Жидкий бальзам и способ его получения Российский патент 2023 года по МПК A61K9/08 A61K31/45 A61K31/125 A61K36/282 A61K47/44 A61P31/04 A61P31/10 A61P39/06 

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к средствам для наружного применения с местнораздражающим, антибактериальным и антирадикальным действием. Жидкий бальзам содержит касторовое масло, левоментол, камфору и эфирное масло полыни однолетней, взятые в определенном соотношении.

На сегодняшний день в связи с распространением вирусных инфекций, в том числе COVID-19, все больше появляется необходимость разработок эффективных отечественных антибактериальных, антивирусных, антисептических средств. Поиск новых антибактериальных лекарственных средств связан с тем, что микроорганизмы приобретают резистентность ко многим современным препаратам и, в результате, последние теряют свою эффективность. Однако, средства растительного происхождения, в частности эфирные масла (ЭМ), имеют многокомпонентный состав, что предотвращает появление резистентности к их воздействию. Известно, что ЭМ растений обладают антибактериальной, противогрибковой, антивирусной, противоопухолевой, антиоксидантной активностями. Таким образом, ЭМ являются перспективным кандидатом для разработки фармакологических средств на их основе для профилактики и лечения инфекционно-воспалительных заболеваний.

Известен жидкий бальзам с местнораздражающим и противовоспалительным действием, содержащий 5-36 мас.% масла мятного без ментола, 8-43 мас.% масла эвкалиптового, 0,5-20 мас.% масла пихтового, 13-57 мас.% левоментола, 1-25 мас.% масла лавандового, 1,5-36 мас.% масла терпентинового [Пат. № 2014108479/15 RU, МПК Жидкий бальзам, оказывающий местнораздражающее и противовоспалительное действие / М.И. Лазарев; ООО «ОКТАВА ХОЛДИНГ». — № 2563189/15; заявл. 05.03.2014; опубл. 20.09.2015, Бюл. № 26].

Недостатком данного изобретения является то, что в составе содержатся только летучие компоненты (эфирные масла) и левоментол, что способствует быстрому испарению композиции и уменьшению срока применения жидкого бальзама.

Известно косметическое средство «Дыши» (эфирное масло) фирмы ООО «Биосфера» (Россия) (рег. № BY.70.06.01.001 E.002775.05.15 от 13.05.15), также содержащее в своем составе летучие эфирные масла и левоментол в следующем соотношении: масло эвкалиптовое 35,45%, масло мятное 35,45%, масло каепутовое 18,5%, левоментол 4,1%, масло винтергриновое 3,7%, масло можжевеловое 2,7%, масло гвоздичное 0,1%.

Несмотря на эффективность препарата, его производство значительно ограничивает использование импортных натуральных эфирных масел: винтергриновое масло, полученное из листьев вечнозеленого растения гаультерия (Северная Америка) и каепутовое масло из вечнозеленого дерева каепут (Малайзия). Кроме того, летучие компоненты эфирного масла способствуют быстрому испарению композиции.

Известный препарат бальзам «Золотая Звезда» фирмы DANAPHA PHARMACEUTICAL, Joint Stock Company (Вьетнам) (рег. № П N013889/01 от 21.05.08) также обладает местнораздражающим, отвлекающим действием. Недостатком данного препарата является фототоксическое действие гвоздичного и коричного эфирных масел, которые входят в его состав. Данное побочное явление значительно ограничивает его применение.

Настоящее изобретение направлено на устранение указанных недостатков. Целью настоящего изобретения является разработка состава и способа получения бальзама с местнораздражающими, антибактериальными и антирадикальными свойствами, с оптимальными соотношениями действующих и вспомогательных веществ. Достигаемый при этом технический результат заключается в определении антибактериальной активности бальзама в отношении бактерий Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella enterica, активности бальзама в отношении грибов Candida albicans, Aspergillus niger и антирадикальной активности бальзама.

Поставленная задача решается с помощью подбора оптимального состава жидкого бальзама, который включает камфору, левоментол, эфирное масло полыни однолетней и касторовое масло. Предпочтительно использовать компоненты в следующих соотношениях, мас.%:

Камфора
Левоментол
Эфирное масло полыни однолетней
Касторовое масло 5,4 –10,8
5,4 – 64,7
4,7 – 28,1
18,0 – 79,8

Способ получения бальзама заключается в подборе оптимальных соотношений вышеуказанных действующих и вспомогательных веществ для гармонизации органолептических свойств, придания высокой антибактериальной и антирадикальной активности, а также исключения быстрого испарения композиции.

