ДОБАВКА И МЕДИЦИНСКИЙ КОНТЕЙНЕР ДЛЯ ОБОГАЩЕННОЙ ЭРИТРОЦИТАМИ ЖИДКОСТИ Российский патент 2015 года по МПК A61K35/14 A61K47/02 A61K47/22 A61K47/26 A61K47/34 A61J1/10 A61J3/00 

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Настоящее изобретение относится к добавке и медицинскому контейнеру, используемому для хранения обогащенной эритроцитами жидкости в течение длительного времени.

ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

При хранении цельной крови, или эритроцитарной массы (CRC), или т.п. в течение длительного времени возникает так называемый гемолиз, при котором происходит разрыв оболочек эритроцитов и гемоглобин выходит во внешнюю среду. Вместе с тем в последние годы было установлено, что ди-2-этилгексилфталат (DEHP), широко используемый в качестве пластификатора в поливинилхлоридной смоле, из которой изготавливают медицинские контейнеры, обладает эффектом, позволяющим предотвратить гемолиз. Следовательно, смешивание цельной крови или CRC с раствором для хранения эритроцитов в результате совместного растворения в медицинском контейнере из поливинилхлоридной смолы, пластифицированной DEHP, и элюирование DEHP в цельную кровь или CRC позволяет подавить гемолиз и улучшить характеристику хранения эритроцитов.

Однако применение DEHP может приводить и к другим эффектам, например к разрыву тромбоцитов или т.п. и к репродуктивной токсичности. Такие недостатки делают использование DEHP в качестве добавки для обогащенной эритроцитами жидкости нежелательным с точки зрения физиологической безопасности.

Поэтому для решения этой проблемы в патентных документах 1 и 2 с целью преодоления недостатков, обусловленных разрывом и гибелью тромбоцитов, в состав смолы, из которой изготавливают медицинские контейнеры для хранения (или консервирования) крови, предлагается вводить витамин E.

ДОКУМЕНТЫ ПРЕДШЕСТВУЮЩЕГО УРОВНЯ ТЕХНИКИ

ПАТЕНТНЫЕ ДОКУМЕНТЫ

[Патентный документ 1] Опубликованная заявка Японии на изобретение № Н05-500319, не прошедшая экспертизу.

[Патентный документ 2] Опубликованная заявка Японии на изобретение № Н06-34820, прошедшая экспертизу.

РАСКРЫТИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

ЗАДАЧИ, РЕШАЕМЫЕ С ПОМОЩЬЮ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Способы, предлагаемые в патентных документах 1 и 2, позволяют получить достаточный эффект подавления гибели тромбоцитов, но не обеспечивают достаточного эффекта хранения эритроцитов. То есть витамин E оказывает более слабое влияние на ингибирование гемолиза, чем DEHP, и обладает неудовлетворительной характеристикой хранения эритроцитов.

Поэтому цель настоящего изобретения заключается в преодолении вышеупомянутых недостатков. Объектами настоящего изобретения являются добавка и медицинский контейнер для обогащенной эритроцитами жидкости, обеспечивающие высокую эффективность ингибирования гемолиза и превосходную характеристику хранения эритроцитов.

СРЕДСТВА РЕШЕНИЯ ПРОБЛЕМЫ

С целью преодоления вышеупомянутых недостатков добавку для обогащенной эритроцитами жидкости согласно настоящему изобретению получают путем добавления в раствор для хранения крови ингибитора гемолиза и поверхностно-активного вещества. При этом значение HLB (гидрофильно-липофильного баланса) поверхностно-активного вещества составляет не менее 13, а число оксиэтиленовых групп в гидрофильном сегменте молекулярной структуры поверхностно-активного вещества - не менее 20.

Вышеупомянутый состав, полученный путем добавления в раствор для хранения эритроцитов как ингибитора гемолиза, так и поверхностно-активного вещества, обеспечивает эффект ингибирования гемолиза за счет синергетического действия ингибитора гемолиза и поверхностно-активного вещества. В частности, ингибитор гемолиза обладает способностью обволакивать внешнюю поверхность оболочек эритроцитов и, таким образом, препятствует их разрыву. А поверхностно-активное вещество способствует диспергированию и гомогенизации молекул ингибитора гемолиза в растворе для хранения эритроцитов и, таким образом, обволакиванию оболочек эритроцитов ингибитором гемолиза. Кроме того, определенное значение HLB поверхностно-активного вещества и определенное число оксиэтиленовых групп в гидрофильном сегменте поверхностно-активного вещества обеспечивают возможность ингибирования разрыва оболочек эритроцитов даже в случае применения одного поверхностно-активного вещества.

