Способ лечения патологического синдрома и лекарственное средство центрального и периферического действия для лечения патологического синдрома Российский патент 2017 года по МПК A61K39/395 

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для повышения эффективности лечения различных заболеваний, включая ожирение, преимущественно экзогенно-конституциональное, в том числе в сочетании с нарушениями липидного обмена, включая метаболический синдром, а также и для лечения зависимости от наркотических и/или психоактивных веществ.

Согласно данным Международной рабочей группы по проблеме ожирения (International Obesity Task Force), более 300 млн. человек на нашей планете страдают ожирением, а еще 800 млн. человек имеют избыточную массу тела. При сохранении таких высоких темпов роста заболеваемости к 2025 г. ожидается двукратное увеличение числа страдающих ожирением.

Избыточный вес и ожирение являются одной из наиболее распространенных проблем в развитых странах, и повышают риск развития заболеваний сердечно-сосудистой системы, дислипидемии, сахарного диабета 2 типа, онкологических заболеваний.

Среди современных препаратов, используемых для снижения массы тела, можно выделить три основные группы - препараты периферического и центрального действия усиливающие «сжигание» калорий, препараты, снижающие поступления жиров в организм, и препараты центрального действия (регуляторы аппетита) (Padwal R.S., Majumdar S.R., Drug treatments for obesity: orlistat, sibutramine, and rimonabant. Lancet 2007; 366 (9555):71-7). Препараты всех групп имеют множественные побочные эффекты, в связи с чем их применение в повседневной практике крайне ограничено. Таким образом, разработка и внедрение новых безопасных и эффективных препаратов для снижения массы тела являются весьма актуальными.

Из уровня техники известна композиция для лечения ожирения и резистентности к инсулину при регуляции уровня глюкозы в крови, содержащая соединение, выделенное из натурального источника и очищенное, выбираемое из группы, включающей антоцианин, антоцианидин и их смеси (RU 2359689 С2, А61К 36/45, 10.09.2008). Однако при использовании данной композиции возникает сложностью подбора дозы.

Также известно использование лекарственного препарата на основе антител к липазе для лечения ожирения у млекопитающих (WO/1999/002187, A61K 38/00, 21.01.1999). Однако данный препарат может вызывать выраженные побочные эффекты и вследствие этого применяется в незначительном числе случаев.

Из уровня техники известно лекарственное средство для перорального лечения ожирения, сахарного диабета и других заболеваний, сопровождающихся нарушением толерантности к глюкозе, содержащее антитела к бета-субъединице рецептора инсулина в активированной форме (WO 2007/149010 A1, A61K 39/395, 27.12.2007). Однако данное лекарственное средство эффективно, в основном, при ожирении, связанном с инсулинорезистентностью.

Изобретение направлено на создание эффективного способа лечения патологического синдрома, включая лечение ожирения и связанных с ним метаболических расстройств, а также лечение зависимости от наркотических и/или психоактивных веществ без побочных эффектов, и соответствующего лекарственного средства центрального и периферического действия на основе антител к известному каннабиноидному рецептору человека (Ken Mackie. Cannabinoid receptors as therapeutic targets. The Annual Review of Pharmacology and Toxicology, 2006. 46:101-122).

Решение поставленной задачи обеспечивается тем, что в способе лечения патологического синдрома путем введения в организм лекарственного средства центрального и периферического действия на основе активированной-потенцированной формы антител, согласно изобретению, лекарственное средство содержит активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору человека в виде активированного-потенцированного водного или водно-спиртового раствора, полученного в процессе последовательного многократного разведения матричного раствора в водном или водно-спиртовом растворителе и промежуточного внешнего механического воздействия.

Возможно использование активированной-потенцированной формы антител к цельной молекуле каннабиноидного рецептора I типа человека или полипептидному фрагменту с последовательностью, выбираемой, например, из следующей группы:

Кроме того, дополнительно вводят активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100 в виде активированного-потенцированного водного или водно-спиртового раствора, полученного в процессе последовательного многократного разведения матричного раствора в водном или водно-спиртовом растворителе и промежуточного внешнего механического воздействия.

Предпочтительно активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору человека или активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору человека в сочетании с активированной-потенцированной формой антител к мозгоспецифическому белку S-100 используют для лечения ожирения и сопутствующих метаболических расстройств.

При этом активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору человека или активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору человека в сочетании с активированной-потенцированной формой антител к мозгоспецифическому белку S-100 используют для лечения зависимости от наркотических и/или психоактивных веществ.

При этом активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору человека или активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору человека в сочетании с активированной-потенцированной формой антител к мозгоспецифическому белку S-100 используют для лечения алкогольной зависимости.

При этом активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору человека или активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору человека в сочетании с активированной-потенцированной формой антител к мозгоспецифическому белку S-100 используют для лечения зависимости от табакокурения.

Причем лекарственное средство может быть выполнено в твердой лекарственной форме в виде таблетки, содержащей эффективное количество гранул нейтрального носителя, насыщенного водным или водно-спиртовым раствором активированной-потенцированной формы антител к каннабиноидному рецептору I типа человека или активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору человека в сочетании с активированной-потенцированной формой антител к мозгоспецифическому белку S-100, и фармацевтически приемлемые добавки.

Предпочтительно лекарственное средство вводят 1÷2 таблетки 2÷6 раз в сутки.

Как вариант активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору человека или активированную -потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору человека в сочетании с активированной-потенцированной формой антител к мозгоспецифическому белку S-100 используют для лечения зависимости от табакокурения легкой степени по результатам теста Фагерстрома.

Как вариант активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору человека или активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору человека в сочетании с активированной-потенцированной формой антител к мозгоспецифическому белку S-100 используют для лечения зависимости от табакокурения тяжелой степени по результатам теста Фагерстрома.

Решение поставленной задачи обеспечивается также тем, что лекарственное средство центрального и периферического действия для лечения патологического синдрома содержит активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору человека I типа в виде активированного-потенцированного водного или водно-спиртового раствора, полученного в процессе последовательного многократного разведения в водном или водно-спиртовом растворителе и промежуточного внешнего механического воздействия.

Кроме того, лекарственное средство дополнительно может содержать активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100 в виде активированного-потенцированного водного или водно-спиртового раствора, полученного в процессе последовательного многократного разведения матричного раствора в водном или водно-спиртовом растворителе и промежуточного внешнего механического воздействия.

При этом водно-спиртовой раствор активированной-потенцированной формы антител получен путем многократного последовательного разведения и промежуточного внешнего воздействия из матричного раствора соответствующих аффинно очищенных антител с концентрацией 0,5÷5,0 мг/мл.

Лекарственное средство может быть выполнено в твердой лекарственной форме и содержать эффективное количество гранул нейтрального носителя, насыщенного водным или водно-спиртовым раствором активированной-потенцированной формы соответствующих антител, и фармацевтически приемлемые добавки.

При этом фармацевтически приемлемые добавки включают лактозу, целлюлозу микрокристаллическую и магния стеарат.

Предпочтительно нейтральный носитель и фармацевтически приемлемые добавки формируют в виде таблетки, пропитанной 6 мл водного или водно-спиртового раствора активированной потенцированной формы антител, массой 300 мг.

Заявленный технический результат может быть обусловлен тем, что известные каннабиноидные рецепторы 1 типа и эндоканнабиноиды представляют собой единую систему в гипоталамусе, которая, воздействуя, преимущественно, на специфические участки мезолимбической области головного мозга, влияет на чувство насыщения и регулирует аппетит и, как результат, потребление пищи, а активированная-потенцированная форма антител к каннабиноидному рецептору человека, в том числе и в сочетании с активированной-потенцированной формой антител к мозгоспецифическому белку S-100, обеспечивает как нормализацию углеводного и липидного обмена, так и существенное уменьшение зависимости от наркотических и/или психоактивных веществ.

При этом предложенное лекарственное средство на основе активированной-потенцированной формы антител к каннабиноидному рецептору человека, в том числе и в сочетании с активированной-потенцированной формой антител к мозгоспецифическому белку S-100 (т.е. форм антител к каннабиноидному рецептору I типа человека и к мозгоспецифическому белку S-100, приготовленных по гомеопатической технологии потенцирования путем многократного последовательного разведения в сочетании с внешним воздействием-вертикальным встряхиванием каждого разведения (см., например, В.Швабе "Гомеопатические лекарственные средства", М., 1967 г., с.14-29), которые обладают активностью в фармакологических моделях и/или клинических методах как нормализации углеводного и липидного обмена, приводящей к снижению массы тела без побочных явлений, так и лечения зависимости от наркотических и/или психоактивных веществ, преимущественно, алкоголизма и табакокурения) обеспечивает получение неожиданного синергетического терапевтического эффекта, подтвержденного на адекватных (валидных) экспериментальных моделях и клинических исследованиях. При этом заявленное лекарственное средство, являясь препаратом центрального и периферического действия, не только нормализует углеводный и липидный обмен, но и модулирует систему позитивного эмоционального подкрепления, уменьшая тем самым выраженность влечения к психоактивным веществам, в том числе при алкоголизме и никотинизме, нормализует баланс нейромедиаторов в центральной нервной системе, улучшает нейропротекторную активность, повышает устойчивость мозга к токсическим воздействиям, улучшает интегративную деятельность, способствует устранению когнитивных нарушений, повышает умственную работоспособность, нормализует соматовегетативные проявления при абстинентных состояниях. В результате этого устраняется раздражительность, повышается настроение, устраняется внутренний дискомфорт, устраняются мысли о никотине или алкоголе, повышается работоспособность, устраняется потливость, тахикардия и общая слабость, а также другие аффективные, идеаторные и астеновегетативные нарушения; повышается качество жизни. При этом заявленное нейротропное лекарственное средство не оказывает седативного, миорелаксантного действия, не вызывает привыкания, лекарственной зависимости, не обладает наркогенным потенциалом и другими побочными явлениями и обладает расширенным терапевтическим диапазоном, обеспечивающим лечение различных заболеваний, включая ожирение, и зависимости от наркотических и/или психоактивных веществ.

