НОВОЕ ФОСФОРАМИДАТНОЕ ПРОИЗВОДНОЕ НУКЛЕОЗИДА И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ Российский патент 2017 года по МПК C07H19/10 A61K31/7064 C07H19/04 C07H19/06 A61P31/14 

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Настоящее изобретение относится к области фармацевтической химии и, в частности, относится к ряду новых фосфорамидатных производных нуклеозидов, к композициям, содержащим фосфорамидатные производные нуклеозидов, и к применению указанных соединений или композиций в качестве лекарственного средства для лечения вирусных инфекционных заболеваний, в особенности в качестве лекарственного средства для лечения вирусного гепатита.

Уровень техники

Вирусный гепатит С (HCV) представляет собой эпидемическое заболевание всемирного масштаба, и во всем мире насчитывается более чем 200 миллионов хронических инфицированных больных. Хронический уровень инфекции HCV составляет 15% в Египте, 4,8% в Пакистане и 3,2% в Китае, и указанные страны входят в тройку мировых лидеров. Клинические проявления инфекции вирусного гепатита С разнообразны, начиная от симптомов средней тяжести, таких как воспаление, до серьезных заболеваний, таких как цирроз печени или рак печени. Хронический гепатит С также может осложняться некоторыми внепеченочными проявлениями, включая ревматоидный артрит, сухой кератоконъюнктивит, красный плоский лишай, гломерулонефрит, смешанную криоглобулинемию, B-клеточную лимфому, позднюю кожную порфирию и т.д., которые могут быть вызваны аномальной иммунной реакцией организма. Кроме того, на этапе HCV-индуцированного декомпенсированного цирроза печени могут возникать различные осложнения, такие как асцит, внутрибрюшные заражения, кровотечение из верхних отделов желудочно-кишечного тракта, печеночная энцефалопатия, гепаторенальный синдром, печеночная недостаточность и другие симптомы.

HCV относится к семейству Flaviviridae рода гепатовирусов, и его генетическая структура аналогична двум другим родам семейства Flaviviridae, т.е. роду пестивирусов и роду флавивирусов. В настоящее время стандартные методы лечения HCV инфекции включают использование одного лишь интерферона и применение комбинированной терапии интерферона и рибавирина. Тем не менее, лишь 50% пациентов отзываются на указанные методы, при этом интерферон имеет значительные побочные эффекты, такие как гриппозные симптомы, потеря веса, утомляемость и слабость, а комбинированная терапия интерферона и рибавирина вызывает значительные побочные эффекты, включая гемолиз, анемию и утомление и т.д.

Кроме того, препараты, разработанные для лечения HCV инфекции, включают ингибиторы протеаз, производные соединения тиазолидина, тиазолидины и N-бензанилиды, фенантренхинон, ингибиторы хеликазы, ингибиторы нуклеозидполимеразы и глиотоксин, антисмысловые фосфоротиоатные олигодезоксинуклеотиды, ингибиторы IRES-зависимых трансляций, рибозимы, нуклеозидные аналоги и т.д.

В настоящее время использование фосфатных производных соединений нуклеозидов для лечения инфекции вируса семейства Flaviviridae, в частности, для лечения HCV инфекции, является важным направлением исследований в данной области. WO 2006/065335 раскрывает фторсодержащее пирроло[2,3,d]пиримидиновое производное нуклеозида для ингибирования вируса HCV. В US 2006/0241064 раскрывается производное нуклеозида для лечения вирусной инфекции, вызванной вирусом семейства Flaviviridae, такого как HCV. В WO 2008/121634 раскрыто фосфорамидатное производное нуклеозида для лечения вирусных инфекций у млекопитающих.

Несмотря на приведенное выше описание, все еще сохраняется большая потребность в соединениях, эффективных для лечения и/или предотвращения HCV инфекции.

Сущность изобретения

Объектом настоящего изобретения является разработка нового фосфорамидатного производного нуклеозида общей формулы I для лечения и/или предотвращения инфекции HCV:

,

или его стереоизомера, соли, гидрата, сольвата или его кристаллической формы,

где

(1) R₁ выбран из C_1-6 алкила;

(2) R₂ выбран из атома галогена;

(3) R₃ выбран из ОН, Н и C_1-4 алкокси;

(4) R₄ выбран из Н, C_1-6 алкила и галогенсодержащего C_1-6 алкила;

(5) R₅ выбран из C_1-6 алкила и галогенсодержащего C_1-6 алкила;

(6) R₆ выбран из следующих фрагментов:

a) фенил-Y-, где Y отсутствует или выбран из C_1-6 алкила, C_2-6 алкенила, C_2-6 алкинила, C_2-6 алкенил-(CO)-, C_2-6 алкинил-(СО)-, О, S, амино- и -N(C_1-6 алкил), и где фенил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из C_1-6 алкила, атома галогена, нитро, C_1-6 алкокси, циано, С_2-6 алкенила, С_2-6 алкинила, C_1-6 ациламино, галогеносодержащего С_1-6 алкила, галогеносодержащего C_1-6 алкокси, амино, N(C_1-6 алкил)₂ и С_1-6 алкил NHCO или же указанный фенил и пяти- или шестичленный цикл объединены и образуют бензо-пятичленный цикл или бензо- шестичленный цикл;

b) гетероциклил-Y-, где Y отсутствует или выбран из C_1-6 алкила, C_2-6 алкенила, C_2-6 алкинила, C_2-6 алкенил-(CO)-, C_2-6 алкинил-(СО)-, О, S, амино- и -N(C_1-6 алкил), или гетероциклил вместе с присоединенной к нему группой Y образуют бициклический гетероцикл, при этом указанный гетероциклил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из C_1-6 алкила, атома галогена, нитро, C_1-6 алкокси, циано, С_2-6 алкенила, С_2-6 алкинила, С_1-6 ациламино, галогенсодержащего C_1-6 алкила, галогеносодержащего C_1-6 алкокси, амино, N(C_1-6 алкил)₂ и С_1-6 алкил NHCO;

c) С_1-6 алкил-OC(O)-C_2-6 алкенил- и C_1-6 алкил-O-C(O)-C_2-6 алкенил-С(О)-, где C_1-6 алкил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из C_1-6 алкила, атома галогена, нитро, C_1-6 алкокси, циано, С_2-6 алкенила, С_2-6 алкинила, С_1-6 ациламино, галогенсодержащего C_1-6 алкила, галогенсодержащего C_1-6 алкокси, амино, N(C_1-6 алкил)₂ и С_1-6 алкил NHCO; и

(7) R₇ выбран из Н, атома галогена, C_1-6 алкила, галогеносодержащего C_1-6 алкила, C_1-6 алкокси, галогенсодержащего C_1-6 алкокси, NO₂, CN, С_1-6 алкил-NH-CO-, гидрокси, моно-C_1-6 алкиламино, ди-C_1-6 алкиламино, С_1-6 алкил-S-, C_2-6-алкенил-S, С_2-6 алкинил-S, С_1-6 алкил-SO-, С_2-6 алкенил-SO-, С_2-6 алкинил-SO-, С_1-6 алкил-SO₂-, C_2-6 алкенил-SO₂-, C_2-6 алкинил-SO₂-, С_1-6 алкил-OSO₂-, С_2-6 алкенил-OSO₂-, C_2-6 алкинил-OSO₂-; или

(8) R₆ и R₇ вместе с бензольным циклом, к которому они присоединены, образуют бензо-пятичленный цикл или бензо-шестичленный цикл, где указанный бензо-пятичленный цикл или бензо-шестичленный цикл необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из атома галогена, C_1-6 алкила, C_1-6 алкокси, галогенсодержащего C_1-6 алкила, галогенсодержащего C_1-6 алкокси, фенила, циано, С_1-6 алкил-OC(O)- и C_1-6 алкил-OC(O)-СН₂-.

Другим объектом настоящего изобретения является разработка способа получения фосфорамидатного производного нуклеозида общей формулы I или его стереоизомера, соли, гидрата, сольвата или его кристаллической формы.

Еще одним объектом настоящего изобретения является разработка композиции, содержащей фосфорамидатное производное нуклеозида общей формулы I по настоящему изобретению или его стереоизомер, соль, гидрат, сольват или его кристаллическую форму и фармацевтически приемлемый носитель, и разработка композиции, содержащей фосфорамидатное производное нуклеозида общей формулы I по настоящему изобретению или его стереоизомер, соль, гидрат, сольват или его кристаллическую форму и другой антивирусный препарат.

Еще одним объектом настоящего изобретения является разработка способа лечения и/или предотвращения инфекции вирусного гепатита С с использованием фосфорамидатного производного нуклеозида общей формулы I по настоящему изобретению или его стереоизомера, соли, гидрата, сольвата или его кристаллической формы, а также использование фосфорамидатного производного нуклеозида общей формулы I по настоящему изобретению или его стереоизомера, соли, гидрата, сольвата или его кристаллической формы для изготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения и/или предотвращения инфекции вирусного гепатита С.

Для достижения вышеуказанных целей в настоящем изобретении предлагаются следующие технические решения:

В соответствии с первым аспектом, в настоящем изобретении предлагается новое фосфорамидатное производное нуклеозида общей формулы I:

,

или его стереоизомер, соль, гидрат, сольват или его кристаллическая форма,

где

(1) R₁ выбран из C_1-6 алкила; предпочтительно R₁ выбран из C_1-3 алкила; более предпочтительно R₁ обозначает CH₃;

(2) R₂ выбран из атома галогена; предпочтительно R₂ обозначает F;

(3) R₃ выбран из OH, H, C_1-4 алкокси; предпочтительно R₃ выбран из ОН, Н, метокси; более предпочтительно R₃ обозначает ОН;

(4) R₄ выбран из Н, C_1-6 алкила, галогенсодержащего C_1-6 алкила; предпочтительно R₄ выбран из Н, С_1-6 алкила; более предпочтительно R₄ выбран из Н и C_1-4 алкила;

(5) R₅ выбран из C_1-6 алкила, галогенсодержащего C_1-6 алкила; предпочтительно R₅ выбран из C_1-6 алкила; более предпочтительно R₅ выбран из C_1-4 алкила;

(6) R₆ выбран из:

a) фенил-Y-, где Y отсутствует или выбран из C_1-6 алкила, C_2-6 алкенила, C_2-6 алкинила, C_2-6 алкенил-(CO)-, C_2-6 алкинил-(СО)-, О, S, амино- и -N(C_1-6 алкил), и где указанный фенил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из C_1-6 алкила, атома галогена, нитро, C_1-6 алкокси, циано, С_2-6 алкенила, С_2-6 алкинила, C_1-6 ациламино, галогенсодержащего С_1-6 алкила, галогенсодержащего C_1-6 алкокси, амино, N(C_1-6 алкил)₂ и С_1-6 алкил NHCO, или же фенил и пяти- или шестичленный цикл объединены и образуют бензо-пятичленный цикл или бензо-шестичленный цикл;

b) гетероциклил-Y-, где Y отсутствует или выбран из C_1-6 алкила, C_2-6 алкенила, C_2-6 алкинила, C_2-6 алкенил-(CO)-, C_2-6 алкинил-(СО)-, О, S, амино- и -N(C_1-6 алкил), или гетероциклил вместе с присоединенным к нему Y образует бициклический гетероцикл, и где указанный гетероциклил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из С_1-6 алкила, атома галогена, нитро, C_1-6 алкокси, циано, С_2-6 алкенила, С_2-6 алкинила, С_1-6 ациламино, галогенсодержащего C_1-6 алкила, галогенсодержащего C_1-6 алкокси, амино, N(C_1-6 алкил)₂ и С_1-6 алкил NHCO;

c) С_1-6 алкил-OC(O)-C_2-6 алкенил- и C_1-6 алкил-OC(O)-C_2-6 алкенил-С(О)-, где C_1-6 алкил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из C_1-6 алкила, атома галогена, нитро, C_1-6 алкокси, циано, С_2-6 алкенила, С_2-6 алкинила, С_1-6 ациламино, галогенсодержащего C_1-6 алкила, галогенсодержащего C_1-6 алкокси, амино, N(C_1-6 алкил)₂ и С_1-6 алкил NHCO;

предпочтительно R₆ выбран из:

a) фенил-Y-, где Y отсутствует или выбран из C_1-4 алкила, С_2-4 алкенила, С_2-4 алкинила, С_2-4 алкенил-(CO)-, С_2-4 алкинил-(СО)-, О, S, амино и -N(С_1-4-алкил), и где фенил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из С_1-4 алкила, атома галогена, нитро, C_1-4 алкокси, циано, C_2-4 алкенила, С_2-4 алкинила, С_1-4 ациламино, галогенсодержащего C_1-4 алкила, галогенсодержащего C_1-4 алкокси, амино, N(C_1-4 алкил)₂ и C_1-4 алкил NHCO, или же указанный фенил и пяти- или шестичленный цикл объединены и образуют бензо-пятичленный цикл или бензо-шестичленный цикл;

b) гетероциклил-Y-, где Y отсутствует или выбран из C_1-4 алкила, С_2-4 алкенила, С_2-4 алкинила, С_2-4 алкенил-(CO)-, С_2-4 алкинил-(СО)-, О, S, амино и -N(C_1-4 алкил), или гетероциклил вместе с присоединенным к нему Y образует бициклический гетероцикл, и где указанный гетероциклил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из С_1-4 алкила, атома галогена, нитро, C_1-4 алкокси, циано, С_2-4 алкенила, С_2-4 алкинила, С_1-4 ациламино, галогенсодержащего C_1-4 алкила, галогенсодержащего C_1-4 алкокси, амино, N(C_1-4 алкил)₂ и C_1-4 алкил NHCO;

c) C_1-4 алкил-OC(O)-C_2-4 алкенил- и C_1-4 алкил-OC(O)-C_2-4 алкенил-С(О)-, где С_1-4 алкил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из С_1-4 алкила, атома галогена, нитро, C_1-4 алкокси, циано, С_2-4 алкенила, С_2-4 алкинила, С_1-4 ациламино, галогенсодержащего C_1-4 алкила, галогенсодержащего C_1-4 алкокси, амино, N(C_1-4 алкил)₂ и C_1-4 алкил NHCO;

более предпочтительно R₆ выбран из:

a) фенила, фенил-С_1-3 алкил-, фенил-С_2-3 алкенил-, фенил-С_2-3 алкинил-, фенил-O-, фенил-S-, фенил-NH-, фенил-N(C_1-3 алкил)-, фенил-этенил-(СО)- и нафтил-этенил-(СО)-, где фенил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из С_1-4 алкила, атома галогена, нитро, C_1-4 алкокси, циано, С_2-4 алкенила, С_2-4 алкинила, С_1-4 ациламино, галогенсодержащего C_1-4 алкила, галогенсодержащего C_1-4 алкокси, амино, N(C_1-4 алкил)₂ и C_1-4 алкил NHCO, или же указанный фенил и группа, выбранная из фенила, оксазолила, пиразинила и пирролила, объединены и образуют нафтил, бензоксазолил, бензо[b]пиразинил или бензо[b]пирролил;

b) 1H-имидазолил-Y-, 1,2,4-триазолил-Y-, 1,2,3-триазолил-Y-, тиазолил-Y-, 1,2,3-тиадиазолил-Y-, 1,2,4-тиадиазолил-Y-, 1,3,4-тиадиазолил-Y-, оксазолил-Y-, 1,2,4-оксадиазолил-Y-, 1,2,3-оксадиазолил-Y-, 1,3,4-оксадиазолил-Y-, пиримидинил-Y-, пиразинил-Y-, пиридазинил-Y-, хиноксалинил-Y-, 4H-хромен-4-он-Y-, пиридил-Y-, тиенил-Y-, тиено[3,2-b]тиенил-Y-, где Y отсутствует или выбран из метила, этила, этенила, этинила, этенил-(СО)-, этинил-(СО)-, О, S, амино и -NCH₂-, и где каждая из гетероциклических групп необязательно замещена одной или несколькими группами, выбранными из С_1-4 алкила, атома галогена, нитро, C_1-4 алкокси, циано, C_2-4 алкенила, C_2-4 алкинила, C_1-4 ациламино, галогенсодержащего С_1-4 алкила, галогенсодержащего C_1-4 алкокси, амино, N(C_1-4 алкил)₂ и C_1-4 алкил NHCO;

c) метил-OC(O)--, этил-OC(O)--, пропил-OC(O)--, изопропил-OC(O)--, бутил-OC(O)--, изобутил-OC(О)-- и трет-бутил-OC(O)--.

Еще более предпочтительно R₆ выбран из:

a) фенила, бензоксазолила, бензо[b]пиразинила, бензо[b]пирролила, фенил-(СН₂)-, фенил--, фенил--C(O)- и фенил--, где фенил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из С_1-4 алкила, атома галогена, нитро, C_1-4 алкокси, циано, С_2-4 алкенила, С_2-4 алкинила, С_1-4 ациламино, галогенсодержащего C_1-4 алкила, галогенсодержащего C_1-4 алкокси, амино, N(C_1-4 алкил)₂ и C_1-4 алкил NHCO;

b) 1H-имидазолила, 1,2,4-триазолила, 1,2,3-триазолила, тиазолила, 1,2,3-тиадиазолила, 1,2,4-тиадиазолила, 1,3,4-тиадиазолила, оксазолила, 1,2,4-оксадиазолила, 1,2,3-оксадиазолила, 1,3,4-оксадиазолила, пиримидинила, пиразинила, пиридазинила, хиноксалинила, 4Н-хромен-4-она, пиридила, тиено[3,2-b]тиенила, 1H-имидазолил-(СН₂)-, 1,2,4-триазолил-(СН₂)-, 1,2,3-триазолил-(СН₂)-, тиазолил-(СН₂)-, 1,2,3-тиадиазолил-(СН₂)-, 1,2,4-тиадиазолил-(СН₂)-, 1,3,4-тиадиазолил-(СН₂)-, оксазолил-(СН₂)-, 1,2,4-оксадиазолил-(СН₂)-, 1,2,3-оксадиазолил-(СН₂)-, 1,3,4-оксадиазолил-(СН₂)-, пиримидинил-(СН₂)-, пиразинил-(СН₂)-, пиридазинил-(СН₂)-, хиноксалинил-(СН₂)-, 4H-хромен-4-он-(СН₂)-, пиридил-(СН₂)-, тиено[3,2-b]тиенил-(СН₂)-, 1H-имидазолил--, 1,2,4-триазолил--, 1,2,3-триазолил--, тиазолил--, 1,2,3-тиадиазолил--, 1,2,4-тиадиазолил--, 1,3,4-тиадиазолил--, оксазолил--, 1,2,4-оксадиазолил--, 1,2,3-оксадиазолил--, 1,3,4-оксадиазолил--, пиримидинил--, пиразинил--, пиридазинил--, хиноксалинил--, 4H-хромен-4-он--, пиридил--, тиено[3,2-b]тиенил--, 1H-имидазолил--, 1,2,4-триазолил--, 1,2,3-триазолил--, тиазолил--, 1,2,3-тиадиазолил--, 1,2,4-тиадиазолил--, 1,3,4-тиадиазолил--, оксазолил--, 1,2,4-оксадиазолил--, 1,2,3-оксадиазолил--, 1,3,4-оксадиазолил--, пиримидинил--, пиразинил--, пиридазинил--, хиноксалинил--, 4H-хромен-4-он--, пиридил-- и тиено[3,2-b]тиенил--, где каждая из гетероциклических групп необязательно замещена одной или несколькими группами, выбранными из С_1-4 алкила, атома галогена, нитро, C_1-4 алкокси, циано, C_2-4 алкенила, С_2-4 алкинила, C_1-4 ациламино, галогенсодержащего C_1-4 алкила, галогенсодержащего C_1-4 алкокси, амино, N(C_1-4 алкил)₂ и C_1-4 алкил NHCO;

c) метил-OC(O)--; и

(7) R₇ выбран из Н, атома галогена, C_1-6 алкила, галогенсодержащего C_1-6 алкила, C_1-6 алкокси, галогенсодержащего C_1-6 алкокси, NO₂, CN, С_1-6 алкил-NH-CO-, гидрокси, моно-C_1-6 алкиламино, ди-C_1-6 алкиламино, С_1-6 алкил-S-, C_2-6 алкенил-S, С_2-6 алкинил-S, С_1-6 алкил-SO-, С_2-6 алкенил-SO-, С_2-6 алкинил-SO-, С_1-6 алкил-SO₂, C_2-6 алкенил-SO₂, C_2-6 алкинил-SO₂, С_1-6 алкил-OSO₂-, С_2-6 алкенил-OSO₂-, C_2-6 алкинил-OSO₂-; предпочтительно R₇ выбран из Н, атома галогена, C_1-6 алкила, галогенсодержащего C_1-6 алкила, C_1-6 алкокси, галогенсодержащего C_1-6 алкокси, NO₂, CN, С_1-6 алкил-NH-CO-; более предпочтительно R₇ выбран из Н, атома галогена, C_1-4 алкила, галогенсодержащего C_1-4 алкила, C_1-4 алкокси, галогенсодержащего С_1-4 алкокси, NO₂, CN, C_1-4 алкил-NH-CO-; или

(8) R₆ и R₇ вместе с бензольным циклом, к которому они присоединены, образуют бензо-пятичленный цикл или бензо-шестичленный цикл, где указанный бензо-пятичленный цикл или бензо-шестичленный цикл необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из атома галогена, C_1-6 алкила, C_1-6 алкокси, галогенсодержащего C_1-6 алкила, галогенсодержащего C_1-6 алкокси, фенила, циано, С_1-6 алкил-OC(O)-, C_1-6 алкил-OC(O)-СН₂-; предпочтительно R₆ и R₇ вместе с бензольным циклом, к которому они присоединены, образуют 1,2,3,4-тетрагидронафталин, 2,3-дигидро-1Н-инден, индол, бензофуран, хиноксалин, 4H-хромен-4-он, бензо[d]изоксазол, бензо[d]оксазол, бензо[с][1,2,5]тиадиазол, бензо[b]тиофен, бензодигидропиран-4-он, где каждый из указанных конденсированных циклов необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из атома галогена, C_1-6 алкила, C_1-6 алкокси, галогенсодержащего С_1-6 алкила, галогенсодержащего C_1-6 алкокси, фенила, циано, С_1-6 алкил-OC(O)- и C_1-6 алкил-OC(O)-СН₂.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения предлагается соединение общей формулы I или его стереоизомер, соль, гидрат, сольват или его кристаллическая форма, где R₁ обозначает метил, этил, пропил или изопропил; R₂ обозначает F; R₃ обозначает ОН, Н или метокси; R₄ обозначает Н, метил, этил, н-пропил или изопропил; R₅ обозначает метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил или трет-бутил; R₆ обозначает фенил-Y- или гетероциклил-Y-, где Y отсутствует или выбран из C_1-3 алкила, С_2-3 алкенила, С_2-3 алкинила, С_2-3 алкенил-(CO)-, С_2-3 алкинил-(СО)-, О, S, амино и -N(С_1-3 алкил), и где указанный фенил или указанный гетероциклил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из C_1-3 алкила, атома галогена, нитро, C_1-3 алкокси, циано, С_2-3 алкенила, С_2-3 алкинила, С_1-3 ациламино, галогенсодержащего С_1-3 алкила, галогенсодержащего C_1-3 алкокси, амино, N-(С_1-3 алкил)₂ и С_1-3 алкил NHCO, или же указанный фенил и пяти- или шестичленный цикл вместе образуют бензо-пятичленный цикл или бензо-шестичленный цикл.