Добавка для обогащенной эритроцитами жидкости согласно настоящему изобретению состоит из полиоксиэтиленсорбитана в гидрофильном сегменте молекулярной структуры поверхностно-активного вещества. В предпочтительном варианте раствор для хранения эритроцитов представляет собой смешанный раствор, включающий в себя маннитол, глюкозу, аденин, фосфатную соль, цитратную соль и хлорид натрия.

Кроме того, добавка для обогащенной эритроцитами жидкости состоит из полиоксиэтиленсорбитана в гидрофильном сегменте молекулярной структуры поверхностно-активного вещества. В предпочтительном варианте раствор для хранения эритроцитов представляет собой смешанный раствор, включающий в себя маннитол, глюкозу, аденин и хлорид натрия.

Кроме того, добавка для обогащенной эритроцитами жидкости состоит из полиоксиэтиленсорбитана в гидрофильном сегменте молекулярной структуры поверхностно-активного вещества. В предпочтительном варианте раствор для хранения эритроцитов представляет собой смешанный раствор, включающий в себя сорбитол, глюкозу, аденин, гуанозин, фосфатную соль и хлорид натрия.

Кроме того, добавка для обогащенной эритроцитами жидкости состоит из полиоксиэтилена в гидрофильном сегменте молекулярной структуры поверхностно-активного вещества. В предпочтительном варианте раствор для хранения эритроцитов представляет собой смешанный раствор, включающий в себя маннитол, глюкозу, аденин, фосфатную соль, лимонную кислоту и хлорид натрия.

Кроме того, добавка для обогащенной эритроцитами жидкости состоит из полиоксиэтилена в гидрофильном сегменте молекулярной структуры поверхностно-активного вещества. В предпочтительном варианте раствор для хранения эритроцитов представляет собой смешанный раствор, включающий в себя сорбитол, глюкозу, аденин, гуанозин, фосфатную соль и хлорид натрия.

Определенная структура поверхностно-активного вещества и определенный состав раствора для хранения эритроцитов в вышеупомянутых пяти видах добавок обеспечивают синергетическое действие поверхностно-активного вещества и раствора для хранения эритроцитов и способствуют усилению ингибирования разрыва оболочек эритроцитов.

Добавка для обогащенной эритроцитами жидкости согласно настоящему изобретению отличается тем, что ингибитор гемолиза представляет собой витамин E. Кроме того, добавка для обогащенной эритроцитами жидкости согласно настоящему изобретению отличается тем, что вышеупомянутый витамин Е является сложноэфирным производным уксусной кислоты.

Согласно вышеупомянутому составу ингибитор гемолиза представляет собой витамин E и, в частности, сложноэфирное производное витамина E, что за счет антиоксидантного действия витамина E и аффинного взаимодействия с липидом оболочки эритроцита или т.п. способствует усилению ингибирования разрыва оболочек эритроцитов.

Кроме того, медицинский контейнер согласно настоящему изобретению отличается тем, что вышеупомянутая добавка для обогащенной эритроцитами жидкости, наливается непосредственно внутрь контейнера.

Согласно такой конструкции вышеупомянутая добавка для обогащенной эритроцитами жидкости, наливаемая непосредственно внутрь контейнера, ингибирует разрыв оболочек эритроцитов цельной крови или CRC, заливаемой внутрь контейнера.

ДОСТИГАЕМЫЙ РЕЗУЛЬТАТ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Добавка и медицинский контейнер для обогащенной эритроцитами жидкости согласно настоящему изобретению позволяют обеспечить такой же или превосходящий эффект ингибирования гемолиза, как и в случае использования традиционного медицинского контейнера, изготовленного из поливинилхлоридной смолы, пластифицированной DEHP, и превосходную характеристику хранения эритроцитов.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

Фиг.1 - графики изменения содержания свободного Hb (гемоглобина) в плазме крови по тестам в мини-пакетах с использованием различных видов поверхностно-активных веществ.

Фиг.2 - графики изменения содержания свободного Hb в плазме крови по тестам в мини-пакетах с использованием различных видов поверхностно-активных веществ.

Фиг.3 - графики изменения содержания свободного Hb в плазме крови по тестам в мини-пакетах с использованием различных видов поверхностно-активных веществ.

Фиг.4 - графики изменения содержания свободного Hb в плазме крови по тестам в мини-пакетах с использованием различных видов поверхностно-активных веществ.

