Фармацевтическая композиция на основе глюкокортикостероида будесонида и фосфатидилхолина для сухой ингаляции Российский патент 2020 года по МПК A61K9/72 B82B1/00 A61K31/573 A61P11/00 

Изобретение относится к медицине и фармакологии и касается стабильной при хранении и эффективной по своему специфическому действию лекарственной композиции, на основе глюкокортикостероида будесонида, включенного в фосфолипидные наночастицы.

Обструктивные заболевания дыхательных путей (ОЗДП) в настоящее время относятся к одним из самых распространенных заболеваний человека. Данная группа заболеваний чаще всего носит хронический характер. В России по официальным данным Министерства здравоохранения хронические ОЗДП занимают 4-5-е место среди всех причин смертности после сердечно-сосудистых заболеваний, сахарного диабета, травм. Наиболее распространенное и тяжелое проявление ОЗДП является бронхиальная астма (БА), которая характеризуется ярким воспалительным процессом. Воспалительный процесс необходимо купировать быстро, иначе возможен летальный исход. Для экспресс-терапии БА широко применяются глюкокортикоиды, наиболее распространенным среди которых является будесонид из-за его высокого сродства к рецепторам, способствующим проникновению внутрь клетки, и высокой эффективности действия, в 15 раз превосходящей широко применяемого глюкокортикостероида - преднизолона. Для достижения быстрого эффекта от введения препарата при ОЗДП преимущественно используют ингаляционный путь введения.

В целом, несмотря на интенсивные исследования последних лет, показавшие возможности оптимизации применения глюкокортикоидов (ГК) для лечения острых заболеваний дыхательных путей путем создания композиций на основе наночастиц, на фармацевтическом рынке до сих пор присутствуют только свободные лекарственные формы этих препаратов. Большинство препаратов будесонида на рынке представлены в виде суспензий сложного состава и порошков, предназначенных для влажной и сухой ингаляции соответственно. Применение растворов в терапии будесонидом невозможно из-за того, что субстанция лекарственного вещества нерастворима в воде, и наибольшую эффективность показало применение именно сухой ингаляции. Однако и данный способ имеет свои недостатки, например, местнораздражающее действие, обусловленное воздействием крупнодисперсных частиц будесонида на альвеолы. Важно отметить, что при данном способе введения непосредственно в альвеолы попадет только 20-25% от вводимой дозы будесонида (максимум 32%), что говорит о низкой биодоступности [1, 2].

Таким образом, биодоступность будесонида при использовании имеющихся лекарственных форм крайне низка. К тому же, лекарство может вызывать характерные для глюкокортикоидов побочные эффекты: подавлять функцию коры надпочечников, иммунитет, способствовать увеличению массы тела, увеличивать риск гипергликемии, нарушения водно-электролитного баланса, артериальной гипертонии и др. Необходимость повторных ингаляций существенно усиливает побочные эффекты препарата [3].

Кроме того, в течение последних лет появились сведения о том, что бронхообструкция, вызываемая сокращением гладкой мускулатуры бронхов, отек слизистой и повышенная секреция жидкости в просвет бронхов могут быть частично обусловлены нарушениями в системе легочного сурфактанта, что является одним из ведущих патогенетических звеньев этого заболевания [4].

Таким образом, при терапии ОЗДП, в частности БА, важным элементом является восстановление функций легочного сурфактанта. Он участвует в метаболической, очистительной, кислородно-транспортной функции легких, обладает антирадикальной активностью. Основным компонентом легочного сурфактанта, выстилающего поверхность его альвеол, на ~80% являются фосфолипиды [4].

В пульмонологии проблема применения эссенциальных фосфолипидов представляет значительный научный интерес из-за низкой биодоступности имеющихся лекарственных препаратов при их местном (ингаляционном) применении. Фосфолипиды, благодаря строению молекулы, образуют в воде сферические структуры, которые при определенной обработке достигают ультрамалых размеров (менее 100 нм). Эти наночастицы, благодаря своей химической структуре, способны служить переносчиками как для растворимых, так и для нерастворимых в биологических жидкостях (гидрофобных) лекарственных препаратов.

