СПОСОБ ПЕРСОНАЛИЗИРОВАННОГО НАЗНАЧЕНИЯ НЕОАДЪЮВАНТНОЙ ХИМИОТЕРАПИИ БОЛЬНЫМ ЛЮМИНАЛЬНЫМ В РАКОМ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ Российский патент 2016 года по МПК G01N33/50 A61B10/02 A61K31/337 A61K31/513 A61K31/573 A61K31/675 A61K31/704 A61K31/7068 A61K9/08 A61P35/00 

Изобретение относится к медицине, конкретно, к онкологии и может быть использовано для персонализированного назначения неоадъювантной химиотерапии больным с люминальным В раком молочной железы II-III стадий.

Рак молочной железы (РМЖ) уже на протяжении нескольких лет занимает лидирующие позиции по показателям заболеваемости и смертности среди женского населения как в мире, так и в России [Ach R.A., Floore A., Curry В. Et al. 2007; Ряженов В.В., Горохова С.Г. 2011]. Химиотерапия является важным этапом лечения этого заболевания. Применение химиотерапевтических препаратов в предоперационном периоде при первично-операбельном раке молочной железы продиктовано, во-первых, уменьшением объема первичной опухоли для увеличения возможности выполнения органосохранных операций. Во-вторых, определением чувствительности первичной опухоли к проводимой химиотерапии in vivo, что позволяет по результатам оценки эффективности адекватно планировать адъювантное лечение. В-третьих, улучшением отдаленных результатов лечения, т.к. достижение полной морфологической регрессии является благоприятным прогностическим фактором для пациентов, получавших НАХТ [рекомендации RUSSCO 2013; S. Karger, AG. Bazel, et al. 2011].

Однако, далеко не всегда предоперационная химиотерапия оказывается эффективной. В качестве одной из наиболее значимых причин неэффективности химиотерапиитерапии злокачественных новообразований рассматривается множественная лекарственная устойчивость (МЛУ) опухолевых клеток к химиотерапевтическим препаратам. Наиболее часто МЛУ связывают с повышением экспрессии энергозависимых АВС-транспортеров (ATP-Binding Cassette), которые осуществляют выброс цитостатических препаратов из опухолевых клеток против градиента концентрации с затратой энергии АТФ. Семейство АВС-транспортеров (ATP-Binding Cassette), насчитывает 50 генов и главными подсемействами являются АВСВ, АВСС и ABCG. По данным литературы 75-85% случаев низкой эффективности химиотерапии при РМЖ обусловлено развитием МЛУ клеток опухоли [O'Driscoll L., Clynes М., 2006.; Szakacs G., Paterson J.K., Ludwig J.A., Booth-Genthe C, et al. 2006]. Исследования касаемые связи экспрессии генов МЛУ с химиорезистентностью опухоли и выживаемостью считаются весьма перспективными.

В последнее время в литературе появились данные о том, что наличие абераций числа копий ДНК (CNA - copy number aberration) в регионах хромосом не являющихся генами МЛУ, также может быть ассоциировано с неэффективностью системной химиотерапии [Wonshik Han, Jung Hoon Woo, Yoon Kyng Jeon, et al. 2011; Liedtke C, Hatzis C, Symmans WF, et al. 2009]. При этом важным фактором является не только наличие мутаций в конкретных регионах хромосом, но и общее количество цитобендов с CNA. Известно о связи повышенного уровня CNA с резистентностью к таксанам [McClelland, et all, 2009].

Установление факта устойчивости и чувствительности к конкретным химиотерпевтическим препаратам является важнейшим аспектом персонализации лечения. С этой целью в опухолевой ткани возможно определение маркеров монорезистентности. В настоящее время выбор схемы НАХТ при люминальном В РМЖ, согласно мнению экспертов St. Gallen, осуществляется в пользу схем, включающих таксаны и антрациклины, без определения чувствительности опухоли к ним. Чувствительность новообразований к определенным препаратам в заметной степени коррелирует с экспрессионными характеристиками некоторых молекул (ТОР2А, TUBB3, TYMS и ряда других), большая часть из которых является мишенями действия химиопрепаратов. С этих позиций, предварительная оценка уровня экспрессии этих генов-мишеней поможет в выборе химиопрепаратов для лечения. Тем не менее, определение экспрессии генов монорезистентности в опухолевой ткани для персонализации лечения широко в практике не применяется.

