Перечень последовательностей

Настоящее изобретение зарегистрировано вместе с перечнем последовательностей в электронном формате. Перечень последовательностей представлен в виде файла под названием BIOL0254WOSEQ_ST25.txt, созданного 28 апреля 2015 года, размером 0,98 Мб. Информация о перечне последовательностей в электронном формате в полном объеме включена в настоящий документ посредством ссылки.

Область техники

В настоящем документе предложены способы, соединения и композиции для снижения экспрессии мРНК и ангиопоэтин-подобного белка 3 (ANGPTL3) у животного. В настоящем документе предложены также способы, соединения и композиции, содержащие ингибитор ANGPTL3, для облегчения у животного заболеваний или патологических состояний, связанных с ANGPTL3. Такие способы, соединения и композиции пригодны, например, для лечения, предупреждения, отсрочки или облегчения любого одного или более из сердечно-сосудистого заболевания или метаболического синдрома, или его симптома у животного.

Уровень техники

Диабет и ожирение (которые иногда обобщенно называют «диажирением») связаны друг с другом в том отношении, что ожирение, как известно, обостряет патологию ожирения, и более 60% диабетиков страдают от ожирения. Большинство случаев ожирения у людей связано с резистентностью к инсулину и резистентностью к лептину. Действительно, было сделано предположение, что ожирение может оказывать еще большее влияние на действие инсулина, чем сам диабет (Sindelka et al., Physiol Res., 2002, 51, 85-91). Кроме того, известно, что некоторые соединения, имеющиеся в продаже для лечения диабета, вызывают рост массы, что является очень нежелательным побочным эффектом при лечении указанного заболевания.

Сердечно-сосудистые заболевания также взаимосвязаны с ожирением и диабетом. Сердечно-сосудистые заболевания охватывают широкий ряд этиологии и имеют настолько же широкое разнообразие причинных факторов и взаимосвязанных компонентов. Многие причинные факторы способствуют таким симптомам как повышенные уровни холестерина в плазме, включая холестерин липопротеинов невысокой плотности (не-HDL-C), а также другие расстройства, связанные с липидами. Такие расстройства, связанные с липидами, в целом, называют дислипидемией, включая гиперлипидемию, гиперхолестеринемию и гипертриглицеридемию, среди прочих показаний. Повышенный уровень холестерина не-HDL связан с атерогенезом и его осложнениями, включая сердечно-сосудистые заболевания, такие как артериосклероз, болезнь коронарной артерии, инфаркт миокарда, ишемический инсульт и другие формы болезней сердца. Указанные заболевания являются наиболее распространенными типами заболеваний в промышленно развитых странах. Действительно, по оценкам, 12 миллионов людей в Соединенных Штатах Америки страдают от болезни коронарной артерии, и примерно 36 миллионов людей нуждаются в лечении повышенных уровней холестерина.

Эпидемиологические и экспериментальные данные демонстрируют, что высокие уровни циркулирующих триглицеридов (TG) могут способствовать сердечно-сосудистому заболеванию и множеству метаболических расстройств (Valdivielso et al., 2009, Atherosclerosis Zhang et al., 2008, Circ Res. 1; 102(2):250-6). TG, полученные из экзогенных или эндогенных источников, внедряются и секретируются в хиломикронах из кишечника или в липопротеинах очень низкой плотности (VLDL) из печени. Попадая в кровоток, TG гидролизуются липопротеинлипазой (LpL), и затем образованные свободные жирные кислоты поглощаются локальными тканями и используются как источник энергии. Благодаря выраженному действию, которое LpL оказывает на TG в плазме и метаболизм в целом, большой интерес представляет собой открытие и разработка соединений, которые влияют на активность LpL.

Метаболический синдром представляет собой сочетание медицинских расстройств, которые увеличивают риск сердечно-сосудистого заболевания и диабета. У некоторых индивидуумов симптомы, включая высокое кровяное давление, высокий уровень триглицеридов, сниженное содержание HDL и ожирения, как правило, возникают совместно. Такое сочетание поражает многих людей кластерным образом. В некоторых исследованиях рассчитана распространенность в США, составляющая до 25% населения. Метаболический синдром известен под многими другими названиями, такими как (метаболический) синдром X, синдром резистентности к инсулину, синдром Ривена или CHAOS. При высокой распространенности сердечно-сосудистых расстройств и метаболических расстройств сохраняется потребность в улучшенных подходах к лечению указанных состояний.

Ангиопоэтины представляют собой семейство секретируемых факторов роста. В месте с их соответствующими эндотелий-специфичными рецепторами, ангиопоэтины играют важную роль в ангиогенезе. Один из членов семейства, ангиопоэтин-подобный 3 (также известный как ангиопоэтин-подобный белок 3, ANGPT5, ANGPTL3 или ангиопоэтин 5), экспрессируется преимущественно в печени и предположительно играет роль в регуляции метаболизма липидов (Kaplan et al., J. Lipid Res., 2003, 44, 136-143). Полногеномные исследования ассоциаций (GWAS), изучающие геном на наличие общих вариантов, связанных с концентрациями HDL, LDL и триглицеридов в плазме, выявили связь между триглицеридами и однонуклеотидными полиморфизмами (SNP) вблизи ANGPTL3 (Wilier et al., Nature Genetics, 2008, 40(2):161-169). Индивидуумы с гомозиготными мутациями ANGPTL3 с потерей функцией демонстрируют очень низкие уровни всех атерогенных липидов и липопротеинов в плазме, таких как общий холестерин (ТС) и TG, холестерин липопротеинов низкой плотности (LDL-C), аполипопротеин В (ароВ), не-HDL-C, а также HDL-C (Romeo et al. 2009, J Clin Invest, 119(1):70-79; Musunuru et al. 2010 N Engl J Med, 363:2220-2227; Martin-Campos et al. 2012, Clin Chim Acta, 413:552-555; Minicocci et al. 2012, J Clin Endocrinol Metab, 97:e1266-1275; Noto et al. 2012, Arterioscler Thromb Vasc Biol, 32:805-809; Pisciotta et al. 2012, Circulation Cardiovasc Genet, 5:42-50). Такой клинический фенотип назван термином «наследственная комбинированная гиполипидемия (FHBL2). Несмотря на снижение секреции VLDL, субъекты с FHBL2 не демонстрируют увеличение содержания печеночного жира. Кроме того, они имеют более низкие уровни глюкозы и инсулина в плазме и, что важно, у таких субъектов нет диабета и сердечно-сосудистого заболевания. До настоящего времени не описаны противоположные клинические фенотипы (Minicocci et al. 2013, J of Lipid Research, 54:3481-3490). Было показано, что снижение ANGPTL3 приводит к снижению уровней TG, холестерина и LDL в животных моделях (U.S., серийный номер 13/520997; публикация РСТ WO 2011/085271). Мыши с дефицитом ANGPTL3 имеют очень низкие уровни триглицеридов (TG) в плазме и холестерина, тогда как сверхэкспрессия приводит к противоположному эффекту (Koishi et al. 2002; Koster 2005; Fujimoto 2006). Соответственно, потенциальная роль ANGPTL3 в метаболизме липидов делает его перспективной мишенью для терапевтического вмешательства.

До настоящего времени существуют лишь ограниченные стратегии для лечения кардиометаболического заболевания путем прямого направленного воздействия на уровни ANGPTL3. Ранее были предложены или разработаны фрагменты полипептида ANGPTL3 (U.S. серийный номер 12/128545), анти-ANGPTL3 антитела (U.S. серийный номер 12/001012) и ингибиторы нуклеиновой кислоты ANGPTL3, в том числе антисмысловые олигонуклеотиды (U.S. серийный номер 13/520997; публикация РСТ WO 2011/085271; в полном объеме включенные в настоящий документ посредством ссылки), но ни одно из указанных соединений, напрямую нацеленных на ANGPTL3, не было одобрено для лечения кардиометаболического заболевания. Соответственно, существует неудовлетворенная потребность в высокоэффективных и переносимых соединениях для ингибирования ANGPTL3. Изобретение, описанное в настоящем документе, относится к открытию новых, высокоэффективных ингибиторов экспрессии ANGPTL3 и к их применению при лечении.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В настоящем описании предложены композиции и способы модулирования экспрессии мРНК и белка ANGPTL3. В некоторых вариантах реализации композиция представляет собой специфический ингибитор ANGPTL3. В некоторых вариантах реализации специфический ингибитор ANGPTL3 снижает экспрессию мРНК и белка ANGPTL3.

В некоторых вариантах реализации композиция представляет собой специфический ингибитор ANGPTL3. В некоторых вариантах реализации специфический ингибитор ANGPTL3 представляет собой нуклеиновую кислоту. В некоторых вариантах реализации нуклеиновая кислота представляет собой антисмысловое соединение. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение представляет собой модифицированный олигонуклеотид. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение представляет собой модифицированный олигонуклеотид с присоединенной группой конъюгата.

В некоторых вариантах реализации специфический ингибитор ANGPTL3 представляет собой модифицированный олигонуклеотид с группой конъюгата, причем модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и имеет последовательность азотистых оснований, содержащую по меньшей мере 8, по меньшей мере 9, по меньшей мере 10, по меньшей мере 11, по меньшей мере 12, по меньшей мере 13, по меньшей мере 14, по меньшей мере 15, по меньшей мере 16, по меньшей мере 17, по меньшей мере 18, по меньшей мере 19 или 20 смежных азотистых оснований последовательности азотистых оснований SEQ ID NO: 77.

В некоторых вариантах реализации специфический ингибитор ANGPTL3 представляет собой модифицированный олигонуклеотид с группой конъюгата, причем модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и содержит последовательность азотистых оснований, содержащую часть из по меньшей мере 8 смежных азотистых оснований, комплементарную равной по длине части азотистых оснований 1140-1159 SEQ ID NO: 1, при этом последовательность азотистых оснований модифицированного олигонуклеотида по меньшей мере на 80% комплементарна SEQ ID NO: 1.

В некоторых вариантах реализации специфический ингибитор ANGPTL3 представляет собой модифицированный олигонуклеотид с группой конъюгата, причем модифицированный олигонуклотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и содержит последовательность азотистых оснований, содержащую часть из по меньшей мере 8 смежных азотистых оснований, комплементарную равной по длине части азотистых оснований 9715-9734 SEQ ID NO: 2, при этом последовательность азотистых оснований модифицированного олигонуклеотида по меньшей мере на 80% комплементарна SEQ ID NO: 2.

В некоторых вариантах реализации специфический ингибитор ANGPTL3 представляет собой модифицированный олигонуклеотид с группой конъюгата, причем модифицированный олигонуклеотид состоит из 20 связанных нуклеозидов и имеет последовательность азотистых оснований, содержащую по меньшей мере 8 смежных азотистых оснований SEQ ID NO: 77, где модифицированный олигонуклеотид содержит: (a) сегмент гэп, состоящий из десяти связанных дезоксинуклеозидов; (b) сегмент 5' крыла, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; (с) сегмент 3' крыла, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; и при этом сегмент гэп расположен между сегментом 5' крыла и сегментом 3' крыла, причем каждый нуклеозид каждого сегмента крыла содержит 2'-O-метоксиэтильный сахар, где каждая межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь, и где каждый цитозиновый остаток представляет собой 5-метилцитозин.

В некоторых вариантах реализации специфический ингибитор ANGPTL3 представляет собой модифицированный олигонуклеотид с группой конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 20 связанных нуклеозидов и имеет последовательность азотистых оснований, состоящую из по меньшей мере 8 смежных азотистых оснований SEQ ID NO: 77, где модифицированный олигонуклеотид состоит из: (a) сегмент гэп, состоящий из десяти связанных дезоксинуклеозидов; (b) сегмент 5' крыла, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; (с) сегмент 3' крыла, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; и при этом сегмент гэп расположен между сегментом 5' крыла и сегментом 3' крыла, причем каждый нуклеозид каждого сегмента крыла содержит 2'-O-метоксиэтильный сахар, где каждая межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь, и где каждый цитозиновый остаток представляет собой 5-метилцитозин.

С некоторых вариантах реализации настоящего описания предложены сопряженные антисмысловые соединения. В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложены сопряженные антисмысловые соединения, содержащие антисмысловой олигонуклеотид, комплементарный транскрипту нуклеиновой кислоты. В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложены способы, включающие приведение в контакт клетки с сопряженным антисмысловым соединением, содержащим антисмысловой олигонуклеотид, комплементарный транскрипту нуклеиновой кислоты. В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложены способы, включающие приведение в контакт клетки с сопряженным антисмысловым соединением, содержащим антисмысловой олигонуклеотид, и уменьшение количества или активности транскрипта нуклеиновой кислоты в клетке.

Ранее был описан асиалогликопротеиновый рецептор (ASGP-R). См. например, Park et al., PNAS, том. 102, №47, сс. 17125-17129 (2005). Такие рецепторы экспрессируются на клетках печени, в частности, гепатоцитах. Кроме того, было показано, что соединения, содержащие кластеры трех N-ацетилгалактозаминовых (GalNAc) лигандов, способны связываться с ASGP-R, приводя к захвату указанного соединения в клетку. См. например, Khorev et al., Bioorganic and Medicinal Chemistry, 16, 9, сс. 5216-5231 (май, 2008). Соответственно, конъюгаты, содержащие такие кластеры GalNAc, использовали для облегчения захвата некоторых соединений в клетки печени, в частности, гепатоциты. Например, было показано, что некоторые GalNAc-содержащие конъюгаты увеличивают активность дуплексных миРНК соединений в клетках печени in vivo. В таких случаях GalNAc-содержащий конъюгат, как правило, прикрепляется к смысловой цепи дуплекса миРНК. Поскольку смысловая цепь отбрасывается перед окончательной гибридизацией антисмысловой цепи с нуклеиновой кислотой-мишенью, то маловероятно, что такой конъюгат будет влиять на активность. Как правило, конъюгат присоединяется к 3'-концу смысловой цепи миРНК. См. например, патент США 8106022. Некоторые группы конъюгата, описанные в настоящем документе, более активны и/или синтезируются легче, чем группы конъюгата, описанные ранее.

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения конъюгаты присоединяются к одноцепочечным антисмысловым соединениям, включая, но не ограничиваясь ими, антисмысловые соединения на основе РНКазы Н и антисмысловые соединения, которые изменяют сплайсинг целевой нуклеиновой кислоты пре-мРНК. В таких вариантах реализации конъюгат должен оставаться присоединенным к антисмысловому соединению достаточно долго для обеспечения преимущества (улучшенного захвата в клетки), но затем он должен либо расщепляться, либо иным образом не препятствовать последующим стадиям, необходимым для активности, таким как гибридизация с целевой нуклеиновой кислотой и взаимодействие с РНКазой Н или ферментами, связанными со сплайсингом или модулированием сплайсирования. Такой баланс свойств более важен при осаждении одноцепочечных антисмысловых соединений, чем соединений миРНК, где конъюгат может быть просто присоединен к смысловой цепочке. В настоящем документе описаны одноцепочечные антисмысловые соединения, обладающие улучшенной активностью в клетках печени in vivo, по сравнению с таким же антисмысловым соединением, не имеющим конъюгата. Учитывая необходимый баланс свойств для этих соединений, такая улучшенная активность является неожиданной.

В некоторых вариантах реализации группы конъюгата согласно настоящему документу содержат расщепляемый фрагмент. Как было отмечено, не ограничиваясь каким-либо механизмом, логично, что конъюгат должен сохраняться у соединения достаточно долго для обеспечения усиления захвата, но после этого желательно, чтобы некоторая его часть или, в идеале, весь конъюгат расщеплялся, выделяя исходное соединение (например, антисмысловое соединение) в его наиболее активной форме. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой расщепляемый нуклеозид. Такие варианты реализации обладают преимуществом эндогенных нуклеаз в клетке за счет присоединения остальной части конъюгата (кластера) к антисмысловому олигонуклеотиду через нуклеозид при помощи одной или более расщепляемых связей, таких как фосфодиэфирная связь. В некоторых вариантах реализации кластер связан с расщепляемым нуклеозидом через фосфодиэф ирную связь. В некоторых вариантах реализации расщепляемый нуклеозид присоединен к антисмысловому олигонуклеотиду (антисмысловому соединению) фосфодиэфирную связью. В некоторых вариантах реализации группа конъюгата может содержать два или три расщепляемых нуклеозида. В таких вариантах реализации указанные расщепляемые нуклеозиды связаны друг с другом, с антисмысловым соединением и/или с кластером посредством расщепляемых связей (таких как фосфодиэфирная связь). Некоторые конъюгаты по настоящему документу не содержат расщепляемый нуклеозид, а вместо этого содержат расщепляемую связь. Показано, что достаточное расщепление конъюгата из олигонуклеотида обеспечивается по меньшей мере за счет одной связи, которая легко поддается расщеплению в клетке (расщепляемая связь).

В некоторых вариантах реализации сопряженные антисмысловые соединения представляют собой пролекарства. Такие пролекарства вводят животному, и они в конечном итоге метаболизируются до более активной формы. Например, сопряженные антисмысловые соединения расщепляются с удалением всего или части конъюгата, приводя к активной (или более активной) форме антисмыслового соединения, не содержащего всего или части конъюгата.

В некоторых вариантах реализации конъюгаты присоединены на 5'-конце олигонуклеотида. Некоторые такие 5'-конъюгаты расщепляются более эффективно, чем аналоги, имеющие такую же группу конъюгата, присоединенную на 3'-конце. В некоторых вариантах реализации улучшенная активность может коррелировать с улучшенным расщеплением. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотиды, содержащие конъюгат на 5'-конце, обладают более высокой эффективностью, чем олигонуклеотиды, содержащие конъюгат на 3'-конце (см., например, Примеры 56, 81, 83 и 84). Кроме того, 5'-присоединение обеспечивает более простой синтез олигонуклеотида. Как правило, олигонуклеотиды синтезируют на твердой подложке в направлении от 3' к 5'. Для получения 3'-сопряженного олигонуклеотида, как правило присоединяют предварительно сопряженный 3'-нуклеозид к твердой подложке, а затем обычным путем создают олигонуклеотид. Однако присоединение такого сопряженного нуклеозида к твердой подложке усложняет синтез. Кроме того, используя такой подход, конъюгат затем присутствует в ходе всего синтеза олигонуклеотида и может разрушаться во время последующих стадий или может ограничивать типы реакций и реагентов, которые можно использовать. Используя структуры и методики, описанные в настоящем документе для 5'-сопряженных олигонуклеотидов, можно синтезировать олигонуклеотид при помощи стандартных автоматизированных методик и внедрять в конъюгат последний (5'-крайний) нуклеозид или после отделения олигонуклеотида от твердой подложки.

С учетом известного уровня техники и настоящего описания, специалисты в данной области техники могут легко получить любые из конъюгатов и сопряженных олигонуклеотидов, описанных в настоящем документе. Кроме того, синтез некоторых таких конъюгатов и сопряженных олигонуклеотидов, описанных в настоящем документе, проще и/или требует меньше стадий и, следовательно, менее дорогой, чем синтез ранее описанных конъюгатов, что дает преимущество при производстве. Например, синтез некоторых групп конъюгата состоит из меньшего количества синтетических стадий, что приводит к увеличению выхода, по сравнению с ранее описанными группами конъюгата. Группы конъюгатов, такие как GalNAc3-10 в Примере 46 и GalNAc3-7 в Примере 48 гораздо проще, чем ранее описанные конъюгаты, такие как описаны в публикациях U.S. 8106022 или U.S. 7262177, для которых необходима сборка большего количества химических промежуточных соединений. Соответственно, эти и другие конъюгаты, описанные в настоящем документе, обладают преимуществом по сравнению с ранее описанными соединениями для применения с любым олигонуклеотидом, включая одноцепочечные олигонуклеотиды и любую цепь двухцепочечных олигонуклеотидов (например, миРНК).

Точно так же, в настоящем документе описаны группы конъюгатов, имеющие только один или два лиганда GalNAc. Как показано, такие сопряженные группы усиливают активность антисмысловых соединений. Такие соединения гораздо проще получить, чем конъюгаты, содержащие три лиганда GalNAc. Группы конъюгатов, содержащие один или два лиганда GalNAc, могут быть присоединены к любым антисмысловым соединениям, включая одноцепочечные олигонуклеотиды и любую цепь двухцепочечных олигонуклеотидов (например, миРНК).

В некоторых вариантах реализации конъюгаты, описанные в настоящем документе, существенно не изменяют некоторые показатели переносимости. Например, в настоящем документе показано, что сопряженные антисмысловые соединения являются не более иммуногенными, чем несопряженные исходные соединения. Поскольку активность улучшается, то варианты реализации, в которых переносимость остается такой же (или в действительности если даже переносимость ухудшается лишь незначительно, по сравнению с приростом активности), обладают улучшенными характеристиками для терапии.

В некоторых вариантах реализации сопряжение позволяет изменять антисмысловые соединения так, чтобы они обладали менее выраженными последствиями в отсутствие сопряжения. Например, в некоторых вариантах реализации замена одной или более тиофосфатных связей полностью тиофосфатного антисмыслового соединения на фосфодиэфирные связи приводит к улучшению некоторых показателей переносимости. Например, в некоторых случаях такие антисмысловые соединения, имеющие один или более фосфодиэфиров, являются менее иммуногенными, чем такие же соединения, в которых каждая связь представляет собой тиофосфат. Однако в некоторых случаях, как показано в Примере 26, такое же замещение одной или более тиофосфатных связей на фосфодиэфирные связи приводит также к снижению клеточного захвата и/или к снижению активности. В некоторых вариантах реализации сопряженные антисмысловые соединения, описанные в настоящем документе, допускают такое изменение связей с небольшим снижением или без снижения захвата и активности, по сравнению с сопряженным полностью тиофосфатным аналогом. В действительности, в некоторых вариантах реализации, например, в Примерах 44, 57, 59 и 86, олигонуклеотиды, содержащие конъюгат и по меньшей мере одну фосфодиэфирную межнуклеозидную связь, фактически демонстрируют повышенную активность in vivo даже по сравнению с полностью тиофосфатным аналогом, также содержащим такой же конъюгат. Более того, поскольку сопряжение приводит к значительному увеличению захвата /активности, то небольшое снижение такого существенного прироста может быть приемлемым для достижения улучшенной переносимости. Соответственно, в некоторых вариантах реализации сопряженные антисмысловые соединения содержат по меньшей мере одну фосфодиэфирную связь.

В некоторых вариантах реализации сопряжение антисмысловых соединений по настоящему документу приводит к улучшенной доставке, захвату и активности в гепатоцитах. Следовательно, в ткань печени доставляется большее количество соединения. Однако в некоторых вариантах реализации такая улучшенная доставка сама по себе не объясняет общего увеличения активности. В некоторых таких вариантах реализации в гепатоциты поступает большее количество соединения. В некоторых вариантах реализации даже такой улучшенный захват гепатоцитов сам по себе не объясняет общего увеличения активности. В таких вариантах реализации увеличивается продуктивный захват сопряженного соединения. Например, как показано в Примере 102, некоторые варианты реализации GalNAc-coдержащих конъюгатов увеличивают обогащение антисмысловых олигонуклеотидов в гепатоцитах, по сравнению с не паренхимальными клетками. Такое обогащение преимущественно для олигонуклеотидов, которые направлены на гены, экспрессируемые в гепатоцитах.

В некоторых вариантах реализации сопряженные антисмысловые соединения по настоящему документу приводят к уменьшению воздействия на почки. Например, как показано в Примере 20, концентрации антисмысловых олигонуклеотидов, содержащих некоторые варианты реализации GalNAc-содержащих конъюгатов, в почках ниже, чем концентрации антисмысловых олигонуклеотидов, не имеющих GalNAc-содержащего конъюгата. Это имеет несколько преимущественных терапевтических применений. Для терапевтических показаний, в которых не требуется проявление активности в почках, воздействие на почки подвергает их риску токсичности без соответствующей пользы. Более того, высокая концентрация в почках обычно приводит к выводу соединения с мочой, обеспечивая более быстрое выведение. Соответственно, для внепочечных мишеней накопление в почках является нежелательным.

В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложены сопряженные антисмысловые соединения, представленные формулой:

где

А представляет собой антисмысловой олигонуклеотид;

В представляет собой расщепляемый фрагмент

С представляет собой линкер конъюгата

D представляет собой группу ветвления

каждый Е представляет собой связку;

каждый F представляет собой лиганд; и

q представляет собой целое число от 1 до 5.

На представленной выше схеме и в аналогичных схемах в настоящем документе группа ветвления «D» разветвляется такое количество раз, которое необходимо для соответствия количеству групп (E-F), указанному количеством «q». Следовательно, если q=1, то формула представляет собой:

если q=2, то формула представляет собой:

если q=3, то формула представляет собой:

если q=4, то формула представляет собой:

если q=5, то формула представляет собой:

В некоторых вариантах реализации предложены сопряженные антисмысловые соединения, имеющие структуру:

.

В некоторых вариантах реализации предложены сопряженные антисмысловые соединения, имеющие структуру:

.

В некоторых вариантах реализации предложены сопряженные антисмысловые соединения, имеющие структуру:

.

В некоторых вариантах реализации предложены сопряженные антисмысловые соединения, имеющие структуру:

В вариантах реализации, имеющих более одной конкретной переменной (например, более одного «m» или «n»), если не указано иное, каждая такая конкретная переменная выбрана независимо. Следовательно, для структуры, имеющей более одного n, каждый n выбран независимо, так что они могут быть или не быть одинаковыми между собой.

В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложены сопряженные антисмысловые соединения, представленные следующей структурой. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение содержит модифицированный олигонуклеотид ISIS 563580 с 5'-Х, где Х представляет собой группу конъюгата, содержащую GalNAc. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение состоит из модифицированного олигонуклеотида ISIS 563580 с 5'-Х, где Х представляет собой группу конъюгата, содержащую GalNAc.

В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложены сопряженные антисмысловые соединения, представленные следующей структурой. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение содержит сопряженный модифицированный олигонуклеотид ISIS 703801. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение состоит из сопряженного модифицированного олигонуклеотида ISIS 703801.

В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложены сопряженные антисмысловые соединения, представленные следующей структурой. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение содержит сопряженный модифицированный олигонуклеотид ISIS 703802. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение состоит из сопряженного модифицированного олигонуклеотида ISIS 703802.

В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложены сопряженные антисмысловые соединения, представленные следующей структурой. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение содержит модифицированный олигонуклеотид с последовательностью азотистых оснований SEQ ID NO: 77 с 5'-GalNAc, с вариабельностью сахарных модификаций в крыльях. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение состоит из модифицированного олигонуклеотида с последовательностью азотистых оснований SEQ ID NO: 77 с 5'-GalNAc, с вариабельностью сахарных модификаций в крыльях.

где либо R¹ представляет собой -ОСН₂СН₂OСН₃ (МОЕ), и R² представляет собой Н; либо R¹ и R² вместе образуют мостик, где R¹ представляет собой -O-, и R² представляет собой -СН₂-, -СН(СН₃)- или -СН₂СН₂-, и R¹ и R² напрямую связаны так, что образующийся мостик выбран из: -O-СН₂-, -О-СН(СН₃)- и -O-СН₂СН₂-;

и для каждой пары R³ и R⁴ у одного кольца, независимо для каждого кольца: либо R³ выбран из Н и -ОСН₂СН₂OСН₃, и R⁴ представляет собой Н; либо R³ и R⁴ вместе образуют мостик, где R³ представляет собой -O-, и R⁴ представляет собой -СН₂-, -СН(СН₃)- или -СН₂СН₂-, и R³ и R⁴ напрямую связаны так, что образующийся мостик выбран из: -O-СН₂-, -O-СН(СН₃)- и -O-СН₂СН₂-;

и R⁵ выбран из Н и -СН₃;

и Z выбран из S^- и О^-.

В некоторых вариантах реализации предложена композиция, содержащая сопряженное антисмысловое соединение, описанное в настоящем документе, или его соль и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель.

В некоторых вариантах реализации модулирование экспрессии ANGPTL3 происходит в клетке или ткани. В некоторых вариантах реализации модулирование происходит в клетке или ткани в организме животного. В некоторых вариантах реализации животное представляет собой человека. В некоторых вариантах реализации модулирование представляет собой снижение уровня мРНК ANGPTL3. В некоторых вариантах реализации модулирование представляет собой снижение уровня белка ANGPTL3. В некоторых вариантах реализации происходит снижение и мРНК, и белка ANGPTL3. Такое снижение может происходить в зависимости от времени или в зависимости от дозы.

В некоторых вариантах реализации предложены композиции и способы для применения в терапии. В некоторых вариантах реализации предложены композиции и способы предупреждения, лечения, отсрочки, замедления прогрессирования и/или облегчения заболеваний, расстройств и патологических состояний, связанных с ANGPTL3. В некоторых вариантах реализации такие заболевания, расстройства и патологические состояния представляют собой сердечно-сосудистые и/или метаболические заболевания, расстройства и патологические состояния. В некоторых вариантах реализации композиции и способы терапии включают введение специфического ингибитора ANGPTL3 индивидууму, нуждающемуся в этом. В некоторых вариантах реализации специфический ингибитор ANGPTL3 представляет собой нуклеиновую кислоту. В некоторых вариантах реализации нуклеиновая кислота представляет собой антисмысловое соединение. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение представляет собой модифицированный олигонуклеотид. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение представляет собой модифицированный олигонуклеотид с присоединенной группой конъюгата.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Следует понимать, что изложенное выше общее описание и следующее подробное описание являются лишь примерными и пояснительными, и не являются ограничивающими заявленное изобретение. В настоящем документе использование единственного числа включает множественное число, если специально не указано иное. При использовании в настоящем документе, термин «или» означает «и/или», если не указано иное. Кроме того, использование термина «включая», а также других форм, таких как «включает» и «включенный», не является ограничивающим. Также, такие термины как «элемент» или «компонент» охватывают как элементы и компоненты, содержащие одну единицу, так и элементы и компоненты, которые содержат более одной субъединицы, если специально не указано иное.

Используемые в данном документе заголовки разделов предназначены исключительно для целей структурирования и не должны восприниматься как такие, которые ограничивают описываемый объект изобретения. Все документы или части документов, цитируемые в настоящей заявке, включая, но не ограничиваясь ими, патенты, патентные заявки, статьи, книги и трактаты, в явной форме включены в настоящий документ посредством ссылки в отношении частей документов, обсуждаемых в данном описании, а также в полном объеме.

Определения

При отсутствии конкретных определений, номенклатура, используемая в связи с ними, а также в связи с приемами и методиками аналитической химии, синтетической органической химии, а также медицинской и фармацевтической химии, описанная в настоящем документе, является общеизвестной и общепринятой в данной области техники. Для химического синтеза и химического анализа могут быть использованы стандартные методики. Некоторые такие методики и приемы представлены, например, в публикациях "Carbohydrate Modifications in Antisense Research" под редакцией Sangvi и Cook, American Chemical Society, федеральный округ Вашингтон, 1994; "Remington's Pharmaceutical Sciences," Mack Publishing Co., Истон, штат Пенсильвания, 21^е издание, 2005; и "Antisense Drug Technology, Principles, Strategies, and Applications" под редакцией Stanley Т. Crooke, CRC Press, Бока-Ратон, штат Флорида; а также в книге Sambrook et al., "Molecular Cloning, A laboratory Manual," 2^е издание, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989, которые включены в настоящий документ посредством ссылки для всех целей. В допустимых случаях, все патенты, заявки, опубликованные заявки и другие публикации, инвентаризационные номера GENBANK и связанная информация о последовательностях, доступная через базы данных, такие как Национальный Центр Биотехнологической Информации (NCBI) и другие данные, на которые присутствует ссылка в данном описании, включены посредством ссылки в части документа, обсуждаемой в данном описании, а также в полном объеме.

Если не указано иное, следующие термины имеют следующие значения:

В данном контексте «нуклеозид» означает соединение, содержащее фрагмент азотистого основания и сахарный фрагмент. Нуклеозиды включают, но не ограничиваются ими, природные нуклеозиды (которые находятся в ДНК и РНК) и модифицированные нуклеозиды. Нуклеозиды могут быть связаны с фосфатным фрагментом.

В данном контексте «химическая модификация» означает химическое отличие в соединении, по сравнению с природным аналогом. Химические модификации олигонуклеотидов включают нуклеозидные модификации (включая модификации сахарного фрагмента и модификации азотистого основания) и модификации межнуклеозидных связей. В отношении олигонуклеотида химическая модификация включает не только отличия в последовательности азотистых оснований.

В данном контексте «фуранозил» означает структуру, содержащую 5-членное кольцо, содержащее четыре атома углерода и один атом кислорода.

В данном контексте «природный сахарный фрагмент» означает рибофуранозил, встречающийся в природной РНК, или дезоксирибофуранозил, встречающийся в природной ДНК.

В данном контексте «сахарный фрагмент» означает природный сахарный фрагмент или модифицированный сахарный фрагмент нуклеозида.

В данном контексте «модифицированный сахарный фрагмент» означает замещенный сахарный фрагмент или заменитель сахара.

В данном контексте «замещенный сахарный фрагмент» означает фуранозил, который не является природным сахарным фрагментом. Замещенные сахарные фрагменты включают, но не ограничиваются ими, фуранозилы, содержащие заместители в 2'-положении, 3'-положении, 5'-положении и/или 4'-положении. Некоторые замещенные сахарные фрагменты представляют собой бициклические сахарные фрагменты.

В данном контексте «2'-замещенный сахарный фрагмент» означает фуранозил, содержащий заместитель в 2'-положении, отличный от Н или ОН. Если не указано иное, то 2'-замещенный сахарный фрагмент не является бициклическим сахарным фрагментом (т.е. 2'-заместитель 2'-замещенного сахарного фрагмента не образует мостик с другим атомом фуранозильного кольца).

В данном контексте «МОЕ» означает -ОСН₂СН₂OСН₃.

В данном контексте «2'-F нуклеозид» относится к нуклеозиду, содержащему сахар, который содержит фтор в 2'-положении. Если не указано иное, то фтор в 2'-F нуклеозиде находится в рибо-положении (заменяя ОН природной рибозы).

В данном контексте термин «заменитель сахара» означает структуру, которая не содержит фуранозила и способна заменять природный сахарный фрагмент нуклеозида, так что образующиеся нуклеозидные субъединицы могут связываться вместе и/или связываться с другими нуклеозидами с образованием олигомерного соединения, которое может гибридизоваться с комплементарным олигомерным соединением. Такие структуры включают кольца, содержащие другое количество атомов, чем фуранозил (например, 4, 6 или 7-членные кольца); замену кислорода фуранозила некислородным атомом (например, углеродом, серой или азотом); или одновременное изменение количества атомов и замену кислорода. Такие структуры также могут содержать замещения, соответствующие замещениям, описанным для замещенных сахарных фрагментов (например, 6-членные карбоциклические бициклические заменители сахара, необязательно содержащие дополнительные заместители). Заменители сахара включают также более сложные сахарные замены (например, некольцевые системы пептидной нуклеиновой кислоты). Заменители сахара включают, без ограничения, морфолино, циклогексенилы и циклогекситы.

В данном контексте «бициклический сахарный фрагмент» означает модифицированный сахарный фрагмент, содержащий 4-7-членное кольцо (включая, но не ограничиваясь фуранозилом), содержащее мостик, связывающий два атома 4-7-членного кольца с образованием второго кольца, что приводит к получению бициклической структуры. В некоторых вариантах реализации 4-7-членное кольцо представляет собой сахарное кольцо. В некоторых вариантах реализации 4-7-членное кольцо представляет собой фуранозил. В некоторых таких вариантах реализации мостик соединяет 2'-углерод и 4'-углерод фуранозила.

В данном контексте «нуклеотид» означает нуклеозид, дополнительно содержащий фосфатную линкерную группу. В данном контексте «связанные нуклеозиды» могут быть или не быть связаны фосфатными связями и, следовательно, включают, но не ограничиваются ими, «связанные нуклеотиды». В данном контексте «связанные нуклеозиды» представляют собой нуклеозиды, которые связаны в непрерывную последовательность (т.е. между связанными нуклеозидами нет дополнительных нуклеозидов).

В данном контексте «азотистое основание» означает группу атомов, которая может быть связана с сахарным фрагментом с образованием нуклеозида, который может быть внедрен в олигонуклеотид, и при этом указанная группа атомов может связываться с комплементарным природным азотистым основанием другого олигонуклеотида или нуклеиновой кислоты. Азотистые основания могут быть природными или могут быть модифицированными. «Последовательность азотистых оснований» означает порядок последовательных азотистых оснований, независимый от любого сахара, связи или модификации азотистого основания.

В данном контексте термины «немодифицированное азотистое основание» или «природное азотистое основание» означают природные гетероциклические азотистые РНК или ДНК: пуриновые основания аденин (А) и гуанин (G) и пиримидиновые основания тимин (Т), цитозин (С) (включая 5-метил С) и урацил (U).

В данном контексте «модифицированное азотистое основание» означает любое азотистое основание, которое не является природным азотистым основанием.

В данном контексте «модифицированный нуклеозид» означает нуклеозид, содержащий по меньшей мере одну химическую модификацию, по сравнению с природными нуклеозидами РНК или ДНК. Модифицированные нуклеозиды содержат модифицированный сахарный фрагмент и/или модифицированное азотистое основание.

В данном контексте «бициклический нуклеозид» или «BNA» означает нуклеозид, содержащий бициклический сахарный фрагмент.

В данном контексте «затрудненный этил-нуклеозид» или «cEt» означает нуклеозид, содержащий бициклический сахарный фрагмент, который содержит мостик 4'-СН(СН₃)-O-2'.

В данном контексте «нуклеозид закрытой нуклеиновой кислоты» или «ЗНК» означает нуклеозид, содержащий бициклический сахарный фрагмент, который содержит мостик 4'-СН₂-O-2'.

В данном контексте «2'-замещенный нуклеозид» означает нуклеозид, содержащий заместитель в 2'-положении, отличный от Н или ОН. Если не указано иное, то 2'-замещенный нуклеозид не является бициклическим нуклеозидом.

В данном контексте «дезоксинуклеозид» означает нуклеозид, содержащий 2'-Н фуранозильный сахарный фрагмент, находящийся в природных дезоксирибонуклеозидах (ДНК). В некоторых вариантах реализации 2'-дезоксинуклеозид может содержать модифицированное азотистое основание или может содержать азотистое основание РНК (например, урацил).

В данном контексте «олигонуклеотид» означает соединение, содержащее множество связанных нуклеозидов. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид содержит один или более не модифицированных рибонуклеозидов (РНК) и/или немодифицированных дезоксирибонуклеозидов (ДНК), и/или один или более модифицированных нуклеозидов.

В данном контексте «олигонуклеозид» означает олигонуклеотид, в котором ни одна из межнуклеозидных связей не содержит атом фосфора. В данном контексте олигонуклеотиды включают олигонуклеозиды.

В данном контексте «модифицированный олигонуклеотид» означает олигонуклеотид, содержащий по меньшей мере один модифицированный нуклеозид и/или по меньшей мере одну модифицированную межнуклеозидную связь.

В данном контексте «связь» или «линкерная группа» означает группу атомов, которая связывает вместе две или более других групп атомов.

В данном контексте «межнуклеозидная связь» означает ковалентную связь между соседними нуклеозидами в олигонуклеотиде.

В данном контексте «природная межнуклеозидная связь» означает фосфодиэфирную связь 3' с 5'.

В данном контексте «модифицированная межнуклеозидная связь» означает любую межнуклеозидную связь, отличную от природной межнуклеозидной связи.

В данном контексте «концевая межнуклеозидная связь» означает связь между последними двумя нуклеозидами олигонуклеотида или его определенной области.

В данном контексте «фосфорная линкерная группа» означает линкерную группу, содержащую атом фосфора. Фосфорные линкерные группы включают, без ограничения, группы, имеющие формулу:

где:

R_a и R_d, каждый независимо, представляют собой О, S, CH₂, NH или NJ₁, где J₁ представляет собой C₁-С₆ алкил или замещенный C₁-С₆ алкил;

R_b представляет собой О или S;

R_c представляет собой ОН, SH, C₁-С₆ алкил, замещенный C₁-С₆ алкил, C₁-С₆ алкокси, замещенный C₁-С₆ алкокси, амино или замещенный амино; и

J₁ представляет собой R_b представляет собой О или S.

Фосфорные линкерные группы включают, без ограничения, фосфодиэфир, тиофосфат, дитиофосфат, фосфонат, фосфорамидат, фосфортиоамидат, тионоалкилфосфонат, фосфотриэфиры, тионоалкил-фосфотриэфиры и боранофосфат.

В данном контексте «межнуклеозидная фосфорная линкерная группа» означает фосфорную линкерную группу, которая напрямую связывает два нуклеозида.

В данном контексте «немежнуклеозидная фосфорная линкерная группа» означает фосфорную линкерную группу, которая не связывает напрямую два нуклеозида. В некоторых вариантах реализации немежнуклеозидная фосфорная линкерная группа связывает нуклеозид с группой, отличной от нуклеозида. В некоторых вариантах реализации немежнуклеозидная фосфорная линкерная группа связывает две группы, ни одна из которых не является нуклеозидом.

В данном контексте «нейтральная линкерная группа» означает линкерную группу, которая не имеет заряда. Нейтральные линкерные группы включают, без ограничения, фосфотриэфиры, метилфосфонаты, MMI (-СН₂-N(СН₃)-O-), амид-3 (-CH₂-C(=O)-N(H)-), амид-4 (-CH₂-N(H)-C(=O)-), формацеталь (-O-СН₂-O-) и тиоформацеталь (-S-CH₂-O-). Дополнительные нейтральные линкерные группы включают линкеры, содержащие силоксан (диалкилсилоксан), карбоксилатный эфир, карбоксамид, сульфид, сульфонатный эфир и амиды (см., например: Carbohydrate Modifications in Antisense Research; Y.S. Sanghvi and P.D. Cook, ред. ACS Symposium Series 580; главы 3 и 4, (сс. 40-65)). Дополнительные нейтральные линкерные группы включают неионные линкеры, содержащие смешанные составные части N, О, S и CH₂.

В данном контексте «межнуклеозидная нейтральная линкерная группа» означает нейтральную линкерную группу, которая напрямую связывает два нуклеозида.

В данном контексте «немежнуклеозидная нейтральная линкерная группа» означает нейтральную линкерную группу, которая не связывает напрямую два нуклеозида. В некоторых вариантах реализации немежнуклеозидная нейтральная линкерная группа связывает нуклеозид с группой, отличной от нуклеозида. В некоторых вариантах реализации немежнуклеозидная нейтральная линкерная группа связывает две группы, ни одна из которых не является нуклеозидом.

В данном контексте «олигомерное соединение» означает полимерную структуру, содержащую две или более субструктур. В некоторых вариантах реализации олигомерное соединение содержит олигонуклеотид. В некоторых вариантах реализации олигомерное соединение содержит одну или более сопряженных групп и/или концевых групп. В некоторых вариантах реализации олигомерное соединение состоит из олигонуклеотида. Олигомерные соединения включают также природные нуклеиновые кислоты. В некоторых вариантах реализации олигомерное соединение содержит скелет одной или более связанных мономерных субъединиц, при этом каждая связанная мономерная субъединица прямо или косвенно присоединена к гетероциклическому основному фрагменту. В некоторых вариантах реализации олигомерные соединения могут содержать также мономерные субъединицы, которые не связаны с гетероциклическим основным фрагментом, обеспечивая таким образом сайты с удаленными основаниями. В некоторых вариантах реализации линкеры, соединяющие мономерные субъединицы, сахарные фрагменты или заменители и гетероциклические основные фрагменты, могут быть независимо модифицированы. В некоторых вариантах реализации единица линкер-сахар, которая может содержать или не содержать гетероциклическое основание, может быть замещена миметиком, таким как мономеры в пептидных нуклеиновых кислотах.

В данном контексте «концевая группа» означает один или более атомов, присоединенных к любому или к обоим 3'- или 5'-концам олигонуклеотида. В некоторых вариантах реализации концевая группа представляет собой группу конъюгата. В некоторых вариантах реализации концевая группа содержит один или более нуклеозидов концевой группы.

В данном контексте «конъюгат» или «группа конъюгата» означает атом или группу атомов, связанную с олигонуклеотидом или олигомерным соединением. Как правило, группы конъюгата модифицируют одно или более свойств соединения, к которому они присоединены, включая, но не ограничиваясь ими, свойства фармакодинамики, фармакокинетики, связывания, поглощения, клеточного распределения, клеточного захвата, заряда и/или выведения.

В данном контексте «линкер конъюгата» или «линкер» в контексте группы конъюгата означает часть группы конъюгата, содержащую любой атом или группу атомов и ковалентно связывающую (1) олигонуклеотид с другой частью группы конъюгата или (2) две или более частей группы конъюгата.

Группы конъюгата представлены в настоящем документе как радикалы, обеспечивающие связь для образования ковалентного присоединения к олигомерному соединению, такому как антисмысловой олигонуклеотид. В некоторых вариантах реализации точка присоединения в олигомерном соединении представляет собой 3'-атом кислорода 3'-гидроксильной группы 3'-концевого нуклеозида олигомерного соединения. В некоторых вариантах реализации точка присоединения у олигомерного соединения представляет собой 5'-атом кислорода 5'-гидроксильной группы 5'-концевого нуклеозида олигомерного соединения. В некоторых вариантах реализации связь для образования присоединения к олигомерному соединению представляет собой расщепляемую связь. В некоторых таких вариантах реализации такая расщепляемая связь составляет весь или часть расщепляемого фрагмента.

В некоторых вариантах реализации группы конъюгата содержат расщепляемый фрагмент (например, расщепляемую связь или расщепляемый нуклеозид) и часть углеводного кластера, такую как часть кластера GalNAc. Такая часть углеводного кластера содержит: направляющий фрагмент и необязательно линкер конъюгата. В некоторых вариантах реализации часть углеводного кластера определяют по количеству и сущности лиганда. Например, в некоторых вариантах реализации часть углеводного кластера содержит 3 группы GalNAc и обозначена «GalNAc₃». В некоторых вариантах реализации часть углеводного кластера содержит 4 группы GalNAc и обозначена «GalNAc₄». Конкретные части углеводных кластеров (имеющие конкретную связку, группы ветвления и линкера конъюгата) описаны в настоящем документе и обозначены римской цифрой с последующим нижним индексом «а». Соответственно, «GalNac3-1_a» относится к конкретной части углеводного кластера группы конъюгата, имеющей 3 группы GalNAc и конкретно определенную связку, группы ветвления и линкера. Такой фрагмент углеводного кластера присоединен к олигомерному соединению через расщепляемый фрагмент, такой как расщепляемая связь или расщепляемый нуклеозид.

В данном контексте «расщепляемый фрагмент» означает связь или группу, которая может быть расщеплена при физиологических условиях. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент расщепляется внутри клетки или во внутриклеточных отделах, таких как лизосома. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент расщепляется эндогенными ферментами, такими как нуклеазы. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент содержит группу атомов, имеющую один, два, три, четыре или более четырех расщепляемых связей.

В данном контексте «расщепляемая связь» означает любую химическую связь, которая может быть расщеплена. В некоторых вариантах реализации расщепляемая связь выбрана из: амида, полиамида, сложного эфира, эфира, одного или обоих сложных эфиров фосфодиэфира, фосфатного сложного эфира, карбамата, дисульфида или пептида.

В данном контексте «углеводный кластер» означает соединение, имеющее один или более углеводных остатков, присоединенных к скелету или линкерной группе, (см., например, Maier et al., "Synthesis of Antisense Oligonucleotides Conjugated to a Multivalent Carbohydrate Cluster for Cellular Targeting," Bioconjugate Chemistry, 2003, (14): 18-29, полное содержание которой включено в настоящий документ посредством ссылки, или Rensen et al., "Design and Synthesis of Novel N-Acetylgalactosamine-Terminated Glycolipids for Targeting of Lipoproteins to the Hepatic Asiaglycoprotein Receptor," J. Med. Chem. 2004, (47): 5798-5808, где представлены примеры углеводных сопряженных кластеров).

В данном контексте «модифицированный углевод» означает любой углевод, имеющий одну или более модификаций, по сравнению с природными углеводами.

В данном контексте «производное углевода» означает любое соединение, которое может быть синтезировано с использованием углевода в качестве исходного материала или промежуточного соединения.

В данном контексте «углевод» означает природный углевод, модифицированный углевод или производное углевода.

В данном контексте «защитная группа» означает любое соединение или защитную группу, известную специалистам в данной области техники. Неограничивающие примеры защитных групп представлены в книге "Protective Groups in Organic Chemistry", Т.W. Greene, P.G.M. Wuts, ISBN 0-471-62301-6, John Wiley & Sons, Ink, Нью-Йорк, полное содержание которой включено в настоящий документ посредством ссылки.

В данном контексте «одноцепочечное» означает олигомерное соединение, которое не гибридизовано с его комплементом и которое не обладает достаточной самокомплементарностью для образования устойчивого собственного дуплекса.

В данном контексте «двухцепочечное» означает пару олигомерных соединений, которые гибридизованы друг с другом, или одно самокомплементарное олигомерное соединение, которое образует шпилечную структуру. В некоторых вариантах реализации двухцепочечное олигомерное соединение содержит первое и второе олигомерное соединение.

В данном контексте «антисмысловое соединение» означает соединение, содержащее или состоящее из олигонуклеотида, по меньшей мере часть которого комплементарна целевой нуклеиновой кислоте, с которой возможна его гибридизация, что приводит к получению по меньшей мере одной антисмысловой активности.

В данном контексте «антисмысловая активность» означает любое обнаруживаемое и/или измеримое изменение, обусловленное гибридизацией антисмыслового соединения с его нуклеиновой кислотой-мишенью. В некоторых вариантах реализации антисмысловая активность включает модулирование количества или активности транскрипта целевой нуклеиновой кислоты (например, мРНК). В некоторых вариантах реализации антисмысловая активность включает модулирование сплайсинга пре-мРНК.

В данном контексте «антисмысловое соединение на основе РНКазы H» означает антисмысловое соединение, в котором по меньшей мере часть антисмысловой активности антисмыслового соединения обусловлена гибридизацией антисмыслового соединения с целевой нуклеиновой кислотой и последующим расщеплением целевой нуклеиновой кислоты под действием РНКазы Н.

В данном контексте «антисмысловое соединение на основе RISC» означает антисмысловое соединение, в котором по меньшей мере часть антисмысловой активности антисмыслового соединения обусловлена РНК-индуцируемым комплексом сайленсинга (RISC).

В данном контексте «обнаружение» или «измерение» означает, что выполнено испытание или анализ для обнаружения или измерения. Такое обнаружение и/или измерение может приводить к результату с нулевым значением. Следовательно, даже если испытание для обнаружения или измерения приводит к обнаружению отсутствия активности (нулевой активности), то стадия обнаружения или измерения активности была выполнена.

В данном контексте «обнаруживаемая и/или измеримая активность» означает статистически значимую активность, которая не является нулевой.

В данном контексте «по существу не измененный» означает небольшое или отсутствие изменения конкретного параметра, в частности, по сравнению с другим параметром, который изменился гораздо больше. В некоторых вариантах реализации параметр является по существу не измененным, если его изменение составило менее 5%. В некоторых вариантах реализации параметр является по существу не измененным, если его изменение составило менее двух раз, тогда как изменение другого параметра составило по меньшей мере десять раз. Например, в некоторых вариантах реализации антисмысловая активность представляет собой изменение количества целевой нуклеиновой кислоты. В некоторых таких вариантах реализации количество нецелевой нуклеиновой кислоты является по существу не измененным, если оно изменяется гораздо меньше, чем изменяется количество целевой нуклеиновой кислоты, но это изменение не обязательно должно быть нулевым.

В данном контексте «экспрессия» означает процесс, посредством которого ген в конечном итоге преобразуется в белок. Экспрессия включает, но не ограничивается этим, транскрипцию, пост-транскрипционную модификацию (например, сплайсинг, полиаденилирование, добавление 5'-кэпа) и трансляцию.

В данном контексте «целевая нуклеиновая кислота» означает молекулу нуклеиновой кислоты, с которой предполагается гибридизация антисмыслового соединения с получением заданной антисмысловой активности. Антисмысловые олигонуклеотиды обладают достаточной комплементарностью с их нуклеиновыми кислотами-мишенями для обеспечения гибридизации при физиологических условиях.

В данном контексте «комплементарность азотистого основания» или «комплементарность» в отношении азотистых оснований означает азотистое основание, которое способно к спариванию оснований с другим азотистым основанием. Например, в ДНК аденин (А) комплементарен тимину (Т). Например, в РНК аденин (А) комплементарен урацилу (U). В некоторых вариантах реализации комплементарное азотистое основание означает азотистое основание антисмыслового соединения, которое способно к спариванию с азотистым основанием его целевой нуклеиновой кислоты. Например, если азотистое основание в определенном положении антисмыслового соединения способно к водородному связыванию с азотистым основанием в определенном положении нуклеиновой кислоты-мишени, то это положение водородного связывания между олигонуклеотидом и нуклеиновой кислотой-мишенью считается комплементарным по этой паре азотистых оснований. Азотистые основания, содержащие определенные модификации, могут сохранять способность к спариванию с противоположным азотистым основанием и, следовательно, все еще могут обладать комплементарностью азотистых оснований.

В данном контексте «некомплементарные» в отношении азотистых оснований означает пару азотистых оснований, которые не образуют водородные связи друг с другом.

В данном контексте «комплементарные» в отношении олигомерных соединений (например, связанных нуклеозидов, олигонуклеотидов или нуклеиновых кислот) означает способность таких олигомерных соединений или их областей к гибридизации с другим олигомерным соединением или его областью за счет комплементарности азотистых оснований. Комплементарные олигомерные соединения не обязательно должны обладать комплементарностью азотистых оснований в каждом нуклеозиде. До не которой степени допустимы некоторые несоответствия. В некоторых вариантах реализации комплементарные олигомерные соединения или области комплементарны по 70% азотистых оснований (комплементарность 70%). В некоторых вариантах реализации комплементарные олигомерные соединения или области комплементарны на 80%. В некоторых вариантах реализации комплементарные олигомерные соединения или области комплементарны на 90%. В некоторых вариантах реализации комплементарные олигомерные соединения или области комплементарны на 95%. В некоторых вариантах реализации комплементарные олигомерные соединения или области комплементарны на 100%.

В данном контексте «несоответствие» означает азотистое основание первого олигомерного соединения, которое не способно спариваться с азотистым основанием в соответствующем положении второго олигомерного соединения при выравнивании первого и второго олигомерного соединения. Любое или оба первое и второе олигомерные соединения могут быть олигонуклеотидами.

В данном контексте «гибридизация» означает спаривание комплементарных олигомерных соединений (например, антисмыслового соединения и его целевой нуклеиновой кислоты). Не ограничиваясь конкретным механизмом, наиболее распространенный механизм спаривания включает водородное связывание, которое может представлять собой уотсон-криковское, хугстиновское или обратное хугстиновское водородное связывание между комплементарными азотистыми основаниями.

В данном контексте «специфически гибридизуется» означает способность олигомерного соединения гибридизоваться с одним сайтом нуклеиновой кислоты с большей аффинностью, чем оно гибридизуется с другим сайтом нуклеиновой кислоты.

В данном контексте «полностью комплементарный» в отношении олигонуклеотида или его части означает, что каждое азотистое основание олигонуклеотида или его части способно к спариванию с азотистым основанием комплементарной нуклеиновой кислоты или ее непрерывной частью. Следовательно, полностью комплементарная область не содержит несоответствий или негибридизованных азотистых оснований в обеих цепях.

В данном контексте «процент комплементарности» означает процент азотистых оснований олигомерного соединения, которые комплементарны равной по длине части целевой нуклеиновой кислоты. Процент комплементарности рассчитывают делением количества азотистых оснований олигомерного соединения, которые комплементарны азотистым основаниям в соответствующих положениях целевой нуклеиновой кислоты, на общую длину олигомерного соединения.

В данном контексте «процент идентичности» означает количество азотистых оснований в первой нуклеиновой кислоте, которые относятся к тому же типу (независимо от химической модификации), что и азотистые основания в соответствующих положениях второй нуклеиновой кислоты, деленное на общее количество азотистых оснований в первой нуклеиновой кислоте.

В данном контексте «модулирование» означает изменение количества или качества молекулы, функции или активности, по сравнению с количеством или качеством молекулы, функции или активности до модулирования. Например, модулирование включает изменение, как увеличение (стимуляцию или индукцию), так и снижение (ингибирование или уменьшение) генной экспрессии. В качестве дополнительного примера, модулирование экспрессии может включать изменение выбора сайта сплайсинга при процессинге пре-мРНК, что приводит к изменению абсолютного или относительного количества определенного сплайс-варианта, по сравнению с его количеством в отсутствие модулирования.

В данном контексте «химический мотив» означает характерный участок химических модификаций в олигонуклеотиде или его области. Мотивы могут быть определены по модификациям в определенных нуклеозидах и/или в определенных линкерных группах олигонуклеотида.

В данном контексте «нуклеозидный мотив» означает характерный участок нуклеозидных модификаций в олигонуклеотиде или его области. Связи такого олигонуклеотида могут быть модифицированными или немодифицированными. Если не указано иное, мотивы, описывающие в настоящем документе только нуклеозиды, представляют собой нуклеозидные мотивы. Следовательно, в таких случаях связи не ограничены.

В данном контексте «сахарный мотив» означает характерный участок сахарных модификаций в олигонуклеотиде или его области.

В данном контексте «линкерный мотив» означает характерный участок линкерных модификаций в олигонуклеотиде или его области. Нуклеозиды такого олигонуклеотида могут быть модифицированными или немодифицированными. Если не указано иное, мотивы, описывающие в настоящем документе только линкеры, представляют собой линкерные мотивы. Следовательно, в таких случаях нуклеозиды не ограничены.

В данном контексте «мотив модификации азотистого основания» означает характерный участок модификаций азотистых оснований вдоль олигонуклеотида. Если не указано иное, то мотив модификации азотистого основания не зависит от последовательности азотистых оснований.

В данном контексте «мотив последовательности» означает характерный участок азотистых оснований, расположенных вдоль олигонуклеотида или его части. Если не указано иное, то мотив последовательности не зависит от химических модификаций и, следовательно, может иметь любую комбинацию химических модификаций, включая отсутствие химических модификаций.

В данном контексте «тип модификации» в отношении нуклеозида или нуклеозида определенного «типа» означает химическую модификацию нуклеозида и включает модифицированные и немодифицированные нуклеозиды. Соответственно, если не указано иное, «нуклеозид, имеющий модификацию первого типа» может быть немодифицированным нуклеозидом.

В данном контексте «по-разному модифицированные» означает химические модификации или химические заместители, которые отличны друг от друга, включая отсутствие модификаций. Так, например, МОЕ нуклеозид и немодифицированный нуклеозид ДНК являются «по-разному модифицированными», даже несмотря на то, что нуклеозид ДНК не является модифицированным. Точно так же, ДНК и РНК являются «по-разному модифицированными», даже несмотря на то, что оба представляют собой природные немодифицированные нуклеозиды. Нуклеозиды, которые являются одинаковыми, но содержат различные азотистые основания, не являются по-разному модифицированными. Например, нуклеозид, содержащий 2'-ОМе модифицированный сахар и немодифицированное азотистое основание аденин, и нуклеозид, содержащий 2'-ОМе модифицированный сахар и немодифицированное азотистое основание тимин, не являются по-разному модифицированными.

В данном контексте «модификации одного типа» относится к модификациям, которые являются одинаковыми друг относительно друга, включая отсутствие модификаций. Так, например, два немодифицированных нуклеозида ДНК имеют «модификацию одного типа», даже несмотря на то, что нуклеозид ДНК является немодифицированным. Такие нуклеозиды, имеющие модификацию одного типа, могут содержать различные азотистые основания.

В данном контексте «отдельные области» означает части олигонуклеотида, в которых химические модификации или мотив химических модификаций любой из соседних частей содержит по меньшей мере одно отличие для обеспечения возможности различать области друг от друга.

В данном контексте «фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель» означает любое вещество, подходящее для использования при введении животному. В некоторых вариантах реализации фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель представляет собой стерильный солевой раствор. В некоторых вариантах реализации такой стерильный солевой раствор представляет собой солевой раствор фармацевтической марки.

В данном контексте термин «метаболическое расстройство» означает заболевание или состояние, которое характеризуется, прежде всего, дисрегуляцией метаболизма - сложного набора химических реакций, связанных с расщеплением пищи с выработкой энергии.

В данном контексте термин «сердечно-сосудистое заболевание» или «сердечнососудистое расстройство» означает заболевание или состояние, которое характеризуется, прежде всего, ухудшенной функцией сердца или кровеносных сосудов. Примеры сердечнососудистых заболеваний или расстройств включают, но не ограничиваются ими, аневризму, стенокардию, аритмию, атеросклероз, цереброваскулярное заболевание (инсульт), коронарную болезнь сердца, гипертонию, дислипидемию, гиперлипидемию и гиперхолестеринемию.

В данном контексте термин «моно- или полициклическая кольцевая система» включает все кольцевые системы, выбранные из одиночных или полициклических радикальных кольцевых систем, в которых указанные кольца конденсированы или связаны, и включает одиночные или смешанные кольцевые системы, индивидуально выбранные из алифатических, алициклических, арильных, гетероарильных, аралкильных, арилалкильных, гетероциклических, гетероарильных, гетероароматических и гетероарилалкильных. Такие моно- и полициклические структуры могут содержать кольца, каждое из которых имеет одинаковую степень насыщенности, или каждое независимо имеет переменные степени насыщенности, включая полностью насыщенные, частично насыщенные или полностью ненасыщенные. Каждое кольцо может содержать кольцевые атомы, выбранные из С, N, О и S с образованием гетероциклических колец, а также колец, содержащих только кольцевые атомы С, которые могут быть представлены в смешанном мотиве, как, например, в бензимидазоле, в котором одно кольцо имеет только кольцевые атомы углерода, а конденсированное кольцо имеет два атома азота. Моно- или полициклическая кольцевая система может быть дополнительно замещена группами заместителей, как, например, фталимид, который имеет две группы =O, присоединенные к одному из колец. Моно- или полициклические кольцевые системы могут быть присоединены к исходным молекулам при помощи различных способов, таких как непосредственно через кольцевой атом, путем конденсации через несколько кольцевых атомов, через группу заместителя или через бифункциональный линкерный фрагмент.

В данном контексте «пролекарство» означает неактивную или менее активную форму соединения, которая при введении субъекту метаболизируется с образованием активного или более активного соединения (например, лекарства).

В данном контексте «заместитель» и «группа заместителя» означает атом или группу, которая заменяет атом или группу указанного исходного соединения. Например, заместитель модифицированного нуклеозида представляет собой любой атом или группу, которая отлична от атома или группы, находящейся в природном нуклеозиде (например, модифицированный 2'-заместитель представляет собой любой атом или группу в 2'-положении нуклеозида, отличную от Н или ОН). Группы заместителей могут быть защищенными или незащищенными. В некоторых вариантах реализации соединения настоящего описания имеют заместители в одном или более чем в одном положении исходного соединения. Заместители также могут быть дополнительно замещены другими группами заместителей и могут быть присоединены напрямую или через линкерную группу, такую как алкильная или углеводородная группа, к исходному соединению.

Точно так же, в данном контексте «заместитель» в отношении химической функциональной группы означает атом или группу атомов, которая отлична от атома или группы атомов, обычно содержащихся в указанной функциональной группе. В некоторых вариантах реализации заместитель вытесняет атом водорода функциональной группы (например, в некоторых вариантах реализации заместитель замещенной метильной группы представляет собой атом или группу, отличную от водорода, которая вытесняет один или более атомов водорода незамещенной метильной группы). Если не указано иное, то группы, пригодные для применения в качестве заместителей, включают, без ограничения, галоген, гидроксил, алкил, алкенил, алкинил, ацил (-C(O)R_aa), карбоксил (-C(O)O-R_aa), алифатические группы, алициклически группы, алкокси, замещенный окси (-O-R_aa), арил, аралкил, гетероциклический радикал, гетероарил, гетероарилалкил, амино (-N(R_bb)(R_cc)), имино (=NR_bb), амидо (-C(O)N(R_bb)(R_cc) или -N(R_bb)C(O)R_aa), азидо (-N₃), нитро (-NO₂), циано (-CN), карбамидо (-OC(O)N(R_bb)(R_cc) или -N(R_bb)C(O)OR_aa), уреидо (-N(R_bb)C(O)N(R_bb)(R_cc)), тиоуреидо (-N(R_bb)C(S)N(R_bb)(R_cc)), гуанидил (-N(R_bb)C(=NR_bb)N(R_bb)(R_cc)), амидинил (-C(=NR_bb)N(R_bb)(R_cc) или -N(R_bb)C(=NR_bb)(R_aa)), тиол (-SR_bb), сульфинил (-S(O)R_bb), сульфонил (-S(O)₂R_bb) и сульфонамидил (-S(O)₂N(R_bb)(R_cc) или -N(R_bb)S(O)₂R_bb). Где каждый R_aa, R_bb and R_cc независимо представляет собой Н, необязательно связанную химическую функциональную группу или дополнительную группу заместителя, при этом предпочтительный перечень включает, без ограничения, алкил, алкенил, алкинил, алифатические, алкокси, ацил, арил, аралкил, гетероарил, алициклические, гетероциклические и гетероарилалкил. Выбранные заместители в соединениях, описанных в настоящем документе, находятся в рекурсивной степени.

В данном контексте «алкил» означает насыщенный прямой или разветвленный углеводородный радикал, содержащий до двадцати четырех атомов углерода. Примеры алкильных групп включают, без ограничения, метил, этил, пропил, бутил, изопропил, н-гексил, октил, децил, додецил и т.п. Алкильные группы обычно содержат от 1 до примерно 24 атомов углерода, более часто от 1 до примерно 12 атомов углерода (C₁-C₁₂ алкил), более предпочтительно от 1 до примерно 6 атомов углерода.

В данном контексте «алкенил» означает прямой или разветвленный углеводородный радикал, содержащий до двадцати четырех атомов углерода и имеющий по меньшей мере одну двойную углерод-углеродную связь. Примеры алкенильных групп включают, без ограничения, этенил, пропенил, бутенил, 1-метил-2-бутен-1-ил, диены, такие как 1,3-бутадиен и т.п. Алкенильные группы обычно содержат от 2 до примерно 24 атомов углерода, более часто от 2 до примерно 12 атомов углерода, более предпочтительно от 2 до примерно 6 атомов углерода. Алкенильные группы, используемые в настоящем документе, могут необязательно содержать одну или более дополнительных групп заместителей.

В данном контексте «алкинил» означает прямой или разветвленный углеводородный радикал, содержащий до двадцати четырех атомов углерода и имеющий по меньшей мере одну тройную углерод-углеродную связь. Примеры алкинильных групп включают, без ограничения, этинил, 1-пропинил, 1-бутинил и т.п. Алкинильные группы обычно содержат от 2 до примерно 24 атомов углерода, более часто от 2 до примерно 12 атомов углерода, более предпочтительно от 2 до примерно 6 атомов углерода. Алкинильные группы, используемые в настоящем документе, могут необязательно содержать одну или более дополнительных групп заместителей.

В данном контексте «ацил» означает радикал, образованный за счет удаления гидроксильной группы от органической кислоты, и имеет общую формулу -С(O)-Х, где Х обычно является алифатическим, алициклическим или ароматическим. Примеры включают алифатические карбонилы, ароматические карбонилы, алифатические сульфонилы, ароматические сульфинилы, алифатические сульфинилы, ароматические фосфаты, алифатические фосфаты и т.п. Ацильные группы, используемые в настоящем документе, могут необязательно содержать дополнительные группы заместителей.

В данном контексте «алициклическая» означает циклическую кольцевую систему, в которой кольцо является алифатическим. Кольцевая система может содержать одно или более колец, при этом по меньшей мере одно кольцо является алифатическим. Предпочтительные алициклические системы включают кольца, имеющие от примерно 5 до примерно 9 атомов углерода в кольце. Алициклические группы, используемые в настоящем документе, могут необязательно содержать дополнительные группы заместителей.

В данном контексте «алифатический» означает прямой или разветвленный углеводородный радикал, содержащий до двадцати четырех атомов углерода, в котором насыщенность между любыми двумя атомами углерода представляет собой одинарную, двойную или тройную связь. Алифатическая группа предпочтительно содержит от 1 до примерно 24 атомов углерода, более часто от 1 до примерно 12 атомов углерода, при этом более предпочтительно от 1 до примерно 6 атомов углерода. Прямая или разветвленная цепь алифатической группы может быть прервана одним или более гетероатомами, которые включают азот, кислород, серу и фосфор. Такие алифатические группы, прерванные гетероатомами, включают, без ограничения, полиалкокси, такие как полиалкиленгликоли, полиамины и полиимины. Алифатические группы, используемые в настоящем документе, могут необязательно содержать дополнительные группы заместителей.

В данном контексте «алкокси» означает радикал, образованный между алкильной группой и атомом кислорода, при этом атом кислорода используется для присоединения алкокси-группы к исходной молекуле. Примеры алкокси-групп включают, без ограничения, метокси, этокси, пропокси, изопропокси, н-бутокси, втор-бутокси, трет-бутокси, н-пентокси, неопентокси, н-гексокси и т.п. Алкокси-группы, используемые в настоящем документе, могут необязательно содержать дополнительные группы заместителей.

В данном контексте «аминоалкил» означает аминозамещенный C₁-C₁₂ алкильный радикал. Алкильная часть указанного радикала образует ковалентную связь с исходной молекулой. Аминогруппа может быть расположена в любом положении, и аминоалкильная группа может быть замещена дополнительной группой заместителя в алкильной и/или амино-части.

В данном контексте «аралкил» и «арилалкил» означает ароматическую группу, которая ковалентно связана с C₁-C₁₂ алкильным радикалом. Часть алкильного радикала образовавшейся аралкильной (или арилалкильной) группы образует ковалентную связь с исходной молекулой. Примеры включают, без ограничения, бензил, фенетил и т.п. Аралкильные группы, используемые в настоящем документе, могут необязательно содержать дополнительные группы заместителей, присоединенные к алкильной, арильной или к обеим группам, которые образуют указанную радикальную группу.

В данном контексте «арил» и «ароматический» означают радикалы моно- или полициклической карбоциклической кольцевой системы, имеющие одно или более ароматических колец. Примеры арильных групп включают, без ограничения, фенил, нафтил, тетрагидронафтил, инданил, инденил и т.п. Предпочтительные арильные кольцевые системы имеют от примерно 5 до примерно 20 атомов углерода в одном или более кольцах. Арильные группы, используемые в настоящем документе, могут необязательно содержать дополнительные группы заместителей.

В данном контексте «гало» и «галоген» означает атом, выбранный из фтора, хлора, брома и йода.

В данном контексте «гетероарил» и «гетероароматический» означает радикал, содержащий моно- или полициклическое ароматическое кольцо, кольцевую систему или конденсированную кольцевую систему, в котором по меньшей мере одно из колец является ароматическим и содержит один или более гетероатомов. Гетероарил включает также конденсированные кольцевые системы, включая системы, в которых одно или более из конденсированных колец не содержат гетероатомов. Гетероарильные группы, как правило, содержат один кольцевой атом, выбранный из серы, азота или кислорода. Примеры гетероарильных групп включают, без ограничения, пиридинил, пиразинил, пиримидинил, пирролил, пиразолил, имидазолил, тиазолил, оксазолил, изоксазолил, тиадиазолил, оксадиазолил, тиофенил, фуранил, хинолинил, изохинолинил, бензимидазолил, бензоксазолил, хиноксалинил и т.п. Гетероарильные радикалы могут быть присоединены к исходной молекуле напрямую или через линкерный фрагмент, такой как алифатическая группа или гетероатом. Гетероарильные группы, используемые в настоящем документе, могут необязательно содержать дополнительные группы заместителей.

В данном контексте «сопряженное соединение» означает любые атомы, группы атомов или группу связанных атомов, подходящую для применения в качестве группы конъюгата. В некоторых вариантах реализации сопряженные соединения могут обладать или влиять на одно или более свойств, включая, но не ограничиваясь ими, свойства фармакодинамики, фармакокинетики, связывания, абсорбции, клеточного распределения, клеточного захвата, заряда и/или выведения.

В данном контексте, если не указано или не модифицировано иным образом, «двухцепочечные» относится к двум отдельным олигомерным соединениям, которые гибридизованы друг с другом. Такие двухцепочечные соединения могут иметь один или более негибридизованных нуклеозидов у одного или обоих концов одной или обеих цепей (выступы) и/или один или более внутренних негибридизованных нуклеозидов (несоответствий), при условии, что существует достаточная комплементарность для сохранения гибридизации при физиологически релевантных условиях.

В данном контексте «2'-O-метоксиэтил» (также 2'-МОЕ и 2'-O(СН₂)₂-ОСН₃) относится к O-метоксиэтил-модификации в 2'-положении фуранозного кольца. 2'-O-метоксиэтил-модифицированный сахар представляет собой модифицированный сахар.

В данном контексте «2'-O-метоксиэтил-нуклеотид» означает нуклеотид, содержащий 2'-O-метоксиэтил-модифицированный сахарный фрагмент.

«3' Сайт-мишень» или «3' сайт терминации» обозначает нуклеотид нуклеиновой кислоты-мишени, комплементарный 3'-крайнему нуклеотиду конкретного антисмыслового соединения.

В данном контексте «5' сайт-мишень» или «5 сайт инициации» обозначает нуклеотид нуклеиновой кислоты-мишени, комплементарный 5'-крайнему нуклеотиду конкретного антисмыслового соединения.

В данном контексте «5-метилцитозин» означает цитозин, модифицированный метильной группой в 5'-положении. 5-метилцитозин представляет собой модифицированное азотистое основание.

В данном контексте «примерно» означает в пределах ±10% от значения. Например, если указано, что «маркер может быть увеличен на примерно 50%», то подразумевается, что маркер может быть увеличен на 45%-55%.

В данном контексте «активный фармацевтический агент» означает вещество или вещества в фармацевтической композиции, которые обеспечивают терапевтический эффект при введении индивидууму. Например, в некоторых вариантах реализации антисмысловой олиго нуклеотид, нацеленный на ANGPTL3, представляет собой активный фармацевтический агент.

В данном контексте «активная область-мишень» или «область-мишень» означает область, на которую нацелено одно или более активных антисмысловых соединений.

В данном контексте «активные антисмысловые соединения» означает антисмысловые соединения, которые снижают уровни целевой нуклеиновой кислоты или уровни белка.

В данном контексте «адипогенез» означает развитие жировых клеток из преадипоцитов. «Липогенез» означает выработку или образование жира, либо жировую дегенерацию, либо жировую инфильтрацию.

В данном контексте «тучность» или «ожирение» относится к состоянию ожирения или избыточно высокого количества телесного жира или жировой ткани по сравнению с тощей массой тела. Количество телесного жира относится к распределению жира в теле и к размеру и массе отложений жировой ткани. Распределение телесного жира может быть оценено посредством измерений кожных складок, соотношения окружностей талии/бедер или такими технологиями как ультразвуковое исследование, компьютерная томография или магнитно-резонансное исследование. Согласно указаниям Центра профилактики и контроля заболеваемости, индивидуумы с индексом массы тела (BMI) 30 или более считаются тучными. Термин «ожирение» в данном контексте включает патологические состояния, в которых существует увеличение телесного жира за пределами физических потребностей в результате избыточного накопления жировой ткани в организме. Термин «ожирение» включает, но не ограничивается ими, следующие патологические состояния: возрастное ожирение; алиментарное ожирение; эндогенное или метаболическое ожирение; эндокринное ожирение; наследственное ожирение; гиперинсулинарное ожирение; гиперпластическое-гипертрофическое ожирение; гипогонадное ожирение; гипотиреоидное ожирение; пожизненное ожирение; морбидное ожирение и экзогенное ожирение.

В данном контексте «вводятся совместно» огтносится к совместному введению двух агентов любым способом, при котором фармакологические эффекты обоих проявляются у пациента одновременно. Совместное введение не требует, чтобы оба агента были введены в одной фармацевтической композиции, в одной лекарственной форме или одним способом введения. Эффекты обоих агентов не обязательно должны проявляться одновременно. Эффекты должны только перекрываться в промежутке времени и не обязательно должны иметь одинаковую продолжительность.

В данном контексте «введение» означает обеспечение агентом животного и включает, но не ограничивается этим, введение медицинским работником и самостоятельное введение.

В данном контексте «агент» означает активное вещество, которое может обеспечивать терапевтический эффект при введении животному. «Первый агент» означает терапевтическое соединение согласно настоящему изобретению. Например, первый агент может представлять собой антисмысловой олигонуклеотид, нацеленный на ANGPTL3. «Второй агент» означает второе терапевтическое соединение согласно настоящему изобретению (например, второй антисмысловой олигонуклеотид, нацеленный на ANGPTL3) и/или терапевтическое соединение, не нацеленное на ANGPTL3.

В данном контексте «улучшение» относится к уменьшению по меньшей мере одного показателя, признака или симптома связанного заболевания, расстройства или патологического состояния. Степень тяжести показателей может быть определена субъективными или объективными показателями, которые известны специалистам в данной области техники.

В данном контексте «ANGPTL3» означает любую нуклеиновую кислоту или белок ANGPTL3.

В данном контексте «экспрессия ANGPTL3» означает уровень мРНК, транскрибированной из гена, кодирующего ANGPTL3, или уровень белка, транслированного из мРНК. Экспрессия ANGPTL3 может быть определена известными в данной области техники способами, такими как нозерн или вестерн-блоттинг.

В данном контексте «нуклеиновая кислота ANGPTL3» означает любую нуклеиновую кислоту, кодирующую ANGPTL3. Например, в некоторых вариантах реализации изобретения, нуклеиновая кислота ANGPTL3 включает последовательность ДНК, кодирующую ANGPTL3, последовательность РНК, транскрибированную из ДНК, кодирующей ANGPTL3 (в том числе, геномной ДНК, содержащей интроны и экзоны), и последовательность мРНК, кодирующую ANGPTL3. «мРНК ANGPTL3» обозначает мРНК, кодирующую белок ANGPTL3.

В данном контексте «животное» относится к человеку или животному, не являющемуся человеком, включая, но не ограничиваясь ими, мышей, крыс, кроликов, собак, кошек, свиней и приматов, включая, но не ограничиваясь ими, обезьян и шимпанзе.

В данном контексте «липопротеин, содержащий ароВ» означает любой липопротеин, который содержит аполипопротеин В в качестве компонента своего белка, и включает LDL, VLDL, IDL и липопротеин (а), и может быть, в целом, мишенью для агента и терапии для понижения липидов. «LDL, содержащий АроВ-100» означает LDL, содержащий изоформу АроВ-100.

В данном контексте «атеросклероз» означает отвердевание артерий, поражающее крупные и средние артерии, которое характеризуется наличием жировых отложений. Жировые отложения называют «атеромами» или «бляшками», которые состоят, главным образом, из холестерина и других жиров, кальция и рубцовой ткани, и повреждает выстилку артерий.

В данном контексте «кардиометаболическое заболевание» или «кардиометаболическое расстройство» представляют собой заболевания или расстройства, касающиеся одновременно сердечно-сосудистой системы и метаболической системы. Примеры кардиометаболических заболеваний или расстройств включают, но не ограничиваются ими, диабет и дислипидемию.

В данном контексте «совместное введение» означает введение индивидууму двух или более агентов. Два или более агентов могут быть в одной фармацевтической композиции или могут быть в отдельных фармацевтических композициях. Каждый из двух или более агентов может быть введен таким же или другим способом введения. Совместное введение включает параллельное или последовательное введение.

В данном контексте «холестерин» представляет собой молекулу стерина, находящуюся в клеточных меабранах всех животных тканей. Холестерин транспортируется в плазме крови животных липопротеинами, включая липопротеин очень низкой плотности (VLDL), липопротеин средней плотности (IDL), липопротеин низкой плотности (LDL) и липопротеин высокой плотности (HDL). «Холестерин плазмы» относится к сумме всех липопротеинов (VDL, IDL, LDL, HDL) эстерифицированного и/или неэстерифицированного холестерина, присутствующих в плазме или сыворотке.

В данном контексте «ингибитор абсорбции холестерина» означает агент, который ингибирует абсорбцию экзогенного холестерина, получаемого с пищей.

В данном контексте «коронарная болезнь сердца (CHD)» означает сужение мелких кровеносных сосудов, которые доставляют кровь и кислород в сердце, что зачастую является результатом атеросклероза.

В данном контексте «сахарный диабет» или «диабет» представляет собой синдром, характеризующийся нарушенным метаболизмом и патологически высоким содержанием сахара в крови (гипергликемия) вследствие недостаточных уровней инсулина или сниженной чувствительности к инсулину. Характерные симптомы включают избыточное выделение мочи (полиурия) вследствие высоких уровней глюкозы в крови, чрезмерную жажду и повышенное потребление жидкостей (полидипсия) в попытке компенсировать усиленное мочевыделение, расплывчатое зрение в результате высокого содержания глюкозы в крови, влияющего на оптические свойства глаз, необъяснимую потерю веса и сонливость.

В данном контексте «диабетическая дислипидемия» или «диабет 2 типа с дислипидемией» означает патологическое состояние, характеризующееся диабетом 2 типа, сниженным уровнем HDL-C, повышенным уровнем триглицеридов и повышенным содержанием мелких, плотных частиц LDL.

В данном контексте «разбавитель» означает компонент композиции, который не обладает фармакологической активностью, но является фармацевтически необходимым или желательным. Например, разбавитель в композиции для инъекции может представлять собой жидкость, например, солевой раствор.

В данном контексте «дислипидемия» относится к расстройству метаболизма липидов и/или липопротеинов, включая сверхвыработку или дефицит липидов и/или липопротеинов. Дислипидемия может проявляться повышением содержания липидов, таких как холестерин и триглицериды, а также липопротеинов, таких как холестерин липопротеинов низкой плотности (LDL).

В данном контексте «дозированная единица» означает форму, в которой представлен фармацевтический агент, например, пилюля, таблетка или другая дозированная единица, известная в данной области техники. В некоторых вариантах реализации дозированная единица представляет собой пробирку, содержащую лиофилизированный антисмысловой олигонуклеотид. В некоторых вариантах реализации дозированная единица представляет собой пробирку, содержащую восстановленный антисмысловой олигонуклеотид.

В данном контексте «доза» означает определенное количество фармацевтического агента, обеспечиваемое за одно введение или за определенный период времени. В некоторых вариантах реализации изобретения доза может быть введена в виде одного, двух или более болюсов, таблеток или инъекций. Например, в определенных вариантах реализации, где необходимо подкожное введение, нужная доза требует объема, который не помещается в одной инъекции, поэтому для достижения желаемой дозы могут быть использованы две или более инъекций. В некоторых вариантах реализации фармацевтический агент вводят путем инфузии в течение длительного периода времени или непрерывно. Дозы могут быть указаны как количество фармацевтического агента в час, день, неделю, или месяц. Дозы могут быть выражены в мг/кг или г/кг.

В данном контексте «эффективное количество» или «терапевтически эффективное количество» означает количество активного фармацевтического агента, достаточное для достижения требуемого физиологического результата у индивидуума, нуждающегося в таком агенте. Эффективное количество может варьироваться среди индивидуумов в зависимости от состояния здоровья и физического состояния индивидуума, подлежащего лечению, таксономической группы индивидуумов, подлежащих лечению, рецептуры композиции, оценки индивидуального состояния здоровья и других релевантных факторов.

В данном контексте «глюкоза» представляет собой моносахарид, используемый клетками в качестве источника энергии и метаболического промежуточного соединения. «Глюкоза плазмы» относится к содержанию глюкозы в плазме.

В данном контексте «X липопротеинов высокой плотности (HDL-C)» означает холестерин, связанный с частицами липопротеинов высокой плотности. Концентрацию HDL-С в сыворотке (или плазме) обычно количественно определяют в мг/дл или нмоль/л. «HDL-C в сыворотке» и «HDL-C в плазме» означают HDL-C в сыворотке и плазме, соответственно.

