ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ, СОДЕРЖАЩАЯ ПОЛИМЕРНОЕ ПРОИЗВОДНОЕ КАМПТОТЕЦИНА Российский патент 2020 года по МПК A61K9/08 A61K9/19 A61K31/4745 A61K31/787 A61K47/26 A61K47/50 A61K47/60 A61K47/64 A61P35/00 

Область техники

[0001] Настоящее изобретение относится к препарату в виде фармацевтической композиции полимеризованного производного камптотецина, полученного путем связывания производного камптотецина с полимерным носителем, где препарат в виде фармацевтической композиции имеет повышенную стабильность. Полимеризованное производное камптотецина обладает свойством, благодаря которому совокупность молекул производного приобретает способность образовывать ассоциаты в водном растворе и тем самым образует наночастицы. Настоящее изобретение представляет собой технологию, относящуюся к фармацевтическому препарату, содержащему полимеризованное производное камптотецина, имеющее указанные свойства образования наночастиц, где фармацевтический препарат имеет превосходную стабильность при хранении и сохраняет свойства образования наночастиц в течение продолжительного времени.

Уровень техники

[0002] Для обеспечения эффективности фармацевтического продукта необходимо, чтобы фармакологически активное соединение оказывало свое действие в соответствующем участке организма в соответствующей концентрации в течение соответствующего периода времени. В частности, цитотоксический противоопухолевый агент должен быть таким, чтобы при системном введении внутривенным способом и т.д. цитотоксический противоопухолевый агент распределялся по всему организму и оказывал действие в отношении подавления пролиферации клеток. В указанном случае сообщается, что так как клетки подвергаются фармакологически активному действию, для которого отсутствуют различия между раковыми клетками и нормальными клетками, действие на нормальные клетки приводит к серьезным побочным эффектам. Таким образом, для снижения побочных эффектов важна технология транспортировки противоопухолевого агента. Таким образом, существует потребность в способе контролирования фармакокинетики для селективного транспорта противоопухолевого агента в опухолевую ткань и обеспечения действия противоопухолевого агента в соответствующей концентрации лекарственного средства в течение соответствующего периода повышенной восприимчивости к лекарственному средству.

[0003] В качестве способа контролирования фармакокинетики известен способ использования характеристик фармакокинетики, основанный на молекулярной массе. То есть при внутрисосудистом введении биосовместимого полимерного материала его выведение через почки подавляется, что обеспечивает продолжительный период полувыведения из крови. Кроме того, известно, что так как опухолевые ткани являются высокопроницамемыми для полимерных материалов, и механизм выделения полимерных материалов является недостаточно эффективным, то полимерные материалы распределяются и накапливаются в опухолевых тканях в относительно высоких концентрациях. Таким образом, были разработаны полимеризованные противоопухолевые агенты, в которых биосовместимый полимерный материал применяют в качестве полимерного носителя, и противоопухолевый агент связан с указанным полимерным носителем.

Что касается полимеризованных противоопухолевых агентов, то были описаны полимеризованные противоопухолевые агенты, в которых в качестве полимерного носителя применяют блоксополимер, полученный путем сшивки сегмента полиэтиленгликоля с сегментом полиглутаминовой кислоты, и различные противоопухолевые агенты связаны с карбоновыми кислотами при боковых цепях сегмента полиглутаминовой кислоты. В патентной литературе 1 описан фармацевтический продукт, в котором 7-этил-10-гидрокамптотецин связан с соответствующим блоксополимером. Кроме того, если рассматривать другие противоопухолевые агенты, то известны конъюгат блоксополимера с противоопухолевым агентом на основе цитидина (патентная литература 2), конъюгат блоксополимера с комбретастатином А-4 (патентная литература 3), конъюгат блоксополимера с ингибитором HSP90 (патентная литература 4) и т.д. Согласно описанию указанные полимеризованные противоопухолевые агенты обладают усиленным противоопухолевым действием по сравнению с низкомолекулярными противоопухолевыми соединениями, применяемыми в качестве активных ингредиентов.

[0004] Указанные конъюгаты блоксополимеров с противоопухолевыми агентами представляют собой полимеризованные противоопухолевые агенты, в которых гидроксильные группы противоопухолевого агента связаны с карбоновыми кислотами при боковых цепях блоксополимера посредством сложноэфирных связей с образованием конъюгатов. Они представляют собой пролекарства, которые проявляют противоопухолевую активность при введении в организм в результате расщепления сложноэфирных связей с постоянной скоростью для высвобождения противоопухолевого агента.

Кроме того, указанные блоксополимеры, с которыми связаны противоопухолевые агенты, имеют физическое свойство, благодаря которому фрагмент со связанным противоопухолевым агентом, если блочный фрагмент, с которым связан противоопухолевый агент, является гидрофобным, в водном растворе имеет свойства образования ассоциатов, основанного на гидрофобном взаимодействии, и несколько молекул блоксополимера образуют ассоциированные агрегаты.

Ассоциированные агрегаты, образуемые указанным полимеризованным противоопухолевым агентом, можно обнаруживать в анализе рассеивания света с использованием лазерного излучения и т.д., и физические свойства ассоциированных агрегатов можно измерять по значению интенсивности рассеянного света. То есть, физические свойства ассоциированных агрегатов можно определять по интенсивности рассеянного света, которая является измеряемым параметром.

Полимеризованный противоопухолевый агент, имеющий указанные свойства образования ассоциатов, ведет себя как наночастицы, образующиеся в организме благодаря свойствам образования ассоциатов, и, таким образом, имеет фармакокинетику, такую как описано выше. Таким образом, полимеризованный противоопухолевый агент распределяется в высокой концентрации в опухолевой ткани и высвобождает противоопухолевый агент и тем самым оказывает сильное противоопухолевое действие. Таким образом, в случае указанных полимеризованных противоопухолевых агентов свойства образования ассоциатов для получения наночастиц являются важным фактором, определяющим их характеристики.

[0005] Фармацевтический продукт, содержащий конъюгат лекарственное средство-полимер, такой как описано выше, представляет собой фармацевтический продукт, который обеспечивает высокую фармакологическую активность и снижает побочные эффекты за счет фармакокинетики, основанной на молекулярной массе полимерного носителя, и медленного высвобождения связанного с ним лекарственного средства в активированной форме. Таким образом, указанный фармацевтический продукт, содержащий конъюгат лекарственное средство-полимер, необходимо получать в виде препарата, в котором происходит пониженное изменение молекулярной массы полимерного носителя при хранении в виде препарата, то есть в виде препарата, имеющего превосходную стабильность при хранении и ограниченное снижение молекулярной массы.

Как и в случае упомянутого препарата, имеющего стабильность при хранении фармацевтического продукта, содержащего конъюгат лекарственное средство-полимер, например, в патентной литературе 5 и 6 описано, что изменение молекулярной массы полимерного носителя и высвобождение производного камптотецина подавляются при получении конъюгата полисахарида, имеющего карбоксильные группы, и производного камптотецина в фармацевтическом препарате, содержащем сахар или сахарный спирт и агент, регулирующий рН.

Тем не менее, предполагается, что в фармацевтических продуктах, содержащих конъюгат лекарственное средство-полимер, описанных в патентной литературе 5 и 6, фармацевтические продукты, содержащие конъюгат лекарственное средство-полимер, не образуют прочные ассоциаты в виде наночастиц. Таким образом, молекулярную массу полимерного носителя рассматривают как фактор, определяющий его характеристики. По указанной причине уменьшение молекулярной массы в результате реакции химического разложения, вызванной расщеплением химических связей в носителе, является проблемой, которую необходимо решать, и подавление указанного уменьшения является задачей изобретения. Тем не менее, если рассматривать полимеризованный противоопухолевый агент на основе блоксополимера, в котором в качестве фактора регулирования характеристик используют полимеризацию при получении наночастиц из ассоциированных агрегатов, то для него стабильный фармацевтический препарат, в котором должно быть обеспечено контролирование способности образования наночастиц, не известен.

Список литературы

Патентная литература

[0006] Патентная литература 1: WO 2004/039869 А

Патентная литература 2: WO 2008/056596 А

Патентная литература 3: WO 2008/010463 А

Патентная литература 4: WO 2008/041610 А

Патентная литература 5: WO 2002/005585 А

Патентная литература 6: заявка на патент Японии 2005-523329 W

Краткое описание изобретения

Техническая проблема

[0007] Задачей настоящего изобретения является обеспечение препарата в виде фармацевтической композиции полимеризованного производного камптотецина, полученного путем связывания производного камптотецина с полимерным носителем, где препарат в виде фармацевтической композиции имеет свойства образования наночастиц, сохраняющиеся в течение продолжительного времени, и повышенную стабильность, связанную с получением. В частности, это является важным фактором с учетом того, что полимеризованное производное камптотецина имеет свойства образования ассоциатов, и несколько молекул полимеризованного производного камптотецина образуют ассоциированные агрегаты в водном растворе, и, таким образом, образуют наночастицы. Задачей изобретения является обеспечение фармацевтического препарата, содержащего полимеризованное производное камптотецина, которое может образовывать наночастицы, где фармацевтический препарат имеет превосходную стабильность при хранении, определяемую свойствами образования наночастиц из ассоциатов.

Решение проблемы

[0008] Авторы настоящего изобретения обнаружили, что в случае полимеризованного производного камптотецина на основе блоксополимера, в котором сегмент полиэтиленгликоля связан с сегментом полиглутаминовой кислоты, включающим звено глутаминовой кислоты, с которым связано производное камптотецина, если в качестве добавки применяют сахарид, то можно контролировать свойства образования наночастиц, связанные с образованием ассоциированных агрегатов, и, таким образом, получают фармацевтический препарат, имеющий превосходную стабильность при хранении. Таким образом, авторы настоящего изобретения решили задачу изобретения. То есть, в сущности настоящее описание включает следующие изобретения.