Наиболее близким к предлагаемому является способ, выбранный в качестве прототипа, который заключается в назначении химиотерапии при раке молочной железы на основании деления опухоли на молекулярные подтипы. РМЖ считается гетерогенным заболеванием. Согласно последним рекомендациям ESMO (European Society for Medical Oncology), выделяют 5 биологических подтипа РМЖ (люминальный А, люминальный В [HER2 отрицательный], люминальный В [HER2 положительный], HER2 положительный, триждынегативный). На основании молекулярных характеристик опухоли решается вопрос о тактике лечения. Химиотерапия считается целесообразной при HER2 положительном, тройном негативном РМЖ и люминальном В подтипе. Цитостатическими препаратами, рекомендуемыми в качестве «золотого стандарта» при первично-операбельных опухолях молочной железы, являются антрациклины и таксаны. [рекомендации ESMO 2014]. Указаны химиотерапевтические препараты предпочтительные для лечения РМЖ без учета уровня маркеров чувствительности к используемым в клинической практике цитостатикам, нет рекомендаций по выбору конкретной схемы НАХТ. В результате существенным недостатком способа является низкая эффективность НАХТ, что особенно значимо для люминальном В РМЖ.

Новый технический результат - повышение эффективности способа, за счет индивидуализации назначения НАХТ с учетом определенных маркеров чувствительности к химиотерапии и индивидуального подбора схемы.

Для достижения нового технического результата в способе персонализированного лечения больных с люминальным В подтипом рака молочной железы II-III стадий, включающий определение целесообразности проведения НАХТ на основании наличия в опухолевой ткани молекулярно-генетических маркеров эффективности НАХТ и в случае ее назначения индивидуальный подбор схемы основанный на молекулярно-генетических характеристиках опухоли, причем до начала лечения осуществляют забор биопсийного материала опухоли, проводят микрочиповое исследование ДНК определяют маркеры сопряженные с эффективностью НАХТ: делецию локусов генов МЛУ: ABCB1-7q21.1, АВСВ3-6р21.32, АВСС1-16р13.1, ABCG2-4q22, MVP-16p11.2; делецию 18p11.21 региона; делецию 11q22.1-23.3 региона; амплификацию 1q24.1-43 региона и пациентам, в опухолевой ткани которых не обнаружено ни одного из указанных маркеров, начинают лечение с хирургического вмешательства в объеме радикальной мастэктомии или органосохраняющей операции, пациентам у которых обнаружен хотя бы 1 из указанных маркеров лечение начинают с курсов НАХТ, для выбора схемы которой дополнительно к результатам микрочипового исследования определяют уровень экспрессии генов монорезистентности: топоизомеразы 2а (ТОР2а), тимидилатсинтетазы (TYMS) для этого из опухолевой ткани, полученной при биопсии, выделяют тотальную РНК, определяют уровень экспрессии генов: ТОР2а и TYMS при помощи количественной ПЦР в режиме реального времени, и при наличии амплификации гена Тор2а и/или уровене экспрессии Тор2а>4 назначают схемы НАХТ с включением антрациклинов, при этом, если уровень экспрессии TYMS>2, то назначают схему САХ, если уровень экспрессии TYMS<2, то - схему FAC, при отсутствии амплификации Тор2а и уровне экспрессии Тор2а<4 назначают таксаны в монорежиме, причем, схема FAC включает введение, внутривенно в 1-й день пациентам фторурацила в дозе 500 мг/м²; доксорубицина в дозе 50 мг/м²; циклофосфамида в дозе 500 мг/м², для проведения схемы САХ пациентам вводят циклофосфамид в дозе 100 мг/м², внутримышечно в течение 14 дней; доксорубицин, 30 мг/м² внутривенно в 1-й и 8-й дни; капецитабин, 2000 мг/м²/сут внутрь на два приема в 1-14-й дни, таксаны в монорежиме проводятся по схеме доцетаксел в дозе 100 мг/м²; внутривенно в 1-й день, с премедикацией дексаметазоном, всего проводят 2-6 курсов НАХТ в зависимости от переносимости и выраженности эффекта. Эффективность неоадъювантной химиотерапии оценивают через 21 день после введения цитостатиков по шкалам RECIST и ВОЗ на основании данных УЗИ и маммографии. Выраженность побочных реакций и осложнений оценивают по шкале CTC-NCIC. После курсов НАХТ проводят хирургическое лечение в объеме радикальной мастэктомии или органосохраняющей операции.