В данном контексте «ингибитор редуктазы HMG-CoA» означает агент, который действует посредством ингибирования фермента редуктазы HMG-CoA, такой как аторвастатин, флувастатин, ловастатин, правастатин и симвастатин.

В данном контексте «гиперхолестеринемия» означает состояние, характеризующееся повышенным уровнем холестерина или циркулирующего холестерина (в плазме), холестерина LDL и холестерина VLDL, в соответствии с руководством отчета экспертной комиссии Национальной программы по холестерину (NCEP) по обнаружению, оценке и лечению высокого содержания холестерина у взрослых (см. Arch. Int. Med. (1988) 148, 36-39).

В данном контексте «гиперлипидемия» или «гиперлипемия» представляет собой состояние, характеризующееся повышенным уровнем липидов в сыворотке или циркулирующих липидов (в плазме). Такое состояние проявляется в виде патологически высокой концентрации жиров. Липидные фракции в кровотоке представляют собой холестерин, липопротеины низкой плотности, липопротеины очень низкой плотности и триглицериды.

В данном контексте «гипертриглицеридемия» означает состояние, характеризующееся повышенными уровнями триглицеридов.

В данном контексте «идентификация» или «выбр субъекта, страдающего от метаболического или сердечно-сосудистого заболевания» означает идентификацию или выбор субъекта, у которого диагностировано метаболическое заболевание, сердечнососудистое заболевание или метаболический синдром; или идентификацию или выбор субъекта, имеющего любой симптом метаболического заболевания, сердечно-сосудистого заболевания или метаболического синдрома, включая, но не ограничиваясь ими, гиперхолестеринемию, гипергликемию, гиперлипидемию, гипертриглицеридемию, гипертонию, повышенную резистентность к инсулину, сниженную чувствительность к инсулину, массу тела выше нормы и/или содержание телесного жира выше нормы, или любую их комбинацию. Такая идентификация может быть проведена любым способом, включая, но не ограничиваясь ими, стандартные клинические тесты или испытания, такие как измерение холестерина в сыворотке или циркулирующего холестерина (в плазме), измерение глюкозы в сыворотке или в кровотоке (в плазме), измерение триглицеридов в сыворотке или циркулирующих триглицеридов (в плазме), измерение кровяного давления, измерение содержания телесного жира, измерение массы тела и т.п.

В данном контексте «идентификация» или «выбор субъекта с диабетом» означает идентификацию или выбор субъекта, у которого выявлен диабет, или идентификацию или выбор субъекта, имеющего любой симптом диабета (1 типа или 2 типа), такой как, но не ограничиваясь ими, уровень глюкозы натощак по меньшей мере 110 мг/дл, гликозурия, полиурия, полидипсия, повышенная резистентность к инсулину и/или сниженная чувствительность к инсулину.

В данном контексте «идентификация» или «выбор субъекта с ожирением» означает идентификацию или выбор субъекта, у которого диагностировано ожирение, или идентификацию или выбор субъекта с BMI более 30 и/или окружностью талии более 102 см у мужчин или более 88 см у женщин.

В данном контексте «идентификация» или «выбор субъекта с дислипидемией» означает идентификацию или выбор субъекта, у которого диагностировано расстройства метаболизма липидов и/или липопротеинов, включая сверхвыработку или дефицит липидов и/или липопротеинов. Дислипидемия может проявляться повышением содержания липидов, таких как холестерин и триглицериды, а также липопротеинов, таких как холестерин липопротеинов низкой плотности (LDL).

В данном контексте «идентификация» или «выбор субъекта, имеющего повышенную тучность» означает идентификацию или выбор субъекта, имеющего повышенное количество телесного жира (или тучность), включая один или оба из распределения жира в организме и размера и массы отложений жировой ткани. Распределение телесного жира может быть оценено посредством измерений кожных складок, соотношения окружностей талии/бедер или такими технологиями как ультразвуковое исследование, компьютерная томография или магнитно-резонансное исследование. Согласно указаниям Центра профилактики и контроля заболеваемости, индивидуумы с индексом массы тела (BMI) 30 или более считаются тучными.

В данном контексте «улучшенный сердечно-сосудистый результат» означает уменьшение возникновения неблагоприятных сердечно-сосудистых явлений или их риска. Примеры неблагоприятных сердечно-сосудистых явлений включают, без ограничения, смерть, повторный инфаркт, инсульт, кардиогенный шок, отек легких, остановку сердца и атриальную дизритмию.

В данном контексте «непосредственно примыкающий» означает отсутствие промежуточных элементов между непосредственно примыкающими элементами.

В данном контексте «индивидуум» или «субъект», или «животное» означает человека или животное, выбранное для лечения или терапии.

В данном контексте «резистентность к инсулину» определяют как состояние, при котором нормальное количество инсулина является недостаточным для получения нормальной инсулиновой реакции клеток, например, жировых, мышечных и/или печеночных клеток. Резистентность к инсулину в жировых клетках приводит к гидролизу запасенных триглицеридов, что повышает уровни свободных жирных кислот в плазме крови. Резистентность к инсулину в мышцах снижает поглощение глюкозы, тогда как резистентность к инсулину в печени снижает запасы глюкозы, и оба эффекта приводят к повышению глюкозы в крови. Высокие уровни инсулина и глюкозы в плазме, обусловленные резистентностью к инсулину, зачастую приводят к метаболическому синдрому и диабету 2 типа.

В данном контексте «чувствительность к инсулину» представляют собой меру эффективности переработки глюкозы в организме индивидуума. Индивидуум, имеющий высокую чувствительность к инсулину, эффективно перерабатывает глюкозу, тогда как индивидуум с низкой чувствительностью к инсулину не может эффективно перерабатывать глюкозу.

В данном контексте «внутривенное введение» означает введение в вену.

В данном контексте «снижение липидов» означает снижение одного или более липидов у субъекта. Снижение липидов может происходить при введении одной или более доз в динамике.

В данном контексте «агент, снижающий липиды» означает агент, например, специфический модулятор ANGPTL3, введенный субъекту для достижения эффекта снижения липидов у субъекта. Например, в некоторых вариантах реализации агент, снижающий липиды, вводят субъекту для снижения одного или более из ароВ, ароС-III, общего холестерина, LDL-С, VLDL-C, IDL-C, не-HDL-C, триглицеридов, мелких плотных частиц LDL и Lp(a) у субъекта.

В данном контексте «терапия для снижения липидов» означает терапевтический режим, обеспечиваемый субъекту для снижения одного или более липидов у субъекта. В некоторых вариантах реализации терапию для снижения липидов обеспечивают для снижения одного или более из ароВ, ароС-III, общего холестерина, LDL-C, VLDL-C, IDL-C, не-HDL-C, триглицеридов, мелких плотных частиц LDL и Lp(a) у субъекта.

В данном контексте «липопротеин», такой как VLDL, LDL и HDL, относится к группе белков, находящихся в сыворотке, плазме и лимфе, которые важны для транспорта липидов. Химический состав каждого липопротеина отличается в том отношении, что HDL имеет более высокое содержание белка относительно липида, тогда как VLDL имеет более низкое содержание белка относительно липида.

В данном контексте «холестерин липопротеинов низкой плотности (LDL-C)» означает холестерин, находящийся в частицах липопротеинов низкой плотности. Концентрацию LDL-С в сыворотке (или плазме) обычно количественно определяют в мг/дл или нмоль/л. «LDL-C в сыворотке» и «LDL-C в плазме» означают LDL-C в сыворотке и плазме, соответственно.

В данном контексте «основные факторы риска» относятся к факторам, которые способствуют высокому риску конкретного заболевания или патологического состояния. В некоторых вариантах реализации основные факторы риска коронарной болезни сердца включают, без ограничения, курение, гипертонию, низкий HDL-C, семейный анамнез коронарной болезни сердца, возраст и другие факторы, описанные в настоящем документе.

В данном контексте «метаболическое расстройство» или «метаболическое заболевание» относится к состоянию, характеризующемуся изменением или нарушением метаболической функции. «Метаболический» и «метаболизм» представляют собой термины, хорошо известные в данной области техники и включают, в целом, весь диапазон биохимических процессов, протекающих в живом организме. Метаболические расстройства включают, но не ограничиваются ими, гипергликемию, преддиабет, диабет (I типа и 2 типа), ожирение, резистентность к инсулину, метаболический синдром и дислипидемию на фоне диабета 2 типа.

В данном контексте «метаболический синдром» означает состояние, характеризующееся комбинацией липидных и нелипидных сердечно-сосудистых факторов риска метаболического происхождения. В некоторых вариантах реализации метаболический синдром идентифицируют по наличию любых 3 из следующих факторов: окружность талии более 102 см у мужчин или более 88 см у женщин; содержание триглицеридов в сыворотке по меньшей мере 150 мг/дл; HDL-C менее 40 мг/дл у мужчин или менее 50 мг/дл у женщин; кровяное давление по меньшей мере 130/85 мм рт.ст.; и содержание глюкозы натощак по меньшей мере 110 мг/дл. Указанные определители могут быть легко измерены в клинической практике (JAMA, 2001, 285: 2486-2497).

В данном контексте «смешанная дислипидемия» означает состояние, характеризующееся повышенным холестерином и повышенными триглицеридами.

В данном контексте «ингибитор МТР» означает агент, который ингибирует фермент микросомальный белок-переносчик триглицеридов.

В данном контексте «неалкагольная жировая дистрофия печени» или «NAFLD» означает состояние, характеризующееся жировым воспалением печени, которое не обусловлено избыточным употреблением алкоголя (например, употреблением алкоголя более 20 г/сутки). В некоторых вариантах реализации NAFLD связана с резистентностью к инсулину и метаболическим синдромом. NAFLD охватывает спектр заболеваний от простого накопления триглицеридов в гепатоцитах (стеатоз печени) до стеатоза печени с воспалением (стеатогепатит), фиброза и цирроза.

В данном контексте «неалкагольный стеатогепатит» (NASH) возникает в результате прогрессирования NAFLD за пределы отложения триглицеридов. Для развития NASH необходима «вторичная травма», способная вызывать некроз, воспаление и фиброз. Потенциальные факторы «вторичной травмы» могут быть сгруппированы в широкие категории: факторы, вызывающие усиление окислительного стресса, и факторы, ускоряющие экспрессию провоспалительных цитокинов. Сделано предположение, что повышенные триглицериды в печени приводят к усилению окислительного стресса в гепатоцитах животных и людей, указывая на потенциальную причинно-следственную связь между накоплением триглицеридов в печени, окислительным стрессом и прогрессированием стеатоза печени до NASH (Browning и Horton, J Clin Invest, 2004, 114, 147-152). Hypertriglyceridemia and hyperfattyacidemia can cause triglyceride accumulation in peripheral tissues (Shimamura et al., Biochem Biophys Res Commun, 2004, 322, 1080-1085).

В данном контексте «нуклеиновая кислота» относится к молекулам, состоящим из мономерных нуклеотидов. Нуклеиновая кислота включает рибонуклеиновые кислоты (РНК), дезоксирибонуклеиновые кислоты (ДНК), одноцепочечные нуклеиновые кислоты, двухцепочечные нуклеиновые кислоты, малые интерферирующие рибонуклеиновые кислоты (миРНК) и микроРНК. Нуклеиновая кислота также может содержать комбинацию указанных элементов в одной молекуле.

В данном контексте «парентеральное введение» означает введение другим путем, отличным от введения через пищеварительный тракт. Парентеральное введение включает местное введение, подкожное введение, внутривенное введение, внутримышечное введение, внутриартериальное введение, внутрибрюшинное введение или внутричерепное введение, например, интратекальное или интрацеребровентрикулярное введение. Введение может быть непрерывным или постоянным, или кратковременным, или прерывистым.

В данном контексте «фармацевтический агент» означает вещество, которое обеспечивает терапевтический эффект при введении индивидууму. Например, в некоторых вариантах реализации антисмысловой олигонуклеотид, нацеленный на ANGPTL3, представляет собой фармацевтический агент.

В данном контексте «фармацевтическая композиция» означает смесь веществ, пригодных для введения индивидууму. Например, фармацевтическая композиция может содержать один или более активных агентов и стерильный водный раствор.

В данном контексте «фармацевтически приемлемый носитель» означает среду или разбавитель, который не нарушает структуру или функцию олигонуклеотида. Некоторые из таких носителей обеспечивают возможность составления фармацевтической композиции, например, в виде таблеток, пилюль, драже, капсул, жидкостей, гелей, сиропов, взвесей, суспензий и пастилок для перорального проглатывания субъектом. Некоторые из таких носителей обеспечивают возможность составления фармацевтических композиций для инъекций или инфузий. Например, фармацевтически приемлемый носитель может представлять собой стерильный водный раствор.

В данном контексте «фармацевтически приемлемые соли» означает физиологически и фармацевтически приемлемые соли антисмысловых соединений, т.е. соли, которые сохраняют требуемую биологическую активность исходного олигонуклеотида и не вызывают нежелательных токсикологических эффектов.

В данном контексте «часть» означает определенное количество смежных (т.е. связанных) азотистых оснований нуклеиновой кислоты. В некоторых вариантах реализации часть представляет собой определенное число смежных азотистых оснований нуклеиновой кислоты-мишени. В некоторых вариантах реализации часть представляет собой определенное число смежных азотистых оснований антисмыслового соединения.

В данном контексте «предупреждать» относится к отсрочке или предотвращению возникновения или развития заболевания, расстройства или патологического состояния в течение периода времени от нескольких минут до неопределенного срока. Предупреждение означает также снижение риска развития заболевания, расстройства или патологического состояния.

В данном контексте «побочные эффекты» означает физиологические реакции, приписываемые лечению, которые отличны от желаемых эффектов. В некоторых вариантах реализации побочные эффекты включают реакции в месте инъекции, аномалии функциональных проб печени, отклонения в функциях почек, гепатотоксичность, нефротоксичность, аномалии центральной нервной системы, миопатии и недомогание. Например, повышение уровней аминотрансферазы в сыворотке может указывать на гепатотоксичность или нарушение функции печени. Например, повышенный билирубин может указывать на гепатотоксичность или нарушение функции печени.

В данном контексте «статин» означает агент, который ингибирует активность редуктазы HMG-CoA.

В данном контексте «подкожное введение» означает введение непосредственно под кожу.

В данном контексте «таргетинг» или «целевой» означает процесс конструирования и выбора антисмыслового соединения, которое будет специфически гибридизоваться с целевой нуклеиновой кислотой и вызывать желаемый эффект.

В данном контексте «целевая нуклеиновая кислота», «целевая РНК» и «целевой РНК транскрипт» относятся к нуклеиновой кислоте, способной стать мишенью для антисмысловых соединений.

В данном контексте «область-мишень» определяют как часть нуклеиновой кислоты-мишени, имеющую по меньшей мере одну идентифицируемую структуру, функцию или характеристику.

В данном контексте «сегмент-мишень» означает последовательность нуклеотидов нуклеиновой кислоты-мишени, на которую нацелено антисмысловое соединение. «5' Сайт-мишень» или «5' сайт инициации» относится к 5'-крайнему нуклеотиду целевого сегмента. «3' Сайт-мишень» или «3' сайт терминации» относится к 3'-крайнему нуклеотиду целевого сегмента.

В данном контексте «терапевтически эффективное количество» означает количество агента, которое обеспечивает терапевтический эффект для индивидуума.

В данном контексте «терапевтическое изменение образа жизни» означает изменение рациона и образа жизни с целью снижения массы жира/жировой ткани и/или холестерина. Такое изменение может снижать риск развития сердечного заболевания и может включать рекомендации по диетическому употреблению общих суточных калорий, общих жиров, насыщенных жиров, полиненасыщенных жиров, мононенасыщенных жиров, углеводов, белков, холестерина, нерастворимых волокон, а также рекомендации по физической активности.

В данном контексте «триглицерид» означает липид или нейтральный жир, состоящий из глицерина, связанного с тремя молекулами жирной кислоты.

В данном контексте «диабет 2 типа» (также известный как «сахарный диабет 2 типа» или «сахарный диабет, тип 2», называемый ранее «сахарным диабетом 2 типа», «инсулино независимым диабетом (NIDDM)», «диабетом на фоне ожирения» или «возрастным диабетом») представляет собой метаболическое расстройство, которое характеризуется, главным образом, резистентностью к инсулину, относительным дефицитом инсулина и гипергликемией.

В данном контексте «лечить» относится к введению фармацевтической композиции для изменения или облегчения заболевания, расстройства или патологического состояния. Некоторые варианты реализации изобретения

В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, ANGPTL3 имеет последовательность с номером доступа GenBank NM_014495.2 (включенную в настоящий документ как SEQ ID NO: 1). В некоторых вариантах реализации ANGPTL3 имеет последовательность с номером доступа GenBank NT_032977.9, нуклеотиды с 33032001 по 33046000 (включенную в настоящий документ как SEQ ID NO: 2).

В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 нуклеозидов, имеющих последовательность азотистых оснований, содержащую по меньшей мере 8 смежных азотистых оснований, комплементарную равной по длине части SEQ ID NO: 1-2.

В некоторых вариантах реализации соединение содержит миРНК или антисмысловой олигонуклеотид, направленный на ANGPTL3, известный в данной области техники, и группу конъюгата, описанную в настоящем документе. Примеры антисмысловых олигонуклеотидов, направленных на ANGPTL3, которые подходят для сопряжения, включают, но не ограничиваются ими, те, которые описаны в US 8653047 (WO 2011/085271), полное содержание которого включено в настоящий документ посредством ссылки. В некоторых вариантах реализации соединение содержит антисмысловой олигонуклеотид, имеющий последовательность азотистых оснований любой из SEQ ID NO: 34-111, описанных в US 8653047, и группу конъюгата, описанную в настоящем документе. В некоторых вариантах реализации соединение содержит смысловую или антисмысловую цепь миРНК, имеющую последовательность азотистых оснований любой из SEQ ID NO: 34-111, описанных в US 8653047, и группу конъюгата, описанную в настоящем документе. Последовательности азотистых оснований всех вышеупомянутых справочных SEQ ID NO включены в настоящий документ посредством ссылки.

В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов в длину и направлен на ANGPTL3. Мишень ANGPTL3 может иметь последовательность, выбранную из любой из SEQ ID NO: 1-2.

В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и содержит последовательность азотистых оснований, содержащую часть из по меньшей мере 8 смежных азотистых оснований, комплементарную равной по длине части азотистых оснований 1140-1159 SEQ ID NO: 1, где последовательность азотистых оснований модифицированного олигонуклеотида по меньшей мере на 80% комплементарна SEQ ID NO: 1. В некоторых вариантах реализации модифицированный олигонуклеотид содержит по меньшей мере 8, по меньшей мере 9, по меньшей мере 10, по меньшей мере 11, по меньшей мере 12, по меньшей мере 13, по меньшей мере 14, по меньшей мере 15, по меньшей мере 16, по меньшей мере 17, по меньшей мере 18, по меньшей мере 19 или 20 последовательных азотистых оснований, комплементарных равной по длине части азотистых оснований 1140-1159 SEQ ID NO: 1.

В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и содержит последовательность азотистых оснований, комплементарную азотистым основаниями 1140-1159 SEQ ID NO: 1, где последовательность азотистых оснований модифицированного олигонуклеотида по меньшей мере на 80% комплементарна SEQ ID NO: 1.

В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и содержит последовательность азотистых оснований, содержащую часть из по меньшей мере 8 смежных азотистых оснований, комплементарную равной по длине части азотистых оснований 1907-1926 SEQ ID NO: 1, где последовательность азотистых оснований модифицированного олигонуклеотида по меньшей мере на 80% комплементарна SEQ ID NO: 1. В некоторых вариантах реализации модифицированный олигонуклеотид содержит по меньшей мере 8, по меньшей мере 9, по меньшей мере 10, по меньшей мере 11, по меньшей мере 12, по меньшей мере 13, по меньшей мере 14, по меньшей мере 15, по меньшей мере 16, по меньшей мере 17, по меньшей мере 18, по меньшей мере 19 или 20 последовательных азотистых оснований, комплементарных равной по длине части азотистых оснований 1907-1926 SEQ ID NO: 1.

В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и содержит последовательность азотистых оснований, комплементарную азотистым основаниями 1907-1926 SEQ ID NO: 1, где последовательность азотистых оснований модифицированного олигонуклеотида по меньшей мере на 80% комплементарна SEQ ID NO: 1.

В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и содержит последовательность азотистых оснований, содержащую часть из по меньшей мере 8 смежных азотистых оснований, комплементарную равной по длине части азотистых оснований 147-162 SEQ ID NO: 1, где последовательность азотистых оснований модифицированного олигонуклеотида по меньшей мере на 80% комплементарна SEQ ID NO: 1. В некоторых вариантах реализации модифицированный олигонуклеотид содержит по меньшей мере 8, по меньшей мере 9, по меньшей мере 10, по меньшей мере 11, по меньшей мере 12, по меньшей мере 13, по меньшей мере 14, по меньшей мере 15 или 16 последовательных азотистых оснований, комплементарных равной по длине части азотистых оснований 147-162 SEQ ID NO: 1.

В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и содержит последовательность азотистых оснований, комплементарную азотистым основаниями 147-162 SEQ ID NO: 1, где последовательность азотистых оснований модифицированного олигонуклеотида по меньшей мере на 80% комплементарна SEQ ID NO: 1.

В некоторых вариантах реализации модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30, 15-30, 18-24, 19-22, 13-25, 14-25, 15-25 или 16-24 связанных нуклеозидов. В некоторых вариантах реализации модифицированный олигонуклеотид состоит из 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 или 30 связанных нуклеозидов, или их количество находится в диапазоне, определенном любыми двумя из указанных значений. В некоторых вариантах реализации модифицированный олигонуклеотид имеет 16 связанных нуклеозидов в длину. В некоторых вариантах реализации модифицированный олигонуклеотид имеет 20 связанных нуклеозидов в длину.

В некоторых вариантах реализации модифицированный олигонуклеотид содержит последовательность азотистых оснований, содержащую часть из по меньшей мере 8, по меньшей мере 9, по меньшей мере 10, по меньшей мере 11, по меньшей мере 12, по меньшей мере 13, по меньшей мере 14, по меньшей мере 15, по меньшей мере 16, по меньшей мере 17, по меньшей мере 18, по меньшей мере 19 или 20 последовательных азотистых оснований, комплементарную равной по длине части SEQ ID NO: 1 или 2.

В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и имеет последовательность азотистых оснований, содержащую по меньшей мере 8, по меньшей мере 9, по меньшей мере 10, по меньшей мере 11, по меньшей мере 12, по меньшей мере 13, по меньшей мере 14, по меньшей мере 15, по меньшей мере 16, по меньшей мере 17, по меньшей мере 18, по меньшей мере 19 или 20 последовательных азотистых оснований последовательности азотистых оснований, выбранной из любой из SEQ ID NO: 15-27, 30-73, 75-85, 87-232, 238, 240-243, 245-247, 249-262, 264-397, 399-469, 471-541, 543-600, 604-760, 762-819, 821-966, 968-971, 973-975, 977-990, 992-1110, 1112-1186, 1188-1216, 1218-1226, 1228-1279, 1281-1293, 1295-1304, 1306-1943, 1945-1951, 1953-1977, 1979-1981, 1983-2044, 2046-2097, 2099-2181, 2183-2232, 2234-2238, 2240-2258, 2260-2265, 2267-2971, 2973-2976, 2978-4162, 4164-4329, 4331-4389, 4391-4394, 4396-4877.

В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и имеет последовательность азотистых оснований, содержащую по меньшей мере 8, по меньшей мере 9, по меньшей мере 10, по меньшей мере 11, по меньшей мере 12, по меньшей мере 13, по меньшей мере 14, по меньшей мере 15, по меньшей мере 16, по меньшей мере 17, по меньшей мере 18, по меньшей мере 19 или 20 последовательных азотистых оснований последовательностей азотистых оснований SEQ ID NO: 77. В некоторых вариантах реализации соединение содержит ISIS 563580 и группу конъюгата. В некоторых вариантах реализации соединение состоит из ISIS 563580 и группы конъюгата.

В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложены сопряженные антисмысловые соединения, представленные следующей структурой. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение содержит модифицированный олигонуклеотид ISIS 563580 с 5'-Х, где Х представляет собой группу конъюгата, содержащую GalNAc. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение состоит из модифицированного олигонуклеотида ISIS 563580 с 5'-Х, где Х представляет собой группу конъюгата, содержащую GalNAc.

В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложены сопряженные антисмысловые соединения, представленные следующей структурой. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение содержит сопряженный модифицированный олигонуклеотид ISIS 703801. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение состоит из сопряженного модифицированного олигонуклеотида ISIS 703801.

В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложены сопряженные антисмысловые соединения, представленные следующей структурой. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение содержит сопряженный модифицированный олигонуклеотид ISIS 703802. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение состоит из сопряженного модифицированного олигонуклеотида ISIS 703802.

В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложены сопряженные антисмысловые соединения, представленные следующей структурой. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение содержит модифицированный олигонуклеотид с последовательностью азотистых оснований SEQ ID NO: 77 с 5'-GalNAc, с вариабельностью сахарных модификаций в крыльях. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение состоит из модифицированного олигонуклеотида с последовательностью азотистых оснований SEQ ID NO: 77 с 5'-GalNAc, с вариабельностью сахарных модификаций в крыльях.

где либо R¹ представляет собой -OCH₂CH₂OCH₃ (МОЕ), и R² представляет собой Н; либо R¹ и R² вместе образуют мостик, где R¹ представляет собой -O-, и R² представляет собой -СН₂-, -СН(СН₃)- или -СН₂СН₂-, и R¹ и R² напрямую связаны так, что образующийся мостик выбран из: -O-СН₂-, -О-СН(СН₃)- и -O-СН₂СН₂-;

и для каждой пары R³ и R⁴ у одного кольца, независимо для каждого кольца: либо R³ выбран из Н и -ОСН₂СН₂OСН₃, и R⁴ представляет собой H; либо R³ и R⁴ вместе образуют мостик, где R³ представляет собой -O-, и R⁴ представляет собой -СН₂-, -СН(СН₃)- или -СН₂СН₂-, и R³ и R⁴ напрямую связаны так, что образующийся мостик выбран из: -O-СН₂-, -O-СН(СН₃)- и -O-СН₂СН₂-;

и R⁵ выбран из Н и -СН₃;

и Z выбран из S^- и О^-.

В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и имеет последовательность азотистых оснований, содержащую по меньшей мере 8, по меньшей мере 9, по меньшей мере 10, по меньшей мере 11, по меньшей мере 12, по меньшей мере 13, по меньшей мере 14, по меньшей мере 15, по меньшей мере 16, по меньшей мере 17, по меньшей мере 18, по меньшей мере 19 или 20 последовательных азотистых оснований последовательности азотистых оснований SEQ ID NO: 20. В некоторых вариантах реализации соединение содержит ISIS 544199 и группу конъюгата. В некоторых вариантах реализации соединение состоит из ISIS 544199 и группы конъюгата.

В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и имеет последовательность азотистых оснований, содержащую по меньшей мере 8, по меньшей мере 9, по меньшей мере 10, по меньшей мере 11, по меньшей мере 12, по меньшей мере 13, по меньшей мере 14, по меньшей мере 15, по меньшей мере 16, по меньшей мере 17, по меньшей мере 18, по меньшей мере 19 или 20 последовательных азотистых оснований последовательности азотистых оснований SEQ ID NO: 35. В некоторых вариантах реализации соединение содержит ISIS 560400 и группу конъюгата. В некоторых вариантах реализации соединение состоит из ISIS 560400 и группы конъюгата.

В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и имеет последовательность азотистых оснований, содержащую по меньшей мере 8, по меньшей мере 9, по меньшей мере 10, по меньшей мере 11, по меньшей мере 12, по меньшей мере 13, по меньшей мере 14, по меньшей мере 15, по меньшей мере 16, по меньшей мере 17, по меньшей мере 18, по меньшей мере 19 или 20 последовательных азотистых оснований последовательности азотистых оснований SEQ ID NO: 90. В некоторых вариантах реализации соединение содержит ISIS 567233 и группу конъюгата. В некоторых вариантах реализации соединение состоит из ISIS 567233 и группы конъюгата.

В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и имеет последовательность азотистых оснований, содержащую по меньшей мере 8, по меньшей мере 9, по меньшей мере 10, по меньшей мере 11, по меньшей мере 12, по меньшей мере 13, по меньшей мере 14, по меньшей мере 15, по меньшей мере 16, по меньшей мере 17, по меньшей мере 18, по меньшей мере 19 или 20 последовательных азотистых оснований последовательности азотистых оснований SEQ ID NO: 93. В некоторых вариантах реализации соединение содержит ISIS 567320 и группу конъюгата. В некоторых вариантах реализации соединение состоит из ISIS 567320 и группы конъюгата.

В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и имеет последовательность азотистых оснований, содержащую по меньшей мере 8, по меньшей мере 9, по меньшей мере 10, по меньшей мере 11, по меньшей мере 12, по меньшей мере 13, по меньшей мере 14, по меньшей мере 15, по меньшей мере 16, по меньшей мере 17, по меньшей мере 18, по меньшей мере 19 или 20 последовательных азотистых оснований последовательности азотистых оснований SEQ ID NO: 94. В некоторых вариантах реализации соединение содержит ISIS 567321 и группу конъюгата. В некоторых вариантах реализации соединение состоит из ISIS 567321 и группы конъюгата.

В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и имеет последовательность азотистых оснований, содержащую по меньшей мере 8, по меньшей мере 9, по меньшей мере 10, по меньшей мере 11, по меньшей мере 12, по меньшей мере 13, по меньшей мере 14, по меньшей мере 15 или 16 последовательных азотистых оснований последовательности азотистых оснований SEQ ID NO: 110. В некоторых вариантах реализации соединение содержит ISIS 559277 и группу конъюгата. В некоторых вариантах реализации соединение состоит из ISIS 559277 и группы конъюгата.

В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и имеет последовательность азотистых оснований, содержащую по меньшей мере 8, по меньшей мере 9, по меньшей мере 10, по меньшей мере 11, по меньшей мере 12, по меньшей мере 13, по меньшей мере 14, по меньшей мере 15 или 16 последовательных азотистых оснований последовательности азотистых оснований SEQ ID NO: 114. В некоторых вариантах реализации соединение содержит ISIS 561011 и группу конъюгата. В некоторых вариантах реализации соединение состоит из ISIS 561011 и группы конъюгата.

В некоторых вариантах реализации последовательность азотистых оснований модифицированного олигонуклеотида по меньшей мере на 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% или на 100% комплементарна любой из SEQ ID NO: 1-2, по результатам измерения по всей длине модифицированного олигонуклеотида.

В некоторых вариантах реализации соединение, описанное в настоящем документе, представляет собой одноцепочечный олигонуклеотид. В некоторых вариантах реализации соединение, описанное в настоящем документе, представляет собой одноцепочечный модифицированный олигонуклеотид.

В некоторых вариантах реализации по меньшей мере одна межнуклеозидная связь указанного модифицированного олигонуклеотида представляет собой модифицированную межнуклеозидную связь. В некоторых вариантах реализации модифицированная межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную межнуклеозидную связь. В некоторых вариантах реализации по меньшей мере 1, по меньшей мере 2, по меньшей мере 3, по меньшей мере 4, по меньшей мере 5, по меньшей мере 6, по меньшей мере 7, по меньшей мере 8, по меньшей мере 9 или по меньшей мере 10 межнуклеозидных связей указанного модифицированного олигонуклеотида представляют собой тиофосфатные мженуклеозидные связи. В некоторых вариантах реализации каждая межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную межнуклеозидную связь. В некоторых вариантах реализации модифицированный олигонуклеотид содержит по меньшей мере 1, по меньшей мере 2, по меньшей мере 3, по меньшей мере 4, по меньшей мере 5, по меньшей мере 6, по меньшей мере 7, по меньшей мере 8, по меньшей мере 9 или по меньшей мере 10 фосфодиэфирных межнуклеозидных связей. В некоторых вариантах реализации каждая межнуклеозидная связь модифицированного олигонуклеотида выбрана из фосфодиэфирной межнуклеозидной связи и тиофосфатной межнуклеозидной связи.

В некоторых вариантах реализации по меньшей мере один нуклеозид модифицированного олигонуклеотида содержит модифицированный сахар. В некоторых вариантах реализации меньшей мере один модифицированный сахар представляет собой бициклический сахар. В некоторых вариантах реализации по меньшей мере один модифицированный сахар содержит 2'-O-метоксиэтил, стерически затрудненный этил, 3'-фтор-ГНК или мостик 4'-(СН₂)_n-O-2', где n равен 1 или 2.

В некоторых вариантах реализации изобретения по меньшей мере один нуклеозид в указанном модифицированном олигонуклеотиде содержит модифицированное азотистое основание. В некоторых вариантах реализации модифицированное азотистое основание представляет собой 5-метилцитозин.

В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены соединения или композиции, содержащие модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, где модифицированный олигонуклеотид имеет: a) сегмент гэп, состоящий из связанных дезоксинуклеозидов; b) сегмент 5'-крыла, состоящий из связанных нуклеозидов; и с) сегмент 3'-крыла, состоящий из связанных нуклеозидов. Сегмент гэп расположен между сегментом 5'-крыла и сегментом 3'-крыла, и при этом каждый нуклеозид каждого сегмента крыла содержит модифицированный сахар.

В некоторых вариантах реализации модифицированный олигонуклеотид состоит из 12-30 связанных нуклеозидов и содержит: сегмент гэп, состоящий из связанных дезоксинуклеозидов; сегмент 5'-крыла, состоящий из связанных нуклеозидов; сегмент 3'-крыла, состоящий из связанных нуклеозидов; при этом сегмент гэп расположен между сегментом 5'-крыла и сегментом 3'-крыла, и при этом каждый нуклеозид каждого сегмента крыла содержит модифицированный сахар.

В некоторых вариантах реализации соединения или композиции, описанные в настоящем документе, содержат модифицированный олигонуклеотид, состоящий из 20 связанных нуклеозидов, имеющих последовательность азотистых оснований, содержащую по меньшей мере 8 смежных азотистых оснований, комплементарную равной по длине части SEQ ID NO: 1-2, где модифицированный олигонуклеотид содержит: сегмент гэп, состоящий из десяти связанных дезоксинуклеозидов; сегмент 5'-крыла, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; и сегмент 3'-крыла, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; и при этом сегмент гэп расположен между сегментом 5'-крыла и сегментом 3'-крыла; причем каждый нуклеозид каждого сегмента крыла содержит 2'-O-метоксиэтильный сахар; где по меньшей мере одна межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь, и где каждый цитозиновый остаток представляет собой 5-метилцитозин. В некоторых вариантах реализации каждая межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь.

В некоторых вариантах реализации модифицированный олигонуклеотид состоит из 20 связанных нуклеозидов и содержит: сегмент гэп, состоящий из десяти связанных дезоксинуклеозидов; сегмент 5'-крыла, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; сегмент 3'-крыла, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; и при этом сегмент гэп расположен между сегментом 5'-крыла и сегментом 3'-крыла; причем каждый нуклеозид каждого сегмента крыла содержит 2'-O-метоксиэтильный сахар; где по меньшей мере одна межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь, и где каждый цитозиновый остаток представляет собой 5-метилцитозин. В некоторых вариантах реализации каждая межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь.

В некоторых вариантах реализации соединения или композиции, описанные в настоящем документе, содержат модифицированный олигонуклеотид, состоящий из 20 связанных нуклеозидов, имеющих последовательность азотистых оснований, содержащую по меньшей мере 8 смежных азотистых оснований последовательности азотистых оснований, выбранной из SEQ ID NO: 77, где модифицированный олигонуклеотид содержит: сегмент гэп, состоящий из десяти связанных дезоксинуклеозидов; сегмент 5'-крыла, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; и сегмент 3'-крыла, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; и при этом сегмент гэп расположен между сегментом 5'-крыла и сегментом 3'-крыла; причем каждый нуклеозид каждого сегмента крыла содержит 2'-O-метоксиэтильный сахар; где по меньшей мере одна межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь, и где каждый цитозиновый остаток представляет собой 5-метилцитозин. В некоторых вариантах реализации каждая межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь.

В некоторых вариантах реализации модифицированный олигонуклеотид состоит из 20 связанных нуклеозидов с последовательностью азотистых оснований SEQ ID NO: 77 и содержит: сегмент гэп, состоящий из десяти связанных дезоксинуклеозидов; сегмент 5'-крыла, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; сегмент 3'-крыла, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; и при этом сегмент гэп расположен между сегментом 5'-крыла и сегментом 3'-крыла; причем каждый нуклеозид каждого сегмента крыла содержит 2'-O-метоксиэтильный сахар; где по меньшей мере одна межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь, и где каждый цитозиновый остаток представляет собой 5-метилцитозин. В некоторых вариантах реализации каждая межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь.

В некоторых вариантах реализации соединения или композиции, описанные в настоящем документе, содержат модифицированный олигонуклеотид, состоящий из 20 связанных нуклеозидов, имеющих последовательность азотистых оснований, содержащую по меньшей мере 8 смежных азотистых оснований последовательности азотистых оснований, выбранной из SEQ ID NO: 20, где модифицированный олигонуклеотид содержит: сегмент гэп, состоящий из десяти связанных дезоксинуклеозидов; сегмент 5'-крыла, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; и сегмент 3'-крыла, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; и при этом сегмент гэп расположен между сегментом 5'-крыла и сегментом 3'-крыла; причем каждый нуклеозид каждого сегмента крыла содержит 2'-O-метоксиэтильный сахар; где по меньшей мере одна межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь, и где каждый цитозиновый остаток представляет собой 5-метилцитозин. В некоторых вариантах реализации каждая межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь.

В некоторых вариантах реализации модифицированный олигонуклеотид состоит из 20 связанных нуклеозидов с последовательностью азотистых оснований SEQ ID NO: 20 и содержит: сегмент гэп, состоящий из десяти связанных дезоксинуклеозидов; сегмент 5'-крыла, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; сегмент 3'-крыла, состоящий из пяти связанных нуклеозидов; и при этом сегмент гэп расположен между сегментом 5'-крыла и сегментом 3'-крыла; причем каждый нуклеозид каждого сегмента крыла содержит 2'-O-метоксиэтильный сахар; где по меньшей мере одна межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь, и где каждый цитозиновый остаток представляет собой 5-метилцитозин. В некоторых вариантах реализации каждая межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь.

В некоторых вариантах реализации соединения или композиции, описанные в настоящем документе, содержат модифицированный олигонуклеотид, состоящий из 16 связанных нуклеозидов, имеющих последовательность азотистых оснований, содержащую по меньшей мере 8 смежных азотистых оснований последовательности азотистых оснований SEQ ID NO: 110, где модифицированный олигонуклеотид содержит: сегмент гэп, состоящий из десяти связанных дезоксинуклеозидов; сегмент 5'-крыла, состоящий из трех связанных нуклеозидов; и сегмент 3'-крыла, состоящий из трех связанных нуклеозидов; при этом сегмент гэп расположен между сегментом 5'-крыла и сегментом 3'-крыла; причем каждый сегмент крыла содержит по меньшей мере один 2'-O-метоксиэтильный сахар и по меньшей мере один cEt сахар; где по меньшей мере одна межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь, и где каждый цитозиновый остаток представляет собой 5-метилцитозин. В некоторых вариантах реализации каждая межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь.

В некоторых вариантах реализации модифицированный олигонуклеотид состоит из 16 связанных нуклеозидов с последовательностью азотистых оснований SEQ ID NO: 110 и содержит: сегмент гэп, состоящий из десяти связанных дезоксинуклеозидов; сегмент 5'-крыла, состоящий из трех связанных нуклеозидов; сегмент 3'-крыла, состоящий из трех связанных нуклеозидов; при этом сегмент гэп расположен между сегментом 5'-крыла и сегментом 3'-крыла; причем каждый сегмент крыла содержит по меньшей мере один 2'-O-метоксиэтильный сахар и по меньшей мере один cEt сахар; где по меньшей мере одна межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь, и где каждый цитозиновый остаток представляет собой 5-метилцитозин. В некоторых вариантах реализации каждая межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь.

В некоторых вариантах реализации группа конъюгата связана с модифицированным олигонуклеотидом на 5'-конце модифицированного олигонуклеотида. В некоторых вариантах реализации группа конъюгата связана с модифицированным олигонуклеотидом на 3'-конце модифицированного олигонуклеотида.

В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит только один лиганд. В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит один или более лигандов. В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит только два лиганда. В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит два или более лигандов. В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит три или более лигандов. В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит только три лиганда. В некоторых вариантах реализации каждый лиганд выбран из: полисахарида, модифицированного полисахарида, маннозы, галактозы, производного маннозы, производного галактозы, D-маннопиранозы, L-маннопиранозы, D-арабинозы, L-галактозы, D-ксилофуранозы, L-ксилофуранозы, D-глюкозы, L-глюкозы, D-галактозы, L-галактозы, α-D-маннофуранозы, β-D-маннофуранозы, α-D-маннопиранозы, β-D-маннопиранозы, α-D-глюкопиранозы, β-D-глюкопиранозы, α-D-глюкофуранозы, β-D-глюкофуранозы, α-D-фруктофуранозы, α-D-фруктопиранозы, α-D-галактопиранозы, β-D-галактопиранозы, α-D-галактофуранозы, β-D-галактофуранозы, глюкозамина, сиаловой кислоты, α-D-галактозамина, N-ацетилгалактозамина, 2-амино-3-О-[(R)-1-карбоксиэтил]-2-дезокси-β-D-глюкопиранозы, 2-дезокси-2-метиламино-L-глюкопиранозы, 4,6-дидезокси-4-формамидо-2,3-ди-O-метил-D-маннопиранозы, 2-дезокси-2-сульфоамино-D-глюкопиранозы, N-гликолоил-α-нейраминовой кислоты, 5-тио-β-D-глюкопиранозы, метил-2,3,4-три-O-ацетил-1-тио-6-О-тритил-α-D-глюкопиранозида, 4-тио-β-D-галактопиранозы, этил-3,4,6,7-тетра-O-ацетил-2-дезокси-1,5-дитио-α-D-глюко-гептопиранозида, 2,5-ангидро-D-аллононитрила, рибозы, D-рибозы, D-4-тиорибозы, L-рибозы, L-4-тиорибозы. В некоторых вариантах реализации каждый лиганд представляет собой N-ацетилгалактозамин.

В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит:

.

В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит по меньшей мере одну фосфорную линкерную группу или нейтральную линкерную группу.

В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит структуру, выбранную из:

,

и .

; ;

;

где n равен от 1 до 12; и

где m равен от 1 до 12.

В некоторых вариантах реализации группа конъюгата имеет связку, имеющую структуру, выбранную из:

и

где L представляет собой либо фосфорную линкерную группу, либо нейтральную линкерную группу;

Z₁ представляет собой C(=O)O-R₂;

Z₂ представляет собой Н, C₁-С₆ алкил или замещенный C₁-С₆ алкил;

R₂ представляет собой Н, C₁-С₆ алкил или замещенный C₁-С₆ алкил; и

каждый m₁ независимо равен от 0 до 20, при этом по меньшей мере один m₁ больше 0 для каждой связки.

В некоторых вариантах реализации группа конъюгата имеет связку, имеющую структуру, выбранную из:

и

где Z₂ представляет собой Н или СН₃; и

каждый m₁ независимо равен от 0 до 20, при этом по меньшей мере один m₁ больше 0 для каждой связки.

В некоторых вариантах реализации группа конъюгата имеет связку, имеющую структуру, выбранную из:

; ;

;

где n равен от 1 до 12; и

где m равен от 1 до 12.

В некоторых вариантах реализации группа конъюгата ковалентно присоединена к модифицированному олигонуклеотиду.

В некоторых вариантах реализации соединение имеет структуру, представленную формулой:

где

А представляет собой модифицированный олигонуклеотид;

В представляет собой расщепляемый фрагмент

С представляет собой линкер конъюгата

D представляет собой группу ветвления

каждый Е представляет собой связку;

каждый F представляет собой лиганд; и

q представляет собой целое число от 1 до 5.

В некоторых вариантах реализации соединение имеет структуру, представленную формулой:

где:

А представляет собой модифицированный олигонуклеотид;

В представляет собой расщепляемый фрагмент

С представляет собой линкер конъюгата

D представляет собой группу ветвления

каждый Е представляет собой связку;

каждый F представляет собой лиганд;

каждый n независимо равен 0 или 1; и

q представляет собой целое число от 1 до 5.

В некоторых вариантах реализации соединение имеет структуру, представленную формулой:

где

А представляет собой модифицированный олигонуклеотид;

В представляет собой расщепляемый фрагмент;

С представляет собой линкер конъюгата;

каждый Е представляет собой связку;

каждый F представляет собой лиганд; и

q представляет собой целое число от 1 до 5.

В некоторых вариантах реализации соединение имеет структуру, представленную формулой:

где

А представляет собой модифицированный олигонуклеотид;

С представляет собой линкер конъюгата;

D представляет собой группу ветвления;

каждый Е представляет собой связку;

каждый F представляет собой лиганд; и

q представляет собой целое число от 1 до 5.

В некоторых вариантах реализации соединение имеет структуру, представленную формулой:

где

А представляет собой модифицированный олигонуклеотид;

С представляет собой линкер конъюгата;

каждый Е представляет собой связку;

каждый F представляет собой лиганд; и

q представляет собой целое число от 1 до 5.

В некоторых вариантах реализации соединение имеет структуру, представленную формулой:

где

А представляет собой модифицированный олигонуклеотид;

В представляет собой расщепляемый фрагмент;

D представляет собой группу ветвления;

каждый Е представляет собой связку;

каждый F представляет собой лиганд; и

q представляет собой целое число от 1 до 5.

В некоторых вариантах реализации соединение имеет структуру, представленную формулой:

где

А представляет собой модифицированный олигонуклеотид;

В представляет собой расщепляемый фрагмент;

каждый Е представляет собой связку;

каждый F представляет собой лиганд; и

q представляет собой целое число от 1 до 5.

В некоторых вариантах реализации соединение имеет структуру, представленную формулой:

где

А представляет собой модифицированный олигонуклеотид;

D представляет собой группу ветвления;

каждый Е представляет собой связку;

каждый F представляет собой лиганд; и

q представляет собой целое число от 1 до 5.

В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата имеет структуру, выбранную из:

и

где каждый L независимо представляет собой фосфорную линкерную группу или нейтральную линкерную группу; и

каждый n независимо равен от 1 до 20.

В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата имеет структуру, выбранную из:

и

В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата имеет следующую структуру:

.

В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата имеет структуру, выбранную из:

; ; и .

В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата имеет структуру, выбранную из:

и .

В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата имеет структуру, выбранную из:

; ; и

В некоторых таких вариантах реализации линкер конъюгата содержит пирролидин. В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата не содержит пирролидин.

В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата содержит ПЭГ.

В некоторых таких вариантах реализации линкер конъюгата содержит амид. В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата содержит по меньшей мере два амида. В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата не содержит амид. В некоторых таких вариантах реализации линкер конъюгата содержит полиамид.

В некоторых таких вариантах реализации линкер конъюгата содержит амин.

В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата содержит одну или более дисульфидных связей.

В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата содержит белок-связывающий фрагмент. В некоторых вариантах реализации белок-связывающий фрагмент содержит липид. В некоторых вариантах реализации белок-связывающий фрагмент выбран из: холестерина, холевой кислоты, адамантан-уксусной кислоты, 1-пирен-масляной кислоты, дигидротестостерона, 1,3-бис-O(гексадецил)глицерина, геранилоксигексиловой группы, гексадецилглицерина, борнеола, ментола, 1,3-пропандиола, гептадециловой группы, пальмитиновой кислоты, миристиновой кислоты, O3-(олеоил)литохолевой кислоты, O3-(олеоил)холеновой кислоты, диметокситритила или феноксазина, витамина (например, фолата, витамина А, витамина Е, биотина, пиридоксаля), пептида, углевода (например, моносахарида, дисахарида, трисахарида, тетрасахарида, олигосахарида, полисахарида), эндосомолитического компонента, стероида (например, уваола, гецигенина, диосгенина), терпена (например, тритерпена, например, сарсасапогенина, фриделина, литохолевой кислоты, дериватизованной эпифриделанолом) или катионного липида. В некоторых вариантах реализации белок-связывающий фрагмент выбран из: насыщенной или ненасыщенной жирной кислоты с длиной цепи от С16 до С22, холестерина, холевой кислоты, витамина Е, адамантана или 1-пентафтор пропила.

В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата имеет структуру, выбранную из:

и

где каждый n независимо равен от 1 до 20; и p равен от 1 до 6.

В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата имеет структуру, выбранную из:

и

где каждый n независимо равен от 1 до 20.

В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата имеет структуру, выбранную из:

и

В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата имеет структуру, выбранную из:

и

где n равен от 1 до 20.

В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата имеет структуру, выбранную из:

и .

В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата имеет структуру, выбранную из:

и ;

где каждый n независимо равен 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6 или 7.

В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата имеет следующую структуру:

.

В некоторых вариантах реализации группа ветвления имеет одну из следующих структур:

и

где каждый А₁ независимо представляет собой O, S, C=O или NH; и

каждый n независимо равен от 1 до 20.

В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата имеет структуру, выбранную из:

и

где каждый A₁ независимо представляет собой О, S, С=O или NH; и

каждый n независимо равен от 1 до 20.

В некоторых вариантах реализации группа ветвления имеет следующую структуру:

.

В некоторых вариантах реализации группа ветвления имеет следующую структуру:

.

В некоторых вариантах реализации группа ветвления имеет следующую структуру:

.

В некоторых вариантах реализации группа ветвления имеет следующую структуру:

.

В некоторых вариантах реализации группа ветвления содержит простой эфир.

В некоторых вариантах реализации группа ветвления имеет следующую структуру:

и

каждый n независимо равен от 1 до 20; и

m равен от 2 до 6.

В некоторых вариантах реализации группа ветвления имеет следующую структуру:

и .

В некоторых вариантах реализации группа ветвления имеет следующую структуру:

.

В некоторых вариантах реализации группа ветвления содержит:

или

где каждый j представляет собой целое число от 1 до 3; и

где каждый n представляет собой целое число от 1 до 20.

В некоторых вариантах реализации группа ветвления содержит:

или

В некоторых вариантах реализации каждая связка выбрана из:

и

где L выбран из фосфорной линкерной группы и нейтральной линкерной группы;

Z₁ представляет собой C(=O)O-R₂;

Z₂ представляет собой Н, C₁-С₆ алкил или замещенный C₁-С₆ алкил;

R₂ представляет собой Н, C₁-С₆ алкил или замещенный C₁-С₆ алкил; и

каждый m₁ независимо равен от 0 до 20, при этом по меньшей мере один m₁ больше 0 для каждой связки.

В некоторых вариантах реализации каждая связка выбрана из:

и

где Z₂ представляет собой Н или СН₃; и

каждый m₂ независимо равен от 0 до 20, при этом по меньшей мере один m₂ больше 0 для каждой связки.

В некоторых вариантах реализации каждая связка выбрана из:

где n равен от 1 до 12; и

где m равен от 1 до 12.

В некоторых вариантах реализации по меньшей мере одна связка содержит этиленгликоль.

В некоторых вариантах реализации по меньшей мере одна связка содержит амид. В некоторых вариантах реализации по меньшей мере одна связка содержит полиамид.

В некоторых вариантах реализации по меньшей мере одна связка содержит амин.

В некоторых вариантах реализации по меньшей мере две связки отличны друг от друга. В некоторых вариантах реализации все связки являются одинаковыми.

В некоторых вариантах реализации каждая связка выбрана из:

и

где каждый n независимо равен от 1 до 20; и

каждый p равен от 1 до примерно 6.

В некоторых вариантах реализации каждая связка выбрана из:

и

В некоторых вариантах реализации каждая связка имеет следующую структуру:

где каждый n независимо равен от 1 до 20.

В некоторых вариантах реализации каждая связка имеет следующую структуру:

.

В некоторых вариантах реализации связка имеет структуру, выбранную из:

или ; где каждый n независимо равен 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6 или 7.

В некоторых вариантах реализации связка имеет структуру, выбранную из:

.

В некоторых вариантах реализации лиганд представляет собой галактозу.

В некоторых вариантах реализации лиганд представляет собой манноза-6-фосфат.

В некоторых вариантах реализации каждый лиганд выбран из:

и

где каждый R₁ выбран из ОН и NHCOOH.

В некоторых вариантах реализации каждый лиганд выбран из:

и

В некоторых вариантах реализации каждый лиганд имеет следующую структуру:

.

В некоторых вариантах реализации каждый лиганд имеет следующую структуру:

.

В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит фрагмент, направляющий на клетку.

В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит фрагмент, направляющий на клетку, который имеет следующую структуру:

где каждый n независимо равен от 1 до 20.

В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, имеет следующую структуру:

.

В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, имеет следующую структуру:

.

где каждый n независимо равен от 1 до 20.

В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, имеет следующую структуру:

.

В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, содержит:

.

В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, содержит:

.

В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, имеет следующую структуру:

.

В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, имеет следующую структуру:

.

В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, содержит:

.

В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, имеет следующую структуру:

.

В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, содержит:

.

В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, содержит:

.

В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, содержит:

.

В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, имеет следующую структуру:

.

В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, имеет следующую структуру: .

В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, имеет следующую структуру:

.

В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, имеет следующую структуру:

.

В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, имеет следующую структуру:

.

В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, содержит:

.

В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, содержит:

.

В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, содержит:

.

В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, содержит:

.

В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, имеет следующую структуру:

.

В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, содержит:

.

В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, имеет следующую структуру:

.

В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, содержит:

;

где каждый Y выбран из О, S замещенного или незамещенного C₁-С₁₀ алкила, амино, замещенного амино, азидо, алкенила или алкинила.

В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит:

;

где каждый Y выбран из О, S замещенного или незамещенного C₁-C₁₀ алкила, амино, замещенного амино, азидо, алкенила или алкинила.

В некоторых вариантах реализации фрагмент, направляющий на клетку, имеет следующую структуру:

;

где каждый Y выбран из О, S замещенного или незамещенного C₁-C₁₀ алкила, амино, замещенного амино, азидо, алкенила или алкинила.

В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит:

В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит расщепляемый фрагмент, выбранный из: фосфодиэфира, амида или сложного эфира.

В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит фосфодиэфирный расщепляемый фрагмент.

В некоторых вариантах реализации группа конъюгата не содержит расщепляемый фрагмент, и при этом группа конъюгата содержит тиофосфатную связь между группой конъюгата и олигонуклеотидом.

В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит амидный расщепляемый фрагмент.

В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит сложноэфирный расщепляемый фрагмент.

В некоторых вариантах реализации соединение имеет следующую структуру:

где каждый n независимо равен от 1 до 20;

Q₁₃ представляет собой Н или O(СН₂)₂-ОСН₃;

А представляет собой модифицированный олигонуклеотид; и

Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.

В некоторых вариантах реализации соединение имеет следующую структуру:

где каждый n независимо равен от 1 до 20;

Q₁₃ представляет собой Н или O(СН₂)₂-ОСН₃;

А представляет собой модифицированный олигонуклеотид; и

Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.

В некоторых вариантах реализации соединение имеет следующую структуру:

где каждый n независимо равен от 1 до 20;

Q₁₃ представляет собой Н или O(СН₂)₂-ОСН₃;

А представляет собой модифицированный олигонуклеотид;

Z представляет собой Н или связанную твердую подложку; и

Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.

В некоторых вариантах реализации соединение имеет следующую структуру:

где каждый n независимо равен от 1 до 20;

Q₁₃ представляет собой Н или O(СН₂)₂-ОСН₃;

А представляет собой модифицированный олигонуклеотид;

Z представляет собой И или связанную твердую подложку; и

Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.

В некоторых вариантах реализации соединение имеет следующую структуру:

где Q₁₃ представляет собой Н или O(СН₂)₂-ОСН₃;

А представляет собой модифицированный олигонуклеотид; и

Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.

В некоторых вариантах реализации соединение имеет следующую структуру:

,

где Q₁₃ представляет собой Н или O(СН₂)₂-ОСН₃;

А представляет собой модифицированный олигонуклеотид; и

Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.

В некоторых вариантах реализации соединение имеет следующую структуру:

,

где Q₁₃ представляет собой Н или O(СН₂)₂-ОСН₃;

А представляет собой модифицированный олигонуклеотид; и

Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.

В некоторых вариантах реализации соединение имеет следующую структуру:

где Q₁₃ представляет собой Н или O(СН₂)₂-ОСН₃;

А представляет собой модифицированный олигонуклеотид; и

Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.

В некоторых вариантах реализации соединение имеет следующую структуру:

где Q₁₃ представляет собой Н или O(CH₂)₂-OCH₃;

А представляет собой модифицированный олигонуклеотид; и

Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.

В некоторых вариантах реализации соединение имеет следующую структуру:

где Q₁₃ представляет собой Н или O(CH₂)₂-OCH₃;

А представляет собой модифицированный олигонуклеотид; и

Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.

В некоторых вариантах реализации соединение имеет следующую структуру:

где Q₁₃ представляет собой Н или O(СН₂)₂-ОСН₃;

А представляет собой модифицированный олигонуклеотид; и

Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.

В некоторых вариантах реализации соединение имеет следующую структуру:

где Q₁₃ представляет собой Н или O(СН₂)₂-ОСН₃;

А представляет собой модифицированный олигонуклеотид; и

Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.

В некоторых вариантах реализации соединение имеет следующую структуру:

где Q₁₃ представляет собой Н или O(СН₂)₂-ОСН₃;

А представляет собой модифицированный олигонуклеотид; и

Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.

В некоторых вариантах реализации соединение имеет следующую структуру:

где Q₁₃ представляет собой Н или O(СН₂)₂-ОСН₃;

А представляет собой модифицированный олигонуклеотид; и

Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.

В некоторых вариантах реализации соединение имеет следующую структуру:

где Q₁₃ представляет собой Н или O(СН₂)₂-ОСН₃;

А представляет собой модифицированный олигонуклеотид; и

Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.

В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит:

где Q₁₃ представляет собой Н или O(СН₂)₂-ОСН₃;

А представляет собой модифицированный олигонуклеотид; и

Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.

В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит:

где Q₁₃ представляет собой Н или O(СН₂)₂-ОСН₃;

А представляет собой модифицированный олигонуклеотид; и

Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.

В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит:

где Q₁₃ представляет собой Н или O(СН₂)₂-ОСН₃;

А представляет собой модифицированный олигонуклеотид; и

Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.

В некоторых вариантах реализации B_x выбран из аденина, гуанина, тимина, урацила или цитозина, или 5-метилцитозина. В некоторых вариантах реализации B_x представляет собой аденин. В некоторых вариантах реализации B_x представляет собой тимин. В некоторых вариантах реализации Q₁₃ представляет собой O(СН₂)₂-ОСН₃. В некоторых вариантах реализации Q₁₃ представляет собой Н.

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения предложено пролекарство, содержащее композиции или соединения, описанные в настоящем документе. В некоторых вариантах реализации предложены способы применения сопряженных антисмысловых соединений и композиций, описанных в настоящем документе, для ингибирования экспрессии ANGPTL3. В некоторых вариантах реализации сопряженные антисмысловые соединения или композиции ингибируют ANGPTL3 по меньшей мере на 5%, по меньшей мере на 10%, по меньшей мере на 20%, по меньшей мере на 30%, по меньшей мере на 35%, по меньшей мере на 40%, по меньшей мере на 45%, по меньшей мере на 50%, по меньшей мере на 55%, по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 65%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 75%, по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 85%, по меньшей мере на 90% или по меньшей мере на 95%. В предпочтительном варианте реализации антисмысловое соединение, содержащее модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, снижает ANGPTL3 по меньшей мере на 50%. В предпочтительном варианте реализации антисмысловое соединение, содержащее модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, снижает ANGPTL3 по меньшей мере на 55%. В предпочтительном варианте реализации антисмысловое соединение, содержащее модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, снижает ANGPTL3 по меньшей мере на 60%. В предпочтительном варианте реализации антисмысловое соединение, содержащее модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, снижает ANGPTL3 по меньшей мере на 65%. В предпочтительном варианте реализации антисмысловое соединение, содержащее модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, снижает ANGPTL3 по меньшей мере на 70%. В предпочтительном варианте реализации антисмысловое соединение, содержащее модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, снижает ANGPTL3 по меньшей мере на 75%. В предпочтительном варианте реализации антисмысловое соединение, содержащее модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, снижает ANGPTL3 по меньшей мере на 80%. В предпочтительном варианте реализации антисмысловое соединение, содержащее модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, снижает ANGPTL3 по меньшей мере на 85%. В предпочтительном варианте реализации антисмысловое соединение, содержащее модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, снижает ANGPTL3 по меньшей мере на 90%. В предпочтительном варианте реализации антисмысловое соединение, содержащее модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, снижает ANGPTL3 по меньшей мере на 95%.

В некоторых вариантах реализации сопряженные антисмысловые соединения или композиции, описанные в настоящем документе, имеют IC₅₀ менее 20 мкМ, менее 10 мкМ, менее 8 мкМ, менее 5 мкМ, менее 2 мкМ, менее 1 мкМ или менее 0,8 мкМ при испытании в клетках человека, например, в клеточной линии Нер3В, как описано в примерах 2-3 и 7-10.

В некоторых вариантах реализации сопряженные антисмысловые соединения или композиции, описанные в настоящем документе, являются эффективными, поскольку имеют вязкость менее 40 сП, менее 35 сП, менее 30 сП, менее 25 сП, менее 20 сП или менее 15 сП при измерении по параметрам, описанным в примере 13.

В некоторых вариантах реализации сопряженные антисмысловые соединения или композиции, описанные в настоящем документе, являются хорошо переносимыми, что демонстрируется измерениями переносимости in vivo, описанными в примерах. В некоторых вариантах реализации сопряженные антисмысловые соединения, описанные в настоящем документе, являются хорошо переносимыми, что демонстрируется увеличением значения ALT и/или AST не более чем в 4 раза, 3 раза, 2 раза или 1,5 раза по сравнению с животными, которым вводили солевой раствор.

В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложена соль сопряженных антисмысловых соединений, описанных в настоящем документе. В некоторых вариантах реализации соединения или композиции, описанные в настоящем документе, содержат соль модифицированного олигонуклеотида с группой конъюгата.

В некоторых вариантах реализации сопряженные антисмысловые соединения или композиции, описанные в настоящем документе, дополнительно содержат фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель.

В некоторых вариантах реализации животное представляет собой человека.

В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе, предложены способы, включающие введение животному сопряженных антисмысловых соединений или композиций, описанных в настоящем документе. В некоторых вариантах реализации введение сопряженного антисмыслового соединения или композиции является терапевтическим. В некоторых вариантах реализации введение сопряженного антисмыслового соединения или композиции обеспечивает лечение, предупреждение или замедление прогрессирования заболевания, связанного с ANGPTL3. В некоторых вариантах реализации заболевание связано с повышенным ANGPTL3. В некоторых вариантах реализации введение сопряженного антисмыслового соединения или композиции обеспечивает предупреждение, лечение, облегчение или замедление прогрессирования сердечно-сосудистого и/или метаболического заболевания.

В некоторых вариантах реализации, описанных в настоящем документе предложены способы лечения человека с сердечно-сосудистым и/или метаболическим заболеванием, включающие идентификацию человека с сердечно-сосудистым и/или метаболическим заболеванием и введение человеку терапевтически эффективного количества любого из сопряженных антисмысловых соединений или композиций, описанных в настоящем документе, для лечения человека от сердечно-сосудистого и/или метаболического заболевания.

В некоторых вариантах реализации предложены сопряженные антисмысловые соединения и композиции, описанные в настоящем документе, для применения в терапии. В некоторых вариантах реализации терапию применяют для лечения, предупреждения или замедления прогрессирования заболевания, связанного с ANGPTL3. В некоторых вариантах реализации терапию применяют для лечения, предупреждения или замедления прогрессирования заболевания, связанного с повышенным ANGPTL3.

В некоторых вариантах реализации заболевание представляет собой сердечно-сосудистое и/или метаболическое заболевание, расстройство или патологическое состояние. В некоторых вариантах реализации метаболическое и/или сердечно-сосудистое заболевание включает, но не ограничивается ими, ожирение, диабет, резистентность к инсулину, атеросклероз, дислипидемию, липодистрофию, коронарную болезнь сердца, неалкагольную жировую дистрофию печени (NAFLD), неалкагольный стеатогепатит (NASH), жирнокислотную гиперацидемию или метаболический синдром, или их комбинацию. Дислипидемия может представлять собой гиперлипидемию. Гиперлипидемия может представлять собой комбинированную гиперлипидемию (CHL), гиперхолестеринемию, гипертриглицеридемию или гиперхолестеренемию и гипертриглицеридемию одновременно. Комбинированная гиперлипидемия может быть наследственной или ненаследственной. Гиперхолестеринемия может представлять собой наследственную гомозиготную гиперхолестеринемию (HoFH), наследственную гетерозиготную гиперхолестеринемию (HeFH). Гипертриглицеридемия может представлять собой синдром семейной хиломикронемии (FCS) или гиперлипопротеинемию типа IV. NAFLD может представлять собой стеатоз печени или стеатогепатит. Диабет может представлять собой диабет 2 типа или диабет 2 типа с дислипидемией. Резистентность к инсулину может представлять собой резистентность к инсулину с дислипидемией.

В некоторых вариантах реализации сопряженные антисмысловые соединения или композиции, описанные в настоящем документе, разработаны в качестве первого агента, и способы их применения, описанные в настоящем документе, дополнительно включают введение второго агента. В некоторых вариантах реализации первый агент и второй агент вводят совместно. В некоторых вариантах реализации первый агент и второй агент вводят совместно последовательно или параллельно.

В некоторых вариантах реализации второй агент представляет собой агент для снижения глюкозы. Агент для снижения глюкозы может включать, но не ограничивается ими, терапевтическое изменение образа жизни, агонист PPAR, ингибитор дипептидилпептидазы (IV), аналог GLP-1, инсулин или аналог инсулина, стимулятор секреции инсулина, ингибитор SGLT2, аналог человеческого амилина, бигуанид, ингибитор альфа-глюкозидазы или их комбинации. Агент для снижения глюкозы может включать, но не ограничивается ими, метформин, сульфонилмочевину, росиглитазон, меглитинид, тиазолидиндион, ингибитор альфа-глюкозидазы или их комбинации. Сульфонилмочевина может представлять собой ацетогексамид, хлорпропамид, толбутамид, толазамид, глимепирид, глипизид, глибурид или гликлазид. Мелгитинид может представлять собой натеглинид или репаглинид. Тиазолидиндион может представлять собой пиоглитазон или росиглитазон. Альфа-глюкозидаза может представлять собой акарбозу или миглитол.

В некоторых вариантах реализации второй агент представляет собой терапию для снижения липидов. В некоторых вариантах реализации терапия для снижения липидов может включать, но не ограничивается ими, терапевтическое изменение образа жизни, ингибитор редуктазы HMG-CoA, ингибитор абсорбции холестерина, ингибитор МТР (например, низкомолекулярный, полипептид, антитело или антисмысловое соединение, направленное на МТР), ингибитор АроВ (например, низкомолекулярный, полипептид, антитело или антисмылосое соединение, направленное на АроВ), ингибитор АроС3 (например, низкомолекулярный, полипептид, антитело или антисмысловое соединение, направленное на АроС3), ингибитор PCSK9 (например, низкомолекулярный, полипептид, антитело или антисмысловое соединение, направленное на PCSK9), ингибитор СЕТР (например, низкомолекулярный, полипептид, антитело или антисмысловое соединение, направленное на СЕТР), фибрат, лечебное масло (например, криля или рыбий жир (например, Vascepa^R), льняное масло или другие масла с высоким содержанием омега-3 жирных кислот, таких как α-линоленовая кислота (ALA), докозагексаеновая кислота (DHA) или эйкозапентаеновая кислота (ЕРА)), или любые их комбинации. Ингибитор редуктазы HMG-CoA может представлять собой аторвастатин, розувастатин, флувастатин, ловастатин, правастатин или симвастатин. Ингибитор абсорбции холестерина может представлять собой эземитиб. Фибрат может представлять собой фенофибрат, безафибрат, ципрофибрат, клофибрат, гемфиброзил и т.п.

В некоторых вариантах реализации введение включает парентеральное введение. В некоторых вариантах реализации введение включает подкожное введение.

В некоторых вариантах реализации введение сопряженного антисмыслового соединения, описанного в настоящем документе, приводит к снижению уровней липидов, включая уровни триглицеридов, уровни холестерина, резистентность к инсулину, уровни глюкозы или их комбинации. Один или более из указанных уровней могут быть независимо снижены на по меньшей мере 5%, по меньшей мере 10%, по меньшей мере 20%, по меньшей мере 30%, по меньшей мере 35%, по меньшей мере 40%, по меньшей мере 45%, по меньшей мере 50%, по меньшей мере 55%, по меньшей мере 60%, по меньшей мере 65%, по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90% или по меньшей мере 95%. Введение сопряженного антисмыслового соединения может приводить к улучшению чувствительности к инсулину или чувствительности к инсулину печени. Введение сопряженного антисмыслового соединения, описанного в настоящем документе, может приводить к уменьшению атеросклеротических бляшек, ожирения, глюкозы, липидов, резистентности к глюкозе, холестерина или к улучшению чувствительности к инсулину, или любой их комбинации.

В некоторых вариантах реализации предложено применение сопряженного антисмыслового соединения, описанного в настоящем документе, в производстве лекарственного средства для лечения, облегчения, отсрочки или предупреждения одного или более заболеваний, связанных с ANGPTL3. В некоторых вариантах реализации предложено применение сопряженного антисмыслового соединения, описанного в настоящем документе, в производстве лекарственного средства для лечения, облегчения, отсрочки или предупреждения одного или более из метаболического заболевания или сердечно-сосудистого заболевания.

В некоторых вариантах реализации предложен набор для лечения, предупреждения или облегчения одного или более из метаболического заболевания или сердечно-сосудистого заболевания, описанного в настоящем документе, где указанный набор содержит: а) сопряженное антисмысловое соединение, описанное в настоящем документе; и необязательно b) дополнительный агент или терапию, описанную в настоящем документе. Набор может дополнительно содержать инструкции или этикетку по применению набора для лечения, предупреждения или облегчения одного или более из метаболического заболевания или сердечно-сосудистого заболевания.

Антисмысловые соединения

Олигомерные соединения включают, но не ограничиваются ими, олигонуклеотиды, олигонуклеозиды, аналоги олигонуклеотидов, миметики олигонуклеотидов, антисмысловые соединения, антисмысловые олигонуклеотиды и миРНК. Олигомерное соединение может быть «антисмысловым» к нуклеиновой кислоте-мишени, что означает, что оно способно подвергаться гибридизации с нуклеиновой кислотой-мишенью посредством водородного связывания.

В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение содержит последовательность азотистых оснований, которая при написании в 5'-3' направлении содержит обратный комплемент целевого сегмента нуклеиновой кислоты-мишени, на которую она направлена. В некоторых таких вариантах реализации антисмысловой олигонуклеотид имеет последовательность азотистых оснований, которая при написании в 5'-3' направлении содержит обратный комплемент целевого сегмента нуклеиновой кислоты-мишени, на которую она направлена.

В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение, направленное на нуклеиновую кислоту ANGPTL3, имеет от 10 до 30 нуклеотидов в длину. Иными словами, антисмысловые соединения имеют от 10 до 30 связанных азотистых оснований. В других вариантах реализации антисмысловое соединение содержит модифицированный олигонуклеотид, состоящий из 8-80, 10-80, 12-50, 12-30, 15-30, 18-24, 19-22 или 20 связанных азотистых оснований. В некоторых таких вариантах реализации антисмысловое соединение содержит модифицированный олигонуклеотид, состоящий из 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79 или 80 связанных азотистых оснований в длину, или их количество находится в диапазоне, определенном любыми двумя из указанных выше значений.

В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение содержит укороченный или усеченный модифицированный олигонуклеотид. Укороченный или усеченный модифицированный олигонуклеотид может иметь один нуклеозид, удаленный с 5' конца (5' усечение), или в альтернативном варианте с 3' конца (3' усечение). Укороченный или усеченный олигонуклеотид может иметь два или более нуклеозидов, удаленных с 5' конца, или в альтернативном варианте может иметь два или более нуклеозидов, удаленных с 3' конца. В альтернативном варианте удаленные нуклеозиды могут быть рассеяны по всему модифицированному олигонуклеотиду, например, в антисмысловом соединении, имеющем один или более нуклеозидов, удаленных с 5' конца, и один или более нуклеозидов, удаленных с 3' конца.

При наличии одного дополнительного нуклеозида в удлиненном олигонуклеотиде, дополнительный нуклеозид может быть расположен на 5', 3' конце или в центральной части олигонуклеотида. При наличии двух или более дополнительных нуклеозидов, дополнительные нуклеозиды могут быть расположены рядом друг с другом, например, в олигонуклеотиде, имеющем дав нуклеозида, добавленных на 5' конце (5' присоединение), или в альтернативном варианте на 3' конце (3' присоединение), или в центральной части олигонуклеотида. В альтернативном варианте добавленные нуклеозиды могут быть рассеяны по всему антисмысловому соединению, например, в олигонуклеотиде, имеющем один или более нуклеозидов, присоединенных к 5' концу, один или более нуклеозидов, присоединенных к 3' концу, и/или один или более нуклеозидов, присоединенных в центральной части.

Длина антисмыслового соединения, такого как антисмысловой олигонуклеотид, может быть увеличена или уменьшена, и/или могут быть введены некомплементарные основания без аннулирования активности. Например, в Woolf et al. (Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89: 7305-7309, 1992) описан ряд антисмысловых олигонуклеотидов длиной 13-25 азотистых оснований, которые были испытаны на их способность индуцировать расщепление целевой РНК в модели инъекции в ооцит. Антисмысловые олигонуклеотиды длиной 25 азотистых оснований с 8 или 11 некомплементарными основаниями вблизи концов антисмысловых олигонуклеотидов были способны управлять прямым расщеплением целевой мРНК, хотя и в меньшей степени, чем антисмысловые олигонуклеотиды, которые не содержали никаких несоответствий. Аналогичным образом целевое специфическое расщепление было достигнуто с применением антисмысловых нуклеотидов из 13 азотистых оснований, включая такие, что имели 1 или 3 несоответствия.

Gautschi et al (J. Natl. Natl. Cancer Inst. 93: 463-471, March 2001) продемонстрировали способность олигонуклеотида, обладающего 100% комплементарностью мРНК bcl-2 и содержащего 3 рассогласованных основания по отношению к мРНК bcl-xL, уменьшать экспрессию как bcl-2, так и bcl-xL in vitro и in vivo. Кроме того, данный олигонуклеотид продемонстрировал высокую противоопухолевую активность in vivo.

Maher и Dolnick (Nuc. Acid. Res. 16: 3341-3358,1988) провели испытания серии тандемов антисмысловых олигонуклеотидов из 14 азотистых оснований и антисмысловых олигонуклеотидов из 28 и 42 азотистых оснований, состоящих из последовательности двух или трех тандемов антисмысловых олигонуклеотидов, соответственно, на их способность к блокированию трансляции ДГФР человека в анализе на ретикулоцитах кролика. Каждый из трех антисмысловых олигонуклеотидов из 14 азотистых оснований в одиночку был способен ингибировать трансляцию, хотя и на более низком уровне, чем антисмысловые олигонуклеотиды из 28 или 42 азотистых оснований.

Некоторые мотивы и механизмы антисмысловых соединений

В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения имеют химически модифицированные субъединицы, организованные в паттерны или мотивы, для придания антисмысловым соединениям таких свойств, как усиленная ингибирующая активность, повышенная аффинность связывания с целевой нуклеиновой кислотой или устойчивость к разложению нуклеазами in vivo.

Химерные антисмысловые соединения обычно содержат по меньшей мере одну область, модифицированную таким образом, чтобы придать повышенную устойчивость к разложению под действием нуклеаз, усиление клеточного поглощения, повышенную аффинность связывания с целевой нуклеиновой кислотой, и/или повышенную ингибирующую активность. Вторая область химерного антисмыслового соединения может придавать другое требуемое свойство, например, служить в качестве субстрата для клеточной эндонуклеазы РНКазы Н, которая расщепляет нить РНК в дуплексе РНК: ДНК.

Антисмысловая активность может быть результатом любого механизма, затрагивающего гибридизацию антисмыслового соединения (например, олигонуклеотида) с целевой нуклеиновой кислотой, при этом гибридизация в конечном итоге приводит к биологическому эффекту. В некоторых вариантах реализации модулируют количество и/или активность нуклеиновой кислоты-мишени. В некоторых вариантах реализации уменьшают количество и/или активность нуклеиновой кислоты-мишени. В некоторых вариантах реализации гибридизация антисмыслового соединения с целевой нуклеиновой кислотой в конечном итоге приводит к разложению целевой нуклеиновой кислоты. В некоторых вариантах реализации гибридизация антисмыслового соединения с целевой нуклеиновой кислотой не приводит к разложению целевой нуклеиновой кислоты. В некоторых таких вариантах реализации наличие антисмыслового соединения, гибридизованного с целевой нуклеиновой кислотой (занятость) приводит к модулированию антисмысловой активности. В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения, имеющие определенный химический мотив или паттерн химических модификаций, особенно подходят для использования одного или более механизмов. В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения действуют более чем по одному механизму и/или по неустановленным механизмам. Соответственно, антисмысловые соединения, описанные в настоящем документе, не ограничены конкретным механизмом.

Антисмысловые механизмы включают, без ограничения, антисенс, опосредованный РНКазой Н; механизмы РНКи, в которых участвует каскад RISC и которые включают, без ограничения, механизмы миРНК, кшРНК и микроРНК; и механизмы на основе занятости. Некоторые антисмысловые соединения могут действовать более чем по одному такому механизму и/или по дополнительным механизмам.

Антисенс, опосредованный РНКазой Н

В некоторых вариантах реализации антисмысловая активность по меньшей мере частично обусловлена разрушением РНК-мишени под действием РНКазы Н. РНКаза Н представляет собой клеточную эндонуклеазу, которая расщепляет цепь РНК дуплекса РНК: ДНК. В данной области техники известно, что одноцепочечные антисмысловые соединения, которые являются «ДНК-подобными», вызывают активность РНКазы Н в клетках млекопитающих. Соответственно, антисмысловые соединения, содержащие по меньшей мере часть ДНК или ДНК-подобных нуклеозидов, могут активировать РНКазу Н, приводя к расщеплению нуклеиновой кислоты-мишени. В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения, использующие РНКазу Н, содержат один или более модифицированных нуклеозидов. В некоторых вариантах реализации такие антисмысловые соединения содержат по меньшей мере один блок из 1-8 модифицированных нуклеозидов. В некоторых вариантах реализации модифицированные нуклеозиды не поддерживают активность РНКазы Н. В некоторых вариантах реализации такие антисмысловые соединения представляют собой гэпмеры, как описано в настоящем документе. В некоторых таких вариантах реализации гэп гэпмера содержит нуклеозиды ДНК. В некоторых таких вариантах реализации гэп гэпмера содержит ДНК-подобные нуклеозиды. В некоторых таких вариантах реализации гэп гэпмера содержит нуклеозиды ДНК и ДНК-подобные нуклеозиды.

Некоторые антисмысловые соединения, имеющие мотив гэпмера, считают химерными антисмысловыми соединениями. В гэпмере внутренняя область, имеющая множество нуклеотидов, которые поддерживают расщепление РНКазой Н, расположена между внешними областями, имеющими множество нуклеотидов, химически отличающихся от нуклеозидов внутренней области. В случае антисмыслового олигонуклеотида, имеющего гэпмерный мотив, сегмент гэп, как правило, служит в качестве субстрата для расщепления эндонуклеазой, в то время как сегменты крыльев содержат модифицированные нуклеозиды. В некоторых вариантах реализации указанные области гэпмера различаются по типам сахарных фрагментов в составе каждой отдельной области. Типы сахарных фрагментов, которые используют для дифференциации областей гэпмера, в некоторых вариантах реализации могут включать β-D-рибонуклеозиды, β-D-дезоксирибонуклеозиды, 2'-модифицированные нуклеозиды (такие 2'-модифицированные нуклеозиды могут включать, среди прочего, 2'-МОЕ и 2'-O-СН₃) и модифицированные бициклическими сахарами нуклеозиды (такие модифицированные бициклическими сахарами нуклеозиды могут включать те, которые содержат стерически затрудненный этил). В некоторых вариантах реализации нуклеозиды в крыльях могут содержать несколько модифицированных сахарных фрагментов, включая, например, 2'-МОЕ и бициклические сахарные фрагменты, такие как фрагменты со стерически затрудненным этилом или ЗНК. В некоторых вариантах реализации крылья могут содержать несколько модифицированных и немодифицированных сахарных фрагментов. В некоторых вариантах реализации крылья могут содержать различные комбинации 2'-МОЕ нуклеозидов, бициклических сахарных фрагментов, таких как нуклеозиды со стерически затрудненным этилом или ЗНК нуклеозиды, и 2'-дезоксинуклеозидов.

Каждая отдельная область может содержать одинаковые сахарные фрагменты, различные или чередующиеся сахарные фрагменты. Мотив крыло-гэп-крыло часто описывают как «Х-Y-Z», где «X» обозначает длину 5' крыла, «Y» обозначает длину гэпа, a «Z» обозначает длину 3' крыла. «X» и «Z» могут содержать одинаковые, различные или чередующиеся сахарные фрагменты. В некоторых вариантах реализации «X» и «Y» могут содержать один или более 2'-дезоксинуклеозида. «Y» может содержать 2'-дезоксинуклеозиды. В данном контексте гэпмер, описанный как «Х-Y-Z», имеет такую конфигурацию, что гэп расположен непосредственно возле каждого из 5' крыла и 3' крыла. Таким образом, между 5'-крылом и гэп или гэп и 3'-крылом нет промежуточных нуклеотидов. Любое из антисмысловых соединений, описанных в настоящем документе, может иметь гэпмерный мотив. В некоторых вариантах реализации «X» и «Z» являются одинаковыми; в других вариантах реализации они различны. В некоторых вариантах реализации «Y» составляет от 8 до 15 нуклеозидов. X, Y или Z могут составлять 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30 или более нуклеозидов.

В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение, направленное на нуклеиновую кислоту ANGPTL3, имеет гэпмерный мотив, в котором гэп состоит из 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 или 16 связанных нуклеозидов.

В некоторых вариантах реализации антисмысловой олигонуклеотид имеет сахарный мотив, описанный Формулой А, представленной ниже:

(J)_m-(B)_n-(J)_p-(B)_r-(A)_t-(D)_g-(A)_v-(B)_w-(J)_x-(B)_y-(J)_z

где:

каждый А независимо представляет собой 2'-замещенный нуклеозид;

каждый В независимо представляет собой бициклический нуклеозид;

каждый J независимо представляет собой либо 2'-замещенный нуклеозид, либо 2'-дезоксинуклеозид;

каждый D представляет собой 2'-дезоксинуклеозид;

m равен 0-4; n равен 0-2; р равен 0-2; r равен 0-2; t равен 0-2; v равен 0-2; w равен 0-4; х равен 0-2; у равен 0-2; z равен 0-4; g равен 6-14;

при условии, что:

по меньшей мере один из m, n и r отличен от 0;

по меньшей мере один из w и y отличен от 0;

сумма m, n, р, r и t равна от 2 до 5; и

сумма v, w, х, у и z равна от 2 до 5.

Соединения РНКи

В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения представляют собой соединения интерферирующей РНК (РНКи), которые включают двухцепочечные соединения РНК (также называемые малой интерферирующей РНК или миРНК) и одноцепочечные соединения РНКи (или оцРНК). Такие соединения по меньшей мере частично действуют по пути RISC для разрушения и/или изолирования нуклеиновой кислоты-мишени (следовательно, включают соединения микроРНК/микроРНК-миметики). В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения содержат модификации, которые делают их особенно подходящими для таких механизмов.

