СОЕДИНЕНИЯ И СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ ЛЕЙКЕМИИ Российский патент 2018 года по МПК A61K31/122 A61P35/02 

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Изобретение, описанное в настоящем документе, относится к соединениям и способам, и применению соединений и их фармацевтических композиций для лечения лейкемии. Изобретение, описанное в настоящем документе, также относится к соединениям и способам, и применению соединений и их фармацевтических композиций, для лечения острого лимфобластного лейкоза (ОЛЛ) в его различных формах.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ И СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Острый лимфобластный лейкоз (ОЛЛ) является наиболее часто встречающейся злокачественной опухолью у детей, включая Т-клеточный ОЛЛ, составляющий около 15% случаев заболевания. Т-клеточный ОЛЛ представляет собой лимфопролиферативное заболевание, характеризуемое неконтролируемым ростом трансформированных Т-клеток. Несмотря на успехи в лечении, рецидивы лейкоза, резистентное заболевание, полная невосприимчивость к терапии и лейкоз у детей представляют собой серьезные проблемы при ОЛЛ у детей и Т-ОЛЛ у детей, а также при заболевании у взрослых, и эти заболевания остаются в высокой степени неизлечимыми. При Т-клеточном ОЛЛ (T-ОЛЛ), в частности, рецидив заболевания и недостаточная восприимчивость к обычной терапии ассоциируют с плохим прогнозом. Таким образом, необходима разработка новых, более эффективных методов лечения при рецидиве ОЛЛ.

Ранее были предприняты попытки по обнаружению подходов, которые могут успешно разрушить или отменить критические молекулярные эффекторы при рецидиве лейкоза, не поддающемся лечению Т-клеточном лейкозе, и прогресс в молекулярном исследовании Т-ОЛЛ вселил надежды по разработке более селективных и эффективных целевых препаратов. Тем не менее, несмотря на такой прогресс, вмешательства, нацеленные на ключевые онкогенные драйверы, такие как Notch-сигнализация, или отдельные молекулярные эффекторы, показывают ограниченную эффективность. Остается проблема определения исходных молекулярных регуляторов, контролирующих активность множественных комплементарных нерекуррентных сигнальных путей в лейкозных клетках, интегрирующих онкогенные сигналы и сигналы микросреды.

Альтернативой использованию комплексных препаратов для нарушения различных молекулярных путей является нацеливание на центральную молекулу, функция которой заключается в регулировании нескольких сигнальных каскадов, таких как активность различных транскрипционных факторов (TF), вовлеченных сигналами “вверх по течению” (онкогенные события, цитокины). Соединения, композиции и способы, описанные в настоящем документе, нацелены на несколько сигнальных путей, которые обеспечивают или регулируют ключевые функции в устойчивости к лекарственным средствам и поддержания опухолевых клеток, в частности, на поздних стадиях заболевания и при рецидиве злокачественной опухоли.

Было обнаружено, что селективное ингибирование редокс потенциала Ref-1 используется при лечении лейкемии, включая ОЛЛ в его различных формах. Роль Ref-1 в устойчивости к лекарственным средствам при лейкозе и рецидиве ОЛЛ до сих пор неизвестна. Было обнаружено, что лейкозные клетки, в том числе лейкозные Т-ОЛЛ клетки человека, экспрессируют Ref-1. Кроме того, авторами настоящего изобретения было обнаружено, что

Не пытаясь привязываться к какой-либо теории, что, предположительно, ОЛЛ поддается лечению путем селективного ингибирования редокс функции Ref-1. В настоящем документе описаны соединения и способы ингибирования редокс потенциала Ref-1. Не пытаясь привязываться к какой-либо теории, также полагают, как описано в настоящем документе, что ОЛЛ поддается лечению путем нарушения сигнализации STAT3. В настоящем документе описаны методы прямого нарушения сигнализации STAT3 и косвенного нарушения сигнализации STAT3.

В одном иллюстративном варианте осуществления настоящего изобретения предложен способ лечения лейкемии у пациента, при необходимости этого, включающий стадию введения эффективного количества одного Ref-1 редокс ингибитора формулы

или его фармацевтически приемлемой соли, где R, R^A, X и Y имеют значения, определенные далее.

Кроме того, в настоящем документе описаны различные классы и подклассы каждого из R, R^A; Х и Y. Следует понимать, что все возможные сочетания различных классов и подклассов каждого из R, R^A, Х и Y, описанных в настоящем документе, представляют дополнительные иллюстративные варианты соединений по настоящему изобретению, описанных в настоящем документе. Следует также понимать, что каждый из этих дополнительных иллюстративных вариантов осуществления соединений могут быть использованы в любой композиции, методе и/или применении, которые описаны в настоящем документе.

В другом варианте осуществления, фармацевтические композиции, содержащие одно или несколько соединений, также описаны в данном документе. В одном аспекте, композиции включают терапевтически эффективное количество одного или нескольких соединений для лечения пациента с лейкемией, как описано в настоящем документе. Следует понимать, что композиции могут включать другие компоненты и/или ингредиенты, включая, но ими не ограничиваясь, другие терапевтически активные соединения, и/или один или несколько носителей, разбавителей, наполнителей и тому подобное. В другом варианте осуществления в настоящем документе также описаны способы применения соединений и фармацевтических композиций для лечения пациентов с лейкозом, описанных здесь. В одном аспекте способы включают стадию введения одного или нескольких соединений и/или композиций, описанных в настоящем документе, пациенту с лейкемией, как описано в настоящем документе. В другом аспекте, способы включают введение терапевтически эффективного количества одного или нескольких соединений и/или композиций, описанных в настоящем документе, для лечения пациентов с лейкозом, как описано в настоящем документе. В другом варианте осуществления, в настоящем документе описано применение соединений и композиций при получении лекарственного средства для лечения пациентов с лейкемией, как описано в настоящем документе. В одном аспекте, лекарственные средства включают терапевтически эффективное количество одного или нескольких соединений и/или композиций для лечения пациента с лейкемией, как описано в настоящем документе.

Следует понимать, что соединения, описанные в настоящем документе, могут быть использованы отдельно или в сочетании с другими соединениями, используемыми для лечения лейкемии, как описано в настоящем документе, в том числе те соединения, которые могут быть терапевтически эффективными с одинаковыми или различными механизмами действия. Кроме того, следует понимать, что соединения, описанные в настоящем документе, могут быть использованы в сочетании с другими соединениями, которые вводят для лечения других симптомов лейкемии, как описано в настоящем документе.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

Фиг. 1 показывает зависимую от дозы жизнеспособность клеток TAIL7, отобранных у пациента с рецидивом ОЛЛ, получающих лечение с помощью E3330.

Фиг. 2A показывает эффективность E3330 относительно клеток TAIL7, резистентных к дексаметазону (незакрашенные столбики), и клеток TAIL7 (закрашенные столбики) в виде функции концентрации (мкМ). На Фиг. 2B показана эффективность соединений, описанных в примерах 5а, 5с и 5е, в отношении клеток TAIL7, резистентных к дексаметазону (незакрашенные столбики), и клеток TAIL7 (закрашенные столбики) в виде функции концентрации (мкМ).

На Фиг. 3A показана эффективность E3330 относительно T-ОЛЛ первичных клеток, отобранных у трех пациентов P₃, P_R и С_В, относительно концентрации (мкМ). На Фиг. 3B показана эффективность соединений, описанных в примерах 5а, 5с и 5е, в отношении T-ОЛЛ первичных клеток, отобранных у трех пациентов P₃, P_R и С_В, относительно концентрации (мкМ).

На Фиг. 4 показана блокада Ref-1 посредством E3330 в T-ОЛЛ клетках. E3330 индуцирует апоптоз лейкозных клеток, как это определено в обычном исследовании с использованием Annexin V/PI, в течение пяти дней (d1-d5), где C=контроль носителем, E1=25 мкМ E3330 и Е2=40 мкМ E3330.

На Фиг. 5 показана эффективность E3330 (•) и соединений по примерам 5а (♦), 5с (■) и 5e по блокированию трансактивации NF-κ.

На Фиг. 6 показана эффективность E3330 относительно лейкозных клеток, отобранных из костного мозга (BM), тимуса (Т) и селезенки (S) мышей с терминальным Notch (ICN)-индуцированным T-ОЛЛ.

На Фиг. 7A показана эффективность E3330 относительно резистентных Jurkat, SupT1, Molt4 и HPB-ОЛЛ Т-ОЛЛ клеточных линий, отобранных у пациентов с рецидивом Т-ОЛЛ, относительно концентрации (мкМ). На Фиг. 7B показана эффективность соединений по примерам 5а, 5с и 5е относительно резистентных Jurkat, SupT1, Molt4 и HPB-ОЛЛ Т-ОЛЛ клеточных линий, отобранных у пациентов с рецидивирующим Т-ОЛЛ, относительно концентрации (мкМ).

На Фиг. 8A показано потенцирование доксорубицина с фиксированной дозой (20 мкМ) E3330 (Е) по сравнению с носителем. На Фиг. 8B показано потенцирование STATTIC с фиксированной дозой (20 мкМ) E3330 (Е) по сравнению с носителем.

На Фиг. 9А показана эффективность E3330 и соединения по примеру 5c по сравнению с контролем носителем на модели ксенотрансплантата лейкемии, как это определено в присутствии человеческих Т-ОЛЛ бластных клеток (huCD45+) в периферической крови (РВ). На Фиг. 9В показана эффективность E3330 и примера 5c по сравнению с контролем носителем на модели ксенотрансплантата лейкемии, что определяется присутствием человеческих Т-ОЛЛ бластных клеток (huCD45+) в костном мозге (ВМ).

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ

В одном варианте осуществления предложен способ лечения лейкемии у пациента, при необходимости этого, включающий стадию введения эффективного количества по меньшей мере одного Ref-1 редокс ингибитора формулы

или его фармацевтически приемлемой соли, где:

R^A представляет собой два заместителя, каждый из которых выбран из водорода и алкокси, где R^A оба не представляют собой водород; или

R^A представляет собой конденсированное арильное кольцо, которое необязательно является замещенным;

R представляет собой водород или галоген, или алкил, гетероалкил, циклоалкил или циклогетероалкил, каждый из которых необязательно является замещенным;

X представляет собой алкилен, алкенилен или алкинилен, каждый из которых необязательно является замещенным; и

Y образует карбоновую кислоту, сложный эфир или амид.

В одном варианте осуществления вышеуказанного каждый R^A представляет собой алкокси. В другом варианте осуществления каждый R^A представляет собой метокси.

В другом варианте осуществления вышеуказанного, R^A представляет собой необязательно замещенный бензо. В другом варианте осуществления R^A представляет собой бензо.

В одном варианте осуществления любого из вышеуказанного, R представляет собой алкил или гетероалкил, каждый из которых необязательно является замещенным. В другом варианте осуществления R представляет собой необязательно замещенный алкил. В еще одном варианте осуществления R представляет собой алкил.

В другом варианте осуществления любого из вышеуказанного, R представляет собой алкокси. В другом варианте осуществления R представляет собой метокси.

В другом варианте осуществления любого из вышеуказанного, R представляет собой алкилтио.

В одном варианте осуществления любого из вышеуказанного, X представляет собой необязательно замещенный алкилен.

В другом варианте осуществления любого из вышеуказанного, X представляет собой эпокси алкилен.

В другом варианте осуществления любого из вышеуказанного, X представляет собой необязательно замещенный алкенилен.

В другом варианте осуществления любого из вышеуказанного, X представляет собой алкилзамещенный алкенилен. В другом варианте осуществления X представляет собой 2-алкилeтиенилен.

В одном варианте осуществления любого из вышеуказанного, Y представляет собой OH.

В другом варианте осуществления любого из вышеуказанного, Y образует сложный эфир.

В другом варианте осуществления любого из вышеуказанного, Y образует амид.

В одном варианте осуществления Y представляет собой N(R¹)₂, где каждый R¹ независимо выбран из группы, состоящей из водорода, алкила, гетероалкила, циклоалкила и циклогетероалкила, каждый из которых необязательно является замещенным, или оба R¹, взятые вместе с присоединенным атомом азота, образуют необязательно замещенный гетероцикл. В одном варианте осуществления по меньшей мере один R¹ представляет собой гидроксиалкил. В другом варианте осуществления по меньшей мере один R¹ представляет собой полигидроксиалкил. В другом варианте осуществления, каждый R¹ представляет собой необязательно замещенный алкил. В другом варианте осуществления, каждый R¹ представляет собой алкил. В другом варианте осуществления, оба R¹, взятые вместе с присоединенным атомом азота, образуют необязательно замещенный гетероцикл, выбранный из группы, состоящей из пирролидина, пиперидина, пиперазина и морфолина.