Изобретение соответствует критерию «новизна», т.к. при лечении люминального В рака молочной железы не использовался персонализированный подход к назначению НАХТ, основанный на определении молекулярно-генетических особенностей опухоли таких как описанные выше хромосомные аберрации и уровень экспрессии генов монорезистентности.

Изобретение соответствует критерию «промышленно применимо», т.к. оно использовано в клинической практике для лечения больных люминальным В раком молочной железы II-III стадии.

Способ осуществляют следующим образом:

На первом этапе до начала лечения проводят забор биопсийного материала опухоли с помощью пистолетной биопсии под контролем УЗИ. Для изучения ДНК и РНК образцы опухолевой ткани помещают в консервирующий раствор RNALater (Ambion, USA) выдерживают сутки при 4°C и далее сохраняют при температуре -80°C. Выделяют ДНК и проводят микрочиповое исследование. ДНК из опухолевой ткани биопсийных образцов до лечения с помощью набора QIAamp DNA mini Kit (Qiagen, Germany). Микрочиповое исследование выполняют на матрице высокой плотности фирмы Affymetrix (USA) CytoScan™ HD Array. На основании результатов микроматричного исследования определяют маркеры эффективности НАХТ. Пациентам в опухолевой ткани которых по результатам микроматричного исследования ДНК не обнаружено ни одного маркера ассоциированного с эффективностью химиотерапии (делеция локусов генов МЛУ (ABCB1-7q21.1, АВСВ3-6р21.32, АВСС1-16р13.1, ABCG2-4q22, MVP-16p11.2); делеция 18р11.21 региона; делеция 11q22.1-23.3 региона; амплификация 1q24.1-43 региона) начинают лечение с хирургического этапа в объеме радикальной мастэктомии или органосохраняющей операции. Пациентам у которых обнаруживают хотя бы 1 из изучаемых маркеров эффективности химиотерапии (делеция локусов генов МЛУ (АВСВ1-7q21.1, АВСВ3-6р21.32, АВСС1-16р13.1, ABCG2-4q22, MVP-16p11.2); делеция 18p11.21 региона; делеция 11q22.1-23.3 региона; амплификация 1q24.1-43 региона) начинают лечение с НАХТ.

Для выбора схемы НАХТ дополнительно к результатам микрочипового исследования из опухолевой ткани выделяют РНК и определяют уровень экспрессии генов монорезистентности методом количественной ПЦР. Тотальную РНК выделяют из биопсийных образцов взятых до лечения с помощью набора Plus RNeasy mini kit (Qiagen, Germany). Уровень экспрессии генов монорезистентности: ТОР2а, TYMS оценивают при помощи количественной ПЦР в режиме реального времени (qPCR) по технологии TaqMan. Выбор схемы осуществляют, исходя из результатов микроматричного исследования ДНК и уровня экспрессии генов монорезистентности. При амплификации Тор2а и/или уровене экспрессии Тор2а>4 одновременно с уровенем экспрессии TYMS>2, назначают схему САХ (циклофосфамид, 100 мг/м², внутримышечно в течении 14 дней; доксорубицин, 30 мг/м2 внутривенно в 1-й и 8-й дни; капецитабин, 2000 мг/м²/сут внутрь на два приема в 1-14-й дни)назначают схемы НАХТ с включением антрациклинов. При амплификации Тор2а и/или уровене экспрессии Тор2а>4 одновременно с уровенем экспрессии TYMS<2 - схему FAC (фторурацил, 500 мг/м²; доксорубицин, 50 мг/м²; циклофосфамид, 500 мг/м²; внутривенно в 1-й день). При отсутствии амплификации Тор2а и уровене экспрессии Тор2а<4 назначают таксаны в монорежиме (доцетаксел, 100 мг/м²; внутривенно в 1-й день, с премедикацией дексаметазоном).

На третьем этапе, после определения целесообразности проведения НАХТ и выбора схемы, пациентам проводят НАХТ по схемам:

- FAC (фторурацил, 500 мг/м²; доксорубицин, 50 мг/м²; циклофосфамид, 500 мг/м²; внутривенно в 1-й день);

- САХ (циклофосфамид, 100 мг/м², внутримышечно в течении 14 дней; доксорубицин, 30 мг/м2 внутривенно в 1-й и 8-й дни; капецитабин, 2000 мг/м²/сут внутрь на два приема в 1-14-й дни), или таксаны в монорежиме (доцетаксел, 100 мг/м²; внутривенно в 1-й день, с премедикацией дексаметазоном).

