ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ
Настоящая заявка заявляет приоритет предварительной заявки на патент Австралии 2015902659, поданной 6 июля 2015 года, содержание которой включено в данную заявку посредством ссылки.
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
Настоящее описание относится к соединениям, композициям и способам лечения неврологических, психических расстройств, которые отличаются разрушением основ социального поведения, и расстройств, связанных с употреблением психоактивных веществ. В конкретном воплощении данное описание относится к лечению неврологических, психических расстройств и расстройств, связанных с употреблением психоактивных веществ, с использованием соединений Формулы (I) или солей и пролекарств соединений Формулы (I).
ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Многие психические расстройства отличаются разрушением основ социального поведения. Частые встречающиеся примеры включают расстройство аутистического спектра (ASD) и социальное тревожное расстройство (SAD). Кроме того, некоторые расстройства имеют социальное отчуждение в качестве вторичного симптома; примеры включают шизофрению, большое депрессивное расстройство (MDD) и расстройства, связанные с употреблением психоактивных веществ. В настоящее время не существует одобренных лекарственных средств, которые прямо нацелены на социальные нарушения, и лекарственное лечение этих расстройств, где оно доступно, имеет в лучшем случае ограниченную эффективность.
Недавние доклинические исследования демонстрируют выдающийся терапевтический потенциал нейропептида окситоцина в стимулировании социального поведения и снижении самостоятельного приема наркотических средств и алкоголя. Однако окситоцин сам по себе демонстрирует плохую способность преодолевать гематоэнцефалический барьер, ничтожно малую пероральную биодоступность и короткий период полувыведения in vivo. Вследствие этих проблем клинические исследования, включающие интраназальный окситоцин, дали весьма скромную выгоду у клинических популяций. Таком образом, малая молекула, способная стимулировать окситоциновые системы мозга с намного большей эффективностью может иметь широкие терапевтические применения при вышеуказанных расстройствах.
Вышеуказанные расстройства находятся среди наиболее широко распространенных заболеваний и вносят один из наибольших вкладов в глобальное бремя заболеваний. В недавних исследованиях Центра по контролю заболеваемости (США) распространение аутизма у детей 8 лет оценено на уровне 1 из 110. SAD представляет собой второе наиболее часто встречающееся тревожное расстройство, при этом NIH (Национальные институты здравоохранения США) оценивают, что примерно 6,8% взрослых американцев страдают от этого расстройства.
Согласно Всемирной Организации Здравоохранения (WHO), шизофрения поражает примерно 24 миллиона людей по всему миру и имеет один из самых высоких уровней хронизации из всех заболеваний. WHO также оценивает, что злоупотребление алкоголем привело к более 3 миллионам смертей по всему миру в 2012 году (5,9% всех смертей). В развитом мире злоупотребление психоактивными веществами ответственно за 33,4% общих потерянных лет жизни у мужчин.
Идея специфично нацеливаться на нейронные субстраты социального поведения представляет собой сдвиг парадигмы с существующих терапий для вышеуказанных расстройств. Например, применение антипсихотических средств при ASD (например, рисперидона) нацелено на ингибирование агрессивного и трансгрессивного поведения, а не на стимулирование просоциального поведения. Применение антидепрессантов при SAD (например, пароксетина или венлафаксина) предполагает, что подавленное настроение и генерализованная тревога являются первичными драйверами социального отчуждения при SAD, и нацелено на непрямое влияние на социальную тревожность путем улучшения настроения и снижения глобальной тревожности. Лечение шизофрении антипсихотическими средствами (например, оланзапином или арипипразолом) нацелено на контроль положительных симптомов и, в определенной степени, нейрокогнитивных нарушений, но напрямую не справляется со всепроникающим социальным отчуждением, которое наблюдается при хроническом состоянии заболевания.
Существующее лечение зависимостей предлагает или заместительную версию злоупотребляемого лекарственного средства (например, метадон, бупренорфин или варениклин) для контроля пристрастия, или терапевтическое средство, которое может снижать пристрастие путем в основном неизвестных механизмов (например, акампросат, налтрексон, баклофен или ондансетрон). Кроме того, эти существующие фармакотерапии имеют в лучшем случае ограниченную эффективность, и никакие из них не нацелены на изнурительную социальную дисфункцию, вызванную такими терапиями. Хотя существует некоторое количество психотерапий для этих расстройств, их успех также ограничен.
Раскрытые соединения Формулы (I) и их соли и пролекарства были разработаны для того, чтобы напрямую нацеливаться на социальную дисфункцию с помощью воздействия на участки мозга, которые, как известно, вовлечены в острую и долгосрочную регуляцию социального поведения, для того чтобы постараться вызвать долгосрочный сдвиг социальной мотивации, который может значительно превысить длительность лекарственного лечения, представляя собой "изменение состояния". Другими словами, были разработаны соединения для перекалибровки социального поведения у индивидуума до более высокого уровня в результате лечения. Авторы изобретения полагают, что при лечении злоупотребления веществами продолжительное увеличение социальной мотивации может переориентировать поведение вокруг социальных наград, в противоположность деструктивному циклу поведения, нацеленному на поиск психоактивных веществ.
Любое обсуждение документов, актов, материалов, устройств, статей или тому подобного, которое было включено в настоящее описание, не следует понимать как допущение того, что любая или все эти сущности образуют часть основы предшествующего уровня техники или представляли собой общедоступное знание в области, релевантной настоящему раскрытию, так как они существовали до даты приоритета каждого пункта формулы изобретения данной заявки.
КРАТКОЕ ИЗЛОЖЕНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
В первом аспекте в данной заявке предложено соединение Формулы (I) или его соль или пролекарство:
где:
V представляет собой NH, CH2 или прямую связь;
W представляет собой NH, CH2 или прямую связь;
Х представляет собой NH, CH2 или прямую связь;
Y представляет собой NH, CH2 или прямую связь;
Z выбран из: NH, О, S, S(O), SO2 или прямой связи;
R1 выбран из Н или C(O)R4;
R2 выбран из: Н, ОН, галогена, возможно замещенного С1-5алкила или возможно замещенной группы ОС1-5алкил;
R3 выбран из: Н, ОН, галогена, возможно замещенного С1-5алкила или возможно замещенной группы ОС1-5алкил;
R4 представляет собой возможно замещенный С1-5алкил;
m представляет собой 0 или 1;
n представляет собой 0 или 1;
р представляет собой 0 или 1; и
q представляет собой 0 или 1.
Во втором аспекте в данной заявке предложена фармацевтическая композиция, содержащая фармацевтически приемлемое соединение или его фармацевтически приемлемую соль или пролекарство, согласно первому аспекту, и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или эксципиент.
В третьем аспекте в данной заявке предложен способ лечения или предупреждения состояния у субъекта, где способ включает стадию введения фармацевтически приемлемого соединения или его фармацевтически приемлемой соли или пролекарства, согласно первому аспекту; или фармацевтической композиции согласно второму аспекту.
В четвертом аспекте в данной заявке предложено применение фармацевтически приемлемого соединения или его фармацевтически приемлемой соли или пролекарства, согласно первому аспекту; или фармацевтической композиции согласно второму аспекту, для лечения или предупреждения состояния у субъекта.
В пятом аспекте в данной заявке предложено применение фармацевтически приемлемого соединения или его фармацевтически приемлемой соли или пролекарства, согласно первому аспекту; или фармацевтической композиции согласно второму аспекту, в изготовлении лекарственного средства для лечения или предупреждения состояния у субъекта.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ
Фиг. 1 - На изображении (А) показаны результаты теста на социальное взаимодействие для самцов крыс Hooded Wistar, которым внутрибрюшинно давали различные дозы SOC-1 (IP); на изображении (В) показан остаточный просоциальный эффект различных доз SOC-1 у крыс Hooded Wistar в тесте на социальное взаимодействие; и на изображении (С) показаны сравнительные результаты лежания рядом в тесте на социальное взаимодействие у крыс Hooded Wistar, которым давали: носитель (VEH); окситоцин (ОТ) (0,5 мг/кг); аргининвазопрессин (AVP) (0,005 мг/кг); 3,4-метилендиоксиметамфетамин (MDMA) (5 мг/кг); WAY 267,464 (100 мг/кг); или SOC-1 (5 мг/кг).
Фиг. 2 - На изображении (А) показаны результаты теста на социальные предпочтения, где SOC-1 (5 мг/кг IP) увеличивал природное предпочтение крыс к незнакомой живой крысе (залитая часть столбцов) по сравнению с игрушечной крысой (заштрихованная часть столбцов); и на изображении (В) показаны селективные эффекты перорально вводимого SOC-1 (3 мг/кг) на самостоятельное внутривенное введение кокаина у макак-резусов.
Фиг. 3 - Прогрессивные соотношения самостоятельного введения кокаина у макак-резусов, которым вводили SOC-1.
Фиг. 4 - Профили время-концентрация между одинаковой дозой 5 мг/кг SOC-1, которую давали с помощью внутрибрюшинных инъекций (IP) или перорально (РО).
Фиг. 5 - Стабильность SOC-1, инкубированного при температуре тела в человеческой плазме.
Фиг. 6 - Результаты Fos иммуногистохимического исследования, изучавшего активацию окситоцин-содержащих клеток в супраоптическом ядре гипоталамуса (SON) самцов крыс Wistar, с помощью: носителя (изображение (А)); окситоцина в концентрации 1 мг/кг (изображение (В)); и SOC-1 в концентрации 5 мг/кг (изображение (С)).
Фиг. 7 - Контролируемые температуры тела крыс Wistar, которым вводили носитель, SOC-1 (5 мг/кг), или SOC-1 и антагонист рецептора V1A SR49059 (10 мг/кг).
Фиг. 8 - Контролируемый пульс крыс Wistar, которым вводили носитель, SOC-1 (5 мг/кг) или SOC-1 и антагонист рецептора V1A SR49059 (10 мг/кг).
Фиг. 9 - Эффект SOC-1 на инфузии у крыс, самостоятельно вводящих метамфетамин в прогрессивном графике. * указывает на р<0,05 по сравнению с носителем.
Фиг. 10 - Эффект SOC-1 на нажатие на рычаг у крыс, самостоятельно вводящих метамфетамин в прогрессивном графике. * указывает на р<0,05 по сравнению с носителем.
Фиг. 11 - Влияние SOC-1 на двигательную активность у крыс, самостоятельно вводящих метамфетамин в прогрессивном графике. * указывает на р<0,05 по сравнению с носителем.
Фиг. 12 - Влияние введения носителя, SOC-1 и SOC-1, объединенного с С25 или SR49059, на активные нажатия на рычаг в ходе восстановления с введением метамфетамина. # обозначает р<0,05 основного эффекта в днях, & обозначает р<0,05 основного эффекта лечения и * обозначает р<0,05 по сравнению с носителем + МЕТН состояние.
Фиг. 13 - Влияние введения носителя, SOC-1 и SOC-1, объединенного с С25 или SR49059, на двигательную активность в ходе восстановления с введением метамфетамина. # обозначает р<0,05 основного эффекта в днях, & обозначает р<0,05 основного эффекта лечения и * обозначает р<0,05 по сравнению с носителем + МЕТН состояние.
Фиг. 14 - Значения средней массы тела крыс Sprague Dawley, употреблявших SOC-1.
Фиг. 15 - Графики средней (+ среднеквадратичное отклонение от среднего (SEM)) концентрации в плазме SOC-1 в зависимости от времени для крыс Sprague Dawley.
Фиг. 16 - Значения средней массы тела для суток изучения для крыс Sprague Dawley, которым вводили SOC-1.
Фиг. 17 - Общее число доставок жидкости для бабуинов в ходе изучения, фокусировавшегося на приеме алкоголя относительно различных концентрацией SOC-1, который вводили указанным бабуинам, и общее среднее.
Фиг. 18 - Прием алкоголя у бабуинов и среднее в ходе утренних сессий у бабуинов, которым вводили различные дозы SOC-1.
Фиг. 19 - Прием алкоголя у бабуинов и среднее в ходе послеполуденных сессий у бабуинов, которым вводили различные дозы SOC-1.
Фиг. 20 - Результаты исследования расстройств аутистического спектра с использованием мышей BALB/C, которым вводили SOC-1.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
На протяжении этого описания слово "содержать" или его различные вариации, такие как "содержит" или "содержащий", следует понимать как подразумевающее включение указанного элемента, целого числа или стадии, или группы элементов, целых чисел или стадий, но не исключение любого другого элемента, целого числа или стадии, или группы элементов, целых чисел или стадий.
Что касается определений, предоставленных в данной заявке, если иное не указано или не подразумевается контекстом, определенные термины и фразы включают предоставленные значения. Если иное не указано однозначно или не очевидно из контекста, термины и фразы ниже не исключают значения, которое термин или фраза приобрели у специалиста в данной области. Определения предоставлены для помощи в описании конкретных воплощений и не предназначены ограничивать заявленное изобретение, так как объем изобретения ограничен только формулой изобретения. Кроме того, если иное не требуется контекстом, термины в единственном числе будет включать множественное число, и термины во множественном числе будут включать единственное число.
На протяжении настоящего описания различные аспекты и компоненты изобретения могут быть представлены в формате диапазона. Формат диапазона включен для удобства и не должен быть интерпретирован как негибкое ограничение объема изобретения. Соответственно, следует считать, что в описании диапазона специфически раскрыты все возможные поддиапазоны, а также индивидуальные численные значения в пределах этого диапазона, если конкретно не указано иное. Например, следует считать, что в описании такого диапазона, как от 1 до 5, специфично раскрыты такие поддиапазоны, как от 1 до 3, от 1 до 4, от 1 до 5, от 2 до 4, от 2 до 5, от 3 до 5 и т.д., а также индивидуальные и частичные числа в пределах указанного диапазона, например, 1, 2, 3, 4, 5, 5,5 и 6. Это применимо вне зависимости от ширины раскрытого диапазона. Там, где требуются конкретные значения, они будут указаны в описании.
Как использовано в данной заявке, термин "С1-5алкил", использованный или отдельно или в составном термине, относится к одновалентным прямоцепочечным или разветвленным углеводородным группам, имеющим от 1 до 5 атомов углерода. Как понятно специалисту в данной области, термин "C1-5алкил" означает алкильную цепь с 1, 2, 3, 4 или 5 атомами углерода или диапазоном, включающим любое из этих двух целых чисел, включая 1-2, 1-3, 1-4, 1-5, 2-3, 2-4, 2-5, 3-4, 3-5 и 4-5. Подходящие алкильные группы включают, но не ограничиваются этим: метил, этил, пропил, изопропил, н-бутил, втор-бутил, трет-бутил, н-пентил, неопентил, изопентил и трет-пентил. С1-4алкил возможно может быть замещен одним или более заместителями. Заместители могут располагаться в любом положении углеродной цепи. Подходящие заместители включают, но не ограничиваются этим: ОН, NH2, галоген, NH(C1-5алкил), N(С1-5алкил)2, CN, NO2, CO2H или ОС1-5алкил.
Как использовано в данной заявке, термин "ОС1-5алкил", использованный или отдельно или в составном термине, относится к алкоксигруппам, имеющим от 1 до 5 атомов углерода. Как понятно специалисту в данной области, термин "ОС1-5алкил" означает алкоксигруппу с 1, 2, 3, 4 или 5 атомами углерода или диапазоном, включающим любое из этих двух целых чисел, включая 1-2, 1-3, 1-4, 1-5, 2-3, 2-4, 2-5, 3-4, 3-5 и 4-5. Подходящие ОС1-5алкильные группы включают, но не ограничиваются этим, метокси, этокси, пропилокси, изопропилокси, н-бутилокси, втор-бутилокси, трет-бутилокси, н-пентилокси, неопентилокси, изопентилокси и трет-пентилокси. С1-5алкил возможно может быть замещен одним или более заместителями. Заместители могут располагаться в любом положении углеродной цепи. Подходящие заместители включают, но не ограничиваются этим: ОН, NH2, галоген, NH(С1-5алкил), N(C1-5алкил)2, CN, NO2, CO2H или ОС1-5алкил.
Как использовано в данной заявке, термин "галогено" или "галоген" относится к фтору (фторо), хлору (хлоро), брому (бромо) или йоду (йодо).
Соединения Формулы (I) и их Соли или Пролекарства:
В данной заявке раскрыты соединения Формулы (I) или их соли и пролекарства,
где:
V представляет собой NH, CH2 или прямую связь;
W представляет собой NH, CH2 или прямую связь
Х представляет собой NH, CH2 или прямую связь
Y представляет собой NH, CH2 или прямую связь
Z выбран из: NH, О, S, S(O), SO2 или прямую связь;
R1 выбран из Н или C(O)R4;
R2 выбран из: Н, ОН, галогена, возможно замещенного С1-5алкила или возможно замещенной группы ОС1-5алкил;
R3 выбран из: Н, ОН, галогена, возможно замещенного С1-5алкила или возможно замещенной группы ОС1-5алкил;
R4 представляет собой возможно замещенный С1-5алкил;
m представляет собой 0 или 1;
n представляет собой 0 или 1;
р представляет собой 0 или 1; и
q представляет собой 0 или 1.
В данной заявке раскрыты соединения Формулы (Ia) или их соли и пролекарства,
где:
Z выбран из: NH, О, S, S(O) или SO2;
R1 выбран из Н или C(O)R4;
R2 выбран из: Н, ОН, галогена, возможно замещенного С1-5алкила или возможно замещенной группы ОС1-5алкил;
R3 выбран из: Н, ОН, галогена, возможно замещенного С1-5алкила или возможно замещенной группы ОС1-5алкил; и
R4 представляет собой возможно замещенный С1-5алкил.
В данной заявке раскрыты соединения Формулы (Ib) или их соли и пролекарства,
где:
R1 выбран из Н или C(O)R4;
R2 выбран из: Н, ОН, галогена, возможно замещенного С1-5алкила или возможно замещенной группы ОС1-5алкил;
R3 выбран из: Н, ОН, галогена, возможно замещенного С1-5алкила или возможно замещенной группы ОС1-5алкил; и
R4 представляет собой возможно замещенный С1-5алкил.
В данной заявке раскрыты соединения Формулы (Ic) или их соли и пролекарства,
где:
Z выбран из: NH, О, S, S(O) или SO2;
R1 выбран из Н или C(O)R4;
R2 выбран из: Н, ОН, галогена, возможно замещенного С1-5алкила или возможно замещенной группы ОС1-5алкил;
R3 выбран из: Н, ОН, галогена, возможно замещенного С1-5алкила или возможно замещенной группы ОС1-5алкил; и
R4 представляет собой возможно замещенный С1-5алкил.
В данной заявке раскрыты соединения Формулы (Id) или их соли и пролекарства,
где:
Z выбран из: NH, О, S, S(O) или SO2;
R1 выбран из Н или C(O)R4;
R2 выбран из: Н, ОН, галогена, возможно замещенного С1-5алкила или возможно замещенной группы ОС1-5алкил;
R3 выбран из: Н, ОН, галогена, возможно замещенного С1-5алкила или возможно замещенной группы ОС1-5алкил; и
R4 представляет собой возможно замещенный С1-5алкил.
В данной заявке раскрыты соединения Формулы (Ie) или их соли и пролекарства,
где:
Z выбран из: NH, О, S, S(O) или SO2;
R1 выбран из Н или C(O)R4;
R2 выбран из: Н, ОН, галогена, возможно замещенного С1-5алкила или возможно замещенной группы ОС1-5алки;
R3 выбран из: Н, ОН, галогена, возможно замещенного С1-5алкила или возможно замещенной группы ОС1-5алкил; и
R4 представляет собой возможно замещенный С1-5алкил.
В данной заявке раскрыты соединения Формулы (If) или их соли и пролекарства,
где:
Z выбран из: NH, О, S, S(O) или SO2;
R1 выбран из Н или C(O)R4;
R2 выбран из: Н, ОН, галогена, возможно замещенного С1-5алкила или возможно замещенной группы ОС1-5алкил;
R3 выбран из: Н, ОН, галогена, возможно замещенного С1-5алкила или возможно замещенной группы ОС1-5алкил; и
R4 представляет собой возможно замещенный С1-5алкил.
В одном из воплощений соединение Формулы (I) представляет собой соединение Формулы (Ia) или его соль или пролекарство.