Фиг.5 - диаграмма содержания свободного Hb в плазме крови по тестам в мини-пакетах в зависимости от соотношения концентраций между ингибитором гемолиза и поверхностно-активного вещества.

Фиг.6 - принципиальная схема конструкции медицинских контейнеров согласно настоящему изобретению.

ПРИМЕР РЕАЛИЗАЦИИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Далее следует подробное описание примеров осуществления добавки для обогащенной эритроцитами жидкости согласно настоящему изобретению.

Добавку для обогащенной эритроцитами жидкости (ниже именуемую в соответствии с необходимостью "добавкой") получают путем добавления ингибитора гемолиза и поверхностно-активное вещество в раствор для хранения эритроцитов, где это поверхностно-активного вещество имеет определенную молекулярную структуру. За счет своего состава добавка обладает более сильной способностью ингибировать разрыв оболочек эритроцитов (гемолиз), чем традиционный DEHP (то есть медицинский контейнер, изготовленный из поливинилхлоридной смолы, пластифицированной DEHP). При этом количество добавки составляет 40~60 мл на 100 мл обогащенной эритроцитами жидкости, то есть 20~30 мл на 100 мл забранной крови. Ниже приводится описание каждого состава.

Ингибитор гемолиза

Ингибитор гемолиза препятствует разрыву оболочек эритроцитов в результате актиоксидантного эффекта и аффинного взаимодействия с липидом оболочек эритроцитов или т.п. В частности, в предпочтительном варианте ингибитор гемолиза включает в себя: витамин Е или соединение углеводорода с ненасыщенной цепью, выбранное из группы, состоящей из 7-тетрадецена, 8-октадецена, 9-эйкозена и сквалена. Кроме того, витамин Е включает в себя: токоферолы, такие как α-токоферол, β-токоферол, γ-токоферол и δ-токоферол; и токотриенолы, такие как α-токотриенол, β-токотриенол, γ-токотриенол и δ-токотриенол или т.п., но самым предпочтительным является α-токоферол. Кроме того, витамин Е может включать в себя сложноэфирные производные таких токоферолов или токотриенолов, например, сложноэфирное производное уксусной кислоты. В частности, самым предпочтительным является ацетат токоферола.

В предпочтительном варианте концентрация ингибитора гемолиза в эритроцитарном препарате составляет 25~100 ppm (промилле) (см. фиг. 5). В случае добавления в обогащенную эритроцитами жидкость ингибитора гемолиза вместе с поверхностно-активным веществом предпочтительная концентрация ингибитора гемолиза в добавке составляет 75~300 ppm. При концентрации ниже чем 75 ppm ингибирование разрыва оболочек эритроцитов становится затруднительным. В частности, снижается эффективность ингибирования, то есть содержание Hb в плазме крови становится выше. Повышение же концентрации до уровня выше 300 ppm не вызывает явного усиления эффекта ингибирования разрыва оболочек эритроцитов, но приводит к увеличению стоимости препарата.

Поверхностно-активное вещество

Поверхностно-активное вещество способствует диспергированию и гомогенизации ингибитора гемолиза в растворе для хранения эритроцитов и обволакиванию оболочек эритроцитов ингибитором гемолиза. Кроме того, одно только поверхностно-активное вещество может препятствовать разрыву оболочек эритроцитов. Для получения вышеупомянутых полезных эффектов значение HLB поверхностно-активного вещества должно составлять не менее 13, причем в предпочтительном варианте - 13~20, а число оксиэтиленовых групп (или число ЕО) в гидрофильном сегменте молекулярной структуры поверхностно-активного вещества - не менее 20. В предпочтительном варианте число ЕО составляет 20~40. Кроме того, предпочтительной является первая форма поверхностно-активного вещества, в которой гидрофильный сегмент молекулярной структуры состоит из полиоксиэтилена (РЕО), или вторая форма, в которой гидрофильный сегмент молекулярной структуры состоит из полиоксиэтиленсорбитана (РЕО-сорбитана).

