СПОСОБ ПРИМЕНЕНИЯ КОМПОЗИЦИОННОГО ГЕМОПРЕПАРАТА ЖИВОТНЫМ Российский патент 2016 года по МПК A61K35/14 A61K35/20 A61K35/745 A61K35/747 A61P1/00 A61P43/00 

Изобретение относится к ветеринарии и может быть использован для лечения и профилактики дисбиозов животных.

Наиболее близким прототипом предлагаемого препарата является «Способ предварительной обработки крови», патент РФ №2265361, опубликованный 10.12.2005, бюл. №34. Авторы Данилова Т.Е., Бубеев А.Т., Тарнуева Н.М., Цыренов В.Ж. Способ включает смешивание изъятой крови убойных животных с молочной сывороткой в качестве антикоагулянта и консерванта, полученной путем фракционирования сквашенного при 37-43°C чистыми культурами L. acidophilus обезжиренного молока до достижения в нем титруемой кислотности 260-270°Т. Кровь смешивают с молочной сывороткой в соотношении 1,5:1. Способ позволяет удлинить сроки хранения обработанной крови, исключить антикоагулянты химической природы, совместить процессы антикоагуляции и консервирования, повысить антимикробную активность обработанной крови.

Целью нашего изобретения является приготовление композиционного гемопрепарата на основе цитрированной крови убойных животных, смешанной с молочной сывороткой, сквашенной при 37°C чистыми культурами в дозе Lactobacillus plantarum 2×10⁹ КОЕ, Lactobacillus fermentum 2×10⁹ КОЕ и Bifidobacterium bifidum 5×10⁸ КОЕ. При этом кровь смешивают с молочной сывороткой в соотношении 1,5:1.

Поставленная цель достигается тем, что при изготовлении композиционного средства использовалась кровь крупного рогатого скота, молочная сыворотка и культуры молочно- кислых бактерий Lactobacillus plantarum и Lactobacillus fermentum, Bifidobacterium bifidum стандартизированных биопрепаратов, реализуемых через аптечную сеть.

Приготовление композиционного гемопрепарата включает смешивание изъятой крови убойного животного крупного рогатого скота с молочной сывороткой, сквашенной при 37°C чистыми культурами в дозе Lactobacillus plantarum 2×10⁹ КОЕ, Lactobacillus fermentum 2×10⁹ КОЕ и Bifidobacterium bifidum 5×10 КОЕ. Кровь смешивают с молочной сывороткой в соотношении 1,5:1. В качестве антикоагулянта и консерванта крови использовали цитрат натрия в количестве 3,8 г на 1 л крови. В 1 мл композиционного гемопрепарата содержится лактобактерий 4×10⁹ кл/мл культуры, бифидобактерий 5×10⁹ кл/мл культуры. В процессе хранения количество клеток лактобактерий снижается до 1,1×10⁹ кл/мл культуры, бифидобактерий до 1,0×10⁹ кл/мл культуры. В таблице 1 приведены данные о составе композиционного гемопрепарата в различных соотношениях и о содержимом кишечной микрофлоры опытных животных в 1 г фекалий.

Данные таблицы 1 показывают, что самым оптимальным соотношением крови и сыворотки является соотношение 1,5:1, при котором полезная микрофлора кишечника животных достигает максимального значения, а именно количество бифидобактерий у белых мышей составляет (3,7±0,30)×10⁹, у кроликов (3,3±0,15)×10⁹, у собак (7,3±0,5)×10⁹, у ячат (4,1±1,23)×10⁹, количество лактобактерий у белых мышей составляет (3,2±0,28)×10⁸, у кроликов (2,3±0,62)×10⁸, у собак (292,57±18,8)×10⁹, у ячат (2,6±0,16)×10⁸, условно-патогенная микрофлора кишечника находилась в пределах нормы, так у белых мышей составляет (3,5±0,15)×10⁶, у кроликов (2,7±0,86)×10⁶, у собак (57,0±0,30)×10⁶, у ячат (4,6±0,37)×10⁶. При увеличении количества крови (2,0:1) или ее уменьшении (1:1) данные по количественной характеристике выделенных микроорганизмов кишечной микрофлоры животных не соответствуют норме.

В таблице показана антимикробная активность композиционного гемопрепарата в соотношении 1,5:1, хранившейся при 0÷6°C в течение 7 суток.

Антимикробную активность композиционного гемопрепарата оценивали по отношению к следующим микроорганизмам: В. subtilis, St. aureus, Е. coli, В cereus, Salmonella, E. rhysiopathiae методом диффузии в агар с измерением зоны подавления тест-культуры.

