СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ РЕЗИСТЕНТНОСТИ К ИНФЕКЦИОННЫМ ЗАБОЛЕВАНИЯМ РЕБЕНКА НА ПЕРВОМ ГОДУ ЖИЗНИ Российский патент 2015 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования частоты развития инфекционных заболеваний у ребенка на первом году жизни.

Известен способ прогнозирования повторных респираторных заболеваний у детей (пат. RU 2357675). Согласно способу оценивают наличие следующих факторов риска: пол ребенка, возраст ребенка, жилищно-бытовые условия, контакт с часто болеющими родственниками, посещение детского сада, профвредности у матери, осложненное течение беременности, ОРВИ матери во время беременности, патология в родах, ОРВИ у ребенка на 1 году жизни, сочетание анемии и эритроцитоза, определяют значение следующих лабораторных показателей: уровень гемоглобина, количество эритроцитов, количество лимфоцитов, количество Т-лимфоцитов, количество В-лимфоцитов, количество активных фагоцитов, уровень иммуноглобулина G, уровень иммуноглобулина А, уровень иммуноглобулина М. Выявленным факторам риска и лабораторным показателям присваивают прогностические коэффициенты, которые суммируют. При значении суммы более +7 прогнозируют высокую вероятность развития повторных респираторных заболеваний у детей.

При выполнении способа используют как объективные, так и субъективные показатели, что не позволяет судить о его высокой точности.

Известен способ прогнозирования заболеваемости респираторными инфекциями у детей раннего возраста (пат. RU №2018832). Авторы предлагают у ребенка, посещающего детское дошкольное учреждение, на 10 день после начала посещения в пробе мочи проводят цветную осадочную реакцию по Кимбаровскому, а на 5-й день проводят кардиоинтервалографию, по результатам которой рассчитывают величину моды и при значении первого показателя выше 52,4 ус.ед., а второго - ниже 0,45 с. прогнозируют у ребенка частую заболеваемость ОРВИ в течение первого года посещения дошкольного учреждения.

Недостатки способа: нет сведений о возможности применения способа у детей первого года жизни.

Близким к предлагаемому является способ прогнозирования частоты развития у детей острых инфекционных заболеваний на первом году жизни (пат. RU №2431147).

Способ включает определение на первые и пятые сутки после рождения показателей иммунного статуса: абсолютного числа лимфоцитов, носителей маркеров дифференцировки CD3, CD4, CD8, CD19, CD56, CD95, показателя спонтанного теста с нитросиним тетразолием (НСТсп), уровня фагоцитарного показателя (ФП), концентрации в сыворотке крови иммуноглобулинов классов А, М, G (IgA, IgM, IgG) и далее определением индекса прогнозирования (Ипр) с использованием определенного уравнения множественной линейной регрессии, если Ипр не превышает значение 3,2, судят о вероятности перенесения на первом году жизни не более одного острого инфекционного заболевания; если Ипр - в диапазоне 3,2-3,7, вероятно возникновение от 2-х до 5-ти острых инфекционных заболеваний на первом году жизни; если Ипр превышает значение 3,7, судят о вероятности возникновения более 5-ти острых инфекционных заболеваний на первом году жизни.

Недостатки способа: использован недостаточно полный спектр иммунологических показателей, не позволяющий точно прогнозировать вероятность высокой частоты заболеваемости на первом году жизни.

Технический результат: разработка сопособа прогнозирования степени резистентности к инфекционным заболеваниям ребенка на первом году жизни, отличающийся высокой степенью объективности и точности, не требующего дополнительных лабораторных обследований.

Технический результат достигнут следующим образом. С целью изучения особенностей клеточного и гуморального иммунитета у новорожденных проводили исследование иммунного статуса. Объектом иммунологического исследования была пуповинная и периферическая кровь новорожденных детей. Исследование осуществляли при рождении и на 4-5 сутки жизни. С получением информированного согласия матери, кровь для исследования набиралась в количестве 1-2 мл из вены пуповины сразу после рождения младенца и из подкожных вен головы в условиях процедурного кабинета в утренние часы перед кормлением ребенка на 4-5 день жизни. Кровь собиралась в вакуумные пробирки фирмы IMPROVACUTER, содержащие антикоагулянты. Исследование крови осуществлялось в течение 48 часов после забора.

Методом проточной лазерной цитофлуориметрии с использованием цитометра Epics XL-MCL фирмы «Beckman Coulter FC 500» (США) и с помощью трех- или четырехцветной комбинации моноклональных антител, меченных флуорохромом флуоресцеинизотиоцианат (FITC), фикоэритрином (РЕ) и последующим лизированием эритроцитов. Определяли относительные и абсолютные значения для лимфоцитов, носителей следующих маркеров дифференцировки:

(CD45+CD3+); (CD45+CD4+CD3+); (CD45+CD8+CD3+); (CD4+CD8+); (HLA-DR+); (CD3+HLA-DR+); (CD3+CD25+); (CD3+СD4+CD25+); (CD16+CD56+CD3-); (CD16+CD56-CD3-); (CD16+CD56+CD3+); (CD19+); (CD5+); (CD3+).