В одном из воплощений соединение Формулы (I) представляет собой соединение Формулы (Ib) или его соль или пролекарство.
В одном из воплощений соединение Формулы (I) представляет собой соединение Формулы (Ic) или его соль или пролекарство.
В одном из воплощений соединение Формулы (I) представляет собой соединение Формулы (Id) или его соль или пролекарство.
В одном из воплощений соединение Формулы (I) представляет собой соединение Формулы (Ie) или его соль или пролекарство.
В одном из воплощений соединение Формулы (I) представляет собой соединение Формулы (If) или его соль или пролекарство.
В одном из воплощений V представляет собой NH.
В одном из воплощений V представляет собой СН2
В одном из воплощений V представляет собой прямую связь;
В одном из воплощений W представляет собой NH.
В одном из воплощений W представляет собой СН2.
В одном из воплощений W представляет собой прямую связь.
В одном из воплощений Х представляет собой NH.
В одном из воплощений Х представляет собой СН2.
В одном из воплощений Х представляет собой прямую связь
В одном из воплощений Y представляет собой NH.
В одном из воплощений Y представляет собой СН2.
В одном из воплощений Y представляет собой прямую связь.
В одном из воплощений Z представляет собой NH.
В одном из воплощений Z представляет собой О.
В одном из воплощений Z представляет собой S.
В одном из воплощений Z представляет собой S(O).
В одном из воплощений Z представляет собой SO2.
В одном из воплощений Z представляет собой прямую связь.
В одном из воплощений R1 представляет собой водород.
В одном из воплощений R1 представляет собой C(O)R4. Например, R4 возможно может быть замещен С1-5алкилом, выбранным из: метильной, этильной, пропильной, изопропильной, н-бутильной, втор-бутильной, трет-бутильной, н-пентильной, неопентильной, изопентильной и трет-пентильной группы. В одном из воплощений R4 представляет собой возможно замещенный метил.
В одном из воплощений R2 представляет собой водород.
В одном из воплощений R2 представляет собой гидроксильную группу.
В одном из воплощений R2 представляет собой галоген. Например, в одном из воплощений R2 представляет собой фтор. В другом воплощении R2 представляет собой хлор.
В одном из воплощений R2 представляет собой возможно замещенный С1-5алкил. Например, R2 возможно может быть замещен С1-5алкилом, выбранным из: метила, этила, пропила, изопропила, н-бутила, втор-бутила, трет-бутила, н-пентила, неопентила, изопентила и трет-пентила. В одном из воплощений R2 представляет собой возможно замещенный метил.
В одном из воплощений R2 представляет собой возможно замещенную группу ОС1-5алкил. Например, R2 возможно может быть замещен группой OC1-5алкил, выбранной из групп: метокси, этокси, пропилокси, изопропилокси, н-бутилокси, втор-бутилокси, трет-бутилокси, н-пентилокси, неопентилокси, изопентилокси и трет-пентилокси. В одном из воплощений R2 представляет собой возможно замещенную метоксигруппу.
В одном из воплощений R3 представляет собой водород.
В одном из воплощений R3 представляет собой гидроксильную группу.
В одном из воплощений R3 представляет собой галоген. Например, в одном из воплощений R3 представляет собой фтор. В другом воплощении R3 представляет собой хлор.
В одном из воплощений R3 представляет собой возможно замещенный C1-5алкил. Например, R3 возможно может быть замещен С1-5алкилом, выбранным из: метила, этила, пропила, изопропила, н-бутила, втор-бутила, трет-бутила, н-пентила, неопентила, изопентила и трет-пентила. В одном из воплощений R3 представляет собой возможно замещенный метил.
В одном из воплощений R3 представляет собой возможно замещенную группу ОС1-5алкил. Например, R3 возможно может быть замещен группой OC1-5алкил, выбранной из групп: метокси, этокси, пропилокси, изопропилокси, н-бутилокси, втор-бутилокси, трет-бутилокси, н-пентилокси, неопентилокси, изопентилокси и трет-пентилокси групп. В одном из воплощений R3 представляет собой возможно замещенную метоксигруппу.
В одном из воплощений соединение Формулы (I) выбрано из:
или его соли или пролекарства.
В другом воплощении соединение Формулы (I) выбрано из:
или его соли или пролекарства.
В другом воплощении соединение Формулы (I) выбрано из:
или его соли или пролекарства. Например, в одном из воплощений соединение Формулы (I) представляет собой:
или его соль или пролекарство. В другом воплощении соединение Формулы (I) представляет собой:
или его соль или пролекарство.
В одном из воплощений соединение Формулы (I) или его соль или пролекарство является фармацевтически приемлемым.
В одном из воплощений соединение Формулы (I) представляет собой соединение Формулы (Ia) или его соль или пролекарство и является фармацевтически приемлемым.
В одном из воплощений соединение Формулы (I) представляет собой соединение Формулы (Ib) или его соль или пролекарство и является фармацевтически приемлемым.
В одном из воплощений соединение Формулы (I) представляет собой соединение Формулы (Ic) или его соль или пролекарство и является фармацевтически приемлемым.
В одном из воплощений соединение Формулы (I) представляет собой соединение Формулы (Id) или его соль или пролекарство и является фармацевтически приемлемым.
В одном из воплощений соединение Формулы (I) представляет собой соединение Формулы (Ie) или его соль или пролекарство и является фармацевтически приемлемым.
В одном из воплощений соединение Формулы (I) представляет собой соединение Формулы (If) или его соль или пролекарство и является фармацевтически приемлемым.
Соединения Формулы (I) или их соли и пролекарства, могут являться фармацевтически приемлемыми, но следует понимать, что фармацевтически неприемлемые соединения, соли и пролекарства также попадают в объем настоящего изобретения, так как они являются полезными в качестве промежуточных соединений в получении фармацевтически приемлемых соединений, солей и пролекарств.
В одном из воплощений соединение Формулы (I) представляет собой соль, например, фармацевтически приемлемую соль.
В одном из воплощений соединение Формулы (I) представляет собой соединение Формулы (Ia) и представляет собой соль, например, фармацевтически приемлемую соль.
В одном из воплощений соединение Формулы (I) представляет собой соединение Формулы (Ib) и представляет собой соль, например, фармацевтически приемлемую соль.
В одном из воплощений соединение Формулы (I) представляет собой соединение Формулы (Ic) и представляет собой соль, например, фармацевтически приемлемую соль.
В одном из воплощений соединение Формулы (I) представляет собой соединение Формулы (Id) и представляет собой соль, например, фармацевтически приемлемую соль.
В одном из воплощений соединение Формулы (I) представляет собой соединение Формулы (Ie) и представляет собой соль, например, фармацевтически приемлемую соль.
В одном из воплощений соединение Формулы (I) представляет собой соединение Формулы (If) и представляет собой соль, например, фармацевтически приемлемую соль.
Подходящие фармацевтически приемлемые соли включают, но не ограничиваются этим: соли фармацевтически приемлемых неорганических кислот, таких как: хлороводородная, серная, фосфорная, азотная, угольная, борная, сульфаминовая и бромоводородная кислоты; или соли фармацевтически приемлемых органических кислот, таких как уксусная, пропионовая, масляная, винная, малеиновая, гидроксималеиновая, фумаровая, изэтионовая, яблочная, лимонная, молочная, муциновая, глюконовая, бензойная, янтарная, щавелевая, фенилуксусная, метансульфоновая, толуолсульфоновая, бензолсульфоновая, салициловая, сульфаниловая, аспарагиновая, глутаминовая, эдетовая, стеариновая, пальмитиновая, олеиновая, лауриновая, пантотеновая, дубильная, аскорбиновая и валериановая кислоты.
Основные соли включают, но не ограничиваются этим: соли, образованные с фармацевтически приемлемыми катионами, такими как: натрий, калий, литий, кальций, магний, цинк, аммоний и алкиламмоний; соли, образованные из триэтиламина; алкоксиаммонийные соли, такие как соли, образованные с этаноламином; и соли, образованные из этилендиамина, холина или аминокислот, таких как аргинин, лизин или гистидин. Общая информация о типах фармацевтически приемлемых солей и их получении известна специалистам в данной области и является такой, как описано в общих текстах, таких как "Handbook of Pharmaceutical salts" P.H. Stahl, C.G. Wermuth, 1st edition, 2002, Wiley-VCH.
Основные азотсодержащие группы в Формуле (I) (или основные азотсодержащие группы в соединении Формулы (Ia), Формулы (Ib), Формулы (Ic), Формулы (Id), Формулы (Ie) или Формулы (If)) могут быть кватернизованы такими агентами, как низшие алкилгалогениды, такие как хлористый метил, этил, пропил и бутил, бромиды и йодиды; диалкилсульфаты, такие как диметил- и диэтилсульфаты; и другими, известными в области техники.
В одном из воплощений соединение Формулы (I) представляет собой соль соединения, выбранного из:
В другом воплощении соединение Формулы (I) представляет собой соль соединения, выбранного из:
В другом воплощении соединение Формулы (I) представляет собой соль соединения, выбранного из:
Например, в одном из воплощений соль соединения Формулы (I) представляет собой соль
В то время, как в еще одном воплощении соль соединения Формулы (I) представляет собой соль
В одном из воплощений соединение Формулы (I) представляет собой гидрохлоридную соль.
В одном из воплощений соединение Формулы (I) представляет собой соединение Формулы (Ia) в форме гидрохлоридной соли, например, фармацевтически приемлемой гидрохлоридной соли.
В одном из воплощений соединение Формулы (I) представляет собой соединение Формулы (Ib) в форме гидрохлоридной соли, например, фармацевтически приемлемой гидрохлоридной соли.
В одном из воплощений соединение Формулы (I) представляет собой соединение Формулы (Ic) в форме гидрохлоридной соли, например, фармацевтически приемлемой гидрохлоридной соли.
В одном из воплощений соединение Формулы (I) представляет собой соединение Формулы (Id) в форме гидрохлоридной соли, например, фармацевтически приемлемой гидрохлоридной соли.
В одном из воплощений соединение Формулы (I) представляет собой соединение Формулы (Ie) в форме гидрохлоридной соли, например, фармацевтически приемлемой гидрохлоридной соли.
В одном из воплощений соединение Формулы (I) представляет собой соединение Формулы (If) в форме гидрохлоридной соли, например, фармацевтически приемлемой гидрохлоридной соли.
В одном из воплощений соединение Формулы (I) представляет собой гидрохлоридную соль соединения, выбранного из:
В другом воплощении соединение Формулы (I) представляет собой гидрохлоридную соль соединения, выбранного из:
В другом воплощении соединение Формулы (I) представляет собой гидрохлоридную соль соединения, выбранного из:
Например, в одном из воплощений соль соединения Формулы (I) представляет собой гидрохлоридную соль
В то же время в еще одном воплощении соль соединения Формулы (I) представляет собой гидрохлоридную соль
В одном из воплощений соединение Формулы (I) представляет собой пролекарство.
В одном из воплощений соединение Формулы (Ia) представляет собой пролекарство.
В одном из воплощений соединение Формулы (Ib) представляет собой пролекарство.
В одном из воплощений соединение Формулы (Ic) представляет собой пролекарство.
В одном из воплощений соединение Формулы (Id) представляет собой пролекарство.
В одном из воплощений соединение Формулы (Ie) представляет собой пролекарство.
В одном из воплощений соединение Формулы (If) представляет собой пролекарство.
Пролекарства включают соединения, где присутствует аминокислотный остаток или полипептидная цепь двух или более (например, двух, трех или четырех) аминокислотных остатков, которые ковалентно присоединены к свободным группам амино, гидрокси и карбоновой кислоты соединений Формулы (I). Аминокислотные остатки включают 20 встречающихся в природе аминокислот, обычно обозначаемых трехбуквенными символами, и также включают: 4-гидроксипролин, гидроксилизин, демозин, изодемозин, 3-метилгистидин, норвалин, бета-аланин, гамма-аминомасляная кислота, цитруллин, гомоцистеин, гомосерин, орнитин и метионинсульфон. Пролекарства также включают соединения, где карбонаты, карбаматы, амиды и алкиловые сложные эфиры, которые могут быть ковалентно связаны с вышеуказанными заместителями Формулы (I) через карбонил-углеродную боковую цепь пролекарства. Пролекарства также включают фосфатные производные соединений Формулы (I) (такие как кислоты, соли кислот или сложные эфиры), присоединенные через фосфор-кислородную связь к свободному гидроксилу соединений Формулы (I).
Фармацевтические композиции
В данной заявке раскрыты фармацевтические композиции, содержащие соединение Формулы (I) или его соль или пролекарство, и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или эксципиент. В одном из воплощений соединение Формулы (I) или его соль или пролекарство является фармацевтически приемлемым.
Как использовано в данной заявке, "фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или эксципиент" включает эксципиенты или такие агенты как растворители, разбавители, диспергирующие среды, покрытия, антибактериальные и противогрибковые агенты, агенты для придания изотоничности и агенты для замедления всасывания и тому подобное, которые являются физиологически совместимыми и не являются вредными для соединения, описанного в данной заявке, или для его применения. Применение таких носителей и агентов для изготовления композиций фармацевтически активных веществ хорошо известно в области техники (см., например, Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st Edition; Lippincott Williams & Wilkins: Philadelphia, PA, 2005).
Фармацевтически приемлемая композиция может быть разбавлена перед применением. Подходящие разбавители могут быть выбраны из, например: раствора Рингера, раствора Хартманна, раствора декстрозы, солевого раствора и стерильной воды для инъекций.
Термин "композиция", как использовано в данной заявке, предназначен для того, чтобы охватить продукт, содержащий определенные ингредиенты в определенных количествах, а также любой продукт, который происходит прямо или косвенно из комбинации определенных ингредиентов в определенных количествах.
В данной заявке "фармацевтически приемлемый" означает, что соединения Формулы (I) или их соли или пролекарства, наряду с носителями, разбавителями или эксципиентами, должны быть совместимы с другими ингредиентами препарата и не являться вредными для его реципиента. Соединения Формулы (I) или их соли или пролекарства должны быть способны контактировать с тканями реципиента без чрезмерной токсичности, раздражения, аллергической реакции или других потенциальных осложнений, соизмеримых с разумным соотношением выгода/риск, как определено квалифицированным медицинским профессионалом или ветеринаром. Кроме того, соединение Формулы (I) или его соль или пролекарство должны быть совместимы с носителем и/или эксципиентом в любой композиции, которая предназначена для доставки в качестве лекарственного средства индивидууму, например, животному или человеку.
Следует понимать, что в некоторых случаях соединения Формулы (I) или их соль или пролекарство не являются фармацевтически приемлемыми, и они попадают в объем настоящего изобретения. Однако, для применения в фармацевтических препаратах в некоторых воплощениях соединения Формулы (I) или их соль или пролекарство, являются фармацевтически приемлемыми соединениями. Фармацевтически неприемлемые соединения Формулы (I) или их соль или пролекарство, могут быть полезными в получении фармацевтически приемлемых соединений Формула (I) или их солей или пролекарств.
Композиции по настоящему изобретению могут содержать другие терапевтические агента, как описано ниже, и могут быть изготовлены в виде препаратов, например, путем использования традиционных твердых или жидких носителей или разбавителей, а также фармацевтических добавок того типа, который подходят для целевого пути введения (например, эксципиенты, связующие, консерванты, стабилизаторы, корригенты и т.д.), согласно методикам, таким как методики, хорошо известные в области изготовления фармацевтических препаратов.
Соединения Формулы (I) или их соль или пролекарство, определенные в данной заявке, могут быть введены любым подходящим способом, например, парентерально, а именно путем подкожной, внутрибрюшинной, внутривенной, внутримышечной или интрацистернальной инъекции или инфузионной методики (например, в виде стерильных водных или неводных растворов или суспензий для инъекций).
Фармацевтические композиции включают композиции для перорального, ректального, назального, местного (включая трансбуккальное и подъязычное), парентерального введения (включая внутримышечное, внутрибрюшинное, подкожное и внутривенное), или в форме, подходящей для введения путем ингаляции или инсуффляции. Соединения Формулы (I) или их соль или пролекарство, вместе с традиционным адъювантом, носителем или разбавителем, таким образом могут быть помещены в форму фармацевтических композиций и их стандартных лекарственных форм, и в таком виде могут быть использованы как твердые формы, такие как таблетки или заполненные капсулы, или жидкие формы, такие как растворы, суспензии, эмульсии, эликсиры или капсулы, наполненные ими, все из которых предназначены для перорального введения, или в форме стерильных растворов для инъекций для парентерального (включая подкожное) применения.
Фармацевтические композиции для введения соединений по этому изобретению могут быть удобным образом представлены в виде стандартных лекарственных форм и могут быть получены любым из способов, хорошо известных в области фармацевтики. Все способы включают стадию совмещения активного ингредиента, например, соединения, определенного Формулой (I), или его соли или пролекарства, с носителем, который составляет один или более вспомогательных ингредиентов. В общем, фармацевтические композиции получают путем равномерного и тщательного совмещения активного ингредиента, например, соединения, определенного Формулой (I), или его соли или пролекарства с жидким носителем или мелко измельченным твердым носителем или с обоими, и затем, если это необходимо, придание продукту формы целевого препарата. В фармацевтической композиции активное соединение включено в количестве, достаточном для оказания целевого эффекта на протекание или состояние заболеваний.
Фармацевтические композиции могут быть в форме стерильной инъецируемой водной или маслянистой суспензии. Эта суспензия может быть изготовлена в виде препарата согласно методикам, известным в области техники, с использованием подходящих диспергирующих или смачивающих агентов и суспендирующих агентов, которые были упомянуты выше. Стерильный препарат для инъекций также может представлять собой стерильный раствор для инъекций или суспензию в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, например, в качестве раствора в 1,3-бутандиоле. Среди приемлемых носителей и растворителей, которые могут быть применены, находятся вода, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того стерильные нелетучие масла традиционно используются в качестве растворителя или суспендирующей среды. Для этой цели могут быть применены любые асептические нелетучие масла, включая синтетические моно- или диглицериды. Кроме того жирные кислоты, такие как олеиновая кислота, находят применение в получении инъецируемых препаратов.
Фармацевтические композиции и способы, раскрытые в данной заявке, могут также включать другие терапевтически активные соединения, которые обычно применяют для лечения раскрытых расстройств или состояний. Выбор подходящих агентов для применения в комбинированной терапии может быть сделать обычным специалистом в данной области, согласно традиционным принципам фармацевтики. Комбинация терапевтических агентов может действовать синергически для осуществления лечения или предупреждения различных расстройств или состояний, раскрытых в данной заявке. С использованием этого подхода можно достигнуть терапевтической эффективности с более низкими дозировками каждого агента, что таким образом уменьшает потенциал негативных побочных эффектов.
Когда другие терапевтические агенты используют в комбинации с соединением Формулы (I) или его солью или пролекарством, они могут быть использованы, например, в количествах, как отмечено в Настольном справочнике врача (PDR) или как определено другим образом обычным специалистом в данной области.
Однако следует понимать, что конкретный уровень доз и частота дозирования для каждого конкретного пациента может варьироваться и будет зависеть от различных факторов, включая активность конкретного применяемого соединения, метаболическую стабильность и длительность действия этого соединения, возраст, массу тела, общее здоровье, пол, диету, путь и время введения, скорость выведения, комбинацию лекарственных средств, тяжесть конкретного состояния и организм, подвергающийся терапии.
Способы лечения
В данной заявке раскрыты способы лечения или предупреждения состояния у субъекта, где способ включает стадию введения субъекту фармацевтически приемлемого количества соединения Формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или пролекарства, или фармацевтической композиции, как определено в данной заявке.
Также в данной заявке раскрыто применение фармацевтически приемлемого соединения Формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или пролекарства, или фармацевтической композиции, как определено в данной заявке, для лечения или предупреждения состояния у субъекта.
Также в данной заявке раскрыто применение фармацевтически приемлемого соединения Формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или пролекарства в изготовлении лекарственного средства для лечения или предупреждения состояния у субъекта.
В одном из воплощений соединение Формулы (I) или его соль или пролекарство применяют в качестве лекарственного средства.
В одном из воплощений соединение Формулы (Ia) или его соль или пролекарство применяют в качестве лекарственного средства.
В одном из воплощений соединение Формулы (Ib) или его соль или пролекарство применяют в качестве лекарственного средства.