1. Соединения оцРНК

В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения, включая соединения, особенно подходящие для применения в качестве одноцепочечных РНКи соединений (оцРНК), содержат модифицированный 5'-терминальный конец. В некоторых таких вариантах реализации 5'-терминальный конец содержит модифицированный фосфатный фрагмент. В некоторых вариантах реализации такой модифицированный фосфат является стабилизированным (например, устойчивым к разложению/расщеплению по сравнению с немодифицированным 5'-фосфатом). В некоторых вариантах реализации такие 5'-концевые нуклеозиды стабилизируют 5'-фосфорный фрагмент. Некоторые модифицированные 5'-концевые нуклеозиды описаны в известном уровне техники, например, в WO/2011/139702.

В некоторых вариантах реализации 5'-нуклеозид соединения оцРНК имеет формулу IIc:

где:

T₁ представляет собой необязательно защищенный фосфорный фрагмент;

Т₂ представляет собой межнуклеозидную линкерную группу, связывающую соединение Формулы IIc с олигомерным соединением;

А имеет одну из формул:

или

Q₁ и Q₂, каждый независимо, представляют собой Н, галоген, C₁-C₆ алкил, замещенный C₁-C₆ алкил, C₁-C₆алкокси, замещенный C₁-C₆ алкокси, C₂-C₆ алкенил, замещенный C₂-C₆ алкенил, C₂-C₆ алкинил, замещенный C₂-C₆ алкинил или N(R₃)(R₄);

Q₃ представляет собой О, S, N(R₅) или C(R₆)(R₇);

каждый R₃, R₄ R₅, R₆ и R₇ независимо представляет собой Н, C₁-C₆ алкил, замещенный C₁-C₆ алкил или C₁-C₆ алкокси;

М₃ представляет собой О, S, NR₁₄, C(R₁₅)(R₁₆), C(R₁₅)(R₁₆)C(R₁₇)(R₁₈), C(R₁₅)=C(R₁₇), OC(R₁₅)(R₁₆) или OC(R₁₅)(Bx₂);

R₁₄ представляет собой H, C₁-C₆ алкил, замещенный C₁-C₆ алкил, C₁-C₆ алкокси, замещенный C₁-C₆ алкокси, C₂-C₆ алкенил, замещенный C₂-C₆ алкенил, C₂-C₆ алкинил или замещенный C₂-C₆ алкинил;

R₁₅, R₁₆, R₁₇ и R₁₈, каждый независимо, представляют собой Н, галоген, C₁-C₆ алкил, замещенный C₁-C₆ алкил, C₁-C₆ алкокси, замещенный C₁-C₆ алкокси, C₂-C₆ алкенил, замещенный C₂-C₆ алкенил, C₂-C₆ алкинил или замещенный C₂-C₆ алкинил;

Bx₁ представляет собой фрагмент гетероциклического основания;

или если присутствует Вх₂, то Вх₂ представляет собой фрагмент гетероциклического основания, a Bx₁ представляет собой Н, галоген, C₁-C₆ алкил, замещенный C₁-C₆ алкил, C₁-C₆ алкокси, замещенный C₁-C₆ алкокси, C₂-C₆ алкенил, замещенный C₂-C₆ алкенил, С₂-С₆ алкинил или замещенный C₂-C₆ алкинил;

J₄, J₅, J₆ и J₇, каждый независимо, представляют собой Н, галоген, C₁-C₆ алкил, замещенный C₁-C₆ алкил, C₁-C₆ алкокси, замещенный C₁-C₆ алкокси, C₂-C₆ алкенил, замещенный C₂-C₆ алкенил, C₂-C₆ алкинил или замещенный С₂-С₆ алкинил;

или J₄ образует мостик с одним из J₅ или J₇, где указанный мостик состоит из 1-3 связанных бирадикальных групп, выбранных из О, S, NR₁₉, C(R₂₀)(R₂₁), C(R₂₀)=C(R₂₁), C[=C(R₂₀)(R₂₁)] и С(=O), а другие два из J₅, J₆ и J₇, каждый независимо, представляют собой Н, галоген, C₁-C₆ алкил, замещенный C₁-C₆ алкил, C₁-C₆ алкокси, замещенный C₁-C₆ алкокси, C₂-C₆ алкенил, замещенный C₂-C₆ алкенил, С₂-С₆ алкинил или замещенный C₂-C₆ алкинил;

каждый R₁₉, R₂₀ и R₂₁ независимо представляет собой Н, C₁-C₆ алкил, замещенный C₁-C₆ алкил, C₁-C₆ алкокси, замещенный C₁-C₆ алкокси, C₂-C₆ алкенил, замещенный C₂-C₆ алкенил, C₂-C₆ алкинил или замещенный C₂-C₆ алкинил;

G представляет собой Н, ОН, галоген или O-[C(R₈)(R₉)]_n-[(C=O)_m-X₁]_j-Z;

каждый R₈ и R₉ независимо представляет собой Н, галоген, C₁-C₆ алкил или замещенный C₁-C₆ алкил;

X₁ представляет собой О, S или N(E₁);

Z представляет собой Н, галоген, C₁-C₆ алкил, замещенный C₁-C₆ алкил, C₂-C₆ алкенил, замещенный C₂-C₆ алкенил, C₂-C₆ алкинил, замещенный C₂-C₆ алкинил или N(E₂)(E₃);

E₁, Е₂ и Е₃, каждый независимо, представляют собой Н, C₁-C₆ алкил или замещенный C₁-C₆ алкил;

n равен от 1 до примерно 6;

m равен 0 или 1;

j равен 0 или 1;

каждая замещенная группа содержит одну или более необязательно защищенных групп заместителей, независимо выбранных из галогена, OJ₁, N(J₁)(J₂),=NJ₁, SJ₁, N₃, CN, OC(=X₂)J₁, OC(=X₂)N(J₁)(J₂) и C(=X₂)N(J₁)(J₂);

X₂ представляет собой О, S или NJ₃;

каждый J₁, J₂ и J₃ независимо представляет собой Н или C₁-C₆ алкил;

если j равен 1, то Z отличен от галогена или N(Е₂)(Е₃); и

где указанное олигомерное соединение содержит от 8 до 40 мономерных субъединиц и может подвергаться гибридизации с по меньшей мере частью нуклеиновой кислоты-мишени.

В некоторых вариантах реализации М₃ представляет собой О, СН=СН, ОСН₂ или ОС(Н)(Вх₂). В некоторых вариантах реализации М₃ представляет собой О.

В некоторых вариантах реализации J₄, J₅, J₆ и J₇ представляют собой Н. В некоторых вариантах реализации J₄ образует мостик с одним из J₅ или J₇.

В некоторых вариантах реализации А имеет одну из формул:

где:

Q₁ и Q₂, каждый независимо, представляют собой Н, галоген, C₁-C₆ алкил, замещенный C₁-С₆ алкил, C₁-C₆ алкокси или замещенный C₁-C₆ алкокси. В некоторых вариантах реализации Q₁ и Q₂ представляют собой Н. В некоторых вариантах реализации Q₁ и Q₂, каждый независимо, представляют собой Н или галоген. В некоторых вариантах реализации Q₁ и Q₂ представляет собой Н, а другой из Q₁ и Q₂ представляет собой F, СН₃ или ОСН₃.

В некоторых вариантах реализации T₁ имеет формулу:

где:

R_a и R_c, каждый независимо, представляют собой защищенный гидроксил, защищенный тиол, C₁-C₆ алкил, замещенный C₁-C₆ алкил, C₁-C₆ алкокси, замещенный C₁-C₆ алкокси, защищенный амино или замещенный амино; и

R_b представляет собой О или S. В некоторых вариантах реализации R_b представляет собой О, a R_a и R_c, каждый независимо, представляют собой ОСН₃, ОСН₂СН₃ или СН(СН₃)₂.

В некоторых вариантах реализации G представляет собой галоген, ОСН₃, OCH₂F, OCHF₂, OCF₃, ОСН₂СН₃, O(CH₂)₂F, OCH₂CHF₂, OCH₂CF₃, ОСН₂-СН=СН₂, O(СН₂)₂-ОСН₃, O(CH₂)₂-SCH₃, O(CH₂)₂-OCF₃, O(CH₂)₃-N(R₁₀)(R₁₁), O(CH₂)₂-ON(R₁₀)(R₁₁), O(CH₂)₂-O(CH₂)₂-N(R₁₀)(R₁₁), OCH₂C(=O)-N(R₁₀)(R₁₁), OCH₂C(=O)-N(R₁₂)-(CH₂)₂-N(R₁₀)(R₁₁) или O(CH₂)₂-N(R₁₂)-C(=NR₁₃)[N(R₁₀)(R₁₁)], где R₁₀, R₁₁, R₁₂ и R₁₃, каждый независимо, представляют собой Н или C₁-C₆ алкил. В некоторых вариантах реализации G представляет собой галоген, ОСН₃, OCF₃, ОСН₂СН₃, OCH₂CF₃, ОСН₂-СН=СН₂, O(СН₂)₂-ОСН₃, O(CH₂)₂-O(CH₂)₂-N(CH₃)₂, OCH₂C(=O)-N(H)CH₃, OCH₂C(=O)-N(H)-(CH₂)₂-N(CH₃)₂ или OCH₂-N(H)-C(=NH)NH₂. В некоторых вариантах реализации G представляет собой F, ОСН₃ или O(СН₂)₂-ОСН₃. В некоторых вариантах реализации G представляет собой O(СН₂)₂-ОСН₃.

В некоторых вариантах реализации 5'-концевой нуклеозид имеет Формулу IIe:

В некоторых вариантах реализации изобретения антисмысловые соединения, включая соединения, которые особенно подходят для оцРНК, содержат один или более типов модифицированных сахарных фрагментов и/или природных сахарных фрагментов, расположенных вдоль олигонуклеотида или его области в определенном паттерне или мотиве сахарной модификации. Такие мотивы могут содержать любые сахарные модификации, рассмотренные в настоящем документе, и/или другие известные модификации сахара.

В некоторых вариантах реализации олигонуклеотиды содержат или состоят из области, имеющей одинаковые сахарные модификации. В некоторых таких вариантах реализации каждый нуклеозид указанной области содержит одинаковую РНК-подобную сахарную модификацию. В некоторых вариантах реализации каждый нуклеозид области представляет собой 2'-F нуклеозид. В некоторых вариантах реализации каждый нуклеозид области представляет собой 2'-ОМе нуклеозид. В некоторых вариантах реализации каждый нуклеозид области представляет собой 2'-МОЕ нуклеозид. В некоторых вариантах реализации каждый нуклеозид области представляет собой cEt нуклеозид. В некоторых вариантах реализации каждый нуклеозид области представляет собой ЗНК нуклеозид. В некоторых вариантах реализации однородная область образует весь или по существу весь олигонуклеотид. В некоторых вариантах реализации область образует весь нуклеотид, за исключением 1-4 концевых нуклеозидов.

В некоторых вариантах реализации олигонуклеотиды содержат одну или более областей чередующихся сахарных модификаций, где нуклеозиды чередуются между нуклеотидами, имеющими сахарную модификацию первого типа, и нуклеотидами, имеющими сахарную модификацию второго типа. В некоторых вариантах реализации нуклеозиды обоих типов представляют собой РНК-подобные нуклеозиды. В некоторых вариантах реализации чередующиеся нуклеозиды выбраны из: 2'-ОМе, 2'-F, 2'-МОЕ, ЗНК и cEt. В некоторых вариантах реализации чередующиеся модификации представляют собой 2'-F и 2'-ОМе. Такие области могут быть смежными или могут быть прерваны по-другому модифицированными нуклеозидами или конъюгированными нуклеозидами.

В некоторых вариантах реализации каждая чередующаяся область чередующихся модификаций состоит из одного нуклеозида (т.е. паттерн представляет собой (AB)_xA_y, где А представляет собой нуклеозид, имеющий сахарную модификацию первого типа, и В представляет собой нуклеозид, имеющий сахарную модификацию второго типа; x равен 1-20, и у равен 0 или 1). В некоторых вариантах реализации одна или более чередующихся областей в чередующемся мотиве содержит более одного нуклеозида некоторого типа. Например, олигонуклеотиды могут содержать одну или более областей любого из следующих нуклеозидных мотивов:

AABBAA;

ABBABB;

AABAAB;

ABBABAABB;

ABABAA;

AABABAB;

ABABAA;

ABBAABBABABAA; BABBAABBABABAA; или

ABABBAABBABABAA;

где А представляет собой нуклеозид первого типа, и В представляет собой нуклеозид второго типа. В некоторых вариантах реализации каждый А и В выбран из 2'-F, 2'-ОМе, БНК и МОЕ.

В некоторых вариантах реализации олигонуклеотиды, имеющие такой чередующийся мотив, содержат также модифицированный 5'-концевой нуклеозид, такой как нуклеозид формулы IIc или IIe.

В некоторых вариантах реализации олигонуклеотиды содержат область, имеющую мотив 2-2-3. Такие области содержат следующий мотив:

-(А)₂-(В)_х-(А)₂-(С)_y-(А)₃-

где: А представляет собой первый тип модифицированного нуклеозида;

В и С представляют собой нуклеозиды, модифицированные иначе, чем А, однако В и С могут иметь одинаковые или разные модификации относительно друг друга;

x и у равны от 1 до 15.

В некоторых вариантах реализации А представляет собой 2'-ОМе модифицированный нуклеозид. В некоторых вариантах реализации В и С представляют собой 2'-F модифицированные нуклеозиды. В некоторых вариантах реализации А представляет собой 2'-ОМе модифицированный нуклеозид, а В и С представляют собой 2'-F модифицированные нуклеозиды.

В некоторых вариантах реализации олигонуклеозиды имеют следующий сахарный мотив:

5'-(Q)-(AB)_xA_y-(D)_z

где:

Q представляет собой нуклеозид, содержащий стабилизированный фосфатный фрагмент. В некоторых вариантах реализации Q представляет собой нуклеозид, имеющий Формулы IIc или IIe;

А представляет собой первый тип модифицированного нуклеозида;

В представляет собой второй тип модифицированного нуклеозида;

D представляет собой модифицированный нуклеозид, содержащий модификацию, отличную от нуклеозида, смежного с ним. Так, если у равен 0, то D должен быть модифицирован иначе, чем В, а если у равен 1, то D должен быть модифицирован иначе, чем А. В некоторых вариантах реализации D отличен и от А, и от В.

X равен 5-15;

Y равен 0 или 1;

Z равен 0-4.

В некоторых вариантах реализации олигонуклеозиды имеют следующий сахарный мотив:

5'-(Q)-(A)_x-(D)_z

где:

Q представляет собой нуклеозид, содержащий стабилизированный фосфатный фрагмент. В некоторых вариантах реализации Q представляет собой нуклеозид, имеющий Формулы IIc или IIe;

А представляет собой первый тип модифицированного нуклеозида;

D представляет собой модифицированный нуклеозид, содержащий модификацию, отличную от А.

X равен 11-30;

Z равен 0-4.

В некоторых вариантах реализации А, В, С и D в представленных выше мотивах выбраны из: 2'-ОМе, 2'-F, 2'-МОЕ, ЗНК и cEt. В некоторых вариантах реализации D представляет собой концевые нуклеозиды. В некоторых вариантах реализации такие концевые нуклеозиды не предназначены для гибридизации с нуклеиновой кислотой-мишенью (хотя может происходить случайная гибридизация одного или более из них). В некоторых вариантах реализации азотистое основание каждого нуклеозида D представляет собой аденин, независимо от идентичности азотистого основания в соответствующем положении нуклеиновой кислоты-мишени. В некоторых вариантах реализации азотистое основание каждого нуклеозида D представляет собой тимин.

В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения, включая соединения, которые особенно подходят для применения в качестве оцРНК, содержат модифицированные межнуклеозидные связи, расположенные вдоль олигонуклеотида или его области в определенном порядке или в мотиве модифицированной межнуклеозидной связи. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотиды содержат область, имеющую мотив чередующихся межнуклеозидных связей. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотиды содержат область одинаково модифицированных межнуклеозидных связей. В некоторых таких вариантах реализации олигонуклеотид содержит область, которая равномерно связана тиофосфатными межнуклеозидными связями. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид равномерно связан тиофосфатными межнуклеозидными связями. В некоторых вариантах реализации каждая межнуклеозидная связь олигонуклеотида выбрана из фосфодиэфира и тиофосфата. В некоторых вариантах реализации каждая межнуклеозидная связь олигонуклеотида выбрана из фосфодиэфира и тиофосфата, и по меньшей мере одна межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфат.

В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид содержит по меньшей мере 6 тиофосфатных межнуклеозидных связей. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид содержит по меньшей мере 8 тиофосфатных межнуклеозидных связей. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид содержит по меньшей мере 10 тиофосфатных межнуклеозидных связей. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид содержит по меньшей мере один блок из по меньшей мере 6 последовательных тиофосфатных межнуклеозидных связей. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид содержит по меньшей мере один блок из по меньшей мере 8 последовательных тиофосфатных межнуклеозидных связей. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид содержит по меньшей мере один блок из по меньшей мере 10 последовательных тиофосфатных межнуклеозидных связей. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид содержит по меньшей мере один блок из по меньшей мере 12 последовательных тиофосфатных межнуклеозидных связей. В некоторых таких вариантах реализации по меньшей мере один такой блок расположен на 3' конце олигонуклеотида. В некоторых таких вариантах реализации по меньшей мере один такой блок расположен в пределах 3 нуклеозидов от 3' конца олигонуклеотида.

Олигонуклеотиды, имеющие любые из различных сахарных мотивов, описанных в настоящем документе, могут иметь любой связывающий мотив. Например, олигонуклеотиды, включая, но не ограничиваясь ими, те, которые описаны выше, могут иметь связывающий мотив, выбранный из неограничивающей таблицы, представленной ниже:

2. Соединения миРНК

В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения представляют собой двухцепочечные РНКи соединения (миРНК). В таких вариантах реализации одна или обе цепи могут содержать любой мотив модификации, описанный выше для оцРНК. В некоторых вариантах реализации оцРНК соединения могут представлять собой немодифицированные РНК. В некоторых вариантах реализации соединения миРНК могут содержать немодифицированные нуклеозиды РНК, но модифицированные межнуклеозидные связи.

Некоторые варианты реализации относятся к двухцепочечным композициям, в которых каждая цепь содержит мотив, определенный положением одного или более модифицированных или немодифицированных нуклеозидов. В некоторых вариантах реализации предложены композиции, содержащие первое и второе олигомерное соединение, которые полностью или по меньшей мере частично гибридизованы с образованием дуплексной области, и дополнительно содержащие область, которая комплементарна нуклеиновой кислоте-мишени и гибридизуется с ней. Удобно, что такая композиция содержит первое олигомерное соединение, которое представляет собой антисмысловую цепь, имеющую полную или частичную комплементарность нуклеиновой кислоте-мишени, и второе олигомерное соединение, которое представляет собой смысловую цепь, имеющую одну или более областей, комплементарных и образующих по меньшей мере одну дуплексную область с первым олигомерным соединением.

Композиции согласно некоторым вариантам реализации модулируют генную экспрессию посредством гибридизации с нуклеиновой кислотой-мишенью, что приводит к потере ее нормальной функции. В некоторых вариантах реализации нуклеиновая кислота-мишень представляет собой ANGPTL3. В некоторых вариантах реализации разрушение ANGPTL3-мишени облегчается активированным комплексом RISC, который образуется с композициями, описанными в настоящем документе.

Некоторые варианты реализации относятся к двухцепочечным композициям, в которых одна из цепей подходит, например, для воздействия на предпочтительное включения противоположной цепи в RISC (или расщепляющий) комплекс.Указанные композиции подходят для направленного воздействия на выбранные молекулы нуклеиновых кислот и для модулирования экспрессии одного или более генов. В некоторых вариантах реализации композиции согласно настоящему изобретению гибридизуются с частью РНК-мишени, что приводит к потере нормальной функции РНК-мишени.

Некоторые варианты реализации относятся к двухцепочечным композициям, в которых обе цепи содержат гемимерный мотив, полностью модифицированный мотив, позиционно модифицированный мотив или чередующийся мотив. Каждая цепь композиций согласно настоящему изобретению может быть модифицирована для выполнения определенной роли, например, в каскаде миРНК. Используя различные мотивы в каждой цепи или одинаковый мотив с различными химическими модификациями в каждой цепи, может быть обеспечено направленное воздействие на антисмысловую цепь комплекса RISC при ингибировании внедрения смысловой цепи. В рамках такой модели каждая цепь может быть модифицирована независимо, так что она лучше выполняет свою конкретную роль. Антисмысловая цепь может быть модифицирована на 5'-конце для усиления его роли в одной области RISC, тогда как 3'-конец может быть модифицирован иначе для усиления его роли в другой области RISC.

Молекулы двухцепочечных олигонуклеотидов могут представлять собой молекулу двухцепочечного полинуклеотида, содержащую самокомплементарные смысловые и антисмысловые области, где антисмысловая область содержит нуклеотидную последовательность, которая комплементарна нуклеотидной последовательности в молекуле нуклеиновой кислоты-мишени или ее части, а смысловая область имеет нуклеотидную последовательность, соответствующую последовательности нуклеиновой кислоты-мишени или ее части. Двухцепочечные молекулы олигонуклеотида могут быть собраны из двух отдельных олигонуклеотидов, где одна цепь представляет собой смысловую цепь, а другая цепь представляет собой антисмысловую цепь, где антисмысловая и смысловая цепи являются самокомплементарными (т.е. каждая цепь содержит последовательность нуклеотидов, которая комплементарна последовательности нуклеотидов в другой цепи; например, если антисмысловая цепь и смысловая цепь образуют дуплекс или двухцепочечную структуру, например, если двухцепочечная область имеет от примерно 15 до примерно 30, например, примерно 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 или 30 пар оснований; антисмысловая цепь содержит последовательность нуклеотидов, которая комплементарна последовательности нуклеотидов в молекуле нуклеиновой кислоты-мишени или ее части, а смысловая цепь содержит последовательность нуклеотидов, соответствующую последовательности нуклеиновой кислоты-мишени или ее части (например, от примерно 15 до примерно 25 или более нуклеотидов двухцепочечной молекулы олигонуклеотида комплементарны нуклеиновой кислоте-мишени или ее части. В альтернативном варианте двухцепочечный олигонуклеотид собран из одного олигонуклеотида, при этом самокомплементарные смысловые и антисмысловые области миРНК связаны посредством линкера(-ов), основанных на нуклеиновой кислоте или не основанных на нуклеиновой кислоте.

Двухцепочечный олигонуклеотид может представлять собой полинуклеотид с дуплексной, асимметричной дуплексной, шпилечной или асимметричной шпилечной вторичной структурой, имеющий самокоплементарные смысловые и антисмысловые области, при этом антисмысловая область содержит нуклеотидную последовательность, которая комплементарна нуклеотидной последовательности в отдельной молекуле целевой нуклеиновой кислоты или ее части, а смысловая область имеет нуклеотидную последовательность, соответствующую последовательности целевой нуклеиновой кислоты или ее части. Двухцепочечный олигонуклеотид может представлять собой кольцевой одноцепочечный полинуклеотид, имеющий две или более петлевых структур и ствол, содержащий самокомплементарные смысловые и антисмысловые области, при этом антисмысловая область содержит нуклеотидную последовательность, которая комплементарна нуклеотидной последовательности в молекуле нуклеиновой кислоты-мишени или ее части, а смысловая область имеет нуклеотидную последовательность, соответствующую последовательности нуклеиновой кислоты-мишени или ее части, и при этом кольцевой полинуклеотид может быть процессирован in vivo или in vitro с получением активной молекулы миРНК, способной опосредовать РНКи.

В некоторых вариантах реализации двухцепочечный олигонуклеотид содержит отдельные смысловые и антисмысловые последовательности или области, при этом смысловая и антисмысловая области ковалентно связаны нуклеотидными или ненуклеотидными линкерными молекулами, известными в данной области техники, или в альтернативном варианте реализации связаны нековалентно посредством ионных взаимодействий, водородного связывания, ван-дер-ваальсовских взаимодействий, гидрофобных взаимодействий и/или стэкинг-взаимодействий. В некоторых вариантах реализации двухцепочечный олигонуклеотид содержит нуклеотидную последовательность, которая комплементарна нуклеотидной последовательности гена-мишени. В другом варианте реализации двухцепочечный олигонуклеотид взаимодействует с нуклеотидной последовательностью гена-мишени таким образом, который вызывает ингибирование экспрессии гена-мишени.

В данном контексте двухцепочечные олигонуклеотиды не ограничены молекулами, содержащими только РНК, а дополнительно охватывают химически модифицированные нуклеотиды и ненуклеотиды. В некоторых вариантах реализации молекулы малой интерферирующей нуклеиновой кислоты не имеют нуклеотидов, содержащих 2'-гидрокси (2'-ОН). В некоторых вариантах реализации малые интерферирующие нуклеиновые кислоты необязательно не содержат рибонуклеотидов (например, нуклеотидов, имеющих группу 2'-ОН). Такие двухцепочечные олигонуклеотиды, которые не требуют наличия рибонуклеотидов в молекуле для поддержания РНКи, могут тем не менее иметь присоединенный линкер или линкеры или другие присоединенные или связанные группы, фрагменты или цепи, содержащие один или более нуклеотидов с группами 2'-ОН. Необязательно, двухцепочечный олигонуклеотиды могут содержать рибонуклеотиды в примерно 5, 10, 20, 30, 40 или 50% положений нуклеотидов. В контексте настоящего документа термин миРНК считают эквивалентным другим терминам, используемым для описания молекул нуклеиновых кислот, которые могут опосредовать последовательность-специфичную РНКи, например, малой интерферирующей РНК (миРНК), двухцепочечной РНК (дцРНК), микро-РНК (микроРНК), короткой шпилечной РНК (кшРНК), малого интерферирующего олигонуклеотида, малой интерферирующей нуклеиновой кислоты, малого интерферирующего модифицированного олигонуклеотида, химически модифицированной миРНК, РНК посттранскрипционного сайленсинга гена (ptgsPHK) и других. Кроме того, в данном контексте термин РНК считают эквивалентным другим терминам, используемым для описания последовательность-специфической интерференции РНК, такой как посттранскрипционный сайленсинг гена, трансляционное ингибирование или эпигенетика. Например, двухцепочечные олигонуклеотиды могут быть использованы для эпигенетического сайленсинга генов на посттранскрипционном уровне и на дотранскрипционном уровне. В неограничивающем примере эпигенетическое регулирование генной экспрессии молекулами миРНК согласно настоящему изобретению может быть результатом миРНК-опосредованной модификации структуры хроматина или паттерна метилирования для изменения генной экспрессии (см., например, Verdel et al., 2004, Science, 303,672-676; Pal-Bhadra et al., 2004, Science, 303,669-672; Allshire, 2002, Science, 297, 1818-1819; Volpe et al., 2002, Science, 297, 1833-1837; Jenuwein, 2002, Science, 297, 2215-2218; и Hall et al., 2002, Science, 297, 2232-2237).

Подразумевается, что соединения и композиции согласно некоторым вариантам реализации, предложенным в настоящем документе, могут направленно воздействовать на ANGPTL3 посредством дцРНК-опосредованного сайленсинга гена или механизма РНКи, включая, например, эффекторные молекулы «шпилечной» или двухцепочечной РНК из ствола-петли, в которых одна цепь РНК с самокомплементарными последовательностями может принимать двухцепочечную конформацию, или эффекторные молекулы дуплексной дцРНК, содержащие две отдельные цепи РНК. В различных вариантах реализации дцРНК полностью состоит из рибонуклеотидов или состоит из смеси рибонуклеотидов и дезоксинуклеотидов, таких как гибриды РНК/ДНК, описанные, например, в WO 00/63364, поданной 19 апреля 2000 года, или в патенте США Ser. №60/130377, поданном 21 апреля 1999 года. дцРНК или эффекторная молекула дцРНК может представлять собой одну молекулу с областью самокомплементарности, так что нуклеотиды в одном сегменте молекулы участвуют в спаривании оснований с нуклеотидами в другом сегменте молекулы. В различных вариантах реализации дцРНК, которая состоит из одной молекулы, полностью состоит из рибонуклеотидов или содержит область рибонуклеотидов, которая комплементарна области дезоксирибонуклеотидов. В альтернативном варианте реализации дцРНК может содержать две разные цепи, которые имеют область комплементарности друг с другом.

В различных вариантах реализации обе цепи полностью состоят из рибонуклеотидов, одна цепь полностью состоит из рибонуклеотидов, и одна цепь полностью состоит из дезоксирибонуклеотидов, или одна или обе цепи содержат смесь рибонуклеотидов и дезоксирибонуклеотидов. В некоторых вариантах реализации области комплементарности по меньшей мере на 70, 80, 90, 95, 98 или 100% комплементарны друг другу и последовательности нуклеиновой кислоты-мишени. В некоторых вариантах реализации область дцРНК, которая находится в двухцепочечной конформации, содержит по меньшей мере 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 50, 75,100, 200, 500, 1000, 2000 или 5000 нуклеотидов или содержит все нуклеотиды в кДНК или другой последовательности нуклеиновой кислоты-мишени, находящейся в дцРНК. В некоторых вариантах реализации дцРНК не содержит одноцепочечных областей, таких как одноцепочечные концы, или дцРНК представляет собой шпильку. В других вариантах реализации дцРНК имеет одну или более одноцепочечных областей или выступов. В некоторых вариантах реализации гибриды РНК/ДНК содержат цепь или область ДНК, которая представляет собой антисмысловую цепь или область (например, имеет по меньшей мере 70, 80, 90, 95, 98 или 100% комплементарность с нуклеиновой кислотой-мишенью), и цепь или область РНК, которая представляет собой смысловую цепь или область (например, имеет по меньшей мере 70, 80, 90, 95, 98 или 100% идентичность с нуклеиновой кислотой-мишенью) и наоборот.

В различных вариантах реализации гибрид РНК/ДНК получают in vitro с помощью методов ферментного или химического синтеза, таких как описаны в настоящем документе или в WO 00/63364, поданной 2000 года, или в патенте США Ser. №60/130377, поданном 21 апреля 1999 года. В других вариантах реализации цепь ДНК, синтезированная in vitro, связана в комплекс с цепью РНК, полученной in vivo или in vitro до, после или одновременно с трансформацией ДНК цепи в клетку. В других вариантах реализации дцРНК представляет собой одну кольцевую нуклеиновую кислоту, содержащую смысловую и антисмысловую область, или дцРНК содержит кольцевую нуклеиновую кислоту и вторую кольцевую нуклеиновую кислоту или линейную нуклеиновую кислоту (см., например, WO 00/63364, поданную 2000 года, или в патенте США Ser. №60/130377, поданном 21 апреля 1999 года). Иллюстративные кольцевые нуклеиновые кислоты включают лариатные структуры, в которых свободная 5' фосфорильная группа нуклеотида становится связанной с 2' гидроксильной группой другого нуклеотида путем закольцовывания.

В других вариантах реализации дцРНК содержит один или более модифицированных нуклеотидов, в которых 2' положение сахара содержит галоген (такой как группа фтора) или содержит алкокси-группу (такую как метокси-группа), что увеличивает период полувыведения дцРНК in vitro или in vivo по сравнению с соответствующей дцРНК, в которой соответствующее 2' положение содержит водород или гидроксильную группу. В других вариантах реализации дцРНК содержит одну или более связей между смежными нуклеотидами, отличных от природной фосфодиэфирной связи. Примеры таких связей включают фосфорамидные, тиофосфатные и дитиофосфатные связи. дцРНК также могут представлять собой химически модифицированные молекулы нуклеиновых кислот, как описано в патенте патент США №6673661. В других вариантах реализации дцРНК содержит одну или две кэпированных цепей, как описано, например, в WO 00/63364, поданной 2000 года, или в патенте США Ser. №60/130377, поданном 21 апреля 1999 года.

В других вариантах реализации дцРНК может представлять собой любую из по меньшей мере частично дцРНК молекул, описанных в WO 00/63364, а также любую из дцРНК молекул, описанных в предварительной заявке США 60/399998; и в предварительной заявке США 60/419532, и в PCT/US2003/033466, содержание которых включено в настоящий документ посредством ссылки. Любая из дцРНК может быть экспрессирована in vitro или in vivo с помощью способов, описанных в настоящем документе, или стандартных способов, таких как описаны в WO 00/63364.

Занятость

В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения предположительно не приводят к расщеплению нуклеиновой кислоты-мишени посредством РНКазы Н или не приводят к расщеплению или секвестрации по пути RISC. В некоторых таких вариантах реализации антисмысловая активность может быть результатом занятости, при этом наличие гибридизованного антисмыслового соединения нарушает активность нуклеиновой кислоты-мишени. В некоторых таких вариантах реализации антисмысловое соединение может быть равномерно модифицировано или может содержать смесь модификаций и/или модифицированных и немодифицированных нуклеозидов.

Нуклеиновые кислоты-мишени, области-мишени и нуклеотидные последовательности

Нуклеотидные последовательности, которые кодируют ANGPTL3, включают, без ограничения, следующие: последовательность человека с номером доступа GenBank NM_014495.2 (включенную в настоящий документ как SEQ ID NO: 1) или с номером доступа GenBank NT_032977.9, нуклеотиды с 33032001 по33046000 (включенную в настоящий документ как SEQ ID NO: 2). Понятно, что последовательность, изложенная в каждом SEQ ID NO в примерах, содержащихся в настоящем документе, является независимой от любой модификации сахарного фрагмента, межнуклеозидной связи или азотистого основания. Следовательно, антисмысловое соединение, определяемое по SEQ ID NO, может независимо содержать одну или более модификаций сахарного фрагмента, межнуклеозидной связи или азотистого основания. Антисмысловые соединения, описанные по номеру Isis (Isis №) указывают сочетание последовательности азотистых оснований и мотива.

В некоторых вариантах реализации целевая область представляет собой структурно определенную область нуклеиновой кислоты-мишени. Например, целевая область может охватывать 3' UTR, 5' UTR, экзон, интрон, экзон /интронное сочленение, кодирующую область, область инициации трансляции, область терминации трансляции или другими определенные области нуклеиновой кислоты. Структурно определенные области для ANGPTL3 могут быть получены по номеру доступа из баз данных последовательностей, таких как NCBI, и такая информация включена в данное описание посредством ссылки. В некоторых вариантах реализации целевая область может охватывать последовательность от 5' сайта-мишени одного целевого сегмента в пределах области-мишени до 3' сайта-мишени другого целевого сегмента в пределах указанной области-мишени.

В некоторых вариантах реализации «целевой сегмент» представляет собой меньший, субфрагмент области-мишени в составе нуклеиновой кислоты. Например, сегмент-мишень может представлять собой последовательность нуклеотидов нуклеиновой кислоты-мишени, на которую нацелено одно или более антисмысловых соединений. «5' Сайт-мишень» или «5' сайт инициации» относится к 5'-крайнему нуклеотиду целевого сегмента. «3' Сайт-мишень» или «3' сайт терминации» относится к 3'-крайнему нуклеотиду целевого сегмента.

Таргетирование включает в себя определение по меньшей мере одного целевого сегмента, с которым гибридизируется антисмысловое соединение, например, для достижения желаемого эффекта. В некоторых вариантах реализации желаемый эффект представляет собой снижение уровней мРНК нуклеиновой кислоты-мишени. В некоторых вариантах реализации желаемый эффект представляет собой снижение уровней белка, кодируемого нуклеиновой кислотой-мишенью, или фенотипическое изменение, связанное с нуклеиновой кислотой-мишенью.

Область-мишень может содержать один или более целевых сегментов. Несколько целевых сегментов в области-мишени могут быть перекрывающимися. В альтернативном варианте они могут быть не перекрывающимися. В некоторых вариантах реализации целевые сегменты в пределах области-мишени разделены не более чем примерно 300 нуклеотидами. В некоторых вариантах реализации целевые сегменты в пределах области-мишени разделены числом нуклеотидов, равным, равным примерно, не более чем, не более чем примерно 250, 200, 150, 100, 90, 80, 70, 60, 50, 40, 30, 20 или 10 нуклеотидами в нуклеиновой кислоте-мишени, или находится в пределах, определяемых любыми двумя из предшествующих значений. В некоторых вариантах реализации целевые сегменты в пределах области-мишени разделены не более чем, или не более чем примерно 5 нуклеотидами в нуклеиновой кислоте-мишени. В некоторых вариантах реализации целевые сегменты непрерывны. Предусмотрены области-мишени, определенные диапазоном, имеющим стартовую нуклеиновую кислоту, которая представляет собой любую из 5' сайта-мишени или 3' сайта-мишени, перечисленных в настоящем документе.

Подходящие целевые сегменты могут быть расположены в 5' UTR, кодирующем участке, в 3' UTR, интроне, экзоне или в экзон/интронном сочленении. Целевые сегменты, содержащие стартовый кодон или стоп-кодон, также представляют собой подходящие целевые сегменты. Подходящий целевой сегмент может специфически исключать некоторые структурно определенные области, такие как стартовый кодон или стоп-кодон.

Определение подходящих целевых сегментов может включать в себя сравнение последовательности нуклеиновой кислоты-мишени с другими последовательностями по всему геному. Например, для идентификации областей подобия среди различных нуклеиновых кислот может быть использован алгоритм BLAST. Это сравнение может предотвратить выбор последовательностей антисмыслового соединения, которые гибридизуются неспецифическим образом с последовательностями, отличными от выбранной нуклеиновой кислоты-мишени (например, нецелевые или побочные последовательности).

Могут быть вариации в активности (например, определенной по процентному снижению уровней нуклеиновой кислоты-мишени) антисмысловых соединений внутри активной целевой области. В некоторых вариантах реализации изобретения снижение уровней мРНК ANGPTL3 является индикатором ингибирования экспрессии ANGPTL3. Снижение уровней белка ANGPTL3 также указывает на подавление экспрессии мРНК-мишени. Кроме того, на ингибирование экспрессии мРНК и/или белка ANGPTL3 указывают фенотипические изменения, такие как снижение уровня холестерина LDL, триглицеридов или глюкозы.

Гибридизация

В некоторых вариантах реализации гибридизация происходит между антисмысловым соединением, описанным в настоящем документе, и нуклеиновой кислотой ANGPTL3. Наиболее распространенный механизм гибридизации включает водородное связывание (например, уотсон-криковское, хугстиновское или обратное хугстиновское водородное связывание) между комплементарными азотистыми основаниями молекул нуклеиновых кислот.

Гибридизация может происходить в различных условиях. Жесткие условия являются последовательность-зависимыми и определяются природой и составом гибридизуемых молекул нуклеиновых кислот.

Способ определения того, является ли последовательность специфически гибридизуемой с целевой нуклеиновой кислотой, хорошо известны в данной области техники (Sambrook и Russell, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3^е изд., 2001). В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения, представленные в настоящем документе, являются специфически гибридизуемыми с нуклеиновой кислотой ANGPTL3.

Комплементарность

Антисмысловое соединение и нуклеиновая кислота-мишень комплементарны друг другу, если достаточное количество азотистых оснований антисмыслового соединения может образовывать водородную связь с соответствующими азотистыми основаниями нуклеиновой кислоты-мишени, таким образом, что будет достигаться желательный эффект (например, антисмысловое ингибирование нуклеиновой кислоты-мишени, такой как нуклеиновая кислота ANGPTL3).

Антисмысловое соединение может гибридизоваться с одним или несколькими сегментами нуклеиновой кислоты ANGPTL3 таким образом, что промежуточные или смежные сегменты не участвуют в гибридизации (например, петлевая структура, рассогласование или структура шпильки).

В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения, представленные в настоящем изобретении, или определенные их части, являются или по меньшей мере на 70%, 75%, 80%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или на 100% комплементарны нуклеиновой кислоте ANGPTL3, области-мишени, сегменту-мишени или определенной ее части. В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения, представленные в настоящем изобретении, или определенные их части, являются или по меньшей мере на 70%, 75%, 80%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или на 100% комплементарны последовательности одной или более из SEQ ID NO: 1-2. Процент комплементарности антисмыслового соединения с целевой нуклеиновой кислотой может быть определен с использованием стандартных методов.

Например, антисмысловое соединение, в котором 18 из 20 азотистых оснований антисмыслового соединения являются комплементарными к области-мишени, и поэтому будут специфически гибридизоваться, имеет 90 процентов комплементарности. В данном примере оставшиеся некомплементарные азотистые основания могут быть расположены кластерно или вперемешку с комплементарных азотистыми основаниями и не обязаны быть смежными друг с другом или комплементарными азотистыми основаниям. Таким образом, антисмысловое соединение, длина которого составляет 18 азотистых оснований, содержащее 4 (четыре) некомплементарных азотистых основания, фланкированных двумя областями полной комплементарности с нуклеиновой кислотой-мишенью, обладает общей комплементарностью с нуклеиновой кислотой-мишенью 77,8%, и таким образом, входит в границы объема настоящего изобретения. Процент комплементарности антисмыслового соединения с областью нуклеиновой кислоты-мишени может быть определен с помощью программ BLAST (основное средство поиска локального выравнивания) и программ PowerBLAST, известных в данной области техники (Altschul et al., J. Mol. Biol., 1990, 215, 403 410; Zhang и Madden, Genome Res., 1997, 7, 649 656). Процент гомологии, идентичность или комплементарность последовательностей, могут быть определены, например, программой Gap (висконсинский пакет анализа последовательностей, версия 8 для Unix, Genetics Computer Group, Висконсинский Университет, Мэдисон, штат Висконсин), с использованием настроек по умолчанию, которые используют алгоритм Смита и Ватермана (Adv. Appl. Math., 1981, 2, 482 489).

В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения, предложенные в настоящем документе, или их определенные части полностью комплементарны (т.е. на 100% комплементарны) нуклеиновой кислоте-мишени или ее определенной части. Например, антисмысловое соединение может быть полностью комплементарно нуклеиновой кислоте ANGPTL3 или ее области-мишени, или ее сегменту-мишени, или ее последовательности-мишени. В данном контексте «полностью комплементарный» означает, что каждое азотистое основание антисмыслового соединения способно точно спариваться с соответствующими азотистыми основаниями нуклеиновой кислоты-мишени. Например, антисмысловое соединение из 20 азотистых оснований полностью комплементарно целевой последовательности, которая имеет 400 азотистых оснований в длину, при условии, что существует соответствующая часть целевой нуклеиновой кислоты из 20 азотистых оснований, которая полностью комплементарна указанному антисмысловому соединению. Полностью комплементарный может также использоваться в отношении определенного фрагмента первой и/или второй нуклеиновой кислоты. Например, фрагмент из 20 азотистых оснований антисмыслового соединения, состоящего из 30 азотистых оснований, может быть «полностью комплементарным» последовательности-мишени, которая имеет 400 азотистых оснований в длину. Фрагмент из 20 азотистых оснований олигонуклеотида, состоящего из 30 азотистых оснований, полностью комплементарен целевой последовательности, если целевая последовательность имеет соответствующий фрагмент из 20 азотистых оснований, при этом каждое его азотистое основание комплементарно фрагменту из 20 азотистых оснований антисмыслового соединения. В то же время, все антисмысловое соединение из 30 азотистых оснований может быть полностью комплементарным целевой последовательности в зависимости от того, будут ли остальные 10 азотистых оснований антисмыслового соединения также комплементарны целевой последовательности.

Некомплементарное азотистое основание может располагаться на 5' конце или 3' конце антисмыслового соединения. В альтернативном варианте некомплементарное азотистое основание или азотистые основания могут быть внутри антисмыслового соединения. При наличии двух или более некомплементарных нуклеиновых оснований, они могут быть смежными (т.е. связанными) или несмежными. В одном варианте реализации некомплементарное азотистое основание расположено в сегменте крыла гэпмера антисмыслового олигонуклеотида.

В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения, которые содержат точно или до 10, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20 азотистых оснований в длину, содержат не более 4, не более 3, не более 2 или не более 1 некомплементарного азотистого основания(-ий) относительно нуклеиновой кислоты-мишени, такой как нуклеиновая кислота ANGPTL3, или ее определенной части.

В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения, которые содержат точно или до 10, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28,29 или 30 азотистых оснований в длину, содержат не более 6, не более 5, не более 4, не более 3, не более 2 или не более 1 некомплементарного азотистого основания(-ий) относительно нуклеиновой кислоты-мишени, такой как нуклеиновая кислота ANGPTL3, или ее определенной части.

Антисмысловые соединения, представленные в настоящем документе, включают также те, которые являются комплементарными части целевой нуклеиновой кислоты. В данном контексте «часть» относится к определенному количеству смежных (т.е. связанных) азотистых оснований в пределах области или сегмента нуклеиновой кислоты-мишени.

«Часть» также может относиться к определенному количеству смежных азотистых оснований антисмыслового соединения. В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения комплементарны части целевого сегмента из по меньшей мере 8 азотистых оснований. В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения комплементарны части целевого сегмента из по меньшей мере 10 азотистых оснований. В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения комплементарны части целевого сегмента из по меньшей мере 15 азотистых оснований. Также предусмотрены антисмысловые соединения, которые являются комплементарными части из по меньшей мере 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 или более азотистых оснований целевого сегмента, или количества в диапазоне, определяемом любыми двумя из указанных значений.

Идентичность

Антисмысловые соединения, представленные в настоящем документе, также могут иметь определенный процент идентичности конкретной нуклеотидной последовательности, SEQ ID NO или последовательности соединения, представленного конкретным номером Isis, или его части. В данном контексте антисмысловое соединение идентично последовательности, описанной в настоящем документе, если оно имеет такую же способность к спариванию азотистых оснований. Например, РНК, которая содержит урацил вместо тимидина в описанной последовательности ДНК, считают идентичной последовательности ДНК, поскольку и урацил, и тимидин спариваются с аденином. Предусмотрены также укороченные и удлиненные варианты антисмысловых соединений, описанных в настоящем документе, а также соединений, обладающих неидентичными основаниями по отношению к антисмысловым соединениям, предложенным в настоящем документе. Неидентичные основания могут быть смежными друг с другом или рассеянными по всему антисмысловому соединению. Процент идентичности антисмыслового соединения рассчитывают по количеству оснований, которые имеют идентичное спаривание оснований, относительно последовательности, с которой идет сравнение.

В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения или их части по меньшей мере на 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичны одному или более антисмысловым соединениям из SEQ ID NO, или их части, как описано в настоящем документе.

Модификации

Нуклеозид представляет собой комбинацию азотистое основание-сахар. Азотистое основание (также известное как основание) - часть нуклеозида, обычно представляющая собой фрагмент гетероциклического основания. Нуклеотиды представляют собой нуклеозиды, которые дополнительно содержат фосфатную группу, ковалентно связанную с сахарной частью нуклеозида. Для тех нуклеозидов, которые содержат пентофуранозильный сахар, фосфатная группа может быть связана с 2', 3' или 5' гидроксильным фрагментом сахара. Олигонуклеотиды образуются посредством ковалентного связывания соседних нуклеозидов друг с другом с образованием линейного полимерного олигонуклеотида. В олигонуклеотидной структуре фосфатные группы обычно называют как образующие межнуклеозидные связи олигонуклеотида.

Модификации антисмысловых соединений охватывают замещения или изменения межнуклеозидных связей, сахарных фрагментов или азотистых оснований. Модифицированные антисмысловые соединения зачастую предпочтительны по сравнению с нативными формами за счет желаемых свойств, таких как, например, улучшенное клеточное поглощение, повышенная аффинность связывания с нуклеиновой кислотой-мишенью, повышенная стабильность в присутствии нуклеаз или повышенная ингибирующая активность.

Химически модифицированные нуклеозиды также могут быть использованы для повышения аффинности связывания укороченного или усеченного антисмыслового олигонуклеотида с его нуклеиновой кислотой-мишенью. Следовательно, сопоставимые результаты часто могут быть получены с помощью более коротких антисмысловых соединений, которые имеют такие химически модифицированные нуклеозиды.

Модифицированные межнуклеозидные связи

Природная межнуклеозидная связь РНК и ДНК представляет собой 3'-5' фосфодиэфирную связь. Часто выбор делается в пользу антисмысловых соединений, содержащих одну или более модифицированных, т.е., не встречающихся в природе межнуклеозидных связей, по сравнению с антисмысловыми соединениями, содержащими природные межнуклеозидные связи, из-за желательных свойств, например, таких как увеличение захвата клеткой, повышенная аффинность к нуклеиновым кислотам-мишеням и повышенная устойчивость в присутствии нуклеаз.

Олигонуклеотиды, имеющие модифицированные межнуклеозидные связи, включают межнуклеозидные связи, которые сохраняют атом фосфора, а также межнуклеозидные связи, которые не имеют атома фосфора. Иллюстративные фосфорсодержащие межнуклеозидные связи включают, но не ограничиваются ими, фосфодиэфиры, фосфотриэфиры, метилфосфонаты, фосфорамидаты и тиофосфаты. Способы получения фосфорсодержащих и не содержащих фосфор связей хорошо известны.

В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения, направленные на нуклеиновую кислоту ANGPTL3, содержат одну или более модифицированных межнуклеозидных связей. В некоторых вариантах реализации модифицированные межнуклеозидные связи представляют собой тиофосфатные связи. В некоторых вариантах реализации каждая межнуклеозидная связь антисмыслового соединения представляет собой тиофосфатную межнуклеозидную связь.

В некоторых вариантах реализации олигонуклеотиды содержат модифицированные межнуклеозидные связи, расположенные вдоль олигонуклеотида или его области определенным образом или в виде мотива модифицированной межнуклеозидной связи. В некоторых вариантах реализации межнуклеозидные связи расположены в разорванном мотиве. В таких вариантах реализации межнуклеозидные связи в каждой из двух областей крыльев отличны от межнуклеозидных связей в области гэп. В некоторых вариантах реализации межнуклеозидные связи в крыльях являются фосфодиэфирными, а межнуклеозидные связи в гэп являются тиофосфатными. Нуклеозидный мотив выбран независимо, так что олигонуклеотид, имеющий разорванный мотив межнуклеозидных связей, может иметь или не иметь разорванный нуклеозидный мотив, и если он имеет разорванный нуклеозидный мотив, то длина крыльев и гэп может быть или не быть одинаковой.

В некоторых вариантах реализации олигонуклеотиды содержат область, имеющую мотив чередующихся межнуклеозидных связей. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотиды согласно настоящему изобретению содержат область одинаково модифицированных межнуклеозидных связей. В некоторых таких вариантах реализации олигонуклеотид содержит область, которая равномерно связана тиофосфатными межнуклеозидными связями. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид равномерно связан тиофосфатными межнуклеозидными связями. В некоторых вариантах реализации каждая межнуклеозидная связь олигонуклеотида выбрана из фосфодиэфира и тиофосфата. В некоторых вариантах реализации каждая межнуклеозидная связь олигонуклеотида выбрана из фосфодиэфира и тиофосфата, и по меньшей мере одна межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфат.

В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид содержит по меньшей мере 6 тиофосфатных межнуклеозидных связей. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид содержит по меньшей мере 8 тиофосфатных межнуклеозидных связей. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид содержит по меньшей мере 10 тиофосфатных межнуклеозидных связей. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид содержит по меньшей мере один блок из по меньшей мере 6 последовательных тиофосфатных межнуклеозидных связей. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид содержит по меньшей мере один блок из по меньшей мере 8 последовательных тиофосфатных межнуклеозидных связей. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид содержит по меньшей мере один блок из по меньшей мере 10 последовательных тиофосфатных межнуклеозидных связей. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид содержит по меньшей мере один блок из по меньшей мере 12 последовательных тиофосфатных межнуклеозидных связей. В некоторых таких вариантах реализации по меньшей мере один такой блок расположен на 3' конце олигонуклеотида. В некоторых таких вариантах реализации по меньшей мере один такой блок расположен в пределах 3 нуклеозидов от 3' конца олигонуклеотида.

В некоторых вариантах реализации олигонуклеотиды содержат одну или более метилфосфонатных связей. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотиды, имеющие гэпмерный нуклеозидный мотив, содержат линкерный мотив, содержащий все тиофосфатные связи, за исключением одной или двух метилфосфонатных связей. В некоторых вариантах реализации одна метилфосфонатная связь находится в центральном гэпе олигонуклеотида, имеющего гэпмерный нуклеозидный мотив.

В некоторых вариантах реализации желательно распределять количество тиофосфатных межнуклеозидных связей и фосфодиэфирных межнуклеозидных связей для сохранения устойчивости к нуклеазе. В некоторых вариантах реализации желательно распределять количество и положение тиофосфатных межнуклеозидных связей, а также количество и положение фосфодиэфирных межнуклеозидных связей для сохранения устойчивости к нуклеазе. В некоторых вариантах реализации количество тиофосфатных межнуклеозидных связей может быть уменьшено, а количество фосфодиэфирных межнуклеозидных связей может быть увеличено. В некоторых вариантах реализации количество тиофосфатных межнуклеозидных связей может быть уменьшено, а количество фосфодиэфирных межнуклеозидных связей может быть увеличено при сохранении устойчивости к нуклеазе. В некоторых вариантах реализации желательно уменьшить количество тиофосфатных межнуклеозидных связей при сохранении устойчивости к нуклеазе. В некоторых вариантах реализации желательно увеличить количество фосфодиэфирных межнуклеозидных связей при сохранении устойчивости к нуклеазе.

Модифицированные сахарные фрагменты

Антисмысловые соединения могут необязательно содержать один или более нуклеозидов, в которых модифицирована сахарная группа. Такие нуклеозиды с модифицированным сахаром могут придавать антисмысловым соединениями повышенную устойчивость к нуклеазам, повышенную аффинность связывания или некоторые другие полезные биологические свойства. В некоторых вариантах реализации нуклеозиды содержат химически модифицированные фрагменты рибофуранозного кольца. Примеры химически модифицированных рибофуранозных колец включают, без ограничения, введение групп заместителей (включая 5' и 2' группы заместителей, соединение мостиком негеминальных кольцевых атомов с образованием бициклических нуклеиновых кислот (БНК), замену атома кислорода в рибозильном кольце на S, N(R) или C(R₁)(R₂) (R, R₁ и R₂, каждый независимо, представляют собой Н, С₁-С₁₂ алкил или защитную группу) и их комбинации. Примеры химически модифицированных сахаров включают 2'-F-5'-метил-замещенный нуклеозид (см. международную заявку РСТ WO 2008/101157, опубликованную 8/21/08, где представлены другие описанные 5',2'-бис-замещенные нуклеозиды) или замену атома кислорода рибозильного кольца на S с дополнительным замещением в 2'-положении (см. опубликованную заявку на патент США US2005-0130923, опубликованную 16 июня 2005 года), или в альтернативном варианте с 5'-замещением БНК (см. международную заявку РСТ WO 2007/134181, опубликованную 11/22/07, где ЗНК замещена, например, 5'-метильной или 5'-винильной группой).

Примеры нуклеозидов, имеющих модифицированные сахарные фрагменты, включают, без ограничения, нуклеозиды, содержащие 5'-винильные, 5'-метильные (R или S), 4'-S, 2'-F, 2'-ОСН₃, 2'-ОСН₂СН₃, 2'-OC₂CH₂F и 2'-O(СН₂)₂OCH₃ группы заместителей. Заместитель в 2' положении также может быть выбран из аллила, амино, азидо, тио, О-аллила, O-C₁-C₁₀ алкила, OCF₃, OCH₂F, O(CH₂)₂SCH₃, O(CH₂)₂-O-N(R_m)(R_n), O-CH₂-C(=O)-N(R_m)(R_n) и O-CH₂-C(=O)-N(R₁)-(CH₂)₂-N(R_m)(R_n), где каждый R₁, R_m и R_n независимо представляет собой Н или замещенный или незамещенный C₁-С₁₀ алкил.

В данном контексте «бициклические нуклеозиды» относятся к модифицированным нуклеозидам, содержащим бициклический сахарный фрагмент. Примеры бициклических нуклеиновых кислот (БНК) включают, без ограничения, нуклеозиды, содержащие мостик между 4' и 2' атомами рибозильного кольца. В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения, предложенные в настоящем документе, содержат один или более БНК нуклеозидов, при этом мостик содержит одну из формул: 4'-(СН₂)-O-2' (ЗНК); 4'-(CH₂)-S-2'; 4'-(СН₂)₂-O-2' (ЭНК); 4'-СН(СН₃)-O-2' и 4'-СН(CH₂OCH₃)-O-2' (и их аналоги, см. патент США 7399845, выданный 15 июля 2008 года); 4'-С(СН₃)(СН₃)-O-2' (и их аналоги, см. PCT/US2008/068922, опубликованную как WO 2009/006478 8 января 2009 года); 4'-СН₂-N(OCH₃)-2' (и их аналоги, см. PCT/US2008/064591, опубликованную как WO/2008/150729 11 декабря 2008 года); 4'-CH₂-O-N(CH₃)-2' (см. опубликованную заявку на патент США US2004-0171570, опубликованную 2 сентября 2004 года); 4'-CH₂-N(R)-O-2', где R представляет собой Н, С₁-С₁₂ алкил или защитную группу (см. патент США 7427672, выданный 23 сентября 2008 года); 4'-СН₂-С(Н)(СН₃)-2' (см. Zhou et al, J. Org Chem., 2009, 74, 118-134); и 4'-CH₂-C-(=CH₂)-2' (и их аналоги, см. PCT/US2008/066154, опубликованную как WO 2008/154401 8 декабря 2008 года).

Дополнительные бициклические нуклеозиды описаны в опубликованной литературе (см., например: Srivastava et al., J. Am. Chem. Soc, 2007,129(26) 8362-8379; Frieden et al., Nucleic Acids Research, 2003, 21, 6365-6372; Elayadi et al., Curr. Opinion Invens. Drugs, 2001, 2, 558-561; Braasch et al., Chem. Biol, 2001, 8, 1-7; Orum et al., Curr. Opinion Mol Ther., 2001, 3, 239-243; Wahlestedt et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A., 2000, 97, 5633-5638; Singh et al., Chem. Commun., 1998, 4, 455-456; Koshkin et al., Tetrahedron, 1998, 54, 3607-3630; Kumar et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 1998, 8, 2219-2222; Singh et al., J. Org. Chem., 1998, 63, 10035-10039; патенты США №: 7741457; 7399845; 7053207; 7034133; 6794499; 6770748; 6670461; 6525191; 6268490; публикации патентов США №: US2008-0039618; US2007-0287831; US2004-0171570; заявки на патент США, серийные номера: 61/097787; 61/026995; и международные заявки: WO 2009/006478; WO 2008/154401; WO 2008/150729; WO 2009/100320; WO 2011/017521; WO 2009/067647; WO 2010/036698; WO 2007/134181; WO 2005/021570; WO 2004/106356; WO 99/14226. Каждый из указанных бициклических нуклеозидов может быть получен с одной или более стереохимическими конфигурациями сахара, включая, например, α-L-рибофуранозу и β-D-рибофуранозу (см. международную заявку РСТ PCT/DK98/00393, опубликованную 25 марта 1999 года как WO 99/14226).

В данном контексте «моноциклические нуклеозиды» относятся к нуклеозидам, содержащим модифицированные сахарные фрагменты, которые не являются бициклическими сахарными фрагментами. В некоторых вариантах реализации сахарный фрагмент или аналог сахарного фрагмента нуклеозида может быть модифицирован или замещен в любом положении.

В данном контексте «4'-2' бициклический нуклеозид» или «4' к 2' бициклический нуклеозид» относится к бициклическому нуклеозиду, содержащему фуранозное кольцо, содержащее мостик, соединяющий два атома углерода фуранозного кольца, соединяющий 2' атом углерода и 4' атом углерода сахарного кольца.

В некоторых вариантах реализации бициклические сахарные фрагменты нуклеозидов БНК включают, но не ограничиваются ими, соединения, имеющие по меньшей мере один мостик между 4' и 2' атомами углерода пентофуранозильного сахарного фрагмента, включая, без ограничения, мостики, содержащие 1 или от 1 до 4 связанных групп, независимо выбранных из -[C(R_a)(R_b)]_n-, -C(R_a)=C(R_b)-, -C(R_a)=N-, -C(=NR_a)-, -C(=O)-, -C(=S)-, -O-, -Si(R_a)₂-, -S(=O)_x- и -N(R_a)-; где: x равен 0, 1 или 2; n равен 1, 2, 3 или 4; каждый R_a и R_b независимо представляет собой Н, защитную группу, гидроксил, C₁-C₁₂ алкил, замещенный C₁-C₁₂ алкил, C₂-C₁₂ алкенил, замещенный C₂-C₁₂ алкенил, C₂-C₁₂ алкинил, замещенный C₂-C₁₂ алкинил, С₅-С₂₀ арил, замещенный С₅-С₂₀ арил, гетероциклический радикал, замещенный гетероциклический радикал, гетероарил, замещенный гетероарил, С₅-С₇ алициклический радикал, замещенный С₅-С₇ алициклический радикал, галоген, OJ₁, NJ₁J₂, SJ₁, N₃, COOJ₁, ацил (С(=O)-Н), замещенный ацил, CN, сульфонил (S(=O)₂-J₁) или сульфоксил (S(=O)-J₁); и

каждый J₁ и J₂ независимо представляет собой Н, C₁-C₁₂ алкил, замещенный C₁-C₁₂ алкил, C₂-C₁₂ алкенил, замещенный C₂-C₁₂ алкенил, C₂-C₁₂ алкинил, замещенный C₂-C₁₂ алкинил, С₅-С₂₀ арил, замещенный С₅-С₂₀ арил, ацил (С(=O)-Н), замещенный ацил, гетероциклический радикал, замещенный гетероциклический радикал, C₁-C₁₂ аминоалкил, замещенный C₁-C₁₂ аминоалкил или защитную группу.

В некоторых вариантах реализации мостик бициклического сахарного фрагмента представляет собой -[C(R_a)(R_b)]_n-, -[C(R_a)(R_b)]_n-O-, -C(R_aR_b)-N(R)-O- или -C(R_aR_b)-O-N(R)-. В некоторых вариантах реализации мостик представляет собой 4'-СН₂-2', 4'-(СН₂)₂-2', 4'-(СН₂)₃-2', 4'-СН₂-O-2', 4'-(СН₂)₂-O-2', 4'-CH₂-O-N(R)-2' и 4'-CH₂-N(R)-O-2'-, где каждый R независимо представляет собой Н, защитную группу или C₁-C₁₂ алкил.

В некоторых вариантах реализации бициклические нуклеозиды дополнительно определяют по изомерной конфигурации. Например, нуклеозид, содержащий мостик 4'-(СН₂)-O-2', может быть в α-L конфигурации или в β-D конфигурации. Ранее α-L-метиленокси (4'-СН₂-O-2') БНК были внедрены в антисмысловые олигонуклеотиды, которые демонстрировали антисмысловую активность (Frieden et al., Nucleic Acids Research, 2003, 21, 6365-6372).

В некоторых вариантах реализации бициклические нуклеозиды включают нуклеозиды, имеющие 4'-2' мостик, где такие мостики включают, без ограничения,, α-L-4'-(СН₂)-O-2', β-D-4'-CH₂-O-2', 4'-(СН₂)₂-O-2', 4'-CH₂-O-N(R)-2', 4'-CH₂-N(R)-O-2', 4'-СН(СН₃)-O-2', 4'-CH₂-S-2', 4'-CH₂-N(R)-2', 4'-СН₂-СН(СН₃)-2' и 4'-(СН₂)₃-2', где R представляет собой Н, защитную группу или C₁-C₁₂ алкил.

В некоторых вариантах реализации бициклические нуклеозиды имеют формулу:

где:

Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания;

-Q_a-Q_b-Q_c- представляет собой -CH₂-N(R_c)-CH₂-, -C(=O)-N(R_c)-CH₂-, -CH₂-O-N(R_c)-, -CH₂-N(R_c)-O- или -N(R_c)-O-CH₂;

R_c представляет собой C₁-C₂ алкил или аминозащитную группу; и

T_a и T_b, каждый независимо, представляют собой Н, гидроксил-защитную группу, группу конъюгата, реакционноспособную фосфорную группу, фосфорный фрагмент или ковалентное присоединение к среде подложки.

В некоторых вариантах реализации бициклические нуклеозиды имеют формулу:

где:

Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания;

Т_а и T_b, каждый независимо, представляют собой Н, гидрокси-защитную группу, группу конъюгата, реакционноспособную фосфорную группу, фосфорный фрагмент или ковалентное присоединение к среде подложки;

Z_a представляет собой C₁-C₆ алкил, С₂-С₆ алкенил, С₂-С₆ алкинил, замещенный C₁-C₆ алкил, замещенный С₂-С₆ алкенил, замещенный С₂-С₆ алкинил, ацил, замещенный ацил, замещенный амид, тиол или замещенный тиол.

В одном из вариантов реализации каждая из замещенных групп независимо является моно или полизамещенной группами заместителей, выбранными из галогена, оксо, гидроксила, OJ_c, NJ_cJ_d, SJ_c, N₃, OC(=X)J_c и NJ_eC(=X)NJ_cJ_d, где каждый J_c, J_d и J_e независимо представляет собой Н, C₁-C₆ алкил ил изамещенный C₁-C₆ алкил, и X представляет собой О или NJ_c.

В некоторых вариантах реализации бициклические нуклеозиды имеют формулу:

где:

Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания;

T_a и T_b, каждый независимо, представляют собой Н, гидрокси-защитную группу, группу конъюгата, реакционноспособную фосфорную группу, фосфорный фрагмент или ковалентное присоединение к среде подложки;

Z_b представляет собой C₁-C₆ алкил, C₂-C₆ алкенил, C₂-C₆ алкинил, замещенный C₁-C₆ алкил, замещенный C₂-С₆ алкенил, замещенный C₂-C₆ алкинил или замещенный ацил (С(=O)-).

В некоторых вариантах реализации бициклические нуклеозиды имеют формулу:

где:

Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания;

T_a и T_b, каждый независимо, представляют собой Н, гидрокси-защитную группу, группу конъюгата, реакционноспособную фосфорную группу, фосфорный фрагмент или ковалентное присоединение к среде подложки;

R_d представляет собой C₁-C₆ алкил, замещенный C₁-C₆ алкил, C₂-C₆ алкенил, замещенный С₂-С₆ алкенил, С₂-С₆ алкинил или замещенный С₂-С₆ алкинил;

каждый q_a, q_b, q_c и q_d независимо представляет собой Н, галоген, C₁-C₆ алкил, замещенный C₁-C₆ алкил, С₂-С₆ алкенил, замещенный С₂-С₆ алкенил, C₂-C₆ алкинил или замещенный C₂-C₆ алкинил, C₁-С₆ алкоксил, замещенный C₁-С₆ алкоксил, ацил, замещенный ацил, C₁-С₆ аминоалкил или замещенный C₁-С₆ аминоалкил;

В некоторых вариантах реализации бициклические нуклеозиды имеют формулу:

где:

Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания;

T_a и T_b, каждый независимо, представляют собой Н, гидрокси-защитную группу, группу конъюгата, реакционноспособную фосфорную группу, фосфорный фрагмент или ковалентное присоединение к среде подложки;

q_a, q_b, q_e и q_f, каждый независимо, представляют собой водород, галоген, C₁-C₁₂ алкил, замещенный С₁-C₁₂ алкил, С₂-С₁₂ алкенил, замещенный С₂-С₁₂ алкенил, С₂-С₁₂ алкинил, замещенный С₂-С₁₂ алкинил, С₁-С₁₂ алкокси, замещенный С₁-С₁₂ алкокси, OJ_j, SJ_j, SOJ_j, SO₂J_j, NJ_jJ_k, N₃, CN, C(=O)OJ_j, C(=O)NJ_jJ_k, C(=O)J_j, O-C(=O)NJ_jJ_k, N(H)C(=NH)NJ_jJ_k, N(H)C(=O)NJ_jJ_k или N(H)C(=S)NJ_jJ_k;

или q_e и q_f вместе представляют собой=C(q_g)(q_h);

q_g и q_h, каждый независимо, представляют собой Н, галоген, C₁-С₁₂ алкил или замещенный С₁-С₁₂ алкил.

Описаны синтез и получение бициклических нуклеозидов аденина, цитозина, гуанина, 5-метилцитозина, тимина и урацила, имеющих мостик 4'-СН₂-O-2', а также их олигомеризация и свойства распознавания нуклеиновых кислот (Koshkin et al., Tetrahedron, 1998, 54, 3607-3630). Описан также синтез бициклических нуклеозидов в WO 98/39352 и WO 99/14226.

Были также получены аналоги различных бициклических нуклеозидов, которые имеют 4'-2' мостиковые группы, такие как 4'-СН₂-O-2' и 4'-CH₂-S-2' (Kumar et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 1998, 8, 2219-2222). Описано также получение олигодезоксирибонуклеотидных дуплексов, содержащих бициклические нуклеозиды, для применения в качестве субстратов для полимераз нуклеиновых кислот (Wengel et al., WO 99/14226). Кроме того, в данной области техники описан синтез 2'-амино-БНК, нового конформационно ограниченного высокоаффинного аналога олигонуклеотида (Singh et al., J. Org. Chem., 1998, 63, 10035-10039). Кроме того, ранее были получены 2'-амино- и 2'-метиленамино-БНК, и была описана термостабильность их дуплексов с комплементарными нитями РНК и ДНК.

В некоторых вариантах реализации бициклические нуклеозиды имеют формулу:

где:

Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания;

T_a и T_b, каждый независимо, представляют собой Н, гидрокси-защитную группу, группу конъюгата, реакционноспособную фосфорную группу, фосфорный фрагмент или ковалентное присоединение к среде подложки;

каждый q_i, q_j, q_k и q_l независимо представляет собой Н, галоген, C₁-C₁₂ алкил, замещенный С₁-С₁₂ алкил, С₂-С₁₂ алкенил, замещенный С₂-С₁₂ алкенил, С₂-С₁₂ алкинил, замещенный С₂-С₁₂ алкинил, C₁-C₁₂ алкоксил, замещенный С₁-С₁₂ алкоксил, OJ_j, SJ_j, SOJ_j, SO₂J_j, NJ_jJ_k, N₃, CN, C(=O)OJ_j, C(=O)NJ_jJ_k, C(=O)J_j, O-C(=O)NJ_jJ_k, N(H)C(=NH)NJ_jJ_k, N(H)C(=O)NJ_jJ_k или N(H)C(=S)NJ_jJ_k; и

q_i и q_j или q_l и q_k вместе представляют собой=C(q_g)(q_h), где q_g и q_h, каждый независимо, представляют собой Н, галоген, С₁-С₁₂ алкил или замещенный C₁-C₁₂ алкил.

Описан один карбоциклический бициклический нуклеозид, имеющий мостик 4'-(СН₂)₃-2', и мостик из аналога алкенила 4'-СН=СН-СН₂-2' (Freier et al., Nucleic Acids Research, 1997, 25(22), 4429-4443 и Albaek et al., J. Org. Chem., 2006, 71, 7731-7740). Описан также синтез и получение карбоциклических бициклических нуклеозидов вместе с их олигомеризацией и биохимическими исследованиями (Srivastava et al., J. Am. Chem. Soc. 2007, 129(26), 8362-8379).

В некоторых вариантах реализации бициклические нуклеозиды включают, но не ограничиваются ими, (А) α-L-метиленокси (4'-СН₂-O-2') БНК, (В) β-D-метиленокси (4'-СН₂-O-2') БНК, (С) этиленокси (4'-(СН₂)₂-O-2') БНК, (D) аминоокси (4'-CH₂-O-N(R)-2') БНК, (Е) оксиамино (4'-CH₂-N(R)-O-2') БНК, (F) метил(метиленокси) (4'-СН(СН₃)-O-2') БНК (также называемый стерически затрудненным этилом или cEt), (G) метилентио (4'-CH₂-S-2') БНК, (Н) метиленамино (4'-CH₂-N(R)-2') БНК, (I) метилкарбоциклическую (4'-СН₂-СН(СН₃)-2') БНК, (J) пропиленкарбоциклическую (4'-(СН₂)₃-2') БНК и (K) винил-БНК, как показано ниже.

где Вх представляет собой фрагмент основания, a R независимо представляет собой Н, защитную группу, C₁-C₆ алкил или C₁-C₆ алкокси.

В данном контексте термин «модифицированный тетрагидропирановый нуклеозид» или «модифицированный ТГП нуклеозид» означает нуклеозид, имеющий шестичленный тетрагидропирановый «сахар», заменивший пентофуранозильный остаток в обычных нуклеозидах, и он может быть упомянут как заменитель сахара. ТГП-модифицированные нуклеозиды включают, но не ограничиваются ими, те, которые в данной области техники называют гекситоловой нуклеиновой кислотой (ГНК), анитоловой нуклеиновой кислотой (АНК), манитоловой нуклеиновой кислотой (МНК) (см. Leumann, Bioorg. Med. Chem., 2002, 10, 841-854) или фтор-ГНК (F-ГНК), имеющие тетрагидропирановую кольцевую систему, как показано ниже.

В некоторых вариантах реализации выбраны заменители сахара, имеющие формулу:

где:

Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания;

T₃ и T₄, каждый независимо, представляют соой межнуклеозидную линкерную группу, связывающую аналог тетрагидропиранового нуклеозида с олигомерным соединением, или один из Т₃ и Т₄ представляет собой межнуклеозидную линкерную группу, связывающую аналог тетрагидропиранового нуклеозида с олигомерным соединением или олигонуклеотидом, а другой из Т₃ и Т₄ представляет собой Н, гидроксил-защитную группу, связанную группу конъюгата или 5' или 3'-концевую группу;

q₁, q₂, q₃, q₄, q₅, q₆ и q₇, каждый независимо, представляют собой Н, C₁-C₆ алкил, замещенный C₁-C₆ алкил, C₂-C₆ алкенил, замещенный C₂-C₆ алкенил, C₂-C₆ алкинил или замещенный C₂-C₆ алкинил; и

один из R₁ и R₂ представляет собой водород, а другой выбран из галогена, замещенного или незамещенного алкокси, NJ₁J₂, SJ₁, N₃, OC(=X)J₁, OC(=X)NJ₁J₂, NJ₃C(=X)NJ₁J₂ и CN, где X представляет собой О, S или NJ₁, и каждый J₁, J₂ и J₃ независимо представляет собой Н или C₁-С₆ алкил.

В некоторых вариантах реализации каждый q₁, q₂, q₃, q₄, q₅, q₆ и q₇ представляет собой H. В некоторых вариантах реализации по меньшей мере один из q₁, q₂, q₃, q₄, q₅, q₆ и q₇ отличен от H. В некоторых вариантах реализации по меньшей мере один из q₁, q₂, q₃, q₄, q₅, q₆ и q₇ представляет собой метил. В некоторых вариантах реализации предложены ТГП нуклеозиды, в которых один из R₁ и R₂ представляет собой F. В некоторых вариантах реализации R₁ представляет собой фтор, a R₂ представляет собой Н; R₁ представляет собой метокси, a R₂ представляет собой Н, и R₁ представляет собой метоксиэтокси, a R₂ представляет собой Н.

В некоторых вариантах реализации заменители сахара содержат кольца, имеющие более 5 атомов и более одного гетероатома. Например, описаны нуклеозиды, содержащие морфолиносахарные фрагменты, и их применение в олигомерных соединениях (см., например: Braasch et al., Biochemistry, 2002, 41, 4503-4510; и патенты США 5698685; 5166315; 5185444; и 5034506). В данном контексте термин «морфолино» означает заменитель сахара, имеющий следующую формулу:

.

В некоторых вариантах реализации морфолино могут быть модифицированными, например, добавлением или изменением различных групп заместителей относительно представленной выше структуры морфолино. Такие заменители сахара в данном контексте называют «модифицированными морфолино».

Предложены также комбинации модификаций, без ограничения, такие как 2'-F-5'-метил-замещенные нуклеозиды (см. международную заявку РСТ WO 2008/101157, опубликованную 8/21/08, где описаны другие 5', 2'-бис-замещенные нуклеозиды) и замену рибозильного кольцевого атома кислорода на S с дополнительным замещением в 2'-положении (см. опубликованную заявку на патент США US2005-0130923, опубликованную 16 июня 2005 года) или в альтернативном варианте с 5'-замещением бициклической нуклеиновой кислоты (см. международную заявку РСТ WO 2007/134181, опубликованную 11/22/07, где 4'-СН₂-O-2' бициклический нуклеозид дополнительно замещен в 5' положении 5'-метильной или 5'-винильной группой). Описан также синтез и получение карбоциклических бициклических нуклеозидов вместе с их олигомеризацией и биохимическими исследованиями (см., например, Srivastava et al., J. Am. Chem. Soc. 2007,129(26), 8362-8379).

В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения содержат один или более модифицированных циклогексенильных нуклеозидов, которые представляют собой нуклеозиды, имеющие шестичленный циклогексенил вместо пентофуранозильного остатка в природных нуклеозидах. Модифицированные циклогексенильные нуклеозиды включают, но не ограничиваются ими, нуклеозиды, описанные в данной области техники (см., например, параллельную опубликованную заявку РСТ WO 2010/036696, опубликованную 10 апреля, 2010, Robeyns et al., J. Am. Chem. Soc, 2008,130(6), 1979-1984; et al., Tetrahedron Letters, 2007, 48, 3621-3623; Nauwelaerts et al., J. Am. Chem. Soc, 2007,129(30), 9340-9348; Gu et al.,, Nucleosides, Nucleotides & Nucleic Acids, 2005, 24(5-7), 993-998; Nauwelaerts et al., Nucleic Acids Research, 2005, 33(8), 2452-2463; Robeyns et al., Acta Crystallographica, Section F: Structural Biology and Crystallization Communications, 2005, F61(6), 585-586; Gu et al., Tetrahedron, 2004, 60(9), 2111-2123; Gu et al., Oligonucleotides, 2003, 13(6), 479-489; Wang et al., J. Org. Chem., 2003, 68, 4499-4505; Verbeure et al., Nucleic Acids Research, 2001, 29(24), 4941-4947; Wang et al., J. Org. Chem., 2001, 66, 8478-82; Wang et al., Nucleosides, Nucleotides & Nucleic Acids, 2001, 20(4-7), 785-788; Wang et al., J. Am. Chem., 2000, 122, 8595-8602; опубликованную заявку PCT WO 06/047842; и опубликованную заявку РСТ WO 01/049687; полное содержание каждой из которых включено в настоящий документ посредством ссылки). Некоторые модифицированные циклогексенильные нуклеозиды имеют формулу X.

где независимо для каждого указанного по меньшей мере одного циклогексенильного нуклеозидного аналога формулы X:

Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания;

T₃ и T₄, каждый независимо, представляют собой межнуклеозидную линкерную группу, которая связывает циклогексенильный нуклеозидный аналог с антисмысловым соединением, или один из T₃ и T₄ представляет собой межнуклеозидную линкерную группу, которая связывает тетрагидропирановый нуклеозидный аналог с антисмысловым соединением, а другой из T₃ и T₄ представляет собой Н, гидроксил-защитную группу, связанную группу конъюгата или 5'-или 3'-концевую группу; и

q₁, q₂, q₃, q₄, q₅, q₆, q₇, q₈ и q₉, каждый независимо, представляют собой Н, C₁-C₆ алкил, замещенный C₁-C₆ алкил, C₂-C₆ алкенил, замещенный C₂-C₆ алкенил, C₂-C₆ алкинил, замещенный C₂-C₆ алкинил или другие группы-заместители сахара.

В данной области техники известны также многие другие моноциклические, бициклические и трициклические кольцевые системы, и они подходят в качестве заменителей сахара, которые могут быть использованы для модификации нуклеозидов для внедрения в олигомерные соединения, предложенные в настоящем документе (см., например, обзорную статью: Leumann, Christian J. Bioorg. & Med. Chem., 2002, 10, 841-854). Такие кольцевые системы могут быть подвергнуты различным дополнительным замещениям для дополнительного повышения их активности.

В данном контексте «2'-модифицированный сахар» означает фуранозильный сахар, модифицированный в 2' положении. В некоторых вариантах реализации такие модификации включают заместители, выбранные из: галогенидов, включая, но не ограничиваясь ими, замещенный и незамещенный алкокси, замещенный и незамещенный тиоалкил, замещенный и незамещенный аминоалкил, замещенный и незамещенный алкил, замещенный и незамещенный аллил и замещенный и незамещенный алкинил. В некоторых вариантах реализации 2' модификации выбраны из заместителей, включающих, но не ограничиваясь ими: O[(CH₂)_nO]_mCH₃, O(CH₂)_nNH₂, O(CH₂)_nCH₃, O(CH₂)_nF, O(CH₂)_nONH₂, OCH₂C(=O)N(H)CH₃ и O(CH₂)_nON[(CH₂)_nCH₃]₂, где n и m равны от 1 до примерно 10. Другие 2' группы заместителей также могут быть выбраны из: C₁-C₁₂ алкила, замещенного алкила, алкенила, алкинила, алкарила, аралкила, О-алкарила или О-аралкила, SH, SCH₃, OCN, Cl, Br, CN, F, CF₃, OCF₃, SOCH₃, SO₂CH₃, ONO₂, NO₂, N₃, NH₂, гетероциклоалкила, гетероциклоалкарила, аминоалкиламино, полиалкиламино, замещенного силила, РНК расщепляющей группы, репортерной группы, интеркалятора, группы для улучшения фармакокинетических свойств или группы для улучшения фармакодинамических свойств антисмыслового соединения, и других заместителей с подобными свойствами. В некоторых вариантах реализации модифицированные нуклеозиды содержат 2'-МОЕ боковую цепь (Baker et al., J. Biol. Chem., 1997, 272, 11944-12000). Такие 2'-MOE замещения описаны как улучшающие аффинность связывания по сравнению с немодифицированными нуклеозидами и с другими модифицированными нуклеозидами, такими как 2'-O-метил, О-пропил и О-аминопропил. Было показано, что олигонуклеотиды, имеющие 2'-МОЕ заместитель, являются антисмысловыми ингибиторами экспрессии генов с перспективными возможностями для применения in vivo (Martin, Helv. Chim. Acta, 1995, 78, 486-504; Altmann et al., Chimia, 1996, 50, 168-176; Altmann et al., Biochem. Soc. Trans., 1996, 24, 630-637; и Altmann et al., Nucleosides Nucleotides, 1997, 16, 917-926).

В данном контексте «2'-модифицированный» или «2'-замещенный» относится к нуклеозиду, содержащему сахар, содержащий заместитель в 2' положении, отличный от Н или ОН. 2'-модифицированные нуклеозиды включают, но не ограничиваются ими, бициклические нуклеозиды, в которых мостик, соединяющий два атом углерода сахарного кольца, соединяет 2' атом углерода и другой атом углерода сахарного кольца; и нуклеозиды с немостиковыми 2' заместителями, такими как аллил, амино, азидо, тио, О-аллил, O-C₁-С₁₀ алкил, -OCF₃, O-(CH₂)₂-O-CH₃, 2'-O(CH₂)₂SCH₃, O-(CH₂)₂-O-N(R_m)(R_n), or O-CH₂-C(=O)-N(R_m)(R_n), где каждый R_m и R_n независимо представляет собой Н или замещенный или незамещенный C₁-С₁₀ алкил. 2'-модифицированные нуклеозиды могут также содержать другие модификации, например, в других положениях сахара и/или азотистого основания.

В данном контексте «2'-F» относится к нуклеозиду, содержащему сахар, содержащий группу фтора в 2' положении сахарного кольца.

В данном контексте «2'-ОМе» или «2'-ОСН₃», «2'-O-метил» или «2'-метокси» относятся к нуклеозиду, содержащему сахар, содержащий группу -ОСН₃ в 2' положении сахарного кольца.

В данном контексте «МОЕ» или «2'-МОЕ», или «2'-OCH₂CH₂OCH₃», или «2'-O-метоксиэтил» относится к нуклеозиду, содержащему сахар, содержащий группу -ОСН₂СН₂ОСН₃ в 2' положении сахарного кольца.

Способы получения модифицированных сахаров хорошо известны специалистам в данной области техники. Некоторые иллюстративные патенты США, которые описывают получение таких модифицированных сахаров, включают, без ограничения, патенты США: 4981957; 5118800; 5319080; 5359044; 5393878; 5446137; 5466786; 5514785;5519134;5567811; 5576427; 5591722; 5597909; 5610300; 5627053; 5639873; 5646265; 5670633; 5700920; 5792847 и 6600032, а также международную заявку PCT/US2005/019219, поданную 2 июня 2005 года и опубликованную как WO 2005/121371 22 декабря 2005 года, полное содержание каждого из которых включено в настоящий документ посредством ссылки.