[0009]

[1] Фармацевтический препарат, включающий блоксополимер связанных друг с другом сегмента полиэтиленгликоля и сегмента полиглутаминовой кислоты, где сегмент полиглутаминовой кислоты включает звено глутаминовой кислоты, с которым связано производное камптотецина; и сахарид,

в котором блоксополимер представляет собой блоксополимер, представленный общей формулой (1):

где R₁ представляет собой атом водорода или (С1-С6) алкильную группу, необязательно замещенную заместителем; А представляет собой (С1-С6) алкиленовую группу; R₂ представляет собой любое, выбранное из группы, состоящей из атома водорода, (С1-С6) ацильной группы, необязательно замещенной заместителем, и (С1-С6) алкоксикарбонильной группы, необязательно замещенной заместителем; R₃ представляет собой гидроксильную группу и/или -N(R₆)CONH(R₇); R₆ и R₇ могут быть одинаковыми или различными, и каждый представляет собой (С1-С8) алкильную группу, необязательно замещенную третичной аминогруппой; R₄ представляет собой любое, выбранное из группы, состоящей из атома водорода, (С1-С6) алкильной группы, необязательно замещенной заместителем, и силильной группы, необязательно замещенной заместителем; R₅ представляет собой атом водорода или (С1-С6) алкильную группу, необязательно замещенную заместителем; t представляет собой целое число от 45 до 450; каждый d и е представляет собой целое число, (d+е) представляет собой целое число от 6 до 60, отношение d к (d+е) составляет от 1% до 100%, отношение е составляет от 0% до 99%; и сегмент полиглутаминовой кислоты имеет структуру сегмента полиглутаминовой кислоты, имеющую звено глутаминовой кислоты, с которым связано производное камптотецина, и звено глутаминовой кислоты, с которым связана группа R₃, где каждое из звеньев глутаминовой кислоты независимо расположено в случайном порядке,

где фармацевтический препарат имеет физическое свойство образования ассоциатов из совокупности молекул блоксополимеров в водном растворе, и относительное изменение интенсивности рассеянного света для ассоциатов фармацевтического препарата, полученных после хранения фармацевтического препарата в течение 4 недель при 40°С в условиях без доступа света, составляет 20% или менее.

[0010] Блоксополимер согласно настоящему изобретению, в котором сегмент полиэтиленгликоля связан с сегментом полиглутаминовой кислоты, включающим звено глутаминовой кислоты, с которым связано производное камптотецина, таким образом, сегмент полиглутаминовой кислоты, с которым связано производное камптотецина, который является относительно гидрофобным, имеет свойства образования ассоциатов в водном растворе за счет гидрофобного взаимодействия и образует наночастицы, которые представляют собой ассоциированные агрегаты, образующиеся из совокупности блоксополимеров. Указанный блоксополимер представляет собой фармацевтический продукт, который вводят в организм для того, чтобы блоксополимер имел схожие характеристики с вышеуказанными ассоциированными агрегатами in vivo и высвобождал связанное производное камптотецина из указанного блоксополимера с постоянной скоростью для проявления тем самым фармакологической активности. Поэтому блоксополимер, который представляет собой полимеризованное производное камптотецина, является важным фактором для проявления физического свойства превращения в наночастицы в результате образования ассоциированных агрегатов. Если рассматривать ассоциированные агрегаты, то свойство образования ассоциатов можно оценивать путем измерения интенсивности рассеянного света с использованием лазерного излучения. Как правило, измеряемое значение интенсивности рассеянного света для указанного блоксополимера составляет от нескольких тысяч имп./с до нескольких сотен тысяч имп./с, и, таким образом, блоксополимер рассматривают как образующий ассоциированные агрегаты. Согласно настоящему изобретению предполагается использовать интенсивность рассеянного света, полученного с использованием лазерного излучения, в качестве показателя свойств образования ассоциированных агрегатов, и для получения фармацевтического препарата, имеющего пониженное изменение характеристик образования ассоциатов. Таким образом, согласно настоящему изобретению можно получать фармацевтический состав, включающий полимеризованное производное камптотецина, где фармацевтический препарат имеет свойства контролируемого образования наночастиц, что является важным фактором для его характеристик, и имеет высокую стабильность, которая сохраняется при хранении препарата.

[0011]

[2] Фармацевтический препарат согласно [1], для которого рН водного раствора составляет от 3,0 до 6,0, если фармацевтический препарат получают в водном растворе, содержащем производное камптотецина в концентрации 1 мг/мл.

[3] Фармацевтический препарат согласно [1] или [2], дополнительно включающий агент, регулирующий рН.

Настоящее изобретение представляет собой фармацевтический препарат, включающий блоксополимер и сахарид; тем не менее, если препарат получают в водном растворе, то рН может быть различным в зависимости от кислотности блоксополимера, типа сахарида и соответствующего содержания блоксополимера и сахарида. Если рассматривать фармацевтический препарат, включающий полимеризованное производное камптотецина, то для получения фармацевтического состава, имеющего свойства контролируемого образования наночастиц, что является важным фактором для его характеристик, и имеющего высокую стабильность, сохраняющуюся при хранении препарата, рН водного раствора фармацевтического препарата предпочтительно должен находиться в диапазоне от 3,0 до 6,0. Для регулирования рН водного раствора в подходящем диапазоне можно соответствующим образом регулировать тип и дозу блоксополимера и/или сахарида, и по ситуации также можно применять агент, регулирующий рН.

[0012]

[4] Фармацевтический препарат согласно любому из [1]-[3], в котором сахарид представляет собой сахарид или сахарный спирт одного или более видов, выбранный из группы, состоящей из мальтозы, глюкозы, лактозы, фруктозы, трегалозы, сахарозы, маннита, сорбита, инозита, ксилита и глюконата магния.

[5] Фармацевтический препарат согласно любому из [1]-[4], в котором сахарид представляет собой сахарид или сахарный спирт одного или более видов, выбранный из группы, состоящей из мальтозы, глюкозы, лактозы, фруктозы, трегалозы и сахарозы.

[6] Фармацевтический препарат согласно любому из [1]-[5], в котором фармацевтический препарат включает от 10 до 500 частей по массе сахарида и 1 часть по массе производного камптотецина, содержащегося в блоксополимере.

[7] Фармацевтический препарат согласно любому из [1]-[6], в котором фармацевтический препарат представляет собой лиофилизированный препарат.

Преимущества изобретения

[0013] Если рассматривать блоксополимер согласно настоящему изобретению, в котором сегмент полиэтиленгликоля связан с сегментом полиглутаминовой кислоты, включающим звено глутаминовой кислоты, с которым связано производное камптотецина, то образование наночастиц в виде ассоциированных агрегатов является важной характеристикой для обеспечения эффективности, и важно отметить, что способность образования целевых ассоциатов может сохраняться во время хранения препарата. Фармацевтический препарат согласно настоящему изобретению может обеспечивать фармацевтический препарат, включающий блоксополимер, который может образовывать ассоциаты, в качестве активного ингредиента, где фармацевтический препарат имеет превосходную стабильность при хранении, а также способность образования ассоциатов. То есть можно предложить фармацевтический препарат, гарантированно обеспечивающий эффективность в качестве фармацевтического продукта, в котором блоксополимер сохраняет желаемую способность образования ассоциатов и может применяться в качестве содержащей связанное производное камптотецина основы для образования наночастиц.

Описание вариантов реализации

[0014] Согласно настоящему изобретению в случае получения фармацевтического препарата, имеющего долгосрочную стабильность в качестве фармацевтического продукта блоксополимера, в котором сегмент полиэтиленгликоля связан с сегментом полиглутаминовой кислоты, включающим звено глутаминовой кислоты, с которым связано производное камптотецина, может быть получен фармацевтический препарат, включающий блоксополимер, в котором при использовании сахарида в качестве добавки к блоксополимеру относительное изменение уровня образования ассоциатов фармацевтического препарата при хранении фармацевтического препарата в течение 4 недель при 40°С в условиях без доступа света является низким, и образование ассоциатов поддерживается на устойчивом уровне. В последующем описании настоящее изобретение будет объяснено более подробно.

[0015] В настоящем изобретении применяют блоксополимер, в котором сегмент полиэтиленгликоля связан с сегментом полиглутаминовой кислоты, включающим звено глутаминовой кислоты, с которым связано производное камптотецина, представленный следующей общей формулой (1):

где R₁ представляет собой атом водорода или (С1-С6) алкильную группу, которая может содержать заместитель; А представляет собой (С1-С6) алкиленовую группу; R₂ представляет собой любое, выбранное из группы, состоящей из атома водорода, (С1-С6) ацильной группы, которая может содержать заместитель, и (С1-С6) алкоксикарбонильной группы, которая может содержать заместитель; R₃ представляет собой гидроксильную группу и/или -N(R₆)CONH(R₇); R₆ и R₇ могут быть одинаковыми или различными, и каждый представляет собой (С1-С8) алкильную группу, которая может быть замещена третичной аминогруппой; R₄ представляет собой любое, выбранное из группы, состоящей из атома водорода, (С1-С6) алкильной группы, которая может содержать заместитель, и силильной группы, которая может содержать заместитель; R₅ представляет собой атом водорода или (С1-С6) алкильную группу, которая может содержать заместитель; t представляет собой целое число от 45 до 450; каждый d и е представляет собой целое число, (d+е) представляет собой целое число от 6 до 60, и отношение d к (d+е) составляет от 1% до 100%, отношение е составляет от 0% до 99%; и сегмент полиглутаминовой кислоты имеет структуру сегмента полиглутаминовой кислоты, имеющую звено глутаминовой кислоты, с которым связано производное камптотецина, и звенья глутаминовой кислоты, с которыми связаны группы R₃, где каждое из звеньев независимо расположено в случайном порядке.

Блоксополимер представляет собой блоксополимер, в котором сегмент полиэтиленгликоля связан посредством соответствующей линкерной группы с сегментом полиглутаминовой кислоты, включающим звено глутаминовой кислоты, в котором производное камптотецина связано с боковой цепью посредством сложноэфирной связи.

[0016] (С1-С6) алкильная группа, которая может содержать заместитель, в случае R₁ может представлять собой линейную, разветвленную или циклическую (С1-С6) алкильную группу, которая может содержать заместитель. Примеры могут включать метиловую группу, этиловую группу, н-пропиловую группу, изопропиловую группу, н-бутиловую группу, втор-бутиловую группу, трет-бутиловую группу, н-пентиловую группу, неопентиловую группу, циклопентиловую группу, н-гексиловую группу и циклогексиловую группу.

Примеры содержащихся заместителей могут включать меркаптогруппу, гидроксильную группу, атом галогена, нитрогруппу, цианогруппу, карбоциклическую или гетероциклическую арильную группу, алкилтиогруппу, арилтиогруппу, алкилсульфинильную группу, арилсульфинильную группу, алкилсульфонильную группу, арилсульфонильную группу, сульфамоильную группу, алкоксигруппу, арилоксигруппу, ацилоксигруппу, алкоксикарбонилоксигруппу, карбамоилоксигруппу, замещенную или незамещенную аминогруппу, ациламиногруппу, алкоксикарбониламиногруппу, уреидогруппу, сульфониламиногруппу, сульфамоиламиногруппу, формильную группу, ацильную группу, карбоксильную группу, алкоксикарбонильную группу, карбамоильную группу и силильную группу. Заместитель в ароматическом кольце может быть расположен в орто-положении, мета-положении или пара-положении. Предпочтительными являются аминогруппа, диалкиламиногруппа, алкоксигруппа, карбоксильная группа и формильная группа.

