КОМПОЗИЦИЯ, СОДЕРЖАЩАЯ ПРОТИВОМИКРОБНЫЕ ИОНЫ МЕТАЛЛА И ЧЕТВЕРТИЧНОЕ КАТИОННОЕ ПОВЕРХНОСТНО-АКТИВНОЕ ВЕЩЕСТВО Российский патент 2018 года по МПК A61K9/70 A61K33/00 A61K31/14 A61P31/04 

Настоящее изобретение относится к противомикробной композиции, которая может быть нанесена на кожу, раны, порезы, ссадины или ожоги для предупреждения или лечения инфекций или на перевязочные материалы для ран и т.п. для наложения на кожу, раны, порезы, ссадины или ожоги. Более конкретно, настоящее изобретение относится к композиции, способной обеспечивать эффективную противомикробную активность без одновременного раздражения раны и кожи и без замедления заживления раны.

Чрезмерное применение антибиотиков и связанное с этим усиление устойчивости бактерий неблагоприятно влияет на эффективность антибиотиков при лечении раневых инфекций. Поэтому желательны эффективные альтернативы антибиотикам.

Местные противомикробные материалы и препараты, содержащие их, давно признаны в качестве средств, играющих важную роль в минимизации возможностей для кожных и раневых инфекций. Противомикробные средства, не относящиеся к антибиотикам, представляют собой селективные химические средства, которые можно безопасно применять на живых тканях. Молекулярный йод, ионное серебро и такие окислители, как гипохлорит натрия и диоксид хлора, являются признанными противомикробными средствами, эффективными против широкого спектра микроорганизмов. Однако имеется несколько препятствий для изготовления эффективной противомикробной композиции, предназначенной для нанесения на раны и основанной на таких средствах. Одна из проблем состоит в том, что эти противомикробные средства могут реагировать с имеющимися в ране органическими материалами, отличными от микробных мишеней, на которые они должны действовать. Это означает, что для обеспечения эффективности противомикробных средств необходимы высокие уровни их включения в терапевтические композиции, что может при длительном применении вызывать нежелательные побочные эффекты, такие как цитотоксичность, реакции гиперчувствительности, появление пятен на коже и системные эффекты. Такие побочные эффекты более подробно описаны в публикациях: «In vitro cytotoxity of silver: implication for clinical wound care» by Poon VK, Burd A, Burns, 2004 Mar, 30 (2): 140-7; «A review of iodine toxicity reports» by Pennington JA, J Am Diet Assoc, 1990 Nov, 90 (11): 1571-81; и «Topical antimicrobial toxicity» by Lineaweaver W, Howard R, Soucy D, McMorris S, Freeman J, Crain C, Robertson J, Rumley T, Arch Surg, 1985 Mar, 120 (3): 267-70.

Поэтому имеется потребность в способах изготовления терапевтических композиций, эффективных без простого повышения уровня противомикробного вещества, включенного в композицию. Было также признано, что раневые бактерии часто существуют в биопленках и что воздействовать на них значительно труднее, чем на их планктонные аналоги.

Авторы настоящей заявки обнаружили, что эффективность противомикробных ионов металла можно повысить посредством включения в рецептуру четвертичного катионного поверхностно-активного вещества.

Соответственно, первый аспект настоящего изобретения предоставляет противомикробную композицию, подходящую для применения на коже и ранах и содержащую источник противомикробного иона металла и четвертичное катионное поверхностно-активное вещество.

Присутствие четвертичного катионного поверхностно-активного вещества усиливает эффект противомикробного иона металла, так что эффективность противомикробного иона металла улучшается. Например, присутствие четвертичного катионного поверхностно-активного вещества может увеличить скорость, при которой работает противомикробный ион металла.

