Способ исследования ротовой жидкости Российский патент 2019 года по МПК G01N33/487 

Описание патента на изобретение RU2708241C1

Изобретение относится к области стоматологии, а точнее к способам исследования ротовой жидкости и может быть использовано для изготовления из нее гистологического препарата и его последующего исследования картиной.

Известен способ исследования ротовой жидкости, включающий ее сбор с использованием коллекторов, содержащих хлопковый тампон из стоматологической (хирургической) ваты. Хлопковый тампон помещают под язык на 10 минут без стимуляции слюноотделения. После того как тампон пропитается слюной, его помещают в коллектор, закрываемый герметично пластмассовой пробкой, коллектор опечатывают и направляют с сопроводительной документацией в лабораторию в сумке-холодильнике (см. Приказ Минздравсоцразвития РФ от 27 января 2006 г. № 40 «Об организации химико-токсикологических исследований при аналитической диагностике наличия в организме человека алкоголя, наркотических средств, психотропных и других токсических веществ»).

Недостаток этого технического решения - количество жидкости ограничено, клетки в мазках идентифицируются единичные, поэтому способ мало информативен, и не дает представление о состоянии ротовой полости.

Известен также способ исследования ротовой жидкости, включающий ее сбор и центрифугирование, приготовление препарата и последующее его исследование (см. RU № 2432620, МПК G09B 23/28, 2010). Забор жидкости осуществляют утром, натощак, до чистки зубов. Центрифугируют в течение 10 минут при скорости 3000 об/мин. Для определения физико-химических параметров ротовой жидкости использовались методики, адаптированные в стоматологии для изучения ротовой жидкости (Питаева А.Н., Коршунов А.П., Дистель В.А. и др. «Физико-химические методы исследования смешанной слюны в клинической и экспериментальной стоматологии» (учебное пособие) - Омск, 2001).

В результате в препарате - клетки в поле зрения единичны, т.е. препараты малоинформативны. Таким образом, недостаток этого способа – не обеспечивается возможность формирования из ротовой жидкости гистологического препарата с обогащенной цитологической картиной.

Задача, на решение которой направлено изобретение, выражается в обеспечении возможности изучения гистологического препарата с обогащенной цитологической картиной, сформированного из ротовой жидкости.

Технический результат, проявляющийся при решении поставленной задачи, выражается в обеспечении возможности изучения гистологического препарата с обогащенной цитологической картиной, сформированного из ротовой жидкости.

Для решения поставленной задачи способ исследования ротовой жидкости, включающий ее сбор и центрифугирование, приготовление препарата и последующее его изучение, отличается тем, что кроме секрета слюнных желез отбирают микрофлору и продукты их жизнедеятельности, содержимое пародонтальных карманов, десневую жидкость, десквамированный эпителий, продукты распада мигрирующих в полость рта лейкоцитов, для чего в процессе отбора промывают межзубные промежутки, пародонтальные карманы посредством ирригатора полости рта с использованием соответствующих насадок для очистки и промывания объектов полости рта, при этом всю полученную жидкость от одного пациента отводят в отдельную стерильную емкость, затем центрифугируют 30 секунд при скорости 600 об/мин, отделяют осадок и размещают его ровным тонким слоем на предметном стекле, и немедленно изучают с помощью фазовоконтрастной микроскопии.

Кроме того, при наличии ортодонтических конструкций и/или искусственных коронок и/или мостовидных протезов и/или имплантатов, в процессе отбора ротовой жидкости используют соответствующие насадки для их очистки.

Сопоставительный анализ признаков заявленного решения с признаками прототипа и аналогов свидетельствует о соответствии заявленного решения критерию «новизна».

Совокупность признаков формулы изобретения обеспечивает возможность формирования из ротовой жидкости гистологического препарата с обогащенной цитологической картиной, при этом признаки отличительной части формулы изобретения решают следующие функциональные задачи.

