СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СРЕДСТВА ДЛЯ ВОССТАНОВЛЕНИЯ ФУНКЦИИ ПРЕДСТАТЕЛЬНОЙ ЖЕЛЕЗЫ Российский патент 2016 года по МПК A61K35/52 A61P13/08 

Изобретение относится к медицине, а именно к технологии получения биологически активных средств животного происхождения из предстательной железы забойных половозрелых быков и/или бычков и последующего использования при изготовлении лекарственных препаратов для лечения больных с нарушенной функцией предстательной железы.

Известен способ получения средства для восстановления функции предстательной железы (UA 64985 A, опубл. 2004.03.15), включающий измельчение размороженного сырья - ткани предстательной железы забитых быков и/или бычков, достигших половой зрелости. К полуфабрикату добавляют 3%-ный водный раствор уксусной кислоты и хлорид цилка в массовом количестве от 0,5 до 0,7 г/л в объемном соотношении 1:5, где 1 - объемное количество сырья, а 5 - объемное количество водного раствора уксусной кислоты. Из полученной смеси выделяют водорастворимые модифицированные компоненты клеток животной ткани посредством сепарации и центрифугирования с получением супернатанта. Супернатант концентрируют, очищают ультрафильтрацией, стерилизуют, лиофилизируют и расфасовывают.

Известен также способ получения вещества, восстанавливающего функцию предстательной железы (RU 1417244 C, опубл. 1994.06.30), путем экстракции из ткани предстательной железы убойных животных с последующим отделением, очисткой и лиофилизацией целевого продукта. Экстракцию проводят 5%-ным раствором уксусной кислоты в течение 24÷36 часов с добавлением 1.0÷1.5 г/л хлористого цинка. Осаждение целевого продукта проводят ацетоном в соотношении 5:1 при температуре 5÷7°C. Очистку проводят промыванием 10 объемами ацетона на 1 часть продукта с последующей фильтрацией полученного раствора. Согласно приведенному примеру реализации способа берут 5 кг замороженной предстательной железы баранов, измельчают на волчке и помещают в реактор с охлаждением и мешалкой. Сырье заливают раствором 5%-ной уксусной кислоты до pH 4,0, добавляют 1 г на 1 л хлористого цинка и включают реактор. Экстракцию проводят при 18°C в течение 48 часов при постоянном перемешивании. По окончании экстракции сырье сливают и центрифугируют 15 мин. Надосадочную жидкость декантируют. Добавляют 5 частей ацетона на 1 часть экстракта. При температуре -5°C перемешивают и формируют осадок в течение 20 часов, после чего перемешивают и фильтруют. Осадок, полученный на фильтре, обрабатывают ацетоном (10 объемов). Осадок в количестве 30 г высушивают, измельчают и растворяют в дистиллированной воде из расчета 0,2 кг осадка на 10 кг воды. В течение 2 часов при 18°C перемешивают и удаляют балластные белки фильтрованием. В отфильтрованном растворе устанавливают pH 4,5, стерильно фильтруют через пластины EKS. Разливают в флаконы и лиофилизируют. Получают в каждом флаконе по 10 мл порошка. Выход активного вещества составляет 12 г из 1 кг сырья.

Наиболее близким является известный способ получения средства, восстанавливающего функцию предстательной железы (RU 2413525 C2, опубл. 2011.03.10). Способ включает измельчение животной ткани предстательной железы забойных быков и/или бычков, достигших половой зрелости, и гомогенизацию полуфабриката. Измельченную ткань выдерживают в водной смеси 3% водного раствора уксусной кислоты и хлорида цинка (ZnCl₂). Компоненты клеток животной ткани экстрагируют из измельченной ткани в водную смесь посредством центрифугирования с получением супернатанта. Супернатант концентрируют и очищают путем ультрафильтрации. В раствор добавляют глицин и извлекают целевой продукт с использованием нанофильтрационных композиционных мембран. Целевой продукт сушат на установке распылительной сушки до получения порошка.

Этот известный способ обеспечивает недостаточно высокий выход биологически активного целевого продукта и, кроме того, технологически сложный в реализации вследствие применения ультрафильтрации с использованием нанофильтрационных композиционных мембран для извлечения целевого продукта.

Предлагаемый способ позволяет повысить выход биологически активного целевого продукта при одновременном технологическом упрощении получение средства для восстановления функции предстательной железы.

