СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНЫХ БОЛЕЗНЕЙ НОВОРОЖДЕННЫХ ТЕЛЯТ Российский патент 2015 года по МПК A61K35/74 A61K31/505 A61K31/375 A61K33/14 A61P1/00 

Изобретение относится к ветеринарной медицине, касается способа профилактики желудочно-кишечных болезней новорожденных телят с симптомокомплексом диареи и может быть использовано для нормализации и поддержания физиологического статуса новорожденных телят.

В структуре заболеваний телят в ранний постнатальный период превалирующее место занимают нарушения функции пищеварительной системы, клинически проявляющиеся диареей, обуславливающей развитие выраженной дегидратации, токсемии, иммунодефицитов, нарушения обмена веществ. Этиопатогенетические поражения органов пищеварения отличаются значительным полиморфизмом, включающим широкий спектр различных факторов, в том числе генетических, физиологических, санитарно-гигиенических и инфекционных. Массовые нарушения функции пищеварения, клинически проявляющиеся диареями, регистрируются у 70-100% новорожденных телят уже к концу первых суток после рождения. Гибель новорожденных телят, как правило, наступает на 2-5-й день или 7-10-й дни. Обычно погибают от 15 до 55% новорожденных телят [1]. К числу основных причин заболеваний желудочно-кишечного тракта новорожденных телят в ранний постнатальный период развития относится физиологический дисбактериоз - несбалансированный качественный и количественный состав микрофлоры кишечника, который в это время не способен предотвратить заселение кишечника патогенными и условно патогенными микроорганизмами, выделяющими в процессе жизнедеятельности большое количество токсинов, небезопасных для жизни новорожденного [2]. Недостаточность полезной кишечной микрофлоры негативно отражается на гомеостазе микробиоценоза кишечника телят, который играет важную роль в формировании иммунобиологической реактивности животных.

Известны способы профилактики желудочно-кишечных болезней новорожденных телят путем компенсации физиологического дисбактериоза с применением пробиотиков, например бифилакта и бифимола (лиофильно высушенная масса жизнеспособных бифидо- и лактобактерий), бифидумбактерина (лиофилизированная биомасса активных бифидобактерий), лактобактерина сухого (смесь двух штаммов лактобактерий), ромакола, субтиллина, субалина, стрептолакта и др. [3]. Эти биопрепараты во многих случаях обладают существенной лечебно-профилактической эффективностью при желудочно-кишечных заболеваниях телят, стимулируя рост и развитие полезной микрофлоры (на 14-15%), существенно снижая тяжесть проявлений болезней и сроки излечения (до 1-3 дней). Однако состав внедряемой с помощью пробиотиков микрофлоры не воспроизводит все видовое и индивидуальное многообразие нормальной микрофлоры кишечника, что снижает их эффективность в качестве средств профилактики желудочно-кишечных болезней новорожденных телят. Для расширения спектра фармакологических воздействий пробиотики применяют в сочетании с нутриентами. Так, в состав композиционного средства «Витабациллин» для поддержания физиологического гомеостаза входит биофармацевтический препарат коредон, содержащий рекомбинантный штамм Bacillus subtilis и живую культуру Bacillus licheniformis, и аскорбиновая кислота [4]. Витабациллин оказывает гемопоэтическое действие, активно влияет на белковый, энергетический обмен, повышает активность факторов неспецифической и специфической защиты организма, энергию роста. В последние годы в ветеринарную практику внедряются препараты группы ЭМ (эффективные микроорганизмы), например препараты «Байкал ЭМ-1» и «ЭМ-Курунга». Препарат «Байкал ЭМ-1» представляет собой устойчивое сообщество эффективных микроорганизмов, включающее симбиозный комплекс из 86 штаммов микроорганизмов [5], его применение телятам, начиная со второй выпойки молозива в течение 20-30 дней, обеспечивает биологическую защищенность и высокую продуктивность животных. «ЭМ-Курунга» - натуральный кисломолочный продукт, содержащий симбиоз бифидо-, лакто-, уксусно-, пропионовокислых и других бактерий, лактострептококков, дрожжей, ферментов, аминокислот и витаминов. Введение ЭМ-препарата «ЭМ-Курунга» в рационы сухостойных коров позволяет увеличить молочную продуктивность в период раздоя на 15,7-25,0%, снизить продолжительность желудочно-кишечных заболеваний телят на 2,4 дня и повысить рентабельность производства молока на 12,5 и 26,0% [6]. Общим недостатком пробиотиков является недостаточное влияние на систему антиоксидантной защиты. Из-за дисбаланса в соотношении интенсивности процессов пероксидного окисления липидов и функциональной активности системы антиоксидантной защиты повышается риск развития иммунодефицитного состояния и возникновения постнатальных заболеваний у новорожденных животных.

