СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ СИНДРОМА АКТИВАЦИИ МАКРОФАГОВ У ПАЦИЕНТОВ С АКТИВНЫМ СИСТЕМНЫМ ЮВЕНИЛЬНЫМ ИДИОПАТИЧЕСКИМ АРТРИТОМ Российский патент 2016 года по МПК G01N33/49 G01N33/493 

Предлагаемое изобретение относится к детской ревматологии, иммунологии и гематологии и может применяться для ранней диагностики тяжелого жизнеугрожающего осложнения системного ювенильного идиопатического артрита (СЮИА) - синдрома активации макрофагов (САМ). Трудности диагностики САМ связаны со следующими факторами:

- неизвестная частота встречаемости,

- наличие субклинических форм,

- наличие пролонгированных («хронических») форм,

- схожесть клинических проявлений с сепсисом, а также не редкость - ассоциация с сепсисом.

Известны способы диагностики САМ у пациентов с СЮИА при помощи наборов диагностических критериев. Критерии HLH-2004 были разработаны для диагностики гемафагоцитирующего гистиоцитоза, так как САМ относится к группе вторичных гистиоцитарных нарушений (Henter JI et al, Pediatr Blood Cancer 2007; 48(2): 124-31). Данный набор критериев представлен 8 признаками: двумя клиническими и восьмью лабораторными. Для верификации патологического состояния необходимо иметь как минимум 5 любых критериев из 8 возможных.

Недостатком этого способа диагностики является невозможность диагностики САМ на ранних этапах, а также низкая чувствительность, не позволяющая диагностировать САМ у части пациентов вовремя. Критерии HLH-2004 ввиду сложности диагностических тестов является малоприменимыми в реальной клинической практике.

Ближайшим к заявляемому является способ диагностики САМ у пациентов с активным СЮИА на основе критериев, разработанных A. Ravelli (J Pediatr 2005; 146: 598-604). У пациента с СЮИА оценивают наличие следующих клинических, лабораторных и гистопатологического симптомов:

Клинические критерии

1. Дисфункция ЦНС (дезориентация, раздражительность, летаргия, головные боли, судороги, кома).

2. Геморрагический синдром (повышенная кровоточивость, пурпура, кровотечение со слизистых).

3. Гепатомегалия (≥3 см из-под ребра).

Лабораторные критерии

1. Снижение числа тромбоцитов периферической крови (Тр≤262*10⁹/л).

2. Повышение активности аспартатаминотрансферазы сыворотки крови (АСТ>59 Ед/л).

3. Снижение числа лейкоцитов периферической крови (≤4.0*10⁹/л).

4. Гипофибриногенемия (≤2.5 г/л).

Гистопатологический критерий

1. Доказательство гемофагоцитоза макрофагами в аспирате костного мозга.

Недостатками способа, выбранного в качестве прототипа, являются следующие:

1) Способ не предусматривает определения наиболее чувствительного показателя - уровня ферритина сыворотки крови, отражающего как наличие, так и степень выраженности синдрома активации макрофагов.

2) Способ-прототип не обладает достаточной чувствительностью и специфичностью в отношении ранней диагностики САМ, так как опирается на клинические симптомы, появляющиеся у пациента лишь в развернутой стадии заболевания.

Задачей данного исследования является обеспечение ранней диагностики синдрома активации макрофагов и повышение ее точности.

Согласно изобретению, технический результат поставленной задачи достигается тем, что в способе диагностики синдрома активации макрофагов у пациентов с активным системным ювенильным идиопатическим артритом, заключающемся в исследовании биохимических показателей крови и мочи, при наличии не менее трех значений следующих показателей: уменьшение числа тромбоцитов ≤211×10⁹/л, уменьшение числа лейкоцитов ≤9,9×10⁹/л, повышение ACT>59,7 Е/л, повышение ЛДГ>882 Е/л, снижение альбумина ≤29 г/л, повышение ферритина >400 мкг/л, снижение фибриногена ≤1,8 г/л и наличие протеинурии <1,0 г/24 часа, диагностируют синдром активации макрофагов.

Именно применение трех и более лабораторных критериев является наиболее достоверным, что подтверждается наивысшим значением диагностического отношения шансов для данной модели 2997.0 (95% ДИ: 57.2 - 156962.8).

В заявляемом способе используются простые и легковоспроизводимые лабораторные тесты. Наличие трех любых тестов из восьми предложенных позволяет диагностировать развитие раннего синдрома активации макрофагов со 100% чувствительностью и специфичностью.

Способ осуществляют следующим образом. У пациентов с активным СЮИА производят исследование следующих анализов:

1) клинический анализ крови,

2) биохимический анализ крови,

3) коагулограмма,

4) анализ мочи (при выявлении протеинурии дополнительно проводится исследование суточной потери белка с мочой).

