НАСТОЙКА ТРУТНЕВОГО РАСПЛОДА И СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ Российский патент 2019 года по МПК A61K35/64 B01D11/02 

Описание патента на изобретение RU2690516C2

Предшествующий уровень техники

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно, к настойке из личинок трутней, а также способу ее получения. Настойка может использоваться для повышения защитных и иммунных сил организма в период сезонных заболеваний; для повышения умственной и физической работоспособности; в восстановительный период после длительных заболеваний, при астении, нарушении обмена веществ, задержке полового созревания, при сексуальной дисфункции, в климактерическом периоде, при преждевременном старении.

Известен ряд фармакологических препаратов и биологически активных добавок, полученных на основе продуктов пчеловодства (меда, пчелиного яда, пыльцы, забруса, воска, перги, мервы, прополиса, маточного молочка, пчелиного подмора, в том числе, трутневого расплода и/или его смесей с другими продуктами пчеловодства), а также различные способы их приготовления. В соответствии с ГОСТ Р 56668-2015, «гомогенат трутневого расплода - это продукт пчеловодства (однородная масса жидкой консистенции), полученный из личинок и предкуколок трутней медоносных пчел» и предназначенный для переработки в пищевых целях. Трутневый расплод имеет много общих свойств с маточным молочком, достаточно хорошо изученными лечебным препаратом, как в нашей стране (Киселева В.А., 1998; Циколенко С.П., Ишмуратова Н.М. 2010; Белов А.Е,, Исмагилов А.Ф. 2011 и др.), так и за рубежом (Ramadan M.F., Al-Ghamdi А., 2012 и др.). По питательным и фармакологическим свойствам препараты на основе трутневых личинок близки к маточному молочку, например, лекарственному препарату «Апилак» (Машковский М.Д. 2012 г.). Данный препарат рекомендуется для применения детям при гипотрофии и анорексии, взрослым - при гипотензии, нарушениях питания, неврологических расстройствах, нарушении лактации в послеродовом периоде и др. Имея много общих свойств с маточным молочком, трутневый расплод существенно отличается по биологической природе, составу биологически активных компонентов, и, что существенно, имеет различные природные запасы и различные по степени сложности технологии получения сырья и исходных субстанций.

Личинки пчел - традиционная для многих жителей стран Азии, Африки, Южной Америки диетическая пища. Кондитерские изделия с расплодом пчел продаются в США и странах ЕС.

Биологические добавки на основе трутневых личинок широко используются в кормах для увеличения здорового приплода у свиней (Меликова Ю.Н., 2011); для повышения адаптивных и защитных свойств организма у собак (Осинцева Л.А., 2009); улучшения хозяйственно полезных признаков у пчелиных семей в период осеннего и весеннего наращивания (Ганиятуллин М.Г., Саттарова А.А., 2010); повышения продуктивности кур-несушек, прироста и сохранности кур (Муравьев Д.В., 2016). В опытах на кроликах отмечено повышение неспецифической резистентности, содержания форменных элементов крови, общего белка, отмечены большие показатели лизоцимной активности и иммунного статуса животных.

Лиофилизированный расплод - один из компонентов лечебного питания спортсменов. Расплод ценят за высокую питательность, биостимулирующие свойства и используют не только в питании, но и в лечебных целях.

Препараты на основе трутневого расплода (трутневого гомогената, трутневого молочка, пчелиного молочка) широко используются как в альтернативной, так и классической медицине. В России, Украине, Румынии, Китае, Японии на основе трутневого гомогената разработаны новые продукты питания и биологически активные добавки к пище. Запатентованный в 1980 г. в Румынии препарат «Апиларнил» (Пат. RO №74872/1980), представляющий собой гомогенат трутневых личинок и содержимого ячеек сотов, рекомендуется для использования в апитерапии в качестве самостоятельного средства, а также в качестве основы для производства целого ряда препаратов: «Апиларнил-проп», «Апивитас-форте», «Никотиностоп», «Гепатоапимел», «Сперматоген-фактор» и косметических средств. «Апиларнил» содержит модифицированный гомогенат, его терапевтическое воздействие основано на комплексе активных компонентов трутневых личинок. Добавление порошка прополиса в «Апиларнил-проп» обогащает продукт активными летучими эфирами, ароматическими аминами, флавоноидами, придает ему более широкую гамму апитерапевтического применения. Оба препарата рекомендуются в качестве общих энергостимулирующих средств при отставаниях в физическом, умственном, половом развитии, психических заболеваниях, неврозах, депрессиях а также других состояниях, требующих общих тонизирующих и трофических средств.

Существуют и другие лекарственные и биологически активные препараты на основе трутней и трутневого расплода: «Гепатоапимел» - рекомендуется при заболеваниях печени; «Апифоргум» - жевательная резинка, способствует укреплению десен; «Билар» - регулирует состояние автономного и центрального контуров управления сердечным ритмом у юных спортсменов; «Апилар» - обладает выраженным анаболическим и актопротекторным действием. Под разными торговыми названиями биологические добавки к пище на основе трутневого расплода выпускают отечественные предприятия: «НПЦ Апилад», «Тенториум», «Авита-К/Золотая пчелка», «Алтай-Старовер», «Урал», «Медок», «Доктор Корнилов», «МелМур», «Нектар Алтая», «Материя Био Профи Центр», «Сашера Мед» и др.

Лечебные и лечебно-профилактические свойства меда, трутневого расплода, пчелиного подмора и других продуктов пчеловодства, трудно переоценить. Ниже приведены предприятия, поставляющие на рынок пчелопродуктов биологически активные товары на основе гомогената трутневых личинок, их смесей с трутневым подмором и лечебными растениями (Табл. 1).

Исходя из многочисленных данных литературы, препараты на основе трутневого расплода способствуют ускоренному восстановлению характеристик семенников и предстательной железы. Повышают половое влечение, интенсивность образования мужских половых гормонов при мужском бесплодии (для усиления эффекта рекомендуется применять совместно с пергой). Способствуют восстановлению гормонального фона и детородной функции у женщин (для усиления эффекта желательно принимать с маточным молочком и пергой). В смеси с лекарственными растениями и медом, трутневый расплод применяют для лечения глазных болезней, в качестве биостимулирующего средства, в диетическом питании, при лучевом поражении, при онкологических заболеваниях. Незаменим он для взрослых с ослабленным организмом, для детей при отставании в физическом, половом и умственном развитии, а в геронтологии - как великолепное стимулирующее, оздоравливающее и омолаживающее средство, в том числе, повышающее устойчивость организма к физическим нагрузкам. Препараты показаны спортсменам, мужчинам и женщинам в периоды высоких физических и психоэмоциональных нагрузок.