Встраивание лекарственных соединений в фосфолипидную матрицу наночастиц позволяет получить растворимые лекарственные формы, содержащие в своем составе гидрофобные лекарственные соединения.

Авторами настоящего изобретения разработан подход, позволяющий получать новые формы известных лекарственных соединений, отличающиеся высокой эффективностью, специфичностью действия и низкой токсичностью. Этот подход заключается в получении композиции, содержащей лекарственную субстанцию, конъюгированную с высокоочищенными фосфолипидами растительного происхождения в форме наночастиц. На основе разработанной авторами оригинальной технологии [5, 6] были получены различные лекарственные композиции, которые в проводимых in vitro и in vivo исследованиях показали высокую эффективность в сравнении с аналогами и/или «свободными» субстанциями.

В связи с этим представляется целесообразным в качестве лекарственной композиции использовать будесонид, конъюгированный с фосфатидилхолином.

Основной задачей при разработке новой лекарственной формы будесонида для терапии ОЗДП с одной стороны являлось то, что при его введении в составе новых лекарственных форм (ЛФ) достигается высокое проникновение будесонида в альвеолы и мелкие дыхательные пути и эффективно купируются нарушения легочного сурфактанта.

В связи с вышесказанным разработка новых лекарственных форм будесонида с применением инновационных технологических подходов, позволяющих существенно увеличить его эффективность, является актуальной задачей. Имеются сообщения о включении будесонида в фосфолипидные липосомы, имеющие высокое сродство к тканям легких, к мембранам альвеол [4]. Разрабатываются формы будесонида в твердых липидных микрочастицах [7] или наносуспензиях [8] и др. Все эти разработки подтверждают актуальность создания новой эффективной лекарственной формы будесонида.

Известны возможности включения ГК, особенно наиболее распространенного из них, будесонида, в различные виды наночастиц на основе полимеров, липидов или их сочетаний. Будесонид включали в основном в частицы относительно крупного размера [9, 10]. Однако выяснилось, что чем больше диаметр частиц, тем меньше процент их прохождения в легочные альвеолы, но, с другой стороны, наиболее мелкие наночастицы быстрее поступают в кровоток, не успев транспортировать встроенный ГК к альвеолярным клеткам-мишеням. Наиболее обещающим в этом плане является включение будесонида в наночастицы на основе фосфолипидов - естественного материала биомембран и в том числе легочного сурфактанта (СФ). При размерах наночастиц из ФХ (сходного с основным липидом сурфактанта) ≤50 нм, они могут, как считалось, достигнув альвеол, больше абсорбироваться клетками. Это должно улучшить фармакокинетику доставляемого будесонида и тем самым повысить эффективность его терапевтического действия - что в дальнейшем может позволить снизить разовую ингалируемую дозу. Параллельно поступление ФХ в альвеолы будет способствовать поддержанию целостности легочного сурфактанта.

Таким образом, одной из важнейших задач, решенных авторами настоящего изобретения, является нахождение оптимального размера фосфолипидных наночастиц, содержащих будесонид, который позволяет, с одной стороны, обеспечить достаточный уровень проникновения препарата в альвеолы, к клеткам-мишеням, а с другой стороны, исключает быстрое проникновение препарата в кровоток. В ходе исследований, проведенных авторами настоящего изобретения такой оптимальный размер наночастиц установлен. Такой размер составляет около 67 нм. Ранее считавшиеся приемлемыми предельные размеры наночастиц ≤50 нм в ходе настоящих исследований по таким важнейшим показателям, как данные гистологического исследования легких, морфометрической характеристики легочной ткани и цитологического исследования бронхоальвеолярного смыва, показали неприемлемые результаты в 1,5-2 раза хуже, чем наночастицы из композиции согласно настоящему изобретению.