В другом варианте осуществления Y представляет собой NR²OR², где каждый R² независимо выбран из группы, состоящей из водорода, алкила гетероалкила, циклоалкила и циклогетероалкила, каждый из которых, необязательно, является замещенным, и группу пролекарства, или оба R², взятые вместе с присоединенными атомами азота и кислорода, образуют необязательно замещенный гетероцикл. В одном варианте осуществления по меньшей мере один R² представляет собой водород. В другом варианте осуществления по меньшей мере один R² представляет собой необязательно замещенный алкил. В другом варианте осуществления по меньшей мере один R² представляет собой алкил. В другом варианте осуществления, оба R², взятые вместе с присоединенными атомами азота и кислорода, образуют необязательно замещенный гетероцикл, выбранный из группы, состоящей из оксазолидина, оксазина и оксазапина.

В одном варианте осуществления любого из вышеуказанного по меньшей мере один Ref-1 редокс ингибитор представляет собой E3330 (известный также как APX3330).

В другом варианте осуществления любого из вышеуказанного по меньшей мере один Ref-1 редокс ингибитор является иным, чем E3330.

Другим вариантом осуществления любого из вышеуказанного является способ, включающий дополнительное введение антилейкемического химиотерапевтического агента или антилейкемического ингибитора фермента.

В одном варианте осуществления любого из вышеуказанного, лейкемией является острый лимфобластный лейкоз (ОЛЛ). В другом варианте осуществления любого из вышеуказанного, лейкемией является педиатрический (детский) ОЛЛ. В другом варианте осуществления любого из вышеуказанного, лейкемией является младенческий ОЛЛ. В другом варианте осуществления любого из вышеуказанного лейкемией является Т-клеточный ОЛЛ (T-ОЛЛ). В другом варианте осуществления любого из вышеуказанного, лейкемией является рецидивный ОЛЛ. В другом варианте осуществления любого из вышеуказанного, лейкемией является не поддающийся лечению ОЛЛ. В другом варианте осуществления любого из вышеуказанного, лейкемией является резистентный к лекарственным средствам ОЛЛ. В другом варианте осуществления лейкемией является резистентный к глюкокортикоидам ОЛЛ.

Несколько иллюстративных вариантов осуществления изобретения описываются в следующих перечисленных пунктах:

1. Способ лечения лейкемии у пациента, где способ включает стадию введения эффективного количества по меньшей мере одного соединения формулы

или его фармацевтически приемлемой соли, где:

R^A представляет собой два заместителя, каждый из которых выбран из водорода и алкокси, где R^A оба не представляют собой водород; или

R^A представляет собой конденсированное арильное кольцо, которое необязательно является замещенным;

R представляет собой водород или галоген, или алкил, гетероалкил, циклоалкил или циклогетероалкил, каждый из которых необязательно является замещенным;

X представляет собой алкилен, алкенилен или алкинилен, каждый из которых необязательно является замещенным; и

Y образует карбоновую кислоту, сложный эфир или амид.

2. Применение одного или нескольких соединений при получении лекарственного средства для лечения лейкемии, где по меньшей мере одно соединение представлено формулой

или его фармацевтически приемлемая соль, где:

R^A представляет собой два заместителя, каждый из которых выбран из водорода и алкокси, где R^A оба не представляют собой водород; или

R^A представляет собой конденсированное арильное кольцо, которое необязательно является замещенным;

R представляет собой водород или галоген, или алкил, гетероалкил, циклоалкил или циклогетероалкил, каждый из которых необязательно является замещенным;

X представляет собой алкилен, алкенилен или алкинилен, каждый из которых необязательно является замещенным; и

Y образует карбоновую кислоту, сложный эфир или амид.

3. Композиция для лечения лейкемии, где композиция содержит, по меньшей мере, одно соединение формулы

или его фармацевтически приемлемую соль, где:

R^A представляет собой два заместителя, каждый из которых выбран из водорода и алкокси, где R^A оба не представляют собой водород; или

R^A представляет собой конденсированное арильное кольцо, которое необязательно является замещенным;

R представляет собой водород или галоген, или алкил, гетероалкил, циклоалкил или циклогетероалкил, каждый из которых необязательно является замещенным;

X представляет собой алкилен, алкенилен или алкинилен, каждый из которых необязательно является замещенным; и

Y образует карбоновую кислоту, сложный эфир или амид.

4. Способ, применение или композиция по любому из пунктов 1-3, где композиция, кроме того, содержит один или несколько носителей, разбавителей или инертных наполнителей или их комбинацию

5. Способ, применение или композиция по любому из пунктов 1-4, где соединение является селективным ингибитором редокс функции Ref-1.

6. Способ, применение или композиция по любому из пунктов 1-5, где каждый R^A представляет собой алкокси.

7. Способ, применение или композиция по любому из пунктов 1-5, где каждый R^A представляет собой метокси.

8. Способ, применение или композиция по любому из пунктов 1-5, где R^A представляет собой необязательно замещенный бензо.

9. Способ, применение или композиция по любому из пунктов 1-5, где R^A представляет собой бензо.

10. Способ, применение или композиция по любому из пунктов 1-9, где R представляет собой алкил или гетероалкил, каждый из которых необязательно является замещенным.

11. Способ, применение или композиция по любому из пунктов 1-9, где R представляет собой необязательно замещенный алкил.

12. Способ, применение или композиция по любому из пунктов 1-9, где R представляет собой алкил.

13. Способ, применение или композиция по любому из пунктов 1-9, где R представляет собой алкокси.

14. Способ, применение или композиция по любому из пунктов 1-9, где R представляет собой метокси.

15. Способ, применение или композиция по любому из пунктов 1-9, где R представляет собой алкилтио.

16. Способ, применение или композиция по любому из пунктов 1-15, где X представляет собой необязательно замещенный алкилен.

17. Способ, применение или композиция по любому из пунктов 1-15, где X представляет собой эпокси алкилен.

18. Способ, применение или композиция по любому из пунктов 1-15, где X представляет собой необязательно замещенный алкенилен.

19. Способ, применение или композиция по любому из пунктов 1-15, где X представляет собой алкилзамещенный алкенилен.

20. Способ, применение или композиция по любому из пунктов 1-15, где X представляет собой 2-алкилeтиенилен.

21. Способ, применение или композиция по любому из пунктов 1-20, где Y представляет собой OH.

22. Способ, применение или композиция по любому из пунктов 1-20, где Y образует сложный эфир.

23. Способ, применение или композиция по любому из пунктов 1-20, где Y образует амид.

24. Способ, применение или композиция по любому из пунктов 1-20, где Y представляет собой N(R¹)₂, где каждый R¹ независимо выбран из группы, состоящей из водорода, алкила, гетероалкила, циклоалкила и циклогетероалкила, каждый из которых необязательно является замещенным, или оба R¹, взятые вместе с присоединенным атомом азота, образуют необязательно замещенный гетероцикл.

25. Способ, применение или композиция по пункту 24, где по меньшей мере один R¹ представляет собой гидроксиалкил.

26. Способ, применение или композиция по пункту 24, где по меньшей мере один R¹ представляет собой полигидроксиалкил.

27. Способ, применение или композиция по пункту 24, где каждый R¹ представляет собой необязательно замещенный алкил.

28. Способ, применение или композиция по пункту 24, где каждый R¹ представляет собой алкил.

29. Способ, применение или композиция по пункту 24, где оба R¹, взятые вместе с присоединенным атомом азота, образуют необязательно замещенный гетероцикл, выбранный из группы, состоящей из пирролидина, пиперидина, пиперазина и морфолина.

30. Способ, применение или композиция по любому из пунктов 1-20, где Y представляет собой NR²OR², где каждый R² независимо выбран из группы, состоящей из водорода, алкила гетероалкила, циклоалкила и циклогетероалкила, каждый из которых необязательно является замещенным, и группу пролекарства, или оба R², взятые вместе с присоединенными атомами азота и кислорода, образуют необязательно замещенный гетероцикл.

31. Способ, применение или композиция по пункту 30, где по меньшей мере один R² представляет собой водород.

32. Способ, применение или композиция по пункту 30, где по меньшей мере один R² представляет собой необязательно замещенный алкил.

33. Способ, применение или композиция по пункту 30, где по меньшей мере один R² представляет собой алкил.

34. Способ, применение или композиция по пункту 30, где оба R², взятые вместе с присоединенными атомами азота и кислорода, образуют необязательно замещенный гетероцикл, выбранный из группы, состоящей из оксазолидина, оксазина и оксазапина.

35. Способ, применение или композиция по любому из пунктов 1-34, где по меньшей мере одно соединение представляет собой E3330.

36. Способ, применение или композиция по любому из пунктов 1-34, где по меньшей мере одно соединение является иным, чем E3330.

37. Способ по любому из предшествующих пунктов, дополнительно включающий введение одного или нескольких противолейкемических химиотерапевтических средств или одного или нескольких противолейкемических ингибиторов ферментов, или их комбинацию.

38. Применение по любому из предшествующих пунктов, где лекарственное средство дополнительно содержит одно или несколько противолейкемических химиотерапевтических средств или один или несколько противолейкемических ингибиторов ферментов, или их комбинацию.

39. Композиция по любому из предшествующих пунктов, дополнительно содержащая одно или несколько противолейкемических химиотерапевтических средств или один или несколько противолейкемических ингибиторов ферментов, или их комбинацию.

40. Способ, применение или композиция по любому из предшествующих пунктов, где лейкемией является острый лимфобластный лейкоз (ОЛЛ).

41. Способ, применение или композиция по пункту 40, где лейкемией является детский ОЛЛ.

42. Способ, применение или композиция по пункту 40, где лейкемией является младенческий ОЛЛ.

43. Способ, применение или композиция по пункту 40, где лейкемией является Т-клеточный ОЛЛ (T-ОЛЛ).

44. Способ, применение или композиция по пункту 40, где лейкемией является рецидивный ОЛЛ.

45. Способ, применение или композиция по пункту 40, где лейкемией является не поддающийся лечению ОЛЛ.

46. Способ, применение или композиция по пункту 40, где лейкемией является резистентный к лекарственным средствам ОЛЛ.

47. Способ, применение или композиция по пункту 40, где лейкемией является резистентный к глюкокортикоидам ОЛЛ.

Для каждого из вышеуказанных и последующих вариантов осуществления изобретения следует учитывать, что формулы включают и представляют не только все фармацевтически приемлемые соли соединения, но включают также любые и все гидраты и/или сольваты соединений данных формул. Понятно, что некоторые функциональные группы, такие как гидрокси, амино и подобные группы образуют комплексы и/или координационные соединения с водой и/или различными растворителями, в виде различных физических форм соединений. Соответственно, следует понимать, что приведенные выше формулы включают и представляют различные их гидраты и/или сольваты. Для каждого из вышеуказанных и последующих вариантов осуществления изобретения следует также принимать во внимание, что формулы включают и представляют каждый возможный изомер, такой как стереоизомеры и геометрические изомеры, оба по отдельности и в виде любой и всех возможных смесей. Для каждого из вышеуказанных и последующих вариантов осуществления изобретения следует также принимать во внимание, что формулы включают и представляет любую и все кристаллические формы, частично кристаллические формы и некристаллические и/или аморфные формы соединений.

Следует учитывать, что каждый из вышеуказанных вариантов осуществления изобретения может быть объединен в химически соответствующих путях получения подмножеств вариантов осуществления изобретения, описанного в данном документе. Соответственно, следует также принять во внимание, что все такие подмножества также являются иллюстративными вариантами осуществления изобретения, описанного в данном документе.

Соединения, описанные в настоящем документе, могут содержать один или нескольких хиральных центров, или, с другой стороны, могут быть способны существовать в виде нескольких стереоизомеров. Следует учитывать, что в одном варианте осуществления, настоящее изобретение, описанное в данном документе, не ограничивается никакими конкретными стереохимическими требованиями, и что соединения, и композиции, способы, применение и лекарственные средства, которые их включают, могут быть в чистом виде, или могут быть в виде какой-либо из множества стереоизомерных смесей, включая рацемические и другие смеси энантиомеров, другие смеси диастереомеров и тому подобное. Следует также принимать во внимание, что такие смеси стереоизомеров могут включать одну стереохимическую конфигурацию на одном или нескольких хиральных центрах, при этом включая смеси стереохимических конфигураций на одном или нескольких других хиральных центрах.

Подобным образом, соединения, описанные в настоящем документе, могут содержать геометрические центры, такие как цис, транс, E и Z двойные связи. Следует учитывать, что в другом варианте осуществления, настоящее изобретение, раскрытое в данном документе, не ограничивается требованиями каких-либо конкретных геометрических изомеров, и что соединения и композиции, способы, применение и лекарственные средства, которые их включают, могут быть в чистом виде, или могут быть в виде какой-либо из различных смесей геометрических изомеров. Следует также принимать во внимание, что такие смеси геометрических изомеров могут иметь отдельную конфигурацию одной или нескольких двойных связей, при этом имея геометрические смеси по одной или нескольким другим двойным связям.