Предпочтительно применение касторового масла в качестве основы, удерживающей летучие компоненты и придающей необходимую консистенцию бальзаму. Касторовое масло также обладает благоприятным влиянием на кожу и не имеет запаха. Летучие компоненты бальзама – левоментол, камфора и эфирное мало. Левоментол стимулирует холодовые рецепторы верхних дыхательных путей, облегчая носовое дыхание. Камфора при местном применении хорошо всасывается кожей и слизистыми оболочками и, раздражая рецепторы, оказывает местнораздражающее, сосудосуживающее, антимикробное и противовоспалительное действие. Однако ввиду наличия побочных эффектов, в ароматерапии, а также при изготовлении растворов дозировка камфоры не должна превышать 11%. Эфирное масло полыни однолетней (п. однолетняя) проявляет антимикробную, антифунгальную, антиоксидантную активности. Основными компонентами эфирного масла п. однолетней являются β-мирцен, артемизиа кетон, артемизиа спирт, 1,8-цинеол, β-фарнезен, гермакрен Д, кариофиллен, β-селинен. Известно, что монотерпеновые соединения обеспечивают фото- и термотолерантность растительных клеток, таким образом, эфирное масло п. однолетней не обладает фототоксическим действием. По токсичности его относят к 6 классу («относительно безвредные вещества») по классификации К. Сидорова.

Антирадикальную активность бальзама оценивают методом с применением стабильного радикала 2,2-дифенил-1-пикрилгидразила (ДФПГ-тест).

Исследование антибактериальной активности образцов проводят в условиях in vitro согласно [Государственная фармакопея СССР. XI издание. Выпуск 2. М., 1990. 385 с.]. В качестве тестовых культур использовали грамположительные бактерии Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, грамотрицательные бактерии Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella enterica, грибы Candida albicans, Aspergillus niger. Бактериостатическое действие образцов определяли методом серийных разведений в стерильной питательной среде №8 ГРМ. Бактерицидное действие определяли путем пересева 1 мл содержимого пробирок с серийным разведением после инкубирования на чашки с питательной средой №1 ГРМ.

Способ получения жидкого бальзама поясняется следующими примерами подбора оптимальных соотношений действующих и вспомогательных веществ в зависимости от органолептических свойств, антирадикальной и антибактериальной активностей. Результаты бактериостатической и бактерицидной активности представлены в таблицах 1–4.

Пример 1

Жидкий бальзам содержит в своем составе компоненты с массовой долей, %: камфоры – 10,8; левоментола – 43,1; эфирного масла полыни однолетней – 4,7; касторового масла – 41,4. Камфору и левоментол предварительно растирают в ступке, растворяют в касторовом масле и добавляют эфирное масло п. однолетней. Полученный раствор гомогенизируют на роторном диспергаторе в течение 5 минут. Полученный жидкий бальзам представляет собой светло-желтый, прозрачный, вязкий раствор с умеренным запахом ментола и эфирного масла п. однолетней. Показатель 50%-ингибирования свободных радикалов (IC₅₀) составляет 160,14 µл/мл.

Пример 2

Жидкий бальзам приготовлен по аналогии Примера 1 с содержанием компонентов, мас.%: камфоры – 10,8; левоментола – 43,1; эфирного масла полыни однолетней – 9,4; касторового масла – 36,7. Полученный бальзам представляет собой светло-желтый, прозрачный, вязкий раствор с резким запахом ментола и эфирного масла п. однолетней. IC₅₀ =188,55 µл/мл.

Пример 3

Жидкий бальзам приготовлен по аналогии Примера 1 с содержанием компонентов, мас.%: камфоры – 10,8; левоментола – 43,1; эфирного масла полыни однолетней – 18,7; касторового масла – 27,4. Светло-желтый, прозрачный, вязкий раствор с резким запахом эфирного масла п. однолетней и умеренным запахом ментола. IC₅₀ = 181,41 µл/мл.

Пример 4

Жидкий бальзам приготовлен по аналогии Примера 1 с содержанием компонентов, мас.%: камфоры – 10,8; левоментола – 43,1; эфирного масла полыни однолетней – 28,1; касторового масла – 18,0. Светло-желтый, прозрачный, вязкий раствор с резким запахом эфирного масла п. однолетней. IC₅₀ = 133,09 µл/мл.

Пример 5

Жидкий бальзам приготовлен по аналогии Примера 1 с содержанием компонентов, мас.%: камфоры – 5,4; левоментола – 64,7; эфирного масла полыни однолетней – 9,4; касторового масла – 20,5. Светло-желтый, мутный раствор с белым кристаллическим осадком и с резким запахом ментола. IC₅₀ =300,89 µл/мл. Экспериментально подтверждено, что содержание левоментола выше 60 мас.% приводит к кристаллизации раствора, что недопустимо при изготовлении бальзама.