Химический состав трутневого расплода.

Полный (детальный) химический состав трутневого расплода и, особенно, его специфические биологически активные ингредиенты, недостаточно изучены. Известны основные пищевые компоненты: белки, жиры, углеводы, витамины. При этом, в связи с развитием хромато-масс-спектрометрических методик анализа, детально исследован качественный и количественный состав карбоновых кислот, являющихся на сегодня одним из основных показателей подлинности продукта (ГОСТ Р 56668-2015). Ниже, а также в Табл. 2 приведены данные химического состава (в масс %), характеризующего биологическую активность трутневого гомогената и его фармакологическое действие (Киселева В.А., 1998 г.; Бурмистрова Л.А., 1999 г.; Лазарян Д.С., Сотникова Е.М. и др., 2002 г.; Прохода Е.А., 2009 г.; Трифонов В.Ю., Андрущак Г.Н. и др., 2011 г.; Будникова Н.В., 2012 г.; Клишина И.М. 2013 г.): белок (18-51); аминокислоты (11-37); нуклеиновые кислоты (1,1-1,7); ферменты (липаза, протеаза, фосфотаза, уреаза, дегидрогеназа, амилаза и др. - 0,5-0,9); фосфолипиды (0,9-2,5); комплекс веществ липидной фракции, жирные кислоты (2,6-4,6); карбоновые кислоты (не менее 2,5); стероидные гормоны (тестостерон, эстрадиол, кортизол, прогестерон и др. - 11-652 нмоль/л), углеводы (фруктоза, глюкоза и др. - 20-30), флавоноиды (1,5-5); широкий спектр микро- и макроэлементов; водо- и жирорастворимые витамины А, Д, Е, РР, С, группы В и многие другие биологически активные компоненты.

Многие природные животные и растительные субстраты, включая продукты пчеловодства, широко используются в практической косметологии (Хижа В.В. и др., Пат. РФ 2460514, 2010; Децина А.Н., Бачинский А.Г., Пат. РФ 2129858, 1996; Децина А.Н. Пат. РФ 2082393, 1996; Децина А.Н., Родионов В.И. и др. Пат. РФ 2110984, 1997; Децина А.Н., Бачинский А.Г., Голубев В.В., Пат. РФ 2142783, 1997; Вязовая Е.А., Децина А.Н., Бачинский А.Г., Пат. РФ 2144815, 2000).

Одними из таких природных субстратов являются "фитоэстрогены", которые в организме человека и животных действуют подобно собственным гормонам (Кавот С., Грейс К. Гормоны молодости // Косм. Мед. 1998, 3, С, 19-22; Ayres D.C. et al. Chemical, biological and clinical properties. In: Chemistry & Pharmocology of Natural Products. Ed.: Phillipson. Cambrige University Press. 1990, p. 402). Фитоэстрогены обладают определенным сходством с эстрогенами животных и имеют близкую с ними химическую структуру. Среди косметической продукции, содержащей фитогормоны, особое место занимают косметические маски на основе продуктов пчеловодства (Пат. РФ №2113215, 10.07.2010).

Такие косметические маски имеют богатый химический состав, обладают антибактериальным, регенерирующим и восстанавливающим свойствами. В Табл. 2 приведен химический состав трутневого гомогената в сравнении с другими продуктами пчеловодства, составленный (Хижа В.В. и др., Пат. РФ 2460514, 10.07.2010) на основании ряда литературных данных.

Исследованный комплекс биологически активных веществ обуславливает ряд фармакологических свойств продуктов пчеловодства, в частности, для трутневого расплода: наличие антиоксидантного, иммунотропного, адаптогенного, анаболического, актопротекторного действия.

Препараты на основе трутневого расплода и полученные из него способствуют усилению противомикробной, антиоксидантоной, иммунной, андрогенной, физической и интеллектуальной активности организма.

Стероидные гормоны (андрогены), аминокислоты, ферменты, микроэлементы, витамины группы В, витамины А, Д определяет анаболическое действие. Наличие комплекса углеводов, аминокислот (глицина, метионина, глютаминовой кислоты), гормонов - характеризует актопротекторное действие, улучшение мозговой деятельности человека. Кроме того, ценность трутневого расплода обусловливается также чрезвычайно высоким содержанием витаминов А и Д. Данное обстоятельство может служить основанием использования пчелиного расплода в детском и спортивном питании, профилактике и лечении хронических заболеваний.

Все известные препараты на основе трутневого расплода, в связи с крайней химической неустойчивостью его активных ингредиентов, как правило, содержат стабилизирующие добавки, например, мед, сахарозу, лактозу, глюкозу, отруби, сою. Они отличаются концентрацией биологически и химически активных веществ, природой и свойствами используемых экстрагентов и стабилизаторов, что обусловлено различной технологией их производства (экстракцией, лиофилизацией, термической сушкой, адсорбцией, стабилизацией, смешением), в связи с этим, препараты на основе трутневого расплода имеют непостоянный качественный и количественный состав, обладают различной выраженностью питательных и лечебных свойств, характеризуются различными сроками хранения. При этом известно, что при различных технологиях приготовления меняется содержание и соотношение извлекаемых биологически активных и сопутствующих химических веществ, а также их фармакологическая активность (Муравьев И.А., 1980 г.; Бурмистрова Л.А., 1999 г.; Марданлы С.Г. и др., 2015 г.)

В России известен ряд промышленно выпускаемых биологически активных добавок к пище и лекарственных косметических средств, полученных на основе трутневого расплода, а также нетрадиционные лечебные препараты и способы их получения с использованием различных композиций, содержащих трутневой расплод. При этом государственная регистрация препаратов на основе трутневого расплода в качестве лекарственных средств практически отсутствует.

Известен «способ приготовления биологически активного препарата, включающий приготовление гомогената личинок трутневого расплода пчел, смешивание приготовленного гомогената с адсорбентом на основе смеси лактозы и глюкозы, взятых при определенном соотношении, далее измельчают и сушат адсорбированный гомогенат, при этом смешивание осуществляют путем растирания свежеприготовленного гомогената с адсорбентом, после измельчения и сушки адсорбированного гомогената его гранулируют спиртовым раствором прополиса, при определенных условиях» (Пат. РФ 2456005, 20.07.2012).