Учитывая сложность развития патологического процесса желудочно-кишечных болезней, их полиэтиологичность и многофакторность, стратегия профилактики и лечения должна быть направлена на комплексное воздействие как на этиологические факторы, так и на организм в целом для мобилизации важнейших систем организма.

Задача, на решение которой направлено изобретение, заключается в создании способа профилактики желудочно-кишечных болезней новорожденных телят с применением биосовместимых, безвредных и экологически безопасных препаратов.

Технический результат заключается в повышении эффективности профилактики желудочно-кишечных болезней телят с повышением естественной резистентности и сопротивляемости организма, укреплением иммунной системы, реактивность которой сохраняется в течение длительного времени в результате поддержания физиологического гомеостаза.

Способ осуществляется следующим образом.

Новорожденным телятам, начиная со второй выпойки молозива, с молозивом выпаивают раствор сухой микробной закваски «ЭМ-Курунга», полученный внесением в 1 литр 1,5% коровьего молока 1 чайной ложки пчелиного меда и 2 г сухой микробной закваски «ЭМ-Курунга», перемешиванием и выдерживанием в закрытой крышкой емкости при комнатной температуре 2-3 суток при периодическом помешивании, в дозе 150 мл 3 раза в день в течение 10 дней и дополнительно в 1, 2 и 7 дни жизни внутримышечно или подкожно инъецируют 50-55 мг/кг живой массы биологически активного комплекса, содержащего гидрохлорид ксимедона, аскорбиновую кислоту и физиологический раствор при следующем соотношении компонентов, масс. %: гидрохлорид ксимедона - 13,22, аскорбиновая кислота - 4,13, физиологический раствор - остальное, полученного смешиванием расчетных количеств гидрохлорида ксимедона и аскорбиновой кислоты с последующей стерилизацией полученной смеси сухим жаром при температуре 100°С в течение 25-30 минут и добавлением непосредственно перед применением стерильного физиологического раствора.

Гидрохлорид 1-(2-гидроксиэтил)-4,6-диметил-1,2-дигидропиримидин-2-она (гидрохлорид ксимедона) - иммуномодулятор с выраженным регенераторным действием. Согласно медицинским данным ксимедон проявляет иммуномодулирующее, анаболическое, ангиопротективное и противовоспалительное действие. Применяется для коррекции иммунодефицитов и в составе комплексной терапии ожогов и ран.

Аскорбиновая кислота, в состав которой входит диенольная группа, имеет выраженные восстановительные свойства. С этим связано ее участие в окислительно-восстановительных процессах, регуляции углеводного, белкового и липидного обменов, процессе свертывания крови, биосинтезе стероидных гормонов, регенерации тканей, синтезе коллагена и проколлагена, нормализации проницаемости капилляров, всасывания железа в пищеварительном канале. Препарат усиливает защитные свойства организма при инфекционных заболеваниях, повышает устойчивость к простудным заболеваниям, ускоряет регенерацию поврежденных тканей, снижает концентрацию в крови токсических веществ, нормализует проницаемость сосудов.

Предварительно готовят препарат «ЭМ-Курунга» для перорального и «Иммоветона-Ks» для внутримышечного или подкожного введения. Препарат «ЭМ-Курунга»: в 1 литр 1,5% коровьего молока вносят 1 чайную ложку пчелиного меда и 2 г сухой микробной закваски «ЭМ-Курунга», перемешивают, закрывают крышкой и выдерживают при комнатной температуре 2-3 суток при периодическом помешивании. Расслоение и закисление молока свидетельствует о готовности кисломолочной «ЭМ-Курунги». «Иммоветон-Ks»: расчетные количества гидрохлорида ксимедона и аскорбиновой кислоты смешивают и стерилизуют сухим жаром при температуре 100°C в течение 25-30 минут. Непосредственно перед введением добавляют стерильный физиологический раствор.