Под термином «противомикробный» понимают вещество, которое ингибирует рост или убивает микроорганизмы из таксономического царства бактерий, грибов и простейших. Поэтому эффективной противомикробной композицией является такая композиция, которую применяют для уменьшения и предупреждения распространения и пролиферации микроорганизмов при специфическом применении. При уходе за ранами это можно интерпретировать как контроль за перекрестным инфицированием, предупреждение или устранение инфекций и уменьшение устойчивой биологической нагрузки, которая может замедлять заживление и являться причиной хронического характера заболевания.

Авторы настоящего изобретения также обнаружили, что можно изготавливать композицию, которая включает четвертичное катионное поверхностно-активное вещество, которое является эффективным в условиях значений рН, обычно наблюдаемых в ранах.

Соответственно, второй аспект настоящего изобретения предоставляет композицию, подходящую для применения на ранах и содержащую четвертичное катионное поверхностно-активное вещество при pH 4-8.

Композиции согласно первому аспекту настоящего изобретения содержат противомикробное средство (предпочтительно, ион металла - например, серебра, железа, никеля, меди, хрома, марганца, золота, галлия, магния, ртути, свинца, алюминия, цинка, висмута, олова и палладия). Предпочтительным ионом металла является ион серебра. Противомикробное средство, предпочтительно, включают в композицию в количестве от 0,01% до 10% по массе (более предпочтительно, от 0,1% до 5% и, еще более предпочтительно, от 0,5% до 1,5% по массе или от 1% до 5%). Если композиция находится в водном растворе, то противомикробный ион металла, предпочтительно, находится в водном растворе, содержащем от 0,00001% до 1,0% по массе или, более предпочтительно, от 0,0001% до 0,1%, еще более предпочтительно, от 0,0001% до 0,02% по массе или 0,001% до 1,0% по массе.

Композиции согласно настоящему изобретению содержат катионное поверхностно-активное вещество. Указанное катионное поверхностно-активное вещество может представлять собой соль четвертичного аммония, соль алкилпиридиния, соль алкилимидазолия, соль алкилморфолиния, соль бензетония или соль этоксилированного четвертичного аммония или их смеси. Предпочтительно, там где указанная соль представляет собой соль четвертичного аммония, она является выбранной из группы солей моноалкилтриметиламмония, солей диалкилдиметиламмония и солей моноалкилмонобензидиметиламмония. Предпочтительно, катионное поверхностно-активное вещество представляет собой четвертичное катионное поверхностно-активное вещество и, более предпочтительно, поверхностно-активное вещество, представляющее собой соединение четвертичного аммония. Предпочтительно, катионное поверхностно-активное вещество является выбранным из группы катионов бензетония, бензалкония, диметилдиалкилония, алкилпиридиния и алкилтриметиламмония с любым противоионом (например, с бромидом, хлоридом, ацетатом или метилсульфатом). Предпочтительно, четвертичное катионное поверхностно-активное вещество присутствует в количестве, превышающем или равном 0,025% по массе (более предпочтительно, от 0,05% до 4% по массе и, более предпочтительно, от 0,5% до 2% по массе).

Значение pH композиции, предпочтительно, составляет от 4 до 8 (более предпочтительно, от 4 до 6 и, наиболее предпочтительно, от 4,5 до 5,5). Желательное значение рН может быть достигнуто посредством включения в композицию буферных средств. Примерами буферных средств, которые можно включать, являются лимонная кислота с двузамещенным фосфатом натрия, лимонная кислота с цитратом натрия, уксусная кислота с ацетатом натрия. Указанное буферное средство может присутствовать в количестве, составляющем приблизительно от 0,5% до 2% от массы композиции, обеспечивая ее изотоничность.

Композиция, предпочтительно, содержит этилендиаминтетрауксусную кислоту (EDTA). Предпочтительно, EDTA присутствует в виде своих ди-, три- или тетразамещенных солей. Авторы настоящей заявки обнаружили, что эти соли усиливают противомикробный эффект ионного металла в отношении разложения биопленки. Например, авторы настоящей заявки обнаружили, что EDTA в концентрациях 0,25-0,5% (масса к объему) была эффективной в отношении повышения чувствительности ряда микроорганизмов в состоянии биопленки к противомикробным средствам.