Всего проводят 2-6 курсов НАХТ в зависимости от переносимости и выраженности эффекта. Эффективность неоадъювантной химиотерапии оценивают через 21 день после введения цитостатиков по шкалам RECIST и ВОЗ на основании данных УЗИ и маммографии. Выраженность побочных реакций и осложнений оценивают по шкале СТС-NCIC.

На четвертом этапе пациентам после курсов НАХТ проводят хирургическое лечение в объеме радикальной мастэктомии или органосохраняющей операции.

Рак молочной железы устойчиво занимает лидирующие позиции по показателям заболеваемости и смертности среди женского населения как в мире, так и в России [Ach R. et al. 2007; Ряженов В.В., Горохова С.Г. 2011]. Одним из этапов комбинированного лечения данного заболевания является проведение НАХТ. Частота развития ПМР опухоли на фоне химиотерапии при триплнегативном, самом неблагоприятном в прогностическом плане РМЖ, по данным разных авторов, колеблется от 22 до 58% [Carey L., et al. 2007; Liedtke С., et al. 2008; Smith I., et al. 2002; Hayes D., et al. 2007]. При достижении такой эффективности, выживаемость у этой когорты пациентов аналогична выживаемости, наблюдаемой у пациентов с люминальным РМЖ [Liedtke С, et al. 2008; Carey LA, et al. 2007]. Продолжительность жизни при люминальном В РМЖ сравнима с показателями при триплнегативном РМЖ [В. Tran, Ph. L Bedard, 2011; Cheang МС, et al. 2009; Hu Z. et al. 2006]. Пациентам с этим типом опухолей, который характеризуется высокой пролиферативной активностью (ki67>20%), также показано проведение цитостатической терапии. При этом опухоли люминального В типа являются относительно не чувствительными к химиотерапии по сравнению с Her2-положительным и триплнегативным подтипами РМЖ. Существенное уменьшение размеров опухоли люминального В типа в ответ на НАХТ наблюдается далеко не всегда. Персонализированный подход к НАХТ с одной стороны позволит повысить эффективность лечения, а с другой избежать необоснованного назначения химиопрепаратов, тем самым, уменьшив токсическое действие на организм.

Необходимо отметить, что в качестве одной из наиболее значимых причин неэффективности химиотерапии злокачественных новообразований рассматривается множественная лекарственная устойчивость (МЛУ) опухолевых клеток, которую наиболее часто связывают с работой энергозависимых АВС-транспортеров (ATP-Binding Cassette), осуществляющих выброс цитостатических и таргетных препаратов из опухолевых клеток против градиента концентрации с затратой энергии АТФ. Семейство АВС-транспортеров (ATP-Binding Cassette), насчитывает 50 генов и главными подсемействами являются АВСВ, АВСС и ABCG. По данным литературы 75-85% случаев низкой эффективности химиотерапии при РМЖ обусловлено развитием МЛУ клеток опухоли [O′Driscoll L., Clynes М., 2006.; Szakacs G., et al. 2006 Gillet J.P. 2012, Eechoute K., et al., 2011, Schinkel A.H. et al., 2012]. В исследованиях, проведенных в Томском НИИ онкологии, было показано, что эффект неоадъювантной химиотерапии зависит от изменения экспрессии генов МЛУ в опухолевой ткани в процессе лечения. Оказалось, что повышение экспрессии в ходе НАХТ являлось маркером отсутствия непосредственного эффекта химиотерапии. Снижение экспрессии генов МЛУ во время лечения соотносится с хорошим ответом на НАХТ [Litviakov, Cherdyntseva et al. 2013]. Кроме этого было установлено, что при делеции локусов генов МЛУ в опухолевой ДНК отмечается снижение их экспрессии и наблюдается более выраженный ответ на НАХТ [Литвяков Н.В. и др. 2014; Litviakov N et al., 2014 in press].