В данном контексте «олигонуклеотид» относится к соединению, содержащему множество связанных нуклеозидов. В некоторых вариантах реализации один или более из множества нуклеозидов являются модифицированными. В некоторых вариантах реализации олигонуклеотид содержит один или более рибонуклеозидов (РНК) и/или дезоксирибонуклеозидов (ДНК).

В нуклеотидах, имеющих модифицированные сахарные фрагменты, фрагменты азотистых оснований (природные, модифицированные или их комбинации) сохраняются для гибридизации с соответствующей нуклеиновой кислотой-мишенью.

В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения содержат один или более нуклеозидов, имеющих модифицированные сахарные фрагменты. В некоторых вариантах реализации модифицированный сахарный фрагмент представляет собой 2'-МОЕ. В некоторых вариантах реализации 2'-МОЕ модифицированные нуклеозиды расположены в гэпмерном мотиве. В некоторых вариантах реализации модифицированный сахарный фрагмент представляет собой бициклический нуклеозид, имеющий мостиковую группу (4'-СН(СН₃)-O-2'). В некоторых вариантах реализации (4'-СН(СН₃)-O-2') модифицированные нуклеозиды расположены в крыльях гэпмерного мотива.

Модифицированные азотистые основания

Модификации или замещения азотистого основания (или основания) структурно отличаются и функционально взаимозаменимы с природными или синтетическими немодифицированными азотистыми основаниями. Природные и модифицированные азотистые основания могут участвовать в водородном связывании. Такие модификации азотистых оснований могут влиять на стабильность к действию нуклеаз, аффинность связывания или некоторые другие полезные биологические свойства антисмысловых соединений. Модифицированные азотистые основания включают синтетические и природные азотистые основания, такие как, например, 5-метилцитозин (5-me-С). Некоторые замещения азотистых оснований, включая 5-метилцитозиновые замещения, особенно подходят для повышения аффинности связывания антисмыслового соединения с нуклеиновой кислотой-мишенью. Например, было показано, что 5-метилцитозиновые замещения повышают стабильность дуплекса нуклеиновой кислоты на 0,6-1,2°C (Sanghvi, Y.S., Crooke, S.T. и Lebleu, В., ред., Antisense Research and Applications, CRC Press, Boca Raton, 1993, cc. 276-278).

Дополнительные модифицированные азотистые основания включают 5-гидроксиметилцитозин, ксантин, гипоксантин, 2-аминоаденин, 6-метил и другие алкильные производные аденина и гуанина, 2-пропил и другие алкильные производные аденина и гуанина, 2-тиоурацил, 2-тиотимин и 2-тиоцитозин, 5-галогенурацил и цитозин, 5-пропинил (-C≡C-CH3) урацил и цитозин и другие алкинильные производные пиримидиновых оснований, 6-азоурацил, цитозин и тимин, 5-урацил (псевдоурацил), 4-тиоурацил, 8-галоген, 8-амино, 8-тиол, 8-тиоалкил, 8-гидроксил и другие 8-замещенные аденины и гуанины, 5-галоген, в частности, 5-бром, 5-трифторметил и другие 5-замещенные урацилы и цитозины, 7-метилгуанин и 7-метиладенин, 2-F-аденин, 2-аминоаденин, 8-азагуанин и 8-азааденин, 7-дезазагуанин и 7-дезазааденин, и 3-дезазагуанин и 3-дезазааденин.

Фрагменты гетероциклических оснований также могут включать те, в которых пуриновое или пиримидиновое основание заменено другими гетероциклами, например, 7-дезазааденин, 7-дезазагуанозин, 2-аминопиридин и 2-пиридон. Азотистые основания, которые особенно подходят для повышения аффинности связывания антисмысловых соединений, включают 5-замещенные пиримидины, 6-азапиримидины и N-2, N-6 и O-6 замещенные пурины, включая 2-аминопропиладенин, 5-пропинилурацил и 5-пропинилцитозин.

В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения, направленные на нуклеиновую кислоту ANGPTL3, содержат одно или более модифицированных азотистых оснований. В некоторых вариантах реализации укороченные или гэп-расширенные антисмысловые олигонуклеотиды, направленные на нуклеиновую кислоту ANGPTL3, содержат одно или более модифицированных азотистых оснований. В некоторых вариантах реализации модифицированное азотистое основание представляет собой 5-метилцитозин. В некоторых вариантах реализации каждый цитозин представляет собой 5-метилцитозин.

Составы и способы для разработки фармацевтических композиций

Антисмысловые олигонуклеотиды могут быть смешаны с фармацевтически приемлемыми активными или инертными веществами для получения фармацевтических композиций или составов. Композиции и способы составления фармацевтических композиций зависят от множества критериев, включая, но не ограничиваясь этим, способ введения, тяжесть заболевания или дозу, подлежащую введению.

Антисмысловое соединение к нуклеиновой кислоте ANGPTL3 могут быть использованы в фармацевтических композициях путем объединения антисмыслового соединения с подходящим фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем. Фармацевтичски приемлемый разбавитель включает фосфатно-солевой буферный раствор (PBS). PBS представляет собой разбавитель, подходящий для применения в композициях, доставляемых парентерально. Соответственно, в одном из вариантов реализации в способах, описанных в настоящем документе, используют фармацевтическую композицию, содержащую антисмысловое соединение, направленное на нуклеиновую кислоту ANGPTL3, и фармацевтически приемлемый разбавитель. В некоторых вариантах реализации фармацевтически приемлемый разбавитель представляет собой PBS. В некоторых вариантах реализации антисмысловое соединение представляет собой антисмысловой олигонуклеотид.

Фармацевтические композиции, содержащие антисмысловые соединения, включают любые фармацевтически приемлемые соли, сложные эфиры или соли таких сложных эфиров или любой другой олигонуклеотид, который, при введении животному, включая человека, способен обеспечить (прямо или косвенно) биологически активный метаболит или его остаток. Соответственно, например, настоящее описание относится также к фармацевтически приемлемым солям антисмысловых соединений, пролекарствам, фармацевтически приемлемым солям таких пролекарств и к другим биоэквивалентам. Подходящие фармацевтически приемлемые соли включают, но не ограничиваются ими, соли натрия и калия.

Пролекарство может включать внедрение дополнительных нуклеозидов с одного или обоих концов антисмыслового соединения, которые расщепляются в организме под действием эндогенных нуклеаз с образованием активного антисмыслового соединения.

Сопряженные антисмысловые соединения

Антисмысловые соединения могут быть ковалентно связаны с одним или более фрагментами или конъюгатами, которые усиливают активность, клеточное распределение или клеточное поглощение полученных антисмысловых олигонуклеотидов. Типичные группы конъюгата включают фрагменты холестерина и липидные фрагменты. Дополнительные группы конъюгата включают углеводы, фосфолипиды, биотин, феназин, соль фолиевой кислоты, фенантридин, антрахинон, акридин, флуоресцеины, родамины, кумарины, и красители.

Антисмысловые соединения могут также быть модифицированными, чтобы иметь одну или более стабилизирующих групп, которые обычно присоединяются к одному или обоим концам антисмысловых соединений для улучшения свойств, таких как, например, устойчивость к нуклеазам. Стабилизирующие группы включают кэпирующие структуры. Такие концевые модификации защищают антисмысловое соединение с концевой нуклеиновой кислотой от разрушения под действием экзонуклеаз и могут способствовать доставке и/или локализации внутри клетки. Кэп может быть расположен на 5'-конце (5'-кэп) или на 3'-конце (3'-кэп), или может находиться на обоих концах. Кэпирующие структуры хорошо известны в данной области техники и включают, например, инвертированные дезокси кэпы с удаленными азотистыми основаниями. Дополнительные 3' и 5'-стабилизирующие группы, которые могут быть использованы для кэпирования одного или обоих концов антисмыслового соединения для придания устойчивости к нуклеазам, включают группы, описанные в WO 03/004602 опубликованном 16 января 2003 года.

В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложены сопряженные антисмысловые соединения, представленные формулой:

где

А представляет собой антисмысловой олигонуклеотид;

В представляет собой расщепляемый фрагмент

С представляет собой линкер конъюгата

D представляет собой группу ветвления

каждый Е представляет собой связку;

каждый F представляет собой лиганд; и

q представляет собой целое число от 1 до 5.

В некоторых вариантах реализации предложены сопряженные антисмысловые соединения, имеющие структуру:

.

В некоторых вариантах реализации предложены сопряженные антисмысловые соединения, имеющие структуру:

В настоящем описании предложены следующие неограничивающие нумерованные варианты реализации:

где:

T₂ представляет собой нуклеозид, нуклеотид, мономерную субъединицу или олигомерное соединение.

В вариантах реализации, имеющих более одной конкретной переменной (например, более одного «m» или «n»), если не указано иное, каждая такая конкретная переменная выбрана независимо. Следовательно, для структуры, имеющей более одного n, каждый n выбран независимо, так что они могут быть или не быть одинаковыми между собой.

i. Некоторые расщепляемые фрагменты

В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой расщепляемую связь. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент содержит расщепляемую связь. В некоторых вариантах реализации группа конъюгата содержит расщепляемый фрагмент. В некоторых таких вариантах реализации расщепляемый фрагмент присоединен к антисмысловому олигонуклеотиду. В некоторых таких вариантах реализации расщепляемый фрагмент присоединен непосредственно к фрагменту, направляющему на клетку. В некоторых таких вариантах реализации расщепляемый фрагмент присоединен к линкеру конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент содержит фосфат или фосфодиэфир. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой расщепляемый нуклеозид или нуклеозидный аналог. В некоторых вариантах реализации нуклеозид или нуклеозидный аналог содержит необязательно защищенное гетероциклическое основание, выбранное из пурина, замещенного пурина, пиримидина или замещенного пиримидина. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой нуклеозид, содержащий необязательно защищенное гетероциклическое основание, выбранное из урацила, тимина, цитозина, 4-N-бензоилцитозина, 5-метилцитозина, 4-N-бензоил-5-метилцитозина, аденина, 6-N-бензоиладенина, гуанина и 2-N-изобутирилгуанина. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой 2'-дезоксинуклеозид, который присоединен к 3'-положению антисмыслового олигонуклеотида фосфодиэфирной связью и присоединен к линкеру фосфодиэфирной или тиофосфатной связью. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой 2'-дезоксиаденозин, который присоединен к 3'-положению антисмыслового олигонуклеотида фосфодиэфирной связью и присоединен к линкеру фосфодиэфирной или тиофосфатной связью. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой 2'-дезоксиаденозин, который присоединен к 3'-положению антисмыслового олигонуклеотида фосфодиэфирной связью и присоединен к линкеру фосфодиэфирной связью.

В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент присоединен к 3'-положению антисмыслового олигонуклеотида. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент присоединен к 5'-положению антисмыслового олигонуклеотида. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент присоединен к 2'-положению антисмыслового олигонуклеотида. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент присоединен к антисмысловому олигонуклеотиду фосфодиэфирной связью. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент присоединен к указанному линкеру либо фосфодиэфирной, либо тиофосфатной связью. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент присоединен к указанному линкеру фосфодиэфирной связью. В некоторых вариантах реализации группа конъюгата не содержит расщепляемый фрагмент.

В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент расщепляется после введения указанного комплекса в организм животного только после его поглощения целевой клеткой. Внутри клетки расщепляемый фрагмент расщепляется, высвобождая таким образом активный антисмысловой олигонуклеотид. Не ограничиваясь теорией, предполагают, что расщепляемый фрагмент расщепляется под действием одной или более нуклеаз внутри клетки. В некоторых вариантах реализации одна или более нуклеаз расщепляют фосфодиэфирную связь между расщепляемым фрагментом и линкером. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент имеет структуру, выбранную из следующих:

и

где каждый из Вх, Bx₁, Вх₂ и Вх₃ независимо представляет собой фрагмент гетероциклического основания. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент имеет структуру, выбранную из следующих:

i. Некоторые линкеры

В некоторых вариантах реализации группы конъюгата содержат линкер. В некоторых таких вариантах реализации линкер ковалентно связан с расщепляемым фрагментом. В некоторых таких вариантах реализации линкер ковалентно связан с антисмысловым олигонуклеотидом. В некоторых вариантах реализации линкер ковалентно связан с фрагментом, направляющим на клетку. В некоторых вариантах реализации линкер дополнительно содержит ковалентное присоединение к твердой подложке. В некоторых вариантах реализации линкер дополнительно содержит ковалентное присоединение к белковому связывающему фрагменту. В некоторых вариантах реализации линкер дополнительно содержит ковалентное присоединение к твердой подложке и дополнительно содержит ковалентное присоединение к белковому связывающему фрагменту. В некоторых вариантах реализации линкер содержит несколько положений для присоединения связанных лигандов. В некоторых вариантах реализации линкер содержит несколько положений для присоединения связанных лигандов и не присоединен к группе ветвления. В некоторых вариантах реализации линкер дополнительно содержит одну или более расщепляемых связей. В некоторых вариантах реализации группа конъюгата не содержит линкер.

В некоторых вариантах реализации линкер содержит по меньшей мере одну линейную группу, содержащую группы, выбранные из алкильных, амидных, дисульфидных, полиэтиленгликолевых, тиоэфирных (-S-) и гидроксиламино (-O-N(H)-) групп. В некоторых вариантах реализации линейная группа содержит группы, выбранные из алкильных, амидных и простых эфирных групп. В некоторых вариантах реализации линейная группа содержит группы, выбранные из алкильных и простых эфирных групп. В некоторых вариантах реализации линейная группа содержит по меньшей мере одну фосфорную линкерную группу. В некоторых вариантах реализации линейная группа содержит по меньшей мере одну фосфодиэфирную группу. В некоторых вариантах реализации линейная группа содержит по меньшей мере одну нейтральную линкерную группу. В некоторых вариантах реализации линейная группа ковалентно присоединена к фрагменту, направляющему на клетку, и к расщепляемому фрагменту. В некоторых вариантах реализации линейная группа ковалентно присоединена к фрагменту, направляющему на клетку, и к антисмысловому олигонуклеотиду. В некоторых вариантах реализации линейная группа ковалентно присоединена к фрагменту, направляющему на клетку, к расщепляемому фрагменту и к твердой подложке. В некоторых вариантах реализации линейная группа ковалентно присоединена к фрагменту, направляющему на клетку, к расщепляемому фрагменту, к твердой подложке и к белковому связывающему фрагменту. В некоторых вариантах реализации линейная группа содержит одну или более расщепляемых связей.

В некоторых вариантах реализации линкер содержит линейную группу, ковалентно присоединенную к группе скелета. В некоторых вариантах реализации скелет содержит разветвленную алифатическую группу, которая содержит группы, выбранные из алкильных, амидных, дисульфидных, полиэтиленгликолевых, простых эфирных, тиоэфирных и гидроксиламино-групп. В некоторых вариантах реализации скелет содержит разветвленную алифатическую группу, которая содержит группы, выбранные из алкильных, амидных и простых эфирных групп. В некоторых вариантах реализации скелет содержит по меньшей мере одну моно- или полициклическую кольцевую систему. В некоторых вариантах реализации скелет содержит по меньшей мере две моно- или полициклические кольцевые системы. В некоторых вариантах реализации линейная группа ковалентно присоединена к группе скелета, а группа скелета ковалентно присоединена к расщепляемому фрагменту и линкеру. В некоторых вариантах реализации линейная группа ковалентно присоединена к группе скелета, а группа скелета ковалентно присоединена к расщепляемому фрагменту, линкеру и твердой подложке. В некоторых вариантах реализации линейная группа ковалентно присоединена к группе скелета, а группа скелета ковалентно присоединена к расщепляемому фрагменту, линкеру и белковому связывающему фрагменту. В некоторых вариантах реализации линейная группа ковалентно присоединена к группе скелета, а группа скелета ковалентно присоединена к расщепляемому фрагменту, линкеру, белковому связывающему фрагменту и твердой подложке. В некоторых вариантах реализации группа скелета содержит одну или более расщепляемых связей.

В некоторых вариантах реализации линкер содержит белок-связывающий фрагмент. В некоторых вариантах реализации белок-связывающий фрагмент представляет собой липид, такой как, например, включая, но не ограничиваясь ими, холестерин, холевая кислота, адамантан-уксусная кислота, 1-пирен-масляная кислота, дигидротестостерон, 1,3-бис-O(гексадецил)глицерин, геранилоксигексиловая группа, гексадецилглицерин, борнеол, ментол, 1,3-пропандиол, гептадециловая группа, пальмитиновая кислота, миристиновая кислота, O3-(олеоил)литохолевая кислота, O3-(олеоил)холеновая кислота, диметокситритил или феноксазин, витамин (например, фолат, витамин А, витамин Е, биотин, пиридоксаль), пептид, углевод (например, моносахарид, дисахарид, трисахарид, тетрасахарид, олигосахарид, полисахарид), эндосомолитический компонент, стероид (например, уваол, гецигенин, диосгенин), терпен (например, тритерпен, например, сарсасапогенин, фриделин, литохолевая кислота, дериватизованная эпифриделанолом) или катионный липид. В некоторых вариантах реализации белок-связывающий фрагмент представляет собой насыщенную или ненасыщенную жирную кислоту с длиной цепи от С16 до С22, холестерин, холевую кислоту, витамин Е, адамантан или 1-пентафторпропил.

В некоторых вариантах реализации линкер имеет структуру, выбранную из:

где каждый n независимо равен от 1 до 20; и p равен от 1 до 6.

В некоторых вариантах реализации линкер имеет структуру, выбранную из:

где каждый n независимо равен от 1 до 20.

В некоторых вариантах реализации линкер имеет структуру, выбранную из:

где n равен от 1 до 20.

В некоторых вариантах реализации линкер имеет структуру, выбранную из:

и

где каждый L независимо представляет собой фосфорную линкерную группу или нейтральную линкерную группу; и

каждый n независимо равен от 1 до 20.

В некоторых вариантах реализации линкер имеет структуру, выбранную из:

; и

.

В некоторых вариантах реализации линкер имеет структуру, выбранную из:

и

.

В некоторых вариантах реализации линкер имеет структуру, выбранную из:

где n равен от 1 до 20.

В некоторых вариантах реализации линкер имеет структуру, выбранную из:

и .

В некоторых вариантах реализации линкер имеет структуру, выбранную из:

и .

В некоторых вариантах реализации линкер имеет структуру, выбранную из:

и .

В некоторых вариантах реализации линкер конъюгата имеет структуру:

В некоторых вариантах реализации линкер имеет структуру, выбранную из:

и .

В некоторых вариантах реализации линкер имеет структуру, выбранную из:

и ;

где каждый n независимо равен 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6 или 7.

ii. Некоторые фрагменты, направляющие на клетку

В некоторых вариантах реализации группы конъюгата содержат фрагменты, направляющие на клетку. Некоторые такие фрагменты, направляющие на клетку, увеличивают клеточный захват антисмысловых соединений. В некоторых вариантах реализации фрагменты, направляющие на клетку, содержат группу ветвления, одну или более связок и один или более лигандов. В некоторых вариантах реализации фрагменты, направляющие на клетку, содержат группу ветвления, одну или более связок, один или более лигандов и одну или более расщепляемых связей.

1. Некоторые группы ветвления

В некоторых вариантах реализации группы конъюгата содержат направляющий фрагмент, содержащий группу ветвления и по меньшей мере два связанных лиганда. В некоторых вариантах реализации группа ветвления присоединяет линкер конъюгата. В некоторых вариантах реализации группа ветвления присоединяет расщепляемый фрагмент. В некоторых вариантах реализации группа ветвления присоединяет антисмысловой олигонуклеотид. В некоторых вариантах реализации группа ветвления ковалентно присоединена к линкеру и каждому из связанных лигандов. В некоторых вариантах реализации группа ветвления содержит разветвленную алифатическую группу, которая содержит группы, выбранные из алкильных, амидных, дисульфидных, полиэтиленгликолевых, простых эфирных, тиоэфирных и гидроксиламино-групп. В некоторых вариантах реализации группа ветвления содержит группы, выбранные из алкильных, амидных и простых эфирных групп. В некоторых вариантах реализации группа ветвления содержит группы, выбранные из алкильных и простых эфирных групп. В некоторых вариантах реализации группа ветвления содержит моно- или полициклическую кольцевую систему. В некоторых вариантах реализации группа ветвления содержит одну или более расщепляемых связей. В некоторых вариантах реализации группа конъюгата не содержит группу ветвления.

В некоторых вариантах реализации группа ветвления имеет структуру, выбранную из:

где каждый n независимо равен от 1 до 20;

j равен от 1 до 3; и

m равен от 2 до 6.

В некоторых вариантах реализации группа ветвления имеет структуру, выбранную из:

где каждый n независимо равен от 1 до 20; и

m равен от 2 до 6.

В некоторых вариантах реализации группа ветвления имеет структуру, выбранную из:

и

где каждый A₁ независимо представляет собой О, S, С=O или NH; и

каждый n независимо равен от 1 до 20.

В некоторых вариантах реализации группа ветвления имеет структуру, выбранную из:

и

где каждый A₁ независимо представляет собой О, S, С=O или NH; и

каждый n независимо равен от 1 до 20.

В некоторых вариантах реализации группа ветвления имеет структуру, выбранную из:

и

где A₁ представляет собой О, S, С=O или NH; и

каждый n независимо равен от 1 до 20.

В некоторых вариантах реализации группа ветвления имеет структуру, выбранную из:

2. Некоторые связки

В некоторых вариантах реализации группы конъюгата содержат одну или более связок, ковалентно присоединенных к группе ветвления. В некоторых вариантах реализации группы конъюгата содержат одну или более связок, ковалентно присоединенных к линкерной группе. В некоторых вариантах реализации каждая связка представляет собой линейную алифатическую группу, содержащую одну или более групп, выбранных из алкильных, простых эфирных, тиоэфирных, дисульфидных, амидных и полиэтиленгликолевых групп в любой комбинации. В некоторых вариантах реализации каждая связка представляет собой линейную алифатическую группу, содержащую одну или более групп, выбранных из алкильных, замещенных алкильных, простых эфирных, тиоэфирных, дисульфидных, амидных, фосфодиэфирных и полиэтиленгликолевых групп в любой комбинации. В некоторых вариантах реализации каждая связка представляет собой линейную алифатическую группу, содержащую одну или более групп, выбранных из алкильных, простых эфирных и амидных групп в любой комбинации. В некоторых вариантах реализации каждая связка представляет собой линейную алифатическую группу, содержащую одну или более групп, выбранных из алкильных, замещенных алкильных, фосфодиэфирных, простых эфирных и амидных групп в любой комбинации. В некоторых вариантах реализации каждая связка представляет собой линейную алифатическую группу, содержащую одну или более групп, выбранных из алкила и фосфодиэфира в любой комбинации. В некоторых вариантах реализации каждая связка содержит по меньшей мере одну фосфорную линкерную группу или нейтральную линкерную группу.

В некоторых вариантах реализации связка содержит одну или более расщепляемых связей. В некоторых вариантах реализации связка присоединена к группе ветвления либо через амидную, либо через простую эфирную группу. В некоторых вариантах реализации связка присоединена к группе ветвления через фосфордиэфирную группу. В некоторых вариантах реализации связка присоединена к группе ветвления через фосфорную линкерную группу или через нейтральную линкерную группу. В некоторых вариантах реализации связка присоединена к группе ветвления через простую эфирную группу. В некоторых вариантах реализации связка присоединена к лиганду либо через амидную, либо через простую эфирную группу. В некоторых вариантах реализации связка присоединена к лиганду через простую эфирную группу. В некоторых вариантах реализации связка присоединена к лиганду либо через амидную, либо через простую эфирную группу. В некоторых вариантах реализации связка присоединена к лиганду через простую эфирную группу.

В некоторых вариантах реализации каждая связка имеет длину от примерно 8 до примерно 20 атомов в цепи между лигандом и группой ветвления. В некоторых вариантах реализации каждая связка имеет длину от примерно 10 до примерно 18 атомов в цепи между лигандом и группой ветвления. В некоторых вариантах реализации каждая связка имеет длину примерно 13 атомов в цепи.

В некоторых вариантах реализации связка имеет структуру, выбранную из:

и

где каждый n независимо равен от 1 до 20; и

каждый p равен от 1 до примерно 6.

В некоторых вариантах реализации связка имеет структуру, выбранную из:

и .

В некоторых вариантах реализации связка имеет структуру, выбранную из:

где каждый n независимо равен от 1 до 20.

В некоторых вариантах реализации связка имеет структуру, выбранную из:

и

где L представляет собой либо фосфорную линкерную группу, либо нейтральную линкерную группу;

Z₁ представляет собой C(=O)O-R₂;

Z₂ представляет собой Н, C₁-C₆ алкил или замещенный C₁-C₆ алкил;

R₂ представляет собой Н, C₁-C₆ алкил или замещенный C₁-C₆ алкил; и

каждый m₁ независимо равен от 0 до 20, при этом по меньшей мере один m₁ больше 0 для каждой связки.

В некоторых вариантах реализации связка имеет структуру, выбранную из:

.

В некоторых вариантах реализации связка имеет структуру, выбранную из:

и

где Z₂ представляет собой Н или СН₃; и

каждый m₁ независимо равен от 0 до 20, при этом по меньшей мере один m₁ больше 0 для каждой связки.

В некоторых вариантах реализации связка имеет структуру, выбранную из:

или; где каждый n независимо равен 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6 или 7.

В некоторых вариантах реализации связка содержит фосфорную линкерную группу. В некоторых вариантах реализации связка не содержит ни одной амидной связи. В некоторых вариантах реализации связка содержит фосфорную линкерную группу и не содержит ни одной амидной связи.

3. Некоторые лиганды

В некоторых вариантах реализации настоящего описания представлены лиганды, при этом каждый лиганд ковалентно присоединен к связке. В некоторых вариантах реализации каждый лиганд выбран так, чтобы он обладал аффинностью по меньшей мере к одному типу рецептора на клетке-мишени. В некоторых вариантах реализации лиганды выбраны так, чтобы они обладали аффинностью по меньшей мере к одному типу рецептора на поверхности клетки печени млекопитающего. В некоторых вариантах реализации лиганды выбраны так, чтобы они обладали аффинностью к печеночному асиалогликопротеиновому рецептору (ASGP-R). В некоторых вариантах реализации каждый лиганд представляет собой углевод. В некоторых вариантах реализации каждый лиганд независимо выбран из галактозы, N-ацетилгалактозамина, маннозы, глюкозы, глюкозамина и фукозы. В некоторых вариантах реализации каждый лиганд представляет собой N-ацетилгалактозамин (GalNAc). В некоторых вариантах реализации направляющий фрагмент содержит 2-6 лигандов. В некоторых вариантах реализации направляющий фрагмент содержит 3 лиганда. В некоторых вариантах реализации направляющий фрагмент содержит 3 N-ацетилгалактозаминовых лиганда.

В некоторых вариантах реализации лиганд представляет собой углевод, углеводное производное, модифицированный углевод, поливалентный углеводный кластер, полисахарид, модифицированный полисахарид или полисахаридное производное. В некоторых вариантах реализации лиганд представляет собой аминосахар или тиосахар. Например, аминосахара могут быть выбраны из любого количества соединений, известных в данной области техники, например, глюкозамина, сиаловой кислоты, α-D-галактозамина, N-ацетилгалактозамина, 2-ацетамидо-2-дезокси-D-галактопиранозы (GalNAc), 2-амино-3-O-[(R)-1-карбоксиэтил]-2-дезокси-β-D-глюкопиранозы (β-мурамовой кислоты), 2-дезокси-2-метиламино-L-глюкопиранозы, 4,6-дидезокси-4-формамидо-2,3-ди-O-метил-D-маннопиранозы, 2-дезокси-2-сульфоамино-D-глюкопиранозы и N-сульфо-D-глюкозамина, и N-гликолоил-α-нейраминовой кислоты. Например, тиосахара могут быть выбраны из группы, состоящей из 5-тио-β-D-глюкопиранозы, метил-2,3,4-три-O-ацетил-1-тио-6-O-тритил-α-D-глюкопиранозида, 4-тио-β-D-галактопиранозы и этил-3,4,6,7-тетра-O-ацетил-2-дезокси-1,5-дитио-α-O-gluco-гептопиранозида.

В некоторых вариантах реализации «GalNac» или «Gal-NAc» относится к 2-(ацетиламино)-2-дезокси-D-галактопиранозе, обычно упоминаемой в литературе как N-ацетилгалактозамин. В некоторых вариантах реализации «N-ацетилгалактозамин» относится к 2-(ацетиламино)-2-дезокси-D-галактопиранозе. В некоторых вариантах реализации «GalNac» или «Gal-NAc» относится к 2-(ацетиламино)-2-дезокси-D-галактопиранозе. В некоторых вариантах реализации «GalNac» или «Gal-NAc» относится к 2-(ацетиламино)-2-дезокси-D-галактопиранозе, которая включает и β-форму: 2-(ацетиламино)-2-дезокси-β-D-галактопиранозу, и α-форму: 2-(ацетиламино)-2-дезокси-D-галактопиранозу. В некоторых вариантах реализации обе формы, β-форма: 2-(ацетиламино)-2-дезокси-β-D-галактопираноза, и α-форма: 2-(ацетиламино)-2-дезокси-D-галактопираноза, могут быть использованы взаимозаменяемо. Соответственно, в структурах, в которых изображена одна форма, подразумевается, что эти структуры включают также и другую форму. Например, если показана структура для α-формы: 2-(ацетиламино)-2-дезокси-D-галактопиранозы, то подразумевается, что эта структура включает также и другую форму. В некоторых предпочтительных вариантах реализации β-форма 2-(ацетиламино)-2-дезокси-D-галактопиранозы является предпочтительным вариантом реализации.

В некоторых вариантах реализации один или более лигандов имеют структуру, выбранную из:

и

где каждый R₁ выбран из ОН и NHCOOH.

В некоторых вариантах реализации один или более лигандов имеют структуру, выбранную из:

.

В некоторых вариантах реализации один или более лигандов имеют структуру, выбранную из:

.

iii. Некоторые конъюгаты

В некоторых вариантах реализации группы конъюгата содержат структурные особенности, представленные выше. В некоторых таких вариантах реализации группы конъюгата содержат следующую структуру:

где каждый n независимо равен от 1 до 20.

В некоторых таких вариантах реализации группы конъюгата содержат следующую структуру:

В некоторых таких вариантах реализации группы конъюгата имеют следующую структуру:

где каждый n независимо равен от 1 до 20;

Z представляет собой Н или связанную твердую подложку;

Q представляет собой антисмысловое соединение;

X представляет собой О или S; и

Вх представляет собой фрагмент гетероциклического основания.

В некоторых таких вариантах реализации группы конъюгата имеют следующую структуру:

В некоторых таких вариантах реализации группы конъюгата содержат следующую структуру:

В некоторых таких вариантах реализации группы конъюгата имеют следующую структуру:

В некоторых вариантах реализации конъюгаты не содержат пирролидин.

b. Некоторые сопряженные антисмысловые соединения

В некоторых вариантах реализации конъюгаты связаны с нуклеозидом антисмыслового олигонуклеотида в 2', 3' или 5' положении нуклеозида. В некоторых вариантах реализации сопряженное антисмысловое соединение имеет следующую структуру:

где

А представляет собой антисмысловой олигонуклеотид;

В представляет собой расщепляемый фрагмент

С представляет собой линкер конъюгата

D представляет собой группу ветвления

каждый Е представляет собой связку;

каждый F представляет собой лиганд; и

q представляет собой целое число от 1 до 5.

В некоторых вариантах реализации сопряженное антисмысловое соединение имеет следующую структуру:

где

А представляет собой антисмысловой олигонуклеотид;

С представляет собой линкер конъюгата

D представляет собой группу ветвления

каждый Е представляет собой связку;

каждый F представляет собой лиганд; и

q представляет собой целое число от 1 до 5.

В некоторых таких вариантах реализации линкер конъюгата содержит по меньшей мере одну расщепляемую связь.

В некоторых таких вариантах реализации группа ветвления содержит по меньшей мере одну расщепляемую связь.

В некоторых вариантах реализации каждая связка содержит по меньшей мере одну расщепляемую связь.

В некоторых вариантах реализации конъюгаты связаны с нуклеозидом антисмыслового олигонуклеотида в 2', 3' или 5' положении нуклеозида.

В некоторых вариантах реализации сопряженное антисмысловое соединение имеет следующую структуру:

где

А представляет собой антисмысловой олигонуклеотид;

В представляет собой расщепляемый фрагмент

С представляет собой линкер конъюгата

каждый Е представляет собой связку;

каждый F представляет собой лиганд; и

q представляет собой целое число от 1 до 5.

В некоторых вариантах реализации конъюгаты связаны с нуклеозидом антисмыслового олигонуклеотида в 2', 3' или 5' положении нуклеозида. В некоторых вариантах реализации сопряженное антисмысловое соединение имеет следующую структуру:

где

А представляет собой антисмысловой олигонуклеотид;

С представляет собой линкер конъюгата

каждый Е представляет собой связку;

каждый F представляет собой лиганд; и

q представляет собой целое число от 1 до 5.

В некоторых вариантах реализации сопряженное антисмысловое соединение имеет следующую структуру:

где

А представляет собой антисмысловой олигонуклеотид;

В представляет собой расщепляемый фрагмент

D представляет собой группу ветвления

каждый Е представляет собой связку;

каждый F представляет собой лиганд; и

q представляет собой целое число от 1 до 5.

В некоторых вариантах реализации сопряженное антисмысловое соединение имеет следующую структуру:

где

А представляет собой антисмысловой олигонуклеотид;

D представляет собой группу ветвления

каждый Е представляет собой связку;

каждый F представляет собой лиганд; и

q представляет собой целое число от 1 до 5.

В некоторых таких вариантах реализации линкер конъюгата содержит по меньшей мере одну расщепляемую связь.

В некоторых вариантах реализации каждая связка содержит по меньшей мере одну расщепляемую связь.

В некоторых вариантах реализации сопряженное антисмысловое соединение имеет структуру, выбранную из следующих:

В некоторых вариантах реализации сопряженное антисмысловое соединение имеет следующую структуру:

Иллюстративные патенты Соединенных штатов Америки, публикации патентных заявок Соединенных штатов Америки и публикации международных патентных заявок, в которых описано получение некоторых из указанных выше конъюгатов, сопряженных антисмысловых соединений, связок, линкеров, групп ветвления, лигандов, расщепляемых фрагментов, а также других модификаций, включают, без ограничения, US 5994517, US 6300319, US 6660720, US 6906182, US 7262177, US 7491805, US 8106022, US 7723509, US 2006/0148740, US 2011/0123520, WO 2013/033230 и WO 2012/037254, каждая из которых включена в настоящий документ посредством ссылки в полном объеме.

Иллюстративные публикации, в которых описано получение некоторых из указанных выше конъюгатов, сопряженных антисмысловых соединений, связок, линкеров, групп ветвления, лигандов, расщепляемых фрагментов, а также других модификаций, включают, без ограничения, BIESSEN et al., "The Cholesterol Derivative of a Triantennary Galactoside with High Affinity for the Hepatic Asialoglycoprotein Receptor: a Potent Cholesterol Lowering Agent" J. Med. Chem. (1995) 38:1846-1852, BIESSEN et al., "Synthesis of Cluster Galactosides with High Affinity for the Hepatic Asialoglycoprotein Receptor" J. Med. Chem. (1995) 38: 1538-1546, LEE et al., "New and more efficient multivalent glyco-ligands for asialoglycoprotein receptor of mammalian hepatocytes" Bioorganic & Medicinal Chemistry (2011) 19: 2494-2500, RENSEN et al., "Determination of the Upper Size Limit for Uptake and Processing of Ligands by the Asialoglycoprotein Receptor on Hepatocytes in vitro and in vivo" J. Biol. Chem. (2001) 276(40): 37577-37584, RENSEN et al., "Design and Synthesis of Novel N-Acetylgalactosamine-Terminated Glycolipids for Targeting of Lipoproteins to the Hepatic Asialoglycoprotein Receptor" J. Med. Chem. (2004) 47: 5798-5808, SLIEDREGT et al., "Design and Synthesis of Novel Amphiphilic Dendritic Galactosides for Selective Targeting of Liposomes to the Hepatic Asialoglycoprotein Receptor" J. Med. Chem. (1999) 42: 609-618, и Valentijn et al., "Solid-phase synthesis of lysine-based cluster galactosides with high affinity for the Asialoglycoprotein Receptor" Tetrahedron, 1997, 53(2), 759-770, каждый из которых включен в настоящий документ посредством ссылки в полном объеме.

В некоторых вариантах реализации сопряженные антисмысловые соединения содержат олигонуклеотид на основе РНКазы Н (такой как гэпмер) или сплайс-модулирующий олигонуклеотид (такой как полностью модифицированный олигонуклеотид) и любую группу конъюгата, содержащую по меньшей мере одну, две или три группы GalNAc. В некоторых вариантах реализации сопряженное антисмысловое соединение содержит любую группу конъюгата, описанную в любой из следующих ссылок: Lee, Carbohydr Res, 1978, 67, 509-514; Connolly et al., J Biol Chem, 1982, 257, 939-945; Pavia et al., Int J Pep Protein Res, 1983, 22, 539-548; Lee et al., Biochem, 1984, 23, 4255-4261; Lee et al., Glycoconjugate J, 1987, 4, 317-328; Toyokuni et al., Tetrahedron Lett, 1990, 31, 2673-2676; Biessen et al., J Med Chem, 1995, 38, 1538-1546; Valentijn et al., Tetrahedron, 1997, 53, 759-770; Kim et al., Tetrahedron Lett, 1997, 38, 3487-3490; Lee et al., Bioconjug Chem, 1997, 8, 762-765; Kato et al., Glycobiol, 2001, 11, 821-829; Rensen et al., J Biol Chem, 2001, 276, 37577-37584; Lee et al., Methods Enzymol, 2003, 362, 38-43; Westerlind et al., Glycoconj J, 2004, 21, 227-241; Lee et al., Bioorg Med Chem Lett, 2006, 16(19), 5132-5135; Maierhofer et al., Bioorg Med Chem, 2007, 15, 7661-7676; Khorev et al., Bioorg Med Chem, 2008, 16, 5216-5231; Lee et al., BioorgMed Chem, 2011, 19, 2494-2500; Kornilova et al., Analyt Biochem, 2012, 425, 43-46; Pujol et al., Angew Chemie Int Ed Engl, 2012, 51, 7445-7448; Biessen et al., J Med Chem, 1995, 38, 1846-1852; Sliedregt et al., J Med Chem, 1999, 42, 609-618; Rensen et al., J Med Chem, 2004, 47, 5798-5808; Rensen et al., Arterioscler Thromb Vase Biol, 2006, 26, 169-175; van Rossenberg et al., Gene Ther, 2004, 11, 457-464; Sato et al., J Am Chem Soc, 2004, 126, 14013-14022; Lee et al., J Org Chem, 2012, 77, 7564-7571; Biessen et al., FASEB J, 2000, 14, 1784-1792; Rajur et al., Bioconjug Chem, 1997, 8, 935-940; Duff et al., Methods Enzymol, 2000, 313, 297-321; Maier et al., Bioconjug Chem, 2003, 14, 18-29; Jayaprakash et al., Org Lett, 2010, 12, 5410-5413; Manoharan, Antisense Nucleic Acid Drug Dev, 2002, 12, 103-128; Merwin et al., Bioconjug Chem, 1994, 5, 612-620; Tomiya et al., Bioorg Med Chem, 2013, 21, 5275-5281; в международных заявках WO 1998/013381; WO 2011/038356; WO 1997/046098; WO 2008/098788; WO 2004/101619; WO 2012/037254; WO 2011/120053; WO 2011/100131; WO 2011/163121; WO 2012/177947; WO 2013/033230; WO 2013/075035; WO 2012/083185; WO 2012/083046; WO 2009/082607; WO 2009/134487; WO 2010/144740; WO 2010/148013; WO 1997/020563; WO 2010/088537; WO 2002/043771; WO 2010/129709; WO 2012/068187; WO 2009/126933; WO 2004/024757; WO 2010/054406; WO 2012/089352; WO 2012/089602; WO 2013/166121; WO 2013/165816; в патентах 4751219; 8552163; 6908903; 7262177; 5994517; 6300319; 8106022; 7491805; 7491805;7582744;8137695; 6383812; 6525031; 6660720; 7723509; 8541548; 8344125; 8313772; 8349308;8450467; 8501930; 8158601; 7262177; 6906182; 6620916; 8435491; 8404862; 7851615; в опубликованных заявках на патент США US 2011/0097264; US 2011/0097265; US 2013/0004427; US 2005/0164235; US 2006/0148740; US 2008/0281044; US 2010/0240730; US 2003/0119724; US 2006/0183886; US 2008/0206869; US 2011/0269814; US 2009/0286973; US 2011/0207799; US 2012/0136042; US 2012/0165393; US 2008/0281041; US 2009/0203135; US 2012/0035115; US 2012/0095075; US 2012/0101148; US 2012/0128760; US 2012/0157509; US 2012/0230938; US 2013/0109817; US 2013/0121954; US 2013/0178512; US 2013/0236968; US 2011/0123520; US 2003/0077829; US 2008/0108801; и US 2009/0203132; полное содержание которых включено в настоящий документ посредством ссылки.

Клеточная культура и лечение антисмысловыми соединениями

Влияние антисмысловых соединений на уровень, активность или экспрессию нуклеиновых кислот ANGPTL3 может быть испытано in vitro на различных типах клеток.

Различные типы клеток, используемые для таких анализов, имеются в продаже у коммерческих поставщиков (например, Американская коллекция типов культур (АТСС), Манассас, штат Вирджиния; Zen-Bio, Inc., Research Triangle Park, штат Северная Каролина; Clonetics Corporation, Уолкерсвиль, штат Мэриленд) и клетки культивируют согласно инструкциям производителей с применением коммерчески доступных реагентов (например, Invitrogen Life Technologies, Карлсбад, штат Калифорния). Иллюстративные типы клеток включают, но не ограничиваются ими, клетки HepG2, клетки Hep3B, клетки Huh7 (гепатоцеллюлярная карцинома), первичные гепатоциты, клетки А549, фибробласты GM04281 и клетки LLC-MK2.

Тестирование антисмысловых олигонуклеотидов in vitro

Описываемые в настоящем документе способы лечения клеток с помощью антисмысловых олигонуклеотидов могут быть изменены соответствующим образом для лечения другими антисмысловыми соединениями.

В целом, клетки могут быть обработаны антисмысловыми олигонуклеотидами при 60-80% уровне конфлюентности в культуре.

Реагент, используемый для введения антисмысловых олигонуклеотидов в культивируемые клетки, включает катионный липидный трансфекционный реагент LIPOFECTIN® (Invitrogen, Карлсбад, штат Калифорния). Антисмысловые олигонуклеотиды могут быть смешаны с реагентом LIPOFECTIN® в OPTI-MEM® 1 (Invitrogen, Карлсбад, штат Калифорния) для достижения желаемой конечной концентрации антисмысловых олигонуклеотидов и концентрации LIPOFECTIN® обычно в пределах от 2 до 12 мкг/мл при 100 нМ антисмыслового олигонуклеотида.

Другой реагент, используемый для введения антисмысловых олигонуклеотидов в культивируемые клетки, включает LIPOFECTAMINE 2000® (Invitrogen, Карлсбад, штат Калифорния). Антисмысловой олигонуклеотид смешивают с LIPOFECTAMINE 2000® в среде OPTI-MEM® 1 со сниженным содержанием сыворотки (Invitrogen, Карлсбад, штат Калифорния) для достижения желаемой концентрации антисмысловых олигонуклеотидов и концентрации LIPOFECTAMINE® обычно в пределах от 2 до 12 мкг/мл при 100 нМ антисмыслового олигонуклеотида.

Другой реагент, используемый для введения антисмысловых олигонуклеотидов в культивируемые клетки, включает Cytofectin® (Invitrogen, Карлсбад, штат Калифорния). Антисмысловой олигонуклеотид смешивают с Cytofectin® в среде OPTI-MEM® 1 со сниженным содержанием сыворотки (Invitrogen, Карлсбад, штат Калифорния) для достижения желаемой концентрации антисмысловых олигонуклеотидов и концентрации Cytofectin® обычно в пределах от 2 до 12 мкг/мл при 100 нМ антисмыслового олигонуклеотида.

Другой реагент, используемый для введения антисмысловых олигонуклеотидов в культивируемые клетки, включает Oligofectamine™ (Invitrogen Life Technologies, Карлсбад, штат Калифорния). Антисмысловой олигонуклеотид смешивают с Oligofectamine™ в среде Opti-MEM™-1 со сниженным содержанием сыворотки (Invitrogen Life Technologies, Карлсбад, штат Калифорния) для достижения желаемой концентрации олигонуклеотида и соотношения Oligofectamine™ к олигонуклеотиду примерно 0,2-0,8 мкл на 100 нМ.

Другой реагент, используемый для введения антисмысловых олигонуклеотидов в культивируемые клетки, включает FuGENE 6 (Roche Diagnostics Corp., Индианаполис, штат Индиана). Антисмысловое олигомерное соединение смешивают с FuGENE 6 в 1 мл среды RPMI, не содержащей сыворотки, для достижения желаемой концентрации олигонуклеотида с соотношением FuGENE 6 к олигомерному соединению 1-4 мкл FuGENE 6 на 100 нМ.

Другая технология, используемая для введения антисмысловых олигонуклеотидов в культивируемые клетки, включает электропорацию (Sambrook and Russell, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3^е изд., 2001).

Клетки обрабатывают антисмысловыми олигонуклеотидами с помощью стандартных способов. Клетки обычно собирают через 16-24 часов после обработки антисмысловым олигонуклеотидом, после чего уровни РНК или белков нуклеиновых кислот-мишеней измеряют методами, известными в данной области техники и описанными в настоящем документе. Как правило, если обработку проводят в нескольких повторениях, данные представляют как среднее значение для многократных обработок.

Концентрация используемого антисмыслового олигонуклеотида варьируется в зависимости от линии клеток. Способы определения оптимальной концентрации антисмыслового олигонуклеотидна для конкретной линии клеток хорошо известны в данной области техники. Антисмысловые олигонуклеотиды обычно используют в концентрациях от 1 нМ до 300 нМ, при трансфекции с использованием реагентов LIPOFECTAMINE2000®, Lipofectin или Cytofectin. Антисмысловые олигонуклеотиды используют в более высоких концентрациях в диапазоне от 625 до 20000 нМ при трансфекции с использованием электропорации.

Выделение РНК

Анализ РНК может быть проведен на общей клеточной РНК или поли(А)+ мРНК. Способы выделения РНК хорошо известны в данной области техники (Sambrook and Russell, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3^е изд., 2001). РНК получают с использованием способов, хорошо известных в данной области техники, например, с использованием реагента TRIZOL® (Invitrogen, Карлсбад, штат Калифорния) по рекомендуемым протоколам производителя.

Анализ ингибирования целевых уровней или экспрессии

Ингибирование уровней или экспрессии нуклеиновой кислоты ANGPTL3 может быть проанализировано различными способами, известными в данной области техники (Sambrook and Russell, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3^е изд., 2001). Например, уровни целевой нуклеиновой кислоты могут быть количественно измерены, например, нозерн-блоттингом, конкурентной полимеразной цепной реакцией (ПЦР) или количественной ПЦР в реальном времени. Анализ РНК может быть проведен на общей клеточной РНК или поли(А) + мРНК. Способы выделения РНК хорошо известны в данной области техники. Нозерн-блоттинг также является общепринятым в данной области техники. Количественная ПЦР в реальном времени может быть удобно выполнена с помощью имеющихся в продаже систем обнаружения последовательностей ABI PRISM® 7600, 7700, или 7900 производства компании PE-Applied Biosystems, Фостер-Сити, штат Калифорния, и используемых в соответствии с инструкциями производителя.

Количественный анализ уровней целевой РНК методом ПЦР в реальном времени

Количественное определение уровней целевой РНК может быть проведено путем количественной ПЦР в реальном времени с использованием систем обнаружения последовательностей ABI PRISM 7600, 7700 или 7900 (PE-Applied Biosystems, Фостер-Сити, штат Калифорния) в соответствии с инструкциями производителя. Способы количественной ПЦР в реальном времени хорошо известны в данной области техники.

Перед проведением ПЦР в реальном времени изолированную РНК подвергают реакции обратной транскрипции (ОТ), которая производит комплементарную ДНК (кДНК), которую затем используют в качестве субстрата для амплификации в ПЦР в реальном времени. Реакции ОТ и ПЦР в реальном времени проводят последовательно в одном и том же образце. Реагенты для ОТ и ПЦР в реальном времени могут быть приобретены у компании Invitrogen (Карлсбад, штат Калифорния). Реакции ОТ и ПЦР в реальном времени проводят способами, хорошо известными специалистам в данной области техники.

Количества гена-мишени (или РНК), полученные путем ПЦР в реальном времени, нормализуют с использованием либо уровня экспрессии гена, экспрессия которого постоянна, такого как циклофилин А или GADPH, или на основе количественной оценки суммарной РНК с использованием реагента PIBOGREEN® (Life Technologies™, Inc. Карлсбад, штат Калифорния). Экспрессия циклофилина А или GADPH может быть количественно определена с помощью ПЦР в реальном времени, которую проводят одновременно с мишенью, мультиплексно или отдельно. Общая РНК может быть количественно определена с помощью реагента для количественного определения РНК PIBOGREEN®. Способы количественного определения РНК с использованием PIBOGREEN® изложены в публикации Jones, L.J., et al, (Analytical Biochemistry, 1998, 265, 368-374). Для измерения флуоресценции RIBOGREEN® может быть использован прибор CYTOFLUOR® 4000 (РЕ Applied Biosystems).

Способы конструирования зондов и праймеров для ПЦР в реальном времени хорошо известны в данной области техники, и могут включать использование программного обеспечения, такого как PRIMER EXPRESS® (Applied Biosystems, Фостер-Сити, штат Калифорния). Зонды и праймеры, используемые в ПЦР в реальном времени, конструировали для гибридизации с определенными последовательностями ANGPTL3, и они описаны ниже в разделе «Примеры». Специфичные к мишени зонды ПЦР могут иметь FAM, ковалентно связанный с 5' концом, и TAMRA или MGB, ковалентно связанный с 3' концом, где FAM представляет собой флуоресцентный краситель, a TAMRA или MGB представляют собой гасители флуоресценции.

Анализ уровней белка

Антисмысловое ингибирование нуклеиновых кислот ANGPTL3 может быть оценено путем измерения уровней белка ANGPTL3. Уровни белка ANGPTL3 могут быть оценены или количественно измерены различными способами, хорошо известными в данной области техники, такими как иммунопреципитация, вестерн-блоттинг (иммуноблоттинг), иммуноферментный анализ (ELISA), количественный анализ белка, анализ активности белка (например, анализ активности каспазы), иммуногистохимия, иммуноцитохимия или сортировка флуоресцентно-активированных клеток (FACS) (Sambrook and Russell, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3^е изд., 2001). Антитела, направленные на мишень, могут быть идентифицированы и получены из различных источников, таких как каталог антител MSRS (Aerie Corporation, Бирмингем, штат Мичиган), или могут быть получены с помощью обычных способов генерации моноклональных или поликлональных антител, хорошо известных в данной области техники.

Тестирование антисмысловых соединений in vivo

Антисмысловые соединения, например, антисмысловые олигонуклеотиды, испытывали на животных с целью оценки их способности ингибировать экспрессию ANGPTL3 и производить фенотипические изменения. Тестирование быть проведено на здоровых животных или в экспериментальных моделях заболеваний. Для введения животным антисмысловые олигонуклеотиды составляли с фармацевтически приемлемым разбавителем, таким как фосфатно-солевой буфер. Введение включает парентеральные пути введения. После периода лечения с помощью антисмысловых олигонуклеотидов, РНК выделяют из ткани и измеряют изменения экспрессии нуклеиновой кислоты ANGPTL3. Измеряют также изменения уровней белка ANGPTL3.

Некоторые показания

В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения предложены способы лечения индивидуума, включающие введение одной или более фармацевтических композиций, описанных в настоящем документе. В некоторых вариантах реализации индивидуум страдает метаболическим заболеванием и/или сердечно-сосудистым заболеванием. В некоторых вариантах реализации индивидуум страдает комбинированной гиперлипидемией (например, наследственной или ненаследственной), гиперхолестеринемией (например, наследственной гомозиготной гиперхолестеринемией (HoFH), наследственной гетерозиготной гиперхолестеринемией (HeFH)), дислипидемией, липодистрофией, гипертриглицеридемией (например, гетерозиготным дефицитом LPL, гомозиготным дефицитом LPL), болезнью коронарной артерии (CAD), семейным синдромом хиломикронемии (FCS), гиперлипопротеинемией типа IV), метаболическим синдромом, неалкагольной жировой дистрофией печени (NAFLD), неалкагольным стеатогепатитом (NASH), диабетом (например, диабетом 2 типа, диабетом 2 типа с дислипидемией), резистентностью к инсулину (например, резистентностью к инсулину с дислипидемией), утолщением сосудистых стенок, высоким кровяным давлением (например, легочной артериальной гипертензией), склерозом (например, атеросклерозом, системным склерозом, прогрессирующим склерозом кожи и пролиферативной облитерирующей васкулопатией, такой как цифровая язва и вовлечение в опухоль легочных сосудов), или их комбинацией.

В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения, направленные на нуклеиновую кислоту ANGPTL3, описанные в настоящем документе, модулируют метаболизм липидов и/или энергетический обмен у животного. В некоторых вариантах реализации соединения, направленные на ANGPTL3, описанные в настоящем документе, модулируют физиологические маркеры или фенотипы гиперхолестеринемии, дислипидемии, липодистрофии, гипертриглицеридемии, метаболического синдрома NAFLD, NASH и/или диабета. Например, введение соединений животным может модулировать один или более уровней VLDL, неэстерифицированных жирных кислот (NEFA), LDL, холестерина, триглицеридов, глюкозы, инсулина или ANGPTL3. В некоторых вариантах реализации модулирование физиологических маркеров или фенотипов может быть связано с ингибированием ANGPTL3 указанными соединениями.

В некоторых вариантах реализации соединения, направленные на ANGPTL3, описанные в настоящем документе, снижают и/или предупреждают одно или более из накопления TG в печени (т.е. стеатоз печени), атеросклероза, утолщения сосудистых стенок (например, утолщение комплекса интима-медиа артериальной стенки), комбинированной гиперлипидемии (например, наследственной или ненаследственной), гиперхолестеринемии (например, наследственной гомозиготной гиперхолестеринемии (HoFH), наследственной гетерозиготной гиперхолестеринемии (HeFH)), дислипидемии, липодистрофии, гипертриглицеридемии (например, гетерозиготного дефицита LPL, гомозиготного дефицита LPL, семейного синдрома хиломикронемии (FCS), гиперлипопротеинемии типа IV), метаболического синдрома, неалкагольной жировой дистрофии печени (NAFLD), неалкагольного стеатогепатита (NASH), диабета (например, диабета 2 типа, диабета 2 типа с дислипидемией), резистентности к инсулину (например, резистентности к инсулину с дислипидемией), высокого кровяного давления и склероза, или любой их комбинации. В некоторых вариантах реализации соединения, направленные на ANGPTL3, описанные в настоящем документе, улучшают чувствительность к инсулину.

В некоторых вариантах реализации введение антисмыслового соединения, направленного на нуклеиновую кислоту ANGPTL3, приводит к снижению экспрессии ANGPTL3 на по меньшей мере 15%, по меньшей мере 20%, по меньшей мере 25%, по меньшей мере 30%, по меньшей мере 35%, по меньшей мере 40%, по меньшей мере 45%, по меньшей мере 50%, по меньшей мере 55%, по меньшей мере 60%, по меньшей мере 65%, по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95% или по меньшей мере 99%, или на значение в диапазоне между любыми двумя из указанных значений.

В некоторых вариантах реализации фармацевтические композиции, содержащие антисмысловое соединение, направленное на ANGPTL3, используют для получения лекарственного средства для лечения пациента страдающего или предрасположенного к метаболическому заболеванию или сердечно-сосудистому заболеванию. В некоторых вариантах реализации фармацевтические композиции, содержащие антисмысловое соединение, направленное на ANGPTL3, используют для получения лекарственного средства для лечения пациента, страдающего или предрасположенного к одному или более из комбинированной гиперлипидемии (например, наследственной или ненаследственной), гиперхолестеринемии (например, наследственной гомозиготной гиперхолестеринемии (HoFH), наследственной гетерозиготной гиперхолестеринемии (HeFH)), дислипидемии, липодистрофии, гипертриглицеридемии (например, семейного синдрома хиломикронемии (FCS), гиперлипопротеинемии типа IV), метаболического синдрома, неалкагольной жировой дистрофии печени (NAFLD), неалкагольного стеатогепатита (NASH), диабета (например, диабета 2 типа, диабета 2 типа с дислипидемией), резистентности к инсулину (например, резистентности к инсулину с дислипидемией), утолщения сосудистых стенок, высокого кровяного давления и склероза, или любой их комбинации.

Введение

В некоторых вариантах реализации соединения и композиции, описанные в настоящем документе, вводят парентерально.

В некоторых вариантах реализации парентеральное введение осуществляют инфузией. Инфузия может быть постоянной или непрерывной, или кратковременной, или прерывистой. В некоторых вариантах реализации фармацевтические агенты, вводимые инфузией, доставляют с помощью насоса.

В некоторых вариантах реализации парентеральное введение осуществляют инъекцией. Инъекция может быть доставлена с помощью шприца или насоса. В некоторых вариантах реализации инъекция представляет собой болюсную инъекцию. В некоторых вариантах реализации инъекцию вводят непосредственно в ткань или орган. В некоторых вариантах реализации инъекция является подкожной.

Некоторые комбинированные терапии

В некоторых вариантах реализации первый агент, содержащий модифицированный олигонуклеотид, описанный в настоящем документе, вводят вместе с одним или более вторыми агентами. В некоторых вариантах реализации такие вторые агенты предназначены для лечения того же заболевания, расстройства или патологического состояния, что и первый агент, описанный в настоящем документе. В некоторых вариантах реализации такие вторые агенты предназначены для лечения другого заболевания, расстройства или патологического состояния, чем первый агент, описанный в настоящем документе. В некоторых вариантах реализации такие вторые агенты предназначены для лечения нежелательного побочного эффекта одной или более фармацевтических композиций, описанных в настоящем документе. В некоторых вариантах реализации вторые агенты вводят совместно с первым агентом для лечения нежелательного эффекта первого агента. В некоторых вариантах реализации вторые агенты вводят совместно с первым агентом для получения комбинированного эффекта. В некоторых вариантах реализации вторые агенты вводят совместно с первым агентом для получения синергетического эффекта.

В некоторых вариантах реализации первый агент и один или более вторых агентов вводят одновременно. В некоторых вариантах реализации первый агент и один или более вторых агентов вводят в разное время. В некоторых вариантах реализации первый агент и один или более вторых агентов получают вместе в виде одного фармацевтического состава. В некоторых вариантах реализации первый агент и один или более вторых агентов получают по отдельности.

В некоторых вариантах реализации вторые агенты включают, но не ограничиваются ими, агент для понижения глюкозы или агент для понижения липидов. Агент для снижения глюкозы может включать, но не ограничивается ими, терапевтическое изменение образа жизни, агонист PPAR, ингибитор дипептидилпептидазы (IV), аналог GLP-1, инсулин или аналог инсулина, стимулятор секреции инсулина, ингибитор SGLT2, аналог человеческого амилина, бигуанид, ингибитор альфа-глюкозидазы или их комбинации. Агент для снижения глюкозы может включать, но не ограничивается ими, метформин, сульфонилмочевину, росиглитазон, меглитинид, тиазолидиндион, ингибитор альфа-глюкозидазы или их комбинации. Сульфонилмочевина может представлять собой ацетогексамид, хлорпропамид, толбутамид, толазамид, глимепирид, глипизид, глибурид или гликлазид. Мелгитинид может представлять собой натеглинид или репаглинид. Тиазолидиндион может представлять собой пиоглитазон или росиглитазон. Альфа-глюкозидаза может представлять собой акарбозу или миглитол. В некоторых вариантах реализации терапия для снижения липидов может включать, но не ограничивается ими, терапевтическое изменение образа жизни, ниацин, ингибитор редуктазы HMG-CoA, ингибитор абсорбции холестерина, ингибитор МТР (например, низкомолекулярный, полипептид, антитело или антисмысловое соединение, направленное на МТР), фибрат, ингибитор PCSK9 (например, антитела PCSK9, полипептиды, низкомолекулярные соединения нуклеиновых кислот, направленные на PCSK9), ингибитор СЕТР (например, низкомолекулярный, такой как торцетрапиб и анацетрапиб, полипептиды, антитела или соединения нуклеиновых кислот, направленные на СЕТР), ингибитор ароС-III (например, низкомолекулярный, полипептид, антитело или соединения нуклеиновых кислот, направленные на ароС-III), ингибитор ароВ (например, низкомолекулярный, полипептид, антитело или соединения нуклеиновых кислот, направленные на ароВ), лечебные масла с высоким содержанием омега-3 жирных кислот, омега-3 жирные кислоты или любые их комбинации. Ингибитор редуктазы HMG-CoA может представлять собой аторвастатин, розувастатин, флувастатин, ловастатин, правастатин, симвастатин и т.п. Ингибитор абсорбции холестерина может представлять собой эземитиб. Фибрат может представлять собой фенофибрат, безафибрат, ципрофибрат, клофибрат, гемфиброзил и т.п. Лечебное масло с высоким содержанием омега-3 жирных кислот может представлять собой масло криля, рыбий жир (например, Vascepa^R), льняное масло и т.п. Омега-3 жирные кислоты могут представлять собой ALA, DHA, ЕРА и т.п.

Некоторые соединения

Антисмысловые олигонуклеотиды, направленные на человеческий ANGPTL3, описаны в более ранней публикации (см. публикацию патента РСТ №WO 2011/085271, опубликованную 14 июля 2011 года, включенную в настоящий документ посредством ссылки в полном объеме). Некоторые олигонуклеотиды (233676, 233690, 233710, 233717, 233721, 233722, 337459, 337460, 337474, 337477, 337478, 337479, 337481, 337484,337487,337488, 337490, 337491, 337492, 337497, 337498, 337503, 337505, 337506, 337508, 337513, 337514, 337516, 337520, 337521, 337525, 337526 и 337528), описанные в указанном документе, включая десять самых эффективных антисмысловых соединений in vitro, использовали в качестве эталонов для некоторых in vitro отборов антисмысловых соединений, описанных ниже, а также в документе US с серийным номером 61/920652. Среди наиболее эффективных соединений, описанных в WO 2011/085271, было обнаружено, что ISIS 233722 имеет весьма разнообразную способность ингибирования ANGPTL3. Соответственно, несмотря на то, что изначально в некоторые испытания in vitro было включено соединение 233722, его не выбирали в качестве эталона для дальнейших испытаний. Среди ранее идентифицированных эффективных in vitro эталонных соединений выбрали пять соединений (233710, 233717, 337477, 337478, 337479 и 337487) для проведения испытаний in vivo, как описано ниже, на трансгенных мышах huANGPTL3, для оценки наиболее эффективного соединения для снижения транскрипта мРНК человека и экспрессии белка (пример 126). Антисмысловой олигонуклеотид с наивысшей первоначальной in vivo эффективностью для снижения уровней ANGPTL3 (233710) использовали в качестве эталона для in vivo оценки новых антисмысловых соединений, описанных ниже.

В некоторых вариантах реализации антисмысловые соединения, описанные в настоящем документе, имеют преимущество, заключающееся в улучшении одного или более свойств по сравнению с антисмысловыми соединениями, описанными в WO 2011/085271 и в документе US с серийным номером 61/920652. Такие улучшенные свойства продемонстрированы в примерах, представленных в настоящем документе, и ниже представлено не исчерпывающее обобщение примеров для простоты упоминания.

В первом отборе, описанном в настоящем документе, примерно 3000 новых разработанных антисмысловых соединений, представляющих собой 5-10-5 МОЕ гэпмер, нацеленных на человеческий ANGPTL3, испытывали в клетках Нер3В для оценки их влияния на мРНК человеческого ANGPTL3 in vitro (пример 116). Степень ингибирования мРНК новыми антисмысловыми соединениями оценивали с помощью некоторых разработанных ранее антисмысловых соединений (233717, 337484, 337487, 337492 и 337516), использованных в выборочных испытаниях в качестве эталонов. Среди примерно 3000 новых разработанных антисмысловых соединений из данного первого отбора выбрали примерно 85 антисмысловых соединений для in vitro испытаний дозозависимого ингибирования для определения их полумаксимальной ингибирующей концентрации (IC₅₀) (примеры 117-118). Из примерно 85 новых антисмысловых соединений, испытанных на их полумаксимальную ингибирующую концентрацию (IC₅₀), выбрали примерно 38 антисмысловых соединений, которые демонстрировали эффективное дозозависимое снижение ANGPTL3, для in vivo испытания эффективности и переносимости (ALT и AST) на мышах (примеры 126-127), используя антисмысловое соединение 233710 в качестве эталона.

Во втором отборе, описанном в настоящем документе, примерно 2000 новых разработанных антисмысловых соединений, направленных на человеческий ANGPTL3, с МОЕ гэпмерным мотивом или смешанным мотивом (дезокси, 5-10-5 МОЕ и сЕТ гэпмеры) также испытывали в клетках Нер3В для оценки их влияния на мРНК человеческого ANGPTL3 in vitro (примеры 119-121). Степень ингибирования новыми антисмысловыми соединениями оценивали с помощью некоторых разработанных ранее антисмысловых соединений (233717, 337487, 337513, 337514 и 337516), использованных в выборочных испытаниях в качестве эталонов. Среди примерно 2000 новых разработанных антисмысловых соединений из данного второго отбора выбрали примерно 147 антисмысловых соединений для in vitro испытаний дозозависимого ингибирования для определения их полумаксимальной ингибирующей концентрации (IC₅₀) (примеры 122-125). Из примерно 147 новых антисмысловых соединений, испытанных на их полумаксимальную ингибирующую концентрацию (IC₅₀), выбрали примерно 73 антисмысловых соединений, которые демонстрировали эффективное дозозависимое снижение ANGPTL3, для in vivo испытания эффективности и переносимости (например, ALT и AST) на мышах (примеры 126-127), используя антисмысловое соединение 233710 в качестве эталона.

Из примерно 111 антисмысловых соединений из первого и второго отборов, которые испытывали на эффективность и переносимость у мышей, выбрали 24 соединения для более тщательного исследования переносимости у мышей, оценивая метаболические маркеры в печени, такие как аланинтрансаминаза (ALT), аспартаттрансаминаза (AST), альбумин и билирубин, а также метаболические маркеры в почках, АМК и креатинин, а также массу органов (пример 127).

Параллельно с in vivo испытаниями на мышах выбрали семнадцать антисмысловых соединений для испытания вязкости (пример 128). В целом, антисмысловые соединения, не обладающие оптимальной вязкостью, не использовали для дальнейших исследований.

На основании результатов испытания переносимости у мышей выбрали двадцать антисмысловых соединений для in vivo испытания переносимости у крыс (пример 129). У крыс измеряли метаболические маркеры печени, такие как ALT, AST, альбумин и билирубин, массу тела и органов, а также метаболические маркеры почек, такие как АМК, креатинин и отношение общего белка/креатинина, для определения переносимости соединения in vivo.

Двадцать антисмысловых соединений, испытанных на крысах, также испытывали на перекресную реактивность с генной последовательностью ANGPTL3 резус-макак (пример 130). Хотя антисмысловые соединения в указанном испытании проверяли на яванских макаках, последовательность ANGPTL3 яванских макак не была доступна для сравнения с последовательностями соединений полной длины, поэтому последовательности антисмысловых соединений сравнивали с последовательности весьма родственных резус-макак. Было обнаружено, что последовательности восьми антисмысловых соединений имеют 0-2 несоответствия с генной последовательностью ANGPTL3 резуса, и их дополнительно исследовали на яванских макаках (пример 130). Восемь антисмысловых соединений (ISIS 563580, ISIS 560400, ISIS 567320, ISIS 567321, ISIS 544199, ISIS 567233, ISIS 561011 и ISIS 559277) испытывали на ингибирование экспрессии мРНК и белка ANGPTL3, а также переносимости у обезьян. В испытаниях переносимости измеряли массу тела, метаболические маркеры в печени (ALT, AST и билирубин), метаболические маркеры в почках (АМК и креатинин), гематологические параметры (количество кровяных клеток, гемоглобин и гематокрит) и провоспалительные маркеры (CRP и С3). Кроме того, измеряли концентрацию полноразмерного олигонуклеотида в печени и почках и рассчитывали соотношение полноразмерного олигонуклеотида в почках/печени.

Последовательность эффективного и переносимого антисмыслового соединения, ISIS 563580, проверенную на яванских макаках, дополнительно модифицировали конъюгатом GalNAc и/или изменениями химического состава скелета, как показано в примерах 113-115 и 131, и оценивали на предмет увеличения эффективности.

Соответственно, в настоящем документе предложены антисмысловые соединения с одной или более улучшенными характеристиками, например, улучшенными относительно антисмысловых соединений, описанных в WO 2011/085271 и в документе US с серийным номером 61/920,52. В некоторых вариантах реализации в настоящем документе предложены антисмысловые соединения, содержащие модифицированный олигонуклеотид, описанный в настоящем документе, направленный на или специфически гибридизуемый с областью нуклеотидов любой из SEQ ID NО: 1-2.

В некоторых вариантах реализации некоторые антисмысловые соединения, описанные в настоящем документе, являются эффективными благодаря их эффективности для ингибирования экспрессии ANGPTL. В некоторых вариантах реализации соединения или композиции ингибируют ANGPTL3 по меньшей мере на 40%, по меньшей мере на 45%, по меньшей мере на 50%, по меньшей мере на 55%, по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 65%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 75%, по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 85%, по меньшей мере на 90% или по меньшей мере на 95%.

В некоторых вариантах реализации некоторые антисмысловые соединения, описанные в настоящем документе, являются эффективными, поскольку имеют in vitro IC₅₀ менее 20 мкМ, менее 10 мкМ, менее 8 мкМ, менее 6 мкМ, менее 2 мкМ, менее 1 мкМ, менее 0,9 мкМ, менее 0,8 мкМ, менее 0,7 мкМ, менее 0,6 мкМ или менее 0,5 мкМ при испытании в клетках человека, например, в клеточной линии Hep3B (как описано в примерах 117-118 и 122-125). В некоторых вариантах реализации предпочтительные антисмысловые соединения, имеющие IC₅₀ <1,0 мкМ, включают SEQ ID NO: 15, 20, 24, 34, 35, 36, 37, 42, 43, 44, 47, 50, 51, 57, 58, 60, 77, 79, 82, 87, 88, 90, 91, 93, 94, 100, 101, 104, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 169, 170, 177, 188, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 224, 225, 226, 227, 228, 229, 230, 231 и 232. В некоторых вариантах реализации предпочтительные антисмысловые соединения, имеющие IC₅₀<0,9 мкМ, включают SEQ ID NO: 15, 20, 35, 36, 42, 43, 44, 50, 57, 60, 77, 79, 87, 88, 90, 91, 93, 94, 101, 104, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 122, 123, 124, 125, 126,127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136,137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 177, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 224, 225, 226, 227, 228, 229, 230, 231 и 232. В некоторых вариантах реализации предпочтительные антисмысловые соединения, имеющие IC₅₀ <0,8 мкМ, включают SEQ ID NO: 15, 20, 35, 36, 42, 43, 44, 50, 57, 60, 77, 79, 87, 88, 90, 91, 93, 94, 101, 104, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 177, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 217, 218, 219, 220,221, 222, 223, 224, 225, 228, 229, 230, 231 и 232. В некоторых вариантах реализации предпочтительные антисмысловые соединения, имеющие IC₅₀ <0,7 мкМ, включают SEQ ID NO: 15, 20, 36, 42, 43, 57, 60, 114, 117, 127, 131, 177, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 224, 225, 228, 229, 230, 231 и 232. В некоторых вариантах реализации предпочтительные антисмысловые соединения, имеющие IC₅₀ <0,6 мкМ, включают SEQ ID NO: 15, 20, 36, 42, 43, 57, 60, 114, 117, 127, 131, 177, 209, 210, 211, 212, 213, 215, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 224, 225, 228, 229, 230, 231 и 232. В некоторых вариантах реализации предпочтительные антисмысловые соединения, имеющие IC₅₀ <0,5 мкМ, включают SEQ ID NO: 43, 114, 117, 127, 131, 177, 209, 210, 211, 212, 215, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 229, 230 и 232.

В некоторых вариантах реализации некоторые антисмысловые соединения, описанные в настоящем документе, являются эффективными, поскольку имеют вязкость менее 40 сП, менее 35 сП, менее 30 сП, менее 25 сП, менее 20 сП, менее 15 сП или менее 10 сП при измерении с помощью анализа (описанного в примере 128). Олигонуклеотиды, имеющие вязкость более 40 сП, имеют неоптимальную вязкость. В некоторых вариантах реализации предпочтительные антисмысловые соединения, имеющие вязкость <20 сП, включают SEQ ID NO: 16, 18, 20, 34, 35, 36, 38, 49, 77, 90, 93 и 94. В некоторых вариантах реализации предпочтительные антисмысловые соединения, имеющие вязкость <15 сП, включают SEQ ID NO: 16, 18, 20, 34, 35, 38, 49, 90, 93 и 94. В некоторых вариантах реализации предпочтительные антисмысловые соединения, имеющие вязкость <10 сП, включают SEQ ID NO: 18, 34, 35, 49, 90, 93 и 94.

В некоторых вариантах реализации некоторые антисмысловые соединения, описанные в настоящем документе, являются хорошо переносимыми, что демонстрируется результатами измерений переносимости in vivo, описанных в примерах. В некоторых вариантах реализации некоторые антисмысловые соединения, описанные в настоящем документе, являются хорошо переносимыми, что демонстрируется увеличением значения ALT и/или AST не более чем в 3 раза, 2 раза или 1,5 раза по сравнению с животными, которым вводили солевой раствор.

В некоторых вариантах реализации некоторые антисмысловые соединения, описанные в настоящем документе, являются эффективными, поскольку имеют одно или более из ингибирующей эффективности более 50%, значения in vitro IC₅₀ по меньшей мере 1 мкМ, вязкости менее 20 сП и не более чем 3-кратного увеличения ALT и/или AST.

В некоторых вариантах реализации ISIS 563580 (SEQ ID NO: 77) является предпочтительным. Было обнаружено, что указанное соединение является эффективным ингибитором у ANGPTL3 трансгенных мышей и наиболее хорошо переносимым антисмысловым соединением. Оно имеет приемлемую вязкость примерно 16,83 сП и значение IC₅₀ <0,8 мкМ in vitro. У мышей оно вызывает не более чем 3-кратное увеличение уровней ALT и/или AST по сравнению с животными, обработанными солевым раствором. Кроме того, у обезьян указанное соединение было одним из наиболее хорошо переносимых и эффективных соединений для ингибирования ANGPTL3, и имело наилучшее соотношение концентрации полноразмерного олигонуклеотида.

В некоторых вариантах реализации ISIS 544199 (SEQ ID NO: 20) является предпочтительным. Было обнаружено, что указанное соединение является эффективным и переносимым антисмысловым соединением. Оно имеет приемлемую вязкость 1,7 сП и значение IC₅₀ <0,5 мкМ in vitro. У мышей оно вызывает не более чем 3-кратное увеличение уровней ALT и/или AST по сравнению с животными, обработанными солевым раствором. Кроме того, у обезьян указанное соединение было одним из наиболее эффективных соединений для ингибирования ANGPTL3, и имело хорошее соотношение концентрации полноразмерного олигонуклеотида.

В некоторых вариантах реализации ISIS 559277 (SEQ ID NO: 110) является предпочтительным. Было обнаружено, что указанное соединение является эффективным и переносимым антисмысловым соединением. Оно имеет значение IC₅₀ <0,8 мкМ in vitro. У мышей оно вызывает не более чем 3-кратное увеличение уровней ALT и/или AST по сравнению с животными, обработанными солевым раствором. Кроме того, у обезьян указанное соединение было одним из наиболее эффективных соединений для ингибирования ANGPTL3, и имело хорошее соотношение концентрации полноразмерного олигонуклеотида.

В некоторых вариантах реализации GalNAc-сопряженное антисмысловое соединение, ISIS 658501 (SEQ ID NO: 4912), является предпочтительным. Было обнаружено, что указанное антисмысловое соединение является более эффективным, чем его исходное соединение ISIS 563580 (SEQ ID NO: 77), что продемонстрировано уровнями ингибирования.

В некоторых вариантах реализации GalNAc-сопряженное антисмысловое соединение, ISIS 703801 (SEQ ID NO: 77) является предпочтительным. Было обнаружено, что указанное антисмысловое соединение является в несколько раз более эффективным, чем его исходное соединение ISIS 563580 (SEQ ID NO: 77). ISIS 703801 имеет значение ID50 1, тогда как ISIS 563580 имеет значение ID50 6.

В некоторых вариантах реализации GalNAc-сопряженное антисмысловое соединение, ISIS 703802 (SEQ ID NO: 77) является предпочтительным. Было обнаружено, что указанное антисмысловое соединение является в несколько раз более эффективным, чем его исходное соединение ISIS 563580 (SEQ ID NO: 77). ISIS 703802 имеет значение ID50 0,3, тогда как ISIS 563580 имеет значение ID50 6.

ПРИМЕРЫ

Следующие примеры иллюстрируют некоторые варианты реализации настоящего описания и не являются ограничивающими. Более того, если представлены конкретные варианты реализации, авторы изобретения подразумевают общее применение указанных конкретных вариантов реализации. Например, описание олигонуклеотида, содержащего конкретный мотив, дает обоснованное основание для дополнительных олигонуклеотидов, содержащих такой же или похожий мотив. И, например, если конкретная высокоаффинная модификация возникает в определенном положении, то в этом же положении считаются подходящими другие высокоаффинные модификации, если не указано иное.

Пример 1: Общий способ получения фосфорамидитов, Соединений 1,1а и 2

Соединения 1, 1а и 2 были получены по способам, общеизвестным в данной области техники, как описано в настоящем документе (см. Seth et al., Bioorg. Med. Chem., 2011, 21 (4), 1122-1125, J. Org. Chem., 2010, 75 (5), 1569-1581, Nucleic Acids Symposium Series, 2008, 52 (1), 553-554); и см. также опубликованные Международные заявки РСТ (WO 2011/115818, WO 2010/077578, WO 2010/036698, WO 2009/143369, WO 2009/006478 и WO 2007/090071) и патент США 7569686).

Пример 2. Получение Соединения 225

Соединение 3 (2-ацетамидо-1,3,4,6-тетра-O-ацетил-2-дезокси-β-D-галактопираноза или галактозамина пентаацетат) имеется в продаже. Соединение 5 получили по опубликованным методикам (Weber et al., J. Med. Chem., 1991, 34, 2692).

Пример 3. Получение Соединения 11

Соединения 8 и 9 имеются в продаже.

Пример 226. Получение Соединения 18

Соединение 11 получили по способам, описанным в Примере 3. Соединение 14 имеется в продаже. Соединение 17 получили по такому же способу, как описан в публикации Rensen et al., J. Med. Chem., 2004, 47, 5798-5808.

Пример 227. Получение Соединения 23

Соединения 19 и 21 имеются в продаже.

Пример 6. Получение Соединения 24

Соединения 18 и 23 получили так, как описано в способах в Примерах 4 и 5.

Пример 7. Получение Соединения 228

Соединение 24 получили по способам, представленным в Примере 6.

Пример 8. Получение Соединения 229

Соединение 24 получили по способам, представленным в Примере 6.

Пример 9. Общее получение сопряженных ASO, содержащих GalNAc₃-1 на 3'-конце, Соединения 29

Где защищенный GalNAc₃-1 имеет структуру:

Кластерная часть GalNAc₃ группы конъюгата GalNAc₃-1 (GalNAc₃-1_a) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. Где GalNAc₃-1_a имеет формулу:

Защищенный GalNAc₃-1, связанный с твердой подложкой, Соединение 25, получили по способам, представленным в Примере 7. Олигомерное соединение 29, содержащее GalNAc₃-1 на 3'-конце, получили по стандартным способам в автоматическом синтезаторе ДНК/РНК (см. Dupouy et al., Angew. Chem. Int. ред., 2006, 45, 3623-3627). Фосфорамидитные строительные блоки, Соединения 1 и 1a, получили так, как описано в способах в Примере 1. Изображенные фосфорамидиты являются иллюстративными и не предназначены для ограничения, поскольку могут быть использованы другие фосфорамидитные строительные блоки для получения олигомерных соединений, имеющих заданную последовательность и состав. Порядок и количество фосфорамидитов, добавляемых к твердой подложке, может быть подобрано для получения разорванных олигомерных соединений, описанных в настоящем документе. Такие разорванные олигомерные соединения могут иметь заданный состав и последовательность оснований, продиктованную любой данной мишенью.

Пример 10: Общее получение сопряженных ASO, содержащих GalNAc₃-1 на 5'-конце, Соединения 34

Unylinker™ 30 имеется в продаже. Олигомерное соединение 34, содержащее кластер GalNAc₃-1 на 5'-конце, получили по стандартным способам в автоматическом синтезаторе ДНК/РНК (см. Dupouy et al., Angew. Chem. Int. ред., 2006, 45, 3623-3627). Фосфорамидитные строительные блоки, Соединения 1 и 1a, получили так, как описано в способах в Примере 1. Изображенные фосфорамидиты являются иллюстративными и не предназначены для ограничения, поскольку могут быть использованы другие фосфорамидитные строительные блоки для получения олигомерных соединений, имеющих заданную последовательность и состав. Порядок и количество фосфорамидитов, добавляемых к твердой подложке, может быть подобрано для получения разорванных олигомерных соединений, описанных в настоящем документе. Такие разорванные олигомерные соединения могут иметь заданный состав и последовательность оснований, продиктованную любой данной мишенью.

Пример 11: Получение Соединения 39

Соединения 4, 13 и 23 получили так, как описано в способах в Примерах 2, 4 и 5. Соединение 35 получили по такому же способу, как описан в публикации Rouchaud et al., Eur. J. Org. Chem., 2011, 12, 2346-2353.

Пример 237: Получение Соединения 40

Соединение 38 получили по способам, представленным в Примере 11.

Пример 13: Получение Соединения 44

Соединения 23 и 36 получили так, как описано в способах в Примерах 5 и 11. Соединение 41 получили по такому же способу, как описан в публикации WO 2009082607.

Пример 14: Получение Соединения 239

Соединение 43 получили по способам, представленным в Примере 13.

Пример 15: Получение Соединения 47

Соединение 46 имеется в продаже.

Пример 16: Получение Соединения 240

Соединения 48 и 49 имеются в продаже. Соединения 17 и 47 получили так, как описано в способах в Примерах 4 и 15.

Пример 17: Получение Соединения 241

Соединение 53 получили по способам, представленным в Примере 16.

Пример 18: Получение Соединения 242

Соединение 53 получили по способам, представленным в Примере 16.

Пример 19: Общий способ получения сопряженных ASO, содержащих GalNAc₃-1 в 3'-положении, при помощи твердофазных методик (получение ISIS 647535,647536 и 651900)

Если не указано иное, все реагенты и растворы, использованные для синтеза олигомерных соединений, приобретены у коммерческих поставщиков. Стандартные фосфорамидитные строительные блоки и твердую подложку использовали для внедрения нуклеозидных остатков, которые включают, например, остатки Т, A, G и ^mС. 0,1 М раствор фосфорамидита в безводном ацетонитриле использовали для β-D-2'-дезоксирибонуклеозида и 2'-МОЕ.