Предпочтительные примеры R₁ могут включать метиловую группу, этиловую группу, н-пропиловую группу, изопропиловую группу, н-бутиловую группу, втор-бутиловую группу, трет-бутиловую группу, бензиловую группу, 2,2-диметоксиэтиловую группу, 2,2-диэтоксиэтиловую группу и 2-формилэтиловую группу. Предпочтительной является незамещенная линейная, разветвленная или циклическая (С1-С4) алкильная группа. Особенно предпочтительными являются метиловая группа, этиловая группа, н-пропиловая группа, изопропиловая группа, н-бутиловая группа, втор-бутиловая группа, трет-бутиловая группа и т.д.

[0017] Если рассматривать общую формулу (1), то предпочтительно следует применять сегмент полиэтиленгликоля, в котором фрагмент полиэтиленгликоля в сегменте имеет молекулярную массу от 2 килодальтон до 20 килодальтон и более предпочтительно от 4 килодальтон до 15 килодальтон. То есть, t в общей формуле (1), который представляет собой число повторяющихся звеньев этиленоксигруппы, группы (-ОСН₂СН₂), представляет собой целое число от 45 до 450. Предпочтительно t представляет собой целое число от 90 до 340. Тем не менее, если рассматривать молекулярную массу сегмента полиэтиленгликоля, то используют максимальную молекулярную массу, которую определяют способом ГПХ с использованием стандартов полиэтиленгликоля.

[0018] А в общей формуле (1), который представляет собой линкерную группу, которая соединяет сегмент полиэтиленгликоля и сегмент полиглутаминовой кислоты, представляет собой (С1-С6) алкиленовую группу. Примеры могут включать метиленовую группу, этиленовую группу, триметиленовую группу, тетраметиленовую группу и гексаметиленовую группу. Среди указанных групп предпочтительными являются этиленовая группа или триметиленовая группа, и особенно предпочтительной является триметиленовая группа.

[0019] Сегмент полиглутаминовой кислоты в полимерном соединении согласно настоящему изобретению, представленном общей формулой (1), имеет структуру, в которой звенья глутаминовой кислоты полимеризованы в форме с α-амидными связями. Тем не менее, в указанную полимеризованную структуру аминокислоты также отчасти могут быть включены звенья глутаминовой кислоты, полимеризованной в форме с γ-амидными связями. Если рассматривать сегмент полиглутаминовой кислоты, то различные звенья глутаминовой кислоты могут иметь L-тип или D-тип, или они могут существовать в виде смеси.

Общее количество звеньев глутаминовой кислоты в общей формуле (1) представлено выражением: (d+e), и представляет собой целое число от 6 до 60. Предпочтительно (d+e) составляет от 8 до 40. Таким образом, несмотря на то, что средняя молекулярная масса сегмента полиглутаминовой кислоты зависит от структур производного камптотецина и группы R₃, связанных друг с другом, что будет описано далее, и от количества линкерных групп, средняя молекулярная масса составляет от 0,6 килодальтон до 15 килодальтон и предпочтительно от 0,8 килодальтон до 10 килодальтон.

[0020] Общее количество звеньев глутаминовой кислоты в сегменте полиглутаминовой кислоты может быть определено способом ¹Н ЯМР для вычисления количества звеньев глутаминовой кислоты, способом анализа аминокислот, способом кислотно-основного титрования карбоксильных групп при боковых цепях и т.д. Предпочтительно следует использовать такое количество звеньев глутаминовой кислоты, которое соответствует количеству карбоксильных групп при боковых цепях, определенному способом кислотно-основного титрования при использовании сегмента полиглутаминовой кислоты перед присоединением производного камптотецина и группы R₃ к боковой цепи.

[0021] (С1-С6) ацильная группа, которая может содержать заместитель, в случае R₂ может представлять собой линейную, разветвленную или циклическую (С1-С6) ацильную группу, которая может содержать заместитель. Примеры могут включать формильную группу, ацетильную группу, пропионильную группу, бутирильную группу и валерильную группу.

Что касается заместителей, то ацильная группа может содержать гидроксильную группу, атом галогена, аминогруппу, алкиламиногруппу, диалкиламиногруппу, алкоксигруппу или арильную группу.

Предпочтительные примеры могут включать формильную группу, ацетильную группу, трихлорацетильную группу, трифторацетильную группу, пропионильную группу, пивалоильную группу, бензилкарбонильную группу и фенэтилкарбонильную группу. Предпочтительной является линейная, разветвленная или циклическая (С1-С4) ацильная группа, которая может содержать заместитель, и предпочтительными являются ацетильная группа, трихлорацетильная группа и трифторацетильная группа.

[0022] (С1-С6) алкоксикарбонильная группа, которая может содержать заместитель, в случае R₂ может представлять собой линейную, разветвленную или циклическую (С1-С6) алкоксикарбонильную группу, которая может содержать заместитель. Что касается заместителя, то алкоксикарбонильная группа может содержать гидроксильную группу, атом галогена, аминогруппу, алкиламиногруппу, диалкиламиногруппу, алкоксигруппу или арильную группу.

Предпочтительные примеры могут включать метоксикарбонильную группу, этоксикарбонильную группу, трет-бутоксикарбонильную группу, бензилоксикарбонильную группу и 9-флуоренилметилоксикарбонильную группу.

[0023] Что касается R₂, то предпочтительно следует использовать атом водорода или линейную, разветвленную или циклическую (С1-С4) ацильную группу, которая может содержать заместитель. Особенно предпочтительно R₂ представляет собой атом водорода, ацетильную группу, трихлорацетильную группу или трифторацетильную группу.

[0024] Что касается общей формулы (1), R₃ представляет собой гидроксильную группу и/или -N(R₆)CONH(R₇). То есть, звено глутаминовой кислоты, в котором карбоксильная группа при боковой цепи представляет собой R₃, представляет собой звено глутаминовой кислоты, в котором боковая цепь является немодифицированной, и/или звено глутаминовой кислоты, в котором к боковой цепи присоединено производное мочевины.

R₆ и R₇ могут быть одинаковыми или различными, и каждый представляет собой линейную, разветвленную или циклическую (С1-С8) алкильную группу, которая может быть замещена третичной аминогруппой. Примеры (С1-С8) алкильных групп R₆ и R₇ могут включать метиловую группу, этиловую группу, н-пропиловую группу, изопропиловую группу, н-бутиловую группу, трет-бутиловую группу, циклопропиловую группу, циклогексиловую группу и н-октиловую группу.

Примеры линейной, разветвленной или циклической (С1-С8) алкильной группы, которая может быть замещена третичной аминогруппой, могут включать 2-диметиламиноэтиловую группу и 3-диметиламинопропиловую группу.

Предпочтительные примеры R₆ и R₇ могут включать этиловую группу, изопропиловую группу, циклогексиловую группу и 3-диметиламинопропиловую группу. Более предпочтительные примеры могут включать вариант, в котором R₆ и R₇ оба представляют собой изопропиловые группы, вариант, в котором R₆ и R₇ оба представляют собой циклогексиловые группы, и вариант, в котором R₆ и R₇ представляют собой этиловую группу и 3-диметиламинопропиловую группу, соответственно.

[0025] Как будет описано ниже, -N(R₆)CONH(R₇) в случае R₃ представляет собой группу, модифицирующую боковую цепь глутаминовой кислоты, которая образуется в качестве побочного продукта при использовании агента конденсации на основе карбодиимида во время синтеза блоксополимера общей формулы (1) с присоединенным к нему производным камптотецина. Таким образом, указанные R₆ и R₇ являются идентичными с алкильным заместителем агента конденсации на основе карбодиимида, применяемым в синтезе. То есть, если в качестве карбодиимидного агента конденсации применяют диизопропилкарбодиимид (DIPCI), то R₆ и R₇ представляют собой изопропиловые группы. Если используют гидрохлорид 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (WSC), то R₆ и R₇ представляют собой смесь заместителей, включающую этиловые группы и 3-диметиламинопропиловые группы. В указанном случае существует вариант, в котором R₃ представляет собой этиловую группу, и R₇ представляет собой 3-диметиламинопропиловую группу, и наоборот, и также допустима группа -N(R₆)CONH(R₇), в которой обе указанные группы присутствуют в одной молекуле.

[0026] Что касается общей формулы (1), R₃ может представлять собой гидроксильную группу. То есть, сегмент полиглутаминовой кислоты согласно настоящему изобретению может содержать звено глутаминовой кислоты в свободной форме, которое не связано ни с производным камптотецина, ни с группой -N(R₆)CONH(R₇). Как показано, карбоксильная группа при боковой цепи в звене глутаминовой кислоты, в котором R₃ представляет собой гидроксильную группу, находится в форме свободной кислоты; тем не менее, карбоксильная группа при боковой цепи может иметь форму соли, которую можно применять в качестве фармацевтического продукта, и карбоксильная группа при боковой цепи в форме соли щелочного металла или соли щелочно-земельного металла также включена в настоящее изобретение. Примеры солей щелочных металлов или солей щелочно-земельных металлов могут включать соль лития, соль натрия, соль магния и соль кальция. Если фармацевтический препарат согласно настоящему изобретению предложен в качестве противоракового агента для парентерального введения, то блоксополимер получают в растворе в фармацевтически приемлемой солюбилизирующей жидкости. В указанном случае вариант реализации звена глутаминовой кислоты в свободной форме зависит от рН раствора и наличия солей в буферном растворе и т.д., и можно применять варианты реализации любых произвольных солей глутаминовой кислоты.

[0027] Блоксополимер, представленный общей формулой (1), включает производное камптотецина, связанное с карбоксильной группой при боковой цепи сегмента полиглутаминовой кислоты посредством сложноэфирной связи. Производное камптотецина представляет собой производное камптотецина, которое содержит в положении 10 гидроксильную группу, которая доступна для образования сложноэфирной связи, и содержит группу R₄ в положении 7 и группу R₅ в положении 9. Любой один из R₄ и R₅ может представлять собой атом водорода; тем не менее, предпочтительно, чтобы любой один из R₄ и R₅ представлял собой заместитель, отличный от атома водорода.

[0028] R₄ представляет собой атом водорода, (С1-С6) алкильную группу, которая может содержать заместитель, или силильную группу, которая может содержать заместитель.