В последние годы получены новые данные о том, что наличие делеций и амплификаций в других хромосомных регионах также ассоциировано с химиорезистентностью опухоли и показателями выживаемости [Wonshik Han, et al. 2011; Liedtke С, et al. 2009, Wikman, et al. 2012]. Так, в работе корейских ученых на 15 образцах опухоли больных РМЖ, у которых не было отмечено эффекта при проведении НАХТ таксанами, установлены амплификации в 8q (24,3, 24.22, 22.1-3), 13q21.1 и 20q (13.2-13.33) регионах и делеции 8р23.3-1 и 17р13.3 сайтов [Han, Park et al. 2010]. Делеции или амплификации хромосомных регионов и отдельных хромосом называют аберрациями числа копий ДНК (CNA - copy number aberration). CNA особенно распространены в солидных опухолях различных локализаций, и в частности, в опухоли молочной железы (www.progenetix.org [Horlings, Lai et al. 2010]).

При назначении НАХТ, даже в случае высокой вероятности достижения объективного ответа, остается проблема выбора схемы лечения. В настоящее время, согласно принятым международным стандартам, для лечения больных с люминальным В РМЖ используются схемы, включающие таксаны и антрациклины, однако их эффективность далеко не всегда является оптимальной. С целью персонифицированного подбора схемы целесообразно определение маркеров монорезистентности в опухолевой ткани. Согласно данным FDA (Food and Drug Administration), чувствительность новообразований к определенным препаратам в заметной степени коррелирует с уровнем экспрессии некоторых молекул (ТОР2А, TYMS и ряда других) в опухолевой ткани, большая часть из которых является мишенями воздействия химиопрепаратов. Предварительная оценка уровня экспрессии генов-мишеней в опухолевой ткани существенно помогает в выборе химиопрепаратов для лечения. Тем не менее, определение экспрессии генов монорезистентности в опухолевой ткани для персонификации НАХТ широкого внедрения в практику пока не получило, поскольку не обладает достаточной эффективностью и не может быть использовано в качестве самостоятельного метода. Учитывая все выше сказанной, нами был разработан способ персонализированного назначения неоадъювантной химиотерапии больным люминальным В раком молочной железы, описанный выше.

Предлагаемый способ лечения иллюстрируется следующими примерами

Пример 1

Больная М., 33 года. Диагноз: рак молочной железы слева, IIa стадия (T2N0M0). Обратилась с жалобами: на уплотнение в левой молочной железе. Гистологическое исследование №14/1-072308 от 16.12.14, заключение: Инвазивный неспецифический рак молочной железы 2 ст. злокачественности. ИГХ: РЭ+, РП+, Her2Neu отр., Ki 67=27%. При первичном осмотре пациентки: молочные железы симметричные. В левой молочной железе на границе нижних квадратов определяется уплотнение до 3,5 см в диаметре, плотно-эластичной консистенции с нечеткими контурами, смещаемое с тканью молочной железы. ПМЖ без особенностей. Регионарные л/у не пальпируются. Учитывая соотношение объема опухоли с объемом молочной железы, выполнение органосохраняющей операции на момент первичного осмотра признано нецелесообразным. Проведено лечение согласно предлагаемому способу. На первом этапе выполнено микрочиповое исследование ДНК опухоли. Обнаружено наличие в опухолевой ДНК двух маркеров эффективности НАХТ (делеция 11q22.1-23.3 региона; амплификация 1q24.1-43 региона). Это определило целесообразность проведения НАХТ. На втором этапе для выбора схемы дополнительно к микрочиповому исследованию ДНК, определяли уровень экспрессии генов монорезистентности (Тор2а, TYMS). По данным микрочипового исследования выявлено отсутствие амплификации Тор2а, при этом уровень экспрессии Тор2а<4 (Тор2а=3,708) - рекомендованы таксаны в монорежиме. В качестве схемы НАХТ был назначен доцетаксел, 180 мг; внутривенно в 1-й день, с премедикацией дексаметазоном. Третьим этапом проведено 6 курсов НАХТ с эффектом частичной регрессии - 96%. При осмотре пациентки после 6 курсов НАХТ: Молочные железы симметричные. В левой молочной железе на границе нижних квадратов достоверно уплотнение не определяется. ПМЖ без особенностей. Регионарные л/у не пальпируются. На четвертом этапе выполнена органосохраняющая операция в объеме секторальной резекции, аксиллярной лимфодиссекции, ИОЛТ 10 Гр. Гистологическое исследование операционного материала, описание: в ткане молочной железы на фоне выраженного фиброза, неравномерной лимфоидной инфильтрацией, единичных кистознорасширенных протоков, имеется единичный проток, просвет которого выполнен полиморфными клетками, рядом расположена единичная инвазивная структура, представленная группой клеток. Заключение: инвазивная карцинома неспецифического типа, лечебный патоморфоз 3 степени, без метастазов в 5 л/узлах. Границы резекции - без опухолевых клеток. В дальнейшем пациентке планируется ДЛТ на область оставшейся молочной железы слева, гормонотерапия - тамоксифен 5 лет. Косметический результат хирургического лечения оценен, как отличный.