EDTA, предпочтительно, присутствует в композициях согласно настоящему изобретению в количестве от 0,1% до 4% от массы композиции (более предпочтительно, не более 2% по массе, еще более предпочтительно, от 0,2 до 1% по массе).

Композиции согласно настоящему изобретению могут быть в форме раствора, который можно применять в виде аэрозоля, наносимого на перевязочные материалы, или в виде раствора, в который можно погружать перевязочные материалы, или в форме тонких растворимых пленок, которые можно наслаивать на перевязочные материалы, накладываемые на раны, или применять вместе с отдельными компонентами перевязочных средств в форме комплекта. В качестве альтернативы, указанные композиции могут быть в виде полужидкого вещества, такого как гель, пена или крем, которые поддерживают рану во влажной заживляющей среде и способствуют ее естественному заживлению. Полужидкие препараты обладают тем преимуществом, что они способны протекать внутрь раны, образуя непосредственный контакт с ложем раны и обеспечивать противомикробные эффекты на всей поверхности раны. Предпочтительно, препарат имеет достаточно высокую вязкость, которая не позволяет ему вытекать из раны на другие ткани. Предпочтительно, pH препарата является забуференным приблизительно у 5,5, поскольку это значение не влияет на баланс рН околораневой ткани и поэтому защищает ее. Композиции согласно настоящему изобретению можно также представлять в виде распыляемого сухого порошка.

Нижеследующие примеры иллюстрируют настоящее изобретение.

Данные, существенные для этих примеров, представлены на прилагаемых чертежах, которые показывают:

Фигуры 1a, 1b, 1c и 1d показывают противомикробную эффективность некоторых концентраций серебра для определенных диапазонов концентраций ряда поверхностно-активных веществ и необязательных ингредиентов в виде шкалы серых тонов;

Фигура 2 показывает сравнение глубины проникновения (мм) противомикробного действия серебряных повязок, испытанных с обработкой и без обработки композиции согласно настоящему изобретению; и

Фигура 3 показывает сравнение активности растворов и полужидких гелей против биопленки (данные MBEC).

Пример 1

Повышение эффективности серебра четвертичным катионным поверхностно-активным веществом

Методика: Аналитическая система MBEC Assay System, использующая устройство Calgary Biofilm Device, предоставляет возможность выполнять анализ, необходимый для скрининга антибиотиков и биоцидов по их активности против бактериальных биопленок. В данной системе используют реактор, образующий 96 эквивалентных биопленок. Система MBEC Assay System подходит для определения значений MBEC (Minimum Biofilm Eradication Concentration - минимальной концентрации уничтожения биопленки) и других связанных с этим величин. Описание этой системы и методики даны в публикациях «The MBEC Assay System: Multiple Equivalent Biofilms for Antibiotic and Biocide Susceptibility Testing» by Howard Ceri, Merle Olson, Douglas Morck, Douglas Storey, Ronald Read, Andre Buret and Barbara Olson, 2001 Methods in Enzymology Vol 337, [25] p 377 и «The Calgary Biofilm Device: New Technology for Rapid Determination of Antibiotic Susceptibilities of Bacterial Biofilms» by Ceri, Olson, Stremick, Read, Morck and Buret, Journal of Clinical Microbiology, June 1999, Vol 37, No. 6, p 1771-1776.

