СРЕДСТВО ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ МАСТИТА У КОРОВ И СПОСОБ ЕГО ПРИМЕНЕНИЯ Российский патент 2019 года по МПК A61K9/12 A61K31/25 A61K33/00 A61K31/45 A61K36/15 A61K31/728 A61K31/07 A61K31/355 A61K31/375 A61K31/20 A61K31/201 A61K31/202 A61P31/04 

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к ветеринарии, и может быть использовано для лечения мастита у животных.

Под маститом понимают воспаление молочной железы у млекопитающих, развивающееся под воздействием факторов внешней среды, биологических факторов и факторов внутренней среды (Студенцов А.П., Шипилов B.C. и др. Ветеринарное акушерство, гинекология и биотехника размножения. М.: Колос, 1999, с. 357-369; Ивашура А.И. Система мероприятий по борьбе с маститами коров. - М.: Росагропромиздат, 1991, с. 168-201).

Воспаление вымени в России, как и во многих странах мира с развитым молочным скотоводством, занимает ведущее место среди заболеваний коров и наносит большой экономический ущерб. Оно регистрируется у 30, а в энзоотических случаях до 80 процентов дойных коров. Экономический ущерб, причиняемый маститом, складывается из потерь молочной продуктивности, ухудшения питательных и технологических свойств молока, а также сокращения срока службы коров, заболеваемости телят, затрат на лечение и других факторов. Поэтому разработка наиболее эффективных средств и методов борьбы с маститом коров и их внедрение в технологию молочного скотоводства является большим резервом в повышении продуктивности животноводства и качества продуктов питания для населения.

К факторам внешней среды, способствующим возникновению и развитию мастита, относятся механические, термические и химические. Основными же факторами являются техническое несовершенство доильных установок и нарушение технологии машинного доения, а также нарушение оптимальных условий содержания и кормления коров.

При нарушении ветеринарно-санитарных правил по уходу за доильными установками и гигиены доения, а также снижении общей устойчивости организма животного и молочной железы происходит колонизация микроорганизмами верхушки соска и наружного отверстия соскового канала. Затем микроорганизмы проникают в сосковую и надсосковую цистерны (синусы) и вызывают инфекционный процесс различной степени тяжести от субклинического до клинически выраженного воспаления различных форм. Чаще всего возбудителями мастита являются грамположительные микроорганизмы (Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiac и др.), а также грамотрицательные (Е. coli, Klebsiella и др.) и грибы. Поэтому в комплексе мер борьбы с маститом основное значение придается применению специальных противовоспалительных препаратов, которые обладают антибактериальным действием в отношении возбудителей заболеваний вымени.

Для лечения маститов применяются препараты, содержащие антисептические средства (йод, риванол и др.), химиотерапевтические средства, такие, как сульфаниламидные препараты, антибиотики, нитрофураны, хинолоны и др. (RU 2180559, 2002). В частности, в качестве антисептических средств используют препараты на основе йода (септогель, лазин, синтайод), растворы ихтиола и формалина, препараты ртути (RU 2180558, 2002; RU 2239422, 2004; Гавриш В.Г., Егунова А.В., Семенов С.В., Новикова С.В. Септогель для лечения коров при мастите // Ветеринария, 2000, 6, с. 33-36). Так, предполагается использовать против мастита (RU 2401657, 2010) внутрипистернальное введение лекарственного препарата, содержащего 40% формалин, янтарную кислоту, стимулятор Дорогова и гелеобразователь. Препарат вводят в дозе 10,0 мл ежедневно до полного выздоровления.

Недостатком таких препаратов является неизбирательное действие на микроорганизмы, что приводит к гибели полезных микроорганизмов, а также то, что при их воздействии нередко отмечают раздражение эпителий молочных ходов и альвеол, что может привести к гипогалактии и агалактии леченых долей.