Как используется в настоящем документе, термин "алкил" включает цепь из атомов углерода, которая является, необязательно, разветвленной. Как используется в настоящем документе, термин "алкенил" и "алкинил" включает цепь из атомов углерода, которая является, необязательно, разветвленной, и включает по меньшей мере одну двойную связь или тройную связь, соответственно. Следует учитывать, что алкинил может включать также одну или нескольких двойных связей. Следует также принять во внимание, что в некоторых вариантах осуществления изобретения, алкил предпочтительно имеет ограниченную длину, включая C₁-C₂₄, C₁-C₁₂, C₁-C₈, C₁-C₆ и C₁-C₄. Следует также принять во внимание, что в некоторых вариантах осуществления изобретения алкенил и/или алкинил, каждый, может, предпочтительно, иметь ограниченную длину, включая C₂-C₂₄, C₂-C₁₂, C₂-C₈, C₂-C₆ и C₂-C₄. В данном контексте понятно, что более короткие алкильные, алкенильные и/или алкинильные группы могут придавать меньшую липофильность соединению и, соответственно, будут демонстрировать различное фармакокинетическое поведение. Иллюстративными алкильными группами являются, но этим не ограничиваются, метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, пентил, 2-пентил, 3-пентил, неопентил, гексил, гептил, октил и тому подобное.

Алкилен обозначает и алкандиильную группу, такую как метилен, этилен или триметилен. Алкенилен обозначает алкендиильную группу, в которой связи находятся не на одном и том же атоме углерода, например, этенилен (1,2-этендиил). Алкинилен обозначает алкиндиильную группу, например, этинилен.

Как используется в настоящем документе, термин "циклоалкил" включает цепь из атомов углерода, которая является необязательно разветвленной, где по меньшей мере часть цепи входит в состав цикла. Следует учитывать, что циклоалкилалкил является подвидом циклоалкила. Следует учитывать, что циклоалкил может быть полициклическим. Характерные примеры циклоалкила включают, но этим не ограничиваются, циклопропил, циклопентил, циклогексил, 2-метилциклопропил, циклопентилэт-2-ил, адамантил и тому подобное. Как используется в настоящем документе, термин "циклоалкенил" включает цепь из атомов углерода, которая является необязательно разветвленной, и включает по меньшей мере одну двойную связь, где по меньшей мере часть цепи входит в состав цикла. Следует учитывать, что одна или несколько двойных связей могут присутствовать в циклической части циклоалкенила и/или нециклической части циклоалкенила. Следует учитывать, что циклоалкенилалкил и циклоалкилалкенил, каждый, являются подвидами циклоалкенила. Следует учитывать, что циклоалкил может быть полициклическим. Иллюстративные циклоалкенилы включают, но этим не ограничиваются, циклопентенил, циклогексилэтен-2-ил, циклогептенилпропенил и тому подобное. Следует также принять во внимание, что образующие эту цепь циклоалкил и/или циклоалкенил, предпочтительно, имеет ограниченную длину, включая C₃-C₂₄, C₃-C₁₂, C₃-C₈, C₃-C₆ и C₅-C₆. В данном контексте понятно, что более короткие цепи алкила и/или алкенила, образующие циклоалкил и/или циклоалкенил, соответственно, могут придавать меньшую липофильность соединению и, соответственно, будут демонстрировать различное фармакокинетическое поведение.

Как используется в настоящем документе, термин "гетероалкил" включает цепь атомов, которая включает как атомы углерода, так и по меньшей мере один гетероатом, и является необязательно разветвленной. Иллюстративные примеры гетероатомов включают азот, кислород и серу. В некоторых вариантах осуществления изобретения иллюстративные гетероатомы включают также фосфор и селен. Как используется в настоящем документе, термин "циклогетероалкил", включая гетероциклил и гетероцикл, охватывает цепь атомов, которая содержит как атомы углерода, так и по меньшей мере один гетероатом, такую как гетероалкил, и является необязательно разветвленной, где по меньшей мере часть цепи является циклической. Иллюстративные гетероатомы включают азот, кислород и серу. В некоторых вариантах иллюстративные гетероатомы включают также фосфор и селен. Иллюстративные примеры циклогетероалкила включают, но этим не ограничиваются, тетрагидрофурил, пирролидинил, тетрагидропиранил, пиперидинил, морфолинил, пиперазинил, гомопиперазинил, хинуклидинил и тому подобное.

Как используется в настоящем документе, термин "арил" включает моноциклические и полициклические ароматические карбоциклические группы, каждая из которых может быть необязательно замещенной. Иллюстративные ароматические карбоциклические группы, описанные в настоящем документе, включают, но этим не ограничиваются, фенил, нафтил и тому подобное. Как используется в настоящем документе, термин "гетероарил" включает ароматические гетероциклические группы, каждая из которых может быть необязательно замещенной. Иллюстративные ароматические гетероциклические группы включают, но этим не ограничиваются, пиридинил, пиримидинил, пиразинил, триазинил, тетразинил, хинолинил, хиназолинил, хиноксалинил, тиенил, пиразолил, имидазолил, оксазолил, тиазолил, изоксазолил, изотиазолил, оксадиазолил, тиадиазолил, триазолил, бензимидазолил, бензоксазолил, бензтиазолил, бензизоксазолил, бензизотиазолил и тому подобное.

Как используется в настоящем документе, термин "амино" включает группу NH₂, алкиламино и диалкиламино, где две алкильные группы в диалкиламино могут быть одинаковыми или различными, то есть алкилалкиламино. Для иллюстрации, амино включает метиламино, этиламино, диметиламино, метилэтиламино и тому подобное. Кроме того, следует учитывать, что, когда амино изменен или, другими словами, модифицирован как аминоалкил или ациламино, вышеуказанный термин амино также их включает. Для иллюстрации, аминоалкил включает H₂N-алкил, метиламиноалкил, этиламиноалкил, диметиламиноалкил, метилэтиламиноалкил и тому подобное. Для иллюстрации, ациламино включает ацилметиламино, ацилэтиламино и тому подобное.

Как используется в настоящем документе термин "амино и их производные" включает амино, как используется в настоящем документе, и алкиламино, алкениламино, алкиниламино, гетероалкиламино, гетероалкениламино, гетероалкиниламино, циклоалкиламино, циклоалкениламино, циклогетероалкиламино, циклогетероалкениламино, ариламино, арилалкиламино, арилалкениламино, арилалкиниламино, гетероариламино, гетероарилалкиламино, гетероарилалкениламино, гетероарилалкиниламино, ациламино и тому подобное, каждый из которых необязательно является замещенным. Термин "амино производное" включает также мочевину, карбамат и тому подобное.

Как используется в настоящем документе термин "гидрокси и их производные" включает OH и алкилокси, алкенилокси, алкинилокси, гетероалкилокси, гетероалкенилокси, гетероалкинилокси, циклоалкилокси, циклоалкенилокси, циклогетероалкилокси, циклогетероалкенилокси, арилокси, арилалкилокси, арилалкенилокси, арилалкинилокси, гетероарилокси, гетероарилалкилокси, гетероарилалкенилокси, гетероарилалкинилокси, ацилокси и тому подобное, каждый из которых необязательно является замещенным. Термин "гидрокси производное" включает также карбамат и тому подобное.

Как используется в настоящем документе термин "тио и их производные" включает SH и алкилтио, алкенилтио, алкинилтио, гетероалкилтио, гетероалкенилтио, гетероалкинилтио, циклоалкилтио, циклоалкенилтио, циклогетероалкилтио, циклогетероалкенилтио, арилтио, арилалкилтио, арилалкенилтио, арилалкинилтио, гетероарилтио, гетероарилалкилтио, гетероарилалкенилтио, гетероарилалкинилтио, ацилтио и тому подобное, каждый из которых необязательно является замещенным. Термин "тио производное" включает также тиокарбамат и тому подобное.

Как используется в настоящем документе термин "ацил" включает формил и алкилкарбонил, алкенилкарбонил, алкинилкарбонил, гетероалкилкарбонил, гетероалкенилкарбонил, гетероалкинилкарбонил, циклоалкилкарбонил, циклоалкенилкарбонил, циклогетероалкилкарбонил, циклогетероалкенилкарбонил, арилкарбонил, арилалкилкарбонил, арилалкенилкарбонил, арилалкинилкарбонил, гетероарилкарбонил, гетероарилалкилкарбонил, гетероарилалкенилкарбонил, гетероарилалкинилкарбонил, ацилкарбонил и тому подобное, каждый из которых необязательно является замещенным.

Как используется в настоящем документе термин "карбонил и их производные" включает группу C(O), C(S), C(NH) и их замещенные амино производные.

Как используется в настоящем документе термин "карбоновая кислота и ее производные" включает группу CO₂H и ее соли, и их сложные эфиры и амиды, и CN.

Как используется в настоящем документе термин "сульфиновая кислота или ее производное" включает SO₂H и их соли, и их сложные эфиры и амиды.

Как используется в настоящем документе термин "сульфоновая кислота или ее производное" включает SO₃H и их соли, и их сложные эфиры и амиды.

Как используется в настоящем документе термин "сульфонил" включает алкилсульфонил, алкенилсульфонил, алкинилсульфонил, гетероалкилсульфонил, гетероалкенилсульфонил, гетероалкинилсульфонил, циклоалкилсульфонил, циклоалкенилсульфонил, циклогетероалкилсульфонил, циклогетероалкенилсульфонил, арилсульфонил, арилалкилсульфонил, арилалкенилсульфонил, арилалкинилсульфонил, гетероарилсульфонил, гетероарилалкилсульфонил, гетероарилалкенилсульфонил, гетероарилалкинилсульфонил, ацилсульфонил и тому подобное, каждый из которых необязательно является замещенным.

Как используется в настоящем документе термин "фосфиновая кислота или ее производное" включает P(R)O₂H и их соли, и их сложные эфиры и амиды, где R представляет собой алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, циклоалкенил, гетероалкил, гетероалкенил, циклогетероалкил, циклогетероалкенил, арил, гетероарил, арилалкил или гетероарилалкил, каждый из которых необязательно является замещенным.

Как используется в настоящем документе термин "фосфоновая кислота или ее производное" включает PO₃H₂ и их соли, и их сложные эфиры и амиды.

Как используется в настоящем документе термин "гидроксиламино и их производные" включает NHOH и алкилоксилNH, алкенилоксилNH, алкинилоксилNH гетероалкилоксилNH, гетероалкенилоксилNH, гетероалкинилоксилNH, циклоалкилоксилNH, циклоалкенилоксилNH, циклогетероалкилоксилNH, циклогетероалкенилоксилNH, арилоксилNH, арилалкилоксилNH, арилалкенилоксилNH, арилалкинилоксилNH, гетероарилоксилNH, гетероарилалкилоксилNH, гетероарилалкенилоксилNH гетероарилалкинилоксилNH ацилокси и тому подобное, каждый из которых необязательно является замещенным.

Как используется в настоящем документе термин "гидразино и их производные" включает алкилNHNH, алкенилNHNH, алкинилNHNH, гетероалкилNHNH, гетероалкенилNHNH, гетероалкинилNHNH, циклоалкилNHNH, циклоалкенилNHNH, циклогетероалкилNHNH, циклогетероалкенилNHNH, арилNHNH, арилалкилNHNH, арилалкенилNHNH, арилалкинилNHNH, гетероарилNHNH, гетероарилалкилNHNH, гетероарилалкенилNHNH, гетероарилалкинилNHNH, ацилNHNH и тому подобное, каждый из которых необязательно является замещенным.

Термин "необязательно замещенный", как используется в настоящем документе, включает замену атомов водорода другими функциональными группами на радикале, который является необязательно замещенным. Такие другие функциональные группы для иллюстрации включают, но этим не ограничиваются, амино, гидроксил, галоген, тиол, алкил, галогеналкил, гетероалкил, арил, арилалкил, арилгетероалкил, гетероарил, гетероарилалкил, гетероарилгетероалкил, нитро, сульфоновые кислоты и их производные, карбоновые кислоты и их производные, и тому подобное. Для иллюстрации, любой из амино, гидроксила, тиола, алкила, галогеналкила, гетероалкила, арила, арилалкила, арилгетероалкила, гетероарила, гетероарилалкила, гетероарилгетероалкила и/или сульфоновой кислоты является необязательно замещенным.

Как используется в настоящем документе, термины "необязательно замещенный арил" и "необязательно замещенный гетероарил" включают замену атомов водорода другими функциональными группами в ариле или гетероариле, которые являются необязательно замещенными. Такие другие функциональные группы для иллюстрации включают, но этим не ограничиваются, амино, гидрокси, галоген, тио, алкил, галогеналкил, гетероалкил, арил, арилалкил, арилгетероалкил, гетероарил, гетероарилалкил, гетероарилгетероалкил, нитро, сульфоновые кислоты и их производные, карбоновые кислоты и их производные и тому подобное. Для иллюстрации, любой из амино, гидрокси, тио, алкила, галогеналкила, гетероалкила, арила, арилалкила, арилгетероалкила, гетероарила, гетероарилалкила, гетероарилгетероалкила и/или сульфоновой кислоты является необязательно замещенным.