Синтез антисмысловых олигонуклеотидов (ASO) выполнили на синтезаторе ABI 394 (в масштабе 1-2 мкмоль) или на синтезаторе Oligopilot производства GE Healthcare Bioscience (в масштабе 40-200 мкмоль) по способу фосфорамидитного связывания на твердой подложке VIMAD, наполненной GalNAc₃-1 (110 мкмоль/г, Guzaev et al., 2003), упакованной в колонку. Для стадии связывания фосфорамидиты вводили в 4-кратном избытке по сравнению с загрузкой на твердой подложке, а конденсацию фосфорамидита выполняли в течение 10 минут. Все остальные стадии выполняли по стандартным протоколам, предоставленным производителем. Для удаления диметокситритильной (DMT) группы с 5'-гидроксильной группы нуклеотида использовали 6% раствор дихлоруксусной кислоты в толуоле. На стадии связывания в качестве активатора использовали 4,5-дицианоимидазол (0,7 М) в безводном CH₃CN. Тиофосфатные связи внедряли сульфированием при помощи 0,1 М раствора гидрида ксантана в 1:1 смеси пиридина/CH₃CN в течение 3 минут времени контакта. В качестве окислительного агента для получения фосфодиэфирных межнуклеозидных связей использовали 20% раствор трет-бутилгидропероксида в CH₃CN, содержащий 6% воды, в течение 12 минут времени контакта.

После сборки требуемой последовательности цианоэтил-фосфатные защитные группы снимали при помощи 1:1 (об./об.) смеси триэтиламина и ацетонитрила в течение 45 минут времени контакта. Связанные с твердой подложкой ASO суспендировали в водном растворе аммиака (28-30 масс. %) и нагревали при 55°C в течение 6 часов.

Затем отфильтровывали не связанные ASO и выпаривали аммиак кипячением. Остаток очищали жидкостной хроматографией высокого давления на сильной анионообменной колонке (GE Healthcare Bioscience, Source 30Q, 30 мкм, 2,54×8 см, А=100 мМ ацетата аммония в 30% водном CH₃CN, В=1,5 М NaBr в А, 0-40% В за 60 мин., скорость потока 14 мл. мин-1, λ=260 нм). Остаток обессоливали при помощи ВЭЖХ на обращенно-фазовой колонке с получением заданных ASO с выделенным выходом 15-30% относительно первоначальной загрузки на твердую подложку. ASO характеризовали при помощи ион-парной ВЭЖХ, совмещенной с МС-анализом на системе Agilent 1100 MSD.

Антисмысловые олигонуклеотиды, не содержащие конъюгат, синтезировали по стандартным способам синтеза олигонуклеотидов, общеизвестным в данной области техники.

Применяя эти способы, получили три отдельных антисмысловых соединения, направленных на АроС III. Как показано ниже в Таблице 17, каждое из трех антисмысловых соединений, направленных на АроС III, имеет одну и ту же последовательность нуклеооснований. ISIS 304801 представляет собой 5-10-5 МОЕ гэпмер, содержащий только тиофосфатные связи; ISIS 647535 является таким же, как ISIS 304801, за исключением того, что он содержит GalNAc₃-1, сопряженный у его 3'-конца; и ISIS 647536 является таким же, как ISIS 647535, за исключением того, что некоторые межнуклеозидные связи этого соединения представляют собой фосфодиэфирные связи. Как дополнительно показано в Таблице 17, были синтезированы два отдельных антисмысловых соединения, направленных на SRB-1. ISIS 440762 представляет собой 2-10-2 cEt гэпмер, содержащий только тиофосфатные межнуклеозидные связи; ISIS 651900 является таким же, как ISIS 440762, за исключением того, что он содержит GalNAc₃-1 у его 3'-конца.

Нижние индексы: «е» означает 2'-МОЕ модифицированный нуклеозид; «d» означает β-D-2'-дезоксирибонуклеозид; «k» означает 6'-(S)-CH₃ бициклический нуклеозид (например, cEt); «s» означает тиофосфатные межнуклеозидные связи (PS); «о» означает фосфодиэфирные межнуклеозидные связи (РО); и «o'» означает -O-Р(=O)(ОН)-. Верхний индекс «m» означает 5-метилцитозины. «GalNAc₃-1» означает группу конъюгата, имеющую структуру, показанную ранее в Примере 9. Следует отметить, что GalNAc₃-1 содержит расщепляемый аденозин, которые связывает ASO с остальной частью конъюгата, обозначенной «GalNAc₃-1_a." Номенклатура, используемая в представленной выше таблице, показывает полную последовательность азотистых оснований, включая аденозин, который является частью конъюгата. Следовательно, в представленной выше таблице последовательности также могут быть перечислены с окончанием «GalNAc₃-1", без «A_do". Такое условное применение нижнего индекса «а» для обозначения части группы конъюгата, не содержащей расщепляемого нуклеозида или расщепляемого фрагмента, используется во всех представленных Примерах. Эта часть группы конъюгата, не содержащая расщепляемого фрагмента, упоминается в настоящем документе как «кластер» или «кластер конъюгата» или «кластер GalNAc₃». В некоторых случаях группа конъюгата для удобства описана путем отдельного представления ее кластера и ее расщепляемого фрагмента.

Пример 20: Дозозависимое антисмысловое ингибирование человеческого АроС III у huApoC III трансгенных мышей

ISIS 304801 и ISIS 647535, каждый из которых направлен на человеческий АроС III и описан выше, отдельно испытывали и оценивали в дозозависимом исследовании на их способность ингибировать человеческий АроС III у трансгенных мышей с человеческим АроС III.

Лечение

Трансгенных мышей с человеческим АроСIII выдерживали при 12-часовом цикле освещения/темноты и обеспечивали ad libitum доступ к пище Teklad lab. До начала эксперимента животных акклиматизировали по меньшей мере в течение 7 дней в исследовательской лаборатории. Получили ASO в PBS и стерилизовали фильтрованием через фильтр 0,2 микрона. ASO растворили в 0,9% PBS для инъекций.

Трансгенным мышам с человеческим АроС III один раз в неделю в течение двух недель внутрибрюшинно вводили инъекции ISIS 304801 или 647535 при 0,08, 0,25, 0,75, 2,25 или 6,75 мкмоль/кг или PBS в качестве контроля. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Через сорок восемь часов после введения последней дозы каждую мышь обескровили и усыпили, и собрали ткани.

Анализ мРНК АроС III

Уровни мРНК АроС-III в печени мышей определили при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN® (Molecular Probes, Inc. Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Уровни мРНК АроС III определяли относительно общей РНК (при помощи Ribogreen), затем нормализовали к контрольному образцу, обработанному PBS. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней мРНК АроС III для каждой экспериментальной группы, нормализованных к контрольному образцу, обработанному PBS, и обозначены как «% PBS». Полумаксимальная эффективная доза (ED₅₀) каждого ASO представлена также ниже в Таблице 18.

Показано, что оба антисмысловых соединения снижают РНК АроС III, по сравнению с контрольным образцом, обработанным PBS. Кроме того, антисмысловое соединение, сопряженное с GalNAc₃-1 (ISIS 647535), было значительно более эффективным, чем антисмысловое соединение, не содержащее конъюгат GalNAc₃-1 (ISIS 304801).

Анализ белка АроС III (турбидиметрический анализ)

Анализ белка АроС III в плазме выполнили по способам, описанным в работе Graham et al., Circulation Research, до печати опубликованной онлайн 29 марта 2013 года.

Приблизительно 100 мкл плазмы, выделенной из мышей, анализировали без разбавления, используя клинический анализатор Olympus и имеющийся в продаже турбидиметрический аналитический набор АроС III (Kamiya, кат. №KAI-006, Kamiya Biomedical, Сиэтл, штат Вашингтон). Протокол анализа выполняли по описанию поставщика.

Как показано ниже в Таблице 19, оба антисмысловых соединения снижают белок АроС III, по сравнению с PBS контрольным образцом. Кроме того, антисмысловое соединение, сопряженное с GalNAc₃-1 (ISIS 647535), было значительно более эффективным, чем антисмысловое соединение, не содержащее конъюгат GalNAc₃-1 (ISIS 304801).

Триглицериды и холестерин плазмы выделили по способу Bligh и Dyer (Bligh, E.G. и Dyer, W.J. Can. J. Biochem. Physiol. 37: 911-917, 1959)(Bligh, E and Dyer, W, Can J Biochem Physiol, 37, 911-917, 1959) (Bligh, E and Dyer, W, Can J Biochem Physiol, 37, 911-917, 1959) и измерили при помощи клинического анализатора Beckmann Coulter и имеющихся в продаже реагентов.

Уровни триглицеридов измерили относительно мышей, инъецированных PBS, и выразили как «% PBS». Результаты представлены в Таблице 20. Показано, что оба антисмысловых соединения снижают уровни триглицеридов. Кроме того, антисмысловое соединение, сопряженное с GalNAc₃-1 (ISIS 647535), было значительно более эффективным, чем антисмысловое соединение, не содержащее конъюгат GalNAc₃-1 (ISIS 304801).

Образцы плазмы анализировали при помощи ВЭЖХ для определения количества общего холестерина и различных фракций холестерина (HDL и LDL). Результаты представлены в таблицах 21 и 22. Показано, что оба антисмысловых соединения снижают общие уровни холестерина; оба снижают LDL; и оба повышают HDL. Кроме того, антисмысловое соединение, сопряженное с GalNAc₃-1 (ISIS 647535), было значительно более эффективным, чем антисмысловое соединение, не содержащее конъюгат GalNAc₃-1 (ISIS 304801). Увеличение уровней HDL и снижение уровней LDL представляет собой преимущественный сердечно-сосудистый эффект антисмыслового ингибирования АроС III.

Фармакокинетический анализ (ФК)

Исследовали также ФК ASO. Образцы печени и почек измельчали и экстрагировали по стандартным протоколам. Образцы анализировали на MSD1, используя ИП-ВЭЖХ-МС. Определили содержание (мкг/г) в ткани ISIS 304801 и 647535 полной длины, и результаты представлены в Таблице 23. Показано, что концентрации в печени антисмысловых соединений полной длины были одинаковыми для двух антисмысловых соединений. Следовательно, даже несмотря на то, что CalNAc₃-1-сопряженное антисмысловое соединение является более активным в печени (как показано по данным РНК и белка, представленным выше), его содержание в печени не намного выше. Действительно, рассчитанное значение ЕС₅₀ (представленное в Таблице 23) подтверждает, что наблюдаемое увеличение эффективности сопряженного соединения не может быть приписано исключительно повышенному накоплению. Такой результат позволяет предположить, что конъюгат улучшает эффективность по другому механизму, чем простое накопление в печени, возможно за счет увеличения продуктивного захвата антисмыслового соединения в клетки.

Эти результаты показывают также, что концентрация CalNAc₃-1-сопряженного антисмыслового соединения почках ниже, чем концентрация антисмыслового соединения, не содержащего конъюгата GalNAc. Это имеет несколько преимущественных терапевтических применений. Для терапевтических показаний, в которых не требуется проявление активности в почках, воздействие на почки подвергает их риску токсичности без соответствующей пользы. Более того, высокая концентрация в почках обычно приводит к выводу соединения с мочой, обеспечивая более быстрое выведение. Соответственно, для внепочечных мишеней накопление в почках является нежелательным. Эти данные позволяют предположить, что сопряжение с GalNAc₃-1 снижает накопление в почках.

Идентифицировали также метаболиты ISIS 647535 и подтвердили их массы при помощи масс-спектрометрического анализа высокого разрешения. Сайты расщепления и структуры наблюдаемых метаболитов представлены ниже. Относительный % от общей длины ASO рассчитали по стандартным технологиям, а результаты представлены в Таблице 23а. Основной метаболит ISIS 647535 представляет собой ASO полной длины без всего конъюгата (то есть ISIS 304801), который образуется в результате расщепления по сайту расщепления A, представленному ниже. Кроме того, наблюдали также дополнительные метаболиты, образующиеся из других сайтов расщепления. Эти результаты позволяют предположить, что может быть пригодным также внедрение других расщепляемых связей, таких как сложные эфиры, пептиды, дисульфиды, фосфорамидаты или ацил-гидразоны, между caxapoм GalNAc₃-1 и ASO, которые могут расщепляться под действием ферментов внутри клетки или которые могут расщепляться в восстановительной среде цитозоля, или которые лабильны в кислотном pH внутри эндосом и лизосом.

Пример 21: Антисмысловое ингибирование человеческого АроС III у трансгенных мышей с АроС III в исследовании одного введения

ISIS 304801, 647535 и 647536, каждый из которых направлен на человеческий АроС III и описан в Таблице 17, дополнительно оценивали в исследовании однократного введения на их способность ингибировать человеческий АроС III у трансгенных мышей с человеческим АроС III.

Лечение

Трансгенных мышей с человеческим ApoCIII выдерживали при 12-часовом цикле освещения/темноты и обеспечивали ad libitum доступ к пище Teklad lab. До начала эксперимента животных акклиматизировали по меньшей мере в течение 7 дней в исследовательской лаборатории. Получили ASO в PBS и стерилизовали фильтрованием через фильтр 0,2 микрона. ASO растворили в 0,9% PBS для инъекций.

Трансгенным мышам с человеческим АроС III внутрибрюшинно ввели однократную инъекцию дозы, представленной ниже, соединения ISIS 304801, 647535 или 647536 (описанных выше), или PBS в качестве контрольного образца. Экспериментальная группа состояла из 3 животных, а контрольная группа состояла из 4 животных. Перед лечением, а также после последней дозы у каждой мыши брали кровь и анализировали образцы плазмы. Мышей усыпили через 72 часа после последнего введения.

Образцы собрали и анализировали для определения уровней мРНК АроС III и белка в печени; триглицеридов в плазме; и холестерина, включая фракции HDL и LDL, которые анализировали так, как описано выше (Пример 20). Данные этих анализов представлены ниже в Таблицах 24-28. Уровни трансаминазы в печени, аланин-аминотрансферазы (ALT) и аспартат-аминотрансферазы (AST) в сыворотке измеряли относительно мышей, инъецированных солевым раствором, используя стандартные протоколы. Уровни ALT и AST показали, что антисмысловые соединения хорошо переносятся при всех введенных дозах.

Эти результаты демонстрируют усиление эффективности антисмысловых соединений, содержащих конъюгат GalNAc₃-1 на 3'-конце (ISIS 647535 и 647536), по сравнению с антисмысловым соединением, не содержащим конъюгат GalNAc₃-1 (ISIS 304801). Кроме того, ISIS 647536, который содержит конъюгат GalNAc₃-1 и несколько фосфодиэфирных связей, был таким же эффективным, как ISIS 647535, который содержит тот же конъюгат, и все межнуклеозидные связи в этом ASO являются тиофосфатными.

Эти результаты подтверждают, что конъюгат GalNAc₃-1 улучшает эффективность антисмыслового соединения. Эти результаты показывают также равную эффективность GalNAc₃-1-сопряженных антисмысловых соединений, в которых антисмысловые олигонуклеотиды имеют смешанные связи (ISIS 647536, который имеет шесть фосфодиэфирных связей), и полностью тиофосфатной версии того же антисмыслового соединения (ISIS 647535).

Тиофосфатные связи обеспечивают несколько свойств антисмысловых соединений. Например, они устойчивы к нуклеазному расщеплению и связываются с белками, что приводит к накоплению соединения в печени, а не в почках/моче. Эти свойства являются желательными, особенно при лечении показаний в печени. Однако тиофосфатные связи связаны также с воспалительной реакцией. Соответственно, уменьшение количества тиофосфатных связей в соединении предположительно снижает риск воспаления, но снижает также концентрацию соединения в печени, повышает концентрацию в почках и моче, снижает стабильность в присутствии нуклеаз и уменьшает общую эффективность. Представленные результаты демонстрируют, что CalNAc₃-1-сопряженное антисмысловое соединение, в котором некоторые тиофосфатные связи заменены фосфодиэфирными связи, настолько же эффективно против мишени в печени, как и аналог, содержащий только тиофосфатные связи. Такие соединения предположительно являются менее провоспалительными (см. Пример 24, в котором описан эксперимент, демонстрирующий, что уменьшение тиофосфатов (PS) приводит к снижению воспалительного действия).

Пример 22: Влияние модифицированного CalNAc₃-1-сопряженного ASO, направленного на SRB-1, in vivo

ISIS 440762 и 651900, каждый из которых направлен на SRB-1 и описан в Таблице 17, оценили в дозозависимом исследовании на их способность ингибировать SRB-1 у Balb/c мышей.

Лечение

Шестинедельным самцам мышей Balb/c (Jackson Laboratory, Бар-Харбор, штат Мэн) ввели однократную подкожную инъекцию дозы, представленной ниже, соединения ISIS 440762, 651900 или PBS в качестве контрольного образца. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Мышей усыпили через 48 часов после последнего введения для определения уровней мРНК SRB-1 в печени при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN® (Molecular Probes, Inc. Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Уровни мРНК SRB-1 определяли относительно общей РНК (при помощи Ribogreen), затем нормализовали к контрольному образцу, обработанному PBS. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней мРНК SRB-1 для каждой экспериментальной группы, нормализованных к контрольному образцу, обработанному PBS, и обозначены как «% PBS».

Как показано в Таблице 29, оба антисмысловых соединения снижают уровни мРНК SRB-1. Кроме того, антисмысловое соединение, содержащее конъюгат GalNAc₃-1 (ISIS 651900), было значительно более эффективным, чем антисмысловое соединение, не содержащее конъюгат GalNAc₃-1 (ISIS 440762). Эти результаты демонстрируют, что преимущество эффективности конъюгатов GalNAc₃-1 наблюдается при использовании антисмысловых олигонуклеотидов, комплементарных различным мишеням и имеющих различные химически модифицированные нуклеозиды, в этом случае модифицированные нуклеозиды содержат стерически затрудненные этил-сахарные фрагменты (бициклический сахарный фрагмент).

Пример 23: Протокол анализа человеческих мононуклеарных клеток периферической крови (hPBMC)

Анализ hPBMC выполнили при помощи пробирочного способа BD Vautainer СРТ.

Получили образец цельной крови, полученной от доноров-добровольцев, давших информированное согласие в Медицинской клинике США (Faraday & El Camino Real, Карлсбад), и собрали его в 4-15 пробирки BD Vacutainer СРТ по 8 мл (VWR, кат. №BD362753). Приблизительный исходный общий объем цельной крови в пробирке СРТ для каждого донора записали в формуляре анализа РВМС.

Непосредственно перед центрифугированием образец крови повторно перемешали, осторожно переворачивая пробирки 8-10 раз. Пробирки СРТ центрифугировали при комнатной температуре (18-25°C) в горизонтальном (с избыточной поворачиваемостью) роторе в течение 30 минут с фактором разделения (RCF) 1500-1800 с затормаживанием (2700 об./мин. Beckman Allegra 6R). Клетки сняли с лейкоцитарной поверхности раздела (между слоями фиколла и полимерного геля); перенесли в стерильную 50 мл коническую пробирку и сгруппировали по 5 СРТ пробирок/50 мл коническая пробирка/донор. Затем клетки дважды промыли PBS (без Са⁺⁺, Mg⁺⁺; GIBCO). Пробирки пополнили до 50 мл и перемешали, переворачивая несколько раз. Затем образец центрифугировали при 330×g в течение 15 минут при комнатной температуре (1215 об./мин. в Beckman Allegra 6R) и аспирировали максимальное количество надосадочной жидкости, не нарушая осадок. Клеточный осадок сняли, осторожно поворачивая пробирку, и повторно суспендировали клетки в RPMI + 10% FBS + пенициллин/стрептомицин (~1 мл/10 мл исходного объема цельной крови). Пипеткой взяли 60 мкл образца и поместили во флакон с пробой (Beckman Coulter), содержащий 600 мкл реагента VersaLyse (Beckman Coulter, кат. №А09777), и осторожно перемешивали на вортексе в течение 10-15 секунд. Образец оставили инкубироваться в течение 10 минут при комнатной температуре, и снова перемешали перед подсчетом. Суспензию клеток считывали на анализаторе жизнеспособности клеток Vicell XR (Beckman Coulter), используя клетки типа РВМС (сохранили фактор разбавления 1:11 с другими параметрами). Записали количество живых клеток/мл и жизнеспособность. Клеточную суспензию разбавили до 1×10⁷ живых РВМС/мл в RPMI + 10% FBS + пенициллин/стрептомицин.

Клетки поместили на планшет при 5×10⁵ в 50 мкл/лунку 96-луночного тканевого культурального планшета (Falcon Microtest). 50 мкл/лунку 2х концентрации олигомеров/контроля, разбавленных в RPMI + 10% FBS + пенициллин/стрептомицин, добавили в соответствии с экспериментальной матрицей (в целом 100 мкл/лунку). Планшеты установили на шейкер и оставили перемешиваться в течение примерно 1 мин. После инкубации в течение 24 часов при 37°C; 5% CO₂, планшеты центрифугировали при 400×g в течение 10 минут, затем удалили надосадочную жидкость для анализа цитокинов MSD (то есть человеческих IL-6, IL-10, IL-8 и MCP-1).

Пример 24: Оценка провоспалительных эффектов в анализе hPBMC для GalNAc₃-1-сопряженных ASO

Антисмысловые олигонуклеотиды (ASO), перечисленные в Таблице 30, оценили на провоспалительное действие в анализе hPBMC, используя протокол, описанный в Примере 23. ISIS 353512 представляет собой внутренний стандарт, который, как известно, обладает высоким ответом на высвобождение IL-6 в этом анализе. hPBMC выделили из свежих образцов, полученных от доноров-добровольцев, и обработали ASO в концентрациях 0, 0,0128, 0,064, 0,32, 1,6, 8, 40 и 200 мкМ. Через 24 часа обработки измерили уровни цитокинов.

Уровни IL-6 использовали в качестве первичного значения. ЕС₅₀ и E_max рассчитывали по стандарным способам. Результаты выразили как среднее отношение E_max/EC₅₀ для двух доноров и обозначили как «E_max/ЕС₅₀». Более низкое соотношение означает относительное снижение провоспалительного ответа, а более высокое соотношение означает относительное увеличение провоспалительного ответа.

В отношении исследуемых соединений, наименее провоспалительным соединением было ASO, соединенное при помощи PS/PO (ISIS 616468). GalNAc₃-1-сопряженное ASO, ISIS 647535, было немного менее провоспалительным, чем его несопряженный аналог, ISIS 304801. Эти результаты показывают, что внедрение нескольких РО связей снижает провоспалительную реакцию, а добавление конъюгата GalNAc₃-1 не делает соединение более провоспалительным, и может снижать провоспалительную реакцию. Соответственно, можно ожидать, что антисмысловое соединение, содержащее смешанные PS/PO связи и конъюгат GalNAc₃-1, может вызывать более слабые провоспалительные реакции, по сравнению с антисмысловым соединением, связанным только посредством PS, с конъюгатом GalNAc₃-1 или без него. Эти результаты показывают, что GalNAc₃-1-сопряженные антисмысловые соединения, в частности, соединения, имеющие меньшее содержание PS, являются менее провоспалительными.

В целом, эти результаты позволяют предположить, что GalNAc₃-1-сопряженное соединение, в частности, соединение со сниженным содержанием PS, может быть введено в более высокой дозе, чем аналогичное полностью PS антисмысловое соединение без конъюгата GalNAc₃-1. Поскольку не ожидается, что период полувыведения для этих соединений будет существенно различаться, то такое введение в более высокой дозе обусловит менее частое введение доз. В действительности, такое введение может быть еще более редким, поскольку GalNAc₃-1-сопряженные соединения являются более эффективными (см. Примеры 20-22), а повторное введение дозы необходимо только при снижении концентрации соединения ниже заданного уровня, при этом такой заданный уровень обусловлен эффективностью.

Нижние индексы: «е» означает 2'-МОЕ модифицированный нуклеозид; «d» означает β-D-2'-дезоксирибонуклеозид; «k» означает 6'-(S)-CH₃ бициклический нуклеозид (например, cEt); «s» означает тиофосфатные межнуклеозидные связи (PS); «о» означает фосфодиэфирные межнуклеозидные связи (РО); и «o'» означает -O-Р(=O)(OH)-. Верхний индекс «m» означает 5-метилцитозины. «A_do'-GalNAc₃-1_a» означает конъюгат, имеющий структуру GalNAc₃-1, показанную в Примере 9, присоединенную к 3'-концу антисмыслового олигонуклеотида, как показано.

Пример 25: Влияние модифицированного GalNAc₃-1-сопряженного ASO, направленного на человеческий АроС III, in vitro

ISIS 304801 и 647535, описанные выше, испытали in vitro. Первичные гепатоцитарные клетки трансгенных мышей при плотности 25000 клеток на лунку обработали концентрациями 0,03, 0,08, 0,24, 0,74, 2,22, 6,67 и 20 мкМ модифицированных олигонуклеотидов. После обработки в течение приблизительно 16 часов, из клеток выделили РНК и измерили уровни мРНК при помощи количественной ПЦР в реальном времени, а уровни мРНК hApoC III скорректировали в соответствии с общим содержанием РНК, измеренным при помощи RIBOGREEN.

IC₅₀ рассчитали по стандартным способам, а результаты представлены в Таблице 32. Показано, что наблюдали сравнимую эффективность в клетках, обработанных ISIS 647535, по сравнению с контрольным образцом, ISIS 304801.

В этом эксперименте in vitro не наблюдали такого большого преимущества эффективности сопряжения с GalNAc₃-1, как наблюдали in vivo. Последующие эксперименты свободного захвата в первичных гепатоцитах in vitro не показали повышенной эффективности олигонуклеотидов, содержащих различные конъюгаты GalNAc, по сравнению с олигонуклеотидами, не содержащими конъюгаты GalNAc (см. Примеры 60, 82 и 92).

Пример 26: Влияние линкеров PO/PS на активность ASO в отношении АроС III

Трансгенным мышам с человеческим АроС III внутрибрюшинной инъекцией вводили 25 мг/кг ISIS 304801 или ISIS 616468 (оба описаны выше) или PBS в качестве контрольного образца, один раз в неделю в течение двух недель. Экспериментальная группа состояла из 3 животных, а контрольная группа состояла из 4 животных. Перед лечением, а также после последней дозы у каждой мыши брали кровь и анализировали образцы плазмы. Мышей усыпили через 72 часа после последнего введения.

Образцы собрали и анализировали для определения уровней белка АроС III в печени, как описано выше (Пример 20). Данные этих анализов представлены ниже в Таблице 33.

Эти результаты демонстрируют снижение эффективности антисмысловых соединений с PO/PS (ISIS 616468) в крыльях, по сравнению с соединениями, содержащими только PS (ISIS 304801).

Пример 27: Соединение 56

Соединение 56 имеется в продаже у компании Glen Research или может быть получено по опубликованным методикам, описанным авторами Shchepinov et al., Nucleic Acids Research, 1997, 25 (22), 4447-4454.

Пример 28: Получение Соединения 60

Соединение 4 получили по способам, представленным в Примере 2. Соединение 57 имеется в продаже. Соединение 60 подтвердили структурным анализом.

Соединение 57 является иллюстративным, и его не следует считать ограничивающим, поскольку могут быть использованы другие монозащищенные замещенные или незамещенные алкилдиолы, включая, но не ограничиваясь ими, те, которые представлены в данном описании, для получения фосфорамидитов, имеющих заданный состав.

Пример 29: Получение Соединения 63

Соединения 61 и 62 получили по такому же способу, как описан в публикации Tober et al., Eur. J. Org. Chem., 2013, 3, 566-577; и Jiang et al, Tetrahedron, 2007, 63 (19), 3982-3988.

Альтернативно, Соединение 63 получили по таким же способам, как описаны в научной и патентной литературе авторами Kim et al., Synlett, 2003, 12, 1838-1840; и Kim et al., в опубликованной международной заявке РСТ WO 2004063208. Пример 30: Получение Соединения 63b

Соединение 63а получили по таким же способам, как описаны авторами Hanessian et al., Canadian Journal of Chemistry, 1996, 74 (9), 1731-1737.

Пример 31: Получение Соединения 63d

Соединение 63c получили по таким же способам, как описаны авторами Chenef al., Chinese Chemical Letters, 1998, 9 (5), 451-453.

Пример 32: Получение Соединения 67

Соединение 64 получили по способам, представленным в Примере 2. Соединение 65 получили по таким же способам, как описаны авторами Or et al., в опубликованной международной заявке РСТ WO 2009/003009. Защитные группы, использованные для Соединения 65, являются иллюстративным, и их не следует считать ограничением, поскольку могут быть использованы другие защитные группы, включая, но не ограничиваясь ими, те, которые представлены в данном описании.

Пример 33: Получение Соединения 264

Соединение 64 получили по способам, представленным в Примере 2. Соединение 68 имеется в продаже. Защитная группа, использованная для Соединения 68, является иллюстративной, и ее не следует считать ограничением, поскольку могут быть использованы другие защитные группы, включая, но не ограничиваясь ими, те, которые представлены в данном описании.

Пример 34: Получение Соединения 75а

Соединение 75 получили по опубликованным способам, описанным авторами Shchepinov et al., Nucleic Acids Research, 1997, 25 (22), 4447-4454.

Пример 265: Получение Соединения 79

Соединение 76 получили по опубликованным способам, описанным авторами Shchepinov et al., Nucleic Acids Research, 1997, 25 (22), 4447-4454.

Пример 266: Получение Соединения 79а

Соединение 77 получили по способам, представленным в Примере 35.

Пример 37: Общий способ получения сопряженного олигомерного соединения 82, содержащего фосфодиэфир-связанный конъюгат GalNAc₃-2 на 5'-конце, нетвердой подложке (Способ I),

где GalNAc₃-2 имеет структуру:

Кластерная часть GalNAc₃ группы конъюгата GalNAc₃-2 (GalNAc₃-2_a) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. Где GalNAc₃-2_a имеет формулу:

VIMAD-связанное олигомерное соединение 79b получили по стандартным способам в автоматическом синтезаторе ДНК/РНК (см. Dupouy et al., Angew. Chem. Int. ред., 2006, 45, 3623-3627). Фосфорамидитные Соединения 56 и 60 получили так, как описано в способах в Примерах 27 и 28, соответственно. Изображенные фосфорамидиты являются иллюстративными, и их не следует считать ограничением, поскольку могут быть использованы другие фосфорамидитные строительные блоки, включая, но не ограничиваясь ими, те, которые представлены в данном описании, для получения олигомерного соединения, содержащего фосфодиэфир-связанную группу конъюгата на 5'-конце. Порядок и количество фосфорамидитов, добавляемых к твердой подложке, может быть подобрано для получения олигомерных соединений, описанных в настоящем документе, которые имеют любую заданную последовательность и состав.

Пример 38: Альтернативный способ получения олигомерного соединения 82, содержащего фосфодиэфир-связанный конъюгат GalNAc₃-2 на 5'-конце (Способ II)

VIMAD-связанное олигомерное соединение 79b получили по стандартным способам в автоматическом синтезаторе ДНК/РНК (см. Dupouy et al., Angew. Chem. Int. ред., 2006, 45, 3623-3627). GalNAc₃-2 кластерный фосфорамидит, Соединение 79, получили по способам, представленным в Примере 35. Альтернативный способ обеспечивает возможность одностадийной установки фосфодиэфир-связанного GalNAc₃-2 конъюгата на олигомерное соединение на последней стадии синтеза. Изображенные фосфорамидиты являются иллюстративными, и их не следует считать ограничением, поскольку могут быть использованы другие фосфорамидитные строительные блоки, включая, но не ограничиваясь ими, те, которые представлены в данном описании, для получения олигомерных соединений, содержащих фосфодиэфирный конъюгат на 5'-конце. Порядок и количество фосфорамидитов, добавляемых к твердой подложке, может быть подобрано для получения олигомерных соединений, описанных в настоящем документе, которые имеют любую заданную последовательность и состав.

Пример 39: Общий способ получения олигомерного соединения 83h, содержащего конъюгат GalNAc₃-3 на 5'-конце (GalNAc₃-1, модифицированный для 5'-концевого присоединения), на твердой подложке

Соединение 18 получили по способам, представленным в Примере 4. Соединения 83а и 83b имеются в продаже. Олигомерное Соединение 83е, содержащее связанный через фосфодиэфир гексиламин, получили по стандартным способам синтеза олигонуклеотидов. В результате обработки защищенного олигомерного соединения водным раствором аммиака получили 5'-GalNAc₃-3 сопряженное олигомерное соединение (83h).

Где GalNAc₃-3 имеет структуру:

Кластерная часть GalNAc₃ группы конъюгата GalNAc₃-3 (GalNAc₃-3_a) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. Где GalNAc₃-3_a имеет формулу:

Пример 40: Общий способ получения олигомерного соединения 89, содержащего связанный фосфодиэфирным линкером GalNAc₃-4 конъюгат на 3'-конце, на твердой подложке

Где GalNAc₃-4 имеет структуру:

Где СМ представляет собой расщепляемый фрагмент. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой:

Кластерная часть GalNAc₃ группы конъюгата GalNAc₃-4 (GalNAc₃-4_a) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. Где GalNAc₃-4_a имеет формулу:

Защищенное Соединение 30 на функционализированной твердой подложке Unylinker имеется в продаже. Соединение 84 получили по таким же способам, как описаны в литературе (см. Shchepinov et al., Nucleic Acids Research, 1997, 25 (22), 4447-4454; Shchepinov et al., Nucleic Acids Research, 1999, 27, 3035-3041; и Hornet et al., Nucleic Acids Research, 1997, 25, 4842-4849).

Фосфорамидитные строительные блоки, Соединения 60 и 79а, получили так, как описано в способах в примерах 28 и 36. Изображенные фосфорамидиты являются иллюстративными и не предназначены для ограничения, поскольку могут быть использованы другие фосфорамидитные строительные блоки для получения олигомерного соединения, имеющего фосфодиэфир-связанный конъюгат на 3'-конце, которое имеет заданную последовательность и состав. Порядок и количество фосфорамидитов, добавляемых к твердой подложке, может быть подобрано для получения олигомерных соединений, описанных в настоящем документе, которые имеют любую заданную последовательность и состав.

Пример 41: Общий способ получения ASO, содержащих фосфодиэфир-связанный конъюгат GalNAc₃-2 (см. Пример 37, Вх представляет собой аденин) в 5'-положении, по твердофазному способу (получение ISIS 661134)

Если не указано иное, все реагенты и растворы, использованные для синтеза олигомерных соединений, приобретены у коммерческих поставщиков. Стандартные фосфорамидитные строительные блоки и твердую подложку использовали для внедрения нуклеозидных остатков, которые включают, например, остатки T, A, G и ^mC. Фосфорамидитные соединения 56 и 60 использовали для синтеза фосфодиэфир-связанного конъюгата GalNAc₃-2 на 5'-конце. 0,1 М раствор фосфорамидита в безводном ацетонитриле использовали для β-D-2'-дезоксирибонуклеозида и 2'-МОЕ.

Синтез антисмысловых олигонуклеотидов (ASO) выполнили на синтезаторе ABI 394 (в масштабе 1-2 мкмоль) или на синтезаторе Oligopilot производства GE Healthcare Bioscience (в масштабе 40-200 мкмоль) по способу фосфорамидитного связывания на твердой подложке VIMAD (110 мкмоль/г, Guzaev et al., 2003), упакованной в колонку. Для стадии связывания фосфорамидиты вводили в 4-кратном избытке по сравнению с исходной загрузкой на твердой подложке, а конденсацию фосфорамидита выполняли в течение 10 минут. Все остальные стадии выполняли по стандартным протоколам, предоставленным производителем. Для удаления диметокситритильных (DMT) групп с 5'-гидроксильных групп нуклеотида использовали 6% раствор дихлоруксусной кислоты в толуоле. На стадии связывания в качестве активатора использовали 4,5-дицианоимидазол (0,7 М) в безводном CH₃CN. Тиофосфатные связи внедряли сульфированием при помощи 0,1 М раствора гидрида ксантана в 1:1 смеси пиридина/CH₃СN в течение 3 минут времени контакта. В качестве окислительного агента для получения фосфодиэфирных межнуклеозидных связей использовали 20% раствор трет-бутилгидропероксида в CH₃CN, содержащий 6% воды, в течение 12 минут времени контакта.

После сборки требуемой последовательности цианоэтил-фосфатные защитные группы снимали при помощи 20% диэтиламина в толуоле (об./об.) в течение 45 минут времени контакта. Связанные с твердой подложкой ASO суспендировали в водном растворе аммиака (28-30 масс. %) и нагревали при 55°C в течение 6 часов.

Затем отфильтровывали не связанные ASO и выпаривали аммиак кипячением. Остаток очищали жидкостной хроматографией высокого давления на сильной анионообменной колонке (GE Healthcare Bioscience, Source 30Q, 30 мкм, 2,54×8 см, А=100 мМ ацетата аммония в 30% водном CH₃CN, В=1,5 М NaBr в А, 0-40% В за 60 мин., скорость потока 14 мл. мин-1, λ=260 нм). Остаток обессоливали при помощи ВЭЖХ на обращенно-фазовой колонке с получением заданных ASO с выделенным выходом 15-30% относительно первоначальной загрузки на твердую подложку. ASO характеризовали при помощи ион-парной ВЭЖХ, совмещенной с МС-анализом на системе Agilent 1100 MSD.

Нижние индексы: «e» означает 2'-МОЕ модифицированный нуклеозид; «d» означает β-D-2'-дезоксирибонуклеозид; «k» означает 6'-(S)-CH₃ бициклический нуклеозид (например, cEt); «s» означает тиофосфатные межнуклеозидные связи (PS); «о» означает фосфодиэфирные межнуклеозидные связи (РО); и «o'» означает -O-Р(=O)(ОН)-. Верхний индекс «m» означает 5-метилцитозины. Структура GalNAc₃-2_a показана в Примере 37.

Пример 42: Общий способ получения ASO, содержащих конъюгат GalNAc₃-3 в 5'-положении, via твердофазным методикам (получение ISIS 661166)

Синтез ISIS 661166 выполнили по таким же способам, как представлены в Примерах 39 и 41.

ISIS 661166 представляет собой 5-10-5 МОЕ гэпмер, в котором 5'-положение содержит конъюгат GalNAc₃-3. Это ASO характеризовали при помощи ион-пар ной ВЭЖХ, совмещенной с МС-анализом на системе Agilent 1100 MSD.

Нижние индексы: «е» означает 2'-МОЕ модифицированный нуклеозид; «d» означает β-D-2'-дезоксирибонуклеозид; «s» означает тиофосфатные межнуклеозидные связи (PS); «о» означает фосфодиэфирные межнуклеозидные связи (РО); и «o'» означает ОР(=O)(ОН)-. Верхний индекс «m» означает 5-метилцитозины. Структура «5'-GalNAc₃-3a» представлена в Примере 39.

Пример 43: Дозозависимое исследование фосфодиэфир-связанного GalNAc₃-2 (см. Примеры 37 и 41, Вх представляет собой аденин) на 5'-конце, направленного на SRB-1, in vivo

ISIS 661134 (см. Пример 41), содержащий фосфодиэфир-связанный конъюгат GalNAc₃-2 на 5'-конце, испытывали в дозозависимом исследовании на антисмысловое ингибирование SRB-1 у мышей. Несопряженные ISIS 440762 и 651900 (конъюгат (GalNAc₃-1 на 3'-конце, см. Пример 9) включены в исследование для сравнения и описаны ранее в Таблице 17.

Лечение

Шестинедельным самцам мышей Balb/c (Jackson Laboratory, Бар-Харбор, штат Мэн) ввели однократную подкожную инъекцию дозы, представленной ниже, соединения ISIS 440762, 651900, 661134 или PBS в качестве контрольного образца. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Мышей усыпили через 72 часа после последнего введения для определения уровней мРНК SRB-1 в печени при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN® (Molecular Probes, Inc. Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Уровни мРНК SRB-1 определяли относительно общей РНК (при помощи Ribogreen), затем нормализовали к контрольному образцу, обработанному PBS. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней мРНК SRB-1 для каждой экспериментальной группы, нормализованных к контрольному образцу, обработанному PBS, и обозначены как «% PBS». ED₅₀ измеряли по таким же способам, как описаны ранее, и указанные значения представлены ниже.

Как показано в Таблице 35, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни мРНК SRB-1 дозозависимым образом. Действительно, антисмысловые олигонуклеотиды, содержащие фосфодиэфир-связанный конъюгат GalNAc₃-2 на 5'-конце (ISIS 661134) или конъюгат GalNAc₃-1, связанный на 3'-конце (ISIS 651900), демонстрируют значительное улучшение эффективности, по сравнению с несопряженным антисмысловым олигонуклеотидом (ISIS 440762). Кроме того, ISIS 661134, который содержит фосфодиэфир-связанный конъюгат GalNAc₃-2 на 5'-конце, был настолько же эффективным, как ISIS 651900, который содержит конъюгат GalNAc₃-1 на 3'-конце.

Структуры 3' GalNAc₃-1 и 5' GalNAc₃-2 описаны ранее в Примерах 9 и 37.

Фармакокинетический анализ (ФК)

ФК для ASO из группы высокой дозы (7 мг/кг) исследовали и оценили таким же образом, как описано в Примере 20. Образцы печени измельчили и экстрагировали по стандартным протоколам. Идентифицировали метаболиты полной длины 661134 (5' GalNAc₃-2) и ISIS 651900 (3' GalNAc₃-1) и подтвердили их массы при помощи масс-спектрометрического анализа высокого разрешения. Результаты показали, что основной метаболит, обнаруженный для ASO, содержащего фосфодиэфир-связанный конъюгат GalNAc₃-2 на 5'-конце (ISIS 661134), представлял собой ISIS 440762 (данные не показаны). Не наблюдали никаких дополнительных метаболитов в обнаруживаемом количестве. В отличие от него, для ASO, содержащего конъюгат GalNAc₃-1 на 3'-конце (ISIS 651900), наблюдали дополнительные метаболиты, аналогичные тем, которые описаны ранее в Таблице 23а. Эти результаты позволяют предположить, что наличие фосфодиэфир-связанного конъюгата GalNAc₃-1 или GalNAc₃-2 может улучшать ФК профиль ASO без ухудшения их эффективности.

Пример 44: Влияние PO/PS линкеров на антисмысловое ингибирование ASO, содержащих конъюгат GalNAc₃-1 (см. Пример 9) у 3'-конца, направленных на SRB-1

ISIS 655861 и 655862, содержащие конъюгат GalNAc₃-1 на 3'-конце, каждый из которых направлен на SRB-1, испытали в исследовании однократного введения на их способность ингибировать SRB-1 у мышей. Исходное несопряженное соединение, ISIS 353382, включили в исследование для сравнения.

Эти ASO представляют собой 5-10-5 МОЕ гэпмеры, в которых гэп-область содержит десять 2'-дезоксирибонуклеозидов, и каждая область крыльев содержит пять 2'-МОЕ модифицированных нуклеозидов. Эти ASO получили по таким же способам, как показаны ранее в Примере 19, и они описаны ниже в Таблице 36.

Нижние индексы: «е» означает 2'-МОЕ модифицированный нуклеозид; «d» означает β-D-2'-дезоксирибонуклеозид; «s» означает тиофосфатные межнуклеозидные связи (PS); «о» означает фосфодиэфирные межнуклеозидные связи (РО); и «o'» означает ОР(=O)(ОН)-. Верхний индекс «m» означает 5-метилцитозины. Структура «GalNAc₃-1» показана в Примере 9.

Лечение

Шестинедельным самцам мышей Balb/c (Jackson Laboratory, Бар-Харбор, штат Мэн) ввели однократную подкожную инъекцию дозы, представленной ниже, соединения ISIS 353382, 655861, 655862 или PBS в качестве контрольного образца. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Перед лечением, а также после последней дозы у каждой мыши брали кровь и анализировали образцы плазмы. Мышей усыпили через 72 часа после последнего введения для определения уровней мРНК SRB-1 в печени при помощи ПНР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК PIBOGREEN® (Molecular Probes, Inc. Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Уровни мРНК SRB-1 определяли относительно общей РНК (при помощи Ribogreen), затем нормализовали к контрольному образцу, обработанному PBS. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней мРНК SRB-1 для каждой экспериментальной группы, нормализованных к контрольному образцу, обработанному PBS, и обозначены как «% PBS». ED₅₀ измеряли по таким же способам, как описаны ранее, и указанные значения представлены ниже.

Как показано в Таблице 37, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни мРНК SRB-1 дозозависимым образом, по сравнению с контрольным образцом, обработанным PBS. Действительно, антисмысловые олигонуклеотиды, содержащие конъюгат GalNAc₃-1 на 3'-конце (ISIS 655861 и 655862), демонстрируют значительное усиление эффективности, по сравнению с несопряженным антисмысловым олигонуклеотидом (ISIS 353382). Кроме того, ISIS 655862 со смешанными PS/PO связями демонстрирует усиление эффективности, по сравнению с соединением, содержащим только PS (ISIS 655861).

Уровни трансаминазы в печени, аланин-аминотрансферазы (ALT) и аспартат-аминотрансферазы (AST) в сыворотке измеряли относительно мышей, инъецированных солевым раствором, используя стандартные протоколы. Оценили также массу органов. Результаты показывают, что не наблюдали какого-либо увеличения уровней трансаминазы (Таблица 38) или массы органов (данные не показаны) у мышей, обработанных ASO, по сравнению с PBS контролем. Кроме того, ASO со смешанными PS/PO связями (ISIS 655862) демонстрирует схожие уровни трансаминазы, по сравнению с соединением, содержащим только PS (ISIS 655861).

Пример 45: Получение PFP эфира, Соединения 110а

Соединение 4 (9,5 г, 28,8 ммоль) обработали по отдельности соединением 103а или 103b (38 ммоль) и TMSOTf (0,5 экв.), и молекулярными ситами в дихлорметане (200 мл), и перемешивали в течение 16 часов при комнатной температуре. Затем органический слой отфильтровали через целит, затем промыли бикарбонатом натрия, водой и насыщенным солевым раствором. Затем отделили органический слой и высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и упарили при пониженном давлении. Полученное маслянистое вещество очистили хроматографией на силикагеле (2%-->10% метанол/дихлорметан) с получением соединений 104а и 104b с выходом >80%. Данные ЖХМС и протонного ЯМР согласовались с указанной структурой.

Соединения 104а и 104b обработали в тех же условиях, что и соединения 100a-d (Пример 47), с получением соединений 105а и 105b с выходом >90%. Данные ЖХМС и протонного ЯМР согласовались с указанной структурой.

Соединения 105а и 105b по отдельности обработали соединением 90 при тех же условиях, что и соединения 901a-d, с получением соединений 106а (80%) и 106b (20%). Данные ЖХМС и протонного ЯМР согласовались с указанной структурой.

Соединения 106а и 106b обработали в тех же условиях, что и соединения 96a-d (Пример 47), с получением соединения 107а (60%) и 107b (20%). Данные ЖХМС и протонного ЯМР согласовались с указанной структурой.

Соединения 107а и 107b обработали в тех же условиях, что и соединения 97a-d (Пример 47), с получением соединений 108а и 108b с выходом 40-60%. Данные ЖХМС и протонного ЯМР согласовались с указанной структурой.

Соединения 108а (60%) и 108b (40%) обработали в тех же условиях, что и соединения 100a-d (Пример 47), с получением соединений 109а и 109b с выходом >80%. Данные ЖХМС и протонного ЯМР согласовались с указанной структурой.

Соединение 109а обработали в тех же условиях, что и соединения 101a-d (Пример 47), с получением соединения 110а с выходом 30-60%. Данные ЖХМС и протонного ЯМР согласовались с указанной структурой. Альтернативно, Соединение 110b может быть получено таким же образом, исходя из Соединения 109b.

Пример 46: Общий способ сопряжения с PFP эфирами (олигонуклеотид 111); получение ISIS 666881 (GalNAc₃-10)

Синтезировали и очистили 5'-гексиламино-модифицированный олигонуклеотид по стандартным способам твердофазного получения олигонуклеотидов. 5'-Гексиламино-модифицированный олигонуклеотид растворили в 0,1 М растворе тетрабората натрия, pH 8,5 (200 мкл) и добавили 3 эквивалента выбранного PFP-эстерифицированного кластера GalNAc₃, растворенного в ДМСО (50 мкл). Если при добавлении раствора ASO эфир PFP выпадал в осадок, то добавляли ДМСО до перехода всего эфира PFP в раствор. Реакция была завершена примерно через 16 часов перемешивания при комнатной температуре. Полученный раствор разбавили водой до 12 мл, а затем центрифугировали при 3000 об./мин. в центробежном фильтре с отсечением по массе 3000 Да. Этот прием повторили два раза для удаления низкомолекулярных примесей. Затем раствор лиофилизировали досуха и повторно растворили в концентрированном водном растворе аммиака, и перемешивали при комнатной температуре в течение 2,5 часов, затем концентрировали in vacuo для удаления большей части аммиака. Сопряженный олигонуклеотид очистили и обессолили при помощи ОФ-ВЭЖХ, и лиофилизировали с получением GalNAc₃ сопряженного олигонуклеотида.

Олигонуклеотид 111 сопряжен с GalNAc₃-10. Кластерная часть GalNAc₃ группы конъюгата GalNAc₃-10 (GalNAc₃-10_a) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -P(=O)(ОН)-A_d-Р(=O)(ОН)-, как показано ниже в олигонуклеотиде (ISIS 666881), синтезированном с GalNAc₃-10. Структура GalNAc₃-10 (GalNAc₃-10_a-CM-) представлена ниже:

По указанному общему способу получили ISIS 666881. Синтезировали и очистили 5'-гексиламино-модифицированный олигонуклеотид, ISIS 660254, по стандартным способам твердофазного получения олигонуклеотидов. ISIS 660254 (40 мг, 5,2 мкмоль) растворили в 0,1 М растворе тетрабората натрия, pH 8,5 (200 мкл) и добавили 3 эквивалента PFP эфира (Соединения 110а), растворенного в ДМСО (50 мкл). Эфир PFP выпал в осадок при добавлении раствора ASO, поэтому потребовалось добавление дополнительного количества ДМСО (600 мкл) для полного растворения PFP эфира. Реакция была завершена через 16 часов перемешивания при комнатной температуре. Раствор разбавили водой до общего объема 12 мл, а затем центрифугировали при 3000 об./мин. в центробежном фильтре с отсечением по массе 3000 Да. Этот прием повторили два раза для удаления низкомолекулярных примесей. Раствор лиофилизировали досуха и повторно растворили в концентрированном водном растворе аммиака, перемешивая при комнатной температуре в течение 2,5 часов, затем концентрировали in vacuo для удаления большей части аммиака. Сопряженный олигонуклеотид очистили и обессолили при помощи ОФ-ВЭЖХ, и лиофилизировали с получением ISIS 666881 с выходом 90% по массе (42 мг, 4,7 мкмоль).

Заглавные буквы указывают азотистое основание для каждого нуклеозида, а ^mC означает 5-метилцитозин. Нижние индексы: «е» означает 2'-МОЕ модифицированный нуклеозид; «d» означает β-D-2'-дезоксирибонуклеозид; «s» означает тиофосфатную межнуклеозидную связь (PS); «о» означает фосфодиэфирную межнуклеозидную связь (РО); и «o'» означает ОР(=O)(ОН)-. Группы конъюгата выделены жирным.

Пример 47: Получение олигонуклеотида 102, содержащего GalNAc₃-8

Трехкислотное соединение 90 (4 г, 14,43 ммоль) растворили в ДМФА (120 мл) и N,N-диизопропилэтиламине (12,35 мл, 72 ммоль). По каплям добавили пентафторфенила трифторацетат (8,9 мл, 52 ммоль) в атмосфере аргона и оставили реакционную смесь перемешиваться при комнатной температуре в течение 30 минут. Добавили Boc-диамин 91а или 91b (68,87 ммоль) вместе с N,N-диизопропилэтиламином (12,35 мл, 72 ммоль) и оставили реакционную смесь перемешиваться при комнатной температуре в течение 16 часов. Затем упарили ДМФА на >75% при пониженном давлении, а затем растворили смесь в дихлорметане. Органический слой промыли бикарбонатом натрия, водой и насыщенным солевым раствором. Затем отделили органический слой и высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и упарили при пониженном давлении до маслянистого остатка. Полученное маслянистое вещество очистили хроматографией на силикагеле (2%-->10% метанол/дихлорметан) с получением соединений 92а и 92b с приблизительным выходом 80%. Данные ЖХМС и протонного ЯМР согласовались с указанной структурой.

Соединение 92а или 92b (6,7 ммоль) обрабатывали 20 мл дихлорметана и 20 мл трифторуксусной кислоты при комнатной температуре в течение 16 часов. Полученный раствор выпарили, а затем растворили в метаноле и обрабатывали смолой DOWEX-OH в течение 30 минут. Полученный раствор отфильтровали и упарили до маслянистого вещества при пониженном давлении с получением 85-90% выхода соединений 93а и 93b.

Соединения 7 или 64 (9,6 ммоль) обрабатывали HBTU (3,7 г, 9,6 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламином (5 мл) в ДМФА (20 мл) в течение 15 минут. К смеси добавили либо соединение 93а, либо 93b (3 ммоль) и оставили перемешиваться при комнатной температуре на 16 часов. Затем упарили ДМФА на >75% при пониженном давлении, а затем растворили смесь в дихлорметане. Органический слой промыли бикарбонатом натрия, водой и насыщенным солевым раствором. Затем отделили органический слой и высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и упарили при пониженном давлении до маслянистого остатка. Полученное маслянистое вещество очистили хроматографией на силикагеле (5%-->20% метанол/дихлорметан) с получением соединений 80а-d с выходом 40-60%. Данные ЖХМС и протонного ЯМР согласовались с указанной структурой.

Соединения 96a-d (0,75 ммоль) по отдельности гидрировали на никеле Ренея в течение 3 часов в этаноле (75 мл). Затем катализатор удалили фильтрованием через целит, а этанол удалили при пониженном давлении с получением соединений 97a-d с выходом 80-90%. Данные ЖХМС и протонного ЯМР согласовались с указанной структурой.

Соединение 23 (0,32 г, 0,53 ммоль) обрабатывали HBTU (0,2 г, 0,53 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламином (0,19 мл, 1,14 ммоль) в ДМФА (30 мл) в течение 15 минут. К смеси по отдельности добавили соединения 97a-d (0,38 ммоль) и оставили перемешиваться при комнатной температуре на 16 часов. Затем упарили ДМФА на >75% при пониженном давлении, а затем растворили смесь в дихлорметане. Органический слой промыли бикарбонатом натрия, водой и насыщенным солевым раствором. Затем отделили органический слой и высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и упарили при пониженном давлении до маслянистого остатка. Полученное маслянистое вещество очистили хроматографией на силикагеле (2%-->20% метанол/дихлорметан) с получением соединений 98a-d с выходом 30-40%. Данные ЖХМС и протонного ЯМР согласовались с указанной структурой.

Соединение 99 (0,17 г, 0,76 ммоль) обрабатывали HBTU (0,29 г, 0,76 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламином (0,35 мл, 2,0 ммоль) в ДМФА (50 мл) в течение 15 минут. К смеси по отдельности добавили соединения 97a-d (0,38 ммоль) и оставили перемешиваться при комнатной температуре на 16 часов. Затем упарили ДМФА на >75% при пониженном давлении, а затем растворили смесь в дихлорметане. Органический слой промыли бикарбонатом натрия, водой и насыщенным солевым раствором. Затем отделили органический слой и высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и упарили при пониженном давлении до маслянистого остатка. Полученное маслянистое вещество очистили хроматографией на силикагеле (5%-->20% метанол/дихлорметан) с получением соединений 100а-d с выходом 40-60%. Данные ЖХМС и протонного ЯМР согласовались с указанной структурой.

Соединения 100a-d (0,16 ммоль) по отдельности гидрировали на 10% Pd(OH)₂/C в течение 3 часов в метаноле/этилацетате (1:1,50 мл). Затем катализатор удалили фильтрованием через целит, а органические растворители удалили при пониженном давлении с получением соединений 101a-d с выходом 80-90%. Данные ЖХМС и протонного ЯМР согласовались с указанной структурой.

Соединения 101a-d (0,15 ммоль) по отдельности растворили в ДМФА (15 мл) и пиридине (0,016 мл, 0,2 ммоль). По каплям добавили пентафторфенила трифторацетат (0,034 мл, 0,2 ммоль) в атмосфере аргона и оставили реакционную смесь перемешиваться при комнатной температуре в течение 30 минут. Затем упарили ДМФА на >75% при пониженном давлении, а затем растворили смесь в дихлорметане. Органический слой промыли бикарбонатом натрия, водой и насыщенным солевым раствором. Затем отделили органический слой и высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и упарили при пониженном давлении до маслянистого остатка. Полученное маслянистое вещество очистили хроматографией на силикагеле (2%-->5% метанол/дихлорметан) с получением соединений 102a-d с приблизительным выходом 80%. Данные ЖХМС и протонного ЯМР согласовались с указанной структурой.

Олигомерное соединение 160, содержащее группу конъюгата GalNAc₃-8, получили по стандартным способам синтеза олигонуклеотидов. Кластерная часть GalNAc₃ группы конъюгата GalNAc₃-8 (GalNAc₃-8_a) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В предпочтительном варианте реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -P(=O)(OH)-A_d-P(=O)(OH)-.

Структура GalNAc₃-8 (GalNAc₃-8_a-CM-) представлена ниже:

Пример 48: Получение олигонуклеотида 119, содержащего GalNAc₃-7

Соединение 112 синтезировали по способу, описанному в литературе (J. Med. Chem. 2004, 47, 5798-5808).

Соединение 112 (5 г, 8,6 ммоль) растворили в 1:1 смеси метанола/этилацетата (22 мл/22 мл). Добавили гидроксид палладия на углероде (0,5 г). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере водорода в течение 12 часов. Реакционную смесь отфильтровали через слой целита и промыли этот слой 1:1 смесью метанола/этилацетата. Фильтрат и промывочные растворы объединили и концентрировали досуха с получением Соединения 105а (количественно). Структуру подтвердили по ЖХМС.

Соединение 113 (1,25 г, 2,7 ммоль), HBTU (3,2 г, 8,4 ммоль) и DIEA (2,8 мл, 16,2 ммоль) растворили в безводном ДМФА (17 мл) и перемешивали реакционную смесь при комнатной температуре в течение 5 минут. К этой смеси добавили раствор Соединения 105а (3,77 г, 8,4 ммоль) в безводном ДМФА (20 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 6 часов. Растворитель удалили при пониженном давлении с получением маслянистого вещества. Остаток растворили в CH₂Cl₂ (100 мл) и промыли насыщенным водным раствором NaHCO₃ (100 мл) и насыщенным солевым раствором (100 мл). Органическую фазу отделили, высушили (Na₂SO₄), отфильтровали и выпарили. Остаток очистили силикагелевой колоночной хроматографией и элюировали от 10 до 20% МеОН в дихлорметане с получением Соединения 114 (1,45 г, 30%). Структуру подтвердили анализом ЖХМС и ¹Н ЯМР.

Соединение 114 (1,43 г, 0,8 ммоль) растворили в 1:1 смеси метанола/этилацетата (4 мл/4 мл). Добавили палладий на углероде (влажный, 0,14 г). Реакционную смесь продували водородом и перемешивали при комнатной температуре в атмосфере водорода в течение 12 часов. Реакционную смесь фильтровали через слой целита. Слой целита промыли метанолом/этилацетатом (1:1). Фильтрат и промывочные растворы объединили и выпарили при пониженном давлении с получением Соединения 115 (количественно). Структуру подтвердили анализом ЖХМС и ¹Н ЯМР.

Соединение 83а (0,17 г, 0,75 ммоль), HBTU (0,31 г, 0,83 ммоль) и DIEA (0,26 мл, 1,5 ммоль) растворили в безводном ДМФА (5 мл) и перемешивали реакционную смесь при комнатной температуре в течение 5 минут. К этой смеси добавили раствор Соединения 115 (1,22 г, 0,75 ммоль) в безводном ДМФА и перемешивали реакционную смесь при комнатной температуре в течение 6 часов. Растворитель удалили при пониженном давлении, а остаток растворили в CH₂Cl₂. Органический слой промыли насыщенным водным раствором NaHCO₃ и насыщенным солевым раствором, и высушили над безводным Na₂SO₄, и отфильтровали. Органический слой концентрировали досуха, а полученный остаток очистили силикагелевой колоночной хроматографией и элюировали от 3 до 15% МеОН в дихлорметане с получением Соединения 116 (0,84 г, 61%). Структуру подтвердили анализом ЖХМС и ¹Н ЯМР.

Соединение 116 (0,74 г, 0,4 ммоль) растворили в 1:1 смеси метанола/этилацетата (5 мл/5 мл). Добавили палладий на углероде (влажный, 0,074 г). Реакционную смесь продували водородом и перемешивали при комнатной температуре в атмосфере водорода в течение 12 часов. Реакционную смесь фильтровали через слой целита. Слой целита промыли метанолом/этилацетатом (1:1). Фильтрат и промывочные растворы объединили и выпарили при пониженном давлении с получением соединения 117 (0,73 г, 98%). Структуру подтвердили анализом ЖХМС и ¹H ЯМР.

Соединение 117 (0,63 г, 0,36 ммоль) растворили в безводном ДМФА (3 мл). К этому раствору добавили N,N-диизопропилэтиламин (70 мкл, 0,4 ммоль) и пентафторфенила трифторацетат (72 мкл, 0,42 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов и вылили в насыщенный водный раствор NaHCO₃. Смесь экстрагировали дихлорметаном, промыли насыщенным солевым раствором и высушили над безводным Na₂SO₄. Дихлорметановый раствор концентрировали досуха и очистили силикагелевой колоночной хроматографией, и элюировали от 5 до 10% МеОН в дихлорметане с получением соединения 118 (0,51 г, 79%). Структуру подтвердили анализом ЖХМС и ¹Н и ¹Н и ¹⁹F ЯМР.

Олигомерное соединение 119, содержащее группу конъюгата GalNAc₃-7, получили по общим способам, представленным в Примере 46. Кластерная часть GalNAc₃ группы конъюгата GalNAc₃-7 (GalNAc₃-7_a) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -P(=O)(OH)-A_d-P(=O)(OH)-.

Структура GalNAc₃-7 (GalNAc₃-7_a-CM-) представлена ниже:

Пример 49: Получение олигонуклеотида 132, содержащего GalNAc₃-5

Соединение 120 (14,01 г, 40 ммоль) и HBTU (14,06 г, 37 ммоль) растворили в безводном ДМФА (80 мл). Добавили триэтиламин (11,2 мл, 80,35 ммоль) и перемешивали в течение 5 минут. Реакционную смесь охладили на ледяной бане и добавили раствор соединения 121 (10 г, ммоль) в безводном ДМФА (20 мл). Добавили дополнительное количество триэтиламина (4,5 мл, 32,28 ммоль) и перемешивали реакционную смесь в течение 18 часов в атмосфере аргона. Реакцию контролировали по ТСХ (этилацетат:гексан; 1:1; Rf=0,47). Растворитель удалили при пониженном давлении. Остаток растворили в EtOAc (300 мл) и промыли 1 М раствором NaHSO₄ (3×150 мл), насыщенным водным раствором NaHCO₃ (3×150 мл) и насыщенным солевым раствором (2×100 мл). Органический слой высушили над Na₂SO₄ и концентрировали. Высушивающий агент удалили фильтрованием, а органический слой концентрировали на ротационном испарителе. Неочищенную смесь очистили силикагелевой колоночной хроматографией и элюировали при помощи 35-50% EtOAc в гексане с получением соединения 122 (15,50 г, 78,13%). Структуру подтвердили анализом ЖХМС и ¹Н ЯМР. Масса m/z 589,3 [М+Н]⁺.

К охлажденному раствору соединения 122 (7,75 г, 13,16 ммоль), растворенного в метаноле (15 мл) добавили раствор LiOH (92,15 ммоль) в воде (20 мл) и ТГФ (10 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 45 минут и контролировали по ТСХ (EtOAc: гексан; 1:1). Реакционную смесь концентрировали до половины объема при пониженном давлении. Оставшийся раствор охладили на ледяной бане и нейтрализовали добавлением концентрированной HCl. Реакционную смесь разбавили, экстрагировали EtOAc (120 мл) и промыли насыщенным солевым раствором (100 мл). При стоянии в течение ночи образовалась и осветлилась эмульсия. Органический слой отделили, высушили (Na₂SO₄), отфильтровали и выпарили с получением Соединения 123 (8,42 г). Избыточную массу вероятно обусловливает остаточная соль. Данные ЖХМС согласовались со структурой. Продукт использовали без какой-либо дополнительной очистки. Мол. масса, расчетная: 574,36% мол. масса, найденная: 575,3 [М+Н]⁺.

Соединение 126 синтезировали по способу, описанному в литературе(J. Am. Chem. Soc. 2011, 733, 958-963).

Соединение 123 (7,419 г, 12,91 ммоль), HOBt (3,49 г, 25,82 ммоль) и соединение 126 (6,33 г, 16,14 ммоль) растворили в ДМФА (40 мл), а полученную реакционную смесь охладили на ледяной бане. К смеси добавили N,N-диизопропилэтиламин (4,42 мл, 25,82 ммоль), PyBop (8,7 г, 16,7 ммоль), затем Bop-связывающий агент (1,17 г, 2,66 ммоль) в атмосфере аргона. Ледяную баню убрали и оставили раствор нагреваться до комнатной температуры. По данным ТСХ (ДХМ:МеОН:АА; 89:10:1), реакция была завершена через 1 час. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворили в EtOAc (300 мл) и промыли 1 М раствором NaHSO₄ (3×150 мл), насыщенным водным раствором NaHCO₃ (3×150 мл) и насыщенным солевым раствором (2×100 мл). Отделенную органическую фазу высушили (Na₂SO₄), отфильтровали и концентрировали. Остаток очистили колоночной хроматографией на силикагеле с градиентом от 50% гексанов в EtOAc до 100% EtOAc с получением Соединения 127 (9,4 г) в виде белого пенистого вещества. Данные ЖХМС и ¹Н ЯМР согласовались со структурой. Масса m/z 778,4 [М+Н]⁺.

Трифторуксусную кислоту (12 мл) добавили к раствору соединения 127 (1,57 г, 2,02 ммоль) в дихлорметане (12 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь выпарили совместно с толуолом (30 мл) при пониженном давлении досуха. Полученный остаток дважды совместно выпаривали с ацетонитрилом (30 мл) и толуолом (40 мл) с получением Соединения 128 (1,67 г) в виде трифторацетатной соли и использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Данные ЖХМС и ¹Н ЯМР согласовались со структурой. Масса m/z 478,2 [М+Н]⁺.

Соединение 7 (0,43 г, 0,963 ммоль), HATU (0,35 г, 0,91 ммоль) и HOAt (0,035 г, 0,26 ммоль) смешали вместе и высушивали в течение 4 часов над P₂O₅ при пониженном давлении в круглодонной колбе, а затем растворили в безводном ДМФА (1 мл) и перемешивали в течение 5 минут. К этой смеси добавили раствор соединения 128 (0,20 г, 0,26 ммоль) в безводном ДМФА (0,2 мл) и добавили N,N-диизопропилэтиламин (0,2 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере аргона. По данным ЖХМС и ТСХ (7% МеОН/ДХМ), реакция была завершена через 20 минут. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворили в ДХМ (30 мл) и промыли 1 М раствором NaHSO₄ (3×20 мл), насыщенным водным раствором NaHCO₃ (3×20 мл) и насыщенным солевым раствором (3×20 мл). Органическую фазу отделили, высушили над Na₂SO₄, отфильтровали и концентрировали. Остаток очистили колоночной хроматографией на силикагеле, используя 5-15% МеОН в дихлорметане, с получением Соединения 129 (96,6 мг). Данные ЖХМС и ¹Н ЯМР согласовались со структурой. Масса m/z 883,4 [М+2Н]⁺.

Соединение 129 (0,09 г, 0,051 ммоль) растворили в метаноле (5 мл) в сцинтилляционной пробирке объемом 20 мл. К смеси добавили небольшое количество 10% Pd/C (0,015 мг) и продули реакционный сосуд газообразным H₂. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере H₂ в течение 18 часов. Реакционную смесь отфильтровали через слой целита и промыли слой целита метанолом. Фильтрат и промывочные растворы слили вместе и концентрировали при пониженном давлении с получением Соединения 130 (0,08 г). Данные ЖХМС и ¹Н ЯМР согласовались с указанной структурой. Продукт использовали без дополнительной очистки. Масса m/z 838,3 [М+2Н]⁺.

В коническую круглодонную колбу объемом 10 мл добавили соединение 130 (75,8 мг, 0,046 ммоль), 0,37 М пиридин/ДМФА (200 мкл) и мешалку. К этому раствору по каплям добавили 0,7 М пентафторфенилтрифторацетат/ДМФА (100 мкл) при перемешивании. По данным ЖХМС реакция была завершена через 1 час. Растворитель удалили при пониженном давлении и растворили остаток в CHCl₃ (~10 мл). Органический слой разделили между NaHSO₄ (1 М, 10 мл), насыщенным водным раствором NaHCO₃ (10 ил) и насыщенным солевым раствором (10 мл), с каждым раствором по три раза. Органическую фазу отделили и высушили над Na₂SO₄, отфильтровали и концентрировали с получением Соединения 131 (77,7 мг). Данные ЖХМС согласовались со структурой. Использовали без дополнительной очистки. Масса m/z 921,3 [М+2Н]⁺.

Олигомерное Соединение 132, содержащее группу конъюгата GalNAc₃-5, получили по общим способам, представленным в Примере 46. Кластерная часть GalNAc₃ группы конъюгата GalNAc₃-5 (GalNAc₃-5_a) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -P(=O)(OH)-A_d-P(=O)(OH)-.

Структура GalNAc₃-5 (GalNAc₃-5_a-CM-) представлена ниже:

Пример 50: Получение олигонуклеотида 144, содержащего GalNAc₄-11

Синтез Соединения 134. В колбу Меррифилда добавили аминометиловую смолу VIMAD (2,5 г, 450 мкмоль/г), которую промыли ацетонитрилом, диметилформамидом, дихлорметаном и ацетонитрилом. Смолу оставили набухать в ацетонитриле (4 мл). Соединение 133 предварительно активировали в 100 мл круглодонной колбе путем добавления 20 (1,0 ммоль, 0,747 г), TBTU (1,0 ммоль, 0,321 г), ацетонитрила (5 мл) и DIEA (3,0 ммоль, 0,5 мл). Этот раствор оставили перемешиваться на 5 минут, а затем добавили в колбу Меррифилда при встряхивании. Суспензию оставили встряхиваться на 3 часа. Реакционную смесь слили, а смолу промыли ацетонитрилом, ДМФА и ДХМ. Заполнение новой смолы количественно определили по измерению абсорбции DMT катиона при 500 нм (коэффициент экстинкции = 76000) в ДХМ, которое составило 238 мкмоль/г. Смолу кэпировали трехкратным суспендированием в растворе уксусного ангидрида в течение десяти минут.

Соединение 141, связанное с твердой подложкой, синтезировали многократным повторением способов твердофазного синтеза пептидов при помощи Fmoc. Взяли небольшое количество твердой подложки и суспендировали в водном растворе аммиака (28-30 масс. %) в течение 6 часов. Расщепленное соединение анализировали по ЖХ-МС и наблюдали, что масса согласуется со структурой. Масса m/z 1063,8 [М+2Н]⁺.

Соединение 142, связанное с твердой подложкой, синтезировали по способам твердофазного синтеза пептидов.

Соединение 143, связанное с твердой подложкой, синтезировали при помощи стандартного твердофазного синтеза на ДНК синтезаторе.

Соединение 143, связанное с твердой подложкой, суспендировали в водном аммиаке (28-30 масс. %) и нагревали при 55°C в течение 16 часов. Раствор охладили, а твердую подложку отфильтровали. Фильтрат концентрировали, а остаток растворили в воде и очистили при помощи ВЭЖХ на сильной анионообменной колонке. Фракции, содержащие соединение 144 полной длины, слили вместе и обессолили. Полученное GalNAc₄-11-сопряженное олигомерное соединение анализировали при помощи ЖХ-МС и наблюдали, что масса согласуется со структурой.

Кластерная часть GalNAc₄ группы конъюгата GalNAc₄-11 (GalNAc₄-11_а) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -P(=O)(OH)-A_d-P(=O)(OH)-.

Структура GalNAc₄-11 (GalNAc₄-11_а-СМ) представлена ниже:

Пример 51: Получение олигонуклеотида 155, содержащего GalNAc₃-6

Соединение 146 синтезировали так, как описано в литературе (Analytical Biochemistry 1995, 229, 54-60).

Соединение 4 (15 г, 45,55 ммоль) и соединение 35b (14,3 грамм, 57 ммоль) растворили в CH₂Cl₂ (200 мл). Добавили активированные молекулярные сита (, 2 г, порошкообразные) и оставили реакционную смесь перемешиваться в течение 30 минут в атмосфере азота. Добавили TMS-OTf (4,1 мл, 22,77 ммоль) и оставили реакционную смесь перемешиваться при комнатной температуре в течение ночи. После завершения реакции смесь погасили, вылив в насыщенный водный раствор NaHCO₃ (500 мл) с дробленым льдом (~150 г). Органический слой отделили, промыли насыщенным солевым раствором, высушили над MgSO₄, отфильтровали и концентрировали до оранжевого маслянистого вещества при пониженном давлении. Неочищенный материал очистили силикагелевой колоночной хроматографией и элюировали 2-10% МеОН в CH₂Cl₂ с получением Соединения 112 (16,53 г, 63%). ЖХМС и ¹Н ЯМР согласовались с ожидаемым соединением.

Соединение 112 (4,27 г, 7,35 ммоль) растворили в 1:1 МеОН/EtOAc (40 мл). Реакционную смесь очистили пропусканием потока аргона через раствор в течение 15 минут. Добавили катализатор Перлмана (гидроксид палладия на углероде, 400 мг) и пропускали через раствор газообразный водород в течение 30 минут. После завершения (ТСХ, 10% МеОН в CH₂Cl₂, и ЖХМС), катализатор удалили фильтрованием через слой целита. Фильтрат концентрировали на ротационном испарителе и быстро высушили под высоким вакуумом с получением Соединения 105а (3,28 г). Данные ЖХМС и ¹Н ЯМР согласовались с заданным продуктом.

Соединение 147 (2,31 г, 11 ммоль) растворили в безводном ДМФА (100 мл). Добавили N,N-диизопропилэтиламин (DIEA, 3,9 мл, 22 ммоль), затем HBTU (4 г, 10,5 ммоль). Реакционную смесь оставили перемешиваться в течение ~15 минут в атмосфере азота. К этой смеси добавили раствор соединения 105а (3,3 г, 7,4 ммоль) в сухом ДМФА и перемешивали в течение 2 часов в атмосфере азота. Реакционную смесь разбавили EtOAc и промыли насыщенным водным раствором NaHCO₃ и насыщенным солевым раствором. Органическую фазу отделили, высушили (MgSO₄), отфильтровали и концентрировали до оранжевого сиропообразного вещества. Неочищенный материал очистили колоночной хроматографией и элюировали 2-5% МеОН в CH₂Cl₂ с получением Соединения 148 (3,44 г, 73%). ЖХМС и ¹Н ЯМР согласовались с ожидаемым продуктом.

Соединение 148 (3,3 г, 5,2 ммоль) растворили в 1:1 МеОН/EtOAc (75 мл). Реакционную смесь очистили пропусканием потока аргона через раствор в течение 15 минут. Добавили катализатор Перлмана (гидроксид палладия на углероде) (350 мг). Через раствор продували газообразный водород в течение 30 минут. После завершения (ТСХ, 10% МеОН в ДХМ, и ЖХМС), катализатор удалили фильтрованием через слой целита. Фильтрат концентрировали на ротационном испарителе и быстро высушили под высоким вакуумом с получением Соединения 149 (2,6 г). Данные ЖХМС согласовались с заданным продуктом. Остаток растворили в сухом ДМФА (10 мл) и сразу использовали на следующей стадии.

Соединение 146 (0,68 г, 1,73 ммоль) растворили в сухом ДМФА (20 мл). К нему добавили DIEA (450 мкл, 2,6 ммоль, 1,5 экв.) и HBTU (1,96 г, 0,52 ммоль). Реакционную смесь оставили перемешиваться в течение 15 минут при комнатной температуре в атмосфере азота. Добавили раствор соединения 149 (2,6 г) в безводном ДМФА (10 мл). pH реакционной смеси довели до рН=9-10 добавлением DIEA (при необходимости). Реакционную смесь оставили перемешиваться в течение 2 часов при комнатной температуре в атмосфере азота. После завершения реакции смесь разбавили EtOAc (100 мл) и промыли насыщенным водным раствором NaHCO₃, затем насыщенным солевым раствором. Органическую фазу отделили, высушили над MgSO₄, отфильтровали и концентрировали. Остаток очистили силикагелевой колоночной хроматографией и элюировали 2-10% МеОН в CH₂Cl₂ с получением Соединения 150 (0,62 г, 20%). ЖХМС и ¹Н ЯМР согласовались с заданным продуктом.

Соединение 150 (0,62 г) растворили в 1:1 МеОН/EtOAc (5 л). Реакционную смесь очистили пропусканием потока аргона через раствор в течение 15 минут. Добавили катализатор Перлмана (гидроксид палладия на углероде) (60 мг). Через раствор продували газообразный водород в течение 30 минут. После завершения (ТСХ, 10% МеОН в ДХМ, и ЖХМС), катализатор удалили фильтрованием (тефлоновый фильтр с переходной канюлей шприца, 0,45 мкм). Фильтрат концентрировали на ротационном испарителе и быстро высушили под высоким вакуумом с получением Соединения 151 (0,57 г). Данные ЖХМС согласовались с заданным продуктом. Продукт растворили в 4 мл сухого ДМФА и сразу использовали на следующей стадии.

Соединение 83а (0,11 г, 0,33 ммоль) растворили в безводном ДМФА (5 мл) и добавили N,N-диизопропилэтиламин (75 мкл, 1 ммоль) и PFP-ТФК (90 мкл, 0,76 ммоль). При соприкосновении реакционная смесь стала пурпурной и постепенно изменила цвет на оранжевый в течение следующих 30 минут. Ход реакции контролировали по ТСХ и ЖХМС. После завершения (образования эфира PFP) добавили раствор соединения 151 (0,57 г, 0,33 ммоль) в ДМФА. pH реакционной смеси довели до рН=9-10 добавлением N,N-диизопропилэтиламина (при необходимости). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере азота в течение ~30 минут. После завершения реакции большую часть растворителя удалили при пониженном давлении. Остаток разбавили CH₂Cl₂ и промыли насыщенным водным раствором NaHCO₃, затем насыщенным солевым раствором. Органическую фазу отделили, высушили над MgSO₄, отфильтровали и концентрировали до оранжевого сиропообразного вещества. Остаток очистили колоночной хроматографией на силикагеле (2-10% МеОН в CH₂Cl₂) с получением Соединения 152 (0,35 г, 55%). ЖХМС и ¹Н ЯМР согласовались с заданным продуктом.

Соединение 152 (0,35 г, 0,182 ммоль) растворили в 1:1 МеОН/EtOAc (10 мл). Реакционную смесь очистили пропусканием потока аргона через раствор в течение 15 минут. Добавили катализатор Перлмана (гидроксид палладия на углероде) (35 мг). Через раствор продували газообразный водород в течение 30 минут. После завершения (ТСХ, 10% МеОН в ДХМ, и ЖХМС), катализатор удалили фильтрованием (тефлоновый фильтр с переходной канюлей шприца, 0,45 мкм). Фильтрат концентрировали на ротационном испарителе и быстро высушили под высоким вакуумом с получением Соединения 153 (0,33 г, количественно). Данные ЖХМС согласовались с заданным продуктом.

Соединение 153 (0,33 г, 0,18 ммоль) растворили в безводном ДМФА (5 мл) при перемешивании в атмосфере азота. К нему добавили N,N-диизопропилэтиламин (65 мкл, 0,37 ммоль) и PFP-ТФК (35 мкл, 0,28 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере азота в течение ~30 минут. При соприкосновении реакционная смесь стала пурпурной и постепенно изменила цвет на оранжевый. pH реакционной смеси поддерживали при рН=9-10 добавлением дополнительного количества N,N-диизопропилэтиламина. Ход реакции контролировали по ТСХ и ЖХМС. После завершения реакции большую часть растворителя удалили при пониженном давлении. Остаток разбавили СН₂Cl₂ (50 мл) и промыли насыщенным водным раствором NaHCO₃, затем насыщенным солевым раствором. Органический слой высушили над MgSO₄, отфильтровали и концентрировали до оранжевого сиропообразного вещества. Остаток очистили колоночной хроматографией и элюировали 2-10% МеОН в CH₂Cl₂ с получением Соединения 154 (0,29 г, 79%). ЖХМС и ¹Н ЯМР согласовались с заданным продуктом.

Олигомерное Соединение 155, содержащее группу конъюгата GalNAc₃-6, получили по общим способам, представленным в Примере 46. Кластерная часть GalNAc₃ группы конъюгата GalNAc₃-6 (GalNAc₃-6_a) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -P(=O)(OH)-A_d-P(=O)(OH)-.

Структура GalNAc₃-6 (GalNAc₃-6_a-CM-) представлена ниже:

Пример 52: Получение олигонуклеотида 160, содержащего GalNAc₃-9

Соединение 112 синтезировали по способу, описанному в литературе (J. Med. Chem. 2004, 47, 5798-5808).

Соединение 156 (18,60 г, 29,28 ммоль) растворили в метаноле (200 мл). Добавили палладий на углероде (6,15 г, загрузка 10 масс. % (в пересчете на сухое вещество), матрица из порошкообразного углерода, влажный). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере водорода в течение 18 часов. Реакционную смесь отфильтровали через слой целита и тщательно промыли слой целита метанолом. Объединенный фильтрат промыли и концентрировали досуха. Остаток очистили силикагелевой колоночной хроматографией и элюировали 5-10% метанола в дихлорметане с получением Соединения 157 (14,26 г, 89%). Масса m/z 544,1 [М-Н]^-.

Соединение 157 (5 г, 9,17 ммоль) растворили в безводном ДМФА (30 мл). Добавили HBTU (3,65 г, 9,61 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламин (13,73 мл, 78,81 ммоль) и перемешивали реакционную смесь при комнатной температуре в течение 5 минут. К нему добавили раствор соединения 47 (2,96 г, 7,04 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 8 часов. Реакционную смесь вылили в насыщенный водный раствор NaHCO₃. Смесь экстрагировали этилацетатом, а органический слой промыли насыщенным солевым раствором и высушили (Na₂SO₄), отфильтровали и выпарили. Полученный остаток очистили силикагелевой колоночной хроматографией и элюировали 50% этилацетатом в гексане с получением Соединения 158 (8,25 г, 73,3%). Структуру подтвердили анализом МС и ¹Н ЯМР.

Соединение 158 (7,2 г, 7,61 ммоль) высушили над P₂O₅ при пониженном давлении. Высушенное соединение растворили в безводном ДМФА (50 мл). К нему добавили 1Н-тетразол (0,43 г, 6,09 ммоль) и N-метилимидазол (0,3 мл, 3,81 ммоль), и цианоэтил-N,N,N',N'-тетраизопропил-фосфородиамидит (3,65 мл, 11,50 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере аргона в течение 4 часов. Реакционную смесь разбавили этилацетатом (200 мл). Реакционную смесь промыли насыщенным раствором NaHCO₃ и насыщенным солевым раствором. Органическую фазу отделили, высушили (Na₂SO₄), отфильтровали и выпарили. Остаток очистили силикагелевой колоночной хроматографией и элюировали 50-90% этилацетатом в гексане с получением Соединения 159 (7,82 г, 80,5%). Структуру подтвердили анализом ЖХМС и ³¹Р ЯМР.

