Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для лечения органических заболеваний нервной системы, в том числе эндогенно-органических и экзогенно-органических, для лечения психоорганического синдрома и энцефалопатий различного генеза, в том числе обусловленных острыми и хроническими расстройствами мозгового кровообращения, черепно-мозговыми травмами, нейроинфекциями, атеросклеротическими и нейродегенеративными поражениями головного мозга.
Психоорганический синдром - это симптомокомплекс, характеризующийся ослаблением памяти, снижением интеллекта, недержанием аффектов (триада Вальтер-Бюэля). Часто наблюдаются астенические явления. Нарушение памяти в той или иной степени затрагивает все ее виды. С наибольшим постоянством выявляется гипомнезия, в частности дисмнезия, возможны амнезии, конфабуляции. Объем внимания значительно ограничен, повышена отвлекаемость. Страдает качество восприятия, в ситуации улавливаются лишь частные детали. Ухудшается ориентировка, вначале в окружающем, а затем и в собственной личности. Уровень мышления снижается, что проявляется обеднением понятий и представлений, слабостью суждений, неспособностью адекватно оценивать ситуацию, свои возможности. Темп мыслительных процессов замедлен, торпидность мышления сочетается со склонностью к детализации, персеверациям. Психоорганический синдром (органический психосиндром) - это состояние психической слабости, обусловленное органическим поражением головного мозга (при сосудистых заболеваниях головного мозга, поражениях центральной нервной системы, при сифилисе, черепно-мозговых травмах, различных интоксикациях, хронических нарушениях обмена веществ, при опухолях и абсцессах головного мозга, энцефалите, а также при заболеваниях, сопровождающихся судорожными припадками). Но особенно часто психоорганический синдром возникает при атрофических процессах головного мозга в предстарческом и старческом возрасте (болезнь Альцгеймера, старческое слабоумие). В наиболее легкой форме психоорганический синдром представляет собой астеническое состояние со слабостью, повышенной истощаемостью, эмоциональной лабильностью, неустойчивостью внимания, снижением работоспособности. При тяжелых формах психоорганического синдрома на первое место выступает интеллектуально-мнестическое снижение, доходящее до степени слабоумия (деменция).
Органическими заболеваниями нервной системы являются сосудистые заболевания центральной нервной системы (последствия перенесенного инсульта, дисциркуляторная энцефалопатия), дегенеративные заболевания ЦНС, демиелизирующие заболевания нервной системы, наследственные заболевания ЦНС и др.
Болезнь Паркинсона - это хроническое, прогрессирующее органическое заболевание нервной системы (нейродегенеративное заболевание), обусловленное утратой клеток, содержащих дофамин. Дегенерация дофаминэргических нейронов приводит к нарушению синтеза дофамина и в конечном итоге к выраженным двигательным расстройствам, нарушению координации движений и ухудшению качества жизни пациентов.
Энцефалопатия - это общее название для невоспалительных (в отличие от энцефалита) заболеваний головного мозга. Энцефалопатия бывает врожденная и приобретенная (органические поражения головного мозга, связанные с отравлениями, инфекциями, алкоголизмом, травмами, гиповитаминозами, сосудистыми заболеваниями головного мозга, нехваткой витамина В1). Проявления: в основном неврозоподобные и психопатоподобные. Лечение энцефалопатии зависит от причины, ее вызвавшей.
Инсульт - это острое нарушение мозгового кровообращения, относящееся к цероброваскулярным заболеваниям, которое характеризуется внезапным (в течение нескольких минут, часов) появлением очаговой и/или общемозговой неврологической симптоматики, которая сохраняется более 24 часов или приводит к смерти больного в более короткий промежуток времени вследствие цереброваскулярной патологии. К инсультам относят инфаркт мозга, кровоизлияние в мозг и субарахноидальное кровоизлияние, имеющие этиопатогенетические и клинические различия.
Из уровня техники известно лечение психоорганического синдрома нейротропным лекарственным средством на основе активированной-потенцированной формы антител к мозгоспецифическому белку S-100 (RU 2156621 C1, A61K 39/395, 2000). Однако данное техническое решение может быть недостаточно эффективно при лечении различных органических заболеваний нервной системы, психоорганического синдрома и энцефалопатий различного генеза.
Изобретение направлено на расширение терапевтического диапазона нейротропного лекарственного средства на основе активированной-потенцированной формы антител к мозгоспецифическому белку S-100 и повышение эффективности лечения органических заболеваний нервной системы, включая болезнь Паркинсона, психоорганического синдрома, включая острые нарушения мозгового кровообращения (инсульт), и энцефалопатий различного генеза.
Решение поставленной задачи обеспечивается тем, что нейротропное лекарственное средство, содержащее активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100, согласно изобретению выполнено в виде фармацевтической композиции и содержит в качестве дополнительного усиливающего компонента активированную-потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе.
Кроме того, активированную-потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе и активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100 используют в виде активированного-потенцированного водного или водно-спиртового раствора, активность которого обусловлена процессом последовательного многократного разведения в водном или водно-спиртовом растворителе в сочетании с внешним механическим воздействием - вертикальным встряхиванием каждого разведения.
При этом фармацевтическая композиция может быть выполнена в твердой лекарственной форме и содержит эффективное количество гранул нейтрального носителя, насыщенного смесью водных или водно-спиртовых растворов активированной-потенцированной формы антител к эндотелиальной NO-синтазе и активированной-потенцированной формы антител к мозгоспецифическому белку S-100, и фармацевтически приемлемые добавки, включающие лактозу, целлюлозу микрокристаллическую и магния стеарат.
Причем водные или водно-спиртовые растворы активированных-потенцированных форм антител к эндотелиальной NO-синтазе и к мозгоспецифическому белку S-100 получены путем многократного последовательного разведения и внешнего воздействия - вертикального встряхивания каждого разведения из матричных растворов аффинно очищенных антител к эндотелиальной NO-синтазе и к мозгоспецифическому белку S-100 с концентрацией 0,5÷5,0 мг/мл.
Каждый из компонентов заявленного нейротропного лекарственного средства используют в виде смеси различных, преимущественно сотенных, разведений по гомеопатической технологии.
Кроме того, фармацевтическую композицию, содержащую активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100 и активированную-потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе, используют для лечения органических заболеваний нервной системы.
При этом фармацевтическую композицию, содержащую активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100 и активированную-потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе, используют, предпочтительно, для лечения болезни Паркинсона.
Причем, фармацевтическую композицию, содержащую активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100 и активированную-потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе, используют для лечения психоорганического синдрома.
При этом фармацевтическую композицию, содержащую активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100 и активированную-потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе, используют для лечения цереброваскулярных заболеваний, предпочтительно, для лечения острого нарушения мозгового кровообращения - инсульта.
Кроме того, фармацевтическую композицию, содержащую активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100 и активированную-потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе, используют для лечения энцефалопатий различного генеза.
Решение поставленной задачи обеспечивается также тем, что в способе лечения органических заболеваний нервной системы, психоорганического синдрома и энцефалопатий различного генеза путем введения в организм нейротропного лекарственного средства на основе активированной-потенцированной формы антител к мозгоспецифическому белку S-100 согласно изобретению дополнительно одновременно и сочетанно вводят активированную-потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе.
При этом активированную-потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе и активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100 используют в виде активированного-потенцированного водного или водно-спиртового раствора каждого компонента, активность которого обусловлена процессом многократного разведения в водном или водно-спиртовом растворителе в сочетании с внешним механическим воздействием - вертикальным встряхиванием каждого разведения.
Кроме того, используют приготовленные в виде единого лекарственного препарата - одной лекарственной формы смесь различных разведений антител к эндотелиальной NO-синтазе в сочетании со смесью различных разведений антител к мозгоспецифическому белку S-100, приготовленных по гомеопатической технологии.
Причем нейротропное лекарственное средство на основе активированной-потенцированной формы антител к мозгоспецифическому белку S-100 и активированной-потенцированной формы антител к эндотелиальной NO-синтазе используют, предпочтительно, для лечения болезни Паркинсона.
Кроме того, нейротропное лекарственное средство на основе активированной-потенцированной формы антител к мозгоспецифическому белку S-100 и активированной-потенцированной формы антител к эндотелиальной NO-синтазе используют для лечения цереброваскулярных заболеваний, предпочтительно, для лечения острого нарушения мозгового кровообращения - инсульта.
Лекарственное средство может содержать действующие компоненты в объемном соотношении 1:1, при этом каждый компонент используют в виде смеси трех матричных растворов, разведенных, соответственно, в 10012, 10030 и 100200 раз, что эквивалентно сотенным разведениям С12, С30, С200, приготовленным по гомеопатической технологии.
Заявленную фармацевтическую композицию рекомендуется принимать, предпочтительно, по 1-2 таблетке 2-4 раза в день.
При лечении органических заболеваний нервной системы, психоорганического синдрома и энцефалопатий различного генеза возможно раздельное, но сочетанное и одновременное применение (введение в организм) заявленной фармацевтической композиции в виде двух отдельно приготовленных препаратов как в виде растворов, так и в твердых лекарственных формах (таблеток), каждый из которых содержит активированную-потенцированную форму сверхмалых доз аффинно очищенных антител к мозгоспецифическому белку S-100 и, соответственно, активированную-потенцированную форму сверхмалых доз аффинно очищенных антител к эндотелиальной NO-синтазе.