В случае когда значение HLB составляет менее 13, диспергирования молекул поверхностно-активного вещества в добавке не происходит, и поэтому ингибирование разрыва оболочек эритроцитов является невозможным. Кроме того, если число ЕО составляет менее 20, то ингибирование разрыва оболочек эритроцитов является невозможным вследствие низкой молекулярной массы гидрофильного сегмента поверхностно-активного вещества. В случае же когда значение HLB составляет более 20 или число ЕО - более 40, явного усиления эффекта ингибирования разрыва оболочек эритроцитов не наблюдается, но происходит повышение стоимости препарата. При этом значение HLB измеряется методом Гриффина и рассчитывается по следующей формуле:

Значение HLB=(20 × общая молекулярная масса гидрофильного сегмента) / (молекулярная масса поверхностно-активного вещества)

Поверхностно-активное вещество первой формы включает в себя, например, простой полиоксиэтиленолеиловый эфир (EMALGEN (зарегистрированный товарный знак) 430), простой полиоксиэтиленлауриловый эфир (EMALGEN (зарегистрированный товарный знак) 130К) или т.п. (см. таблицу 1).

Поверхностно-активное вещество второй формы включает в себя, например, полиоксиэтиленсорбитанмоноолеат (Tween (зарегистрированный товарный знак) 80), полиоксиэтиленсорбитанмоностеарат (Tween 60), полиоксиэтиленсорбитанмонолаурат (Tween 20) или т.п. (см. таблицу 1).

При этом предпочтительная концентрация поверхностно-активного вещества в эритроцитарном препарате составляет 100~300 ppm (см. фиг.5). В случае совместного добавления поверхностно-активного вещества и ингибитора гемолиза в обогащенную эритроцитами жидкость предпочтительная концентрация поверхностно-активного вещества в добавке составляет 300~900 ppm. При концентрации ниже, чем 300 ppm ингибирование разрыва оболочек эритроцитов становится затруднительным. В частности, снижается эффективность ингибирования, то есть содержание Hb в плазме крови становится выше. Повышение же концентрации до уровня выше 900 ppm приводит не только к затруднению ингибирования разрыва оболочек эритроцитов, но и к увеличению стоимости препарата.

Раствор для хранения эритроцитов

Раствор для хранения эритроцитов представляет собой известный традиционный раствор для хранения, используемый для хранения обогащенной эритроцитами жидкости в течение длительного времени. Такой раствор для хранения эритроцитов включает в себя: раствор ACD (кислота, цитрат, декстроза), раствор CPD (цитрат, фосфат, декстроза), раствор MAP, раствор SAGM (солевой раствор, аденин, глюкоза, маннитол), OPTISOL (зарегистрированный товарный знак) (или AS-5), ADSOL (аденин, декстроза, сорбитол, хлорид натрия, маннитол) (или AS-1), Nutricel (или AS-3), PAGG-S, SAGP-мальтоза или т.п. Наиболее предпочтительными из перечисленных, в частности, являются раствор MAP, раствор SAGM или PAGG-S. Раствор MAP представляет собой смешанный раствор, содержащий маннитол, глюкозу, аденин, фосфат, лимонную кислоту и хлорид натрия, раствор SAGM - смешанный раствор, содержащий маннитол, глюкозу, аденин и хлорид натрия, a PAGG-S - смешанный раствор, содержащий сорбитол, глюкозу, аденин, гуанозин, фосфат и хлорид натрия.

При этом количество раствора для хранения эритроцитов составляет 40~60 мл на 100 мл обогащенной эритроцитами жидкости, то есть 20~30 мл на 100 мл забранной крови. Уменьшение количества этого раствора до уровня ниже указанного минимального количества приводит к тому, что ингибирование разрыва оболочек эритроцитов становится затруднительным. А увеличение до уровня выше указанного максимального количества не вызывает явного усиления эффекта ингибирования разрыва оболочек эритроцитов, но приводит к увеличению стоимости препарата.

Ниже приводится подробное описание медицинского контейнера согласно настоящему изобретению.

Медицинский контейнер характеризуется тем, что добавка для обогащенной эритроцитами жидкости наливается непосредственно внутрь этого контейнера. При этом сам контейнер изготовлен в результате сплавления двух листов полиолефиновой или поливинилхлоридной смолы или т.п., сложенных с прилеганием одного к другому, по периферии. Кроме того, медицинский контейнер согласно настоящему изобретению соответствует пакету 107 для раствора лекарственного препарата в системе 100 переливания крови с использованием пакетов, показанной на фиг.6.