В одном из воплощений соединение Формулы (Ic) или его соль или пролекарство применяют в качестве лекарственного средства.
В одном из воплощений соединение Формулы (Id) или его соль или пролекарство применяют в качестве лекарственного средства.
В одном из воплощений соединение Формулы (Ie) или его соль или пролекарство применяют в качестве лекарственного средства.
В одном из воплощений соединение Формулы (If) или его соль или пролекарство применяют в качестве лекарственного средства.
Соединения Формулы (I) или их соль или пролекарство могут быть предложены в "эффективном количестве", например, когда подходящее соединение добавляют в фармацевтическую композицию. "Эффективное количество" означает количество соединения, которое вызывает целевой биологический или медицинский ответ ткани, системы, животного или человека, который ожидается исследователем, ветеринаром, лечащим врачом или другим лечащим персоналом, который вводит соединение или композицию, содержащую соединение.
"Эффективное количество" будет зависеть от нескольких факторов, включая эффективность конкретного соединения. Масса и возраст субъекта также могут являться фактором для специалиста в данной области при определении концентрации соединения, которую должен получить субъект.
Фразы "введение" и или "вводя" соединение следует понимать как означающие предоставление соединения Формулы (I) (или соединения Формулы (Ia), или Формулы (Ib), или Формулы (Ic), или Формулы (Id), или Формулы (Ie), или Формулы (If)) или его соли или пролекарства, субъекту, нуждающемуся в лечении.
Реципиенты соединения Формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или пролекарства; или фармацевтической композиции, содержащей соединение Формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль или пролекарство, могут являться людьми мужского или женского пола.
Альтернативно, реципиенты соединения Формулы (I) или его фармацевтически приемлемого производного, соли или пролекарства; или фармацевтической композиции, содержащей соединение Формулы (I) или его фармацевтически приемлемое производное, соль или пролекарство, также могут являться животным, не являющимся человеком. "Животные, не являющиеся человеком" или "животное, не являющееся человеком" направлено на царство Животных, исключая людей, и включает как позвоночных, так и беспозвоночных, мужского и женского пола, и включает: теплокровных животных, включая млекопитающих (включая, но не ограничиваясь этим, приматов, собак, кошек, крупный рогатый скот, свиней, овец, коз, крыс, морских свинок, лошадей и других видов семейств бычьих, овечьих, лошадиных, псовых, кошачьих, грызунов или мышиных), птиц, насекомых, рептилий, рыб и амфибий.
Реципиенты соединений и фармацевтически приемлемых композиций определены в данной заявке взаимозаменяемыми терминами "пациент", "реципиент", "индивидуум" и "субъект". Эти четыре термина используются взаимозаменяемо и относятся к любому человеку или животному (если не указано иное), как определено в данной заявке.
В одном из воплощений соединение Формулы (I) или его соль или пролекарство; или фармацевтическую композицию, содержащую соединение Формулы (I) или его соль или пролекарство, применяют для стимуляции просоциального поведения у субъекта.
В одном из воплощений соединение Формулы (I) или его соль или пролекарство; или фармацевтическую композицию, содержащую соединение Формулы (I) или его соль или пролекарство, применяют для обеспечения острой и долгосрочной регуляции социального поведения у субъекта.
В одном из воплощений соединение Формулы (I) или его соль или пролекарство; или фармацевтическую композицию, содержащую соединение Формулы (I) или его соль или пролекарство, применяют для лечения расстройства, связанного с злоупотреблением психоактивным веществом. Например, соединение Формулы (I) или его соль или пролекарство; или фармацевтическая композиция, содержащая соединение Формулы (I) или его соль или пролекарство, может быть применена для лечения индивидуума, злоупотребляющего наркотическими веществами. Примеры наркотических веществ включают, но не ограничиваются этим, опиаты и стимуляторы. Конкретные примеры наркотических веществ включают, но не ограничиваются этим кокаин, метамфетамин и марихуану. Альтернативно, соединение Формулы (I) или его соль или пролекарство; или фармацевтическая композиция, содержащая соединение Формулы (I) или его соль или пролекарство, могут быть использованы для лечения индивидуума, злоупотребляющего алкоголем.
В одном из воплощений соединение Формулы (I) или его соль или пролекарство; или фармацевтическую композицию, содержащую соединение Формулы (I) или его соль или пролекарство, применяют для лечения или предупреждения социальной дисфункции. Авторы изобретения разработали соединения, раскрытые в данной заявке, как часть терапии психических расстройств, которые демонстрируют социальную дисфункцию в качестве первичного или вторичного свойства, таких как расстройство аутистического спектра (ASD), социальное тревожное расстройство (SAD), депрессивное расстройство, включая большое депрессивное расстройство (MDD), шизофрению и расстройство, связанное с употреблением психоактивных веществ.
В данной заявке целевые популяции пациентов для лечения включают:
- Детей и взрослых с диагнозом расстройство аутистического спектра;
- Людей с диагнозом социальное тревожное расстройство;
- Людей, зависимых от наркотиков (например, опиатов, стимуляторов, марихуаны) и алкоголя в состоянии выздоровления, которые стремятся к поддержанию продолжающегося воздержания;
- Людей с диагнозом хроническая шизофрения, где лекарственное средство может применяться в качестве дополнения к антипсихотическому лечению для улучшения социального функционирования; или
- Других людей, которые стремятся к преодолению социальной недостаточности как части текущего состояния заболевания (например, большое депрессивное расстройство (MDD))
В одном из воплощений состояние, которое лечат или предупреждают, представляет собой социальную дисфункцию. Например, социальную дисфункцию, выбранную из:
- социального отчуждения;
- агрессивности;
- антисоциального расстройства; или
- пристрастия к веществу.
В одном из воплощений субъект имеет психическое расстройство. Например, в другом воплощении субъект имеет психическое расстройство, где социальное отчуждение представляет собой первичное или вторичное свойство психического расстройства.
В одном из воплощений субъект имеет психическое расстройство, выбранное из:
- расстройства аутистического спектра;
- социального тревожного расстройства;
- депрессивного расстройства, включая большое депрессивное расстройство; или
- шизофрении.
В одном из воплощений субъект страдает или находится в стадии выздоровления от расстройства, связанного с злоупотреблением психоактивным веществом. Например, пристрастия к наркотическим веществам и химическим веществам, таким как кокаин, опиаты, амфетамины, героин, этанол и никотин.
В другом воплощении субъект находится в стадии выздоровления от расстройства, связанного с злоупотреблением психоактивным веществом, и стремится к поддержанию продолжающегося воздержания от вещества.
Иллюстративные воплощения
1. Соединение Формулы (I) или его соль или пролекарство:
где:
V представляет собой NH, CH2 или прямую связь;
W представляет собой NH, CH2 или прямую связь;
Х представляет собой NH, CH2 или прямую связь;
Y представляет собой NH, CH2 или прямую связь;
Z выбран из: NH, О, S, S(O), SO2 или прямой связи;
R1 выбран из Н или C(O)R4;
R2 выбран из: Н, ОН, галогена, возможно замещенного С1-5алкила или возможно замещенной группы ОС1-5алкил;
R3 выбран из: Н, ОН, галогена, возможно замещенного С1-5алкила или возможно замещенной группы ОС1-5алкил;
R4 представляет собой возможно замещенный С1-5алкил;
m представляет собой 0 или 1;
n представляет собой 0 или 1;
р представляет собой 0 или 1; и
q представляет собой 0 или 1.
2. Соединение согласно иллюстративному воплощению 1, имеющее Формулу (Ia):
где:
Z выбран из: NH, О, S, S(O) или SO2;
R1 выбран из Н или C(O)R4;
R2 выбран из: Н, галогена, возможно замещенного С1-5алкила или возможно замещенной группы ОС1-5алкил;
R3 выбран из: Н, галогена, возможно замещенного С1-5алкила или возможно замещенной группы ОС1-5алкил; и
R4 представляет собой возможно замещенный С1-5алкил,
или его соль или пролекарство.
3. Соединение согласно иллюстративному воплощению 1 имеющее Формулу (Ib):
где:
R1 выбран из Н или C(O)R4;
R2 выбран из: Н, ОН, галогена, возможно замещенного С1-5алкила или возможно замещенной группы ОС1-5алкил;
R3 выбран из: Н, ОН, галогена, возможно замещенного С1-5алкила или возможно замещенной группы ОС1-5алкил; и
R4 представляет собой возможно замещенный С1-5алкил
или его соль или пролекарство.
4. Соединение согласно иллюстративному воплощению 1, имеющее Формулу (Ic):
где:
Z выбран из: NH, О, S, S(O) или SO2;
R1 выбран из Н или C(O)R4;
R2 выбран из: Н, ОН, галогена, возможно замещенного С1-5алкила или возможно замещенной группы ОС1-5алкил;
R3 выбран из: Н, ОН, галогена, возможно замещенного С1-5алкила или возможно замещенной группы ОС1-5алкил; и
R4 представляет собой возможно замещенный С1-5алкил
или его соль или пролекарство.
5. Соединение согласно иллюстративному воплощению 1, имеющее Формулу (Id):
где:
Z выбран из: NH, О, S, S(O) или SO2;
R1 выбран из Н или C(O)R4;
R2 выбран из: Н, ОН, галогена, возможно замещенного С1-5алкила или возможно замещенной группы ОС1-5алкил;
R3 выбран из: Н, ОН, галогена, возможно замещенного С1-5алкила или возможно замещенной группы ОС1-5алкил; и
R4 представляет собой возможно замещенный С1-5алкил
или его соль или пролекарство.
6. Соединение согласно иллюстративному воплощению 1, имеющее Формулу (Ie):
где:
Z выбран из: NH, О, S, S(O) или SO2;
R1 выбран из H или C(O)R4;
R2 выбран из: Н, ОН, галогена, возможно замещенного С1-5алкила или возможно замещенной группы ОС1-5алкил;
R3 выбран из: Н, ОН, галогена, возможно замещенного С1-5алкила или возможно замещенной группы ОС1-5алкил; и
R4 представляет собой возможно замещенный С1-5алкил
или его соль или пролекарство.
7. Соединение согласно иллюстративному воплощению 1, имеющее Формулу (If):
где:
Z выбран из: NH, О, S, S(O) или SO2;
R1 выбран из Н или C(O)R4;
R2 выбран из: Н, ОН, галогена, возможно замещенного С1-5алкила или возможно замещенной группы ОС1-5алкил;
R3 выбран из: Н, ОН, галогена, возможно замещенного С1-5алкила или возможно замещенной группы ОС1-5алкил; и
R4 представляет собой возможно замещенный С1-5алкил
или его соль или пролекарство.
8. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-7, где Z представляет собой NH.
9. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-7, где Z представляет собой О.
10. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-7, где Z представляет собой S.
11. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-7, где Z представляет собой S(O).
12. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-7, где Z представляет собой SO2.
13. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-12, где R1 представляет собой водород.
14. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-12, где R1 представляет собой C(O)R4.
15. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-12 или 14, где R4 представляет собой возможно замещенный С1-5алкил, выбранный из любого из: метила, этила, пропила, изопропила, н-бутила, втор-бутила, трет-бутила, н-пентила, неопентила, изопентила и трет-пентила.
16. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-12, 14 или 15, где R4 представляет собой возможно замещенный метил.
17. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-16, где R2 представляет собой водород.
18. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-16, где R2 представляет собой гидроксильную группу.
19. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-16, где R2 представляет собой галоген.
20. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-16 или 19, где R2 представляет собой фтор.
21. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-16 или 19, где R2 представляет собой хлор.
22. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-16, где R2 представляет собой возможно замещенный С1-5алкил.
23. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-16 или 22, где R2 представляет собой возможно замещенный метил.
24. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-16, где R2 представляет собой возможно замещенный ОС1-5алкил.
25. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-16 или 24, где R2 представляет собой возможно замещенную метоксигруппу.
26. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-25, где R3 представляет собой водород.
27. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-25, где R3 представляет собой гидроксильную группу.
28. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-25, где R3 представляет собой галоген.
29. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-25 или 28, где R3 представляет собой фтор.
30. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-25 или 28, где R3 представляет собой хлор.
31. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-25, где R3 представляет собой возможно замещенный С1-5алкил.
32. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-25 или 31, где R3 представляет собой возможно замещенный метил.
33. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-25, где R3 представляет собой возможно замещенную группу ОС1-5алкил.
34. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-25 или 33, где R3 представляет собой возможно замещенную метоксигруппу.
35. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-34, где соединение выбрано из любого из:
или его соли или пролекарства.
36. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-35, где соединение представляет собой
или его соль или пролекарство.
37. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-36, где соединение представляет собой
или его соль или пролекарство.
38. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-36, где соединение представляет собой
или его соль или пролекарство.
39. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-36, где соединение выбрано из любого из:
или его соли или пролекарства.
40. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-39, где соединение представляет собой соль соединения, имеющего любую из: Формулы (Ia), или Формулы (Ib), или Формулы (Ic), или Формулы (Id), или Формулы (Ie), или Формулы (If).
41. Соединение или его соль или пролекарство, согласно иллюстративному воплощению 40, где соединение представляет собой соль соединения, имеющего Формулу (Ia).
42. Соединение или его соль или пролекарство, согласно иллюстративному воплощению 40, где соединение представляет собой соль соединения, имеющего Формулу (Ib).
43. Соединение или его соль или пролекарство, согласно иллюстративному воплощению 40, где соединение представляет собой соль соединения, имеющего Формулу (Ic).
44. Соединение или его соль или пролекарство, согласно иллюстративному воплощению 40, где соединение представляет собой соль соединения, имеющего Формулу (Id).
45. Соединение или его соль или пролекарство, согласно иллюстративному воплощению 40, где соединение представляет собой соль соединения, имеющего Формулу (Ie).
46. Соединение или его соль или пролекарство, согласно иллюстративному воплощению 40, где соединение представляет собой соль соединения, имеющего Формулу (If).
47. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-46, где соединение представляет собой соль выбранную из любой соли из следующих: соли хлороводородной, серной, фосфорной, азотной, угольной, борной, сульфаминовой и бромоводородной кислоты; или соли фармацевтически приемлемых органических кислот, таких как уксусная, пропионовая, масляная, винная, малеиновая, гидроксималеиновая, фумаровая, изэтионовая, яблочная, лимонная, молочная, муциновая, глюконовая, бензойная, янтарная, щавелевая, фенилуксусная, метансульфоновая, толуолсульфоновая, бензолсульфоновая, салициловая, сульфаниловая, аспарагиновая, глутаминовая, эдетовая, стеариновая, пальмитиновая, олеиновая, лауриновая, пантотеновая, дубильная, аскорбиновая и валериановая кислоты; соли металлов, включая натрий, калий, литий, кальций, магний и цинк; или соли аммония и алкиламмония; или соли аминокислот.
48. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-47, где соединение представляет собой гидрохлоридную соль.
49. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-48, где соль представляет собой гидрохлоридную соль соединения, выбранного из любого из:
50. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-49, где соль представляет собой гидрохлоридную соль соединения, выбранного из:
51. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-50, где соль представляет собой гидрохлоридную соль соединения
52. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-50, где соль представляет собой гидрохлоридную соль соединения
53. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-48, где соединение представляет собой гидрохлоридную соль соединения, выбранного из любого из:
54. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-39, где соединение представляет собой пролекарство соединения, имеющего Формулу (Ia), или Формулу (Ib), или Формулу (Ic), или Формулу (Id), или Формулу (Ie), или Формулу (If).
55. Соединение или его соль или пролекарство согласно иллюстративному воплощению 54, где соединение представляет собой пролекарство соединения, имеющего Формулу (Ia).
56. Соединение или его соль или пролекарство согласно иллюстративному воплощению 54, где соединение представляет собой пролекарство соединения, имеющего Формулу (Ib).
57. Соединение или его соль или пролекарство согласно иллюстративному воплощению 54, где соединение представляет собой пролекарство соединения, имеющего Формулу (Ic).
58. Соединение или его соль или пролекарство согласно иллюстративному воплощению 54, где соединение представляет собой пролекарство соединения, имеющего Формулу (Id).
59. Соединение или его соль или пролекарство согласно иллюстративному воплощению 54, где соединение представляет собой пролекарство соединения, имеющего Формулу (Ie).
60. Соединение или его соль или пролекарство согласно иллюстративному воплощению 54, где соединение представляет собой пролекарство соединения, имеющего Формулу (If).
61. Соединение или его соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-60 при применении в качестве лекарственного средства.
62. Фармацевтическая композиция, содержащая фармацевтически приемлемое соединение или его фармацевтически приемлемую соль или пролекарство согласно любому из иллюстративных воплощений 1-60, и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или эксципиент.
63. Фармацевтическая композиция по иллюстративному воплощению 62, где фармацевтически приемлемое соединение или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство представляет собой соединение, имеющее Формулу (Ia), или его соль или пролекарство.
64. Фармацевтическая композиция по иллюстративному воплощению 62, где фармацевтически приемлемое соединение или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство представляет собой соединение, имеющее Формулу (Ib), или его соль или пролекарство.
65. Фармацевтическая композиция по иллюстративному воплощению 62, где фармацевтически приемлемое соединение или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство представляет собой соединение, имеющее Формулу (Ic), или его соль или пролекарство.
66. Фармацевтическая композиция по иллюстративному воплощению 62, где фармацевтически приемлемое соединение или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство представляет собой соединение, имеющее Формулу (Id), или его соль или пролекарство.
67. Фармацевтическая композиция по иллюстративному воплощению 62, где фармацевтически приемлемое соединение или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство представляет собой соединение, имеющее Формулу (Ie), или его соль или пролекарство.
68. Фармацевтическая композиция по иллюстративному воплощению 62, где фармацевтически приемлемое соединение или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство представляет собой соединение, имеющее Формулу (If), или его соль или пролекарство.
69. Способ лечения или предупреждения состояния у субъекта, где способ включает стадию введения субъекту: фармацевтически приемлемого соединения или его фармацевтически приемлемой соли или пролекарства согласно любому из иллюстративных воплощений 1-60; или фармацевтической композиции согласно любому из иллюстративных воплощений 62-68.
70. Способ по иллюстративному воплощению 69, где фармацевтически приемлемое соединение или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство представляет собой соединение, имеющее Формулу (Ia), или его соль или пролекарство.
71. Способ по иллюстративному воплощению 69, где фармацевтически приемлемое соединение или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство представляет собой соединение, имеющее Формулу (Ib), или его соль или пролекарство.
72. Способ по иллюстративному воплощению 69, где фармацевтически приемлемое соединение или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство представляет собой соединение, имеющее Формулу (Ic), или его соль или пролекарство.
73. Способ по иллюстративному воплощению 69, где фармацевтически приемлемое соединение или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство представляет собой соединение, имеющее Формулу (Id), или его соль или пролекарство.
74. Способ по иллюстративному воплощению 69, где фармацевтически приемлемое соединение или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство представляет собой соединение, имеющее Формулу (Ie), или его соль или пролекарство.
75. Способ по иллюстративному воплощению 69, где фармацевтически приемлемое соединение или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство представляет собой соединение, имеющее Формулу (If), или его соль или пролекарство.
76. Способ согласно любому из иллюстративных воплощений 69-75, где состояние представляет собой социальную дисфункцию.
77. Способ согласно любому из иллюстративных воплощений 69-76, где состояние представляет собой социальную дисфункцию, выбранную из:
- социального отчуждения; или
- агрессивности; или
- антисоциального расстройства; или
- пристрастия к веществу.
78. Способ согласно любому из иллюстративных воплощений 69-77, где субъект имеет психическое расстройство.
79. Способ согласно иллюстративному воплощению 78, где социальное отчуждение представляет собой первичное или вторичное свойство психического расстройства.
80. Способ согласно любому из иллюстративных воплощений 69-79, где субъект имеет психическое расстройство, выбранное из:
- расстройства аутистического спектра;
- социального тревожного расстройства;
- депрессивного расстройства, включая большое депрессивное расстройство; или
- шизофрении.
81. Способ согласно любому из иллюстративных воплощений 69-80, где субъект страдает или находится в стадии выздоровления от расстройства, связанного с злоупотреблением психоактивным веществом.