Биопленки выращивали на выступах, находящихся на крышках 96-луночных планшетов (Nunc-TSP parts 445497 and 167008, Thermo Fisher Scientific Inc); затем их тщательно ополаскивали очищенной водой. В новый планшет, используя асептическую технику и растворы, стерилизованные фильтрованием, пипеткой вносили аликвоты водных растворов нитрата серебра, водных растворов различных четвертичных катионных поверхностно-активных веществ и очищенной воды, создавая матрицу 100-мкл испытуемых образцов с разными концентрациями серебра и поверхностно-активного вещества. После этого планшеты накрывали крышками, покрытыми биопленками, которые оставляли в контакте с испытуемыми растворами на 30 минут, 2 или 4 часа. После этого времени крышки снимали и все оставшиеся испытуемые агенты удаляли с их выступов, ополаскивая их стерильным нормальным раствором соли (0,85% по массе NaCl). Затем с выступов по стандартной методике обработки ультразвуком физически удаляли остаточные биопленки. Отделенные и все еще жизнеспособные бактерии затем выращивали в их планктонной форме в течение 24 часов в новом планшете, лунки которого содержали ростовую среду. После этого концентрацию живых бактерий, отделившихся от выступов, оценивали, измеряя помутнение на оптическом планшет-ридере. Хотя записывали и оптические плотности, представление в виде простой шкалы серых тонов было тоже вполне адекватным для интерпретации.

Диапазон испытуемых концентраций иона серебра составлял от 1,625 мкг/мл до 200 мкг/мл, с удвоением концентрации в каждом следующем образце. Испытуемыми катионными поверхностно-активными веществами были хлорид бензетония-бензалкония, хлорид диметилдиалкиламмония, бромид цетилтриметиламмония и хлорид цетилпиридиния в диапазоне концентраций от 31,25 мкг/мл до 200 мкг/мл, также с удвоением концентрации в каждом следующем образце.

Результаты: Результаты представлены диаграммами на Фигуре 1а и левой диаграммой на Фигурах 1b, 1c и 1d. Противомикробная эффективность представлена в виде градации серых тонов. Чем выше эта эффективность, тем светлее оттенок серого тона, так что отсутствие противомикробной эффективности представлено черным цветом, а высокая противомикробная эффективность представлена светло-серым тоном. Положительный синергизм представлен сдвигом к более светлому положению шкалы серых тонов от экспериментального контроля (без поверхностно-активного вещества), представленного на Фигуре 1а. На этих фигурах концентрация серебра показана на оси ординат, а концентрация поверхностно-активного вещества - на оси абсцисс.

Эти результаты показывают диапазоны концентраций, где наблюдали синергизм. Все проанализированные катионные поверхностно-активные вещества продемонстрировали синергизм с ионным серебром выше специфической критической концентрации для каждого поверхностно-активного вещества. Ниже этой критической концентрации наблюдали ингибирование противомикробного эффекта ионов серебра.

Пример 2

Повышение эффективности серебра четвертичным катионным поверхностно-активным веществом и EDTA

Методика: Как в Примере 1, но каждый испытуемый раствор содержал еще и 0,25% по массе динатриевой соли этилендиаминтетрауксусной кислоты.

Результаты: Результаты представлены правой диаграммой на Фигурах 1b, 1c и 1d. Диаграммы на левой стороне соответствуют экспериментам без EDTA.

Эти результаты показывают, что EDTA дополнительно повышает синергическую противомикробную активность катионного поверхностно-активного вещества и иона металла.

Пример 3

Повышение противомикробной эффективности содержащих серебро образцов перевязочного материала для ран

Оценивали глубину противомикробного эффекта в отношении агарового геля, содержащего Staphylococcus aureus, для разных типов обработанных и необработанных содержащих серебро образцов перевязочного материала для ран.

Материалы:

Испытуемые перевязочные материалы:

- AQUACEL Ag (5×5 см), партия 9L019035, абсорбент, гелеобразующий, волокнисто-войлочный перевязочный материал, содержащий 1,2% по массе ионного серебра.

- Allevyn Ag Non-adhesive, партия 0935, абсорбентный пенообразный перевязочный материал, содержащий сульфадиазин серебра.

- Silvercel Hydro-alginate, партия, 37923, перевязочный материал, состоящий из смешанного альгината и покрытой серебром нейлоновой волокнистой прокладки, завернутой в перфорированную этилметилакрилатную пленку.