Признаки «…кроме секрета слюнных желез отбирают микрофлору и продукты их жизнедеятельности, содержимое пародонтальных карманов, десневую жидкость, десквамированный эпителий, продукты распада мигрирующих в полость рта лейкоцитов…» обеспечивают обогащение ротовой жидкости дополнительными компонентами, позволяющими, при необходимости, расширить набор диагностических признаков, не только в отношении ротовой полости, но и других систем организма.

Признаки «…в процессе отбора промывают межзубные промежутки, пародонтальные карманы посредством ирригатора полости рта с использованием соответствующих насадок для очистки и промывания объектов полости рта…» обеспечивают промывку тонкой струей воды под давлением и зачистку в ротовую жидкость материала с зубов и других объектов полости рта и, тем самым, обогащение ротовой жидкости.

Признак «…всю полученную жидкость от одного пациента отводят в отдельную стерильную емкость…» обеспечивает «привязку» отобранного материала ротовой полости к конкретному пациенту, что позволяет изучить динамику изменения состава ротовой жидкости.

Признак, указывающий, что материал ротовой жидкости «центрифугируют 30 секунд при скорости 600 об/мин», обеспечивает сохранность в исследуемом материале структуры клеток. Осадок при таких условиях центрифугирования представляют только живые клетки, которые в мазке наблюдаются в большом количестве. Морфология клеток соответствует реальной их прижизненной структуре в полости рта.

Признаки, указывающие, что «отделяют осадок и размещают его ровным тонким слоем на предметном стекле», обеспечивают подготовку препарата к исследованию.

Признаки, указывающие, что подготовленный препарат «немедленно изучают с помощью фазовоконтрастной микроскопии» обеспечивает возможность использования полученного материала для изучения состояния ротовой полости и анализа динамики реакции слизистой рта на установку брекетов, имплантатов, зубных протезов различного химического состава или лечения, что расширяет спектр диагностических возможностей и обеспечивает проведение своевременной профилактики реакций отторжения или аллергических проявлений.

Признаки, указывающие, что «при наличии ортодонтических конструкций и/или искусственных коронок и/или мостовидных протезов и/или имплантатов, в процессе отбора ротовой жидкости используют соответствующие насадки для их очистки», повышают эффективность зачистки ротовой полости и эффективность концентрирования материала с поверхности ротовой полости в ротовой жидкости.

На фиг.1 - фиг.4 показаны этапы сбора ротовой жидкости, при этом на фиг.1 процедура установки фиксирующего держателя; на фиг.2 показана промывка и зачистка ротовой полости; на фиг.3 показан отбор ротового материала из ротовой полости; на фиг.4 показано помещение материала в пробирку, для последующего центрифугирования; на фиг.5 – фиг.6 показаны соскоб со слизистой оболочки рта пациента группы исследования с посттравматическими дефектами челюстей, при этом на фиг.5 показан препарат без фиксации; на фиг.6 показан фазовый контраст после фиксации и центрифугирования; на фиг. 7 – фиг.12 показан соскоб со слизистой оболочки рта, при этом на фиг.7 показан митоз эпителиоцита; на фиг.8 и 9 показаны дендритные клетки; на фиг.10 и 11 показаны макрофаги; на фиг.12 показан эпителиоцит.

Для реализации способа используют известные средства: ирригатор полости рта (аппарат, формирующий тонкую струю воды, под давлением), насадки для очистки языка, для промывания пародонтальных карманов, насадки для очистки ортодонтических конструкций (брекетов), насадки для очистки искусственных коронок и мостовидных протезов, насадки для очистки имплантатов. Кроме того, используют другие известные средства: шпатель, слюноотсос, скребок, стерильные пробирки, фиксирующий держатель челюстей. Кроме того, для мягкого центрифугирования используют исследовательскую центрифугу, например, К1015. Для изучения препаратов и изготовления иллюстраций используют микроскоп, например, Olympus Bx51 c фотокамерой DP25.