82. Способ согласно любому из иллюстративных воплощений 69-81, где субъект находится в стадии выздоровления от расстройства, связанного с злоупотреблением психоактивным веществом, и стремится к поддержанию продолжающегося воздержания от вещества.
83. Применение фармацевтически приемлемого соединения или его фармацевтически приемлемой соли или пролекарства согласно любому из иллюстративных воплощений 1-60; или фармацевтической композиции согласно любому из иллюстративных воплощений 62-68, для лечения или предупреждения состояния у субъекта.
84. Применение иллюстративного воплощения 83, где фармацевтически приемлемое соединение или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство представляет собой соединение, имеющее Формулу (Ia), или его соль или пролекарство.
85. Применение иллюстративного воплощения 83, где фармацевтически приемлемое соединение или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство представляет собой соединение, имеющее Формулу (Ib), или его соль или пролекарство.
86. Применение иллюстративного воплощения 83, где фармацевтически приемлемое соединение или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство представляет собой соединение, имеющее Формулу (Ic), или его соль или пролекарство.
87. Применение иллюстративного воплощения 83, где фармацевтически приемлемое соединение или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство представляет собой соединение, имеющее Формулу (Id), или его соль или пролекарство.
88. Применение иллюстративного воплощения 83, где фармацевтически приемлемое соединение или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство представляет собой соединение, имеющее Формулу (Ie), или его соль или пролекарство.
89. Применение иллюстративного воплощения 83, где фармацевтически приемлемое соединение или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство представляет собой соединение, имеющее Формулу (If), или его соль или пролекарство.
90. Применение согласно любому из иллюстративных воплощений 83-89, где состояние представляет собой социальную дисфункцию.
91. Применение согласно любому из иллюстративных воплощений 83-90, где состояние представляет собой социальную дисфункцию, выбранную из:
- социального отчуждения;
- агрессивности;
- антисоциального расстройства; или
- пристрастия к веществу.
92. Применение согласно любому из иллюстративных воплощений 83-91, где субъект имеет психическое расстройство.
93. Применение согласно иллюстративному воплощению 92, где социальное отчуждение представляет собой первичное или вторичное свойство психического расстройства.
94. Применение согласно любому из иллюстративных воплощений 83-93, где субъект имеет психическое расстройство, выбранное из:
- расстройства аутистического спектра;
- социального тревожного расстройства;
- депрессивного расстройства, включая большое депрессивное расстройство; или
- шизофрении.
95. Применение согласно любому из иллюстративных воплощений 83-94, где субъект страдает или находится в стадии выздоровления от расстройства, связанного с злоупотреблением психоактивным веществом.
96. Применение согласно любому из иллюстративных воплощений 83-95, где субъект находится в стадии выздоровления от расстройства, связанного с злоупотреблением психоактивным веществом, и стремится к поддержанию продолжающегося воздержания от вещества.
97. Применение фармацевтически приемлемого соединения или его фармацевтически приемлемой соли или пролекарства согласно любому из иллюстративных воплощений 1-60; или фармацевтической композиции согласно любому из иллюстративных воплощений 62-68, в изготовлении лекарственного средства для лечения или предупреждения состояния у субъекта.
98. Применение иллюстративного воплощения 97, где фармацевтически приемлемое соединение или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство представляет собой соединение, имеющее Формулу (Ia), или его соль или пролекарство.
99. Применение иллюстративного воплощения 98, где фармацевтически приемлемое соединение или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство представляет собой соединение, имеющее Формулу (Ib), или его соль или пролекарство.
100. Применение иллюстративного воплощения 98, где фармацевтически приемлемое соединение или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство представляет собой соединение, имеющее Формулу (Ic), или его соль или пролекарство.
101. Применение иллюстративного воплощения 98, где фармацевтически приемлемое соединение или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство представляет собой соединение, имеющее Формулу (Id), или его соль или пролекарство.
102. Применение иллюстративного воплощения 98, где фармацевтически приемлемое соединение или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство представляет собой соединение, имеющее Формулу (Ie), или его соль или пролекарство.
103. Применение иллюстративного воплощения 98, где фармацевтически приемлемое соединение или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство представляет собой соединение, имеющее Формулу (If), или его соль или пролекарство.
104. Применение согласно любому из иллюстративных воплощениий 98-103, где состояние представляет собой социальную дисфункцию.
105. Применение согласно любому из иллюстративных воплощений 98-104, где состояние представляет собой социальную дисфункцию, выбранную из:
- социального отчуждения;
- агрессивности;
- антисоциального расстройства; или
- пристрастия к веществу.
106. Применение согласно любому из иллюстративных воплощений 98-105, где субъект имеет психическое расстройство.
107. Применение согласно иллюстративному воплощению 106, где социальное отчуждение представляет собой первичное или вторичное свойство психического расстройства.
108. Применение согласно любому из иллюстративных воплощений 98-107, где субъект имеет психическое расстройство, выбранное из:
- расстройства аутистического спектра;
- социального тревожного расстройства;
- депрессивного расстройства, включая большое депрессивное расстройство;
- шизофрении.
109. Применение согласно любому из иллюстративных воплощений 98-108, где субъект страдает или находится в стадии выздоровления от расстройства, связанного с злоупотреблением психоактивным веществом.
110. Применение согласно любому из иллюстративных воплощений 98-109, где субъект находится в стадии выздоровления от расстройства, связанного с злоупотреблением психоактивным веществом, и стремится к поддержанию продолжающегося воздержания от вещества.
111. Способ согласно любому из иллюстративных воплощений 69-75, где состояние представляет собой расстройство, связанное с злоупотреблением психоактивным веществом.
112. Способ по иллюстративному воплощению 111, где вещество представляет собой алкоголь.
113. Способ по иллюстративному воплощению 111, где вещество представляет собой кокаин.
114. Способ по иллюстративному воплощению 111, где вещество представляет собой метамфетамины.
115. Применение согласно любому из иллюстративных воплощений 83-89, где состояние представляет собой расстройство, связанное с злоупотреблением психоактивным веществом.
116. Применение согласно иллюстративному воплощению 115, где вещество представляет собой алкоголь.
117. Применение согласно иллюстративному воплощению 115, где вещество представляет собой кокаин.
118. Применение согласно иллюстративному воплощению 115, где вещество представляет собой метамфетамины.
119. Применение согласно любому из иллюстративных воплощений 97-103, где состояние представляет собой расстройство, связанное с злоупотреблением психоактивным веществом.
120. Применение согласно иллюстративному воплощению 119, где вещество представляет собой алкоголь.
121. Применение согласно иллюстративному воплощению 119, где вещество представляет собой кокаин.
122. Применение согласно иллюстративному воплощению 119, где вещество представляет собой метамфетамины.
Примеры
Набор сокращений, использованных в данной заявке, показан в Таблице 1:
Общие детали способов синтеза и характеристики
Все реакции осуществляли в атмосфере азота или аргона, если не указано иное. THF, толуол и 1,4-диоксан сушили над натриевой проволокой и отгоняли из, в случае с THF, бензофенонкетила натрия, дихлорметан, метанол, этанол и ацетонитрил отгоняли из СаН2. Ацетон аналитической чистоты использовали в том виде, в котором приобретали. Доступные в продаже химические вещества использовали в том виде, в котором приобретали. Аналитическую тонкослойную хроматографию (TLC) осуществляли с использованием пластин силикагеля на алюминиевой основе Merck 60 F254 (0,2 мм), которые визуализировали с использованием коротковолновой (254 нм) и/или длинноволновой (365 нм) УФ-флуоресценции. Флэш-хроматографию осуществляли с использованием силикагеля Merck Kieselgel 60 (230-400 меш). Температуры плавления измеряли в открытых капиллярах с использованием аппарата для измерения температуры плавления Stuart SMP10, и они являются неоткорректированными. Спектры инфракрасной абсорбции регистрировали на спектрофотометре Bruker Alpha FT-IR, и данные представлены в виде колебательной частоты (см-1). Спектры ядерного магнитного резонанса регистрировали при 300 K с использованием спектрометра Bruker Avance 200 NMR (300,1 МГц). Данные представлены в виде химического сдвига (δ м.д.) относительно резонанса остаточного протонированного растворителя, относительного интеграла, мультиплетности (s = сигнлет, br s = широкий синглет, d = дублет, dd = дублет дублетов, t = триплет, dt = дублет триплетов, q = квартет, sep = септет, m = мультиплет), констант магнитного взаимодействия (J Гц) и назначения. Назначениям сигнала содействовали эксперименты COSY, DEPT, HSQC и НМВС, где необходимо, относящиеся к резонансу остаточного протонированного растворителя. LRMS регистрировали с использованием ионизации электроспреем (ESI) или химической ионизации при атмосферном давлении (APCI), регистрировали на спектрометре на основе захвата ионов Finnigan LCQ.
Пример 1 - Синтез соединений Формулы (I)
Подходящие методологии синтеза можно найти в Т.A. Reekie et al., Tetrahedron Letters, 55, 4568-4571, 2014; и Т.A. Reekie et al., Synthesis, 45, 3211-3227, 2013.
1-Метил-1Н-пиразол-5-ол (1)
Перемешиваемый с помощью магнитной мешалки раствор метил-3-метоксиакрилата (20,0 г, 172,2 ммоль) в метаноле (100 мл) медленно обрабатывали N-метилгидразином (10,0 мл, 189,4 ммоль), затем нагревали при температуре флегмообразования в течение 16 часов. Полученную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем концентрировали в пониженном давлении с получением оранжевого твердого вещества, которое растворяли в N,N-Диметилформамиде (DMF) (19,9 мл, 258,4 ммоль) и охлаждали до 0°С. Полученную смесь медленно обрабатывали фосфорилхлоридом (48,1 мл, 516,6 ммоль), затем нагревали при 80°С в течение 7 часов, после чего охлаждали и медленно вливали в ледяной Na2CO3 (600 мл 20%-ного масс./об. водного раствора). Затем водный раствор экстрагировали хлороформом (5×100 мл) и объединенные органические фазы промывали рассолом (1×100 мл), после чего сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали в пониженном давлении с получением оранжевого твердого вещества. Перекристаллизация (дихлорметан/гексан) давала соединение 1 (12,87 г, 52%) в виде желтых кристаллов, т.пл. 77-78°С, (Rf=0,44 в 1:1 об./об. этилацетат/гексан).
Характеристические данные для соединения 1 показаны в Таблице 2.
Общая процедура 1
Соединения Pre-SOC-2, Pre-SOC-3, Pre-SOC-4, Pre-SOC-5 и Pre-SOC-6 получали с помощью Общей процедуры 1, где перемешиваемый с помощью магнитной мешалки раствор 1 (500 мг, 3,46 ммоль) в DMF (7 мл) обрабатывали KOH (387 мг, 6,90 ммоль) и подходящим нитроанилином (3 эквивалента, 10,38 ммоль), затем нагревали при 100°С в течение 1 часа. Полученную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем обрабатывали NH4Cl (100 мл насыщенного водного раствора) и экстрагировали этилацетатом (3×25 мл). Объединенные органические фазы промывали рассолом (1×50 мл), после чего сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали в пониженном давлении с получением желтого масла. Подвергание этого остатка колоночной флэш-хроматографии (силикагель, элюирование градиентом 1:4 → 1:1 об./об. этилацетат/н-гексан) и концентрирование релевантных фракцией давало целевой пиразол.
Общая процедура 2
Соединения FB-SOC-2, FB-SOC-4, FB-SOC-5 и FB-SOC-6 получали с помощью Общей процедуры 2, где суспензию Pre-SOC-2, Pre-SOC-4, Pre-SOC-5 или Pre-SOC-6 (1,20 ммоль) и палладий на углероде (10 мг 10%-ного масс./об.) в метаноле (12 мл) перемешивали на магнитной мешалке при комнатной температуре в атмосфере H2 (1 атм.) в течение 18 часов. Полученную смесь фильтровали через Celite™ и задержанные таким образом твердые вещества промывали метанолом (3×10 мл). Объединенные фильтраты концентрировали в пониженном давлении с получением требуемого бензодиазепинового соединения.
1-Метил-5-((2-нитрофенил)амино)-1Н-пиразол-4-карбальдегид (Pre-SOC-1)
Перемешиваемый с помощью магнитной мешалки раствор соединения 1 (5,78 г, 40,0 ммоль) и 2-нитроанилина (5,52 г, 40,0 ммоль) в DMF (40 мл) обрабатывали порошкообразным KOH (4,49 г, 80,0 ммоль), затем нагревали при 120°С в течение 2 часов. Полученную смесь охлаждали до комнатной температуры затем обрабатывали NH4Cl (500 мл насыщенного водного раствора) и экстрагировали этилацетатом (3×200 мл). Объединенные органические фазы промывали рассолом (1×100 мл), после чего сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали в пониженном давлении с получением желтого масла. Подвергание этого остатка колоночной флэш-хроматографии (диоксид кремния, элюирование градиентом 1:4 → 1:1 об./об. этилацетат/гексан) и концентрирование релевантных фракций (Rf=0,33 в 1:1 об./об. этилацетат/гексан) давало соединение Pre-SOC-1 (7,38 г, 75%) в виде желтого кристаллического твердого вещества, т.пл. 102-105°С.
Характеристические данные для соединения Pre-SOC-1 показаны в Таблице 2.
1-Метил-1,4,5,10-тетрагидробензо[b]пиразоло[3,4-е][1,4]диазепин (FB-SOC-1)
Суспензию Pre-SOC-1 (3,94 г, 16,0 ммоль) и палладия на углероде (100 мг 10% масс./об.) в метаноле (160 мл) перемешивали с помощью магнитной мешалки при комнатной температуре в атмосфере Н2 (1 атм.) в течение 16 часов. Полученную смесь фильтровали через Celite™ и удержанные таким образом твердые вещества промывали метанолом (3×20 мл). Объединенные фильтраты концентрировали в пониженном давлении с получением FB-SOC-1 (3,04 г, 95%) в виде желтого порошка, т.пл. 205-207°С, (Rf=0,43 в 1:9 об./об. метанол/дихлорметан).
Характеристические данные для соединения FB-SOC-1 показаны в Таблице 2.
5-((4-Фтор-2-нитрофенил)амино)-1-метил-1Н-пиразол-4-карбальдегид (Pre-SOC-2)
Pre-SOC-2 получали (539 мг, 59%) в виде оранжевого твердого вещества, т.пл. 113-116°С, (Rf=0,32 в 1:1 об./об. этилацетат/н-гексан) согласно Общей процедуре 1 с 4-фтор-2-нитроанилином.
Характеристические данные для Pre-SOC-2 могут быть найдены в Таблице 2.
7-Фтор-1-метил-1,4,5,10-тетрагидробензо[b]пиразоло[3,4-е][1,4]диазепин (FB-SOC-2)
FB-SOC-2 получали (236 мг, 90%) в виде коричневых кристаллов, т.пл. 181-183°С, (Rf=0,43 в 1:9 об./об. метанол/дихлорметан) согласно Общей процедуре 2.
Характеристические данные для FB-SOC-2 могут быть найдены в Таблице 2.
5-((4-Хлор-2-нитрофенил)амино)-1-метил-1Н-пиразол-4-карбальдегид (Pre-SOC-3)
Pre-SOC-3 получали (563 мг, 58%) в виде желтых кристаллов, т.пл. 131-132°С, (Rf=0,40 в 1:1 об./об. этилацетат/н-гексан) согласно Общей процедуре 1 с 4-хлор-2-нитроанилином.
Характеристические данные для Pre-SOC-3 могут быть найдены в Таблице 2.
7-Хлор-1-метил-1,4,5,10-тетрагидробензо[b]пиразоло[3,4-е][1,4]диазепин (FB-SOC-3)
Перемешиваемый с помощью магнитной мешалки раствор Pre-SOC-3 (337 мг, 1,20 ммоль) в метаноле (12 мл) обрабатывали HCl (2,0 мл 6,0 М водного раствора, 12,0 ммоль), затем порошком Zn (1,57 г, 24,0 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, затем фильтровали через Celite™. Удержанные таким образом твердые вещества промывали метанолом (2×25 мл) и объединенные фильтраты концентрировали в пониженном давлении с получением желтого твердого вещества. Перекристаллизация (н-гексан/дихлорметан) давала FB-SOC-3 (175 мг, 62%) в виде коричневого твердого вещества, т.пл. 174-176°С, (Rf=0,25 в 1:9 об./об. метанол/дихлорметан).
Характеристические данные для FB-SOC-3 могут быть найдены в Таблице 2.
1-Метил-5-((4-метил-2-нитрофенил)амино)-1Н-пиразол-4-карбальдегид (Pre-SOC-4)
Pre-SOC-4 получали (621 мг, 69%) в виде оранжевого твердого вещества, т.пл. 162-163°С, (Rf=0,40 в 1:1 об./об. этилацетат/н-гексан) согласно Общей процедуре 1 с 4-метил-2-нитроанилином.
Характеристические данные для Pre-SOC-4 могут быть найдены в Таблице 2.
1,7-Диметил-1,4,5,10-тетрагидробензо[b]пиразоло[3,4-е][1,4]диазепин (FB-SOC-4)
FB-SOC-4 получали (247 мг, 96%) в виде бледно-желтых кристаллов, т.пл. 172-173°С, (Rf=0,50 в 1:9 об./об. метанол/дихлорметан) согласно Общей процедуре 2.
Характеристические данные для FB-SOC-4 могут быть найдены в Таблице 2.
1-Метил-5-((2-метил-6-нитрофенил)амино)-1Н-пиразол-4-карбальдегид (Pre-SOC-5)
Pre-SOC-5 получали согласно Общей процедуре 1, но нагревали при 100°С в течение 18 часов. Это давало Pre-SOC-5 (396 мг, 44%) в виде желтого твердого вещества и 1:1,5 смеси атропоизомеров, т.пл. 129-130°С, (Rf=0,25 в 1:1 об./об. этилацетат/н-гексан).
Характеристические данные для Pre-SOC-5 могут быть найдены в Таблице 2.
1,9-Диметил-1,4,5,10-тетрагидробензо[b]пиразоло[3,4-е][1,4]диазепин (FB-SOC-5)
FB-SOC-5 получали (211 мг, 82%) в виде бледно-желтых кристаллов, т.пл. 137-139°С, (Rf=0,50 в 1:9 об./об. метанол/дихлорметан) согласно Общей процедуре 2.
Характеристические данные для FB-SOC-5 могут быть найдены в Таблице 2.
5-((4-Метокси-2-нитрофенил)амино)-1-метил-1H-пиразол-4-карбальдегид (Pre-SOC-6)
Pre-SOC6 получали (401 мг, 42%) в виде оранжевого твердого вещества, т.пл. 132-133°С, (Rf=0,27 в 1:1 об./об. этилацетат/н-гексан) согласно Общей процедуре 1 с 4-метокси-2-нитроанилином.
Характеристические данные для Pre-SOC-6 могут быть найдены в Таблице 2.
7-Метокси-1-метил-1,4,5,10-тетрагидробензо[b]пиразоло[3,4-е][1,4]диазепин (FB-SOC-6)
FB-SOC-6 получали (251 мг, 91%) в виде бледно-розового твердого вещества, т.пл. 126-128°С, (Rf=0,55 в 1:9 об./об. метанол/дихлорметан) согласно Общей процедуре 2.
Характеристические данные для FB-SOC-6 могут быть найдены в Таблице 2.
1-(1-метил-4,10-дигидробензо[b]пиразоло[3,4-е][1,4]диазепин-5(1Н)-ил)этан-1-он (FB-SOC-7)
Перемешиваемую на магнитной мешалке ледяную суспензию FB-SOC-1 (200 мг, 1 ммоль) в сухом DCM (10 мл) и триэтиламине (279 мкл, 2 ммоль) обрабатывали ацетилхлоридом (85 мкл, 1,2 ммоль) и перемешивание продолжали при комнатной температуре в течение 4 часов. Полученную смесь разбавляли DCM (50 мл) и промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия (2×100 мл). Органическую фазу отделяли и промывали рассолом (50 мл), сушили (MgSO4) и концентрировали в пониженном давлении с получением желтого порошка, который очищали посредством колоночной хроматографии (диоксид кремния, элюент: элюирование градиентом 19:1 - 9:1 об./об. DCM:MeOH) и концентрирование релевантных фракций (Rf=0,40 в 9:1 об./об. DCM:MeOH) давало соединение FB-SOC-7 в виде белого порошка (197 мг, 0,81 ммоль, 81%).