Удивительно, но авторы настоящего изобретения обнаружили, что, когда группа R₆ и кислородная группа, обе из которых присоединены к бензольному циклу, находятся в пара- или мета-положении друг к другу, в частности, когда R₆ выбран из фенил-Y- и гетероциклил-Y-, соединение общей формулы I обладает превосходной активностью против HCV. Не желая связывать себя с какой-либо существующей теорией, авторы настоящего изобретения полагают, что соединение общей формулы I, где группа R₆, в частности, выбрана из фенил-Y-, а фенил-Y- или гетероциклил-Y располагаются либо в пара-, либо в мета-положении к группе -О-, присоединенной к бензольному циклу в структуре фенил-Y-фенил-O- или гетероциклил-Y-фенил-O-, обладает превосходной активностью против HCV.

В другом предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения предлагается соединение общей формулы I или его стереоизомер, соль, гидрат, сольват или его кристаллическая форма, где R₁ обозначает метил или этил; R₂ обозначает F; R₃ обозначает ОН или Н; R₄ обозначает Н, метил или этил; R₅ обозначает метил, этил, н-пропил или изопропил; R₆ обозначает фенил-Y-, где Y отсутствует или выбран из C_1-3 алкила, С_2-3 алкенила, С_2-3 алкинила, С_2-3 алкенил-(CO)- и С_2-3 алкинил-(CO)-, и где указанный фенил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из C_1-3 алкила, атома галогена, нитро, C_1-3 алкокси, циано, С_2-3 алкенила, С_2-3 алкинила, С_1-3 ациламино, галогенсодержащего C_1-3 алкила, галогенсодержащего C_1-3 алкокси, амино, N(С_1-3 алкил)₂ и С_1-3 алкил NHCO, или же указанный фенил и группа, выбранная из оксазолила, пиразинила и пирролила, объединены и образуют бензоксазолил, бензо[b]пиразинил или бензо[b]пирролил, где группа R₆ "фенил-Y-" и кислородная группа, обе из которых присоединены к бензольному циклу, находятся в пара- или мета-положении друг к другу.

В другом предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения предлагается соединение общей формулы I или его стереоизомер, соль, гидрат, сольват или его кристаллическая форма, где R₁ обозначает метил; R₂ обозначает F; R₃ обозначает ОН; R₄ обозначает Н, метил или этил; R₅ обозначает метил, этил, н-пропил или изопропил; R₆ обозначает фенил-Y-, где Y отсутствует или выбран из C_1-3 алкила, С_2-3 алкенила, С_2-3 алкинила, С_2-3 алкенил-(CO)- и С_2-3 алкинил-(CO)-, и где указанный фенил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из C_1-3 алкила, атома галогена, нитро, C_1-3 алкокси, галогенсодержащего С_1-3 алкила, галогенсодержащего C_1-3 алкокси, циано, С_2-3 алкенила, С_2-3 алкинила, C_1-3 ациламино, амино и С_1-3 алкил NHCO, или же указанный фенил и группа, выбранная из оксазолила, пиразинила и пирролила, объединены и образуют бензоксазолил, бензо[b]пиразинил или бензо[b]пирролил, где группа R₆ "фенил-Y-" и кислородная группа, обе из которых присоединены к бензольному циклу, находятся в пара- или мета-положении друг к другу.

В другом предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения предлагается соединение общей формулы I или его стереоизомер, соль, гидрат, сольват или его кристаллическая форма, где R₁ обозначает метил; R₂ обозначает F; R₃ обозначает ОН; R₄ обозначает Н или метил; R₅ обозначает изопропил; R₆ обозначает фенил-Y-, где Y отсутствует или выбран из C_1-3 алкила, С_2-3 алкенила, С_2-3 алкинила, С_2-3 алкенил-(CO)- и С_2-3 алкинил-(CO)-, и где указанный фенил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из C_1-3 алкила, атома галогена, нитро, C_1-3 алкокси, галогенсодержащего С_1-3 алкила, галогенсодержащего C_1-3 алкокси, циано и С_1-3 алкил NHCO, или же указанный фенил и группа, выбранная из оксазолила, пиразинила и пирролила, объединены и образуют бензоксазолил, бензо[b]пиразинил или бензо[b]пирролил, где группа R₆ "фенил-Y-"и кислородная группа, обе из которых присоединены к бензольному циклу, находятся в пара- или мета-положении друг к другу.

В еще одном предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения предлагается соединение общей формулы I или его стереоизомер, соль, гидрат, сольват или его кристаллическая форма, где R₆ обозначает фенил или бензил, предпочтительно фенильная или бензильная группа и кислородная группа, обе из которых присоединены к бензольному циклу, находятся в пара- или мета-положении друг к другу.

В других вариантах осуществления настоящего изобретения предлагается соединение общей формулы I или его стереоизомер, соль, гидрат, сольват или его кристаллическая форма, где R₆ обозначает гетероциклил-Y-, где гетероциклил может также обозначать фурил, пирролил, тетразолил, фуразанил, диоксадиазолил, пиранил, тиопиранил, пиперидинил, триазинил, оксазинил и т.д.

Более предпочтительно, в некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения предлагается соединение общей формулы Ia:

,

или его стереоизомер, соль, гидрат, сольват или его кристаллическая форма,

где

(1) R₆ выбран из:

a) фенил-Y-, где Y отсутствует или выбран из C_1-6 алкила, C_2-6 алкенила, C_2-6 алкинила, C_2-6 алкенил-(CO)-, C_2-6 алкинил-(СО)-, О, S, амино- и -N(C_1-6 алкил), и где фенил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из C_1-6 алкила, атома галогена, нитро, C_1-6 алкокси, циано, С_2-6 алкенила, С_2-6 алкинила, C_1-6 ациламино, галогеносодержащего С_1-6 алкила, галогеносодержащего C_1-6 алкокси, амино, N(C_1-6 алкил)₂ и С_1-6 алкил NHCO, или же указанный фенил и пяти- или шестичленный цикл объединены и образуют бензо-пятичленный цикл или бензо-шестичленный цикл;

b) гетероциклил-Y-, где Y отсутствует или выбран из C_1-6 алкила, C_2-6 алкенила, C_2-6 алкинила, C_2-6 алкенил-(CO)-, C_2-6 алкинил-(СО)-, О, S, амино- и -N(C_1-6 алкил), или гетероциклил вместе с присоединенной к нему группой Y образуют бициклический гетероцикл, при этом указанный гетероциклил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из C_1-6 алкила, атома галогена, нитро, C_1-6 алкокси, циано, С_2-6 алкенила, С_2-6 алкинила, С_1-6 ациламино, галогенсодержащего C_1-6 алкила, галогеносодержащего C_1-6 алкокси, амино, N(C_1-6 алкил)₂ и С_1-6 алкил NHCO; и

c) С_1-6 алкил-OC(O)-C_2-6 алкенил- и C_1-6 алкил-O-C(O)-C_2-6 алкенил-С(О)-, где C_1-6 алкил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из C_1-6 алкила, атома галогена, нитро, C_1-6 алкокси, циано, С_2-6 алкенила, С_2-6 алкинила, С_1-6 ациламино, галогенсодержащего C_1-6 алкила, галогенсодержащего C_1-6 алкокси, амино, N(C_1-6 алкил)₂ и С_1-6 алкил NHCO;

предпочтительно R₆ выбран из:

a) фенил-Y-, где Y отсутствует или выбран из C_1-4 алкила, С_2-4 алкенила, С_2-4 алкинила, С_2-4 алкенил-(CO)-, С_2-4 алкинил-(СО)-, О, S, амино и -N(С_1-4-алкил), и где фенил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из С_1-4 алкила, атома галогена, нитро, C_1-4 алкокси, циано, C_2-4 алкенила, С_2-4 алкинила, С_1-4 ациламино, галогенсодержащего C_1-4 алкила, галогенсодержащего C_1-4 алкокси, амино, N(C_1-4 алкил)₂ и C_1-4 алкил NHCO, или же указанный фенил и пяти- или шестичленный цикл объединены и образуют бензо-пятичленный цикл или бензо-шестичленный цикл;

b) гетероциклил-Y-, где Y отсутствует или выбран из C_1-4 алкила, С_2-4 алкенила, С_2-4 алкинила, С_2-4 алкенил-(CO)-, С_2-4 алкинил-(СО)-, О, S, амино и -N(C_1-4 алкил), или гетероциклил вместе с присоединенным к нему Y образует бициклический гетероцикл, и где указанный гетероциклил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из С_1-4 алкила, атома галогена, нитро, C_1-4 алкокси, циано, С_2-4 алкенила, С_2-4 алкинила, С_1-4 ациламино, галогенсодержащего C_1-4 алкила, галогенсодержащего C_1-4 алкокси, амино, N(C_1-4 алкил)₂ и C_1-4 алкил NHCO; и

c) C_1-4 алкил-OC(O)-C_2-4 алкенил- и C_1-4 алкил-OC(O)-C_2-4 алкенил-С(О)-, где С_1-4 алкил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из С_1-4 алкила, атома галогена, нитро, C_1-4 алкокси, циано, С_2-4 алкенила, С_2-4 алкинила, С_1-4 ациламино, галогенсодержащего C_1-4 алкила, галогенсодержащего C_1-4 алкокси, амино, N(C_1-4 алкил)₂ и C_1-4 алкил NHCO;

более предпочтительно R₆ выбран из:

a) фенила, фенил-С_1-3 алкил-, фенил-С_2-3 алкенил-, фенил-С_2-3 алкинил-, фенил-O-, фенил-S-, фенил-NH-, фенил-N(C_1-3 алкил)-, фенил-этенил-(СО)- и нафтил-этенил-(СО)-, где фенил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из С_1-4 алкила, атома галогена, нитро, C_1-4 алкокси, циано, С_2-4 алкенила, С_2-4 алкинила, С_1-4 ациламино, галогенсодержащего C_1-4 алкила, галогенсодержащего C_1-4 алкокси, амино, N(C_1-4 алкил)₂ и C_1-4 алкил NHCO, или же указанный фенил и группа, выбранная из фенила, оксазолила, пиразинила и пирролила, объединены и образуют нафтил, бензоксазолил, бензо[b]пиразинил или бензо[b]пирролил;

b) 1H-имидазолил-Y-, 1,2,4-триазолил-Y-, 1,2,3-триазолил-Y-, тиазолил-Y-, 1,2,3-тиадиазолил-Y-, 1,2,4-тиадиазолил-Y-, 1,3,4-тиадиазолил-Y-, оксазолил-Y-, 1,2,4-оксадиазолил-Y-, 1,2,3-оксадиазолил-Y-, 1,3,4-оксадиазолил-Y-, пиримидинил-Y-, пиразинил-Y-, пиридазинил-Y-, хиноксалинил-Y-, 4H-хромен-4-он-Y-, пиридил-Y-, тиенил-Y-, тиено[3,2-b]тиенил-Y-, где Y отсутствует или выбран из -CH₂-, -CH₂-CH₂-, этенила, этинила, этенил-(СО)-, этинил-(СО)-, О, S, амино и -NCH₂-, и где каждая из указанных гетероциклических групп необязательно замещена одной или несколькими группами, выбранными из С_1-4 алкила, атома галогена, нитро, C_1-4 алкокси, циано, C_2-4 алкенила, C_2-4 алкинила, C_1-4 ациламино, галогенсодержащего С_1-4 алкила, галогенсодержащего C_1-4 алкокси, амино, N(C_1-4 алкил)₂ и C_1-4 алкил NHCO; и

c) метил-OC(O)--, этил-OC(O)--, пропил-OC(O)--, изопропил-OC(O)--, бутил-OC(O)--, изобутил-OC(О)-- и трет-бутил-OC(O)--.

Еще более предпочтительно R₆ выбран из:

a) фенила, фенил-(СН₂)-, фенил--, фенил--C(O)- и фенил--, где фенил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из С_1-4 алкила, атома галогена, нитро, C_1-4 алкокси, циано, С_2-4 алкенила, С_2-4 алкинила, С_1-4 ациламино, галогенсодержащего C_1-4 алкила, амино, N(C_1-4 алкил)₂ и C_1-4 алкил NHCO, или же указанный фенил и группа, выбранная из оксазолила, пиразинила и пирролила, объединены и образуют бензоксазолил, бензо[b]пиразинил или бензо[b]пирролил;

b) 1H-имидазолила, 1,2,4-триазолила, 1,2,3-триазолила, тиазолила, 1,2,3-тиадиазолила, 1,2,4-тиадиазолила, 1,3,4-тиадиазолила, оксазолила, 1,2,4-оксадиазолила, 1,2,3-оксадиазолила, 1,3,4-оксадиазолила, пиримидинила, пиразинила, пиридазинила, хиноксалинила, 4Н-хромен-4-она, тиено[3,2-b]тиенила, 1H-имидазолил-(СН₂)-, 1,2,4-триазолил-(СН₂)-, 1,2,3-триазолил-(СН₂)-, тиазолил-(СН₂)-, 1,2,3-тиадиазолил-(СН₂)-, 1,2,4-тиадиазолил-(СН₂)-, 1,3,4-тиадиазолил-(СН₂)-, оксазолил-(СН₂)-, 1,2,4-оксадиазолил-(СН₂)-, 1,2,3-оксадиазолил-(СН₂)-, 1,3,4-оксадиазолил-(СН₂)-, пиримидинил-(СН₂)-, пиразинил-(СН₂)-, пиридазинил-(СН₂)-, хиноксалинил-(СН₂)-, 4H-хромен-4-он-(СН₂)-, пиридил-(СН₂)-, тиено[3,2-b]тиенил-(СН₂)-, 1H-имидазолил--, 1,2,4-триазолил--, 1,2,3-триазолил--, тиазолил--, 1,2,3-тиадиазолил--, 1,2,4-тиадиазолил--, 1,3,4-тиадиазолил--, оксазолил--, 1,2,4-оксадиазолил--, 1,2,3-оксадиазолил--, 1,3,4-оксадиазолил--, пиримидинил--, пиразинил--, пиридазинил--, хиноксалинил--, 4H-хромен-4-он--, пиридил--, тиено[3,2-b]тиенил--, 1H-имидазолил--, 1,2,4-триазолил--, 1,2,3-триазолил--, тиазолил--, 1,2,3-тиадиазолил--, 1,2,4-тиадиазолил--, 1,3,4-тиадиазолил--, оксазолил--, 1,2,4-оксадиазолил--, 1,2,3-оксадиазолил--, 1,3,4-оксадиазолил--, пиримидинил--, пиразинил--, пиридазинил--, хиноксалинил--, 4H-хромен-4-он--, пиридил-- и тиено[3,2-b]тиенил--, где каждая из указанных гетероциклических групп необязательно замещена одной или несколькими группами, выбранными из С_1-4 алкила, атома галогена, нитро, C_1-4 алкокси, циано, C_2-4 алкенила, С_2-4 алкинила, C_1-4 ациламино, галогенсодержащего C_1-4 алкила, галогенсодержащего C_1-4 алкокси, амино, N(C_1-4 алкил)₂ и C_1-4 алкил NHCO; и

c) метил-OC(O)--; и

(2) R₇ выбран из Н, атома галогена, C_1-6 алкила, галогенсодержащего C_1-6 алкила, C_1-6 алкокси, галогенсодержащего C_1-6 алкокси, NO₂, CN и С_1-6 алкил-NH-CO-; предпочтительно R₇ выбран из Н, атома галогена, C_1-4 алкила, галогенсодержащего C_1-4 алкила, C_1-4 алкокси, галогенсодержащего C_1-4 алкокси, NO₂, CN, С_1-4 алкил-NH-CO-; более предпочтительно R₇ выбран из Н, атома фтора, атома хлора, метила, этила, н-пропила, изопропила, фторметила, дифторметила, трифторметила, фторэтила, дифторэтила, трифторэтила, метокси, этокси, н-пропокси, изопропокси, фторметокси, дифторметокси, трифторметокси, фторэтокси, дифторэтокси, трифторэтокси, NO₂, CN и C_1-4 алкил-NH-CO-; или

(3) R₆ и R₇ вместе с бензольным циклом, к которому они присоединены, образуют бензо-пятичленный цикл или бензо-шестичленный цикл, где указанный бензо-пятичленный цикл или бензо-шестичленный цикл необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из атома галогена, C_1-6 алкила, C_1-6 алкокси, галогенсодержащего C_1-6 алкила, галогенсодержащего C_1-6 алкокси, фенила, циано, С_1-6 алкил-OC(O)-, C_1-6 алкил-OC(O)-СН₂-; предпочтительно R₆ и R₇ вместе с бензольным циклом, к которому они присоединены, образуют 1,2,3,4-тетрагидронафталин, 2,3-дигидро-1Н-инден, индол, бензофуран, хиноксалин, 4H-хромен-4-он, бензо[d]изоксазол, бензо[d]оксазол, бензо[с][1,2,5]тиадиазол, бензо[b]тиофен, бензодигидропиран-4-он, где каждый из указанных конденсированных циклов необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из атома галогена, C_1-6 алкила, C_1-6 алкокси, галогенсодержащего С_1-6 алкила, галогенсодержащего C_1-6 алкокси, фенила, циано, С_1-6 алкил-OC(O)-, C_1-6 алкил-OC(O)-СН₂.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения предлагается соединение общей формулы Ia или его стереоизомер, соль, гидрат, сольват или его кристаллическая форма, где R₆ обозначает фенил-Y- или гетероциклил-Y-, где Y отсутствует или выбран из С_1-3 алкила, С_2-3 алкенила, С_2-3 алкинила, С_2-3 алкенил-(СО)-, С_2-3 алкинил-(СО)-, О, S, амино и -N(С_1-3 алкил), и где фенил или гетероциклил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из C_1-3 алкила, атома галогена, нитро, C_1-3 алкокси, циано, С_2-3 алкенила, С_2-3 алкинила, C_1-3 ациламино, галогенсодержащего C_1-3 алкила, галогенсодержащего C_1-3 алкокси, амино, NH(C_1-3 алкил), N(C_1-3 алкил)₂ и С_1-3 алкила NHCO, или же указанный фенил и пяти- или шестичленный цикл, объединены и образуют бензо-пятичленный цикл или бензо-шестичленный цикл. Предпочтительно, в настоящем изобретении предлагается соединение общей формулы Ia или его стереоизомер, соль, гидрат, сольват или его кристаллическая форма, где группа R₆ "фенил-Y-" или "гетероциклил-Y-" и кислородная группа, обе из которых присоединены к бензольному циклу, находятся в пара- или мета-положении друг к другу.

