Способ диагностики перинатального поражения центральной нервной системы плода при гестационном сахарном диабете Российский патент 2019 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, перинатологии и клинической лабораторной диагностике и может быть использовано в обследовании рожениц.

Гестационный сахарный диабет является одной из причин перинатального поражения центральной нервной системы (ЦНС), перинатальной заболеваемости и смертности. Улучшение перинатальных исходов у новорожденных достигается ранним началом патогенетической терапии. Разработка информативных методов ранней диагностики перинатального поражения ЦНС плода является важной задачей в решении проблемы перинатальной заболеваемости и смертности.

Известен способ диагностики гипоксии новорожденного ( В., Katlan D.C., Т., A. Neural and cardiac injury markers in fetal growth restriction and their relation to perinatal outcomes // Turk. J. Obstet. Gynecol. - 2019. - Vol. 16(1). PP. 50-54) путем взятия образца капиллярной крови из артерии пуповины новорожденного и определения в ней концентрации нейронспецифической енолазы. При концентрации нейронспецифической енолазы в артерии пуповины новорожденного выше 22,4 мг/л диагностируют поражение центральной нервной системы (ЦНС) новорожденного.

Недостатком известного способа является поздняя диагностика перинатального поражения ЦНС новорожденного.

Наиболее близким по технической сущности и достигаемому техническому результату является способ диагностики дистресса плода в родах путем определения концентрации нейронспецифической енолазы в образце амниотической жидкости (Zinsmeyer J., Marangos P.J., Issel E.P., Gross J. Neuron specific enolase in amniotic fluid-a possible indicator for fetal distress and brain implication // J. Perinat. Med. - 1987. - Vol. 15(2). - PP. 199-202). По известному способу при проведении амниоцентеза забирают образец амниотической жидкости в пробирки, центрифугируют ее при 4000 g, замораживают и лиофилизируют образец с последующим восстановлением исходного объема дистиллированной водой определяют концентрацию нейронспецифической енолазы в амниотической жидкости методом радиоиммунного анализа. При концентрации нейронспецифической енолазы в амниотической жидкости выше 1,02-1,33 мкг/л диагностируют дистресс плода.

Недостатком известного способа являются низкая точность и длительное время исследования.

Техническим результатом заявляемого способа является повышение чувствительности и специфичности исследования за счет использования определения концентрации нейронспецифической енолазы в амниотической жидкости.

Технический результат заявляемого способа достигается тем, что образец амниотической жидкости забирают при проведении индукции родов на зрелых родовых путях при открытии зева не менее 3 см или при кесаревом сечении проколом плодного пузыря и отсасыванием вод через иглу, надетую на шприц для инъекций и определяют в амниотической жидкости концентрацию нейронспецифической енолазы методом иммуноферментного анализа (ИФА) и при концентрации нейронспецифической енолазы в амниотической жидкости выше 4,9 нг/мл диагностируют повреждение ЦНС плода.

Способ осуществляют следующим образом.

Для иллюстрации заявляемого способа даны фигуры в виде таблицы и рисунка 1, 2.

На фиг. 1 представлена статистическая характеристика концентрации лактата, определенная энзиматическим колориметрическим методом, в амниотической жидкости.

На фиг. 2 представлены результаты ROC-анализа (receiver operating characteristic) при определении нижнего диагностического порога концентрации нейронспецифической енолазы в амниотической жидкости в группах при рождении новорожденных с поражением ЦНС при сроках беременности от 36 до 41 недели.

В заявляемом способе используют:

Оборудование

1. Вертикальный фотометр «Multiscan» (Labsystems, Финляндия) или аналогичный - 1 шт.

2. Автоматический дозатор с диапазоном дозирования 10-200 мкл - 1 шт.

Вещества и материалы

1. Иглы для пункции заднего свода влагалища.

2. Одноразовые стерильные пластиковые или стеклянные пробирки без антикоагулянта.

3. Одноразовые пластиковые наконечники для автоматического дозатора.

4. Набор реагентов для определения концентрации нейронспецифической енолазы методом иммуноферментного анализа (Вектор-Бест, Россия).

Забирают образцы амниотической жидкости в первом периоде родов вагинальной амниотомией при раскрытии шейки матки 4-5 см. Амниотомию проводят при помощи иглы для пункции заднего свода влагалища. После начала истечения амниотической жидкости из иглы к игле подносят стерильную пробирку и производят забор не менее 1-2 мл амниотической жидкости. В образце амниотической жидкости энзиматическим колориметрическим методом определяют концентрацию нейронспецифической енолазы (фиг. 1). При концентрации нейронспецифической енолазы в амниотической жидкости выше 4,9 нг/мл (фиг. 2) диагностируют гипоксию плода в родах. Величина концентрации нейронспецифической енолазы 4,9 нг/мл установлены экспериментально.

Клинический пример №1.

Беременная К., 35 лет, поступила в отделение патологии беременных №2 КГБУЗ «Алтайский краевой клинический перинатальный центр» 20.02.2018 с диагнозом: Беременность 36,6 недель. Отягощенный акушерский анамнез. Рубец на матке после операции кесарева сечения. Ожирение 1 степени. Гестационный сахарный диабет, на инсулинотерапии. Диабетическая фетопатия.