Кроме того, полученное в соответствии с изобретением техническое решение расширяет арсенал лекарственных средств центрального и периферического действия, предназначенных для эффективного лечения различных заболеваний, в том числе и в составе комплексной терапии.

Лекарственное средство приготовляют, например, следующим образом.

Для приготовления гомеопатически активированной-потенцированной формы антител используют моноклональные или, преимущественно, поликлональные антитела, которые могут быть получены по известным технологиям-методикам, описанным, например, в книге: Иммунологические методы, под ред. Г.Фримеля, М., «Медицина», 1987, с.9-33; или, например, в статье Laffly E., Sodoyer R. Hum. Antibodies. Monoclonal and recombinant antibodies, 30 years after. - 2005 - Vol.14. - N 1-2. P.33-55.

Моноклональные антитела получают, например, с помощью гибридомной технологии. Причем начальная стадия процесса включает иммунизацию, основанную на принципах, уже разработанных при приготовлении поликлональных антисывороток. Дальнейшие этапы работы предусматривают получение гибридных клеток, продуцирующих клоны одинаковых по специфичности антител. Их выделение в индивидуальном виде проводится теми же методами, что и в случае поликлональных антисывороток.

Поликлональные антитела антител к каннабиноидному рецептору человека могут быть получены активной иммунизацией животных. Для этого по специально разработанной схеме животным делают серию инъекций требуемым в соответствии с изобретением веществом-антигеном: каннабиноидным рецептором I типа человека. В результате проведения такой процедуры получают моноспецифическую антисыворотку с высоким содержанием антител, которую и используют для получения активированной-потенцированной формы. При необходимости проводят очистку антител, присутствующих в антисыворотке, например, методом аффинной хроматографии, путем применения фракционирования солевым осаждением или ионообменной хроматографии.

Для иммунизации кроликов можно использовать в качестве иммуногена (антигена) адъювант и цельную молекулу каннабиноидного рецептора I типа человека следующей последовательности:

или, преимущественно, полипептидный фрагмент каннабиноидного рецептора I типа человека с последовательностью, выбираемой, например, из следующей группы:

Перед отбором крови за 7-9 дней проводят 1-3 внутривенных инъекций для повышения уровня антител. В процессе иммунизации у кроликов отбирают небольшие пробы крови для оценки количества антител. Максимальный уровень иммунного ответа на введение большинства растворимых антигенов достигается через 40-60 дней после первой инъекции. После окончания первого цикла иммунизации кроликов в течение 30 дней дают восстановить здоровье и проводят реиммунизацию, включающую 1-3 внутривенные инъекции. Для получения антисыворотки из иммунизированных кроликов собирают кровь в центрифужную пробирку объемом 50 мл. С помощью деревянного шпателя удаляют со стенок пробирки образовавшиеся сгустки и помещают палочку в сгусток, образовавшийся в центре пробирки. Кровь помещают в холодильник (температура 4°С) на ночь. На следующий день удаляют сгусток, прикрепившийся к шпателю, и центрифугируют оставшуюся жидкость при 13000 g в течение 10 мин. Супернатант (надосадочная жидкость) является антисывороткой. Полученную антисыворотку, которая должна быть желтого цвета, хранят до использования в замороженном состоянии при температуре -70°С. Для выделения из антисыворотки антител к каннабиноидному рецептору I типа человека производят абсорбцию на твердой фазе в следующей последовательности:

1. 10 мл антисыворотки кролика разбавляют в 2 раза 0,15 М NaCl добавляют 6,26 г Na₂SO₄, перемешивают и инкубируют 12-16 ч при 4°С;

2. выпавший осадок удаляют центрифугированием, растворяют в 10 мл фосфатного буфера и затем диализуют против того же буфера в течение ночи при комнатной температуре;

3. после удаления осадка центрифугированием раствор наносят на колонку с ДЭАЭ-целлюлозой, уравновешенную фосфатным буфером;

4. фракцию антител определяют, измеряя оптическую плотность элюата при 280 нм.

Затем производят очистку антител методом аффинной хроматографии путем прикрепления полученных антител к каннабиноидному рецептору I типа человека, который находится на нерастворимом матриксе с последующим элюированием концентрированными растворами соли.

Полученный, таким образом, буферный раствор поликлональных кроличьих антител к каннабиноидному рецептору I типа человека, очищенных на антигене, с концентрацией 0,5÷5,0 мг/мл, предпочтительно 2,0÷2,5 мг/мл, используют в качестве матричного (первичного) раствора для последующего приготовления активированной-потенцированной формы.

Для получения поликлональных антител к мозгоспецифическому белку S-100 используют мозгоспецифический белок S-100, физико-химические свойства которого описаны в статье М.В.Старостина, С.М.Свиридов, Нейроспецифический белок S-100, Успехи современной биологии, 1977 г., т.5, с.170-178; книге М.Б.Штарк, Мозгоспецифические белки /антигены/ и функции нейрона, М., "Медицина", 1985 г.; с.12-14, выделенный из ткани головного мозга быка по следующей методике:

- замороженную в жидком азоте ткань растирают в порошок на специальной мельнице;

- экстракцию белков проводят в соотношении 1:3 (вес/объем) в экстрагирующем буфере при гомогенизации;

- гомогенат прогревают в течение 10 мин при 60°С и охлаждают до 4°С на ледяной бане;

- термолабильные белки удаляют центрифугированием;

- проводят ступенчатое фракционирование сульфатом аммония с последующим удалением выпадающих в осадок примесных белков;

- содержащую белок S-100 фракцию осаждают 100% насыщенным сульфатом аммония при снижении рН до 4,0 и собирают центрифугированием;

- осадок растворяют в минимальном объеме буфера, содержащего ЭДТА и меркаптоэтанол, диализируют против деионизованной воды и лиофильно высушивают;

- фракционирование кислых белков продолжают хроматографией на ионообменных носителях - ДЭАЭ целлюлозе ДЕ-52 и затем ДЭАЭ-сефадексе А-50;

- собранные и отдиализованные фракции, содержащие белок S-100, разделяют по молекулярному весу гель-фильтрацией на сефадексе G-100;

- очищенный белок S-100 диализируют и лиофильно высушивают.

Молекулярный вес очищенного мозгоспецифического белка S-100 составляет - 21000 д.

Благодаря высокому содержанию аспарагиновой и глутаминовой кислот мозгоспецифический белок S-100 является сильнокислым и занимает крайнее анодное положение при электрофорезе в прерывистой буферной системе в полиакриламидном геле, что облегчает его идентификацию.

Для получения мозгоспецифической антисыворотки к выделенному мозгоспецифическому белку S-100 готовят смесь очищенного белка S-100 (антигена) в комплексе с метилированным бычьим сывороточным альбумином в качестве носителя с полным адъювантом Фрейнда, которую вводят подкожно лабораторному животному-кролику в область спины в количестве 1-2 мл. На 8-й, 15-й день проводят повторную иммунизацию. Забор крови производят (например, из вены уха) на 26-й и 28-й день.

Полученная антисыворотка имеет титр 1:500-1:1000, образует единственную полосу преципитации с экстрактом из нервной ткани, но не реагирует с экстрактами гетерологичных органов и формирует единственный пик преципитации как с чистым белком S-100, так и с экстрактом нервной ткани, что свидетельствует о моноспецифичности полученной антисыворотки.

Полученный, таким образом, буферный раствор поликлональных кроличьих антител к мозгоспецифическому белку S-100, очищенных на антигене, с концентрацией 0,5÷5,0 мг/мл, предпочтительно 2,0÷2,5 мг/мл, используют в качестве матричного (первичного) раствора для последующего приготовления активированной-потенцированной формы.

Активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору I типа человека (или к мозгоспецифическому белку S-100) в сверхмалой дозе готовят путем равномерного уменьшения концентрации в результате последовательного разведения 1 части упомянутого матричного раствора в 9 частях (для десятичного разведения) или в 99 частях (для сотенного разведения С) или в 999 частях (для тысячного разведения М) нейтрального водного или водно-спиртового растворителя с многократным вертикальным встряхиванием-потенцированием (или "динамизацией") каждого полученного разведения и использованием отдельных емкостей для каждого последующего разведения до получения требуемой потенции-кратности разведения по гомеопатическому методу (см., например, В.Швабе "Гомеопатические лекарственные средства", М., 1967 г., с.14-29).

Например, для приготовления 12-го сотенного разведения С12 одну часть упомянутого матричного раствора антител к каннабиноидному рецептору I типа человека с концентрацией 2,5 мг/мл разводят в 99 частях нейтрального водного или водно-спиртового растворителя и многократно (10 и более раз) вертикально встряхивают-потенцируют полученное 1-е сотенное С1 разведение. Из 1-го сотенного С1 разведения приготовляют 2-ое сотенное разведение С2. Данную операцию повторяют 11 раз, получая 12-е сотенное разведение С12. Таким образом, 12-е сотенное разведение С12 представляет собой раствор, полученный разбавлением последовательно в разных емкостях 12 раз 1-ой части исходного матричного раствора антител к каннабиноидному рецептору I типа человека с концентрацией 2,5 мг/мл в 99-ти частях нейтрального растворителя, т.е. раствор, полученный сверхразведением исходного матричного раствора в 100¹² раз. Аналогичные операции с соответствующей кратностью разведения проводят для получения разведении С30 и С200.