Далее учитываются следующие показатели: количество тромбоцитов, лейкоцитов периферической крови, активность аспартатаминотрансферазы (ACT), лактатдегидрогеназы (ЛДГ), уровень альбумина, ферритина, фибриногена, а также наличие протеинурии в разовой и суточной порциях мочи. Для каждого из вышеперечисленных параметров нами было рассчитано диагностическое значение. Далее необходимо определить, соответствует ли параметр диагностическому значению. Диагностические значения исследуемых параметров представлены ниже.

1. Уменьшение числа тромбоцитов (≤211×10⁹/л).

2. Уменьшение числа лейкоцитов (≤9,9×10⁹/л).

3. Повышение АСТ (>59,7 Е/л).

4. Повышение ЛДГ (>882 Е/л).

5. Снижение альбумина (≤29 г/л).

6. Повышение ферритина (>400 мкг/л).

7. Снижение фибриногена (≤1,8 г/л).

8. Наличие протеинурии (<1,0 г/24 часа).

Затем производят подсчет, сколько из измеренных параметров соответствуют диагностическим значениям САМ. При наличии как минимум трех любых из вышеперечисленных диагностических значений следует диагностировать наличие САМ.

Из 58 пациентов с активным СЮИА заявляемым способом у 18 был диагностирован САМ в 100% случаев. Случаев ложноположительного и ложноотрицательного диагнозов не было, т.е. заявляемый способ диагностики обладает 100% чувствительностью и специфичностью.

Сравнение заявляемого способа и аналогов по чувствительности и специфичности, а также диагностической мощности, измеренной при помощи диагностического отношения шансов (ДОШ), показано в таблице.

Пример 1. Девочка К.А. 8 лет, с диагностированным активным СЮИА с момента поступления имела лихорадку, сыпь, артрит (3 активных сустава), гепатоспленомегалию, лимфаденопатию, гемоглобин 111 г/л, лейкоциты 5,2×10⁹/л, тромбоциты 364×10⁹%, СОЭ - 32 мм/час, С-реактивный белок 16,7 мг/л, АЛТ 252 Е/л, ACT 201 Е/л, ферритин 735 мкг/л, триглицериды 1,68 ммоль/л, протромбиновый индекс 102%, фибриноген 2,8 г/л, общий белок 70 г/л, альбумин 31,2 г/л, натрий - 140 ммоль/л. На основании набора исследований, выполненного в стационаре, девочка имеет 3 критерия HLH-2004 из 7 доступных анализу (восьмой не был выполнен из-за отсутствия технологической возможности) и 1 критерию из 7 согласно критериям А. Ravelli (2005). Таким образом диагностировать САМ на основании имеющихся наборов критериев не представляется возможным. При применении способа, предложенного нами, у девочки выявлено 3 (выделены жирным шрифтом) из 8 критериев, что позволило диагностировать САМ.

Пример 2. Девочка И.А. 5 лет 4 мес, с активным системным артритом: лихорадка, артрит, гепатоспленомегалия, лимфаденопатия, поражение сердечно-сосудистой системы (перикардит), гемоглобин 107 г/л, лейкоциты 6,1×10⁹/л, тромбоциты 391×10⁹%, СОЭ - 35 мм/ч, С-реактивный белок 152,4 мг/л, АЛТ 37,2 Е/л, ACT 24,1 Е/л, гамма-глутаминтранспептидаза 26 Е/л, щелочная фосфатаза 176 Е/л, ЛДГ 451 Е/л, ферритин 1416 мкг/л, триглицериды 2,53 ммоль/л, общий белок 78 г/л, альбумин 24,0 г/л, натрий - 139 ммоль/л, протромбиновый индекс и фибриноген по месту жительства измерены не были. На основании набора исследований, выполненного в стационаре по месту жительства, девочка имела 3 критерия HLH-2004 из 7 доступных анализу (восьмой также не был выполнен из-за отсутствия технологической возможности) и 1 критерий из 7 согласно критериям А. Ravelli (2005). Таким образом, диагностировать САМ на основании имеющихся наборов критериев не представляется возможным. При применении способа, предложенного нами, у девочки ретроспективно можно было диагностировать САМ на основании 3 (выделены жирным шрифтом) из 7 доступных анализу критериев, однако по месту жительства диагноз установлен не был. В последующем при поступлении в наш стационар девочка развернула полную клинику САМ, что подтверждает правильность нашего способа диагностики.