Реализацию и эффективность способа профилактики желудочно-кишечных болезней новорожденных телят с симптомокомплексом диареи, включающего пероральное введение препарата «ЭМ-Курунга» в дозе 150 мл/гол. 3 раза в день в течение 10 дней и внутримышечную или подкожную инъекцию в 1, 2 и 7 дни жизни биологически активного комплекса «Иммоветон-Ks» в дозе 50-55 мг/кг, подтверждали в научно-производственном опыте в условиях хозяйства, стационарно неблагополучного по желудочно-кишечным болезням телят (заболеваемость - 80%, летальность - 25-30%), на новорожденных телятах. Опытные группы формировали по принципу аналогов и следили за тем, чтобы в них не попали телята с антенатальной гипотрофией, которая характеризуется низкой массой и недостаточными размерами тела, незрелостью основных систем организма, запоздалыми рефлексами вставания и сосания.

Сущность способа поясняется примерами.

Пример 1. Формировали 4 группы телят. Телята содержались в соответствующих ветеринарно-зоогигиеническим требованиям условиях, получали молозиво, а затем молоко в соответствии с общепринятыми нормами. Телятам трех групп, начиная со второй выпойки молозива, с молозивом выпаивали препарат «ЭМ-Курунга» в дозе 150 мл/кг живой массы 3 раза в день в течение 10 дней и дополнительно в 1, 2 и 7 дни жизни внутримышечно инъецировали «Иммоветон-Ks» в дозе 45, 55 и 60 мг/кг. Телята четвертой группы препаратов не получали и служили контролем. Наблюдение вели в течение 14 дней, учитывали физиологическое состояние, заболеваемость, характер течения болезни, продолжительность и исход. Результаты представлены в таблице 1.

Как видно из таблицы 1, результаты испытаний подтвердили обоснованность доз биологически активного комплекса «Иммуноветон-Ks» в заявленном интервале значений. Дозы «Иммоноветона-Ks» ниже минимальной и выше максимальной нецелесообразны. Так, при использовании «Иммуноветона-Ks» в дозе ниже минимальной заболели 3 теленка (в контрольной группе - 4 теленка), причем у 1 теленка (в контрольной группе у 3 телят) заболевание протекало в тяжелой форме и сопровождалось сильным обезвоживанием. Данные телята лечились с использованием антибиотиков, инфузионных средств и витаминов. Средняя продолжительность курса терапии составила 4-5 дней (в контрольной группе - 7 дней). При использовании дозы «Иммоноветона-Ks» выше максимальной заболел 1 теленок (во 2-й группе при использовании «Иммуноветона-Ks» в дозе на уровне верхней границы заявленного интервала - 1 теленок), заболевание телят во 2-й и 3-й группах протекало в легкой форме, а лечение заключалось в назначении диеты и выпойке регидратационных растворов и вяжущих средств в течение 2 дней.