При использовании в качестве биологически активного жидкого компонента смеси различных гомеопатических, преимущественно сотенных, разведении, действующего вещества каждый компонент состава (например, С12, С30, С200) приготовляют раздельно по описанной выше технологии до их предпоследнего разведения (соответственно, до получения С11, С29, С199) и затем вносят в соответствии с составом смеси в одну емкость по одной части каждого компонента и смешивают с требуемым количеством растворителя (соответственно, с 97 частями для сотенного разведения). При этом получают активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору I типа человека в сверхмалой дозе, полученной сверхразведеним исходного матричного раствора в 100¹², 100³⁰, 100²⁰⁰ раз, что эквивалентной смеси сотенных гомеопатических разведении С12, С30, С200.

Возможно использование смеси других различных гомеопатических разведении, например, десятичных и/или сотенных (D20, С30, С100 или С12, С30, С50 и т.д.), эффективность которых определяют экспериментально.

При потенцировании вместо встряхивания (вертикального или горизонтального) в процессе уменьшения концентрации также можно осуществлять внешнее воздействие ультразвуком, электромагнитным или иным физическим воздействием.

Заявленное лекарственное средство может быть приготовлено в виде фармацевтической композиции, при этом водные или водно-спиртовые растворы действующих компонентов (активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору I типа человека и к мозгоспецифическому белку S-100) смешивают, преимущественно, в объемном соотношении 1:1 и используют в жидкой лекарственной форме.

Заявленное лекарственное средство может быть использовано в твердой лекарственной форме, которая содержит эффективное количество гранул нейтрального носителя - лактозы, насыщенного путем пропитывания до насыщения водным или водно-спиртовым раствором активированной-потенцированной формы антител к каннабиноидному рецептору человека или активированной-потенцированной формы антител к каннабиноидному рецептору человека в сочетании с активированной-потенцированной формой антител к мозгоспецифическому белку S-100, и фармацевтически приемлемые добавки, включающие, преимущественно, лактозу, целлюлозу микрокристаллическую и магния стеарат.

Твердую лекарственную форму приготовляют таблетированием из таблеточной массы, которая содержит 8÷10 масс. частей гранул лактозы, орошенных в псевдоожиженном-кипящем слое водным или водно-спиртовым раствором активированной-потенцированной формы антител к каннабиноидному рецептору I типа человека, 2÷7 масс. частей увлажненной 70% спиртом лактозы, пропитанных до насыщения водным или водно-спиртовым раствором активированной-потенцированной формы антител к каннабиноидному рецептору I типа человека, и фармацевтически приемлемые добавки, включающие 75÷95 масс. частей чистой лактозы, 8÷15 масс. частей микрокристаллической целлюлозы и 0,8÷1,2 масс. частей стеарата магния. Масса таблетки может составлять 150÷500 мг. Предпочтительно использовать таблетки массой 250÷300 мг, которые включают 3,0÷6,0 мг/табл активированной-потенцированной формы водно-спиртовых разведении субстанции - действующего вещества поликлональных кроличьих антител к каннабиноидному рецептору I типа человека или активированной-потенцированной формы антител к каннабиноидному рецептору человека в сочетании с активированной-потенцированной формой антител к мозгоспецифическому белку S-100, очищенных на антигене, в сверхмалой дозе, полученной сверхразведением исходного матричного раствора в 100¹²,100³⁰, 100²⁰⁰ раз, эквивалентной смеси сотенных гомеопатических разведении С12, С30, С200.

Предпочтительно для эффективного лечения применять заявленное лекарственное средство по 1÷2 таблетке (держать во рту до полного растворения) 2÷6 раз в день.

Для проведения экспериментальных исследований были использованы поликлональные антитела, приготовленные по заказу специализированной фармацевтической фирмой.

Пример 1.

Для лечения ожирения неоднократно проводились попытки использовать психоактивные вещества (антидепрессанты, ноотропы, различные эндорфины, энкефалины, эндоканнабиноиды), воздействующие на систему позитивного эмоционального подкрепления и, прежде всего, функциональную активность «центров удовольствия» в латеральном гипоталамусе. Однако из-за выраженных побочных действий, развития привыкания (пристрастия) эффективное и одновременно безопасное лекарственное средство центрального действия до сих пор не создано.

Заявленное лекарственное средство по направленности действия - рецептор каннабиноидный 1 типа - является центральным, но в связи использованием особой технологии потенцирования оказывает воздействие на рецептор, приводящее к его сенситизации и вследствие этого - повышению чувствительности к эндогенным каннабиноидам.

Данный эффект подтверждается следующим экспериментом: проведено изучение влияния препарата на основе активированной-потенцированной формы поликлональных кроличьих антител к каннабиноидному рецептору I типа человека, очищенных на антигене, в сверхмалой дозе, полученной сверхразведением исходного матричного раствора в 100¹², 100³⁰, 100²⁰⁰ раз, эквивалентной смеси сотенных гомеопатических разведении С12, С30, С200 (сверхмалые дозы - СМД анти-КР) на функциональное состояние каннабиноидного рецептора 1 типа {in vitro) в 2 режимах: в режиме агониста и в режиме антагониста.

Режим агониста:

Перед внесением в лунки микропланшета (96-луночный планшет, объем лунки 250μl) клетки суспендировали в буфере HBSS (Invitrogen), содержащем 20 мМ HEPES (рН=7.4). Клетки проинкубировали в течение 10 минут при комнатной температуре вместе с добавлением 20 мкл препарата СМД анти-КР. После преинкубации в лунки добавляли активатор аденилатциклазы NKH477. Клетки инкубировали в течение 10 минут 37°С и лизировали. В лунки вносили флуоресцентный акцептор (цАМФ, меченный D2) и флуоресцентный донор (антитела к цАМФ, меченные криптатом европия).

В качестве базального контроля вместо препарата СМД анти-КР суспензию клеток проинкубировали в присутствии HBSS буфера (20 мкл). В качестве стимулированного контроля вместо СМД анти-КР суспензию клеток преинкубировали в присутствии референсного агониста СР 55940 (20 мкл).

Функциональную активность (по концентрации цАМФ) оценивали методом гомогенной флуоресценции с временным разрешением (HTRF). Интенсивность флуоресценции в базальном контроле принимается за фоновую и ее значение вычитается из интенсивностей флуоресценции в опыте (СМД анти-КР) и контроле (СР 55940):

Измеренный специфический ответ клетки на введение СМД анти-КР вычисляется по формуле: интенсивность флуоресценции в опыте (СМД анти-КР) - интенсивность флуоресценции в базальном контроле.

Измеренный специфический ответ клетки на введение референсного агониста (СР 55940) вычисляется по формуле: интенсивность флуоресценции в контроле (СР 55940) - интенсивность флуоресценции в базальном контроле.

Результаты выражаются в процентах от специфического ответа клетки на введение референсного агониста в стимулированном контроле:

% ответа референсного агониста = ((измеренный специфический ответ / специфический ответ в контроле на введение референсного агониста) × 100%).

Режим антагониста:

Перед внесением в лунки микропланшета (96-луночный планшет, объем лунки 250μl) клетки суспендировали в буфере HBSS (Invitrogen), содержащем 20 мМ HEPES (рН=7.4). Клетки проинкубировали в течение 5 минут при комнатной температуре вместе с добавлением 20 мкл препарата СМД анти-КР. После добавления в лунки референсного агониста СР 55940 клетки инкубировали 10 минут при комнатной температуре. Далее в лунки добавляли активатор аденилатциклазы NKH477. Клетки инкубировали в течение 10 минут 37°С и лизировали. В лунки вносили флуоресцентный акцептор (цАМФ, меченный D2) и флуоресцентный донор (антитела к цАМФ, меченные криптатом европия).

В качестве базального контроля вместо СМД анти-КР суспензию клеток преинкубировали в присутствии референсного антагониста AM 281 (20 мкл). В лунки с базальным контролем не добавляли референсный агонист СР 55940. В качестве стимулированного контроля суспензию клеток преинкубировали в присутствии HBSS буфера, содержащего 20 мМ HEPES (рН=7.4), и референсного агониста СР 55940 (20 мкл).

Функциональную активность (по концентрации цАМФ) оценивали методом гомогенной флуоресценции с временным разрешением (HTRF). Интенсивность флуоресценции в базальном контроле принимается за фоновую и ее значение вычитается из интенсивностей флуоресценции в опыте (СМД анти-КР) и контроле (СР 55940):

Измеренный специфический ответ клетки на введение СМД анти-КР вычисляется по формуле: интенсивность флуоресценции в опыте (СМД анти-КР) - интенсивность флуоресценции в базальном контроле.

Измеренный специфический ответ клетки на введение референсного агониста (СР 55940) вычисляется по формуле: интенсивность флуоресценции в контроле (СР 55940) - интенсивность флуоресценции в базальном контроле.

Результаты выражаются в процентах ингибирования специфического ответа клетки на введение референсного агониста (СР 55940) в контроле:

% ингибирования ответа референсного агониста = 100% - ((измеренный специфический ответ / специфический ответ в контроле на введение референсного агониста) × 100%)

В результате исследований показано (см. таблицу 1), что СМД анти-КР изменяет функциональную активность каннабиноидного рецептора 1 типа, оцененную по концентрации внутриклеточной цАМФ.

Образец (сверхмалые дозы антител к каннабиноидному рецептору I типа (смесь гомеопатических разведении С12+С30+С200)) проявляет свойства агониста каннабиноидному рецептору I типа, выраженность модифицирующего эффекта которого составляет 21% от эффекта стандартного агониста СР 55940 (эффект стандартного агониста принимается за 100%).

