ИНТРАНАЗАЛЬНАЯ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ НА ОСНОВЕ ИНСУЛИНА Российский патент 2017 года по МПК A61K38/28 A61K31/205 A61K9/08 A61K9/12 A61K9/06 A61P25/28 

Изобретение относится к области медицины, а именно к интраназальным фармацевтическим композициям инсулина.

Нарушения памяти и других когнитивных функций, которые оказывают клинически значимое влияние на поведение и повседневную активность пациентов, называются деменцией согласно определению Международной классификации болезней (10-й пересмотр). Болезнь Альцгеймера (БА) является наиболее распространенной формой деменции, наблюдаемой в среднем у 4-6% лиц старше 60 лет. Alzheimer Disease and other Dementias. WHO report 2013. До настоящего времени не существует лечения БА, замедляющего прогресс заболевания. Одним из подходов к такому лечению является использование интраназального инсулина, эффективность которого была показана в ряде клинических испытаний. Reger et al., J Alzheimers Dis 2008, 13 (3): 323. Craft et al, Arch Neurol. 2012, 69:29. Claxton et al. J Alzheimers Dis 2013, 35:789. Однако эффективность интраназального инсулина лимитирована патологически низкой чувствительностью к инсулину у лиц, страдающих БА.

Таким образом, задачей, решаемой при создании заявленного изобретения, является улучшение интраназальной терапии БА путем повышения чувствительности мозга к инсулину.

Для решения такой задачи заявлена фармацевтическая композиция, содержащая инсулин и соединение формулы (I):

В практике настоящего изобретения «инсулин» означает пептидный гормон, идентичный натуральному инсулину человека, образованный двумя аминокислотными цепями (А и Б) ковалентно связанными дисульфидными связями, где цепь А имеет аминокислотную последовательность: GIVEQCCTSICSLYQLENYCN, а цепь Б аминокислотную последовательность: FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTPKT; а также биологически активные инсулиновые аналоги и производные.

В практике настоящего изобретения, инсулин может быть синтезирован методами пептидного синтеза, известными из уровня техники, или получен методами генной инженерии в, например, E-coli или дрожжах. Предпочтительно, инсулин настоящего изобретения - это рекомбинантный инсулин, полученный методом генной инженерии.

В практике настоящего изобретения термин «инсулиновый аналог» означает инсулин, содержащий одно или большее число замещений аминокислот, удалений аминокислот, добавлений аминокислот или перестановок аминокислот по сравнению с натуральным инсулином человека, в цепях А и Б, и сохраняющий при этом биологическую активность инсулина. Примерами аналогов инсулина являются инсулины Аспарт, Лизпро, Глулизин, Гларгин, Детемир, Деглюдек и инсулины животных, например свиной инсулин.

В практике настоящего изобретения термин «производное инсулина» означает как инсулин, так и инсулиновый аналог, содержащий химически и ферментативно модифицированные аминокислоты. Примерами таких модифицированных аминокислот являются ацилированные гидроксилированные, метилированные, амидированные, фосфорилированные, пегилированные, гликозилированные аминокислоты в составе аминокислотных цепей А и Б, которые сохраняют биологическую активность инсулина.

В настоящей заявке соединение формулы (I) является янтарнокислой солью холина или янтарнокислым бис(2-гидрокси-N,N,N-триметилэтанаминием) (химическая формула [(СН₃)₃N⁺CH₂CH₂OH]^-₂OOCCH₂CH₂COO^-), получение которого описано в патенте РФ №2228174.

Предпочтительно, фармацевтическая композиция настоящего изобретения содержит от 0,1 до 100 международных единиц (ME) инсулина и/или от 0,1 до 10% соединения формулы (I).

Фармацевтическая композиция настоящего изобретения используется для приготовления интраназального лекарственного средства, предпочтительно, в форме интраназального спрея.

В практике настоящего изобретения термин «интраназальное лекарственное средство» означает лекарственное средство, сформулированное для введения в организм человека через нос. Предпочтительными лекарственными формами указанного средства являются капли, гель, аэрозоль и спрэй. Предпочтительно, интраназальное средство предназначено для лечения болезни Альцгеймера.

В практике настоящего изобретения термин интраназальное средство лечения болезни Альцгеймера приготавливается способами, известными из предшествующего уровня техники, например растворением инсулина и соединения формулы (I) в фармацевтической воде.

Интраназальное средство лечения болезни Альцгеймера может содержать наполнители и вспомогательные ингредиенты, например консерванты, буферы для поддержания рН раствора в интервале от 3,5 до 8,5; и гелебразователи,

Используя настоящее изобретение, становится возможным улучшить эффективность интраназального инсулина при лечении болезни Альцгеймера.

Следующие примеры демонстрируют изобретение.

Пример 1.

Пример иллюстрирует фармацевтическую композицию настоящего изобретения (Таблица 1).

Приготовление фармацевтической композиции: инсулин и соединение формулы (I) растворяют в воде для инъекций в соотношениях, указанных в таблице 1, для получения раствора и разливают во флаконы.