Предложенное сочетание активированных-потенцированных форм антител к мозгоспецифическому белку S-100 и к эндотелиальной NO-синтазе в фармацевтической композиции (т.е. форм антител к мозгоспецифическому белку S-100 и к эндотелиальной NO-синтазе, приготовленных по гомеопатической технологии потенцирования путем многократного разведения и внешнего воздействия - неоднократного вертикального встряхивания каждого разведения (см., например, В.Швабе. "Гомеопатические лекарственные средства", М., 1967 г., с.14-29), которые обладают активностью, обусловленной технологией потенцирования, в фармакологических моделях и/или клинических методах лечения психоорганического синдрома и энцефалопатий различного генеза) обеспечивает получение неожиданного синергетического терапевтического эффекта, подтвержденного на адекватных (валидных) экспериментальных моделях и клинических исследованиях, который заключается в повышении эффективности лечения органических заболеваний нервной системы, психоорганического синдрома и энцефалопатий различного генеза.
Указанный технический результат обеспечивается усилением нейропротекторной активности антител к белку S-100, обусловленным влиянием на эффективность взаимодействия лигандов с сигма-1 рецептором, усилением вегетостабилизирующего эффекта, нормализацией вегетативного статуса, синергическим влиянием обоих компонентов на нейрональную пластичность и, вследствие этого, повышением устойчивости мозга к токсическим воздействиям, что улучшает интегративную деятельность и восстанавливает межполушарные связи головного мозга, способствует устранению когнитивных нарушений, стимулирует репаративные процессы и ускоряет восстановление функций центральной нервной системы (ЦНС), повышает умственную работоспособность, восстанавливает процессы обучения и памяти, нормализует соматовегетативные проявления, увеличивает мозговой кровоток и, соответственно, обеспечивает расширение терапевтического диапазона лекарственного средства и повышение эффективности лечения органических заболеваний нервной системы, психоорганического синдрома и энцефалопатий различного генеза, обусловленных острыми и хроническими расстройствами мозгового кровообращения, черепно-мозговыми травмами, нейроинфекциями, атеросклеротическими и нейродегенеративными поражениями головного мозга, цереброваскулярными (в том числе ишемические) заболеваниями. Заявленное лекарственное средство может применяться в монотерапии соматоформной дисфункции вегетативной нервной системы. Кроме того, применение заявленного лекарственного средства обеспечивает восстановление интегративной деятельности мозга при широком спектре органических расстройств ЦНС. В том числе заявленное лекарственное средство может быть использовано в составе комплексной терапии.
При этом заявленное лекарственное средство, как и составляющие его компоненты, не обладает седативным и миорелаксантным действием, не вызывает пристрастия и привыкания.
Кроме того, заявленное лекарственное средство расширяет арсенал препаратов, предназначенных для лечения органических заболеваний нервной системы, психоорганического синдрома и энцефалопатий различного генеза.
Лекарственное средство приготовляют, преимущественно, следующим образом.
Для приготовления активированной-потенцированной формы действующих компонентов используют моноклональные или, преимущественно, поликлональные антитела, которые могут быть получены по известным технологиям - методикам, описанным, например, в книге: Иммунологические методы, под ред. Г.Фримеля, М.: «Медицина», 1987, с.9-33; или, например, в статье Laffly E., Sodoyer R. Hum. Antibodies. Monoclonal and recombinant antibodies, 30 years after. - 2005. - Vol.14. - N 1-2. P.33-55.
Моноклональные антитела получают, например, с помощью гибридомной технологии. Причем начальная стадия процесса включает иммунизацию, основанную на принципах, уже разработанных при приготовлении поликлональных антисывороток. Дальнейшие этапы работы предусматривают получение гибридных клеток, продуцирующих клоны одинаковых по специфичности антител. Их выделение в индивидуальном виде проводится теми же методами, что и в случае поликлональных антисывороток.
Поликлональные антитела могут быть получены активной иммунизацией животных. Для этого по специально разработанной схеме животным делают серию инъекций требуемыми в соответствии с изобретением веществами - антигенами: мозгоспецифическим белком S-100 и эндотелиальной NO-синтазой. В результате проведения такой процедуры получают моноспецифические антисыворотки с высоким содержанием антител, которые используют для получения активированных-потенцированных форм компонентов. При необходимости проводят очистку антител, присутствующих в антисыворотке, например, методом аффинной хроматографии, путем применения фракционирования солевым осаждением или ионообменной хроматографии.
Предпочтительным для приготовления заявленной фармацевтической композиции является использование поликлональных антител к мозгоспецифическому белку S-100 и к эндотелиальной NO-синтазе, которые в качестве матричного (первичного) раствора с концентрацией 0,5÷5,0 мг/мл используют для последующего приготовления активированной-потенцированной формы.
Предпочтительной для приготовления каждого компонента является использование смеси трех водно-спиртовых разведений первичного матричного раствора антител, разведенных, соответственно, в 10012, 10030 и 100200 раз, что соответствует сотенным разведениям С12, С30 и С200, приготовленным по гомеопатической технологии. При выполнении заявленного лекарственного средства в твердой лекарственной форме на нейтральный носитель - лактозу может наноситься смесь указанных компонентов в объемном соотношении 1:1.
Предпочтительным для приготовления заявленного лекарственного препарата является использование поликлональных антител к эндотелиальной NO-синтазе и к мозгоспецифическому белку S-100, которые могут быть получены иммунизацией кроликов следующим образом.
Для проведения экспериментальных исследований были использованы антитела, приготовленные по заказу специализированной биотехнологической фирмой.
Поликлональные антитела к эндотелиальной NO-синтазе получают, используя в качестве иммуногена (антигена) для иммунизации кроликов адъювант и цельную молекулу эндотелиальной NO-синтазы следующей последовательности:
Возможно для получения поликлональных антител к эндотелиальной NO-синтазе использование в качестве иммуногена (антигена) цельной молекулы эндотелиальной NO-синтазы следующей последовательности:
Возможно для получения поликлональных антител к эндотелиальной NO-синтазе использование в качестве иммуногена (антигена) синтетического пептида эндотелиальной NO-синтазы, выбранного, например, из следующих аминокислотных последовательностей:
Перед отбором крови за 7-9 дней проводят 1-3 внутривенные инъекции для повышения уровня антител. В процессе иммунизации у кроликов отбирают небольшие пробы крови для оценки количества антител. Максимальный уровень иммунного ответа на введение большинства растворимых антигенов достигается через 40-60 дней после первой инъекции. После окончания первого цикла иммунизации кроликов в течение 30 дней дают восстановить здоровье и проводят реиммунизацию, включающую 1-3 внутривенные инъекции. Для получения антисыворотки из иммунизированных кроликов собирают кровь в центрифужную пробирку объемом 50 мл. С помощью деревянного шпателя удаляют со стенок пробирки образовавшиеся сгустки и помещают палочку в сгусток, образовавшийся в центре пробирки. Кровь помещают в холодильник (температура 4°С) на ночь. На следующий день удаляют сгусток, прикрепившийся к шпателю, и центрифугируют оставшуюся жидкость при 13000g в течение 10 мин. Супернатант (надосадочная жидкость) является антисывороткой. Полученная антисыворотка должна быть желтого цвета. Добавляют к антисыворотке 20% (весовая концентрация) NaN3 до конечной концентрации 0,02% и хранят до использования в замороженном состоянии при температуре -20°С (или без добавления NaN3 - при температуре -70°С). Для выделения из антисыворотки антител к эндотелиальной NO-синтазе производят абсорбцию на твердой фазе в следующей последовательности:
1) 10 мл антисыворотки кролика разбавляют в 2 раза 0,15 М NaCl добавляют 6,26 г Na2SO4, перемешивают и инкубируют 12-16 ч при 4°С;
2) выпавший осадок удаляют центрифугированием, растворяют в 10 мл фосфатного буфера и затем диализуют против того же буфера в течение ночи при комнатной температуре;
3) после удаления осадка центрифугированием раствор наносят на колонку с ДЭАЭ-целлюлозой, уравновешенную фосфатным буфером;
4) фракцию антител определяют, измеряя оптическую плотность элюата при 280 нм.
Затем производят очистку антител методом аффинной хроматографии путем прикрепления полученных антител к эндотелиальной NO-синтазе, которая находится на нерастворимом матриксе, с последующим элюированием концентрированными растворами соли.
Полученный таким образом буферный раствор поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной NO-синтазе, очищенных на антигене, с концентрацией 0,5÷5,0 мг/мл, предпочтительно 2,0÷3,0 мг/мл, используют в качестве матричного (первичного) раствора для последующего приготовления активированной-потенцированной формы по гомеопатической технологии.