Иллюстративные заместители включают, но этим не ограничиваются, радикал -(CH₂)_xZ^X, где x представляет собой целое число от 0 до 6, и Z^X выбран из галогена, гидрокси, алканоилокси, включая C₁-C₆ алканоилокси, необязательно замещенный ароилокси, алкил, включая C₁-C₆ алкил, алкокси, включая C₁-C₆ алкокси, циклоалкил, включая C₃-C₈ циклоалкил, циклоалкокси, включая C₃-C₈ циклоалкокси, алкенил, включая C₂-C₆ алкенил, алкинил, включая C₂-C₆алкинил, галогеналкил, включая C₁-C₆ галогеналкил, галогеналкокси, включая C₁-C₆ галогеналкокси, галогенциклоалкил, включая C₃-C₈ галогенциклоалкил, галогенциклоалкокси, включая C₃-C₈ галогенциклоалкокси, амино, C₁-C₆ алкиламино, (C₁-C₆ алкил)(C₁-C₆ алкил)амино, алкилкарбониламино, N-(C₁-C₆ алкил)алкилкарбониламино, аминоалкил, C₁-C₆ алкиламиноалкил, (C₁-C₆ алкил)(C₁-C₆ алкил)аминоалкил, алкилкарбониламиноалкил, N-(C₁-C₆ алкил)алкилкарбониламиноалкил, циано и нитро; или Z^X выбран из -CO₂R⁴ и -CONR⁵R⁶, где R⁴, R⁵ и R⁶, каждый, независимо, выбраны, в каждом случае, из водорода, C₁-C₆ алкила, арил-C₁-C₆ алкила и гетероарил- C₁-C₆ алкила.

Термин "пролекарство", как он используется в настоящем документе, как правило, относится к любому соединению, которое при введении в биологическую систему генерирует биологически активное соединение в результате одной или нескольких спонтанных химических реакций, катализируемых ферментом химических реакций и/или метаболических химических реакций или их комбинацией. In vivo, пролекарство обычно подвергается воздействию ферментов (таких как эстеразы, амидазы, фосфатазы и тому подобное), простых биологических химических реакций или других in vivo процессов, чтобы освободить или регенерировать более фармакологически активное лекарственное средство. Эта активация может происходить под действием эндогенного фермента хозяина или не-эндогенного фермента, который вводится хозяину перед, после или во время введения пролекарства. Дополнительные подробные сведения об использовании пролекарств описаны в патенте США №5627165; и в обзоре Pathalk et al., Enzymic protecting group techniques in organic synthesis, Stereosel. Biocatal. 775-797 (2000). Следует учитывать, что вышеуказанные публикации, а также каждая дополнительная публикация, цитируемые в данном документе, включены здесь в качестве ссылки. Следует понимать, что пролекарство, предпочтительно, преобразуется в начальное лекарственное средство, как только достигается цель, такая как мишеневая доставка, безопасность, стабильность и тому подобное, с последующим быстрым выведением высвобожденных остатков групп, образующих пролекарство.

Пролекарства могут быть изготовлены из соединений, описанных в настоящем документе, путем присоединения групп, которые немедленно отщепляются in vivo, к одной или нескольким функциональным группам, имеющимся в соединении, таким как -OH-, -SH, -CO₂H, -NR₂. Иллюстративные примеры пролекарств включают, но этим не ограничиваются, сложные эфиры карбоксилатов, где группа представляет собой алкил, арил, арилалкил, гетероарил, гетероарилалкил, ацилоксиалкил, алкоксикарбонилоксиалкил, а также сложные эфиры гидроксила, тиола и аминов, где присоединенная группа представляет собой ацильную группу, алкоксикарбонил, аминокарбонил, фосфат или сульфат. Иллюстративные примеры сложных эфиров, указываемых также как активные сложные эфиры, включают, но этим не ограничиваются, 1-инданил, N-оксисукцинимид; ацилоксиалкильные группы, такие как ацетоксиметил, пивалоилоксиметил, β-ацетоксиэтил, β-пивалоилоксиэтил, 1-(циклогексилкарбонилокси)проп-1-ил, (1-аминоэтил)карбонилоксиметил и тому подобное; алкоксикарбонилоксиалкильные группы, такие как этоксикарбонилоксиметил, α-этоксикарбонилоксиэтил, β-этоксикарбонилоксиэтил и тому подобное; диалкиламиноалкильные группы, включая динизшие алкиламино алкильные группы, такие как диметиламинометил, диметиламиноэтил, диэтиламинометил, диэтиламиноэтил и тому подобное; 2-(алкоксикарбонил)-2-алкенильные группы, такие как 2-(изобутоксикарбонил)пент-2-енил, 2-(этоксикарбонил)бут-2-енил и тому подобное; и лактоновые группы, такие как фталидил, диметоксифталидил и тому подобное.

Другие иллюстративные примеры пролекарств содержат химический фрагмент, такой как амидная или фосфорная группа, измененные с целью повышения растворимости и/или стабильности соединений, описанных в настоящем документе. Следующие иллюстративные примеры пролекарств для амино групп включают, но этим не ограничиваются, (C₃-C₂₀)алканоил; галоген-(C₃-C₂₀)алканоил; (C₃-C₂₀)алкеноил; (C₄-C₇)циклоалканоил; (C₃-C₆)-циклоалкил(C₂-C₁₆)алканоил; необязательно замещенный ароил, такой как незамещенный ароил или ароил, замещенный от 1 до 3 заместителями, выбранными из группы, включающей галоген, циано, трифторметансульфонилокси, (C₁-C₃)алкил и (C₁-C₃)алкокси, каждый из которых, необязательно, дополнительно замещен одним или несколькими от 1 до 3 атомами галогена; необязательно замещенный арил(C₂-C₁₆)алканоил и необязательно замещенный гетероарил(C₂-C₁₆)алканоил, такие как арил или гетероарил радикал, незамещенный или замещенный от 1 до 3 заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена, (C₁-C₃)алкила и (C₁-C₃)алкокси, каждый из которых необязательно дополнительно замещен одним или несколькими 1-3 атомами галогена; и необязательно замещенный гетероарилалканоил, содержащий от одного до трех гетероатомов, выбранных из O, S и N в гетероарильном фрагменте и от 2 до 10 атомов углерода в алканоильном фрагменте, такие как гетероарильный радикал, являющийся незамещенным или замещенным 1-3 заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена, циано, трифторметансульфонилокси, (C₁-C₃)алкила и (C₁-C₃)алкокси, каждый из которых, необязательно, дополнительно замещен одним или несколькими от 1 до 3 атомами галогена. Данные иллюстративные группы являются примерами, но не исчерпывающими, и могут быть получены общеизвестными способами.

Понятно, что сами пролекарства не обладают значительной биологической активностью, но, с другой стороны, подвергаются одной или нескольким спонтанным химическим реакциям, фермент-катализируемым химическим реакциям и/или метаболическим химическим реакциям или их комбинациям, после введения in vivo, генерируя описанное здесь соединение, которое является биологически активным или является предшественником биологически активного соединения. Тем не менее, следует понимать, что в некоторых случаях пролекарство является биологически активным. Необходимо также отметить, что пролекарства часто могут служить для улучшения безопасности или эффективности лекарственных средств за счет повышения биодоступности при пероральном введении, улучшения фармакодинамической полужизни и тому подобное. Пролекарства также относятся к таким производным соединений, описанных в настоящем документе, которые включают группы, просто маскирующие нежелательные свойства лекарственных средств или улучшающие доставку лекарственных средств. Например, одно или несколько соединений, описанных в настоящем документе, могут обладать нежелательным свойством, успешно подавленным или миниминизированным, которое может стать фармакологическим, фармацевтическим или фармакокинетическим барьером при клиническом применении лекарственного средства, такое как низкая пероральная абсорбция лекарственного средства, отсутствие специфики сайта, химическая нестабильность, токсичность и плохое восприятие пациентом (плохой вкус, запах, боль в месте инъекции и тому подобное) и другие. В данном контексте понятно, что пролекарство или другая стратегия с использованием воспроизводимых производных могут быть полезны при оптимизации клинического применения лекарственного средства.

Термин "терапевтически эффективное количество", как он используется в настоящем документе, относится к такому количеству действующего вещества или фармацевтического средства, которое вызывает биологический или медицинский ответ в тканевой системе, животном или человеке, которого в настоящее время добивается исследователь, ветеринар, врач или другой клиницист, включающий облегчение симптомов заболевания или расстройства, подлежащего лечению. В одном аспекте, терапевтически эффективное количество является таким, которое может лечить или облегчать заболевания или симптомы болезни при соотношении польза/риск, применимом к любому лечению. Тем не менее, следует учитывать, что общее ежедневное использование соединения и композиции, описанные в данном документе, могут быть определены только лечащим врачом в рамках его медицинской точки зрения. Конкретный терапевтически эффективный уровень дозы для любого конкретного пациента будет зависеть от множества факторов, включая расстройство, подлежащее лечению, и тяжесть заболевания; активность конкретного используемого соединения; конкретную используемую композицию; возраст, массу тела, общее состояние здоровья, пол и питание пациента; время введения, путь введения и скорость экскреции конкретного используемого соединения; продолжительность лечения; лекарственные средства, используемые в комбинации или одновременно с конкретным используемым соединением; и подобные факторы, хорошо известные исследователям, ветеринарам, врачам или другим клиницистам обычного уровня знаний.

Необходимо также отметить, что терапевтически эффективное количество, будь то со ссылкой на монотерапию или на комбинированную терапию, целесообразно выбирать с отсылкой на какую-либо токсичность или другой нежелательный побочный эффект, который может возникнуть в процессе введения одного или нескольких соединений, описанных в настоящем документе. Кроме того, следует понимать, что эти сопутствующие терапии, описанные здесь, могут позволить вводить более низкие дозы соединений, которые показывают такую токсичность или другие нежелательные побочные эффекты, причем эти более низкие дозы ниже порогов токсичности или ниже терапевтического окна, чем могло бы быть в противном случае при введении в отсутствие совместной терапии.

Как используется в настоящем документе, термин "композиция", как правило, относится к любому продукту, содержащему указанные ингредиенты в указанных количествах, а также к любому продукту, который получен прямо или косвенно из сочетаний определенных ингредиентов в указанных количествах. Следует учитывать, что композиции, описанные в настоящем документе, могут быть получены из отдельного соединения, описанного в настоящем документе, или из солей, растворов, гидратов, сольватов и других форм соединений, описанных в настоящем документе. Следует также принимать во внимание, что композиции могут быть получены из различных аморфной, не-аморфной, частично кристаллической, кристаллической и/или других морфологических форм соединений, описанных в настоящем документе. Следует также принимать во внимание, что композиции могут быть получены из различных гидратов и/или сольватов соединений, описанных в настоящем документе. Соответственно, такую фармацевтическую композицию, в которой указаны соединения, описанные в настоящем документе, следует понимать как включающую каждое из, или любое сочетание, различные морфологические формы и/или формы сольвата или гидрата соединений, описанных в настоящем документе. Для иллюстрации, композиции могут включать один или несколько носителей, разбавителей и/или инертных наполнителей. Соединения, описанные в настоящем документе, или композиции, содержащие их, могут быть приготовлены в терапевтически эффективном количестве в виде любых обычных лекарственных форм, подходящих для способов, описанных в настоящем документе. Соединения, описанные в настоящем документе, или композиции, содержащие их, включая такие составы, могут быть введены с помощью широкого разнообразия обычных путей для способов, описанных здесь, и в самых разнообразных дозированных формах с использованием известных процедур (смотри, в основном, Remington: The Science и Practice of Pharmacy, (21^st ed., 2005)).

Термин "введение", как используется в настоящем документе, включает все методы введения соединений и композиций, описанных здесь, пациенту, включая, но этим не ограничиваясь, пероральный (po), внутривенный (iv), внутримышечный (im), подкожной (sc), трансдермальный, ингаляционный, щечной, глазной, подъязычный, вагинальный, ректальный и тому подобное. Соединения и композиции, описанные в настоящем документе, могут быть введены в виде стандартных лекарственных форм и/или составов, содержащих обычные нетоксичные фармацевтически приемлемые носители, адъюванты и наполнители.

Иллюстративные примеры путей перорального введения включают таблетки, капсулы, эликсиры, сиропы и тому подобное.

Иллюстративные примеры путей парентерального введения включают внутривенное, внутриартериальное, внутрибрюшинное эпидуриальное, интрауретральное, внутригрудинное, внутримышечное и подкожное введение, а также любой другой признанный в данной области путь парентерального введения.