Таблица 1. Рецептор Препарат Содержание СМД анти-КР в лунке (% по объему) (общий объем всех соединений в лунке равен 200 мкл) Режим агониста Режим агониста Пояснения к результатам % ответа на СМД анти-КР Стандартный агонист % ингибирования ответа агониста Стандартный антагонист СВ1-Рецептор каннабиноидный 1 типа СМД анти-КР 10% 21 CP 55940 0 AM 281 СМД анти-КР обладают эффектом агониета, выраженность которого составляет 21% от эффекта стандартного агониста (принимается за 100%)

Пример 2.

Для исследования свойств заявленного лекарственного средства был использован водный раствор активированной-потенцированной формы поликлональных кроличьих антител к каннабиноидному рецептору I типа человека, очищенных на антигене, в сверхмалой дозе, полученной сверхразведением исходного матричного раствора в 100¹², 100³⁰, 100²⁰⁰ раз эквивалентной смеси сотенных гомеопатических разведении С12, С30, С200 (сверхмалые дозы - СМД анти-КР).

В исследовании использованы 40 мышей-самцов линии С57В1 (вес на начало исследования 13,5-15,5 г). 10 мышей получали обычный стандартный корм (стандартная диета), 30 мышей - стандартный корм с высококалорийными добавками (высококалорийная диета) и одновременно либо дистиллированную воду (контроль, 0,4 мл/кг), либо сибутрамин¹ (¹Меридиа 10 мг капсулы,Abbott GMBH, Германия) (10 мг/кг), либо СМД анти-КР (0,4 мл/кг). Все препараты вводили внутрижелудочно 1 раз в день в течение 5 месяцев. До начала введения препаратов (исходно), а также каждую неделю после начала их введения измеряли потребление мышами корма. Потребление корма оценивали как среднее количество пищи (г), потребленного мышью за 1 и 2 месяца исследования, и как среднее количестве корма на 10 г массы тела мыши.

Мыши в группе низкокалорийной диеты потребляли в среднем за весь период наблюдения на 15% меньше корма, чем мыши на высококалорийной диете (табл.2). И сибутрамин и СМД анти-КР снижали потребление корма, причем эффект сибутрамина был выражен несколько выше: препарат снижал потребление корма в неделю на 19,3% (р<0,05), в то время как СМД анти-КР - только на 9,3% относительно контроля (р>0,05). На Таблице 2 представлены результаты влияния СМД анти-КР и сибутрамина на потребление пищи мышами С57В1 (средние значения за 5 месяцев наблюдения), М±m.

Таблица 2. Препарат Потребление корма (г/мышь) в день Потребление корма (г на 10 г массы тела) в день Стандартная диета 2,95±1,42 1,35±0,05 Высококалорийная диета + дистиллированная вода 3,41±1,64# 1,54±0,05# Высококалорийная диета + сибутрамин 2,75±1,36** 1,28±0,05** Высококалорийная диета + диетра 3,10±2,02 1,44±0,08 Примечание: ** - отличия от контроля достоверны, р<0,01;
# - отличия от стандартной диеты достоверны, р<0,05

Однако при анализе динамики потребления корма были выявлены следующие особенности. На двадцатой неделе эксперимента мыши на высокожировой диете, получавшие СМД анти-КР, потребляли больше корма по сравнению с первой неделей эксперимента, что показано на Таблице 3.

Таблица 3 Влияние СМД анти-КР и сибутрамина на прирост массы тела мышей С57В1 и потребление пищи на 10 г веса за последнюю 20-ю неделю эксперимента. Примечание: ** - отличия от контроля достоверны, р<0,01; *** - р<0,001

При этом у мышей, получавших СМД анти-КР, по-прежнему наблюдалось снижение прироста массы тела на 51,2% относительно контроля. Сибутрамин на последней двадцатой неделе эксперимента также снижал прирост массы тела на 51,5% по сравнению с контрольной группой.

Пример 3.

Для исследования свойств заявленного лекарственного средства был использован водный раствор активированной-потенцированной формы поликлональных кроличьих антител к каннабиноидному рецептору I типа человека, очищенных на антигене, в сверхмалой дозе, сверхмалой дозе, полученной сверхразведением исходного матричного раствора в 100¹², 100³⁰, 100²⁰⁰ раз, эквивалентной смеси сотенных гомеопатических разведении С12, С30, С200 (сверхмалые дозы - СМД анти-КР).

В исследовании использованы 33 мышей-самцов линии С57В1 (вес на начало исследования 13,09±0,738 г). Мыши получали модифицированную диету с высоким (45%) содержанием жира и одновременно либо дистиллированную воду (контроль, 0,2 мл/кг), либо сибутрамин (10 мг/кг), либо антител к каннабиноидному рецептору I типа человека, очищенных на антигене, смесь сотенных гомеопатических разведении С12+С30+С200 (сверхмалые дозы - СМД анти-КР) (0,2 мл/кг). Все препараты СМД анти-КР вводили внутрижелудочно 1 раз в день в течение 2 месяцев. До начала введения препаратов (исходно), а также каждую неделю после начала их введения измеряли вес мышей на электронных весах Philips Cucina HR 239016 (Венгрия). Прирост массы тела мышей оценивали в % от исходного.

Начиная с 6 недели введения, СМД анти-КР снижала прирост массы тела мышей, содержащихся на высокожировой диете. В таблице 3 представлена средняя еженедельная масса (г) мышей С57В16, получавших высокожировую диету и СМД анти-КР (0,2 мл/мышь) или сибутрамин 10 мг/кг) (М±m). На Таблице 4 показан прирост массы тела мышей.

Таблица 4. Группа Масса тела (г), недели исследования 0 1 2 3 4 5 6 7 8 Дистил. вода 12,18±0,501 15,27±0,982 15,27±0,488 16,00±0,972 18,18±0,569 17,27±0,557 20,18±0,501 20,55±0,608 21,45±0,857 Δ к исходному 25,4 25,4 31,3 49,3 41,8 65,7 68,7 76,1 Сибутрамин 13,82±1,094 13,45±0,474 16,73±0,407* 19,82±0,501** 20,18±0,784 20,91±0,563** 22,36±0,927 23,64±1,343 22,91±1,091 Δ к исходному -2,6 21,1 43,4 46,1 51,3 61,8 71,1 65,8 СМД анти-КР 13,27±0,619 16,18±0,182 17,45±0,282** 19,64±0,453** 20,18±0,423* 20,18±0,423** 19,82±0,501 21,64±0,364 22,00±0,467 Δ к исходному 21,9 31,4 47,9 52,1 52,1 49,43 63,0 65,8 Примечание: * - р<0,05 по отношению к группе контроля;
** - р<0,001 по отношению к группе контроля;

Таким образом, препарат СМД анти-КР снижает пророст массы тела мышей на высокожировой диете, снижая потребление ими пищи и не уступает по эффективности известному широко используемому для снижения массы тела препарату сибутрамину.

Пример 4.

Для исследования свойств заявленного лекарственного средства были использованы таблетки массой 300 мг, пропитанные водно-спиртовым раствором (6 мг/табл.) активированной-потенцированной формы поликлональных кроличьих антител к каннабиноидному рецептору I типа человека, очищенных на антигене, в сверхмалой дозе, полученной сверхразведением исходного матричного раствора в 100¹², 100³⁰, 100²⁰⁰ раз, эквивалентной смеси сотенных гомеопатических разведении С12, С30, С200 (сверхмалые дозы - СМД анти-КР).

В исследование принимали участие 80 добровольцев (20 мужчин и 60 женщин) в возрасте от 20 до 69 лет (средний возраст составил 40,2±1,26 года), 68,7% из которых страдали избыточной массой тела или ожирением (I-III степени), которые принимали по 1-й таблетке 2 раза в день.

В Таблице 5 представлены демографические и антропометрические показатели пациентов, включенных в исследование. В анализ безопасности были включены данные всех пациентов, участвовавших в исследовании (n=80). В течение всего периода наблюдения за пациентами отмечалась хорошая переносимость препарата. Нежелательные явления отсутствовали. Все пациенты исследуемых групп завершили лечение в сроки, установленные протоколом исследования, досрочно выбывших пациентов не было. При оценке влияния СМД анти-КР на изменение массы тела испытуемых выявлено, что использование препарата привело к снижению массы тела 56 (70%) пациентов. У 24 (30%) пациентов вес оставался неизменным, или незначительно увеличивался, однако следует отметить, что среди указанных пациентов 14 (17,5%) исходно имели нормальную массу тела (ИМК<25 кг/м²).

Таблица 5. Показатель Значение Возраст, лет М±m 40,2±1,26 Рост, см М±m 167,1±0,89 Вес, кг М±m 80,3±1,85 Пол мужчины 20 человек (25%) женщины 60 человек (75%) ИМТ, кг/м² М±m 28,7±0,6 ИМТ, кг/м² менее 25 25 человек (31,3%) Нормальная масса тела 25-29,99 28 человек (35%) Избыточная масса тела (предожирение) 30-34,99 20 человек (25%) Ожирение I степени 35-39,99 5 человек (6,2%) Ожирение II степени 40 и более 2 человек (2,5%) Ожирение III степени

В динамике наблюдения у пациентов, ответивших на терапию, отмечалось статистически достоверное снижение массы тела (р<0,001), которое уже через 15 дней приема СМД анти-КР составило 1,1 кг (1,3%), а через 1 месяц достигло 1,9 кг (2,2%) от исходного значения, что показано в Таблице 6.

Таблица 6. Примечание: *** - Р от исх <0,001

Также в указанной группе пациентов уже через 1 неделю после начала приема СМД анти-КР отмечалось статистически значимое (р<0,001) уменьшение окружности талии и окружности бедер, которое к окончанию терапии достигло 2,3% и 2,7% соответственно. В Таблице 7 представлена динамика изменения окружности талии и окружности бедер.