- Sorbsan Silver-Plus, партия 012035, абсорбентная нетканая альгинатная прокладка, пропитанная серебром, соединенная с вторичным абсорбентным вискозным слоем.

- Все вышеуказанные материалы, обработанные динатриевой солью EDTA и хлоридом бензетония.

Микробиологические среды:

- Растворитель для максимального выделения микробов (Maximal Recovery Diluent, MRD)

- Предварительно высушенный триптон-соевый агар (Tryptone Soy Agar, TSA) в виде пластин

- 0,85%-ный раствор хлорида натрия

- Расплавленный триптон-соевый агар (TSA)

- Технический денатурированный спирт (Industrial Denatured Alcohol, IDA)

Стерильная деионизированная вода (Sterile Deionised Water, SDW)

Микробная провокационная проба: Staphylococcus aureus NCIMB 9518

Методики: Два круговых образца диаметром 3,75 см асептически вырезали из перевязочного материала каждого вида. Один из этих образцов помещали в стерильную чашку Петри для последующего тестирования. Оставшийся образец обрабатывали раствором согласно настоящему изобретению, применяя следующую процедуру: - отвешивали по 0,25 г динатриевой соли EDTA и хлорида бензетония в отдельные стерильные флаконы и растворяли в 100 мл смеси IDA с SDW (50:50 по объему) и 100% IDA, соответственно. К перевязочному материалу добавляли 50 мкг/см² EDTA и 50 мкг/см² хлорида бензетония, осторожно пипеткой нанося каждый раствор на всю поверхность каждого образца перевязочного материала. После этого образцы помещали обратно в оригинальную упаковку и сушили в вакуумном сушильном шкафу при 90°С и 0,9 атм вакуума в течение приблизительно 2 часов. Используя колориметр, готовили суспензию Staphylococcus aureus, содержавшую приблизительно 1×10⁸ КОЕ/мл в MRD (0,16-0,18 OD540) и последовательно разбавляли, получая приблизительно 1×10⁴ КОЕ/мл. В два 100-мл объема расплавленного TSA (приблизительно 45°C) вносили по 1 мл суспензии, содержавшей 1×10⁴ КОЕ/мл Staphylococcus aureus, и перемешивали. Затем отмеряли 20-мл аликвоты этого расплавленного агара, засеянного бактериями, и разливали в десять 60-мл чашек (с внутренним диаметром 3,75 см). После охлаждения и усадки эти чашки инкубировали при 35°C±3°C в течение 4 часов ±15 минут для инициирования роста. Спустя 4 часа каждый из испытуемых перевязочных материалов смачивали 2,5 мл 0,85%-ного раствора хлорида натрия в стерильных чашках Петри и помещали в 60-мл чашку на поверхность засеянного агара. В одну чашку перевязочный материл не помещали, она служила положительным контролем. Затем чашки инкубировали в течение следующих 24 часов, после чего перевязочные материалы удаляли и выбрасывали. После этого чашки инкубировали повторно в течение не менее 72 часов, предоставляя возможность для роста уже сформированных колоний. После окончания периода инкубации чашки оценивали и фотографировали с калибровочной линейкой.

Результаты: Там, где перевязочный материал оказывал антибактериальный эффект, засеянный агар под образцом такого перевязочного материала выглядел прозрачным. Там, где ингибирование роста бактерий не происходило, агар выглядел мутным. Глубину прозрачной зоны агара от поверхности, контактировавшей с перевязочным материалом, интерпретировали как показатель противомикробной эффективности. Результаты представлены на Фигуре 2. Положительный контроль был мутным вплоть до поверхности агара, т.е. прозрачных зон не было совсем. Эти результаты указывают, что все испытанные содержащие серебро перевязочные материалы обладали некоторой противомикробной эффективностью, но она была разной у перевязочных материалов разных типов. Добавление в этот пример препарата согласно настоящему изобретению увеличивало глубину прозрачной зоны не менее чем в два раза для перевязочных материалов всех типов, но количественное соотношение между ними оставалось тем же. Это свидетельствует о том, что эффективность зависит от типа перевязочного материала, но от него не зависит синергическое увеличение этой эффективности.