Иллюстративные примеры средств для парентерального введения включают инъекторы с иглами (включая микроиглы), безыгольные инъекторы и средства для вливания, а также любые другие средства для парентерального введения, признанные в данной области. Парентеральные композиции обычно представляют собой водные растворы, которые могут содержать наполнители, такие как соли, карбогидраты и буферные агенты (предпочтительно, при рН в интервале от примерно 3 до примерно 9), но для некоторых применений они могут быть более удобно приготовлены в виде стерильного неводного раствора или в виде сухой формы, которые будут использоваться в сочетании с подходящим носителем, таким как стерильная апирогенная вода. Приготовление парентеральных композиций в стерильных условиях, например, путем лиофилизации, может быть легко осуществлено с использованием стандартных фармацевтических методов, хорошо известных специалистам в данной области. Парентеральное введение соединений, для иллюстрации, осуществляют в виде солевых растворов, либо соединение включено в липосомы. В тех случаях, когда соединение само по себе недостаточно растворимо для приготовления раствора, может быть использован солюбилизатор, такой как этанол.

Дозировка каждого соединения в заявляемых комбинациях зависит от нескольких факторов, включая: способ введения, состояние, подлежащее лечению, тяжесть состояния, того, является ли состояние подлежащим лечению или профилактике, и возраст, массу и здоровье человека, проходящего лечение. Кроме того, фармакогеномная (действие генотипа на фармакокинетику, фармакодинамический профиль или эффективность терапевтического препарата) информация о конкретном пациенте может повлиять на используемую дозировку.

Следует учитывать, что в способах, описанных в данном документе, отдельные компоненты совместного введения или комбинацию можно вводить любыми подходящими средствами, так же долго, одновременно, последовательно, раздельно или в виде одной фармацевтической композиции. При совместном введении, соединения или композиции вводятся в виде отдельных лекарственных форм, количество доз введения на день для каждого соединения может быть одинаковым или различным. Соединения или композиции могут быть введены с помощью одних и тех же или разных путей введения. Соединения или композиции могут быть введены в соответствии с одновременными или чередующимися схемами, в то же или в разное время в процессе терапии, одновременно в виде разделенных или отдельных форм.

Для иллюстрации, введение включает местное применение, такое как введение локально на участок заболевания, травмы или дефекта. Иллюстративные примеры местного введения могут быть осуществлены во время открытой операции или других процедур, когда участок заболевания, травмы или дефекта является доступным. Альтернативно, местное введение может быть осуществлено с помощью парентеральной доставки, когда соединение или композицию, описанные в данном документе, помещают локально на участок без общего распределения на несколько других немишеневых участков на пациенте, которого лечат. Также следует понимать, что местное введение может быть осуществлено непосредственно в место повреждения, либо локально в окружающие ткани. Аналогичные изменения, касающиеся местной доставки в конкретные типы тканей, такие как органы и тому подобное, также описаны в настоящем документе. Для иллюстрации, соединения могут быть введены непосредственно в нервную систему, включая, но этим не ограничиваясь, внутримозговой, интравентрикулярный, интрацеребровентрикулярный, интратекальный, интрацистернальный, интраспинальный и/или периспинальный пути доставки лекарственного средства через внутричерепные или интравертебральные иглы и/или катетеры с насосным устройством или без него.

В зависимости от заболевания, как это используется в настоящем документе, способа введения и пути, которыми вводят соединения и/или композиции, в данном документе рассматривается широкий спектр допустимых доз, включая дозы, подпадающие в диапазон приблизительно от 1 мкг/кг до примерно 1 г/кг. Дозы могут быть едиными или раздельными, и их можно вводить в соответствии с широким спектром протоколов, включая один раз в день, два раза в день, три раза в день, или даже через день, один раз в неделю, раз в месяц, раз в квартал и тому подобное. В каждом из этих случаев следует понимать, что терапевтически эффективные количества, описанные здесь, соответствуют ситуации введения, или, альтернативно, общей ежедневной, еженедельной, ежемесячной или ежеквартальной дозе, как определяется протоколом дозирования. При введении системно, таком как парентерально, иллюстративные дозы включают такие, как в диапазоне приблизительно от 0,01 мг/кг до приблизительно 100 мг/кг, или от примерно 0,01 мг/кг до около 10 мг/кг, или от около 0,1 мг/кг до приблизительно 100 мг/кг, или от около 0,1 мг/кг до примерно 10 мг/кг. При введении системно, таком как перорально, иллюстративные дозы включают такие, как в диапазоне от приблизительно 0,1 мг/кг до около 1000 мг/кг, или от примерно 0,1 мг/кг до приблизительно 100 мг/кг, или от около 0,1 мг/кг до примерно 10 мг/кг, или от около 1 мг/кг до примерно 1000 мг/кг, или от около 1 мг/кг до приблизительно 100 мг/кг, или от около 1 мг/кг до примерно 10 мг/кг.

Помимо вышеуказанных иллюстративных примеров доз и протоколов дозирования следует учитывать, что эффективные количества любого из соединений или их смесей, описанных в настоящем документе, могут быть легко определены лечащим диагностом или врачом с использованием известных методов и/или результатов наблюдений, полученных в аналогичных условиях. При определении эффективного количества или дозы, рассматривается ряд факторов по усмотрению лечащего диагноста или врача, включая, но этим не ограничиваясь, вид млекопитающего, включая человека, его размер, возраст и общее состояние здоровья, конкретное заболевание или связанное расстройство, степень развития или тяжесть заболевания или расстройства, реакция отдельного пациента, особенность вводимого соединения, способ введения, характеристики биодоступности вводимого препарата, выбранная схема приема, применение сопутствующего лекарственного средства и другие соответствующие обстоятельства.

Для иллюстрации, соединения, описанные в настоящем документе, могут быть получены как показано на следующей схеме:

(a) 1. Pd(II)OAc, основание, H₂O; 2. кислота; (b) (COCl)₂, ДМФ, CH₂Cl₂; (c) Y-H, необязательно, основание; (d) R-H, необязательно, основание. Соединения (1) получают как описано в работе Perez et al., Tetrahedron Lett. 48:3995-98 (2007). На представленной схеме Y и R имеют значения, определенные в данном документе, и R^A1 представляет собой от 1 до 4 необязательных арильных заместителей; и дивалентный радикал CH=C(R¹)-X¹ является вариантом группы X, определенной в данном документе. Дополнительные соединения, описанные в настоящем документе, получают путем адаптации процессов, описанных в PCT/US2008/077213, раскрытие которой включено в настоящее описание в качестве ссылки.

Организм человека имеет основные окислительно-восстановительные системы (тиоредоксин и глутаредоксин/глутатион), которые помогают поддерживать внутриклеточный гомеостаз путем утилизации активных форм кислорода (ROS). Тем не менее, Ref-1 отличается и функционирует иным образом, чем эти системы. Ref-1, в целом, не восстанавливает факторы транскрипции; он, скорее, селективно воздействует на TF, которые непосредственно регулируют важнейшие клеточные функции, включая репарацию ДНК, стрессовые реакции. Ref-1 также регулирует другие, в частности, критические клеточные функции, нижерасположенные от своих эффекторов, включая выживаемость клеток и цикл.

До настоящего момента было неизвестно, что Ref-1 играет важную и, возможно, решающую регуляторную роль в биологии Т-клеточного лейкоза. Неожиданно обнаружили, что нацеливание на редокс активность Ref-1 представляет собой эффективную стратегию нарушения множественных способствующих выживанию программ транскрипции в клетках не поддающегося лечению лейкоза, резистентного к лекарственным средствам. Неожиданно было обнаружено, что повышенная экспрессия Ref-1 связана с детским ОЛЛ (а также злокачественными опухолями, в большинстве случаев). Было обнаружено, что редокс функция Ref-1 играет важную роль в пролиферации и выживании Т-клеточного ОЛЛ, в том числе в клетках пациентов и в клетках рецидивирующего лейкоза. Важно, в связи с тем, что Ref-1 регулирует активность различных транскрипционных факторов, включая лейкоз-ассоциированные NF-κВ, STAT3 и AP-1, его селективная инактивация обладает потенциалом нарушения множественных комплементарных нерекуррентных сигнальных путей, опосредующих важные процессы в клетках рецидивирующего не поддающегося лечению лейкоза. Соответственно, соединения, композиции и способы, описанные в настоящем документе, обладают потенциалом для увеличения противоопухолевой эффективности при одновременном снижении "терапевтической неудачи", где выбор вариантов опухоли зависит от альтернативных путей выживания. В более широком смысле, селективное нацеливание на ключевой медиатор программ редокс-регулируемой транскрипции при лейкозе у детей представляет собой новый подход лечения рецидивирующего ОЛЛ.

Ref-1 является многофункциональным белком с активностью репарации ДНК и уникальной ядерной редокс функцией, которая регулирует активность некоторых TF. Авторами настоящего изобретения было обнаружено, что Ref-1 также контролирует активность различных лейкоз-ассоциированных TF, контролируя таким образом свои транскрипционные программы. В частности, редокс функция Ref-1 регулирует транскрипционную активность контролирующих выживание факторов NF-κВ и AP-1. Кроме того, авторами настоящего изобретения было обнаружено, что STAT3 необходим для Т-клеточного ОЛЛ и, в частности, Т-клеточного лейкемогенеза. Удаление STAT3 замедляет развитие Т-клеточного лейкоза, индуцированного онкогенным Notch1. Блокада STAT3 ингибирует Т-ОЛЛ выживание, и запускает активный апоптоз. Наблюдали ДНК связывание и активность STAT3, регулируемые редокс функцией Ref-1. Кроме того, было обнаружено, что Ref-1 экспрессируется в лейкозных Т-клетках, включая клетки, отобранные путем биопсии у пациентов с лейкозом, первичных клеток, отобранных у пациентов, клетках рецидивирующего Т-ОЛЛ и лейкозных клетках Notch-индуцированного Т-ОЛЛ у мышей. Кроме того, было обнаружено, что костный мозг (BM) пациентов с Т-ОЛЛ показал значительно более высокие уровни трансриптов Ref-1 (р<0,000002) по сравнению с костным мозгом здоровых доноров.

Кроме того, было обнаружено, что активность транскрипции STAT3 контролируется, по меньшей мере, частично, Ref-1. Будучи не связанными с теорией, полагают, что соединения являются эффективными против лейкоза, по меньшей мере, частично, ввиду облегчения, содействия, инициирования апоптоза лейкозных клеток. Кроме того, будучи не связанными с теорией, полагают, что соединения являются эффективными против лейкоза, по меньшей мере, частично, ввиду негативной регуляции, нарушения регуляции, или иным образом препятствуя способствующим выживанию генам, которые являются транскрипционными мишенями STAT3, NF-κВ, такие как Survivin и Bcl-XL.

Кроме того, было обнаружено, что селективная инактивация редокс потенциала Ref-1 обеспечивает средство нарушения множественных комплементарных сигнальных путей, опосредующих основные процессы для клеток рецидивного лейкоза. Такое нарушение множественных комплементарных сигнальных путей представляет собой новый терапевтический подход для этой цели. В солидных опухолях повышенная экспрессия Ref-1 ассоциирована с плохим прогнозом и лекарственной резистентностью. Роль Ref-1 в рецидиве лейкоза до сих пор была неизвестна. Кроме того, роль редокс контроля транскрипции, включая Ref-1 опосредованный редокс контроль, в резистентности лейкоза к лекарственным препаратам, который может прогнозировать ОЛЛ рецидив, также была ранее неизвестна. Ref-1 экспрессирован при детском ОЛЛ. Далее, авторами настоящего изобретения было обнаружено, что механизмы резистентности лейкозных клеток к лекарственным препаратам, например, резистентность к глюкокортикоидам, связаны с повышенной экспрессией Ref-1. Исследования лейкозных клеток, отобранных у пациентов, показывают, что Т-клеточный ОЛЛ и его молекулярная регуляция является более сложным, чем исключительный результат онкоген-инициированных клеточных автономных факторов. Вместо этого, молекулярное регулирование вызывает молекулярное взаимодействие между онкогенными событиями и сигналами микросреды, что приводит к повышенной приспособленности лейкозных клеток.

Эффективное использование соединений, композиций и способов, описанных в настоящем документе, для лечения или ослабления одного или нескольких эффектов лейкозного заболевания с использованием одного или нескольких соединений, описанных в настоящем документе, может основываться на моделях заболеваний животных, таких как мыши, собаки, свиньи и нечеловекообразные приматы. Например, понятно, что лейкоз у человека характеризуется потерей функции и/или развитием симптомов, каждый из которых может быть выявлен у животных, таких как мыши, и других замещающих подопытных животных. В частности, для оценки способов лечения и фармацевтических композиций, описанных в настоящем документе, для определения терапевтически эффективных количеств, описанных в настоящем документе, может быть использована мышиная модель рецидивирующего Т-клеточного лейкоза.

