ПРЕПАРАТ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ГЕЛЬМИНТОЗОВ ЖИВОТНЫХ Российский патент 2015 года по МПК A61K31/415 A61K31/66 A61P33/10 

Область техники, к которой относится изобретение

Изобретение относится к ветеринарии, в частности к препаратам для лечения гельминтозов животных.

Уровень техники

Для профилактики и лечения паразитарных заболеваний, вызываемых нематодами, цестодами, трематодами, разработан ряд препаратов. Широкой известностью пользуются препараты, базирующиеся на производных бензимидазолкарбаматов: тиабендазол, мебендазол, флюбендазол, оксфендазол, оксибендазол, луксабендазол, парбендазол, камбендазол, фторбендазол, албендазол, рикобендазол и фенбендазол (Демидов Н.В. Антгельминтики в ветеринарии. М.: Колос, 1982, с. 250-292; патент США N 5538990, А61К 31/415, 1996).

Наиболее глубоко и всесторонне изучен албендазол (Демидов Н.В. Антгельминтики в ветеринарии. М.: Колос, 1982, с. 279-283; патент ФРГ N 3315607, A61K 31/415, 1983).

Многочисленные клинические испытания подтвердили высокую эффективность и хорошую переносимость албендазола (Н.И. Тумольская и др. Новые лекарства: №4/2003). Препарат вызывает гибель нематод, цестод и трематод (только в период половозрелой стадии). В дозах, активных против трематод, обладает эмбриотоксическим действием. Албендазол представляет собой бесцветные кристаллы с t_пл=208-210°C, нерастворим в воде, хорошо растворим в диметилсульфоксиде и диметилформамиде. Основным преимуществом его является то, что он действует на гельминтов, резистентных ко многим другим препаратам. В организме млекопитающих альбендазол быстро превращается в печени до активного метаболита - сульфоксида (известного как рикобендазол) и сульфона (неактивный метаболит); причем сульфоксид существует в двух энантиомерных формах и их соотношение различно у разных животных. При оральном введении албендазол всасывается не полностью (около 50%) и после превращения в активные метаболиты пассивно диффундирует в желудочно-кишечный тракт.Как правило, албендазол лучше воздействует на гельминтов желудочно-кишечного тракта, чем в других местах локализации (В.А.Сидоркин. Грозное оружие против гельминтов // Ветеринария Поволжья. - 2002, №1).

Известны противопаразитарные препараты на основе албендазола, такие как альвет, альбен С, вальбазен, бровальзен, атазол, вермитан 20% гранулят, клозальбен, албендазол ультра 10%.

Наиболее близким по своей технической сущности является препарат Альвет-суспензия, содержащий в качестве действующего вещества албендазол по 25 или 100 мг в 1 мл (соответственно 2,5 или 10%), загустители, консерванты и воду. Этот препарат широкого спектра действия, активен в отношении имаго и личинок нематод, трематод, а также имаго цестод. Механизм действия препарата заключается в нарушении процессов транспорта глюкозы, микротубулярной функции и снижении активности фумарат-редуктазы у гельминтов, что приводит к их гибели. Альвет-суспензия при пероральном введении всасывается в желудочно-кишечном тракте и проникает в органы и ткани; из организма быстро выводится в основном с мочой и фекалиями. Препарат относится к низкотоксичным для теплокровных животных: ЛД₅₀ при пероральном введении белым мышам составляет более 3000 мг/кг, в рекомендуемых дозах хорошо переносится животными, не обладает гепатотоксическим и сенсибилизирующим действием. (Сидоркин В.А., Нефедова Н.С., Панфилова М.Н. Опыт применения альвета-суспензии для терапии гельминтозов кошек // Российский паразитологический журнал. - 2013. - №1. - С. 92-94).

Недостатком данного препарата является относительно узкая область применения, обусловленная невозможностью проведения комплексной терапии осложнений на фоне гельминтозной инвазии, а также пероральный способ введения препарата.