(С1-С6) алкильная группа, которая может содержать заместитель, в случае R₄ может представлять собой линейную, разветвленную или циклическую (С1-С6) алкильную группу, которая может содержать заместитель. Что касается заместителя, то алкильная группа может содержать гидроксильную группу, атом галогена, аминогруппу, алкиламиногруппу, диалкиламиногруппу, алкоксигруппу, арильную группу и т.д. Примеры могут включать метиловую группу, этиловую группу, н-пропиловую группу, изопропиловую группу, н-бутиловую группу, втор-бутиловую группу, трет-бутиловую группу и бензиловую группу. Предпочтительной является линейная, разветвленная или циклическая (С1-С4) алкильная группа, которая может содержать заместитель, и особенно предпочтительной является этиловая группа.

Примеры силильной группы, которая может содержать заместитель, в случае R₄ могут включать триметилсилильную группу, триэтилсилильную группу, трет-бутилдиметилсилильную группу триизопропилсилильную группу и трет-бутилдифенилсилильную группу. Трет-бутилдиметилсилильная группа является предпочтительной.

[0029] R₄ предпочтительно представляет собой атом водорода или незамещенную (С1-С6) алкильную группу. Особенно предпочтительными являются атом водорода или этиловая группа.

[0030] R₅ представляет собой атом водорода или (С1-С6) алкильную группу, которая может содержать заместитель.

(С1-С6) алкильная группа, которая может содержать заместитель, в случае R₅ может представлять собой линейную, разветвленную или циклическую (С1-С6) алкильную группу, которая может содержать заместитель. Что касается заместителя, алкильная группа может содержать гидроксильную группу, атом галогена, аминогруппу, алкиламиногруппу, диалкиламиногруппу, алкоксигруппу, арильную группу и т.д. Примеры могут включать метиловую группу, этиловую группу, н-пропиловую группу, изопропиловую группу, н-бутиловую группу, втор-бутиловую группу, трет-бутиловую группу, бензиловую группу и диметиламинометиловую группу.

R₅ предпочтительно представляет собой атом водорода или (С1-С6) алкильную группу, содержащую аминогруппу. Особенно предпочтительными являются атом водорода или диметиламинометиловая группа.

[0031] Производное камптотецина, присоединенное к блоксополимеру общей формулы (1), предпочтительно представляет собой присоединяемый остаток 7-этил-10-гидроксикамптотецина и/или ногитекана (9-диметиламинометил-10-гидроксикамптотецина). То есть, производное камптотецина предпочтительно представляет собой присоединяемый остаток, к котором посредством сложноэфирной связи присоединен 7-этил-10-гидроксикамптотецин, в котором R₄ представляет собой этиловую группу, и R₅ представляет собой атом водорода. В качестве альтернативы производное камптотецина предпочтительно представляет собой присоединяемый остаток, к которому посредством сложноэфирной связи присоединен ногитекан (9-диметиламинометил-10-гидроксикамптотецин), в котором R₄ представляет собой атом водорода, и R₅ представляет собой диметиламинометиловую группу. Производное камптотецина особенно предпочтительно представляет собой присоединяемый остаток, к которому посредством сложноэфирной связи присоединен 7-этил-10-гидроксикамптотецин, в котором R₄ представляет собой этиловую группу, и R₅ представляет собой атом водорода.

[0032] Блоксополимер, описанный на общей формуле (1), согласно настоящему изобретению предпочтительно содержит несколько производных камптотецина. Производные камптотецина, которые связаны с одной цепью молекулы блоксополимера, могут представлять собой идентичные соединения, или в смеси могут присутствовать несколько видов соединений. Тем не менее, предпочтительно, чтобы производные камптотецина, связанные с одной цепью молекулы блоксополимера, представляли собой идентичные соединения.

[0033] Что касается общей формулы (1), сегмент полиглутаминовой кислоты является таким, что если рассматривать различные звенья глутаминовой кислоты, каждое звено глутаминовой кислоты, в котором производное камптотецина связано с карбоксильной группой при боковой цепи, и звено глутаминовой кислоты, в котором группа R₃ связана с карбоксильной группой при боковой цепи, существуют независимо в случайных конфигурациях. Так как группа R₃ может представлять собой гидроксильную группу и/или -N(R₆)CONH(R₇), сегмент полиглутаминовой кислоты представляет собой сегмент полиглутаминовой кислоты, в котором каждое звено глутаминовой кислоты, с которым связано производное камптотецина, звено глутаминовой кислоты, с которым связана группа -N(R₆)CONH(R₇), и звено глутаминовой кислоты, содержащее боковую цепь, представляющую собой свободную карбоксильную группу или ее соль, существуют независимо в случайных конфигурациях.

[0034] Согласно настоящему изобретению звено глутаминовой кислоты, с которым связано производное камптотецина, представляет собой неотъемлемый компонент сегмента. Количество звеньев глутаминовой кислоты, с которыми связано производное камптотецина, в общей формуле (1) соответствует d, и звено глутаминовой кислоты составляет от 1% до 100% от общей степени полимеризации сегментов глутаминовой кислоты. Относительное содержание d в сегменте полиглутаминовой ксилоы предпочтительно составляет от 20% до 70%. Количество связанного производного камптотецина определяет содержание активного ингредиента при использовании блоксополимера в качестве фармацевтического продукта и в значительной степени влияет на фармакокинетику в организме после введения и тем самым важно для проявления эффективности или побочных эффектов.

С другой стороны, звено глутаминовой кислоты, связанное с группой R₃, является необязательным компонентом сегмента. То есть, звено глутаминовой кислоты, с которым не связано производное камптотецина, представляет собой соответствующее звено глутаминовой кислоты, связанное с группой R₃. Что касается звеньев глутаминовой кислоты, связанных с группой R₃, на общей формуле (1), их содержание соответствует е, и глутаминовая кислота составляет от 0% до 99% от общей степени полимеризации сегментов глутаминовой кислоты. Относительное содержание е в сегменте полиглутаминовой кислоты предпочтительно составляет от 30% до 80%.

Кроме того, если рассматривать блоксополимер общей формулы (1), то содержание в процентах производного камптотецина предпочтительно составляет от 10% до 60% по массе. Содержание производного камптотецина может быть измерено путем количественного анализа производного камптотецина, высвобождаемого при расщеплении сложноэфирной связи со звеном глутаминовой кислоты путем гидролиза. Более предпочтительно содержание в процентах производного камптотецина составляет от 10% до 50% по массе и особенно предпочтительно от 15% до 40% по массе.

[0035] Группа R₃ представляет собой гидроксильную группу и/или -N(R₆)CONH(R₇). Указанная группа -N(R₆)CONH(R₇) представляет собой необязательный заместитель, и звено глутаминовой кислоты, с которым не связано производное камптотецина, предпочтительно является таким, что основным заместителем является гидроксильная группа. Что касается общей степени полимеризации глутаминовой кислоты в сегменте полиглутаминовой кислоты, (d+e), относительное содержание звеньев глутаминовой кислоты, в которых R₃ представляет собой гидроксильную группу, предпочтительно составляет от 15% до 60%, и относительное содержание звеньев глутаминовой кислоты, в которых R₃ представляет собой -N(R₆)CONH(R₇), предпочтительно составляет от 0% до 50%.

Если группа R₃ представляет собой группу -N(R₆)CONH(R₇), то процентное содержание группы -N(R₆)CONH(R₇) предпочтительно составляет от 1% до 15% по массе, и содержание группы -N(R₆)CONH(R₇) может быть определено способом измерения содержания путем количественного анализа остатков свободной мочевины при расщеплении амидной связи со звеном глутаминовой кислоты посредством гидролиза или путем измерения процентного содержания группы -N(R₆)CONH(R₇) при помощи ¹Н ЯМР. Более предпочтительно процентное содержание группы -N(R₆)CONH(R₇) составляет от 2% до 10% по массе.

[0036] Кроме того, блоксополимер общей формулы (1) согласно настоящему изобретению имеет физическое свойство образования ассоциированных агрегатов в водном растворе. Для придания устойчивой способности образования ассоциированных агрегатов указанную способность можно соответствующим образом регулировать путем настройки баланса между гидрофильностью сегмента полиэтиленгликоля и гидрофобностью сегмента полиглутаминовой кислоты. Предпочтительно применяют блоксополимер, в котором t в сегменте полиэтиленгликоля на общей формуле (1) представляет собой целое число от 90 до 340, и общее количество звеньев глутаминовой кислоты, (d+e), представляет собой целое число от 8 до 40, и применяют блоксополимер, в котором относительное содержание d, которое представляет собой количество звеньев глутаминовой кислоты, с которыми связано производное камптотецина, в сегменте полиглутаминовой кислоты, составляет от 20% до 70%.

[0037] Далее на примере будет приведено объяснение способа получения блоксополимера, представленного на общей формуле (1), согласно настоящему изобретению.

Соответствующий блоксополимер можно получать путем связывания производного камптотецина, содержащего гидроксильную группу в положении 10, с «блоксополимером, в котором связаны сегмент полиэтиленгликоля и сегмент полиглутаминовой кислоты в свободной форме» по реакции этерификации. Необязательно, если в реакции связывания используют группу -N(R₆)CONH(R₇) в качестве R₃, то может быть получен блоксополимер, связанный с производным камптотецина согласно настоящему изобретению. Способ связывания указанного производного камптотецина, содержащего гидроксильную группу в положении 10, и необязательной группы -N(R₆)CONH(R₇) никаким конкретным образом не ограничен. Сначала можно проводить связывание производного камптотецина, содержащего гидроксильную группу в положении 10, и затем можно проводить связывание группы -N(R₆)CONH(R₇); способы также можно проводить в обратном порядке; или реакции связывания можно проводить одновременно.

[0038] Примеры способа получения «блоксополимера, в котором связаны сегмент полиэтиленгликоля и сегмент полиглутаминовой кислоты в свободной форме» могут включать способ связывания сегмента полиэтиленгликоля с сегментом полиглутаминовой кислоты, и способ последовательной полимеризации полиглутаминовой кислоты на сегменте полиэтиленгликоля, можно применять любые способы.

[0039] Способ синтеза блоксополимера, представленного на общей формуле (1), согласно настоящему изобретению будет объяснен на примере, в котором производное камптотецина представляет собой 7-этил-10-гидроксикамптотецин, и гидроксильная группа в положении 10 производного камптотецина и карбоксильная группа в сегменте глутаминовой кислоты в блоксополимере связаны посредством сложноэфирной связи. При этом, соответствующий блоксополимер, связанный с производным камптотецина, можно получать способом, описанным в WO 2004/039869. Краткий обзор способа получения, описанного в указанном документе, приведен далее.