Пример 2

Больная Д., 59 лет. Диагноз: рак молочной железы слева IIa стадия T2N0M0.

Обратилась с жалобами на уплотнение в левой молочной железе. Гистологическое исследование №19905-912/14 от 30.09.14, заключение: Инвазивная карцинома неспецифического типа. ИГХ: РЭ - 8 баллов, РП - 0 баллов, Her2Neu - (1+), Ki 67=24%. При первичном осмотре пациентки: молочные железы симметричные. В ННК левой молочной железы определяется уплотнение до 3 см в диаметре, плотной консистенции, с нечеткими контурами, смещаемое вместе с тканью молочной железы. С-м площадки положительный. ПМЖ без особенностей. Регионарные л/у не пальпируются. Учитывая соотношение объема опухоли с объемом молочной железы, выполнение органосохраняющей операции на момент первичного осмотра нецелесообразно. Проведено лечение согласно предлагаемому способу. На первом этапе выполнено микроматречное исследование ДНК опухоли. Обнаружено наличие в опухолевой ДНК одного маркера эффективности НАХТ (амплификация 1q24.1-43 региона). Назначение НАХТ признано целесобразным. На втором этапе, для выбора схемы дополнительно к микроматречному исследованию ДНК, определяли уровень экспрессии генов монорезистентности (Тор2а, TYMS). В опухолевой ткани имела место амплификация Тор2а, уровень экспрессии Тор2а>4 (Тор2а=9,758) - рекомендована схема НАХТ с включением антрациклинов. При этом уровень экспрессии TYMS<2 (TYMS=0,213) - показана схема FAC. На третьем этапе пациентка получила 4 курса НАХТ по схеме FAC (фторурацил 750 мг; доксорубицин, 75 мг; циклофосфамид, 750 мг; внутривенно в 1-й день с клинико-эхоскопическим эффектом - полная регрессия регрессия - 100%. При осмотре пациентки после 4 курсов НАХТ: Молочные железы симметричные. В левой молочной железе на границе нижних квадратов достоверно уплотнение не определяется. ПМЖ без особенностей. Регионарные л/у не пальпируются. Четвертым этапом пациентке выполнена органосохраняющая операция в объеме секторальной резекции, аксилярной лимфодиссекции, ИОЛТ 10 Гр. №4319-33/15 от 11.03.15 заключение: в остаточной опухоли (маркированной металической меткой) имеются фокусы микропапиллярного инвазивного рака молочной железы 9в микропрепарате №4231/15) - без признаков лечебного патоморфоза и участки муцинозной карциномы молочной железы - без признаков лечебного патоморфоза. По границе резекции - опухоли ненайдено. Отдельно прислано 5 лимфоузлов - без МТС поражения. Косметический результат хирургического лечения оценен, как хороший.

Пример 3

Больная Е., 57 лет. Диагноз: рак молочной железы справа II стадия T2N0M0.