В настоящем изобретении предлагается соединение общей формулы Ia или его стереоизомер, соль, гидрат, сольват или его кристаллическая форма, где R₆ обозначает 1H-имидазолил, 1,2,4-триазолил, 1,2,3-триазолил, тиазолил, 1,2,3-тиадиазолил, 1,2,4-тиадиазолила, 1,3,4-тиадиазолил, оксазолил, 1,2,4-оксадиазолил, 1,2,3-оксадиазолил, 1,3,4-оксадиазолил, пиримидинил, пиразинил, пиридазинил, хиноксалинил, 4Н-хромен-4-он, тиено[3,2-b]тиенил, 1H-имидазолил-(СН₂)-, 1,2,4-триазолил-(СН₂)-, 1,2,3-триазолил-(СН₂)-, тиазолил-(СН₂)-, 1,2,3-тиадиазолил-(СН₂)-, 1,2,4-тиадиазолил-(СН₂)-, 1,3,4-тиадиазолил-(СН₂)-, оксазолил-(СН₂)-, 1,2,4-оксадиазолил-(СН₂)-, 1,2,3-оксадиазолил-(СН₂)-, 1,3,4-оксадиазолил-(СН₂)-, пиримидинил-(СН₂)-, пиразинил-(СН₂)-, пиридазинил-(СН₂)-, хиноксалинил-(СН₂)-, 4H-хромен-4-он-(СН₂)-, пиридил-(СН₂)-, тиено[3,2-b]тиенил-(СН₂)-, 1H-имидазолил--, 1,2,4-триазолил--, 1,2,3-триазолил--, тиазолил--, 1,2,3-тиадиазолил--, 1,2,4-тиадиазолил--, 1,3,4-тиадиазолил--, оксазолил--, 1,2,4-оксадиазолил--, 1,2,3-оксадиазолил--, 1,3,4-оксадиазолил--, пиримидинил--, пиразинил--, пиридазинил--, хиноксалинил--, 4H-хромен-4-он--, пиридил--, тиено[3,2-b]тиенил--, 1H-имидазолил--, 1,2,4-триазолил--, 1,2,3-триазолил--, тиазолил--, 1,2,3-тиадиазолил--, 1,2,4-тиадиазолил--, 1,3,4-тиадиазолил--, оксазолил--, 1,2,4-оксадиазолил--, 1,2,3-оксадиазолил--, 1,3,4-оксадиазолил--, пиримидинил--, пиразинил--, пиридазинил--, хиноксалинил--, 4H-хромен-4-он--, пиридил-- или тиено[3,2-b]тиенил--, где каждая из указанных гетероциклических групп необязательно замещена одной или несколькими группами, выбранными из С_1-3 алкила, атома галогена, нитро, C_1-3 алкокси, циано, галогенсодержащего C_1-3 алкила, галогенсодержащего C_1-3 алкокси, C_2-3 алкенила, С_2-3 алкинила, C_1-3 ациламино, амино, NH(C_1-3 алкил), N(C_1-3 алкил)₂ и C_1-4 алкил NHCO, где указанная гетероциклильная и кислородная группа, обе из которых присоединены к бензольному циклу, находятся в пара- или мета-положении друг к другу.

В другом предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения предлагается соединение общей формулы Ia или его стереоизомер, соль, гидрат, сольват или его кристаллическая форма, где R₆ обозначает фенил-Y-, где Y отсутствует или выбран из C_1-3 алкила, С_2-3 алкенила, С_2-3 алкинила, С_2-3 алкенил-(СО)- и С_2-3 алкинил-(СО)-, и где фенил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из C_1-3 алкила, атома галогена, нитро, C_1-3 алкокси, циано, С_2-3 алкенила, С_2-3 алкинила, С_1-3 ациламино, галогенсодержащего C_1-3 алкила, галогенсодержащего C_1-3 алкокси, амино, NH(C_1-3 алкил), N(C_1-3 алкил)₂ и С_1-3 алкил NHCO, или же указанный фенил и группа, выбранная из оксазолила, пиразинила и пирролила, объединены и образуют бензоксазолил, бензо[b]пиразинил или бензо[b]пирролил, где группа R₆ и кислородная группа, обе из которых присоединены к бензольному циклу, находятся в пара- или мета-положении друг к другу.

В другом предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения предлагается соединение общей формулы Ia или его стереоизомер, соль, гидрат, сольват или его кристаллическая форма, где R₆ обозначает фенил-Y-, где Y отсутствует или выбран из C_1-3 алкила, С_2-3 алкенила, С_2-3 алкинила, С_2-3 алкенил-(СО)- и С_2-3 алкинил-(СО)-, и где фенил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из C_1-3 алкила, атома галогена, нитро, C_1-3 алкокси, циано, С_2-3 алкенила, С_2-3 алкинила, галогенсодержащего C_1-3 алкила, галогенсодержащего C_1-3 алкокси, С_1-3 ациламино, амино и С_1-3 алкил NHCO, или же указанный фенил и группа, выбранная из оксазолила, пиразинила и пирролила, объединены и образуют бензоксазолил, бензо[b]пиразинил или бензо[b]пирролил, где группа R₆ и кислородная группа, обе из которых присоединены к бензольному циклу, находятся в пара- или мета-положении друг к другу.

В другом предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения предлагается соединение общей формулы Ia или его стереоизомер, соль, гидрат, сольват или его кристаллическая форма, где R₆ обозначает фенил-Y-, где Y отсутствует или выбран из C_1-3 алкила, С_2-3 алкенила, С_2-3 алкинила, С_2-3 алкенил-(СО)- и С_2-3 алкинил-(СО)-, и где указанный фенил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из C_1-3 алкила, атома галогена, нитро, C_1-3 алкокси, циано, галогенсодержащего C_1-3 алкила, галогенсодержащего C_1-3 алкокси и С_1-3 алкил NHCO, или же фенил и группа, выбранная из оксазолила, пиразинила и пирролила, объединены и образуют бензоксазолил, бензо[b]пиразинил или бензо[b]пирролил, где группа R₆ и кислородная группа, обе из которых присоединены к бензольному циклу, находятся в пара- или мета-положении друг к другу.

В другом предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения предлагается соединение общей формулы Ia или его стереоизомер, соль, гидрат, сольват или его кристаллическая форма, где R₆ обозначает фенил или бензил (т.е. фенил-СН₂-), предпочтительно фенильная или бензильная группа и кислородная группа, обе из которых присоединены к бензольному циклу, находятся в пара- или мета-положении друг к другу.

В других вариантах осуществления настоящего изобретения предлагается соединение общей формулы Ia или его стереоизомер, соль, гидрат, сольват или его кристаллическая форма, где R₆ обозначает гетероциклил-Y-, где гетероциклил может также представлять собой фурил, пирролил, тетразолил, фуразанил, диоксадиазолил, пиранил, тиопиранил, пиперидинил, триазинил, оксазинил и т.п.

В настоящем изобретении предлагаются следующие конкретные соединения:

Другой аспект настоящего изобретения касается способа получения соединения общей формулы I или Ia по настоящему изобретению, который включает следующие стадии:

a) взаимодействие соединения (1) с оксихлоридом фосфора в щелочных условиях с последующим добавлением соединения (2), а затем добавление пентафторфенола, при этом получают соединение (3);

b) взаимодействие соединения (3) с соединением (4) при низкой температуре, при этом получают требуемое соединение (5),

где значения R₁, R₂, R₃, R₄, R₅, R₆ и R₇ определены выше в общей формуле I.

Третий аспект настоящего изобретения касается фармацевтической композиции, содержащей соединение общей формулы I или Ia по настоящему изобретению или его стереоизомер, соль, гидрат, сольват или его кристаллическую форму.

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения предлагается фармацевтическая композиция, содержащая соединение общей формулы I или Ia или его стереоизомер, соль, гидрат, сольват или его кристаллическую форму и дополнительные терапевтические агенты против HCV, выбранные из одного или более из следующих агентов: ингибиторы протеазы HCV NS3, HCV NS5B РНК-зависимые ингибиторы РНК-полимеразы, нуклеозидные аналоги, интерферон α, пегилированный интерферон, рибавирин, левовирин, вирамидин, агонисты TLR7, агонисты TLR9, ингибиторы циклофилина, ингибиторы α-глюкозидазы, ингибиторы NS5A и ингибиторы NS3 хеликазы.

Фармацевтическая композиция, пригодная для перорального или парентерального введения, может быть приготовлена путем смешивания соединения формулы I или Ia по настоящему изобретению или его стереоизомера, соли, гидрата, сольвата или его кристаллической формы с фармацевтически приемлемым носителем, разбавителем или наполнителем. Способы введения включают, однако, этим не ограничиваясь, внутрикожное, внутримышечное, внутрибрюшинное, внутривенное, подкожное, интраназальное и пероральное введение. Составы могут быть введены любыми путями, например, путем инфузии или инъекции болюса, или путем эпителиальной или кожно-слизистой (например, слизистой оболочки полости рта или прямой кишки и т.д.) абсорбции. Введение может быть системным или местным. Примеры композиций для перорального введения включают твердые или жидкие лекарственные формы, которые, в частности, включают таблетки, пилюли, гранулы, порошок, капсулы, сиропы, эмульсии, суспензии и т.п. Композиции могут быть получены способами, хорошо известными в данной области техники, и могут содержать обычные носители, разбавители или наполнители, используемые в области приготовления фармацевтических композиций.

В соответствии с четвертым аспектом, настоящее изобретение относится к способу лечения субъекта, инфицированного вирусом семейства Flaviviridae, с использованием соединения общей формулы I или Ia по настоящему изобретению или его стереоизомера, соли, гидрата, сольвата или его кристаллической формы, или с использованием фармацевтической композиции по настоящему изобретению, который включает введение указанному субъекту соединения общей формулы I или Ia, или его стереоизомера, соли, гидрата, сольвата или его кристаллической формы, или введение фармацевтической композиции, содержащей соединение общей формулы I или Ia, или его стереоизомер, соль, гидрат, сольват или его кристаллическую форму, в количестве, эффективном для уменьшения вирусной нагрузки указанного вируса у указанного субъекта. В одном варианте осуществления настоящего изобретения предлагается способ лечения и/или предотвращения инфекции вирусной РНК, в частности, вирусной инфекции семейства Flaviviridae, который включает введение нуждающемуся в этом субъекту соединения по настоящему изобретению или его стереоизомера, соли, гидрата, сольвата, его кристаллической формы или его фармацевтической композиции. В другом варианте осуществления настоящего изобретения предлагается способ подавления инфекции вирусной РНК, в частности, вирусной инфекции семейства Flaviviridae, который включает контактирование указанного вируса с терапевтически эффективным количеством соединения по настоящему изобретению или его стереоизомера, соли, гидрата, сольвата, его кристаллической формой или его фармацевтической композиции.

"Вирусы Flaviviridae" означает любой вирус семейства Flaviviridae, в том числе такие вирусы, которые заражают человека или отличных от человека животных, такие как флавивирусы, пестивирусы и вирус гепатита C. Соединения и композиции по настоящему изобретению могут быть использованы, в частности, для лечения или предотвращения инфекции HCV.

В соответствии с другим аспектом, настоящее изобретение касается применения соединения общей формулы I или Ia по настоящему изобретению или его стереоизомера, соли, гидрата, сольвата или его кристаллической формы для предотвращения или лечения вирусных инфекционных заболеваний, в частности, инфекционных заболеваний, вызываемых вирусами семейства Flaviviridae, а также применение соединения общей формулы I или Ia по настоящему изобретению или его стереоизомера, соли, гидрата, сольвата или его кристаллической формы для приготовления лекарственного средства, предназначенного для предотвращения и/или лечения вирусных инфекционных заболеваний, в частности, для предотвращения и/или лечения заболеваний, вызванных инфекцией HCV, такой как вирусный гепатит HCV. Примеры подобных заболеваний включают острый гепатит C, хронический гепатит C и смешанную инфекцию гепатита С и гепатита B или гепатита D.

Определение

Если не указано иное, все технические и научные термины, используемые в данном описании, имеют то же самое значение, которое обычно понятно специалисту в данной области техники.

Термин "стереоизомер" относится к изомерам, образованным различным пространственным расположением атомов в молекулах, включая цис- и транс-изомеры, и энантиомеры, и конформационные изомеры. Все указанные стереоизомеры включены в объем настоящего изобретения. Отдельный стереоизомер соединения по настоящему изобретению может быть практически свободен от других изомеров, или представлять собой смесь, например, рацемат, или может быть смешан со всеми другими стереоизомерами.

Термин "соль" относится к фармацевтически приемлемой соли, образованной соединениями по настоящему изобретению с кислотой. Указанная кислота может быть выбрана из фосфорной кислоты, серной кислоты, хлористоводородной кислоты, бромистоводородной кислоты, лимонной кислоты, малеиновой кислоты, малоновой кислоты, миндальной кислоты, янтарной кислоты, фумаровой кислоты, уксусной кислоты, молочной кислоты, азотной кислоты, сульфоновой кислоты, п-толуолсульфоновой кислоты, яблочной кислоты, метансульфоновой кислоты и т.п.

Термин "сольват" относится к твердому или жидкому комплексу, образованному координацией соединения по настоящему изобретению с молекулой растворителя. Гидрат является особой формой сольвата, в котором соединение координируется с водой. В контексте настоящего изобретения, гидрат является предпочтительным сольватом.

Термин "кристаллическая форма" обозначает все твердые формы, образованные соединением по настоящему изобретению, включая кристаллические и аморфные формы.

Термин "алкил" относится к углеводородной группе с неразветвленной цепью, разветвленной цепью или к циклической насыщенной углеводородной группе, предпочтительно содержащей 6 или меньше атомов углерода. Примеры алкильных групп включают метил, этил, н-пропил, изопропил, циклопропил, н-бутил, изобутил, трет-бутил, циклобутил, н-пентил, изопентил, неопентил, циклогексил, н-гексил, изогексил, 2,2-диметилбутил и 2,3-диметилбутил. Термин "C_1-6 алкил" означает углеводородную группу с прямой цепью, разветвленной цепью или циклическую насыщенную углеводородную группу с 1-6 атомами углерода. Термин "C_1-4 алкил" означает углеводородную группу с прямой цепью, разветвленной цепью или циклическую насыщенную углеводородную группу с 1-4 атомами углерода.

Термин "алкенил" означает неразветвленную или разветвленную ненасыщенную углеводородную группу, содержащую одну или несколько двойных углерод-углеродных связей (C=C), предпочтительно содержащую от 2 до 6 атомов углерода, более предпочтительно от 2 до 4 атомов углерода, и наиболее предпочтительно содержащую 2 атома углерода. Термин "С_2-6 алкенил" относится к ненасыщенной углеводородной группе, имеющей от 2 до 6 атомов углерода, которая содержит 1 или 2 двойные углерод-углеродные связи. Термин "С_2-4 алкенил" относится к ненасыщенной углеводородной группе, имеющей от 2 до 4 атомов углерода, которая содержит 1 или 2 двойные углерод-углеродные связи.

Термин "алкинил" означает прямую или разветвленную ненасыщенную углеводородную группу, содержащую одну или несколько тройных углерод-углеродных связей (C≡C), предпочтительно содержащую от 2 до 6 атомов углерода, более предпочтительно от 2 до 4 атомов углерода, наиболее предпочтительно содержащую 2 атома углерода. Термин "С_2-6 алкинил" относится к ненасыщенной углеводородной группе, имеющей от 2 до 6 атомов углерода, которая содержит 1 или 2 тройные углерод-углеродные связи. Термин "С_2-4 алкинил" относится к ненасыщенной углеводородной группе, имеющей от 2 до 4 атомов углерода, которая содержит 1 или 2 тройные углерод-углеродные связи.

Термин "алкокси" относится к -O-алкилу.

Термин "атом галогена" относится к атому фтора, хлора, брома и йода.

Термин "галогеносодержащий алкил" означает алкил, замещенный, по меньшей мере, одним атомом галогена.

Термин "гетероциклил" относится к циклической группе, содержащей, по меньшей мере, один гетероатом, где гетероатом может представлять собой N, О или S, в том числе одиночный гетероциклил и конденсированный гетероциклил. Одиночная гетероциклильная группа включает, однако, этим не ограничиваясь, фуран, тиофен, пиррол, тиазол, имидазол, 1,2,3-триазол, 1,2,4-триазол, 1,2,3-тиадиазол, оксазол, 1,2,4-оксадиазол, 1,3,4-оксадиазол, пиридин, пиримидин, пиридазин, пиразин, тетрагидрофуран, пирролидин, пиперидин, пиперазин, морфолин, изоксазолин и т.д. Конденсированная гетероциклильная группа включает, однако, этим не ограничиваясь, хинолин, изохинолин, индол, бензофуран, бензотиофен, пурин, акридин, карбазол, флуорен, хроменовый кетон, флуоренон, хиноксалин, 3,4-дигидронафталинон, дибензофуран, гидрид дибензофурана, бензоксазолил и т.п.

Термин "бензо-пятичленный цикл" и "бензо-шестичленное цикл" означает конденсированную кольцевую группу.

Подробное описание изобретения

Следующие примеры приведены для иллюстрации настоящего изобретения, но не ограничивают настоящее изобретение частностями указанных примеров. Реагенты и исходные вещества, используемые в настоящем изобретении, получены из коммерческих источников.

Пример 1: изопропиловый эфир (2S)-2-((([1,1'-бифенил]-4-илокси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Стадия 1: Получение изопропилового эфира (2S)-2-((((S)-пентафторфенокси)([1,1'-бифенил]-4-илокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

В реакционный сосуд добавляют 0,9 г оксихлорида фосфора (5,87 ммоль) и 30 мл дихлорметана. Смесь охлаждают до минус 60°С и по каплям медленно добавляют раствор 1 г п-фенилфенола (5,87 ммоль) и 0,6 г триэтиламина (5,87 мол) в дихлорметане. После того как добавление завершено, смесь оставляют реагировать на ночь при комнатной температуре, затем охлаждают до 0°С и добавляют 0,9 г гидрохлорида изопропилового эфира L-аланина (5,3 ммоль). Смесь охлаждают до минус 60°С и по каплям добавляют раствор 1,34 г триэтиламина (13 ммоль) в дихлорметане (20 мл). После того как добавление завершено, температуру повышают до минус 5°С, затем к вышеуказанной смеси по каплям добавляют раствор 1 г пентафторфенола (5,3 ммоль) и 0,8 г триэтиламина (8 ммоль) в дихлорметане (15 мл). Полученную смесь перемешивают в течение 1 часа при температуре минус 5°С. После завершения реакции добавляют воду для экстракции, затем смесь сушат, концентрируют и разделяют колоночной хроматографией на силикагеле, получая указанное в названии соединение.

Стадия 2: Получение изопропилового эфира (2S)-2-((([1,1'-бифенил]-4-илокси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

В реакционный сосуд добавляют (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин (26 мг, 0,1 ммоль) и 1 мл тетрагидрофурана. По каплям в атмосфере азота добавляют 1М раствор трет-бутилмагния (0,25 ммоль) в ТГФ (0,25 мл) при охлаждении на бане со льдом. После того как добавление завершится, смеси дают прореагировать в течение 4 часов при комнатной температуре, и при охлаждении на бане со льдом добавляют по каплям полученный выше раствор промежуточного фосфатного соединения п-фенилфенола (70 мг, 0,13 ммоль) в тетрагидрофуране (1,5 мл). После окончания добавления смесь оставляют реагировать на ночь при комнатной температуре. После того как реакция завершается, реакцию прерывают, добавляя 6 мл 2н. раствора HCl при охлаждении на бане со льдом. Полученную смесь экстрагируют этилацетатом, промывают насыщенным раствором бикарбоната натрия, сушат, концентрируют, затем разделяют и очищают колоночной хроматографией на силикагеле, получая указанное в названии соединение.

Спектр ¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ: 11,51 (с, 1H, пиримидин N-H), 7,68-7,62 (м, 4H, Ar-H, пиримидин-H), 7,60-7,56 (д, 1H, Ar-H), 7,48-7,43 (т, 2H, Ar-H), 7,38-7,30 (м, 3H, Ar-H), 6,12-6,00 (м,2H, тетрагидрофуран-H), 5,84 (д, 1H, пиримидин-H), 5,56 (д, 1H, P-NH), 4,90-4,82 (м, 1H, -(CH₃)₂C-H), 4,62-4,34 (м, 1H, тетрагидрофуран-OH), 4,30-4,22 (м, 1H, (CH₃)C(NH)-H), 4,06-4,00 (м, 1H, тетрагидрофуран-H), 3,88-3,77 (м, 2H, P-O-CH₂-H), 1,30-1,20 (м, 9H, 3×CH₃), 1,58 (д, 3H, CH₃).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [М+Н]⁺=606,2.