Известны такие химиотерапевтические препараты на основе антибиотиков, как Мастисан А, содержащий в своем составе калиевую или натриевую соль бензилпенициллина, стрептомицин, норсульфазол или сульфадимезин, суспензированные в растительном масле; Мастисан Б для лечения мастита, содержащий сульфат неомицина, сульфадимезин, метилурацил, вазелиновое масло и дистиарат полиглицерина; Мастисан Е, содержащий эритромицин, сульфадимезин, полиэтилсилоксановую жидкость (ПЭС) с эмульгатором в качестве масляной основы; Мастицид, содержащий калиевую или натриевую соль пенициллина, сульфат стрептомицина, норсульфазол, сульфадимезин, подсолнечное или вазелиновое масло и эмульгатор в качестве масляной основы, а также мастаэрозоль, дифурол-А, менэрсин А, мастивален, лактопен, нотил, аэродит, мастикур, суперсептил и другие, также содержащие антибиотики, сульфаниламиды и производные нитрофурана (Кленова И.Ф., Яременко Н.А. Ветеринарные препараты в России. Справочник. - М.: Сельхозиздат, 2000, 544 с.; Кленова И.Ф., Илюхина И.Н., Написанова Л.А. Зарубежные ветеринарные препараты в России. Справочник. М.: "Компания Эверс", 1999, 314 с.; Ветеринарные препараты. Справочник / Под ред. А.Д. Третьякова. - М.: Агропромиздат, 1988 г.; Гончаров В.П., Карпов В.А. и др., Профилактика и лечение маститов животных - М.: Россельхозиздат, 1987, 174 с. И т.д.)

Общим недостатком известных препаратов является низкая терапевтическая эффективность, появление при многократном использовании антибиотиков антибиотикорезистентных штаммов, а также нестабильность препаратов при хранении (антибиотики в водной фазе достаточно быстро теряют свою активность, сульфаниламиды выпадают в осадок, большинство препаратов в виде суспензии при хранении расслаиваются, а растительные масла окисляются).

Наиболее близким к заявляемому изобретению является композиция «Вилпран-вет» (RU 2605631, 2016) для профилактики маститов у крупного рогатого скота, содержащая глицерин, азотнокислый церий, триэтиленгликоль, полиэтиленгликоль, масло расторопши, масло облепихи, этиловый спирт, фурацилин, гидроокись калия, воду очищенную при следующем соотношении ингредиентов, мас. %: глицерин 6,0-7,0; азотно-кислый церий 2,0-2,5; триэтиленгликоль 50,0-55,0; полиэтиленгликоль 5,0-25,0; масло расторопши 1,0-2,0; масло облепихи 2,0-4,0; этиловый спирт 4,0-6,0; фурацилин 0,2-0,4; гидроокись калия 0,5-0,6; вода очищенная - остальное. «Вилпран-вет» представлял собой однообразную массу от белого до кремового цвета, которая легко выдавливается из тубы и затем наносится на кожу вымени. Композицию используют путем смазывания ею вымени и сосков животного после доения 1-2 раза в неделю.

Существенным недостатком композиции являлось кратковременность действия, связанная с недостаточным бактериостатическим воздействием на микроорганизмы, а также нестабильность при хранении, приводящая к расслоению мази и потере ее эффективности. Недостатком способа применения мази является неравномерность ее нанесения на поверхность вымени, определяемая субъективным фактором (особенностями доярки), необходимость длительного контакта препарата до полного впитывания, недостаточное проникновение мази в каналы сосков.

Задачей, решаемой авторами, являлось создание более эффективной композиции, а именно, обладающей повышенными бактериостатическими характеристиками и проникающей способностью, а также позволяющей использовать более надежный и удобный метод нанесения средства на вымя животного в форме аэрозоля.

Технический результат достигался созданием средства, содержащего наряду с растворимой солью редкоземельного элемента (далее СРМ), глицерином, триэти-ленгликолем, этиловым спиртом, гидроокисью калия и водой дополнительно гиалуроновую кислоту, масло кедрового ореха и витамины при следующем соотношении ингредиентов, мас. %:

триэтиленгликоль 45,0-60,0 соль редкоземельного элемента 1,2-1,8 глицерин 15,0-20,0 этиловый спирт 3,0-4,5 гидроксид калия 0,3-0,5 гиалуроновая кислота 2,0-6,0 масло кедрового ореха 0,7-1,2 витамины 1,0-4,0 вода дистиллированная - остальное.

В качестве солей редкоземельных металлов средство содержит растворимые соли лантана или церия, например, нитраты или хлориды, а в качестве витаминов оно содержит витамины А, Е, F, С.Оптимально витамины в средстве используются в следующих концентрациях (% масс): витамин А - 0,05-0,1; смесь витаминов Е и F- 1,3-1,5, витамин С - 0,6-1,2.