1-Метил-4,5-дигидро-1Н-бензо[b]пиразоло[4,3-f][1,4]оксазепин (FB-SOC-8)
FB-SOC-8 может быть синтезирован путем двух многостадийных процессов (Синтез 1 и Синтез 2, соответственно).
Синтез 1
Раствор 1 (500 мг, 3,46 ммоль), 2-нитрофенол (1,44 г, 10,38 ммоль) и порошковый KOH (388 мг, 6,92 ммоль) в DMF (4 мл) облучали в микроволновом реакторе СЕМ Explorer™ при 120°С в течение 0,5 часов. Полученную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем обрабатывали NH4Cl (50 мл насыщенного водного раствора) и экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Объединенные органические фазы промывали рассолом (1×10 мл), после чего сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали в пониженном давлении с получением желтого масла. Подвергание этого остатка колоночной флэш-хроматографии (диоксид кремния, элюирование градиентом 1:4 → 1:1 об./об. этилацетат/гексан) и концентрирование релевантных фракций (Rf=0,26 в 1:1 об./об. этилацетат/гексан) давали 1-метил-5-(2-нитрофенокси)-1Н-пиразол-4-карбальдегид.
Затем суспензию 1-метил-5-(2-нитрофенокси)-1Н-пиразол-4-карбальдегида (300 мг, 1,21 ммоль) и палладия на углероде (20 мг 10% масс./масс.) в метаноле (15 мл) перемешивали с помощью магнитной мешалки при комнатной температуре в атмосфере H2 (1 атм.) в течение 18 часов. Полученную смесь фильтровали через Celite™ и удержанные таким образом твердые вещества промывали метанолом (3×20 мл). Объединенные фильтраты концентрировали в пониженном давлении с получением белого твердого вещества. Перекристаллизация (дихлорметан/гексан) давала FB-SOC-8 (229 мг, 94%) в виде белых кристаллов, т.пл. 143-145°С, (Rf=0,50 в 1:9 об./об. метанол/дихлорметан).
Синтез 2
Перемешиваемый с помощью магнитной мешалки раствор 1 (500 мг, 3,46 ммоль) и 2-аминофенол (1,13 г, 10,38 ммоль) в DMF (4 мл) обрабатывали порошковым KOH (388 мг, 6,92 ммоль), затем нагревали при 120°С в течение 2 часов. Полученную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем обрабатывали NH4Cl (50 мл насыщенного водного раствора) и экстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Объединенные органические фазы промывали рассолом (1×10 мл), после чего сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали в пониженном давлении с получением желтого масла. Подвергание этого остатка колоночной флэш-хроматографии (диоксид кремния, элюирование градиентом 1:4→1:1 об./об. этилацетат/гексан) и концентрирование релевантных фракций (Rf=0,21 в 1:1 об./об. этилацетат/гексан) давало 1-метил-1H-бензо[b]пиразоло[4,3-f][1,4]оксазепин (400 мг, 58%) в виде коричневого масла.
Затем перемешиваемый с помощью магнитной мешалки раствор 1-метил-1Н-бензо[b]пиразоло[4,3-f][1,4]оксазепина (350 мг, 1,76 ммоль) в метаноле (8,5 мл) при 0°С порциями в течение 5 минут обрабатывали NaBH4 (136 мг, 3,51 ммоль). Полученную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 1,5 часов, после чего аккуратно обрабатывали Н2О (5 мл). Когда выделение водорода прекращалось метанол удаляли в пониженном давлении и полученную водную смесь экстрагировали этилацетатом (3×10 мл). Объединенные органические фазы сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали в пониженном давлении с получением FB-SOC-8 в виде белого порошка.
Характеристические данные для FB-SOC-8 могут быть найдены в Таблице 2.
Синтез 1-метил-4,5-дигидро-1Н-бензо[b]пиразоло[4,3-f][1,4]тиазапина (FB-SOC-9)
Перемешиваемый с помощью магнитной мешалки раствор 1 (150 мг, 1,0 ммоль), 2-аминотиофенол (120 мкл, 1,1 ммоль) и пиперидин (11 мкл, 0,1 ммоль) в EtOH (5 мл) нагревали при температуре флегмообразования в течение 3 часов, после чего TLC указывала на то, что не оставалось исходного альдегида 1. Реакционную смесь охлаждали до 0°С и обрабатывали порциями NaBH4 (98 мг, 2,6 ммоль, 2,5 экв.) и когда все растворяли смесь повторно нагревали до температуры флегмообразования в течение 1 часа, затем упаривали с получением желтого остатка. Его растворяли в насыщенном растворе NaHCO3 (20 мл) и экстрагировали диэтиловым эфиром (3×20 мл). Объединенные органические слои сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали в пониженном давлении с получением желтого твердого вещества. Подвергание этого остатка колоночной флэш-хроматографии (диоксид кремния, элюирование градиентом 3:7→8:2 об./об. этилацетат/гексан) и концентрирование релевантных фракций (Rf=0,15 в 1:1 об./об. этилацетат/гексан) давало FB-SOC-9 (54 мг, 24%) в виде белого твердого вещества, т.пл. 134-137°С.
Характеристические данные для соединения FB-SOC-9 показаны в Таблице 2.
1-Метил-4,5-дигидро-1Н-бензо[b]пиразоло[4,3-f][1,4]тиазепин-10-оксид (FB-SOC-10)
Соединение FB-SOC-10 синтезировали в многостадийной реакции. Исходно, перемешиваемый с помощью магнитной мешалки раствор SOC-9 (200 мг, 920 мкмоль) и триэтиламина (96 мкл, 2,8 ммоль) в THF (3 мл) при 0°С по каплям обрабатывали трифторуксусным ангидридом (200 мкл, 1,4 ммоль). Полученный раствор оставляли перемешиваться при 0°С в течение 3 часов и затем при комнатной температуре в течение последующих 18 часов. Затем полученную смесь концентрировали в пониженном давлении с получением желтого масла, которое подвергали колоночной флэш-хроматографии (диоксид кремния, элюирование 1:7 об./об. этилацетат/гексан). Концентрирование релевантных фракций (Rf=0,43 в 1:1 об./об. этилацетат/гексан) давало 2,2,2-трифтор-1-(1-метил-1Н-бензо[b]пиразоло[4,3-f][1,4]тиазепин-5(4Н)-ил)этанон (261 мг, 94%) в виде желтого твердого вещества, т.пл. 115-118°С.
Для получения FB-SOC-10 раствор 2,2,2-трифтор-1-(1-метил-1H-бензо[b]пиразоло[4,3-f][1,4]тиазепин-5(4Н)-ил)этанона (90 мг, 273 мкмоль) и K2CO3 (100 мг, 720 мкмоль) в МеОН (6 мл) перемешивали с помощью магнитной мешалки при комнатной температуре в течение 18 часов. Затем полученную смесь концентрировали в пониженном давлении, после чего добавляли воду (15 мл), затем смесь экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенные органические фазы сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали в пониженном давлении с получением FB-SOC-10 (60 мг, 94%) в виде белого твердого вещества, т.пл. 192-194°С, (Rf=0,45 в 1:9 об./об. метанол/дихлорметан).
Характеристические данные для соединения FB-SOC-10 показаны в Таблице 2.
1-Метил-4,5-дигидро-1Н-бензо[b]пиразоло[4,3-f][1,4]тиазепин-10,10-диоксид (FB-SOC-11)
Соединение FB-SOC-11 синтезировали путем многостадийной реакции. Сначала перемешиваемый с помощью магнитной мешалки раствор 2,2,2-трифтор-1-(1-метил-1Н-бензо[b]пиразоло[4,3-f][1,4]тиазепин-5(4Н)-ил)этанона, полученный, как описано в синтезе SOC-10 (50 мг, 160 мкмоль), в ледяной уксусной кислоте (0,6 мл) по каплям обрабатывали пероксидом водорода (50 мкл 30%-ного водн. раствора, 480 мкмоль) при комнатной температуре, затем нагревали до 80°С в течение 4 часов. Полученный раствор охлаждали до комнатной температуры и обрабатывали водой (15 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенные органические фазы сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали в пониженном давлении с получением 2,2,2-трифтор-1-(1-метил-10,10-диоксидо-1H-бензо[b]пиразоло[4,3-f][1,4]тиазепин-5(4Н)-ил)этанона (55 мг, 80%) в виде желтого твердого вещества, т.пл. 187-190°С, (Rf=0,25 в 1:1 об./об. этилацетат/гексан).
Затем раствор 2,2,2-трифтор-1-(1-метил-10,10-диоксидо-1Н-бензо[b]пиразоло[4,3-f][1,4]тиазепин-5(4Н)-ил)этанона (56 мг, 159 мкмоль), и K2CO3 (62 мг, 450 мкмоль) в МеОН (4 мл) перемешивали с помощью магнитной мешалки при комнатной температуре в течение 18 часов. Затем полученную смесь концентрировали в пониженном давлении, после чего добавляли воду (15 мл), затем смесь экстрагировали этилацетатом (3×15 мл). Объединенные органические фазы сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали в пониженном давлении с получением FB-SOC-11 (39 мг, 97%) в виде белого твердого вещества, т.пл. 172-174°С, (Rf=0,39 в 1:9 об./об. метанол/дихлорметан).
Характеристические данные для соединения FB-SOC-11 показаны в Таблице 2.
Пример 2 - Соли
Получение солей известно специалистам в данной области. Например, для изготовления гидрохлоридной соли HCl (4М в диоксане, 1,1 эквивалента) может быть добавлена к перемешиваемому с помощью магнитной мешалки раствору в виде свободного основания, например, (FB-SOC-1 или FB-SOC-2) в THF. Перемешивание продолжали в течение 30 минут. Полученный осадок собирали путем фильтрации с получением соответствующих солевых производных в виде гидрохлоридных солей.
Один из примеров соли Формулы (I) представляет собой гидрохлоридную соль соединения:
Гидрохлоридную соль:
используют в следующих примерах, и ей дали название SOC-1.
Пример 3 - Исследования In Vivo (Бихевиористские эффекты - Тесты на социальное взаимодействие с крысами Hooded Wistar)
Тест на социальное взаимодействие, осуществляли с использованием крыс Hooded Wistar, и было показано, что SOC-1 вызывает мощный просоциальный эффект у грызунов. Первичным фенотипическим эффектом являлось значительное увеличение поведения, называемого "лежание рядом", где незнакомые крысы приходят в пассивный социальный контакт в течение длительных периодов. Как можно видеть на Фиг. 1, изображение (A), SOC-1, вводимый в виде внутрибрюшинной инъекции (IP) самцам крыс Hooded Wistar, вызывал значительное увеличение лежания рядом в тесте на социальное взаимодействие при дозах 5 и 10 мг/кг IP. (n=6-8 пар на состояние, 20-минутный тест). Примечательно, что эффекты SOC-1 переживают его однократное введение и наблюдали продленную повышенную регуляцию социального поведения (измеренную как время, проведенное в непосредственной близости) у крыс, которым давали всего лишь 3 дозы SOC-1 за 2 недели до этого (Фиг. 1, изображение (В)). Через две недели после лечения SOC-1 (всего 3 дозы на протяжении 6 суток) самцы крыс Hooded Wistar демонстрируют повышенную близость в отношении новичков относительно контроля (время, проведенное в пределах 1 длины тела)). Сходная долгосрочная повышенная регуляция была обнаружена с окситоцином (ОТ) (М. Bowen, et al., "Adolescent Oxytocin Exposure Causes Persistent Reductions in Anxiety and Alcohol Consumption and Enhances Sociability in Rats", PloS One, 6(11), 2011 - e27237; и A. Suraev, et al., "Adolescent exposure to oxytocin, but not the selective oxytocin receptor agonist TGOT, increases social behavior and plasma oxytocin in adulthood", Hormones and Behavior, 65(5), 488-496, 2014. Прямые сравнения наиболее эффективной дозы SOC-1 с наиболее эффективными дозами других веществ, которые, как известно, вызывают поведение лежания поблизости у крыс (аргининвазопрессин (AVP), 3,4-метилендиокси-метамфетамин (MDMA) и WAY 267,464), показали, что SOC-1 обладал наиболее мощным просоциальным эффектом с ощутимым превосходством (Фиг. 1, изображение (С)).
Было показано, что социальное предпочтение увеличивается у самцов крыс Albino Wistar вследствие введения SOC-1 крысам, которым давали выбор проводить время с помещенным в клетку соплеменником или игрушечной крысой (Фиг. 2, изображение (А)). Как можно видеть на Фиг. 2, изображение (А), SOC-1, в дозе 5 мг/кг значительно увеличивал предпочтение к живой крысе.
Пример 4 - Исследования In Vivo (Бихевиористские эффекты - пристрастие у нечеловекообразных макак-резусов)
Дополнительные бихевиористские исследования с использованием SOC-1 в моделях зависимости и социального поведения нечеловекообразных приматов показали, что SOC-1, вводимый перорально макакам-резусам в дозе 3 мг/кг, снижал практически в два раза самостоятельное внутривенное введение кокаина по сравнению с базовыми уровнями, не влияя на потребление пищи (Фиг. 2, изображение (В)). В этом исследовании введение SOC-1 радикально уменьшало потребление кокаина без влияния на потребление пищи. Прогрессивное самостоятельное введение кокаина показано на Фиг. 3.
Пример 5 - Исследования In Vivo (Фармакокинетика)
В моделях грызунов in vivo с использованием крыс Hooded Wistar SOC-1 демонстрирует отличную пероральную биодоступность и фармакокинетические параметры относительно бихевиористически эффективного внутрибрюшинного пути введения (Таблица 3 и Фиг. 4). При введении путем внутрибрюшинной инъекции (IP) уровни SOC-1 в плазме демонстрируют быстрый рост. Он быстро снижается в течение первого часа, после чего превращается в более медленное снижение концентрации в течение последующих часов. Противоположно, та же доза SOC-1, вводимая перорально, демонстрирует намного большую стабильность концентрации в плазме на протяжении многих часов. Исходное увеличение уровней в плазме является менее выраженным, когда SOC-1 дают перорально, но снижение является намного более медленным, где концентрация в плазме становится равной концентрации при введении IP между 1 и 4 часами. Во многих отношениях это представляет собой более благоприятный профиль, так как, в отличие от дозировки IP, в результате пероральной дозировки наблюдаются уровни SOC-1, которые все еще являются высокими, но также стабильны в течение многих часов, с периодом полувыведения более четырех часов.
SOC-1 демонстрирует отличную стабильность в человеческой плазме в исследованиях на стабильность в плазме in vitro (Фиг. 5). Даже в относительно низких концентрациях (500 нМ) SOC-1 демонстрирует период полувыведения более 6 часов при инкубировании в человеческой плазме при температуре тела.
Пример 6 - Исследования In Vivo (Фармакодинамика)
Иммуногистохимию Fos использовали для определения нейронной "подписи" SOC-1 (5 мг/кг) в мозге крыс относительно инъекций внешнего окситоцина (ОТ) (1 мг/кг). Результаты показаны в Таблице 4. SOC-1 дает сходную с ОТ общую картину нервной активации и бихевиористских эффектов. Однако эффекты являются значительно более заметными, и посредством SOC-1 активируются дополнительные области, которые причастны к регуляции социального поведения (например, боковая перегородка, медиальная преоптическая область и супраоптическое ядро). SOC-1 дает мощную активацию ОТ-содержащих нейронов и в супраоптическом (Фиг. 6: (А) = носитель; (В) = окситоцин; и (С) = SOC-1), и в паравентрикулярном ядре гипоталамуса. SOC-1 (5 мг/кг), вводимый самцам крыс Wistar, мощно активирует экспрессию Fos в окситоцин-положительных клетках в супраоптическом ядре гипоталамуса (SON). SOC-1 является значительно более эффективным в активации этих окситоцин-содержащих клеток в SON, чем 1 мг/кг окситоцина (внутрибрюшинное введение).
a) SOC-1 значительно >VEH; b) SOC-1 значительно >ОТ
При этом примечательно, что SOC-1 не демонстрирует аффинности к ортостерическим сайтам связывания на окситоциновом рецепторе (OTR) (человеческий ОТ рецептор, IC50 (нМ) против [3Н]ОТ=>10000). Кроме того, исследование сигнального пути IP1 в OTR на клетках HEK показало, что SOC-1 не представляет собой агонист или антагонист OTRs, и также не является положительным аллостерическим модулятором OTR. Также SOC-1 не демонстрирует какой-либо аффинности к ортостерическим сайтам связывания рецепторов AVP (V1A, V1B или V2) (например, человеческий рецептор V1a, IC50 (нМ) по сравнению с [3H]AVP=>10000). Сигнальный путь IP1 в клетках V1aR HEK показал, что SOC-1 не является агонистом или положительным аллостерическим модулятором V1aRs, но демонстрировал слабую антагонистическую активность в отношении этих рецепторов.
Исчерпывающий скрининг аффинности для ортостерических сайтов связывания для многочисленных рецепторов из Программы отбора психоактивных лекарственных веществ (PDSP) до сих пор не смог определить мишень, несмотря на мощные ОТ-подобные бихевиористские эффекты соединения, очевидные in vivo, и явную активацию ОТ систем мозга, очевидную из данных Fos от авторов изобретения. В PDSP SOC-1 не обладал значительной аффинностью в отношении сайтов в мозге крыс 5-НТ1А, 5-НТ1В, 5-HT1D, 5-ht1e, 5-НТ2А, 5-НТ2В, 5-НТ2С, 5-НТ3, 5-ht5a, 5-НТ6, 5-НТ7, Alpha1B, Alpha1D, Alpha2A, Alpha2B, Alpha2C, Beta1, Beta2, Beta3, BZP, рецепторов D1, D2, D3, D4, D5, DAT, DOR, GABAA, H1, H2, H3, KOR, M1, M2, М3, M4, M5, MOR, NET, PBR, SERT, Sigma 1 и Sigma 2.
Исследование передачи сигнала с использованием гипоталамических нейронов крыс показало, что SOC-1 не менял уровни IP1 и достоверно не менял уровни Са2+. Однако, SOC-1 был способен снизить базальный сАМР, но достоверно не снижал форсколин-стимулированный сАМР. Все это предполагает, что он может работать или через Gs-связанный рецептор в качестве обратного агониста, или в качестве агониста Gi-связанного рецептора.
Пример 7 - Исследование токсичности и побочных эффектов
Не наблюдали очевидной цитотоксичности SOC-1 in vitro или токсичности in vivo. В исследовании, клетки нейробластомы SH-SY5Y и клетки HEK-293 (4×104 клеток на лунку) подвергали воздействию ОТ или SOC-1 (0,01-10 мкМ) в течение 48 часов, с ежедневными сменами среды. Жизнеспособность клеток оценивали по прошествии 4-часового воздействия Cell Titer Blue (Promega). Никакие значительные различия в жизнеспособности не были вызваны ни ОТ, ни SOC-1 в любой исследованной концентрации (Таблица 5). Так как клетки SH-SY5Y экспрессируют OTR (P. Cassoni, et al., Int J Cancer, 77, 695-700, 1998), a клетки HEK-293 экспрессируют небольшое количество эндогенного OTR (ВМС Genomics 12:4), эти результаты предполагают, что SOC-1 не индуцирует опосредованный рецептором или опосредованные не рецептором цитотоксические события, даже в чрезмерных концентрациях.
Таблица 5 - Жизнеспособность клеток, подвергнутых воздействию окситоцина или SOC-1 в течение 48 часов. Жизнеспособность выражена как средний процент жизнеспособности с носителем ± стандартное отклонение (SD). Никакие значительные различия в жизнеспособности не были вызваны окситоцином или SOC-1 в любой тестируемой концентрации.