Пример 2: изопропиловый эфир (2S)-2-((([1,1'-бифенил]-3-илокси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя м-фенилфенол, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных веществ.

Спектр ¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ: 11,50 (с, 1H, пиримидинN-H), 7,68-7,55 (м, 3H, Ar-H, пиримидин-H), 7,50-7,36 (м, 6H, Ar-H), 7,21 (д, 1H, Ar-H), 6,13-6,00 (м, 2H, тетрагидрофуран-H), 5,88-5,84 (д, 1H, пиримидин-H), 5,57-5,52 (д, 1H, P-NH), 4,86-4,82 (м, 1H, -(CH₃)₂C-H), 4,40-4,38 (м, 1H, тетрагидрофуран-OH), 4,28-4,26 (м, 1H, (CH₃)C(NH)-H), 4,04-4,02 (м, 1H, тетрагидрофуран-H), 3,88-3,80 (м, 2H, P-O-CH₂-H), 1,28-1,20 (м, 6H, 2×CH₃), 1,14-1,11 (д, 6H, 2×CH₃).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [М+Н]⁺=606,2.

Пример 3: изопропиловый эфир (2S)-2-((([1,1'-бифенил]-2-илокси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя о-фенилфенол, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных веществ.

Спектр ¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ: 11,49 (с, 1H, пиримидин-N-H), 7,56-7,05 (м, 10H, Ar-H, пиримидин-H), 6,38-5,89 (м, 2H, тетрагидрофуран-H), 5,80 (д, 1H, пиримидин-H), 5,42 (д, 1H, P-NH), 4,86-4,75 (м, 1H, -(CH₃)₂C-H), 4,24-4,18 (м, 1H, тетрагидрофуран-OH), 4,14-4,08 (м, 1H, (CH₃)C(NH)-H), 3,99-3,89 (м, 1H, тетрагидрофуран-H), 3,85-3,72 (м, 2H, P-O-CH₂-H), 1,27-1,23 (м, 3Н, СН₃), 1,19-1,07 (д, 9Н, 3×CH₃).

Масс-спектр ESI-МS m/z: [М+Н]⁺=606,2.

Пример 4: изопропиловый эфир (2S)-2-(((2-бензилфен-1-илокси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя о-бензилфенол, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных веществ.

Спектр ¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ: 11,48 (с, 1H, пиримидин-N-H), 7,53-7,05 (м, 10H, Ar-H, пиримидин-H), 6,36-5,88 (м, 2H, тетрагидрофуран-H), 5,81 (д, 1H, пиримидин-H), 5,43 (д, 1H, P-NH), 4,85-4,71 (м, 1H, -(CH₃)₂C-H), 4,21-4,15 (м, 1H, тетрагидрофуран-OH), 4,12-4,01 (м, 1H, (CH₃)C(NH)-H), 3,92-3,89 (м, 1H, тетрагидрофуран-H), 3,81-3,73 (м, 2H, P-O-CH₂-H), 1,32-1,31 (м, 2H, СН₂), 1,23-1,21 (м, 3Н, СН₃), 1,11-1,01 (д, 9Н, 3×CH₃).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [М+Н]⁺=620,2.

Пример 5: изопропиловый эфир (2S)-2-((([4'-фтор-1,1'-бифенил]-4-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя 4-фтор-4'-гидроксибифенил, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных веществ.

Спектр ¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ: 8,09 (с, 1H, пиримидинN-H), 7,55-7,49 (м, 6H, Ar-H), 7,32 (д, 1H, Ar-H), 7,17-7,11 (д, 1H, пиримидин-H), 6,23-6,18 (м, 1H, тетрагидрофуран-H), 5,76 (д, 1H, пиримидин-H), 5,09-5,00 (м, 1H, P-NH), 4,62-4,49 (м, 2H, -(CH₃)₂C-H), 4,16-4,12 (м, 1H, тетрагидрофуран-OH), 4,04-3,97 (м, 2H, (CH₃)C(NH)-H), 3,78-3,71 (м, 1H, тетрагидрофуран-H), 1,49 (м, 2H, P-O-CH₂-H), 1,42-1,39 (м, 6H, 2×CH₃), 1,30-1,24 (д, 6H, 2×CH₃).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [М+Н]⁺=624,3.

Пример 6: изопропиловый эфир (2S)-2-((([4'-нитро-1,1'-бифенил]-4-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя 4-гидрокси-4'-нитро бифенил, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных веществ.

Спектр ¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ: 11,48 (с, 1H, пиримидин-N-H), 8,29 (д, 2H, Ar-H), 7,94 (д, 2H, Ar-H), 7,82 (д, 2H, Ar-H), 7,56 (д, 1H, пиримидин-H), 7,38-7,34 (м, 2H, Ar-H), 6,13-6,04 (м, 2H, тетрагидрофуран-H), 5,83 (д, 1H, пиримидин-H), 5,56 (д, 1H, P-NH), 4,88-4,85 (м, 1H, -(CH₃)₂C-H), 4,40 (м, 1H, тетрагидрофуран-OH), 4,28 (м, 1H, (CH₃)C(NH)-H), 4,04-4,02 (м, 1H, тетрагидрофуран-H), 3,86-3,84 (м, 2H, P-O-CH₂-H), 1,28-1,25 (м, 6H, 2×CH₃), 1,18-1,15 (м, 6H, 2×CH₃).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [М+Н]⁺=651,4.

Пример 7: изопропиловый эфир (2S)-2-(((2-метокси-4-метоксикарбонил-(E)-этенилфен-1-илокси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя метиловый эфир (Е)-3-(4-гидрокси-3-метоксифенил)акриловой кислоты, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных веществ.

Спектр ¹H ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ: 11,48 (с, 1H, пиримидин-NH), 7,62-7,57 (м, 2Н, Ar-H, пиримидин-H), 7,46 (с, 1H, CH=CH), 7,31-7,22 (м, 2H, Ar-H), 6,63 (д, 1H, CH=CH), 6,03-5,93 (м, 2H, тетрагидрофуран-H), 5,88-5,79 (м, 1H, пиримидин-H), 5,57-5,50 (м, 1H, P-NH), 4,87-4,78 (м, 1H, -(CH₃)₂C-H), 4,40-4,34 (м, 1H, тетрагидрофуран-OH), 4,25-4,20 (м, 1H, (CH₃)C(NH)-H), 4,05-3,96 (м, 1H, тетрагидрофуран-H), 3,75-3,82 (м, 2H, P-O-CH₂-H), 3,80 (с, 3H, OCH₃), 3,70 (с, 3H, -COOCH₃), 1,26-1,1 (м, 9H, 3×CH₃), 1,13-1,10 (м, 3H, CH₃).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [М+Н]⁺=644,2.

Пример 8: изопропиловый эфир (2S)-2-((((E)-4-(3,5-диметоксифенилэтенил)фен-1-илокси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя (E)-4-(3,5-диметоксифенилэтенил)фенол, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных веществ.

Спектр ¹H ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ: 11,51 (с, 1H, N-H), 8,19 (д, 1H, Ar-H), 7,59 (т, 2H, Ar-H), 7,20 (м, 4H, Ar-H), 6,76 (с, 2H, Ar-H), 6,41 (с, 1H, Ar-H), 6,10 (с, 1H, Ar-H), 6,06 (м, 1H, -CH-), 5,85 (д, 1H, N-H), 5,57 (д, 1H, -CH-), 4,85 (кв, 1H, -CH-), 4,37 (м, 2H, -CH-), 4,27 (м, 1H, -OH), 4,01 (м, 1H, -CH2-), 3,78 (с, 6H, -CH₃), 1,29 (с, 3H, -CH₃), 1,25 (с, 3H, -CH₃), 1,15 (д, 6H, -CH₃).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [М+Н]⁺=692,2.

Пример 9: изопропиловый эфир (2S)-2-(((4-метоксикарбонил-(E)-этенилфен-1-илокси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя метиловый эфир ((Е)-3-(4-гидроксифенил)акриловой кислоты, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных веществ.

Спектр ¹H ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ: 11,50 (с, 1H, пиримидин-NH), 7,63-7,59 (м, 2Н, Ar-H, пиримидин-H), 7,48 (с, 1H, CH=CH), 7,32-7,21 (м, 2H, Ar-H), 6,65 (д, 1H, CH=CH), 6,01-5,94 (м, 2H, тетрагидрофуран-H), 5,84-5,78 (м, 1H, пиримидин-H), 5,51-5,50 (м, 1H, P-NH), 4,88-4,79 (м, 1H, -(CH₃)₂C-H), 4,42-4,33 (м, 1H, тетрагидрофуран-OH), 4,25-4,18 (м, 1H, (CH₃)C(NH)-H), 4,05-3,95 (м, 1H, тетрагидрофуран-H), 3,75-3,82 (м, 2H, P-O-CH₂-H), 3,72 (с, 3H, -COOCH₃), 1,28-1,12 (м, 9H, 3×CH₃), 1,12-1,10 (м, 3Н, СН₃).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [М+Н]⁺=644,2.

Пример 10: изопропиловый эфир (2S)-2-(((3-циннамоилфен-1-илокси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя 3-циннамоилфенoл, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных веществ.

Спектр ¹H ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ: 11,52 (с, 1H, пиримидинN-H), 7,88-7,82 (м, 1H, пиримидин-H), 7,78-7,72 (м, 3H, Ar-H), 7,60-7,56 (д, 1H, Ar-H), 7,46 (с, 1H, CH=CH), 7,31-7,22 (м, 4H, Ar-H), 6,63 (д, 1H, CH=CH), 6,12-6,00 (м, 2H, тетрагидрофуран-H), 5,82 (д, 1H, пиримидин-H), 5,53 (д, 1H, P-NH), 4,91-4,82 (м, 1H, -(CH₃)₂C-H), 4,63-4,34 (м, 1H, тетрагидрофуран-OH), 4,30-4,22 (м, 1H, (CH₃)C(NH)-H), 4,06-4,00 (м, 1H, тетрагидрофуран-H), 3,88-3,77 (м, 2H, P-O-CH₂-H), 1,30-1,20 (м, 9H, 3×CH₃), 1,58(д, 3H, CH₃).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [M+Na]⁺=682,1.

Пример 11: изопропиловый эфир (2S)-2-(((4-(фенилэтинил)фен-1-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя 1-(4-гидроксифенил)-2-фенилацетилен, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных веществ.

Спектр ¹H ЯМР (300МГц, ДМСО) δ: 11,49 (с, 1H, пиримидин-N-H), 7,71 (д, 2H, Ar-H),7,56 (м, 4H, Ar-H, пиримидин-H), 7,42 (с, 2H, Ar-H), 7,27 (м, 1H), 7,04 (м, 1H), 6,16-6,03 (м, 2H, тетрагидрофуран-H), 5,84 (д, 1H, пиримидин-H), 5,66-5,52 (м, 1H, P-NH), 4,87-4,83 (м, 1H, -(CH₃)₂C-H), 4,38 (м, 1H, тетрагидрофуран-OH), 4,25 (м, 1H, (CH₃)C(NH)-H), 4,02 (м, 1H, тетрагидрофуран-H), 3,79 (м, 2H, P-O-CH₂-H), 1,27-1,23 (м, 6H, 2×CH₃), 1,16-1,14 (м, 6H, 2×CH₃).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [М+Н]⁺=630,3.

Пример 12: изопропиловый эфир (2S)-2-(((4-(1,2,3-тиадиазол-4-ил)фен-1-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя 4-(1,2,3-тиадиазол-4-ил)фенол, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных соединений.

Спектр ¹H ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ: 11,50 (с, 1H, пиримидин-N-Н), 9,59 (с, 1Н, тиадиазол), 8,14-8,17 (м, 2H, Ar-H), 7,57 (м, 1H, пиримидин-H), 7,36-7,42 (м, 2H, Ar-H), 6,10-6,17 (м, 2H, тетрагидрофуран-H), 5,90 (д, 1H, пиримидин-H), 5,59 (д, 1H, P-NH), 4,90-4,82 (м, 1H, -(CH₃)₂C-H), 4,68-4,36 (м, 1H, тетрагидрофуран-OH), 4,31-4,23 (м, 1H, (CH₃)C(NH)-H), 4,06-4,02 (м, 1H, тетрагидрофуран-H), 3,89-3,77 (м, 2H, P-O-CH₂-H), 1,30-1,20 (м, 9H, 3×CH₃), 1,58 (д, 3H, CH₃).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [М+Н]⁺=614,5.

Пример 13: изопропиловый эфир (2S)-2-(((2-(хиноксалин-5-ил)фен-1-илокси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя 2-(хиноксалин-5-ил)фенол, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных соединений.

Спектр ¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ: 11,48 (с, 1H, пиримидин-N-H), 7,69-7,61 (м, 1H, пиримидин-H), 7,69-7,61 (м, 3H, Ar-H), 7,61-7,58 (д, 1H, Ar-H), 7,49-7,45 (т, 2H, хиноксалин-H), 7,37-7,32 (м, 3H, Ar-H), 6,11-6,03 (м, 2H, тетрагидрофуран-H), 5,82 (д, 1H, пиримидин-H), 5,53 (д, 1H, P-NH), 4,90-4,83 (м, 1H, -(CH₃)₂C-H), 4,62-4,32 (м, 1H, тетрагидрофуран-OH), 4,30-4,21 (м, 1H, (CH₃)C(NH)-H), 4,04-4,01 (м, 1H, тетрагидрофуран-H), 3,83-3,74 (м, 2H, P-O-CH₂-H), 1,34-1,21 (м, 9H, 3×CH₃), 1,53 (д, 3H, CH₃).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [М+Н]⁺=658,2.

Пример 14: метиловый эфир (2S)-2-(((5,6,7,8-тетрагидронафталин-1-илокси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)уксусной кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя 5,6,7,8-тетрагидро-2-нафтол, оксихлорид фосфора, гидрохлорид метилового эфира L-аминоуксусной кислоты, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных соединений.

Спектр ¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ: 11,49 (с, 1H, пиримидин-N-H), 7,58-7,52 (м, 1H, пиримидин-H), 7,46-7,42 (м, 2H, Ar-H), 7,40-7,36 (д, 1H, Ar-H), 6,11-6,00 (м, 2H, тетрагидрофуран-H), 5,82 (д, 1H, пиримидин-H), 5,55 (д, 1H, P-NH), 4,91-4,83 (м, 1H, -(CH₃)₂C-H), 4,64-4,31 (м, 1H, тетрагидрофуран-OH), 4,31-4,23 (м, 2H, (CH₃)CH₂(NH)), 4,06-4,00 (м, 1H, тетрагидрофуран-H), 3,88-3,77 (м, 2H, P-O-CH₂-H), 1,30-1,20 (м, 3Н, СН₃), 1,5 (д, 3Н, СН₃).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [М+Н]⁺=542,2.

Пример 15: трет-бутиловый эфир (2S)-2-(((5,6,7,8-тетрагидронафталин-1-илокси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя 5,6,7,8-тетрагидро-2-нафтол, оксихлорид фосфора, гидрохлорид трет-бутилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных соединений.

Спектр ¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ: 11,49 (с, 1H, пиримидин-N-H), 7,58-7,52 (м, 1H, пиримидин-H), 7,46-7,42 (м, 2H, Ar-H), 7,40-7,36 (д, 1H, Ar-H), 6,11-6,00 (м, 2H, тетрагидрофуран-H), 5,82 (д, 1H, пиримидин-H), 5,55 (д, 1H, P-NH), 4,64-4,31 (м, 1H, тетрагидрофуран-OH), 4,31-4,23 (м, 1H, (CH₃)C(NH)-H), 4,06-4,00 (м, 1H, тетрагидрофуран-H), 3,88-3,77 (м, 2H, P-O-CH₂-H), 1,33-1,31 (м, 8H, 4×CH₂), 1,30-1,20 (м, 12H, 4×CH₃), 1,5 (д, 3H, CH₃).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [М-Н]⁺=596,3.

Пример 16: изопропиловый эфир (2S)-2-(((4-(тиазол-2-ил)фен-1-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Стадия 1: Получение 2-(4-метоксифенил)тиазола

В одногорлую колбу емкостью 100 мл добавляют 2,2 г п-метоксифенилбороновой кислоты (0,014 мол), 2 г 4-бромтиазола (0,012 мол), 7,8 г карбоната цезия (0,024 мол) и 0,4 г дихлорида бис(трифенилфосфин)палладия (0,6 ммоль), затем добавляют 30 мл 1,4-диоксана и 8 мл воды. Смесь нагревают до температуры 90°С в атмосфере азота и оставляют реагировать на ночь. Реакцию останавливают после того, как исходные вещества почти полностью прореагируют. Смесь охлаждают до комнатной температуры, концентрируют и экстрагируют водой и этилацетатом. Органические фазы объединяют, сушат, концентрируют и разделяют с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, получая указанное в названии соединение.

Спектр ¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ: 7,90-7,95 (м, 2H, Ar-H), 7,83 (д, 1H, Ar-H), 7,26 (д, 1H, Ar-H), 6,95-7,00 (м, 2H, Ar-H), 3,88 (с, 3Н, ОСН₃).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [М+Н]⁺=192,2.

Стадия 2: Получение 4-(тиазол-2-ил)фенола

В одногорлую колбу емкостью 100 мл добавляют продукт, полученный на стадии 1 (0,9 г, 4,7 ммоль), и 40% HBr. Продукт со стадии 1 полностью растворяется, и образуется прозрачный раствор желтого цвета. Добавляют 6 мл уксусной кислоты, раствор нагревают до температуры 115°С и дают прореагировать в течение 20 час. Реакцию останавливают, когда исходные вещества почти полностью исчезнут. Смесь концентрируют досуха и разделяют колоночной хроматографией на силикагеле, получая 0,42 г твердого вещества бледно-желтого цвета.

Спектр ¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ: 7,83-7,88 (м, 3H, Ar-H), 7,30 (д, 1H, Ar-H), 6,92 (д, 2H, Ar-H).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [М+Н]⁺=178,2.

Стадия 3 Получение изопропилового эфира (2S)-2-(((4-(тиазол-2-ил)фен-1-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя 4-(тиазол-2-ил)фенол, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных соединений.

Спектр ¹Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ: 11,47 (с, 1H, пиримидин-N-H), 7,97-7,90 (м, 3H, Ar-2H, тиазол-1H), 7,76 (д, 1H, тиазол-H), 7,56 (д, 1H, пиримидин-H), 7,35 (д, 2H, Ar-H), 6,12-6,04 (м, 2H, тетрагидрофуран-H), 5,82 (д, 1H, пиримидин-H), 5,58-5,56 (м, 1H, P-NH), 4,88-4,83 (м, 1H, -(CH₃)₂C-H), 4,39 (м, 1H, тетрагидрофуран-OH), 4,28-4,27 (м, 1H, (CH₃)C(NH)-H), 4,05-4,01 (м, 1H, тетрагидрофуран-H), 3,84-3,83 (м, 2H, P-O-CH₂-H), 1,28-1,24 (м, 6H, 2×CH₃), 1,16-1,14 (м, 6H, 2×CH₃).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [М+Н]⁺=613,3.

Пример 17: изопропиловый эфир (2S)-2-(((4-(тиазол-5-ил)фен-1-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Стадия 1: Получение 5-(4-метоксифенил)тиазола

В одногорлую колбу емкостью 100 мл помещают 2,2 г п-метоксифенилбороновой кислоты (0,014 мол), 2 г 5-бромтиазола (0,012 мол), 7,8 г карбоната цезия (0,024 мол) и 0,4 г дихлорида бис(трифенилфосфин)палладия (0,6 ммоль), затем добавляют 30 мл 1,4-диоксана и 8 мл воды. Смесь нагревают до температуры 90°С в атмосфере азота, и оставляют реагировать на ночь. Реакцию останавливают после того, как исходные вещества почти полностью прореагируют. Смесь охлаждают до комнатной температуры, концентрируют и экстрагируют водой и этилацетатом. Органические фазы объединяют, сушат, концентрируют и разделяют с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, получая твердый продукт бледно-желтого цвета.

Спектр ¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ: 8,74 (с, 1H, Ar-H), 8,00 (с, 1Н, Ar-H), 7,51-7,54 (м, 2H, Ar-H), 6,95-6,99 (м, 2H, Ar-H), 3,87 (с, 3Н, ОСН₃).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [М+Н]⁺=192,2.