Известны ЛФ, разработанные на основе будесонида в составе фосфолипидных наночастиц для влажных ингаляций (заявки на патенты РФ №№2013145597 и 2015131218), имеющие следующий состав:

Фосфатидилхолин 5-11 Олеат натрия 0,5-2,0 Мальтоза 14-25 Будесонид 0,5-2,0 Вода очищенная до 100.

Известно, что для улучшения встраивания гидрофобных лекарственных соединений в фосфолипидные наночастицы в композицию могут быть добавлены жирные кислоты или их соли, в частности, олеат натрия. Использование данной композиции в качестве лекарственного средства является проблематичным ввиду отсутствия регистрации олеата натрия в качестве вспомогательного компонента при производстве лекарственных препаратов. Кроме того, отсутствие дополнительного компонента (соли жирной кислоты) делает состав композиции проще и дешевле в производстве.

Данного недостатка была лишена новая лекарственная форма будесонида, конъюгированного с фосфолипидом, в виде лиофильно высушенного порошка, полученная по усовершенствованной технологии, разработанной авторами настоящего изобретения. При этом терапевтический эффект лекарственной композиции складывается из двух активных компонентов состава, а именно, ГКС будесонида и фосфолипида.

Итак, настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции на основе будесонида и фосфатидилхолина в виде сухого порошка для ингаляции для лечения обструктивных заболеваний дыхательных путей с размером частиц 64-70 нм, содержащей будесонид, фосфатидилхолин и мальтозу при следующем соотношении компонентов, масс. %:

Как описано выше, создание композиции, согласно настоящему изобретению, позволило достигнуть технический результат, заключающийся в повышенной биодоступности будесонида, уменьшении его количества при большей простоте и дешевизне производства.

Примеры

Материалы и методы

В работе использовались следующие материалы:

1. Соевый фосфолипид фирмы Липоид, Германия (Липоид С100).

2. Мальтозы моногидрат фирмы MERCK, Германия.

3. Будесонид субстанция (по ФС 42-02402570-02).

4. Вода для инъекций (по ФС №42-4587-95).

Способ получения композиции и методы ее контроля могут быть продемонстрированы на следующих примерах.

Пример 1. Способ получения композиции.

0,625 г будесонида растворяли в 15 мл этилового спирта при нагревании на водяной бане до 40°С. После полного растворения к полученному раствору добавляли 6,25 г фосфолипида и перемешивали до полного растворения. Полученный раствор упаривали на роторном испарителе до получения пленки.

25 г мальтозы растворяли в 200 мл воды с температурой 40°С. К полученной пленке добавляли полученный водный раствор мальтозы. С помощью бытового блендера проводили гомогенизацию полученной смеси, после чего доводили объем смеси до 250 мл. Полученную грубую эмульсию пропускали через микрофлюидайзер (Microfluidizer Processor MHO EN-30K (США) при давлении 1000 бар±10% бар, 6 циклов при температуре не выше 40°С. Последовательно фильтровали препарат через фильтр 0,45 мкм и стерилизующий фильтр 0,22 мкм. Определяли размер частиц в препарате с помощью прибора Beckman N5. Анализировали содержание будесонида в полученном препарате с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).

Основные характеристики фосфолипидной композиции будесонида представлены в таблице 1.

Полученный раствор фильтровали через фильтр 5 мкм, затем через фильтр 0,22 мкм (стерилизующая фильтрация). Повторно регистрировали светопропускание при 660 нм (наблюдали его увеличение). Определяли размер частиц в препарате с помощью прибора Beckman N5. Анализировали содержание будесонида в полученном препарате с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).

В таблице 2 приведены показатели фосфолипидной композиции будесонида при различном соотношении входящих в нее компонентов.

Наиболее оптимальной по размеру частиц и другим физико-химическим показателям оказалась композиция №1, которая и была выбрана для дальнейших экспериментов на животных для изучения ее специфической активности.