Обратилась с жалобами на уплотнение в правой молочной железе. Гистологическое исследование №26078/14 от 28.11.14, заключение: Инвазивная карцинома неспецифического типа (ИПР 2 ст. злокачественности) с наличием протокового компонента. ИГХ: РЭ - 8 баллов, РП - 8 баллов, Her2Neu - (2+), Ki 67=28%, FISH отрицательный. При первичном осмотре молочные железы симметричные. В ВНК правой молочной железы определяется уплотнение до 2,5 см с нечеткими, бугристыми контурами, плотной консистенции, смещаемое вместе с тканью молочной железы. С-м площадки положительный. ЛМЖ без особенностей. Регионарные л/у увеличены, элластичной консистенции. Учитывая соотношение объема опухоли с объемом молочной железы, выполнение органосохраняющей операции на момент первичного осмотра привело бы к неудовлетворительному эстетическому результату. Проведено лечение согласно предлагаемому способу. На первом этапе выполнено микроматречное исследование ДНК опухоли. Обнаружено наличие в опухолевой ДНК маркеров эффективности НАХТ (делеция ABCB1-7q21.1; делеция ABCG2-4q22,1; делеция 18р11.21; делеция 11q22.1-23.3; амплификация 1q24.1-43 региона). Таким образом, назначение НАХТ - целесообразно. На втором этапе, для выборы схемы дополнительно к микроматречному исследованию ДНК, определялся уровень экспрессии генов монорезистентности (Тор2а, TYMS). Выявлена амплификации Тор2а, уровень экспрессии Тор2а>4 (Тор2а=5,149) - рекомендована схема НАХТ с включением антрациклинов. При этом уровень экспрессии TYMS>2 (TYMS=5,971) - показана схема САХ. На третьем этапе проведено 4 курс НАХТ по схеме САХ с эффектом - частичная регрессия - 85%. При осмотре пациентки после 4-х курсов НАХТ: молочные железы симметричные. В ВНК правой молочной железы определяется уплотнение до 0,5 см с нечеткими, бугристыми контурами, плотной консистенции, смещаемое вместе с тканью молочной железы. С-м площадки отрицательный. ЛМЖ без особенностей. Регионарные л/у увеличены, эластичной консистенции. На четвертом этапе выполнена органосохраняющая операция. Гистологическое исследование операционного материала, заключение: инвазивная карцинома неспецифического типа, 2 ст. злокачественности, в операционном материале имеет место только внутрипротоковый компонент (in situ). В 9 л/у без метастазов, т.е имеет место полная морфологическая регрессия опухоли на фоне НАХТ, что является благоприятным прогностическим критерием при люминальном В РМЖ. Эстетический результат оценен, как хороший.

Пример 4

Больная С., 54 года. Диагноз: рак молочной железы справа IIа стадия T2N0M0.

Обратилась с жалобами на уплотнение в правой молочной железе. Гистологическое исследование №12991-96 от 11.06.14, заключение: Инвазивная карцинома неспецифического типа. ИГХ: РЭ - 8 баллов, РП - 0 баллов, Her2Neu - (2+), Ki 67=48%, FISH положительный. При первичном осмотре молочные железы симметричные. В центральных отделах правой молочной железы определяется уплотнение до 3,5 см с нечеткими, бугристыми контурами, плотной консистенции, смещаемое вместе с тканью молочной железы. С-м площадки положительный. ЛМЖ без особенностей. Регионарные л/у не увеличены. Учитывая соотношение объема опухоли с объемом молочной железы, выполнение органо-сохранной операции на момент первичного осмотра не возможно. Проведено лечение согласно предлагаемому способу. На первом этапе выполнено микроматричное исследование ДНК опухоли. В опухолевой ДНК не обнаружено ни одного из интересующих нас маркеров эффективности НАХТ (нормальное состояние локусов генов МЛУ (ABCB1-7q21.1, АВСВ3-6р21.32, АВСС1-16р13.1, ABCG2-4q22, MVP-16p11.2); 18р11.21 региона; 11q22.1-23.3 региона; 1q24.1-43 регионов). Таким образом, назначение НАХТ признано не целесообразным. В проведении второго и третьего этапов нет необходимости. Лечение начато с хирургического этапа в объеме - радикальной мастэктомии. Гистологическое исследование №17493-545 от 04.08.14, заключение: инвазивная карцинома неспецифического типа с фокусами инвазивной микропапилярной карциномы II степени злокачественности. Вне опухоли фиброзные изменения. В л/у гистиоцитоз, липоматоз. Сосок и ареола без особенностей.

Предлагаемым способом пролечено 31 больная люминальным В раком молочной железы II-III стадии, из которых 10 (32%) больным НАХТ не показана, 21 (68%) пациентка начала лечение с курсов НАХТ. Из них в 8 (38%) случаях рекомендована схема FAC, в 5 (24%) - схема САХ, в 8 (38%) - таксаны в монорежиме. На настоящий момент оценка эффекта НАХТ возможна в 17 случаях, из которых стабилизация была отмечены в 2-х случаях (11,8%), частичная и полная регрессия в 15 случаях (88,2%), 4 пациентки находятся на этапе проведения НАХТ и оценка эффекта на данный момент невозможна.

Предлагаемый способ лечения основан на анализе результатов экспериментальных и клинических результатов. Как показали клинические исследования, использование предлагаемого способа лечения позволяет достичь нового технического результата, а именно повысить эффективность неоадъювантного лечения люминального В рака молочной железы - II-III стадии, что способствует увеличению числа органосохранных операций, помогает в планировании адъювантного лечения, а в случае достижения полной морфологической регрессии, является благоприятным прогностическим критерием.