Полученное средство получило условное наименование «ВИЛМАСТ». Основной особенностью заявляемого средства является замена полиэтиленгликоля на гиалуроновую кислоту в концентрациях в несколько раз превышающую обычно используемую в мазях, что обеспечило более глубокое проникновение в ткани вымени и фиксацию ионов редкоземельного металла, обеспечивающих защитное бактерицидное и ранозаживляющее действие в каналах соска и цистернах вымени, особенно в наиболее опасный для заражения микроорганизмами период - 2 часа после дойки, когда каналы остаются открытыми.

При этом корректировка концентрации иных компонентов состава, как показали проведенные эксперименты существенно повысило стабильность композиции, как в форме аэрозоля так и при хранении. Выход концентрации таких ингредиентов, как триэтиленгликоль, глицерин и этиловый спирт за пределы заявляемых концентраций нарушает ее стабильность. Снижение концентрации СРМ, масла кедрового ореха и витаминов относительно заявляемых снижает эффективность препарата, использование их в более высокой концентрации экономически нецелесообразно. Введение гидроксида калия осуществляется в концентрации, обеспечивающей нейтральный рН композиции.

Техническим результатом в отношении способа являлось проведение профилактики и лечения мастита вышеописанным средством «ВИЛМАСТ» в виде аэрозоля с размером частиц менее 100 мкм. «ВИЛМАСТ» в лечебно-профилактических целях наносится на ткани вымени животного не менее одного раза в сутки путем 2-3 распылений сразу после доения (когда каналы соска еще открыты).

Средство «ВИЛМАСТ» получали растворением СРМ в триэтиленгликоле при 40-60°С, после чего при интенсивном перемешивании вносят гиалуроновую кислоту, глицерин, масло кедрового ореха, витамины. Полученную смесь для дальнейшего использования помещают в аэрозольные баллончики с соплом, отрегулированным для создания аэрозоля с размером частиц менее 100 мкм.

Исследования «ВИЛМАСТа» показали его высокую эффективность в отношении бактерицидного, бактериостатического и ранозаживляющего действия, а также полную безвредность и физиологичность для животного. Препарат не оказывает воздействия на свойства молока и молокопродуктов, получаемых на его основе. По сравнению с традиционными препаратами время лечения серозного мастита уменьшается в среднем в два раза. Срок хранения средства без изменения свойств не менее 3 лет.

Предлагаемая схема профилактики и лечения экономична, удобна в применении, в частности, позволяет обрабатывать труднодоступные места и облегчает труд доярок по обработке вымени лактирующих коров.

Сущность и преимущества заявляемой группы изобретений иллюстрируются следующими примерами.

Пример 1. Противомаститное средство «ВИЛМАСТ» готовили следующим образом. Навеску азотнокислого церия или хлорида лантана растворяли в триэтиленгликоле при 40-60°С в течении 2 часов. После чего при интенсивном перемешивании вносили гиалуроновую кислоту, глицерин, масло кедрового ореха, витамины. Полученную смесь охлаждали и использовали для предварительных испытаний на культурах бактерий или помещали в аэрозольные баллончики с соплом, отрегулированным для создания аэрозоля с размером частиц менее 100 мкм для проведения полевых испытаний.

При варьировании количества ингредиентов были получены композиции, состав которых приведен в таблице 1.

*%-ное содержание ланатана или церия в составе крема;

** используется дистиллированная вода.

рН всех указанных композиций 6,5-7,5.

Пример 2. Исследование стабильности композиций проводили по их бактерио-цидной активности по отношению к бактериям.

Исследование сохранения бактериостатической активности композиций проводили на твердой питательной среде. Средство разводили физиологическим раствором, вносили в разогретый мясо-пептонный агар и разливали в чашки Петри. На чашки высевали тест культуры микроорганизмов Staphylococcus aureus АТСС 6538, Esherichia coli М17 в концентрации 500 микробных клеток. Через 48 часов после инкубации культур при температуре 37°С подсчитывали число выросших колоний. В качестве средства использовали составы, указанные в таблице 1, хранившиеся в холодильники при температуре +4°С заданное время. В качестве контроля использовали состав «Вилпран-вет» (ближайший аналог). Полученные результаты приведены в таблице 2.

Данные испытаний показали, что все композиции ВИЛМАСТ обладают биоцидными характеристиками, которые сохраняются при его хранении в холодильнике в течении года. При этом препарат аналог при хранении достаточно быстро теряет свою активность. Лучшие результаты были получены на композициях ВИЛМАКС 3 и ВИЛМАКС 4.