Полученный проанализированный раствор разливали в поддоны из нержавеющей стали и подвергали сублимационной сушке. Высушенный препарат размалывали с помощью шаровой мельницы, протирали через сетку размером 125 мкм и упаковывали в пакетики саше, этикетировали и отбирали пробы для аналитического и микробиологического контроля.

Форма выпуска: пакетики саше для сухой ингаляции по 250 мг (50 доз) с содержанием будесонида 9,5-10,5 мг на пакетик.

Пример 2. Исследование биологической эффективности разработанной композиции в экспериментах in vitro и in vivo.

Сравнение специфической активности показало преимущества фосфолипидной композиции будесонида согласно настоящему изобретению (композиции №1 из примера 1) в сравнении со свободной субстанцией: в экспериментах in vitro показано почти двукратное увеличение эффективности торможения анафилактической контрактуры гладких мышц кишечника, сенсибилизированных морских свинок на фоне предварительного введения «свободного» будесонида и в составе фосфолипидных частиц.

На модели гистамин-индуцированного бронхоспазма in vivo было показано, что при сухой ингаляции фосфолипидная композиция будесонида, согласно настоящему изобретению, существенно (в 2-2,5 раза) эффективнее тормозит как острую фазу, так и подострую фазу бронхоспазма. При этом особенно важен тот факт, что наряду со значительным торможением бронхоспазма при использовании фосфолипидной композиции будесонида, у 30-40% животных бронхоспазм вообще не развивался.

В экспериментах in vivo было показано положительное влияние ингаляционного введения фосфолипидных наночастиц полученных из высокоочищенного (80-95%) соевого фосфатидилхолина на биохимические маркеры оксидативного стресса на модели бронхиальной астмы у крыс. Так, было установлено, что при бронхиальной астме в сурфактанте легких экспериментальных животных достоверно снижается содержание фосфатидилхолина (ФХ) и дипальмитоилфосфатидилхолина (ДФХ), но увеличивается содержание лизофосфатидилхолина (ЛФХ). Суммарное содержание общих фосфолипидов (ОФ) уменьшается. При ингаляционном введении фосфолипидных наночастиц наблюдалось как восстановление уровня содержания общих фосфолипидов с 58% в группе контроля до 70% в группе леченных животных, так и увеличение в группе леченных животных фракций фосфатидилхолина до 8,9% против 6,9% в группе контроля и фракции ДФХ до 45,7% против 38,5% в группе контроля. Также показано практически полное восстановление до физиологического уровня ЛФХ и гидроперекисей липидов (ГПЛ).

Сравнительный анализ функционального состояния тучных клеток после аппликации будесонида в свободном виде и в составе фосфолипидных наночастиц на плевру показал, что при инкубации медиастинальной плевры со свободным будесонидом и будесонидом в составе фосфолипидных наночастиц согласно настоящему изобретению число дегранулирующих форм снижалось в 1,4 раза и в 2,5 раза, соответственно.

Таким образом, проведенные эксперименты доказывают прямое репарационное действие фосфолипидов на поврежденные мембраны клеток, что играет существенную роль в лечении оксидативного стресса, имеющего немаловажное значение патогенезе хронической обструктивной болезни легких и БА на молекулярно-клеточном уровне.

Пример 3. Изучение противовоспалительного действия Будесонид-НФ на модели бронхоальвеолита у крыс.

Изучение противовоспалительного действия препарата Будесонид-НФ было проведено на крысах популяции Вистар. Бронхоальвеолит моделировали интратрахеальным введением сефадекса А-25 в дозе 5 мг/кг массы тела. Развитие воспалительного процесса в легких крыс исследовалось в динамике на 7-е сутки после аэрозольного воздействия сефадекса А-25. Исследуемый препарат Будесонид-НФ и препарат сравнения «Будесонид, порошок для ингаляций дозированный» (Орион Корпорейшн ОРИОН ФАРМА», Финляндия) вводили ингаляционно (всего 7 введений), животным контрольной группы вводили ингаляционно мальтозу.