Aquacel Ag имел большую глубину проникновения, чем другие перевязочные материалы и в контроле, и в обработанных образцах. Кроме того, Aquacel Ag демонстрировал и наибольшее улучшение противомикробного проникновения, когда его обрабатывали раствором согласно настоящему изобретению, т.к. средняя глубина проникновения в три раза превышала контрольную.

Пример 4

Повышение противомикробной эффективности разными противомикробными металлами

Предыдущие Примеры, использовавшие методику MBEC (Minimum Biofilm Eradication Concentration - минимальной концентрации уничтожения биопленки), показали, что добавление специфических противомикробных средств к серебру повышает его противомикробную активность. Целью настоящего примера была оценка этих средств в отношении противомикробной активности других металлов с использованием методики MBEC.

Методика: 0,2%-ный по массе базовый водный раствор четвертичного катионного поверхностно-активного вещества, которым являлся хлорид дидецилдиметиламмония (DDAC), готовили из концентрированного коммерческого раствора (50%-ный (масса к объему) раствор, Merck KGaA, Darmstadt, Germany). Индивидуальные базовые растворы нитрата серебра, тригидрата нитрата меди (II), нитрата галлия (III), гексагидрата нитрата никеля (II), гептагидрата сульфата цинка, тетрагидрата хлорида марганца (II), гептагидрата сульфата железа (II) и гидрата сульфата железа (III) готовили из коммерчески доступных лабораторных твердых веществ. Каждый раствор доводили приблизительно до рН 5,5, добавляя небольшие количества разбавленного водного гидроксида натрия и/или разбавленной хлористоводородной кислоты. Растворы ионов металлов затем волюмометрически разбавляли очищенной водой до 0,1% по массе (в расчете на металл). Интенсивным встряхиванием поддерживали все осадки в гомогенно суспендированном состоянии. Затем проводили анализ по методике MBEC, как описано в Примере 1, для раствора одного поверхностно-активного вещества, каждого раствора индивидуального металлического иона, а затем для каждого раствора металла в комбинации с раствором поверхностно-активного вещества.

Результаты:

Металл pH MBEC для иона металла (м.д.) † Синергизм Без DDAC С 0,1% DDAC Серебро 5,27 12,5 0,097 +ve Медь * 5,47 15,6 1,95 +ve Железо (II) * 5,30 >1000 ≤0,24 +ve Железо (III) * 5,40 >1000 ≤0,24 +ve Галлий * 5,51 >1000 ≤0,24 +ve Марганец 5,40 >1000 ≤0,24 +ve Никель 5,51 >1000 ≤0,24 +ve Цинк 5,40 >1000 ≤125 +ve DDAC - 0,2% -na- -na- † Самая низкая концентрация, при которой наблюдали активность; м.д. эквивалентны мкг/г (или мкг/мл в водных растворах). Эти значения являются приблизительными.
* Эти металлы образовывали осадки, когда их 0,1%-ные растворы доводили до рН 5,5; однако осадок растворялся при разбавлении в испытательном планшете.

Литературные данные для растворов металлов (без регулирования рН) свидетельствуют о следующем порядке величин противомикробной активности:

Серебро>Железо>Никель>Медь>Галлий>Магний>Висмут

Значения MBEC для одного DDAC были определены приблизительно на уровне 0,2%. Когда 0,1%-ный раствор DDAC применяли в комбинации с перечисленными растворами ионов металлов, все они значительно уменьшали MBEC для металла, тем самым демонстрируя синергический эффект, который не зависел от конкретного применяемого противомикробного металла.