В отношении in vivo токсичности/неблагоприятных явлений: при высоких дозах у крыс (10-20 мг/кг IP) наблюдалось определенное небольшое ингибирование двигательной активности. Однако крысы не были атактическими или коматозными, они просто находились в расслабленном состоянии покоя. Крысы переносили повторявшиеся дозировки SOC-1 без явных неблагоприятных явлений, таких как потеря массы тела или изменение состояния шерсти. SOC-1 не оказывал эффекта в традиционных несоциальных тестах на тревожность (например, приподнятый крестообразный лабиринт, открытое поле) ни при однократной дозировке, ни в виде остаточного долгосрочного эффекта. SOC-1 не дает предпочтения мест введения вещества у крыс, что позволяет предполагать низкий потенциал к злоупотреблениям. Эксперименты с биологической телеметрией показывают небольшую гипотермию у крыс при 5 мг/кг, но отсутствие влияния SOC-1 на частоту сердечных сокращений (Фиг. 7 и Фиг. 8). Влияние на температуру тела и другие поведение не блокируется предварительным лечением антагонистом вазопрессинового рецептора V1A SR49059 (10 мг/кг). Ограниченная гипотермия, получаемая от SOC-1, исчезает при более высоких температурах окружающей среды (т.е. 30°С) но социальные эффекты лекарственного средства при этих температурах сохраняются. Данные в этих двух исследованиях собирали с помощью телеметрической системы DataSciences International biotelemetry system.
Пример 8 - Исследование на лекарственный рецидив у крыс Sprague-Dawley
Животные
32 самца крыс Sprague Dawley (с массой тела 200-250 г) получали из Animal Resources Centre (Perth, WA, Australia). Крыс содержали парами (размер клетки: 40×27×16 см до недели 6, после чего их перемещали в более просторные клетки: 64×20×40 см), за исключением послеоперационного периода индивидуального содержания, длившегося двое суток. Пища и вода были доступны ad libitum в домашних клетках и не в ходе экспериментальных процедур. Освещение поддерживали циклом свет/темнота по 12 часов (свет включали в 06:00), и все эксперименты осуществляли в ходе светового цикла. Температуру содержания поддерживали при 21°С (±1°С). Перед началом эксперимента крысы акклиматизировались к условиям в течение семи суток, и с ними выполняли процедуры в течение последующих семи суток. Все экспериментальные процедуры осуществляли в соответствии с Australian Code of Practice for the Care and Use of Animals for Scientific Purposes (8-е издание, 2013), и они были одобрены Комитетом по животной этике Университета Макуори.
Лекарства
Метамфетамина гидрохлорид (МЕТН) приобретали в Australian Government Analytical Laboratories (Pymble, NSW, Australia). SOC-1 был синтезирован Prof. Michael Kassiou (School of Chemistry, University of Sydney, Australia). МЕТН и SOC-1 растворяли в солевом растворе (0,9%) для инъекций. Антагонист рецептора V1A SR49059 приобретали в Axon Medchem BV (Groningen, The Netherlands), и антагонист окситоцинового рецептора С25 (5-(3-(3-(2-хлор-4-фторфенокси)азетидин-1-ил)-5-(метоксиметил)-4Н-1,2,4-триазол-4-ил)-2-метоксипиридин) синтезировали согласно процедурам в Hudsen et al. (2005) и Brown et al. (2010). SR49059 и C25 растворяли в 15% диметилсульфоксида (DMSO), 2% tween 80, и 83% носителя солевого раствора. Все растворы являлись свежеприготовленными для каждой тестовой сессии.
Аппарат
Тестирование осуществляли в 16 стандартных помещениях оперантных реакций (32×25×34 см; Med Associates, St Albans, VT, USA), которые помещали в заглушающие шум коробки (41×56×56 см), снабженные вентилятором для маскировки шума и обеспечения вентиляции. Каждую комнату снабжали двумя убираемыми рычагами (1 активный, 1 неактивный), где над каждым рычагом располагали световой сигнал, и освещение помещения. Помещения также содержали металлическое плечо с регулируемой массой и коннектор источника, которые были присоединены к поворотному соединению. Полиэтиленовая трубка, продетая через коннектор источника, была присоединена к 10 мл шприцу, присоединенному к инфузионному насосу (Med Associates), расположенному за пределами заглушающего шум помещения. Трубки, выходившие из основания коннектора источника, были присоединены к заднему коннектору внутривенного катетера.
Четыре инфракрасных позиционных детектора также помещали на боковые стенки каждого оперантного помещения для измерения двигательной активности. Нажатия на активные и неактивные рычаги, число инфузий, двигательную активность собирали и регистрировали с использованием программного обеспечения MED-PC.
Хирургия
Крысам имплантировали хронический полостный катетер в правую яремную вену. Для достижения этого крыс анестезировали газом изофлураном (3% в кислороде, 2 л/мин) и применяли асептические хирургические методики. Имплантация катетера, а также конструкция катетера являются такими, как описано ранее (Moteby et al., 2013). Крыс обрабатывали 0,2 мл антибиотика цефазолина натрия (100 мг/мл) внутривенно и анальгетиком карпофеном (5 мг/кг) подкожно во время хирургии и ежесуточно в течение последующих двух суток. После этого проходимость катетера поддерживали путем ежедневной внутривенной промывки 0,2 мл цефазолина натрия в гепаринизированном солевом растворе (300 IU/мл). Крыс оставляли восстанавливаться после хирургии в течение 7 суток, после чего начинали эксперимент.
Процедура самостоятельного внутривенного введения метамфетамина (IVSA)
После восстановления после хирургии крысы были способны самостоятельно вводить внутривенный МЕТН в течение двухчасовых сессий 2. В начале каждой сессии катетеры промывали 0,1 мл гепаринизированного солевого раствора (10 IU/мл) и подсоединяли к инфузионной линии. Вытягивание рычага и освещение верхним светом указывали на начало сессии. Рычаги были распределены как активные и неактивные, где расположение активного рычага было уравновешено для всех комнат. Нажатие на активный рычаг давало 3 сек инфузию МЕТН (0,1 мг/кг/инфузия, 50 мкл), зажигало световой сигнал и выключало верхнее освещение. Верхнее освещение было выключено в течение 20 секундного периода времени, в течение которого нажатие на активный рычаг не имело программируемых последствий. Нажатие на неактивный рычаг не имело программируемых последствий ни в какое время. В конце каждой сессии инфузионную линию отключали и катетеры промывали 0,2 мл цефазолина натрия в гепаринизированном солевом растворе.
Перед началом процедуры IVSA крыс приучали к помещениям. Рычаги были подняты, и инфузии не были доступны. Сессию осуществляли в течение 60 минут.
Эксперимент 1 - Приобретение и поддержание МЕТН IVSA
Крысы получали самостоятельное введение МЕТН в ходе ежесуточных 2-часовых фиксированных однократных запланированных сессий. Во избежание передозировки каждую крысу ограничивали до максимального количества 60 инфузий за сессию. Крысы продолжали по графику FR-1 до тех пор, пока не достигали стабильного ответа, на что указывала менее чем 10%-ная вариативность в числе инфузий и нажатий на активный рычаг по сравнению с предыдущими сутками. Стабильные базовые линии самостоятельного введения достигали по прошествии 10 суток, после чего крысы переходили на прогрессивный график.
Прогрессивный график
В прогрессивном графике (PR) инфузии МЕТН доставляли согласно соотношению: ((5×(е№ усилителя×0,2)-5). Число нажатий на активный рычаг, которые требовались для получения одной инфузии МЕТН, повышалось согласно следующей последовательности: 1, 2, 4, 6, 9, 12, 15, 20, 25, 32, 40, 50, 62, 77, 95, 118, 145, 178, 219, 268 (Cornish et al., 2005). Ежесуточные PR сессии завершали по прошествии 2 часов или если инфузия не было самостоятельно введена в течение 60 минут. Крысы продолжали с PR сессиями до тех пор, пока нажатие на рычаг не стабилизировалось, что определяли как менее чем 10%-ная вариативность числа инфузий и нажатий на активный рычаг в течение двух следующих друг за другом суток. Нажатия на рычаг стабилизировались по прошествии 7 суток. В ходе этого времени крысам давали фальшивую i.p.(1 мл/кг) инъекцию солевого раствора перед сессией.
Когда нажатие на рычаг стабилизировалось, начинали тестирование SOC-1. Каждые сутки теста были разделены 2-3 PR запланированными сессиями для повторного набора базового уровня ответа на инфузий МЕТН. Крысы получали SOC-1 в увеличивающейся последовательности доз (0, 1,25, 2,5, 5 и 10 мг/кг), которые вводили за 15 минут перед тестовой сессией. В конечную тестовую сессию крысы получали инъекцию носителя для того, чтобы убедиться в том, что они продолжали участвовать в сходном нажатии на рычаг, как и в их первую тестовую сессию, и что сниженное нажатие на рычаг, очевидное в тестовые дни SOC-1, происходило вследствие эффектов соединения, а не стресса от инъекций.
Эксперимент 2 - Получение и поддержание МЕТН IVSA
Получение и поддержание МЕТН IVSA в эксперименте 2 было идентичным Эксперименту 1, за исключением того, что сессии IVSA осуществляли 5 дней в неделю в течение 21 дня.
Ослабление
После последнего дня самостоятельного введения МЕТН крыс подвергали ежедневным 2-часовым сессиям ослабления. Сессии были идентичными сессиям самостоятельного введения, за исключением того, что нажатие на активный рычаг теперь приводило к инфузий солевого раствора, сопряженного с включением светового сигнала, и максимальный критерий больше не действовал. Крысы продолжали в условиях ослабления в течение минимум десяти суток и вплоть до того, как делали <25 нажатий на рычаг за сессию в течение двух последовательных суток. В ходе второй недели ослабления крысам давали одну фальшивую инъекцию солевого раствора i.p. (1 мл/кг солевого раствора) перед 2-часовой сессией.
Восстановление
Когда критерии ослабления были удовлетворены, крысы подвергались тестированию восстановления. Каждая тестовая сессия восстановления была разделена тремя днями ослабления. Перед каждой тестовой сессией восстановления крысы получали первую инъекцию (DMSO и носитель tween, С25 или SR49059) за 5 минут перед второй инъекцией (носитель солевой раствор или SOC-1), после которой они получали их конечную инъекцию (носитель солевой раствор или МЕТН) 5 минутами позднее, и затем немедленно помещали в помещение на 2 часа для измерения нажатия на рычаг и двигательной активности.
Крысы исходно получали SOC-1 в возрастающей последовательности доз (0, 2,5, 5, 10 мг/кг, i.p.), после чего получали примирование МЕТН (1 мг/кг, i.p.). После завершения первых четырех сессий восстановления вводили предварительное лечение агонистом (С25 в дозе 10 мг/кг i.p. или SR49059 в дозе 1 мг/кг, i.p.) перед дозой SOC-1 10 мг/кг и примирование МЕТН. Инъекции антагониста балансировали на протяжении двух сессий восстановления, так что половина крыс получала С25, а другая половина получала SR49059 перед каждой сессией. В ходе сессии восстановления, следующей за тестирование антагониста, крысы получали наиболее высокую тестируемую дозу SOC-1, сопровождающуюся инъекциями носителя, чтобы убедиться в том, что SOC-1 отдельно не менял активность нажатия на рычаг. Также чтобы убедиться в том, что крысы продолжали восстанавливать потребление МЕТН, были включены дополнительные сессии, где крысы получали носитель i.p. инъекциями перед примированием МЕТН после завершения расписание возрастающей дозы тестового соединения SOC-1. Условия восстановления были идентичными сессиям ослабления.
Статистический анализ
Суточные количества нажатий на активный и неактивный рычаг в ходе получения самостоятельного введения анализировали с использованием двухфакторного анализа вариативности повторяющихся измерений (ANOVA) с последующими парными сравнениями. Число инфузий и нажатий на активный рычаг на протяжении 20-дневного периода также сравнивали с использованием ANOVA повторяющихся измерений для того, чтобы убедиться, что крысы приобретали самостоятельное введение МЕТН с последующими запланированными парными сравнениями. Двигательную активность на протяжении самостоятельного введения анализировали с использованием ANOVA повторяющихся измерений с запланированными парными сравнениями.
Влияние SOC-1 на потребление МЕТН и нажатие на активный рычаг в прогрессивном графике анализировали с использованием ANOVA повторяющихся измерений с последующими запланированными парными сравнениями. Сравнение нажатий на активный и неактивный рычаг после введения препарата осуществляли с использованием двухфакторного ANOVA повторяющихся измерений. Двигательную активность после введения SOC-1 также анализировали с использованием ANOVA повторяющихся измерений с последующими запланированными парными сравнениями.
Для оценки того, демонстрировали ли крысы исчезновение связанных с МЕТН ответов, средние нажатия на активный рычаг из трех последних сессий самостоятельного введения МЕТН сравнивали с нажатием на активный рычаг в ходе сессий ослабления с использованием ANOVA повторяющихся измерений с запланированными сравнениями, как и для изменений в двигательной активности.
Для определения того, что крысы восстанавливали связанный с МЕТН ответ в виде нажатия на рычаг, нажатие на активный рычаг в ходе последнего дня ослабления перед восстановлением сравнивали с использованием двухфакторного ANOVA повторяющихся измерений. Нажатие на активный и неактивный рычаг при восстановлении сравнивали с использованием двухфакторного ANOVA повторяющихся измерений для того, чтобы убедиться, что крысы продолжали различать рычаги. Двигательную активность также анализировали на протяжении ослабления и восстановления с использованием двухфакторного ANOVA повторяющихся измерений. Влияние SOC-1 на восстановления поведения, направленного на поиск МЕТН, оценивали с использованием ANOVA повторяющихся измерений с последующими запланированными парными сравнениями. Статистический анализ осуществляли с использованием SPSS 20 Graduate Student Version для Mac. В случаях, когда предположение сферичности нарушалось, сообщали поправку Greenhouse-Geisser. Статистическую значимость устанавливали на уровне Р<0,05.
Результаты
Тестирование SOC-1 в прогрессивном графике
На Фиг. 9, Фиг. 10 и Фиг. 11 показано влияние SOC-1 или носителя на а) инфузий (Фиг. 9), б) нажатия на рычаг (Фиг. 10) и в) двигательную активность (Фиг. 11) у крыс, самостоятельно вводящих метамфетамин по прогрессивному графику. В этих Фиг. * обозначает р<0,05 по сравнению с носителем.
После восстановления от хирургического вмешательства для имплантации катетера в правую яремную вену самцов крыс Sprague Dawley тренировали в ходе ежесуточных 2-часовых FR-1 запланированным сессий нажимать на рычаг для метамфетамина (0,1 мг/кг/инфузия). Стабильных ответов по графику FR-1 достигали в течение 10 суток. Затем крыс переводили на график PR, который они поддерживали в течение 7 суток до стабилизации их ответа. Когда их нажатие на рычаг стабилизировалось, начиналось тестирование SOC-1. Каждый день теста был разделен 2-3 PR запланированными сессиями. Крысы получали SOC-1 в возрастающей последовательности доз (0, 1,25, 2,5, 5 и 10 мг/кг, IP), которые вводили за 15 минут перед тестовой сессией. В конечную тестовую сессию крысы получали инъекцию носителя.
Введение SOC-1 значительно снижало нажатия на активный рычаг при PR графике в дозах 5 мг (р=0,043) и 10 мг/кг (р=0,007) по сравнению с введением носителя. Значительное уменьшение пограничного значения инфузии и двигательной активности было очевидно после дозы 10 мг/кг (р=0,001 и р=0,005 соответственно) по сравнению с введением носителя. Нажатия на активный рычаг (р=0,236), инфузии (р=0,191) и двигательная активность (р=0,107) не были сильно различными между первой и последней сессией восстановления с носителем.
Тестирование SOC-1 при восстановлении с метамфетамином
На Фиг. 12 и Фиг. 13 показано влияние введения носителя, SOC-1 и SOC-1, объединенного с С25 или SR49059, на а) нажатия на активный рычаг (Фиг. 12) и б) двигательную активность (Фиг. 13) в ходе восстановления с амфетамином. В этих Фиг. # обозначает р<0,05 основного эффекта в сутках, & обозначает р<0,05 основного эффекта лечения, и * обозначает р<0,05 по сравнению с носителем + условия МЕТН.
После восстановления от хирургического вмешательства для имплантации катетера в правую яремную вену самцов крыс Sprague Dawley оставляли приобретать самостоятельное введение метамфетамина (0,1 мг/кг/инфузия) в ходе 2-часовых FR-1 запланированных сессий, осуществлявшихся 5 дней в неделю в течение 21 дня. После этого крыс подвергали ежедневным 2-часовым сессиям ослабления. Крысы соответствовали критериям ослабления (минимум 10 дней и менее чем 25 нажатий на активный рычаг за сессию в течение 2 последовательных дней) по прошествии 15 сессий. Когда критерии ослабления были удовлетворены крысы претерпевали тестирование восстановления. Каждая тестовая сессия восстановления была разделена тремя сутками ослабления. Перед каждой сессией восстановления крысы получали первую инъекцию (DMSO и носитель tween, С25 или SR49059) за 5 минут перед второй инъекцией (носитель солевой раствор или SOC-1), после чего они получали их последнюю инъекцию (носитель солевой раствор или метамфетамин) через 5 минут, и затем их немедленно помещали в помещение на 2 часа. График лечения был следующим: сначала крысы получали SOC-1 в возрастающей последовательности доз (0, 2,5, 5, 10 мг/кг, IP) с последующим метамфетаминовым примированием (1 мг/кг, IP). После этого вводили предварительное лечение антагонистом (С25 в дозе 10 мг/кг IP или SR49059 в дозе 1 мг/кг IP) перед дозой 10 мг/кг SOC-1 и метамфетаминовым примированием. В следующую сессию крысы получали дозу 10 мг/кг SOC-1 перед инъекцией носителя для того, чтобы убедиться в том, что SOC-1 сам по себе не изменял активность нажатия на рычаг. В сессию восстановления, следовавшую за тестированием дозы SOC-1 и конечной сессией восстановления, проводили дополнительные сессии носитель + метамфетамин для того, чтобы убедиться в том, что крысы продолжали восстанавливаться.
Крысы восстанавливались до их предшествующей активности нажатия на рычаг, как показано значительным увеличением нажатий на активный рычаг при восстановлении по сравнению с предшествующими сутками ослабления (р<0,005). Сравнение введения носителя с введением наркотических средств в сессии восстановления сессии демонстрировали, что введение SOC-1 в дозах 2,5 мг (р<0,005), 5 мг (р<0,005) и 10 мг/кг (р<0,005) значительно снижало нажатие на активный рычаг, полученное метамфетаминовым примированием. Введение антагониста окситоцинового рецептора (С25) или антагониста рецептора V1a (SR49059) не могло блокировать ослабляющий эффект введения SOC-1 на метамфетамин-примированное восстановление, как показано через значительное снижение нажатия на активный рычаг (оба р<0,005). Введение SOC-1 само по себе (SOC-1 + носитель) не меняло значительно активность нажатия на рычаг по сравнению с предшествующим днем ослабления (р=0,147). В ходе дополнительных сессий восстановления носителя крысы продолжали восстанавливаться до их предшествующей активности нажатия на активный рычаг (р<0,05).
Двигательная активность также была значительно выше при сессиях восстановления, чем при сессиях ослабления (р<0,005). На протяжении сессий восстановления двигательная активность была значительно более низкой, когда вводили дозы 2,5 мг (р=0,006), 5 мг (р<0,005) и 10 мг/кг (р<0,005) SOC-1 перед метамфетаминовым примированием. Сходный эффект был очевиден после введения антагонистов окситоцинового рецептора (р<0,005) и антагонистов рецептора V1a (р<0,005) перед введением SOC-1 и метамфетамина. Однократное введение SOC-1 не меняло значительно двигательную активность в ходе восстановления по сравнению с предыдущей сессией ослабления (р=0,472).
Пример 9 - Оценка острой токсичности тестового вещества SOC-1 после внутривенного введения однократной болюсной дозы крысам Sprague-Dawley в однонедельном исследовании поиска диапазона дозировки
Острую токсичность тестового вещества SOC-1 оценивали у крыс Sprague Dawley после внутривенного введения однократной болюсной дозы. Всего четыре группы с n=3 взрослых самок крыс обрабатывали дозами по 1, 3, 10 и 30 мг/кг SOC-1. Затем крыс наблюдали в течение 7 суток перед умерщвлением на сутки 8 без вскрытия.
Лечение тестовым веществом SOC-1 переносилось в этом исследовании при всех уровнях дозировки. Существовали дозозависимые результаты легкой пилоэрекции, сгорбленной позы и походки и закрытия век, которые были обнаружены после лечения на сутки изучения 1. Эти результаты обычно проходили в течение 4-24 часов и считаются связанными с лечением. Также существовал результат чрезмерной реакции вздрагивания и вокализации во время введения дозы, который считали связанным с лечением.