Указанный технический результат достигается тем, что способ получения средства для восстановления функции предстательной железы включает измельчение животной ткани предстательной железы забойных быков и/или бычков, достигших половой зрелости, выдерживание измельченной ткани в 3% водном растворе уксусной кислоты и хлористого цинка, экстракцию компонентов клеток животной ткани из измельченной ткани в водный раствор, извлечение целевого продукта из водного раствора и сушку целевого продукта до получения порошка. Измельченную ткань выдерживают в 3% водном растворе уксусной кислоты и хлористого цинка с pH от 3,3 до 3,8 в течение не менее 20 минут. Экстракцию ведут в течение не менее трех часов при периодическом перемешивании измельченной ткани. После экстракции в водный раствор добавляют ацетон от 2,0 до 2,5 л на 1 кг измельченной ткани. Из водного раствора удаляют балластные белки и жмых сепарированием. К отсепарированному экстракту добавляют ацетон в соотношении 3÷3,5 объема ацетона на один объем отсепарированного экстракта. Полученную водно-ацетоновую смесь перемешивают и отстаивают при температуре не выше +5°C в течение не менее 4 часов. Осветленную жидкость сливают и фильтруют с отделением сырца. Сырец сушат, растирают и просеивают.

PH водного раствора уксусной кислоты и хлористого цинка повышают до диапазона от 3,3 до 3,8 добавлением 20% раствора натрия гидроокиси.

PH водного раствора уксусной кислоты и хлористого цинка понижают до диапазона от 3,3 до 3,8 добавлением 33% раствора уксусной кислоты.

После слива осветленной жидкости в водно-ацетоновую смесь добавляют вторую порцию ацетона в объеме 0,9-1,2 объема отсепарированного экстракта. Полученную водно-ацетоновую смесь перемешивают и отстаивают при температуре не выше +5°C в течение не менее 4 часов. Осветленную жидкость сливают и фильтруют с отделением сырца.

Выдерживание измельченной ткани в 3% водном растворе уксусной кислоты и хлористого цинка с pH от 3,3 до 3,8 в течение не менее 20 минут, экстракция в течение не менее трех часов при периодическом перемешивании измельченной ткани, добавление ацетона в водный раствор после экстракции от 2,0 до 2,5 л на 1 кг измельченной ткани, удаление из водного раствора балластных белков и жмыха сепарированием, добавление к отсепарированному экстракту ацетона в соотношении 3÷3,5 объема ацетона на один объем отсепарированного экстракта, перемешивание и отстаивание полученной водно-ацетоновой смеси при температуре не выше +5°C в течение не менее 4 часов, слив и фильтрование осветленной жидкости с отделением сырца, сушка, растирание и просеивание сырца повышают полноту извлечения пептидов из ткани предстательной железы и выход биологически активного целевого продукта за счет увеличения степени диссоциации выделяемого продукта.

Добавлением ацетона в водный раствор после экстракции от 2,0 до 2,5 л на 1 кг измельченной ткани и добавлением ацетона к отсепарированному экстракту в соотношении 3÷3,5 объема ацетона на один объем отсепарированного экстракта повышают полноту улавливания наиболее активных фракций пептидов.

Полнота улавливания наиболее активных фракций пептидов дополнительно повышена за счет того, что после слива осветленной жидкости в водно-ацетоновую смесь добавляют вторую порцию ацетона в объеме 0,9-1,2 объема отсепарированного экстракта. Полученную водно-ацетоновую смесь перемешивают и отстаивают при температуре не выше +5°C в течение не менее 4 часов. Осветленную жидкость сливают и фильтруют с отделением сырца.

Примеры реализации способа получения средства для восстановления функции предстательной железы.

Пример 1

Измельчают 90 кг замороженной животной ткани предстательной железы бычков, достигших половой зрелости.

Измельченную ткань помещают в 450 л 2,9% водного раствора уксусной кислоты с добавлением хлористого цинка в количестве 0,46 кг.

При значении pH водного раствора менее 3,3 выводят pH в диапазон от 3,3 до 3,8 добавлением 20% раствора натрия гидроокиси.

При значении pH водного раствора более 3,8 выводят pH в диапазон от 3,3 до 3,8 добавлением 33% раствора уксусной кислоты.

Полученную смесь измельченной ткани и водного раствора уксусной кислоты с добавлением хлористого цинка выдерживают при температуре +19°C в течение 30 минут.

Экстракцию проводят в течение 45 часов при периодическом перемешивании измельченной ткани и водного раствора.

В водный раствор добавляют ацетон в количестве 200 л.

Из водного раствора удаляют балластные белки и жмых сепарированием до получения экстракта.

К отсепарированному экстракту добавляют ацетон в количестве 2130 л с получением водно-ацетоновой смеси.

Водно-ацетоновую смесь перемешивают в течение 1 часа и отстаивают в течение 4 часов при температуре не выше +5°C.

После отстаивания водно-ацетоновой смеси осветленную жидкость сливают.

К водно-ацетоновой смеси добавляют вторую порцию ацетона в количестве 630 л.

Водно-ацетоновую смесь после добавления второй порции ацетона отстаивают в течение 14 часов при температуре не выше +5°C.

Осветленную жидкость сливают.