Описан (Пат. РФ 2473355, 12.12.2011) лечебно-профилактический препарат из трутневых личинок, обладающий выраженным иммуномодулирующим действием, представляющий собой порошок желтого цвета, полученный путем измельчения трутневых личинок до однородной биомассы, добавления к полученной биомассе водно-спиртового экстракта прополиса и тонкоизмельченной цветочной пыльцы, последующего замораживания пасты и ее сублимационного высушивания в вакуумной камере при определенных условиях.

Известна технологическая разработка, связанная с оптимизацией состава и усовершенствованием способа получения сухого порошка пчелиного трутневого расплода, предназначенного для обогащения различных сыпучих пищевых продуктов. Апробированы варианты лиофильного и воздушно-термического высушивания замороженного субстрата (сертификат соответствия РОСС RU АИ, 55.Н 00535), обеспечивающие заданные физические и биологические свойства получаемого продукта. Определены необходимые вспомогательные вещества, улучшающие технологические параметры порошка.

Известен патент на лекарственное средство для восстановления функций головного мозга (Пат. РФ 2466733, 20.11.2012). «Сущность изобретения заключается в расширении арсенала и повышении фармакологической активности постинсультных средств. Средство содержит смесь дигидрокверцетина и трутневого расплода при следующем соотношении компонентов: дигидрокверцетин от 10 мг до 400 мг, трутневый расплод от 40 мг до 1000 мг. Средство выполнено в порошкообразном, таблетированном или капсулированном виде, а также может быть выполнено в виде водно-спиртового экстракта и форм, созданных на основе этого экстракта, а именно порошок, таблетки и капсулы. Средство способствует повышению качества мышления, памяти, устойчивости организма к физическим и умственным нагрузкам, улучшению метаболизма головного мозга.

Изобретение (Пат. РФ 2233666, 30.12.2002) заключается в том, что таблетки содержат: гомогенат трутневого расплода, лактозу, пектин, сорбиновую кислоту, лимонную кислоту, подсластитель, кальция стеарат, ароматизатор при определенном соотношении компонентов.

Известно лекарственное средство для профилактики и лечения аденомы предстательной железы и простатита, содержащее трутневый расплод, цветочную пыльцу, аскорбиновую кислоту, витамин Е, наполнители (Пат. РФ 2414229, 20.03.2011).

Известна биологически активная добавка к пище, содержащая следующие компоненты, %: трутневый расплод - 1-70, левзея - 5-70, аскорбиновая кислота - 1-70, витамин Е - 0,05-30 и наполнители - стеарат кальция, тальк, лактозу - остальное. Добавка обладает эффектом в отношении анаболического действия, выраженного в быстром наращивании мышечной массы спортсменов (Пат. РФ 2390270, 27.05.2010).

Известен способ приготовления биогенного стимулятора, включающего 50% биологически активной массы из личинок трутней, 49,7% раствора хлорида натрия и 0,3% консерванта, заключающийся в том, что соты с живым здоровым трутневым расплодом возрастом 18-22 дня выдерживают в холодильнике, затем соты с расплодом вскрывают и отбирают личинки трутней одинакового размера, светло-серого цвета, после чего личинки трутней измельчают в стерильной лабораторной мельнице, разводят стерильным раствором хлорида натрия и автоклавируют при температуре 120°С и давлении пара 1,5 атмосферы, затем массу доводят стерильным раствором хлорида натрия с концентрацией 0,9% до первоначального объема, добавляют консервант (фенол), разливают в стерильную герметичную тару и автоклавируют (Пат. РФ 2395289, 27.07.2010).

Известен способ получения лечебного препарата, согласно которому личинки трутней замораживают при температуре -4, -5°С в течении 12-14 час, затем размораживают и гомогенизируют, при этом в качестве стабилизирующей среды используют 5% раствор глюкозы в соотношении 1:10 с добавлением раствора хлороформа или салициловой кислоты с последующей сублимацией. Сублимацию проводят в вакуумной камере при температуре подогрева полок до 30-45°С. При достижении температуры препарата 20-22°С температуру полок снижают до 25°С и производят досушивание в течение 22-24 час (Пат. РФ 2258522, 20.08.2005).

Известен аналогичный способ приготовления биологически активного препарата, в котором для повышения эффективности средства к гомогенату добавляют селеноорганическое соединение - диацетофенонилселенид, а затем к смеси гомогената и диацетофенонилселенида в стерильных условиях добавляют среду высушивания (сахарозо-желатиновая смесь, содержащую 10% сахарозы и 5% желатина) в соотношении гомогената и среды высушивания 1:10 (Пат. РФ 2414919, 27.03.2011).

Описана технология приготовления биологически активного препарата из личинок трутней, в котором восковые крышечки запечатанного расплода срезают, соты устанавливают в медогонку, в течение 10-12 мин извлекают до 95% личинок, подвергают их гомогенизации, добавляют адсорбент - смесь лактозы и глюкозы, тщательно растирают, полученный сырой адсорбированный гомогенат трутневого расплода хранят при температуре 4-6°С около 3 мес до высушивания (В.И. Лебедев, М.А. Легович. Заготовка личинок трутней // Пчеловодство, №3, 2003, С. 52-54).

Известен, также, способ (Предв. пат. Казахстан, №14879, 15.10.04) приготовления биологически активной добавки к пище общеукрепляющего действия «Хан-балы», включающий извлечение из пчелиных сотов личинок трутневого расплода возрастом 4-6 дней, диспергирование и смешивание полученного гомогената с медом в следующем соотношении компонентов, масс. %: Мед - 70-80; гомогенат трутневых личинок - 20-30.

Известен способ (Пат. РФ 2395289, 24.11.2008) приготовления биогенного стимулятора, включающего 50% биологически активной массы из личинок трутней, 49,7% раствора хлорида натрия и 0,3% консерванта, отличающийся тем, что для приготовления препарата соты с живым здоровым трутневым расплодом возрастом 18-22 дня выдерживают в холодильнике при температуре 3-4°С в течение 5-6 дней, затем соты с расплодом вскрывают и отбирают личинок трутней одинакового размера, светло-серого цвета, после чего личинок трутней измельчают в стерильной лабораторной мельнице, разводят стерильным раствором хлорида натрия с концентрацией 0,9% в пропорции 1:1 и автоклавируют при температуре внутри котла 120°С и давлении пара в рубашке 1,5 атмосферы в течение 1 час, затем массу отфильтровывают через 2 слоя марли в стерильную мерную посуду, доводят стерильным раствором хлорида натрия с концентрацией 0,9% до первоначального объема, добавляют консервант (фенол), разливают при соблюдении правил асептики и антисептики в подготовленные стерильные флаконы и герметично закупоривают их, автоклавируют при 120°С и давлении пара в рубашке 1,5 атм в течение 20 мин.