22.02.2018 в сроке беременности 37 недель женщина родоразрешена путем операции кесарева сечения в плановом порядке по поводу прогрессирующей диабетической фетопатии, наличия рубца на матке. Извлечен плод мужского пола массой 4090 г, ростом 54 см, с оценкой по шкале Апгар на 1 минуте - 7 баллов, на 5 минуте - 7 баллов. Взятие амниотической жидкости для определения уровня нейронспецифической енолазы (НСЕ) произведен после разреза на матке путем прокола плодного пузыря инъекционной иглой в комплекте с одноразовым шприцем. Концентрация НСЕ составила 6,85 нг/мл, что расценили как перинатальное поражение ЦНС плода.

Новорожденный переведен на второй этап выхаживания на 7 сутки жизни с диагнозом: Перинатальное поражение ЦНС гипоксически-ишемического генеза, синдром мышечной гипотонии, диабетическая фетопатия, гипертрофическая форма.

Клинический пример №2.

Беременная П., 44 лет, поступила в отделение патологии беременных №2 КГБУЗ «Алтайский краевой клинический перинатальный центр» 20.10.2017 с диагнозом: Беременность 36,1 недель. ГСД, не компенсированный. Диабетическая фетопатия. Множественная миома матки. Гипертоническая болезнь 1 стадии, 1 степени. Ожирение 1 степени.

30.10.18 на сроке 37 недель проведена индукция родов. Родился ребенок женского пола массой. Вовремя амниотомии, произведен забор амниотической жидкости с целью определения уровня нейронспецифической енолазы. Родился ребенок женского пола массой 3490, ростом 55 см, с оценкой по шкале Апгар на 1 минуте - 6 баллов, на 5 минуте - 6 баллов. Забор амниотической жидкости для определения уровня нейронспецифической енолазы проведен путем вагинальной амниотомиии при зрелой шейке матки.

Концентрация НСЕ составила 38,6 нг/мл, что расценили как перинатальное поражение ЦНС плода.

При выписке диагноз у новорожденного: Церебральная ишемия, синдром угнетения легкой степени. Выписан домой на 5 сутки 04.11.17.

Клинический пример №3.

Беременная Ч, 33 года, поступила в отделение патологии беременных №2 КГБУЗ «Алтайский краевой клинический перинатальный центр» 10.01.18 с диагнозом: Беременность 40,0 недели. Отягощенный акушерский анамнез. Нейроциркуляторная дистония по кардиальному типу. Хронический гастрит, ремиссия.

12.01.2018 в 40,2 недели проведена индукция родов. Родился ребенок мужского пола массой 3190 г, ростом - 50 см, с оценкой по шкале Апгар на 1 минуте - 7 баллов, на 5 минуте - 8 баллов. Забор амниотической жидкости для определения уровня нейронспецифической енолазы проведен путем вагинальной амниотомиии при зрелой шейке матки (открытие маточного зева - 3 см).

Концентрация НСЕ составила 2,89, что расценили как норму.

Новорожденный выписан домой на 4 сутки с диагнозом: Период новорожденности.

Заявляемый способ обладает высокой скоростью проведения исследования, поскольку использует высокочувствительный метод определения концентрации нейронспецифической енолазыа в амниотической жидкости, высокой точностью, поскольку учитывает низкие и высокие концентрации лактата в амниотической жидкости, и найдет широкое применение для диагностики гипоксии плода в родах при срочных родах.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, гинекологии, перинатологии и клинической лабораторной диагностике, и может быть использовано для диагностики поражения центральной нервной системы плода при срочных родах при беременности, осложненной гестационным сахарным диабетом. Для этого забирают образец амниотической жидкости при проведении индукции родов на зрелых родовых путях при открытии зева не менее 3 см или при кесаревом сечении проколом плодного пузыря и отсасыванием вод через иглу, надетую на шприц для инъекций. В указанном образце определяют концентрацию нейронспецифической енолазы методом иммуноферментного анализа и при концентрации нейронспецифической енолазы в амниотической жидкости выше 4,9 нг/мл диагностируют поражение центральной нервной системы плода. Изобретение обеспечивает повышение чувствительности и специфичности исследования. 2 ил., 3 пр.

Способ диагностики перинатального поражения центральной нервной системы плода при гестационном сахарном диабете, включающий определение концентрации нейронспецифической енолазы в образце амниотической жидкости, отличающийся тем, что образец амниотической жидкости забирают при проведении индукции родов на зрелых родовых путях при открытии зева не менее 3 см или при кесаревом сечении проколом плодного пузыря и отсасыванием вод через иглу, надетую на шприц для инъекций, и определяют в амниотической жидкости концентрацию нейронспецифической енолазы методом иммуноферментного анализа и при концентрации нейронспецифической енолазы в амниотической жидкости выше 4,9 нг/мл диагностируют поражение центральной нервной системы плода.