Таблица 7. День 1 (исх) День 7 День 14 День 15 День 16 День 22 День 29 День 30 окружность талии, см М±m, см 96,3±1,97 95,2±2,07 ** 93,7±1,82 *** 94,2±1,96 *** 95,1±2,16 *** 94,5±2,16 *** 94,3±2,10*** 94,1±2,07*** А от исх, % -1,1% -2,7% -2,2% -1,2% -1,9% -2,1% -2,3% окружность бедер, см М±m, см 110,8±1,52 110,8±1,66*** 109,3±1,37** 109,9±1,50*** 108,7±1,60*** 108,3±1,56*** 108,1±1,58*** 107,8±1,69*** Δ от исх, % 0,0% -1,4% -0,8% -1,9% -2,3% -2,4% -2,7% Примечание: ** - Р от исх <0,01; *** - Р от исх <0,001

При оценке выраженности чувства голода пациентов по Визуальной аналоговой шкале (ВАШ) исходно показано, что наибольшая интенсивность чувства голода отмечалось у пациентов в вечернее время. По окончании 1 месяца приема СМД анти-КР уровень голода в вечерние часы снизился достоверно (р<0,001) с 49,4±3,75 до 42,0±4,32 баллов. В утреннее и дневное время также отмечалась тенденция к снижению выраженности чувства голода (с 20,5±3,23 до 13,6±1,78 баллов в утренние часы, с 44,7±3,45 до 27,3±3,72 баллов в дневные часы), которая, однако, не достигла статистически значимых значений к окончанию терапии, что возможно связано с недостаточным числом пациентов и умеренными исходными значениями показателей.

Таким образом, в проведенном клиническом исследовании СМД анти-КР подтверждена высокая переносимость препарата, нежелательные явления при приеме препарата отсутствовали.

Пример 5.

В трех экспериментальных исследованиях изучали эффекты антител к каннабиоидному рецептору 1 типа, аффинно очищенных на антигене, в сверхмалой дозе, полученной сверхразведением исходного матричного раствора с концентрацией 2.5 мг/мл в 100¹², 100³⁰, 100²⁰⁰ раз (AT KP) в сравнении с антителами к белку S100, аффинно очищенными на антигене, в сверхмалой дозе, полученной сверхразведением исходного матричного раствора в 100¹², 100³⁰, 100²⁰⁰ раз (AT S100), и их комбинацией (AT S100 + AT KP).

Влияние на никотин-индуцированное повышение двигательной активности мышей.

В исследовании использовано 40 белых неинбредных мышей-самцов (22-25 г, 1,5 мес.). 10 мышей были интактными. Остальным в течение 4 дней вводили никотин подкожно в дозе 0,3 мг/кг, а также дистиллированную воду (контроль, 0,4 мл/мышь), AT S100 (0,4 мл/мышь), AT KP (0,4 мл/мышь) и AT S100 + AT KP (0,4 мл/мышь) внутрижелудочно за 1 час до введения никотина. Через 30 минут после последнего введения никотина проводили тест «открытое поле». Животных помещают в центр фотосенсорной установки Tru Scan (Coulboum, США), где в течение 2 минут автоматически регистрируют показатели вертикальной и горизонтальной активности. Эта модель позволяет оценить влияние исследуемых соединений на двигательно-исследовательскую активность животных (Howard et al., 1997). Параметры установки: размер 270×270×360 мм, разделена на 64 квадрата 2.5×2.5, с отверстиями 25 мм, расположенными в полу платформы, освещение лампой 150 Вт.

Никотин является алкалоидом, содержащимся в растениях семейства пасленовых, преимущественно в табаке, и обладающий выраженной психотропной активностью. Действие никотина опосредовано через периферические и центральные н-холинорецепторы. Влияние никотина на поведение человека и животных весьма разнообразно. В зависимости от дозы введение в организм данного алкалоида может вызывать развитие тревожно-депрессивной симптоматики, эйфории, возбуждения или наоборот спокойствия. Кроме того, при длительном применении никотина формируется зависимость. Препараты, применяемые для облегчения отказа от курения, в том числе направлены на устранение патологических изменений в психоэмоциональной сфере, что облегчает избавление пациентов от патологического пристрастия к табаку.

В настоящем исследовании введение никотина приводило к повышению двигательной активности мышей: время активности увеличилось на 8,2% (р<0,05), пройденная дистанция - на 5,1%, количество исследованных отверстий - на 78,2% (р<0,05), время исследовательской реакции - на 76,9%, а время неподвижности, наоборот, уменьшилось на 13,5% (р<0,05) по сравнению с интактными животными.

AT S100 не оказывал значимого влияния на исследованные параметры по сравнению с контрольной группой. AT KP снижал время активности и пройденную дистанцию до уровня интактных мышей, однако не оказывал влияния на время неподвижности, количество исследованных отверстий и время исследовательской реакции. В тоже время, комбинированное введение AT S100 и AT KP снижало время активности и, соответственно, повышало время неподвижности до уровня интактных животных, значительно снижало пройденную дистанцию (на 29,2% по сравнению с контролем и на 25,5% по сравнению с интактными) и несколько снижало исследовательскую активность (количество исследованных отверстий снижалось на 15,3%, время исследовательской реакции - снижалось на 17,4%).

Таким образом, введение AT KP, также как и совместное применение AT S100 + AT KP, способствует устранению изменений в поведении животных, вызванных введением никотина. Использование комплекса AT S100 + AT KP было более эффективным по сравнению с введением AT KP. Введение AT S100 в данной модели не оказывало влияния на поведение животных.

В Таблице 8 показано влияние препаратов на двигательную активность мышей.

Таблице 8. Влияние препаратов на двигательную активность мышей (тест открытое поле), М±m Время активности, сек Дистанция движения, см Время неподвижности, сек Кол-во исслед. отверстий Время исслед. реакции Интактные 74,1±1,9 393,6±19,6 46,0±2,0 5,5±1,0 2,6±0,6 Контроль 80,2±1,3* 413,7±15,4 39,8±1,3* 9,8±1,4* 4,6±0,9# AT S100 76,5±1,4 434,4±23,5 43,5±1,4 10,0±1,1** 5,1±1,0# АТ КР 72,4±1,4## 366,3±19,1 47,6±1,4## 9,8±0,8 5,6±1,1*# AT S100 + АТКР 74,5±2,8 393,1±28 45,5±2,9 8,3±1,5 3,8±0,7 отличия от интактных достоверны: * - р<0,05
отличия от контроля достоверны: # - р<0,05; ## - р<0,01

Пример 6.

Для исследования свойств заявленного лекарственного средства для лечения пациентов группы активного препарата были использованы таблетки массой 300 мг, пропитанные фармацевтической композицией, содержащей водно-спиртовые растворы (6 мг/табл.) активированных-потенцированных форм поликлональных кроличьих антител к каннабиноидному рецептору I типа (анти-СВ1) и к мозгоспецифическому белку S-100 в сверхмалых дозах (СМД анти-S100), полученных сверхразведением исходного матричного раствора с концентрацией 2,5 мл/мл в 100¹², 100³⁰, 100²⁰⁰ раз, эквивалентных смеси сотенных гомеопатических разведении С12, С30, С200. Для лечения пациентов группы сравнения были использованы таблетки массой 300 мг, пропитанные водно-спиртовым раствором (6 мг/табл.) активированной-потенцированной формы поликлональных кроличьих антител к каннабиноидному рецептору I типа человека, очищенных на антигене, в сверхмалой дозе (СМД анти-СВ1), полученной сверхразведением исходного матричного раствора в 100¹², 100³⁰, 100²⁰⁰ раз, эквивалентной смеси сотенных гомеопатических разведении С12, С30, С200 (препарат сравнения).

В сравнительное двойное слепое плацебоконтролируемое исследование оценки эффективности композиции СМД анти-S100 и анти-СВ1 в лечении никотиновой зависимости были включены 59 пациентов, имеющих желание бросить курить, в том числе 22 пациента в группу активного препарата (СМД анти-S100 + анти-СВ1 по 1 таблетке 3 раза в день), 17 пациентов в группу препарата сравнения (СМД анти-СВ1 по 1 таблетке 3 раза в день) и 20 человек в группу плацебо (по 1 таблетке, содержащей гранулы нейтрального носителя (лактозы), не насыщенного водным или водно-спиртовым раствором активированной-потенцированной формы антител, и фармацевтически приемлемые добавки, массой 300 мг 3 раза в день). Длительность терапии составила 12 недель. Все три группы пациентов были сопоставимы по исходным демографическим, антропометрическим и клинико-лабораторным показателям. Все пациенты имели никотиновую зависимость легкой степени по результатам теста Фагерстрома (менее 4 баллов), стаж курения не менее одного года и ожирение 1 степени (индекс массы тела [ИМТ]=30,0-34,9 кг/м²). Все пациенты исследуемых групп завершили лечение в сроки, установленные протоколом исследования, досрочно выбывших пациентов не было.

При анализе эффективности терапии выявлено, что число пациентов, отказавшихся от курения, увеличивалось в динамике наблюдения среди пациентов, получавших анти-S100 + анти-СВ1 и анти-СВ1 (Таблица 9).