Стадия 2: Получение 4-(тиазол-5-ил)фенола

В одногорлую колбу емкостью 100 мл добавляют продукт, полученный на стадии 1 (0,9 г, 4,7 ммоль), и 40% HBr. Продукт со стадии 1 полностью растворяется, и образуется прозрачный раствор желтого цвета. Добавляют 6 мл уксусной кислоты, смесь нагревают до температуры 115°С и дают прореагировать в течение 20 час. Реакцию останавливают после того, как исходные вещества почти полностью исчезают. Смесь концентрируют досуха, экстрагируют водой и этилацетатом, сушат, концентрируют и разделяют колоночной хроматографией на силикагеле, получая 0,66 г твердого вещества бледно-желтого цвета.

Спектр ¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ: 8,72 (с, 1H, Ar-H), 7,99 (с, 1Н, Ar-H), 7,43-7,49 (м, 2H, Ar-H), 6,87-6,90 (м, 2H, Ar-H).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [М+Н]⁺=178,2.

Стадия 3: Получение изопропилового эфира (2S)-2-(((4-(тиазол-5-ил)фен-1-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя 4-(тиазол-5-ил)фенол, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных соединений.

Спектр ¹H ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ: 11,48 (с, 1H, пиримидин-N-Н), 9,06 (с, 1H, тиазол-H), 7,97 (д, 1H, тиазол-1H), 7,70 (д, 2H, Ar-H), 7,56 (д, 1H, пиримидин-H), 7,31 (д, 2H, Ar-H), 6,09-6,01 (м, 2H, тетрагидрофуран-H), 5,81 (д, 1H, пиримидин-H), 5,57-5,56 (м, 1H, P-NH), 4,88-4,83 (м, 1H, -(CH₃)₂C-H), 4,38 (м, 1H, тетрагидрофуран-OH), 4,28-4,27 (м, 1H, (CH₃)C(NH)-H), 4,05-4,02 (м, 1H, тетрагидрофуран-H), 3,85-3,83 (м, 2H, P-O-CH₂-H), 1,28-1,23 (м, 6H, 2×CH₃), 1,18-1,14 (м, 6H, 2×CH₃).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [М+Н]⁺=613,4.

Пример 18: изопропиловый эфир (2S)-2-((([4'-циано-1,1'-бифенил]-4-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя 4'-циано-4-гидроксибифенил, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных соединений.

Спектр ¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ: 11,50 (с, 1H, пиримидин-N-H), 7,98-7,82 (м, 8H, Ar-H), 7,57 (м, 1H, пиримидин-H), 6,18-6,15 (м, 2H, тетрагидрофуран-H), 5,91 (д, 1H, пиримидин-H), 5,59 (д, 1H, P-NH), 4,92-4,87 (м, 1H, -(CH₃)₂C-H), 4,68-4,36 (м, 2H, тетрагидрофуран-OH, (CH₃)C(NH)-H), 4,03-4,01 (м, 1H, тетрагидрофуран-H), 3,85-3,82 (м, 2H, P-O-CH₂-H), 1,40-1,29 (м, 9H, 3×CH₃), 1,15-1,13 (д, 3H, CH₃).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [М+Н]⁺=631,2.

Пример 19: изопропиловый эфир (2S)-2-(((4-((E)-4-фторфенилэтенилфенил)-1-илокси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Стадия 1: Получение (Е)-4-(4-фторфенилэтенил)фенола

В трехгорлую колбу емкостью 50 мл помещают п-йодфенол (1,32 г, 6 ммоль), п-фторстирол (610 мг, 5 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладий (622 мг, 0,5 ммоль) и карбонат цезия (4,89 г, 15 ммоль), а затем добавляют 20 мл 1,4-диоксана. Через полученный раствор пропускают газообразный аргон и смесь оставляют на ночь (приблизительно 10 час) реагировать при температуре 80°С, пока раствор не станет черным. Через 24 часа по данным контроля с помощью ТСХ реакция завершается. При температуре 0°С медленно добавляют по каплям разбавленную хлористоводородную кислоту, смесь экстрагируют этилацетатом и разделяют колоночной хроматографией на силикагеле, получая белое твердое вещество.

Масс-спектр ESI-МС m/z: [М+Н]⁺=215,2.

Стадия 2: Получение изопропилового эфира (2S)-2-((((E)-4-(4-фторфенилэтенилфенил)-1-илокси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя (E)-4-(4-фторфенилэтенил)фенол, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных соединений.

Спектр ¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ: 11,46 (с, 1H, пиримидин-N-H), 7,64-7,58 (м, 5H, Ar-H, пиримидин-H), 7,23-7,15 (м, 6H, Ar-H, -CH=CH-), 6,10-6,15 (м, 2H, тетрагидрофуран-H), 5,91 (д, 1H, пиримидин-H), 5,79 (д, 1H, P-NH), 4,91-4,88 (м, 1H,-(CH₃)₂C-H), 4,66-4,32 (м, 2H, тетрагидрофуран-OH, (CH₃)C(NH)-H), 4,03-4,01 (м, 1H, тетрагидрофуран-H), 3,85-3,82 (м, 2H, P-O-CH₂-H), 1,40-1,29 (м, 9H, 3×CH₃), 1,15-1,13 (д, 3H, CH₃).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [М+Н]⁺=650,4.

Пример 20: изопропиловый эфир (2S)-2-(((1H-индол-5-илокси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя 5-гидрокси-1H-индол, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных соединений.

Спектр ¹H ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ: 11,54 (с, 1H, пиримидин-NH), 11,14 (с, 1Н, индол-NH), 7,55 (д, 1H, пиримидин-Н), 7,37-7,32 (м, 3Н, индол-H), 6,96 (д, 1Н, индол-Н), 6,38 (с, 1Н, индол-Н), 6,05-5,84 (м, 3Н, тетрагидрофуран-Н, пиримидин-Н), 5,55-5,48 (м, 1H Р-NH), 4,88-4,80 (м, 1H, -(CH₃)₂C-H), 4,38-4,33 (м, 1H, тетрагидрофуран-OH), 4,25-4,20 (м, 1H, (CH₃)C(NH)-H), 4,03-4,00 (м, 1H, тетрагидрофуран-H), 3,82-3,74 (м, 2H, P-O-CH₂-H), 1,28-1,21 (м, 3H, СН₃), 1,17-1,15 (м, 3Н, СН₃), 1,15-1,12 (м, 6Н, 2×CH₃).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [М+Н]⁺=569,2.

Пример 21: изопропиловый эфир (2S)-2-(((4-фтор-2-метил-1H-индол-5-илокси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя 4-фтор-5-гидрокси-2-метил-1H-индол, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных соединений.

Спектр ¹Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ: 11,48 (с, 1H, пиримидин-N-H), 11,19 (с, 1H, индол-N-H), 7,55 (д, 1H, пиримидин-H), 7,02 (с, 2H, Ar-H), 6,17 (д, 1H, Ar-H), 5,97-5,85 (м, 3H, тетрагидрофуран-H, пиримидин-H), 5,56-5,49 (м, 1H, P-NH), 4,86 (м, 1H, -(CH₃)₂C-H), 4,41-4,35 (м, 1H, тетрагидрофуран-OH), 4,25-4,20 (м, 1H, (CH₃)C(NH)-H), 4,04-4,00 (м, 1H, тетрагидрофуран-H), 3,82-3,78 (м, 2H, P-O-CH₂-H), 2,37 (с, 3H, CH₃), 1,25-1,22 (м, 6H, 2×CH₃), 1,16-1,14 (м, 6Н, 2×CH₃).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [М+Н]⁺=601,3.

Пример 22: изопропиловый эфир (2S)-2-(((3-метоксикарбонилметил-бензофуран-7-илокси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя 7-гидрокси-3-метоксикарбонилметилбензофуран, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных соединений.

Спектр ¹Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ: 11,48 (с, 1H, пиримидин-N-H), 7,95 (с, 1H, фуран-H), 7,56 (д, 1H, пиримидин-H), 7,40 (д, 1H, Ar-H), 7,28 (с, 1H, Ar-H), 7,20 (т, 1H, Ar-H), 6,13 (м, 1H, тетрагидрофуран-H), 6,01 (м, 1H, пиримидин-H), 5,82 (м, 1H, тетрагидрофуран-H), 5,50 (м, 1H, P-NH), 4,86 (м, 1H, -(CH₃)₂C-H), 4,42 (м, 1H, тетрагидрофуран-OH), 4,31 (м, 1H, (CH₃)C(NH)-H), 4,02 (м, 1H, тетрагидрофуран-H), 3,84-3,82 (м, 4H, P-O-CH₂-H, -CH₂-), 3,65 (с, 3H, CH₃), 1,27-1,22 (м, 6H, 2×CH₃), 1,16-1,14 (м, 6Н, 2×CH₃).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [М+Н]⁺=642,2.

Пример 23: изопропиловый эфир (2S)-2-(((4-оксо-2-фенил-4H-бензопиран-6-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя 6-гидроксифлавон, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных соединений.

Спектр ¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ: 13,22 (с, 1H, N-H), 8,59 (с, 1H, Ar-H), 8,50 (д, 2H, Ar-H), 8,30 (с, 1H, Ar-H), 8,20 (д, 1H, Ar-H), 8,03 (д, 1H, Ar-H), 7,70 (дд, 2H, Ar-H), 7,61 (д, 1H, Ar-H), 7,48 (м, 1H, Ar-H), 7,38 (д, 1H, Ar-H), 7,36 (д, 1H, N-H), 7,34 (д, 1H, -CH-), 7,26 (м, 1H, -CH-), 5,62 (с, 2H, -CH₂-), 5,54 (с, 1H, -OH), 5,32 (м, 1H, -CH-), 4,59 (м, 1H, -CH-), 4,05 (м, 1H, -CH-), 2,01 (с, 3H, -CH₃), 1,35 (с, 3H, -CH₃), 1,16 (д, 6H, -CH₃).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [М+Н]⁺=674,2.

Пример 24: изопропиловый эфир (2S)-2-(((хиноксалин-5-илокси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя 5-гидроксихиноксалин, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных соединений.

Спектр ¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ: 11,52 (с, 1H, пиримидин-N-H), 7,54 (д, 1H, пиримидин-H), 7,36-7,31 (м, 3H, Ar-H), 6,95 (д, 1H, Ar-H), 6,36 (д, 1H, Ar-H), 6,03-5,82 (м, 3H, тетрагидрофуран-H, пиримидин-H), 5,55-5,48 (м, 1H, P-NH), 4,88-4,80 (м, 1H, -(CH₃)₂C-H), 4,38-4,33 (м, 1H, тетрагидрофуран-OH), 4,25-4,20 (м, 1H, (CH₃)C(NH)-H), 4,03-4,01 (м, 1H, тетрагидрофуран-H), 3,82-3,74 (м, 2H, P-O-CH₂-H), 1,27-1,25 (м, 3H, CH₃), 1,18-1,16 (м, 3H, CH₃), 1,15-1,12 (м, 6H, 2×CH₃).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [M+Na]⁺=604,1.

Пример 25: изопропиловый эфир (2S)-2-(((4-оксо-2-фенилбензодигидропиран-7-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя 7-гидроксифлаванон, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных соединений.

Спектр ¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ: 11,59 (с, 1H, пиримидинN-H), 8,06-8,02 (м, 1H, Ar-H), 7,89-7,86 (м, 3H, Ar-H), 7,69-7,61 (м, 1H, пиримидин-H), 7,42-7,41 (м, 2H, Ar-H), 7,36-7,34 (д, 2H, Ar-H), 6,12-6,03 (м, 2H, тетрагидрофуран-H), 5,84 (д, 1H, пиримидин-H), 5,43 (д, 1H, P-NH), 4,90-4,83 (м, 1H, -(CH₃)₂C-H), 4,63-4,32 (м, 1H, тетрагидрофуран-OH), 4,30-4,21 (м, 1H, (CH₃)C(NH)-H), 4,14-4,11 (м, 1H, тетрагидрофуран-H), 4,10-4,08 (м, 2H, P-O-CH₂-H), 3,98-3,96 (м, 4H, CH₂), 1,98-1,95 (м, 1H, CH), 1,34-1,21 (м, 6H, 2×CH₃), 1,53 (д, 6H, 2×CH₃).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [М+Н]⁺=676,2.

Пример 26: изопропиловый эфир (2S)-2-((((4-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)фенилокси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя 4-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)фенол, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных соединений.

Спектр ¹H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ м.д.: 11,48 (с, 1H), 9,18-9,21 (м, 2H), 8,15-8,18 (м, 1H), 8,05-8,07 (м, 1H), 7,98-8,02 (м, 1H), 7,56-7,58 (м, 1H), 7,15-7,21 (м, 1H), 6,11-6,15 (м, 2H), 5,92 (м, 1H), 5,88 (м, 1H), 4,88-4,92 (м, 1H), 4,32-4,65 (м, 2H), 4,01-4,04 (м, 1H), 3,82-3,86 (м, 2H), 1,13-1,40 (м, 12Н).

Масс-спектр ЖХ-МС m/z: [М+Н]⁺=597.

Пример 27: изопропиловый эфир (2S)-2-((((4'-хлор-[1,1’-бифенил]-4-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя 4'-хлор-4-гидрокси[1,1'-бифенил], оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных соединений.

Спектр ¹H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ м.д.: 11,54 (с, 1H), 7,66-7,69 (д, 3H), 7,55-7,59 (д, 1H), 7,49-7,52 (д, 2H), 7,29-7,33 (м, 3H), 6,12-6,16 (м, 2H), 5,96-5,99 (м, 1Н), 5,34 (м, 1H), 4,81-4,89 (м, 1Н), 4,38-4,42 (м, 2H), 3,84 (м, 1H), 3,82-3,84 (м, 2H), 1,05-1,14 (м, 12Н).

Масс-спектр ЖХ-МС m/z [М+Н]⁺=640.

Пример 28: изопропиловый эфир (2S)-2-(((2-фтор-[1,1'-бифенил]-4-илокси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Стадия 1: Получение 2-фтор-4-гидрокси-[1,1'-бифенила]

В колбу продолговатой формы емкостью 250 мл помещают 1,06 г фенилбороновой кислоты, 2,38 г 3-фтор-4-йодфенола, 0,4 г Pd(dppf)Cl₂ и 9 г карбоната цезия, а затем добавляют 50 мл 1,4-диоксана и 5 мл воды. Полученную смесь перемешивают при температуре 90°С в течение 1,5 час в атмосфере азота, а затем реакцию прерывают. Реакционный раствор экстрагируют с помощью 100 мл этилацетата и 50 мл насыщенного раствора хлорида натрия и промывают водой (3×50 мл). Органические фазы собирают, сушат над безводным сульфатом натрия, фильтруют, концентрируют и очищают колоночной хроматографией, получая указанное в названии соединение.

Масс-спектр ЖХ-МС m/z: [М+Н]⁺=189.

Стадия 2: Получение изопропилового эфира (2S)-2-(((2-фтор-[1,1'-бифенил]-4-илокси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя 2-фтор-4-гидрокси-[1,1'-бифенил], полученный на стадии 1, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных соединений.

Спектр ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ м.д.: 11,49 (с, 1H), 7,51-7,82 (м, 6H), 7,15-7,29 (м, 3H), 6,12-6,15 (м, 1H), 6,03 (м, 1H), 5,97-5,99 (м, 1H), 5,58 (м, 1H), 4,80-4,89 (м, 1H), 4,38-4,41 (м, 2H), 4,01 (м, 1H), 3,82-3,84 (м, 2H),1,05-1,14 (м, 12Н).

Масс-спектр ЖХ-МС m/z: [М+Н]⁺=624.

Пример 29: изопропиловый эфир (2S)-2-(((4-(пиримидин-2-ил)фенилокси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Стадия 1: Получение 2-(4-метоксифенил)пиримидина

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной на стадии 1 примера 28, используя 4-метоксифенилбороновую кислоту, 2-бромпиримидин, Pd(dppf)Cl₂ и карбонат цезия в качестве исходных соединений.

Масс-спектр ЖХ-МС m/z: [М+Н]⁺=187.

Стадия 2: Получение 4-(пиримидин-2-ил)фенола

В круглодонную колбу емкостью 50 мл добавляют 830 мг 2-(4-метоксифенил)пиримидина, полученного на стадии 1, в дихлорметане (10 мл). При температуре минус 20°С в атмосфере азота медленно добавляют по каплям 8 мл 1н. раствора BBr₃. После того, как добавление завершено, смесь перемешивают при 0°С. После завершения реакции смесь гасят, добавив 10 мл воды, и экстрагируют дихлорметаном (2×20 мл). Органические фазы собирают, промывают водой и насыщенным раствором соли, сушат над безводным сульфатом натрия, фильтруют, концентрируют и очищают колоночной хроматографией, получая указанное в названии соединение.

Масс-спектр ЖХ-МС m/z: [М+Н]⁺=173.

Стадия 3: Получение изопропилового эфира (2S)-2-(((4-(пиримидин-2-ил)фенилокси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя 4-(пиримидин-2-ил)фенол, полученный на стадии 2, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных соединений.

Спектр ¹H ЯМР (500 МГц, ДМСО-d₆) δ м. д.: 11,48 (с, 1H), 8,88-8,89 (м, 2H), 8,38-8,40 (м, 2H), 7,57-7,59 (м, 1H), 7,43-7,44 (м, 1H), 7,35-7,28 (м, 2H), 6,13-6,15 (м, 1H), 6,04 (м, 1H), 5,86-5,88 (м, 1H), 5,59 (м, 1H), 4,81-4,89 (м, 1H), 4,38-4,41 (м, 2H), 4,02 (м, 1H), 3,81-3,84 (м, 2H), 1,10-1,18 (м, 12H).

Масс-спектр ЖХ-МС m/z: [M+Na]⁺=630.

Пример 30: изопропиловый эфир (2S)-2-((((3'-(N-метилкарбамоил)-[1,1'-бифенил]-4-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Стадия 1: 4'-гидрокси-N-метил-[1,1'-бифенил]-3-формамид

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной на стадии 1 примера 28, используя 4-йодфенол, 3-(N-метилкарбамоил)фенилбороновую кислоту, Pd(dppf)Cl₂ и карбонат цезия в качестве исходных соединений.

Масс-спектр ЖХ-МС m/z: [М+Н]⁺=228.

Стадия 2: Получение изопропилового эфира (2S)-2-((((3'-(N-метилкарбамоил)-[1,1'-бифенил]-4-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя 4'-гидрокси-N-метил-[1,1'-бифенил]-3-формамид, полученный на стадии 1, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных соединений.

Спектр ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ м.д.: 11,46-11,50 (с, 1Н), 7,95-7,96 (м, 1Н), 7,70-7,73 (м, 1H), 7,57-7,59 (м, 1H), 7,35-7,37 (м, 2H), 7,30-7,32 (м, 1H), 7,28-7,31 (м, 1H), 7,22-7,26 (м, 1H), 7,18-7,20 (м, 1H), 7,15-7,17 (м, 1H), 6,08-6,10 (м, 1H), 6,01 (м, 1H), 5,97-6,02 (м, 1H), 5,58 (м, 1H), 4,81-4,88 (м, 1H), 4,38-4,42 (м, 2H), 4,05 (м, 1H), 3,89-3,92 (м, 5H), 1,16-1,28 (м, 12H).

Масс-спектр ЖХ-МС m/z: [М-Н]⁺=661.

Пример 31: изопропиловый эфир (2S)-2-((((3'-фтор-[1,1'-бифенил]-4-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Стадия 1: Получение 4-(3-фторфенил)фенола

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной на стадии 1 примера 28, используя 4-гидроксифенилбороновую кислоту, 3-фторйодбензол, Pd(dppf)Cl₂ и карбонат цезия в качестве исходных соединений.

ЖХ-МС m/z: [М+Н]⁺=189.

Стадия 2: Получение изопропилового эфира (2S)-2-((((3'-фтор-[1,1'-бифенил]-4-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя 4-(3-фторфенил)фенол, полученный на стадии 1, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных соединений.

Спектр ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ м.д.: 11,49 (с, 1H), 7,95-7,97 (м, 1Н), 7,70-7,72 (м, 1H), 7,56-7,58 (м, 1H), 7,36-7,38 (м, 2H), 7,31-7,32 (м, 1H), 7,28-7,30 (м, 1H), 7,19-7,20 (м, 1H), 7,16-7,17 (м, 1H), 6,07-6,10 (м, 1H), 6,03 (м, 1H), 5,97-6,01 (м, 1H), 5,56 (м, 1H), 4,80-4,88 (м, 1H), 4,38-4,41 (м, 2H), 4,06 (м, 1H), 3,82-3,86 (м, 2H), 1,16-1,27 (м, 12H).

Масс-спектр ЖХ-МС m/z: [М+Н]⁺=624.

Пример 32: изопропиловый эфир (2S)-2-((((3'-хлор-[1,1'-бифенил]-4-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Стадия 1: Получение 4-(3-хлорфенил)фенола

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной на стадии 1 примера 28, используя 4-гидроксифенилбороновую кислота, 3-хлорйодбензол, Pd(dppf)Cl₂ и карбонат цезия в качестве исходных соединений.