Пример 6

Жидкий бальзам приготовлен по аналогии Примера 1 с содержанием компонентов, мас.%: камфоры – 5,4; левоментола – 43,1; эфирного масла полыни однолетней – 9,4; касторового масла – 42,1. Светло-желтый, прозрачный раствор с резким запахом эфирного масла п. однолетней. IC₅₀ =196,57 µл/мл.

Пример 7

Жидкий бальзам приготовлен по аналогии Примера 1 с содержанием компонентов, мас.%: камфоры – 5,4; левоментола – 21,6; эфирного масла полыни однолетней – 9,4; касторового масла – 63,6.

Светло-желтый, прозрачный, вязкий раствор с резким запахом эфирного масла п. однолетней и умеренным запахом ментола. IC₅₀ = 138,19 µл/мл.

Пример 8

Жидкий бальзам приготовлен по аналогии Примера 1 с содержанием компонентов, мас.%: камфоры – 5,4; левоментола – 10,8; эфирного масла полыни однолетней – 9,4; касторового масла – 74,4. Светло-желтый, прозрачный, вязкий раствор с резким запахом эфирного масла п. однолетней. IC₅₀ =128,73 µл/мл.

Пример 9

Жидкий бальзам приготовлен по аналогии Примера 1 с содержанием компонентов, мас.%: камфоры – 5,4; левоментола – 5,4; эфирного масла полыни однолетней – 9,4; касторового масла – 79,8. Светло-желтый, прозрачный раствор с резким запахом эфирного масла п. однолетней. IC₅₀ =124,10 µл/мл.

Достижению технического результата способствует то, что для разработанных образцов была также определена минимальная бактериостатическая и бактерицидная концентрация в отношении культуры стрептококка группы А (Streptococcus pyogenes), т.к. они являются основными возбудителями заболеваний верхних дыхательных путей. В таблице 1 указаны результаты учета определения наличия/отсутствия роста в пробирках с серией разведений растворов образцов. Наименьшая концентрация с отсутствием роста является минимальной бактериостатической концентрацией образцов.

Таблица 1 – Определение минимальной бактериостатической концентрации в отношении культуры стрептококка группы А (Streptococcus pyogenes)

Концентрация (разведение) образца 100 % 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:128 1:256 Пример 1 -* - - - - - - - - Пример 2 - - - - - - - - - Пример 3 - - - - - - - - - Пример 4 - - - - - - - + + Пример 5 В результате кристаллизации образца проведение исследования невозможно Пример 6 - - - - - - - - - Пример 7 - - - - - - - - - Пример 8 - - - - - - - + + Пример 9 - - - - - - - - +

*Примечание: «+» – наличие роста микроорганизма, «-» – отсутствие роста микроорганизма

Выявлено, что наилучшей бактериостатической активностью обладают образцы Примеров 1, 2, 3, 6, 7, т.к. при 8-кратном разведении образцов не наблюдался рост бактерий.

В таблице 2 указаны результаты учета определения наличия/отсутствия роста колоний после инкубации на чашках с агаром Мюллера-Хинтона с добавлением 5% дефибринированной крови после пересева из пробирок с серией разведений образцов. Наименьшая концентрация с отсутствием роста является минимальной бактерицидной концентрацией образцов.

Таблица 2 – Определение минимальной бактерицидной концентрации в отношении культуры стрептококка группы А (S. pyogenes)

Концентрация (разведение) образца, % 100 % 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:128 1:256 Пример 1 -* - - - - - - - - Пример 2 - - - - - - - + + Пример 3 - - - - - - - - - Пример 4 - - - - - - + + + Пример 5 В результате кристаллизации образца проведение исследования невозможно Пример 6 - - - - - - - + + Пример 7 - - - - - - - - + Пример 8 - - - - - - + + + Пример 9 - - - - - - + + +

*Примечание: «+» – наличие роста микроорганизма, «-» – отсутствие роста микроорганизма

Выявлено, что наилучшей бактерицидной активностью обладают образцы Примера 1 и 3, где также при 8-кратном разведении образцов не наблюдался рост бактерий.