Таблица 9 Динамика основных показателей в зависимости от вида терапии Период Анти-S100 + анти-СВ1 (M+SE) Анти-СВ1 (M±SE) Плацебо (M±SE) Тест Фагерстрома, баллы (n - число курящих) Исходно 2,64±0,10 (n=22) 2,65±0,12 (n=17) 2,65±0,11 (n=20) Исходно *** 2,67±0,14 (n=12) 2,58±0,14 (n=12) 2,66±0,11 (n=18) 12 нед 1,33±0,14*#(n=12) 1,25±0,13* (n=12) 2,39±0,26 (n=18) Доля пациентов, отказавшихся от курения, % 4 нед 23% (n=5) 12% (n=2) 5% (n=1) 8 нед 36% (n=8) 24% (n=4) 5% (n=1) 12 нед 41% (n=10) 29% (n=5) 10% (n=2) Шкала симптомов отмены MPSS, баллы (n - число отказавшихся от курения) 4 нед 33,4±1,25 (n=5) 33,00±2,00 (n=2) 36 (n=1) 8 нед 28,12±1,02 (n=8) 25,50±2,22 (n=4) 34 (n=1) 12 нед 14,85±2,41* ** (n=10) 20,80±1,62* (n=5) 32,50±0,50 (n=2) Госпитальная шкала тревоги и депрессии HADS, баллы (n - число обследованных пациентов) Исходно 11,73±0,36 (n=22) 11,41±0,50 (n=17) 11,4±0,44 (n=20) 4 нед 10,32±0,32 (n=22) 10,47±0,30 (n=17) 11,95±0,45 (n=20) 8 нед 8,59±0,33 (n=22) 9,88±0,32 (n=17) 12,55±0,35 (n=20) 12 нед 7,68±0,46* # (n=22) 9,41±0,35 (n=17) 12,05±0,18 (n=20) Примечание: * достоверность различий с группой плацебо, р<0,05;
** достоверность различий групп Анти-S100 + анти-СВ1 и анти-CB1, р<0,05; # достоверность различий с исходным показателем
*** подгруппа пациентов, не сумевших отказаться от курения.

В группе активного препарата доля пациентов, бросивших курить, через 4 недели лечения составила 23%, через 8 недель - 36%, а к концу 12 недель она достигла 41%; в группе препарата сравнения соответствующие показатели составили 12%, 24% и 29% (против 5%, 5% и 10% соответственно в группе плацебо). Разница в эффективности лечения по главному показателю по сравнению с плацебо-терапией составила 31% (для группы анти-S100 + анти-СВ1) и 19% (для группы анти-СВ1) и была значимой. Активный препарат по эффективности существенно превосходил не только плацебо, но препарат сравнения.

Оценка влияния композиции СМД анти-S100 и анти-СВ1 на выраженность никотиновой зависимости показала существенное ее снижение как в целом по группе, так в подгруппе пациентов, не сумевших отказаться от курения. Если исходная средняя сумма баллов по тесту Фагерстрома у них была 2,67±0,14, то через 12 недель лечения она уменьшилось до 1,33±0,14, причем снижение было значимым не только при сопоставлении с базовыми показателями, но и со значениями группы плацебо. Пациенты, получавшие монокомпонентный препарат сравнения анти-СВ1 и не бросившие курить, также демонстрировали позитивную динамику в отношении выраженности их никотиновой зависимости, которая к концу 3 месяцев терапии была значимо ниже по сравнению с исходной и с результатами плацебо-терапии.

Выраженность симптомов отмены по данным шкалы Mood and Physical Symptoms Scale (MPSS) среди пациентов, отказавшихся от курения, постепенно снижалась в ходе наблюдения, достигая минимальных значений к 12 недели лечения как двух-, так и однокомпонентным препаратом (Таблица 9). Наименьшая сумма баллов регистрировалась у пациентов группы активного препарата, свидетельствуя о том, что композиции СМД анти-S100 и анти-СВ1 позволяла более легко и безболезненно переносить отказ от курения, в том числе при сравнении с монокомпонентным препаратом.

Учитывая возможную роль активации эндоканнабиноидной системы в развитии ожирения, был проведен анализ влияния композиции aнти-S100 + aнти-CB1 и анти-СВ1 на массу тела в процессе приема лекарственных средств. Исходный подсчет ИМТ позволил включить пациентов с ожирением 1 степени во все исследуемые группы. В Таблице 10 представлены результаты мониторирования массы тела пациентов трех групп, которые свидетельствуют о ее существенном снижении в группах активного препарата и препарата сравнения, начиная с 8 недели терапии.

Таблица 10 Усредненные различия между исходным и текущим весом (в кг) на каждом из визитов Период Анти-S100 + анти-СВ1 (n=22; M±SE) Анти-СВ1 (n=17; M±SE) Плацебо (n=20; M±SE) 0 0±0,0 0±0,0 0±0,0 2 нед -1,2±0,5 -0,9±0,3 -0,4±0,2 4 нед -1,7±0,4 -1,5±0,5 -0,5±0,4 6 нед -2,5±0,4 -2,2±0,6 -1,3±0,4 8 нед -3,1±0,7* -2,8±0,7* -1,3±0,4 10 нед -3,8±0,6* -3,4±0,8* -1,8±0,5* 12 нед -4,2±0,9* -3,8±1,0* -1,8±0,6* Примечание: Для расчета оценки достоверности уменьшения показателей использовался двусторонний критерий Стьюдента в модификации Даннетта (Dunnett) для выполнения сравнений веса в контрольном визите (визит 0) со всеми последующими визитами. Значимые различия (р<0,05) отмечены звездочками.

В результате 12-недельного курса лечения масса тела в обеих группах значимо снизалась по сравнению с показателями группы плацебо. В целом за 3 месяца терапии около половины пациентов (52% и 47%), получавших лечение, снизили свой вес на 5% и более по сравнению с исходным состоянием (против 15% пациентов в группе плацебо; р<0,05) (Таблица 11).

Таблица 11. Доли пациентов с потерей веса на 5 и более процентов Примечание: * Сравнение долей пациентов в трех группах производилось с помощью одностороннего точного критерия Фишера по каждому из визитов.

Оценка безопасности терапии, проводимая на основе регистрации нежелательных явлений в период лечения и повторного исследования лабораторных показателей, свидетельствовала о хорошей переносимости препаратов. В анализ безопасности были включены данные всех пациентов, участвовавших в исследовании (n=59). Не выявлено негативного воздействия лечения на центральную нервную систему, какие-либо психические расстройства отсутствовали. Это подтверждалось мониторингом показателей с помощью Госпитальной шкалы тревоги (см. Приложение 2) и депрессии (HADS) (см. Приложение 3) (Таблица 9). Более того, активный препарат демонстрировал свое положительное влияние, оказывая нивелирующее влияние на выраженность симптомов тревоги и депрессии, которая значимо снижалась к концу терапии при сопоставлении значений с исходными показателями и результатами группы плацебо. Нежелательные явления, связанные с приемом лекарственного средства, со стороны других органов и систем, отсутствовали. Исследование лабораторных показателей, включая общий и биохимический анализы крови, клинический анализ мочи, не зафиксировало каких-либо значимых отклонений от нормальных значений.

Таким образом, исследование продемонстрировало эффективность и безопасность композиции СМД анти-S100 и анти-СВ1 в лечении никотиновой зависимости легкой степени. Эффект лечения заключался в высоком проценте пациентов, отказавшихся от курения, нивелировании симптомов абстинентного синдрома в ходе терапии, снижении выраженности никотиновой зависимости у тех пациентов, которые не смогли бросить курить. Все отмеченные эффекты имели значимые различия по сравнению с результатами группы плацебо и, кроме того, превосходили положительные результаты, которые давала терапия монокомпонентным препаратом, в состав которого входят СМД анти-CB1. Профиль безопасности был одинаково высоким у обоих препаратов. И композиция СМД анти-S100 + анти-СВ1, и монокомпонентный препарат СМД анти-СВ1 не приводили к появлению клинически выраженной тревоги/депрессии. В качестве дополнительного критерия эффективности СМД анти-S100 + анти-СВ1 и анти-СВ1 продемонстрировано снижение массы тела у пациентов с ожирением 1 степени.

Пример 7.

Для исследования свойств заявленного лекарственного средства для лечения пациентов группы активного препарата были использованы таблетки массой 300 мг, пропитанные водно-спиртовым раствором (6 мг/табл.) активированных-потенцированных форм поликлональных кроличьих антител к каннабиноидному рецептору I типа (анти-СВ1) и к мозгоспецифическому белку S-100 (анти-S100), в сверхмалых дозах (СМД), полученных сверхразведением исходного матричного раствора с концентрацией 2,5 мг/мл в 100¹², 100³⁰, 100²⁰⁰ раз, эквивалентных смеси сотенных гомеопатических разведении С12, С30, С200. Для лечения пациентов группы сравнения были использованы таблетки массой 300 мг, пропитанные водно-спиртовым раствором (6 мг/табл.) активированной-потенцированной формы поликлональных кроличьих антител к каннабиноидному рецептору I типа человека, очищенных на антигене, в сверхмалой дозе (СМД анти-СВ1), полученной сверхразведением исходного матричного раствора в 100¹², 100³⁰, 100²⁰⁰ раз, эквивалентной смеси сотенных гомеопатических разведении С12, С30, С200 (препарат сравнения).

С целью оценки эффективности композиции СМД анти-S100 и анти-СВ1 в лечении тяжелой никотиновой зависимости было проведено двойное слепое плацебоконтролируемое сравнительное исследование с участием 61 пациента, которые были рандомизированы в три группы, в том числе, 18 пациентов в группу активного препарата (СМД анти-S100 + анти-СВ1 по 1 таблетке 4 раза в день), 22 пациента в группу препарата сравнения (СМД анти-СВ1 по 1 таблетке 4 раза в день) и 21 пациент в группу плацебо (по 1 таблетке, содержащей гранулы нейтрального носителя (лактозы), не насыщенного водным или водно-спиртовым раствором активированной-потенцированной формы антител, и фармацевтически приемлемые добавки, массой 300 мг 4 раза в день). Длительность терапии составила 12 недель. Пациенты трех групп были сопоставимы по исходным показателям, включая демографические, физикальные и лабораторные данные; по результатам первичной оценки теста Фагерстрома все участники исследования имели никотиновую зависимость тяжелой степени (≥7 баллов) и стаж курения более трех лет. В ходе ежемесячных визитов пациентам проводилось физикальное и лабораторное обследования, тестирование (тест Фагерстрома (см. Приложение 1), Госпитальная шкала тревоги (см. Приложение 2) и депрессии (HADS) (см. Приложение 3)), у пациентов, отказавшихся от курения, отмечались симптомы отмены (шкала Mood and Physical Symptoms Scale (MPSS)). Все пациенты исследуемых групп завершили лечение в сроки, установленные протоколом исследования, досрочно выбывших пациентов не было.