В результате проведенного сравнительного исследования препарата «Будесонид, порошок для ингаляций» (ИБМХ, Россия) в сравнении с известным препаратом «Будесонид, порошок для ингаляций дозированный» (Орион Корпорейшн ОРИОН ФАРМА», Финляндия) по параметрам противовоспалительного действия при моделировании бронхоальвеолита у крыс было показано что ингаляционное введение препарата «Будесонид-НФ, порошок для ингаляций» (ИБМХ, Россия) в дозах 0,051 мг/кг, 0,102 мг/кг и 0,153 мг/кг в течение 7 дней приводило к снижению степени выраженности явлений воспаления, что проявлялось в уменьшении интерстициального отека вокруг бронхов; снижении выраженности воспалительного инфильтрата; отсутствии инфильтрата в просвете бронхов и мелких бронхиол; уменьшении воспалительного инфильтрата вокруг бронхиол; снижении количества нейтрофилов в бронхо-альвеолярного смыве.

Степень корригирующего действия препарата «Будесонид-НФ, порошок для ингаляций» (ИБМХ, Россия) зависела от дозы препарата. Наиболее выраженный эффект был достигнут в дозе 0,153 мг/кг.

Эффективность противовоспалительного действия препаратов Будесонид-НФ и Будесонид-Орион была сравнима. По ряду показателей противовоспалительный эффект препарата «Будесонид-НФ, порошок для ингаляций» (ИБМХ, Россия), был выше, чем препарата «Будесонид, порошок для ингаляций дозированный» (Орион Корпорейшн ОРИОН ФАРМА», Финляндия).

Гистологически более высокая эффективность препарата Будесонид-НФ по сравнению с препаратом Будесонид-Орион, проявлялась в более быстром восстановлении толщины межальвеолярных перегородок и меньшем воспалительном инфильтрате вокруг альвеол.

Морфометрически выявлено достоверно меньшее количество нейтрофилов в межальвеолярных перегородках на 7-ом дне бронхоальвеолита при применении препарата Будесонид-НФ по сравнению с препаратом сравнения «Будесонид, порошок для ингаляций дозированный» (Орион Корпорейшн ОРИОН ФАРМА», Финляндия). Также при исследовании бронхоальвеолярного смыва отмечено достоверно меньшее количество нейтрофилов в бронхоальвеолярном смыве (2,7±0,6 и 4,6±0,2, соответственно).

Таким образом, применение препарата Будесонид-НФ в течение 7 дней на фоне развивающегося бронхоальвеолита приводило к снижению степени выраженности явлений воспаления, что проявлялось в:

- уменьшении интерстициального отека вокруг бронхов;

- снижении выраженности воспалительного инфильтрата;

- отсутствии инфильтрата в просвете бронхов и мелких бронхиол;

- уменьшении воспалительного инфильтрата вокруг бронхиол.

Пример 4. Изучение противовоспалительной активности фармакологических веществ на модели воспаления in vivo (модель бронхоальвеолита у крыс).

Модель Сефадекс А-25 стимулируемого бронхоальвеолита характеризуется воспалением с аллергическим компонентом, локализованным в ткани легкого.

Для постановки этой модели использовали крыс-самцов популяции Вистар (масса тела 250-260 г), которая склонна к развитию воспалительных реакций со стороны легочной ткани.

В качестве ирританта использовали Сефадекс А-25. При попадании в дыхательные пути сефадекс А-25, увлажняясь, образует гель. Высокомолекулярные полимеры, к которым относится сефадекс А-25, способны вызывать в легких развитие воспалительных реакций с образованием гранулем.

Введение Сефадекса А-25 в дозе 5 мг/кг осуществлялось с помощью дозирующего ингаляционного устройства для введения сухих порошков лабораторным животным под легким эфирным наркозом.

Развитие воспалительного процесса в легких крыс исследовалось в динамике на 7-е сутки после аэрозольного воздействия Сефадекса А-25.