Масс-спектр ЖХ-МС m/z: [М+Н]⁺=205.

Стадия 2: Получение изопропилового эфира (2S)-2-((((3'-хлор-[1,1'-бифенил]-4-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя 4-(3-хлорфенил)фенол, полученный на стадии 1, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных соединений.

Спектр ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ м.д.: 11,49 (с, 1H), 7,51-7,82 (м, 6Н), 7,26-7,35 (м, 3H), 6,12-6,14 (м, 1Н), 6,11 (м, 1H), 5,96-5,98 (м, 1Н), 5,88 (м, 1H), 4,80-4,88 (м, 1Н), 4,38-4,42 (м, 2H), 4,01 (м, 1H), 3,82-3,87 (м, 2H), 1,11-1,29 (м, 12Н).

Масс-спектр ЖХ-МС m/z: [М+Н]⁺=640.

Пример 33: изопропиловый эфир (2S)-2-(((S)-((4-фтор-1,2-диметил-1H-индол-5-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Стадия 1: Получение этилового эфира 2-(2,3-дифтор-6-нитрофенил)-3-оксобутановой кислоты

В круглодонную колбу емкостью 100 мл добавляют 35 мл тетрагидрофурана, при перемешивании на бане со льдом медленно добавляют 1150 мг гидрида натрия и медленно добавляют 1,43 мл этилацетоацетата. После окончания добавления медленно добавляют раствор 2,3 мл 2,3,4-трифторнитробензола в тетрагидрофуране (4 мл). После того как добавление завершается, смеси дают прореагировать в течение 24 часов при комнатной температуре, а затем реакцию прерывают, добавив воду. Добавляют 35 мл 2н. раствора HCl, чтобы довести величину рН до нейтрального значения, и смесь экстрагируют этилацетатом. Органические слои собирают, сушат над безводным сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют, получая указанное в названии соединение, которое сразу же используют на следующей стадии.

Стадия 2: Получение 1-(2,3-дифтор-6-нитрофенил)пропан-2-она

Этиловый эфир 2-(2,3-дифтор-6-нитрофенил)-3-оксобутановой кислоты, полученный на стадии 1, переносят в реакционный сосуд, и добавляют смесь 10 мл концентрированной хлористоводородной кислоты и 10 мл ледяной уксусной кислоты. Раствору дают прореагировать в течение 12 час при температуре 100°С, после чего реакцию прекращают. Раствор разбавляют водой и этилацетатом, и отделяют этилацетатные слои. Добавляют насыщенный водный раствор NaHCO₃, чтобы довести величину рН до нейтрального значения, этилацетатный слой отделяют, и водную фазу экстрагируют этилацетатом. Органические слои объединяют, сушат над безводным Na₂SO₄, фильтруют, концентрируют и очищают колоночной хроматографией, получая указанное в названии соединение.

Спектр ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ м.д.: 8,04-8,08 (м, 1H), 7,66-7,7 (м, 1H), 4,26-4,26 (д, 2H), 2,30 (с, 3H).

Стадия 3: Получение 1-(2-фтор-3-метокси-6-нитрофенил)пропан-2-она

В круглодонной колбе емкостью 100 мл 2 г 1-(2,3-дифтор-6-нитрофенил)пропан-2-она, полученного на стадии 2, добавляют к раствору метилата натрия в метаноле (40 мл), при этом раствор метилата натрия в метаноле получают, медленно добавляя при перемешивании 2,27 г Na к метанолу на бане со льдом с последующим перемешиванием в течение 1 час при температуре 50°С. Смеси дают прореагировать в течение 1 часа при комнатной температуре, пока реакция не завершится, останавливают реакцию, добавив 1 мл воды, и экстрагируют дихлорметаном. Органические слои промывают насыщенным раствором соли, сушат над безводным сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют, получая указанное в названии соединение.

Спектр ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ м.д.: 8,04-8,07 (м, 1Н), 7,31-7,35 (м, 1Н), 4,20-4,21 (д, 2H), 3,98 (с, 3H), 2,28 (с, 3H).

Стадия 4: Получение 2-метил-4-фтор-5-метокси-1H-индола

В круглодонную колбу емкостью 100 мл, содержащую 15 мл метанола, добавляют и растворяют 1,9 г 1-(2-фтор-3-метокси-6-нитрофенил)пропан-2-она, полученного на стадии 3, а затем добавляют 190 мг палладия на угле. Смеси дают прореагировать в течение 36 часов при комнатной температуре, а затем реакцию прекращают. Смесь фильтруют и концентрируют, получая указанное в названии соединение.

Спектр ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ м.д.: 11,01 (шир, 1Н), 6,99-7,01 (д, 1Н), 6,853 (м, 1H), 6,10-6,11 (т, 1H), 3,79 (с, 3H), 2,35 (с, 3H).

Стадия 5: Получение 1,2-диметил-4-фтор-5-метокси-1H-индола

В круглодонной колбе емкостью 100 мл растворяют 950 мг 2-метил-4-фтор-5-метокси-1H-индола, полученного на стадии 4, в 6 мл тетрагидрофурана и медленно добавляют при температуре 0°С 87,2 мг гидрида натрия. После того как добавление завершено, раствор продолжают перемешивать еще в течение 30 мин, и при 0°С медленно добавляют 0,14 мл йодистого метила. Смеси дают прореагировать в течение 1 часа, после чего реакцию прекращают и прерывают, медленно добавив воду при 0°С, экстрагируют этилацетатом, промывают насыщенным раствором соли, сушат над безводным сульфатом натрия, фильтруют, концентрируют и очищают с помощью колоночной хроматографии, получая указанное в названии соединение.

Стадия 6: Получение 1,2-диметил-4-фтор-5-гидрокси-1H-индола

В круглодонную колбу емкостью 100 мл помещают 210 мг 1,2-диметил-4-фтор-5-метокси-1H-индола, полученного на стадии 5, растворяют в 4 мл безводного дихлорметана, и при температуре минус 70°С медленно добавляют 0,2 мл BBr₃. Реакционную смесь выдерживают в течение 2 час при минус 70°С, после чего реакцию прекращают. Реакционный раствор медленно выливают в воду со льдом, и дихлорметан удаляют при пониженном давлении. Остаток фильтруют, и осадок на фильтре растворяют в метаноле, а затем концентрируют, получая указанное в названии соединение.

Спектр ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ: 8,82 (с, 1H), 6,97-6,99 (д, 1Н), 6,68-6,72 (т, 1H), 8,12 (с, 1Н), 3,59 (с, 3H), 2,35 (с, 3H).

Стадия 7: Изопропиловый эфир (2S)-2-(((S)-((4-фтор-1,2-диметил-1H-индол-5-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя 1,2-диметил-4-фтор-5-гидрокси-1H-индол, полученный на стадии 6, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных соединений.

Спектр ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ: 11,48 (с, 1H), 7,52-7,54 (д, 1H), 7,08-7,19 (м, 2H), 6,29 (с, 1H), 5,86-6,08 (м, 3H), 5,47-5,49 (д, 1H), 4,84-4,87 (т, 1H), 4,24-4,36 (м, 2H), 3,77-3,86 (м, 3H), 3,65 (с, 3H), 2,40 (с, 3H), 1,21-1,27 (м, 6H), 1,14-1,16 (м, 6H).

Масс-спектр ЖХ-МС m/z: [М+Н]⁺=615.

Пример 34: изопропиловый эфир (2S)-2-((((6-фтор-3-метилбензо[d]изоксазол-5-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Стадия 1: Получение 3-фтор-4-метоксибензальдегида

В круглодонную колбу емкостью 100 мл помещают 1,3 мл 3,4-дифторбензальдегида, растворяют в 30 мл метанола и медленно при комнатной температуре добавляют 2,2 г метоксида натрия. Смеси дают прореагировать в течение 12 часов, после чего реакцию прекращают, и реакцию останавливают, добавив 3 мл воды. Метанол удаляют при пониженном давлении, а остаток экстрагируют дихлорметаном. Органические фазы собирают, промывают насыщенным раствором соли, сушат над безводным сульфатом натрия, фильтруют, концентрируют и очищают колоночной хроматографией, получая указанное в названии соединение.

Спектр ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ м.д.: 9,87-9,88 (д, 1Н), 7,81-7,82 (м, 1Н), 7,79 (м, 1Н), 7,40-7,42 (т, 1H), 3,96 (с, 3H)

Стадия 2: Получение (3-фтор-4-метоксифенил)формиата

В круглодонной колбе емкостью 100 мл 2,5 г 3-фтор-4-метоксибензальдегида, полученного на стадии 1, растворяют в 20 мл безводного дихлорметана и добавляют 4,7 г м-хлорнадбензойной кислоты. Смеси дают прореагировать в течение 4 часов при температуре 50°С, после чего реакцию прекращают. Смесь разбавляют с помощью 30 мл дихлорметана, промывают водой, насыщенным раствором соли, сушат над безводным сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют, получая указанное в названии соединение, которое сразу же используют на следующей стадии.

Стадия 3: Получение 3-фтор-4-метоксифенола

В круглодонную колбу емкостью 100 мл помещают 2,4 г (3-фтор-4-метоксифенил)формиата, полученного на стадии 2, и добавляют 10 мл 5%-го раствора гидроксида натрия и 20 мл метанола. Смеси дают прореагировать в течение 1 часа при комнатной температуре, после чего реакцию прекращают. Добавляют 2н. раствор хлористоводородной кислоты, чтобы довести величину рН до значения приблизительно 5, и метанол удаляют при пониженном давлении. Остаток экстрагируют этилацетатом, промывают водой и насыщенным раствором соли. Органические фазы собирают, сушат над безводным сульфатом натрия, фильтруют, концентрируют и очищают колоночной хроматографией, получая указанное в названии соединение.

Спектр ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ м.д.: 9,36 (с, 1H), 6,93-6,98 (м, 1Н), 6,59-6,62 (м, 1Н), 6,50-6,51 (м, 1Н), 3,73 (с, 3H)

Стадия 4: Получение (3-фтор-4-метоксифенил)уксусной кислоты

1,8 г 3-фтор-4-метоксифенола, полученного на стадии 3, помещают в круглодонную колбу емкостью 100 мл и растворяют, добавив 25 мл дихлорметана. При охлаждении на бане со льдом добавляют 1 мл ацетилхлорида и 1,9 мл триэтиламина и полученной смеси дают прореагировать в течение 10 мин, после чего реакцию прекращают. Добавляют 40 мл диэтилового эфира, и реакционный раствор фильтруют. Фильтрат упаривают на роторном испарителе, получая твердое вещество желтого цвета, к которому добавляют 30 мл диэтилового эфира. Раствор фильтруют, и фильтрат упаривают на роторном испарителе, получая указанное в названии соединение, которое сразу же используют на следующей стадии.

Стадия 5: Получение 1-(4-фтор-2-гидрокси-5-метоксифенил)этанона

2 г (3-фтор-4-метоксифенил)уксусной кислоты, полученной на стадии 4, помещают в круглодонную колбу емкостью 100 мл и при температуре 0°С медленно добавляют 6,5 мл трифторметансульфоновой кислоты. Смесь перемешивают в течение еще 5 мин, и осуществляют реакцию в течение 75 мин при температуре 70°С, после чего реакцию прекращают. Смесь охлаждают до 0°С и добавляют 20 мл воды со льдом. Реакционный раствор фильтруют, и осадок на фильтре промывают водой. Осадок на фильтре собирают и сушат в вакууме, получая указанное в названии соединение.

Спектр ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ м.д.: 11,95-11,95 (д, 1Н), 7,51-7,54 (д, 1H), 6,89-6,92 (д, 1H), 3,85 (с, 3H), 2,65 (с, 3H)

Масс-спектр ЖХ-МС m/z: [М+Н]⁺=185.

Стадия 6: Получение (Е)-1-(4-фтор-2-гидрокси-5-метоксифенил)этилкетоксима

2,4 г 1-(4-фтор-2-гидрокси-5-метоксифенил)этанона, полученного на стадии 5, и 1,08 г гидрохлорида гидроксиламина помещают в круглодонную колбу емкостью 50 мл и растворяют, добавив 15 мл этанола, а затем при температуре 50°С медленно добавляют 0,6 г гидроксида натрия. После того как добавление завершено, смесь кипятят с обратным холодильником в течение приблизительно 1 часа, после чего реакцию прекращают. Реакционный раствор энергично перемешивают при температуре 0-4°С и добавляют 20 мл воды. Реакционный раствор отфильтровывают, осадок на фильтре промывают холодной водой и сушат в вакууме, получая указанное в названии соединение.

Спектр ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ м.д.: 11,53 (с, 1H), 11,49 (с, 1H), 7,14-7,17 (д, 1H), 6,75-6,782 (д, 1H), 3,81 (с, 3H), 2,23 (с, 3H).

Масс-спектр ЖХ-МС m/z: [М+Н]⁺=200.

Стадия 7: Получение 6-фтор-5-метокси-3-метилбензо[d]изоксазола

800 мг (E)-1-(4-фтор-2-гидрокси-5-метоксифенил)этилкетоксима, полученного на стадии 6, и 332 мг карбоната калия помещают в круглодонную колбу емкостью 25 мл. Добавляют 5,8 мл N-метилпирролидона (NMP) и 0,4 мл уксусного ангидрида. Смесь оставляют реагировать в течение 3 часов при температуре 120°С в атмосфере азота, а затем реакцию останавливают. Реакционный раствор охлаждают до комнатной температуры и добавляют 10 мл воды. Реакционный раствор отфильтровывают, и осадок на фильтре растворяют в дихлорметане и сушат над безводным сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют, получая указанное в названии соединение.

Спектр ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ м.д.: 7,73-7,76 (д, 1Н), 7,55-7,57 (д, 1H), 3,39 (с, 3H), 2,53 (с, 3H).

Масс-спектр ЖХ-МС m/z: [М+Н]⁺=182.

Стадия 8: Получение 3-метил-5-гидрокси-6-фтор-бензо[d]изоксазола

400 мг 6-фтор-5-метокси-3-метилбензо[d]изоксазола, полученного на стадии 7, добавляют в круглодонную колбу емкостью 25 мл и растворяют, добавляя 6 мл безводного дихлорметана. По каплям медленно добавляют 0,5 мл трибромида бора при температуре минус 70°С в атмосфере азота. После того как добавление завершено, смеси дают прореагировать в течение 30 мин, затем реакцию останавливают. Реакционный раствор выливают на измельченный лед, и дихлорметан удаляют при пониженном давлении. Остаток фильтруют и очищают с помощью колоночной хроматографии, получая указанное в названии соединение.

Спектр ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ м.д.: 10,11 (с, 1H), 7,64-7,67 (д, 1Н), 7,21-7,23 (д, 1H), 2,50 (с, 3H).

Масс-спектр ЖХ-МС m/z: [М+Н]⁺=168.

Стадия 9: Получение изопропилового эфира (2S)-2-((((6-фтор-3-метилбензо[d]изоксазол-5-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя 3-метил-5-гидрокси-6-фтор-бензо[d]изоксазол, полученный на стадии 8, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных соединений.

Спектр ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ м.д.: 11,53 (с, 1H), 7,86 (м, 2H), 7,57 (с, 1H), 6,28-6,32 (м, 1H), 5,91 (м, 2H), 5,56-5,602 (м, 1H), 4,82-4,86 (м, 1H), 4,31-4,42 (м, 2H), 4,01-4,04 (м, 1H), 3,80-3,85 (м, 2H), 2,52 (с, 3H), 1,22-1,29 (м, 6H), 1,12-1,15 (м, 6H).

Масс-спектр ЖХ-МС m/z: [М+Н]⁺=603.

Пример 35: изопропиловый эфир (2S)-2-((((6-фторбензо[c][1,2,5]тиадиазол-5-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Стадия 1: Получение 4-фтор-5-метокси-2-нитроанилина

3,4 г 2-амино-4,5-дифторнитробензола помещают в круглодонную колбу емкостью 100 мл и растворяют, добавляя 30 мл МеОН. При комнатной температуре медленно добавляют 2,16 г метоксида натрия. Смеси дают реагировать в течение 12 часов при комнатной температуре, и реакцию прекращают. Реакционный раствор отфильтровывают, и осадок на фильтре промывают с помощью 10 мл холодного метанола и сушат в вакууме, получая указанное в названии соединение, которое сразу же используют на следующей стадии.

Масс-спектр ЖХ-МС m/z: [М+Н]⁺=187.

Стадия 2: Получение 4-фтор-5-метокси-1,2-фенилендиамина

2,7 г 4-фтор-5-метокси-2-нитроанилина, полученного на стадии 1, помещают в круглодонную колбу емкостью 100 мл, добавляют 30 мл МеОН, и при комнатной температуре медленно добавляют 270 мг Pd/C. Смесь реагирует в течение 3 часов при 50°С в атмосфере водорода, а затем реакцию прекращают. Реакционный раствор отфильтровывают, и осадок на фильтре промывают с помощью холодного МеОН (10 мл×2). Фильтрат концентрируют, получая указанное в названии соединение, которое сразу же используют на следующей стадии.

Масс-спектр LC-МС m/z: [М+Н]⁺=157.

Стадия 3: Получение 5-фтор-6-метоксибензо[с][1,2,5]тиадиазола

1,5 г 4-фтор-5-метокси-1,2-фенилендиамина, полученного на стадии 2, помещают в круглодонную колбу емкостью 100 мл и растворяют, добавляя 20 мл пиридина. При 0°С медленно добавляют 2,36 г SOCl₂. Смеси дают прореагировать в течение 12 часов при температуре 50°С в атмосфере азота, а затем реакцию прекращают. Реакционный раствор выливают на 10 г льда и экстрагируют этилацетатом. Органические слои собирают, последовательно промывают водой, 0,5н. раствором холодной хлористоводородной кислоты и насыщенным раствором соли, сушат, концентрируют и очищают колоночной хроматографией, получая указанное в названии соединение.

Спектр ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ м.д.: 7,99-8,02 (д, 1Н), 7,65-7,67 (д, 1H), 4,02 (с, 3H).

Масс-спектр ЖХ-МС m/z: [М+Н]⁺=185.

Стадия 4: Получение 5-гидрокси-6-фторбензо[с][1,2,5]тиадиазола

500 мг 5-фтор-6-метоксибензо[с][1,2,5]тиадиазола, полученного на стадии 3, помещают в реакционную колбу и добавляют 4 мл 40%-го водного раствора HBr. Смесь дают прореагировать в течение 12 часов при температуре 90°С в герметичных условиях, и реакцию останавливают. Реакционный раствор охлаждают до комнатной температуры и отфильтровывают. Осадок на фильтре промывают водой и сушат в вакууме, получая указанное в названии соединение.

Масс-спектр ЖХ-МС m/z: [М+Н]⁺=171.

Стадия 5: Получение изопропилового эфира (2S)-2-((((6-фторбензо[c][1,2,5]тиадиазол-5-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя 5-гидрокси-6-фторбензо[с][1,2,5]тиадиазол, полученный на стадии 4, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных соединений.

Спектр ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ м.д.: 11,54-11,56 (м, 1H), 8,08-8,20 (м, 2H), 7,57 (м, 1H), 6,48-6,54 (м, 1H), 5,91-6,10 (м, 2H), 5,52-5,18 (м, 1H), 4,78-4,85 (м, 1H), 4,35-4,38 (м, 2H), 3,81-4,07 (м, H), 1,16-1,30 (м, 6H), 1,11-1,13 (м, 6H).

Масс-спектр ЖХ-МС m/z: [М+Н]⁺=606.

Пример 36: изопропиловый эфир (2S)-2-(((((4'-метокси-[1,1'-бифенил]-4-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя 4-гидрокси-4'-метокси-1,1'-бифенил, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных соединений.

Спектр ¹Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ: 11,49 (с, 1H), 7,61-7,55 (м, 5H), 7,28-7,23 (м, 2H), 7,01 (д, 2H), 6,05-6,01 (м, 2H), 5,84-5,82 (м, 1H), 5,57-5,55 (м, 1H), 4,88-4,84 (м, 1H), 4,41-4,37 (м, 1H), 4,27-4,25 (м, 1H), 4,05-4,01 (м, 1H), 3,84-3,82 (м, 2H), 2,333,79 (с, 3H), 1,28-1,22 (м, 6H), 1,18-1,15 (м, 6H).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [М+Н]⁺=636,1.