В таблице 12 приведена динамика основных показателей в зависимости от вида терапии.

Анализ эффективности терапии показал, что число пациентов, отказавшихся от курения, увеличивалось в динамике наблюдения среди пациентов, получавших анти-S100 + анти-СВ1 и анти-СВ1 (см. Таблицу 12).

Таблица 12 Динамика основных показателей в зависимости от вида терапии Период Анти-S100 + анти-СВ1 (M±SE) Анти-СВ1 (M±SE) Плацебо (M±SE) Тест Фагерстрома, баллы (n - число курящих) Исходно 8,78±0,26 (n=18) 8,55±0,26 (n=22) 8,52±0,24 (n=21) Исходно *** 8,92±0,34 (n=12) 8,47±0,24 (n=17) 8,47±0,25 (n=20) 12 нед 4,50±0,26 * ** # (n=12) 6,11±0,26*# (n=17) 8,73±0,23 (n=19) Доля пациентов, отказавшихся от курения, % 4 нед 11% (n=2) 9% (n=2) 5% (n=1) 8 нед 22% (n=4) 14% (n=3) 5% (n=1) 12 нед 30% (n=6) 23% (n=5) 10% (n=2) Шкала симптомов отмены MPSS, баллы (n - число отказавшихся от курения) 4 нед 54,33±1,2 (n=2) 54,50±0,50 (n=2) 54 (n=1) 8 нед 46,75±1,89 (n=4) 47,33±0,67 (n=3) 50 (n=1) 12 нед 38,67±0,88 * ** (n=6) 45,25±1,11 * (n=5) 53,00±1,00 (n=2) Госпитальная шкала тревоги и депрессии HADS, баллы (n - число обследованных пациентов) Исходно 12,61±0,36 (n=18) 12,50±0,29 (n=22) 11,81±0,38 (n=21) 4 нед 11,17±0,31 (n=18) 11,95±0,25 (n=22) 13,05±0,47 (n=21) 8 нед 9,56±0,30 (n=18) 10,86±0,22 (n=22) 13,24±0.39 (n=21) 12 нед 7,72±0,32 * # (n=18) 9,50±0,19 * # (n=22) 12,67±0,23 (n=21) Примечание: * достоверность различий с группой плацебо, р<0,05;
** достоверность различий групп Анти-S100 + анти-СВ1 и анти-СВ1, р<0,05;
*** подгруппа пациентов, не сумевших отказаться от курения.
* достоверность различий с исходным показателем, р<0,05.

Доля пациентов, бросивших курить, в группе активного препарата через 4 недели лечения составила 11%, через 8 недель - 22%, а к концу 12 недель она достигла 30%; в группе препарата сравнения соответствующие показатели были 9%, 14% и 23% (против 5%, 5% и 10% соответственно в группе плацебо). Эффективность лечения композицией анти-S100 + анти-СВ1 по главному показателю превышала терапию плацебо на 20% (р<0,05), монокомпонентную терапию анти-СВ1 - на 13%.

Выраженность никотиновой зависимости под влиянием композиции СМД анти-S100 и анти-СВ1 существенно снизилась как в целом по группе, так в подгруппе пациентов, не сумевших отказаться от курения (см. Таблицу 12). Исходная средняя сумма баллов по тесту Фагерстрома у них была 8,92±0,34, а через 12 недель лечения она уменьшилось почти вдвое - до 4,50±0,26, причем снижение было значимым не только при сопоставлении с базовыми показателями, но и со значениями пациентов групп препарата сравнения (анти-СВ1) и плацебо.

Эффективность композиции анти-S100 + анти-СВ1 проявлялась также в более низких, по сравнению с анти-СВ1 (р<0,05) и плацебо (р<0,005), показателях симптомов отмены никотина, которые по данным шкалы MPSS снижались в ходе лечения и достигали минимальных значений к 12 недели лечения.

Оценка безопасности терапии, в анализ которой были включены данные всех пациентов, участвовавших в исследовании (n=61), проводилась на основе регистрации нежелательных явлений в период лечения и повторного исследования лабораторных показателей. Итоги исследования свидетельствовали не только о хорошей переносимости обоих препаратов, но и об отсутствии каких-либо нежелательных явлений, связанных с приемом лекарственных средств. В том числе, не выявлено негативного воздействия препаратов на центральную нервную систему, включая какие-либо психические расстройства, что подтверждалось данными ежемесячной оценки симптомов с помощью HADS (см. Таблицу 12). Напротив, активный препарат оказывал нивелирующее влияние на выраженность симптомов тревоги и депрессии, которая значимо снижалась к концу терапии при сопоставлении значений с исходными показателями и результатами группы плацебо. Исследование лабораторных показателей, которые включали общий и биохимический анализы крови, клинический анализ мочи, не зарегистрировало каких-либо значимых отклонений от нормальных значений.

Таким образом, результаты исследования показали эффективность и безопасность композиции СМД анти-S100 + анти-СВ1 в лечении никотиновой зависимости тяжелой степени. Под влиянием 12-недельного курса лечения почти третья часть курильщиков смогла избавиться от никотиновой зависимости; данный показатель значимо превышал результаты использования плацебо. Композиция СМД анти-S100 + анти-СВ1 позволяла более легко и безболезненно переносить отказ от курения, чем монокомпонентный препарат анти-СВ1. Среди тех пациентов, которые не смогли отказаться от курения в ходе наблюдения, выраженность никотиновой зависимости существенно снизилась при использовании композиции анти-S100 + анти-СВ1 и была значимо ниже те только при сопоставлении с эффективностью плацебо, но и при сравнении с результатами лечения одним компонентом анти-CB1.

Оба лекарственных средства отличались высоким профилем безопасности, в том числе, отсутствием негативных влияний на центральную нервную систему.

Приложение 1

Тест Фагерстрома на никотиновую зависимость

Источник: Heatherton T.F., Kozlowski L.T., Frecker R.C., Fagerström K.O. The Fagerström test for nicotine dependence: a revision of the Fagerström Tolerance Questionnaire. Br J Addict 1991; 86:1119-27.

Описание: Пациент отвечает на все вопросы. Итоговый балл дает оценку степени зависимости от никотина.

Степень никотиновой зависимости оценивается по сумме баллов:

<4 - слабая зависимость

4-6 - зависимость средней степени

7-10 - тяжелая зависимость

1. Через сколько времени после пробуждения Вы закуриваете первую сигарету? Более чем 60 минут 0 31-60 минут 1 6-30 минут 2 менее 5 минут 3 2. Вам трудно удержаться от курения в местах где курить запрещено, например, на собрании, в самолете, в кино и т.п.? Нет 0 Да 1 3. От какой сигареты Вам труднее всего отказаться? от первой с утра 1 от любой другой 0 4. Сколько сигарет Вы выкуриваете в день? 10 или меньше 0 11-20 1 21-30 2 31 или больше 3 5. Вы курите в первые утренние часы чаще, чем в другое время суток? Нет 0 Да 1 6. Вы курите, даже если Вы больны и вынуждены лежать в постели большую часть дня? Нет 0 Да 1

Приложение 2

Шкала симптомов отмены (Mood and Physical Symptoms Scale, MPSS)

Источник: West R, Hajek P. Evaluation of the mood and physical symptoms scale (MPSS) to assess cigarette withdrawal. Psychopharmacology, 2004; Volume 177, Numbers 1-2, 195-199

Описание:

Пациент, отказавшийся от курения, дает ответы по 12 пунктам (оценка варьирует от 1 до 5 баллов по каждому пункту), оценивая свое самочувствие в течение последних 24 часов (пункты 1-7), тягу к курению (пункты 8-9) и выраженность физикальных симптомов (пункты 10-12). Пациент обводит только одну цифру в каждом пункте. Подсчет результатов можно проводить по трем отдельным доменам (М - пункты 1-7, С - пункты 8-9 и Р - пункты 10-12) или по общей сумме баллов, которая может колебаться от минимальной (12 баллов) до максимальной (60 баллов), отражая выраженность симптомов отмены никотина.

Пожалуйста, укажите по каждому пункту, как Вы себя чувствовали в течение последних 24 часов (Обведите только одну цифру в каждом пункте)

Не было В легкой степени Довольно сильно Очень сильно Чрезмерно сильно 1. Подавленность 1 2 3 4 5 2. Тревожность 1 2 3 4 5 3. Раздражительность 1 2 3 4 5 4. Беспокойство 1 2 3 4 5 5. Чувство голода 1 2 3 4 5 6. Нарушение концентрации внимания 1 2 3 4 5 7. Расстройство сна 1 2 3 4 5

8. В течение какого периода времени Вам хотелось курить за последние 24 часа? (Обведите только одну цифру)

Ни разу Очень недолго Меньшую часть суток Большую часть суток Почти все время Постоянно 0 1 2 3 4 5

9. Насколько сильным было желание курить? (Обведите только одну цифру)

Не было Легкое Умеренное Сильное Очень сильное Чрезмерно сильное 0 1 2 3 4 5

Были ли у Вас какие-либо проявления за последние 24 часа? (Обведите только одну цифру)

Нет Легкие Умеренные Тяжелые Очень тяжелые 10. Боли во рту 1 2 3 4 5 11. Запор 1 2 3 4 5 12. Кашель/боль в горле 1 2 3 4 5

Приложение 3

Госпитальная шкала тревоги и депрессии (HADS)

Источник: Zigmond A.S., Snaith R.P. The Hospital Anxiety and Depression scale // Acta Psychiatr. Scand. - 1983. - Vol.67. - P.361-370.

