Средство, обладающее гепатопротекторной активностью Российский патент 2019 года по МПК A61K36/738 A61K36/185 A61K36/28 A61K36/534 A61P1/16 

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к средству на основе растительного сырья, обладающему гепатопротекторной активностью.

Известно, что в окружающей среде, в потребляемых продуктах присутствует огромное количество гепатотоксичных ксенобиотиков, с которыми человек контактирует в течение всей своей жизни.

В последние десятилетия возрос и имеет дальнейшую тенденцию к распространению удельный вес заболеваний гастроэнтерологической патологии, около половины которой составляют заболевания печени. Гепатопротекторные средства патогенетической терапии острых и хронических заболеваний гепатобилиарной системы нормализуют строение, метаболизм, функции паренхимы печени.

Известно, что хроническое потребление алкоголя сопровождается поражением печени (жировая инфильтрация, гепатит). Основное биологическое действие этанола связано с нарушением тканевого и клеточного метаболизма, подавлением системы иммунитета, токсичностью (Кольер Дж.А.Б. и др. Оксфордский справочник для клицинистов., М.: Медицина, 2000 г).

Использование синтетических лекарственных средств (антибиотики, НПВС) не всегда обеспечивает желаемый эффект, в ряде случаев усугубляет течение заболевания. В связи с этим актуальным представляется разработка и применение растительных лекарственных средств, отличающихся достаточно выраженной эффективностью и безопасностью при лечении и профилактике алкогольном поражении печени.

Лечебный эффект достигается за счет широкого спектра фармакологических свойств лекарственных растений: гепатопротекторного, желчегонного, противовоспалительного, антимикробного, вяжущего, иммуномодулирующего и др.

Печень и почки являются основными органами, участвующими в метаболизме и выводящими лекарственные вещества, которые не подвергаются интенсивному метаболизму и экскреции в печени (Терапевтический справочник Вашингтонского университета. Ред. Вудли М. и Уэлан А. М., 1995 г., с. 422-423). Фитопрепараты же отвечают всем этим требованиям.

Очень часто для лечения хронических заболеваний печени, возникающих на фоне применения различных препаратов, применяются гепатопротективные медикаменты: эссенциале, цитрат бетамина, а также витамины различных групп.

Для лечения хронического алкогольного гепатита применяется препарат хофитол, полученный из экстракта свежих листьев артишока. Хофитол обладает прямым действием на печень и почки, а также на другие органы и системы организма. В тоже время препарат улучшает антитоксическую функцию печени, увеличивает выработку коферментов гепатоцитами, оказывает влияние на метаболизм липидов и холестерина (Лоранская И.Д., Ракитская Л.Г. Мамедова Л.Д. Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колонопроктологии. 2005 г., №3, с. 83). Однако данный препарат обладает слабовыраженным клиническим действием и недостаточно эффективен в лечении медикаментозных гепатитов.

Для лечения заболеваний печени применяется гепатопротективный сбор №1: трава бессмертника песчаного (1 часть), горец птичий (1 ч.), трава расторопши пятнистой (1 ч.), трава репешка (1 ч.), трава манжетки обыкновенной (1 ч.), плоды шиповника коричного (1 ч.) Столовую ложку смеси необходимо залить 1 стаканом кипятка, настоять 3-6 часов в термосе, процедить. Употреблять по 1/3-1/2 стакана три раза в день за 20-30 мин до еды (Иванченко В.А. Натуральная медицина. М., 2004 г., с. 242). Однако данный сбор не обладает выраженным лечебным действием из-за недостаточного гепатопротекторного эффекта, а при длительном применении возможны побочные влияния травы расторопши пятнистой на деятельность сердца. Кроме того, сбор находится в термосе 3-6 часов, что ослабляет действие некоторых активных веществ, находящихся в лекарственном сырье.

Применяется также гепатопротективный сбор №2: измельченные корни и корневища девясила большого - 1 ч., трава буквицы лекарственной - 1 ч.; трава полукрасильная - 1 ч.; трава подорожника большого - 2 ч.; трава манжетки - 1 ч.; измельченные корневища володушки - 1 ч.; плоды барбариса - 1 ч.; трава цикория обыкновенного - 1 ч.; трава чистотела большого - 1 ч.; корни солодки голой - 1 ч. Столовую ложку смеси необходимо залить 1/5 стакана воды, кипятить 10 мин, настоять - 1 час, остудить. Употреблять по 1/3-1/2 стакана три раза в день до еды (Иванченко В.Н. Натуральная медицина. М., 2004, с. 242). Однако гепатопротекторный сбор №2: не рекомендуется применять пациентам с повышенной кислотностью желудочного сока из-за относительно большого содержания травы подорожника большого - 2 части. Кроме того, у отдельных больных не исключена токсическая реакция на траву чистотела большого - 1 ч.