Острая переносимая доза SOC-1, введенного в виде болюсной внутривенной инъекции в этом исследовании, была определена как по меньшей мере 30 мг/кг.
Этот тест осуществляли в соответствии с принципами Организации экономического сотрудничества и развития (OECD) в отношении Надлежащих лабораторных практик (GLP) (редакция 1997). Исследования, проведенные согласно стандартам Надлежащих лабораторных практик OECD и Управления по контролю за продуктами питания и лекарственными средствами США (US FDA), принимаются сторонами, подписавшими соглашение OECD о Взаимном приеме данных, включая США и Японию.
Основной целью данного исследования являлось исследовать переносимость и острую токсичность тестового вещества SOC-1 после введения однократной болюсной дозы внутривенным путем взрослым крысам Sprague Dawley.
Это исследование осуществляли в соответствии с руководством, приведенным в Совете по национальному здоровью и медицинским исследованиям, Australian Code of Practice for the Care and Use of Animals for Scientific Purposes, 8-е издание, 2013 (1). Исследование было оценено и одобрено Комитетом по животной этике Университета Квинсленда.
Тестовое вещество и носитель/контрольное вещество
"Тестовое вещество" и "Носитель/Контрольное вещество" показаны в Таблице 6 и Таблице 7, соответственно.
Тестовый и контрольный препарат
Тестовое вещество SOC-1 растворяли в 0,9%-ном солевом растворе для введения дозы согласно Таблице 8. Препараты получали в чистых условиях в тяге с ламинарным потоком с использованием стерильных полипропиленовых пробирок, и с аккуратным завихрением/перемешиванием вихревым способом, чтобы убедиться в том, что соединение полностью растворено в носителе перед применением.
Препараты тестового вещества поддерживали при температуре окружающей среды каждый день применения (и применяли в тот же день). Образцы доз препаратов не собирали для этого исследования.
Резерв GLP
Неиспользованное тестовое вещество выдерживали в центре тестирования в подходящих условиях хранения.
Животные
Детали, относящиеся к животным, использованным в исследовании, показаны в Таблице 9.
Условия тестовой системы показаны в Таблице 10.
Способы
Дизайн этого исследования острой токсичности однократной дозы на крысах был взял из OECD Инструкции по тестированию химических веществ No. 420 Acute Oral Toxicity - Fixed Dose Procedure' 2001 (2) и Стандартной операционной процедуры исследовательского центра SP_T002 'Dose Range Finding Study in Rodents'. Процедуры исследования были осуществлены, как указано ниже и согласно связанным Стандартным операционным процедурам исследовательского центра.
Дизайн исследования изложен в Таблице 11.
Начало исследования разбивали на два дня между группами 2 и 3 для того, чтобы предусмотреть возможную корректировку каждого уровня доз на основе токсичностей предшествующей дозы.
Вкратце, по завершении периода акклиматизации исследование продолжали с введением лечения на Сутки изучения 1. Животных наблюдали на наличие знаков токсичности на протяжении прижизненного периода исследований, как показано ниже. Массы тела также собирали ежедневно. На сутки изучения 8 выживших животных отбраковывали без вскрытия.
Лечения
Лечения тестовым веществом вводили в виде болюсной внутривенной инъекции в объеме доз 2 мл/кг на Сутки изучения 1 с обездвиживанием у животных в сознании (за исключением Группы 4, где лечение вводили в объеме дозы 6 мл/кг у легко анестезированных животных после введения анестетика изофлуорана).
Наблюдения
Наблюдения заболеваемости и смертности регистрировали один раз в сутки в ходе периода акклиматизации и на сутки 8, и дважды в сутки от суток 1 до суток 8.
Клинические наблюдения проводили по меньшей мере один раз в ходе периода акклиматизации. Клинические наблюдения проводили по меньшей мере один раз в сутки от суток 1 вплоть до и включая сутки перед умерщвлением. В день лечения за животными непрерывно наблюдали в течение первых 30 мин после лечения, причем формальные наблюдения делали по прошествии 30 минут, 1 часа и 4 часов после лечения.
Клинические наблюдения включали исследование животных на изменения кожи и меха, глаз и слизистых мембран, дыхательной функции и функции кровообращения, походки и позы, поведения, треморов или конвульсий и любых других ненормальных проявлений.
Клинические наблюдения также включали ежесуточное исследование хвоста на любые реакции в месте инъекций (например, эритрему или эдему).
Массы тела
Массу тела регистрировали один раз в ходе периода акклиматизации в ежесуточно от времени лечения на сутки 1-сутки 8. Средние значения массы тела на сутки изучения 1-8 показаны как среднее по группе ± стандартное отклонение (SD) на Фиг. 14.
Вскрытие
На сутки 8 все животные подвергались финальному измерению массы тела и затем подвергались эвтаназии путем передозировки пентобарбитала (через внутрибрюшинное введение). Тушки утилизировали без вскрытия.
Сбор и оценка данных
Данные собирали с использованием или Provantis v.9.3.1.1, или регистрировали на подходящих формах TetraQ. Затем данные сводили в таблицы с использованием или Provantis v9.3.1.1, или GraphPad Prism 6, и/или Excel 2010.
Заболеваемость и смертность
В этом исследовании не происходило незапланированных смертей или обнаружений заболеваемости.
Клинические наблюдения
Наблюдали пилоэрекцию, сгорбленную позу и походку и закрытие век после дозы на сутки изучения 1 у крыс, которых обрабатывали 10 и 30 мг/кг тестового вещества SOC-1. Эти наблюдения классифицировали как легкой тяжести, за исключением обнаружения среднего закрытия век у одной крысы. Наблюдения обычно регистрировали в течение 30 минут после лечения, и они проходили в течение 4-24 часов после дозировки, за исключением одного наблюдения легкой пилоэрекции, которое проходило на сутки 3. Эти наблюдения считаются связанными с лечением.
Также было сделано наблюдение, что крысы в группе 3 демонстрировали чрезмерную реакцию вздрагивания и вокализации во время введения дозы 10 мг/кг. Наблюдение считается связанным с лечением. Затем крысам с 30 мг/кг вводили анестетик изофлуоран перед дозировкой для облегчения дозировки и минимизации боли/страдания животных.
Не было сделано наблюдений о реакциях в местах инъекций.
Клинические наблюдения сведены в Таблице 12.
Не существовало влияния лечения тестовым веществом SOC-1 на массу тела. Массы тела всех животных увеличивались в ходе исследования.
Значения массы тела сведены на Фиг. 14 и в Таблице 13.
Выводы
В этом исследовании лечение тестовым веществом SOC-1 переносилось в дозах 1, 3, 10 и 30 мг/кг. Существовали дозозависимые наблюдения легкой пилоэрекции, сгорбленной позы и походки и закрытия век, которые были зарегистрированы после лечения на сутки 1. Эти наблюдения обычно проходили в течение 4-24 часов и считаются связанными с лечением. Также существовало наблюдение реакции чрезмерного вздрагивания и вокализации у крыс, которых обрабатывали 10 мг/кг во время введения дозы, что считалось связанным с лечением и соответствует острому местному венозному раздражению.
Острая переносимая доза SOC-1, введенного в виде болюсной внутривенной инъекции в этом исследовании, определена как по меньшей мере 30 мг/кг.
Пример 10 - 24-часовое исследование фармакокинетики у крыс Sprague Dawley с тестовым веществом SOC-1, введенным внутривенным путем
Однократную внутривенную болюсную дозу тестового вещества SOC-1 20 мг/кг (соответствующую ~17,1 мг/кг, выраженную как свободное основание с поправкой на чистоту), изготовленную в виде препарата в растворе Хартманна, вводили трем взрослым крысам Sprague Dawley. От каждой крысы отбирали в общей сложности 10 образцов образцов крови в моменты времени, варьирующиеся от времени перед дозой до 24 часов после дозы. Затем образцы крови обрабатывали до плазмы и анализировали на концентрацию SOC-1 в плазме с использованием способа скрининга LC-MS/MS (диапазон результатов = 50-5000 нг/мл). Фармакокинетические параметры оценивали из данных зависимости концентрации в плазме от времени с использованием некомпартментных методов с использованием программного обеспечения Phoenix 64 WinNonlin®.
Это исследование осуществляли для оценки фармакокинетики SOC-1 после внутривенного (i.v.) введения самцам крыс Sprague Dawley в течение 24-часового периода. Соединение вводили в виде болюсной i.v. дозы, изготовленное в виде препарата с использованием раствора Хартманна (солевого), группе n=3 крыс в количестве 20 мг/кг (17,1 мг/кг, выражено в виде свободного основания, скорректировано на чистоту). У каждой крысы отбирали в общей сложности десять образцов крови в моменты времени, варьирующиеся от времени перед дозой до 24 часов после дозы. Затем эти образцы обрабатывали до плазмы и анализировали на концентрацию SOC-1 в плазме с использованием основанного на LC-MS/MS способа биоаналитического скрининга.
Целью данного исследования являлось исследовать фармакокинетику тестового вещества SOC-1 после введения однократкой болюсной дозы в количестве 20 мг/кг внутривенным путем взрослым крысам Sprague Dawley.
Это исследование осуществляли в соответствии с руководством, изложенным в National Health and Medical Research Council, Australian Code of Practice for the Care and Use of Animals for Scientific Purposes, 8-е издание, 2013 (1). Исследование было оценено и одобрено Комитетом по животной этике Университета Квинсленда.
Тестовое вещество и Носитель/Контрольное вещество
"Тестовое вещество", "Биоаналитическое референсное вещество" и "Носитель/Контрольное вещество" показаны в Таблице 14, Таблице 15 и Таблице 16, соответственно.
Тестовый и контрольный препарат
Тестовое вещество SOC-1 растворяли в растворе Хартманна в конечной концентрации 5 мг/мл для введения дозы. Препарат получали в чистых условиях в тяге с ламинарным потоком с использованием стерильных полипропиленовых пробирок и при аккуратном завихрении/встряхивании, чтобы убедиться в том, что соединение полностью растворялось в носителе перед применением.
Препарат тестового вещества поддерживали при температуре окружающей среды и применяли в тот же день. В этом исследовании не собирали образцы для анализа препарата для доз.
Животные
Детали, относящиеся к животным, использованным в исследовании, показаны в Таблице 17.
Крысы Sprague Dawley рассматриваются как подходящий и часто используемый вид для фармакокинетических исследований.
Условия тестовой среды показаны в Таблице 18.
Способы
Фармакокинетические исследования осуществляли согласно плану исследований UOS-004 и связанными Стандартными операционными процедурами (SOPs) исследовательского центра, как указано ниже. План клинического исследования показан в Таблице 19.
а) ~17,1 мг/кг, выражено в виде свободного основания и скорректировано на чистоту.
Перед лечениями крыс подвергали хирургическому вмешательству для катетеризации яремной вены (для введения доз, IV) и бедренной артерии (для забора образцов крови, IA) с экстернализацией катетеров согласно SOPs исследовательского центра. После восстановления от хирургического вмешательства крыс переносили в систему Culex введения доз и забора образцов крови (где обе линии поддерживали согласно SOPs исследовательского центра).
Внутривенные лечения вводили через яремнай катетер с объемом дозировки 4,0 мл/кг в сутки после хирургического вмешательства. Обработки заключались в последующих ~200 мкл носителя для того, чтобы убедиться в том, что полная доза была доставлена животным.
Образцы крови (~250 мкл) собирали в литий-гепаринизированные трубки из катетера IA в следующие моменты времени: перед дозой, через 2, 5, 10, 30, 60 минут, 2, 4, 8 и 24 часов после дозы.
Образцы крови хранили на льду сразу после отбора для минимизации разложения и центрифугировали так быстро, как возможно при приблизительно 4000 × центробежное ускорение в течение 10 мин. Образцы, отобранные перед дозировкой, центрифугировали отдельно перед дозировкой. Затем плазму переносили в полипропиленовые пробирки и хранили в замороженном виде при -80°С.
После того, как отбирали последний образец, животных умерщвляли с помощью Lethabarb™, введенного через катетер IV в количестве 325 мг/кг.
Затем исследуемые образцы переносили на сухой лед для измерения концентраций SOC-1.
Значения массы тела собирали непосредственно перед хирургическим вмешательством. Проверки заболеваемости и смертности завершали один раз в сутки в ходе периода акклиматизации и по меньшей мере дважды в сутки в ходе исследования.
Анализ концентрации SOC-1 в плазме
Концентрации SOC-1 в плазме определяли с использованием способа скрининга LC-MS/MS с последующей жидкость-жидкостной экстракцией. Вкратце, аликвоты по 50 мкл тестовых образцов и калибровочных стандартов смешивали с 1 мл смеси гексан : дихлорметан (1:1) в течение 5 минут, затем добавляли 10 мкл внутреннего стандарта, затем центрифугировали и органическую фазу декантировали и сушили в атмосфере азота. Затем образцы восстанавливали с помощью 0,5 мл 0,1%-ной муравьиной кислоты в 30%-ном метаноле в деионизованной воде и 0,2 мл переносили в 96-луночный планшет. Затем 5 мкл аликвоту этого образца анализировали с использованием ABSciex API 4000 MS/MS, сопряженного с Shimadzu Prominence HPLC. Градиенты HPLC включали 0,1%-ную муравьиную кислоту в деионизованной воде (Подвижная фаза А) и 0,1%-ную муравьиную кислоту в метаноле (Подвижная фаза В). Параметры настройки LC-MS/MS приведены в Приложении 2. Образцы анализировали с калиброванными образцами (от 50 до нг/мл) и данные концентрации определяли путем обратного расчета из стандартной кривой.
Данные концентрации в плазме получали с использованием программного обеспечения AnalystTM v1.6.1 (АВ Sciex). Затем данные сводили в таблицы с использованием или GraphPad Prism 6, и/или Excel 2010.
Значения группового среднего ± стандартная ошибка для концентраций в плазме относительно значений времени определяли с использованием программного обеспечения Phoenix 64 WinNonlin. Следующие фармакокинетические параметры также вычисляли с использованием некомпартментных методов, с использованием программного обеспечения Phoenix 64 WinNonlin:
• Rsq - Коэффициент связанности для конечной элиминации (R2).
• Лямбда - Константа конечной элиминации у крыс, связанная с конечной (линейно-логирифмической) частью кривой (1/ч).
• T1/2 - Период полувыведения в фазе элиминации (ч)
• С0 - Исходная концентрация во время 0 мин (нг/мл), определенная путем обратной экстраполяции из первых двух измеренных значений концентрации.
• Tmax - Время до максимальной концентрации в плазме после внесосудистого введения.
• Cmax - Максимальная концентрация в плазме после внесосудистого введения
• AUClast - Площадь под кривой от времени дозировки (Dosing_time, время 0 мин) до последней измеримой концентрации (нг.ч/мл).
• AUCinf - AUC от Времени дозирования, экстраполированная до бесконечности, на основе последней наблюдаемой концентрации (obs). (нг.ч/мл).
• AUC %Extrap - Процент AUCinf вследствие экстраполяции от времени последней измеряемой концентрации до бесконечности.
• Vz - Объем распределения (л/кг).
• CI - Общий клиренс (л/ч/кг).
Внимание: Параметры фазы конечной элиминации не были изложены, если или R2<0,85, и/или AUC %Extrapolation >20%.
Массы тела и клинические проявления
Лечения SOC-1 переносились, и не было обнаружено заболеваемости или смертности. Значения индивидуальных масс тела перед лечением показаны в Таблице 20.
a) Значения масс тела определяли во время хирургии в сутки перед лечением.
б) 17,1 мг/кг, выражено в виде свободного основания, скорректировано на чистоту.
Данные концентрации в плазме относительно времени
Результаты индивидуальных и средних концентраций в плазме SOC-1 относительно времени результаты показаны в Таблице 21 и Фиг. 15.
a) BLOQ=ниже предела количественного определения 50 нг/мл.
Данные концентрации SOC-1 в плазме относительно времени SOC-1, определенные после введения однократной внутривенной 20 мг/кг (17,1 мг/кг, выражено в виде свободного основания, скорректировано на чистоту) болюсной дозы самцам крыс Sprague Dawley. Фармакокинетические параметры
Фармакокинетические параметры сведены в Таблице 22.
Данные концентрации SOC-1 в плазме относительно времени SOC-1, определенные после введения однократной внутривенной 20 мг/кг (17,1 мг/кг, выраженной в виде свободного основания, скорректировано на чистоту) болюсной дозы самцам крыс Sprague Dawley.
Вкратце, после внутривенного введения 20 мг/кг SOC-1 (17,1 мг/кг, выражено в виде свободного основания, скорректировано на чистоту) средние значения (±среднеквадратичное отклонение от среднего (SEM)) для С0 и AUCinf составляли 18200 (±2860) нг/мл и 17000 (±840) нг.ч/мл, соответственно. Среднее значение (±SEM) для Т1/2 было оценено как 0,550 (±0,049) ч, и средние значения (±SEM) для Vz и Cl составляли 0,799 (±0,051) л/кг и 1,01 (±0,051) л/ч/кг, соответственно.
Визуальная инспекция данных указывает на то, что данные зависимости концентрации от времени снижались моноэкспоненциально. Однако, возможно, что наблюдаемое снижение концентрации в плазме может отображать только перераспределение SOC-1, а не элиминацию, так как конечная фаза элиминации SOC-1 могла быть не детектирована. Конечная фаза элиминации может быть более точно определена с использованием теста с улучшенной чувствительностью, который обеспечивает количественное определение концентраций в образцах за пределами промежутка времени 4 часов с момента дозирования.
Вывод
В этом исследовании была охарактеризована фармакокинетика SOC-1 после введения однократной 20 мг/кг (17,1 мг/кг, выражено в виде свободного основания, скорректировано на чистоту) болюсной дозы внутривенным путем взрослым крысам Sprague Dawley.
Пример 11 - Оценка острой токсичности тестового вещества SOC-1 после внутривенного введение однократной болюсной дозы 50 мг/кг крысам Sprague-Dawley в однонедельном исследовании поиска диапазона дозировок
Острую токсичность тестового вещества SOC-1 оценивали на крысах Sprague Dawley после внутривенного введения однократной болюсной дозы 50 мг/кг. Всего обрабатывали n=3 взрослых самки крыс и затем наблюдали в течение 7 суток перед умерщвлением на сутки изучения 8 без вскрытия.
В этом исследовании лечение с помощью тестового вещества SOC-1 переносилось при дозе 50 мг/кг. Были сделаны наблюдения легкой пилоэрекции и сниженной активности после лечения на сутки изучения 1. Эти наблюдения проходили в течение 4 часов и считаются связанными с лечением.
В этом исследовании острая переносимая доза SOC-1, введенного в виде болюсной внутривенной инъекции, определена как по меньшей мере 50 мг/кг.
Неклиническое исследование токсичности, описанное в данной заявке, включало внутривенное введение однократной болюсной дозы SOC-1 взрослым крысам Sprague Dawley с последующим периодом наблюдения в течение одной недели. Предыдущее исследование, проведенное в исследовательском центре, показало, что обработка вплоть до 30 мг/кг переносится красами (1). Исследование поиска диапазона дозировок, описанное в данной заявке, включало введение дозы 50 мг/кг тестового вещества. Эта доза считается максимальной допустимой дозой для введения внутривенным путем с существующим препаратом 5 мг/мл.
Целью этого исследования было определить переносимость острой токсичности тестового вещества SOC-1 после введения однократной болюсной дозы 50 мг/кг внутривенным путем взрослым крысам Sprague Dawley.
Исследование проводили в соответствии с руководством, изложенным в National Health and Medical Research Council, Australian Code of Practice for the Care and Use of Animals for Scientific Purposes, 8-е издание, 2013 (1). Исследование было оценено и одобрено Комитетом по животной этике Университета Квинсленда.
Тестовое вещество и Носитель/Контрольное вещество
"Тестовое вещество" и "Носитель/Контрольное вещество" показаны в Таблице 23 и Таблице 24, соответственно.
