Способ дифференциальной диагностики анте- и интранатального церебрального повреждения у новорожденных Советский патент 1992 года по МПК G01N33/68 

Изобретение относится к медицине, в частности к перинатологии, и может найти широкое применение.

Известен способ дифференциальной диагностики перинатальных повреждений центральной нервной системы у новорожденных детей путем исследования в крови пуповины и на 7-10-е сутки жизни уровня комплемента. При содержании комплемента в крови 10-35 ед. диагностируют гипокси- ческое повреждение, а при 45-89 ед. - травматическое (авт.св, № 1121006, МКИ А 61 К 39/00).

Известный способ обладает рядом недостатков:

Постановка диагноза травматического повреждения мозга осуществляется на 7- 10-й день.

Наличие тяжелых осложнений в родах, приводящих к значительной гипоксии, вызывает повреждение мозга плода идентичное травматическому, что не позволяет дифференцировать их как анте- и интранаталь- ные.

Цель изобретения - повышение точности на доклинической стадии.

Околоплодные воды получали с помощью амниоцентеза у женщин в 28-36 недель беременности для оценки состояния плода и выбора оптимальных сроков и способа родоразрешения. Способ выполняется следующим образом.

В околоплодных водах и крови пуповины определяют активность нейроспецифической енолазы любым известным методом. Используют наборы реактивов для иммуно- ферментного анализа активности нейроспецифической енолазы СП Диаплюс. Для осуществления последнего берут 25 мкл исследуемой биологической жидкости (около- плодных вод или сыворотки крови),

(Л

с

Ч 00

С

ы

параллельно ставят контрольные и стандартные пробы, добавляют 250 мкл анти-НСЕ реагента и шарик, покрытый моноклональ- ными антителами к НСЕ после инкубации в течение 60 мин при 37°С, шарики промывают, добавляют 250 мкл раствора пероксида- зы и антител к иммуноглобулинам, после повторной инкубации в тех же условиях в пробирки добавляют 250 мкл раствора 0-фе- нмлендиамина. Инкубируют пробирки при 18-26°С в темноте в течение 30 мин, реакцию останавливают добавлением 1 мл серной кислоты и замеряют оптическую плотность образцов при длине волны 492 нм.

При величине енолазы в околоплодных водах Btiiue 0,7 нг/мл и в крови пуповины выше 39 нг/мл диагностируют антенатальное повреждение мозга, а при величине енолазы в околоплодных водах 0,7 нг/мл и ниже и в крови пуповины выше 39 нг/мл диагностируют интранатальт-toe повреждение мозга.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

П р и м е р 1. Беременная Т-а 29 лет, поступила 4.02.89 г. в родильное отделение за 10 дней до родов.

Диагноз: Беременность 38 недель, состояние после клиновидной резекции яичников по поводу синдрома склерололи- кистоза яичников.

5,02.90 г. произведен амниоцентез, получены околоплодные воды. Содержание енолазы 0,7 нг/мл.

12.02.90 г.-роды.

Диагноз: Роды 1-е срочные, вторичная слабость родовой деятельности, наложение акушерских щипцов.

Родился ребенокженского пола, оценка по шкале Апгар 8-10 баллов. Содержание енолазы в крови пуповины 56 нг/мл. Неврологический статус: акроцианоз, рефлексы вялые, патологическая установка стоп, ригидность затылочных мышц. На вторые сутки состояние ребенка оценено (сак тяжелое. Переведен в реанимационное отделение.

Из приведенного примера очевидно, что предлагаемый способ дает возможность подтверждения интраиатального повреждения мозга новорожденного ребенка, поскольку активность енолазы в крови пуповины повышена (нормальные показатели - 12-39 нг/мл), а в околоплодных водах находится в пределах нормальных показателей 0,1-0,7 нг/мл. Под нормальными показателями понимают уровни енолазы в околоплодных водах и крови пуповины, при которых дети рождались с отсутствием церебральных повреждений.

П р и м е р 2. Беременная Р-к, 28 лет, поступила в родильное отделение 2.02.89 г.

Диагноз: Беременность 36 недель, токсикоз I половины беременности, водянка 5 беременной.

В анамнезе бесплодие в течение 5 лет, индуцированная беременность, 12.02.89 г, проведен амниоцентез, получены околоплодные воды. Активность енолазы 0,8 0 нг/мл.

18,02.89 г, родила ребенка женского пола, оценка по шкале Апгар - 6-8 баллов. Роды протекали без осложнений. Активность енолазы крови пуповины - 40 нг/мл. 5 При осмотре у ребенка наблюдалась выраженная неврологическая симптоматика: тремор верхних и нижних конечностей, подбородка, горизонтальный нистагм, напряжение родничка.

0Приведенный пример доказывает, что

предлагаемый способ позволяет диагностировать антенатальтное повреждение мозга новорожденного, поскольку уровень енолазы был повышен не только в крови пупови- 5 ны, но и в амниотической жидкости.

Определение активности енолазы в околоплодных водах проведено-у 53 беременных, 53 исследования проведены также в крови пуповины.

0 Анализ состояния новорожденных позволил установить, что у 19 детей неврологическая симптоматика отсутствовала, у 34 новорожденных наблюдались неврологические нарушения. Причем у 16 новорожден- 5 ных диагностировано антенатальное повреждение мозга, а у 18 - интранаталь- ное.

Полученные данные представлены в таблице.

0Предлагаемый способ позволяет проводить точную дифференциальную диагностику анте- и интранатальных повреждений на доклинической стадии, обосновать тактику родоразрешения дать объективную оценку 5 качества ведения родов, проводить своевременную адекватную терапию церебральных повреждений новорожденного и тем самым снизить смертность и инвалидиза- цию, 0

Формула изобретения

Способ дифференциальной диагностики анте- и интранатального повреждения у новорожденных путем биохимического ана- 5 лиза пуповинной крови, отличающий- с я тем, что, с целью повышения точности способа на доклинической стадии, исследуют уровень нейроспецифической енолазы, при его значении выше 39 нг/мл дополни- телыю определяют уровень этого фермента

в околоплазных водах и при его значении выше 0,7 нг/мл диагностируют антенатальное повреждение мозга, а ниже 0,7 нг/мл интранатальное повреждение.

Цель изобретения - повышение точности и возможности осуществления доклинической диагностики анте- и интранатальных повреждений мозга. Сущность изобретения: околоплодных водах и крови пуповины определяют уровень нейроспецифической знолазы и при величине энолазы в крови пуповины выше 39 нг/мл, а в околоплодных водах выше 0,7 нг/мл диагностируют антенатальное повреждение мозга, если в околоплодных водах уровень энолазы 0,7 и ниже - диагностируют интранатальное повреждение мозга. Положительный эффект: определение энолазы в оМлЪплодных водах позволяет осуществить дифференциальную диагностику церебральных повреждений у площа и новорожденного на доклинической стадии. 1 табл.

Уровень енолазы в околоплодных водах и крови пуповины

р - достоверность отличия нормальных показателей.