За время паразитирования гельминты оказывают негативное воздействие на организм хозяина. В организме неспецифических хозяев, в том числе человека, животных и птиц, личинки нематод совершают соматическую миграцию и вызывают патологические изменения по пути миграции и локализации, характерные для синдрома "larva migrans". Чаще личинки гельминтов попадают в печень и легкие, но могут поражать ткани глаз, мышц, головного мозга, вызывая воспалительные и аллергические реакции. Одни личинки разрушаются, другие - неоднократно активизируются и перемещаются по организму. (Есаулова Н.В. Гельминтозы собак и кошек, опасные для человека, и их диагностика // Ветеринария, 2000. - №6. - С. 22-29. Токмалаев А.К. Клиническая паразитология: протозоозы и гельминтозы / А.К. Токмалев, Г.М. Кожевникова. - М.: Медицинское информационное агентство, 2009. - 432 с.). Известно также, что гельминты обладают и иммуносупрессивным действием на организм хозяина, а применение антгельминтиков в большинстве случаев синергирует их отрицательное действие на факторы неспецифической резистентности, тем самым повышая риск реинвазирования животных, возможно с более высокой интенсивностью. (Даугалиева Э.X., Филиппов В.В. Иммунный статус и пути его коррекции при гельминтозах сельскохозяйственных животных. - М.: Агропромиздат, 1991. - 188 с.; Якубовский М.В., Чистенко Г.Н., Горбачева В.Н., Веденьков А.Л. Современные проблемы иммунологии гельминтозов // Медицинские новости. - 1997. - №4. - С. 11-15.)

Раскрытие изобретения

Задачей изобретения является разработка новой лекарственной формы албендазола, обладающей возможностью комплексного специфического воздействия на гельминтов и сопутствующие гельминтозной инвазии побочные эффекты и заболевания, а также низкой токсичностью и высокой терапевтической эффективностью.

Технический результат - повышение терапевтической эффективности вследствие комплексного воздействия на гельминтов и сопутствующие гельминтозной инвазии побочные эффекты и заболевания, снижение токсичности препарата.

Указанный технический результат достигается тем, что препарат для лечения гельминтозов животных содержит, %: албендазола сульфоксид(n-[6-(пропан-1-сульфинил)-1Н-1,3-бензодиазол-2-ил]метоксикарбоксимидовая кислота) - 5,0-10,0; бутафосфан (1-бутиламино-1-метил)этилфосфоновая кислота - 10,0-20,0; вода для инъекций - остальное.

Комплексное лекарственное средство, обладая высокой антигельминтной эффективностью, нормализует метаболические процессы, оказывает стимулирующее влияние на белковый, углеводный и жировой обмены веществ, повышает резистентность организма к неблагоприятным факторам внешней среды, способствует росту и развитию животных. Бутафосфан - органическое соединение фосфора, оказывающее влияние на многие ассимиляционные процессы в организме. Бутафосфан улучшает утилизацию глюкозы в крови, что способствует стимуляции энергетического обмена; ускоряет процессы метаболизма за счет стимуляции АДФ - АТФ цикла; активизирует все функции печени; повышает неспецифическую резистентность организма; стимулирует гладкую мускулатуру и повышает ее двигательную активность; восстанавливает работу миокарда; стимулирует образование костной ткани; нормализует уровень кортизола в крови; стимулирует синтез протеина, ускоряя рост и развитие животного, а также репаративные свойства органов и тканей. Органические соединения фосфора не накапливаются в организме и не оказывают побочных эффектов, характерных для стимулирующих средств и неорганического фосфора. Терапевтическая доза препарата находится в интервале 50-500 мг на собаку в зависимости от живой массы (http://www.animalhealth.bayerhealthcare.com).

Осуществление изобретения

Албендазола сульфоксид (n-[6-(пропан-1-сульфинил)-1Н-1,3-бензодиазол-2-ил]метоксикарбоксимидовая кислота) получают окислением из албендазола [5-(пропилтио)-1Н-бензимидазол-2-ил] карбаминовой кислоты метилового эфира в присутствии дибензоилпероксида. Получаемое соединение является водорастворимым. Для стабилизации албендазола сульфоксида использовали бутафосфан. Бутафосфан - органическое соединение, которое пригодно в качестве стимулятора метаболизма и тонизирующего средства, в частности, для сельскохозяйственных и домашних животных. Препарат получают посредством того, что указанные компоненты растворяют в воде для инъекций в определенных соотношениях.

Примеры конкретного получения препарата

Для подбора оптимального соотношения действующих веществ в препарате использовали 4 лекарственные формы с различным содержанием

действующих веществ, %.

Пример 1. Албендазола сульфоксид (n-[6-(пропан-1-сульфинил)-1Н-1,3-бензодиазол-2-ил]метоксикарбоксимидовая кислота) - 2,0; бутафосфан (1-бутиламино-1-метил)этилфосфоновая кислота - 5,0; вода для инъекций - остальное.

Пример 2. Албендазола сульфоксид (n-6-(пропан-1-сульфинил)-1Н-1,3-бензодиазол-2-ил]метоксикарбоксимидовая кислота) - 5,0; бутафосфан (1-бутиламино-1-метил)этилфосфоновая кислота - 10,0; вода для инъекций - остальное.

Пример 3. Албендазола сульфоксид (n-[6-(пропан-1-сульфинил)-1Н-1,3-бензодиазол-2-ил]метоксикарбоксимидовая кислота) - 10,0; бутафосфан (1-бутиламино-1-метил)этилфосфоновая кислота - 20,0; вода для инъекций - остальное.