Олигомерное соединение 160, содержащее группу конъюгата GalNAc₃-9, получили по стандартным способам синтеза олигонуклеотидов. Три единицы соединения 159 связали с твердой подложкой, затем с фосфорамидитами нуклеотидов. В результате обработки защищенного олигомерного соединения водным раствором аммиака получили соединение 160. Кластерная часть GalNAc₃ группы конъюгата GalNAc₃-9 (GalNAc₃-9_a) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -P(=O)(OH)-A_d-P(=O)(OH)-. Структура GalNAc₃-9 (GalNAc₃-9_a-CM) представлена ниже:

Пример 53: Альтернативный способ получения Соединения 18 (GalNAc₃-1a и GalNAc₃-3а)

Выполнили реакцию лактона 161 с диаминопропаном (3-5 экв.) или моно-Вос-защищинным диаминопропаном (1 экв.) с получением спирта 162а или 162b. При использовании для описанной выше реакции незащищенного пропандиамина, избыток диамина удалили выпариванием под высоким вакуумом, а свободную аминогруппу в 162а защитили при помощи CbzCl с получением 162b в виде белого твердого вещества после очистки колоночной хроматографией. Спирт 162b затем взаимодействовал с соединением 4 в присутствии TMSOTf с получением 163а, которое преобразовали в 163b путем снятия Cbz группы при помощи каталитического гидрирования. Пентафторфениловый (PFP) эфир 164 получили взаимодействием трехкислотного соединения 113 (см. Пример 48) с PFP-ТФК (3,5 экв.) и пиридином (3,5 экв.) в ДМФА (от 0,1 до 0,5 М). Триэфир 164 непосредственно взаимодействовал с амином 163b (3-4 экв.) и DIPEA (3-4 экв.) с получением Соединения 18. Представленный выше способ значительно облегчает очистку промежуточных соединений и минимизирует образование побочных продуктов, которые образуются при использовании способа, описанного в Примере 4.

Пример 54: Альтернативный способ получения Соединения 18 (GalNAc₃-1a и GalNAc₃-3а)

Три-PFP эфир 164 получили из кислоты 113 по способу, представленному выше в Примере 53, выполнили реакцию этого эфира с моно-Вос-защищенным диамином с получением 165 практически с количественным выходом. Boc группы сняли хлористоводородной кислотой или трифторуксусной кислотой с получением триамина, который взаимодействовал с активированной кислотой PFP 166 в присутствии подходящего основания, такого как DIPEA, с получением Соединения 18.

PFP-защищенную кислоту Gal-NAc 166 получили из соответствующей кислоты обработкой PFP-ТФК (1-1,2 экв.) и пиридином (1-1,2 экв.) в ДМФА. Кислоту-предшественник, в свою очередь, получили из соответствующего спирта окислением с использованием TEMPO (0,2 экв.) и BAIB в ацетонитриле и воде. Спирт-предшественник получили из сахарного промежуточного соединения 4 взаимодействием с 1,6-гександиолом (или 1,5-гександиолом или другим диолом для других значений n) (2-4 экв.) и TMSOTf, используя условия, описанные ранее в Примере 47.

Пример 55: Дозозависимое исследование олигонуклеотидов, содержащих либо 3', либо 5'-группу конъюгата (сравнение GalNAc₃-1, 3, 8 и 9), направленных на SRB-1, in vivo

Олигонуклеотиды, перечисленные ниже, испытали в дозозависимом исследовании антисмыслового ингибирования SRB-1 у мышей. Несопряженный ISIS 353382 включили в качестве стандарта. Каждая из различных групп конъюгата GalNAc₃ была присоединена либо к 3', либо к 5'-концу соответствующего олигонуклеотида при помощи фосфодиэфир-связанного 2'-дезоксиаденозинового нуклеозида (расщепляемый фрагмент).

Заглавные буквы указывают азотистое основание для каждого нуклеозида, а ^mC означает 5-метилцитозин. Нижние индексы: «е» означает 2'-МОЕ модифицированный нуклеозид; «d» означает β-D-2'-дезоксирибонуклеозид; «s» означает тиофосфатную межнуклеозидную связь (PS); «о» означает фосфодиэфирную межнуклеозидную связь (РО); и «o'» означает ОР(=O)(ОН)-. Группы конъюгата выделены жирным.

Структура GalNAc₃-1a показана ранее в Примере 9. Структура GalNAc₃-9 показана ранее в Примере 52. Структура GalNAc₃-3 показана ранее в Примере 39. Структура GalNAc₃-8 показана ранее в Примере 47.

Лечение

Шестинедельным самцам мышей Balb/c (Jackson Laboratory, Бар-Харбор, штат Мэн) ввели однократную подкожную инъекцию дозы, представленной ниже, соединения ISIS 353382, 655861, 664078, 661161, 665001 или солевого раствора. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Мышей усыпили через 72 часа после последнего введения для определения уровней мРНК SRB-1 в печени при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN® (Molecular Probes, Inc. Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней мРНК SRB-1 для каждой экспериментальной группы, нормализованных к контрольному образцу, обработанному солевым раствором.

Как показано в Таблице 40, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни мРНК SRB-1 дозозависимым образом. Действительно, антисмысловые олигонуклеотиды, содержащие фосфодиэфир-связанные конъюгаты GalNAc₃-1 и GalNAc₃-9 на 3'-конце (ISIS 655861 и ISIS 664078), а также конъюгаты GalNAc₃-3 и GalNAc₃-8, связанные на 5'-конце (ISIS 661161 и ISIS 665001) демонстрируют существенное улучшение эффективности, по сравнению с несопряженным антисмысловым олигонуклеотидом (ISIS 353382). Кроме того, ISIS 664078, содержащий конъюгат GalNAc₃-9 на 3'-конце, был по существу настолько же эффективным, как ISIS 655861, который содержит конъюгат GalNAc₃-1 на 3'-конце. 5'-сопряженные антисмысловые олигонуклеотиды, ISIS 661161 и ISIS 665001, содержащие GalNAc₃-3 или GalNAc₃-9, соответственно, обладают повышенной эффективностью, по сравнению с 3'-сопряженными антисмысловыми соединениями (ISIS 655861 и ISIS 664078).

Уровни трансаминазы в печени, аланин-аминотрансферазы (ALT) и аспартат-аминотрансферазы (AST) в сыворотке измеряли относительно мышей, инъецированных солевым раствором, используя стандартные протоколы. Оценили также общий билирубин и азот мочевины крови (АМК). Проверили изменение массы тела, которое существенно не отличалось от группы с солевым раствором. Значения ALT, AST, общего билирубина и АМК представлены ниже в таблице.

Пример 56: Дозозависимое исследование олигонуклеотидов, содержащих либо 3', либо 5'-группу конъюгата (сравнение GalNAc₃-1, 2, 3, 5, 6, 7 и 20), направленных на SRB-1, in vivo Олигонуклеотиды, перечисленные ниже, испытали в дозозависимом исследовании антисмыслового ингибирования SRB-1 у мышей. Несопряженный ISIS 353382 включили в качестве стандарта. Каждая из различных групп конъюгата GalNAc₃ была присоединена к 5'-концу соответствующего олигонуклеотида фосфодиэфир-связанным 2'-дезоксиаденозиновым нуклеозидом (расщепляемый фрагмент), за исключением ISIS 655861, в котором группа конъюгата GalNAc₃ присоединена к 3'-концу.

Заглавные буквы указывают азотистое основание для каждого нуклеозида, а ^mC означает 5-метилцитозин. Нижние индексы: «е» означает 2'-МОЕ модифицированный нуклеозид; «d» означает β-D-2'-дезоксирибонуклеозид; «s» означает тиофосфатную межнуклеозидную связь (PS); «о» означает фосфодиэфирную межнуклеозидную связь (РО); и «o'» означает ОР(=O)(ОН)-. Группы конъюгата выделены жирным.

Структура GalNAc₃-1_a показана ранее в Примере 9. Структура GalNAc₃-2_a показана ранее в Примере 37. Структура GalNAc₃-3_a показана ранее в Примере 39. Структура GalNAc₃-5_а показана ранее в Примере 49. Структура GalNAc₃-6_a показана ранее в Примере 51. Структура GalNAc₃-7_a показана в Примере 48. Структура GalNAc₃-10_a показана в Примере 46.

Лечение

Шестинедельным самцам мышей Balb/c (Jackson Laboratory, Бар-Харбор, штат Мэн) ввели однократную подкожную инъекцию дозы, представленной ниже, соединения ISIS 353382, 655861, 664507, 661161, 666224, 666961, 666981, 666881 или солевого раствора. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Мышей усыпили через 72 часа после последнего введения для определения уровней мРНК SRB-1 в печени при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN® (Molecular Probes, Inc. Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней мРНК SRB-1 для каждой экспериментальной группы, нормализованных к контрольному образцу, обработанному солевым раствором.

Как показано в Таблице 43, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни мРНК SRB-1 дозозависимым образом. Действительно, сопряженные антисмысловые олигонуклеотиды демонстрируют значительное усиление эффективности, по сравнению с несопряженным антисмысловым олигонуклеотидом (ISIS 353382). 5'-сопряженные антисмысловые олигонуклеотиды демонстрируют небольшое усиление эффективности, по сравнению с 3'-сопряженным антисмысловым олигонуклеотидом.

Уровни трансаминазы в печени, аланин-аминотрансферазы (ALT) и аспартат-аминотрансферазы (AST) в сыворотке измеряли относительно мышей, инъецированных солевым раствором, используя стандартные протоколы. Оценили также общий билирубин и азот мочевины крови (АМК). Проверили изменение массы тела, которое существенно не отличалось от группы с солевым раствором. Значения ALT, AST, общего билирубина и АМК представлены ниже в Таблице 44.

Пример 57: Исследование продолжительности действия олигонуклеотидов, содержащих 3'-группу конъюгата, направленных на АроС III, in vivo

Мышам однократно ввели инъекцию дозы, указанной ниже, и в течение 42 дней наблюдали уровни АроС-III и триглицеридов в плазме (TG в плазме). Исследование выполнили, используя в каждой группе 3 трансгенных мышей, которые экспрессируют человеческий АРОС-III.

Заглавные буквы указывают азотистое основание для каждого нуклеозида, а ^mC означает 5-метилцитозин. Нижние индексы: «е» означает 2'-МОЕ модифицированный нуклеозид; «d» означает β-D-2'-дезоксирибонуклеозид; «s» означает тиофосфатную межнуклеозидную связь (PS); «о» означает фосфодиэфирную межнуклеозидную связь (РО); и «o'» означает ОР(=O)(ОН)-. Группы конъюгата выделены жирным.

Структура GalNAc₃-1_a показана ранее в Примере 9.

Как можно видеть в представленной выше таблице, продолжительность действия увеличивается при добавлении 3'-группы конъюгата, по сравнению с несопряженным олигонуклеотидом. Дополнительное увеличение продолжительности действия наблюдали для смешанного сопряженного PO/PS олигонуклеотида 647536, по сравнению с сопряженным олигонуклеотидом 647535, содержащим только PS.

Пример 58: Дозозависимое исследование олигонуклеотидов, содержащих либо 3', либо 5'-группу конъюгата (сравнение GalNAc₃-1 и GalNAc₄-11), направленных на SRB-1, in vivo

Олигонуклеотиды, перечисленные ниже, испытали в дозозависимом исследовании антисмыслового ингибирования SRB-1 у мышей. Несопряженный ISIS 440762 включили в качестве несопряженного стандарта. Каждая из групп конъюгата была присоединена к 3'-концу соответствующего олигонуклеотида при помощи расщепляемого фрагмента фосфодиэфир-связанного 2'-дезоксиаденозинового нуклеозида.

Структура GalNAc₃-1_a показана ранее в Примере 9. Структура GalNAc₃-11_а показана ранее в Примере 50.

Лечение

Шестинедельным самцам мышей Balb/c (Jackson Laboratory, Бар-Харбор, штат Мэн) ввели однократную подкожную инъекцию дозы, представленной ниже, соединения ISIS 440762, 651900, 663748 или солевого раствора. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Мышей усыпили через 72 часа после последнего введения для определения уровней мРНК SRB-1 в печени при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN® (Molecular Probes, Inc. Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней мРНК SRB-1 для каждой экспериментальной группы, нормализованных к контрольному образцу, обработанному солевым раствором.

Как показано в Таблице 47, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни мРНК SRB-1 дозозависимым образом. Антисмысловые олигонуклеотиды, содержащие фосфодиэфир-связанные конъюгаты GalNAc₃-1 и GalNAc₄-11 на 3'-конце (ISIS 651900 и ISIS 663748), демонстрируют значительное усиление эффективности, по сравнению с несопряженным антисмысловым олигонуклеотидом (ISIS 440762). Эти два сопряженных олигонуклеотида, GalNAc₃-1 и GalNAc₄-11, были одинаково эффективными.

Заглавные буквы указывают азотистое основание для каждого нуклеозида, а ^mC означает 5-метилцитозин. Нижние индексы: «е» означает 2'-МОЕ модифицированный нуклеозид; «k» означает 6'-(S)-СН₃ бициклический нуклеозид; «d» означает β-D-2'-дезоксирибонуклеозид; «s» означает тиофосфатную межнуклеозидную связь (PS); «о» означает фосфодиэфирную межнуклеозидную связь (РО); и «o'» означает -O-Р(=O)(ОН)-. Группы конъюгата выделены жирным.

Уровни трансаминазы в печени, аланин-аминотрансферазы (ALT) и аспартат-аминотрансферазы (AST) в сыворотке измеряли относительно мышей, инъецированных солевым раствором, используя стандартные протоколы. Оценили также общий билирубин и азот мочевины крови (АМК). Проверили изменение массы тела, которое существенно не отличалось от группы с солевым раствором. Значения ALT, AST, общего билирубина и АМК представлены ниже в Таблице 48.

Пример 59: Действие CalNac₃-1-сопряженных ASO, направленных на FXI, in vivo

Олигонуклеотиды, перечисленные ниже, испытали в исследовании действия многократных нарастающих доз на антисмысловое ингибирование FXI у мышей. ISIS 404071 включили в качестве несопряженного стандарта. Каждая из групп конъюгата была присоединена к 3'-концу соответствующего олигонуклеотида при помощи расщепляемого фрагмента фосфодиэфир-связанного 2'-дезоксиаденозинового нуклеозида.

Заглавные буквы указывают азотистое основание для каждого нуклеозида, а ^mC означает 5-метилцитозин. Нижние индексы: «е» означает 2'-МОЕ модифицированный нуклеозид; «d» означает β-D-2'-дезоксирибонуклеозид; «s» означает тиофосфатную межнуклеозидную связь (PS); «о» означает фосфодиэфирную межнуклеозидную связь (РО); и «o'» означает ОР(=O)(ОН)-. Группы конъюгата выделены жирным.

Структура GalNAc₃-1_a показана ранее в Примере 9.

Лечение

Шестинедельным самцам мышей Balb/c (Jackson Laboratory, Бар-Харбор, штат Мэн) дважды в неделю в течение 3 недель вводили подкожную инъекцию дозы, представленной ниже, соединения ISIS 404071, 656172, 656173 или PBS в качестве контрольного образца.

Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Мышей усыпили через 72 часа после последнего введения для определения уровней мРНК FXI в печени при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN® (Molecular Probes, Inc. Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Измерили также уровни белка FXI в плазме при помощи твердофазного иммуноферментного анализа. Уровни мРНК FXI определяли относительно общей РНК (при помощи RIBOGREEN®), затем нормализовали к контрольному образцу, обработанному PBS. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней мРНК FXI для каждой экспериментальной группы. Результаты нормализовали к контрольному образцу, обработанному PBS, и обозначали как «% PBS». ED₅₀s измеряли по таким же способом, как описаны ранее, и указанные значения представлены ниже.

Как показано в Таблице 50, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни мРНК FXI дозозависимым образом. Олигонуклеотиды, содержащие группу конъюгата 3'-GalNAc₃-1, демонстрируют значительное усиление эффективности, по сравнению с несопряженным антисмысловым олигонуклеотидом (ISIS 404071). Между эти двумя сопряженными олигонуклеотидами дополнительное усиление эффективности было обеспечено за счет замены некоторых PS связей на РО (ISIS 656173)

Как показано в Таблице 50а, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни белка FXI дозозависимым образом. Олигонуклеотиды, содержащие группу конъюгата 3'-GalNAc₃-1, демонстрируют значительное усиление эффективности, по сравнению с несопряженным антисмысловым олигонуклеотидом (ISIS 404071). Между эти двумя сопряженными олигонуклеотидами дополнительное усиление эффективности было обеспечено за счет замены некоторых PS связей на РО (ISIS 656173)

Уровни трансаминазы в печени, аланин-аминотрансферазы (ALT) и аспартат-аминотрансферазы (AST) в сыворотке измеряли относительно мышей, инъецированных солевым раствором, используя стандартные протоколы. Оценили также общий билирубин, общий альбумин, CRE и азот мочевины крови (АМК). Проверили изменение массы тела, которое существенно не отличалось от группы с солевым раствором. Значения ALT, AST, общего билирубина и АМК представлены ниже в таблице.

Пример 60: Действие сопряженных ASO, направленных на SRB-1, in vitro

Олигонуклеотиды, перечисленные ниже, испытали в исследовании действия многократных нарастающих доз на антисмысловое ингибирование SRB-1 в первичных гепатоцитах мышей. ISIS 353382 включили в качестве несопряженного стандарта. Каждая из групп конъюгата была присоединена к 3' или 5'-концу соответствующего олигонуклеотида при помощи расщепляемого фрагмента фосфодиэфир-связанного 2'-дезоксиаденозинового нуклеозида.

Заглавные буквы указывают азотистое основание для каждого нуклеозида, а ^mC означает 5-метилцитозин. Нижние индексы: «е» означает 2'-МОЕ модифицированный нуклеозид; «d» означает β-D-2'-дезоксирибонуклеозид; «s» означает тиофосфатный межнуклеозидный линкер (PS); «о» означает фосфодиэфирный межнуклеозидный линкер (РО); и «o'» означает ОР(=O)(ОН)-. Группы конъюгата выделены жирным.

Структура GalNAc₃-1_a показана ранее в Примере 9. Структура GalNAc₃-3a показана ранее в Примере 39. Структура GalNAc₃-8a показана ранее в Примере 47. Структура GalNAc₃-9а показана ранее в Примере 52. Структура GalNAc₃-6a показана ранее в Примере 51. Структура GalNAc₃-2a показана ранее в Примере 37. Структура GalNAc₃-10a показана ранее в Примере 46. Структура GalNAc₃-5a показана ранее в Примере 49. Структура GalNAc₃-7a показана ранее в Примере 48.

Лечение

Олигонуклеотиды, перечисленные выше, испытывали in vitro в первичных гепатоцитарных клетках мышей, помещенных на планшеты при плотности 25000 клеток на лунку и обработанных 0,03, 0,08, 0,24, 0,74, 2,22, 6,67 или 20 нМ модифицированного олигонуклеотида. После обработки в течение приблизительно 16 часов, из клеток выделили РНК и измерили уровни мРНК при помощи количественной ПЦР в реальном времени, а уровни мРНК SRB-1 III скорректировали в соответствии с общим содержанием РНК, измеренным при помощи RIBOGREEN®.

IC₅₀ рассчитали по стандартным способам, а результаты представлены в Таблице 53. Результаты показывают, что при условиях свободного поглощения, в которых не использованы никакие реагенты или электроимпульсные приемы для искусственного ускорения входа олигонуклеотидов в клетки, олигонуклеотиды, содержащие конъюгат GalNAc, были существенно более эффективными в гепатоцитах, чем исходный олигонуклеотид (ISIS 353382), который не содержит конъюгат GalNAc.

^аСреднее для нескольких повторов.

Пример 61: Получение олигомерного соединения 175, содержащего GalNAc₃-12

Соединение 169 имеется в продаже. Соединение 172 получили добавлением бензил(перфторфенил)глутарата к соединению 171. Бензил(перфторфенил)глутарат получили добавлением PFP-ТФК и DIEA к 5-(бензилокси)-5-оксопентановой кислоте в ДМФА. Олигомерное Соединение 175, содержащее группу конъюгата GalNAc3-12, получили из соединения 174 по общим способам, представленным в Примере 46. Кластерная часть GalNAc₃ группы конъюгата GalNAc₃-12 (GalNAc₃-12_a) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -P(=O)(OH)-A_d-Р(=O)(ОН)-. Структура GalNAc₃-12 (GalNAc₃-12_a-CM-) представлена ниже:

Пример 62: Получение олигомерного соединения 180, содержащего GalNAc₃-13

Соединение 176 получили по общему способу, представленному в Примере 2. Олигомерное Соединение 180, содержащее группу конъюгата GalNAc3-13, получили из соединения 177 по общим способам, представленным в Примере 49. Кластерная часть GalNAc₃ группы конъюгата GalNAc₃-13 (GalNAc₃-13_a) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -P(=O)(OH)-A_d-P(=O)(OH)-. Структура GalNAc₃-13 (GalNAc₃-13_a-CM-) представлена ниже:

Пример 63: Получение олигомерного соединения 188, содержащего GalNAc₃-14

Соединения 181 и 185 имеются в продаже. Олигомерное Соединение 188, содержащее группу конъюгата CalNAc₃-14,получили из соединения 187 по общим способам, представленным в Примере 46. Кластерная часть GalNAc₃ группы конъюгата GalNAc₃-14 (GalNAc₃-14_a) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -P(=O)(OH)-A_d-P(=O)(OH)-. Структура GalNAc₃-14 (GalNAc₃-14_a-CM-) представлена ниже:

Пример 64: Получение олигомерного соединения 188, содержащего GalNAc₃-15

Соединение 189 имеется в продаже. Соединение 195 получили по общему способу, представленному в Примере 31. Олигомерное соединение 197, содержащее группу конъюгата GalNAc3-15, получили из соединений 194 и 195 по стандартным способам синтеза олигонуклеотидов. Кластерная часть GalNAc₃ группы конъюгата GalNAc₃-15 (GalNAc₃-15a) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -P(=O)(OH)-A_d-P(=O)(OH)-. Структура GalNAc₃-15 (GalNAc₃-15_a-CM-) представлена ниже:

Пример 65: Дозозависимое исследование олигонуклеотидов, содержащих 5'-группу конъюгата (сравнение GalNAc₃-3, 12, 13, 14 и 15), направленных на SRB-1, in vivo

Олигонуклеотиды, перечисленные ниже, испытали в дозозависимом исследовании антисмыслового ингибирования SRB-1 у мышей. Несопряженный ISIS 353382 включили в качестве стандарта. Каждая из групп конъюгата GalNAc₃ была присоединена к 5'-концу соответствующего олигонуклеотида при помощи расщепляемого фрагмента фосфодиэфир-связанного 2'-дезоксиаденозинового нуклеозида.

Заглавные буквы указывают азотистое основание для каждого нуклеозида, а ^mC означает 5-метилцитозин. Нижние индексы: «е» означает 2'-МОЕ модифицированный нуклеозид; «d» означает β-D-2'-дезоксирибонуклеозид; «s» означает тиофосфатный межнуклеозидный линкер (PS); «о» означает фосфодиэфирный межнуклеозидный линкер (РО); и «o'» означает ОР(=O)(ОН)-. Группы конъюгата выделены жирным.

Структура GalNAc₃-3_a показана ранее в Примере 39. Структура GalNAc₃-12a показана ранее в Примере 61. Структура GalNAc₃-13a показана ранее в Примере 62. Структура GalNAc₃-14а показана ранее в Примере 63. Структура GalNAc₃-15a показана ранее в Примере 64.

Лечение

Шести-восьминедельным мышам C57bl6 (Jackson Laboratory, Бар-Харбор, штат Мэн) один или два раза ввели подкожную инъекцию дозы, представленной ниже, соединения ISIS 353382, 661161, 671144, 670061, 671261, 671262 или солевого раствора. Мыши, которым вводили дозу два раза, вторую дозу вводили через три дня после первой дозы. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Мышей усыпили через 72 часа после последнего введения для определения уровней мРНК SRB-1 в печени при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN® (Molecular Probes, Inc. Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней мРНК SRB-1 для каждой экспериментальной группы, нормализованных к контрольному образцу, обработанному солевым раствором.

Как показано в Таблице 55, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни мРНК SRB-1 дозозависимым образом. Не наблюдали значительной разницы нокдауна мишени между животными, получавшими одну дозу, и животными, получавшими две дозы (см. ISIS 353382 в дозах 30 и 2 × 15 мг/кг; и ISIS 661161 в дозах 5 и 2 × 2,5 мг/кг). Антисмысловые олигонуклеотиды, содержащие фосфодиэфир-связанные конъюгаты GalNAc₃-3, 12, 13, 14 и 15, демонстрируют существенное усиление эффективности, по сравнению с несопряженным антисмысловым олигонуклеотидом (ISIS 335382).

мРНК SRB-1 (% от солевого раствора)

Уровни трансаминазы в печени, аланин-аминотрансферазы (ALT) и аспартат-аминотрансферазы (AST) в сыворотке измеряли относительно мышей, инъецированных солевым раствором, используя стандартные протоколы. Оценили также общий билирубин и азот мочевины крови (АМК). Проверили изменение массы тела, которое существенно не отличалось от группы с солевым раствором (данные не показаны). Значения ALT, AST, общего билирубина и АМК представлены ниже в Таблице 56.

Пример 66: Влияние различных расщепляемых фрагментов на антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, направленных на SRB-1, содержащих кластер 5'-GalNAc₃

Олигонуклеотиды, перечисленные ниже, испытали в дозозависимом исследовании антисмыслового ингибирования SRB-1 у мышей. Каждая из групп конъюгата GalNAc₃ была присоединена к 5'-концу соответствующего олигонуклеотида при помощи фосфодиэфир-связанного нуклеозида (расщепляемый фрагмент (СМ)).

Заглавные буквы указывают азотистое основание для каждого нуклеозида, а ^mC означает 5-метилцитозин. Нижние индексы: «е» означает 2'-МОЕ модифицированный нуклеозид; «d» означает β-D-2'-дезоксирибонуклеозид; «s» означает тиофосфатный межнуклеозидный линкер (PS); «о» означает фосфодиэфирный межнуклеозидный линкер (РО); и «o'» означает ОР(=O)(ОН)-. Группы конъюгата выделены жирным.

Структура GalNAc₃-3a показана ранее в Примере 39. Структура GalNAc₃-13a показана ранее в Примере 62.

Лечение

Шести-восьминедельным мышам C57bl6 (Jackson Laboratory, Ббар-Харбор, штат Мэн) ввели однократную подкожную инъекцию дозы, представленной ниже, соединения ISIS 661161, 670699, 670700, 670701, 671165 или солевого раствора. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Мышей усыпили через 72 часа после последнего введения для определения уровней мРНК SRB-1 в печени при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN® (Molecular Probes, Inc. Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней мРНК SRB-1 для каждой экспериментальной группы, нормализованных к контрольному образцу, обработанному солевым раствором.

Как показано в Таблице 58, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни мРНК SRB-1 дозозависимым образом. Все антисмысловые олигонуклеотиды, содержащие различные расщепляемые фрагменты, демонстрируют одинаковую эффективность.

Уровни трансаминазы в печени, аланин-аминотрансферазы (ALT) и аспартат-аминотрансферазы (AST) в сыворотке измеряли относительно мышей, инъецированных солевым раствором, используя стандартные протоколы. Оценили также общий билирубин и азот мочевины крови (АМК). Проверили изменение массы тела, которое существенно не отличалось от группы с солевым раствором (данные не показаны). Значения ALT, AST, общего билирубина и АМК представлены ниже в Таблице 56.

Пример 67: Получение олигомерного соединения 199, содержащего GalNAc₃-16

Олигомерное Соединение 199, содержащее группу конъюгата GalNAc₃-16, получили по общим способам, представленным в Примерах 7 и 9. Кластерная часть GalNAc₃ группы конъюгата GalNAc₃-16 (GalNAc₃-16a) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -P(=O)(OH)-A_d-P(=O)(OH)-. Структура GalNAc₃-16 (GalNAc₃-16_а-СМ-) представлена ниже:

Пример 68: Получение олигомерного соединения 200, содержащего GalNAc₃-17

Олигомерное Соединение 200, содержащее группу конъюгата GalNAc₃-17, получили по общим способам, представленным в Примере 46. Кластерная часть GalNAc₃ группы конъюгата GalNAc₃-17 (GalNAc₃-17_a) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -P(=O)(OH)-A_d-P(=O)(OH)-. Структура GalNAc₃-17 (GalNAc₃-17_а-СМ-) представлена ниже:

Пример 69: Получение олигомерного соединения 201, содержащего GalNAc₃-18

1

Олигомерное Соединение 201, содержащее группу конъюгата GalNAc₃-18, получили по общим способам, представленным в Примере 46. Кластерная часть GalNAc₃ группы конъюгата GalNAc₃-18 (GalNAc₃-18_a) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -Р(=O)(ОН)-A_d-Р(=O)(ОН)-. Структура GalNAc₃-18 (GalNAc₃-18_а-СМ-) представлена ниже:

Пример 70: Получение олигомерного соединения 204, содержащего GalNAc₃-19

Олигомерное Соединение 204, содержащее группу конъюгата GalNAc₃-19, получили из соединения 64 по общим способам, представленным в Примере 52. Кластерная часть GalNAc3 группы конъюгата GalNAc₃-19 (GalNAc₃-19_a) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -Р(=O)(ОН)-A_d-Р(=O)(ОН)-. Структура GalNAc₃-19 (GalNAc₃-19_a-CM-) представлена ниже:

Пример 71: Получение олигомерного соединения 210, содержащего GalNAc₃-20

Соединение 205 получили добавлением PFP-ТФК и DIEA к 6-(2,2,2-трифторацетамидо)гексановой кислоте в ацетонитриле, которую получили добавлением трифторуксусного ангидрида к 6-аминогексановой кислоте. Реакционную смесь нагрели до 80°С, затем охладили до комнатной температуры. Олигомерное Соединение 210, содержащее группу конъюгата GalNAc₃-20, получили из соединения 208 по общим способам, представленным в Примере 52. Кластерная часть GalNAc₃ группы конъюгата GalNAc₃-20 (GalNAc₃-20_a) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -P(=O)(OH)-A_d-P(=O)(OH)-. Структура GalNAc₃-20 (GalNAc₃-20_a-CM-) представлена ниже:

Пример 72: Получение олигомерного соединения 215, содержащего GalNAc₃-21

Соединение 211 имеется в продаже. Олигомерное Соединение 215, содержащее группу конъюгата GalNAc₃-21, по лучили из соединения 213 по общим способам, представленным в Примере 52. Кластерная часть GalNAc₃ группы конъюгата GalNAc₃-21 (GalNAc₃-21_a) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -P(=O)(OH)-A_d-P(=O)(OH)-. Структура GalNAc₃-21 (GalNAc₃-21_a-CM-) представлена ниже:

Пример 73: Получение олигомерного соединения 221, содержащего GalNAc₃-22

Соединение 220 получили из соединения 219, используя тетразолид диизопропиламмония. Олигомерное Соединение 221, содержащее группу конъюгата GalNAc₃-21, получили из соединения 220 по общим способам, представленным в Примере 52. Кластерная часть GalNAc₃ группы конъюгата GalNAc₃-22 (GalNAc₃-22_a) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации расщепляемый фрагмент представляет собой -P(=O)(OH)-A_d-P(=O)(OH)-. Структура GalNAc₃-22 (GalNAc₃-22_a-CM-) представлена ниже:

Пример 74: Влияние различных расщепляемых фрагментов на антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, направленных на SRB-1, содержащих кластер 5'-GalNAc₃

Олигонуклеотиды, перечисленные ниже, испытали в дозозависимом исследовании антисмыслового ингибирования SRB-1 у мышей. Каждая из групп конъюгата GalNAc₃ была присоединена к 5'-концу соответствующего олигонуклеотида.

Во всех таблицах заглавные буквы указывают азотистое основание для каждого нуклеозида, а ^mC означает 5-метилцитозин. Нижние индексы: «е» означает 2'-МОЕ модифицированный нуклеозид; «d» означает β-D-2'-дезоксирибонуклеозид; «s» означает тиофосфатный межнуклеозидный линкер (PS); «о» означает фосфодиэфирный межнуклеозидный линкер (РО); и «o'» означает ОР(=O)(ОН)-. Группы конъюгата выделены жирным.

Структура GalNAc₃-3_a показана ранее в Примере 39. Структура GalNAc₃-17a показана ранее в Примере 68, а структура GalNAc₃-18a показана в Примере 69.

Лечение

Шести-восьминедельным мышам C57BL/6 (Jackson Laboratory, Бар-Харбор, штат Мэн) ввели однократную подкожную инъекцию дозы, представленной ниже, олигонуклеотида, перечисленного в Таблице 60, или солевого раствора. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Мышей усыпили через 72 часа после последнего введения для определения уровней мРНК SRB-1 при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN® (Molecular Probes, Inc. Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней мРНК SRB-1 для каждой экспериментальной группы, нормализованных к контрольному образцу, обработанному солевым раствором.

Как показано в Таблице 61, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни мРНК SRB-1 дозозависимым образом. Антисмысловые олигонуклеотиды, содержащие конъюгат GalNAc, демонстрируют равные эффективности и являются значительно более эффективными, чем исходный олигонуклеотид, не имеющий конъюгата GalNAc.

Уровни трансаминазы в печени, аланин-аминотрансферазы (ALT) и аспартат-аминотрансферазы (AST) в сыворотке измеряли относительно мышей, инъецированных солевым раствором, используя стандартные протоколы. Оценили также общий билирубин и азот мочевины крови (АМК). Проверили изменение массы тела, которое существенно не отличалось от группы с солевым раствором (данные не показаны). Значения ALT, AST, общего билирубина и АМК представлены ниже в Таблице 62.

Пример 75: Фармакокинетический анализ олигонуклеотидов, содержащих 5'-группу конъюгата

ФК ASO, представленных выше в Таблицах 54, 57 и 60, оценили с использованием образцов печени, которые получили после выполнения способов лечения, описанных в Примерах 65, 66 и 74. Образцы печени измельчили и экстрагировали по стандартным протоколам, и анализировали при помощи ИП-ВЭЖХ-МС вместе с внутренним стандартом. Суммарный уровень (мкг/г) всех метаболитов в ткани измерили интегрированием соответствующих УФ пиков, а уровни в ткани ASO полной длины, не содержащих конъюгата («исходное», в данном случае Isis №353382), измерили с использованием подходящих ион-экстракционных хроматограмм (EIC).

Результаты, представленные выше в Таблице 63, демонстрируют, что наблюдали более высокие уровни в печени олигонуклеотидов, содержащих группу конъюгата GalNAc₃, чем исходного олигонуклеотида, не содержащего группу конъюгата GalNAc₃ (ISIS 353382) через 72 часа после введения олигонуклеотида, особенно с учетом введения различных доз для олигонуклеотидов с группой конъюгата GalNAc₃ и без нее. Кроме того, через 72 часа 40-98% каждого олигонуклеотида, содержащего группу конъюгата GalNAc₃, было метаболизировано до исходного соединения, что указывает на то, что группы конъюгата GalNAc₃ расщепляются в указанных олигонуклеотидах.

Пример 76: Получение олигомерного соединения 230, содержащего GalNAc₃-23

Соединение 222 имеется в продаже. 44,48 мл (0,33 моль) соединения 222 обрабатывали тозилхлоридом (25,39 г, 0,13 моль) в пиридине (500 мл) в течение 16 часов. Затем реакционную смесь выпарили до маслянистого вещества, растворили в EtOAc и промыли водой, насыщенным раствором NaHCO₃, насыщенным солевым раствором и высушили над Na₂SO₄. Этилацетат концентрировали досуха и очистили колоночной хроматографией, элюировали EtOAc в гексанах (1:1), затем 10% метанола в CH₂Cl₂ с получением соединения 223 в виде бесцветного маслянистого вещества. Данные ЖХМС и ЯМР согласовались с указанной структурой. 10 г (32,86 ммоль) 1-тозилтриэтиленгликоля (соединение 223) обрабатывали азидом натрия (10,68 г, 164,28 ммоль) в ДМСО (100 мл) при комнатной температуре в течение 17 часов. Затем реакционную смесь вылили в воду и экстрагировали EtOAc. Органический слой три раза промыли водой и высушили над Na₂SO₄. Органический слой концентрировали досуха с получением 5,3 г соединения 224 (92%). Данные ЖХМС и ЯМР согласовались с указанной структурой. 1-Азидотриэтиленгликоль (соединение 224, 5,53 г, 23,69 ммоль) и соединение 4 (6 г, 18,22 ммоль) обработали 4А молекулярными ситами (5 г) и TMSOTf (1,65 мл, 9,11 ммоль) в дихлорметане (100 мл) под инертной атмосферой. Через 14 часов реакционную смесь отфильтровали для удаления сит, а органический слой промыли насыщенным раствором NaHCO₃, водой, насыщенным солевым раствором и высушили над Na₂SO₄. Органический слой концентрировали досуха и очистили колоночной хроматографией, элюировали градиентом от 2 до 4% метанола в дихлорметане с получением соединения 225. Данные ЖХМС и ЯМР согласовались с указанной структурой. Соединение 225 (11,9 г, 23,59 ммоль) гидрировали в EtOAc/метаноле (4:1, 250 мл) на катализаторе Перлмана. Через 8 часов катализатор удалили фильтрованием, а растворители удалили досуха с получением соединения 226. Данные ЖХМС и ЯМР согласовались с указанной структурой.

Для получения соединения 227 раствор нитрометантриспропионовой кислоты (4,17 г, 15,04 ммоль) и основание Хюнига (10,3 мл, 60,17 ммоль) в ДМФА (100 мл) по каплям обработали пентафтортрифторацетатом (9,05 мл, 52,65 ммоль). Через 30 минут реакционную смесь вылили в ледяную воду и экстрагировали EtOAc. Органический слой промыли водой, насыщенным солевым раствором и высушили над Na₂SO₄. Органический слой концентрировали досуха, а затем перекристаллизовали из гептана с получением соединения 227 в виде белого твердого вещества. Данные ЖХМС и ЯМР согласовались с указанной структурой. Соединение 227 (1,5 г, 1,93 ммоль) и соединение 226 (3,7 г, 7,74 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в ацетонитриле (15 мл) в течение 2 часов. Затем реакционную смесь выпарили досуха и очистили колоночной хроматографией, элюируя градиентом от 2 до 10% метанола в дихлорметане, с получением соединения 228. Данные ЖХМС и ЯМР согласовались с указанной структурой. Соединение 228 (1,7 г, 1,02 ммоль) обработали никелем Ренея (примерно 2 г, влажный) в этаноле (100 мл) в атмосфере водорода. Через 12 часов катализатор удалили фильтрованием, а органический слой выпарили до твердого вещества, которое использовали непосредственно на следующей стадии. Данные ЖХМС и ЯМР согласовались с указанной структурой. Это твердое вещество (0,87 г, 0,53 ммоль) обработали бензилглутаровой кислотой (0,18 г, 0,8 ммоль), HBTU (0,3 г, 0,8 ммоль) и DIEA (273,7 мкл, 1,6 ммоль) в ДМФА (5 мл). Через 16 часов ДМФА удалили при пониженном давлении при 65°С до маслянистого вещества, и это маслянистое вещество растворили в дихлорметане. Органический слой промыли насыщенным раствором NaHCO₃, насыщенным солевым раствором и высушили над Na₂SO₄. После выпаривания органического слоя соединение очистили колоночной хроматографией и элюировали градиентом от 2 до 20% метанола в дихлорметане с получением связанного продукта. Данные ЖХМС и ЯМР согласовались с указанной структурой. С бензилового эфира сняли защиту на катализаторе Перлмана в атмосфере водорода в течение 1 часа. Затем катализатор удалили фильтрованием, а растворители удалили досуха с получением кислоты. Данные ЖХМС и ЯМР согласовались с указанной структурой. Эту кислоту (486 мг, 0,27 ммоль) растворили в сухом ДМФА (3 мл). Добавили пиридин (53,61 мкл, 0,66 ммоль) и продули реакционную смесь аргоном. К реакционной смеси медленно добавили пентафтортрифторацетат (46,39 мкл, 0,4 ммоль). Цвет реакционной смеси изменился с бледно-желтого на винный, и появился легкий дымок, который улетучился с потоком аргона. Реакционную смесь оставили перемешиваться при комнатной температуре на один час (завершение реакции подтвердили по ЖХМС). Растворитель удалили при пониженном давлении (ротационный испаритель) при 70°С. Остаток разбавили ДХМ и промыли 1 н. NaHSO₄, насыщенным солевым раствором, насыщенным раствором бикарбоната натрия и снова насыщенным солевым раствором. Органический слой высушили над Na₂SO₄, отфильтровали и концентрировали досуха с получением 225 мг соединения 229 в виде хрупкой желтой пены. Данные ЖХМС и ЯМР согласовались с указанной структурой.

Олигомерное Соединение 230, содержащее группу конъюгата GalNAc₃-23, получили из соединения 229 по общим способам, представленным в Примере 46. Кластерная часть GalNAc3 группы конъюгата GalNAc₃-23 (GalNAc₃-23_a) может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом с получением различных групп конъюгата. Структура GalNAc₃-23 (GalNAc₃-23_a-CM) представлена ниже:

Пример 77: Антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, направленных на SRB-1, содержащих конъюгат GalNAc₃

Олигонуклеотиды, перечисленные ниже, испытали в дозозависимом исследовании антисмыслового ингибирования SRB-1 у мышей.

Структура GalNAc₃-1_a показана ранее в Примере 9, GalNAc₃-3_a показана в Примере 39, GalNAc₃-9a показана в Примере 52, GalNAc₃-10a показана в Примере 46, GalNAc₃-19 а показана в Примере 70, GalNAc₃-20_a показана в Примере 71, и GalNAc₃-23_a показана в Примере 76.

Лечение

Шести-восьминедельным мышам C57BL/6 (Jackson Laboratory, Бар-Харбор, штат Мэн) ввели однократную подкожную инъекцию дозы, представленной ниже, олигонуклеотида, перечисленного в Таблице 64, или солевого раствора. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Мышей усыпили через 72 часа после последнего введения для определения уровней мРНК SRB-1 при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN® (Molecular Probes, Inc. Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней мРНК SRB-1 для каждой экспериментальной группы, нормализованных к контрольному образцу, обработанному солевым раствором.

Как показано в Таблице 65, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни мРНК SRB-1 дозозависимым образом.

Измерили также уровни трансаминазы в печени, аланин-аминотрансферазы (ALT) и аспартат-аминотрансферазы (AST) в сыворотке, используя стандартные протоколы. Оценили также общий билирубин и азот мочевины крови (АМК). Проверили изменение массы тела, которое существенно не отличалось от группы с солевым раствором (данные не показаны). Значения ALT, AST, общего билирубина и АМК представлены ниже в Таблице 66.

Пример 78: Антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, направленных на ангиотензиноген, содержащих конъюгат GalNAc₃

_{Олигонуклеотиды, перечисленные ниже, испытали в дозозависимом исследовании антисмыслового ингибирования ангиотензиногена (AGT) у нормотензивных мышей Спрага-Доули.}

Структура GalNAc₃-1_a показана ранее в Примере 9.

Лечение

Шестинедельным самцам крыс Спрага-Доули один раз в неделю вводили подкожную инъекцию дозы, представленной ниже, в целом три дозы олигонуклеотида, перечисленного в Таблице 67, или PBS. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Крыс усыпили через 72 часа после последней дозы. Уровни мРНК AGT в печени измерили при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN® (Molecular Probes, Inc., Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Уровни белка AGT в плазме измерили при помощи твердофазного иммуноферментного анализа для определения общего ангиотензиногена (кат. № JP 27412, IBL International, Торонто, штат Онтарио) с разбавлением плазмы 1:20000. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент от уровней мРНК AGT в печени или от уровней белка AGT в плазме для каждой экспериментальной группы, нормализованных к контрольному образцу с PBS.

Как показано в Таблице 68, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни мРНК AGT в печени и уровни белка в плазме дозозависимым образом, и олигонуклеотид, содержащий конъюгат GalNAc, был значительно более эффективным, чем исходный олигонуклеотид, не содержащий конъюгата GalNAc.

Измерили также уровни трансаминазы в печени, аланин-аминотрансферазы (ALT) и аспартат-аминотрансферазы (AST) в плазме, а также массу тела в момент усыпления, используя стандартные протоколы. Результаты представлены ниже в Таблице 69.

Пример 79: Продолжительность действия in vivo олигонуклеотидов, направленных на АРОС-III, содержащих конъюгат GalNAc₃

Олигонуклеотиды, перечисленные ниже в Таблице 70, испытали в исследовании однократной дозы на продолжительность действия у мышей.

Структура GalNAc₃-1_a показана ранее в Примере 9, GalNAc₃-3_a показана в Примере 39, GalNAc₃-7_a показана в Примере 48, GalNAc₃-10_a показана в Примере 46, и GalNAc₃-13_a показана в Примере 62.

Лечение

Шести-восьминедельным трансгенным мышам, экспрессирующим человеческий АРОС-III, ввели однократную подкожную инъекцию олигонуклеотида, перечисленного в Таблице 70, или PBS. Каждая экспериментальная группа состояла из 3 животных. Образцы крови брали до введения дозы для определения исходного значения, а также через 72 часа, 1 неделю, 2 недели, 3 недели, 4 недели, 5 недель и 6 недель после введения дозы. Уровни триглицеридов и белка АРОС-III в плазме измеряли так, как описано в Примере 20. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент от уровней триглицеридов и АРОС-III в плазме для каждой экспериментальной группы, нормализованных и исходным значениям, и они демонстрируют, что олигонуклеотиды, содержащие группу конъюгата GalNAc, обладают более продолжительным действием, чем исходный олигонуклеотид, не содержащий группу конъюгата (ISIS 304801) даже несмотря на то, что доза исходного соединения была в три раза выше, чем доза олигонуклеотидов, содержащих группу конъюгата GalNAc.

Пример 80: Антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, направленных на альфа-1 антитрипсин (А1АТ), содержащих конъюгат GalNAc₃

Олигонуклеотиды, перечисленные ниже в Таблице 72, испытали в исследовании дозозависимого ингибирования А1АТ у мышей.

Структура GalNAc₃-1_a показана ранее в Примере 9, GalNAc₃-3_a показана в Примере 39, GalNAc₃-7_a показана в Примере 48, GalNAc₃-10_a показана в Примере 46, и GalNAc₃-13_a показана в Примере 62.

Лечение

Шестинедельным самцам мышей C57BL/6 (Jackson Laboratory, Бар-Харбор, штат Мэн) один раз в неделю вводили подкожную инъекцию дозы, представленной ниже, в целом три дозы олигонуклеотида, перечисленного в Таблице 72, или PBS. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Мышей усыпили через 72 часа после последнего введения. Уровни мРНК А1АТ в печени определили при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN® (Molecular Probes, Inc., Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Уровни белка А1АТ в плазме определили при помощи твердофазного иммуноферментного анализа для определения мышиного альфа 1-антитрипсина (кат. №41-A1AMS-E01, Alpco, Салем, штат Нью-Гэмпшир). Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней мРНК А1АТ в печени и белка в плазме для каждой экспериментальной группы, нормализованных к контрольному образцу с PBS.

Как показано в Таблице 73, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни мРНК А1АТ в печени и уровни белка А1АТ в плазме дозозависимым образом. Олигонуклеотиды, содержащие конъюгат GalNAc, были значительно более эффективными, чем исходное соединение (ISIS 476366).

Во время усыпления измерили уровни трансаминазы в печени и АМК в плазме по стандартным протоколам. Измерили также массы тела и массы органов. Результаты представлены ниже в Таблице 74. Масса тела представлена как % относительно исходного значения. Массы органов представлены как % от массы тела относительно контрольной группы с PBS.

Пример 81: Продолжительность действия in vivo олигонуклеотидов, направленных на А1АТ, содержащих кластер GalNAc₃

Олигонуклеотиды, перечисленные в Таблице 72, испытали в исследовании однократной дозы на продолжительность действия у мышей.

Лечение

Шестинедельным самцам мышей C57BL/6 ввели однократную подкожную инъекцию олигонуклеотида, перечисленного в Таблице 72, или PBS. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Образцы крови брали за день до введения дозы для определения исходного значения, а также на 5, 12, 19 и 25 день после введения дозы. Уровни белка А1АТ в плазме измерили при помощи твердофазного иммуноферментного анализа (см. Пример 80). Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней белка А1АТ в плазме для каждой экспериментальной группы, нормализованных к исходным уровням. Результаты демонстрируют, что олигонуклеотиды, содержащие конъюгат GalNAc, были более эффективными и имели более продолжительное действие, чем исходное соединение без конъюгата GalNAc (ISIS 476366). Кроме того, олигонуклеотиды, содержащие 5'-GalNAc конъюгат (ISIS 678381, 678382, 678383 и 678384), были, в целом, еще более эффективными с еще более продолжительным действием, чем олигонуклеотид, содержащий 3'-GalNAc конъюгат (ISIS 656326).

Пример 82: Антисмысловое ингибирование in vitro под действием олигонуклеотидов, направленных на SRB-1, содержащих конъюгат GalNAc₃

Первичные гепатоциты печени мышей высеивали в 96-луночные планшеты при 15000 клеток на лунку за 2 часа до обработки. Олигонуклеотиды, перечисленные в Таблице 76, добавили в концентрации 2, 10, 50 или 250 нМ в среде Уильяма Е, и инкубировали клетки в течение ночи при 37°С в 5% СО₂. Клетки лизировали через 16 часов после добавления олигонуклеотида, а общую РНК очистили при помощи RNease 3000 BioRobot (Qiagen). Уровни мРНК SRB-1 определили при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN® (Molecular Probes, Inc., Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Значения IC₅₀ определили при помощи программы Prism 4 (GraphPad). Результаты демонстрируют, что олигонуклеотиды, содержащие множество различных групп конъюгата GalNAc и множество различных расщепляемых фрагментов, являются значительно более эффективными в in vitro эксперименте свободного поглощения, чем исходные олигонуклеотиды, не содержащие группу конъюгата GalNAc (ISIS 353382 и 666841).

Структура GalNAc₃-1 а показана ранее в примере 9, GalNAc₃-3_a показана в примере 39, GalNAc₃-5_а показана в примере 49, GalNAc₃-6_a показана в примере 51, GalNAc₃-7_а показана в примере 48, GalNAc₃-8_a показана в примере 47, GalNAc₃-9_a показана в примере 52, GalNAc₃-10_а показана в примере 46, GalNAc₃-12_a показана в примере 61, GalNAc₃-13_a показана в примере 62, GalNAc₃-14_a показана в примере 63, GalNAc₃-15_a показана в примере 64, GalNAc₃-17_a показана в примере 68, GalNAc₃-18_a показана в примере 69, GalNAc₃-19_a показана в примере 70, GalNAc₃-20_a показана в примере 71, и GalNAc₃-23_a показана в примере 76.

Пример 83: Антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, направленных на фактор XI, содержащих кластер GalNAc₃

Олигонуклеотиды, перечисленные ниже в Таблице 77, испытали в исследовании дозозависимого ингибирования фактора XI у мышей.

Структура GalNAc₃-1_a показана ранее в Примере 9, GalNAc₃-3_a показана в Примере 39, GalNAc₃-7_a показана в Примере 48, GalNAc₃-10_a показана в Примере 46, и GalNAc₃-13_a показана в Примере 62.

Лечение

Шести-восьминедельным мышам один раз в неделю вводили подкожную инъекцию дозы, представленной ниже, в целом три дозы олигонуклеотида, перечисленного ниже, или PBS. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Мышей усыпили через 72 часа после последней дозы. Уровни мРНК фактора XI в печени измерили при помощи ПЦР в реальном времени и нормализовали к циклофилину по стандартным протоколам. Измерили также трансаминазы в печени, АМК и билирубин. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент для каждой экспериментальной группы, нормализованный к контролю с PBS.

Как показано в Таблице 78, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни мРНК фактора XI в печени дозозависимым образом. Результаты демонстрируют, что олигонуклеотиды, содержащие конъюгат GalNAc, были более эффективными, чем исходное соединение без конъюгата GalNAc (ISIS 404071). Кроме того, олигонуклеотиды, содержащие 5'-GalNAc конъюгат (ISIS 663086, 678347, 678348 и 678349), были еще более эффективными, чем олигонуклеотид, содержащий 3'-GalNAc конъюгат (ISIS 656173).

Пример 84: Продолжительность действия in vivo олигонуклеотидов, направленных на фактор XI, содержащих конъюгат GalNAc₃

Олигонуклеотиды, перечисленные в Таблице 77, испытали в исследовании однократной дозы на продолжительность действия у мышей.

Лечение

Шести-восьминедельным мышам ввели однократную подкожную инъекцию олигонуклеотида, перечисленного в Таблице 77, или PBS. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Образцы крови брали из хвостовой вены за день до введения дозы для определения исходного значения, а также на 3, 10 и 17 день после введения дозы. Уровни белка фактора XI в плазме определяли твердофазным иммуноферментным анализом, используя иммобилизованные и биотинилированные детекторные антитела для фактора XI производства R&D Systems, Миннеаполис, штат Миннесота (кат.№AF2460 и №BAF2460, соответственно), а также реагент OptEIA, набор В (кат. №550534, BD Biosciences, Сан-Хосе, штат Калифорния). Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней белка фактора XI в плазме для каждой экспериментальной группы, нормализованных к исходным уровням. Результаты демонстрируют, что олигонуклеотиды, содержащие конъюгат GalNAc, были более эффективными и имели более продолжительное действие, чем исходное соединение без конъюгата GalNAc (ISIS 404071). Кроме того, олигонуклеотиды, содержащие 5'-GalNAc конъюгат (ISIS 663086, 678347, 678348 и 678349), были еще более эффективными с еще более продолжительным действием, чем олигонуклеотид, содержащий 3'-GalNAc конъюгат (ISIS 656173).

Пример 85: Антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, направленных на SRB-1, содержащих конъюгат GalNAc₃

Олигонуклеотиды, перечисленные в Таблице 76, испытали в дозозависимом исследовании антисмыслового ингибирования SRB-1 у мышей.

Лечение

Шести-восьминедельным мышам C57BL/6 один раз в неделю вводили подкожную инъекцию дозы, представленной ниже, в целом три дозы олигонуклеотида, перечисленного в Таблице 76, или солевого раствора. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Мышей усыпили через 48 часов после последнего введения для определения уровней мРНК SRB-1 при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN® (Molecular Probes, Inc. Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней мРНК SRB-1 в печени для каждой экспериментальной группы, нормализованных к контрольному образцу, обработанному солевым раствором.

Как показано в Таблицах 80 и 81, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни мРНК SRB-1 дозозависимым образом.

Измерили также уровни трансаминазы в печени, общего билирубина, АМК и массы тела по стандартным протоколам. Средние значения для каждой экспериментальной группы представлены ниже в Таблице 82.

Пример 86: Антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, направленных на TTR, содержащих кластер GalNAc₃

Олигонуклеотиды, перечисленные ниже в Таблице 83, испытали в дозозависимом исследовании антисмыслового ингибирования человеческого транстиретина (TTR) у трансгенных мышей, экспрессирующих человеческий TTR ген.

Лечение

Восьминедельным TTR трансгенным мышам один раз в неделю в течение трех недель, в целом три дозы, вводили подкожную инъекцию олигонуклеотида и дозы, перечисленных в представленных ниже таблицах, или PBS. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Мышей усыпили через 72 часа после последнего введения. В течение эксперимента в различных временных точках брали образцы крови из хвостовой вены и измеряли уровни белка TTR в плазме, ALT и AST, которые представлены в Таблицах 85-87. После усыпления животных измерили уровни ALT, AST и человеческого TTR в плазме, а также массы тела, массы органов и уровни мРНК человеческого TTR в печени. Уровни белка TTR измерили при помощи клинического анализатора (AU480, Beckman Coulter, штат Калифорния). Реагент для количественного определения РНК RIBOGREEN® (Molecular Probes, Inc., использовали по стандартным протоколам для определения уровней мРНК человеческого TTR в печени. Результаты, показанные в Таблицах 84-87, представляют собой средние значения для каждой экспериментальной группы. Уровни мРНК представляют собой средние значения относительно среднего значения для PBS группы. Уровни белка в плазме представляют собой средние значения относительно среднего значения для PBS группы в исходном состоянии. Массы тела представляют собой среднее процентное изменение массы от исходного значения до умерщвления для каждой отдельной экспериментальной группы. Представленные массы органов нормализованы к массе тела животного, а затем представлена средняя нормализованная масса органов для каждой экспериментальной группы относительно средней нормализованной массы органов для PBS группы.

В Таблицах 84-87 «BL» означает исходное значения измерений, выполненных непосредственно перед введением первой дозы. Как показано в Таблицах 84 и 85, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни экспрессии TTR дозозависимым образом. Олигонуклеотиды, содержащие конъюгат GalNAc, были более эффективными, чем исходное соединение без конъюгата GalNAc (ISIS 420915). Кроме того, олигонуклеотиды, содержащие конъюгат GalNAc и смешанные PS/PO межнуклеозидные связи, были еще более эффективными, чем олигонуклеотид, содержащий конъюгат GalNAc и только PS связи.

Легенда для Таблицы 85 представлена в Примере 74. Структура GalNAc₃-1 показана в Примере 9. Структура GalNAc₃-3_a показана в Примере 39. Структура GalNAc₃-7_a показана в Примере 48. Структура GalNAc₃-10_a показана в Примере 46. Структура GalNAc₃-13_a показана в Примере 62. Структура GalNAc₃-19_a показана в Примере 70.

Пример 87: Продолжительность действия in vivo однократных доз олигонуклеотидов, направленных на TTR, содержащих кластер GalNAc₃

ISIS №420915 и 660261 (см. Таблицу 83), испытали в исследовании однократной дозы на продолжительность действия у мышей. ISIS №420915, 682883 и 682885 (см. Таблицу 83) также испытали в исследовании однократной дозы на продолжительность действия у мышей.

Лечение

Восьминедельным самцам трансгенных мышей, которые экспрессируют человеческий TTR, ввели однократную подкожную инъекцию 100 мг/кг ISIS №420915 или 13,5 мг/кг ISIS №660261. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Образцы крови из хвостовой вены брали до введения дозы для определения исходных показателей и на 3, 7, 10, 17, 24 и 39 день после введения дозы. Уровни белка TTR в плазме измеряли так, как описано в Примере 86. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней белка TTR в плазме для каждой экспериментальной группы, нормализованных к исходным уровням.

Лечение

Самкам трансгенных мышей, которые экспрессируют человеческий TTR, ввели однократную подкожную инъекцию 100 мг/кг ISIS №420915, 10,0 мг/кг ISIS №682883 или 10,0 мг/кг 682885. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Образцы крови из хвостовой вены брали до введения дозы для определения исходных показателей и на 3, 7, 10, 17, 24 и 39 день после введения дозы. Уровни белка TTR в плазме измеряли так, как описано в Примере 86. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней белка TTR в плазме для каждой экспериментальной группы, нормализованных к исходным уровням.

Результаты в Таблицах 88 и 89 демонстрируют, что олигонуклеотиды, содержащие конъюгат GalNAc, являются более эффективными и имеют более продолжительное действие, чем исходный олигонуклеотид без конъюгата (ISIS 420915).

Пример 88: Сплайсинг-модулирование in vivo под действием олигонуклеотидов, направленных на SMN, содержащих конъюгат GalNAc₃

Олигонуклеотиды, перечисленные в Таблице 90, испытали на сплайсинг-модулирование человеческих генов выживаемости мотонейронов (SMN) у мышей.

Структура GalNAc₃-7_a показана ранее в Примере 48. «X» означает 5'-первичный амин, полученный компанией Gene Tools (Филомат, штат Орегон), aGalNAc₃-7_b означает структуру GalNAc₃-7_a, не содержащую часть -NH-С₆-О линкера, как показано ниже:

ISIS №703421 и 703422 представляют собой морфолино-олигонуклеотиды, при этом каждый нуклеотид из двух олигонуклеотидов представляет собой морфолино-нуклеотид.

Лечение

Шестинедельным трансгенным мышам, экспрессирующим человеческий SMN, ввели однократную подкожную инъекцию олигонуклеотида, перечисленного в Таблице 91, или солевого раствора. Каждая экспериментальная группа состояла из 2 самцов и 2 самок. Мышей усыпили через 3 дня после введения дозы для определения уровней мРНК человеческого SMN в печени с экзоном 7 и без него, используя ПЦР в реальном времени по стандартным протоколам. Общую РНК измерили при помощи реагента Ribogreen. Уровни мРНК SMN нормализовали к общей мРНК, а затем нормализовали к средним значениям в группе, обработанной солевым раствором. Полученные средние отношения мРНК SMN, содержащей экзон 7, к мРНК SMN, не содержащей экзон 7, представлены в Таблице 91. Результаты демонстрируют, что полностью модифицированные олигонуклеотиды, которые модулируют сплайсинг и содержат конъюгат GalNAc, являются значительно более эффективными для изменения сплайсинга в печени, чем исходные олигонуклеотиды, не содержащие конъюгат GalNAc. Кроме того, эта тенденция сохраняется для химизма многократных модификаций, включая 2'-МОЕ и морфолино-модифицированные олигонуклеотиды.

Пример 89: Антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, направленных на аполипопротеин А (Аро(а)), содержащих конъюгат GalNAc₃

Олигонуклеотиды, перечисленные ниже в Таблице 92, испытали в исследовании дозозависимого ингибирования Аро(а) у трансгенных мышей.

Структура GalNAc₃-7_a показана в Примере 48.

Лечение

Восьминедельным самкам мышей C57BL/6 (Jackson Laboratory, Бар-Харбор, штат Мэн) один раз в неделю вводили подкожную инъекцию дозы, представленной ниже, в целом шесть доз олигонуклеотида, перечисленного в Таблице 92, или PBS. Каждая экспериментальная группа состояла из 3-4 животных. Образцы крови из хвостовой вены брали за день до введения первой дозы и еженедельно после введения каждой дозы для определения уровней белка Аро(а) в плазме. Мышей усыпили через два дня после последнего введения. Уровни мРНК Аро(а) в печени определили при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN® (Molecular Probes, Inc., Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Уровни белка Аро(а) в плазме определили при помощи твердофазного иммуноферментного анализа, и определили уровни трансаминазы в печени. Результаты анализа мРНК и белка в плазме в Таблице 93 представлены как среднее процентное значение для экспериментальной группы относительно группы, обработанной PBS. Уровни белка в плазме дополнительно нормализовали к исходному значению (BL) для группы с PBS. Средние абсолютные уровни трансаминазы и массы тела (% относительно среднего исходного значения) представлены в Таблице 94.

Как показано в Таблице 93, лечение олигонуклеотидами снижает уровни мРНК Аро(а) в печени и уровни белка в плазме дозозависимым образом. Кроме того, олигонуклеотид, содержащий конъюгат GalNAc, был значительно более эффективным с более продолжительным действием, чем исходный олигонуклеотид, не содержащий конъюгат GalNAc. Как показано в Таблице 94, представленные олигонуклеотиды не влияют на уровни трансаминазы и массы тела, что указывает на хорошую переносимость олигонуклеотидов.

Пример 90: Антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, направленных на TTR, содержащих кластер GalNAc₃

Олигонуклеотиды, перечисленные ниже в таблице 95, испытывали в дозозависимом исследовании на антисмысловое ингибирование человеческого транстиретина (TTR) у трансгенных мышей, которые экспрессируют человеческий ген TTR.

Лечение

Каждой TTR трансгенной мыши один раз в неделю в течение трех недель, в целом три дозы, вводили подкожные инъекции олигонуклеотида и дозы, перечисленных в таблице 96, или PBS. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Перед введением первой дозы взяли образец крови из хвостовой вены для определения уровней белка TTR в плазме в исходном состоянии (BL). Мышей усыпили через 72 часа после последнего введения. Уровни белка TTR измерили при помощи клинического анализатора (AU480, Beckman Coulter, штат Калифорния). Реагент для количественного определения РНК RIBOGREEN® (Molecular Probes, Inc., использовали по стандартным протоколам для определения уровней мРНК человеческого TTR в печени. Результаты, показанные в Таблице 96, представляют собой средние значения для каждой экспериментальной группы. Уровни мРНК представляют собой средние значения относительно среднего значения для PBS группы. Уровни белка в плазме представляют собой средние значения относительно среднего значения для PBS группы в исходном состоянии. «BL» означает исходное значения измерений, выполненных непосредственно перед введением первой дозы. Как показано в Таблице 96, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни экспрессии TTR дозозависимым образом. Олигонуклеотид, содержащий конъюгат GalNAc, был более эффективным, чем исходное соединение без конъюгата GalNAc (ISIS 420915), а олигонуклеотиды, содержащие фосфодиэфирный или дезоксиаденозиновый расщепляемый фрагмент, демонстрировали значительное усиление эффективности, по сравнению с исходным соединением, не содержащим конъюгат (см. ISIS №682883 и 666943 по сравнению с 420915, а также см. Примеры 86 и 87).

Легенда для Таблицы 95 представлена в Примере 74. Структура GalNAc₃-3_а показана в Примере 39. Структура GalNAc₃-7_a показана в Примере 48. Структура GalNAc₃-10_а показана в Примере 46. Структура GalNAc₃-13_a показана в Примере 62.

Пример 91: Антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, направленных на фактор VII, содержащих конъюгат GalNAc₃, у приматов, не являющихся человеком

Олигонуклеотиды, перечисленные ниже в Таблице 97, испытали в нетерминальном исследовании повышения дозы на антисмысловое ингибирование фактора VII у обезьян.

Лечение

Обезьянам, ранее не подверженным экспериментам, на 0, 15 и 29 день вводили подкожные инъекции повышающихся доз олигонуклеотидов, перечисленных в Таблице 97, или PBS. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 самцов и 1 самки. Перед введением первой дозы и в различные временные точки после нее брали образцы крови для определения уровней белка фактора VII в плазме. Уровни белка фактора VII определяли с помощью твердофазного иммуноферментного анализа. Результаты, показанные в Таблице 98, представляют собой средние значения для каждой экспериментальной группы относительно среднего значения для группы PBS в исходном состоянии (BL), измерения выполнены непосредственно перед введением первой дозы. Как показано в Таблице 98, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни экспрессии фактора VII дозозависимым образом, и олигонуклеотид, содержащий конъюгат GalNAc, был значительно более эффективным у обезьян, чем олигонуклеотид, не содержащий конъюгата GalNAc.

Легенда для Таблицы 97 представлена в Примере 74. Структура GalNAc₃-10_а показана в Примере 46.

Пример 92: Антисмысловое ингибирование в первичных гепатоцитах под действием олигонуклеотидов, направленных на Аро-CIII, содержащих конъюгат GalNAc₃

Первичные мышиные гепатоциты высеивали в 96-луночные планшеты при 15000 клеток на лунку и добавляли олигонуклеотиды, перечисленные в Таблице 99, направленные на мышиный АроС-III в концентрации 0,46, 1,37, 4,12 или 12,35, 37,04, 111,11 или 333,33 нМ, или 1,00 мкМ. После инкубации с олигонуклеотидами в течение 24 часов клетки лизировали и очистили общую РНК при помощи RNeasy (Qiagen). Уровни мРНК АроС-III определили при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN® (Molecular Probes, Inc.) по стандартным протоколам. Значения IC₅₀ определили при помощи программы Prism 4 (GraphPad). Результаты демонстрируют, что независимо от того, является ли расщепляемый фрагмент фосфодиэфиром или фосфодиэфир-связанным дезоксиаденозином, олигонуклеотиды, содержащие конъюгат GalNAc, были значительно более эффективными, чем исходный олигонуклеотид, не содержащий конъюгата.

Структура GalNAc₃-1_a показана ранее в Примере 9, GalNAc₃-3_a показана в Примере 39, GalNAc₃-7_a показана в Примере 48, GalNAc₃-10_a показана в Примере 46, GalNAc₃-13_a показана в Примере 62, и GalNAc₃-19_a показана в Примере 70.

Пример 93: Антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, направленных на SRB-1, содержащих смешанные крылья и 5'-GalNAc₃ конъюгат

Олигонуклеотиды, перечисленные в Таблице 100, испытали в дозозависимом исследовании антисмыслового ингибирования SRB-1 у мышей.

Структура GalNAc₃-3_a показана ранее в Примере 39, а структура GalNAc₃-7_a показана ранее в Примере 48. Нижние индексы: «е» означает 2'-МОЕ модифицированный нуклеозид; «d» означает β-D-2'-дезоксирибонуклеозид; «k» означает 6'-(S)-СН₃ бициклический нуклеозид (cEt); «s» означает тиофосфатные межнуклеозидные связи (PS); «о» означает фосфодиэфирные межнуклеозидные связи (РО). Верхний индекс «m» означает 5-метилцитозины.

Лечение

Шести-восьминедельным мышам C57BL/6 (Jackson Laboratory, Бар-Харбор, штат Мэн) ввели однократную подкожную инъекцию дозы, представленной ниже, олигонуклеотида, перечисленного в Таблице 100, или солевого раствора. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Мышей усыпили через 72 часа после последнего введения. Уровни мРНК SRB-1 в печени измерили при помощи ПЦР в реальном времени. Уровни мРНК SRB-1 нормализовали к уровням мРНК циклофилина по стандартным протоколам. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней мРНК SRB-1 для каждой экспериментальной группы, по сравнению с контрольной группой, обработанной солевым раствором. Как показано в Таблице 101, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни мРНК SRB-1 дозозависимым образом, а гэпмерные олигонуклеотиды, содержащие конъюгат GalNAc и имеющие крылья, которые представляют собой либо полностью cEt, либо смешанные сахарные модификации, были существенно более эффективными, чем исходный олигонуклеотид, не содержащий конъюгата и содержащий полностью cEt модифицированные крылья.

Измерили также массы тела, уровни трансаминазы в печени, общий билирубин и АМК, а средние значения для каждой экспериментальной группы представлены в Таблице 101. Масса тела показана как средний процент массы тела относительно исходной массы тела (% BL), измеренный непосредственно перед введением дозы олигонуклеотида.

Пример 94: Антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, направленных на SRB-1, содержащих 2'-сахарные модификации и 5'-GalNAc₃ конъюгат

Олигонуклеотиды, перечисленные в Таблице 102, испытали в дозозависимом исследовании антисмыслового ингибирования SRB-1 у мышей.

Верхний индекс «m» означает 2'-0-метил-модифицированный нуклеозид. Полная легенда к таблице представлена в Примере 74. Структура GalNAc₃-3_a показана ранее в Примере 39, а структура GalNAc₃-7_a показана в Примере 48.

Лечение

Исследование проводили по протоколу, описанному в Примере 93. Результаты представлены ниже в Таблице 103 и демонстрируют, что и 2'-МОЕ, и 2'-ОМе-модифицированные олигонуклеотиды, содержащие конъюгат GalNAc, были значительно более эффективными, чем соответствующие исходные олигонуклеотиды, не содержащие конъюгата. Результаты измерений массы тела, трансаминазы в печени, общего билирубина и АМК демонстрируют, что эти соединения хорошо переносятся.

Пример 95: Антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, направленных на SRB-1, содержащих бициклические нуклеозиды и 5'-GalNAc₃ конъюгат

Олигонуклеотиды, перечисленные в Таблице 104, испытали в дозозависимом исследовании антисмыслового ингибирования SRB-1 у мышей.

Нижний индекс «g» означает фтор-ГНК нуклеозид, нижний индекс «1» означает закрытый нуклеозид, содержащий мостик 2'-O-СН₂-4'. Другие сокращения представлены в легенде таблицы Примера 74. Структура GalNAc₃-1_a показана ранее в Примере 9, структура GalNAc₃-3_а показана ранее в Примере 39, и структура GalNAc₃-7_a показана ранее в Примере 48.

Лечение

Исследование проводили по протоколу, описанному в Примере 93. Результаты представлены ниже в Таблице 105 и демонстрируют, что олигонуклеотиды, содержащие конъюгат GalNAc и различные бициклические нуклеозидные модификации, были значительно более эффективными, чем исходный олигонуклеотид, не содержащий конъюгата и содержащий бициклические нуклеозидные модификации. Кроме того, олигонуклеотид, содержащий конъюгат GalNAc и фтор-ГНК модификации, был существенно более эффективным, чем исходное соединение, не содержащее конъюгата и содержащее фтор-ГНК модификации. Результаты измерений массы тела, трансаминазы в печени, общего билирубина и АМК демонстрируют, что эти соединения хорошо переносятся.

Пример 96: Связывание белка плазмы антисмысловыми олигонуклеотидами, содержащими группу конъюгата GalNAc₃

Олигонуклеотиды, перечисленные в Таблице 70, направленные на АроС-III, и олигонуклеотиды в Таблице 106, направленные на Аро(а), испытали в анализе ультрафильтрации для оценки связывания белка в плазме.

Легенда таблицы представлена в Примере 74. Структура GalNAc₃-7_a показана ранее в Примере 48.

Элементы для ультрафильтрации Ultrafree-MC (номинальное ограничение молекулярной массы 30000, слабосвязывающая регенерированная целлюлозная мембрана, Millipore, Бедфорд, штат Массачусетс) предварительно кондиционировали с 300 мкл 0,5% Tween 80 и центрифугировали при 2000 g в течение 10 минут, затем с 300 мкл 300 мкг/мл раствора контрольного олигонуклеотида в H₂O и центрифугировали при 2000 g в течение 16 минут. Для оценки неспецифического связывания с фильтрами каждого исследуемого олигонуклеотида из Таблиц 70 и 106, используемых в испытаниях, 300 мкл 250 нг/мл раствора олигонуклеотида в Н₂О при рН 7,4 поместили в предварительно кондиционированные фильтры и центрифугировали при 2000 g в течение 16 минут.Нефильтрованные и фильтрованные образцы анализировали твердофазным иммуноферментным анализом для определения концентраций олигонуклеотидов. Для получения средней концентрации для каждого образца использовали три экземпляра. Среднюю концентрацию фильтрованного образца относительно нефильтрованного образца использовали для определения процента олигонуклеотида, прошедшего через фильтр без плазмы (% выделения).

Замороженные образцы цельной плазмы, собранные в К3-ЭДТК и полученные от здоровых, не принимающих лекарства людей-добровольцев, яванских макак и мышей CD-1, приобрели у компании Bioreclamation LLC (Вестбери, штат Нью-Йорк). Исследуемые олигонуклеотиды добавляли к 1,2 мл аликвотам плазмы в двух концентрациях (5 и 150 мкг/мл). Аликвоту (300 мкл) каждого маркированного образца плазмы поместили на предварительно кондиционированный фильтровальный элемент и инкубировали при 37°С в течение 30 минут, затем сразу выполнили центрифугирование при 2000 g в течение 16 минут. Аликвоты фильтрованных и нефильтрованных маркированных образцов плазмы анализировали твердофазным иммуноферментным анализом для определения концентрации олигонуклеотида в каждом образце. Использовали три экземпляра каждой концентрации для определения среднего процента связанного и несвязанного олигонуклеотида в каждом образце. Среднюю концентрацию фильтрованного образца относительно концентрации нефильтрованного образца использовали для определения процента олигонуклеотида в плазме, не связанного с белками плазмы (% несвязанного). Окончательные значения несвязанного олигонуклеотида корректировали на неспецифическое связывание путем деления % несвязанного на % выделения для каждого олигонуклеотида. Окончательные значения % связанного олигонуклеотида определили вычитанием окончательных значений % несвязанного из 100. Результаты показаны в Таблице 107 для двух концентраций испытанного олигонуклеотида (5 и 150 мкг/мл) в плазме каждого вида. Результаты демонстрируют, что группы конъюгата GalNAc не оказывают существенного влияния на связывание белка плазмы. Кроме того, олигонуклеотиды, содержащие только PS межнуклеозидные связи и смешанные PO/PS связи, - оба варианта связывают белки плазмы, при этом олигонуклеотиды, содержащие только PS связи, связывают белки плазмы в несколько большей степени, чем олигонуклеотиды, содержащие смешанные PO/PS связи.

Пример 97: Модифицированные олигонуклеотиды, направленные на TTR, содержащие группу конъюгата GalNAc₃

Олигонуклеотиды, представленные в Таблице 108, содержащие конъюгат GalNAc, предназначены для воздействия на TTR.

Легенда для Таблицы 108 представлена в Примере 74. Структура GalNAc₃-1 показана в Примере 9. Структура GalNAc₃-3_a показана в Примере 39. Структура GalNAc₃-7_а показана в Примере 48. Структура GalNAc₃-10_a показана в Примере 46. Структура GalNAc₃-13_a показана в Примере 62. Структура GalNAc₃-19_a показана в Примере 70.

Пример 98: Оценка про воспалительного действия олигонуклеотидов, содержащих конъюгат GalNAc, в анализе hPMBC

Олигонуклеотиды, перечисленные в Таблице 109, исследовали на провоспалительное действие в анализе hPMBC, описанном в Примерах 23 и 24. (См. Таблицы 30, 83, 95 и 108, где представлено описание олигонуклеотидов). ISIS 353512 обладает высоким ответом, и его использовали в качестве положительного контроля, а другие олигонуклеотиды описаны в Таблицах 83, 95 и 108. Результаты, представленные в Таблице 109, получены с использованием крови, полученной от одного донора-добровольца. Результаты демонстрируют, что олигонуклеотиды, содержащие смешанные PO/PS межнуклеозидные связи, вызывают значительно более слабые провоспалительные реакции, по сравнению с теми же олигонуклеотидами, содержащими только PS связи. Кроме того, в этом анализе группа конъюгата GalNAc не оказывает существенного влияния.

Пример 99: Связывающие аффинности олигонуклеотидов, содержащих конъюгат GalNAc, в отношении асиалогликопротеинового рецептора

Связывающие аффинности олигонуклеотидов, перечисленных в Таблице 110 (см. Таблицу 76, в которой представлено описание олигонуклеотидов), в отношении асиалогликопротеинового рецептора испытали в анализе конкурентного связывания рецепторов. Конкурирующий лиганд, α1-кислый гликопротеин (AGP), инкубировали в 50 мМ ацетатно-натриевом буфере (рН 5) с 1 ед. нейраминидазы-агарозы в течение 16 часов при 37°С, а > 90% дезалилирование подтвердили анализом с сиаловой кислотой или эксклюзионной хроматографией (SEC). Для йодирования АГФ использовали монохлорид йода по способу, описанному авторами Atsma et al. (см. J Lipid Res. январь 1991 г.; 32(1): 173-81.) В этом способе дезалилированный al-кислый гликопротеин (de-AGP) добавляли к 10 мМ хлориду йода, Na¹²⁵I и 1 М глицина в 0,25 М NaOH. После инкубации в течение 10 минут при комнатной температуре, ¹²⁵I-меченный de-AGP отделили от свободного ¹²⁵I двукратным концентрированием смеси с использованием спин-колонки с номинальным отсечением по молекулярной массе 3 кДа. Белок испытали на эффективность мечения и чистоту на системе ВЭЖХ, оснащенной колонкой Agilent SEC-3 (7,8×300 мм) и счетчиком β-RAM. Конкуретные исследования с использованием ¹²⁵I-меченного de-AGP и ASO, содержащих различные GalNAc-кластеры, выполнили следующим образом. Человеческие клетки HepG2 (10⁶ клеток/мл) поместили на 6-луночные планшеты в 2 мл соответствующей питательной среды. Использовали среду MEM с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS), 2 мМ L-глутамина и 10 мМ HEPES. Клетки выращивали в течение 16-20 часов при 37°С с 5% и 10% СО₂, соответственно. Перед экспериментом клетки промыли средой без FBS. Клетки выращивали в течение 30 минут при 37°С с 1 мл конкурентной смеси, содержащей соответствующую питательную среду с 2% FBS, 10^-8 М ¹²⁵I-меченным de-AGP и ASO, содержащим GalNAc-кластер в концентрациях в диапазоне от 10^-11 до 10^-5 М. Неспецифическое связывание определили в присутствии 10^-2 М GalNAc сахара. Клетки дважды промыли средой без FBS для удаления несвязанного ¹²⁵I-меченного de-AGP и конкурирующего GalNAc ASO. Клетки лизировали с использованием буфера RLT производства компании Qiagen, содержащего 1% β-меркаптоэтанола. Лизаты перенесли в круглодонные аналитические пробирки после быстрого 10-минутного цикла замораживания/оттаивания, и анализировали на γ-счетчике. Неспецифическое связывание вычли, а затем разделили импульсы белка ¹²⁵I на значение импульсов при самой низкой концентрации GalNAc-ASO. Кривые ингибирования построили по уравнению моносайтового конкурентного связывания, используя алгоритм нелинейной регрессии для расчета связывающей аффиности (K_D).

Результаты в Таблице 110 были получены в экспериментах, выполненных в пять разных дней. Результаты для олигонуклеотидов, отмеченных верхним индексом «а», представляют собой средние значения экспериментов, выполненных в два разных дня. Результаты демонстрируют, что олигонуклеотиды, содержащие группу конъюгата GalNAc на 5'-конце, связывают асиалогликопротеиновый рецептор человеческих клеток HepG2 с аффинностью, которая в 1,5-16 раз больше, чем для олигонуклеотидов, содержащих группу конъюгата GalNAc на 3'-конце.

Пример 100: Антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, содержащих группу конъюгата GalNAc, направленных на Аро(а), in vivo

Олигонуклеотиды, перечисленные ниже в Таблице 111а, испытали в исследовании однократной дозы на продолжительность действия у мышей.

Структура GalNAc₃-7_a показана в Примере 48.

Лечение

Каждой самке трансгенных мышей, экспрессирующих человеческий Аро(а), один раз в неделю, в целом 6 доз, вводили подкожную инъекцию олигонуклеотида и дозы, перечисленной в Таблице 111b, или PBS. Каждая экспериментальная группа состояла из 3 животных. Образцы крови брали за день до введения дозы для определения исходных уровней белка Аро(а) в плазме, а также через 72 часа, 1 неделю и 2 недели после введения первой дозы. Дополнительные пробы крови брали через 3 недели, 4 недели, 5 недель и 6 недель после введения первой дозы. Уровни белка Аро(а) в плазме измеряли при помощи твердофазного иммуноферментного анализа. Результаты в Таблице 111b представлены как средний процент от уровней белка Аро(а) в плазме для каждой экспериментальной группы, нормализованных к исходным уровням (% BL). Результаты показывают, что олигонуклеотиды, содержащие группу конъюгата GalNAc, демонстрируют эффективное снижение экспрессии Аро(а). Этот мощный эффект наблюдали для олигонуклеотида, содержащего только PS межнуклеозидные связи, и для олигонуклеотида, содержащего смешанные РО и PS связи.

Пример 101: Антисмысловое ингибирование олигонуклеотидами, содержащими кластер GalNAc, связанный через стабильный фрагмент

Олигонуклеотиды, перечисленные в Таблице 112, испытали на ингибирование экспрессии мышиного АРОС-III in vivo. Мышам С57В1/6 ввели однократную подкожную инъекцию олигонуклеотида, перечисленного в Таблице 112, или PBS. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Каждой мыши, проходившей лечение с ISIS 440670, вводили дозу 2, 6, 20 или 60 мг/кг. Каждой мыши, проходившей лечение с ISIS 680772 или 696847, вводили 0,6, 2, 6 или 20 мг/кг. Группа конъюгата GalNAc в ISIS 696847 связана через стабильный фрагмент, тиофосфатную связь, вместо легко расщепляемой фосфодиэфир-содержащей связи. Животных усыпили через 72 часа после введения дозы. Уровни мРНК АРОС-III в печени измерили при помощи ПЦР в реальном времени. Уровни мРНК АРОС-III нормализовали к уровням мРНК циклофилина по стандартным протоколам. Результаты представлены в Таблице 112 как средний процент уровней мРНК АРОС-III для каждой экспериментальной группы, по сравнению с контрольной группой, обработанной солевым раствором. Результаты демонстрируют, что олигонуклеотиды, содержащие группу конъюгата GalNAc, были существенно более эффективными, чем олигонуклеотид, не содержащий группу конъюгата. Кроме того, олигонуклеотид, содержащий группу конъюгата GalNAc, связанную с олигонуклеотидом через расщепляемый фрагмент (ISIS 680772), был еще более эффективным, чем олигонуклеотид, содержащий группу конъюгата GalNAc, связанную с олигонуклеотидом через стабильный фрагмент (ISIS 696847).

Структура GalNAc₃-7_a показана в Примере 48.