Описан состав консервированного гомогената пчелиного расплода, представляющий собой гомогенизированные трутневый расплод и маточные личинки, характеризующийся тем, что он содержит сорбиновую кислоту и лимонную, или янтарную, или яблочную, или аскорбиновую для достижения рН среды 4,5 при определенном количественном содержании компонентов.

Известен способ (Пат. РФ 2491078, 16.09.2011) приготовления расплода трутневого адсорбированного, отличающийся тем, что берется 1 часть гомогената трутневого расплода и 3-30 частей адсорбента по массе, где в качестве адсорбента выступает лактоза, или глюкоза, или фруктоза, или любое сочетание данных веществ, которые перемешиваются и не позднее чем 55 мин с момента извлечения трутневого расплода из сот поступают на сушку и сушатся под вакуумом без применения температуры до влажности не более 1,5%.

Описана (Пат. WO 2012150872 A1 - PCT/RU 2011/000274) биологически активная добавка к пище для нормализации уровня андрогенов мужчин, общего состояния, снижения ожирения, характеризующаяся тем, что она содержит корни и корневища лапчатки белой или наземную часть лапчатки белой, или их смесь, а также включает трутневый расплод при следующем его количественном содержании: трутневый расплод - от 20 мас. % до 80 мас. %.

Лекарственные средства и биологически активные добавки для комплексной активизации защитных сил организма, лечения и профилактики различных заболеваний, содержащие препараты, приготовленные на основе трутневого расплода, описаны, также, в Пат. РФ: 2129858, 1996; 2423142, 2009; 2128501, 2002; 2345523, 2007; 2366435, 2009; 2372094, 2007; 2245155, 27.01.2005; 2460514, 2010; Пат. Евразийский №021315, 25.11.2010; Пат. GB 2079602, 1982; Пат. WO 81/02106 и др.

Биологически активные ингредиенты трутневого гомогената крайне лабильны и требуют для их сохранения специального технологического решения. Например, фитоэстрогены обладают определенным сходством с эстрогенами животных и имеют близкую с ними химическую структуру, нестабильны на воздухе и водных средах. Все технологические процессы по производству, отбору трутневого расплода и приготовлению из него гомогената должны выполняться в максимально ограниченные сроки. Это обусловлено тем, что расплод проходит определенные стадии развития, а после отбора из сот подвержен под воздействием окружающей среды быстрой порче. Полученный из личинок водно-белковый гомогенат еще более лабилен. Поэтому, сразу после сбора личинок, тем более их гомогенизации, трутневый расплод необходимо стабилизировать для сохранения его качества. Приведенные выше примеры показывают, что дезинфектанты, антиоксиданты, консерванты, низкие температуры, адсорбция на твердых носителях, лиофилизация являются достаточно эффективными способами сохранения количественного содержания компонентов и биологической активности трутневого расплода. Тем не менее, описанные способы характеризуются сложностью в технологии получения и недостаточной стабильностью свойств целевых продуктов. Получаемые на их основе препараты обладают, как правило, слабо воспроизводимыми показателями биологической активности, малыми сроками хранения.

Известна технология получения спиртовой настойки трутневого гомогената (Будникова Н.В. Совершенствование технологии производства и хранения трутневого расплода медоносных пчел. Автореф. дисс. к. с-х. н., Дивово, 2011 г.) путем гомогенизации 9-11 суточных трутневых личинок с последующей фильтрацией через сито из нейлоновых тканей в охлажденные и обработанные спиртом флаконы из темного стекла и стабилизацией его 40 или 70% этиловым спиртом:

«По органолептическим показателями спиртовые настойки трутневого расплода имеют вид прозрачной жидкости с желтоватым оттенком и характерным для каждой концентрации пряным ароматом. Подлинность спиртовых настоек подтверждает показатель окисляемости (48-65 с) и массовая доля (3,3%) карбоновых кислот. Сравнением настоек одной концентрации (10%), приготовленных с применением 40 и 70% этилового спирта установлено, что ненасыщенные соединения лучше сохраняются при экстракции 40% этиловым спиртом. Наличие флавоноидных соединений в трутневом расплоде составляет 0,0145%, в исследуемых настойках - от 0,0032% (что составляет 22,1% от исходного расплода) при использовании 40% спирта - до 0,0046%) (31,7% от исходного расплода) при использовании 70% спирта. С увеличением концентрации гомогената в спирте (с 10 до 50%) возрастает и количество флавоноидных соединений с 0,0046 до 0,0142%. Оценивая влияние концентрации спирта в процессе хранения 10%-ных настоек в течение 1 года, замечено незначительное снижение ненасыщенных соединений. Так содержание карбоновых кислот уменьшилось на 8,2% при концентрации спирта 40%, а с концентрацией спирта 70% - на 6,3%; показатель окисляемости соответственно увеличился на 46,63 и 24,43%; показатель содержания водородных ионов в настойке на 40% спирту уменьшился на 1,1%, а на 70% спирту увеличился на 1,25%. Содержание флавоноидных соединений уменьшается вдвое при стабилизации гомогената как 40, так и 70% спиртом.

Хранение настоек в течение 2 лет привело к дальнейшему снижению биологически активных соединений. Так, содержание ненасыщенных соединений в 10% настойках - уменьшилось на 14,59% с использованием 40% спирта и на 19,25% при использовании 70% спирта. Показатель окисляемости, который обусловлен также содержанием ненасыщенных соединений в процессе хранения увеличился на 67,36% при стабилизации 40% спиртом, а при использванием 70% спирта - на 43,13%. Содержание флавоноидных соединений при хранении в течение 2 лет уменьшилось на 62,5% и на 67,39% с использованием 70% этилового спирта.

