СРЕДСТВО ДЛЯ ПОМЕЩЕНИЙ ДЕЗОДОРИРУЮЩЕЕ С СОДЕРЖАНИЕМ БАКТЕРИОФАГОВ Российский патент 2016 года по МПК A61L9/01 C12N7/00 

Изобретение относится к биотехнологии, медицине, ветеринарии, санитарии.

Биопрепараты бактериофагов представляют собой фильтраты полностью лизированной тем или иным фагом соответствующей бульонной культуры бактерий. Полифаги - биопрепараты, которые содержат в своем составе от двух и более бактериофагов. Как правило, перед смешиванием устанавливают титр бактериофагов и в зависимости от содержания вирусных частиц в 1 мл фаголизата смешивают. По мнению ряда исследователей, антагонизма между бактериофагами в биопрепаратах полифага не возникает (RU 1697421; RU 2410084; RU 1533330). Во многих работах отмечена полная безвредность бактериофагов для организма, вводимых даже в больших дозах и неоднократно, включая внутривенный и интралюмбальный способ введения. Биопрепараты полифагов, применяемые для санации помещений, не должны содержать жизнеспособных бактериальных клеток. Применяемый для этих целей биопрепарат полифага, также не должен содержать агрессивных и коррозионных веществ. Основными критериями качества биопрепаратов полифагов являются: жизнеспособность бактериофагов (стабильность титра фага), широта спектра чувствительных бактерий. Кроме того, растворы биопрепараты полифагов не должны содержать питательных веществ, которые могут быть доступны бактериям, не чувствительным к бактериофагам, входящим в состав средства. Биопрепараты бактериофагов не должны содержать эндотоксинов, которые высвобождаются при лизисе (разрушении) клеток. Также биопрепараты полифагов не должны содержать вещества, ингибирующие или оказывающие негативное воздействие на бактериофаги.

Известно изобретение «Пробиотический препарат ветеринарного назначения» (RU 99112455). Изобретение содержит бактериальную массу бифидобактерий, стрептококков и стрептококковых бактериофагов. Однако для аэрозольного применения этот препарат не приемлем.

Известно изобретение - композиция для перорального применения, содержащая непатогенные микроорганизмы, обладающая способностью нормализовать микрофлору кишечника (варианты) (RU 2008131894). Основой композиции являются бактериофаги. Однако для аэрозольного применения этот препарат не приемлем.

Известно средство - суппозитории с содержанием бактериофагов (RU 2000115937). Однако для аэрозольного применения этот препарат не приемлем.

Известен метод обработки бактериофагами помещений хозяйственного назначения (GEU 20071393). Однако к недостаткам этого метода можно отнести отсутствие эффекта дезодорирования.

Известно изобретение, средство антибактериальное избирательного действия на основе бактериофагов (RU 2366436), которое может являться прототипом. Это изобретение относится к биотехнологии, медицине, фармации, косметологии и ветеринарии и может быть использовано при изготовлении лечебных профилактических и санитарно-гигиенических средств. Известное средство содержит бактериофаги, избирательно инактивирующие патогенную микрофлору, и компоненты стимулирующие рост нормофлоры. Бактериофаги содержатся в средстве в количестве 0,01-0,1 мас.% с концентрацией 10^-5 в 1 мл по Аппельману. Недостатком предлагаемого средства для аэрозольной обработки помещений является узкий спектр входящих в состав бактериофагов Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Proteus spp., Echerichia spp. и возможное содержание эндотоксинов в связи с технологией культивирования на жидких средах и отсутствия контроля на эндотоксины указанных бактерий.

Задачей предлагаемого изобретения является создание дезодорирующего средства для избирательной инактивации широкого спектра бактерий видов Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Salmonella enterica, Proteus mirabilis, Proteus vulgaris, Yersinia pseudotuberculosis, Yersinia enterocolitica, Pseudomonas aeruginosa в помещениях, использования культивирования на плотной среде с целью получения высоких титров бактериофагов, отсутствия эндотоксинов в средстве и питательных компонентов для размножения бактерий, а также консервантов на основе изотиозолинона, не снижающих активность бактериофагов.

В результате использования предлагаемого изобретения появляется возможность расширения спектра средств дезодорирующих для помещений с высокоэффективным антибактериальным действием избирательного назначения за счет сочетания действия отдушки и селекционированных высокоспецифичных бактериофагов Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Salmonella enterica, Proteus mirabilis, Proteus vulgaris, Yersinia pseudotuberculosis, Yersinia enterocolitica, Pseudomonas aeruginosa.

Аэрозольное применение предлагаемого средства обеспечивает контакт бактериофагов и чувствительных бактерий с последующей инактивацией, улучшение качества жизни человека и профилактику распространения инфекций микробной этиологии. Пример состава средства указан в таблице 1.

Вышеуказанный результат достигается тем, что предлагаемое средство дезодорирующее с избирательным антибактериальным действием, на основе бактериофагов включает следующее.