[0040] Что касается способа синтеза «блоксополимера, в котором связаны сегмент полиэтиленгликоля и сегмент полиглутаминовой кислоты в свободной форме», можно применять способ получения структурного фрагмента полиглутаминовой кислоты на конце сегмента полиэтиленгликоля путем последовательного взаимодействия ангидрида N-карбонил-глутаминовой кислоты с полиэтиленгликолевым соединением, один конец которого модифицирован алкоксигруппой, и другой конец модифицирован аминогруппой. В указанном случае, если рассматривать ангидрид N-карбонил-глутаминовой кислоты, предпочтительно карбоксильная группа в боковой цепи глутаминовой кислоты должна представлять собой производное глутаминовой кислоты, модифицированное соответствующей защитной группой карбоновой кислоты. Защитная группа карбоновой кислоты не ограничена каким-либо конкретным образом; тем не менее, сложноэфирная защитная группа является предпочтительной.

Более конкретно, можно применять способ получения блоксополимера, содержащего сегмент полиэтиленгликоля и сегмент полиглутаминовой кислоты, путем последовательной полимеризации с проведением последовательного взаимодействия ангидрида γ-бензил-N-карбонил-глутаминовой кислоты с полиэтиленгликолем, один конец которого модифицирован метоксигруппой, и другой конец модифицирован аминогруппой. При этом можно контролировать степень полимеризации глутаминовой кислоты в сегменте полиглутаминовой кислоты путем регулирования количества эквивалентов применяемого ангидрида γ-бензил-N-карбонил-глутаминовой кислоты.

Затем проводят удаление защитных бензиловых групп в сегменте полиглутаминовой кислоты соответствующим способом, и таким образом можно получать «блоксополимер, в котором связаны сегмент полиэтиленгликоля и сегмент полиглутаминовой кислоты». Что касается реакции удаления защитных бензиловых групп, можно применять реакцию гидролиза в щелочных условиях и реакцию восстановительного гидрирования.

[0041] Затем проводят реакцию конденсации 7-этил-10-гидроксикамптотецина с «блоксополимером, в котором связаны сегмент полиэтиленгликоля и сегмент полиглутаминовой кислоты в свободной форме» в присутствии карбодиимидного агента конденсации. При использовании указанного способа можно проводить одновременное связывание 7-этил-10-гидроксикамптотецина и группы -N(R₆)CONH(R₇) с блоксополимером, и, таким образом, указанный способ включает наиболее эффективное взаимодействие. При этом, если рассматривать соответствующую реакцию конденсации, то уровень связывания производного камптотецина можно контролировать путем регулирования количества эквивалентов применяемого 7-этил-10-гидроксикамптотецина. Кроме того, количество встраиваемых групп -N(R₆)CONH(R₇) можно контролировать путем регулирования количества эквивалентов применяемого карбодиимидного агента конденсации.

Остаточные звенья глутаминовой кислоты, в которых карбоксильные группы при боковых цепях химически не модифицированы, за исключением звеньев глутаминовой кислоты, с которыми связаны производное камптотецина и группа -N(R₆)CONH(R₇), составляют звенья глутаминовой кислоты, в которых R₃ представляет собой гидроксильную группу. Количество звеньев глутаминовой кислоты, в которых R₃ представляет собой гидроксильную группу, можно контролировать при помощи количества эквивалентов применяемого производного камптотецина и карбодиимидного агента конденсации.

[0042] При этом, если рассматривать карбодиимидный агент конденсации, применяемый в настоящем описании, можно применять любой агент конденсации, который может связывать производное камптотецина с карбоксильными группами при боковых цепях звена глутаминовой кислоты посредством сложноэфирных связей, без каких-либо конкретных ограничений. Предпочтительные примеры могут включать дициклогексилкарбодиимид (DCC), диизопропилкарбодиимид (DIPCI) и гидрохлорид 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (WSC). При проведении реакции конденсации также можно применять вспомогательный реакционный агент, такой как N,N-диметиламинопиридин (DMAP). При этом, в случае использования DCC в качестве карбодиимидного агента конденсации R₆ и R₇ представляют собой циклогексиловые группы; и при использовании DIPCI R₆ и R₇ представляют собой изопропиловые группы; и при использовании WSC R₆ и R₇ представляют собой смесь этиловой группы и 3-диметиламинопропиловой группы.

[0043] После связывания соответствующего количества 7-этил-10-гидроксикамптотецина и соответствующего количества группы -N(R₆)CONH(R₇) в качестве необязательного заместителя при R₃ по реакции, описанной выше, с боковой цепью глутаминовой кислоты «блоксополимера, в котором связаны сегмент полиэтиленгликоля и сегмент полиглутаминовой кислоты в свободной форме» и последующего проведения способа очистки, если это требуется, можно синтезировать блоксополимер, с которым связано производное камптотецина согласно настоящему изобретению. Что касается способа очистки, то он является предпочтительным для получения полиглутаминовой кислоты, в боковых цепях которой содержатся гидроксильные группы, в свободной кислотной форме и одновременного удаления остаточных аминовых компонентов с применением катионообменной смолы и т.д.

[0044] Блоксополимер, с которым связано производное камптотецина, представленный на общей формуле (1), имеет свойство медленного высвобождения производного камптотецина в фосфатном буферном солевом растворе (ФБР) и непрерывного высвобождения производного камптотецина. Например, если производное камптотецина представляет собой 7-этил-10-гидроксикамптотецин и присоединено посредством сложноэфирной связи через гидроксильную группу в положении 10, то блоксополимер имеет физическое свойство медленного высвобождения 7-этил-10-гидроксикамптотецина при введении в организм. Низкомолекулярные лекарственные средства, которые, как правило, используют для клинических задач, обеспечивают максимальную концентрацию лекарственного средства в крови сразу после введения и затем относительно быстро выводятся из организма. В противоположность этому, соответствующий блоксополимер со связанным производным камптотецина представляет собой препарат, характеризующийся тем, что за счет медленной диссоциации 7-этил-10-гидроксикамптотецина в качестве активного ингредиента блоксополимер обеспечивает устойчивый профиль концентрации в крови в отсутствие чрезмерного увеличения концентрации активного ингредиента в крови после введения.

[0045] Кроме того, в соответствующем блоксополимере, связанном с производным камптотецина, сегмент полиэтиленгликоля является гидрофильным. С другой стороны, так как сегмент полиглутаминовой кислоты включает гидрофильное производное камптотецина, соответствующий блоксополимер, связанный с производным камптотецина, имеет свойства образования ассоциатов, определяемые гидрофобным взаимодействием между сегментами полиглутаминовой кислоты в водном растворе. Таким образом, в водном растворе блоксополимера образуются мицеллярные ассоциаты типа ядро-оболочка, в которых гидрофобные сегменты полиглутаминовой кислоты образуют ядро в виде ассоциированных агрегатов, при этом гидрофильные сегменты полиэтиленгликоля образуют покрытие поверх ядра с образованием внешней оболочки и тем самым образуют слой оболочки.

[0046] Что касается мицеллярных ассоциатов, образование ассоциатов можно подтверждать путем измерения интенсивности рассеянного света с использованием лазерного излучения и т.д., и, таким образом, можно проводить оценку свойств образования ассоциатов на основании значения интенсивности рассеянного света. Например, интенсивность рассеянного света можно применять непосредственно в качестве физической величины, определяющей свойства образования ассоциированных агрегатов. Если рассматривать водный раствор блоксополимера, например, водный раствор блоксополимера в концентрации от 0,01 до 100 мг/мл имеет значение интенсивности рассеянного света от нескольких тысяч имп./с до нескольких сотен тысяч имп./с, по указанному параметру делают вывод об образовании ассоциированных агрегатов. Кроме того, молекулярную массу ассоциированных агрегатов, определенную с использованием высокомолекулярных стандартов полиэтиленгликоля и т.д., можно оценивать по интенсивности рассеянного света. Согласно вычислениям водный раствор блоксополимера может включать ассоциированные агрегаты, имеющие общую молекулярную массу 1000000 или более. Таким образом, предполагается, что наночастицы образуются в результате ассоциации совокупности молекул блоксополимера, от нескольких дюжин молекул до нескольких сотен молекул. Кроме того, водный раствор блоксополимера имеет физическое свойство образования скоплений в виде наночастиц размером от нескольких нанометров до нескольких сотен нанометров согласно анализу размера частиц, определяемого по динамическому рассеянию света.

[0047] Блоксополимер, который образует наночастицы в качестве ассоциированных агрегатов в водном растворе, представляет собой блоксополимер, который при введении в организм распределяется в организме в виде вышеуказанных ассоциированных наночастиц, присутствующих в крови. Высокомолекулярное соединение или объект в виде наночастиц имеет значительно отличающийся профиль фармакокинетики или распределения в тканях организма по сравнению с традиционно используемыми низкомолекулярными лекарственными средствами. Таким образом, если рассматривать блоксополимер, связанный с производным камптотецина, который может образовывать ассоциированные наночастицы, известно, что удерживание в организме или распределение в ткани определяется в зависимости от молекулярной массы ассоциата или размера наночастиц, и блоксополимер удерживается и распределяется, главным образом, в опухолевых тканях. С этой точки зрения блоксополимер, связанный с производным камптотецина, представляет собой противоопухолевый препарат, который имеет характеристики, определяющие фармацевтическую эффективность, и характеристики, определяющие побочные эффекты, которые полностью отличаются от традиционных низкомолекулярных препаратов камптотецина, и, таким образом, может обеспечивать новый способ терапии при клиническом применении производных камптотецина. Таким образом, так как соответствующий блоксополимер имеет форму наночастиц, которые образуются благодаря конкретным свойствам образования ассоциатов и имеют контролируемую желаемую молекулярную массу ассоциата и желаемый размер частиц, важно добиваться таких профилей фармакокинетики и распределения в ткани, которые являются предпочтительными для противоопухолевых агентов, и образование наночастиц, имеющих желаемую молекулярную массу ассоциата и желаемый размер, может быть причислено к важным показателям качества продукта при демонстрации его характеристик.

[0048] Согласно настоящему изобретению сахарид применяют в качестве добавки в фармацевтическом препарате, включающем блоксополимер в качестве активного ингредиента. Что касается указанного сахарида, то можно применять моносахариды, дисахариды и сахарные спирты, которые используют в качестве фармацевтических добавок.