Тестовый и контрольный препарат
Тестовое вещество SOC-1 растворяли в растворе Хартманна в конечной концентрации 5 мг/мл для введения дозы. Препарат получали в чистых условиях в тяге с ламинарным потоком с использованием стерильных полиэтиленовых пробирок с аккуратным завихрением/встряхиванием для того, чтобы убедиться, что соединение было полностью растворено в носителе перед применением.
Препарат тестового вещества сохраняли при температуре окружающей среды и использовали в тот же день. В этом исследовании не собирали образцы для анализа препарата для доз.
Животные
Детали, относящиеся к использованным животным, использованным в исследовании, показаны в Таблице 25.
Крысы Sprague Dawley рассматриваются как подходящий и часто используемый вид для фармакокинетических исследований. Исследование включало применение самок крыс только для минимизации использования животных.
Условия тестовой среды показаны в Таблице 26.
Способы
Дизайн этого исследования острой токсичности однократной дозы у крыс адаптировали из методики OECD для тестирования химикатов №420 Acute Oral Toxicity - Fixed Dose Procedure' 2001 (3) и стандартной операционной процедуры исследовательского центра SP_T002 'Dose Range Finding Study in Rodents'. Исследовательские процедуры осуществляли, как указано ниже и согласно стандартным операционным процедурам исследовательского центра.
Дизайн исследования сведен в Таблицу 27.
Вкратце, по завершении периода акклиматизации исследование начинали с введения лечения в сутки исследования 1. Животных осматривали на наличие признаков токсичности на протяжении прижизненного периода исследования, как указано ниже. Массы тела также собирали ежедневно. На сутки изучения 8 выживших животных отбраковывали без вскрытия.
Лечение
Лечения 5 мг/мл тестового вещества вводили в виде болюсной внутривенной инъекции в объеме дозы 10 мл/кг на сутки изучения 1 с фиксацией животным в сознании.
Наблюдения
Наблюдения заболеваемости и смертности регистрировали ежесуточно в ходе периода акклиматизации и на сутки 8, и дважды в сутки от суток 1 до суток 7 включительно.
Клинические наблюдения осуществляли по меньшей мере один раз в ходе периода акклиматизации. Клинические наблюдения осуществляли по меньшей мере один раз в сутки от суток 1 вплоть до и включая сутки перед умерщвлением. В сутки лечения животных непрерывно наблюдали в течение первых 30 минут после лечения, и формальные наблюдения делали по прошествии 30 минут, 1 часа и 4 часов после лечения.
Клинические наблюдения включали осмотр животных на изменения кожи и меха, глаз и слизистых мембран, дыхательной функции и функции кровообращения, походки и позы, поведения, треморов или конвульсий и любых других ненормальных наблюдений.
Клинические наблюдения также включали ежедневный осмотр хвоста на предмет местной реакции на инъекцию (например, эритему или отек).
Массы тела
Массу тела регистрировали один раз в ходе периода акклиматизации и ежедневно от времени лечения на сутки 1-сутки 8.
Вскрытие
На сутки 8 всех животных подвергали конечному измерению массы тела и затем подвергали эвтаназии путем введения передозировки пентобарбитала (путем внутрибрюшинного введения). Тушки утилизировали без вскрытия.
Сбор данных и оценка
Данные собирали вручную и сводили в таблицы с использованием или GraphPad Prism 6, и/или Excel 2010.
Заболеваемость и смертность
В этом исследовании не было незапланированных смертей или наблюдений заболеваемости.
Клинические наблюдения
Были наблюдения легкой пилоэрекции и пониженной активности после дозы на сутки изучения 1 у крыс, которых обрабатывали 50 мг/кг тестового вещества SOC-1. Эти наблюдения обычно регистрировали в течение 30 минут после лечения, и они проходили в течение 4 часов после дозы. Эти наблюдения считаются связанными с лечением. Также было сделано наблюдение сгорбленной позы или походки для одного животного на сутки изучения 5, которое считалось лишь случайным и не связанным с лечением. Не было наблюдений реакций в местах инъекций, и клинические наблюдения показаны в Таблице 28.
Массы тела для всех животных увеличивались или были стабильными в ходе исследования. Не было сделано наблюдений о массе тела, которые считались связанными с лечением.
Значения массы тела сведены в Фиг. 16 и Таблице 29, и индивидуальные значения массы тела показаны в Таблице 30.
Значения массы тела показаны в граммах.
Выводы
В этом исследовании лечение тестовым веществом SOC-1 переносилось в дозе 50 мг/кг. Были сделаны наблюдения легкой милоэрекции и сниженного уровня активности после лечения на сутки изучения 1. Эти наблюдения проходили в течение 4 часов и считаются связанными с лечением.
Следует отметить, что в предыдущем исследовании, проведенном на крысах Sprague Dawley, внутривенное введение 10 мг/кг SOC-1, изготовленного в виде препарата в нормальном солевом растворе, было связано с необычной вокализацией и реакциями вздрагивания во время дозировки (1). В данном исследовании введение 50 мг/кг SOC-1, изготовленного в растворе Хартманна, не было связано со сходными реакциями.
В этом исследовании острая переносимая доза SOC-1, введенного в виде болюсной внутривенной инъекции была определена как 50 мг/кг.
Пример 12 - Оценка потребления алкоголя бабуинами, которым вводили SOC-1
Животные
Бабуины рассматриваются как идеальный субъект для этих исследований, так как в области техники есть достаточно данных о влиянии алкоголя на бабуинов, и ответы на манипуляции кормления и операционные условия также хорошо изучены. Авторы изобретения выбрали в качестве модели алкогольной зависимости, так как бабуины употребляют большое количество алкоголя и могут быть натренированы работать за алкоголь и привлекательные пищевые награды. Кроме того, нечеловекообразные приматы имеют большую гомологию с человеческим мозгом, чем грызуны.
Бабуинов получали из World Wide Primates во Флориде. Четыре бабуина, использованных в исследовании, являлись частью большей когорты, которая была использована в другом исследовании, но не была использована в других типах исследования в течение более года. Четыре животных, включенных в данное исследование, были выбраны из исходной группы из 8 животных. Эти 4 желали пить алкоголь в больших количествах и были выбраны для протокола исследования. Предыдущие исследования, которые проводили с этими бабуинами, включали ответ на пищу и наркотические средства (например, метамфетамин). Предыдущее исследование не включало каких-либо хирургических процедур или указания на зависимость от злоупотребляемых наркотических средств.
У четырех бабуинов была история среднего употребления алкоголя. Эти животные были вовлечены в предыдущий протокол, где им давали ограниченный доступ к алкоголю. В этих условиях они охотно выпивали от 0,9 до 1,5 г/кг в течение двух часов в сутки с определенной периодичностью.
Бабуинов размещали в инновационных укрытиях, которые состояли из стандартной клетки с прессованной подложкой (squeeze-back housing cage) с большой твердой скамьей, проходящей с передней в заднюю часть, присоединенной к сконструированному по заказу расширению клетки, которое имело большой насест, расположенный в передней части клетки с достаточным пространством для того, чтобы бабуины сидели или под насестом, или сверху насеста. Сидение на насесте было предпочтительным положением для большинства животных. Это расположение позволяло животным ходить между клетками, использовать насест, использовать скамью, поддерживать себя путем помещения их ног на рейки на половине высоты каждой клетки или сидеть на полу. Это инновационное укрытие позволяло обеспечивать стабильную среду размещения, в которой можно поддерживать нечеловекообразных приматов в течение многих лет, как это требуется долгосрочными бихевиористскими исследованиями и визуализирующими исследованиями.
Самостоятельное введение алкоголя
Бабуины уже были натренированы самостоятельно вводить 4-8%-ный алкоголь (масс/об.) с использованием процедуры с подслащенным алкоголем. Бабуины были приучены нажимать на рычаг для наград и были ранее приучены отвечать на подслащенный напиток kool-aid. Когда отсвет на kool-aid (смешанный до 1/4 силы от инструкций на упаковке) был восстановлен, к kool-aid добавляли этанол (4-8% масс./об.). Доставка жидкости сопровождалась звуковым сигналом и загоранием стимулирующего света над желобом для жидкости.
Фиксированный график использовали для самостоятельного введения алкоголя, где алкоголь был доступен в течение 2-часовой сессии каждые сутки исследования. Первую сессию начинали в 9:00, а вторую сессию начинали в 13:00. Бабуины получали их суточный рацион питания в полдень каждый день. Каждая сессия состояла из двадцать 6-минутных проб, где доступность алкоголя была обозначена световым сигналом над алкогольным рычагом. Бабуины получали аликвоту алкоголя (4% масс./об., 5 мл) за нажатие на рычаг 10 раз (FR10) и могли заработать 5 аликвот в ходе каждой пробы. Проба заканчивалась после того, как бабуины зарабатывали 5 вознаграждений, и если не было никакого ответа в течение 10 минут. Пробы были разделены 1-минутным интервалом, в ходе которого алкоголь не был доступен. Таким образом, 100 аликвот или 500 мл напитков были доступны утром и после полудня с понедельника по пятницу.
Введение SOC-1
Введенный дозы 1-8 мг/кг SOC-1 давали бабуинам перорально в ходе исследования. Лекарственное средство в порошковой форме доставляли бабуинам путем помещения правильной дозировки вместе с некоторым количеством сахара в центр фиг, и скармливания этих фиг бабуинам за 60 минут перед ежедневной сессией. Лекарственное средство или плацебо давали однократно не более чем дважды в неделю.
Результаты исследования показаны на Фиг. 17, Фиг. 18 и Фиг. 19. На Фиг. 17 показано общее число доставок жидкости как функция дозы SOC-1. На Фиг. 18 и Фиг. 19 показаны результаты для утреннего и послеполуденного приема, выраженные как прием алкоголя, соответственно.
Пример 13 - Оценка расстройств аутического спектра в модели мышей BALB/C
Мыши BALB/C обладают аутически-подобным поведением (включая сниженный интерес к социальным стимулам) по сравнению со стандартными мышами C57BL/6. В тесте на социальные предпочтения мыши BALB/C не демонстрируют предпочтения взаимодействию с социальным стимулом (новая мышь) по сравнению с объектным стимулом (новый объект), в то время как сыши C57BL/6 демонстрируют стойкие предпочтения. SOC-1 (5 мг/кг IP) значительно увеличивал количество времени, которое мыши BALB/C провели в исследовании социального стимула, до того предела, что они больше не отличались от стандартной линии мышей C57BL/6. SOC-1 (5 мг/кг IP) также значительно увеличивал количество времени, которое мыши BALB/C проводили в исследовании объектного стимула, что предполагает, что кроме увеличения интереса к социальному стимулу, он также может вызывать более общее увеличение исследовательского поведения. Результаты исследования показаны на Фиг. 20.
Специалистам в данной области должно быть понятно, что могут быть сделаны различные вариации и/или модификации вышеописанных воплощений, не отходя от широкого общего объема настоящего раскрытия. Таким образом, настоящие воплощения следует считать во всех аспектах иллюстративными, и не ограничивающими.
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ГЛУБОКОЙ ДЕПРЕССИИ У ЧЕЛОВЕКА | 2007 |
|
RU2445973C2 |
| СОЕДИНЕНИЯ, МОДЕЛИРУЮЩИЕ ВНУТРИКЛЕТОЧНЫЙ КАЛЬЦИЙ | 2008 |
|
RU2465272C2 |
| СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ ПОСТТРАВМАТИЧЕСКОГО СТРЕССОВОГО РАССТРОЙСТВА | 2011 |
|
RU2775783C2 |
| Способы лечения биполярного расстройства | 2011 |
|
RU2653408C2 |
| Применение производных N,N"-замещенных 3,7-диазабицикло[3.3.1]нонанов для терапии депрессии | 2019 |
|
RU2726313C1 |
| Соединения и способы для ингибирования NHE-опосредованного антипорта в лечении расстройств, ассоциированных с задержкой жидкости или солевой перегрузкой, и заболеваний желудочно-кишечного тракта | 2013 |
|
RU2684097C2 |
| НЕЙРОАКТИВНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ | 2015 |
|
RU2764702C2 |
| Пролекарства антагониста NMDA | 2014 |
|
RU2695372C2 |
| (+)-АЛЬФА-ДИГИДРОТЕТРАБЕНАЗИН ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ПРИ ЛЕЧЕНИИ ДВИГАТЕЛЬНОГО РАССТРОЙСТВА | 2018 |
|
RU2771164C2 |
| ИНГИБИТОРЫ DPP-IV ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ НЕЙРОДЕГЕНЕРАЦИИ И КОГНИТИВНЫХ РАССТРОЙСТВ | 2005 |
|
RU2394570C2 |
Изобретение относится к фармацевтической композиции для лечения или предупреждения социальной дисфункции у субъекта; лечения или предупреждения псисихического расстройства у субъекта; лечения субъекта, который страдает или находится в стадии выздоровления от расстройства, связанного с злоупотреблением психоактивным веществом и/или стремится к поддержанию продолжающегося воздержания от указанного вещества. Предлагаемая композиция содержит фармацевтически приемлемый носитель и соединение, имеющее приведенную ниже формулу, или его фармацевтически приемлемую соль. В данной заявке раскрыты способы лечения вышеуказанных неврологических и психических расстройств с использованием вышеуказанной фармацевтической композиции или указазанного выше соединения, а также применение этого соединения. 5 н. и 15 з.п. ф-лы, 20 ил., 30 табл., 12 пр.
1. Фармацевтическая композиция для лечения или предупреждения социальной дисфункции у субъекта; лечения или предупреждения психического расстройства у субъекта; лечения субъекта, который страдает или находится в стадии выздоровления от расстройства, связанного с злоупотреблением психоактивным веществом, и/или стремится к поддержанию продолжающегося воздержания от указанного вещества, содержащая:
фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или эксципиент;
и
соединение формулы
или его фармацевтически приемлемую соль.
2. Фармацевтическая композиция по п. 1, приготовленная таким образом, что эта композиция представляет собой одну из: перорально вводимой композиции, ректально вводимой композиции, назально вводимой композиции, местно вводимой композиции, парентерально вводимой композиции, композиции, вводимой посредством ингаляции, или композиции, вводимой посредством инсуффляции.
3. Фармацевтическая композиция по п. 1 или 2, где указанное соединение присутствует в свободной форме.
4. Фармацевтическая композиция по п. 1 или 2, содержащая фармацевтически приемлемую соль указанного соединения.
5. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1, 2 и 4, где фармацевтически приемлемая соль выбрана из любой из: хлороводородной, серной, фосфорной, азотной, угольной, борной, сульфаминовой и бромоводородной кислот, уксусной, пропионовой, масляной, винной, малеиновой, гидроксималеиновой, фумаровой, изэтионовой, яблочной, лимонной, молочной, муциновой, глюконовой, бензойной, янтарной, щавелевой, фенилуксусной, метансульфоновой, толуолсульфоновой, бензолсульфоновой, салициловой, сульфаниловой, аспарагиновой, глутаминовой, эдетовой, стеариновой, пальмитиновой, олеиновой, лауриновой, пантотеновой, дубильной, аскорбиновой и валериановой кислот; или солей металлов, включая соли металлов натрия, калия, лития, кальция, магния и цинка; или солей аммония, алкиламмония; или солей аминокислот.
6. Фармацевтическая композиция по п. 4 или 5, где фармацевтически приемлемая соль представляет собой хлороводородную соль.
7. Способ лечения или предупреждения социальной дисфункции у субъекта; лечения или предупреждения психического расстройства у субъекта; лечения субъекта, который страдает или находится в стадии выздоровления от расстройства, связанного с злоупотреблением психоактивным веществом, и/или стремится к поддержанию продолжающегося воздержания от указанного вещества, включающий стадию введения субъекту, нуждающемуся в этом, фармацевтической композиции по любому из пп. 1-6.
8. Способ лечения или предупреждения социальной дисфункции у субъекта; лечения или предупреждения психического расстройства у субъекта; лечения субъекта, который страдает или находится в стадии выздоровления от расстройства, связанного с злоупотреблением психоактивным веществом, и/или стремится к поддержанию продолжающегося воздержания от указанного вещества, включающий стадию введения субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения следующей формулы:
или его фармацевтически приемлемой соли.
9. Способ по п. 7 или 8, где соединение или его фармацевтически приемлемую соль вводят перорально, ректально, назально, местно, парентерально, путем ингаляции или инсуффляции.
10. Способ по любому из пп. 7-9, включающий введение указанного соединения в форме свободного основания.
11. Способ по любому из пп. 7-9, включающий введение фармацевтически приемлемой соли указанного соединения.
12. Способ по п. 11, где фармацевтически приемлемая соль выбрана из любой из: хлороводородной, серной, фосфорной, азотной, угольной, борной, сульфаминовой и бромоводородной кислот, уксусной, пропионовой, масляной, винной, малеиновой, гидроксималеиновой, фумаровой, изэтионовой, яблочной, лимонной, молочной, муциновой, глюконовой, бензойной, янтарной, щавелевой, фенилуксусной, метансульфоновой, толуолсульфоновой, бензолсульфоновой, салициловой, сульфаниловой, аспарагиновой, глутаминовой, эдетовой, стеариновой, пальмитиновой, олеиновой, лауриновой, пантотеновой, дубильной, аскорбиновой и валериановой кислот; или солей металлов, включая соли металлов натрия, калия, лития, кальция, магния и цинка; или солей аммония, алкиламмония; или солей аминокислот.
13. Способ по п. 11 или 12, где фармацевтически приемлемая соль представляет собой хлороводородную соль.
14. Применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли для лечения или предупреждения социальной дисфункции у субъекта; лечения или предупреждения психического расстройства у субъекта; лечения субъекта, который страдает или находится в стадии выздоровления от расстройства, связанного с злоупотреблением психоактивным веществом, и/или стремится к поддержанию продолжающегося воздержания от указанного вещества, где указанное соединение имеет следующую формулу:
15. Применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли в изготовлении лекарственного средства для лечения или предупреждения социальной дисфункции у субъекта; лечения или предупреждения психического расстройства у субъекта; лечения субъекта, который страдает или находится в стадии выздоровления от расстройства, связанного с злоупотреблением психоактивным веществом, и/или стремится к поддержанию продолжающегося воздержания от указанного вещества, где указанное соединение имеет следующую формулу:
16. Применение по п. 14 или 15, где указанное соединение присутствует в форме свободного основания.
17. Применение по п. 14 или 15, где указанное соединение присутствует в форме фармацевтически приемлемой соли.
18. Применение по п. 17, где фармацевтически приемлемая соль выбрана из любой из: хлороводородной, серной, фосфорной, азотной, угольной, борной, сульфаминовой и бромоводородной кислот, уксусной, пропионовой, масляной, винной, малеиновой, гидроксималеиновой, фумаровой, изэтионовой, яблочной, лимонной, молочной, муциновой, глюконовой, бензойной, янтарной, щавелевой, фенилуксусной, метансульфоновой, толуолсульфоновой, бензолсульфоновой, салициловой, сульфаниловой, аспарагиновой, глутаминовой, эдетовой, стеариновой, пальмитиновой, олеиновой, лауриновой, пантотеновой, дубильной, аскорбиновой и валериановой кислот; или солей металлов, включая соли металлов натрия, калия, лития, кальция, магния и цинка; или солей аммония, алкиламмония; или солей аминокислот.
19. Применение по п. 18, где фармацевтически приемлемая соль представляет собой хлороводородную соль.
20. Применение по п. 14 или 15, где указанное соединение или его фармацевтически приемлемая соль представлены в форме фармацевтической композиции по любому из пп. 1-6.
| REEKIE, T.A | |||
| et al., "Synthesis of biologically active seven-membered-ring heterocycles", Synthesis, 2013, vol | |||
| Железобетонный фасонный камень для кладки стен | 1920 |
|
SU45A1 |
| Прибор для равномерного смешения зерна и одновременного отбирания нескольких одинаковых по объему проб | 1921 |
|
SU23A1 |
| REEKIE, T.A | |||
| et al., "Pyrazolo[1,4]diazepines as non-peptidic probes of the oxytocin and vasopressin receptors", Tetrahedron Letters, 2014, vol | |||
| Устройство двукратного усилителя с катодными лампами | 1920 |
|
SU55A1 |
| Способ сопряжения брусьев в срубах | 1921 |
|
SU33A1 |
| Приспособление для суммирования отрезков прямых линий | 1923 |
|
SU2010A1 |
| RU | |||