Пример 2. Формировали 4 группы телят: 3 группы - опытные, 1 группа - контрольная. Телята содержались в соответствующих ветеринарно-зоогигиеническим требованиям условиях, получали молозиво, а затем молоко в соответствии с общепринятыми нормами. Телятам 1-й и 2-й опытных групп, начиная со второй выпойки молозива, с молозивом выпаивали препарат «ЭМ-Курунга» в дозе 150 мл/кг живой массы 3 раза в день в течение 10 дней, а телятам 2-й группы дополнительно в 1, 2 и 7 дни жизни подкожно в области шеи инъецировали «Иммоветон-Ks» в дозе 50 мг/кг живой массы. Телятам 3-й опытной группы в 1, 2 и 7 дни жизни подкожно в области шеи инъецировали «Иммоветон-Ks» в дозе 50 мг/кг живой массы. Контроль за состоянием иммунобиохимического гомеостаза телят осуществляли путем лабораторных исследований крови телят опытных и контрольной групп до начала опытов в возрасте 1 день и по их завершении к 20-25 дню жизни по следующим показателям: общий белок (определяли рефрактометрическим методом); глюкоза (определяли орто-толуидиновым методом); общие липиды (определяли по Криницкому А.Ф. в модификации Волгина В.И); иммуноглобулины (определяли цинк-сульфатным тестом); холестерин (определяли по Ильку); бактерицидная активность сыворотки крови (определяли по Смирновой О.В. и Кузьминой Т.А); лизоцимная активность сыворотки крови (определяли по Дорофейчук В.Г.); фагоцитарная активность лейкоцитов (определяли по Плященко С.И., Сидорову В.Г.); Т- и В-лимфоциты и субпопуляции Т-лимфоцитов (CD4+, CD8+) (определяли по Маянскому А.Н., Рассанову С.П.); гемоглобин (определяли гемиглобинцианидным методом); кальций общий (определяли унифицированным колориметрическим методом); фосфор неорганический (определяли молибдатным UV-методом); эритроциты (определяли турбидиметрическим методом), лейкоциты (определяли методом подсчета в камере Горяева); лейкограмма (определяли методом дифференциального подсчета лейкоцитов в мазках крови); общие триглицериды и классы иммуноглобулинов (определяли на приборе «Биом»). Объективную оценку степени иммунных расстройств осуществляли с использованием абсолютных значений клеточного иммунитета и расчетных показателей лейко-Т- и лейко-В-лимфоцитарных индексов и иммунорегуляторного индекса (соотношения CD4+/CD8+). В качестве основного маркера оценки эндогенной интоксикации применяли индекс эндотоксикации - соотношение показателей уровня молекул средней массы (МСМ) в сыворотке крови при оптической плотности 254 нм и 280 нм (определяли по Габриэлян Н.И.). Результаты представлены в таблице 2.

Как видно из таблицы 2, комбинация биологически активных препаратов («ЭМ-Курунга»+«Иммоветона-Ks») обеспечивала наиболее оптимальные значения основных показателей естественной резистентности и клеточного и гуморального звеньев иммунитета по сравнению с каждым из препаратов в отдельности. Так, лизоцимная и бактерицидная активности сыворотки крови у телят 2-й группы были выше на 16,51% и 3,7% в сравнении с контрольной группой, тогда как значения этих показателей в 1-й группе были ниже на 6,4% и 8,35%, а в 3-й группе на 47,7% и 1,4% соответственно по сравнению с контрольной группой. Значение фагоцитарной активности лейкоцитов во 2-й группе было выше на 9,8% в сравнении с контрольной группой, а значения соответствующего показателя в 1-й и 3-й опытных и контрольной группах не имели достоверных отличий (>0,05). Количество лейкоцитов у телят 1-й и 3-й групп превышало соответствующий показатель у телят контрольной группы на 5,8%. У телят 1-й и 2-й групп количество лейкоцитов в периферической крови было выше на 22,4% и 17,4% в сравнении с контрольной группой. Однако у телят 2-й опытной группы увеличение числа лейкоцитов обусловлено заметной стимуляцией клеточного звена иммунитета. Так, абсолютное число лимфоцитов выше на 4,5%, а Т-лимфоцитов - на 90,9% в сравнении с контролем. При этом у телят 1-й опытной группы количество нейтрофилов было выше на 30,8%, 21,6%, 22,5% в сравнении с контрольной, 2-й и 3-й опытными группами, а количество Т-лимфоцитов не достигало физиологической нормы.

Количество CD4+ (Т-хелперов) у телят 2-й опытной группы превышало значение этого показателя у телят контрольной группы в 4,8 раза и в 2,7 раза у телят 2-й опытной группы. При этом количество CD8+-клеток было выше в 2 раза в сравнении с контролем, а иммунорегуляторный индекс составлял 2,3, что соответствовало норме. У телят 2-й и 3-й опытной группы достоверных различий в показателях Т-лимфоцитов, CD4+и CD8+ не отмечалось (>0,05), что объясняло отсутствие достоверных различий (>0,05) в показателях лейко-Т-лимфоцитарного и иммунорегуляторного индексов. Абсолютное количество В-лимфоцитов у телят всех групп находилось в пределах физиологической нормы, но у телят 2-й опытной группы этот показатель был ниже на 50% в сравнении с контрольной группой. Однако лейко-В-лимфоцитарный индекс телят 2-й опытной группы оптимален и составлял 14,7, что выше в 2,1 раза в сравнении с контролем. У телят контрольной и 1-й опытной группы отмечено снижение лейко-В-лимфоцитарного индекса ниже нормы, что свидетельствовало о развитии гиперактивности гуморального звена иммунитета. При этом у телят 1-й опытной группы увеличилось содержание общих и всех классов иммуноглобулинов, что привело к накоплению иммунных комплексов. Так, количество общих иммуноглобулинов было выше аналогичного показателя в контрольной и 2-й опытной группе на 54,7% и 65,5% соответственно при низкой фагоцитарной активности. Иммунорегуляторный индекс у телят контрольной и 1-й опытной группы приближался к нижней границе нормы, что свидетельствовало о расстройстве иммунорегуляции.