Система 100 переливания крови с использованием пакетов содержит: пакет 103 для сбора крови, заполняемый кровью, забранной у донора через трубку 101а для сбора крови с иглой 102 для взятия крови на конце; фильтр ПО для обработки крови, обеспечивающий отделение определенных компонентов крови (или лейкоцитов и тромбоцитов) от крови (или цельной крови), перемещаемой из пакета 103 для сбора крови через трубку 101b; пакет 105 для хранения крови, из которой в результате пропускания через фильтр 110 для обработки крови и трубку 101с были удалены определенные компоненты; пакет 106 для хранения крови, в который через трубку 101d, тройник 104 и трубку 101е поступают компоненты крови (или плазма крови), подвергнутые центрифугированию в пакете 105 для хранения крови; и пакет 107 для раствора лекарственного препарата, в который налита вышеупомянутая добавка для обогащенной эритроцитами жидкости. Добавка для обогащенной эритроцитами жидкости подается в пакет 105 для хранения крови из пакета 107 для раствора лекарственного препарата через трубку 101f, тройник 104 и трубку 101d и, таким образом, добавляется к компонентам крови (или обогащенной эритроцитами жидкости) в пакете 105 для хранения крови.

При этом объем всех пакетов - пакета 103 для сбора крови, пакетов 105 и 106 для хранения крови и пакета 107 для раствора лекарственного препарата - составляет, например, приблизительно 100~600 мл.

Кроме того, со стороны своей верхней части пакет 103 для сбора крови, пакеты 105 и 106 для хранения крови и пакет 107 для раствора лекарственного препарата снабжены выпускными отверстиями 108. На каждом из пакетов - на пакете 103 для сбора крови, на пакетах 105 и 106 для хранения крови и на пакете 107 для раствора лекарственного препарата имеется наклейка 109 с указанием залитых в него компонентов крови. Кроме того, в случае необходимости любая из трубок 101b-101f может быть снабжена уплотнением (непоказанным), перекрывающим (или уплотняющим) отверстие в трубке, открывающееся при разрыве этого уплотнения.

ПРИМЕРЫ

ПРИМЕР 1

Ниже приводится описание тестов в мини-пакетах, проводившихся с целью оценки каждой добавки с точки зрения характеристики хранения эритроцитов.

Тесты в мини-пакетах

В результате добавления в каждый раствор для хранения эритроцитов (100 мл раствора MAP) по одному из семи видов поверхностно-активных веществ, перечисленных в таблице 1, (по 90 мг) вместе с ингибитором гемолиза (с витамином E: ацетат токоферола; 15 мг) были приготовлены добавки №1-3 и 8-11, показанные в таблице 2. Кроме того, была приготовлена показанная в таблице 2 добавка №12, в состав которой вместо поверхностно-активного вещества входит полиэтиленгликоль (с молекулярной массой MW=1000), а также показанная в таблице 2 добавка №13, полученная без использования какого-либо поверхностно-активного вещества, в состав которой был введен только ингибитор гемолиза (или витамин E). Затем каждая добавка (20 мл) и обогащенная эритроцитами жидкость (40 мл) были смешаны одна с другой для получения эритроцитарного препарата, который был выдержан в течение пяти недель при температуре 4°C в мини-пакетах из поливинилхлорида (PVC), пластифицированного три(2-этилгексил)тримеллитатом (ТОТМ). При этом концентрация ингибитора гемолиза в эритроцитарном препарате составила 50 ppm, а концентрация поверхностно-активного вещества - 300 ppm. Эритроцитарный препарат, не содержащий поверхностно-активного вещества, точно так же был выдержан в мини-пакете из поливинилхлорида, пластифицированного ди-2-этилгексилфталатом (DEHP).

Концентрация свободного Hb в плазме крови измерялась по описываемому ниже методу LCV перед началом хранения эритроцитарного препарата и после его хранения в течение двух, четырех и пяти недель. При этом результаты оценки характеристики хранения эритроцитов, полученные на основе приводимых ниже критериев, представлены на фиг. 1 и в таблице 2.

Метод LCV

Измерение содержания свободного Hb (гемоглобина) в плазме крови проводилось следующим образом.

(1) После растворения Leuco Crystal Violet (20 мг) в ацетоне (75 мл) в приготовленный таким образом раствор были добавлены уксусная кислота (20 мл) и RO-вода (очищенная при помощи обратного осмоса) (25 мл). Полученный в результате перемешивания этой смеси раствор был использован в качестве окрашивающего реагента.

(2) В водный раствор пероксида водорода (30 мас.%, 1 мл) была добавлена RO-вода (30 мл). Полученный в результате смешивания раствор было использован в качестве раствора для окрашивания субстрата.