Пример 3. Девочка В.У. 3 лет, была госпитализирована в отделение реанимации и интенсивной терапии одной из больниц г. Санкт-Петербурга с клиникой, включавшей в себя острую дыхательную недостаточность в виде респираторного дистресс синдрома, требовавшего проведения искусственной вентиляции легких, экссудативного перикардита, с развитием клиники тампонады перикарды, требовавшей проведения экстренного перикардиоцентеза. При лабораторном исследовании: гемоглобин 85 г/л, лейкоциты 4,2×10⁹/л, тромбоциты 105×10⁹/л, СОЭ - 44 мм/ч, С-реактивный белок 152 мг/л, АЛТ 34,2 Е/л, ACT 21,4 Е/л, ЛДГ 342 Е/л, ферритин 1258 мкг/л, триглицериды 2,14 ммоль/л, протромбиновый индекс 82%, фибриноген 6,3 г/л, общий белок 69,9 г/л, альбумин 32,0 г/л, натрий -132 ммоль/л. На основании набора исследований, выполненного в стационаре, девочка имела 2 критерия HLH-2004 из 7 доступных анализу (восьмой не был выполнен из-за отсутствия технологической возможности) и 1 критерий из 7 согласно критериям A. Ravelli (2005). Таким образом, диагностировать САМ на основании критериев HLH-2004 и критериев А. Ravelli не представлялось возможным, в связи с чем пациентка не получала адекватной этиопатогенетической терапии. При применении способа, предложенного нами, у девочки имелось 3 (выделены жирным) из 8 критериев, что позволило диагностировать САМ и назначить эффективную терапию.

Применение предлагаемого способа диагностики позволяет рано и весьма точно диагностировать наличие САМ у пациентов с активным СЮИА, что позволяет правильно и своевременно лечить данное осложнение, а также правильно скорректировать терапию основного заболевания, так как часть лекарственных препаратов может поддерживать активное течение САМ. Раннее купирование САМ позволяет пересмотреть терапию основного заболевания (СЮИА) и сделать ее более эффективной и безопасной.

Ранняя и точная диагностика САМ у пациентов с активным СЮИА имеет принципиальное значение, так как САМ является жизнеугрожающим состоянием. Ранняя диагностика позволяет значительно повысить выживаемость пациентов, избегать применения препаратов, способных поддерживать или усугублять течение данного синдрома. Терапия САМ, начатая своевременно, позволяет уменьшить объем лекарственной терапии, в первую очередь дозы, и продолжительность кортикостероидной терапии, являющейся основополагающей в терапии САМ. Также ранняя терапия позволяет уменьшить длительность пребывания в стационаре и сократить объем финансовых затрат на лечение, уменьшить риск развития нозокомиальных инфекций у пациентов с активным СЮИА, так как они получают иммуносупрессивную терапию. Возможность применения меньших кумулятивных доз кортикостероидов позволяет уменьшить частоту и степень выраженности таких осложнений гормонотерапии, как стероидный диабет, стероидный остеопороз, патологические переломы, артериальная гипертензия, задержка линейного роста, ожирение, гиперхолестеринемия, риск развития атеросклероза.

Способ относится к детской ревматологии, иммунологии и гематологии и может применяться для ранней диагностики тяжелого жизнеугрожающего осложнения системного ювенильного идиопатического артрита (СЮИА) - синдрома активации макрофагов (САМ). Он заключается в исследовании биохимических показателей крови и мочи. При наличии не менее трех значений следующих показателей: уменьшение числа тромбоцитов ≤211×109/л, уменьшение числа лейкоцитов ≤9,9×109/л, повышение АСТ>59,7 Е/л, повышение ЛДГ>882 Е/л, снижение альбумина ≤29 г/л, повышение ферритина >400 мкг/л, снижение фибриногена ≤1,8 г/л и наличие протеинурии <1,0 г/24 часа, диагностируют синдром активации макрофагов. Применение предлагаемого способа диагностики позволяет рано и весьма точно диагностировать развитие раннего синдрома активации макрофагов со 100% чувствительностью и специфичностью. 3 пр.

Способ диагностики синдрома активации макрофагов у пациентов с активным системным ювенильным идиопатическим артритом, заключающийся в исследовании биохимических показателей крови и мочи, отличающийся тем, что при наличии не менее трех значений следующих показателей: уменьшение числа тромбоцитов ≤211×10⁹/л, уменьшение числа лейкоцитов ≤9,9×10⁹/л, повышение АСТ>59,7 Е/л, повышение ЛДГ>882 Е/л, снижение альбумина ≤29 г/л, повышение ферритина >400 мкг/л, снижение фибриногена ≤1,8 г/л и наличие протеинурии <1,0 г/24 часа, диагностируют синдром активации макрофагов.