Ингаляционный препарат Будесонид-НФ вводили в изученной эффективной дозе 0,153 мг/кг, используя при этом образцы с различным размером частиц

Группы животных (n=50):

1. Интактные животные (n=10)

2. Контроль-бронхоальвеолит (мальтоза) (n=10)

3. Будесонид-НФ (испытуемый препарат) d=50 нм (n=10),

4. Будесонид-НФ (испытуемый препарат) d-67 нм (n=10),

5. Будесонид-НФ (испытуемый препарат) d=100 нм (п=10),

Использовали курсовое (ежедневно в течение 7 дней) введение лекарственного препарата, причем ингаляцию сефадекса и первую ингаляцию препаратов производили с коротким интервалом (60 мин) между воздействиями. Эффект лечения оценивали через 7 суток после индукции воспаления.

Оценка эффективности исследуемых препаратов проводили по нескольким критериям:

- гистологическое исследование легких;

- морфометрическая характеристика легочной ткани крыс;

- цитологическое исследование бронхоальвеолярного смыва (определение цитоза и эндопульмональная цитограмма).

Гистологическое исследование легких

Гистологические исследования проведены через 7 дней после ингаляционного введения Сефадекса А-25. На фоне развития бронхоальвеолита в легких в просвете бронхов отмечен воспалительный инфильтрат, наблюдался также резко выраженный отек рыхлой соединительной ткани, окружающей бронхи и сопутствующие им сосуды. Резко усиливалась продукция слизи железами и бокаловидными клетками. Наблюдалось слущивание покровного призматического эпителий слизистой оболочки.

Наблюдалась инфильтрация соединительной ткани вокруг бронхов нейтрофильными и эозинофильными лейкоцитами, а также скоплениями лимфоидных элементов. В альвеолах отмечали скопления экссудата с примесью слизи, много нейтрофилов, макрофагов, эритроцитов, слущенного альвеолярного эпителия. Экссудат распределялся неравномерно.

Межальвеолярные перегородки были утолщены и пропитаны клеточным инфильтратом. Отмечены участки легочной ткани с расширением альвеолярных ходов, истончением и выпрямлением стенок альвеол, а также деструкцией межальвеолярных перегородок.

В гистологических срезах легких крыс в полях зрения микроскопа определяли большое число нейтрофилов в межальвеолярных перегородках, объемная плотность альвеолита составила 22,1±2,6%

Морфометрическое исследование бронхоассоциированной лимфоидной ткани на 7-е сутки после аэрозольного воздействия Сефадекса А-25 показало максимальное увеличение объемной плотности лимфоидных фолликулов (46,4±1,1%).

Курсовое применение в течение 7 дней препарата «Будесонид-НФ, порошок для ингаляций» (ИБМХ, Россия) в дозе 0,153 мг/кг

Применение исследуемого препарата Будесонид-НФ с размером частиц d=50 нм снижало степень выраженности явлений воспаления, характерных для контрольной группы. Это проявлялось в уменьшении интерстициального отека вокруг бронхов и снижении степени выраженности воспалительного инфильтрата. Бронхи и мелкие бронхиолы имели открытый чистый просвет.

Использование Будесонида-НФ с размером частиц d=67 нм приводило к нормализации структуры легочной ткани

При лечении препаратом в Будесонид-НФ с размером частиц d=100 нм отмечался незначительный воспалительный инфильтрат вокруг бронхиол и участки легочной ткани с неравномерно утолщенными стенками альвеол и уменьшением их просвета.

Количество нейтрофилов в межальвеолярных перегородках и объемная плотность альвеолита при морфометрическом исследовании легких на единицу площади представлены в таблице 3.

В макропрепаратах легких крыс, получавших ингаляционно препарат «Будесонид-НФ, порошок для ингаляций» (ИБМХ, Россия), объемная плотность бронхоассоциированной лимфоидной ткани, оцениваемой по лимфоидным фолликулам в стенке бронхов показана в таблице 3.