Применение предлагаемого способа позволяет увеличить эффективность НАХТ, что ведет к уменьшению объема первичной опухоли и следовательно, создает более благоприятные условия для выполнения органосохраняющих операций. Также, определение чувствительности первичной опухоли к проводимой химиотерапии in vivo, позволяет адекватно планировать лечение в адъювантном режиме. В-третьих, достижение полной морфологической регрессии (ПМР) способствует улучшению отдаленных результатов.

Изобретение относится к области медицины, в частности к онкологии, и предназначено для персонализированного назначения неоадъювантной химиотерапии (НАХТ) больным люминальным В раком молочной железы. До начала лечения осуществляют забор биопсийного материала опухоли, в котором проводят микрочиповое исследование ДНК с определением маркеров: делеции локусов генов ABCB1-7q21.1, АВСВ3-6р21.32, АВСС1-16р13.1, ABCG2-4q22, MVP-16p11.2; делеции 18p11.21; делеции 11q22.1-23.3; амплификацию 1q24.1-43. Пациентам, в опухолевой ткани которых не обнаружено ни одного из указанных маркеров, начинают лечение с хирургического вмешательства в объеме радикальной мастэктомии или органосохраняющей операции. Пациентам, у которых обнаружен хотя бы 1 из указанных маркеров, до хирургического вмешательства выполняют НАХТ. Изобретение обеспечивает увеличение эффективности НАХТ, адекватное планирование лечения в адъювантном режиме и улучшение отдаленных результатов. 4 пр.

Способ персонализированного назначения неоадъювантной химиотерапии больным люминальным В раком молочной железы, включающий определение целесообразности проведения НАХТ на основании наличия в опухолевой ткани молекулярно-генетических маркеров эффективности НАХТ и в случае ее назначения индивидуальный подбор схемы, основанный на молекулярно-генетических характеристиках опухоли, с последующим хирургическим лечением, отличающийся тем, что до начала лечения осуществляют забор биопсийного материала опухоли, в котором проводят микрочиповое исследование ДНК с определением маркеров: делеции локусов генов МЛУ: ABCB1-7q21.1, АВСВ3-6р21.32, АВСС1-16р13.1, ABCG2-4q22, MVP-16p11.2; делеции 18p11.21 региона; делеции 11q22.1-23.3 региона; амплификацию 1q24.1-43 региона; и пациентам, в опухолевой ткани которых не обнаружено ни одного из указанных маркеров, начинают лечение с хирургического вмешательства в объеме радикальной мастэктомии или органосохраняющей операции, пациентам у которых обнаружен хотя бы 1 из указанных маркеров, до хирургического вмешательства выполняют НАХТ, причем для выбора схемы НАХТ дополнительно к результатам микрочипового исследования из опухолевой ткани выделяют тотальную РНК, определяют уровень экспрессии генов монорезистентности: топоизомеразы 2а (ТОР2а), тимидилатсинтетазы (TYMS) при помощи количественной ПЦР в режиме реального времени и при наличии амплификации гена Тор2а и/или уровне экспрессии Тор2а>4 назначают схемы НАХТ с включением антрациклинов, при этом при уровне экспрессии TYMS>2 назначают схему САХ, при уровне экспрессии TYMS<2 назначают схему FAC, при отсутствии амплификации Тор2а и уровне экспрессии Тор2а<4 назначают таксаны в монорежиме, причем схема FAC включает внутривенное введение в 1-й день пациентам фторурацила в дозе 500 мг/м²; доксорубицина в дозе 50 мг/м²; циклофосфамида в дозе 500 мг/м², для проведения схемы САХ пациентам вводят циклофосфамид в дозе 100 мг/м², внутримышечно в течение 14 дней; доксорубицин, 30 мг/м² внутривенно в 1-й и 8-й дни; капецитабин, 2000 мг/м²/сут внутрь на два приема в 1-14-й дни, или таксаны в монорежиме по схеме доцетаксел в дозе 100 мг/м², внутривенно в 1-й день, с премедикацией дексаметазоном, интервал между курсами химиотерапии составляет 21 день, в зависимости от переносимости и выраженности эффекта, проводят 2-6 курсов НАХТ, после этого осуществляют хирургическое лечение в объеме радикальной мастэктомии или органосохраняющей операции.