Пример 2.

Пример иллюстрирует интраназальную фармацевтическую композицию настоящего изобретения (Таблица 2).

Приготовление средства: инсулин и соединение формулы (I) растворяют в воде для инъекций в соотношениях, указанных в таблице 1, для получения раствора и разливают во флаконы. Флаконы снабжаются помпой для дозированного распыления раствора в виде спрэя (100 микролитров раствора на каждое нажатие помпы). Распыленный раствор вводится интраназально.

Пример 3.

Пример иллюстрирует способ лечения болезни Альцгеймера с использованием интраназальной фармацевтической композиции настоящего изобретения.

Фармацевтическую композицию настоящего изобретения тестировали на модели болезни Альцгеймера. Harkany Т et al., Behav Brain Res. 1998 90 (2): 133-45. Harkany T et al., Prog Neuropsvchopharmacol Biol Psychiatry. 1999 23 (6): 963-1008.

В соответствии с вышеуказанной моделью бета-амилоид, фрагмент 25-35 (А-бета 25-35), однократно вводили в головной мозг крыс самцов Вистар в ядро Мейнерта в дозе 2 мкг на каждую сторону, что на 15-й день после введения вызвало достоверное нарушение когнитивных функций, релевантных наблюдаемым при болезни Альцгеймера. Изменения когнитивных функций (память и обучение) оценивали по поведению крыс в тесте пассивного избегания, позволяющем оценить воздействие изучаемых препаратов на обучение и память. Величина исходного латентного периода перехода в темный отсек в день обучения характеризует двигательную и ориентировочно-исследовательскую активность животных. Время захода в темный отсек в сеансе тестирования, проводимом через 24 часа после сеанса обучения, является показателем долговременной памяти оборонительного поведения. Введение здоровым животным бета-амилоида (25-35) в базальное ядро Мейнерта вызвало значительное увеличение времени перехода в темный отсек в день обучения (Р<0.05), что указывает на нарушения ориентировочно-исследовательской активности, вызванные инъекцией бета-амилоида (25-35). Введение бета-амилоида (25-35) также вызвало значительное снижение времени перехода в темный отсек в день тестирования (Р<0.05) по сравнению с аналогичным показателем у ложнооперированных животных. Это указывает на нарушения долговременной памяти, вызванные внутримозговым введением бета-амилоида (25-35). Крыс разделили на группы (n=8). Начиная с 16 дня после введения А-бета 25-35, крысам вводили интраназально в количестве 50 мкл в каждую ноздрю один раз в день в течение 7 дней, следующие препараты: физ. р-р (контроль); 0,05 ME инсулина; композицию 0,05 ME инсулина и 1 мг соединения формулы (I); 1 мг соединения формулы (I); 1 мг холина хлорида; или 1 мг янтарнокислого натрия.

Данные представлены в Таблице 3 как среднее ± стандартное отклонение (n=8) величины времени перехода в неосвещенный отсек в день тестирования, через 24 часа после обучения. Статистически значимые отличия результатов оценивали с помощью t-критерия Стьюдента.

Таблица 3 показывает, что введение фармацевтической композиции инсулина и соединения формулы (I) достоверно улучшило долговременную память у крыс с амнезией, вызванной введением амилоида, по сравнению с индивидуальным интраназальным инсулином, введенным в той же дозе. Индивидуальное введение соединения (I) и контрольных веществ (холина хлорида и янтарнокислого натрия) было неэффективным в указанных дозах (р>0.05). Эти результаты указывают на то, что фармацевтическая композиция инсулина и соединения формулы (I) является синергически более эффективной терапией по сравнению с инсулином для лечения болезни Альцгеймера.

Настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей инсулин и дихолина сукцинат, а также к применению указанной композиции для приготовления интраназального средства лечения болезни Альцгеймера и способу лечения болезни Альцгеймера. Фармацевтическая композиция содержит от 0,05 до 100 международных единиц (МЕ) инсулина и от 0,05 до 10% дихолина сукцината. Предпочтительно фармацевтическая композиция приготавливается в форме интраназального спрэя. Фармацевтическая композиция по изобретению улучшает когнитивную функцию у млекопитающего. 3 н. и 4 з п. ф-лы, 3 табл., 3 пр.

1. Фармацевтическая композиция, содержащая инсулин и соединение формулы (I):

2. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что содержит от 0,05 до 100 международных единиц (ME) инсулина.

3. Фармацевтическая композиция по п. 1 или 2, отличающаяся тем, что содержит от 0,05 до 10% соединения формулы (I).

4. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что приготавливается в виде интраназального спрэя.

5. Применение фармацевтической композиции по п. 1 для приготовления средства лечения болезни Альцгеймера.

6. Применение по п. 5, для приготовления интраназального средства в форме интраназального спрэя.

7. Способ лечения болезни Альцгеймера, характеризующийся тем, что эффективное количество фармацевтической композиции по п. 1 вводится интраназально млекопитающему, нуждающемуся в таком лечении.