Пример 3. Исследование бактериостатической активности композиций 3 и 4 проводили на твердой питательной среде. Средство разводили физиологическим раствором, вносили в разогретый мясо-пептонный агар и разливали в чашки Петри. На чашки высевали тест культуры микроорганизмов Staphylococcus aureus АТСС 6538, Staphylococcus agalactia АТСС 12386 в концентрации 500 микробных клеток. Через 48 часов после инкубации культур при температуре 37°С число выросших колоний. Полученные результаты приведены в таблице 3.

Полученные результаты свидетельствуют о сильных бактериостатических свойствах изучаемых композиций, а также о сохранении этих свойств в течении длительного времени.

Пример. 4. Бактериостатическую активность проверяли на основе анализа смывов на поверхности вымени на наличие патогенных микробов на примере групп по 10 животных в каждой группе. Полученные результаты приведены в таблице 4

Пример 5. В хозяйстве Нижегородской области на поголовье в 210 коров в течении 9 месяцев была проведена проверка препарата ВИЛМАСТ 3. Было сформировано 3 группы по 70 голов. В первой группе коровы обрабатывали средством в виде аэрозоля после каждой дойки, во второй группе обработку проводили 1 раз в день после первой дойки, в третьей группе обработка не проводилась. В первой и второй группах ни у одной коровы не отмечалось заболевание маститом. В третьей группе у 10 коров было отмечено начало серозного заболевания вымени. После перевода больных коров в режим первой группы через 7 дней признаки болезни исчезли.

У всех животных 1 и 2 групп отмечалось улучшение состояния кожного покрова вымени и сосков, ускорялось заживление повреждений кожи вымени, кожа становилась более эластичной и упругой. Доярки отмечали большее удобство использования препарата в форме аэрозоля.

Проведенные исследования показали, что заявляемое средство обладает высокой эффективностью при профилактики и лечении маститов, безопасно, стабильно при хранении и более удобно в применении.

Группа изобретений относится к сельскому хозяйству, в частности к ветеринарии, и представляет собой средство для профилактики и лечения мастита у коров, представляющее собой аэрозоль с размером частиц менее 100 мкм и рН 6,5-7,5, содержащее растворимую соль редкоземельного элемента, выбранную из нитрата церия или хлорида лантана, глицерин, триэтиленгликоль, этиловый спирт, гидроокись калия, гиалуроновую кислоту, масло кедрового ореха, витамины А, С, Е, F и воду дистиллированную, причем компоненты в средстве находятся в определенном соотношении в мас.%, а также способ профилактики и лечения мастита у коров, заключающийся в нанесении вышеуказанного средства не менее 1 раза в день после завершения доения путем 2-3 распылений. Изобретение обеспечивает высокую эффективность при профилактике и лечении маститов, безопасно, стабильно при хранении и более удобно в применении. 2 н. и 1 з.п. ф-лы, 4 табл., 5 пр.

1. Средство для профилактики и лечения мастита у коров, представляющее собой аэрозоль с размером частиц менее 100 мкм и рН 6,5-7,5, содержащее растворимую соль редкоземельного элемента, выбранную из нитрата церия или хлорида лантана, глицерин, триэтиленгликоль, этиловый спирт, гидроокись калия, гиалуроновую кислоту, масло кедрового ореха, витамины А, С, Е, F и воду дистиллированную при следующем соотношении ингредиентов, мас.%:

триэтиленгликоль 45,0-60,0 соль редкоземельного элемента, выбранная из нитрата церия или хлорида лантана 1,2-1,8 глицерин 15,0-20,0 этиловый спирт 3,0-4,5 гидроксид калия 0,3-0,5 масло кедрового ореха 0,7-1,2 гиалуроновая кислота 2,0-6,0 витамины А, С, Е, F 1,0-4,0 вода дистиллированная остальное

2. Средство по п. 1, отличающееся тем, что содержит витамины в следующих соотношениях, мас. %:

витамин А 0,05-0,1 смесь витаминов Е и F 1,3-1,5 витамин С 0,6-1,2

3. Способ профилактики и лечения мастита у коров, заключающийся в нанесении средства по п.1 не менее 1 раза в день после завершения доения путем 2-3 распылений.