Способы и следующие примеры дополнительно иллюстрируют конкретные варианты осуществления изобретения по настоящему изобретению; однако, следующие иллюстративные примеры в любом случае не следует интерпретировать как ограничивающие настоящее изобретение.

ПРИМЕРЫ

ПРИМЕР. В настоящем изобретении исследовали дексаметазон, положительно регулирующий экспрессию Ref-1 в клетках Т-ОЛЛ, и исследовали уровни Ref-1, повышенные в типах лейкоза, резистентного к глюкокортикоидам. Т-клетки рецидивирующего лейкоза демонстрируют повышенную экспрессию и активацию глюкокортикоидных рецепторов (GR), и промотор Ref-1 содержит сайты связывания GR. Тем не менее, лечение дексаметазоном или глюкокортикоидная резистентность не приводит к повышению уровня транскриптов Ref-1. Не пытаясь привязываться к какой-либо теории, полагают, что регулирование экспрессии Ref-1 в лейкозных Т-клетках может задействовать посттрансляционный механизм, который не контролируется сигнализацией Notch. Блокада редокс потенциала Ref-1 заметно ингибирует жизнеспособность резистентных к глюкокортикоидам лейкозных Т-клеток; что является важным, так как резистентные к глюкокортикоидам лейкозные Т-клетки демонстрируют снижение чувствительности к ингибиторам других лейкемия-ассоциированных сигнальных путей, таких как PI3K/Akt, mTOR, и к другим терапевтическим препаратам. В настоящем изобретении было исследовано, что ингибирование Ref-1 является более эффективным по сравнению с другими медиаторами сигнального пути, вовлеченными в Т-ОЛЛ. Например, при оптимальных дозах, которые блокируют их соответствующие целевые пути, блокада передачи сигнала Notch, PI3K/Akt или mTOR не превышает 70% ингибирования лейкозных клеток TAIL7, тогда как соединения, описанные здесь, обеспечивают блокаду 95-100% ингибирования.

ПРИМЕР. Инактивация окислительно-восстановительного фактора Ref-1 посредством описанных в настоящем документе соединений заметно ингибирует выживаемость лейкозных клеток, в том числе первичных клеток, отобранных у пациентов c ОЛЛ, рецидивирующим T-ОЛЛ и клеток, отобранных у мышиной модели с Notch-индуцированной лейкозом. Селективный ингибитор редокс потенциала E3330 заметно ингибирует выживаемость лейкозных клеток, включая первичные клетки, отобранные у пациентов с ОЛЛ, рецидивирующим Т-ОЛЛ, и клеток, отобранных у мышиной модели с Notch-индуцированной лейкозом. Ингибирующие эффекты E3330 обеспечивают значительный апоптоз лейкозных клеток, и коррелируют с негативной регуляцией генов выживания контролируемых Ref-1 ʹмишенямиʹ STAT3 и NF-κВ. Блокада Ref-1 не показала значительного эффекта в отношении активации путей Akt PI3K/или mTOR. Активность других селективных ингибиторов окислительно-восстановительного фактора Ref-1 анализировали относительно лейкозных клеток с помощью обычных редокс EMSA анализов. Смотри, Su, D. et al. Interactions of APE1with a redox inhibitor: Evidence for an alternate conformation of the enzyme. Biochemistry 50, 82-92 (2011). Nyland et al., Design and Synthesis of Novel Quinone Inhibitors Targeted to the Redox Function of Apurinic/Apyrimidinic Endonuclease 1/Redox Enhancing Factor-1 (Ape1/Ref-1). J Med Chem 53, 1200-1210 (2010). Kelley et al., Cancer Drug Discovery and Development (ed Rebecca G. Bagley) Springer (part of Springer Science+Business Media), 2010. Luo et al., Role of the multifunctional DNA repair and redox signaling protein Ape1/Ref-1 in cancer and endothelial cells: Small molecule inhibition of Ape1ʹs redox function. Antioxid Redox Signal 10, 1853-1867 (2008). Georgiadis et al., Evolution of the redox function in mammalian Apurinic/apyrimidinic Mutation Research 643, 54-63 (2008).

Пример IC₅₀
(мкМ) Е3330 25 5а 1 5с 1 5е 2

ПРИМЕР. Соединения, описанные в настоящем документе, снижают выживаемость лейкозных клеток. Жизнеспособность клеток TAIL7, которые отобраны у пациентов с рецидивирующим ОЛЛ, обработанных E3330, определяли с помощью стандартного анализа выживаемости клеток (анализа АТФ), за 96 час. Результаты показаны на Фиг. 1. Блокада Ref-1 посредством редокс-селективных ингибиторов, описанных в настоящем документе, значительно ингибирует лейкозные Т-клетки относительно дозы, с использованием ДМСО в качестве контроля.

Пример IC₅₀
(мкМ) Е3330 29,7 5а 5,5 5с 4,2 5е 5,5

Ингибирование проявляется также в Т-ОЛЛ линиях (E3330 IC₅₀ 20-30 мкМ), отобранных у мышиной модели с Т-клеточным лейкозом, индуцированным онкогенным Notch, где злокачественные клетки модели отбирали у мышей с заболеванием в терминальной стадии, демонстрирующим значительный лейкоцитоз, спленомегалию и другую инфильтрацию паренхиматозных тканей лейкозными клетками.

ПРИМЕР. Описанные в настоящем документе соединения вызывают существенную негативную регуляцию вовлеченных в выживание генов, контролируемых STAT3 и NF-κВ, такими как Survivin, Bcl-XL и miR-21. E3330 вызывает 2-10 кратное снижение уровня Survivin и Bcl-XL мРНК через 24 ч при дозах от 25-40 мкМ, что показано с помощью количественной ПЦР. Не пытаясь привязываться к какой-либо теории, эти данные подтверждают, что соединения, описанные в настоящем документе, могут вызывать апоптоз лейкозных клеток.

ПРИМЕР. Соединения, описанные в настоящем документе, являются эффективными в отношении резистентного лейкоза, включая ОЛЛ, резистентный к глюкокортикоидам. Дексаметазон-резистентные лейкозные клетки получают путем непрерывного культивирования TAIL7 клеток с 20 нМ дексаметазона, обеспечивая резистентность к дексаметазону (>1 мкМ). Соединения, описанные в настоящем документе, являются эффективными относительно лейкозных клеток, резистентных к дексаметазону, в дозах, сопоставимых с или выше, чем это необходимо относительно нативных TAIL7 клеток с помощью обычного анализа с использования АТФ (96 часов, в присутствии IL-7), как показано на Фиг. 2А и Фиг. 2B.

ПРИМЕР. Соединения, описанные в настоящем документе, являются эффективными относительно первичных лейкозных Т-ОЛЛ клеток, полученных от пациентов. Соединения, описанные в настоящем документе, являются эффективными относительно первичных лейкозных Т-ОЛЛ клеток, отобранных у пациентов с рецидивирующим ОЛЛ. Клетки отбирали у пациентов детского возраста, страдающих Т-ОЛЛ. У пациента P₃ диагностировали рецидивирующий ОЛЛ. Результаты для E3330 и соединений примеров 5а, 5с, и 5е с помощью обычного анализа АТФ (96 часов) относительно первичных клеток, отобранных у пациентов Р₃, P_R и С_B, показаны на Фиг. 3А и Фиг. 3B.

ПРИМЕР. Соединения, описанные в настоящем документе, вызывают апоптоз лейкозных клеток, включая лейкозные Т-ОЛЛ клетки. Используя обычный анализа Annexin V/PI апоптоза, Т-ОЛЛ клетки обрабатывали E3330 (25 мкМ или 40 мкМ), и сравнивали с контролем носителем в течение пяти дней (d1-d5). Результаты показаны на Фиг. 4.

ПРИМЕР. Соединения, описанные в настоящем документе, являются эффективными в снижении и/или блокировании трансактивации NF κВ. Соединения исследовали с помощью обычного репортерного анализа NF κВ в клетках. Смотри Kelley et al., Functional analysis of new and novel analogs of E3330 that block the redox signaling activity of the multifunctional AP endonuclease/redox signaling enzyme APE1/Ref-1. Antioxid Redox Signal 14, 1387-1401 (2011); Luo et al, Redox Regulation of DNA Repair: Implications for Human Health and Cancer Therapeutic Development. Antioxid Redox Signal 12, 1247-1269 (2010). Результаты для E3330 (•), и соединений примеров 5а (♦), 5c (■) и 5e , показаны на Фиг. 5.

ПРИМЕР. Соединения, описанные в настоящем документе, являются эффективными относительно лейкозных клеток, отобранных из костного мозга (BM), тимуса (Т) или селезенки (S). Клетки отбирали из костного мозга (BM), тимуса (Т) или селезенки (S) мышей с терминальный Notch (ICN)-индуцированным Т-ОЛЛ, что определено в обычном анализе, с использованием АТФ (жизнеспособность за 96 часов), лейкозных клеток, культивированных с IL-7. Мыши с лейкозом в терминальной стадии также проявляют высокий лейкоцитоз, спленомегалию и заболевание ЦНС. Ингибирование, наблюдаемое для E3330 при 25 или 50 мкМ, сравнивали с контролем носителем, как показано на Фиг. 6. Аналогичное ингибирование наблюдали в иммортализованных клеточных линиях Jurkat, SupTl, Molt4 и HPB-ОЛЛ, отобранных у пациентов с рецидивирующим Т-ОЛЛ, с IC₅₀ от 10-30 мкМ. Линии рецидивирующего Т-ОЛЛ (Jurkat, SupTl, MOLT4 и HPB-ОЛЛ), как сообщается, устойчивы к лечению глюкокортикоидами. Соединения, описанные в настоящем документе, также эффективны относительно клеток TAIL7, резистентных к дексаметазону, которые показывают снижение чувствительности к ингибиторам других лейкоз-ассоциированных сигнальных путей (таких как PI3K/Akt, mTOR), и к цитотоксическим химиотерапевтическим препаратам. Результаты для E3330 и соединений примеров 5а, 5с и 5е показаны на Фиг. 7А и Фиг. 7B, соответственно, в зависимости от концентрации (мкМ).

ПРИМЕР. Соединения, описанные в настоящем документе, потенцируют эффективность обычных препаратов для лечения лейкоза, таких как доксорубицин и STATTIC. Фиксированная доза (20 мкМ) E3330 (Е) потенцирует активность доксорубицина (Doxo) относительно клеток Т-ОЛЛ, как показано на Фиг. 8A, по сравнению с носителем (V) в обычном анализе с использованием АТФ. Фиксированная доза (20 мкМ) E3330 (Е) потенцирует активность STATTIC относительно клеток Т-ОЛЛ, как показано на Фиг. 8B, по сравнению с носителем (V) в обычном анализе с использованием АТФ. И доксорубицин, и STATTIC являются лекарственными средствами первой линии для лечения Т-ОЛЛ.

ПРИМЕР. Мышиная модель с рецидивирующим Т-клеточным лейкозом. Использовали Notch-индуцированную модель с Т-клеточным лейкозом с рецидивом заболевания после лечения дексаметазоном. Лейкозные Т-клетки первоначально реагировали на дексаметазон. Существует два терапевтических режима: (i) режим рецидива, с использованием соединений, описанных в настоящем документе, на мышах с рецидивом лейкоза после индукции ремиссии дексаметазоном; и (ii) с использованием соединений, описанных в настоящем документе, а также дексаметазона в качестве режима терапии первой линии, для оценки эффективности двойной терапии для предотвращения рецидива заболевания.

Трансплантация Lin-кроветворных клеток-предшественников/стволовых клеток (HPSC), трансдуцированных ICN, индуцирует Т-клеточные неоплазмы в зависимости от дозы. BM HPSC, отобранные у мышей линии C57BL/6 (CD45.2+) очищали, трансдуцировали вирусными частицами MSCV-ICN/GFP (ICN), и сортировали для экспрессии GFP выражения с помощью FACS. Донорские клетки (20000) вводили внутривенно летально облученным (10 Грей) 8-недельным реципиентным мышам линии BoyJ (CD45.1+), с примесью сингенной радиозащитной дозы клеток костного мозга с общим количеством 1×10⁵. Использование Lin-/HPSC в качестве донорских клеток, прогрессирование лейкоза хорошо коррелирует с количеством лейкоцитов, циркулирующих бластных клеток и гепатоспленомегалии. Большинство клеток у мышей с лейкозом представляют собой GFP+ и незрелые DP (CD4+CD8+) Т-клетки. Развитие лейкоза у мышей (WBC(лейкоциты)>20; >2% CD45.2+/DP клетки в PB (периферическая кровь)) регистрировали в исследованиях (i) и (ii).