Для получения поликлональных антител к мозгоспецифическому белку S-100 используют мозгоспецифический белок S-100, физико-химические свойства которого описаны в статье М.В. Старостина, С.М. Свиридов, Нейроспецифический белок S-100, Успехи современной биологии, 1977 г., т.5, с.170-178; книге М.Б.Штарк, Мозгоспецифические белки /антигены/ и функции нейрона, М.: "Медицина", 1985 г., с.12-14, выделенный из ткани головного мозга быка по следующей методике:
- замороженную в жидком азоте ткань растирают в порошок на специальной мельнице;
- экстракцию белков проводят в соотношении 1:3 (вес/объем) в экстрагирующем буфере при гомогенизации;
- гомогенат прогревают в течение 10 мин при 60°С и охлаждают до 4°С на ледяной бане;
- термолабильные белки удаляют центрифугированием;
- проводят ступенчатое фракционирование сульфатом аммония с последующим удалением выпадающих в осадок примесных белков;
- содержащую белок S-100 фракцию осаждают 100% насыщенным сульфатом аммония при снижении рН до 4,0 и собирают центрифугированием;
- осадок растворяют в минимальном объеме буфера, содержащего ЭДТА и меркаптоэтанол, диализируют против деионизованной воды и лиофильно высушивают;
- фракционирование кислых белков продолжают хроматографией на ионообменных носителях - ДЭАЭ целлюлозе ДЕ-52 и затем ДЭАЭ-сефадексе А-50;
- собранные и отдиализованные фракции, содержащие белок S-100, разделяют по молекулярному весу гель-фильтрацией на сефадексе G-100;
- очищенный белок S-100 диализируют и лиофильно высушивают.
Молекулярный вес очищенного мозгоспецифического белка S-100 составляет 21000 Да.
Благодаря высокому содержанию аспарагиновой и глутаминовой кислот мозгоспецифический белок S-100 является сильнокислым и занимает крайнее анодное положение при электрофорезе в прерывистой буферной системе в полиакриламидном геле, что облегчает его идентификацию.
Для получения мозгоспецифической антисыворотки к выделенному мозгоспецифическому белку S-100 готовят смесь очищенного белка S-100 (антигена) в комплексе с метилированным бычьим сывороточным альбумином в качестве носителя с полным адъювантом Фрейнда, которую вводят подкожно лабораторному животному - кролику в область спины в количестве 1-2 мл. На 8-й, 15-й день проводят повторную иммунизацию. Забор крови производят (например, из вены уха) на 26-й и 28-й день.
Полученная антисыворотка имеет титр 1:500 - 1:1000, образует единственную полосу преципитации с экстрактом из нервной ткани, но не реагирует с экстрактами гетерологичных органов и формирует единственный пик преципитации как с чистым белком S-100, так и с экстрактом нервной ткани, что свидетельствует о моноспецифичности полученной антисыворотки.
Активированную-потенцированную форму антител каждого компонента (т.е. форм антител к брадикинину, к морфину и к гистамину, приготовленных по гомеопатической технологии потенцирования путем многократного последовательного разведения в сочетании с внешним воздействием - неоднократным вертикальным встряхиванием каждого компонента (см., например, В.Швабе. "Гомеопатические лекарственные средства", М., 1967 г., с.14-29), которые обладают активностью, обусловленной технологией потенцирования, в фармакологических моделях и/или клинических методах лечения заболевания дыхательных путей) готовят путем равномерного уменьшения концентрации в результате последовательного разведения 1 части упомянутого матричного раствора в 9 частях (для десятичного разведения D) или в 99 частях (для сотенного разведения С) или в 999 частях (для тысячного разведения М) нейтрального растворителя в сочетании с многократным (не менее 10 раз) вертикальным встряхиванием ("динамизацией") каждого полученного разведения и использованием отдельных емкостей для каждого последующего разведения до получения требуемой потенции - кратности разведения по гомеопатическому методу (см., например, В.Швабе. "Гомеопатические лекарственные средства", М., 1967 г., с.14-29).
Внешнюю обработку в процессе уменьшения концентрации также можно осуществлять ультразвуком, электромагнитным или иным физическим воздействием.
Например, для приготовления 12-го сотенного разведения С12 одну часть упомянутого матричного раствора антител к NO-синтазе (или к мозгоспецифическому белку S-100) с концентрацией 2,5 мг/мл разводят в 99 частях нейтрального водного или водно-спиртового растворителя (преимущественно 70% этилового спирта) и многократно (10 и более раз) вертикально встряхивают - потенцируют полученное 1-е сотенное С1 разведение. Из 1-го сотенного С1 разведения приготовляют 2-ое сотенное разведение С2. Данную операцию повторяют 11 раз, получая 12-е сотенное разведение С12. Таким образом, 12-е сотенное разведение С12 представляет собой раствор, полученный разбавлением последовательно в разных емкостях 12 раз 1-ой части исходного матричного раствора антител к NO-синтазе с концентрацией 2,5 мг/мл в 99-ти частях нейтрального растворителя, т.е. раствор, приготовленный разведением матричного раствора в 10012 раз. Аналогичные операции с соответствующей кратностью разведения проводят для получения разведений С30 и С200.
При использовании в качестве компонента (например, активированной-потенцированной формы антител к мозгоспецифическому белку S-100) смеси различных, преимущественно сотенных, разведений, каждое разведение компонента (например, С12, С30, С200) приготовляют раздельно по описанной выше технологии до их предпоследнего разведения (соответственно, до получения С11, С29, С199) и затем вносят в одну емкость по одной части каждого полученного предпоследнего разведения и смешивают с требуемым количеством растворителя (соответственно, с 97 частями для сотенного разведения). При этом получают активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100 в сверхмалой дозе, полученной сверхразведением матричного раствора, соответственно, в 10012, 10030 и 100200 раз, эквивалентной смеси сотенных разведений С12, С30 и С200, по гомеопатической технологии.
Возможно использование каждого компонента в виде смеси других различных разведений по гомеопатической технологии, например десятичных и или сотенных, (С12, С30, С100; D20, С30, С100 или D20, С30, М100 и т.д.), эффективность которых определяют экспериментально.
Для получения заявленной фармацевтической композиции водные или водно-спиртовые растворы действующих компонентов смешивают, преимущественно, в объемном соотношении 1:1 и используют в жидкой лекарственной форме.
Заявленная фармацевтическая композиция может быть использована и в твердой лекарственной форме, которая содержит эффективное количество частиц нейтрального носителя - лактозы, насыщенного путем пропитывания до насыщения смесью водных или водно-спиртовых растворов активированной-потенцированной формой антител к эндотелиальной NO-синтазе и активированной-потенцированной формой антител мозгоспецифическому белку S-100, и фармацевтически приемлемые добавки, включающие, преимущественно, лактозу, целлюлозу микрокристаллическую и магния стеарат.
Для получения твердой оральной формы заявленного лекарственного средства производят в установке кипящего слоя (например, типа «Huttlin Pilotlab» производства компании Huttlin GmbH) орошение до насыщения вводимых в псевдоожиженный - кипящий слой частиц нейтрального вещества - лактозы (молочного сахара) с размером частиц 100÷300 мкм, предварительно полученным водным или водно-спиртовым раствором активированных-потенцированных форм антител к мозгоспецифическому белку S-100 и к эндотелиальной синтазе оксида азота (NO-синтазе), преимущественно, в соотношении 1 кг раствора антител на 5 или 10 кг лактозы (1:5 - 1:10) с одновременной сушкой в потоке подаваемого под решетку нагретого воздуха при температуре не выше 40°С. Расчетное количество 10-34 мас. частей высушенных гранул, насыщенных активированной-потенцированной формой антител, загружают в смеситель и смешивают с 25÷85 мас. частей от общей массы загрузки «ненасыщенной» чистой лактозы (для снижения стоимости и некоторого упрощения и ускорения технологического процесса без снижения эффективности лечебного воздействия). Затем в эту смесь добавляют стеарат магния в количестве 0,1÷1 мас. частей от общей массы загрузки и микрокристаллическую целлюлозу в количестве 3÷10 мас. частей от общей массы загрузки. Полученную таблеточную массу равномерно перемешивают и таблетируют прямым сухим прессованием (например, в таблет-прессе Korsch - XL 400) с формированием круглых таблеток массой 150÷500 мг, преимущественно массой 300 мг, пропитанных водно-спиртовым раствором (3,0-6,0 мг/табл.) активированной-потенцированной формы антител к мозгоспецифическому белку S-100 и к NO-синтазе в сверхмалой дозе, каждого компонента, приготовленной из матричного раствора, разведенного, соответственно, в 10012, в 10030 и в 100200, что эквивалентно смеси сотенных разведений С12, С30 и С200, приготовленных по гомеопатической технологии.
В качестве нейтрального носителя возможно также использование глюкозы, сахарозы, мальтозы, крахмала, изомальтозы, изомальта и других моносахаридов, олигосахаридов и полисахаридов, использующихся в производстве фармацевтических препаратов, а также технологических смесей на основе последних с добавлением фармацевтически приемлемых добавок (например, изомальт, кросповидон, цикламат натрия, сахарин натрия, лимонная кислота безводная и т.д.), в том числе лубрикантов, дезинтегрантов, связующих и красителей.
Предпочтительно заявленную фармацевтическую композицию рекомендуется принимать по 1-2 таблетке 2-4 раза в день.
Для проведения экспериментальных исследований были использованы антитела, приготовленные по заказу специализированной биотехнологической фирмой.