HADS относится к субъективным шкалам и предназначена для скринингового выявления тревоги и депрессии у пациентов соматического стационара и амбулаторных больных.

Методика применения: бланк шкалы выдается для самостоятельного заполнения пациенту и сопровождается инструкцией следующего содержания:

«Ученые уверены в том, что эмоции играют важную роль в возникновении большинства заболеваний. Если Ваш доктор больше узнает о Ваших переживаниях, он сможет лучше помочь Вам. Этот опросник разработан для того, чтобы помочь Вашему доктору понять, как Вы себя чувствуете. Не обращайте внимания на цифры и буквы, помещенные в левой части опросника. Прочитайте внимательно каждое утверждение и в пустой графе слева отметьте крестиком ответ, который в наибольшей степени соответствует тому, как Вы себя чувствовали на прошлой неделе.

Не раздумывайте слишком долго над каждым утверждением. Ваша первая реакция всегда будет более верной».

Шкала составлена из 14 утверждений, обслуживающих 2 подшкалы: «тревога» (нечетные пункты - 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13) и «депрессия» (четные пункты - 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14). Каждому утверждению соответствуют 4 варианта ответа, отражающие градации выраженности признака и кодирующиеся по нарастанию тяжести симптома от 0 (отсутствие) до 3 (максимальная выраженность).

Оценка тяжести состояния по Госпитальной шкале тревоги и депрессии

При интерпретации результатов учитывается суммарный показатель по каждой подшкале, при этом выделяются 3 области его значений: 0-7 - «норма» (отсутствие достоверно выраженных симптомов тревоги и депрессии); 8-10 - «субклинически выраженная тревога/депрессия»; 11 и выше - «клинически выраженная тревога/депрессия».

1 Я испытываю напряженность, мне не по себе - все время 3 - часто 2 - время от времени, иногда 1 - совсем не испытываю 0 2 То, что приносило мне большое удовольствие и сейчас вызывает у меня такое же чувство - определенно это так 0 - наверное, это так 1 - лишь в очень малой степени это так 2 - это совсем не так 3 3 Я испытываю страх, кажется, будто что-то ужасное может вот-вот случиться - определенно это так, и страх очень сильный 3 - да, это так, но страх не очень сильный 2 - иногда, но это меня не беспокоит 1 - совсем не испытываю 0 4 Я способен/способна рассмеяться и увидеть в том или ином событии смешное - определенно это так 0 - наверное, это так 1 - лишь в очень малой степени это так 2 - совсем не способен/способна 3 5 Беспокойные мысли крутятся у меня в голове - постоянно 3 - большую часть времени 2 - время от времени 1 - только иногда 0 6 Я испытываю бодрость - совсем не испытываю 3 - очень редко 2 - иногда 1 - практически все время 0 7 Я легко могу сесть и расслабиться - определенно это так 0 - наверное, это так 1 - лишь изредка это так 2 - совсем не могу 3 8 Мне кажется, что я стал (а) все делать очень медленно - практически все время 3 - часто 2 - иногда 1 - совсем нет 0 9 Я испытываю внутреннее напряжение или дрожь - совсем не испытываю 0 - иногда 1 - часто 2 - очень часто 3 10 Я не слежу за своей внешностью - определенно это так 3 - я не уделяю этому столько времени, сколько нужно 2 - может быть, я стал (а) меньше уделять этому внимания 1 - я слежу за собой так же, как и раньше 0 11 Я испытываю неусидчивость, словно мне постоянно нужно двигаться - определенно это так 3 - наверное, это так 2 - лишь в некоторой степени это так 1 - совсем не испытываю 0 12
Я считаю, что мои дела (занятия, увлечения) могут принести мне чувство удовлетворения - точно так же, как и обычно 0 - да, но не в той степени, чем раньше 1 - значительно меньше, чем обычно 2 - совсем так не считаю 3 13
У меня бывает внезапное чувство паники - очень часто 3 - довольно часто 2 - не так уж часто 1 - совсем не бывает 0 14
Я могу получить удовольствие от хорошей книги, радио- или телепрограммы - часто 0 - иногда 1 - редко 2 - очень редко 3

Изобретение относится к области медицины и представляет собой cпособ лечения ожирения, никотиновой зависимости и снижения тревоги при отмене курения путем введения в организм лекарственного средства центрального и периферического действия на основе активированной-потенцированной формы антител. Заявленный способ характеризуется тем, что лекарственное средство содержит активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору человека в виде активированного потенцированного водного или водно-спиртового раствора, полученного в процессе последовательного многократного разведения матричного раствора в водном или водно-спиртовом растворителе и промежуточного внешнего механического воздействия. Изобретение позволяет повысить эффективность лечения ожирения, никотиновой зависимости и снижения тревоги при отмене курения. 2 н. и 15 з.п. ф-лы, 12 табл., 7 пр.

1. Способ лечения ожирения, никотиновой зависимости и снижения тревоги при отмене курения путем введения в организм лекарственного средства центрального и периферического действия на основе активированной-потенцированной формы антител, характеризующийся тем, что лекарственное средство содержит активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору человека в виде активированного потенцированного водного или водно-спиртового раствора, полученного в процессе последовательного многократного разведения матричного раствора в водном или водно-спиртовом растворителе и промежуточного внешнего механического воздействия.

2. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что используют активированную-потенцированную форму антител к цельной молекуле или полипептидному фрагменту каннабиноидного рецептора I типа человека.

3. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что дополнительно вводят активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100 в виде активированного-потенцированного водного или водно-спиртового раствора, полученного в процессе последовательного многократного разведения матричного раствора в водном или водно-спиртовом растворителе и промежуточного внешнего механического воздействия.

4. Способ по п. 1 или 3, характеризующийся тем, что активированную-потенцированную форму антител используют для лечения ожирения и сопутствующих метаболических расстройств.

5. Способ по п. 1 или 3, характеризующийся тем, что активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору человека или активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору человека в сочетании с активированной-потенцированной формой антител к мозгоспецифическому белку S-100 используют для лечения зависимости от наркотических и/или психоактивных веществ.

6. Способ по п. 5, характеризующийся тем, что активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору человека или активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору человека в сочетании с активированной-потенцированной формой антител к мозгоспецифическому белку S-100 используют для лечения алкогольной зависимости.

7. Способ по п. 5, характеризующийся тем, что активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору человека или активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору человека в сочетании с активированной-потенцированной формой антител к мозгоспецифическому белку S-100 используют для лечения зависимости от табакокурения.

8. Способ по п. 1 или 3, характеризующийся тем, что используют лекарственное средство, выполненное в твердой лекарственной форме в виде таблетки, содержащей эффективное количество гранул нейтрального носителя, насыщенного водным или водно-спиртовым раствором активированной-потенцированной формы антител к каннабиноидному рецептору I типа человека или активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору человека в сочетании с активированной-потенцированной формой антител к мозгоспецифическому белку S-100, и фармацевтически приемлемые добавки.

9. Способ по п. 8, характеризующийся тем, что в процессе лечения вводят 1÷2 таблетки лекарственного средства 2÷6 раз в сутки.

10. Способ по п. 7, характеризующийся тем, что активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору человека или активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору человека в сочетании с активированной-потенцированной формой антител к мозгоспецифическому белку S-100 используют для лечения зависимости от табакокурения легкой степени по результатам теста Фагерстрома.

11. Способ по п. 7, характеризующийся тем, что активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору человека или активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору человека в сочетании с активированной-потенцированной формой антител к мозгоспецифическому белку S-100 используют для лечения зависимости от табакокурения тяжелой степени по результатам теста Фагерстрома.

12. Лекарственное средство центрального и периферического действия для лечения ожирения, никотиновой зависимости и снижения тревоги при отмене курения путем по п. 1, характеризующееся тем, что содержит активированную-потенцированную форму антител к каннабиноидному рецептору человека I типа в виде активированного-потенцированного водного или водно-спиртового раствора, полученного в процессе последовательного многократного разведения в водном или водно-спиртовом растворителе и промежуточного внешнего механического воздействия.

13. Лекарственное средство по п. 12, характеризующееся тем, что дополнительно содержит активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100 в виде активированного-потенцированного водного или водно-спиртового раствора, полученного в процессе последовательного многократного разведения матричного раствора в водном или водно-спиртовом растворителе и промежуточного внешнего механического воздействия.

14. Лекарственное средство по п. 12 или 13, характеризующееся тем, что водный или водно-спиртовой раствор активированной потенцированной формы антител получен путем многократного последовательного разведения и промежуточного внешнего воздействия из матричного раствора соответствующих аффинно очищенных антител с концентрацией 0,5÷5,0 мг/мл.

15. Лекарственное средство по п. 12 или 13, характеризующееся тем, что выполнено в твердой лекарственной форме и содержит эффективное количество гранул нейтрального носителя, насыщенного водным или водно-спиртовым раствором активированной-потенцированной формы соответствующих антител, и фармацевтически приемлемые добавки.

16. Лекарственное средство по п. 15, характеризующееся тем, что фармацевтически приемлемые добавки включают лактозу, целлюлозу микрокристаллическую и магния стеарат.

17. Лекарственное средство по п. 16, характеризующееся тем, что нейтральный носитель и фармацевтически приемлемые добавки формируют в виде таблетки, пропитанной 6 мл водного или водно-спиртового раствора активированной-потенцированной формы антител, массой 300 мг.