Показатель 50%-ингибирования свободных радикалов (IC₅₀) в 9 образцах с разным соотношением компонентов составляет 124,10 – 300,89 µл/мл. Для гармонизации органолептического восприятия, а также для проявления высокой антибактериальной активности и относительно высокой антирадикальной активности предпочтительно, чтобы компоненты бальзама были взяты в следующем соотношении согласно Примеру 1 в мас.%:

Камфора
Левоментол
Эфирное масло полыни однолетней
Касторовое масло 10,8
43,1
4,7
41,4

В условиях эксперимента установлены минимальные бактериостатическая и бактерицидная концентрации Примера 1 в отношении грамположительных бактерий Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, грамотрицательных бактерий Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella enterica и грибов Aspergillus niger, Candida albicans. В таблице 3 указаны результаты учета определения наличия/отсутствия роста в пробирках с серией разведений растворов образцов. Наименьшая концентрация с отсутствием роста является минимальной бактериостатической концентрацией образцов.

Таблица 3 – Определение минимальной бактериостатической концентрации в отношении культур

Концентрация (разведение) образца 100% 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:128 1:256 Aspergillus niger - - + + + + + + + Bacillus cereus - - + + + + + + + Candida albicans - - - + + + + + + Escherichia coli - - - - + + + + + Proteus vulgaris - - - - + + + + + Pseudomonas aeruginosa - - - - + + + + + Salmonella enterica - - - - + + + + + Staphylococcus aureus - - - - + + + + +

*Примечание: «+» – наличие роста микроорганизма, «-» – отсутствие роста микроорганизма

В таблице 4 указаны результаты учета определения наличия/отсутствия роста колоний после инкубации на чашках с питательной средой №1 ГРМ после пересева из пробирок с серией разведений образцов. Наименьшая концентрация с отсутствием роста является минимальной бактерицидной концентрацией образцов.

Таблица 4 – Определение минимальной бактерицидной концентрации в отношении культур

Концентрация (разведение) образца 100 % 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:128 1:256 Aspergillus niger - + + + + + + + + Bacillus cereus - + + + + + + + + Candida albicans - - + + + + + + + Escherichia coli - - - + + + + + + Proteus vulgaris - - - + + + + + + Pseudomonas aeruginosa - - - + + + + + + Salmonella enterica - - + + + + + + + Staphylococcus aureus - - - - + + + + +

*Примечание: «+» – наличие роста микроорганизма, «-» – отсутствие роста микроорганизма

Так, при 100% концентрации жидкий бальзам проявляет бактериостатическую и бактерицидную активности в отношении грамположительных бактерий Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, грамотрицательных бактерий Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella enterica и грибов Aspergillus niger, Candida albicans.

Предложенный бальзам упаковывают в стеклянные роликовые карандаши объемом 3-10 мл. Наносят тонким слоем на ладони, слегка втирают и вдыхают, при головной боли небольшое количество бальзама наносят на виски. Противопоказан при повышенной индивидуальной чувствительности к компонентам бальзама.

Таким образом, предложен состав жидкого бальзама, содержащий следующие компоненты с массовой долей, %: камфоры – 10,8; левоментола – 43,1; эфирного масла полыни однолетней – 4,7; касторового масла – 41,4. Он представляет собой светло-желтый, прозрачный, вязкий раствор с умеренным запахом ментола и эфирного масла. Полученный бальзам обладает высокой антирадикальной активностью, где показатель 50%-ингибирования свободных радикалов (IC₅₀) составляет 160,14 µл/мл. Кроме того, жидкий бальзам имеет широкий спектр антибактериальной активности: в отношении грамположительных бактерий Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, грамотрицательных бактерий Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella enterica и грибов Aspergillus niger, Candida albicans.

Изобретение относится к области фармацевтики и медицины, а именно к жидкому бальзаму для наружного применения, обладающему антирадикальной активностью, антибактериальной активностью в отношении грамположительных бактерий Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, грамотрицательных бактерий Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella enterica и активностью в отношении грибов Aspergillus niger, Candida albicans, содержащему компоненты в мас.%: камфора – 10,8; левоментол – 43,1; эфирное масло полыни однолетней – 4,7; касторовое масло – 41,4. Технический результат заключается в антибактериальой активности бальзама в отношении бактерий Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella enterica, активности бальзама в отношении грибов Aspergillus niger, Candida albicans, антирадикальной активности бальзама, местнораздражающем действии бальзама. 4 табл., 9 пр.

Жидкий бальзам для наружного применения, обладающий антирадикальной активностью, антибактериальной активностью в отношении грамположительных бактерий Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, грамотрицательных бактерий Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella enterica и активностью в отношении грибов Aspergillus niger, Candida albicans, содержащий компоненты в мас.%: камфора – 10,8; левоментол – 43,1; эфирное масло полыни однолетней – 4,7; касторовое масло – 41,4.