(3) По завершении периода хранения эритроцитарный препарат был подвергнут центрифугированию, в результате которого был собран супернатант, который был использован в качестве пробы для измерения содержания свободного гемоглобина в плазме крови. Кроме того, с целью одновременного приготовления стандартных растворов гемоглобина для построения калибровочной характеристики (то есть калибровочных проб) концентрации в диапазоне 2-300 мг/дл стандартный раствор гемоглобина (Alfresa Pharma Corporation, HEMOCON) был разбавлен RO-водой.

(4) В пробирку были добавлены окрашивающий реагент (6 мл), проба для измерения и калибровочная проба (25 мкл). Полученная смесь была подвергнута надлежащему перемешиванию.

(5) В приготовленную таким образом смесь был добавлен раствор для окрашивания субстрата (1 мл). Полученная в результате перемешивания смесь была подвергнута инкубации в ванночках с циркуляцией воды при температуре 37°C в течение 20 минут.

(6) По завершении инкубации было осуществлено измерение спектральной поглощательной способности при длине волны 590 нм на спектрофотометре (U-3010, HITACHI LTD.). По измеренным одновременно значениям калибровочных проб были рассчитаны концентрации гемоглобина. Полученные значения были использованы в качестве содержания свободного гемоглобина в плазме крови.

Критерии оценки характеристики хранения эритроцитов

Если содержание свободного Hb в плазме крови пробы для тестирования после хранения в течение пяти недель в мини-мешке было меньше, чем содержание свободного Hb в плазме крови, извлеченного из эталонной пробы, которая хранилась в мини-мешке, изготовленном из поливинилхлорида, пластифицированного DEHP, то характеристика хранения эритроцитов оценивалась как "УДОВЛЕТВОРИТЕЛЬНАЯ". В противном случае, когда содержание Hb в пробе для тестирования было больше, чем извлеченного из эталонной пробы, то характеристика хранения эритроцитов оценивалась как "НЕУДОВЛЕТВОРИТЕЛЬНАЯ".

В результате добавления в каждый раствор для хранения эритроцитов (100 мл раствора MAP) по одному из четырех видов поверхностно-активных веществ, перечисленных в таблице 1, (по 60 мг) вместе с ингибитором гемолиза (или с витамином E: ацетат токоферола, 15 мг) были приготовлены добавки №4-7, показанные в таблице 2. Затем каждая добавка (20 мл) и обогащенная эритроцитами жидкость (40 мл) были смешаны одна с другой для получения эритроцитарного препарата, который был выдержан в течение пяти недель при температуре 4°С в мини-пакетах из поливинилхлорида (PVC), пластифицированного три(2-этилгексил)тримеллитатом (ТОТМ). При этом концентрация ингибитора гемолиза в эритроцитарном препарате составила 50 ppm, а концентрация поверхностно-активного вещества - 200 ppm.

Эритроцитарный препарат, не содержащий добавки, точно так же был выдержан в мини-пакете из поливинилхлорида, пластифицированного ди-2-этилгексилфталатом (DEHP). Точно так же, как описывалось выше, для оценки характеристики хранения эритроцитов измерялась концентрация свободного Hb в плазме крови. Результаты этой оценки представлены на фиг.2 и в таблице 2.

ПРИМЕР 2

Ниже приводится описание тестов в мини-пакетах, проводившихся с целью оценки каждой добавки с точки зрения характеристики хранения эритроцитов.

Тесты в мини-пакетах

В результате добавления в каждый раствор для хранения эритроцитов (100 мл раствора S AGM) по одному из трех видов поверхностно-активных веществ, перечисленных в таблице 1, (по 60 мг) вместе с ингибитором гемолиза (с витамином Е: ацетат токоферола; 15 мг) были приготовлены добавки №1, 4 и 9, показанные в таблице 2. Затем каждая добавка (20 мл) и обогащенная эритроцитами жидкость (40 мл) были смешаны одна с другой для получения эритроцитарного препарата, который был выдержан в течение пяти недель при температуре 4°C в мини-пакетах из поливинилхлорида (PVC), пластифицированного три(2-этилгексил)тримеллитатом (ТОТМ). При этом концентрация ингибитора гемолиза в эритроцитарном препарате составила 50 ppm, а концентрация поверхностно-активного вещества - 200 ppm.Эритроцитарный препарат, не содержащий поверхностно-активного вещества, точно так же был выдержан в мини-пакете из поливинилхлорида, пластифицированного ди-2-этилгексилфталатом (DEHP).

Точно так же, как и в примере 1, для оценки характеристики хранения эритроцитов измерялась концентрация свободного Hb в плазме крови. Результаты этой оценки представлены на фиг 3. и в таблице 2.