(i) Режим лечения рецидивирующего лейкоза. Развивающийся лейкоз у мышей обрабатывали сначала дексаметазоном (интраперитонеальное введение, 15 мг/кг, 5d плюс 2d покой, в течение 2 недель) для индукции ремиссии опухоли. При подтверждении рецидива лейкоза (>2% ОЛЛ клеток в периферической крови), мышей обрабатывали тестируемым соединением (перорально, 50 мг/кг/день, дважды в сутки, три цикла, включающие 5d лечение и 2d отдыха), или композицией носителя в качестве контроля.

(ii) Режим профилактики рецидива с исследуемым соединением плюс дексаметазон. Мышей с развивающимся лейкозом (>2% бласты) случайным образом распределяли на следующие группы для лечения: (а) исследуемое соединение плюс дексаметазон, двойной режим; (b) только дексаметазон; (с) исследуемое соединение; (d) контроль носителями. Дозы, способы введения и продолжительность лечения для соответствующих препаратов являлись такими, как указано выше.

Оценка лейкемогенеза и прогрессирование заболевания. Осуществляли ежедневный контроль животных, еженедельно отбирали кровь для определения количества лейкоцитов и клеток ОЛЛ в периферической крови, и умертвляли при агонии. Мышей, которые не показывали признаков рецидива лейкемии после лечения, усыпляли и анализировали в d120-d150 после трансплантации (или в 10-12 недель после последнего режима терапии).

Периферическая кровь: Появление лейкозного клона будут оценивать по количеству лейкоцитов и увеличению лимфоидных клеток с помощью проточной цитометрии. Донорские лейкозные клетки подтверждают в периферической крови и костном мозге посредством CD45.1/CD45.2 и DP окрашивания.

Костный мозг: клетки костного мозга, отобранные из бедренной кости, исследуют на GFP, IL-7Rα/CD127, Т-клеточные маркеры (CD4, CD8, CD2, CD7, CD3), и оставшиеся нормальные гемопоэтические стволовые клетки ((HSC; c-Kit, Sca-1 плюс линейные маркеры). Также с помощью внутриклеточного окрашивания оценивают экспрессию N1 в GFP+ клетках. Иммуноблоттинг (IB) и кПЦР (qPCR) будут выполнять в отношении лейкозных клеток (или BM из контрольных условий) для Notch1, Notch-IC, Hes1, Hes5 и Deltex.

Лимфогематопоэтические органы: большая берцовая кость, селезенка, печень, тимус, лимфатические узлы и патологические массы обрабатывают для H&E окрашивания и гистологического исследования. Выполняют IHC (иммуноэнзимогистохимию) Т-клеточных маркеров.

Заболевание ЦНС: Как сообщается, модели с T-ОЛЛ могут развиваться с инфильтрацией ЦНС, которая была связана с рецидивом лейкоза. Не пытаясь привязываться к какой-либо теории, полагают, что соединения, описанные в настоящем документе, могут преодолеть гемато-энцефалический барьер, и эффективно нацеливаться на клетки глиобластомы. Мышей оценивали на наличие и степень лейкозной инфильтрации ЦНС, по сравнению с их соответствующими контролями.

Ожидаемые результаты исследования: (i) время ремиссии лейкемии после терапии (режим лечения рецидива; двойной режим лечения); (ii) количество лейкозных бластных клеток в периферической крови; (iii) степень заболевания костного мозга в терминальной стадии или при умерщвлении мыши (если отсутствует рецидив лейкоза); (iv) расширение инфильтрации паренхиматозных органов, включая заболевание ЦНС; (V) общая выживаемость.

ПРИМЕР. Модели ксенотрансплантата, рецидивирующего не поддающийся лечению ОЛЛ у детей. Оценивали противолейкозную эффективность Ref-1 редокс блокады посредством соединений, описанных в настоящем документе, на ксенотрансплантатных моделях ОЛЛ человека. На первом этапе использовали ксенотрансплантатную модель с клетками TAIL7 для анализа терапевтической эффективности в исследуемых соединениях в качестве монотерапевтического средства, и в режимах лечения с двумя агентами, объединяющими исследуемое соединение с агентами, используемыми в качестве химиотерапевтического средства первой линии для лечения Т-ОЛЛ (винкристин; доксорубицин; дексаметазон) и рецидивирующего Т-ОЛЛ (метотрексат). На втором этапе использовали оптимальные режимы лечения (монотерапия с использованием E3330; E3330 в режиме с двумя агентами) на ксенотрансплантатных моделях, полученных с лейкозными клетками, отобранными у детей с рецидивирующим Т-клеточным ОЛЛ (5 различных пациентов). Такие модели детского ОЛЛ использовали в иммунодефицитных мышах (NOD/SCID: лейкоз в терминальной стадии, в 70-120d; NSG: лейкоз в терминальной стадии в дни 28-35 с клетками TAIL7), включая образцы, полученные от рецидивирующего и детского ОЛЛ.

Ксенотрансплантаты детского рецидивирующего Т-клеточного лейкоза: клетки TAIL7 или клетки пациентов с рецидивирующим Т-ОЛЛ (высокая насыщенность клетками; ≥90% поражение костного мозга) будут использовать для ксенотрансплантатов; образцы пациентов будут предоставлены Dr. Batra в соответствии с правилами IRB (комиссия по биомедицинской этике). Лейкозные клетки (1×10⁶ клеток TAIL7; 2-3×10⁶ клеток пациента/мыши) будут трансплантированы IV мышам NSG (возраст 7-9 недель). 19,24 Мыши будут еженедельно подвергаться мониторингу с помощью проточной цитометрии на предмет присутствия человеческих бластных клеток в периферической крови. Животные, демонстрирующие >2% циркулирующих лейкозных бластных клеток, будут случайным образом распределены на экспериментальные группы, и начнется лечение.

Терапевтические режимы лечения. Будут оценены следующие режимы лечения:

(i) Монотерапия с использованием исследуемого соединения. Мышей обрабатывают исследуемым соединением (перорально; 50 мг/кг/день; дважды в сутки) в течение трех циклов (5d лечение и 2d отдыха) или композицией носителя в качестве контроля.

(ii) Исследуемое соединение плюс двойной режим лечения с использованием химиотерапевтических лекарственных средств. Мышей обрабатывали по двойной схеме лечения, по сравнению с соответствующими монорежимами лечения (отдельные лекарственные средства, используемые в некоторых дозах, в течение того же эксперимента). В двойных режимах лечения, исследуемое соединение (перорально, 50 мг/кг/день; дважды в сутки) исследовали в сочетании с: (а) дексаметазоном (интраперитонеальное введение, 15 мг/кг, Пн-Пт, в течение 2 недель); (b) винкристином (интраперитонеальное введение, 0,5 мг/кг каждые 4 дня в течение 3 недель); (с) доксорубицином (интраперитонеальное введение, 1 мг/кг/день каждые 4 дня в течение 3 недель); метотрексатом (интраперитонеальное введение, 5 мг/кг, Пн-Пт в течение недели 1 и недели 3 терапии). Такие лекарства/дозы были ранее согласованы в ксенотрансплантатных моделях c ОЛЛ у детей. Более эффективный режим или режимы лечения используют во 2-й фазе исследования ксенотрансплантатов пациентов с T-ОЛЛ.

Оценка прогрессирования лейкоза. Осуществляли мониторинг животных на предмет появления лейкоза (высокий уровень лейкоцитов, наличие CD45+ клеток человека, Т-клеточных маркеров CD2/CD7, CD4/CD8. Мышей умерщвляли, когда демонстрировали резко выраженный лейкоз, либо когда находились в состоянии агонии, либо на d60 после завершения терапии, если не обнаруживаются клетки ОЛЛ человека в периферической крови. Выполняют фенотипические анализы клеток костного мозга, отобранных из бедренной кости (huCD45, CD2, CD4/CD8 Abs; muCD45,) а также окрашивание H&E и анализы большеберцовой кости, селезенки, печени, лимфатических узлов и аномальных масс.

Ожидаемые результаты исследования: (i) время ремиссии после терапии; (ii) бессобытийная выживаемость после курса лечения; (iii) прогрессирование лейкоза в группе, которую обрабатывали лекарственным средством, в сравнении с контрольной группой, с кривыми общей выживаемости; (iv) количество лейкозных бластных клеток в терминальной стадии (костный мозг); (v) уровень инфильтрации паринхиматозного органа. Будут выполнять прямые сравнения группы с двойной терапией и группы с монотерапией.

ПРИМЕР. E3330 и соединение примера 5с оценивали на ксенотрансплантатной модели в течение одного 5-ти дневного цикла. Мышам NSG (n=5/группа) трансплантировали не поддающиеся лечению Т-ОЛЛ клетки. Через 14 дней после трансплантации, животных обрабатывали ингибитором редокс потенциала Ref-1с соединением примера 5с (25 мг/кг/день, дважды в сутки) или E3330 (50 мг/кг/день дважды в сутки). В конце лечения, определяли концентрацию человеческих клеток CD45+ в периферической крови (РВ) и в костном мозге (ВМ). Животных умерщвляли для анализа. Наблюдали значительное снижение циркулирующих лейкозных бластных клеток после одного цикла лечения с помощью исследуемого соединения (5-ти дневный режим лечения). Анализ при завершении короткого режима лечения (1 цикл) показал, что лечение ингибитором редокс потенциала Ref-1с E3330 или 5с привел к значительному сокращению циркулирующих бластных клеток (р<0,05) по сравнению с группой носителя, а также заметное снижение концентрации CD45+ в костном мозге умерщвленных животных, как показано на Фиг. 9А и Фиг. 9B, соответственно.

ПРИМЕР. Ref-1 экспрессируется лейкозными Т-клетками в злокачественной опухоли костного мозга, и его экспрессия значительно повышается в лейкозных клетках, резистентных к лекарственным препаратам. Иммуноблот (IB) показывает экспрессию Ref-1 в клетках TAIL7 (от рецидивирующего ОЛЛ), линиях иммортализованных клеток Т-ОЛЛ (SupT1, Jurkat, MOLT4) и первичных клетках Т-ОЛЛ, отобранных у пациентов, включая пациентов с рецидивом заболевания. Активация PI3K необходима для интерлейкин 7-опосредованной жизнеспособности, пролиферации, использования глюкозы и роста клеток Т-клеточного острого лимфобластного лейкоза. Смотри J Exp Med 200, 659-669 (2004). Иллюстративная Т-клеточная линия IL-7-зависимого лейкоза у человека описана в Blood 103, 1891-1900 (2004).

ПРИМЕР. Вестерн-блот анализ. Для клеточных лизатов, клетки собирают, лизируют в буфере RIPA (Santa Cruz Biotechnology; Santa Cruz, CA), и белок оценивали количественно и подвергали электрофорезу. Выделяли ядерные и цитоплазматические экстракты, используя обычный метод (см, Jackson, (2006)). Выполняли иммуноблоттинг с использованием следующих антител: APE1 (Novus Biologicals; Littleton, CO), STAT1, STAT3, STAT5, p-STAT1(Y701), p-STAT3(Y705), p-STAT5 (Y694) (Cell Signaling; Danvers, MA), and tubulin (Sigma Aldrich) or GAPDH (Santa Cruz).

ПРИМЕР. Метод сдвига электрофоретической подвижности (EMS). EMSA проводили, как описано ранее (Georgiadis, (2008) #15789) с некоторыми модификациями. Вкратце, tor анализ по методу supershift, 6 мкг антитела STAT3 (Santa Cruz Biotechnology, Inc, Santa Cruz, CA) предварительно инкубировали с 15 мг ядерного экстракта из клеток PaCa-2 (обработанные 50 нг/мл IL-6 в течение 2 часов в 2% сыворотки), затем 1 мкг/мл поли(dI-dC)•поли(dI-dC) (Amersham Biosciences, Piscataway, NJ) и 0,1 пмоль 5ʹHEX меченного двухцепочечного ДНК-олигонуклеотида (Midland Certified реагента Компания, Midland, Техас), содержащего консенсусную последовательность STAT3-прямых повторов, в течение 15 мин (Preston, (2005)). Для исследования взаимодействия APE1 с STAT3, чистый белок APE1 восстанавливают с помощью 2 мМ DTT (дитиотреитола) в течение 10 мин и разбавляют до конечной концентрации 4 мг посредством 0,4 мМ DTT в PBS. Восстановленный APE1 добавляют к 15 мг ядерного экстракта, как описано выше. Конечная концентрация DTT в окислительно-восстановительных реакциях составляет 0,04 мМ. Для проведения EMSА с лечением с помощью соединения, описанного в настоящем документе, такого как E3330 или примеров 5, соединение предварительно инкубируют с чистым восстановленным APE1 в реакционном буфере для EMSA в течение 30 мин с последующим добавлением 3 мкг ядерного экстракта.