Пример 3. Формировали 4 группы телят. Схемы профилактических обработок: 1-я группа - начиная со второй выпойки молозива, с молозивом выпаивали препарат «ЭМ-Курунга» в дозе 150 мл/кг живой массы 3 раза в день в течение 10 дней и дополнительно в 1, 2 и 7 дни жизни внутримышечно инъецировали «Иммоветон-Ks» в дозе 52 мг/кг живой массы (заявленный способ); 2-я группа - начиная со второй выпойки молозива, в течение 15 дней выпаивали пробиотик «Байкал ЭМ-1» в дозе 20 мл (прототип); 3-я группа - начиная со второго дня рождения, ежедневно 1 раз в день в течение 10 дней композиционный препарат «Витабациллин» в дозе 2,0 г (аналог); 4-я группа - лактобактерин в соответствии с наставлением по его применению (аналог). Эффективность оценивали по основным клиническим показателям (таблица 3).

Как видно из таблицы 3, в 4-й группе из 28 телят заболели 5 телят, причем 3 из них тяжелой формой, при которой использовалась интенсивная терапия с применением антибиотиков, инфузионных средств и витаминов. Из этих 3 телят пали 2 теленка. Сохранность телят в этой группе составила 92,9%. В 3-й группе заболели 3 теленка, у 1 из них заболевание протекало в тяжелой форме и сопровождалось сильным обезвоживанием. Теленка лечили с использованием антибиотиков, инфузионных средств и витаминов. В этой группе пал 1 теленок. Сохранность составила 95,8%. Во 2-й группе заболели 4 теленка, у 1 теленка заболевание протекало в тяжелой и у 3 телят - в легкой форме. 1 теленка лечили с применением антибиотиков, 3 телят - назначением диеты и выпойкой регидратационных растворов и вяжущих средств в течение 2-3 дней. В этой группе пал один теленок, сохранность составила 96%. У животных 1-й группы лишь в 1 случае наблюдались расстройства (4,2%) в течение первых суток, на третьи сутки они исчезли. Среднесуточные привесы в 1-й группе были выше, чем в других группах.

Экспериментальные данные подтверждают высокую эффективность заявленного способа, который благодаря подбору препаратов, их последовательности и режимам применения учитывает следующие особенности организма новорожденного теленка: физиологический иммунодефицит из-за отсутствия в крови иммуноглобулинов до получения в достаточном количестве полноценного материнского молозива; приобретенный иммунодефицит вследствие стресса и/или инфицирования вирусами с иммуносупрессивными свойствами, недостаточность факторов антиоксидантной защиты (витамин Е, церулоплазмин, глютатионпероксидаза), способствующая избыточному накоплению продуктов перекисного окисления липидов и обусловливающая нарушение фагоцитоза вследствие структурной перестройки клеточных мембран фагоцитов; стерильность кишечника, заселение которого резидентной микрофлорой (бифидо- и лактобактериями) протекает постепенно и завершается к 20-25 дню после рождения, причем в первые дни жизни кишечник заселяется преимущественно энтеробактериями, энтерококками, другими аэробными микроорганизмами («хлевная» микрофлора), что приводит к дисбактериозу, клинически проявляющемуся диареей, бактериальным токсикозом и нередко завершающемуся сепсисом. Применение иммуномодулятора «Иммоветон-Ks» обеспечивает оптимальное становление клеточного и гуморального звена иммунитета и функциональную устойчивость иммунорегуляторного звена иммунного ответа. Входящая в состав препарата аскорбиновая кислота обеспечивает регуляцию окислительного стресса. Включение в профилактическую схему телят препарата «ЭМ-Курунга», способствует не только преобладанию полезных видов среди микроорганизмов, населяющих желудочно-кишечный тракт, но и физиологичному становлению метаболических процессов в части нормализации углеводного, белкового, жирового и минерального обменов.