Пример 1
Исследование влияния комплексного препарата, в состав которого входят активированные-потенцированные формы поликлональных аффинно очищенных кроличьих антител к мозгоспецифическому белку S-100 (анти-S100) и к эндотелиальной NO-синтазе (анти-eNOS) в сверхмалых дозах (СМД), полученных сверхразведением исходного матричного раствора (концентрацией 2,5 мг/мл) в 10012, 10030, 100200 раз, эквивалентных смеси сотенных гомеопатических разведений С12, С30, С200, в соотношении 1:1 (СМД анти-S100 + анти-eNOS), а также компонентов, входящих в его состав активированной-потенцированной формы поликлональных кроличьих антител к мозгоспецифическому белку S-100, очищенных на антигене, в сверхмалой дозе (СМД анти-S100), полученной сверхразведением исходного матричного раствора в 10012, 10030, 100200 раз, эквивалентной смеси сотенных гомеопатических разведений С12, С30, С200 и активированной-потенцированной формы поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной NO-синтазе, очищенных на антигене, в сверхмалой дозе (СМД анти-eNOS), полученной сверхразведением исходного матричного раствора в 10012, 10030, 100200 раз, эквивалентной смеси сотенных гомеопатических разведений С12, С30, С200, проводили in vitro на связывание стандартного лиганда [3H]пентазоцина с рекомбинантным сигма-1 рецептором человека, оценивали радиолигандным методом.
Сигма-1 рецептор - внутриклеточный рецептор, локализованный в клетках центральной нервной системы, клетках большинства периферических тканей и иммунокомпетентных клетках. Рецепторы демонстрируют уникальную способность транслоцироваться, которая вызывается множеством психотропных препаратов. Динамика сигма-1 рецепторов непосредственно связана с различными влияниями, осуществляемыми препаратами при действии на сигма-1 рецепторы. Эти влияния включают регуляцию каналов активности, экоцитоз, передачу сигналов, ремоделирование плазменной мембраны (формирование рафтов) и транспортировку липидов/метаболизм. Все это может способствовать развитию пластичности нейронов в мозге. Имеются доказательные данные, что сигма-1 рецепторы оказывают модулирующее влияние на все основные нейромедиаторные системы: норадренергическую, серотонинергическую, дофаминергическую, холинергическую системы и NMDA-регулируемые глутаматные эффекты. Сигма-1 рецептор играет важную роль в патофизиологии нейроденегенративных заболеваний, в частности болезнь Паркинсона, психических и аффективных расстройств, инсульта, участвует в процессах обучения и памяти. В связи с этим способность лекарственных средств оказывать влияние на эффективность взаимодействия лигандов с сигма-1 рецептором указывает на наличие нейропротекторного, противоишемического, анксиолитического, антидепрессивного, антиастенического компонентов в спектре их фармакологической активности, что позволяет рассматривать данные препараты в качестве эффективных лекарственных средств, в том числе для лечения цереброваскулярных заболеваний.
В качестве контроля тестируемых препаратов была протестирована потенцированная дистиллированная вода (смесь гомеопатических разведений С12+С30+С200).
В опыте (для измерения общего связывания) в инкубационную среду вносили 20 мкл комплексного препарата СМД анти-S100 + анти-eNOS или по 10 мкл СМД AT к S100 или 10 мкл СМД AT к NOS. Таким образом, количество СМД анти-S100 + анти-eNOS, вносимых в экспериментальную лунку при тестировании комплексного препарата, было идентично количеству СМД AT к S100 и СМД AT к NOS, тестируемых в качестве монопрепаратов, что позволяет провести сравнение эффективности комплексного препарата с его отдельными компонентами, входящими в его состав. Потенцированную дистиллированную воду вносили в инкубационную среду в объеме 20 мкл и 10 мкл.
Затем вносили 160 мкл (~200 µg белка) гомогената мембран клеток линии Jurkat (линия лейкемических Т-лимфоцитов человека), и в последнюю очередь 20 мкл радиолиганда, меченного тритием, - [3H]пентазоцин (15 нМ).
Для измерения неспецифического связывания вместо препаратов или потенцированной воды в инкубационную среду вносили 20 мкл немеченного лиганда - галоперидол (10 мкМ).
Радиоактивность измеряли на сцинтилляционном счетчике (Topcount, Packard) с использованием сцинтилляционной смеси (Microscint 0, Packard) после инкубации в течение 120 минут при температуре 22°С в 50 мМ Tris-HCl буфере (рН 7,4) и фильтрации на стекловолоконных фильтрах (GF/B, Packard). Специфическое связывание (в опыте или контроле) рассчитывали как разницу между общим (в опыте или контроле) и неспецифическим связыванием.
Результаты представлены в виде процента ингибирования специфического связывания в контроле (в качестве контроля использовали дистиллированную воду) (Таблица 1).
Результаты, отражающие ингибирование выше 50%, представляют собой значительные эффекты исследуемых соединений; ингибирование от 25% до 50%, свидетельствует об эффектах от слабого до умеренного; ингибирование менее 25% считается незначительным эффектом исследуемого соединения и находится в пределах уровня фона.
Таким образом, в условиях данной экспериментальной модели показано, что комплексный препарат СМД анти-S100 + анти-eNOS более эффективно, чем отдельные его компоненты (СМД анти-S100 и СМД анти-eNOS), ингибирует связывание стандартного радиолиганда [3H]пентазоцина с рекомбинантным сигма-1 рецептором человека; СМД анти-S100, внесенные в экспериментальную лунку в объеме 10 мкл, ингибируют связывание стандартного радиолиганда [3H]пентазоцина с рекомбинантным сигма-1 рецептором человека, но выраженность эффекта уступает выраженности эффекта комплексного препарата СМД анти-S100 + анти-eNOS; СМД анти-eNOS, внесенные в экспериментальную лунку в объеме 10 мкл, не оказывали влияния на связывание стандартного радиолиганда [3H]пентазоцина с рекомбинантным сигма-1 рецептором человека; потенцированная вода, внесенная в экспериментальную лунку в объеме 10 мкл или 20 мкл, не оказывала влияния на связывание стандартного радиолиганда [3H]пентазоцина с рекомбинантным сигма-1 рецептором человека.
Пример 2
Для исследования свойств заявленного лекарственного средства при лечении острого нарушения мозгового кровообращения - инсульта были использованы таблетки массой 300 мг, пропитанные фармацевтической композицией, содержащей водно-спиртовые растворы (6 мг/табл.) активированных-потенцированных форм поликлональных аффинно очищенных кроличьих антител к мозгоспецифическому белку S-100 (анти-S100) и к эндотелиальной NO-синтазе (анти-eNOS) в сверхмалых дозах (СМД), полученных сверхразведением исходного матричного раствора (с концентрацией 2,5 мг/мл) в 10012, 10030, 100200 раз, эквивалентных смеси сотенных гомеопатических разведений С12, С30, С200 (СМД анти-S100 + анти-eNOS).
В исследование были включены пациенты с установленным диагнозом острое нарушение мозгового кровообращения (ОНМК) по ишемическому типу в системе правой внутренней сонной артерии (ишемический инсульт).
В качестве контрольной группы использовалась группа пациентов, получающих стандартизированную сосудисто-метаболическую терапию, включающую ненаркотические анальгетики и нестероидные противовоспалительные средства, антиагреганты, антикоагулянты и нейропротективные препараты.
По дизайну исследование представляло из себя открытое рандомизированное сравнительное клиническое исследование по оценке эффективности применения препарата СМД анти-S100 + анти-eNOS совместно с комплексной сосудисто-метаболической терапией по сравнению с собственно комплексной сосудисто-метаболической терапией (СМТ) при лечении пациентов в раннем восстановительном периоде ишемического инсульта
В исследование были включены 12 пациентов с диагнозом острое нарушение мозгового кровообращения по ишемическому типу в системе правой внутренней сонной артерии в возрасте от 50 до 84 лет. Средний возраст пациентов составил 66,66±9,3 года.
В исследовании проверялось соответствие пациентов следующим критериям включения и исключения.
Критерии включения
1. Пациенты с острым нарушением мозгового кровообращения по ишемическому типу в системе правой внутренней сонной артерии, давностью 21 день к моменту визита 1, подтвержденным данными медицинского анамнеза, неврологического обследования и медицинской документацией.
2. Пациенты с первого дня заболевания получают комплексную сосудисто-метаболическую терапию в рамках стандартов медицинской помощи по г.Москве.
3. Пациенты правши, с подтверждением исследованием латерализации сенсомоторных функций по Т.А.Доброхотовой и Н.Н.Брагиной.
4. Этиологическим фактором ОНМК у пациента является сочетание атеросклероза и артериальной гипертензии.
5. Пациенты с левосторонним гемипарезом с повышением мышечного тонуса по спастическому типу на визите 1.
6. Интегральная оценка по шкале Линдмарк на визите 0 не ниже 345 баллов.
7. Интегральная оценка по шкале Линдмарк на визите 1 от 345 до 404 баллов.
8. Отсутствие предпосылок к назначению иммуномодулирующих средств в течение ближайших 6 месяцев.
9. Уровень образования и степень понимания пациента достаточны для того, чтобы адекватно общаться с исследователем и координатором исследования.
10. Пациенты оцениваются исследователем как надежные, готовые выполнять все назначенные клинические визиты, тесты и процедуры, предусмотренные протоколом.
11. Пациенты имеют действительный домашний адрес.
12. Подписанная форма информированного согласия.
Критерии исключения
1. В анамнезе хирургическое вмешательство на головном мозге.
2. Острый инфаркт миокарда.
3. Геморрагический инфаркт.
4. Диагноз психоза, биполярного расстройства или шизоаффективного расстройства в анамнезе.
5. Большое депрессивное расстройство согласно критериям модуля депрессии международного нейропсихиатрического мини-интервью (MINI).
6. Факторы/состояния, медицинского или иного характера, которые, по мнению исследователя, могут повлиять на результаты тестирования пациента в рамках данного исследования.