1 этап - сбор ротовой жидкости. Техника забора материала для исследования из ротовой полости предусматривает:

- установку фиксирующего держателя, обеспечивающего не смыкание челюстей (фиг.1);

- промывку полости рта и объектов в нем посредством ирригатора полости рта, а также зачистку объектов в полости рта с использованием соответствующих, вышеупомянутых насадок (фиг.2);

- сбор материала из полости рта посредством слюноотсоса (фиг.3), также, для забора материала, используем шпатель и скребок;

- помещение материала в пробирку (фиг.4).

Материал забирают из ротовой полости с помощью ирригатора полости рта, формирующим тонкую струю воды, которая под давлением промывает межзубные промежутки от зубного налета, а также пародонтальные карманы, язык, очищают (если такие присутствуют) ортодонтические конструкции (брекеты), искусственные коронки, мостовидные протезы, имплантаты.

Центрифугирование материала производится на малых оборотах, без разрушения клеток - по нашим данным сохранность в исследуемом материале структуры клеток обеспечивается на скорости 600 об/мин в течение 30 секунд.

Всю полученную жидкость центрифугируют при названных режимах и, таким образом, в осадке получают обогащенный концентрат, состоящий из клеток эпителия, лейкоцитов и микроорганизмов. Осадок при таких условиях центрифугирования представляют только живые клетки, которые в мазке наблюдаются в большом количестве. Морфология клеток соответствует реальной их прижизненной структуре в полости рта, так как сохраняется целостность мембраны, органелл в цитоплазме, которые при больших оборотах образуют субклеточные фракции.

Полученный обогащенный осадок, состоящий из клеток эпителия и лейкоцитов, а также микроорганизмов, наносят на предметное стекло и шпателем, покровным стеклом, или предметным стеклом распределяют материал по предметному стеклу и немедленно изучают с помощью фазовоконтрастной микроскопии. Количество клеток в поле зрения превышает таковое при обычном изготовлении мазка. Для изготовления иллюстраций используют микроскоп Olympus Bx51 c фотокамерой DP25. Техника микроскопирования предусматривает анализ препарата без покровного стекла с предварительным высушиванием и нанесением иммерсионного масла для работы с наибольшим увеличением под иммерсионным объективом. В рассматриваемых объектах идентифицируются ядра, фигуры митоза, отростки клеток, содержимое цитоплазмы, включая везикулы и контаминированные организмы.

Комментарии к фотографиям (микрофото. Ув. Х400.1): на фиг.5 показана клетка живая, в цитоплазме идентифицируются микроорганизмы; на фиг.6 в поле зрения наблюдается большее количество клеток, идентифицируются ядерные эпителиоциты с контаминацией микроорганизмами; на фиг.7 показан митоз эпителиоцита; на фиг.8 и 9 показаны дендритные клетки; на фиг.10 и 11 показаны макрофаги; на фиг.12 показан эпителиоцит контаминированный микроорганизмами. Наличие контаминированных микроорганизмов позволяет оценить инфекционный процесс, уровень микробного обсеменения, барьерные свойства эпителиальных пластинок слизистой рта и клеточный состав. Количество слущенных клеток эпителия с микробами дает представление о защитных свойствах эпителия. Клетки мигранты и их количество могут дать представление об уровне защитных реакций и при больших количествах свидетельствуют о возможности отторжения имплантатов.

Достоинства способа:

- имеет низкую стоимость, доступен любой клинике с любым бюджетом;

- информативен, дает полное представление о состоянии ротовой полости;

- на основе данных содержимого осадка можно прогнозировать исход патологического процесса и своевременно влиять на ключевые события патогенеза и проводить профилактику осложнений;

- от момента забора материала для диагностики до результатов анализа затрачивается времени не более 10 минут;

- простота выполнения не требует специального обучения и приобретения навыков диагностических манипуляций;

- дает возможность многократного забора диагностического материала;

- неинвазивность и травмобезопасность как для пациента, так и врача (исключает инфицирование через кровь ВИЧ и гепатитом С), а также и другими социально значимыми инфекциями.