Полученную осветленную жидкость фильтруют с отделением сырца, который сушат, растирают и просеивают.

В результате получают субстанцию Сампрост с массой 5,2 кг и содержанием пептидов 23,9%, являющуюся средством для восстановления функции предстательной железы.

Пример 2

Измельчают 150 кг замороженной животной ткани предстательной железы быков.

Измельченную ткань помещают в 750 л 3,0% водного раствора уксусной кислоты с добавлением хлористого цинка в количестве 0,77 кг.

При значении pH водного раствора менее 3,3 выводят pH в диапазон от 3,3 до 3,8 добавлением 20% раствора натрия гидроокиси.

При значении pH водного раствора более 3,8 выводят pH в диапазон от 3,3 до 3,8 добавлением 33% раствора уксусной кислоты.

Полученную смесь измельченной ткани и водного раствора уксусной кислоты с добавлением хлористого цинка выдерживают при температуре +19°C в течение 30 минут.

Экстракцию проводят в течение 42 часов при периодическом перемешивании измельченной ткани и водного раствора.

В водный раствор добавляют ацетон в количестве 350 л.

Из водного раствора удаляют балластные белки и жмых сепарированием до получения экстракта.

К отсепарированному экстракту добавляют ацетон в количестве 3500 л с получением водно-ацетоновой смеси.

Водно-ацетоновую смесь перемешивают в течение 1 часа и отстаивают в течение 5 часов при температуре не выше +5°C.

После отстаивания водно-ацетоновой смеси осветленную жидкость сливают.

К водно-ацетоновой смеси добавляют вторую порцию ацетона в количестве 1050 л.

Водно-ацетоновую смесь после добавления второй порции ацетона отстаивают в течение 12 часов при температуре не выше +5°C.

Осветленную жидкость сливают.

Полученную осветленную жидкость фильтруют с отделением сырца, который сушат, растирают и просеивают.

В результате получают субстанцию Сампрост с массой 8,5 кг и содержанием пептидов 27,2%, являющуюся средством для восстановления функции предстательной железы.

Операции способа получения средства для восстановления функции предстательной железы технологически простые и в совокупности обеспечивают повышение выхода биологически активного целевого продукта.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения средства для восстановления функции предстательной железы. Способ получения средства для восстановления функции предстательной железы, включающий измельчение животной ткани предстательной железы забойных быков и/или бычков, достигших половой зрелости, выдерживание в водном растворе уксусной кислоты и хлористого цинка, после экстракции в водный раствор добавляют ацетон, удаляют балластные белки и жмых сепарированием, добавляют ацетон, водно-ацетоновую смесь перемешивают и отстаивают, осветленную жидкость сливают и фильтруют с отделением сырца, сырец сушат, растирают и просеивают при определенных условиях. При использовании вышеуказанного способа повышается выход биологически активного целевого продукта при технологическом упрощении способа. 3 з.п. ф-лы, 2 пр.

1. Способ получения средства для восстановления функции предстательной железы, включающий измельчение животной ткани предстательной железы забойных быков и/или бычков, достигших половой зрелости, выдерживание измельченной ткани в 3%-ном водном растворе уксусной кислоты и хлористого цинка, экстракцию компонентов клеток животной ткани из измельченной ткани в водный раствор, извлечение целевого продукта из водного раствора и сушку целевого продукта до получения порошка, отличающийся тем, что измельченную ткань выдерживают в 3%-ном водном растворе уксусной кислоты и хлористого цинка с pH от 3,3 до 3,8 в течение не менее 20 минут, экстракцию ведут в течение не менее трех часов при периодическом перемешивании измельченной ткани, после экстракции в водный раствор добавляют ацетон от 2,0 до 2,5 л на 1 кг измельченной ткани, из водного раствора удаляют балластные белки и жмых сепарированием, к отсепарированному экстракту добавляют ацетон в соотношении 3÷3,5 объема ацетона на один объем отсепарированного экстракта, полученную водно-ацетоновую смесь перемешивают и отстаивают при температуре не выше +5°C в течение не менее 4 часов, осветленную жидкость сливают и фильтруют с отделением сырца, сырец сушат, растирают и просеивают.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что pH водного раствора уксусной кислоты и хлористого цинка повышают до диапазона от 3,3 до 3,8 добавлением 20%-ного раствора натрия гидроокиси.

3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что pH водного раствора уксусной кислоты и хлористого цинка понижают до диапазона от 3,3 до 3,8 добавлением 33%-ного раствора уксусной кислоты.

4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что после слива осветленной жидкости в водно-ацетоновую смесь добавляют вторую порцию ацетона в объеме 0,9-1,2 объема отсепарированного экстракта, полученную водно-ацетоновую смесь перемешивают и отстаивают при температуре не выше +5°C в течение не менее 4 часов, осветленную жидкость сливают и фильтруют с отделением сырца.