7. Ответы «2А», «2Б», «2В» или «3» в рубрике «И» опросника депрессии Бека (активное суицидальное мышление с некоторым намерением к действию, без специфического плана или активное суицидальное мышление со специфическим планом и намерением).
8. Аутоиммунное заболевание в анамнезе.
9. Острое поражение печени или выраженный цирроз (класс С по Child-Pugh).
10. Некоррегированное нарушение функции щитовидной железы.
11. Некомпенсированная артериальная гипертензия в анамнезе.
12. Серьезное или декомпенсированное сердечно-сосудистое заболевание, заболевание печени, почек, метаболическое, респираторное или гематологическое заболевание, симптоматическое заболевание периферических сосудов или иное медицинское или психиатрическое состояние, которое, по мнению исследователя, может повлиять на участие пациента в исследовании или может привести к продлению сроков госпитализации или повторной госпитализации пациента в ходе проведения исследования.
13. Заболевания и состояния, которые, по мнению исследователя, могут препятствовать участию пациента в исследовании.
14. Прием препарата Импаза (СМД анти-eNOS) или Тенотен (СМД анти-S100) до участия в исследовании.
15. Прием антидепрессантов любой группы, не исключая растительных и гомеопатических препаратов.
16. Прием анксиолитиков любой группы, не исключая растительных и гомеопатических препаратов.
17. Прием иммуномодуляторов, не исключая растительных и гомеопатических препаратов.
18. Системное лечение стероидами в течение 1 месяца или менее до визита 0.
19. Прививки, в т.ч. против гриппа.
20. Участие в исследовании препаратов Импаза (СМД анти-eNOS) или Тенотен (СМД анти-S100), если пациенты приняли хотя бы одну дозу препарата.
21. Участие в других клинических исследованиях в течение 1 месяца перед включением в данное исследование.
22. Беременность, кормление грудью, невозможность использования адекватной контрацепции во время исследования и в течение месяца после последнего приема исследуемого препарата.
23. Наличие аллергии/непереносимости любого из компонентов лекарственных препаратов, используемых в лечении, включая непереносимость лактозы.
24. Употребление наркотиков, нейролептиков, алкоголизм, психические заболевания пациента.
25. Пациенты являются персоналом центра, напрямую связанным с проводимым исследованием, и/или являются членами семьи персонала исследовательского центра, напрямую связанного с проводимым исследованием. Понятие "члены семьи" включает в себя супруга(у), родителей, детей, братьев (сестер), связанных как биологическим, так и юридическим родством.
26. Участие в судебном процессе либо предположительное получение компенсации или участие в судебном процессе, по мнению исследователя.
После определения соответствия пациента критериям включения и исключения протокола, пациенты были рандомизированы в две исследуемые группы: группа пациентов, получающая СМД анти-S100 + анти-eNOS в сочетании со стандартизированной сосудисто-метаболической терапией (6 человек, женщины - 33,33%, мужчины - 66,66%, средний возраст - 65,33±6,71 года), группа пациентов, получающая собственно стандартизированную сосудисто-метаболическую терапию (СМТ) (6 человек, женщины - 50%, мужчины - 50%, средний возраст - 68,0±11,88 года).
В ходе данного исследования было проведено 5 визитов к пациентам. Фаза лечения продолжалась с Визита 1 до Визита 4 в течение 84±5 дней. Визит 4 (день 84±5) являлся первой конечной точкой исследования, после чего начиналась фаза катамнестического наблюдения. Фаза катамнестического наблюдения продолжалась до Визита 5 (день 168±5).
В анализ безопасности были включены данные всех пациентов, участвовавших в исследовании (n=12). В течение всего периода наблюдения за пациентами отмечалась хорошая переносимость препарата. Нежелательные явления отсутствовали. Все пациенты исследуемых групп завершили лечение в сроки, установленные протоколом исследования, досрочно выбывших пациентов не было.
При оценке действия препарата СМД анти-S100 + анти-eNOS на основные проявления ОНМК (шкала Линдмарк), тревожно-депрессивные расстройства пациента (опросник депрессии Бека), а также когнитивные функции пациента (опросник MMSE), было выявлено улучшение по основным проявлениям ОНМК, выражавшемся в статистически достоверном уменьшении общего балла шкалы Линдмарк (с 383,5±7,81 до 412,33±7,47, p<0,001), выраженности тревожно-депрессивных расстройств, выражавшееся в статистически достоверном уменьшении общего балла опросника депрессии Бека (с 12,16±3,6 до 6,33±4,76, p<0,05), а также статистически достоверное улучшение когнитивной сферы, выражавшееся в увеличении суммарной оценки по опроснику MMSE (с 26,0±3,69 до 29,66±0,52, p<0,05) к окончанию лечения (Таблица 2).
При этом в контрольной группе была показана только статистически достоверная тенденция влияния на основные проявления ОНМК (шкала Линдмарк) в виде увеличения суммарной оценки (с 379,5±8,12 до 394,66=13,67, p<0,05).
При межгрупповом сравнении была показана достоверная разница в динамике основных проявлений ОНМК по шкале Линдмарк (по сравнению с контролем p<0,02). Различия между группами по динамике тревожно-депрессивных расстройств не достигли статистически значимых величин, что, по-видимому, связано с недостаточным количеством пациентов.
Описанные изменения не претерпели существенной разницы за период катамнестического наблюдения.
Таким образом, в проведенном клиническом исследовании показано положительное влияние комбинированного препарата СМД анти-S100 + анти-eNOS в сочетании со стандартизированной сосудисто-метаболической терапией (СМТ) на основные проявления ОНМК и возможное влияние на тревожно-депрессивные расстройства и когнитивные функции пациентов в раннем восстановительном периоде ишемического инсульта. Кроме того, подтверждена высокая переносимость препарата. Нежелательные явления при приеме препарата СМД анти-S100 + анти-eNOS отсутствовали.
Пример 3
Для исследования свойств заявленного лекарственного средства при лечении болезни Паркинсона были использованы таблетки массой 300 мг, пропитанные фармацевтической композицией, содержащей водно-спиртовые растворы (6 мг/табл.) активированных-потенцированных форм поликлональных аффинно очищенных кроличьих антител к мозгоспецифическому белку S-100 (анти-S100) и к эндотелиальной NO-синтазе (анти-eNOS) в сверхмалых дозах (СМД), полученных сверхразведением исходного матричного раствора (с концентрацией 2,5 мг/мл) в 10012, 10030, 100200 раз, эквивалентных смеси сотенных гомеопатических разведений С12, С30, С200 (СМД анти-S100 + анти-eNOS).
В качестве контрольной группы использовалась группа пациентов, получающих препарат в виде таблеток, пропитанных водно-спиртовым раствором (6 мг/табл.) активированной-потенцированной формы поликлональных кроличьих антител к мозгоспецифическому белку S-100, очищенных на антигене, в сверхмалой дозе (СМД анти-S100), полученной сверхразведением исходного матричного раствора в 10012, 10030, 100200 раз, эквивалентной смеси сотенных гомеопатических разведений С12, С30, С200.
В исследование были включены пациенты с установленным диагнозом болезнь Паркинсона. Болезнь Паркинсона характеризуется прогрессирующим разрушением и гибелью дофаминовых нейронов в ЦНС.
По дизайну исследование представляло из себя одноцентровое открытое рандомизированное сравнительное клиническое исследование эффективности и безопасности применения препаратов СМД анти-S100 + анти-eNOS и СМД анти-S100, применяемых в качестве монотерапии, совместно с агонистами дофаминовых рецепторов или совместно с препаратами леводопы при лечении пациентов с болезнью Паркинсона.
В исследование были включены 14 пациентов с диагнозом «Болезнь Паркинсона» в возрасте от 52 до 80 лет. Средний возраст пациентов составил 67,93±11,56 года.
В исследовании проверялось соответствие пациентов следующим критериям включения и исключения.
Критерии включения
1. Пациенты с болезнью Паркинсона, стадии от 1 до 5 по Хену-Яру, подтвержденной данными медицинского анамнеза (в т.ч. теста с леводопой), неврологического обследования и медицинской документацией.
2. Форма болезни Паркинсона преимущественно дрожательная, дрожательно-ригидная или акинетико-ригидная.
3. Стадии по Хену-Яру для пациентов, не получающих противопаркинсонической терапии от 1 до 2.5 включительно на визите 1.
4. Стадии по Хену-Яру для пациентов, получающих противопаркинсоническую терапию от 1 до 5 включительно на визите 1.
5. Отсутствие предпосылок к назначению иммуномодулирующих средств в течение ближайших 6 месяцев.
6. Уровень образования и степень понимания пациента достаточны для того, чтобы адекватно общаться с исследователем и координатором исследования.
7. Пациенты оцениваются исследователем как надежные, готовые выполнять все назначенные клинические визиты, тесты и процедуры, предусмотренные протоколом.
8. Пациенты имеют действительный домашний адрес.
9. Подписанная форма информированного согласия.
Критерии исключения
1. В анамнезе хирургическое вмешательство на головном мозге.
2. Инсульт в анамнезе.
3. Диагноз психоза, биполярного расстройства или шизоаффективного расстройства в анамнезе.
4. Большое депрессивное расстройство согласно критериям модуля депрессии международного нейропсихиатрического мини-интервью (MINI).
5. Факторы/состояния, медицинского или иного характера, которые, по мнению исследователя, могут повлиять на результаты тестирования пациента в рамках данного исследования.