Пример 4. Албендазола сульфоксид (n-[6-(пропан-1-сульфинил)-1Н-1,3-бензодиазол-2-ил]метоксикарбоксимидовая кислота) - 15,0; бутафосфан (1-бутиламино-1-метил)этилфосфоновая кислота - 30,0; вода для инъекций - остальное.

В опыте использовали 20 клинически здоровых белых мышей, разделенных на 4 группы. Животным первой группы вводили лекарственную форму №1, второй группе №2, третьей - №3 и четвертой №4 соответственно. До введения и через 10 дней проводили замеры массы мышей и отбирали кровь для гематологических исследований (таблица 1).

Из данных таблицы 1 видно, что показатели живой массы, количества эритроцитов и гемоглобина во 2 и 3 группах через 10 дней после введения лекарственных форм имеют умеренное увеличение, а в 1 и 4 группах остаются без видимых изменений. Показатели количества лейкоцитов в 1, 2, 3 группах до и после введения колеблются в пределах референтных значений, в то время как в 4 группе заметно небольшое увеличение.

Таким образом, оптимальному соотношению действующих веществ соответствуют 2 и 3 лекарственные формы. Поэтому данные концентрации взяты за основу: Албендазола сульфоксид (n-[6-(пропан-1-сульфинил)-1Н-1,3-бензодиазол-2-ил]метоксикарбоксимидовая кислота) - 5,0-10,0; бутафосфан (1-бутиламино-1-метил)этилфосфоновая кислота - 10,0-20,0; вода для инъекций - остальное.

Примеры конкретного испытания препарата для лечения гельминтозов животных.

Пример 1

Для определения показателей острой токсичности исследуемый препарат вводили мышам обоего пола внутрижелудочно в дозах от 200 мг/кг до 7480,1 мг/кг по действующему веществу (таблица 2).

Ниже приведены данные о влиянии препарата на массу тела экспериментальных животных (таблица 3).

Как видно из данных таблицы 2, животные из опытных групп прибавляли в весе в течение всего периода наблюдения. Различий в приросте массы тела по сравнению с контрольной группой не выявлено.

В результате изучения острой токсичности препарата установлено, что в остром эксперименте при внутрижелудочном введении исследуемого препарата в дозах до 1170,9 мг/кг летальных эффектов достичь не удалось. Общее состояние и поведение животных носили нормальный характер и не отличались от таковых у животных из контрольных групп.

Результаты исследования острой токсичности позволяют отнести препарат к IV классу - вещества малоопасные (ГОСТ 12.1.007-76).

Пример 2

Влияние препарата на гематологические показатели белых мышей (таблица 4).

При анализе полученных данных не установлено отрицательного влияния препарата на основные гематологические показатели. Концентрация гемоглобина, количество эритроцитов, цветовой показатель и скорость оседания эритроцитов в группах, получивших препарат в терапевтической и в десятикратно увеличенной дозе, не имели статистически достоверных различий с показателями животных контрольной группы.

Пример 3

Влияние препарата на биохимические показатели крови. Изучение основных биохимических показателей сыворотки крови не выявило негативных изменений при действии препарата па функцию печени, почек, обмен белка и активность ферментов (таблица 5).

Пример 4

Целью испытания было определение терапевтической дозы и антигельминтной эффективности новой лекарственной формы на основе албендазола при кишечных нематодозах собак.

Для определения терапевтической дозы подобрали 20 собак разных пород в возрасте 1-2 года, спонтанно инвазированных Toxocara canis. Диагноз на токсокароз ставили комплексно: учитывали клинические данные и результаты лабораторного гельминтоовоскопического исследования фекалий по методу Мак-Мастера.

Расчет эффективности препаратов проводили методом «Контрольный тест» согласно Руководству по оценке антгельминтиков, одобренному Всемирной ассоциацией за прогресс ветеринарной паразитологии.

Всех животных разделили на 4 группы по 5 собак в каждой. Животным первой группы ввели внутримышечно однократно разработанный препарат в дозе 150 мг/кг массы по д.в. (0,75 мл/10 кг массы тела). Второй группе собак аналогично ввели препарат в дозе 200,0 мг/кг по д.в. (1,0 мл/10 кг массы тела) однократно, третьей - в дозе 250,0 мг/кг по д.в. (1,25 мл/10 кг массы тела) по аналогичной схеме. Четвертая группа служила зараженным контролем и препаратов не получала. После введения препаратов в течение 4 часов и далее ежедневно наблюдали за клиническим состоянием животных с целью выявления возможного побочного действия.

В результате проведенных исследований установлено, что разработанный препарат обладает высокой терапевтической эффективностью (таблица 6).