Похожие патенты RU2708241C1

название год авторы номер документа
Способ проведения цитологического исследования при дифференциальной диагностике узловых образований щитовидной железы 2019
  • Рева Иван Владимирович
  • Рева Галина Витальевна
  • Калинин Илья Олегович
  • Григорян Виктория Самвеловна
  • Цегольник Екатерина Вадимовна
  • Тудаков Владислав Сергеевич
  • Гармаш Адель Игоревна
  • Гармаш Роман Александрович
  • Зудина Анна Алексеевна
  • Барановская Ирина Анатольевна
  • Пуга Дмитрий Петрович
  • Можилевская Екатерина Сергеевна
  • Накоренок Анна Анатольевна
  • Гордзиевская Яна Владимировна
RU2712080C1
СПОСОБ ИССЛЕДОВАНИЯ СОСТОЯНИЯ ПАРОДОНТА 2006
  • Иванова Ирина Алексеевна
  • Лепилин Александр Викторович
  • Захарова Наталия Борисовна
  • Рыжков Виктор Борисович
  • Фомина Ольга Леонтьевна
RU2299437C1
СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ПАРОДОНТА У ПАЦИЕНТОВ С НЕСЪЕМНОЙ ОРТОДОНТИЧЕСКОЙ ТЕХНИКОЙ С ПРИМЕНЕНИЕМ ИНЪЕКЦИОННОЙ ФОРМЫ АУТОЛОГИЧНОЙ ТРОМБОЦИТАРНОЙ ПЛАЗМЫ 2016
  • Гуляева Оксана Алмазовна
RU2626825C1
Способ диагностики непереносимости акриловых конструкционных материалов съёмных пластиночных зубных протезов у пациентов пожилого и старческого возраста 2022
  • Саркисян Константин Артурович
  • Жолудев Сергей Егорович
  • Базарный Владимир Викторович
RU2793526C1
Микроскопический способ определения обезвоженности тканей полости рта на модели микробиома языка 2017
  • Стрельникова Наталья Викторовна
  • Антонова Александра Анатольевна
  • Старовойтова Елена Леонидовна
  • Гермаш Валерия Ивановна
  • Алексеева Ирина Николаевна
RU2668498C1
Способ изготовления клеточного блока клеточного материала 2019
  • Тихонов Яков Николаевич
  • Назарова Ирина Владимировна
  • Рева Иван Владимирович
  • Цегольник Екатерина Вадимовна
  • Тудаков Владислав Сергеевич
  • Рева Галина Витальевна
  • Енина Светлана Владимировна
  • Горелик Максим Зимулович
  • Олексенко Олеся Михайловна
  • Коцюрбий Евгений Анатольевич
  • Тилик Татьяна Валерьевна
  • Толмачёв Валерий Евгеньевич
RU2722661C1
СПОСОБ ХИРУРГИЧЕСКОГО ЛЕЧЕНИЯ ХРОНИЧЕСКОГО ГЕНЕРАЛИЗОВАННОГО ПАРОДОНТИТА 2010
  • Цымбалов Олег Владимирович
  • Кузьмин Максим Иванович
RU2428950C1
СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ГИПЕРТРОФИЧЕСКОГО ГИНГИВИТА У ПАЦИЕНТОВ С НЕСЪЕМНОЙ ОРТОДОНТИЧЕСКОЙ ТЕХНИКОЙ С ПРИМЕНЕНИЕМ ИНЪЕКЦИОННОЙ ФОРМЫ АУТОЛОГИЧНОЙ ТРОМБОЦИТАРНОЙ ПЛАЗМЫ 2016
  • Гуляева Оксана Алмазовна
RU2626826C1
СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ЦИТОЛОГИЧЕСКОГО ПРЕПАРАТА ПО В.Г. ВОРОБЬЕВУ 1999
  • Воробьев В.Г.
  • Лебедев М.Ю.
  • Сизова Е.Н.
RU2172138C2
СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ КЕРАТОТИЧЕСКИХ ПРОЦЕССОВ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ РТА, ОТНОСЯЩИХСЯ К "БЕЛЫМ ПРОЯВЛЕНИЯМ" 2014
  • Усманова Ирина Николаевна
  • Герасимова Лариса Павловна
  • Кабирова Миляуша Фаузиевна
  • Хуснаризанова Рауза Фазыловна
  • Усманов Ирик Рамимович
  • Минякина Гузель Фанисовна
RU2544173C1