6. Ответы «2А», «2Б», «2В» или «3» в рубрике «И» опросника депрессии Бека (активное суицидальное мышление с некоторым намерением к действию, без специфического плана или активное суицидальное мышление со специфическим планом и намерением).
7. Аутоиммунное заболевание в анамнезе.
8. Острое поражение печени или выраженный цирроз (класс С по Child-Pugh).
9. Некоррегированное нарушение функции щитовидной железы.
10. Некомпенсированная артериальная гипертензия в анамнезе.
11. Серьезное или декомпенсированное сердечно-сосудистое заболевание, заболевание печени, почек, метаболическое, респираторное или гематологическое заболевание, симптоматическое заболевание периферических сосудов или иное медицинское или психиатрическое состояние, которое, по мнению исследователя, может повлиять на участие пациента в исследовании или может привести к продлению сроков госпитализации или повторной госпитализации пациента в ходе проведения исследования.
12. Заболевания и состояния, которые, по мнению исследователя, могут препятствовать участию пациента в исследовании.
13. Прием препарата Импаза (СМД анти-eNOS) или Тенотен (СМД анти-S100) до участия в исследовании.
14. Прием антидепрессантов любой группы, не исключая растительных и гомеопатических препаратов.
15. Прием анксиолитиков любой группы, не исключая растительных и гомеопатических препаратов.
16. Прием иммуномодуляторов, не исключая растительных и гомеопатических препаратов.
17. Системное лечение стероидами в течение 1 месяца или менее до визита 1.
18. Прививки, в т.ч. против гриппа.
19. Участие в исследовании препаратов Импаза (СМД анти-eNOS) или Тенотен (СМД анти-S100), если пациенты приняли хотя бы одну дозу препарата.
20. Участие в других клинических исследованиях в течение 1 месяца перед включением в данное исследование.
21. Беременность, кормление грудью, невозможность использования адекватной контрацепции во время исследования и в течение месяца после последнего приема исследуемого препарата.
22. Наличие аллергии/непереносимости любого из компонентов лекарственных препаратов, используемых в лечении, включая непереносимость лактозы.
23. Употребление наркотиков, нейролептиков, алкоголизм, психические заболевания пациента.
24. Пациенты являются персоналом центра, напрямую связанным с проводимым исследованием, и/или являются членами семьи персонала исследовательского центра, напрямую связанного с проводимым исследованием. Понятие "члены семьи" включает в себя супруга(у), родителей, детей, братьев (сестер), связанных как биологическим, так и юридическим родством.
25. Участие в судебном процессе либо предположительное получение компенсации или участие в судебном процессе, по мнению исследователя.
После определения соответствия пациента критериям включения и исключения протокола, пациенты были рандомизированы на две исследуемые группы: группу пациентов, получавших СМД анти-S100 в сочетании с противопаркинсонической терапией (7 человек, женщины - 57,14%, мужчины - 42,86%, средний возраст - 65,25±10,6 года), и группу пациентов, получавших СМД анти-S100 + анти-eNOS в сочетании с противопаркинсонической терапией (7 человек, женщины - 57,14%, мужчины - 42,86%, средний возраст- 71,5±12,79 года).
В ходе данного исследования было проведено 4 визита в исследовательский центр. Фаза лечения продолжалась с Визита 1 до Визита 3 в течение 56±5 дней. Визит 3 (день 56±5) являлся первой конечной точкой исследования, после чего начиналась фаза катамнестического наблюдения. Фаза катамнестического наблюдения продолжалась до Визита 4 (день 84±5).
В анализ безопасности были включены данные всех пациентов, участвовавших в исследовании (n=14). В течение всего периода наблюдения за пациентами отмечалась хорошая переносимость препарата. Нежелательные явления отсутствовали. Все пациенты исследуемых групп завершили лечение в сроки, установленные протоколом исследования, досрочно выбывших пациентов не было.
При планировании исследования и наборе пациентов, группы были разделены на следующие подгруппы:
1. Пациенты на ранних стадиях болезни Паркинсона (1-2.5 по Хену-Яру), не получающие противопаркинсонической терапии, которые будут получать препарат СМД анти-S100 + анти-eNOS в качестве монотерапии. В подгруппе 2 пациента.
2. Пациенты на любой стадии болезни Паркинсона (1-5 по Хену-Яру), получающие препараты леводопы, у которых лечение не сопровождается осложнениями противопаркинсонической терапии, которым к терапии будет добавлен препарат СМД анти-S100 + анти-eNOS. В подгруппе 2 пациента.
3. Пациенты на любой стадии болезни Паркинсона (1-5 по Хену-Яру), получающие препараты леводопы, с осложнениями противопаркинсонической терапии (дискинезии, периоды «on-off», галлюцинации и др.), которым к терапии будет добавлен препарат СМД анти-S100 + анти-eNOS. В подгруппе 2 пациента.
4. Пациенты на любой стадии болезни Паркинсона (1-5 по Хену-Яру), получающие агонисты дофаминовых рецепторов в качестве монотерапии, которым к терапии будет добавлен препарат СМД анти-S100 + анти-eNOS. В подгруппе 1 пациент.
5. Пациенты на ранних стадиях болезни Паркинсона (1-2.5 по Хену-Яру), не получающие противопаркинсонической терапии, которые будут получать препарат СМД анти-S100 в качестве монотерапии. В подгруппе 1 пациент.
6. Пациенты на любой стадии болезни Паркинсона (1-5 по Хену-Яру), получающие препараты леводопы, у которых лечение не сопровождается осложнениями противопаркинсонической терапии, которым к терапии будет добавлен препарат СМД анти-S100. В подгруппе 2 пациента.
7. Пациенты на любой стадии болезни Паркинсона (1-5 по Хену-Яру), получающие препараты леводопы, с осложнениями противопаркинсонической терапии (дискинезии, периоды «on-off», галлюцинации и др.), которым к терапии будет добавлен препарат СМД анти-S100. В подгруппе 2 пациента.
8. Пациенты на любой стадии болезни Паркинсона (1-5 по Хену-Яру), получающие агонисты дофаминовых рецепторов в качестве монотерапии, которым к терапии будет добавлен препарат СМД анти-S100. В подгруппе 2 пациента.
При оценке действия препарата СМД анти-S100 + анти-eNOS на основные проявления болезни Паркинсона (опросник UPDRS), активность повседневной жизни пациента (опросник Шваба-Ингланда), а также тревожно-депрессивные расстройства пациента (опросник депрессии Бека), было выявлено улучшение по основным проявлениям Болезни Паркинсона, выражавшееся в статистически достоверном уменьшении общего балла опросника UPDRS (с 63,5±9,77 до 49,16±10,09, p<0,05), и увеличение уровня повседневной активности пациента, выражавшееся в статистически достоверном увеличении оценки по шкале Шваба-Ингланда (с 65,0±12,25 до 78,33±7,53, p<0,05) к Визиту 3. Кроме того, была показана тенденция к снижению выраженности тревожно-депрессивных расстройств, не достигшая статистически значимых значений (возможно, из-за недостаточного количества пациентов и большого разброса исходных значений) (Таблица 3).
При этом разница между группами по общему баллу опросника UPDRS к окончанию терапии была достоверной с вероятностью p<0,05.
Аналогичные показатели в группе пациентов, получавших СМД анти-S100, не продемонстрировали тенденций к улучшению, за исключением статистически достоверного снижения уровня тревожно-депрессивных расстройств по опроснику депрессии Бека (с 12,0±7,08 до 6,0±2,52, p<0,05)
При анализе полученных данных не было выявлено статистически достоверных различий как между подгруппами, получающими препарат СМД анти-S100 + анти-eNOS в сочетании с различными вариантами терапии на различных стадиях болезни Паркинсона, так и между аналогичными подгруппами, получающими препарат СМД анти-S100.
Таким образом, в проведенном клиническом исследовании комбинированного препарата СМД анти-S100 + анти-eNOS показано положительное влияние на основные проявления болезни Паркинсона и возможное влияние на тревожно-депрессивные расстройства пациентов. Кроме того, подтверждена высокая переносимость препарата СМД анти-S100 + анти-eNOS. Нежелательные явления при приеме препарата СМД анти-S100 + анти-eNOS отсутствовали.
Пример 4
Для исследования свойств заявленного лекарственного средства при лечении психоорганического синдрома были использованы таблетки массой 300 мг, пропитанные фармацевтической композицией, содержащей водно-спиртовые растворы (6 мг/табл.) активированных-потенцированных форм поликлональных аффинно очищенных кроличьих антител к мозгоспецифическому белку S-100 (анти-S100) и к эндотелиальной NO-синтазе (анти-eNOS) в сверхмалых дозах (СМД), полученных сверхразведением исходного матричного раствора (с концентрацией 2,5 мг/мл) в 10012,10030, 100200 раз, эквивалентных смеси сотенных гомеопатических разведений С12, С30, С200 (СМД анти-S100 + анти-eNOS.
В качестве контрольной группы использовалась группа пациентов, получающих препарат в виде таблеток, пропитанных водно-спиртовым раствором (6 мг/табл.) активированной-потенцированной формы поликлональных кроличьих антител к мозгоспецифическому белку S-100, очищенных на антигене, в сверхмалой дозе (СМД анти-S100), полученной сверхразведением исходного матричного раствора в 10012, 10030, 100200 раз, эквивалентной смеси сотенных гомеопатических разведений С12, С30, С200.