Пример 5

Влияние pH

Многие катионные поверхностно-активные вещества, когда их применяют в высоких концентрациях, обладают противомикробной активностью; щелочной рН обычно ее повышает. Аналогичным образом, многие исследователи обнаружили, что повышенный рН усиливает и активность некоторых соединений серебра. Чтобы избежать болезненности и повреждения ткани, продукты, наносимые на поврежденную кожу, должны иметь нейтральный или слабо кислый рН. В настоящем примере исследуется влияние рН на синергический эффект четвертичного катионного поверхностно-активного вещества и противомикробного металла.

Методика: Были приготовлены следующие базовые растворы: хлорид бензетония (1,0% по массе), нитрат серебра (0,1% по массе в расчете на металл), ацетат натрия (0,5 M) и уксусная кислота (0,5 M).

В контрольном эксперименте смешивали растворы ацетата натрия и уксусной кислоты в разных соотношениях и разбавляли очищенной водой, получая буферные растворы в некотором диапазоне рН, причем растворы с разными значениями рН имели одинаковую общую ионную силу (0,1 М в расчете на ацетатный ион). В каждый из них добавляли раствор нитрата серебра в количестве, достаточном для получения 0,01%-ного по массе раствора в расчете на серебро. Затем каждый раствор испытывали по методике МВЕС, как описано в Примере 1, чтобы определить, находится ли этот раствор (при этом уровне рН и серебра) выше или ниже MBEC.

Используя вторую серию аналогично приготовленных растворов (0,1 М ацетатный буфер, 0,01% серебра), проводили второй эксперимент МВЕС, в котором варьировали концентрацию раствора поверхностно-активного вещества.

Результаты: Ни один из 0,01%-ных растворов серебра с рН, забуференным в диапазоне от 4,7 до 7,7, не был эффективным против биопленок в модели МВЕС. Для уничтожения биопленок в модели МВЕС при рН 6,9, 6,2 и 5,5 требовались концентрации поверхностно-активного вещества, составлявшие более 0,25%, менее 0,10% и 0,025%, соответственно.

Это свидетельствует о том, что синергический противомикробный эффект согласно настоящему изобретению усиливается при уменьшении рН (который становится более кислым), что противоречит современным представлениям.

Пример 6

Повышение противомикробной эффективности полужидкой (гелеобразной) композиции, содержащей серебро, EDTA и четвертичное поверхностно-активное вещество

Предыдущие Примеры (1, 2, 4 и 5) иллюстрируют применимость простых растворов. Целью настоящего примера является демонстрация того, что добавление инертных эксципиентов, модифицирующих физическую форму и свойства основного активного раствора, не влияет на наблюдаемую эффективность. В этом примере увеличивали вязкость препаратов, добавляя к ним гидроксиэтилцеллюлозу (HEC, Aqualon type: Natrosol 250HX Pharm) в качестве гелеобразующего средства, причем активность приготовленных гелей, анализируемая по вышеописанной методике МВЕС, была сравнимой с эквивалентным раствором.

Методика: Были приготовлены базовые растворы нитрата серебра, хлорида бензетония, динатриевой соли EDTA (pH ~4), тринатриевой соли EDTA (pH ~8) и HEC. Затем эти растворы комбинировали различным образом, получая матрицу образцов с одним, двумя и тремя компонентами (EDTA включали в любую из этих комбинаций только один раз) с НЕС или без нее. Конечные концентрации компонентов составляли 0%, 0,0001% или 0,02% для серебра (Ag); 0%, 0,1% или 1% для хлорида бензетония (BeCl); 0%, 0,2% или 1% для EDTA; 0% или 0,1% для HEC. Испытуемые образцы тестировали с микробными биопленками, применяя методику МВЕС, описанную выше в Примере 1. Результаты записывали либо как эффективные (отсутствие роста бактерий) или неэффективные (рост бактерий, детектируемый по помутнению). Все испытуемые образцы дублировали, и каждое определение по методике МВЕС выполняли три раза, поэтому для каждого образца получали шесть результатов изменений.