При исследовании настоек с использованием 70% спирта и более высокими концентрациями трутневого расплода получено, что содержание ненасыщенных соединений (по количеству карбоновых кислот) уменьшилось в процессе хранения: 1 год - в 10%-ной настойке на 6,35%, 20%-ной - на 10,0%, 40%-ной - на 9,7%. В то же время увеличилась скорость окисления ненасыщенных веществ, так, показатель окисляемости повысился в 10%-ной настойке на 24,43%, в 20%-ной - на 62,5%, в 40%-ной - на 32,14%. Количественное содержание водородных ионов изменялось при этом незначительно в сторону уменьшения показателя в 10% - на 1,25%, в 20%-ной - на 0,48%, в 40%-ной - на 2,19%. Отмечено и уменьшение флавоноидных соединений. При дальнейшем хранении этих настоек в течение 2 лет, продолжается уменьшение биологически активных соединений: карбоновых кислот - на 19,25 - 14,72%; показатель окисляемости увеличился - на 43,13 - 300,0%. Количественное содержание водородных ионов увеличилось - на 2,34 - 1,98%. Очень чувствительны к хранению флавоноидные соединения, содержание которых уменьшилось в 10%-ой на 67,39%; в 20%-ной - на 35,53%; в 40%-ной - на 23,53%; в 50% - на 11,97%.

Хранение в течение 2 лет приводит к потере содержания ряда биологически активных соединений в слабо концентрированных спиртовых настоек расплода».

Таким образом, этиловый спирт соответствующей (40-70%) концентрации может быть рекомендован к использованию в качестве стабилизатора ценных компонентов трутневого расплода, при этом их потери по основным специфическим биологически активным компонентам (жирным кислотам, аминокислотам кислотам, фитостеринам, флавоноидам) составляют порядка 25% за первые 2 года.

Данный документ выбран в качестве наиболее близкого аналога.

Техническим недостатком рассмотренной технологии является недостаточная стабильность спиртовой настойки при производстве и хранении.

Цель и сущность изобретения.

Технической задачей изобретения является разработка простой технологии получения настойки из личинок трутней, которая является стабильной.

Технический результат заключается в получении настойки из личинок трутней при сохранении биологически активности и количественных значений идентифицированных компонентов, входящих в состав настойки в течение 2 лет.

Для повышения и стабилизации антиоксидантной активности препарата, которая в зависимости от сырья, варьировала достаточно в широких пределах (от 76 до 240 мг/л), в него добавлялись органические кислоты (антиоксиданты), которые можно было использовать и в качестве стандартов при газохроматографических измерениях.

Технический результат достигается путем осуществления способа, заключающегося в том, что гомогенат трутневого расплода экстрагируют 40% этиловым спиртом в соотношении сырье: экстрагент 1:5 при температуре 20-25°C и периодическом перемешивании. Настаивают 1 сутки. Затем экстракт сливают. К обработанному гомогенату добавляют 70% этиловый спирт при соотношении сырье: экстрагент 1:5 и температуре 20-25°С. Настаивают еще 1 сутки при периодическом перемешивании, затем весь экстракт сливают. Полученные экстракты объединяют. Проводят выхолаживание 2-3 суток при температуре 4-7°С. Содержимое сборника передается на стадию фильтрации, затем в резервуар готовой продукции, где добавляется 0,5-1,5 масс % антиоксиданта, выбранного из липоевой или лимонной, или яблочной, или аскорбиновой, или сорбиновой, или галловой кислоты, или дегидроквертсцина, являющегося одновременно стандартным веществом для последующих аналитических измерений. После определения показателей соответствия, готовый продукт передается на участок розлива.

С использованием предложенного способа получают новый биологически активный препарат в виде настойки из личинок трутней, при сохранении биологической активности компонентов, входящих в состав заявленного средства, в течение 2 лет.

Для получения заявленной настойки используют свежие 9-11 суточные личинки трутней, или охлажденные до -18°С, или охлажденный до -18°С третневый гомогенат. Личинки гомогенизируют. Получаемая настойка содержит экстрактивные вещества, этиловый спирт, антиоксиданты при следующем соотношении компонентов, мг/100г сырья:

- экстрактивные вещества личинок трутней - не менее 300 - лизин - не менее 0,2 - сумма флавоноидов - не менее 8,5 - миристиновая кислота - не менее 2,0 - пальмитиновая кислота - не менее 5,5 - олеиновая кислота - не менее 7,5 - 24-метиленхолестерин - не менее 4,5 - ситостерин - не менее 1,5 - антиоксидант (липоевая или лимонная, или яблочная, или аскорбиновая, или сорбиновая кислоты, или галловая кислоты, или дегидрокверцетин), масс % - 0,5-1,5 - этиловый спирт, % - 40-70 - антиоксидантная активность, мг/100г по галловой кислоте - не менее 500

Экспериментально установлено, что в результате заявляемой в качестве изобретения технологии достигается извлечение и сохранение целевых фармакологически активных компонентов (перечисленных выше) при использование в качестве экстрагента, консерванта и дезинфектанта 40 и 70% этилового спирта, а в качестве антиоксиданта и стандартного вещества - липоевая или лимонная, или яблочная, или аскорбиновая, или сорбиновая, или галловая кислоты или дегидрокверцетин. Хромато-масс-спектрорметрические исследования показали, что основной массив идентифицирорванных соединений (порядка 200), принадлежащих к различным классам химических соединений, остался в качественном и количественном отношении практически неизменным в течении 2 лет.

Заявляемые параметры технологии являются оптимальными с позиции обеспечения возможности извлечения целевых веществ из трутневых личинок при сохранении свойств, качеств и биологической активности извлекаемых веществ и соединений.

При изменении условий и режимов способа, а именно концентрации спирта, соотношение сырье : экстрагент, времени настаивания, температуры, количества добавляемого антиоксиданта, показатели настойки менялись в худшую сторону, уменьшался выход биологически активных веществ, снижались сроки хранения.

Настойка, полученная предложенным способом, обладает выраженной противомикробной, антиоксидантной, иммунной, андрогенной, актопротективной, интеллектуальной активностью в течение 2 лет.

При этом используемый экстрагент и антиоксидант одновременно являются консервантами и дезинфектантантами, способствующими длительному хранению препарата без потери его фармакологической активности.

Изобретение осуществляется следующим образом.

Сущность изобретения поясняется ниже приведенными примерами практической промышленной реализации изобретения.

Экстрагент (спирт этиловый 40 и 70%) готовят в реакторе с мешалкой куда подают 95% этиловый спирт (ГФ XIII) и в необходимом количестве воду очищенную (ГФ XIII).

