Способ получения нанокапсул вакцины "КС" от чумы свиней в альгинате натрия Российский патент 2017 года по МПК A61K39/187 A61K47/36 A61K9/51 A61J3/07 B82B3/00 

Изобретение относится к области нанотехнологии и ветеринарии.

Вакцина «КС» против классической чумы свиней - живая лиофилизированная вакцина из аттенуированного штамма, представляет собой сухую пористую пористую массу белого или розового цвета.

Ранее были известны способы получения микрокапсул.

В пат. 2173140, МПК A61K 009/50, A61K 009/127, Российская Федерация, опубликован 10.09.2001, предложен способ получения кремнийорганолипидных микрокапсул с использованием роторно-кавитационной установки, обладающей высокими сдвиговыми усилиями и мощными гидроакустическими явлениями звукового и ультразвукового диапазона для диспергирования.

Недостатком данного способа является применение специального оборудования - роторно-кавитационной установки, которая обладает ультразвуковым действием, что оказывает влияние на образование микрокапсул и при этом может вызывать побочные реакции в связи с тем, что ультразвук разрушающе действует на полимеры белковой природы, поэтому предложенный способ применим при работе с полимерами.

Наиболее близким методом является способ, предложенный в пат. 2134967, МПК A01N 53/00, A01N 25/28, опубликован 27.08.1999, Российская Федерация (1999). В воде диспергируют раствор смеси природных липидов и пиретроидного инсектицида в весовом отношении 2-4:1 в органическом растворителе, что приводит к упрощению способа микрокапсулирования.

Недостатком метода является диспергирование в водной среде, что делает предложенный способ неприменимым для получения микрокапсул водорастворимых препаратов в водорастворимых полимерах.

Техническая задача - упрощение и ускорение процесса получения нанокапсул, уменьшение потерь при получении нанокапсул (увеличение выхода по массе).

Решение технической задачи достигается способом получения вакцины «КС», отличающимся тем, что в качестве оболочки нанокапсул используется альгинат натрия, а в качестве ядра - вакцина «КС» при получении нанокапсул методом осаждения нерастворителем с применением этилацетата в качестве осадителя.

Отличительной особенностью предлагаемого метода является получение нанокапсул методом осаждения нерастворителем с использованием этилацетата в качестве осадителя, а также использование альгината натрия в качестве оболочки и вакцина «КС» - в качестве ядра.

Результатом предлагаемого метода являются получение нанокапсул вакцины «КС» в оболочке альгината натрия.

На рис. 1. представлено распределение частиц по размерам в образце нанокапсул вакцины «КС» в альгинате натрия (соотношение ядро : оболочка 1:10). Из рисунка определено статистические характеристики распределений (фракталов), которые представлены в таблице (см. таблицу в графической части).

ПРИМЕР 1. Получение нанокапсул вакцины «КС», соотношение ядро : оболочка 1:5

55 мг вакцины «КС» растворяют в 3 мл петролейного эфира и диспергируют полученную смесь в суспензию альгината натрия в петролейном эфире, содержащую указанного 275 мг полимера в присутствии 50 мг препарата Е472 с (сложный эфир глицерина с одной-двумя молекулами пищевых жирных кислот и одной-двумя молекулами лимонной кислоты, причем лимонная кислота как трехосновная может быть этерифицирована другими глицеридами и как оксокислота - другими жирными кислотами. Свободные кислотные группы могут быть нейтрализованы натрием) в качестве поверхностно-активного вещества при перемешивании 1000 об/мин. Далее приливают 5 мл этилацетат. Выпавший осадок отфильтровывают и сушат при комнатной температуре.

Получено 0,33 г порошка нанокапсул. Выход составил 100%.

ПРИМЕР 2. Получение нанокапсул вакцины «КС», соотношение ядро : оболочка 1:10

55 мг вакцины «КС» растворяют в 3 мл петролейного эфира и диспергируют в суспензию альгината натрия в петролейном эфире, содержащую указанного 550 мг полимера в присутствии 60 мг препарата Е472с в качестве поверхностно-активного вещества при перемешивании 1000 об/мин. Далее приливают 5 мл этилацетата. Выпавший осадок отфильтровывают и сушат при комнатной температуре.

Получено 0,605 г порошка нанокапсул. Выход составил 100%.

ПРИМЕР 3. Определение размеров нанокапсул методом NTA.

Измерения проводили на мультипараметрическом анализаторе наночастиц Nanosight LM0 производства Nanosight Ltd (Великобритания) в конфигурации HS-BF (высокочувствительная видеокамера Andor Luca, полупроводниковый лазер с длиной волны 405 нм и мощностью 45 мВт). Прибор основан на методе анализа траекторий наночастиц (Nanoparticle Tracking Analysis, NTA), описанном в ASTM E2834.

Оптимальным разведением для разведения было выбрано 1:100. Для измерения были выбраны параметры прибора: Camera Level = 16, Detection.

Threshold = 10 (multi), Min Track Length: Auto, Min Expected Size: Auto. длительность единичного измерения 215s, использование шприцевого насоса.

Изобретение относится к способу получения нанокапсул вакцины «КС» от чумы свиней в альгинате натрия. Указанный способ характеризуется тем, что 55 мг вакцины «КС» растворяют в 3 мл петролейного эфира и диспергируют в суспензию альгината натрия в петролейном эфире, содержащую 550 мг указанного полимера, в присутствии 60 мг препарата Е472с в качестве поверхностно-активного вещества при перемешивании 1000 об/мин, далее приливают 5 мл этилацетата, выпавший осадок отфильтровывают и сушат при комнатной температуре. Изобретение обеспечивает упрощение и ускорение процесса получения нанокапсул вакцины «КС», а также увеличение их выхода по массе. 1 ил., 1 табл., 3 пр.

Способ получения нанокапсул вакцины «КС» от чумы свиней в альгинате натрия, характеризующийся тем, что 55 мг вакцины «КС» растворяют в 3 мл петролейного эфира и диспергируют в суспензию альгината натрия в петролейном эфире, содержащую 550 мг указанного полимера, в присутствии 60 мг препарата Е472с в качестве поверхностно-активного вещества при перемешивании 1000 об/мин, далее приливают 5 мл этилацетата, выпавший осадок отфильтровывают и сушат при комнатной температуре.