Таким образом, бронхоальвеолит на 7-ой день моделирования в контрольной серии гистологически можно было охарактеризовать следующим образом:

• наличие инфильтрата в просвете бронхов;

• выраженный отек рыхлой соединительной ткани, окружающей бронхи и сопутствующие им сосуды;

• усиление выделения слизи железами и бокаловидными клетками;

• слущивание покровного призматического эпителия слизистой оболочки;

• инфильтрация соединительной ткани вокруг бронхов нейтрофильными и эозинофильными лейкоцитами;

• скопление экссудата с примесью слизи, нейтрофилов, макрофагов, эритроцитов, слущенного альвеолярного эпителия, фибрина;

• утолщение межальвеолярных перегородок;

• наличие участков легочной ткани с расширением альвеолярных ходов, истончением и выпрямлением стенок альвеол, их растяжением и деструкцией межальвеолярных перегородок.

Было изучено применение препарата «Будесонид-НФ, порошок для ингаляций» (ИБМХ, Россия) в дозе 0,153 мг/кг в течение 7 дней на фоне развивающегося бронхоальвеолита. Исследовали 3 образца препарата с разным размером частиц: 50 нм, 67 нм и 100 нм. Применение препарата приводило к снижению степени выраженности явлений воспаления, что проявлялось в:

1. уменьшении интерстициального отека вокруг бронхов;

2. снижении выраженности воспалительного инфильтрата;

3. отсутствии инфильтрата в просвете бронхов и мелких бронхиол;

4. уменьшении воспалительного инфильтрата вокруг бронхиол.

Наиболее выраженное улучшение было получено при размере частиц препарата 67 нм (таблица 3).

Цитологическое исследование бронхоальвеолярного смыва По данным эндопульмональной цитограммы бронхоальвеолярного смыва введение трех образцов препарата «Будесонид-НФ, порошок для ингаляций» (ИБМХ, Россия) с разным размером частиц (50 нм, 67 нм и 100 нм) достоверно изменяло цитологические показатели относительно контрольной группы (таблица 4). Отмечалась тенденция в изменении общего количества клеток, количества макрофагов.

Таким образом, в результате проведенного сравнительного исследования препарата «Будесонид, порошок для ингаляций» (ИБМХ, Россия) с различным размером частиц будесонида, включенного в фосфолипидные наночастицы, по параметрам противовоспалительного действия при моделировании бронхоальвеолита у крыс было показано что ингаляционное введение препарата «Будесонид-НФ, порошок для ингаляций» (ИБМХ, Россия) в дозе 0,153 мг/кг в течение 7 дней приводило к снижению степени выраженности явлений воспаления, что проявлялось в уменьшении интерстициального отека вокруг бронхов; снижении выраженности воспалительного инфильтрата; отсутствии инфильтрата в просвете бронхов и мелких бронхиол; уменьшении воспалительного инфильтрата вокруг бронхиол; снижении количества нейтрофилов в бронхо-альвеолярного смыве.

Степень корригирующего действия препарата «Будесонид-НФ, порошок для ингаляций» (ИБМХ, Россия) зависела от размера частиц препарата. Наиболее выраженный эффект был достигнут при размере частиц около 67 нм (64-70 нм).

Гистологически более высокая эффективность препарата Будесонид-НФ, порошок для ингаляции с размером частиц около 67 нм проявлялась в более быстром восстановлении толщины межальвеолярных перегородок и меньшем воспалительном инфильтрате вокруг альвеол.

Морфометрически обнаружено меньшее количество нейтрофилов в межальвеолярных перегородках на 7-ом дне бронхоальвеолита при применении препарата Будесонид-НФ с размером частиц около 67 нм, а также достоверно меньшее количество нейтрофилов в бронхоальвеолярном смыве.

ЛИТЕРАТУРА

1 Donnelly R, Seale JP Clinical pharmacokinetics of inhaled budesonide. // Clin Pharmacokinet. - 2001. V. 40(6). - P. 427-440

2 Авдеев C.H. Использование небулайзеров в клинической практике. // Русс. Мед. Журн. - 2001. - V. 9(5). - Р. 189-196

3. Hofkens W., Hoven J.M., Pesman G.J., Nabbe К.C. Et al. Safety of glucocorticoids can be improved by lower yet still effective dosages of liposomal steroid formulations in murine antigen-induced arthritis: Comparison of prednisolone with budesonide. International Journal of Pharmaceutics 416 (2011) 493-498.