Примеры моносахаридов и дисахаридов могут включать мальтозу, глюкозу, лактозу, фруктозу, трегалозу, сахарозу, арабинозу, изомальтозу, галактозамин, галактозу, ксилозу, глюкозамин, генциобиозу, коджибиозу, целлобиозу, софорозу, тиоглюкозу, туранозу, деоксирибозу, нигерозу, палатинозу, фукозу, маннозу, мелибиозу, рамнозу и ламинарибиозу.

Примеры сахарных спиртов могут включать маннит, сорбит, инозит, ксилит, глюконат магния, мальтит и меглумин.

Что касается сахаридных добавок, применяемых в настоящем изобретении, можно применять любые сахаридные добавки, имеющие чистоту, подходящую для применения в фармацевтических препаратах, без каких-либо конкретных ограничений. Указанные соединения можно применять по отдельности или в виде смесей.

Если рассматривать сахарид согласно настоящему изобретению, то предпочтительно следует применять один или более видов моносахаридов, дисахаридов и сахарных спиртов, выбранных из группы, состоящей из мальтозы, глюкозы, лактозы, фруктозы, трегалозы, сахарозы, маннита, сорбита, инозита, ксилита и глюконата магния. Указанные сахариды представляют собой сахаридные добавки, которые могут сохранять свойства образования ассоциатов блоксополимера в фармацевтическом препарате, включающем вышеуказанный блоксополимер в качестве активного ингредиента, в течение продолжительного времени. Особенно предпочтительными являются моносахариды и дисахариды, и предпочтительно следует применять один или более видов, выбранных из группы, состоящей из мальтозы, глюкозы, лактозы, фруктозы, трегалозы и сахарозы.

[0049] Что касается предложенного фармацевтического препарата, то предпочтительно следует применять сахарид в количестве от 10 до 500 частей по массе относительно 1 части по массе производного камптотецина, содержащегося в блоксополимере. Если количество сахарида меньше 10 частей по массе относительно производного камптотецина, то существует риск того, что эффект может быть недостаточным для сохранения свойств образования ассоциатов блоксополимера. При этом, если рассматривать эффект стабилизации свойств, проблема верхнего предела количества применяемого сахарида отсутствует; тем не менее, с точки зрения целесообразности дозы фармацевтического препарата предпочтительно верхний предел устанавливают таким образом, чтобы он составлял примерно 500 частей по массе. Более предпочтительно, используемое количество сахарида составляет от 20 до 500 частей по массе относительно 1 части по массе производного камптотецина, содержащегося в блоксополимере, и особенно предпочтительно сахарид следует применять в количестве от 20 до 300 частей по массе.

Кроме того, предпочтительно следует применять сахарид в количестве от 2 до 100 частей по массе относительно 1 части по массе блоксополимера. Более предпочтительно применяемое количество составляет от 4 до 100 частей по массе относительно 1 части по массе блоксополимера, и особенно предпочтительно следует применять сахарид в количестве от 4 до 60 частей по массе.

[0050] В настоящем изобретении предложен фармацевтический препарат, содержащий блоксополимер, связанный с производным камптотецина, в качестве активного ингредиента, и фармацевтический дозированный препарат, полученный путем наполнения предварительно выбранной лекарственной формы произвольно выбранным количеством блоксополимера.

При получении фармацевтического препарата, как правило, состав, который получают для долгосрочного хранения, подбирают с учетом химической стабильности активного ингредиента. В случае фармацевтического препарата, включающего блоксополимер, связанный с производным камптотецина, в качестве активного ингредиента, необходимо проводить получение состава, принимая во внимание сохранение свойств образования наночастиц, так как свойство образования наночастиц в водном растворе является важным показателем качества продукта.

[0051] Свойства образования ассоциатов фармацевтического препарата, включающего блоксополимер, связанный с производным камптотецина, в качестве активного ингредиента, например, можно оценивать с использованием измерительного оборудования, при помощи которого можно измерять интенсивность рассеянного лазерного излучения, используя интенсивность рассеянного света в качестве критерия оценки.

В частности, водный раствор фармацевтического препарата, включающего блоксополимер, связанный с производным камптотецина, можно применять в качестве образца для измерения, и измеренное значение интенсивности рассеянного света в образце можно использовать в качестве физической величины, определяющей свойства образования ассоциатов.

Что касается измерительного оборудования для анализа интенсивности рассеянного света, например, измерение можно проводить с использованием фотометра для определения динамического рассеяния света производства Otsuka Electronics Co., Ltd., DLS-8000DL.

[0052] Что касается способа оценки стабильности при хранении фармацевтического препарата, содержащего блоксополимер, связанный с производным камптотецина, в качестве активного ингредиента, фармацевтический препарат хранят в течение 4 недель при 40°С в условиях без доступа света, проводят анализ интенсивности рассеянного света для фармацевтического препарата, и уровень изменения значения интенсивности рассеянного света используют в качестве показателя относительного изменения свойств образования ассоциатов. Таким образом проводят оценку относительного изменения свойств образования ассоциатов.

Предложенный фармацевтический препарат, включающий блоксополимер, связанный с производным камптотецина, в качестве активного ингредиента, является таким, что при хранении фармацевтического препарата в течение 4 недель при 40°С в условиях без доступа света относительное изменение образования ассоциатов, определяемое по молекулярной массе ассоциатов, составляет 20% или менее. Фармацевтический продукт, характеризующийся свойствами образования ассоциатов, имеет недостаток, связанный с тем, что свойства образования ассоциатов значительно ухудшаются при хранении препарата, и в случае, если желаемые ассоциированные наночастицы не образуются, эффективность блоксополимера, связанного с производным камптотецина, снижается. Таким образом, необходимо, чтобы фармацевтический препарат представлял собой препарат, в котором свойства образования ассоциатов не ухудшаются в условиях хранения фармацевтического продукта.

Относительное изменение образования ассоциатов согласно настоящему изобретению представляет собой абсолютное значение увеличения или уменьшения измеряемого значения интенсивности рассеянного света после хранения фармацевтического препарата, включающего блоксополимер, в течение 4 недель при 40°С относительно начального значения интенсивности рассеянного света для фармацевтического препарата. Согласно настоящему изобретению относительное изменение образования ассоциатов определяется типом и дозой применяемого сахарида. Таким образом, фармацевтический препарат согласно настоящему изобретению можно получать путем соответствующего регулирования типа и дозы сахарида в зависимости от полученного в анализе значения интенсивности рассеянного света, рассматриваемого в качестве критерия оценки. Более предпочтительно предложенный фармацевтический состав представляет собой такой состав, в котором относительное изменение образования ассоциатов составляет 10% или менее.

[0053] Предложенный фармацевтический препарат имеет химическую стабильность с пониженным высвобождением производного камптотецина, связанного с блоксополимером. То есть, если рассматривать фармацевтический препарат, то любые производные камптотецина, образующиеся в результате диссоциации связанного производного камптотецина, рассматривают в качестве примесей, и желательно снижать количество свободного производного камптотецина настолько, насколько это возможно. Предложенный фармацевтический препарат имеет превосходную химическую стабильность, в нем понижена диссоциация связанного производного камптотецина, уменьшено снижение содержания активного ингредиента, и препарат имеет превосходную стабильность при хранении.

Что касается предложенного фармацевтического препарата, если проводят оценку относительного изменения уровня высвобождаемого производного камптотецина, определяемое по количеству высвобождаемого производного камптотецина из блоксополимера в качестве критерия оценки при хранении фармацевтического препарата в течение 4 недель при 40°С в условиях без доступа света, относительное изменение количества производного камптотецина, связанного с блоксополимером, составляет 8,0 раза или менее. Относительный уровень высвобождения производного камптотецина определяется отношением уровня высвобождения производного камптотецина в процентах после хранения в течение 4 недель при 40°С к начальному уровню высвобождения производного камптотецина в процентах. При этом, количество высвобождаемого производного камптотецина можно количественно оценивать способом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием фармацевтического препарата в качестве образца. Согласно настоящему изобретению относительное изменение уровня высвобождения производного камптотецина определяется типом и дозой применяемого сахарида. Таким образом, фармацевтический препарат согласно настоящему изобретению можно получать путем соответствующего регулирования типа и дозы сахарида с учетом количества свободного производного камптотецина в качестве критерия оценки. Более предпочтительно предложенный фармацевтический препарат является таким, что относительное изменение уровня высвобождения производного камптотецина составляет 5,0 раза или менее.

[0054] При получении фармацевтического препарата, включающего предложенный блоксополимер, связанный с производным камптотецина, в качестве активного ингредиента, имеющего низкое относительное изменение уровня ассоциатов и превосходную стабильность при хранении, желательно, чтобы при получении фармацевтического препарата в водном растворе, содержащем производное камптотецина в концентрации 1 мг/мл, рН водного раствора составлял от 3,0 до 6,0.

Для регулирования рН предложенного фармацевтического препарата в диапазоне от 3,0 до 6,0 можно применять агент, регулирующий рН. Что касается агента, регулирующего рН, применяемого в настоящем изобретении, то любую кислоту, которую можно применять в качестве фармацевтической добавки, можно применять без каких-либо конкретных ограничений, и примеры могут включать хлороводородную кислоту, серную кислоту, фосфорную кислоту, лимонную кислоту, винную кислоту, яблочную кислоту, метансульфокислоту, толуолсульфокислоту и бензолсульфокислоту. Также можно применять буферный агент, включающий указанную кислотную добавку в качестве основного компонента и включающий соль щелочного металла, соль щелочноземельного металла или аммонийную соль помимо кислотной добавки.

Предпочтительно можно применять хлороводородную кислоту, фосфорную кислоту, лимонную кислоту и винную кислоту, и предпочтительно следует применять их в соответствующем количестве для достижения рН от 3,0 до 5,0 в водном растворе фармацевтического препарата.

[0055] Фармацевтический препарат согласно настоящему изобретению предпочтительно представляет собой препарат, который вводят в кровеносные сосуды путем инъекции или инфузии, и предпочтительно представляет собой инъецируемый препарат, который можно вводить внутривенно. Лекарственная форма предпочтительно представляет собой лекарственную форму, такую как лиофилизированный препарат, инъецируемый жидкий препарат, который можно переводить в инъецируемый раствор путем разбавления во время применения, или разбавленный раствор, который можно вводить непосредственно.

То есть, в случае введения в виде фармацевтического продукта фармацевтический препарат, как правило, используют в виде раствора соответствующего фармацевтического препарата с использованием воды, физиологического солевого раствора, 5% водного раствора глюкозы или маннита. водорастворимого органического растворителя (например, отдельного растворителя, такого как глицерин, этанол, диметилсульфоксид, N-метилпирролидон, полиэтиленгликоль или Cremophor, или смеси указанных растворителей) и т.д.