Для лечения хронического гепатита также используют чай из следующего сбора: трава зверобоя продырявленного - 40,0 г, трава спорыша - 20,0 г, трава дикого цикория - 30,0 г, цветки бессмертника песчаного - 40,0 г, цветки ромашки аптечной - 10,0 г, кора крушины - 30,0 г, цветки календулы - 40,0 г. 20,0 г смеси вечером залить 400 мл сырой воды, настоять ночь, утром кипятить 5-7 мин, настоять 20 мин, употреблять в течение дня (Лавренова Г.В. Лекарственные травы. М., 1996 г., кн. 2, с. 367-368). Данный сбор не вызывает достаточно выраженного клинического действия при лечении медикаментозных гепатитов из-за относительно высокого содержания цветков бессмертника песчаного - 40,0 г, и его нецелесообразно применять пациентам с гиперацидным гастритом и хроническим колитом из-за высокого содержания коры крушины.

Известны также гепатопротекторы растительного происхождения-легалон (силимарин, силибинин), карсил, полученные из плодов расторопши пятнистой, являющиеся наиболее близкими по фармакологической активности к предлагаемому гепатопротекторному сбору из лекарственного растительного сырья и рекомендуются в качестве препаратов сравнения при изучении гепатопротекторных лекарственных средств (Хабиев Р.У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ, Москва, 2005, с. 683-691).

Известен растительный сбор, обладающий гепатопротекторной активностью и используемый для лечения больных лекарственным гепатитом, содержащий помимо других компонентов лист крапивы двудомной, лист мяты перечной, корень девясила (RU 2419449 С1, 27.05.2011). Недостатком данного сбора является многокомпонентный состав, недостаточно высокая гепатопротекторная активность.

Предложен сбор из растительного сырья, который обладает выраженной гепатопротекторной активностью и состоит из жмыха плодов расторопши-30 масс%, корневища и корня девясила-10 масс%, корня цикория-15 масс%, плодов шиповника-10 масс%, листьев мяты-10 масс%, листьев крапивы-10 масс%, травы тысячелистника-15 масс%.

Технический результат заключается в создании средства, обладающего выраженным гепатопротекторным действием, а также в расширении арсенала средств с гепатопротекторной активностью.

Технический результат достигается тем, что предложено средство, представляющее собой травяной сбор, включающий жмых плодов расторопши, корневище и корень девясила, корень цикория, плоды шиповника, листья мяты, листья крапивы, траву тысячелистника, при следующем соотношении компонентов, в масс%:

жмых плодов расторопши - 30,

корневище и корень девясила - 10,

корень цикория - 15,

плоды шиповника - 10,

листья мяты - 10,

листья крапивы - 10,

траву тысячелистника - 15.

В состав предложенного средства входят лекарственные растения, разрешенные к применению в медицинской практике: жмых плодов расторопши (ТУ 64-4-99-93), корневище и корень девясила (ГФ XI, вып. 2, ст. 73), корень цикория (ГОСТ 13031-67), плоды шиповника (ГФ XI, вып. 2, ст. 38), листья мяты (ГФ XI, вып. 2, ст. 18), листья крапивы (ГФ XI, вып. 2, ст. 25), трава тысячелистника (ГФ XI, вып. 2, ст. 53).

Предложенное соотношение входящих в сбор лекарственных растений подобрано опытным путем и представляет наиболее целесообразное количественное сочетание компонентов, при котором предложенное средство характеризуется наиболее выраженным гепатопротекторным действием.

Входящие в состав жмых плодов расторопши оказывает гепатопротекторный эффект, содержащиеся в нем силибин, силимарин, стабилизируют клеточные мембраны гепатоцитов, предотвращая выход ферментов из клеток, тормозят проникновение в клетки различных токсинов. Жирные масла (32%), биогенные амины (тираимн, гистамин) обеспечивают клетки печени ценными соединениями, способствуя образованию новых клеток.

Корень цикория, содержащий полисахариды, улучшает углеводный обмен, благодаря наличию в нем большого количества инулина, оказывает мощный желчегонный эффект.

Трава тысячелистника богата витамином К, который обеспечивает гемотоксическое действие, предотвращая кровотечение, это особенно ценно при циррозе печени.