Оценка гуморального звена иммунитета включала в себя определение концентрации в сыворотке крови иммуноглобулинов классов A, M, G (IgA, IgM, IgG) методом радиальной иммунодиффузии в агарозном геле по Манчини. Поглотительную и метаболическую активность фагоцитов характеризовали по фагоцитарному показателю (ФП) и фагоцитарному числу (ФЧ). Всего было обследовано 55 доношенных детей.

Исследования проводились в иммунологической лаборатории ГУЗ «Областного центра по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями» г. Воронежа (зав. лабораторией, к.м.н. Костенко С.М.).

Степень резистентности определяли по кратности острых заболеваний, перенесенных ребенком в течение года. Оценки резистентности проводили по индексу острых заболеваний, который рассчитывали как отношение количества перенесенных ребенком острых заболеваний к числу месяцев наблюдения [Поликлиническая педиатрия /В.В. Доскин, Т.В. Косенкова, Т.Г. Авдеева и др. - М.: ГОУ ВУНМЦ МЗ РФ, 2002. - 504 с.]

При частоте острых заболеваний три раза в год и менее степень резистентности оценивали как высокую, при частоте заболеваний более трех раз в год - как низкую.

По истечении года наблюдений за новорожденными рассчитывали степень резистентности, используя данные исследований пуповинной и венозной крови, забор которой выполняли на 4-5 сутки после рождения, строили линейную регрессионную модель прогноза степени резистентности детей к инфекционным заболеваниям на первом году жизни.

Соответствующие расчеты приведены в таблице 1.

Таблица 1.

Результаты регрессионного анализа влияния на степень резистентности к инфекционным заболеваниям на первом году жизни некоторых показателей иммунологического статуса, зарегистрированных в первые дни жизни.

Показатель Коэффициент оценки Стандартная ошибка Т-статистика Уровень значимости Константа 4,95258 3,33731 1,484 0,1527 ФП -0,014396 0,0206305 -0,697777 0,493 ФЧ 0,0962295 0,165077 0,582936 0,5661 IgG -0,009034 0,0556885 -0,162217 0,8727 IgA -0,257936 0,255915 -1,0079 0,325 IgM -0,324514 0,319714 -1,01501 0,3217 CD45+CD3+ 0,430186 0,264565 1,62601 0,1189 CD45+CD4+CD3+ -1,66224 0,759569 -2,18839 0,0401 CD45+CD8+CD3+ 1,49266 1,51301 0,986547 0,3351 CD4+CD8+ 0,815254 2,45381 0,332241 0,743 HLA-DR+ 0,522212 2,42866 0,215021 0,8318 CD3+HLA-DR+ -23,1991 41,2389 -0,562554 0,5797 CD3+CD25+ 0,974106 2,4371 0,399698 0,6934 CD3+СD4+CD25+ 0,832493 2,68833 0,30967 0,7599 CD16+CD56+CD3- -3,52478 1,74562 -2,01921 0,0564 CD16+CD56-CD3- 7,67325 7,94426 0,965886 0,3451 CD16+CD56+CD3+ 11,082 12,479 0,888054 0,3846 CD19+ 0,305366 2,63736 0,115785 0,9089 CD5+ 0,0691703 0,144839 0,477568 0,6379 CD3+ 0,0610707 0,344695 0,177173 0,8611 Формула расчета коэффициента резистентности (Крез)
Крез=4,95258-0,0143955х(ФП)+0,0962295х(ФЧ)-0,00903362х(IgG)-0,257936х(IgA) -0,324514х(IgM)+0,430186х(CD45+CD3+) -1,66224х(CD45+CD4+CD3+)+1,49266х(CD45+CD8+CD3+)+0,815254х(CD4+CD8+)+0,522212х(HLA-DR+)-23,1991х(CD3+HLA-DR+)+0,974106х(CD3+CD25+)+0,832493х(CD3+СD4+CD25+)-3,52478х(CD16+CD56+CD3-)+7,67325х(CD16+CD56-CD3-)+11,082х(CD16+CD56+CD3+)+0,305366х(CD19+)+0,0691703х(CD5+)+0,0610707х(CD3+)

Далее в полученную формулу подставляли значения каждого из 55 обследованных новорожденных.

Установлено, что у детей, резистентность к инфекционным заболеваниям у которых была высокой, величина полученного коэффициента статистически значимо отличалась от аналогичных расчетных величин для детей с низкой резистентностью (табл.2).