С учетом химической стабильности и свойства образования ассоциатов соответствующего блоксополимера, связанного с производным камптотецина фармацевтический препарат предпочтительно представляет собой лиофилизированный препарат.

[0056] Фармацевтический препарат согласно настоящему изобретению может включать фармацевтически приемлемые добавки, которые используют традиционно. Примеры применяемых добавок могут включать связывающий агент, смазывающий агент, разрыхлитель, растворитель, вспомогательное вещество, агент, повышающий растворимость, диспергирующий агент, стабилизатор, суспендирующий агент, консервант, успокаивающий агент, краситель и отдушку.

[0057] В случае получения лиофилизированного препарата водный раствор получают с использованием блоксополимера, связанного с производным камптотецина, в качестве фармацевтически активного ингредиента совместно с необязательными добавками, и жидкость для использования в медицине получают путем регулирования рН водного раствора. Предпочтительно при проведении фильтрования или стерилизации, последующего введения в пробирку для препарата и лиофилизации фармацевтический препарат можно получать в виде лиофилизированного препарата. Для регулирования рН можно применять агент, регулирующий рН, или регулирование рН можно проводить с использованием активного ингредиента, как такового, с использованием блоксополимера, связанного с производным камптотецина, в качестве активного ингредиента, включающего звено глутаминовой кислоты, в котором боковая цепь представляет собой карбоновую кислоту в свободной форме.

При этом, в случае получения фармацевтического препарата в виде инъецируемого жидкого препарата водный раствор получают путем введения добавки сахарида к блоксополимеру. Затем водный раствор превращают в жидкость для медицинского использования путем регулирования рН, и инъецируемый жидкий препарат предпочтительно можно получать путем обработки указанной жидкости для медицинского использования при помощи фильтрования и стерилизации и последующего введения полученного материала в контейнер для препарата. Для регулирования рН можно применять агент, регулирующий рН, или регулирование рН можно проводить с использованием активного ингредиента, как такового.

Указанный фармацевтический препарат представляет собой фармацевтический препарат, который имеет низкое относительное изменение интенсивности рассеянного света при анализе водного раствора даже при хранении фармацевтического препарата в течение 4 недель при 40°С в условиях без доступа света, сохраняет стабильность, если рассматривать уровень образования ассоциатов, имеет низкий уровень высвобождения производного камптотецина и обеспечивает превосходную стабильность основного лекарственного средства.

[0058] Фармацевтический препарат, включающий блоксополимер, связанный с производным камптотецина, согласно настоящему изобретению в качестве активного ингредиента, можно применять в качестве фармацевтического продукта, включающего производное камптотецина в качестве активного ингредиента. Особенно предпочтительным является применение фармацевтического препарата в качестве противоопухолевого агента при химиотерапии рака.

Применение фармацевтического препарата согласно настоящему изобретению не ограничено каким-либо конкретным образом, если поражение представляет собой карциному, в отношении которой производное камптотецина обеспечивает терапевтическое действие. Тем не менее, конкретные примеры могут включать мелкоклеточный рак легкого, немелкоклеточный рак легкого, рак шейки матки, рак яичников, рак желудка, колоректальный рак, рак молочной железы, плоскоклеточную карциному, злокачественную лимфому, злокачественную солидную опухоль младенцев, рак поджелудочной железы и множественную миелому.

Дозировка фармацевтического препарата согласно настоящему изобретению может быть различной и зависит от пола, возраста, физиологического состояния и патологического состояния пациента и т.д.; тем не менее, фармацевтический препарат, как правило, вводят парентерально в количестве от 0,01 до 500 мг/м² (площадь поверхности тела) и предпочтительно от 0,1 до 250 мг/м² в пересчете на количество производного камптотецина в день взрослому пациенту. Предпочтительно проводить введение путем инъекции в вену, артерию, очаг поражения (фрагмент опухоли) и т.д.

Примеры

[0059] [Пример синтеза 1]

Синтез блоксополимера, связанного с 7-этил-10-гидроксикамптотецином (соединение 1), где на общей формуле (1) R₁ = метиловая группа, R₂ = ацетильная группа, А = триметиленовая группа, R₆ = R₇ = изопропиловая группа, (d+е) = 24, t = 273, отношение d к (d+е) составляет 44%, отношение е составляет 56% (содержание в процентах звеньев глутаминовой кислоты, содержащих гидроксильную группу в качестве R₃, составляет 30%, и содержание в процентах звеньев глутаминовой кислоты, содержащих -N(R₆)CONH(R₇) в качестве R₃, составляет 26%).

Соединение 1 синтезировали согласно описанию WO 2004/39869. То есть, проводили взаимодействие блоксополимера метоксиполиэтиленгликоль-полиглутаминовая кислота (блоксополимер, имюещий молекулярную массу 12 килодальтон, включающий структурный фрагмент метоксиполиэтиленгликоля с метиловой группой при одном конце и аминопропиловой группой при другом конце и структурный фрагмент полиглутаминовой кислоты, имеющий N-конец, модифицированный ацетильной группой, и степень полимеризации 24, где линкерная группа представляет собой триметиленовую группу) с 7-этил-10-гидроксикамптотецином (ЕНС) с использованием диизопропилкарбодиимида (DIPCI) и N,N-диметиламинопиридина (DMAP). Затем проводили обработку продукта взаимодействия на ионообменной смоле (DOWEX 50 (Н⁺) производства Dow Chemical Company) и лиофилизировали. Таким образом получали соединение 1.

Проводили гидролиз полученного таким образом соединения 1 в течение 10 минут при комнатной температуре с использованием водного раствора гидроксида натрия и затем проводили количественный анализ высвобожденного ЕНС способом ВЭЖХ для определения содержания ЕНС. Содержание ЕНС составляло 21,0% по массе.

[0060] [Пример 1]

Раствор лекарственного средства, содержащий соединение 1 в концентрации 1 мг/мл, если рассматривать содержание ЕНС, и также содержащий мальтозу в количестве 50 мг/мл, получали с использованием воды для инъекций. рН раствора доводили до 4 фосфорной кислотой и затем стерилизовали и фильтровали раствор. По 3 мл полученного раствора вводили в стеклянные пробирки и лиофилизировали. Затем стеклянные пробирки плотно закрывали резиновыми пробками, полученный препарат обозначали как пример 1.

[0061] [Пример 2]

Раствор лекарственного средства, имеющий содержание глюкозы 50 мг/мл, получали способом, аналогичным тому, что описан в примере 1, и лиофилизировали раствор лекарственного средства. Полученный лиофилизированный препарат плотно закрывали резиновыми пробками, препарат обозначали как пример 2.

[0062] [Пример 3]

Раствор лекарственного средства, имеющий содержание лактозы 50 мг/мл, получали способом, аналогичным тому, что описан в примере 1, и лиофилизировали раствор лекарственного средства. Полученный лиофилизированный препарат плотно закрывали резиновыми пробками, препарат обозначали как пример 3.

[0063] [Пример 4]

Раствор лекарственного средства, имеющий содержание фруктозы 50 мг/мл, получали способом, аналогичным тому, что описан в примере 1, и лиофилизировали раствор лекарственного средства. Полученный лиофилизированный препарат плотно закрывали резиновыми пробками, препарат обозначали как пример 4.

[0064] [Пример 5]

Раствор лекарственного средства, имеющий содержание трегалозы 50 мг/мл, получали способом, аналогичным тому, что описан в примере 1, и лиофилизировали раствор лекарственного средства. Полученный лиофилизированный препарат плотно закрывали резиновыми пробками, препарат обозначали как пример 5.

[0065] [Пример 6]

Раствор лекарственного средства, имеющий содержание сахарозы 50 мг/мл, получали способом, аналогичным тому, что описан в примере 1, и лиофилизировали раствор лекарственного средства. Полученный лиофилизированный препарат плотно закрывали резиновыми пробками, препарат обозначали как пример 6.

[0066] [Пример 7]

Раствор лекарственного средства, имеющий содержание маннита 50 мг/мл, получали способом, аналогичным тому, что описан в примере 1, и лиофилизировали раствор лекарственного средства. Полученный лиофилизированный препарат плотно закрывали резиновыми пробками, препарат обозначали как пример 7.

[0067] [Пример 8]

Раствор лекарственного средства, имеющий содержание сорбита 50 мг/мл, получали способом, аналогичным тому, что описан в примере 1, и лиофилизировали раствор лекарственного средства. Полученный лиофилизированный препарат плотно закрывали резиновыми пробками, препарат обозначали как пример 8.

[0068] [Пример 9]

Раствор лекарственного средства, имеющий содержание инозита 50 мг/мл, получали способом, аналогичным тому, что описан в примере 1, и лиофилизировали раствор лекарственного средства. Полученный лиофилизированный препарат плотно закрывали резиновыми пробками, препарат обозначали как пример 9.

[0069] [Пример 10]

Раствор лекарственного средства, имеющий содержание ксилита 50 мг/мл, получали способом, аналогичным тому, что описан в примере 1, и лиофилизировали раствор лекарственного средства. Полученный лиофилизированный препарат плотно закрывали резиновыми пробками, препарат обозначали как пример 10.

[0070] [Пример 11]

Раствор лекарственного средства, имеющий содержание глюконата магния 50 мг/мл, получали способом, аналогичным тому, что описан в примере 1, и лиофилизировали раствор лекарственного средства. Полученный лиофилизированный препарат плотно закрывали резиновыми пробками, препарат обозначали как пример 11.

[0071] [Пример 12]

Раствор лекарственного средства, содержащий соединение 1 в концентрации 1 мг/мл, если рассматривать содержание ЕНС, и также содержащий мальтозу в количестве 50 мг/мл, получали с использованием воды для инъекций. рН раствора доводили до 3 фосфорной кислотой и затем стерилизовали и фильтровали раствор. По 3 мл полученного раствора вводили в стеклянные пробирки и лиофилизировали. Затем стеклянные пробирки плотно закрывали резиновыми пробками, полученный препарат обозначали как пример 12.

[0072] [Пример 13]

Раствор лекарственного средства, содержащий соединение 1 в концентрации 1 мг/мл, если рассматривать содержание ЕНС, и также содержащий мальтозу в количестве 50 мг/мл, получали с использованием воды для инъекций. рН раствора доводили до 5 фосфорной кислотой и затем стерилизовали и фильтровали раствор. По 3 мл полученного раствора вводили в стеклянные пробирки и лиофилизировали. Затем стеклянные пробирки плотно закрывали резиновыми пробками, полученный препарат обозначали как пример 13.