4. Hohlfeld J.M. Potential role of surfactant in asthma. Appl. Cardiopulm. Pathophysiol. 2004; 13 (1): 44-45.

5. Патент РФ 2391966. Наносистема на основе растительных фосфолипидов для включения биологически активных соединений и способ ее получения (варианты) / Арчаков А.И., Гусева М.К., Учайкин В.Ф., Ипатова О.М., Тихонова Е.Г., Медведева Н.В., Лисица А.В., Прозоровский В.Н., Стрекалова О.С., Широнин А.В.; ООО «ИБМХ - ЭкоБиоФарм» (RU). - №2009104784; заявл. 13.02.2009; опубл. 20.06.2010, Бюл. №17 - 13 с.

6. Патент РФ 2406537. Способ получения эмульсии на основе растительных фосфолипидов / Арчаков А.И., Ипатова О.М., Лисица А.В., Медведева Н.В., Тихонова Е.Г., Стрекалова О.С., Широнин А.В.; ИБМХ (RU). - №2009104785; заявл. 13.02.2009; опубл. 20.12.2011, Бюл. №35. - 7 с.

7. Hoven J.М., Hofkens W., Wauben M.H.M., Wagenaar-Hilbers J.P.A. et al. Optimizing the therapeutic index of liposomal glucocorticoids in experimental arthritis. Journal of Pharmaceutics 416 (2011) 471-47.

8. ME, Curiel T, Gomez JG, Jorge M. Role of pegylated liposomal doxorubicin (Caelyx) in the treatment of relapsing ovarian cancer. Anticancer Drugs. 2007 Jun;18(5):611-7.

9. Rahoui N, Jiang B, Taloub N, Huang YD Spatio-temporal control strategy of drug delivery systems based nano structures. //J Control Release. - 2017. - V. 255. - P. 176-201

10. Mitragotri S, Lammers T, Bae YH, Schwendeman S, De Smedt S, Leroux JC, Peer D, Kwon 1С, Harashima H, Kikuchi A, Oh YK, Torchilin V, Hennink W, Hanes J, Park K. Drug Delivery Research for the Future: Expanding the Nano Horizons and Beyond. //J Control Release.-2017.-V. 246.-P. 183-184

11. Китель Г.Б., Харабад Жах-Ян Я. Показатели биологической нормы для лабораторных животных. Ростов-на-Дону, 1978. - 95 с.

12. Проблемы нормы в токсикологии /под ред. проф. И.М. Трахтенберга. М.: Медицина, 1991.-203 с.

Изобретение относится к области медицины и химико-фармацевтической промышленности. Фармацевтическая композиция для лечения обструктивных заболеваний дыхательных путей в виде сухого порошка для ингаляций с размером частиц 64-70 нм содержит будесонид, фосфатидилхолин растительного происхождения и мальтозу при следующем соотношении компонентов, мас.%: будесонид 0,38-0,42; фосфатидилхолин 19-21, мальтоза 75,62-83,58. 1 з.п. ф-лы, 4 табл.

1. Фармацевтическая композиция для лечения обструктивных заболеваний дыхательных путей, характеризующаяся тем, что она представляет собой сухой порошок для ингаляции с размером частиц 64-70 нм, содержащий будесонид, фосфатидилхолин и мальтозу при следующем соотношении компонентов, мас.%:

будесонид - 0.38-0,42,

фосфатидилхолин - 19,00-21,00,

мальтоза - 75,62-83,58.

2. Композиция по п. 1, характеризующаяся тем, что содержит будесонид, фосфатидилхолин и мальтозу при следующем соотношении компонентов, мас.%:

будесонид - 0.40,

фосфатидилхолин - 20,00,

мальтоза - 79,60.