Как видно из таблицы 2, чувствительными культурами к композиционному гемопрепарату оказались Salmonella typhimurium - 19 мм, Е. coli - 18 мм, St. aureus - 17 мм, В. subtilis - 20 мм, В. cereus - 19 мм, Е. rhysiopathiae - 14 мм.

Представляемый композиционный гемопрепарат отличается разнообразием состава молочнокислых бактерий, а именно Lactobacillus plantarum и Lactobacillus fermentum, Bifidobacterium bifidum, которые играют основную регулирующую роль в микрофлоре желудочно-кишечного тракта животных и создают оптимальные условия для активного развития микробиологического процесса, влияющего на резистентность и обмен веществ организма животных, а также содержащие в крови биогенные стимуляторы крови, повышающие ферментативную и гормональную активность организма животных.

Предлагаемый композиционный гемопрепарат характеризуется конкретными примерами.

Пример 1. Определение безвредности композиционного гемопрепарата проводили на белых мышах в контролируемых условиях вивария ФГОУ ВПО «Бурятская государственная сельскохозяйственная академия им. В.Р.Филиппова». Опыт был проведен в течение 15 дней на 10 белых мышах со средней массой тела 22,8±1,68 г, разбитых на две группы по 5 особей по принципу парных аналогов. Белые мыши первой группы были контрольными, 2-й опытной группы получали композиционный гемопрепарат пероральным путем в объеме 1 мл на 20 г массы тела животного 1 раз в сутки в течение 15 дней. Взвешивание проводили до и после применения данного препарата.

Применение композиционного гемопрепарата белым мышам опытной группы привело к положительным изменениям кишечной микрофлоры, а именно к значительному увеличению бифидобактерий с (4,3±0,62) × 10 до (3,7±0,30) × 10⁹ КОЕ, лактобактерий с (3,2±0,46) × 10⁶ до (3,2±0,28) 10⁸, уменьшению количества энтеробактерий с (5,5±0,67) × 10⁶ до (3,5±0,15) 10⁶, в контрольной группе белых мышей в 1 г фекалий отметилось незначительное уменьшение бифидобактерий с (3,9±0,62) × 10 до (2,4±0,35) 10⁷ КОЕ, лактобактерий с (2,9±1,66) × 10⁶ до (2,6±0,90) 10⁷, увеличению лактобактерий с (2,5±1,19) × 10⁶ до (3,2±0,74) 10⁶. Прирост живой массы белых мышей на 15-й день опыта составил в опытной группе 11,4 г в среднем на животное, в контроле 1,6 г, т.е. в опытной на 50% больше.

Пример 2. Исследования по применению композиционного гемопрепарата проводились в виварии ФГОУ ВПО « Бурятская государственная сельскохозяйственная академия им. В.Р.Филиппова». Было сформировано две группы кроликов породы « Великан» по 5 особей в возрасте 6-7 месяцев со средней массой тела 1560±178,25 г. Содержание и уход за кроликами осуществляли с соблюдением зоотехнических норм и правил. Животным опытной группы в течение 21 дня, один раза в день задавали с кормом полученное средство в дозе 2 мл/кг массы тела.

Применение композиционного гемопрепарата кроликам опытной группы привело к значительному увеличению в 1 г фекалий бифидобактерий с (3,5±1,0) × 10⁶ до (3,3±0,15) × 10⁹ КОЕ, лактобактерий с (2,4±0,22) × 10⁶ до (2,3±0,62) 10⁸, уменьшению энтеробактерий с (3,9±0,48) × 10⁶ до (2,7±0,86) 10⁶ КОЕ, в контрольной группе кроликов в кишечной микрофлоре незначительно отметилось увеличение бифидобактерий с (3,2±1,52) × 10⁶ до (2,7±0,54) 10⁷ КОЕ, лактобактерий с (2,7±0,74) × 10⁶ до (2,1±0,69) 10⁶, увеличению энтеробактерий с (3±0,53) × 10⁶ до (2,7±0,50) 10⁷ КОЕ. Прирост живой массы кроликов на 21-й день опыта составил в опытной группе 350 г в среднем на животное, в контроле 154 г, т.е. в опытной на 22,4% больше.

Пример 3. Исследования по изучению эффективности композиционного гемопрепарата на собаках проводились в условиях питомника ведомственной охраны по ВСЖД города Улан-Удэ на собаках породы кавказской овчарки, САО (среднеазиатской) овчарки, немецкой овчарки. Содержание и уход за собаками осуществляли с соблюдением всех норм и правил. Опыт был проведен на 12 голов собак в течение 21 дня. Было сформировано 2 группы животных по 6 собак - контрольные и опытные. Опытной группе животных в течение 21 дня один раз в день задавали с кормом указанное средство в дозе 2 мл/кг массы тела. Взвешивание проводили до и после применения композиционного гемопрепарата.