Листья крапивы содержит комплекс биологически активных веществ. В листьях крапивы содержаться витамины и соли железа, которые нормализуют липидный обмен в летках печени, обладают и противовоспалительным эффектом, улучшают процессы регенерации, также восстанавливает сопротивляемость организма к воздействию различных факторов внешней и внутренней среды.

Плоды шиповника содержат большое количество витамина С, каротин, витамин В2, витамин К, 18% сахара, токоферолы, все эти витамины нормализуют обменные процессы в печени.

Корень девясила содержит эфирные масла (до 4,3%), обладает бактерицидным противовирусным эффектом, благодаря которому используется как дополнительное средство при вирусных гепатитах. Корень девясила ускоряет процессы восстановления клеток, обладает желчегонной активностью. Богат инулином (44%), который регулирует углеводный обмен.

Листья мяты богаты эфирными маслами. Лечебный эффект обусловлен эфирным маслом-ментолом (60%), которое оказывает умеренный седативный, спазмолитический, антитоксический и холеретический эффект. Эфирное мятное масло улучшает пищеварение желудочно-кишечного тракта, воздействуя на гладкую мускулатуру желчевыводящих протоков.

Растительные компоненты сбора в комплексе оказывают нормализующее действие на метаболизм в печени и ее детоксикационную функцию. Предложенный сбор обладает способностью восстанавливать клеточные мембраны, структуру клеток, выводит из организма холестерин. Водный настой предлагаемого сбора обладает выраженной гепатопротекторной активностью, не уступающей эталонному препарату - карсилу. Способность данного сбора эффективно предотвращать и устранять последствия токсического поражения печени, выявлена при проведении экспериментальных исследований.

Технология приготовления сбора заключается в том, что каждый вид растительного сырья, удовлетворяющий требованиям Госфармакопеи, измельчают до размера 5-7 мм. Затем лекарственное сырье взвешивают и тщательно смешивают в определенных частях до равномерной смеси и отсеивают от пыли сквозь сито с диаметром отверстий 0,18 мм, фасуют.

Средство применяют в виде фиточая, для приготовления которого 2 чайные ложки сбора заливают 200 мл кипятка, настаивают в течение 10-15 минут, охлаждают при комнатной температуре, фильтруют. Полученный фильтрат используют для определения фармакологических свойств.

Мембранопротекторную активность сбор проявлял на модели острого отравления четыреххлористым углеродом. В интегральном тесте оценивалась микровязкость мембран по подвижности флуоресцентного зонда пирена в мембранах эритроцитов (табл. 1). Структура биомембран в патогенезе большинства патологических состояний нарушается за счет интенсификации перекисного окисления липидов, в процессе которого в гидрофобных жирнокислотных остатках липидов образуются гидроперекисные группы. Взаимодействие этих групп с другими полярными структурами биомембран приводит к увеличению микровязкости клеточных и субклеточных мембран, что, как следствие, ведет к нарушению внутриклеточного метаболизма. Как видно из таблицы 1, сбор по своему действию занимает промежуточное положение между контролем (интактные животные) и нелеченными. Таким образом, сбор обладает определенным мембранопротекторным действием (табл. 1).

На следующем этапе исследований было проведено сравнительное изучение лечебно-профилактического действия разработанного сбора, сбора из патента RU 2419449 и эталонного препарата - карсила при CCl₄-индуцированном токсическом гепатите. Исследование выполнено на 60 белых беспородных крысах-самцах массой 220-240 г, случайным образом распределенных по 4-м группам:

1-я группа - интактные крысы (n=22);

2-я группа - контрольная группа (n=22);

3-я группа - опытная, заявляемый сбор (n=28);

4-я группа - опытная, сбор из патента RU 2419449 (n=28).

5-я группа - опытная, эталонный препарат - карсил (n=28).

Животных содержали в стандартных условиях вивария на стандартном рационе кормления. Первая опытная группа в течение трех недель получала водное извлечение из заявляемого сбора. Вторая опытная группа получала в течение трех недель водное извлечение из сбора RU 2419449. В течение первых двух недель эксперимента опытные животные получали настой в условиях свободного запаивания, в среднем на одно животное приходилось по 30 мл настоя в день. Третья опытная группа получала карсил (Sopharma, Болгария) в дозе 200 мг/кг внутрижелудочно в виде взвеси, как эталонный препарат с гепатопротекторной активностью. Животные из контрольной и интактной групп получали воду ad librum.