ПРИМЕР 3

Ниже приводится описание тестов в мини-пакетах, проводившихся с целью оценки каждой добавки с точки зрения характеристики хранения эритроцитов.

Тесты в мини-пакетах

В результате добавления в каждый раствор для хранения эритроцитов (100 мл раствора PAGG-S) по одному из трех видов поверхностно-активных веществ, перечисленных в таблице 1, (по 60 мг) вместе с ингибитором гемолиза (с витамином E: ацетат токоферола; 15 мг) были приготовлены добавки №1, 4 и 9, показанные в таблице 2. Затем каждая добавка (20 мл) и обогащенная эритроцитами жидкость (40 мл) были смешаны одна с другой для получения эритроцитарного препарата, который был выдержан в течение пяти недель при температуре 4°C в мини-пакетах из поливинилхлорида (PVC), пластифицированного три(2-этилгексил)тримеллитатом (ТОТМ). При этом концентрация ингибитора гемолиза в эритроцитарном препарате составила 50 ppm, а концентрация поверхностно-активного вещества - 200 ppm.

Эритроцитарный препарат, не содержащий поверхностно-активного вещества, точно так же был выдержан в мини-пакете из поливинилхлорида, пластифицированного ди-2-этилгексилфталатом (DEHP).

Точно так же, как и в примере 1, для оценки характеристики хранения эритроцитов измерялась концентрация свободного Hb в плазме крови. Результаты этой оценки представлены на фиг. 4 и в таблице 2.

Как показано на фиг. 1-4 и в таблице 2, примеры осуществления 1-3, 8 и 9, удовлетворяющие требованиям для поверхностно-активного вещества согласно настоящему изобретению, свидетельствуют об "УДОВЛЕТВОРИТЕЛЬНОЙ" характеристике хранения эритроцитов, в то время как сравнительные примеры 4-7, 10 и 11, в которых возможность ингибирования разрыва оболочек эритроцитов не обеспечивалась, - о "НЕУДОВЛЕТВОРИТЕЛЬНОЙ" характеристике хранения эритроцитов, что было обусловлено, по меньшей мере, одним из факторов, состоящих в том, что вследствие низкого значения HLB, не достигающего минимального предельного значения, диспергирования поверхностно-активного вещества в добавке (или в водном растворе) не происходило, а недостаточно большое число ЕО, не достигающее нижнего предельного значения, явилось причиной низкой молекулярной массы гидрофильного сегмента поверхностно-активного вещества. Контрольные примеры 1,2 и 13 также свидетельствуют о "НЕУДОВЛЕТВОРИТЕЛЬНОЙ " характеристике хранения эритроцитов.

Приведенные выше результаты показывают, что добавки, использованные в примерах осуществления, превосходят добавки, использованные в сравнительных примерах, по характеристике хранения эритроцитов. Кроме того, эти результаты также показывают, что применение добавок, использованных в примерах осуществления, позволяет получить превосходную характеристику хранения эритроцитов по сравнению со случаем хранения эритроцитатного препарата в традиционном медицинском контейнере из поливинилхлоридной смолы, пластифицированной DEHP (концентрация DEHP в котором в результате элюирования составляет 30 ppm).

ПРИМЕР 4

В результате добавления в каждый раствор для хранения эритроцитов (100 мл раствора MAP) соответствующих количеств ингибитора гемолиза (витамина Е: ацетат токоферола; 7,5 мг, 15 мг и 30 мг) и соответствующих количеств поверхностно-активного вещества (Tween 80; 30 мг, 60 мг и 90 мг) в различной комбинации были приготовлены добавки №14-18, показанные в таблице 3. Затем каждая добавка (20 мл) и обогащенная эритроцитами жидкость (40 мл) были смешаны одна с другой для получения эритроцитарного препарата, который был подвергнут такому же тестированию в мини-пакетах, как и в примере 1, для измерения содержания свободного Hb в плазме крови. Полученные в результате концентрации ингибитора гемолиза и поверхностно-активного вещества в эритроцитарном препарате представлены в таблице 3. Кроме того, одновременно было проведено такое же тестирование характеристики хранения эритроцитов (№19) в мини-пакетах из поливинилхлоридной смолы, пластифицированной DEHP, имеющей такой же состав, как и в традиционном медицинском контейнере, для добавки, не содержащей никакого ингибитора гемолиза и никакого поверхностно-активного вещества. Результаты проведенных тестов в мини-пакетах, представленные на фиг.5 и в таблице 3, показывают, что в случае, когда содержание свободного Hb в плазме крови в пробе для тестирования не превышало содержания свободного Hb в тесте №19, характеристика хранения эритроцитов оценивалась как "УДОВЛЕТВОРИТЕЛЬНАЯ".