В исследование были включены пациенты с установленным диагнозом психоорганический синдром посттравматического генеза. Психоорганический синдром характеризуется ослаблением памяти, снижением интеллекта, недержанием аффектов (триада Вальтер-Бюэля).
По дизайну исследование представляло из себя открытое рандомизированное сравнительное клиническое исследование эффективности и безопасности исследуемой терапии в двух параллельных группах при лечении пациентов с психоорганическим синдромом посттравматического генеза (первая группа пациентов принимала препарат СМД анти-S100, вторая группа пациентов - препарат СМД анти-S100 + анти-eNOS.
В исследование были включены 6 пациентов с диагнозом «Психоорганический синдром» в возрасте от 35 до 90 лет. Средний возраст пациентов составил 70,83±21,95 года.
В исследовании проверялось соответствие пациентов следующим критериям включения и исключения.
Критерии включения
1. Пациенты с диагнозом «Энцефалопатия посттравматическая с психоорганическим синдромом» или «Энцефалопатия смешанного генеза (сосудистая, посттравматическая) с психоорганическим синдромом», подтвержденным данными медицинского анамнеза, неврологического обследования и медицинской документацией.
2. Неизменность сопутствующей терапии в течение как минимум месяца до Визита 1.
3. Отсутствие предпосылок к изменению неврологической сопутствующей терапии в течение всего периода наблюдения.
4. Отсутствие предпосылок к назначению иммуномодулирующих средств в течение ближайших 6 месяцев.
5. Уровень образования и степень понимания пациента достаточны для того, чтобы адекватно общаться с исследователем и координатором исследования.
6. Пациенты оцениваются исследователем как надежные, готовые выполнять все назначенные клинические визиты, тесты и процедуры, предусмотренные протоколом.
7. Пациенты имеют действительный домашний адрес.
Критерии исключения:
1. В анамнезе хирургическое вмешательство на головном мозге.
2. Инсульт в анамнезе.
3. Диагноз психоза, биполярного расстройства или шизоаффективного расстройства в анамнезе.
4. Большое депрессивное расстройство согласно критериям модуля депрессии международного нейропсихиатрического мини-интервью (MINI).
5. Факторы/состояния, медицинского или иного характера, которые, по мнению исследователя, могут повлиять на результаты тестирования пациента в рамках данного исследования.
6. Ответы «2А», «2Б», «2В» или «3» в рубрике «И» опросника депрессии Бека (активное суицидальное мышление с некоторым намерением к действию, без специфического плана или активное суицидальное мышление со специфическим планом и намерением).
7. Аутоиммунное заболевание в анамнезе.
8. Острое поражение печени или выраженный цирроз (класс С по Child-Pugh).
9. Некоррегированное нарушение функции щитовидной железы.
10. Некомпенсированная артериальная гипертензия в анамнезе.
11. Серьезное или декомпенсированное сердечно-сосудистое заболевание, заболевание печени, почек, метаболическое, респираторное или гематологическое заболевание, симптоматическое заболевание периферических сосудов или иное медицинское или психиатрическое состояние, которое, по мнению исследователя, может повлиять на участие пациента в исследовании или может привести к продлению сроков госпитализации или повторной госпитализации пациента в ходе проведения исследования.
12. Заболевания и состояния, которые, по мнению исследователя, могут препятствовать участию пациента в исследовании.
13. Прием препарата Импаза (СМД анти-eNOS) или Тенотен (СМД анти-S100) до участия в исследовании.
14. Прием антидепрессантов любой группы, не исключая растительных и гомеопатических препаратов.
15. Прием анксиолитиков любой группы, не исключая растительных и гомеопатических препаратов.
16. Прием иммуномодуляторов, не исключая растительных и гомеопатических препаратов.
17. Системное лечение стероидами, в течение 1 месяца или менее до Визита 1.
18. Прививки, в т.ч. против гриппа.
19. Участие в исследовании препаратов Импаза (СМД анти-eNOS) или Тенотен (СМД анти-S100), если пациенты приняли хотя бы одну дозу препарата.
20. Участие в других клинических исследованиях в течение 1 месяца перед включением в данное исследование.
21. Беременность, кормление грудью, невозможность использования адекватной контрацепции во время исследования и в течение месяца после последнего приема исследуемого препарата.
22. Наличие аллергии/непереносимости любого из компонентов лекарственных препаратов, используемых в лечении, включая непереносимость лактозы.
23. Употребление наркотиков, нейролептиков, алкоголизм, психические заболевания пациента.
24. Пациенты являются персоналом центра, напрямую связанным с проводимым исследованием, и/или являются членами семьи персонала исследовательского центра, напрямую связанного с проводимым исследованием. Понятие "члены семьи" включает в себя супруга(у), родителей, детей, братьев (сестер), связанных как биологическим, так и юридическим родством.
25. Участие в судебном процессе либо предположительное получение компенсации или участие в судебном процессе, по мнению исследователя.
После определения соответствия пациента критериям включения и исключения протокола, пациенты были рандомизированы в две исследуемые группы: группа пациентов, получающая СМД анти-S100 (3 человека, женщины - 33,33%, мужчины - 66,66%, средний возраст - 71,33±16,25 года), и группа пациентов, получающая СМД анти-S100 + анти-eNOS (3 человека, женщины - 66,66%, мужчины - 33,33%, средний возраст - 70,33±30,66 года).
В ходе данного исследования было проведено 5 визитов в исследовательский центр. Фаза лечения продолжалась с Визита 1 до Визита 4 в течение 84±5 дней. Визит 4 (день 84±5) являлся первой конечной точкой исследования, после чего начиналась фаза катамнестического наблюдения. Фаза катамнестического наблюдения продолжалась до Визита 5 (день 168±5).
В анализ безопасности были включены данные всех пациентов, участвовавших в исследовании (n=6). В течение всего периода наблюдения за пациентами отмечалась хорошая переносимость препарата. Нежелательные явления отсутствовали. Все пациенты исследуемых групп завершили лечение в сроки, установленные протоколом исследования, досрочно выбывших пациентов не было.
При оценке действия препарата СМД анти-S100 + анти-eNOS на основные нейропсихические проявления болезни психоорганического синдрома (нейропсихический опросник NPI, раздел выраженность), на выраженность сопутствующего дистресса ухаживающего за пациентом лица (нейропсихический опросник NPI, раздел дистресс), активность повседневной жизни пациента (опросник ADS-ADL), а также когнитивные функции пациента (опросник MMSE), было выявлено улучшение по основным нейропсихическим проявлениям психоорганического синдрома, выражавшееся в статистически достоверном уменьшении общего балла раздела «выраженность» нейропсихического опросника NPI (с 91,0+15,13 до 69,0+6,244, p<0,05), и уровню дистресса ухаживающего лица, выражавшееся в статистически достоверном уменьшении общего балла раздела «дистресс» нейропсихического опросника NPI (с 44,33+17,78 до 36,33+3,21, p<0,05) к Визиту 4 (Таблица 4).
При этом разница между группами пациентов по общему баллу раздела «выраженность» нейропсихического опросника NPI к окончанию терапии была достоверной с вероятностью p<0,05.
Аналогичные показатели в группе пациентов, получавших СМД анти-S100, не показали тенденций к улучшению.
Таким образом, в проведенном клиническом исследовании комбинированного препарата СМД анти-S100 + анти-eNOS показано положительное влияние на основные нейропсихические проявления ПОС и возможное влияния на когнитивные функции пациентов с ПОС. Кроме того, подтверждена высокая переносимость препарата. Нежелательные явления при приеме препарата отсутствовали.
Пример 5
В нижеприведенном исследовании изучали эффективность активированных-потенцированных форм поликлональных аффинно очищенных на антигене кроличьих антител к мозгоспецифическому белку S-100 (анти-S100) и к эндотелиальной NO-синтазе (анти-eNOS) в сверхмалых дозах (СМД), полученных сверхразведением исходного матричного раствора (с концентрацией 2,5 мг/мл) в 10012,10030, 100200 раз, эквивалентных смеси сотенных гомеопатических разведений С12, С30, С200 (СМД анти-S100 + анти-eNOS) при лечении ишемического инсульта у крыс, вызванного фототромбозом префронтальной коры головного мозга.
Острое нарушение мозгового кровообращения (инсульт) занимает третье место среди причин смертности в развитых странах и является одной из ведущих причин развития нетрудоспособности (Гусев Е.И., 2003; Janardhan V., Qureshi A.I., 2004).
Модель фотоиндуцированного тромбоза отвечает практически всем требованиям, предъявляемым к экспериментальным моделям фокальной ишемии головного мозга. Методика, разработанная Ватсоном (Watson В. et al., 1985), основана на том, что при действии света с длиной волны 560 нм на введенный в кровоток фотосенсибилизированный краситель бенгальский розовый (Bengal rose) образуются активные формы кислорода, под действием которых увеличивается адгезивность клеток эндотелия и тромбоцитов и формируются тромбы, закрывающие просвет сосудов. Методика воспроизведения ишемической патологии при помощи фотоиндуцированного тромбоза технически проста и максимально приближена к клиническим формам ишемического инфаркта головного мозга. Большим преимуществом этой модели перед другими является то, что она является неинвазивной, т.е. не требует трепанации черепа, и, таким образом, более точно воспроизводит клиническую патологию, возникающую при тромбозе сосудов головного мозга.