[0073] [Пример 14]

Раствор лекарственного средства, содержащий соединение 1 в концентрации 1 мг/мл, если рассматривать содержание ЕНС, и также содержащий мальтозу в количестве 25 мг/мл, получали с использованием воды для инъекций. рН раствора доводили до 4 фосфорной кислотой и затем стерилизовали и фильтровали раствор. По 3 мл полученного раствора вводили в стеклянные пробирки и лиофилизировали. Затем стеклянные пробирки плотно закрывали резиновыми пробками, полученный препарат обозначали как пример 14.

[0074] [Пример 15]

Раствор лекарственного средства, содержащий соединение 1 в концентрации 1 мг/мл, если рассматривать содержание ЕНС, и также содержащий мальтозу в количестве 100 мг/мл, получали с использованием воды для инъекций. рН раствора доводили до 4 фосфорной кислотой и затем стерилизовали и фильтровали раствор. По 3 мл полученного раствора вводили в стеклянные пробирки и лиофилизировали. Затем стеклянные пробирки плотно закрывали резиновыми пробками, полученный препарат обозначали как пример 15.

[0075] [Пример сравнения 1]

Раствор лекарственного средства, содержащий соединение 1 в концентрации 1 мг/мл, если рассматривать содержание ЕНС, получали с использованием воды для инъекций. рН раствора доводили до 4 фосфорной кислотой и затем стерилизовали и фильтровали раствор. По 3 мл полученного раствора вводили в стеклянные пробирки и лиофилизировали. Затем стеклянные пробирки плотно закрывали резиновыми пробками, полученный препарат обозначали как пример сравнения 1.

[0076] Пример исследования 1: Изменение интенсивности рассеянного света для ассоциированных агрегатов, приведенных в примерах и в примере сравнения, в условиях хранения при 40°С в течение 4 недель.

3 мл воды для инъекций добавляли в каждый из препаратов согласно примерам 1-15 и примеру сравнения 1 немедленно после лиофилизации и получали 1 мг/мл раствор, если рассматривать содержание ЕНС. Измеряли рН полученного раствора. Затем дополнительно добавляли 3 мл воды для инъекций. Измеряли уровень рассеянного света для ассоциированных агрегатов в указанном растворе способом статического рассеяния света (способ СРС). Полученное значение определяли как начальный уровень рассеянного света. Измерительное оборудование и условия измерения описаны ниже.

В отдельном опыте лиофилизированные препараты согласно примерам 1-15 и примеру сравнения 1 хранили в течение 4 недель при 40°С в условиях без доступа света. Затем в каждый из образцов согласно примерам и примеру сравнения добавляли 3 мл воды для инъекций и измеряли рН раствора. Затем проводили подготовку образца таким же образом, что и в случае исходного образца, и измеряли уровень рассеянного света для ассоциированных агрегатов в растворе каждого лиофилизированного препарата.

Результаты измерения рН раствора и уровня рассеянного света в начальный момент времени и рН раствора и уровня рассеянного света после хранения при 40°С в течение 4 недель приведены в таблице 1.

[0077] Измерительное оборудование и условия измерения

Фотометр для определения рассеяния света: DLS-8000DL (производства Otsuka Electronics Co., Ltd.).

Контрвал: LS-81 (производства Otsuka Electronics Co., Ltd.).

Контрвал насоса: LS-82 (производства Otsuka Electronics Co., Ltd.).

Высокочувствительный дифференциальный рефрактометр: DRM-3000 (производства Otsuka Electronics Co., Ltd.).

Циркуляционный термостатический резервуар: LAUDA E200.

Длина волны: 632,8 нм (He-Ne).

Угол: 90°.

Ph1: ОТКРЫТО

Ph2: ЩЕЛЬ

Фильтр ND: 10%

Параметры системы улавливания пыли: 10

[0078] [Таблица 1]

[0079] Согласно результатам, полученным в примере исследования 1, относительное изменение уровня рассеянного света для примеров 1-15, к которым добавляли сахариды, сахарные спирты и производные Сахаров, составляло 14,2% или менее после хранения при 40°С в течение 4 недель, и относительное изменение уровня рассеянного света для примера сравнения 1, не содержащего каких-либо добавок, составляло 24,7% после хранения при 40°С в течение 4 недель. На основании этого было установлено, что стабильный препарат, в котором свойства образования ассоциированных агрегатов блоксополимера, связанного с производным камптотецина, в качестве активного ингредиента изменяются в меньшей степени, можно получать путем добавления сахарида или сахарного спирта.

[0080] Пример исследования 2: Исследование стабильности препарата (уровень высвобождения производного камптотецина)

Лиофилизированные препараты согласно примерам 1-15 и примеру сравнения хранили в течение 4 недель при 40°С в условиях без доступа света. Затем проводили количественный анализ свободного ЕНС в каждой фармацевтической композиции способом ВЭЖХ и оценивали стабильность препарата. Результаты приведены в таблице 2. Кроме того, уровень свободного ЕНС выражали как относительное изменение уровня свободного ЕНС, которое получали путем деления количества свободного ЕНС после хранения при 40°С в течение 4 недель на начальное значение. Результаты измерений приведены в таблице 2.

[0081] [Таблица 2]

[0082] Согласно результатам, полученным в примере исследования 2, соединение 1, которое представляет собой блоксополимер, связанный с ЕНС, является предпочтительным стабилизированным препаратом, так как диссоциация ЕНС подавляется при добавлении сахарного спирта или производного сахара, такого как маннит, сорбит, инозит, ксилит или глюконат магния. Диссоциация ЕНС еще больше подавляется при добавлении сахарида, такого как мальтоза, глюкоза, лактоза, фруктоза, трегалога или сахароза, и, таким образом, соединение 1 является более предпочтительным в качестве стабилизированного препарата. Кроме того, было показано, что если количество добавляемого сахарида, сахарного спирта или производного сахара в 5-21 раз по массе превышает количество добавляемого соединения 1, это обеспечивает значительный стабилизирующий эффект.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к фармацевтическому противоопухолевому лиофилизированному препарату, включающему блок-сополимер и 2-100 частей по массе сахарида или сахарного спирта относительно 1 части по массе указанного блок-сополимера, где блок-сополимер содержит звено глутаминовой кислоты, связанное с производным камптотецина, и представлен общей формулой (1)

в которой R₁, R₄, R₅ – H или (C₁-C₆) алкильная группа; A – (C₁-C₆) алкиленовая группа; R₂ – H, (C₁-C₆) ацильная группа или (C₁-C₆) алкоксикарбонильная группа; R₃ – -OH или -N(R₆)CONH(R₇); R₆, R₇ – (C₁-C₈) алкильная группа; каждый из t, d, e, (d+e) – целое число; t=45-450; (d+e)=6-60; отношение d и e к (d+e) составляет соответственно 1-100% и 0-99%; относительное содержание звеньев глутаминовой кислоты, в которых R₃ -ОН и в которых R₃ -N(R₆)CONH(R₇), относительно (d+e) составляет соответственно 15-60% и 0-50%. Изобретение обеспечивает улучшение стабильности препарата при хранении, которая определяется как сохранением свойства образовывать наночастицы из ассоциатов блок-сополимера, так и способностью подавления диссоциации производного камптотецина в лиофилизированном препарате. 4 з.п. ф-лы, 18 пр., 2 табл.

1. Фармацевтический противоопухолевый препарат, содержащий блок-сополимер связанных друг с другом сегмента полиэтиленгликоля и сегмента полиглутаминовой кислоты, где сегмент полиглутаминовой кислоты содержит звено глутаминовой кислоты, с которым связано производное камптотецина; и сахарид или сахарный спирт,

где блок-сополимер представляет собой блок-сополимер, представленный общей формулой (1)

где R₁ представляет собой атом водорода или (C₁-C₆) алкильную группу;

A представляет собой (C₁-C₆) алкиленовую группу;

R₂ представляет собой любое одно, выбранное из группы, состоящей из атома водорода, (C₁-C₆) ацильной группы, и (C₁-C₆) алкоксикарбонильной группы;

R₃ представляет собой гидроксильную группу или -N(R₆)CONH(R₇);

R₆ и R₇ могут быть одинаковыми или различными и каждый представляет собой (C₁-C₈) алкильную группу;

R₄ представляет собой любое одно, выбранное из группы, состоящей из атома водорода и (C₁-C₆) алкильной группы;

R₅ представляет собой атом водорода или (C₁-C₆) алкильную группу;

t представляет собой целое число от 45 до 450;

каждый d и e представляет собой целое число, (d+e) представляет собой целое число от 6 до 60,

отношение d к (d+e) составляет от 1% до 100%, отношение e к (d+e) составляет от 0% до 99%;

относительное содержание звеньев глутаминовой кислоты, в которых R₃ представляет собой гидроксильную группу, относительно (d+e) составляет от 15% до 60%, и относительное содержание звеньев глутаминовой кислоты, в которых R₃ представляет собой -N(R₆)CONH(R₇), относительно (d+e) составляет от 0% до 50%, и

сегмент полиглутаминовой кислоты имеет структуру сегмента полиглутаминовой кислоты, содержащую звено глутаминовой кислоты, с которым связано производное камптотецина, и звено глутаминовой кислоты, с которым связана группа R₃, где каждое из звеньев глутаминовой кислоты независимо расположено в случайном порядке,

где фармацевтический противоопухолевый препарат включает от 2 до 100 частей по массе сахарида или сахарного спирта относительно 1 части по массе блок-сополимера, и

где фармацевтический противоопухолевый препарат представляет собой лиофилизированный препарат.

2. Фармацевтический противоопухолевый препарат по п.1, отличающийся тем, что pH водного раствора указанного фармацевтического противоопухолевого препарата составляет от 3,0 до 6,0 при концентрации блок-сополимера формулы (1), равной 1 мг/мл в пересчете на указанное производное камптотецина.

3. Фармацевтический противоопухолевый препарат по п. 1 или 2, дополнительно содержащий агент, регулирующий pH.

4. Фармацевтический противоопухолевый препарат по любому из пп. 1-3, отличающийся тем, что указанный сахарид или сахарный спирт выбран из группы, состоящей из мальтозы, глюкозы, лактозы, фруктозы, трегалозы, сахарозы, маннита, сорбита, инозита, ксилита и глюконата магния.

5. Фармацевтический противоопухолевый препарат по п. 4, отличающийся тем, что указанный сахарид или сахарный спирт выбран из группы, состоящей из мальтозы, глюкозы, лактозы, фруктозы, трегалозы и сахарозы.