Результаты:

Сводка результатов, полученных с комбинациями, показана на Фигуре 3. Инертный эксципиент (НЕС), добавленный для модифицирования физических свойств испытуемого вещества, не изменял противобиопленочную активность испытуемой смеси. Синергические свойства продолжали наблюдаться для комбинаций при рН 4 и рН 8 у более низкой границы предпочтительных диапазонов концентраций. Никаких ингибирующих эффектов добавления инертного эксципиента не наблюдали и у верхней границы предпочтительных диапазонов концентраций.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и представляет собой противомикробную композицию, подходящую для применения на коже и ранах, содержащую источник ионов серебра, EDTA, присутствующую в виде двух-, трех- или четырехосновных солей EDTA в количестве от 0,2 % до 1% масс. от массы композиции, и четвертичное катионное поверхностно-активное вещество, присутствующее в количестве от 0,025% масс. до 4% масс., где ионы серебра включены в композицию в количестве от 0,01% до 10% масс. или, если композиция находится в водном растворе, ионы серебра составляют от 0,00001% до 1,0% масс., инертные эксципиенты - остальное. Изобретение обеспечивает увеличение противомикробной активности и минимизацию побочных эффектов. 3 н. и 12 з.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл., 6 пр.

1. Противомикробная композиция, подходящая для применения на коже и ранах, содержащая источник ионов серебра, EDTA, присутствующую в виде двух-, трех- или четырехосновных солей EDTA в количестве от 0,2 % до 1% масс. от массы композиции, и четвертичное катионное поверхностно-активное вещество, присутствующее в количестве от 0,025% масс. до 4% масс., где ионы серебра включены в композицию в количестве от 0,01% до 10% масс., или, если композиция находится в водном растворе, ионы серебра

составляют от 0,00001% до 1,0% масс., инертные эксципиенты - остальное.

2. Композиция по п. 1, имеющая pH от 4 до 8.

3. Композиция по п.1, где четвертичным катионным поверхностно-активным веществом является поверхностно-активное вещество, представляющее собой соединение четвертичного аммония.

4. Композиция по п.1, в которой указанное четвертичное катионное поверхностно-активное вещество выбрано из группы солей, где катион представляет собой бензетоний, бензалконий, диметилдиалкилоний, алкилпиридиний и алкилтриметиламмоний.

5. Композиция по п. 1, имеющая pH от 4 до 7.

6. Композиция по п. 1, имеющая pH от 4,5 до 5,5.

7. Композиция по п.1, где ионы серебра включены в композицию в количестве от 0,01% до 5% масс.

8. Композиция по п.1, где ионы серебра включены в композицию в количестве от 0,5% до 1,5% масс.

9. Композиция по п.1, где указанное четвертичное катионное поверхностно-активное вещество присутствует в количестве от 0,05 % до 4% масс.

10. Композиция по п.1, где указанное четвертичное катионное поверхностно-активное вещество присутствует в количестве от 0,5 % до 2% масс.

11. Композиция по п. 1, где указанная композиция находится в водном растворе, содержащем от 0,0001% до 0,1% масс. ионов серебра.

12. Композиция по п. 1, где указанная композиция находится в водном растворе, содержащем от 0,0001% до 0,02% масс. ионов серебра.

13. Композиция по п. 1, где указанная EDTA присутствует в композиции в количестве от 0,25% до 0,5% масс.

14. Способ изготовления противомикробного перевязочного материала для ран, включающий:

(i) получение абсорбентного перевязочного материала для ран,

(ii) обработку указанного перевязочного материала композицией по п.1.

15. Противомикробная композиция, подходящая для применения на коже и ранах, содержащая источник ионов серебра, EDTA, присутствующую в виде двух-, трех- или четырехосновных солей EDTA в количестве от 0,2 % до 1% масс. от массы композиции, и четвертичное катионное поверхностно-активное вещество, присутствующее в количестве от 0,05% до 1,5% масс., где ионы серебра включены в композицию в количестве от 0,01% до 10% масс., или, если композиция находится в водном растворе, ионы серебра составляют от 0,00001% до 1,0% масс., инертные эксципиенты – остальное.