В качестве животного сырья используются свежесобранные или замороженные при -18°С 9-11 дневные личинки и предкуколки трутней медоносных пчел, или замороженный гомогенат трутневый (СанПиН 2.3.2.1078-01, ГОСТ Р 56669-2-15, TP ТС 021/2011).

Свежие 9-11 суточные личинки (или замороженные при -18°С личинки, или замороженный гомогенат трутневый) после взвешивания на платформенных весах загружают в подготовленный (стеклянный, эмалированный) сборник. Замороженные личинки оставляют до частичной разморозки.

В сборник с размороженной субстанцией или свежесобранными личинками заливают необходимое количество экстрагента (спирт этиловый 40%) в соотношении объемов 1:5, контролируя вес экстрагента по показаниям тензодатчика. Содержимое сборника перемешивают (гомогенизируют) при помощи перемешивающего устройства не менее 30 мин. Далее реактор закрывают герметичной крышкой и оставляют для настаивания на сутки при температуре 20-25°С, после чего полученный экстракт сливают и добавляют свежую порцию 70% этанола в соотношении объемов 1:5 при температуре 20-25°С, настаивают еще сутки. Полученный экстракт сливают и смешивают с предыдущим экстрактом, перемешивают при помощи насоса.

Производят слив объединенного экстракта в промежуточную емкость, и производят выхолаживание при пониженной температуре от 4 до 5-7°С в течение 3 сут. Выхоложенная настойка фильтруется через каскад фильтров с различным диаметром пор. Добавляют антиоксидант (0,7% масс. дегидрокверцетина) После определения показателей соответствия, готовый продукт передается на участок розлива.

Готовую настойку трутневого расплода подают на фасовку во флаконы оранжевого стекла с винтовой горловиной типа ФК, ФКМ, ФВ-30-20, ФВ-50-20, ФВ-100-20, укупоренные пробками - капельницами и навинчиваемыми крышками их полимерных материалов.

Полученная настойка трутневого расплода представляет собой слабо опалесцирующую жидкость без посторонних включений светло-соломенного цвета с характерным для расплода ароматом, плотностью 0,9747-0,9800 г/см3. При длительном хранении допускается появление хлопьевидного осадка.

При таком виде экстракции концентрация экстрактивных веществ в настойке составляет, мг/100г - не менее 300; в том числе: лизин - 0,2; флавоноиды - не менее 8,5; миристиновая кислота - не менее 2,0; пальмитиновая кислота - не менее 5,5; олеиновая кислота - не менее - 7,5; 24-метиленхолестерин - не менее 4,5; ситостерин - не менее 1,5; антиоксидант (липоевая или лимонная, или яблочная, или аскорбиновая, или сорбиновая, или галловая кислоты, или дегидрокверцетин), % - 0,5-1,5; - этиловый спирт, % об. - 40-70; антиоксиданты, % (липоевая или лимонная, или яблочная, или аскорбиновая, или сорбиновая, или галловая кислоты, или дегидрокверцетин) - 0,5-1,5; антиоксидантная активность - не менее 500 мг/100г по галловой кислоте. Срок годности настойки - 2 года.

Способ применения настойки трутневого расплода.

Взрослым и детям старше 12 лет по 25-35 капель 3 раза в день до еды. Продолжительность курса не должна превышать 8 недель

Показания к применению:

• для повышения естественных защитных сил организма;

• при астениях, физических и психических переутомлениях, стрессах, депрессиях, нарушениях сна (в комплексной терапии);

• для профилактики и при лечении сердечно-сосудистых заболеваний, атеросклероза (в комплексной терапии);

• для профилактики и при лечении заболеваний печени (в комплексной терапии);

• для восстановления функции щитовидной железы при гипотериозе (в комплексной терапии);

• при отставании в физическом, половом и умственном развитии детей;

• при нарушениях половых функций;

• при простатите, аденоме предстательной железы (в комплексной терапии);

• при снижении либидо;

• при климаксе;

• для восстановления энергетических затрат при напряженной умственной работе и занятиях спортом;

• для повышения физической и умственной работоспособности у пожилых людей.

Противопоказания:

- индивидуальная непереносимость (аллергия), острые инфекционные заболевания, злокачественные новообразования, заболевания коры надпочечников (болезнь Аддисона), детский возраст.

Особые указания:

Трутневый гомогенат не следует принимать вечером, т.к. он может вызвать возбуждение и бессонницу.

Применять в рекомендуемой дозировке, большие дозы трутневого гомогената могут стать причиной нервных и эндокринных расстройств.

Учет и интерпретация результатов.

Определение количественных и качественных показателей полученной настойки проводят следующим образом:

- Испытание 1. Содержание сухого остатка в настойке определяли по методике описанной в ГФ XI, вып. 2, стр. 149. Содержание сухого остатка должно быть не менее 2,0%.

- Испытание 2. Содержание спирта этилового в настойке определяют по методике описанной в ГФ XI, вып. 1, стр. 26. Содержание спирта в настойке должно быть не менее 70%.

- Испытание 3. Количественное содержание и идентификация триметилсилильных производных карбоновых кислот, аминокислот, многоатомных спиртов, моносахаров, дисахаридов, стероидов проводят методом газовой хромато-масс-спектрометрии (ГХ-МС) в режиме ионизации электронами с энергией 70 эВ. Дериватизация гидроксильных, карбоксильных и аминогрупп проводилась путем силилирования бистриметилсилилтрифторацетамидом (БСТФА). Масс-спектрометрические данные обрабатывали с помощью стандартного программного обеспечения.

Для анализа отбирали 1 см3 спиртового экстракта трутневого расплода в хроматографические виалы вместимостью 4 см3 и упаривали досуха при температуре 70°C в токе азота. К высушенному осадку добавляли 0,2 см3 силилирующего агента. Виалы укупоривали крышками и полученный раствор тщательно перемешивали с помощью шейкера в течение 15 мин. Затем проводили термостатирование пробы в течение 30 мин. при температуре 70°С.

Для анализа стероидных соединений в стеклянную пробирку вместимостью 15 см3 взвешивали 50 мг проб гомогената трутневых личинок. Добавляли 2 см3 карбонатного буфера для проведения гидролиза. Пробирку укупоривали крышкой, полученную смесь тщательно перемешивали с помощью шейкера в течение 15 мин. Затем к смеси добавляли 5 см3 диэтилового эфира, 1 г хлорида натрия и проводили экстракцию при перемешивании проб с помощью шейкера в течение 15 мин. Разделение фаз проводили центрифугированием проб в течение 15 мин при скорости вращения ротора 1500 об/мин. После центрифугирования полученный экстракт упаривали досуха в токе азота при температуре 50°С. Добавляли 0,1 см3 активированного силилирующего агента (БСТФА), пробы укупоривали и перемешивали с помощью шейкера в течение 15 мин. Затем проводили термостатирование пробы в течение 30 мин при температуре 70°С для получения силилироваиных производных нелетучих стероидных соединений.