Результаты тестирования, представленные на фиг.5 и в таблице 3, свидетельствуют о том, что добавка согласно настоящему изобретению обладает такой же или превосходящей характеристикой хранения эритроцитов, как и в случае (контрольный пример №19) хранения эритроцитарного препарата в традиционном медицинском контейнере из поливинилхлоридной смолы, пластифицированной DEHP (концентрация DEHP в котором в результате элюирования составляет 30 ppm).

При этом следует отметить, что вышеупомянутые выдающиеся результаты наблюдались в случаях (примеры осуществления №14-18) использования добавок согласно настоящему изобретению, содержащих ингибитор гемолиза (25-100 ppm) и поверхностно-активное вещество (100-300 ppm) (ПРИМЕРЫ №14-18).

ОПИСАНИЕ НОМЕРОВ ПОЗИЦИЙ

100 - система переливания крови с использованием пакетов

103 - пакет для сбора крови

105 - пакет для хранения крови

106 - пакет для хранения крови

107 - пакет для раствора лекарственного препарата (или медицинский контейнер)

110 - фильтр для обработки крови

Изобретение относится к фармакологии, а именно представляет собой добавку для обогащенной эритроцитами жидкости. Добавка получена путем добавления ингибитора гемолиза и поверхностно-активного вещества в раствор для хранения крови. Значение HLB поверхностно-активного вещества составляет не менее 13, а число оксиэтиленовых групп в гидрофильном сегменте молекулярной структуры поверхностно-активного вещества - не менее 20. Ингибитор гемолиза представляет собой производное уксусной кислоты в виде витамина Е. Добавка обеспечивает высокую эффективность ингибирования гемолиза и превосходную характеристику хранения эритроцитов. 6 з.п. ф-лы, 6 ил., 3 табл., 4 пр.

1. Добавка, пригодная для добавления к обогащённой эритроцитами жидкости, при этом добавка содержит ингибитор гемолиза и поверхностно-активное вещество, в которой
значение гидрофильно-липофильного баланса (HLB) поверхностно-активного вещества составляет не менее 13,
число оксиэтиленовых групп в гидрофильном сегменте молекулярной структуры поверхностно-активного вещества - не менее 20, а
ингибитор гемолиза является сложноэфирным производным уксусной кислоты в виде витамина Е, присутствующий в добавке в концентрации 75-300 ppm (промилле).

2. Добавка по п. 1, далее содержащая раствор для хранения эритроцитов.

3. Добавка по п. 2, отличающаяся тем, что
гидрофильный сегмент молекулярной структуры поверхностно-активного вещества состоит из полиоксиэтиленсорбитана; а
раствор для хранения эритроцитов представляет собой смешанный раствор, содержащий маннитол, глюкозу, аденин, фосфатную соль, нитратную соль и хлорид натрия.

4. Добавка по п. 2, отличающаяся тем, что
гидрофильный сегмент в молекулярной структуре поверхностно-активного вещества состоит из полиоксиэтиленсорбитана; а
раствор для хранения эритроцитов представляет собой смешанный раствор, содержащий маннитол, глюкозу, аденин и хлорид натрия.

5. Добавка по п. 2, отличающаяся тем, что
гидрофильный сегмент в молекулярной структуре поверхностно-активного вещества состоит из полиоксиэтиленсорбитана; а
раствор для хранения эритроцитов представляет собой смешанный раствор, содержащий сорбитол, глюкозу, аденин, гуанозин, фосфатную соль и хлорид натрия.

6. Добавка по п. 2, отличающаяся тем, что
гидрофильный сегмент в молекулярной структуре поверхностно-активного вещества состоит из полиоксиэтилена; а
раствор для хранения эритроцитов представляет собой смешанный раствор, содержащий маннитол, глюкозу, аденин, фосфатную соль, цитратную соль и хлорид натрия.

7. Добавка по п. 2, отличающаяся тем, что
гидрофильный сегмент в молекулярной структуре поверхностно-активного вещества состоит из полиоксиэтилена; а
раствор для хранения эритроцитов представляет собой смешанный раствор, содержащий сорбитол, глюкозу, аденин, гуанозин, фосфатную соль и хлорид натрия.