В исследовании эффективности препарата СМД анти-S100 + анти-eNOS у крыс с ишемическим инсультом, вызванным фототромбозом префронтальной коры головного мозга, было использовано 37 крыс-самцов линии Вистар (вес 150-180 г; 2-3 мес). Двустороннее фокальное ишемическое повреждение в префронтальной коре головного мозга крыс вызывали методом фотохимического тромбоза по Watson (Watson В. D. et al., 1985) в модификации И.В. Викторова (Романова Г.А. и соавт., 1998). Крысам (n=37) под наркозом (хлоралгидрат 300 мг/кг, внутрибрюшинно) в яремную вену вводили 3% раствор красителя (бенгальский розовый 40 мг/кг). С помощью оптоволоконного световода диаметром 3 см луч света от галогеновой лампы (24 В, 250 Вт) подводили к поверхности черепа над областью лобной коры левого и правого полушария головного мозга, индуцируя фототромбоз. Ложнооперированным крысам (n=6) в тех же условиях проводили все вышеописанные манипуляции, за исключением введения красителя и облучения светом галогеновой лампы. Интактная группа включала 6 крыс.
Крысам с фототромбозом в течение 5 дней до индукции инсульта и 9 дней после внутрижелудочно вводили дистиллированную воду (контроль-фототромбоз, n=12), СМД анти-S100 (n=7) или СМД анти-S100 + анти-eNOS (n=6) в дозе 5 мл/кг. На 8 день после операции (или ложной операции) для оценки способности к обучению и памяти у всех крыс проводили тест условного рефлекса пассивного избегания (УРПИ). Крыс помещали в установку, которая состоит из освещенной площадки и соединенной с ней затемненной камеры, на пол которой подается электроболевое раздражение силой 0,45 мА, в результате чего предпочитаемая в норме затемненная камера становилась опасной. На следующие сутки проводили тестирование выработки условного рефлекса пассивного избегания. Для этого крыс помещали на освещенную площадку и регистрировали латентный период первого захода в темную камеру. Если крыса долго не заходила в темную камеру, делали вывод о том, что она помнит об опасности (электроболевом раздражении). Чем дольше латентный период захода в камеру, тем лучше сохранность памяти, которая нарушается после инсульта, вызванного фототромбозом.
На 9 день после операции у части крыс экспериментальных групп оценивали объем зоны инсульта в морфометрическом исследовании.
У крыс контрольной группы фототромбоз приводил к образованию обширной зоны инсульта и, как следствие, ухудшению памяти - ухудшению воспроизведения УРПИ на 9,6% по сравнению с интактными крысами и на 22,9% по сравнению с ложнооперированными (Таблица 5). Введение СМД анти-S100 сокращало площадь очага инсульта на 42,2% и улучшало память на 14,0% по сравнению с контролем-фототромбозом. Введение СМД анти-S100 + анти-eNOS было более эффективным: в этой группе очаг инсульта был меньше на 44,0%, а воспроизведение условного рефлекса - на 33,4% лучше, чем в группе контроль-фототромбоз.
Таким образом, применение комплексного препарата СМД анти-S100 + анти-eNOS было более эффективным, чем введение монопрепарата СМД анти-S100.
Группа изобретений относится к медицине, а именно к неврологии, и касается лечения органических заболеваний нервной системы, в том числе психоорганического синдрома и энцефалопатий различного генеза. Для этого вводят композицию, содержащую активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100 и в качестве дополнительного усиливающего компонента активированную-потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе. Такой состав композиции обеспечивает эффективное лечение органических заболеваний нервной системы за счет синергетического нейротропного действия входящих в нее компонентов. 2 н. и 16 з.п. ф-лы, 5 пр., 5 табл.
1. Нейротропное лекарственное средство, содержащее активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100, характеризующееся тем, что выполнено в виде фармацевтической композиции и содержит в качестве дополнительного усиливающего компонента активированную-потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе.
2. Нейротропное лекарственное средство по п.1, характеризующееся тем, что активированную-потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе и активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100 используют в виде активированного-потенцированного водного или водно-спиртового раствора, активность которого обусловлена процессом последовательного многократного разведения в водном или водно-спиртовом растворителе в сочетании с внешним механическим воздействием - вертикальным встряхиванием каждого разведения.
3. Нейротропное лекарственное средство по п.1 или 2, характеризующееся тем, что фармацевтическая композиция выполнена в твердой лекарственной форме и содержит эффективное количество гранул нейтрального носителя, насыщенного смесью водных или водно-спиртовых растворов активированной-потенцированной формы антител к эндотелиальной NO-синтазе и активированной-потенцированной формы антител к мозгоспецифическому белку S-100, и фармацевтически приемлемые добавки.
4. Нейротропное лекарственное средство по п.1 или 2, характеризующееся тем, что водные или водно-спиртовые растворы активированных-потенцированных форм антител к эндотелиальной NO-синтазе и к мозгоспецифическому белку S-100 получены путем многократного последовательного разведения и внешнего воздействия - вертикального встряхивания каждого разведения из матричных растворов аффинно очищенных антител к эндотелиальной NO-синтазе и к мозгоспецифическому белку S-100 с концентрацией 0,5÷5,0 мг/мл.
5. Нейротропное лекарственное средство по п.1 или 2, характеризующееся тем, что каждый из компонентов на основе антител используют в виде смеси различных, преимущественно сотенных, разведений по гомеопатической технологии.
6. Нейротропное лекарственное средство по п.3, характеризующееся тем, что фармацевтически приемлемые добавки включают лактозу, целлюлозу микрокристаллическую и магния стеарат.
7. Нейротропное лекарственное средство по п.1 или 2, характеризующееся тем, что фармацевтическую композицию, содержащую активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100 и активированную-потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе, используют для лечения органических заболеваний нервной системы.
8. Нейротропное лекарственное средство по п.7, характеризующееся тем, что фармацевтическую композицию, содержащую активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100 и активированную-потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе, используют для лечения болезни Паркинсона.
9. Нейротропное лекарственное средство по п.1 или 2, характеризующееся тем, что фармацевтическую композицию, содержащую активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100 и активированную-потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе, используют для лечения психоорганического синдрома.
10. Нейротропное лекарственное средство по п.1 или 2, характеризующееся тем, что фармацевтическую композицию, содержащую активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100 и активированную-потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе, используют для лечения цереброваскулярных заболеваний.
11. Нейротропное лекарственное средство по п.10, характеризующееся тем, что фармацевтическую композицию, содержащую активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100 и активированную-потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе, используют для лечения острого нарушения мозгового кровообращения - инсульта.
12. Нейротропное лекарственное средство по п.1 или 2, характеризующееся тем, что фармацевтическую композицию, содержащую активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100 и активированную-потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе, используют для лечения энцефалопатий различного генеза.
13. Способ лечения органических заболеваний нервной системы, психоорганического синдрома и энцефалопатий различного генеза путем введения в организм нейротропного лекарственного средства на основе активированной-потенцированной формы антител к мозгоспецифическому белку S-100, характеризующийся тем, что дополнительно одновременно и сочетанно вводят активированную-потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе.
14. Способ по п.13, характеризующийся тем, что активированную-потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе и активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100 используют в виде активированного-потенцированного водного или водно-спиртового раствора каждого компонента, активность которого обусловлена процессом многократного разведения в водном или водно-спиртовом растворителе в сочетании с внешним механическим воздействием - вертикальным встряхиванием каждого разведения.
15. Способ лечения по п.13 или 14, характеризующийся тем, что используют приготовленные в виде единого лекарственного препарата - одной лекарственной формы - смесь различных разведений антител к эндотелиальной NO-синтазе в сочетании со смесью различных разведений антител к мозгоспецифическому белку S-100, приготовленных по гомеопатической технологии.
16. Способ лечения по п.13 или 14, характеризующийся тем, что нейротропное лекарственное средство на основе активированной-потенцированной формы антител к мозгоспецифическому белку S-100 и активированной-потенцированной формы антител к эндотелиальной NO-синтазе используют для лечения болезни Паркинсона.
17. Способ лечения по п.13 или 14, характеризующийся тем, что нейротропное лекарственное средство на основе активированной-потенцированной формы антител к мозгоспецифическому белку S-100 и активированной-потенцированной формы антител к эндотелиальной NO-синтазе используют для лечения цереброваскулярных заболеваний.
18. Способ лечения по п.13 или 14, характеризующийся тем, что нейротропное лекарственное средство на основе активированной-потенцированной формы антител к мозгоспецифическому белку S-100 и активированной-потенцированной формы антител к эндотелиальной NO-синтазе используют для лечения острого нарушения мозгового кровообращения - инсульта.
| НЕЙРОТРОПНОЕ ЛЕКАРСТВЕННОЕ СРЕДСТВО | 1999 |
|
RU2156621C1 |
| Подвижная подушка для устанавливаемых на механических прессах мощных штампов | 1956 |
|
SU111334A1 |
| ЛЕВИН О.С | |||
| "Дисциркуляторная энцефалопатия :от патогенеза к лечению" Трудный пациент, 2010, N4, [найдено 18.06.2012], найдено из Интернет: t-pacient.ru›Архив›tp4-10/tp4-10_657.html | |||
| АРТЮШКОВА Е.Б | |||
| "Принципы фармакологической коррекции эндотелиальной дисфункции препаратами с различными | |||