Таблица 2.

Средние значения коэффициента прогнозирования степени резистентности к инфекционным заболеваниям на первом году жизни.

Степень резистентности к инфекционным заболеваниям Показатели, зарегистрированные в пуповиной крови Показатели, зарегистрированные в венозной крови на 4-5 сутки после рождения Высокая 1,65±0,13 6,16±0,44 Низкая 2,44±0,14 4,97±0,40 Достоверность различий между группами с высокой и низкой резистентностью(t-тест Стьюдента) 0,045299 0,013068

Из полученных данных следует, что высокая степень резистентности к инфекционным заболеваниям на первом году жизни ожидается у детей, Крез у которых составляет 1,78 и выше при вычислении по величинам показателей, полученных из пуповинной крови, и ниже, чем 5,72 при вычислении по величинам показателей, полученных из венозной крови на 4-5 сутки жизни. Различия между группами детей с высокой и низкой резистентностью по результатам наблюдений в течение года статистически значима с вероятностью более 95%.

Таким образом, нами разработан способ прогнозирования степени резистентности к инфекционным заболеваниям на первом году жизни по результатам измерений некоторых параметров иммунологического статуса в первые дни жизни, дающего объективное основание для отнесения каждого младенца в группу новорожденных, угрожаемых по вероятности проявления частых инфекционных заболеваний. Такие данные позволяют предпринять превентивные меры и снизить риск высокой заболеваемости.

Изобретение относится медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для прогнозирования частоты развития инфекционных заболеваний у ребенка на первом году жизни. Для этого определяют иммунологические показатели в пуповинной крови и венозной крови на 4-5 сутки жизни. Рассчитывают коэффициент резистентности (Крез), рассчитываемый по формуле

Крез=4,95258-0,0143955×(ФП)+0,0962295×(ФЧ)-0,00903362×(IgG)-0,257936×(IgA)-0,324514×(IgM)+0,430186×(CD45+CD3+)-1,66224×(CD45+CD4+CD3+)+l,49266×(CD45+CD8+CD3+)+0,815254×(CD4+CD8+)+0,522212×(HLA-DR+)-23,1991×(CD3+HLA-DR+)+0,974106×(CD3+CD25+)+0,832493×(CD3+CD4+CD25+)-3,52478×(CD16+CD56+CD3-)+7,67325×(CD16+CD56-CD3-)+11,082×(CD16+CD56+CD3+)+0,305366×(CD19+)+0,0691703×(CD5+)+0,0610707×(CD3+), где ФП - фагоцитарный показатель, ФЧ - фагоцитарное число, IgG, М, А - иммуноглобулины соответствующих классов, CD - маркеры дифференцировки лимфоцитов. При значении Крез, составляющем 1,78 и выше при вычислении по величинам показателей, полученных из пуповинной крови, и ниже, чем 5,72 при вычислении по величинам показателей, полученных из венозной крови на 4-5 сутки жизни, ожидается высокая степень резистентности к инфекционным заболеваниям на первом году жизни. Использование данного способа позволяет прогнозировать частоту развития инфекционных заболеваний у ребенка на первом году жизни и предпринять превентивные меры для снижения риска высокой заболеваемости. 2 табл.

Способ прогнозирования степени резистентности к инфекционным заболеваниям на первом году жизни ребенка, включающий определение иммунологических показателей в пуповинной крови и венозной крови на 4-5 сутки жизни, отличающийся тем, что используют коэффициент резистентности (Крез), рассчитываемый по формуле
Крез=4,95258-0,0143955×(ФП)+0,0962295×(ФЧ)-0,00903362×(IgG)-0,257936×(IgA)-0,324514×(IgM)+0,430186×(CD45+CD3+)-1,66224×(CD45+CD4+CD3+)+l,49266×(CD45+CD8+CD3+)+0,815254×(CD4+CD8+)+0,522212×(HLA-DR+)-23,1991×(CD3+HLA-R+)+ +0,974106×(CD3+CD25+)+0,832493×(CD3+CD4+CD25+)-3,52478×(CD16+CD56+CD3-)+7,67325×(CD16+CD56-CD3-)+11,082×(CD16+CD56+CD3+)+0,305366×(CD19+)+0,0691703×(CD5+)+0,0610707×(CD3+), где ФП - фагоцитарный показатель, ФЧ - фагоцитарное число, IgG, М, А - иммуноглобулины соответствующих классов, CD - маркеры дифференцировки лимфоцитов; при этом если Крез составляет 1,78 и выше при вычислении по величинам показателей, полученных из пуповинной крови, и ниже, чем 5,72 при вычислении по величинам показателей, полученных из венозной крови на 4-5 сутки жизни, ожидается высокая степень резистентности к инфекционным заболеваниям на первом году жизни.