Газохроматографическое разделение проводили на капиллярной кварцевой колонке HP-5ms в режиме программирования температуры от 70°С (5 мин) до 280°С со скоростью подъема температуры 10°С/мин, выдержка при 280°С (30 мин); температура испарителя хроматографа 250°С; газ-носитель гелий, расход газа-носителя через колонку 1,3 см3/мин. Температура интерфейса 280°С, источника ионов - 200°С. Объем вводимой пробы 0,001 см3 в режиме деления потока 1:10. Масс-спектрометрический анализ: энергия ионизирующих электронов 70 эВ, температура ионного источника 200°С, режим сканирования по полному ионному току (диапазон m/z 40-950) с 6 до 45 мин.

Условия проведения исследования экстрактов из проб для идентификации стероидов тандемном газовом хромато-масс-спектрометре CGMS Triple Quard 7000: Газохроматографическое разделение проводили на капиллярной колонке HP-Ultra 1 в режиме программирования температуры от 190°С (1 мин) до 250°С со скоростью подъема температуры 5°С/мин, далее подъем температуры до 290°С со скоростью 15°С/мин, выдержка при 220°С (10 мин); температура испарителя хроматографа 250°С; режим работы инжектора - split 1:10; скорость газ-носителя гелия через колонку 1 см3/мин. Температура интерфейса - 260°С, источника ионов - 200°С. Масс-спектрометрический анализ: энергия ионизирующих электронов 70 эВ, температура ионного источника 200°С, режим MRM.

- Испытание 4. Для исследования нелетучих химических веществ - флавоноидов, витаминов, некоторых стероидных и пептидных соединений использовался метод высокоэффективной жидкостной тандемной масс-спектрометрии высокого разрешения (тандемная ВЭЖХ-МС/МС). Условия анализа - колонка - Zorbax SB-C8 длиной 15 см, внутренним диаметром 4.6 мм, с размером частиц 1,8 мкм. Скорость потока элюента - 0,400 мл/мин. Температура термостата колонки - 35°С. Температура термостата для проб - 5°С. Объем вводимой пробы - 5,0 мкл. Время анализа - 50 мин. Подвижная фаза: - компонент А - 0,1% раствор муравьиной кислоты в воде для ВЭЖХ; - компонент В - ацетонитрил для градиентной ВЭЖХ. Режим элюирования - градиентный. Способ ионизации - электростатическим распылением при атмосферном давлении (электроспрей); Режим сканирования 80-800 m/z в отрицательной и положительной полярности. Режим работы источника ионизации - HESII; Поток газа-распылителя - 60 отн. ед. Поток вспомогательного газа - 20 отн. ед. Напряжение на распылителе - 3,0 кВ. Температура проводящего капилляра - 380°С. Температура распылителя - 250°С.

- Испытание 4. Антиоксидантная активность препарата проводилась по ГОСТ Р 54037-2010 «Продукты пищевые. Определение содержания водорастворимых антиоксидантов амперометрическим методом в овощах, фруктах, продуктах их переработки, алкогольных и безалкогольных напитках» методом амперометрического детектирования, основанного на измерении электрического тока в проточной ячейке, возникающего при окислении анализируемого вещества на поверхности рабочего электрода при определенном потенциале. В качестве стандарта использовалась галловая кислота. Суммарное содержание антиоксидантов должно быть не менее 500 мг/л.

Экспериментально установлено, что предлагаемая настойка не обладает раздражающим и сенсибилизирующим действием, нетоксична.

Биологическая активность полученной настойки, характеризующаяся в выраженной противомикробной, антиоксидантной, иммунной, андрогенной, физиологической, интеллектуальной активности организма, обусловлена наличием компонентов экстрактивных веществ, в частности оксикарбоновых кислот, аминов, гормонов а также витаминов, флавоноидов, углеводов и других биологически активных соединений.

Спиртовая настойка с высоким содержанием жирных и карбоновых кислот, аминокислот, протеинов, спиртов, углеводов, витаминов А, Б, Е, микроэлементов, ферментов, стероидов и фитогормонов природного происхождения повышает половое влечение и интенсивность образования андрогенов у мужчин. Восстанавливает функции семенников и предстательной железы у мужчин и функции яичников у женщин, тем самым способствует предотвращению развития как мужского, так и женского бесплодия. У женщин в период климакса способствует восстановлению гормонального фона, улучшает обмен веществ, способствует поддержанию жизненного тонуса и нивелированию проявлений старения. Повышает устойчивость организма к физическим нагрузкам и уменьшает восстановительный период. Предупреждает развитие заболеваний опорно-двигательного аппарата, атеросклероза. Способствует улучшению мозгового кровообращения и памяти. Трутневый гомогенат может усиливать защитные силы организма, за счет высокого содержания гамма-глобулинов; обладает гепатопротективным действием (защита от воздействия радиоактивного излучения, ядовитых веществ, гипоксии): содержание свободного холина способствует предупреждению жировой дистрофии печени; высокое содержание глютаминовой, пантотеновой кислоты, а также ненасыщенных жирных кислот обеспечивает стабилизацию мембран гепатоцитов и повышает их устойчивость к гепатотоксинам. Наличие свободных сульфгидрильных групп и глутатиона может создавать дополнительную барьерную функцию и защищать клетки печени от свободных радикалов в результате процессов, активирующих перекисное окисление липидов. Следовое наличие оксикарбоновых кислот может оказывать противовирусное действие в отношении вирусов гепатита, оказывать нормализующее действие при половой дисфункции.

При исследовании настойки - в течение 2 лет сохранялся количественный и качественный состав биологически активных компонентов, входящих в ее состав (согласно табл. 2). По истечению 2 лет замечено незначительное уменьшение карбоновых кислот - на 5-8%; показатель окисляемости увеличился - на 6-11%. Содержание флавоноидных соединений уменьшилось на 9,5%.