1. Широкий спектр селекционированных высокоспецифичных бактериофагов, выращенных на плотной среде и очищенных ультрафильтрацией с указанными в таблице 2 свойствами.

2. Отсутствие питательных компонентов,в составе средства исключает развитие бактерий.

3. Отсутствие эндотоксинов в составе средства, достигающееся тем, что 1 мл смыва фаголизата с плотной среды разводится более чем в миллион раз в конечном готовом продукте (средстве). Например, 1 мл смыва с плотной среды бактериофага Klebsiella pneumoniae с исходным титром 5*10¹⁴, и содержащего 10 ед. эндотоксина, разводится в ста литрах средства, то есть в 100000 раз. Концентрация в составе средства у бактериофага составит 5*10⁹ БОЕ/мл, а концентрация эндотоксина 0,0001 ед. Концентрация токсина контролируется в составе спрея с использованием наборов или жидкостной хроматографией.

4. Консерванты на основе изотиозолинона, не снижающие активность бактериофагов, но ингибируют рост бактерий, дрожжей и плесневых грибов в концентрациях 0,01-0,1 г/л.

5. Изотонический раствор 0,8%-0,9% хлорида натрия, позволяет защитить бактериофаги в составе средства от такого явления как осмотический шок.

На основании проведенных испытаний бактериофаги бактерий Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Salmonella enterica, Proteus mirabilis, Proteus vulgaris, Yersinia pseudotuberculosis, Yersinia enterocolitica, Pseudomonas aeruginosa не снижают активности в течение 1 года в составе средства дезодорирующего.

При определении эффективности спрея для помещений учитывали специфику его применения. Критерием эффективности считали снижение титра бактерий на обрабатываемой поверхности в 3 и более раза. Для этого проводили смешивание суточных культур специфичных к фагам бактерий в концентрации не ниже 10⁸ и обрабатывали стерильную поверхность площадью 1 м². Затем проводили смыв с 100 см², обрабатывали средством для помещений, выдерживали экспозицию в течение 24 часов и производили последующий смыв с 100 см² поверхности. Были получены следующие результаты, приведенные в таблице 3.

Дезодорирующий эффект определяли органолептически с участием группы добровольцев, установлено, что для достижения данного эффекта в среднем необходимо произвести распыление 1 мл средства в помещении объемом 20 м³.

Предлагаемое дезодорирующее средство для помещений с содержанием селекционированных высокоспецифичных бактериофагов оказывает антибактериальное действие и освежающее за счет ароматических отдушек, а концентрация бактериофагов видов Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Salmonella enterica, Proteus mirabilis, Proteus vulgaris, Yersinia pseudotuberculosis, Yersinia enterocolitica, Pseudomonas aeruginosa составляет 10^-8 в 1 мл средства по Аппельману. Полное отсутствие токсинов и высокая специфичность бактериофагов позволяют использовать указанное средство в любых помещениях. Таким образом, предлагаемое средство соответствует критерию «новизна».

Изобретение относится к медицине, ветеринарии, санитарии и предназначено для дезодорации помещений. Дезодорирующее средство для помещений содержит концентрат селекционированных высокоспецифичных бактериофагов видов Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Salmonella enterica, Proteus mirabilis, Proteus vulgaris, Klebsiella pneumoniae, Yersinia pseudotuberculosis, Yersinia enterocolitica, Pseudomonas aeruginosa. Концентрат указанных бактериофагов обладает литической активностью каждого бактериофага 10-8 по Аппельману. Бактериофаги выращены на плотной среде и очищены ультрафильтрацией. Указанное средство содержит отдушку и консерванты на основе изотиозолинона, не снижающие активность бактериофагов. Питательные для бактерий компоненты отсутствуют. Использование изобретения обеспечивает устранение неприятных запахов с одновременным уничтожением бактерий видов Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Salmonella enterica, Echerichia coli, Proteus mirabilis, Proteus vulgaris, Klebsiella pneumoniae, Yersinia pseudotuberculosis, Yersinia enterocolitica, Pseudomonas aeruginosa, а также обеспечивает профилактику бактериальных инфекций, вызываемых указанными видами бактерий. 3 табл.

Дезодорирующее средство для помещений, содержащее концентрат бактериофагов и отдушку, отличающееся тем, что содержит селекционированные высокоспецифичные бактериофаги видов Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Salmonella enterica, Proteus mirabilis, Proteus vulgaris, Yersinia pseudotuberculosis, Yersinia enterocolitica, Pseudomonas aeruginosa, причем концентрат бактериофагов обладает литической активностью каждого бактериофага 10-8 по Аппельману, бактериофаги выращены на плотной среде и очищены ультрафильтрацией, также содержит консерванты на основе изотиозолинона, не снижающего активность бактериофагов, при этом питательные для бактерий компоненты отсутствуют.