Применение композиционного гемопрепарата собакам опытной группы привело к значительному увеличению в 1 г кала бифидобактерий с (4,05±0,2) × 10⁹ до (7,3±0,5) × 10⁹, лактобактерий (45,82±4,5) × 10⁹ до (292,57±18,8) × 10⁹ и уменьшению условно патогенных микроорганизмов с (31,71±2,69) × 10⁸ до (57,0±0,30) × 10⁶. В контрольной группе собак в содержимом 1 г фекалий незначительно отмечалось увеличение бифидобактерий с (3,05±0,68) × 10⁹ до (4,6±10,74) × 10⁹, уменьшилось количество лактобактерий с (4,14±0,53) × 10⁸ до (4,11±34,4) × 10⁸, количество условно патогенных контрольной группы незначительно уменьшилось с (0,46±0,03) × 10⁶ до (0,21±0,01) × 10⁶. Прирост живой массы собак опытной группы за время опыта увеличился в среднем на 6 кг., в контрольной на 2 кг, т.е. в опытной на 33,3%.

Пример 4. Исследования по применению композиционного гемопрепарата проводились на телятах яка (ячата) в возрасте 6 месяцев со средней живой массой тела 78,7 ± 5,87 в Еравнинском районе в ЗАО « Домна». Для опыта было сформировано две группы ячат по 5 голов - опытная и контрольная. Композиционный гемопрепарат выпаивали телятам ежедневно в течение 21 дня в дозе 2 мл/кг массы тела.

Применение данного средства ячатам опытной группы привело к значительному увеличению в кишечном содержимом бифидобактерий с (10,1±1,28) × 10⁶ до (4,1±1,23) × 10⁹ КОЕ, лактобактерий с (17,5±0,75) × 10⁷ до (2,6±0,16) 10⁸, уменьшению энтеробактерий с (5,7±0,37) × 10⁶ до (4,6±0,37) 10⁶ КОЕ, в контрольной группе ячат в микрофлоре кишечника отметилось незначительное уменьшение бифидобактерий с (3,6±0,61) × 10⁶ до (2,5±1,21) 10⁶ КОЕ, незначительное увеличение лактобактерий с (1,9±0,60) × 10⁶ до (4,2±0,22) 10⁶, значительному увеличению энтеробактерий с (6,0±0,33) × 10⁶ до (4,7±0,57) 10⁷ КОЕ, Прирост живой массы телят яка на 21-й день опыта составил в опытной группе на 18,8 г в среднем на животное, в контроле на 14,0 г, т.е. в опытной на 23,6% больше.

Таким образом, предлагаемый композиционный гемопрепарат по сравнению с известным позволил модифицировать приготовление композиционного гемопрепарата на основе крови, молочной сыворотки и молочно-кислых бактерий, а именно Lactobacillus plantarum и Lactobacillus fermentum, Bifidobacterium bifidum. Использовать композиционный гемопрепарат в кормлении животных, что позволило создать наиболее благоприятный баланс желудочно-кишечной микрофлоры, ответственной за увеличение представителей индигенной микрофлоры кишечника.

Изобретение относится к ветеринарии и предназначено для лечения и профилактики дисбиозов животных. Способ включает приготовление препарата путем смешивания изъятой цитрированной крови убойного животного крупного рогатого скота с молочной сывороткой, сквашенной при 37°C чистыми культурами в дозе Lactobacillus plantarum 2×10⁹ КОЕ, Lactobacillus fermentum 2×10⁹ КОЕ и Bifidobacterium bifidum 5×10⁸ КОЕ. Кровь смешивают с молочной сывороткой в соотношении 1,5:1. Заявленный способ обеспечивает увеличение представителей полезной микрофлоры, а именно бифидобактерий и лактобактерий, улучшает обмен веществ, стимулирует увеличение массы тела животного и эффективно для лечения и профилактики дисбиозов животных . 2 табл., 4 пр.

Препарат для лечения и профилактики дисбиозов животных, отличающийся тем, что для приготовления данного композиционного гемопрепарата смешивают изъятую цитрированную кровь убойного животного крупного рогатого скота с молочной сывороткой, сквашенной при 37°C чистыми культурами в дозе Lactobacillus plantarum 2×10⁹ КОЕ, Lactobacillus fermentum 2×10⁹ КОЕ и Bifidobacterium bifidum 5×10⁸ КОЕ, при этом кровь смешивают с молочной сывороткой в соотношении 1,5:1.