Таким образом, предлагаемая технология получения настойки из трутневого расплода позволяет получить лечебное средство простым способом с сохранением биологической активности компонентов, входящих в состав настойки при использовании спирта этилового различной концентрации как в качестве экстрагента, так и в качестве консерванта и дезинфектанта - и в производственном технологическом процессе, и в готовом продукте.

Похожие патенты RU2690516C2

название год авторы номер документа
НАСТОЙКА ИЗ ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ И СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ 2019
  • Марданлы Сейфаддин Гашим Оглы
  • Мизина Прасковья Георгиевна
  • Рогожникова Елена Петровна
  • Помазанов Владимир Васильевич
  • Гашенко Татьяна Юрьевна
  • Ситникова Елена Анатольевна
RU2722067C2
НАСТОЙКА ЭХИНАЦЕИ И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ НАСТОЙКИ ЭХИНАЦЕИ 2015
  • Марданлы Сейфаддин Гашим Оглы
  • Борисов Вячеслав Юрьевич
  • Помазанов Владимир Васильевич
  • Рогожникова Елена Петровна
  • Осипова Елена Игоревна
RU2567035C2
МЯТЫ ПЕРЕЧНОЙ НАСТОЙКА И СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ 2018
  • Марданлы Сейфаддин Гашим Оглы
  • Мизина Прасковья Георгиевна
  • Рогожникова Елена Петровна
  • Помазанов Владимир Васильевич
  • Гашенко Татьяна Юрьевна
RU2712236C2
СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОГО ПРЕПАРАТА 2011
  • Чижов Владимир Петрович
  • Чижов Сергей Владимирович
  • Кравченко Юлия Валериевна
RU2456005C1
НАСТОЙКА ЭХИНАЦЕИ ПУРПУРНОЙ И СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ 2014
  • Марданлы Сейфаддин Гашим Оглы
  • Борисов Вячеслав Юрьевич
  • Помазанов Владимир Васильевич
  • Рогожникова Елена Петровна
  • Осипова Елена Игоревна
  • Попова Ирина Сергеевна
RU2552919C2
Способ получения трутневого молочка из личинок трутня 2022
  • Червяков Дмитрий Эдуардович
  • Луцук Светлана Николаевна
  • Балыкова Дарья Андреевна
RU2790723C1
СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ЛИОФИЛИЗИРОВАННОЙ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОЙ ДОБАВКИ ДЛЯ ЖИВОТНЫХ И СРЕДСТВО НА ЕГО ОСНОВЕ 2010
  • Луцук Светлана Николаевна
  • Меликова Юлия Николаевна
  • Писаренко Наталья Александровна
  • Скрипкин Валентин Сергеевич
  • Белугин Николай Васильевич
RU2435433C1
СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ ИЗ ЛИЧИНОК ТРУТНЕЙ ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ОРГАНИЗМА СОБАК ПРИ ПАРАЗИТОЗАХ 2009
  • Луцук Светлана Николаевна
  • Дьяченко Юлия Васильевна
  • Белик Юлия Игоревна
RU2402920C1
СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПРЕПАРАТА ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ ОБЩЕЙ И СПЕЦИФИЧЕСКОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ОРГАНИЗМА ЖИВОТНЫХ 2005
  • Луцук Светлана Николаевна
  • Дробина Анна Ивановна
RU2291704C2
Способ приготовления биологически активной добавки для животных и биологически активная добавка для животных на его основе 2018
  • Луцук Светлана Николаевна
  • Пономарева Мария Евгеньевна
  • Червяков Дмитрий Эдуардович
RU2686448C1

Реферат патента 2019 года НАСТОЙКА ТРУТНЕВОГО РАСПЛОДА И СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к стабильной настойке из личинок трутней, а также способу ее получения. Способ получения настойки из трутневого расплода заключается в том, что проводят экстрагирование измельченных (гомогенизированных) трутневых личинок 40% этиловым спиртом, гомогенат настаивают, затем полученный экстракт сливают, после слива экстракта к обработанному гомогенату добавляют свежий 70% этиловый спирт, проводят настаивание при периодическом перемешивании, весь экстракт сливают. Затем полученные экстракты объединяют, проводят выхолаживание, фильтруют, добавляют антиоксидант и передают в резервуар готовой продукции. Способ осуществляют при определенных условиях и режимах. Способ позволяет получить настойку из личинок трутней с повышенным сроком хранения при сохранении биологической активности компонентов в течение 2 лет. 2 н.п. ф-лы, 2 табл.

Формула изобретения RU 2 690 516 C2

1. Способ получения настойки трутневого расплода, заключающийся в том, что проводят экстрагирование гомогената трутневого расплода этиловым спиртом 40% в соотношении сырье:экстрагент 1:5 при температуре 20-25°С при периодическом перемешивании, настаивают сутки, затем полученный экстракт сливают, к обработанному гомогенату добавляют 70% этиловый спирт в соотношении 1:5, проводят настаивание в течение 1 суток при температуре 20-25°С при периодическом перемешивании, экстракт сливают, полученные экстракты объединяют, объединенный экстракт выхолаживают при 4-7°С еще 2-3 суток, фильтруют, добавляют 0,5-1,5 мас.% антиоксиданта, выбранного из липоевой или лимонной, или яблочной, или аскорбиновой, или сорбиновой, или галловой кислоты, или дегидроквертецина, после чего передают в резервуар готовой продукции.

2. Настойка из трутневого расплода, полученная способом по п. 1.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2019 года RU2690516C2

БУДНИКОВА Н.В
Совершенствование технологии производства и хранения трутневого расплода медоносных пчел //Диссертация кандидата сельскохозяйств
наук, Автореферат, 2011
СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОГО ПРЕПАРАТА 2011
  • Чижов Владимир Петрович
  • Чижов Сергей Владимирович
  • Кравченко Юлия Валериевна
RU2456005C1
СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПРЕПАРАТА ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ ОБЩЕЙ И СПЕЦИФИЧЕСКОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ОРГАНИЗМА ЖИВОТНЫХ 2005
  • Луцук Светлана Николаевна
  • Дробина Анна Ивановна
RU2291704C2

RU 2 690 516 C2

Авторы

Марданлы Сейфаддин Гашим Оглы

Помазанов Владимир Васильевич

Киселева Валентина Алексеевна

Рогожникова Елена Петровна

Романов Борис Константинович

Бурмистрова Лилия Александровна

Будникова Наталья Валентиновна

Даты

2019-06-04Публикация

2017-11-22Подача