Пример 37: Получение изопропилового эфира (2S)-2-(((((4'-трифторметил-[1,1'-бифенил]-4-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Стадия 1: Получение 4-гидрокси-4'-трифторметил[1,1'-бифенила]

2 г 4-йодбензотрифторида и 1,2 г п-гидроксифенилбороновой кислоты помещают в одногорлую колбу емкостью 100 мл и добавляют 2 г карбоната калия, 0,26 г PdCl₂(PPh3)₂, 30 мл 1,4-диоксана и 10 мл воды. Смеси дают прореагировать в течение 4 часов при температуре 70°С в атмосфере азота, а затем реакцию останавливают. Полученную смесь концентрируют и добавляют 10 мл воды. Смесь экстрагируют этилацетатом (2×10 мл), сушат, фильтруют, концентрируют и очищают с помощью колоночной хроматографии, получая указанное в названии соединение.

Стадия 2: Получение изопропилового эфира (2S)-2-(((((4'-трифторметил-[1,1'-бифенил]-4-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя 4-гидрокси-4'-трифторметил[1,1'-бифенил], полученный на стадии 1, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных соединений.

Спектр ¹Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ: 11,49 (с, 1H), 7,87 (д, 2H), 7,80 (д, 2H), 7,76 (д, 2H), 7,57 (д, 1H), 7,36 (д, 2H), 6,11-6,01 (м, 2H), 5,88-5,83 (м, 1H), 5,60-5,55 (м, 1H), 4,89-4,84 (м, 1H), 4,42-4,39 (м, 1H), 4,28-4,26 (м, 1H), 4,04-4,02 (м, 1H), 3,85-3,84 (м, 2H), 1,28-1,24 (м, 6H), 1,16-1,14 (м, 6H).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [М+Н]⁺=674.

Пример 38: изопропиловый эфир (2S)-2-(((4-(тиазол-4-ил)фенилокси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Стадия 1: Получение 4-(тиазол-4-ил)фенола

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной на стадии 1 примера 37, используя п-гидроксифенилбороновую кислота, 4-бромтиазол, карбонат калия и дихлорид бис(трифенилфосфин)палладия в качестве исходных соединений.

Спектр ¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 8,65 (с, 1H), 7,83 (с, 12H), 7,39 (с, 1H), 6,90 (д, 2H), 5,00 (с, 1H).

Стадия 2: Получение изопропилового эфира (2S)-2-(((4-(тиазол-4-ил)фенилокси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя 4-(тиазол-4-ил)фенол, полученный на стадии 1, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных соединений.

Спектр ¹Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ: 11,48 (с, 1H), 9,18 (с, 1H), 8,12 (с, 1H), 8,00 (д, 2H), 7,58 (с, 1H), 7,31 (д, 2H), 6,08-6,04 (м, 2H), 5,82 (д, 1H), 5,57 (м, 1H), 4,87-4,85 (м, 1H), 4,38-4,37 (м, 1H), 4,27 (м, 1H), 4,02 (м, 1H), 3,84-3,82 (м, 2H), 1,28-1,24 (м, 6H), 1,16-1,14 (м, 6H).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [М+Н]⁺=613.

Пример 39: изопропиловый эфир (2S)-2-(((((4'-хлор-2'-фтор-[1,1'-бифенил]-4-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Стадия 1: Получение 4-гидрокси-4'-хлор-2'-фтор-[1,1'-бифенила]

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной на стадии 1 примера 37, используя 2-фтор-4-хлорйодбензол, п-гидроксифенилбороновую кислоту, карбонат калия и PdCl₂(PPh₃)₂ в качестве исходных соединений.

Спектр ¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 7,43-6,83 (м, 7Н), 4,94 (с, 1Н).

Стадия 2: Получение изопропилового эфира (2S)-2-(((((4'-хлор-2'-фтор-[1,1'-бифенил]-4-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя 4-гидрокси-4'-хлор-2'-фтор-[1,1'-бифенил], полученный на стадии 1, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных соединений.

Спектр ¹Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ: 11,48 (с, 1H), 7,56-7,52 (м, 5H), 7,39-7,30 (м, 3H), 6,11-6,01 (м, 2H), 5,86-5,82 (м, 1H), 5,56-5,54 (м, 1H), 4,87-4,85 (м, 1H), 4,42-4,39 (м, 1H), 4,28-4,26 (м, 1H), 4,04-4,02 (м, 1H), 3,85-3,84 (м, 2H), 1,28-1,24 (м, 6H), 1,16-1,14 (м, 6H).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [M+Na]⁺=680.

Пример 40: изопропиловый эфир (2S)-2-(((((3'-фтор-4'-метил-[1,1'-бифенил]-4-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Стадия 1: Получение 4-гидрокси-3'-фтор-4'-метил[1,1'-бифенила]

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной на стадии 1 примера 37, используя 3-фтор-4-метилйодбензол, п-гидроксифенилбороновую кислоту, карбонат калия и PdCl₂(PPh₃)₂ в качестве исходных соединений.

Спектр ¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 7,45-6,87 (м, 7Н), 4,77 (с, 1Н), 2,31 (с, 3H).

Стадия 2: Получение изопропилового эфира (2S)-2-(((((3'-фтор-4'-метил-[1,1'-бифенил]-4-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя 4-гидрокси-3'-фтор-4'-метил-[1,1'-бифенил], полученный на стадии 1, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных соединений.

Спектр ¹Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ: 11,48 (с, 1H), 7,68 (д, 2H), 7,57 (д, 1H), 7,44-7,29 (м, 5H), 6,08-6,03 (м, 2H), 5,85-5,82 (м, 1H), 5,56-5,54 (м, 1H), 4,88-4,83 (м, 1H), 4,42-4,38 (м, 1H), 4,28-4,26 (м, 1H), 4,04-4,02 (м, 1H), 3,84-3,82 (м, 2H), 2,26 (д, 3H), 1,28-1,23 (м, 6H), 1,19-1,14 (м, 6H).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [M+Na]⁺=660.

Пример 41: изопропиловый эфир (2S)-2-((((4'-фтор-3'-метил-[1,1'-бифенил]-4-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Стадия 1: Получение 4-гидрокси-4'-фтор-3'-метил-[1,1'-бифенила]

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной на стадии 1 примера 37, используя 4-фтор-3-метилйодбензол, п-гидроксифенилбороновую кислоту, карбонат калия и PdCl₂(PPh₃)₂ в качестве исходных соединений.

Спектр ¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ м.д.: 7,52-7,42 (м, 2H), 7,34-7,26 (м, 2H), 7,06-6,87 (м, 3H), 4,67 (с, 1H), 2,32 (с, 3Н).

Стадия 2: Получение изопропилового эфира (2S)-2-((((4'-фтор-3'-метил-[1,1'-бифенил]-4-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя 4-гидрокси-4'-фтор-3'-метил-[1,1'-бифенил], полученный на стадии 1, оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных соединений.

Спектр ¹Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ: 11,50 (с, 1H), 7,65-7,55 (м, 4H), 7,47-7,45 (м, 1H), 7,30-7,17 (м, 3H), 6,11-5,99 (м, 2H), 5,85-5,83 (м,1 H), 5,57-5,54 (м, 1H), 4,90-4,84 (м, 1H), 4,38-4,36 (м, 1H), 4,27-4,25 (м, 1H), 4,02-3,99 (м, 1H), 3,87-3,80 (м, 2H), 2,30 (с, 3H), 1,29-1,21 (м, 6H), 1,16-1,14 (м, 6H).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [M+Na]⁺=660.

Пример 42: изопропиловый эфир (2S)-2-((((4'-метил-[1,1'-бифенил]-4-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают в соответствии с методикой, описанной в примере 1, используя 4-гидрокси-4'-метил[1,1'-бифенил], оксихлорид фосфора, гидрохлорид изопропилового эфира L-аланина, пентафторфенол и (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридин в качестве исходных соединений.

Спектр ¹Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ: 11,49 (с, 1H), 7,58 (д, 1H), 7,53-7,51 (м, 4H), 7,29-7,25 (м, 4H), 6,10-6,02 (м, 2H), 5,88-5,82 (м, 1H), 5,60-5,55 (м, 1H), 4,88-4,84 (м, 1H), 4,41-4,38 (м, 1H), 4,27 (м, 1H), 4,04-4,02 (м, 1H), 3,84-3,82 (м, 2H), 2,33 (с, 3H), 1,28-1,23 (м, 6H), 1,18-1,14 (м, 6H).

Масс-спектр ESI-МС m/z: [М+Н]⁺=620.

Пример 43: изопропиловый эфир (2S)-2-(((R)-((4-фтор-1,2-диметил-1H-индол-5-ил)окси)(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)фосфорил)амино)пропановой кислоты

Указанное в названии соединение получают по методике, которая аналогична методике, приведенной в примере 33.

Спектр ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ: 11,49 (с, 1H), 7,55-7,57 (д, 1H), 7,07-7,19 (м, 2H), 6,27 (с, 1H), 5,91-6,11 (м, 3H), 5,14-5,56 (д, 1H), 4,82-4,88 (т, 1H), 4,41-4,45 (м, 1H), 4,24-4,28 (м, 1H), 4,04-4,06 (м, 1H), 3,74-3,82 (м, 2H), 3,647 (с, 3H), 2,39 (с, 3H), 1,20-1,25 (м, 6H), 1,14-1,16 (м, 6H).

Масс-спектр ЖХ-МС m/z: [М+Н]⁺=615.

Фармакологическая и фармакокинетическая активность:

Экспериментальный пример 1: Исследование противовирусной активности соединений по настоящему изобретению в системе репликона HCV

1. Используемые в экспериментах вещества

1.1. Реагенты:

Таблица 1
Список реагентов Название реагента Поставщик Среда DMEM Invitrogen Фетальная бычья сыворотка (FBS) Gibco L-Глютамин Invitrogen Раствор пенициллина-стрептомицина Invitrogen Модифицированный DPBS Hyclone Трипсин/ЭДТК Invitrogen Диметилсульфоксид (ДМСО) Sigma Bright-Glo™ Promega Реагент CellTiter-Fluor™ Promega

1.2. Клеточные линии Huh7 1b:

Клеточная линия Huh7 1b, которую поставляет WuXi AppTec Co., Ltd. (Шанхай), содержит репликон HCV 1b со стабильным репортерным геном люциферазы (Luc). Его конструируют путем клонирования гена неструктурного белка HCV, neo (G418 резистентность) и репортерного гена люциферазы в вектор pBR посредством технологии генетической рекомбинации. Затем вектор, несущий репликон HCV, трансфицируют в клетки Huh7, и трансфицированные подобным образом клетки Huh7 подвергают скринингу по резистентности к G418. Репликон HCV устойчиво реплицируется, и соответствующий белок и люцифераза стабильно экспрессируются в клетках Huh7. Клеточную модель используют для in vitro скрининга соединений против HCV. Анти-HCV активность соединений оценивают путем определения уровня экспрессии люциферазы. См. Lohmann V, et al. 1999. Replication of subgenomic hepatitis C virus RNAs in a hepatoma cell line. Science. 285(5424):110-113.

1.3. Положительный контроль:

В качестве контрольного препарата в данном экспериментальном примере используют соединение из примера 25 в WO 2008/121634 (РСТ/US2008/058183), а именно, изопропиловый эфир (S)-2-{[(2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-диhydro-2H-пиримидин-1-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метил-тетрагидро-фуран-2-илметокси]-фенокси-фосфориламино}пропановой кислоты. Указанное соединение получают в соответствии с методикой, приведенной в J. Org. Chem. 2011, 76, 8311-8319, и идентифицируют методами ПМР-спектроскопии и масс-спектрометрии.

2. Экспериментальные методики:

2.1. приготовление соединения: добавляют каждое из соединений, перечисленных в таблице 2, в 96-луночные планшеты, используя POD™ 810 Automation Platform (LabCyte Corporation, США), с 10 мкМ каждого из соединений в качестве исходной концентрации, при этом проводят две серии экспериментов; последовательно разводят каждое из соединений в 3 раза и получают составы с 10 концентрациями, при этом конечная концентрация ДМСО составляет 0,5%;

2.2. подготовка клеток: высевают клетки Huh71b на 96-луночные планшеты, соответственно, с объемом 125 мкл и 8*10³ клеток/лунка и инкубируют при 37°С в инкубаторе с 5% СО₂ в течение 72 часов;

2.3. определение активности клеток: добавляют 30 мкл на лунку реагента CellTiter-Fluor™ Reagent, инкубируют при 37°С в инкубаторе с 5% СО₂ в течение 1 часа, измеряют значение сигнала флуоресценции с помощью флуорометра, и используют полученные данные для расчета цитотоксичности соединений;

2.4. детектирование Bright-Glo: добавляют 100 мкл на лунку субстрата Bright-Glo™ Luciferase Substrate с использованием системы обнаружения хемилюминесценции EnVision™ (PerkinElmer, США) для определения значений сигнала флуоресценции в течение 5 минут, и используют полученные данные для расчета действенности соединений;

2.5. обработка данных: преобразуют полученные данные в процент жизнеспособности клеток (Viability%) с помощью следующей формулы:

,

CPD: значение флуоресценции сигнала лунки с добавленным соединением;

ZPE (эффект ноль процентов): значение сигнала флуоресценции контрольной лунки с эффектом ноль процентов.

Обработку исходных данных для расчета процента ингибирования (Inhibition%) проводят по следующей формуле:

,

CPD: значение флуоресценции сигнала лунки с добавленным соединением;

HPE (эффект сто процентов): значение сигнала флуоресценции контрольной лунки с эффектом сто процентов;

ZPE (эффект ноль процентов): значение сигнала флуоресценции контрольной лунки с эффектом ноль процентов.

Процент ингибирования обрабатывают, используя программное обеспечение GraphPad Prism, и получают соответствующие кривые и значения ЕС₅₀. Данные приведены в таблице 2.

Таблица 2 Номер примера Структура EC₅₀ (мкM) Положительный контроль 0,1168

Пример 1 0,056 Пример 2 0,1051 Пример 3 0,1232 Пример 4 Не установлено Пример 5 0,061 Пример 6 Не установлено

Пример 7 Не установлено Пример 8 0,411 Пример 9 Не установлено Пример 10 Не установлено

Пример 11 0,189 Пример 12 0,637 Пример 13 Не установлено Пример 14 0,2231 Пример 15 >3,33

Пример 16 3,871 Пример 17 0,2577 Пример 18 0,3141 Пример 19 0,303 Пример 20 3,871

Пример 21 0,2577 Пример 22 0,3141 Пример 23 4,488 Пример 24 Не установлено Пример 25 Не установлено

Пример 27 0,098 Пример 28 0,123 Пример 31 0,102 Пример 32 0,068 Пример 33 0,033 Пример 36 0,073

Пример 38 0,100 Пример 39 0,061 Пример 40 0,056 Пример 41 0,050 Пример 42 0,126 Пример 43 0,069

Приведенные выше результаты показывают, что соединения по настоящему изобретению обладают способностью очень эффективно ингибировать вирус HCV и, по сравнению с положительным контролем, обладают превосходящей или равной активностью на основе значений ЕС₅₀.

Экспериментальный пример 2: Исследование противовирусной активности соединений по настоящему изобретению в полученной из клеточной культуры инфекционной системе HCV (HCVcc)

1. Экспериментальные вещества

1.1. Соединения

В данном эксперименте используют соединение из приведенного выше примера 1. Из соединения готовят состав в 10 мМ маточном растворе ДМСО, который разбавляют до 500 нМ с помощью полной культуральной среды DMEM, содержащей 0,5% ДМСО, с последующим последовательным 4-кратным разведением, и получают шесть концентраций. Положительный контроль разбавляют до 10 мкМ с помощью полной культуральной среды DMEM, содержащей 0,5% ДМСО, с последующим последовательным 4-кратным разведением, и получают шесть концентраций.

1.2. Клетки

Клетки Huh7.5.1, которые поставляет Shanghai Institute of Materia Medica, Академии наук Китая.

1.3. Вирусы

Используют вирус J399EM (HCV генотипа 2а), т.е. полноразмерный мутантный штамм HCV, трансфицированный с помощью EGFP (усиленного зеленого флуоресцентного белка), который обладает такой же инфекционной активностью, что и дикий тип JFH-1. Флуоресценцию слитого белка NS5A-EGFP наблюдают непосредственно в инфицированных клетках, путем инсерции кодирующей последовательности EGFP в область NS5A. J399EM поставляет Shanghai Institute of Materia Medica, Академии наук Китая.

1.4. Реагенты

Среда DMEM, приобретенная у компании Invitrogen Corporation, США;

фетальная бычья сыворотка (FBS), приобретенная у компании Sigma Corporation, США;

L(+)-глютамин, приобретенный у компании Invitrogen Corporation, США;

пенициллин-стрептомицин (Pen-Strep), приобретенный у компании Invitrogen Invitrogen Corporation, США;

фосфатно-солевой буферный раствор (PBS), приобретенный у компании Hyclone Corporation, США;

трипсин, приобретенный у компании Invitrogen Corporation, США;

диметилсульфоксид (ДМСО), приобретенный у компании Sigma Corporation, США;

буфер для лизиса, приобретенный у компании Promega Corporation, USA;

МТТ, приобретенный у компании Sigma Corporation, США.

1.4. Приборы

Планшет-ридеры EnVision^® Multilabel, приобретенные у компании Perkin-Elmer Corporation, США.

2. Экспериментальные методики:

1) подготовка клеток Huh7.5.1: собирают клетки Huh7.5.1 в логарифмической фазе, повторно суспендируют в полной культуральной среде DMEM, высевают на 96-луночные планшеты (7*10³ клеток/лунка) и инкубируют при температуре 37°C в инкубаторе с 5% CO₂ в течение 24 час;

2) вирусная инфекция: ресуспендируют вирусы J399EM в полной культуральной среде DMEM, добавляют супернатант вируса (MOI≈0,1) в указанные выше 96-луночные планшеты и промывают с помощью PBS через 8 час после инфицирования;

3) медикаментозное лечение: добавляют различные концентрации соединений к клеткам Huh7.5.1, инфицированным вирусами J399EM, каждую концентрацию исследуют дважды; выбирают контрольную группу с эффектом ноль процентов (ZPE) и контрольную группу с эффектом сто процентов (HPE); заменяют соединения полной культуральной средой DMEM, содержащей 0,5% ДМСО в группе ZPE, и используют клетки, не инфицированные вирусами, в группе HPE;

4) инкубация клеток: инкубируют 96-луночные планшеты при температуре 37°C в инкубаторе с 5% CO₂ в течение 72 часов;

5) определение активности против HCV: считывают показание относительных единиц флуоресценции (RFU) в каждой лунке с помощью планшет-ридера EnVision^® Multilabel после инкубации, и рассчитывают активность соединений против HCV с использованием полученных данных в соответствии со следующей формулой:

,

где RFUZPE обозначает относительные единицы флуоресценции в контрольной группе с эффектом ноль процентов, RFUCPD обозначает относительные единицы флуоресценции группы соответствующего соединения, а RFUHPE обозначает относительные единицы флуоресценции в контрольной группе с эффектом сто процентов;

6) определение жизнеспособности клеток: добавляют раствор МТТ в каждую лунку, инкубируют при температуре 37°C в инкубаторе с 5% CO₂ в течение 4 часов с последующим добавлением раствора растворения МТТ, считывают показание оптической плотности (OD) каждой лунки при 570 нм с помощью планшет-ридера Multilabel по прошествии 6 часов, рассчитывают цитотоксичность соединений с использованием полученных данных в соответствии со следующей формулой:

,

где ODZPE обозначает оптическую плотность в контрольной группе с эффектом ноль процентов, а ODCPD обозначает оптическую плотность соответствующего соединения;

7) обработка данных: обрабатывают Inhibition%, Viability%, соответственно, с помощью GraphPad Prism Software и получают значения 50%-ой величины максимального значения эффективной концентрации (ЕС₅₀) и значения 50%-ой величины максимальной цитотоксической концентрации (СС₅₀) соединений против вирусов HCVcc GT2a. Результаты приведены в таблице 3.

Таблица 3 Пример номер Структура EC₅₀ (мкМ) CC₅₀ (мкМ) Положительный контроль 0,173 ＞10 Пример 1 0,039 ＞10

Из таблицы 3 видно, что соединение из примера 1 по настоящему изобретению обладает великолепной противовирусной активностью и меньшей клеточной токсичностью, по сравнению с положительным контролем в системе HCVcc.

Кроме того, эксперименты по настоящему изобретению также показывают, что при использовании системы HCVcc в условиях in vitro соединения, приведенные в настоящем изобретении, такие как соединения, полученные в примерах 2, 5, 12, 16, 18, 28 и 38, имеют низкое значение полумаксимальной эффективной концентрации (ЕС₅₀) и большое значение полумаксимальной цитотоксической концентрации (СС₅₀) против вирусов HCVcc GT2a, что свидетельствует о хорошей ингибирующей активности и невысокой цитотоксичности.

Экспериментальный пример 3: Фармакокинетические исследования соединений по настоящему изобретению на крысах SD

1. Экспериментальные вещества

1.1. Соединения

В данном эксперименте используют соединение по примеру 1, а препарат, используемый в качестве положительного контроля, такой же, как описано выше. Каждое соединение добавляют к 0,5% натриевому производному карбоксиметилцеллюлозы (КМЦ), и смесь интенсивно перемешивают, получая суспензию 10 мг/мл для внутрижелудочного введения.