Иллюстрации к изобретению RU 2 708 241 C1

Реферат патента 2019 года Способ исследования ротовой жидкости

Изобретение относится к исследованию ротовой жидкости. Способ исследования ротовой жидкости включает ее сбор и центрифугирование, приготовление препарата и последующее его изучение. При этом кроме секрета слюнных желез отбирают микрофлору и продукты их жизнедеятельности, содержимое пародонтальных карманов, десневую жидкость, десквамированный эпителий, продукты распада мигрирующих в полость рта лейкоцитов, для чего в процессе отбора промывают межзубные промежутки, пародонтальные карманы посредством ирригатора полости рта с использованием соответствующих насадок для очистки и промывания объектов полости рта, всю полученную жидкость от одного пациента отводят в отдельную стерильную емкость, центрифугируют 30 секунд при скорости 600 об/мин, отделяют осадок и размещают его ровным тонким слоем на предметном стекле и немедленно изучают с помощью фазово-контрастной микроскопии. Изобретение обеспечивает возможность изучения гистологического препарата с обогащенной цитологической картиной. 1 з.п. ф-лы, 12 ил.

Формула изобретения RU 2 708 241 C1

1. Способ исследования ротовой жидкости, включающий ее сбор и центрифугирование, приготовление препарата и последующее его изучение, отличающийся тем, что кроме секрета слюнных желез отбирают микрофлору и продукты их жизнедеятельности, содержимое пародонтальных карманов, десневую жидкость, десквамированный эпителий, продукты распада мигрирующих в полость рта лейкоцитов, для чего в процессе отбора промывают межзубные промежутки, пародонтальные карманы посредством ирригатора полости рта с использованием соответствующих насадок для очистки и промывания объектов полости рта, при этом всю полученную жидкость от одного пациента отводят в отдельную стерильную емкость, затем центрифугируют 30 секунд при скорости 600 об/мин, отделяют осадок и размещают его ровным тонким слоем на предметном стекле и немедленно изучают с помощью фазово-контрастной микроскопии.

2.Способ по п.1, отличающийся тем, что при наличии ортодонтических конструкций, и/или искусственных коронок, и/или мостовидных протезов, и/или имплантатов в процессе отбора ротовой жидкости используют соответствующие насадки для их очистки.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2019 года RU2708241C1

Способ качественного определения стоматологического статуса пациента с воспалением слизистой оболочки альвеолярного отростка челюсти по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости 2017
  • Кочурова Екатерина Владимировна
  • Муханов Александр Алексеевич
  • Николенко Владимир Николаевич
RU2648765C1
УСТРОЙСТВО И СПОСОБЫ ОТБОРА И АНАЛИЗА ОБРАЗЦОВ ТЕКУЧЕЙ СРЕДЫ ИЗ ПОЛОСТИ РТА 2011
  • Биннер Курт
  • Фужер Ричард Дж.
  • Фьюси Роберт В.
  • Макдоноу Джастин Э.
  • Николсон Томисима Карин Линн
  • Редди Мегха
RU2571327C2
WO 2015173698 A1, 19.11.2015
US 2009024058 A1, 22.01.2009.

RU 2 708 241 C1

Авторы

Рева Иван Владимирович

Рева Галина Витальевна

Толмачёв Валерий Евгеньевич

Восканян Оксана Геворговна

Барановская Ирина Анатольевна

Цегольник Екатерина Вадимовна

Тудаков Владислав Сергеевич

Гармаш Адель Игоревна

Гармаш Роман Александрович

Шиндина Анастасия Дмитриевна

Даты

2019-12-05Публикация

2019-04-12Подача