На 15-й день эксперимента у опытных и контрольной групп животных вызывали токсический гепатит внутрибрюшинным введением CCl₄ в виде 25% раствора в оливковом масле, однократно в дозе 0,2 мл/кг (в пересчете на CCl₄). После чего животные продолжали получать гепатопротекторы еще в течение 7 дней. Таким образом, в эксперименте было смоделировано лечебно-профилактическое применение гепатопротекторов.

Гепатопротекторное действие исследуемого сбора оценивали с помощью тиопенталовой пробы. Тиопентал вводили внутрибрюшинно в дозе 50 мг/кг и фиксировали продолжительность тиопенталового наркоза по показателю «бокового положения». Проба позволяет оценить скорость метаболизма тиопентала, осуществляемого цитохром P-450-зависимой монооксигеназной системой гепатоцитов.

Результаты проведенного эксперимента обработаны с использованием t-критерия Стьюдента и представлены в таблице 2.

CCl₄-гепатит характеризуется развитием колликвационного некроза, белковой и жировой дистрофии гепатоцитов, локализованных преимущественно в центральной зоне печеночной дольки, где максимальна активность зависимых от цитохрома Р-450 монооксигеназ и преобладает продукция повреждающих метаболитов гепатотоксина. Из данных, полученных в эксперименте видно, что продолжительность тиопенталового наркоза у животных, подвергавшихся воздействию гепатотоксина (контроль), продолжительность тиопенталового наркоза была почти в 3 раза выше, чем у интакта. Лечебно-профилактическое применение изучаемого сбора полностью предупреждало эти CCl₄-индуцированные изменения. Следует отметить, что сравнение гепатопротекторного эффекта по данному показателю (продолжительность тиопенталового наркоза) не выявило достоверного различия от этого же показателя препарата сравнения - карсила. Это свидетельствует о меньшем поражении печени в опытной группе (заявляемый сбор) и сохранившейся функции цитохром Р-450-зависимой монооксигеназной системы гепатоцитов.

В качестве информативных критериев оценки сохранности печеночной ткани и гепатопротекторной эффективности предлагаемого сбора были также использованы некоторые биохимические и энзимологические показатели крови.

У экспериментальных животных, не подвергавшихся воздействию тиопентала, на 21 сутки от начала опыта, после декапитации, отбирали кровь для определения холестерина, билирубина (общий, прямой, непрямой), АЛТ, ACT. Кровь центрифугировали 10 мин при 3000 об/мин на центрифуге «Scanspeed mini» (США). Отбирали плазму и оценивали биохимические показатели крови с использованием наборов фирмы «Intermedica» (США), согласно инструкции производителя на биохимическом анализаторе фирмы «Biochem» (США) (см. табл. 3).

Как видно из результатов, приведенных в таблице 2, в группе контроля CCl₄ гепатита наблюдалось значительное повышение уровня печеночных ферментов, холестерина, общего, прямого и непрямого билирубина, вызванное воздействием гепатотоксина. В группе, получавшей заявляемый сбор на фоне гепатита, указанные сдвиги были существенно менее выражены, в том числе по сравнению со сбором по патенту RU 2419449. Следует отметить, что данные, полученные в группе «CCl₄ + заявляемый сбор» лишь незначительно уступают результатам, полученным в группе животных «CCl₄ + карсил».

Таким образом, данные, полученные в эксперименте, свидетельствуют о наличии выраженных гепатопротекторных свойств у сбора, состоящего из жмыха плодов расторопши, корневища и корня девясила, корня цикория, плодов шиповника, листьев мяты, листьев крапивы, травы тысячелистника.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к средству на основе растительного сырья, обладающему гепатопротекторным действием. Предложенное средство представляет собой сбор из жмыха плодов расторопши, корневища и корня девясила, корня цикория, плодов шиповника, листьев мяты, листьев крапивы, травы тысячелистника, взятых в определенном соотношении компонентов. Предложенное средство обладает выраженной гепатопротекторной активностью и расширяет арсенал гепатопротекторных средств. 3 табл.

Средство, обладающее гепатопротекторной активностью, представляющее собой травяной сбор, содержащий жмых плодов расторопши, корневище и корень девясила, корень цикория, плоды шиповника, листья мяты, листья крапивы, траву тысячелистника, при следующем соотношении компонентов, в масс %:

жмых плодов расторопши 30 корневище и корень девясила 10 корень цикория 15 плоды шиповника 10 листья мяты 10 листья крапивы 10 траву тысячелистника 15