ПРИМЕР. Максимально переносимая доза (MTD). Соединения, описанные в настоящем документе, демонстрируют широкий терапевтический диапазон. Соединения примеров E3330, 5а, 5с и 5e демонстрируют хорошую переносимость пероральных доз до 150-200 мг/кг/день, и как с протоколом однократного дозирования, так и протоколом многократного дозирования (исследования в течение 2 недель). Однократная MTD для всех соединений была выше, чем 250 мг/кг, а многократная MTD была выше, чем 200 мг/кг. Животных наблюдали в течение 14 дней после окончания дозирования. Не наблюдали значительное снижение веса. Аналогичные результаты были получены с интраперитонеальным дозированием. В каждом случае, дозы 150-200 мг/кг/день, как ожидается, гораздо выше, чем те, которые используются при лечении заболеваний, описанных в настоящем документе.

ПРИМЕР. Биохимия. Соединения, описанные в настоящем документе, в том числе E3330, и соединения примеров 5а, 5с и 5e, не оказывают воздействие на состояние активации других сигнальных путей, участвующих в Т-ОЛЛ. Этот результат отличается от того, который наблюдается с другими соединениями, например PI3K/Akt или mTOR. Соединения, описанные в настоящем документе, включая E3330 и соединения примеров 5а, 5с и 5e, не оказывают воздействие на состояние фосфорилирования и ядерную транслокацию STAT3. Вместо этого, соединения, описанные в настоящем документе, включая E3330 и соединения примеров 5а, 5с и 5e, нарушают ДНК связывания и активность транскрипции целевого TF Ref-1, включая STAT3, AP-1 и NF-kB).

ПРИМЕРЫ СОЕДИНЕНИЙ

ПРИМЕР 1. Следующие соединения по примерам описаны далее, и они могут быть получены, как раскрыто в схемах, представленных выше.

ПРИМЕР 2a. В 2 л 3-горлую колбу, снабженную механической мешалкой и пористой трубкой для подачи газовой дисперсии, помещали 2-йод-3-гидрокси-1,4-нафтохинон (18 г, 0,06 моль) и метакриловую кислоту (12,9 г, 0,15 моль) в растворе карбоната калия (41,4 г, 0,3 моль) в воде (600 мл). Реакционную смесь перемешивали и продували аргоном в течение 30 мин. Добавляли ацетат палладия(II) (0,67 г, 0,003 моль), и продувку продолжали в течение еще 30 мин. Полученную смесь нагревали на масляной бане при температуре 100°C. Анализ ВЭЖХ показывал, что реакция завешалась через 1 час. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и отфильтровывали черный металлический Pd. Фильтрат помещали в 2 л 3-горлую колбу, снабженную механической мешалкой, охлаждали на бане лед-метанол и подкисляли 50%-ой H₃PO₄ (160 мл) до pH =2. После перемешивания в течение 1 часа отделяли твердый продукт, промывали водой (1 л), смесью 20%-ого ацетона в воде (500 мл) и сушили на воздухе с получением 12,6 г (81%) 2a в виде твердого вещества горчичного цвета. Анализ ВЭЖХ показал степень чистоты 98%. ЯМР (d4-MeOH: d6-ДМСО; 1:2) δ 7,6-8,2 (м, 4H), 7,3 (кв, 1H), 4,7 (ушир. с, 2H), 1,8 (д, 3H).

ПРИМЕР 2b. Подобным образом 2b был получен с выходом 72%. ЯМР (d6-ДМСО) δ 12,6 (ушир. с, 1H), 11,65 (ушир. с, 1H), 8,0 (м, 2Н), 7,8 (м, 2H), 7,15 (с, 1H), 2,1 (м, 2Н), 1,4 (м, 2H), 0,8 (м, 3H).

ПРИМЕР 3a. К суспензии 2a (3,61 г, 0,014 моль) и ДМФ (0,1 мл) в дихлорметане (75 мл) добавляли оксалилхлорид (17,5 мл 2M в CH₂Cl₂, 0,035 моль) в течение 20 мин при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и затем концентрировали при пониженном давлении с получением 4,1 г (100%) 3a в виде твердого вещества коричневого цвета. Данный твердый продукт использовали на следующей стадии напрямую. ЯМР (CDCl₃) δ 7,8-8,2 (м, 2H), 7,7-7,8 (м, 2H), 7,65 (кв, 1H), 1,9 (д, 3H).

ПРИМЕР 3b. Подобным образом был получен 3b. ЯМР (CDCl₃) δ 7,8-8,2 (м, 2H), 7,7-7,8 (м, 2H), 7,4 (с, 1Н), 2,1-2,4 (м, 2H), 1,2-1,7 (м, 2Н), 0,6-1,0 (м, 3H).

ПРИМЕР 4a. К раствору сырого 3a (8,85 г, 0,03 моль) в дихлорметане (50 мл) добавляли раствор гидрохлорида диметиламина (3,67 г, 0,945 моль) и диизопропиламин (11,6 г, 0,09 моль) в дихлорметане (50 мл) при комнатной температуре в течение 45 мин. Анализ ВЭЖХ спустя 15 мин показал, что реакция была завершена. Реакционную смесь промывали водой (100 мл), 1M HCl (2×100 мл), насыщенным солевым раствором (100 мл), фильтровали через фильтровальную бумагу 1PS и концентрировали при пониженном давлении с получением 8,8 г твердого вещества глубокого красного цвета. Твердый продукт подвергали флеш хроматографии на силикагеле (150 г), на верху упакованном безводным сульфатом натрия (20 г), с помощью гексана. Колонку элюировали 125 мл порциями 15% этилацетата в гексане для фракций 1-4, 25% этилацетата в гексане для фракций 5-8, 35% этилацетата в гексане для фракций 9-16, и 50% этилацетата в гексане для фракций 17-32. Все фракции контролировали с помощью ТСХ (этилацетат:гексан; 1:1) и некоторые фракции с помощью ВЭЖХ. Продукт элюировали во фракции 21-30. Их объединяли и концентрировали при пониженном давлении с получением 6,5 г твердого вещества оранжевого цвета. Этот твердый продукт суспендировали в 15% этилацетате в гексане (50 мл) и перемешивали в течение 15 мин. Твердый продукт собирали и сушили на воздухе с получением 6,1 г (67%) 4a в виде твердого вещества оранжевого цвета. Анализ ВЭЖХ показал степень чистоты 99%. ЯМР (CDCl₃) δ 7,9-8,2 (м, 2H), 7,5-7,8 (2H), 6,5 (кв, 1H), 3,1 (ушир. с, 6H), 1,9 (д, 3H).

ПРИМЕР 4b. Подобным образом был получен 4b (67%). ЯМР (CDCl₃) δ 7,9-8,2 (м, 2H), 7,6-7,8 (м, 2H), 6,9 (кв, 1H), 6,3 (ушир. с, 1H), 2,9 (д, 3H), 1,9 (д, 3H).

ПРИМЕР 4c. Подобным образом был получен 4c (62%). ЯМР (CDCl₃) δ 8,1-8,3 (м, 2H), 7,7-7,8 (м, 2H), 6,1 (с, 1H), 3,6 (ушир. д, 4H), 2,2 (т, 2H), 1,45 (м, 2H), 1,25 (ушир. с, (6H), 0,9 (т, 3H).

ПРИМЕР 4d. Подобным образом был получен 4d (73%). ЯМР (CDCl3) δ 8,85 (с, 1H), 8,25 (м, 2H), 8,1 (м, 2H), 6,65 (ушир. с, 1H), 3,9 (с, 3H), 2,2 (т, 2H), 1,5 (м, 2H), 0,85 (т, 3H).

ПРИМЕР 4e. Подобным образом был получен 4e (59%). ЯМР (CDCl₃) δ 7,9-8,2 (м, 2H), 7,6-7,8 (м, 2H), 6,1 (с, 1H), 3,2 (ушир. д, 2H), 2,3- (т, 2H), 1,2-1,7 (м, 2H), 0,9 (т, 3H).

ПРИМЕР 5a. К раствору 4a (4,25 г, 0,014 моль) в метаноле (100 мл) добавляли раствор метоксида натрия в метаноле (4,2 мл 5M) одной порцией в атмосфере аргона. Реакционную смесь подкисляли до pH=3, используя 3M HCl (3,5 мл), и затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в этилацетате (150 мл), промывали водой (2Ч75 мл, насыщенным солевым раствором (1Ч100 мл), фильтровали через фильтровальную бумагу 1PS и концентрировали при пониженном давлении с получением 4,2 г масла, которое отверждалось. Это твердое вещество растирали в гексане (50 мл) в течение 30 мин, и твердый продукт собирали и сушили на воздухе с получением 3,8 г (86%) 5a (86%) в виде твердого вещества светло-оранжевого цвета. Анализ ВЭЖХ показал степень чистоты 100%. ЯМР (CDCl₃) δ 8,1 (м, 2H), 7,8 (м, 2H), 6,3 (с, 1H), 4,15 (с, 3H), 3,2 (ушир. д, 6H), 1,8 (с, 3H).

ПРИМЕР 5c. Подобным образом был получен 5c (96%). Анализ ВЭЖХ показал степень чистоты 99%. ЯМР (CDCl₃) δ 8,15 (м, 2H), 7,75 (м, 2H), 6,2 (с, 1H), 4,1 (с, 3H), 3,6 (ушир. д, 4H), 2,2 (т, 2H), 1,4 (м, 4H), 1,25 (ушир. д, 4H), 0,85 (т, 3H).

ПРИМЕР 5d. Подобным образом был получен 5d (83%). Анализ ВЭЖХ показал степень чистоты 99%. ЯМР (CDCl₃) δ 8,1 (м, 2H), 7,75 (м, 2H), 6,65 (с, 1H), 4,15 (с, 3H), 3,9 (, 3H), 2,2 (т, 2H), 1,45 (м, 2H), 0,85 (т, 3H).

ПРИМЕР 5e. Подобным образом был получен 5e. Анализ ВЭЖХ показал степень чистоты 100%. ЯМР (CDCl₃) δ 8,15 (м, 2H), 7,8 (м, 2H), 6,2 (с, 1H), 4,15 (с, 3H), 3,2 (ушир. д, 6H), 2,2 (т, 2H), 1,45 (м, 2H), 0,9 (т, 3H).

СРАВНИТЕЛЬНЫЙ ПРИМЕР 5b. Подобным образом был получен 5b (94%). Анализ ВЭЖХ показал степень чистоты более чем 93%. ЯМР (CDCl₃) δ 8,1 (м, 2H), 7,75 (м, 2H), 7 (с, 1H), 6,1 (ушир. с, 1H), 4,1 (с, 3H), 2,95 (д, 3H), 1,85 (с, 3H).

В каждый из вышеизложенных примеров, а также во всем данном описании следует учитывать, что геометрия двойной связи может представлять (E), (Z) или любую их смесь, если не указано иное. Например, (Z)-5h соответствует (Z)-изомеру, и (Е)-5h соответствует (Е)-изомеру двойной связи.

Настоящая группа изобретений относится к медицине, а именно к онкологии, и касается лечения лейкемии. Для этого вводят эффективное количество 3-[(5-(2,3-диметокси-6-метил-1,4-бензохиноил)]-2-нонил-2-пропеновой кислоты (E3330) или ее фармацевтически приемлемой соли или сольвата в качестве монотерапии или в комбинации с другими противолейкозными средствами. Это обеспечивает эффективное лечения различных форм острого лимфобластного лейкоза за счет селективного ингибирования редокс функции Ref-1 лейкозных клеток. 2 н. и 1 з.п. ф-лы, 9 ил., 5 пр.

1. Применение 3-[(5-(2,3-диметокси-6-метил-1,4-бензохиноил)]-2-нонил-2-пропеновой кислоты (E3330) или ее фармацевтически приемлемой соли или сольвата для получения лекарственного средства для лечения лейкемии, выбранной из группы, состоящей из детского острого лимфобластного лейкоза (ОЛЛ), младенческого ОЛЛ, Т-клеточного ОЛЛ (Т-ОЛЛ), рецидивного ОЛЛ, не поддающегося лечению ОЛЛ и резистентного к глюкокортикоидам ОЛЛ.

2. Применение по п.1, в котором лекарственное средство представляет собой композицию, которая дополнительно содержит один или несколько носителей, разбавителей или наполнителей или их комбинацию.

3. Применение 3-[(5-(2,3-диметокси-6-метил-1,4-бензохиноил)]-2-нонил-2-пропеновой кислоты (E3330) или ее фармацевтически приемлемой соли или сольвата в комбинации с одним или несколькими противолейкемическими химиотерапевтическими средствами, выбранными из группы, состоящей из дексаметазона, винкристина, доксорубицина и метотрексата, для лечения лейкемии, выбранной из группы, состоящей из детского острого лимфобластного лейкоза (ОЛЛ), младенческого ОЛЛ, Т-клеточного ОЛЛ (Т-ОЛЛ), рецидивного ОЛЛ, не поддающегося лечению ОЛЛ и резистентного к глюкокортикоидам ОЛЛ.