Источники информации, принятые во внимание

1. Павлов, Д.К. Заболевания желудочно-кишечного тракта у новорожденных телят /Д.К. Павлов// Ветеринарная жизнь. - 2006. - №11. - С.8.

2. Субботин, В.В. Основные элементы профилактики желудочно-кишечной патологии новорожденных животных /В.В. Субботин, М.А. Сидоров.// Ветеринария. - 2004. - №1. - С.3-6.

3. Тараканов Б.В. Использование микробных препаратов и продуктов микробиологического синтеза в животноводстве. - М., 1987. - 263 с.

4. Патент РФ №2497519 С1, 2013.

5. Временное наставление по применению пробиотика Байкал ЭМ-1 в ветеринарии, утв. 22.12.2005 г.

6. Белоокова, О.В. Продуктивные и воспроизводительные качества крупного рогатого скота при использовании ЭМ-препаратов: Автореф. дис… канд. с.-х. наук: 06.02.10 /Белоокова Оксана Владимировна. - Курган, 2012. - 21 с.

Изобретения относится к ветеринарии и может быть использовано для профилактики желудочно-кишечных болезней новорожденных телят. Для этого проводят выпаивание телятам, начиная со второй выпойки молозива, препарата из группы ЭМ. При этом в качестве препарата группы ЭМ используют раствор сухой микробной закваски «ЭМ-Курунга», полученный внесением в 1 литр 1,5% коровьего молока, 1 чайной ложки пчелиного меда и 2 г сухой микробной закваски «ЭМ-Курунга», перемешиванием и выдерживанием в закрытой крышкой емкости при комнатной температуре 2-3 суток при периодическом помешивании. Указанный препарат применяют в дозе 150 мл 3 раза в день в течение 10 дней. Дополнительно в 1, 2 и 7 дни жизни внутримышечно или подкожно инъецируют 50-55 мг/кг живой массы биологически активного комплекса, содержащего гидрохлорид ксимедона, аскорбиновую кислоту и физиологический раствор при следующем соотношении компонентов, масс. %: гидрохлорид ксимедона - 13,22, аскорбиновая кислота - 4,13, физиологический раствор - остальное, полученного смешиванием расчетных количеств гидрохлорида ксимедона и аскорбиновой кислоты с последующей стерилизацией полученной смеси сухим жаром при температуре 100°С в течение 25-30 минут и добавлением непосредственно перед применением стерильного физиологического раствора. Изобретение обеспечивает поддержание физиологического гомеостаза за счет компенсации физиологического дисбактериоза, нормализацию углеводного, белкового, жирового и минерального обменов, повышение иммунобиологической реактивности и профилактику желудочно-кишечных болезней новорожденных телят. 3 табл., 3 пр.

Способ профилактики желудочно-кишечных болезней новорожденных телят, включающий выпаивание телятам, начиная со второй выпойки молозива, препарата из группы ЭМ, отличающийся тем, что в качестве препарата группы ЭМ используют раствор сухой микробной закваски «ЭМ-Курунга», полученный внесением в 1 литр 1,5% коровьего молока 1 чайной ложки пчелиного меда и 2 г сухой микробной закваски «ЭМ-Курунга», перемешиванием и выдерживанием в закрытой крышкой емкости при комнатной температуре 2-3 суток при периодическом помешивании, который применяют в дозе 150 мл 3 раза в день в течение 10 дней, и дополнительно в 1, 2 и 7 дни жизни внутримышечно или подкожно инъецируют 50-55 мг/кг живой массы биологически активного комплекса, содержащего гидрохлорид ксимедона, аскорбиновую кислоту и физиологический раствор при следующем соотношении компонентов, масс. %: гидрохлорид ксимедона - 13,22, аскорбиновая кислота - 4,13, физиологический раствор - остальное, полученного смешиванием расчетных количеств гидрохлорида ксимедона и аскорбиновой кислоты с последующей стерилизацией полученной смеси сухим жаром при температуре 100°С в течение 25-30 минут и добавлением непосредственно перед применением стерильного физиологического раствора.