Реперное вещество GS-461203 является метаболитом тестируемых соединений, оно имеет химическое название (2'R)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метилуридинтрифосфат и его приобретают у компании TriLink BioTechnologies Corporation, США.

1.2 Животные

Самцы крыс SD, возраст 6-8 недель, вес 237,0-268,4 г, поставляются компанией Shanghai Super-B&K laboratory animal Co. Limited.

1.3. Реагенты

Метанол (хроматографический чистый), приобретенный у компании Spectrum Corporation, США;

ацетонитрил (хроматографическая чистый), приобретенный у компании Spectrum Corporation, США.

1.4. Приборы

Масс-спектрометр API 5500 LC-MS, приобретенный у компании AB Corporation, США.

2. Экспериментальная методика:

1) введение: делят крыс SD на 4 группы, по 18 крыс в каждой группе, внутрижелудочно вводят соединения в количестве 50 мг/кг; крыс лишают пищи на 10-15 часов до внутрижелудочного введения, и продолжают кормление через четыре часа после введения;

2) подготовка образцов: через 0,5 часа, 1 час, 2 часа, 4 часа, 6 часов и 12 часов после введения крыс умерщвляют (n=3 в каждой временной точке для каждой группы), отбирают образец приблизительно 1 г печени от каждой крысы, соответственно, добавляют 3 объема предварительно охлажденного метанола, гомогенизуют в течение 30 секунд, и хранят подготовленный гомогенат печени при температуре минус 80°C до проведения анализа;

3) построение стандартной кривой: берут соответствующее количество маточного раствора GS-461203, последовательно разбавляют метанолом и получают стандартные растворы с концентрацией 30, 27, 10, 5, 2, 1, 0,5, 0,2 и 0,1 мкг/мл, параллельно добавляют 10 мкл каждого стандартного раствора к 90 мкл холостой пробы гомогената печени крыс, и получают образцы для стандартных кривых с концентрациями 3000, 2700, 1000, 500, 200, 100, 50, 20 и 10 нг/мл;

4) обработка образцов: добавляют 30 мкл образца гомогената печени или образца для стандартной кривой к 150 мкл раствора ацетонитрила, содержащего внутренний стандарт (100 нг/мл), интенсивно перемешивают в течение 2 минут, центрифугируют в течение 10 минут (6000 об./мин), и переносят супернатант во флаконы для инъекций;

5) анализ данных, полученных для образцов: берут 5 мкл супернатанта, инжектируют, а затем используют UPLC-MS/MS для обнаружения концентрации GS-461203 в образцах; в соответствии с полученными данными концентрация лекарственного средства - время для гомогенатов печени используют некомпартментальную модель программного обеспечения WinNonlin 6.2.1 для расчета фармакокинетики, и проводят расчет фармакокинетических параметров метаболита GS-461203 для каждого из тестируемых соединений. Результаты приведены в таблице 4.

Таблица 4 GS-461203 C_max
(нг/г печени) T_max
(час) AUC_last
(нг/г*час) Положительный контроль 753 2,00 5627 Пример 1 818 1,00 7106

Из данных, приведенных в таблице 4, видно, что соединение из примера 1 по настоящему изобретению обладает лучшими свойствами, чем положительный контроль, по таким параметрам, как максимальная концентрация в ткани печени и площадь под кривой концентрация препарата в плазме-время для метаболита, и имеет больший уровень воздействия в условиях in vivo.

Приведенные выше результаты показывают, что соединения по настоящему изобретению обладают способностью эффективно ингибировать вирус HCV и, в сравнении с положительным контролем, оказывают равное или превосходящее действие по величине ЕС₅₀, обладают меньшей токсичностью в клетках-хозяевах, имеют большее значение CC₅₀ и в достаточной степени безопасны. Соединения по настоящему изобретению имеют хорошие перспективы для лечения HCV инфекции.

Хотя настоящее изобретение было подробно описано выше, специалистам в данной области техники должно быть понятно, что могут быть внесены различные модификации и изменения, которые не отступают от сущности и не выходят за рамки объема настоящего изобретения. Объем настоящего изобретения не ограничивается приведенным выше подробным описанием и определяется формулой изобретения.

Изобретение относится к противовирусным производным общей формулы I

,

где R₁ выбран из C_1-6алкила; R₂ выбран из атома галогена; R₃ выбран из ОН, Н и C_1-4алкокси; R₄ выбран из Н, C_1-6алкила и галогенсодержащего C_1-6алкила; R₅ выбран из C_1-6алкила и галогенсодержащего C_1-6алкила; R₆ представляет собой фенил-Y-, где Y отсутствует или выбран из C_1-6алкила, C_2-6алкенила, C_2-6алкинила, C_2-6алкенил-(CO)-, C_2-6алкинил-(СО)-, О, S, амино- и -N(C_1-6алкил), фенил необязательно замещен группами, выбранными из C_1-6алкила, атома галогена, нитро, C_1-6алкокси, циано, С_2-6алкенила, С_2-6алкинила, C_1-6ациламино, галогенсодержащего С_1-6алкила, галогенсодержащего C_1-6алкокси, амино, N(C_1-6алкил)₂ и С_1-6алкил NHCO, или указанный фенил объединен с пяти- или шестичленным циклом с образованием бензо-пятичленного цикла или бензо-шестичленного цикла; гетероциклил-Y-, где Y отсутствует или выбран из C_1-6алкила, C_2-6алкенила, C_2-6алкинила, C_2-6алкенил-(CO)-, C_2-6алкинил-(СО)-, О, S, амино- и -N(C_1-6алкил), или гетероциклил вместе с присоединенной к нему группой Y образуют бициклический гетероцикл, при этом указанный гетероциклил необязательно замещен группами, выбранными из C_1-6алкила, атома галогена, нитро, C_1-6алкокси, циано, С_2-6алкенила, С_2-6алкинила, С_1-6ациламино, галогенсодержащего C_1-6алкила, галогенсодержащего C_1-6алкокси, амино, N(C_1-6алкил)₂ и С_1-6алкил NHCO; С_1-6алкил-OC(O)-C_2-6 алкенил- и C_1-6алкил-O-C(O)-C_2-6алкенил-С(О)-, где C_1-6алкил необязательно замещен группами, выбранными из C_1-6алкила, атома галогена, нитро, C_1-6алкокси, циано, С_2-6алкенила, С_2-6алкинила, С_1-6ациламино, галогенсодержащего C_1-6алкила, галогенсодержащего C_1-6алкокси, амино, N(C_1-6алкил)₂ и С_1-6алкил NHCO; и R₇ выбран из Н, атома галогена, C_1-6алкила, галогенсодержащего C_1-6алкила, C_1-6алкокси, галогенсодержащего C_1-6алкокси, NO₂, CN, С_1-6алкил-NH-CO-, гидрокси, моно-C_1-6алкиламино, ди-C_1-6алкиламино, С_1-6алкил-S-, C_2-6-алкенил-S, С_2-6алкинил-S, С_1-6алкил-SO-, С_2-6алкенил-SO-, С_2-6алкинил-SO-, С_1-6алкил-SO₂-, C_2-6алкенил-SO₂-, C_2-6алкинил-SO₂-, С_1-6алкил-OSO₂-, С_2-6алкенил-OSO₂-, C_2-6алкинил-OSO₂-. Предложено новое соединение, композиции на его основе для лечения вирусной инфекции семейства Flaviviridae, в частности инфекции вирусного гепатита С. 4 н. и 12 з.п. ф-лы, 43 пр., 4 табл.

1. Фосфорамидатное производное нуклеозида следующей общей формулы I:

,

где

(1) R₁ выбран из C_1-6 алкила;

(2) R₂ выбран из атома галогена;

(3) R₃ выбран из ОН, Н и C_1-4 алкокси;

(4) R₄ выбран из Н, С_1-6 алкила и галогенсодержащего C_1-6 алкила;

(5) R₅ выбран из C_1-6 алкила и галогенсодержащего C_1-6 алкила;

(6) R₆ выбран из следующих фрагментов:

a) фенил-Y-, где Y отсутствует или выбран из C_1-6 алкила, С_2-6 алкенила, С_2-6 алкинила, С_2-6 алкенил-(СО)-, С_2-6 алкинил-(СО)-, О, S, амино- и -N(C_1-6 алкил) и где фенил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из C_1-6 алкила, атома галогена, нитро, C_1-6 алкокси, циано, С_2-6 алкенила, С_2-6 алкинила, C_1-6 ациламино, галогеносодержащего C_1-6 алкила, галогеносодержащего C_1-6 алкокси, амино, N(C_1-6 алкил)₂ и C_1-6 алкил NHCO, или же указанный фенил и пяти- или шестичленный цикл объединены и образуют бензо-пятичленный цикл или бензо-шестичленный цикл;

b) гетероциклил-Y-, где Y отсутствует или выбран из C_1-6 алкила, С_2-6 алкенила, С_2-6 алкинила, С_2-6 алкенил-(СО)-, С_2-6 алкинил-(СО)-, О, S, амино- и -N(C_1-6 алкил), или гетероциклил вместе с присоединенной к нему группой Y образуют бициклический гетероцикл, при этом указанный гетероциклил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из C_1-6 алкила, атома галогена, нитро, C_1-6 алкокси, циано, С_2-6 алкенила, С_2-6 алкинила, C_1-6 ациламино, галогенсодержащего C_1-6 алкила, галогеносодержащего C_1-6 алкокси, амино, N(C_1-6 алкил)₂ и C_1-6 алкил NHCO; и

с) C_1-6 алкил-ОС(О)-С_2-6 алкенил- и C_1-6 алкил-О-С(О)-С_2-6 алкенил-С(О)-, где C_1-6 алкил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из C_1-6 алкила, атома галогена, нитро, C_1-6 алкокси, циано, С_2-6 алкенила, С_2-6 алкинила, C_1-6 ациламино, галогенсодержащего C_1-6 алкила, галогенсодержащего C_1-6 алкокси, амино, N(C_1-6 алкил)₂ и C_1-6 алкил NHCO; и

(7) R₇ выбран из Н, атома галогена, C_1-6 алкила, галогеносодержащего C_1-6 алкила, C_1-6 алкокси, галогенсодержащего C_1-6 алкокси, NO₂, CN, C_1-6 алкил-NH-CO-, гидрокси, моно-C_1-6 алкиламино, ди-C_1-6 алкиламино, C_1-6 алкил-S-, С_2-6-алкенил-S, С_2-6 алкинил-S, C_1-6 алкил-SO-, С_2-6 алкенил-SO-, С_2-6 алкинил-SO-, C_1-6 алкил-SO₂-, С_2-6 алкенил-SO₂-, С_2-6 алкинил-SO₂-, C_1-6 алкил-OSO₂-, С_2-6 алкенил-OSO₂- и С_2-6 алкинил-OSO₂-.

2. Соединение по п. 1, где R₁ выбран из C_1-3 алкила, R₂ обозначает F, R₃ выбран из ОН, Н и метокси, R₄ выбран из Н и C_1-6 алкила, a R₅ выбран из С_1-6 алкила.

3. Соединение по п. 1 или 2, где R₆ выбран из:

a) фенил-Y-, где Y отсутствует или выбран из С_1-4 алкила, С_2-4 алкенила, С_2-4 алкинила, С_2-4 алкенил-(СО)-, С_2-4 алкинил-(СО)-, О, S, амино и -N(C_1-4-алкил) и где фенил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из С_1-4 алкила, атома галогена, нитро, C_1-4 алкокси, циано, С_2-4 алкенила, С_2-4 алкинила, C_1-4 ациламино, галогенсодержащего C_1-4 алкила, галогенсодержащего С_1-4 алкокси, амино, N(C_1-4 алкил)₂ и C_1-4 алкил NHCO, или же указанный фенил и пяти- или шестичленный цикл объединены и образуют бензо-пятичленный цикл или бензо-шестичленный цикл;

b) гетероциклил-Y-, где Y отсутствует или выбран из C_1-4 алкила, С_2-4 алкенила, С_2-4 алкинила, С_2-4 алкенил-(СО)-, С_2-4 алкинил-(СО)-, О, S, амино и -N(C_1-4 алкил), или гетероциклил вместе с присоединенным к нему Y образует бициклический гетероцикл, и где указанный гетероциклил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из С_1-4 алкила, атома галогена, нитро, C_1-4 алкокси, циано, С_2-4 алкенила, С_2-4 алкинила, С_1-4 ациламино, галогенсодержащего C_1-4 алкила, галогенсодержащего C_1-4 алкокси, амино, N(C_1-4 алкил)₂ и C_1-4 алкил NHCO; и

с) C_1-4 алкил-ОС(О)-С_2-4 алкенил- и C_1-4 алкил-ОС(О)-С_2-4 алкенил-С(О)-, где С_1-4 алкил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из С_1-4 алкила, атома галогена, нитро, С_1-4 алкокси, циано, С_2-4 алкенила, С_2-4 алкинила, С_1-4 ациламино, галогенсодержащего C_1-4 алкила, галогенсодержащего C_1-4 алкокси, амино, N(C_1-4 алкил)₂ и C_1-4 алкил NHCO.

4. Соединение по п. 3, где R₆ выбран из:

a) фенила, фенил-С_1-3 алкил-, фенил-С_2-3 алкенил-, фенил-С_2-3 алкинил-, фенил-О-, фенил-S-, фенил-NH-, фенил-N(С_1-3 алкил)-, фенил-этенил-(СО)- и нафтил-этенил-(СО)-, где фенил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из C_1-4 алкила, атома галогена, нитро, C_1-4 алкокси, циано, С_2-4 алкенила, С_2-4 алкинила, C_1-4 ациламино, галогенсодержащего С_1-4 алкила, галогенсодержащего C_1-4 алкокси, амино, N(С_1-4 алкил)₂ и C_1-4 алкил NHCO или же указанный фенил и группа, выбранная из фенила, оксазолила, пиразинила и пирролила, объединены и образуют нафтил, бензоксазолил, бензо[b]пиразинил или бензо[b]пирролил;

b) 1Н-имидазолил-Y-, 1,2,4-триазолил-Y-, 1,2,3-триазолил-Y-, тиазолил-Y-, 1,2,3-тиадиазолил-Y-, 1,2,4-тиадиазолил-Y-, 1,3,4-тиадиазолил-Y-, оксазолил-Y-, 1,2,4-оксадиазолил-Y-, 1,2,3-оксадиазолил-Y-, 1,3,4-оксадиазолил-Y-, пиримидинил-Y-, пиразинил-Y-, пиридазинил-Y-, хиноксалинил-Y-, 4Н-хромен-4-он-Y-, пиридил-Y-, тиенил-Y-, тиено[3,2-b]тиенил-Y-, где Y отсутствует или выбран из метила, этила, этенила, этинила, этенил-(СО)-, этинил-(СО)-, О, S, амино и -NCH₂- и где каждая из гетероциклических групп необязательно замещена одной или несколькими группами, выбранными из C_1-4 алкила, атома галогена, нитро, С_1-4 алкокси, циано, С_2-4 алкенила, С_2-4 алкинила, C_1-4 ациламино, галогенсодержащего С_1-4 алкила, галогенсодержащего C_1-4 алкокси, амино, N(C_1-4 алкил)₂ и C_1-4 алкил NHCO; и

c) метил-ОС(О)--, этил-ОС(О)--, пропил-ОС(О)--, изопропил-ОС(О)--, бутил-ОС(О)--, изобутил-ОС(О)-- и трет-бутил-ОС(О)--.

5. Соединение по п. 4, где R₆ выбран из:

a) фенила, фенил-(СН₂)-, фенил--, фенил--С(О)- и фенил--, где фенил необязательно замещен одной или несколькими группами, выбранными из C_1-4 алкила, атома галогена, нитро, C_1-4 алкокси, циано, С_2-4 алкенила, С_2-4 алкинила, С_1-4 ациламино, галогенсодержащего C_1-4 алкила, галогенсодержащего С_1-4 алкокси, амино, N(C_1-4 алкил)₂ и C_1-4 алкил NHCO, или же указанный фенил и группа, выбранная из оксазолила, пиразинила и пирролила, объединены и образуют бензоксазолил, бензо[b]пиразинил или бензо[b]пирролил;

b) 1Н-имидазолила, 1,2,4-триазолила, 1,2,3-триазолила, тиазолила, 1,2,3-тиадиазолила, 1,2,4-тиадиазолила, 1,3,4-тиадиазолила, оксазолила, 1,2,4-оксадиазолила, 1,2,3-оксадиазолила, 1,3,4-оксадиазолила, пиримидинила, пиразинила, пиридазинила, хиноксалинила, 4Н-хромен-4-она, пиридила, тиено[3,2-b]тиенила, 1Н-имидазолил-(СН₂)-, 1,2,4-триазолил-(СН₂)-, 1,2,3-триазолил-(СН₂)-, тиазолил-(СН₂)-, 1,2,3-тиадиазолил-(СН₂)-, 1, 2, 4-тиадиазолил-(СН₂)-, 1,3,4-тиадиазолил-(СН₂)-, оксазолил-(СН₂)-, 1,2,4-оксадиазолил-(СН₂)-, 1,2,3-оксадиазолил-(СН₂)-, 1,3,4-оксадиазолил-(СН₂)-, пиримидинил-(СН₂)-, пиразинил-(СН₂)-, пиридазинил-(СН₂)-, хиноксалинил-(СН₂)-, 4Н-хромен-4-он-(СН₂)-, пиридил-(СН₂)-, тиено[3,2-b]тиенил-(СН₂)-, 1Н-имидазолил--, 1,2,4-триазолил--, 1,2,3-триазолил--, тиазолил--, 1,2,3-тиадиазолил--, 1,2,4-тиадиазолил--, 1,3,4-тиадиазолил--, оксазолил--, 1,2,4-оксадиазолил--, 1,2,3-оксадиазолил--, 1,3,4-оксадиазолил--, пиримидинил--, пиразинил--, пиридазинил--, хиноксалинил--, 4Н-хромен-4-он--, пиридил--, тиено[3,2-b]тиенил--, 1Н-имидазолил--, 1,2,4-триазолил--, 1,2,3-триазолил--, тиазолил--, 1,2,3-тиадиазолил--, 1,2,4-тиадиазолил--, 1,3,4-тиадиазолил--, оксазолил--, 1,2,4-оксадиазолил--, 1,2,3-оксадиазолил--, 1,3,4-оксадиазолил--, пиримидинил--, пиразинил--, пиридазинил--, хиноксалинил--, 4Н-хромен-4-он--, пиридил-- и тиено[3,2-b]тиенил--, где каждая из гетероциклических групп необязательно замещена одной или несколькими группами, выбранными из C_1-4 алкила, атома галогена, нитро, C_1-4 алкокси, циано, С_2-4 алкенила, С_2-4 алкинила, C_1-4 ациламино, галогенсодержащего C_1-4 алкила, галогенсодержащего C_1-4 алкокси, амино, N(C_1-4 алкил)₂ и C_1-4 алкил NHCO; и

с) метил-ОС(О)--.

6. Соединение по п. 1 или 2, где группа R₆ "фенил-Y-" или "гетероциклил-Y-" и кислородная группа, обе из которых присоединены к бензольному циклу, находятся в пара- или метаположении друг к другу.

7. Соединение по п. 1, где R₁ обозначает СН₃, R₂ обозначает F, R₃ обозначает ОН, R₄ обозначает СН₃, a R₅ обозначает изопропил.

8. Соединение по п. 7, где R₆ обозначает фенил или бензил.

9. Соединение по п. 1, где указанное соединение выбрано из

, ,

, ,

, ,

, ,

, ,

, ,

,

,

, ,

,

, ,

, ,

, ,

,

, ,

, ,

,

10. Фармацевтическая композиция для лечения вирусной инфекции семейства Flaviviridae, содержащая терапевтически эффективное количество соединения по любому из пп. 1-9 и фармацевтически приемлемый носитель.

11. Соединение по п. 1 или 2 или композиция по п. 10, предназначенные для лечения вирусной инфекции семейства Flaviviridae.

12. Соединение по п. 11, где вирусная инфекция семейства Flaviviridae представляет собой инфекцию вирусного гепатита С.

13. Применение соединения по любому из пп. 1-9 или композиции по п. 10 для изготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения вирусной инфекции семейства Flaviviridae.

14. Применение по п. 13, где вирусная инфекция семейства Flaviviridae представляет собой инфекцию вирусного гепатита С.

15. Способ лечения и/или предотвращения вирусной инфекции семейства Flaviviridae, включающий введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп. 1-9 или композиции по п. 10.

16. Способ по п. 15, где вирусная инфекция семейства Flaviviridae представляет собой инфекцию вирусного гепатита С.