Пример 102: Распределение в печени антисмысловых олигонуклеотидов, содержащих конъюгат GalNAc

Оценили распределение в печени ISIS 353382 (см. Таблицу 36), который не содержит конъюгата GalNAc, и ISIS 655861 (см. Таблицу 36), который содержит конъюгат GalNAc. Самцам мышей balb/c ввели однократную подкожную инъекцию ISIS 353382 или 655861 в дозе, перечисленной в Таблице 113. Каждая экспериментальная группа состояла из 3 животных, за исключением группы с дозой 18 мг/кг для ISIS 655861, которая состояла из 2 животных. Животных усыпили через 48 часов после введения дозы для определения распределения олигонуклеотидов в печени. Для измерения количества молекул антисмыслового олигонуклеотида на клетку, метку трис-бипиридина рутения (II) (MSD TAG, Meso Scale Discovery) конъюгировали с олигонуклеотидным образцом, используемым для обнаружения антисмысловых олигонуклеотидов. Результаты, представленные в Таблице 113, представляют собой средние концентрации олигонуклеотида для каждой экспериментальной группы в единицах измерения миллионов молекул олигонуклеотида на клетку. Результаты демонстрируют, что при равных дозах олигонуклеотид, содержащий конъюгат GalNAc, содержался в более высоких концентрациях в целом в печени и в гепатоцитах, чем олигонуклеотид, не содержащий конъюгата GalNAc. Кроме того, олигонуклеотид, содержащий конъюгат GalNAc, содержался в более низких концентрациях в непаренхиматозных клетках печени, чем олигонуклеотид, не содержащий конъюгата GalNAc. И тогда как концентрации ISIS 655861 в гепатоцитах и непаренхиматозных клетках печени были одинаковыми в расчете на одну клетку, содержание гепатоцитов в печени составляет приблизительно 80% по объему. Следовательно, основная часть олигонуклеотида ISIS 655861, содержащегося в печени, находилась в гепатоцитах, тогда как основная часть олигонуклеотида ISIS 353382, содержащегося в печени, находилась в непаренхиматозных клетках печени.

Пример 103: Продолжительность действия in vivo олигонуклеотидов, направленных на АРОС-III, содержащих конъюгат GalNAc₃

Олигонуклеотиды, перечисленные ниже в Таблице 114, испытали в исследовании однократной дозы на продолжительность действия у мышей.

Структура GalNAc₃-3_a показана в Примере 39, a GalNAc₃-19_a показана в Примере 70.

Лечение

Самкам трансгенных мышей, экспрессирующим человеческий АРОС-Ш, ввели однократную подкожную инъекцию олигонуклеотида, перечисленного в Таблице 114, или PBS. Каждая экспериментальная группа состояла из 3 животных. Образцы крови из брали до введения дозы для определения исходных показателей и на 3, 7, 14, 21, 28, 35 и 42 день после введения дозы. Уровни триглицеридов и белка АРОС-Ш в плазме измеряли так, как описано в Примере 20. Результаты в Таблице 115 представлены как средний процент уровней триглицеридов и АРОС-III в плазме для каждой экспериментальной группы, нормализованных к исходным уровням. Сравнение результатов в Таблице 71 примера 79 с результатами, представленными ниже в таблице 115, демонстрирует, что олигонуклеотиды, содержащие смесь фосфодиэфирных и тиофосфатных межнуклеозидных связей, обладают увеличенной продолжительностью действия, чем эквивалентные олигонуклеотиды, содержащие только тиофосфатные межнуклеозидные связи.

Пример 104: Синтез олигонуклеотидов, содержащих конъюгат 5'-GalNAc₂

Соединение 120 имеется в продаже, а синтез соединения 126 описан в Примере 49. Соединение 120 (1 г, 2,89 ммоль), HBTU (0,39 г, 2,89 ммоль) и HOBt (1,64 г, 4,33 ммоль) растворили в ДМФА (10 мл) и добавили N,N-диизопропилэтиламин (1,75 мл, 10,1 ммоль). Примерно через 5 минут в реакционную смесь добавили бензиловый эфир аминогексановой кислоты (1,36 г, 3,46 ммоль). Через 3 часа реакционную смесь вылили в 100 мл 1 М раствора NaHSO4 и экстрагировали 2 × 50 мл этилацетата. Органические слои объединили и промыли 3 × 40 мл насыщенного раствора NaHCO₃ и 2 × насыщенным солевым раствором, высушили при помощи Na₂SO₄, отфильтровали и концентрировали. Продукт очистили силикагелевой колоночной хроматографией (ДХМ:ЕА:гексаны, 1:1:1) с получением соединения 231. Данные ЖХМС и ЯМР согласовались с указанной структурой. Соединение 231 (1,34 г, 2,438 ммоль) растворили в дихлорметане (10 мл) и добавили трифторуксусную кислоту (10 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение 2 часов, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и выпарили вместе с толуолом (3 × 10 мл).

Остаток высушили при пониженном давлении с получением соединения 232 в виде трифторацетатной соли. Синтез соединения 166 описан в Примере 54. Соединение 166 (3,39 г, 5,40 ммоль) растворили в ДМФА (3 мл). Раствор соединения 232 (1,3 г, 2,25 ммоль) растворили в ДМФА (3 мл) и добавили N,N-иизопропилэтиламин (1,55 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут, затем вылили в воду (80 мл), а водный слой экстрагировали EtOAc (2 × 100 мл). Органическую фазу отделили и промыли насыщенным водным раствором NaHCO₃ (3 × 80 мл), 1 М NaHSO₄ (3 × 80 мл) и насыщенным солевым раствором (2 × 80 мл), затем высушили (Na₂SO₄), отфильтровали и концентрировали. Остаток очистили силикагелевой колоночной хроматографией с получением соединения 233. Данные ЖХМС и ЯМР согласовались с указанной структурой. Соединение 233 (0,59 г, 0,48 ммоль) растворили в метаноле (2,2 мл) и этилацетате (2,2 мл). Добавили палладий на углероде (10 масс. % Pd/C, влажный, 0,07 г) и перемешивали реакционную смесь в атмосфере водорода в течение 3 часов. Реакционную смесь отфильтровали через слой целита и концентрировали с получением карбоновой кислоты. Карбоновую кислоту (1,32 г, 1,15 ммоль, не содержащая кластера кислота) растворили в ДМФА (3,2 мл). К ней добавили добавили - диизопропилэтиламин (0,3 мл, 1,73 ммоль) и PFP-ТФК (0,30 мл, 1,73 ммоль). Через 30 минут перемешивания при комнатной температуре реакционную смесь вылили в воду (40 мл) и экстрагировали EtOAc (2 × 50 мл). Выполнили стандартную процедуру выделения продукта, как описано выше, с получением соединения 234. Данные ЖХМС и ЯМР согласовались с указанной структурой. Олигонуклеотид 236 получили по общему способу, описанному в Примере 46. Кластерная часть GalNAc₂ (GalNAc₂-24_a) группы конъюгата GalNAc₂-24 может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом, содержащимся в олигонуклеотиде, с получением различных групп конъюгата. Структура GalNAc₂-24 (GalNAc₂-24_a-CM) представлена ниже:

Пример 105: Синтез олигонуклеотидов, содержащих конъюгат GalNAc₁-25

Синтез соединения 166 описан в Примере 54. Олигонуклеотид 236 получили по общему способу, описанному в Примере 46.

Альтернативно, олигонуклеотид 236 синтезировали по схеме, изображенной ниже, а соединение 238 использовали для получения олигонуклеотида 236 по способам, описанным в Примере 10.

Кластерная часть GalNAc₁ (GalNAc₁-25a) группы конъюгата GalNAc₁-25 может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом, содержащимся в олигонуклеотиде, с получением различных групп конъюгата. Структура GalNAc₁-25 (GalNAc₁-25_a-CM) представлена ниже:

Пример 106: Антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, направленных на SRB-1, содержащих 5'-GalNAc₂ или 5'-GalNAc₃ конъюгат

Олигонуклеотиды, перечисленные в Таблицах 116 и 117, испытали в дозозависимых исследованиях антисмыслового ингибирования SRB-1 у мышей. Лечение

Шестинедельным самцам мышей C57BL/6 (Jackson Laboratory, Бар-Харбор, штат Мэн) ввели однократную подкожную инъекцию 2, 7 или 20 мг/кг ISIS №440762; или 0,2, 0,6, 2, 6 или 20 мг/кг ISIS №686221, 686222 или 708561; или солевого раствора. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Мышей усыпили через 72 часа после последнего введения. Уровни мРНК SRB-1 в печени измерили при помощи ПЦР в реальном времени. Уровни мРНК SRB-1 нормализовали к уровням мРНК циклофилина по стандартным протоколам. Антисмысловые олигонуклеотиды снижают уровни мРНК SRB-1 дозозависимым образом, и результаты ED₅₀ представлены в таблицах 116 и 117. Хотя в предшествующих исследованиях показано, что трехвалентные GalNAc-сопряженные олигонуклеотиды существенно более эффективны, чем двухвалентные GalNAc-сопряженные олигонуклеотиды, которые в свою очередь существенно более эффективны, чем одновалентные GalNAc-сопряженные олигонуклеотиды (см., например, Khorev et al., Bioorg. & Med. Chem., Vol. 16, 5216-5231 (2008)), обработка антисмысловыми олигонуклеотидами, содержащими одновалентные, двухвалентные и трехвалентные кластеры GalNAc, приводит к снижению уровней мРНК SRB-1 с одинаковой эффективностью, как показано в Таблицах 116 и 117.

Легенда к таблице представлена в Примере 93. Структура GalNAc₃-13_a показана ранее в Примере 62, а структура GalNAc₂-24a показана в Примере 104.

Легенда к таблице представлена в Примере 93. Структура GalNAci-25a показана в Примере 105.

Оценили также концентрации олигонуклеотидов, представленных в Таблицах 116 и 117, в печени, используя способы, описанные в Примере 75. Результаты, показанные ниже в Таблицах 117а и 117b, представляют собой средние значения общего содержания антисмысловых олигонуклеотидов в тканях для каждой экспериментальной группы, измеренные по УФ, в единицах измерения мкг олигонуклеотида на грамм ткани печени. Результаты демонстрируют, что олигонуклеотиды, содержащие группу конъюагата GalNAc, накапливаются в печени в существенно более высоких количествах, чем при той же дозе олигонуклеотида, не содержащего группу конъюгата GalNAc. Кроме того, антисмысловые олигонуклеотиды, содержащие один, два или три лиганда GalNAc в своих соответствующих группах конъюгата, накапливаются в печени в равных количествах. Этот результат является неожиданным с учетом данных, представленных выше в литературном источнике Khorev et al., и он согласуется с данными активности, представленными выше в Таблицах 116 и 117.

Пример 107: Синтез олигонуклеотидов, содержащих конъюгат GalNAc₁-26 или GalNAc₁-27

Олигонуклеотид 239 синтезировали связыванием соединения 47 (см. Пример 15) с кислотой 64 (см. Пример 32), используя HBTU и DIEA в ДМФА. Полученное амид-содержащее соединение фосфитилировали, затем присоединили к 5'-концу олигонуклеотида по способам, описанным в Примере 10. Кластерная часть GalNAc₁ (GalNAc₁-26_a) группы конъюгата GalNAc₁-26 может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом, содержащимся в олигонуклеотиде, с получением различных групп конъюгата. Структура GalNAc₁-26 (GalNAc₁-26_a-CM) представлена ниже:

Для присоединения группы конъюгата GalNAc₁ к 3'-концу олигонуклеотида амид, образованный по реакции соединений 47 и 64, присоединили к твердой подложке по способам, описанным в Примере 7. Затем выполнили синтез олигонуклеотида по способам, описанным в Примере 9, с получением олигонуклеотида 240.

Кластерная часть GalNAc₁ (GalNAc₁-27_a) группы конъюгата GalNAc₁-27 может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом, содержащимся в олигонуклеотиде, с получением различных групп конъюгата. Структура GalNAc₁-27 (GalNAc₁-27_a-CM) представлена ниже:

Пример 108: Антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, содержащих группу конъюгата GalNAc, направленных на Аро(а), in vivo

Олигонуклеотиды, перечисленные ниже в Таблице 118, испытали в исследовании однократной дозы на мышах.

Структура GalNAc₃-7_a показана в Примере 48.

Лечение

Самцам трансгенных мышей, экспрессирующим человеческий Аро(а), ввели однократную подкожную инъекцию олигонуклеотида и дозы, перечисленных в Таблице 119, или PBS. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Образцы крови брали за день до введения дозы для определения исходных уровней белка Аро(а) в плазме, а также через 1 неделю после введения первой дозы. Образцы крови брали дополнительно еженедельно в течение примерно 8 недель. Уровни белка Аро(а) в плазме измеряли при помощи твердофазного иммуноферментного анализа. Результаты в Таблице 119 представлены как средний процент от уровней белка Аро(а) в плазме для каждой экспериментальной группы, нормализованных к исходным уровням (% BL). Результаты показывают, что антисмысловые олигонуклеотиды снижают экспрессию белка Аро(а). Кроме того, олигонуклеотиды, содержащие группу конъюгата GalNAc, демонстрируют еще более эффективное снижение экспрессии Аро(а), чем олигонуклеотид не содержащий группу конъюгата.

Пример 109: Синтез олигонуклеотидов, содержащих конъюгат GalNAc₁-28 или GalNAc₁-29

Олигонуклеотид 241 синтезировали по таким же способам, как описаны в Примере 71, с получением фосфорамидитного промежуточного соединения, после чего выполнили приемы, описанные в Примере 10, для синтеза олигонуклеотида. Кластерная часть GalNAc₁ (GalNAc₁-28_a) группы конъюгата GalNAc₁-28 может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом, содержащимся в олигонуклеотиде, с получением различных групп конъюгата. Структура GalNAc₁-28 (GalNAc₁-28_a-CM) представлена ниже:

Для присоединения группы конъюгата GalNAc₁ к 3'-концу олигонуклеотида использовали такие же способы, как описаны в Примере 71, с получение гидроксильного промежуточного соединения, которое затем присоединили к твердой подложке по способам, описанным в Примере 7. Затем выполнили синтез олигонуклеотида по способам, описанным в Примере 9, с получением олигонуклеотида 242.

Кластерная часть GalNAc₁ (GalNAc₁-29_a) группы конъюгата GalNAc₁-29 может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом, содержащимся в олигонуклеотиде, с получением различных групп конъюгата. Структура GalNAc₁-29 (GalNAc₁-29_a-CM) представлена ниже:

Пример 110: Синтез олигонуклеотидов, содержащих конъюгат GalNAc₁-30

Олигонуклеотид 246, содержащий группу конъюгата GalNAc₁-30, где Y выбран из О, S, замещенного или незамещенного C₁-C₁₀ алкила, амино, замещенного амино, азидо, алкенила или алкинила, синтезировали так, как показано выше. Кластерная часть GalNAc₁ (GalNAc₁-30_а) группы конъюгата GalNAc₁-30 может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом, содержащимся в олигонуклеотиде, с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации Y представляет собой часть расщепляемого фрагмента. В некоторых вариантах реализации Y представляет собой часть стабильного фрагмента, а расщепляемый фрагмент находится в олигонуклеотиде. Структура GalNAc₁-30_а представлена ниже:

Пример 111: Синтез олигонуклеотидов, содержащих конъюгат GalNAc₂-31 или GalNAc₂-32

Олигонуклеотид 250, содержащий группу конъюгата GalNAc₂-31, где Y выбран из О, S, замещенного или незамещенного C₁-С₁₀ алкила, амино, замещенного амино, азидо, алкенила или алкинила, синтезировали так, как показано выше. Кластерная часть 1NAC₂ (GalNAc₂-31_a) группы конъюгата GalNAc₂-31 может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом, содержащимся в олигонуклеотиде, с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации Y-содержащая группа, которая находится непосредственно возле 5'-конца олигонуклеотида, представляет собой часть расщепляемого фрагмента. В некоторых вариантах реализации Y-содержащая группа, которая находится непосредственно возле 5'-конца олигонуклеотида, представляет собой часть стабильного фрагмента, а расщепляемый фрагмент находится в олигонуклеотиде. Структура GalNAc₂-31_a представлена ниже:

Синтез олигонуклеотида, содержащего конъюгат GalNAc₂-32, представлен ниже.

Олигонуклеотид 252, содержащий группу конъюгата GalNAc₂-32, где Y выбран из О, S, замещенного или незамещенного C₁-С₁₀ алкила, амино, замещенного амино, азидо, алкенила или алкинила, синтезировали так, как показано выше. Кластерная часть 1NAC₂ (GalNAc₂-32_a) группы конъюгата GalNAc₂-32 может быть комбинирована с любым расщепляемым фрагментом, содержащимся в олигонуклеотиде, с получением различных групп конъюгата. В некоторых вариантах реализации Y-содержащая группа, которая находится непосредственно возле 5'-конца олигонуклеотида, представляет собой часть расщепляемого фрагмента. В некоторых вариантах реализации Y-содержащая группа, которая находится непосредственно возле 5'-конца олигонуклеотида, представляет собой часть стабильного фрагмента, а расщепляемый фрагмент находится в олигонуклеотиде. Структура GaINAc₂-32_a представлена ниже:

Пример 112: Модифицированные олигонуклеотиды, содержащие конъюгат GalNAc₁

Олигонуклеотиды в Таблице 120, направленные на SRB-1, были синтезированы с группой конъюгата GalNAc₁ для дополнительной проверки эффективности олигонуклеотидов, содержащих группы конъюгата, которые содержат один лиганд GalNAc.

Пример 113: Антисмысловые олигонуклеотиды, направленные на ангиопоэтин-подобный белок 3 и содержащие группу конъюгата GalNAc

Олигонуклеотиды, представленные в таблице 121, были сконструированы для направленного воздействия на человеческий ангиопоэтин-подобный белок 3 (ANGPTL3).

Пример 114: Антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов, содержащих группу конъюгата GalNAc, направленных на человеческий ANGPTL3

Каждому шестинедельному самцу трансгенных мышей С57В1/6, экспрессирующих человеческий ANGPTL3, один раз в неделю вводили внутрибрюшинную инъекцию дозы, представленной ниже, в целом две дозы олигонуклеотидов, перечисленных в таблице 122 (и описанных в таблице 121), или PBS. Каждая экспериментальная группа состояла из 4 животных. Мышей усыпили через два дня после введения последней дозы. Уровни мРНК ANGPTL3 в печени измерили при помощи ПЦР в реальном времени и реагента для количественного определения РНК RIBOGREEN® (Molecular Probes, Inc., Юджин, штат Орегон) по стандартным протоколам. Результаты, показанные ниже, представлены как средний процент уровней мРНК ANGPTL3 в печени для каждой экспериментальной группы нормализованный к контролю с PBS.

Как показано в таблице 122, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами снижает уровни мРНК ANGPTL3 в печени дозозависимым образом, и олигонуклеотид, содержащий конъюгат GalNAc, был значительно более эффективным, чем исходный олигонуклеотид, не содержащий конъюгата GalNAc.

Во время усыпления измерили также уровни аланинаминотрансферазы (ALT) в печень по стандартным протоколам. Результаты демонстрируют, что ни одна из экспериментальных групп не демонстрировала повышенных уровней ALT, указывая на то, что данные олигонуклеотиды были хорошо переносимыми.

Пример 115: Антисмысловое ингибирование in vivo под действием олигонуклеотидов содержащих группу конъюгата GalNAc, направленных на мышиный ANGPTL3

Олигонуклеотиды, перечисленные ниже в Таблице 123, испытали в дозозависимом исследовании на мышах.

Структура GalNAc₃-7_a показана в Примере 48.

Мышей, нокаутных по рецептору липопротеинов низкой плотности (LDLR^-/-), выдерживали на вестерн-рационе в течение 1 недели, затем один раз в неделю вводили внутрибрюшинные инъекции дозы, представленной ниже, олигонуклеотида, перечисленного в таблице 123, или PBS. Каждая экспериментальная группа состояла из 5 животных. Образцы крови брали до введения первой дозы для определения исходных значений триглицеридов в плазме и через 2 недели после введения первой дозы. Результаты в таблице 124 представлены как средний процент от уровней триглицеридов в плазме для каждой экспериментальной группе, нормализованных к исходным уровням (% BL). Результаты показывают, что антисмысловые олигонуклеотиды снижают уровни триглицеридов дозозависимым образом. Кроме того, олигонуклеотиды, содержащие группу конъюгата GalNAc, демонстрируют еще более эффективное снижение уровней триглицеридов, чем олигонуклеотид, не содержащий группу конъюгата.

Пример 116: Антисмысловое ингибирование человеческого ангиопоэтин-подобного белка 3 в клетках Нер3В МОЕ гэпмерами

Были сконструированы антисмысловые олигонуклеотиды, направленные на нуклеиновую кислоту ангиопоэтин-подобного белка 3 (ANGPTL3) и были протестированы на их воздействие in vitro на мРНК ANGPTL3. Антисмысловые олигонуклеотиды были протестированы в серии экспериментов, которые имели аналогичные условия культивирования. Результаты каждого эксперимента представлены в отдельных таблицах, показанных ниже. Культивированные клетки Нер3В с плотностью 20000 клеток на лунку трансфицировали с использованием электропорации с 4500 нМ антисмыслового олигонуклеотида. После периода обработки длительностью примерно 24 часов, РНК выделяли из клеток и уровни мРНК ANGPTL3 измеряли методом количественной ПЦР в реальном времени. Набор человеческих праймерных зондов RTS3492_MGB (прямая последовательность CCGTGGAAGACCAATATAAACAATT, обозначенная в настоящем документе как SEQ ID NO: 4; обратная последовательность

AGTCCTTCTGAGCTGATTTTCTATTTCT, обозначенная в настоящем документе как SEQ ID NO: 5; последовательность зонда AACCAACAGCATAGTCAAATA, обозначенная в настоящем документе как SEQ ID NO: 6) использовали для измерения уровней мРНК. Уровни мРНК ANGPTL3 были скорректированы в соответствии с содержанием суммарной РНК, измеренным с помощью RIBOGREEN®. Результаты представлены как процентное ингибирование ANGPTL3 относительно необработанных контрольных клеток.

Впервые сконструированные химерные антисмысловые олигонуклеотиды, указанные в представленных ниже таблицах, были сконструированы как 5-10-5 МОЕ гэпмеры. Гэпмеры 5-10-5 МОЕ имеют 20 нуклеозидов в длину, причем центральный сегмент гэп состоит из десяти 2'-дезоксинуклеозидов и окружен сегментами крыльев с 5' конца и с 3' конца, содержащими по пять нуклеозидов каждый. Каждый нуклеозид сегмента 5' крыла и нуклеозид сегмента 3' крыла имеет 2'-МОЕ модификации. Межнуклеозидные связи в каждом гэпмере представляют собой тиофосфатные (P=S) связи. Все остатки цитозина в каждом гэпмере представляют собой 5-метилцитозины. «Сайт инициации» обозначает самый крайний 5' нуклеозид, на который направлен гэпмер в последовательности гена человека. «Сайт терминации» обозначает самый крайний 3' нуклеозид, на который направлен гэпмер в последовательности гена человека. Каждый гэпмер, перечисленный в представленных ниже таблицах, нацелен на мРНК ANGPTL3 человека, обозначенную в данном описании как SEQ ID NO: 1 (с номером доступа GENBANK NM_014495.2) или геномную последовательность ANGPTL3 человека, обозначенную в данном описании как SEQ ID NO: 2 (с номером доступа GENBANK NT_032977.9, усеченную по нуклеотидам с 33032001 по 33046000). «н/д» означает, что антисмысловой олигонуклеотид не направлен на указанную конкретную последовательность гена с 100% комплементарностью.

Пример 117: Дозозависимое антисмысловое ингибирование человеческого ANGPTL3 в клетках Нер3В МОЕ гэпмерами

5-10-5 МОЕ гэпмеры из описанных выше исследований, демонстрирующие значительное ингибирование мРНК ANGPTL3 in vitro, были отобраны и протестированы в различных дозах на клетках Нер3В. Клетки были высеяны с плотностью 20000 клеток на лунку и трансфицированы с использованием электропорации с концентрациями антисмыслового олигонуклеотида, равными 0,75 мкМ, 1,50 мкМ, 3,00 мкМ, 6,00 мкМ и 12,00 мкМ, как указано в представленной ниже таблице. После периода обработки примерно 16 часов, РНК выделяли из клеток и измеряли уровни мРНК ANGPTL3 методом количественной ПЦР в реальном времени. Для измерения уровней мРНК использовали набор человеческих праймерных зондов RTS3492 MGB. Уровни мРНК ANGPTL3 были скорректированы в соответствии с содержанием суммарной РНК, измеренным с помощью RIBOGREEN^®. Результаты представлены как процентное ингибирование ANGPTL3 относительно необработанных контрольных клеток.

Для каждого олигонуклеотида дополнительно приведена полумаксимальная ингибирующая концентрация (IC₅₀). Уровни мРНК ANGPTL3 были существенно снижены дозозависимым образом в обработанных антисмысловым олигонуклеотидом клетках.

Пример 118: Дозозависимое антисмысловое ингибирование человеческого ANGPTL3 в клетках Нер3В МОЕ гэпмерами

5-10-5 МОЕ гэпмеры из описанных выше исследований, демонстрирующие значительное ингибирование мРНК ANGPTL3 in vitro, были отобраны и протестированы в различных дозах на клетках Нер3В. Клетки были высеяны с плотностью 20000 клеток на лунку и трансфицированы с использованием электропорации с концентрациями антисмыслового олигонуклеотида, равными 0,813 мкМ, 1,625 мкМ, 3,25 мкМ, 6,50 мкМ и 13,00 мкМ, как указано в представленной ниже таблице. После периода обработки примерно 16 часов, РНК выделяли из клеток и измеряли уровни мРНК ANGPTL3 методом количественной ПЦР в реальном времени. Для измерения уровней мРНК использовали набор человеческих праймерных зондов RTS3492 MGB. Уровни мРНК ANGPTL3 были скорректированы в соответствии с содержанием суммарной РНК, измеренным с помощью RIBOGREEN^®. Результаты представлены как процентное ингибирование ANGPTL3 относительно необработанных контрольных клеток.

Для каждого олигонуклеотида дополнительно приведена полумаксимальная ингибирующая концентрация (IC₅₀). Уровни мРНК ANGPTL3 были существенно снижены дозозависимым образом в обработанных антисмысловым олигонуклеотидом клетках.

Пример 119: Антисмысловое ингибирование человеческого ANGPTL3 в клетках Нер3В дезокси, МОЕ и (S)-cEt гэпмерами

Были сконструированы дополнительные антисмысловые олигонуклеотиды, нацеленные на нуклеиновую кислоту ANGPTL3, и протестировано их влияние на мРНК ANGPTL3 in vitro. Культивированные клетки Нер3В с плотностью 20000 клеток на лунку трансфицировали с использованием электропорации с 4500 нМ антисмыслового олигонуклеотида. После периода обработки примерно 24 часов, РНК выделяли из клеток и измеряли уровни мРНК ANGPTL3 методом количественной ПЦР в реальном времени. Для измерения уровней мРНК использовали набор человеческих праймерных зондов RTS3492_MGB. Уровни мРНК ANGPTL3 были скорректированы в соответствии с содержанием суммарной РНК, измеренным с помощью RIBOGREEN®. Результаты представлены как процентное ингибирование ANGPTL3 относительно необработанных контрольных клеток.

Новые химерные антисмысловые олигонуклеотиды в представленных ниже таблицах были сконструированы как дезокси, МОЕ и (S)-cEt олигонуклеотиды. Дезокси, МОЕ и (S)-cEt олигонуклеотиды имеют 16 нуклеозидов в длину, причем нуклеозид содержит либо модификацию сахара МОЕ, либо модификацию сахара (S)-cEt, либо дезокси модификацию сахарного остатка. Сахарные модификации каждого антисмыслового олигонуклеотида описаны как «ееk-d10-kke», где «k» означает модификацию сахара (S)-cEt; «d» означает дезоксирибозу; число означает количество дезоксирибозных сахарных остатков; и «е» означает МОЕ модификацию сахара. Межнуклеозидные связи в каждом олигонуклеотиде представляют собой тиофосфатные (P=S) связи. Все остатки цитозина в каждом олигонуклеотиде представляют собой 5-метилцитозины. «Сайт инициации» обозначает самый крайний 5' нуклеозид, на который направлен олигонуклеотид в последовательности гена человека. «Сайт терминации» обозначает самый крайний 3' нуклеозид, на который направлен олигонуклеотид в последовательности гена человека. Каждый олигонуклеотид, перечисленный в представленных ниже таблицах, нацелен на мРНК ANGPTL3 человека, обозначенную в данном описании как SEQ ID NO: 1 (с номером доступа GENBANK NM_014495.2) или геномную последовательность ANGPTL3 человека, обозначенную в данном описании как SEQ ID NO: 2 (с номером доступа GENBANK NT_032977.9, усеченную по нуклеотидам с 33032001 по 33046000). «н/д» означает, что антисмысловой олигонуклеотид не направлен на указанную конкретную последовательность гена с 100% комплементарностью.

Пример 120: Антисмысловое ингибирование человеческого ANGPTL3 в клетках Нер3В дезокси, МОЕ и (S)-cEt гэпмерами

Были сконструированы дополнительные антисмысловые олигонуклеотиды, нацеленные на нуклеиновую кислоту ANGPTL3, и протестировано их влияние на мРНК ANGPTL3 in vitro. ISIS 337487 и ISIS 233717, которые представляют собой 5-10-5 МОЕ гэпмеры, также включили в анализ в качестве эталонных олигонуклеотидов. Культивированные клетки Нер3В с плотностью 20000 клеток на лунку трансфицировали с использованием электропорации с 4500 нМ антисмыслового олигонуклеотида. После периода обработки примерно 24 часов, РНК выделяли из клеток и измеряли уровни мРНК ANGPTL3 методом количественной ПЦР в реальном времени. Для измерения уровней мРНК использовали набор человеческих праймерных зондов RTS3492 MGB. Уровни мРНК ANGPTL3 были скорректированы в соответствии с содержанием суммарной РНК, измеренным с помощью RIBOGREEN®. Результаты представлены как процентное ингибирование ANGPTL3 относительно необработанных контрольных клеток.

Новые химерные антисмысловые олигонуклеотиды в представленных ниже таблицах были сконструированы как дезокси, МОЕ и (S)-cEt олигонуклеотиды или 5-10-5 МОЕ гэпмеры. Дезокси, МОЕ и (S)-cEt олигонуклеотиды имеют 16 нуклеозидов в длину, причем нуклеозид содержит либо модификацию сахара МОЕ, либо модификацию сахара (S)-cEt, либо дезокси модификацию сахарного остатка. Сахарные модификации каждого антисмыслового олигонуклеотида описаны как «еек-d10-kke», где «к» означает модификацию сахара (S)-cEt; «d» означает дезоксирибозу; число означает количество дезоксирибозных сахарных остатков; и «е» означает МОЕ модификацию. Гэпмеры 5-10-5 МОЕ имеют 20 нуклеозидов в длину, причем центральный сегмент гэп состоит из десяти 2'-дезоксинуклеозидов и окружен сегментами крыльев с 5' конца и с 3' конца, содержащими по пять нуклеозидов каждый. Межнуклеозидные связи в каждом олигонуклеотиде представляют собой тиофосфатные (P=S) связи. Все остатки цитозина в каждом олигонуклеотиде представляют собой 5-метилцитозины. «Сайт инициации» обозначает самый крайний 5' нуклеозид, на который направлен олигонуклеотид в последовательности гена человека. «Сайт терминации» обозначает самый крайний 3' нуклеозид, на который направлен олигонуклеотид в последовательности гена человека. Каждый олигонуклеотид, перечисленный в представленных ниже таблицах, нацелен на мРНК ANGPTL3 человека, обозначенную в данном описании как SEQ ID NO: 1 (с номером доступа GENBANK NM_014495.2) или геномную последовательность ANGPTL3 человека, обозначенную в данном описании как SEQ ID NO: 2 (с номером доступа GENBANK NT 032977.9, усеченную по нуклеотидам с 33032001 по 33046000). «н/д» означает, что антисмысловой олигонуклеотид не направлен на указанную конкретную последовательность гена с 100% комплементарностью.

Пример 121: Антисмысловое ингибирование человеческого ANGPTL3 в клетках Нер3В МОЕ гэпмерами

Были сконструированы дополнительные антисмысловые олигонуклеотиды, нацеленные на нуклеиновую кислоту ANGPTL3, и протестировано их влияние на мРНК ANGPTL3 in vitro. Культивированные клетки Нер3В с плотностью 20000 клеток на лунку трансфицировали с использованием электропорации с 4500 нМ антисмыслового олигонуклеотида. После периода обработки длительностью примерно 24 часов, РНК выделяли из клеток и уровни мРНК ANGPTL3 измеряли методом количественной ПЦР в реальном времени. Для измерения уровней мРНК использовали набор человеческих праймерных зондов RTS3492_MGB. Уровни мРНК ANGPTL3 были скорректированы в соответствии с содержанием суммарной РНК, измеренным с помощью RIBOGREEN®. Результаты представлены как процентное ингибирование ANGPTL3 относительно необработанных контрольных клеток.

Впервые сконструированные химерные антисмысловые олигонуклеотиды, указанные в представленных ниже таблицах, были сконструированы как 5-10-5 МОЕ или 3-10-4 МОЕ гэпмеры. Гэпмеры 5-10-5 МОЕ имеют 20 нуклеозидов в длину, причем центральный сегмент гэп состоит из десяти 2'-дезоксинуклеозидов и окружен сегментами крыльев с 5' конца и с 3' конца, содержащими по пять нуклеозидов каждый. Гэпмеры 3-10-4 МОЕ имеют 17 нуклеозидов в длину, причем центральный гэп состоит из десяти 2'-дезоксинуклеозидов и окружен сегментами крыльев с 5' конца и с 3' конца, содержащими три и четыре нуклеозида соответственно. Каждый нуклеозид сегмента 5' крыла и нуклеозид сегмента 3' крыла имеет 2'-МОЕ модификации. Каждый нуклеозид сегмента 5' крыла и нуклеозид сегмента 3' крыла имеет 2'-МОЕ модификации. Межнуклеозидные связи в каждом гэпмере представляют собой тиофосфатные (P=S) связи. Все остатки цитозина в каждом гэпмере представляют собой 5-метилцитозины. «Сайт инициации» обозначает самый крайний 5' нуклеозид, на который направлен гэпмер в последовательности гена человека. «Сайт терминации» обозначает самый крайний 3' нуклеозид, на который направлен гэпмер в последовательности гена человека. Каждый гэпмер, перечисленный в представленных ниже таблицах, нацелен на мРНК ANGPTL3 человека, обозначенную в данном описании как SEQ ID NO: 1 (с номером доступа GENBANK NM_014495.2) или геномную последовательность ANGPTL3 человека, обозначенную в данном описании как SEQ ID NO: 2 (с номером доступа GENBANK NT 032977.9, усеченную по нуклеотидам с 33032001 по 33046000). «н/д» означает, что антисмысловой олигонуклеотид не направлен на указанную конкретную последовательность гена с 100% комплементарностью.

Пример 122: Дозозависимое антисмысловое ингибирование человеческого ANGPTL3 в клетках Нер3В

Дезокси, МОЕ и cEt олигонуклеотиды из описанных выше исследований, демонстрирующие значительное ингибирование мРНК ANGPTL3 in vitro, были отобраны и протестированы в различных дозах на клетках Нер3В. ISIS 233717 и ISIS 337847, которые представляют собой 5-10-5 МОЕ гэпмеры, также включили в испытания. Антисмысловые олигонуклеотиды были протестированы в серии экспериментов, которые имели аналогичные условия культивирования. Результаты каждого эксперимента представлены в отдельных таблицах, показанных ниже.

Клетки были высеяны с плотностью 20000 клеток на лунку и трансфицированы с использованием электропорации с концентрациями антисмыслового олигонуклеотида, равными 0,813 мкМ, 1,625 мкМ, 3,25 мкМ, 6,500 мкМ и 13,00 мкМ, как указано в представленной ниже таблице. После периода обработки примерно 16 часов, РНК выделяли из клеток и измеряли уровни мРНК ANGPTL3 методом количественной ПЦР в реальном времени. Для измерения уровней мРНК использовали набор человеческих праймерных зондов RTS3492 MGB. Уровни мРНК ANGPTL3 были скорректированы в соответствии с содержанием суммарной РНК, измеренным с помощью RIBOGREEN^®. Результаты представлены как процентное ингибирование ANGPTL3 относительно необработанных контрольных клеток.

Для каждого олигонуклеотида дополнительно приведена полумаксимальная ингибирующая концентрация (IC₅₀). Уровни мРНК ANGPTL3 были существенно снижены дозозависимым образом в обработанных антисмысловым олигонуклеотидом клетках.

Пример 123: Дозозависимое антисмысловое ингибирование человеческого ANGPTL3 в клетках Нер3В

Дезокси, МОЕ и cEt олигонуклеотиды из описанных выше исследований, демонстрирующие значительное ингибирование мРНК ANGPTL3 in vitro, были отобраны и протестированы в различных дозах на клетках Нер3В. ISIS 337847, который представляет собой 5-10-5 МОЕ гэпмер, также включили в испытания. Антисмысловые олигонуклеотиды были протестированы в серии экспериментов, которые имели аналогичные условия культивирования. Результаты каждого эксперимента представлены в отдельных таблицах, показанных ниже.

Клетки были высеяны с плотностью 20000 клеток на лунку и трансфицированы с использованием электропорации с концентрациями антисмыслового олигонуклеотида, равными 0.160 мкМ, 0,481 мкМ, 1,444 мкМ, 4,333 мкМ и 13,00 мкМ, как указано в представленной ниже таблице. После периода обработки примерно 16 часов, РНК выделяли из клеток и измеряли уровни мРНК ANGPTL3 методом количественной ПЦР в реальном времени. Для измерения уровней мРНК использовали набор человеческих праймерных зондов RTS3492_MGB. Уровни мРНК ANGPTL3 были скорректированы в соответствии с содержанием суммарной РНК, измеренным с помощью RIBOGREEN^®. Результаты представлены как процентное ингибирование ANGPTL3 относительно необработанных контрольных клеток.

Для каждого олигонуклеотида дополнительно приведена полумаксимальная ингибирующая концентрация (IC₅₀). Уровни мРНК ANGPTL3 были существенно снижены дозозависимым образом в обработанных антисмысловым олигонуклеотидом клетках.

Пример 124: Дозозависимое антисмысловое ингибирование человеческого ANGPTL3 в клетках Нер3В МОЕ гэпмерами

МОЕ гэпмеры из описанных выше примеров, демонстрирующие значительное ингибирование мРНК ANGPTL3 in vitro, были отобраны и протестированы в различных дозах на клетках Нер3В. Клетки были высеяны с плотностью 20000 клеток на лунку и трансфицированы с использованием электропорации с концентрациями антисмыслового олигонуклеотида, равными 0.160 мкМ, 0,481 мкМ, 1,444 мкМ, 4,333 мкМ и 13,00 мкМ, как указано в представленной ниже таблице. После периода обработки примерно 16 часов, РНК выделяли из клеток и измеряли уровни мРНК ANGPTL3 методом количественной ПЦР в реальном времени. Для измерения уровней мРНК использовали набор человеческих праймерных зондов RTS3492_MGB. Уровни мРНК ANGPTL3 были скорректированы в соответствии с содержанием суммарной РНК, измеренным с помощью RIBOGREEN^®. Результаты представлены как процентное ингибирование ANGPTL3 относительно необработанных контрольных клеток.

Для каждого олигонуклеотида дополнительно приведена полумаксимальная ингибирующая концентрация (IC₅₀). Уровни мРНК ANGPTL3 были существенно снижены дозозависимым образом в обработанных антисмысловым олигонуклеотидом клетках.

Пример 125: Дозозависимое антисмысловое ингибирование человеческого ANGPTL3 в клетках Нер3В дезокси, МОЕ и cEt олигонуклеотидами

Дезокси, МОЕ и cEt олигонуклеотиды из описанных выше исследований, демонстрирующие значительное ингибирование мРНК ANGPTL3 in vitro, были отобраны и протестированы в различных дозах на клетках Нер3В. Клетки были высеяны с плотностью 20000 клеток на лунку и трансфицированы с использованием электропорации с концентрациями антисмыслового олигонуклеотида, равными 0,111 мкМ, 0,333 мкМ, 1,00 мкМ, 3,00 мкМ и 9,00 мкМ, как указано в представленной ниже таблице. После периода обработки примерно 16 часов, РНК выделяли из клеток и измеряли уровни мРНК ANGPTL3 методом количественной ПЦР в реальном времени. Для измерения уровней мРНК использовали набор человеческих праймерных зондов RTS3492 MGB. Уровни мРНК ANGPTL3 были скорректированы в соответствии с содержанием суммарной РНК, измеренным с помощью RIBOGREEN^®. Результаты представлены как процентное ингибирование ANGPTL3 относительно необработанных контрольных клеток.

Для каждого олигонуклеотида дополнительно приведена полумаксимальная ингибирующая концентрация (IC₅₀). Уровни мРНК ANGPTL3 были существенно снижены дозозависимым образом в обработанных антисмысловым олигонуклеотидом клетках.

Пример 126: Антисмысловое ингибирование человеческого ANGPTL3 у трансгенных мышей huANGPTL3

Антисмысловые олигонуклеотиды, описанные в представленных выше испытаниях, дополнительно оценивали на их способность снижать транскрипт мРНК человеческого ANGPTL3 у мышей С57В1/6 с трансгеном человеческого ANGPTL3 (Tg мыши).

Испытание 1

Самок Tg мышей выдерживали при 12-часовом цикле освещения/темноты. До начала эксперимента животных акклиматизировали по меньшей мере в течение 7 дней в исследовательской лаборатории. Антисмысловые олигонуклеотиды (ASO) получили в буферном солевом растворе (PBS) и стерилизовали фильтрованием через фильтр 0,2 мкм. Олигонуклеотиды растворили в 0,9% PBS для инъекций.

Группам мышей вводили внутрибрюшинные инъекции 5-10-5 МОЕ гэпмеров в дозе 50 мг/кг один раз в неделю в течение 2 недель. Одной группе мышей вводили подкожные инъекции PBS один раз в неделю в течение 2 недель. Группа, которой вводили инъекции PBS, служила в качестве контрольной группы, с которой сравнивали соответствующие группы, которым вводили олигонуклеотиды.

Анализ РНК

По окончании периода лечения из печени выделяли РНК для измерения экспрессии мРНК ANGPTL3 с RTS3492_MGB с помощью анализа ПЦР в реальном времени. Уровни мРНК измеряли также с набором праймерных зондов человека RTS1984 (прямая последовательность CTTCAATGAAACGTGGGAGAACT, обозначенная в настоящем документе как SEQ ID NO: 7; обратная последовательность TCTCTAGGCCCAACCAAAATTC, обозначенная в настоящем документе как SEQ ID NO: 8; последовательность зонда AAATATGGTTTTGGGAGGCTTGAT, обозначенная в настоящем документе как SEQ ID NO: 9). Результаты представлены как процентное изменение мРНК относительно контроля с PBS, нормализованное по RIBOGREEN^®. Как показано в представленной ниже таблице, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами ISIS привело к существенному снижению мРНК ANGPTL3 по сравнению с контрольным образцом с PBS.

Анализ белка

Уровни белка ANGPTL3 человека количественно определяли с помощью имеющегося в продаже набора для твердофазного иммуноферментного анализа (кат. № DANL30 производства R&D Systems, Миннеаполис, штат Миннесота) с образцами трансгенной плазмы, разбавленными 1:20000, по протоколу производителя. Результаты представлены в следующей таблице. Результаты демонстрируют, что лечение олигонуклеотидами ISIS приводит к снижению уровней белка ANGPTL3.

Химические маркеры плазмы

Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на 10 день измеряли уровни трансаминаз в плазме (ALT и AST), используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции печени, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.

Испытание 2

Самцов Tg мышей выдерживали при 12-часовом цикле освещения/темноты. До начала эксперимента животных акклиматизировали по меньшей мере в течение 7 дней в исследовательской лаборатории. Антисмысловые олигонуклеотиды (ASO) получили в буферном солевом растворе (PBS) и стерилизовали фильтрованием через фильтр 0,2 мкм. Олигонуклеотиды растворили в 0,9% PBS для инъекций.

Группам мышей вводили внутрибрюшинные инъекции 5-10-5 МОЕ гэпмеров в дозе 50 мг/кг один раз в неделю в течение 2 недель. Одной группе мышей вводили подкожные инъекции PBS один раз в неделю в течение 2 недель. Группы, которым вводили инъекции PBS, служили в качестве контрольных групп, с которыми сравнивали соответствующие группы, которым вводили олигонуклеотиды.

Анализ РНК

По окончании периода лечения из печени выделяли РНК для измерения экспрессии мРНК ANGPTL3 с RTS1984 с помощью анализа ПЦР в реальном времени. Результаты представлены как процентное изменение мРНК относительно контроля с PBS, нормализованное по RIBOGREEN^®. Как показано в представленной ниже таблице, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами ISIS привело к существенному снижению мРНК ANGPTL3 по сравнению с контрольным образцом с PBS.

Анализ белка

Уровни белка ANGPTL3 человека количественно определяли с помощью имеющегося в продаже набора для твердофазного иммуноферментного анализа (кат. № DANL30 производства R&D Systems, Миннеаполис, штат Миннесота) с образцами трансгенной плазмы, разбавленными 1:20000, по протоколу производителя. Результаты представлены в следующей таблице. Результаты демонстрируют, что лечение олигонуклеотидами ISIS приводит к снижению уровней белка ANGPTL3.

Химические маркеры плазмы

Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на 8 день измеряли уровни трансаминаз в плазме (ALT и AST), используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции печени, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.

Испытание 3

Самок и самцов Tg мышей выдерживали при 12-часовом цикле освещения/темноты. До начала эксперимента животных акклиматизировали по меньшей мере в течение 7 дней в исследовательской лаборатории. Антисмысловые олигонуклеотиды (ASO) получили в буферном солевом растворе (PBS) и стерилизовали фильтрованием через фильтр 0,2 мкм. Олигонуклеотиды растворили в 0,9% PBS для инъекций.

Группам мышей вводили внутрибрюшинные инъекции 5-10-5 МОЕ гэпмеров в дозе 2,5 мг/кг, 12,5 мг/кг или 25 мг/кг один раз в неделю в течение 3 недель. Одной группе мышей вводили подкожные инъекции PBS один раз в неделю в течение 2 недель. Группы, которым вводили инъекции PBS, служили в качестве контрольных групп, с которыми сравнивали соответствующие группы, которым вводили олигонуклеотиды.

Анализ РНК

По окончании периода лечения из печени выделяли РНК для измерения, методом ПЦР в реальном времени, экспрессии мРНК ANGPTL3 с hANGPTL3_LTS01022 (прямая последовательность AAATTTTAGCCAATGGCCTCC, обозначенная в настоящем документе как SEQ ID NO: 10; обратная последовательность TGTCATTAATTTGGCCCTTCG, обозначенная в настоящем документе как SEQ ID NO: 11; последовательность зонда TCAGTTGGGACATGGTCTTAAAGACTTTGTCC, обозначенная в настоящем документе как SEQ ID NO: 12). Результаты представлены как процентное изменение мРНК относительно контроля с PBS, нормализованное по RIBOGREEN^®. Как показано в представленной ниже таблице, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами ISIS привело к существенному снижению мРНК ANGPTL3 по сравнению с контрольным образцом с PBS. ED₅₀ каждого гэпмера также представлены в следующей таблице, «н.д.» означает, что ED₅₀ не может быть определен.

Анализ белка

Уровни белка ANGPTL3 человека количественно определяли с помощью имеющегося в продаже набора для твердофазного иммуноферментного анализа (кат. № DANL30 производства R&D Systems, Миннеаполис, штат Миннесота) с образцами трансгенной плазмы, разбавленными 1:20000, по протоколу производителя. Результаты представлены в следующей таблице. Результаты демонстрируют, что лечение олигонуклеотидами ISIS приводит к снижению уровней белка ANGPTL3. «н.д.» означает, что ED₅₀ не может быть определен.

Химические маркеры плазмы

Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на 17 день измеряли уровни трансаминаз в плазме (ALT и AST), используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции печени, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.

Испытание 4

Самок и самцов Tg мышей выдерживали при 12-часовом цикле освещения/темноты. До начала эксперимента животных акклиматизировали по меньшей мере в течение 7 дней в исследовательской лаборатории. Антисмысловые олигонуклеотиды (ASO) получили в буферном солевом растворе (PBS) и стерилизовали фильтрованием через фильтр 0,2 мкм. Олигонуклеотиды растворили в 0,9% PBS для инъекций.

Группам мышей вводили внутрибрюшинные инъекции 5-10-5 МОЕ гэпмеров в дозе 25 мг/кг один раз в неделю в течение 2 недель. Одной группе мышей вводили подкожные инъекции PBS один раз в неделю в течение 2 недель. Группа, которой вводили инъекции PBS, служила в качестве контрольной группы, с которой сравнивали соответствующие группы, которым вводили олигонуклеотиды.

Анализ РНК

По окончании периода лечения из печени выделяли РНК для измерения экспрессии мРНК ANGPTL3 с hANGPTL3_LTS01022 с помощью анализа ПЦР в реальном времени. Результаты представлены как процентное изменение мРНК относительно контроля с PBS, нормализованное по RIBOGREEN^®. Как показано в представленной ниже таблице, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами ISIS привело к существенному снижению мРНК ANGPTL3 по сравнению с контрольным образцом с PBS.

Химические маркеры плазмы

Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на 10 день измеряли уровни трансаминаз в плазме (ALT и AST), используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции печени, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.

Испытание 5

Самок и самцов Tg мышей выдерживали при 12-часовом цикле освещения/темноты. До начала эксперимента животных акклиматизировали по меньшей мере в течение 7 дней в исследовательской лаборатории. Антисмысловые олигонуклеотиды (ASO) получили в буферном солевом растворе (PBS) и стерилизовали фильтрованием через фильтр 0,2 мкм. Олигонуклеотиды растворили в 0,9% PBS для инъекций.

Группам мышей вводили внутрибрюшинные инъекции 5-10-5 МОЕ гэпмеров или дезокси, МОЕ и cEt гэпмеров в дозе 25 мг/кг один раз в неделю в течение 2 недель. Одной группе мышей вводили подкожные инъекции PBS один раз в неделю в течение 2 недель. Группа, которой вводили инъекции PBS, служила в качестве контрольной группы, с которой сравнивали соответствующие группы, которым вводили олигонуклеотиды.

Анализ РНК

По окончании периода лечения из печени выделяли РНК для измерения экспрессии мРНК ANGPTL3 с RTS1984 с помощью анализа ПЦР в реальном времени. Результаты представлены как процентное изменение мРНК относительно контроля с PBS, нормализованное по RIBOGREEN^®. Как показано в представленной ниже таблице, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами ISIS привело к существенному снижению мРНК ANGPTL3 по сравнению с контрольным образцом с PBS.

Химические маркеры плазмы

Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на 9 день измеряли уровни трансаминаз в плазме (ALT и AST), используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции печени, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.

Испытание 6

Самок и самцов Tg мышей выдерживали при 12-часовом цикле освещения/темноты. До начала эксперимента животных акклиматизировали по меньшей мере в течение 7 дней в исследовательской лаборатории. Антисмысловые олигонуклеотиды (ASO) получили в буферном солевом растворе (PBS) и стерилизовали фильтрованием через фильтр 0,2 мкм. Олигонуклеотиды растворили в 0,9% PBS для инъекций.

Группам мышей вводили внутрибрюшинные инъекции дезокси, МОЕ и cEt олигонуклеотидов в дозе 25 мг/кг один раз в неделю в течение 2 недель. ISIS 233710, который представляет собой 5-10-5 МОЕ гэпмер, также включили в испытания в качестве эталона. Одной группе мышей вводили подкожные инъекции PBS один раз в неделю в течение 2 недель. Группа, которой вводили инъекции PBS, служила в качестве контрольной группы, с которой сравнивали соответствующие группы, которым вводили олигонуклеотиды.

Анализ РНК

По окончании периода лечения из печени выделяли РНК для измерения экспрессии мРНК ANGPTL3 с hANGPTL3_LTS01022 с помощью анализа ПЦР в реальном времени. Результаты представлены как процентное изменение мРНК относительно контроля с PBS, нормализованное по RIBOGREEN^®. Как показано в представленной ниже таблице, лечение некоторыми антисмысловыми олигонуклеотидами ISIS привело к существенному снижению мРНК ANGPTL3 по сравнению с контрольным образцом с PBS.

Анализ белка

Уровни белка ANGPTL3 человека количественно определяли с помощью имеющегося в продаже набора для твердофазного иммуноферментного анализа (кат. № DANL30 производства R&D Systems, Миннеаполис, штат Миннесота) с образцами трансгенной плазмы, разбавленными 1:20000, по протоколу производителя. Результаты представлены в следующей таблице. Результаты демонстрируют, что лечение некоторыми олигонуклеотидами ISIS приводит к снижению уровней белка ANGPTL3.

Химические маркеры плазмы

Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на 10 день измеряли уровни трансаминаз в плазме (ALT и AST), используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции печени, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.

Испытание 7

Самок и самцов Tg мышей выдерживали при 12-часовом цикле освещения/темноты. До начала эксперимента животных акклиматизировали по меньшей мере в течение 7 дней в исследовательской лаборатории. Антисмысловые олигонуклеотиды (ASO) получили в буферном солевом растворе (PBS) и стерилизовали фильтрованием через фильтр 0,2 мкм. Олигонуклеотиды растворили в 0,9% PBS для инъекций.

Группам мышей вводили внутрибрюшинные инъекции дезокси, МОЕ и cEt олигонуклеотидов в дозе 25 мг/кг один раз в неделю в течение 2 недель. ISIS 233710, который представляет собой 5-10-5 МОЕ гэпмер, также включили в испытания в качестве эталона. Одной группе мышей вводили подкожные инъекции PBS один раз в неделю в течение 2 недель. Группа, которой вводили инъекции PBS, служила в качестве контрольной группы, с которой сравнивали соответствующие группы, которым вводили олигонуклеотиды.

Анализ РНК

По окончании периода лечения из печени выделяли РНК для измерения экспрессии мРНК ANGPTL3 с hANGPTL3_LTS01022 с помощью анализа ПЦР в реальном времени. Результаты представлены как процентное изменение мРНК относительно контроля с PBS, нормализованное по RIBOGREEN^®. Как показано в представленной ниже таблице, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами ISIS привело к существенному снижению мРНК ANGPTL3 по сравнению с контрольным образцом с PBS.

Анализ белка

Уровни белка ANGPTL3 человека количественно определяли с помощью имеющегося в продаже набора для твердофазного иммуноферментного анализа (кат. № DANL30 производства R&D Systems, Миннеаполис, штат Миннесота) с образцами трансгенной плазмы, разбавленными 1:20000, по протоколу производителя. Результаты представлены в следующей таблице. Результаты демонстрируют, что лечение некоторыми олигонуклеотидами ISIS приводит к снижению уровней ANGPTL3. В данном случае значение «0» значает, что лечение олигонуклеотидом ISIS не привело к ингибированию экспрессии; в некоторых случаях могли быть записаны увеличившиеся уровни экспрессии.

Химические маркеры плазмы

Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на 9 день измеряли уровни трансаминаз в плазме (ALT и AST), используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции печени, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.

Испытание 8

Самок и самцов Tg мышей выдерживали при 12-часовом цикле освещения/темноты. До начала эксперимента животных акклиматизировали по меньшей мере в течение 7 дней в исследовательской лаборатории. Антисмысловые олигонуклеотиды (ASO) получили в буферном солевом растворе (PBS) и стерилизовали фильтрованием через фильтр 0,2 мкм. Олигонуклеотиды растворили в 0,9% PBS для инъекций.

Группам мышей вводили внутрибрюшинные инъекции дезокси, МОЕ и cEt олигонуклеотидов в дозе 25 мг/кг один раз в неделю в течение 2 недель. ISIS 233710, который представляет собой 5-10-5 МОЕ гэпмер, также включили в испытания в качестве эталона. Одной группе мышей вводили подкожные инъекции PBS один раз в неделю в течение 2 недель. Группа, которой вводили инъекции PBS, служила в качестве контрольной группы, с которой сравнивали соответствующие группы, которым вводили олигонуклеотиды.

Анализ РНК

По окончании периода лечения из печени выделяли РНК для измерения экспрессии мРНК ANGPTL3 с hANGPTL3_LTS01022 с помощью анализа ПЦР в реальном времени. Результаты представлены как процентное изменение мРНК относительно контроля с PBS, нормализованное по RIBOGREEN^®. Как показано в представленной ниже таблице, лечение антисмысловым и олигонуклеотидами ISIS привело к существенному снижению мРНК ANGPTL3 по сравнению с контрольным образцом с PBS.

Анализ белка

Уровни белка ANGPTL3 человека количественно определяли с помощью имеющегося в продаже набора для твердофазного иммуноферментного анализа (кат. № DANL30 производства R&D Systems, Миннеаполис, штат Миннесота) с образцами трансгенной плазмы, разбавленными 1:20000, по протоколу производителя. Результаты представлены в следующей таблице. Результаты демонстрируют, что лечение олигонуклеотидами ISIS приводит к снижению уровней ANGPTL3.

Химические маркеры плазмы

Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на 8 день измеряли уровни трансаминаз в плазме (ALT и AST), используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции печени, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.

Испытание 9

Самок и самцов Tg мышей выдерживали при 12-часовом цикле освещения/темноты. До начала эксперимента животных акклиматизировали по меньшей мере в течение 7 дней в исследовательской лаборатории. Антисмысловые олигонуклеотиды (ASO) получили в буферном солевом растворе (PBS) и стерилизовали фильтрованием через фильтр 0,2 мкм. Олигонуклеотиды растворили в 0,9% PBS для инъекций.

Группам мышей вводили внутрибрюшинные инъекции дезокси, МОЕ и cEt олигонуклеотидов в дозе 25 мг/кг один раз в неделю в течение 2 недель. ISIS 233710, который представляет собой 5-10-5 МОЕ гэпмер, также включили в испытания в качестве эталона. Одной группе мышей вводили подкожные инъекции PBS один раз в неделю в течение 2 недель. Группа, которой вводили инъекции PBS, служила в качестве контрольной группы, с которой сравнивали соответствующие группы, которым вводили олигонуклеотиды.

Анализ РНК

По окончании периода лечения из печени выделяли РНК для измерения экспрессии мРНК ANGPTL3 с hANGPTL3_LTS01022 с помощью анализа ПЦР в реальном времени. Результаты представлены как процентное изменение мРНК относительно контроля с PBS, нормализованное по RIBOGREEN^®. Как показано в представленной ниже таблице, лечение некоторыми антисмысловыми олигонуклеотидами ISIS привело к существенному снижению мРНК ANGPTL3 по сравнению с контрольным образцом с PBS. В данном случае значение «0» значает, что лечение олигонуклеотидом ISIS не привело к ингибированию экспрессии; в некоторых случаях могли быть записаны увеличившиеся уровни экспрессии.

Анализ белка

Уровни белка ANGPTL3 человека количественно определяли с помощью имеющегося в продаже набора для твердофазного иммуноферментного анализа (кат. № DANL30 производства R&D Systems, Миннеаполис, штат Миннесота) с образцами трансгенной плазмы, разбавленными 1:20000, по протоколу производителя. Результаты представлены в следующей таблице. Результаты демонстрируют, что лечение некоторыми олигонуклеотидами ISIS приводит к снижению уровней ANGPTL3. В данном случае значение «0» значает, что лечение олигонуклеотидом ISIS не привело к ингибированию экспрессии; в некоторых случаях могли быть записаны увеличившиеся уровни экспрессии.

Химические маркеры плазмы

Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на 9 день измеряли уровни трансаминаз в плазме (ALT и AST), используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции печени, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.

Испытание 10

Самок и самцов Tg мышей выдерживали при 12-часовом цикле освещения/темноты. До начала эксперимента животных акклиматизировали по меньшей мере в течение 7 дней в исследовательской лаборатории. Антисмысловые олигонуклеотиды (ASO) получили в буферном солевом растворе (PBS) и стерилизовали фильтрованием через фильтр 0,2 мкм. Олигонуклеотиды растворили в 0,9% PBS для инъекций.

Группам мышей вводили внутрибрюшинные инъекции 5-10-5 МОЕ гэпмеров или дезокси, МОЕ и cEt олигонуклеотидов в дозе 5 мг/кг, 12,5 мг/кг или 25 мг/кг один раз в неделю в течение 2 недель. Одной группе мышей вводили подкожные инъекции PBS один раз в неделю в течение 2 недель. Группа, которой вводили инъекции PBS, служила в качестве контрольной группы, с которой сравнивали соответствующие группы, которым вводили олигонуклеотиды.

Анализ РНК

По окончании периода лечения из печени выделяли РНК для измерения экспрессии мРНК ANGPTL3 с hANGPTL3_LTS01022, а также с RTS3492_MGB, с помощью анализа ПЦР в реальном времени. Результаты представлены как процентное изменение мРНК относительно контроля с PBS, нормализованное по RIBOGREEN^®. Как показано в представленной ниже таблице, лечение некоторыми антисмысловыми олигонуклеотидами ISIS привело к снижению мРНК ANGPTL3 по сравнению с контрольным образцом с PBS.

Химические маркеры плазмы

Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на 8 день измеряли уровни трансаминаз в плазме (ALT и AST), используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции печени, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.

Пример 127: Переносимость антисмысловых олигонуклеотидов, направленных на человеческий ANGPTL3, у мышей CD1

Мыши CD1® (Charles River, штат Массачусетс) представляют собой многоцелевую мышиную модель, часто используемую для испытания безопасности и эффективности. Мышей лечили антисмысловыми олигонуклеотидами ISIS, отобранными в исследованиях, описанных выше, и оценивали изменения уровней различных химических маркеров в плазме.

Испытание 1

Самцам мышей CD1 (одно животное на экспериментальную группу) вводили внутрибрюшинные инъекции однократной дозы 200 мг/кг дезокси, МОЕ и cEt олигонуклеотида. Одному самцу мыши CD1 вводили подкожную инъекцию однократной дозы PBS. Мышей усыпляли через 48 часов после введения последней дозы, и собирали органы и плазму для дальнейшего анализа.

Химические маркеры плазмы

Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на 4 день измеряли уровни трансаминаз в плазме (ALT и AST), используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции печени, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.

Масса тела

На следующий день после введения однократной дозы олигонуклеотида ISIS проводили измерение массы тела, и результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали любые изменения массы органов, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.

Испытание 2

Самцам мышей CD1 (одно животное на экспериментальную группу) вводили внутрибрюшинные инъекции однократной дозы 200 мг/кг дезокси, МОЕ и cEt олигонуклеотида. Одному самцу мыши CD1 вводили подкожную инъекцию однократной дозы PBS. Мышей усыпляли через 48 часов после введения последней дозы, и собирали органы и плазму для дальнейшего анализа.

Химические маркеры плазмы

Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на 5 день измеряли уровни трансаминаз в плазме (ALT и AST), используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции печени, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.

Масса тела

На 5 день после введения однократной дозы олигонуклеотида ISIS проводили измерение массы тела, и результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали любые изменения массы органов, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.

Испытание 3

Самцам мышей CD1 (четыре животных на экспериментальную группу) вводили внутрибрюшинные инъекции по 100 мг/кг 5-10-5 МОЕ гэпмеров один раз в неделю в течение 6 недель. Одной группе из 4 самцов самцов мышей CD1 вводили внутрибрюшинные инъекции PBS один раз в неделю в течение 6 недель. Мышей усыпляли через 48 часов после введения последней дозы, и собирали органы и плазму для дальнейшего анализа.

Химические маркеры плазмы

Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на 45 день измеряли уровни в плазме различных маркеров функции печени и почек, используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из указанных маркеров, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.

Масса тела

Массу тела измеряли на 43 день, и результаты представлены в следующей таблице. По окончании исследования, на 45 день измерили массу почек, печени и селезенки. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали любые изменения массы органов, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.

Испытание 4

Самцам мышей CD1 (четыре животных на экспериментальную группу) вводили внутрибрюшинные инъекции по 50 мг/кг или 100 мг/кг 5-10-5 МОЕ гэпмеров или дезокси, МОЕ и cEt олигонуклеотидов, один раз в неделю в течение 6 недель. Одной группе из 4 самцов самцов мышей CD1 вводили внутрибрюшинные инъекции PBS один раз в неделю в течение 6 недель. Мышей усыпляли через 48 часов после введения последней дозы, и собирали органы и плазму для дальнейшего анализа.

Химические маркеры плазмы

Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на 46 день измеряли уровни в плазме различных маркеров функции печени и почек, используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из указанных маркеров, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.

Масса тела

Массу тела измеряли на 44 день, и результаты представлены в следующей таблице. По окончании исследования, на 46 день измерили массу почек, печени и селезенки. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали любые изменения массы органов, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.

Испытание 5

Самцам мышей CD1 (четыре животных на экспериментальную группу) вводили внутрибрюшинные инъекции по 50 мг/кг дезокси, МОЕ и cEt олигонуклеотидов, один раз в неделю в течение 6 недель. Одной группе из 4 самцов самцов мышей CD1 вводили внутрибрюшинные инъекции PBS один раз в неделю в течение 6 недель. Мышей усыпляли через 48 часов после введения последней дозы, и собирали органы и плазму для дальнейшего анализа.

Химические маркеры плазмы

Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на 43 день измеряли уровни в плазме различных маркеров функции печени и почек, используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из указанных маркеров, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.

Масса тела

Массу тела измеряли на 41 день, и результаты представлены в следующей таблице. По окончании исследования, на 43 день измерили массу почек, печени и селезенки. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали любые изменения массы органов, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.

Пример 128: Измерение вязкости антисмысловых олигонуклеотидов ISIS, направленных на человеческий ANGPTL3

Вязкость отобранных антисмысловых олигонуклеотидов из исследований, описанных выше, измеряли с целью выбрать антисмысловые олигонуклеотиды, имеющие вязкость более 40 сантипуаз (сП). Олигонуклеотиды, имеющие вязкость более 40 сП, имеют неоптимальную вязкость.

Олигонуклеотиды ISIS (32-35 мг) взвешивали в стеклянной пробирке, добавляли 120 мкл воды и растворяли антисмысловой олигонуклеотид с получением раствора, нагревая пробирку при 50°C. Часть (75 мкл) предварительно нагретого образца помещали пипеткой в микровискозиметр (Cambridge). Температуру микровискозиметра устанавливали на 25°C и измеряли вязкость образца. Другую часть (20 мкл) предварительно нагретого образца помещали пипеткой в 10 мл воды для УФ-считывания при 260 нм при 85°C (УФ-прибор Cary). Результаты представлены в следующей таблице, где концентрация каждого антисмыслового олигонуклеотида составляла 350 мг/мл, и демонстрируют, что большинство растворов антисмысловых соединений оптимальны по своей вязкости в соответствии с критерием, указанным выше.

Пример 129: Переносимость антисмысловых олигонуклеотидов, направленных на человеческий ANGPTL3, у крыс Спрага-Доули

Крысы Спрага-Доули представляют собой многоцелевую модель, используемую для испытания безопасности и эффективности. Крыс лечили антисмысловыми олигонуклеотидами ISIS из исследований, описанных в представленных выше примерах, и оценивали изменения уровней различных химических маркеров в плазме.

Испытание 1

Самцов крыс Спрага-Доули выдерживали при 12-часовом цикле освещения/темноты и обеспечивали свободный доступ к нормальному корму для крыс Purina, рацион 5001. Группам по 4 крысы Спрага-Доули один раз в неделю в течение 6 недель вводили подкожные инъекции PBS или 100 мг/кг 5-10-5 МОЕ гэпмеров. Через сорок восемь часов после введения последней дозы крыс усыпляли и собирали органы и плазму для дальнейшего анализа.

Функция печени

Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на функцию печени измеряли уровни трансаминаз в плазме, используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). На 45 день измеряли уровни ALT (аланинтрансаминазы и AST (аспартаттрансаминазы) в плазме, и результаты, выраженные в МЕ/л, представлены в следующей таблице. Измеряли также уровни билирубина в плазме, используя тот же клинический анализатор химического состава, и результаты, выраженные в МЕ/л, также представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции печени, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.

Функция почек

Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на функцию почек измеряли уровни азота мочевины крови (АМК) и креатинина в плазме с использованием автоматического клинического анализатора химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты, представленные в следующей таблице, выражены в мг/дл. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции почек, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний. Измерял уровни общего белка и креатинина в моче и рассчитывали соотношение общего белка в моче к креатинину. Результаты представлены в следующей таблице.

Масса органов

Массу тела измеряли на 42 день, и результаты представлены в следующей таблице. По окончании исследования, на 45 день измеряли массу печени, селезенки и почек, и результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали любые изменения массы органов, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.

Испытание 2

Самцов крыс Спрага-Доули выдерживали при 12-часовом цикле освещения/темноты и обеспечивали свободный доступ к нормальному корму для крыс Purina, рацион 5001. Группам по 4 крысы Спрага-Доули один раз в неделю в течение 6 недель вводили подкожные инъекции PBS или 50 мг/кг или 100 мг/кг 5-10-5 МОЕ гэпмеров или дезокси, МОЕ и cEt олигонуклеотидов. Через сорок восемь часов после введения последней дозы крыс усыпляли и собирали органы и плазму для дальнейшего анализа.

Функция печени

Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на функцию печени измеряли уровни трансаминаз в плазме, используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). На 44 день измеряли уровни ALT (аланинтрансаминазы и AST (аспартаттрансаминазы) в плазме, и результаты, выраженные в МЕ/л, представлены в следующей таблице. Измеряли также уровни билирубина в плазме, используя тот же клинический анализатор химического состава, и результаты, выраженные в МЕ/л, также представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции печени, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.

Функция почек

Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на функцию почек измеряли уровни азота мочевины крови (АМК) и креатинина в плазме на 44 день с использованием автоматического клинического анализатора химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты, представленные в следующей таблице, выражены в мг/дл. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции почек, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний. Измерял уровни общего белка и креатинина в моче и рассчитывали соотношение общего белка в моче к креатинину. Результаты представлены в следующей таблице.

Масса органов

Массу тела измеряли на 42 день, и результаты представлены в следующей таблице. По окончании исследования, на 44 день измеряли массу печени, селезенки и почек, и результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали любые изменения массы органов, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.

Испытание 3

Самцов крыс Спрага-Доули выдерживали при 12-часовом цикле освещения/темноты и обеспечивали свободный доступ к нормальному корму для крыс Purina, рацион 5001. Группам по 4 крысы Спрага-Доули один раз в неделю в течение 6 недель вводили подкожные инъекции PBS или 50 мг/кг дезокси, МОЕ и cEt олигонуклеотидов. Через сорок восемь часов после введения последней дозы крыс усыпляли и собирали органы и плазму для дальнейшего анализа.

Функция печени

Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на функцию печени измеряли уровни трансаминаз в плазме, используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). На 44 день измеряли уровни ALT (аланинтрансаминазы и AST (аспартаттрансаминазы) в плазме, и результаты, выраженные в МЕ/л, представлены в следующей таблице. Измеряли также уровни билирубина в плазме, используя тот же клинический анализатор химического состава, и результаты, выраженные в МЕ/л, также представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции печени, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.

Функция почек

Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на функцию почек измеряли уровни азота мочевины крови (АМК) и креатинина в плазме на 44 день с использованием автоматического клинического анализатора химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты, представленные в следующей таблице, выражены в мг/дл. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали изменения уровней любого из маркеров функции почек, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний. Измерял уровни общего белка и креатинина в моче и рассчитывали соотношение общего белка в моче к креатинину. Результаты представлены в следующей таблице.

Масса органов

Массу тела измеряли на 42 день, и результаты представлены в следующей таблице. По окончании исследования, на 44 день измеряли массу печени, селезенки и почек, и результаты представлены в следующей таблице. Олигонуклеотиды ISIS, которые вызывали любые изменения массы органов, выходящие за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов, исключали из дальнейших испытаний.

Пример 130: Влияние антисмысловых олигонуклеотидов ISIS, нацеленных на ANGPTL3 человека, у яванских макак

Яванских макак лечили антисмысловыми олигонуклеотидами ISIS, отобранными в исследованиях, описанных в представленных выше примерах. Оценивали эффективность и переносимость антисмысловых олигонуклеотидов, а также их фармакокинетический профиль в печени и почках.

Во время проведения испытаний геномная последовательность яванских макак отсутствовала в базе данных Национального центра биотехнологической информации (NCBI); поэтому перекрестная реактивность с последовательностью гена яванских макак не может быть подтверждена. Вместо этого последовательности антисмысловых олигонуклеотидов ISIS, использованные на яванских макаках, сравнивали с последовательностью резус-макак на предмет гомологии. Предполагается, что олигонуклеотиды ISIS с гомологией к последовательности резус-макак, являются также полностью перекрестно реактивными с последовательностью яванских макак. Испытанные человеческие антисмысловые олигонуклеотиды являются перекрестно реактивными с геномной последовательностью резуса (номер доступа GENBANK NW_001108682.1, усеченная с нуклеотида 3049001 по 3062000, обозначенная в настоящем документе как SEQ ID NO: 3). Чем выше комплементарность между человеческим олигонуклеотидом и последовательностью макаки резус, тем вероятнее, что человеческий олигонуклеотид может перекрестно реагировать с последовательностью макак резус. Сайты инициации и терминации каждого олигонуклеотида, направленного на SEQ ID NO: 3, представлены в следующей таблице. «Сайт инициации» обозначает самый крайний 5' нуклеозид, на который направлен гэпмер в последовательности гена резус-макаки. «Рассогласование» указывает на количество азотистых оснований в человеческом олигонуклеотиде, которые не соответствуют геномной последовательности резуса.

Лечение

Перед началом исследования обезьян выдерживали на карантине в течение по меньшей мере 30 дней, в течение которых ежедневно следили за общим состоянием здоровья животных. Возраст обезьян составлял 2-4 года, а масса от 2 до 4 кг. Девяти группам по 5 случайным образом распределенных самцов яванских макак вводили подкожные инъекции олигонуклеотида ISIS или PBS в четырех местах на спине по часовой стрелке (т.е. слева, сверху, справа и снизу), по одному месту на дозу. Обезьянам вводили насыщающие дозы PBS или 40 мг/кг олигонуклеотида ISIS каждые два дня в течение первой недели (1, 3, 5 и 7 день), а затем вводили дозы один раз в неделю в течение 12 недель (14, 21, 28, 35, 42, 49, 56, 63, 70, 77 и 84 день) PBS или 40 мг/кг олигонуклеотида ISIS.

В течение периода испытаний обезьян два раза в сутки наблюдали на наличие признаков заболевания или недомогания. Животных, испытывающих более чем мимолетную или слабую боль или недомогание вследствие лечения, травмы или болезни, лечили ветеринары с применением одобренных обезболивающих или агентов для облегчения боли, после консультации с руководителем исследования. Животных с ослабленным здоровьем или в состоянии возможной агонии идентифицировали для дальнейшего наблюдения и возможного усыпления. Например, у одного животного в экспериментальной группе ISIS 567321 на 45 день была обнаружена агония, и испытание прекратили. Плановое усыпление животных проводили на 86 день (примерно через 48 часов после введения последней дозы) путем обескровливания после анестезии с кетамином/ксилазином и введения пентобарбитала натрия. Описанные в примерах протоколы одобрены Комитетом по содержанию и использованию лабораторных животных (IACUC).

Снижение печеночной мишени

Анализ РНК

На 86 день выделили РНК из ткани печени для анализа экспрессии мРНК ANGPTL3 с помощью ПНР в реальном времени. Результаты представлены как процентное изменение мРНК относительно контроля с PBS, нормализованное по RIBOGREEN^®. Как показано в представленной ниже таблице, лечение антисмысловыми олигонуклеотидами ISIS привело к существенному снижению мРНК ANGPTL3 по сравнению с контрольным образцом с PBS. Анализ уровней мРНК ANGPTL3 показал, что ISIS 544199 и ISIS 559277, которые являются полностью перекрестно реактивными с последовательностью резуса, существенно снижают уровни экспрессии. Другие олигонуклеотиды ISIS, направленные на последовательность обезьян с рассогласованиями, также могут снижать уровни мРНК ANGPTL3.

Анализ белка

Примерно 1 мл крови взяли у всех доступных животных на 85 день и поместили в пробирки, содержащие калиевую соль ЭДТК. Образцы крови сразу поместили на лед и центрифугировали (3000 об./мин. в течение 10 минут при 4°C) с получением плазмы.

Уровни белка ANGPTL3 человека количественно определяли с помощью имеющегося в продаже набора для твердофазного иммуноферментного анализа (кат. № DANL30 производства R&D Systems, Миннеаполис, штат Миннесота) с образцами трансгенной плазмы, разбавленными 1:20000, по протоколу производителя. Результаты представлены в следующей таблице. Анализ ANGPTL3 в плазме показал, что ISIS 563580, 544199 и ISIS 559277 устойчиво снижают уровни белка. Другие олигонуклеотиды ISIS также могут снижать уровни ANGPTL3.

Исследования переносимости

Измерения массы тела

Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на общее состояние здоровья животных измеряли массу тела, и результаты представлены в следующей таблице. Результаты демонстрируют, что влияние лечения антисмысловыми олигонуклеотидами на массу тела находится в пределах ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов. В частности, лечение с применением ISIS 563580 хорошо переносилось с точки зрения массы тела обезьян.

Функция печени

Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на функцию печени из всех экспериментальных групп взяли образцы крови. Образцы крови брали из головной, подкожной или бедренной вены через 48 часов после введения дозы. Обезьяны не принимали пищу в течение ночи до сбора крови. Кровь собирали в пробирки без антикоагулянта для отделения сыворотки. Пробирки выдерживали при комнатной температуре в течение не менее 90 минут, а затем центрифугировали (примерно 3000 об./мин. в течение 10 минут) для получения сыворотки. Уровни различных маркеров функции печени измеряли с помощью анализатора химического состава Toshiba 200FR NEO (Toshiba Co., Япония). Измеряли уровни ALT и AST в плазме, и результаты, выраженные в МЕ/л, представлены в следующей таблице. Таким же образом измеряли билирубин, маркер функции печени, и результаты, выраженные в мг/дл, представлены в следующей таблице. Результаты демонстрируют, что большинство антисмысловых олигонуклеотидов не оказывают воздействия на функцию печени, выходящего за пределы ожидаемого диапазона для антисмысловых олигонуклеотидов. В частности, лечение с применением ISIS 563580 хорошо переносилось с точки зрения функции печени обезьян.

Функция почек

Для оценки влияния олигонуклеотидов ISIS на функцию почек из всех экспериментальных групп взяли образцы крови. Образцы крови брали из головной, подкожной или бедренной вены через 48 часов после введения дозы. Обезьяны не принимали пищу в течение ночи до сбора крови. Кровь собирали в пробирки без антикоагулянта для отделения сыворотки. Пробирки выдерживали при комнатной температуре в течение не менее 90 минут, а затем центрифугировали (примерно 3000 об./мин. в течение 10 минут) для получения сыворотки. Уровни АМК и креатинина измеряли с помощью анализатора химического состава Toshiba 200FR NEO (Toshiba Co., Япония). Результаты, представленные в следующей таблице, выражены в мг/дл.

Данные химического анализа плазмы показывают, что большинство олигонуклеотидов ISIS не оказывали какого-либо влияния на почечную функцию за пределами ожидаемого для антисмысловых олигонуклеотидов диапазона. В частности, лечение с применением ISIS 563580 хорошо переносилось с точки зрения функции почек обезьян.

Гематология

Чтобы оценить влияние олигонуклеотидов ISIS на гематологические параметры яванских макак, образцы крови объемом примерно 0,5 мл крови отбирали у каждого из доступных экспериментальных животных в пробирки, содержащие К₂-ЭДТА. Образцы анализировали на содержание красных кровяных телец (RBC), содержание белых кровяных телец (WBC), количество отдельных белых кровяных телец, таких как моноциты, нейтрофилы, лимфоциты, а также на количество тромбоцитов, содержание гемоглобина и гематокрита, используя анализатор гематологии ADVIA120 (Bayer, США). Данные представлены в следующих таблицах.

Данные показывают, что олигонуклеотиды не вызывали каких-либо изменений гематологических параметров за пределами ожидаемого для антисмысловых олигонуклеотидов диапазона. В частности, лечение с применением ISIS 563580 хорошо переносилось с точки зрения гематологических параметров обезьян.

Влияние на провоспалительные молекулы

Для оценки воспалительного эффекта олигонуклеотидов ISIS у яванских макак для анализа взяли образцы крови для проведения анализа С-реактивного белка и уровней С3 на 84 день до введения дозы. У каждого животного взяли примерно 1,5 мл крови и поместили в пробирки без антикоагулянта для отделения сыворотки. Пробирки выдерживали при комнатной температуре в течение не менее 90 минут, а затем центрифугировали при 3000 об./мин в течение 10 минут при комнатной температуре для получения сыворотки. С-реактивный белок (CRP) и комплемент С3, которые служат маркерами воспаления, измеряли с помощью анализатора химического состава Toshiba 200FR NEO (Toshiba Co., Япония). Результаты демонстрируют, что лечение с применением ISIS 563580 является переносимым у обезьян.

Измерение концентрации олигонуклеотида

Измеряли концентрацию полноразмерного олигонуклеотида. Использованные способы представляют собой модификацию ранее опубликованных способов (Leeds et al., 1996; Geary et al., 1999), которые состоят из экстракции фенолом-хлороформом (жидкость-жидкость) с последующей твердофазной экстракцией. Внутренний стандарт (ISIS 355868, 27-мер 2'-O-метоксиэтил-модифицированного тиофосфатного олигонуклеотида, GCGTTTGCTCTTCTTCTTGCGTTTTTT, обозначенный в настоящем документе как SEQ ID NO: 13), добавляли до экстракции. Концентрации в образце ткани рассчитывали с помощью калибровочных кривых, где нижний предел количественного обнаружения (LLOQ) составляет примерно 1,14 мкг/г. Результаты, выраженные в мкг/г ткани печени или почек, представлены в следующей таблице. Рассчитывали соотношение концентраций полноразмерного олигонуклеотида в почках относительно печени. Установили, что соотношение концентраций полноразмерного олигонуклеотида в почках относительно печени после лечения ISIS 563580 было наиболее оптимальным, по сравнению с другими исследованными соединениями.

Пример 131: Сравнение антисмыслового ингибирования человеческого ANGPTL3 у трансгенных мышей huANGPTL3 ISIS олигонуклеотидами, содержащими группу конъюгата GalNAc, и ISIS олигонуклеотидами, не содержащими группу конъюгата GalNAc

Антисмысловые олигонуклеотиды, содержащие GalNAc₃-7_a, испытывали в сравнении с их несопряженными аналогами на способность снижать транскрипт мРНК человеческого ANGPTL3 у Tg мышей. Гэпмеры, направленные на SEQ ID NO: 1, описаны в следующей таблице и в таблице 121. Символы в колонке «Химия скелета» означают следующее: «s» означает сложный тиоэфир, а «о» означает фосфатный сложный эфир.

Самок и самцов Tg мышей выдерживали при 12-часовом цикле освещения/темноты. До начала эксперимента животных акклиматизировали по меньшей мере в течение 7 дней в исследовательской лаборатории. Антисмысловые олигонуклеотиды (ASO) получили в буферном солевом растворе (PBS) и стерилизовали фильтрованием через фильтр 0,2 мкм. Олигонуклеотиды растворили в 0,9% PBS для инъекций.

Группам по 4 мыши вводили подкожные инъекции ISIS 563580 в дозе 5 мг/кг, 10 мг/кг, 15 мг/кг или 30 мг/кг один раз в неделю в течение 2 недель. Группам по 4 мыши вводили внутрибрюшинные инъекции ISIS 703801 или ISIS 703802 в дозах 0,3 мг/кг, 1 мг/кг, 3 мг/кг или 10 мг/кг, один раз в неделю в течение 2 недель. Одной группе мышей вводили подкожные инъекции PBS один раз в неделю в течение 2 недель. Группа, которой вводили инъекции PBS, служила в качестве контрольной группы, с которой сравнивали соответствующие группы, которым вводили олигонуклеотиды.