Применение препарата в дозе 150 мг/кг по д.в. обеспечило снижение яйцепродукции гельминтов на 84,5%, а в среднем по группе количество яиц токсокар составило 25,2±2,3 экз. Введение антгельминтика в дозах 200 и 250 мг/кг по д.в. обеспечивает интенсэффективность соответственно 98,0-98,2%.

Таким образом, терапевтической дозой на основании копрологических исследований можно считать дозу начиная с 200,0 мг/ кг по д.в.

Пример 5

Для сравнительного испытания новой лекарственной формы антгельминтика методом гельминтоовоскопии подобрали собак различных пород и разного возраста, спонтанно инвазированных Toxocara canis (38 гол.), Toxascaris leonina (27 гол.) и Uncinaria stenocephala (12 гол.).

Эффективность препаратов учитывали на основании результатов исследований проб фекалий собак методом флотации и камеры Мак-Мастера для учета количества яиц гельминтов в г фекалий до и через 15 суток после применения антгельминтиков.

В качестве препаратов сравнения использовали следующие антгельминтики: Каниквантел Плюс (Maramed Pharma GmbH, Германия) в дозе 50 мг празиквантела и 500 мг фенбендазола на 10 кг массы тела; Поливеркан (САНОФИ, Франция) в дозе 40 мг оксибендазола, 200 мг никлозамида на 10 кг массы тела; Дирофен (ООО НПФ «Апи-Сан», Россия) в дозе 50 мг фенбендазола и 15 мг пирантела памоата на 1 кг массы тела. Все указанные препараты сравнения вводили перорально однократно. Разработанный препарат вводили в дозе 200 мг/кг по д.в. внутримышечно однократно. Животных контрольной группы не дегельминтизировали (таблица 7).

В результате проведенных исследований установлено, что все испытанные препараты проявили достаточно высокую антгельминтную эффективность. Интенсэффективность дегельминтизации каниквантелом при токсокарозе и токсаскариозе составила 100%, при унцинариозе - 98,9%. Наименьшие показатели отмечены при использовании дирофена.

Интенсэффективность применения дирофена при токсокарозе, токсаскариозе и унцинариозе составила соответственно 92,7, 91,6 и 91,7%. Применение поливеркана способствовало снижению интенсивности выделения яиц токсокар на 97,1%, яиц токсоаскарид на 98,3% и унцинарий - на 97,5%. Эффективность применения разработанного препарата при

токсокарозе составила 98,2%, при токсаскариозе - 98,8% и при унцинариозе - 98,1%.

Таким образом, по результатам сравнительного испытания установлено, что разработанный препарат не уступает по эффективности антгельминтикам, широко применяемым в ветеринарной практике для дегельминтизации собак, инвазированных Toxocara canis, Toxascaris leonina и Uncinaria stenocephala.

В соответствии с рекомендациями Всемирной ассоциации за прогресс ветеринарной паразитологии разработанный препарат можно классифицировать как высокоэффективный антгельминтик (Jacobs D.E., Arakowa A., Courtney С.Н. et al. // Vet. Parasitol. - 1994. - V. 52, N 1. - P. 179-202).

Предлагаемое изобретение по сравнению с прототипом и другими техническими решениями имеет следующие преимущества:

1. Комплексная терапия побочных эффектов гельминтозной инвазии за счет использования в составе препарата бутафосфана.

2. Низкая токсичность.

3. Удобный способ дозирования и введения.

Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для лечения гельминтозов животных. Препарат для лечения гельминтозов у животных содержит албендазола сульфоксид, бутафосфан и воду для инъекций при следующем массовом соотношении компонентов, %: албендазола сульфоксид (n-[6-(пропан-1-сульфинил)-1Н-1,3-бензодиазол-2-ил]метоксикарбоксимидовая кислота) 5,0-10,0; бутафосфан (1-бутиламино-1-метил) этилфосфоновая кислота) 10,0-20,0; вода для инъекций - остальное. Заявленное изобретение позволяет повысить терапевтическую эффективность при лечении гельминтозной инвазии при снижении побочных эффектов и снижении токсичности препарата. 7 табл., 5 пр.

Препарат для лечения гельминтозов у животных, содержащий албендазола сульфоксид, сопутствующие вещества, отличающийся тем, что дополнительно содержит бутафосфан при следующем массовом соотношении компонентов, %:
Албендазола сульфоксид (n-[6-(пропан-1-сульфинил)-   1Н-1,3-бензодиазол-2-ил]метоксикарбоксимидовая кислота) 5,0-10,0 Бутафосфан (1-бутиламино-1-метил)   этилфосфоновая кислота) 10,0-20,0 Вода для инъекций остальное