Анализ РНК

По окончании периода лечения из ткани печени выделяли РНК для измерения экспрессии мРНК ANGPTL3 с набором человеческих праймерных зондов hANGPTL3_LTS01022 с помощью анализа ПЦР в реальном времени. Результаты представлены как процентное изменение мРНК относительно контрольного образца с PBS, нормализованное по RIBOGREEN^®. Нулевое значение означает просто, что указанный антисмысловой олигонуклеотид не ингибирует экспрессию на измеримом уровне.

Результаты демонстрируют, что сопряженные соединения гораздо более эффективны для снижения экспрессии ANGPTL3, чем их несопряженные аналоги, по данным процентного ингибирования и по значениям ID₅₀. Сопряженный олигонуклеотид со смешанным химическим составом скелета (703802) был более эффективен для ингибирования экспрессии, чем сопряженный олигонуклеотид с полностью тиофосфатным химическим составом скелета (703801).

Анализ белка

Уровни белка ANGPTL3 человека количественно определяли с помощью имеющегося в продаже набора для твердофазного иммуноферментного анализа (кат. № DANL30 производства R&D Systems, Миннеаполис, штат Миннесота) с образцами трансгенной плазмы, разбавленными 1:20000, по протоколу производителя. Результаты представлены в следующей таблице. Нулевое значение означает просто, что указанные антисмысловой олигонуклеотид не ингибирует экспрессию на измеримом уровне.

Результаты демонстрируют, что сопряженные соединения гораздо более эффективны для снижения экспрессии ANGPTL3, чем их несопряженные аналоги, по данным процентного ингибирования. Сопряженный олигонуклеотид со смешанным химическим составом скелета (703802) был более эффективен для ингибирования экспрессии, чем сопряженный олигонуклеотид с полностью тиофосфатным химическим составом скелета (703801).

Пример 132: Переносимость GalNAc-сопряженного антисмыслового олигонуклеотида, направленного на человеческий ANGPTL3, у мышей CD1

Самцам мышей CD1 (четыре животных на экспериментальную группу) вводили подкожные инъекции различных доз ISIS 703802, описанных в следующей таблице, в течение 6 недель (на 1, 3, 5, 8, 14, 21, 28, 35 и 42 день). Одной группе из 4 самцов самцов мышей CD1 вводили подкожные инъекции PBS в течение 6 недель. Мышей усыпляли через 48 часов после введения последней дозы, и собирали органы и плазму для дальнейшего анализа.

Химические маркеры плазмы

Для оценки влияния ISIS 703802 на 44 день измеряли уровни в плазме различных маркеров функции печени и почек, используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). Результаты представлены в следующей таблице. Было показано, что ISIS 703802 представляет собой переносимое соединение даже в высоких дозах.

Масса тела

По окончании исследования, на 44 день измерили массу тела, почек, печени и селезенки. ISIS 703802 не вызывает существенного изменения массы тела и органов даже при введении в высоких дозах.

Пример 133: Переносимость GalNAc-сопряженного антисмыслового олигонуклеотида, направленного на человеческий ANGPTL3, у крыс Спрага-Доули

Крысы Спрага-Доули представляют собой многоцелевую модель, используемую для испытания безопасности и эффективности. Самцов крыс Спрага-Доули выдерживали при 12-часовом цикле освещения/темноты и обеспечивали свободный доступ к нормальному корму для крыс Purina, рацион 5001. Группам по 4 крысы Спрага-Доули вводили подкожные инъекции различных доз ISIS 703802, описанных в следующей таблице, в течение 6 недель (на 1, 3, 5, 8, 14, 21, 28, 35 и 42 день). Одной группе из 4 крыс вводили подкожные инъекции PBS в течение 6 недель. Крыс усыпляли через 48 часов после введения последней дозы, и собирали органы и плазму для дальнейшего анализа.

Функция печени и почек

Для оценки влияния ISIS 703802 на функцию печени измеряли уровни трансаминаз в плазме, используя автоматизированный клинический анализатор химического состава (Hitachi Olympus AU400e, Мелвилл, штат Нью-Йорк). На 44 день измеряли уровни ALT (аланинтрансаминазы и AST (аспартаттрансаминазы) в плазме, и результаты, выраженные в МЕ/л, представлены в следующей таблице.

Для оценки влияния ISIS 703802 на функцию почек измеряли уровни альбумина, азота мочевины крови (АМК), креатинина и билирубина в плазме с использованием того же автоматического клинического анализатора химического состава, и результаты представлены в следующей таблице, выраженные в г/дл или мг/дл.

Для дополнительного анализа влияния ISIS 703802 на функцию почек измеряли уровни белка и креатинина в моче и рассчитывали соотношение общего белка в моче к креатинину. Результаты представлены в следующей таблице.

Было показано, что ISIS 703802 представляет собой переносимое соединение даже в высоких дозах.

Масса органов

По окончании исследования, на 44 день измеряли массу тела, печени, селезенки и почек, и результаты представлены в следующей таблице. ISIS 703802 не вызывает существенного изменения массы тела, почек и печени даже при введении в высоких дозах.

--->

ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> Isis Pharmaceuticals

<120> КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ МОДУЛИРОВАНИЯ ЭКСПРЕССИИ АНГИОПОЭТИН-ПОДОБНОГО БЕЛКА 3

<130> BIOL0254WO

<150> 61/987467

<151> 2014-05-01

<150> 62/049230

<151> 2014-09-11

<160> 4914

<170> PatentIn версии 3.5

<210> 1

<211> 2126

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 1

ttccagaaga aaacagttcc acgttgcttg aaattgaaaa tcaagataaa aatgttcaca 60

attaagctcc ttctttttat tgttcctcta gttatttcct ccagaattga tcaagacaat 120

tcatcatttg attctctatc tccagagcca aaatcaagat ttgctatgtt agacgatgta 180

aaaattttag ccaatggcct ccttcagttg ggacatggtc ttaaagactt tgtccataag 240

acgaagggcc aaattaatga catatttcaa aaactcaaca tatttgatca gtctttttat 300

gatctatcgc tgcaaaccag tgaaatcaaa gaagaagaaa aggaactgag aagaactaca 360

tataaactac aagtcaaaaa tgaagaggta aagaatatgt cacttgaact caactcaaaa 420

cttgaaagcc tcctagaaga aaaaattcta cttcaacaaa aagtgaaata tttagaagag 480

caactaacta acttaattca aaatcaacct gaaactccag aacacccaga agtaacttca 540

cttaaaactt ttgtagaaaa acaagataat agcatcaaag accttctcca gaccgtggaa 600

gaccaatata aacaattaaa ccaacagcat agtcaaataa aagaaataga aaatcagctc 660

agaaggacta gtattcaaga acccacagaa atttctctat cttccaagcc aagagcacca 720

agaactactc cctttcttca gttgaatgaa ataagaaatg taaaacatga tggcattcct 780

gctgaatgta ccaccattta taacagaggt gaacatacaa gtggcatgta tgccatcaga 840

cccagcaact ctcaagtttt tcatgtctac tgtgatgtta tatcaggtag tccatggaca 900

ttaattcaac atcgaataga tggatcacaa aacttcaatg aaacgtggga gaactacaaa 960

tatggttttg ggaggcttga tggagaattt tggttgggcc tagagaagat atactccata 1020

gtgaagcaat ctaattatgt tttacgaatt gagttggaag actggaaaga caacaaacat 1080

tatattgaat attcttttta cttgggaaat cacgaaacca actatacgct acatctagtt 1140

gcgattactg gcaatgtccc caatgcaatc ccggaaaaca aagatttggt gttttctact 1200

tgggatcaca aagcaaaagg acacttcaac tgtccagagg gttattcagg aggctggtgg 1260

tggcatgatg agtgtggaga aaacaaccta aatggtaaat ataacaaacc aagagcaaaa 1320

tctaagccag agaggagaag aggattatct tggaagtctc aaaatggaag gttatactct 1380

ataaaatcaa ccaaaatgtt gatccatcca acagattcag aaagctttga atgaactgag 1440

gcaaatttaa aaggcaataa tttaaacatt aacctcattc caagttaatg tggtctaata 1500

atctggtatt aaatccttaa gagaaagctt gagaaataga ttttttttat cttaaagtca 1560

ctgtctattt aagattaaac atacaatcac ataaccttaa agaataccgt ttacatttct 1620

caatcaaaat tcttataata ctatttgttt taaattttgt gatgtgggaa tcaattttag 1680

atggtcacaa tctagattat aatcaatagg tgaacttatt aaataacttt tctaaataaa 1740

aaatttagag acttttattt taaaaggcat catatgagct aatatcacaa ctttcccagt 1800

ttaaaaaact agtactcttg ttaaaactct aaacttgact aaatacagag gactggtaat 1860

tgtacagttc ttaaatgttg tagtattaat ttcaaaacta aaaatcgtca gcacagagta 1920

tgtgtaaaaa tctgtaatac aaatttttaa actgatgctt cattttgcta caaaataatt 1980

tggagtaaat gtttgatatg atttatttat gaaacctaat gaagcagaat taaatactgt 2040

attaaaataa gttcgctgtc tttaaacaaa tggagatgac tactaagtca cattgacttt 2100

aacatgaggt atcactatac cttatt 2126

<210> 2

<211> 14000

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 2

caagactacg tgaccattac ctctactctg tcagtgttat ttgtgagaaa ttgcacaaat 60

tttgcaaaaa gtgttagtat cctactacag taggatataa tatagaagga aataatttca 120

taaagcctgt ctttggtact agtgctcagt tactttcatt aactaaaaaa ggggctactc 180

ttcaaattcc cttctctaaa aagaatgtac tatatcaaaa gggggtaaac actactacgt 240

atacattctg cacttagaaa tccctatatg ttgattttat cattctctta ttcaataaat 300

attgtttcta caatgtgtaa ggcattactg tactaaagca ttataaggaa tataagttaa 360

aaacacatac aaatcttgcc aatcaacagc ttatagtgta ataggggaga gaagctggcc 420

catctatatt ctccctcaac tagcaagtgg atgaaatatc agggtcaata gttataagcc 480

acaaaagctg acagcttaat taagagaagt tttgaaatat gtatttcatg accaataatt 540

acaactgtaa cttttctatt taaagaagga gaaaatttga atttcttctc tagctcaaca 600

tacacttcta taattccatt acatgaacca gagtaaaggg taagatggaa atgaagaata 660

ttttcttacc cttttgtggt tctatattgg acacttaaaa atcatacaca acctaatcaa 720

aagatgtaat tctttaaaaa ggtacgagac caaaattcag aaaatctaga ctataacaaa 780

atttctcaat ttacattatc ttaatatgca attaattttc accagtaaaa tactatagta 840

tgggtacaaa tgcattgatt agttctaatt acaaaaatgg ctaatatata atactgtgta 900

gtgtttatga tacatcagat aatgttctaa gtgctctgaa aatataaact tttaatcttt 960

tatacgaccc tataaaatag gtgttattct cactggagag atgagaaaac aggggttcag 1020

agatgtgaag taatttgacc aaaggtcaca aagctgaaga atatgaaatc cgggattctg 1080

attcaggcag tcttattcca gaatcatgct cttaaccact atggaatact gcctctactg 1140

taactattat acccaaaacc cttaatccta agtcatcaaa aggaagagcc tctattttac 1200

acaatgaaga ggcatttcta agaatagaaa tttagggacg agcacagtgg cttactcctt 1260

taatatcagc actttgagag gctgatatgg gaggttcact tgaagtcagg agttcaaggt 1320

cagcttgggc aacatagtga aacacagtct ctacaaaata tttaaaaatt agctgggtgt 1380

ggtggcatgc atctatagtc tcagctactt gggagacaga gggaggaggc ttgctcgagc 1440

ccaggagttc gtggctatag tgagctatga tcatgccact gcactccagc ctggacaaca 1500

gagcaagacc ctgtctctaa aaaagaaaag aaatttggaa atggtttatt ttgtattaac 1560

aatttataat ttacactgaa atttattatg ataaaacttt tccctgtgtt aaaaagctat 1620

taactttatg aaaaatttct tttaggtaag gttgattata tatacccaca cacatacaca 1680

ggttaaaagt tagtttcatg tgacataata actagcattt tgagcactac ctgtttgccc 1740

agcactgttc taagtgctct acatgtatta ttgttaaatt atcataacac tatgaattat 1800

gtactataat taccccagct ttacagatga ggagactaat ccatggggag gttaagtaac 1860

ttgtccaagg ccagacagct agagccggct tttggaccca caccacagtc tgactccagc 1920

acccatattc ttaacaattt caccatatta atatgtcaag attaagcagt tttaaaggat 1980

gctattttct cacaaatttc ttaatatgaa cactcaataa gaataatcac taatataagc 2040

atttagtatt tttttaacac taagttggaa gcatagtgga acatttattt ttagaaatat 2100

tattaattgg ctgggctcac gcttgtaatc ggctgggctc atgcctgtaa attttgggag 2160

gccaaggtaa aagaattgct tgagcccagt atttccagac cagcatgggc aatacattaa 2220

gacatcatct ttaaaaaaaa aatgttatta atctcctctt tttgttaaat gtatattatc 2280

aaaattgtta ctaagctaac aaacttcaga aaaacttatg atgggcaagc tgcttgtgac 2340

attgaaggta tttaagattc aattctagtt tggtcctaga tgaccacata tccattgttc 2400

cttcaacgag cacatggtaa agagcctaga acacagagac acagaacaca gtggagaaaa 2460

gggagtgaaa tgtctttaat gacacttact atatatggga ttttgtgaca atatacaagg 2520

atggttaaga catataaggt gatgcaaaaa aacatattaa caattatagt gacaaaaaat 2580

gaggagcata taattataca ttgatttata cagagtacca gaggaacaca gcattgagag 2640

ccgtaacacc acctgaggga gtggagaaag gcttcagaga gaaagtgttt tttggaatgg 2700

atcactgttt ccaaaagaac taaagtacag tttgagaaat gcatacttaa ttcattactt 2760

ttttcccctc aactttaata ataaatttac ccaacaaaaa agtttatttt tgacttgtaa 2820

atctcttaaa atcataaaaa agtaaaatta gcttttaaaa acaggtagtc accatagcat 2880

tgaatgtgta gtttataata cagcaaagtt aaatacaatt tcaaattacc tattaagtta 2940

gttgctcatt tctttgattt catttagcat tgatctaact caatgtggaa gaaggttaca 3000

ttcgtgcaag ttaacacggc ttaatgatta actatgttca cctaccaacc ttaccttttc 3060

tgggcaaata ttggtatata tagagttaag aagtctaggt ctgcttccag aagaaaacag 3120

ttccacgttg cttgaaattg aaaatcaaga taaaaatgtt cacaattaag ctccttcttt 3180

ttattgttcc tctagttatt tcctccagaa ttgatcaaga caattcatca tttgattctc 3240

tatctccaga gccaaaatca agatttgcta tgttagacga tgtaaaaatt ttagccaatg 3300

gcctccttca gttgggacat ggtcttaaag actttgtcca taagacgaag ggccaaatta 3360

atgacatatt tcaaaaactc aacatatttg atcagtcttt ttatgatcta tcgctgcaaa 3420

ccagtgaaat caaagaagaa gaaaaggaac tgagaagaac tacatataaa ctacaagtca 3480

aaaatgaaga ggtaaagaat atgtcacttg aactcaactc aaaacttgaa agcctcctag 3540

aagaaaaaat tctacttcaa caaaaagtga aatatttaga agagcaacta actaacttaa 3600

ttcaaaatca acctgaaact ccagaacacc cagaagtaac ttcacttaaa gtaagtagaa 3660

aataaagagg gttcatgttt atgttttcaa tgtggatctt ttaaaaaaaa tatttctaag 3720

gcatgccatt tgaaatactt tgttgcattg ttgaaatact tttttttcca agaaaaataa 3780

tctccagaaa ataaaatttc ctattataat ttcaagttag ttttttgttt ccctaatgtt 3840

atatatgaaa acactgaaaa tttgcatttt atatgaaaat tacaaatcgg ttaaattata 3900

caatctagaa cactatgtca ttacactatt gtaaattact gaaggtaagt aaaaagttaa 3960

aaaaaattta aaactattct ccagtgttta aaacagatta aataatacag taaatggaaa 4020

agatttattc atatgaaaat atgctgggct ttttctttta attgaagttc agaaaatcaa 4080

attttagaga tagtacaatt taaataaaat gttaaggaca aaaatatgtg ctatttgaaa 4140

gaagcataca aggggaagga attgccaata ttcatttttc aaatccatta ttagtttaaa 4200

aatttagatt atgatagtgt tacaggaaat taatagaaaa gaaagaggaa agcaacttat 4260

aaccaaccta ctctctatat ccagactttt gtagaaaaac aagataatag catcaaagac 4320

cttctccaga ccgtggaaga ccaatataaa caattaaacc aacagcatag tcaaataaaa 4380

gaaatagaaa atcaggtaag tcagtatttt aatggtatgt cccatctttc acacaggtct 4440

gtaaaaacac tgaatcctaa aattatttac aagctttaac tggatcatga gtaaaattat 4500

cacatcagca taactgttaa aattgcaggc tctgaagcta ataaactacc tgcatttaaa 4560

ccatggctct aaaactttgt gtgaccttga ataaattact tcaccccttt atctctcagt 4620

ttcctcacat atactacaaa gataataaca gaacttatag gattattgta agaaaaaaaa 4680

ttaattcata gcagccaatg tcatcttact aaaattcaaa ttagatcatg tttctctttg 4740

ctcaaaacca cacaatagct ttccatttca ctcatattgg ctctttagac caagattacc 4800

caacccttcg tcatctcact gacttcacct cctctactct agttattctg accgctttac 4860

cagtattcaa acacatcaaa catactgcca cctcaaagcc tttgcccttg ttgtttcctc 4920

taactggaac gctcttctgc cctggtatct acgtggccca ctctctgatt tcccttaggg 4980

tcgttatcaa acaaaaaatt cccaatgaag acttacaagg tcacttaacc aaaaatcaca 5040

accgcctggt cccatccctg aaaacttcta cttccttagc tacttttctc ctgcacactc 5100

acctttattt aacataacat aaattttagt tatttatctc ttctattcct gcactaaaat 5160

gtaagctctg tgaatacagg gattttttcc attatcttca tattttccat tatttgtata 5220

tactccagaa tatagaatac tgtatggcac acagtaggca tttctgttga attaataaat 5280

gtaatgtcat attcacacag aagcgtgtgc tatgattatt attacttgga ttactagaaa 5340

tagtgtgcct cataattaaa ggtcaacatt caacaatgta attaatctac aatgtaaaca 5400

tctggtgaag tgacagaggg aagcacttgt ttagaaaaaa gctatgtcag aatccatgta 5460

ttctaatatg cagtacaata gtttaaaaat attaataata ctctcaaaca gctattcaag 5520

aggattcaaa aaacataata taaactcaga gaaactggta aacaaaatca ttttcaagag 5580

atataaaaca aatattatta ccaatttcca ctaaacaaac ataatgttag tagtgctgct 5640

aaaaggtttt ttatcaacta cttttggttt ccatactttc cttcttatga tgttattatt 5700

ctaaattctt ttcaattata tcttttacta tgattaaatg aacctgctcc ccaaagcaaa 5760

atgttactat agtaatatac attgtgtcta aaaataaaaa tgtgtgaaga aaccaaaaca 5820

atgaatttct gagttggaag aagagttaga tcatttaact ttctcatatt taaattaaaa 5880

aaacaaaact ctaaaaattt aagtaacttt aagatcacat agttacttag tagaaaagag 5940

taatacccag caagcaaact ttacaataga tccttttaaa taaggtccta ggaaatatca 6000

ttcatgccag catcaaaaaa ctaacactaa taatgcaaga tattatatat tctgcttttc 6060

ttactgtcaa tgagaaaaac tatcattcaa taaattgcaa acccaacaca cttaaataaa 6120

aataaaatgt tactgctaaa ctaacgataa actactgaat atatagaaag taagcaaaca 6180

aacttgccaa cctgccaaca tctacagata tgtttacagg tcaaaaatta tcaaattatc 6240

aagaaagcct ggttcaaatt atgtattatg tctttatcac aggtctgaag atcagtaaga 6300

cctaaaactg aaaattatta aacttaaaat ctgaacagaa tatcaaatat attttattca 6360

tataaataaa agaatacatt acaatattct aagcaaagca gtctctactt ttggccttgc 6420

tctgttttcc gaccaatgtc tgcttttttg ccttgcttta tttttttatc ttattaaata 6480

atgtccctga ttaaatattt tgagaacagg taatctgtac aatctgaata acactgttta 6540

tctaaatatc aaacaccgtt ataacattat gaactgaaag acaaactgta cttctgacat 6600

ccttactcag atttccccta attgtatatt cagtatcatt ttaaaaaaca gatttatatt 6660

cttttatcag ctcagaagga ctagtattca agaacccaca gaaatttctc tatcttccaa 6720

gccaagagca ccaagaacta ctccctttct tcagttgaat gaaataagaa atgtaaaaca 6780

tgatggtaag acactttggt gggtttcctt cttgaagcta ttattatcaa attccctatt 6840

cttaggactt gttctagact aaaagatagt taagagatat ccatcaaata caatgtatca 6900

acctaaactg gatgctgggg ttctttttac accctataaa agacatacct aagacaatca 6960

gagaaataca aatatggact tgattattag ataatataga aggtttatta attttcttag 7020

atgtgatcat ggtattgcag ttttaaagga gaacaatctc ctgtttaaga gatacatgct 7080

gaaatattta cggagttaaa ggtcactgga ctccagactg gtgatagaac aagactctgt 7140

ctctaaaaaa taattaattt tttaaaagaa aatagtttgg taagatgatt cttacattct 7200

taaataacac gccatctaag aaaaatgctt taacataaac attactgaaa aaatgctaca 7260

tttgccacaa cttcataaaa tgtcaagtga aatctcaagc tccaaagata ttattcctat 7320

tactaaatct gatgtaataa cattttattg attctaggca ttcctgctga atgtaccacc 7380

atttataaca gaggtgaaca tacaagtggc atgtatgcca tcagacccag caactctcaa 7440

gtttttcatg tctactgtga tgttatatca ggtaaaacct gtctaaggag aatagacagt 7500

agttagttca acttactcat tacgtattag gaagattaac ctggttatca ttgttttata 7560

catatatata tgaaatatat atgagtattc gtataaatat aatactttta ccttgtttat 7620

gtatttactc aatattctcc ttttcctcta aaataatctg aagtgactat tatcaataag 7680

tttactatgc caaaattcat taattgcctt tcacttaact tttgggacca taataaataa 7740

taaaatgtat tgccataaca ttaataaact accttacaaa accaccaatt aaaatcaaac 7800

aaacaaaaaa gtgttattta catctgtcaa cataaatcta ctaaaaatac atgatttcat 7860

tcattatatt caggtagtcc atggacatta attcaacatc gaatagatgg atcacaaaac 7920

ttcaatgaaa cgtgggagaa ctacaaatat ggttttggga ggcttgatgg taaggggact 7980

acattcaatc attcattcac ttgctaatct acaaatattt actgagaacc tcttatggac 8040

caggtattag gaaaagtagt aacgaacgag aagcagtctc agccttcata taatttatta 8100

tcaaacaatt acacatttgt tagtaaatta cacttattac aactgttatt atttgaatta 8160

tatttatcac aattacatgt ctgttcttaa atatacttat cacaatttaa ttccacggct 8220

tacaatgatc ataactataa ttattaaaga caattttgat taaatgttat gtcataagta 8280

gtaactgtta caaataagct gtgaaaagaa ccactcctag cattagtcac tctattctct 8340

cattaacgtt ttacatatca attaattgga agttaaaagg accaggaaac tcagacatac 8400

agtatacatt ttaaaatttc aattatttaa atataatata tagaatgtat ggcttataat 8460

gaattagtta actcaatgca aattattcta ttttgattac aaatagtaaa ataagcaaga 8520

taaaataaca gatgtttaaa atccaaaaag cacatacaaa aatccatgaa tgatgtctaa 8580

gtactcactt ataaagtaga agacattcat tattatatca aatttttaaa tgctcagtac 8640

tatttgacca tttaaaaatt ttgtattcaa actaccagtg aaagccctac ctagaaggta 8700

tactcagtga taagttttgt agctccaaat cttctaatag tgagtgtaac cccaaaataa 8760

aaggctgaca ggtaagtcga gaatactcac ttaattctgg taagaaagca acccatttgt 8820

acttgtattt accagcaatc cttaaaatga agcttcctac taactcaata gcaataagac 8880

aatagtgaat gtttaatgaa aacagtattt tataaatact ttaataaaaa ggattgtgat 8940

gaagaacaat ctatttatat ttgttatttg tttttaattc caataaaaat aatttttaaa 9000

attacagaaa aaagttatta agaaccatgc ttttaaattt aaaatgattt tttaaattta 9060

ttcctgtctt tttctacaaa gaaagcatac attaagcaaa taccaaaggc caggtttaca 9120

tttgaagaaa gtgacattat tattactcaa gtctctagga atacttaaca catctcttga 9180

ctgtatatgg atgttaataa atagctgaca gtaaagttta tccatataaa gacttgcaaa 9240

tattcctcta ccaatgacga gactttaaaa tatctataat aatgtaacac atttcactgg 9300

tgaaacatgt cttgtcatat gcattataga aaggataatc agactttcag ttatattaat 9360

atttttaaca tttttgtgca catagctatc ttcaataaaa ttgttttaaa aggtattatt 9420

ttaagataca ctaaaatgat caagggattc aagactaaac aactcaatta gttgcaccaa 9480

taaaaaacac ttaaaaaaac tgtcagtgtc caacctgtac ttaataactc acagattttt 9540

aaaacttttc ttttcaggag aattttggtt gggcctagag aagatatact ccatagtgaa 9600

gcaatctaat tatgttttac gaattgagtt ggaagactgg aaagacaaca aacattatat 9660

tgaatattct ttttacttgg gaaatcacga aaccaactat acgctacatc tagttgcgat 9720

tactggcaat gtccccaatg caatcccgga aaacaaagat ttggtgtttt ctacttggga 9780

tcacaaagca aaaggacact tcaactgtcc agagggttat tcaggtatct ttttctgata 9840

ccaatacttt attttcatat cttcaaagta tcttcccaca ttattagcta ttatctgcaa 9900

tgacaacttt taaaaatccg aatcccaaat aagcgttttc tctctagacg aaaacctctt 9960

aactataatg aaagtgttca ttctagttca atcaggtatt ttacctctaa tcttcctcag 10020

attttctatt ttttggtagt gtatagatta tttatacaga ttatttaaaa ttgggactta 10080

tacagattat ttaaaactgg gatacatgca tctaaaacac tgtaatattt ataagaaagg 10140

aagataaact tacggggaaa tacagtaaca gtaactacat acgagtctgt acccattaaa 10200

ttgcatatct atctccttta ggaggctggt ggtggcatga tgagtgtgga gaaaacaacc 10260

taaatggtaa atataacaaa ccaagagcaa aatctaagcc agagaggaga agaggattat 10320

cttggaagtc tcaaaatgga aggttatact ctataaaatc aaccaaaatg ttgatccatc 10380

caacagattc agaaagcttt gaatgaactg aggcaaattt aaaaggcaat aatttaaaca 10440

ttaacctcat tccaagttaa tgtggtctaa taatctggta ttaaatcctt aagagaaagc 10500

ttgagaaata gatttttttt atcttaaagt cactgtctat ttaagattaa acatacaatc 10560

acataacctt aaagaatacc gtttacattt ctcaatcaaa attcttataa tactatttgt 10620

tttaaatttt gtgatgtggg aatcaatttt agatggtcac aatctagatt ataatcaata 10680

ggtgaactta ttaaataact tttctaaata aaaaatttag agacttttat tttaaaaggc 10740

atcatatgag ctaatatcac aactttccca gtttaaaaaa ctagtactct tgttaaaact 10800

ctaaacttga ctaaatacag aggactggta attgtacagt tcttaaatgt tgtagtatta 10860

atttcaaaac taaaaatcgt cagcacagag tatgtgtaaa aatctgtaat acaaattttt 10920

aaactgatgc ttcattttgc tacaaaataa tttggagtaa atgtttgata tgatttattt 10980

atgaaaccta atgaagcaga attaaatact gtattaaaat aagttcgctg tctttaaaca 11040

aatggagatg actactaagt cacattgact ttaacatgag gtatcactat accttatttg 11100

ttaaaatata tactgtatac attttatata ttttaacact taatactatg aaaacaaata 11160

attgtaaagg aatcttgtca gattacagta agaatgaaca tatttgtggc atcgagttaa 11220

agtttatatt tcccctaaat atgctgtgat tctaatacat tcgtgtaggt tttcaagtag 11280

aaataaacct cgtaacaagt tactgaacgt ttaaacagcc tgacaagcat gtatatatgt 11340

ttaaaattca ataaacaaag acccagtccc taaattatag aaatttaaat tattcttgca 11400

tgtttatcga catcacaaca gatccctaaa tccctaaatc cctaaagatt agatacaaat 11460

tttttaccac agtatcactt gtcagaattt atttttaaat atgatttttt aaaactgcca 11520

gtaagaaatt ttaaattaaa cccatttgtt aaaggatata gtgcccaagt tatatggtga 11580

cctacctttg tcaatactta gcattatgta tttcaaatta tccaatatac atgtcatata 11640

tatttttata tgtcacatat ataaaagata tgtatgatct atgtgaatcc taagtaaata 11700

ttttgttcca gaaaagtaca aaataataaa ggtaaaaata atctataatt ttcaggacca 11760

cagactaagc tgtcgaaatt aacgctgatt tttttagggc cagaatacca aaatggctcc 11820

tctcttcccc caaaattgga caatttcaaa tgcaaaataa ttcattattt aatatatgag 11880

ttgcttcctc tatttggttt ccttaaaaaa aaaaaaaact ctcataggac atgtttcatt 11940

ttgttccttt caggagtagt aaattagacg ttttccccat ataaagcttt tttctaccag 12000

aaagatactt ctggtagaag aagagaaagg agctctttat ggttcacacg actgtctcct 12060

gtcctaacta ctttgcttaa agtgctcaaa ttccatcact actcacagtt gtctaatcta 12120

agtctaatcc cctttgatct ctcagactac cttccctttt atctctctac tacttaataa 12180

taagaatatc tttttttcaa acttgacctt cattttgctt tcacaatact atactctcca 12240

tggattatcc cttatctgaa tccatcttta taaccctatt cctttctcat atttagtact 12300

gtgggccaat ggacaacctt caatcatctt ttctacactg accctcagac attctatctg 12360

ctctcacgga ctcctttatt taccatgaat aaagttccaa aatctacata ttcatcccaa 12420

gtctctttcc agttcccctt cttacattgc ctatttgcca tttctccctt caatacccta 12480

tacttcactc aaattcaaca taccaaaaat aaaaggccag gcacggtggc tcacacctgt 12540

aatcccagga ctttgggagg ctgaggcagg tggatcacct gaggtcagga gtctgaccag 12600

cctgaccaat atggtgaaac cccgtctcta cctaaaatac aaaaattagc caggcgtggt 12660

ggcatgtgcc tacagtccca gctactcaag aggctgagac aggagaatcg cttgaaccca 12720

ggaggcggag gttgcagtga gctgagatca caccaatgca ctgggtgaca gaacaagact 12780

gactcaaaaa aaaataaata acaaattccc cagcccctta ctgctactgc tatccctttc 12840

tacccacctt tccctccttt atactctttc acaccatctt cctcacttct ttatatccat 12900

taatatgacc agcatgttcc cagtcacaga agcctggaac ccggaagaca tctctggctt 12960

ttcactcaac tttgtaaact acctcttttg tatcataagc caccaagttc aatacaatct 13020

tctcttgaaa cgtctcttaa tcttataagc tttcttcccc aaagactgtc tttaacttca 13080

gtgctagatt atataagtag tctcttcttt cctcctaatt ttacgtccct ctccctgtca 13140

atcttccgaa aaggaatttg taatggctgc atactgcctg gacctgtgtc tttcaagctc 13200

atctactgaa gaagtgtaac agcagaggat aatgaaaaca aatcctttta ttgtctggag 13260

ttacaggata aaataactta ctatatgcac aaatttcttt cagaatctta ttgggatctt 13320

agcttaaatc ttagaatttt actttaaaat tgcatatgaa ttgtgtttta tactttataa 13380

atctatcttc atgcctgcag tggctcacac ctgtaatcca agtattttgg gaggccgggg 13440

cgggagtact gcttgaaccc aggagtccaa gatcagcctg tgcaacacgg caaaactcca 13500

cctctacaaa aaatacaaaa attagctggg tgtggtggca ggtgcctgta atcccaacta 13560

cttgggaggc tgaggcagga gaatcgctgg agcctgggaa gtcaagcctg cagcgaacca 13620

tgatcctaac actgcattct agcctgggca acagagtgag actctgtctc aaaaaaaatc 13680

ttcatataaa aatatttatt tccccccaag tatttaaaaa gtgatgttcc tagaagatgt 13740

gtcatgttta tcctgtgaac ttgcacgtcc catatagttg tgccctcaca agaatgtata 13800

ctccaattag aagagtatag gcctttggaa caaaatccaa aatccttcca ggttttcaaa 13860

agtctctatc acctggcccc aaattacctc ttcagccatt ttttcccaca acacaaacct 13920

tctgctctca tcaaaacgat ctacttttaa acatctcctc tatgccttcc taatgtattc 13980

catttgtcta gaatgtctcc 14000

<210> 3

<211> 13000

<212> ДНК

<213> Macaca mulatta

<220>

<221> misc_feature

<222> (4504)..(4523)

<223> n представляет собой a, c, g или t

<220>

<221> misc_feature

<222> (5370)..(5795)

<223> n представляет собой a, c, g или t

<220>

<221> misc_feature

<222> (7498)..(7517)

<223> n представляет собой a, c, g или t

<220>

<221> misc_feature

<222> (9552)..(9895)

<223> n представляет собой a, c, g или t

<400> 3

cccagctact gaggaggctg aggcaggaga atggcgtaaa cccgggaggc ggagcttgca 60

gtgagctgag atctggccac tgcaccccag cctgggcaac agagcaagac tccgtctcaa 120

aaaacaaaac aaaacaaaac aaaacaaaac aaaacaaaga atgtagtata tcaaaaagag 180

gtaaccagta ctacatatac attctgcact tggaaaatcc ctatatgttg attttatcat 240

tctcttagtc attcaataaa cattgcttct acaatgtgtg aggcattact gtactaaagc 300

attataagga atatacatta aaaacacata caaatcttgc caataaacgg cttatagtat 360

aataggggag agaagttggc ccatctatct tctccttcaa ctagcaagta gatgaaatat 420

cagggtcaat agttgtaagc cataaaagct gacagcttag ttaagagaag ttttgaaata 480

tgtatttcat ggccaaataa ttacaactgt aacttttcta tttaaagaag gagaaaattt 540

gaatttcttc tctagctcaa catacacttt tataattcta taacatgaac cagagtaaag 600

ggtaagatgg aaatgaagaa tattttctta cccttttgtg gttccatatt ggacacttaa 660

aaatcataca caacctaatc aaaagacata attcattaaa aaggtacgag accaaaacta 720

aaaaaatcta gactataaca aaatttccca atttacatta tcttaatatg caattaattt 780

tcaccagtaa aatactatac tatgggtaca aatgcattga ttagttctaa ttacaaaaat 840

ggctaatata taatattatg tagtgtttat gacacaccag gtaatgttct aagtgctttg 900

aaaatataaa cttttaatct ttatacaacc ctataaaata ggtgtcattc tcactggaca 960

gatgagaaaa caggggttca gaaatgtgaa gtaatttgac caaaggtcac aaaactgaag 1020

aatatcaaat ccaggattct gattcaggca gtcttgttcc agaatcatgc tcttaaccac 1080

tatggaatac tacctgtatt atagtattac atatactgta ctataactat tacacccaaa 1140

acccttaata ctacctgtac tataactatt atacccaaaa tcctgagtca tcaaaaagaa 1200

gagcctctat tttatacaat gaagaggcat ttctaagaat agaaatttag ggacgagcac 1260

agtggcttac tcctgtaata tcagcacttt gagaggctga tgtgggaagt tcacttgaag 1320

tcaggagttc gaggccagct tggacaacat agtgagaccc actctctaca aaatatttaa 1380

aaattagctg ggcgtgttgg catgcatcta tagtctcagc tactggggag gctgagggag 1440

gaggctcact caagcccagg aattcgtggc tatagtgagc tatgatcatg ccactgtact 1500

ccagcctgga caacagagca agaccctgtc tctaaaaaaa agaaaagaaa agaaatttgg 1560

aaatggttca ttttgtagta acaatttata atttacactg aaattcatta tgataaaact 1620

tttccctgtg ttaaaaagat attaacttta tgaaaaattt attttaggta aggttgatta 1680

tatatactca cacacataca caggttaaaa gttagtttca tgtgacataa taactagcat 1740

tttgagcact acctgtttgc ccaacactgt tctaagtgct ctacatgtat tattgttaaa 1800

ttatcataac actatgaatt atgtactata attaccccag ctttacagat gaggagacta 1860

atccaagggg aagttaagta acttgtccaa ggtcagacag cgagagctgg ctttggaccc 1920

cactacagtc tgactccagc acccatattc ttaacaattt caccatatta atatgtcaag 1980

attaagtagt tttaaaggat actattttct cacaaagttc ttaatatgaa cacttaataa 2040

gaataatcac taatattagt atttttcttt ttaacactaa gttggaagca cagtggaaca 2100

tttattttta gaaatattat taattggctg ggctcacgcc tgtaattgac tgggctcatg 2160

tccgtaaatt ttgggaggcc aaggcaaaag aatcgcttga gcccaatagt tccagaccag 2220

cataggcaat acattaagac atcgtcttta aaaaaacaaa gttattaatc tcttcttttt 2280

gttaaatgta tattatcaaa attgttacac taagctcaca aacttcagaa aaacttatga 2340

tgggtaagtt gcttgtgaca ttgaaagtat ttaagattca attctgtttg atcctagaag 2400

accacatatc cattgttcct tcagtaaaca catgataaag agcctagaac agagagacag 2460

agaacacagt ggagaaaggg gagtgaaatg tctttaatga cacttactat atgtgggatt 2520

ttgtgataat atacaaggat gattaagaca tataaggtga tgcaaaaaaa ccatattaac 2580

aattatagtg acaaaaataa ggagtacata attatacgtt gatttataca gagtaccaaa 2640

ggaatacagc attgagagct gtaccactac ccgagggaat ggagaaaggc ttcagagaga 2700

aagtgttttt tgggatggat caatgtttcc aaaagaaccg aagtgcagtt tgagaaacgc 2760

atacttaatt aattcttttc ctcaacttta ataataaatt tactcaacaa aaaagtttat 2820

ttttgacttg taaatctctt aaaatcataa aaaagtaaaa tcagctttta aaaacaggta 2880

gtcaccatat cattgaatgt gcagtttata atacagcaaa gttaaataca atttcaaatt 2940

acctattaag ttagttgctc atttctttga tttcatttag cattgatgta actcaatgtg 3000

gaagaaggtt acattcgtgc aagttaacat ggcttaatga ttaactatat tcacctgcca 3060

accttgcctt ttctgtggca aatattggta tatatagagt taagaagtct aggtctgctt 3120

ccagaagaac acagttccac gttgcttgaa attgaaaatc aggataaaaa tgttcacaat 3180

taagctcctt ctttttattg ttcctctagt tatttcctcc agaattgacc aagacaattc 3240

atcatttgat tctgtatctc cagagccaaa atcaagattt gctatgttag acgatgtaaa 3300

aattttagcc aatggcctcc ttcagttggg acatggtctt aaagactttg tccataagac 3360

taagggccaa attaatgaca tatttcaaaa actcaacata tttgatcagt ctttttatga 3420

tctatcactg caaaccagtg aaatcaaaga agaagaaaag gaactgagaa gaactacata 3480

taaactacaa gtcaaaaatg aagaggtaaa gaatatgtca cttgaactca actcaaaact 3540

tgaaagcctc ctagaagaaa aaattctact tcaacaaaaa gtgaaatatt tagaagagca 3600

actaactaac ttaattcaaa atcaacctga aactccagaa catccagaag taacttcact 3660

taaagtaagt agaaaataaa gagggttcat gtttatgttt tcaatgtgga acattaaaaa 3720

aaaatatttc taaggcatgc tacttgaaat actttgttgc attgttggaa tacttttttt 3780

tccaagaaaa ataatctcca gaaaataaaa tttcccatta taattttgtt agtttttgtt 3840

tccctaatgt tatatatgaa aacactgaaa ctttacattt tatatgaaaa ttacaaattg 3900

gttaagtaac acaatctaga acactatgtc attacactat tgcaaattac tgaaggtaag 3960

taaaattttt taaaaattta aaactattct ctagtgttta aaacagatta aagtaataca 4020

gtaaatggaa aagatttatt cctattaaaa tatgctgggc tttttctctt aattgaagtt 4080

cagaaaaaca aatcttagag atagcacaat ttaaataaaa tgttaagaac aaaaatacat 4140

gctatttgaa agaagcatac aaggggaagg aattgccaat attcattttt caaatccatt 4200

attagtttaa aaatttagat tatgatagtg ttacaggaaa ttaaaactct aatagaaaag 4260

aagaaagtaa cttataacca atctaatctc tatattcaga gttttgtaga aaaacaagat 4320

aatagcatca aagaccttct ccagactgtg gaagaacaat ataagcaatt aaaccaacag 4380

cacagtcaaa taaaagaaat agaaaatcag gtaagtcaat attttaatgg tatgtcccat 4440

ctttcacaca ggtttgtaaa acattgaatc ctaaaattat ttacagcttt aactggatca 4500

tgannnnnnn nnnnnnnnnn nnngaaaata attaattcat agcagccaat gtcatcctat 4560

taaaattcaa attagatcat gtttctcctt gctcaaaacc acacaatagc tttccatctc 4620

actcatattg gctctttaga ccaagattac ccgacccttc atcatctcac tgacttcacc 4680

tcctctactc tagtcatttt gatcgcttta ccggtattca aacacatcaa acatgctgcc 4740

acctcgaagc ctttgccctt gttgtttcct ctatctggaa tgctcttttg tcctggtatc 4800

tacagggccc actctttgat ctcccttagg gtcgttatca aacataaaat tctcaatgaa 4860

gatttccaag gtcacttaac caaaaattac aactgcctgg tcccatccct gaaaacttct 4920

acttccttaa ctacttttct cctgcacact cacctttatt taacataaat tttagttatt 4980

tatctcttct attcctgcac taaaatgtaa gctctgtgaa taaaggggtt tttttccatt 5040

atcttcatat tttccattat ttgtatatac tccagaatat agaatactgt atggcacata 5100

ctaggcattt ctgttgaatt aataaatgta atgtcatatt cacacagagt gtgtgctata 5160

attattatta cttggattac tagaaatagt gtgcctcata attaaaggtc aacattcaac 5220

aacgtaatta atctacaatg taaacaactg gtgaagtgag gggggaagca cttgtttaga 5280

ataaagctat gtcagaatct aagtattcta atatacagta aatagttaaa aaatattaat 5340

aatactctta aacagtcatt caagaggatn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 5400

nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 5460

nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 5520

nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 5580

nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 5640

nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 5700

nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 5760

nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnntaacg ttaaaatcac atagttactt 5820

agtagaaaag agtaatatcc agcaagtaaa ctttacaata gatcctttta aataaggtcc 5880

taggaaatgt catttatgcc aggatcaaaa aactaacact cataatgcaa gatattatat 5940

attctgcttt tcttactgtc aatgagaaaa actatcattc aataaattgc aaacccaaca 6000

cacttaaata aaatgttatt gcaaaactaa cgataaacta ctgaatatat ggaaagtaag 6060

caaataaact tgccaacctg ccaacatcta cagatgtgtt tacaggtcaa aaattatcaa 6120

attatcaaga aagccaggtt caaattatgt attatgtctt taaagcaggt ctgaagatca 6180

gtaagaccta aaactgaaaa ttattgaact taaaatctga acagaatatc aaacatattc 6240

tattcatata aaaaaaaata cattacaaca ttctaagcaa agcagtctct acttttggcc 6300

ttgttctgtt ttctgaccaa tgtctgcttt tttgccttgt tttatttttt taatttatta 6360

aataatgtcc ctgattaaat attttgagaa caggtaatct gtacaatctg aataacactg 6420

tttatctaaa tatcaaacac cataacatta tgaactgaaa gacaaactgt acttttgaca 6480

tccttactca gatctcccct aattatgtat tcagtatcat tttaaaaaac agatttatat 6540

tcttttatca gctcagaatg actaatattc aagaacccac agaaatttct ctatcttcca 6600

agccaagagc accaagaact actccctttc ttcagctgaa tgaaataaga aatgtaaaac 6660

atgatggtaa gacactttgg tgggtttcct tcttgaagct attatcaaat tccctattct 6720

taggacttgt tctagactaa aagattaaga gatagccatc aaatacaatg gatcatccta 6780

aattggatcc tggggttctt cttctaccct ataaaagata tacctaagac aatcacagaa 6840

atataaatat ggacttgatt attagataat atagaaggtt tattaatttt cttagacgtg 6900

atcatggtat tgcaatttta aaggagaaca acctcctgtt taagagatac atgctgaaat 6960

atttaaggag ttaaaggtca ctggactcct ggctgggtga cagaacaaga ctctgtctct 7020

aaaaaaataa ttttttaaaa gaaaatagtt tggtaagaat gattcttaca ttcttaaata 7080

acatgccatc gaagaaaaat gctttaacat aaacattact gaaaaaaatg ctacatttgc 7140

cacaatttca taaaatgtca agtgaaatct caagctccaa agacattatt cctattacta 7200

aatctgatgt aataacattt tattgattct aggcattcct gctgattgta ccaccattta 7260

caatagaggt gaacatataa gtggcatgta tgccatcaga cccagcaact ctcaagtttt 7320

tcatgtctac tgtgatgttg tatcaggtaa aacctgtcta aggagaatag acagtagtta 7380

gttcaagtta ctcagtatgt attaggaaga ttaacctggt tataattgtt ttatacatat 7440

atatatatga aatatatgta acatgagtat tagtataaat ctaatacttt tatcttgnnn 7500

nnnnnnnnnn nnnnnnnatg gatcacaaaa cttcaatgaa acgtgggaga actacaaata 7560

tggtttcggg aggcttgatg gtaaggtgac tacattcaat cattcattca tttgctaatc 7620

tacaaatatt tactgagaac ctattgtgga ctgggcatta ggaaaagtag taatgaagaa 7680

gcagcagtct cagccttcat ataatttatt atcaaacaat tacacatttg ttagtaaatt 7740

attacaactg ttataatttg atttatattt atcacagtta catgtctgtt cttaaatata 7800

cttatcacaa tttaatttga tggcttacaa tgatcataac tataattatt aaagacaatt 7860

ctgattaaat gttatataag tagtaactgt tacaaataag ctgtgaaaag aaccactcct 7920

agcattagtc actctattct ctcattaacg ttttacgtat caattaattg gaagttaaaa 7980

ggaccaagaa actcagacat acagtataaa ttttaaaatt tcaattattt aaatgtaata 8040

tatagaatgt gtggcttata atgaattagt taactcaatg caaattattc tgattacaaa 8100

ataatgttaa ataagcaaga taaaataaca gatgtttaaa atccaaaaag cacatacaaa 8160

aatccatgaa tgatgtctaa gtactcactt ataaagtaga agacattcat tattatatca 8220

aatttttaaa tgctcagtac tatttgccca tttaaaaatt ttgtattcaa attacccgtt 8280

aaagccctac ctagatggta tactccgtga tatgttttgt agctccaaat cttctaatag 8340

tgagtgtaac cccaaaataa aaggctgaca ggtaagttaa gaatactcac ttaattctgg 8400

taagaaacta acccatttgt acttgtattt accagcaatc cttaaaatga agcttcctac 8460

taactcaata gcaataagac aacagtgact gtttaatgaa aacagtaatt tattaagcat 8520

tttactaaat actttaataa aaaggattgt gataaaaagt ctatttatat ttgttattta 8580

tgtttttaat tccaaataaa aataattttt aaaattatag aaaaaagtta ttaagaacca 8640

tgctttttca tttaaaatga tttttaaaat ttattcctgt ctttttctac aaagaaaaca 8700

tatattaagc aaataccaaa ggccaggttt agacttatta ttactcaagt ctctgggaat 8760

acttaacaaa aatctcttga ctgtatatgg atgttaataa atacctgata gtaaagttta 8820

tccatataaa gacttacaag aaaatattcc tctaccaatg acgagacttt aaagtatcta 8880

taataatgta acatatttca ctggttaaat atgtcttgta atatgcatta tagaaaggat 8940

aatctgactt tcagttctat taatattttt aacattattg tgcatataga tatcttcaat 9000

aaaattgttt taaaaggtat tattttaaga tactctaaaa tgatcaaggg attcaagact 9060

aaacaactca attagttgca ccaataaaaa acacttaaaa aaacagtgtc caacctgtag 9120

ttaataattc acagattttt aaaacttttc ttttcaggag aattctggtt gggcctagag 9180

aagatatact ccatagtgaa gcaatctaat tacgttttac gaattgagtt ggaagactgg 9240

aaagacaaca aacattatat tgaatattct ttttacttgg gaaatcacga aaccaactat 9300

acgctacatg tagttaagat tactggcaat gtccccaatg caatcccgga aaacaaagat 9360

ttggtgtttt ctacttggga tcacaaagca aaaggacact tcagctgtcc agagagttat 9420

tcaggtatct ttttctgata acaatacttt attttcatat cttcaaagta tctgcccaca 9480

ttattagcta ttatctgcaa tgacaacttt taaaaatccg aatcccaaat aagcgttttc 9540

tttctagatg annnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 9600

nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 9660

nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 9720

nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 9780

nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn 9840

nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnnnnnn nnnnnacact 9900

ataatattta ttaaaaagga agataaactc atggggaaat acagtaacta catacgagtc 9960

tgtacccact aaactgcgta tctatctcct ttaggaggct ggtggtggca tgatgagtgt 10020

ggagaaaaca acctaaatgg taaatataac aaaccaagaa caaaatctaa gccagagcgg 10080

agaagaggat tatcctggaa gtctcaaaat ggaaggttat actctataaa atcaaccaaa 10140

atgttgatcc atccaacaga ttcagaaagc tttgaatgaa ctgaggcaaa tttaaaaggc 10200

aataaattaa acattaaact cattccaagt taatgtggtt taataatctg gtattaaatc 10260

cttaagagaa ggcttgagaa atagattttt ttatcttaaa gtcactgtca atttaagatt 10320

aaacatacaa tcacataacc ttaaagaata ccatttacat ttctcaatca aaattcctac 10380

aacactattt gttttatatt ttgtgatgtg ggaatcaatt ttagatggtc gcaatctaaa 10440

ttataatcaa caggtgaact tactaaataa cttttctaaa taaaaaactt agagacttta 10500

attttaaaag tcatcatatg agctaatatc acaattttcc cagtttaaaa aactagtttt 10560

cttgttaaaa ctctaaactt gactaaataa agaggactga taattataca gttcttaaat 10620

ttgttgtaat attaatttca aaactaaaaa ttgtcagcac agagtatgtg taaaaatctg 10680

taatataaat ttttaaactg atgcctcatt ttgctacaaa ataatctgga gtaaattttt 10740

gataggattt atttatgaaa cctaatgaag caggattaaa tactgtatta aaataggttc 10800

gctgtctttt aaacaaatgg agatgatgat tactaagtca cattgacttt aatatgaggt 10860

atcactatac cttaacatat ttgttaaaac gtatactgta tacattttgt gtattttaat 10920

acttaatact atgaaaacaa gtaattgtaa acgtatcttg tcagattaca ataggaatga 10980

acatattggt gacatcgagt taaagtttat atttccccta aatatgctgc gattccaata 11040

tattcatgta ggttttcaag cagaaataaa ccttgtaaca agttactgac taaacagcct 11100

gacaagtatg tatatatgtt taaaattcaa taaataaaga cccagtcttc taaattataa 11160

aaatttaaat tagtcttgca caaattaaat tattcatcac aaaagatgta ttgttatttt 11220

taagtcattt aagccctaaa tccctaaaga ttagatacaa attttttttt gccagagtat 11280

aaattgtcag aatttatttt taaatatatt ttttaaaact accagtaaga aattttaaat 11340

taaacccatt tgttaaagga tatagtgccc aagttatacg gtgacctacc tttgtcaata 11400

tttagcatta tgtatttcaa attatccaat atacatgtca tatatatttt tatatgttgc 11460

atatataaaa gatatacacg atttatgtga atcctatgta aatattttgt tccagaaaag 11520

tacaaaataa taaaggtaaa aataatccat aattttcagg accacagact aagctgtcaa 11580

aattaacatt gatttttttt agggccagaa taccaaaata gctcctctct tccccaaaaa 11640

ttggacaatt tcaaatgcaa aataattcat tatttaatat atgagttgct tccactattt 11700

ggtttccttt aaaaaaaaaa aaaaaacact ctcataggac atgtttcatt ttgttccttt 11760

taggagtagt aaattagatt ttttccccat acaaagcttt cttttaccag aaagatactt 11820

ctggcagaag aggagaaagg agctcttttc tttatggttc acacgactgt ctcctgtcct 11880

cactactttg cttaaagtgc tcaaattcca ccactaactc acagttgtct aatctaagca 11940

aagtctaatc ccctttgatc tctgagtcta ccttcccttt catctctcta ctacttacta 12000

atgtgaatat ctttttttca aacttgacct tcattttgct ttcacaatac tatactctcc 12060

atggattttc ccttacttga atccatcttt ataaccctat tcctttctca tatttagtac 12120

tgtgggccaa tggacaacct ttaatcatct tttctacact gactctcaga tattctatct 12180

gctctcacgg actcatctat gtaccatgaa taaagttcca aaatctacgt attcatccta 12240

agtctctttc cagttcccct tcttacattg cctatctgcc atttctccct ttaataacct 12300

atacttcact taaattcaac atatcaaaaa taacaggccg ggcacggtgg ctcatgactg 12360

taatcccagc actttgggag gccgaggcgg gtggatcacc tgaggtcagg agtttcagac 12420

cagcctgacc aacagggtga aaccccgtct ccacttaaaa tacaaaaatt agccaggtgt 12480

ggtggcatgt gcctatagtc ccagttactc aagaggctga gacaggagaa ttgcttgaac 12540

ccaggaggcg gaggttgcag tgagctgaga tcacaccact gcactccatc ctgggtgaca 12600

gaacaagact gactcaaaaa aataaataat tcaccagccc ctgactgcta ctgctatctc 12660

tttctaccca actttccctc ctttcgactc tgtcacacca tctttctcac ttctttatat 12720

ccattaatat gaccagcatg ttcccagtca cagaagcctg aaacctggaa gacatctcta 12780

gcttttccct caacttcgta aactacttct tttgtataag ccaccaagtt caatacaatc 12840

ttctcttgaa acatctctta atcttataag ctttcttccc caaagtctgt ctttaacttg 12900

agtgctagat tatattagtc tcctctttcc tcctaatttt atgtccctct ccctgtcaat 12960

cttctgaaaa gaaatttgta atggctgcat attgcttgga 13000

<210> 4

<211> 25

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Праймер

<400> 4

ccgtggaaga ccaatataaa caatt 25

<210> 5

<211> 28

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Праймер

<400> 5

agtccttctg agctgatttt ctatttct 28

<210> 6

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Зонд

<400> 6

aaccaacagc atagtcaaat a 21

<210> 7

<211> 23

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Праймер

<400> 7

cttcaatgaa acgtgggaga act 23

<210> 8

<211> 22

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Праймер

<400> 8

tctctaggcc caaccaaaat tc 22

<210> 9

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Зонд

<400> 9

aaatatggtt ttgggaggct tgat 24

<210> 10

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Праймер

<400> 10

aaattttagc caatggcctc c 21

<210> 11

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Праймер

<400> 11

tgtcattaat ttggcccttc g 21

<210> 12

<211> 32

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Зонд

<400> 12

tcagttggga catggtctta aagactttgt cc 32

<210> 13

<211> 27

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 13

gcgtttgctc ttcttcttgc gtttttt 27

<210> 14

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 14

tgaattaatg tccatggact 20

<210> 15

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 15

agttcttggt gctcttggct 20

<210> 16

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 16

gttgtctttc cagtcttcca 20

<210> 17

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 17

gctttgtgat cccaagtaga 20

<210> 18

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 18

ggttgttttc tccacactca 20

<210> 19

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 19

accttccatt ttgagacttc 20

<210> 20

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 20

tacacatact ctgtgctgac 20

<210> 21

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 21

tttcagcatg tatctcttaa 20

<210> 22

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 22

accaggttaa tcttcctaat 20

<210> 23

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 23

agttatgatc attgtaagcc 20

<210> 24

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 24

ggagtggttc ttttcacagc 20

<210> 25

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 25

tggtcctttt aacttccaat 20

<210> 26

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 26

gcattgagtt aactaattca 20

<210> 27

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 27

catccatata cagtcaagag 20

<210> 28

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 28

cacttgtatg ttcacctctg 20

<210> 29

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 29

tctattcgat gttgaattaa 20

<210> 30

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 30

ttgattttca atttcaagca 20

<210> 31

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 31

ggctctggag atagagaatc 20

<210> 32

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 32

tcttgatttt ggctctggag 20

<210> 33

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 33

gtcattaatt tggcccttcg 20

<210> 34

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 34

ttcactggtt tgcagcgata 20

<210> 35

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 35

cttagatttt gctcttggtt 20

<210> 36

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 36

gcttagattt tgctcttggt 20

<210> 37

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 37

ggcttagatt ttgctcttgg 20

<210> 38

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 38

gctcatatga tgccttttaa 20

<210> 39

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 39

agctcatatg atgcctttta 20

<210> 40

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 40

tagctcatat gatgcctttt 20

<210> 41

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 41

tattagctca tatgatgcct 20

<210> 42

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 42

ccacaaatat gttcattctt 20

<210> 43

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 43

tgccacaaat atgttcattc 20

<210> 44

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 44

taaactttaa ctcgatgcca 20

<210> 45

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 45

acgaggttta tttctacttg 20

<210> 46

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 46

catgcttgtc aggctgttta 20

<210> 47

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 47

tacatgcttg tcaggctgtt 20

<210> 48

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 48

tccaactcag aaattcattg 20

<210> 49

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 49

ttgctgggta ttactctttt 20

<210> 50

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 50

tttgcttgct gggtattact 20

<210> 51

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 51

tggcatgaat gatatttcct 20

<210> 52

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 52

gcaataccat gatcacatct 20

<210> 53

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 53

actccgtaaa tatttcagca 20

<210> 54

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 54

tggcaaatgt agcatttttt 20

<210> 55

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 55

aagccataca ttctatatat 20

<210> 56

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 56

tcagctattt attaacatcc 20

<210> 57

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 57

gaggaatatt tgcaagtctt 20

<210> 58

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 58

ttggtagagg aatatttgca 20

<210> 59

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 59

accagtgaaa tgtgttacat 20

<210> 60

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 60

tgaaagtctg attatccttt 20

<210> 61

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 61

atttaatggg tacagactcg 20

<210> 62

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 62

ataccatgat cacatctaag 20

<210> 63

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 63

gacctttaac tccgtaaata 20

<210> 64

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 64

tctggagtcc agtgaccttt 20

<210> 65

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 65

atgtaagaat catcttacca 20

<210> 66

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 66

agcatttttc ttagatggcg 20

<210> 67

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 67

cattttatga agttgtggca 20

<210> 68

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 68

cacttgacat tttatgaagt 20

<210> 69

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 69

tcctggtcct tttaacttcc 20

<210> 70

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 70

gacatcattc atggattttt 20

<210> 71

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 71

agtacttaga catcattcat 20

<210> 72

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 72

ggtcaaatag tactgagcat 20

<210> 73

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 73

ggtagtttga atacaaaatt 20

<210> 74

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 74

ctctgttata aatggtggta 20

<210> 75

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 75

ttcttggtgc tcttggcttg 20

<210> 76

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 76

ggtacattca gcaggaatgc 20

<210> 77

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 77

ggacattgcc agtaatcgca 20

<210> 78

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 78

cactcatcat gccaccacca 20

<210> 79

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 79

ctccacactc atcatgccac 20

<210> 80

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 80

tttctccaca ctcatcatgc 20

<210> 81

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 81

gctgacgatt tttagttttg 20

<210> 82

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 82

cacatactct gtgctgacga 20

<210> 83

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 83

tttacacata ctctgtgctg 20

<210> 84

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 84

gctttcttac cagaattaag 20

<210> 85

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 85

gttgctttct taccagaatt 20

<210> 86

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 86

ataccagatt attagaccac 20

<210> 87

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 87

gcttcatttt aaggattgct 20

<210> 88

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 88

gcttaatgta tgctttcttt 20

<210> 89

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 89

gttaagtatt cctagagact 20

<210> 90

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 90

tccatatttg tatttctctg 20

<210> 91

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 91

cgtaagttta tcttcctttc 20

<210> 92

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 92

cacattaact tggaatgagg 20

<210> 93

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 93

ccagattatt agaccacatt 20

<210> 94

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 94

taccagatta ttagaccaca 20

<210> 95

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 95

gctttctctt aaggatttaa 20

<210> 96

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 96

ctcaagcttt ctcttaagga 20

<210> 97

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 97

tctcaagctt tctcttaagg 20

<210> 98

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 98

ccatttgttt aaagacagcg 20

<210> 99

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 99

acttagtagt catctccatt 20

<210> 100

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 100

gacttagtag tcatctccat 20

<210> 101

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 101

tgacttagta gtcatctcca 20

<210> 102

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 102

gtcaatgtga cttagtagtc 20

<210> 103

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 103

accatataac ttgggcacta 20

<210> 104

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 104

ggtcaccata taacttgggc 20

<210> 105

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 105

gacaaaggta ggtcaccata 20

<210> 106

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 106

gccaatatga gtgaaatgga 20

<210> 107

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 107

tttctaaaca agtgcttccc 20

<210> 108

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 108

ctgcatatta gaatacatgg 20

<210> 109

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 109

cataatttga accaggcttt 20

<210> 110

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 110

aaatcttgat tttggc 16

<210> 111

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 111

ttcttggtgc tcttgg 16

<210> 112

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 112

cgtggaactg ttttct 16

<210> 113

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 113

cttgatcaat tctgga 16

<210> 114

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 114

gtcttgatca attctg 16

<210> 115

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 115

tggctctgga gataga 16

<210> 116

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 116

tgattttggc tctgga 16

<210> 117

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 117

cttgattttg gctctg 16

<210> 118

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 118

ggtgctcttg gcttgg 16

<210> 119

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 119

atcttctcta ggccca 16

<210> 120

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 120

gttgtctttc cagtct 16

<210> 121

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 121

gtttgttgtc tttcca 16

<210> 122

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 122

gtgatttccc aagtaa 16

<210> 123

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 123

tggatcaaca ttttgg 16

<210> 124

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 124

gaatctgttg gatgga 16

<210> 125

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 125

ttctgaatct gttgga 16

<210> 126

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 126

gttcattcaa agcttt 16

<210> 127

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 127

cagttcattc aaagct 16

<210> 128

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 128

ttaacttgga atgagg 16

<210> 129

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 129

agaccacatt aacttg 16

<210> 130

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 130

agattattag accaca 16

<210> 131

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 131

ccagattatt agacca 16

<210> 132

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 132

atctatttct caagct 16

<210> 133

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 133

atagacagtg acttta 16

<210> 134

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 134

atactctgtg ctgacg 16

<210> 135

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 135

actctgtgct gacgat 16

<210> 136

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 136

acatactctg tgctga 16

<210> 137

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 137

gtagcaaaat gaagca 16

<210> 138

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 138

tcaaacattt actcca 16

<210> 139

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 139

taaagacagc gaactt 16

<210> 140

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 140

tgtttaaaga cagcga 16

<210> 141

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 141

agtagtcatc tccatt 16

<210> 142

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 142

ttagtagtca tctcca 16

<210> 143

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 143

acaaaggtag gtcacc 16

<210> 144

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 144

tgacatgtat attgga 16

<210> 145

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 145

gtacttttct ggaaca 16

<210> 146

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 146

cttggtctaa agagcc 16

<210> 147

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 147

tctgtagatg ttggca 16

<210> 148

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 148

ataatttgaa ccaggc 16

<210> 149

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 149

agcagacatt ggtcgg 16

<210> 150

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 150

cagattgtac agatta 16

<210> 151

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 151

gtagaggaat atttgc 16

<210> 152

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 152

aaagtctgat tatcct 16

<210> 153

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 153

tagtcttgaa tccctt 16

<210> 154

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 154

aagttgtcat tgcaga 16

<210> 155

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 155

tctgtataag tcccaa 16

<210> 156

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 156

gatgcatgta tcccag 16

<210> 157

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 157

gtaagtttat cttcct 16

<210> 158

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 158

ctgttactgt atttcc 16

<210> 159

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 159

tgcagcgata gatcat 16

<210> 160

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 160

ctggtttgca gcgata 16

<210> 161

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 161

ctttgatttc actggt 16

<210> 162

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 162

gttcttctca gttcct 16

<210> 163

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 163

gttagttagt tgctct 16

<210> 164

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 164

gtatgttcac ctctgt 16

<210> 165

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 165

gagttgctgg gtctga 16

<210> 166

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 166

aaacttgaga gttgct 16

<210> 167

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 167

gtccatggac tacctg 16

<210> 168

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 168

ccatctattc gatgtt 16

<210> 169

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 169

tagattttgc tcttgg 16

<210> 170

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 170

ccattttgag acttcc 16

<210> 171

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 171

tagagtataa ccttcc 16

<210> 172

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 172

ctcatcatgc caccac 16

<210> 173

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 173

cacactcatc atgcca 16

<210> 174

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 174

gagaaatgta aacggt 16

<210> 175

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 175

ctcatatgat gccttt 16

<210> 176

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 176

agctcatatg atgcct 16

<210> 177

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 177

ttagctcata tgatgc 16

<210> 178

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 178

ttgtgatatt agctca 16

<210> 179

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 179

actgggaaag ttgtga 16

<210> 180

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 180

aatctgacaa gattcc 16

<210> 181

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 181

ctcgatgcca caaata 16

<210> 182

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 182

taactcgatg ccacaa 16

<210> 183

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 183

tgcttgtcag gctgtt 16

<210> 184

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 184

acatgcttgt caggct 16

<210> 185

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 185

cagttatgct gatgtg 16

<210> 186

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 186

aagttttaga gccatg 16

<210> 187

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 187

ctgtcacttc accaga 16

<210> 188

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 188

tggattctga catagc 16

<210> 189

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 189

aaccttttag cagcac 16

<210> 190

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 190

ttgcttgctg ggtatt 16

<210> 191

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 191

gtcttttata gggtgt 16

<210> 192

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 192

ttgtcttagg tatgtc 16

<210> 193

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 193

ctctgattgt cttagg 16

<210> 194

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 194

gtatttctct gattgt 16

<210> 195

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 195

tttttcttag atggcg 16

<210> 196

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 196

gggctttcac tggtag 16

<210> 197

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 197

acagtcaaga gatgtg 16

<210> 198

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 198

atcttgattt tggctctgga 20

<210> 199

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 199

gttcttggtg ctcttggctt 20

<210> 200

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 200

tagttcttgg tgctcttggc 20

<210> 201

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 201

aggttgtttt ctccacactc 20

<210> 202

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 202

acacatactc tgtgctgacg 20

<210> 203

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 203

gtggcaaatg tagcattttt 20

<210> 204

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 204

gccacaaata tgttcattct 20

<210> 205

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 205

tcttggtgct cttggct 17

<210> 206

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 206

ccagattatt agaccac 17

<210> 207

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 207

gctcatatga tgccttt 17

<210> 208

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 208

gcttgtcagg ctgttta 17

<210> 209

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 209

tgtcttgatc aattct 16

<210> 210

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 210

ttgattttgg ctctgg 16

<210> 211

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 211

actggtttgc agcgat 16

<210> 212

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 212

agattttgct cttggt 16

<210> 213

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 213

cattttgaga cttcca 16

<210> 214

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 214

tccattttga gacttc 16

<210> 215

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 215

accagattat tagacc 16

<210> 216

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 216

tagacagtga ctttaa 16

<210> 217

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 217

tgagaaatgt aaacgg 16

<210> 218

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 218

gctcatatga tgcctt 16

<210> 219

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 219

cttagtagtc atctcc 16

<210> 220

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 220

agagtataac cttcca 16

<210> 221

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 221

cagattatta gaccac 16

<210> 222

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 222

tagctcatat gatgcc 16

<210> 223

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 223

ccttttagca gcacta 16

<210> 224

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 224

accttttagc agcact 16

<210> 225

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 225

aaacctttta gcagca 16

<210> 226

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 226

atctgtagat gttggc 16

<210> 227

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 227

taatttgaac caggct 16

<210> 228

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 228

ttttcttaga tggcgt 16

<210> 229

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 229

atctgtataa gtccca 16

<210> 230

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 230

aatctgtata agtccc 16

<210> 231

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 231

atgcatgtat cccagt 16

<210> 232

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 232

tagatgcatg tatccc 16

<210> 233

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 233

agtagttctt ggtgctcttg 20

<210> 234

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 234

ggttcttgaa tactagtcct 20

<210> 235

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 235

aaatttctgt gggttcttga 20

<210> 236

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 236

tggcttggaa gatagagaaa 20

<210> 237

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 237

gtattagaat cacagcatat 20

<210> 238

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 238

gattttcaat ttcaagcaac 20

<210> 239

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 239

agcttaattg tgaacatttt 20

<210> 240

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 240

gaaggagctt aattgtgaac 20

<210> 241

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 241

caataaaaag aaggagctta 20

<210> 242

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 242

gaacaataaa aagaaggagc 20

<210> 243

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 243

ctggaggaaa taactagagg 20

<210> 244

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 244

attctggagg aaataactag 20

<210> 245

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 245

tcaaatgatg aattgtcttg 20

<210> 246

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 246

ttgattttgg ctctggagat 20

<210> 247

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 247

gcaaatcttg attttggctc 20

<210> 248

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 248

atagcaaatc ttgattttgg 20

<210> 249

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 249

cgtctaacat agcaaatctt 20

<210> 250

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 250

tggctaaaat ttttacatcg 20

<210> 251

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 251

ccattggcta aaatttttac 20

<210> 252

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 252

aggaggccat tggctaaaat 20

<210> 253

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 253

tgaaggaggc cattggctaa 20

<210> 254

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 254

gtcccaactg aaggaggcca 20

<210> 255

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 255

ccatgtccca actgaaggag 20

<210> 256

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 256

agaccatgtc ccaactgaag 20

<210> 257

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 257

tttaagacca tgtcccaact 20

<210> 258

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 258

gtctttaaga ccatgtccca 20

<210> 259

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 259

ggacaaagtc tttaagacca 20

<210> 260

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 260

tcttatggac aaagtcttta 20

<210> 261

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 261

tatgtcatta atttggccct 20

<210> 262

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 262

gatcaaatat gttgagtttt 20

<210> 263

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 263

gactgatcaa atatgttgag 20

<210> 264

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 264

tcttctttga tttcactggt 20

<210> 265

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 265

cttctcagtt ccttttcttc 20

<210> 266

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 266

gttcttctca gttccttttc 20

<210> 267

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 267

tgtagttctt ctcagttcct 20

<210> 268

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 268

tatatgtagt tcttctcagt 20

<210> 269

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 269

gtttatatgt agttcttctc 20

<210> 270

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 270

tgtagtttat atgtagttct 20

<210> 271

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 271

gacttgtagt ttatatgtag 20

<210> 272

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 272

tcatttttga cttgtagttt 20

<210> 273

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 273

cctcttcatt tttgacttgt 20

<210> 274

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 274

tctttacctc ttcatttttg 20

<210> 275

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 275

catattcttt acctcttcat 20

<210> 276

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 276

gtgacatatt ctttacctct 20

<210> 277

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 277

gagttcaagt gacatattct 20

<210> 278

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 278

tgagttgagt tcaagtgaca 20

<210> 279

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 279

agttttgagt tgagttcaag 20

<210> 280

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 280

tcaagttttg agttgagttc 20

<210> 281

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 281

ggaggctttc aagttttgag 20

<210> 282

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 282

tttcttctag gaggctttca 20

<210> 283

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 283

attttttctt ctaggaggct 20

<210> 284

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 284

gtagaatttt ttcttctagg 20

<210> 285

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 285

gctcttctaa atatttcact 20

<210> 286

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 286

agttagttag ttgctcttct 20

<210> 287

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 287

caggttgatt ttgaattaag 20

<210> 288

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 288

tttcaggttg attttgaatt 20

<210> 289

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 289

ggagtttcag gttgattttg 20

<210> 290

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 290

gttctggagt ttcaggttga 20

<210> 291

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 291

ttaagtgaag ttacttctgg 20

<210> 292

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 292

tgctattatc ttgtttttct 20

<210> 293

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 293

ggtctttgat gctattatct 20

<210> 294

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 294

gaaggtcttt gatgctatta 20

<210> 295

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 295

ctggagaagg tctttgatgc 20

<210> 296

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 296

ctgagctgat tttctatttc 20

<210> 297

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 297

atttctgtgg gttcttgaat 20

<210> 298

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 298

gagaaatttc tgtgggttct 20

<210> 299

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 299

gatagagaaa tttctgtggg 20

<210> 300

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 300

cttggaagat agagaaattt 20

<210> 301

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 301

gtgctcttgg cttggaagat 20

<210> 302

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 302

cttggtgctc ttggcttgga 20

<210> 303

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 303

gggagtagtt cttggtgctc 20

<210> 304

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 304

ctgaagaaag ggagtagttc 20

<210> 305

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 305

atcatgtttt acatttctta 20

<210> 306

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 306

gccatcatgt tttacatttc 20

<210> 307

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 307

gaatgccatc atgttttaca 20

<210> 308

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 308

caggaatgcc atcatgtttt 20

<210> 309

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 309

gacttcttaa ctctatatat 20

<210> 310

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 310

ctagacttct taactctata 20

<210> 311

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 311

gacctagact tcttaactct 20

<210> 312

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 312

ggaagcagac ctagacttct 20

<210> 313

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 313

tctggaagca gacctagact 20

<210> 314

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 314

tcttctggaa gcagacctag 20

<210> 315

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 315

ctaatcttta gggatttagg 20

<210> 316

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 316

tgtatctaat ctttagggat 20

<210> 317

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 317

taacttgggc actatatcct 20

<210> 318

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 318

attgacaaag gtaggtcacc 20

<210> 319

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 319

atatgacatg tatattggat 20

<210> 320

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 320

ttttgtactt ttctggaaca 20

<210> 321

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 321

tagtctgtgg tcctgaaaat 20

<210> 322

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 322

agcttagtct gtggtcctga 20

<210> 323

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 323

gacagcttag tctgtggtcc 20

<210> 324

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 324

gtattctggc cctaaaaaaa 20

<210> 325

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 325

attttggtat tctggcccta 20

<210> 326

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 326

tttgcatttg aaattgtcca 20

<210> 327

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 327

ggaagcaact catatattaa 20

<210> 328

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 328

tatcagaaaa agatacctga 20

<210> 329

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 329

ataatagcta ataatgtggg 20

<210> 330

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 330

tgcagataat agctaataat 20

<210> 331

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 331

tgtcattgca gataatagct 20

<210> 332

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 332

taaaagttgt cattgcagat 20

<210> 333

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 333

cggattttta aaagttgtca 20

<210> 334

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 334

gggattcgga tttttaaaag 20

<210> 335

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 335

tttgggattc ggatttttaa 20

<210> 336

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 336

acgcttattt gggattcgga 20

<210> 337

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 337

tttaagagat ttacaagtca 20

<210> 338

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 338

gactacctgt ttttaaaagc 20

<210> 339

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 339

tatggtgact acctgttttt 20

<210> 340

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 340

actttgctgt attataaact 20

<210> 341

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 341

attgtattta actttgctgt 20

<210> 342

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 342

gagcaactaa cttaataggt 20

<210> 343

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 343

gaaatgagca actaacttaa 20

<210> 344

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 344

aatcaaagaa atgagcaact 20

<210> 345

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 345

accttcttcc acattgagtt 20

<210> 346

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 346

cacgaatgta accttcttcc 20

<210> 347

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 347

ttaacttgca cgaatgtaac 20

<210> 348

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 348

tatatatacc aatatttgcc 20

<210> 349

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 349

tcttaactct atatatacca 20

<210> 350

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 350

ctttaagtga agttacttct 20

<210> 351

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 351

tctacttact ttaagtgaag 20

<210> 352

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 352

gaaccctctt tattttctac 20

<210> 353

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 353

acataaacat gaaccctctt 20

<210> 354

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 354

ccacattgaa aacataaaca 20

<210> 355

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 355

gcatgcctta gaaatatttt 20

<210> 356

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 356

caatgcaaca aagtatttca 20

<210> 357

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 357

ctggagatta tttttcttgg 20

<210> 358

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 358

ttcatatata acattaggga 20

<210> 359

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 359

tcagtgtttt catatataac 20

<210> 360

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 360

gacatagtgt tctagattgt 20

<210> 361

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 361

caatagtgta atgacatagt 20

<210> 362

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 362

ttacttacct tcagtaattt 20

<210> 363

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 363

atcttttcca tttactgtat 20

<210> 364

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 364

agaaaaagcc cagcatattt 20

<210> 365

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 365

gtatgcttct ttcaaatagc 20

<210> 366

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 366

ccttcccctt gtatgcttct 20

<210> 367

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 367

cctgtaacac tatcataatc 20

<210> 368

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 368

tgacttacct gattttctat 20

<210> 369

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 369

gatgggacat accattaaaa 20

<210> 370

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 370

gtgaaagatg ggacatacca 20

<210> 371

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 371

cctgtgtgaa agatgggaca 20

<210> 372

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 372

cattggctgc tatgaattaa 20

<210> 373

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 373

gatgacattg gctgctatga 20

<210> 374

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 374

gagaaacatg atctaatttg 20

<210> 375

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 375

atggaaagct attgtgtggt 20

<210> 376

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 376

gtctaaagag ccaatatgag 20

<210> 377

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 377

aatcttggtc taaagagcca 20

<210> 378

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 378

gagatttaca agtcaaaaat 20

<210> 379

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 379

atttaacttt gctgtattat 20

<210> 380

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 380

atcaatgcta aatgaaatca 20

<210> 381

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 381

tattttctgg agattatttt 20

<210> 382

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 382

aaaatgaata ttggcaattc 20

<210> 383

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 383

aaagtcaatg tgacttagta 20

<210> 384

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 384

aaggtatagt gatacctcat 20

<210> 385

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 385

cagcaggaat gccatcatgt 20

<210> 386

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 386

tgatggcata catgccactt 20

<210> 387

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 387

tgctgggtct gatggcatac 20

<210> 388

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 388

gagttgctgg gtctgatggc 20

<210> 389

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 389

aaaacttgag agttgctggg 20

<210> 390

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 390

gacatgaaaa acttgagagt 20

<210> 391

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 391

acatcacagt agacatgaaa 20

<210> 392

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 392

agttttgtga tccatctatt 20

<210> 393

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 393

tgaagttttg tgatccatct 20

<210> 394

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 394

cgtttcattg aagttttgtg 20

<210> 395

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 395

ccatatttgt agttctccca 20

<210> 396

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 396

aaaccatatt tgtagttctc 20

<210> 397

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 397

aattctccat caagcctccc 20

<210> 398

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 398

atcttctcta ggcccaacca 20

<210> 399

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 399

gagtatatct tctctaggcc 20

<210> 400

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 400

ctatggagta tatcttctct 20

<210> 401

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 401

gcttcactat ggagtatatc 20

<210> 402

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 402

agattgcttc actatggagt 20

<210> 403

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 403

ccagtcttcc aactcaattc 20

<210> 404

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 404

gtctttccag tcttccaact 20

<210> 405

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 405

gtttgttgtc tttccagtct 20

<210> 406

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 406

aatgtttgtt gtctttccag 20

<210> 407

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 407

cgtgatttcc caagtaaaaa 20

<210> 408

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 408

gttttccggg attgcattgg 20

<210> 409

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 409

tctttgtttt ccgggattgc 20

<210> 410

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 410

ccaaatcttt gttttccggg 20

<210> 411

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 411

acaccaaatc tttgttttcc 20

<210> 412

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 412

agaaaacacc aaatctttgt 20

<210> 413

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 413

caagtagaaa acaccaaatc 20

<210> 414

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 414

gatcccaagt agaaaacacc 20

<210> 415

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 415

tttgctttgt gatcccaagt 20

<210> 416

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 416

tccttttgct ttgtgatccc 20

<210> 417

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 417

gaagtgtcct tttgctttgt 20

<210> 418

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 418

tgccaccacc agcctcctga 20

<210> 419

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 419

ctcatcatgc caccaccagc 20

<210> 420

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 420

ccatttaggt tgttttctcc 20

<210> 421

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 421

atatttacca tttaggttgt 20

<210> 422

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 422

cttggtttgt tatatttacc 20

<210> 423

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 423

atagagtata accttccatt 20

<210> 424

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 424

ttttatagag tataaccttc 20

<210> 425

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 425

tggttgattt tatagagtat 20

<210> 426

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 426

attttggttg attttataga 20

<210> 427

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 427

tcaacatttt ggttgatttt 20

<210> 428

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 428

ggatggatca acattttggt 20

<210> 429

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 429

gttggatgga tcaacatttt 20

<210> 430

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 430

tctgttggat ggatcaacat 20

<210> 431

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 431

ctgaatctgt tggatggatc 20

<210> 432

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 432

agctttctga atctgttgga 20

<210> 433

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 433

cattcaaagc tttctgaatc 20

<210> 434

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 434

gttcattcaa agctttctga 20

<210> 435

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 435

tcagttcatt caaagctttc 20

<210> 436

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 436

gcctcagttc attcaaagct 20

<210> 437

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 437

atttgcctca gttcattcaa 20

<210> 438

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 438

ttaaatttgc ctcagttcat 20

<210> 439

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 439

gccttttaaa tttgcctcag 20

<210> 440

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 440

aggatttaat accagattat 20

<210> 441

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 441

cttaaggatt taataccaga 20

<210> 442

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 442

tctcttaagg atttaatacc 20

<210> 443

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 443

gacagtgact ttaagataaa 20

<210> 444

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 444

tgtgattgta tgtttaatct 20

<210> 445

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 445

aggttatgtg attgtatgtt 20

<210> 446

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 446

ctttaaggtt atgtgattgt 20

<210> 447

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 447

ggtattcttt aaggttatgt 20

<210> 448

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 448

attgattccc acatcacaaa 20

<210> 449

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 449

ctaaaattga ttcccacatc 20

<210> 450

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 450

ccatctaaaa ttgattccca 20

<210> 451

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 451

ttgtgatatt agctcatatg 20

<210> 452

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 452

actagttttt taaactggga 20

<210> 453

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 453

gtcaagttta gagttttaac 20

<210> 454

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 454

tatttagtca agtttagagt 20

<210> 455

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 455

gatttttaca catactctgt 20

<210> 456

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 456

ctgcttcatt aggtttcata 20

<210> 457

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 457

cagcaggaat gccatcatgt 20

<210> 458

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 458

tgatggcata catgccactt 20

<210> 459

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 459

tgctgggtct gatggcatac 20

<210> 460

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 460

gagttgctgg gtctgatggc 20

<210> 461

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 461

aaaacttgag agttgctggg 20

<210> 462

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 462

gacatgaaaa acttgagagt 20

<210> 463

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 463

acatcacagt agacatgaaa 20

<210> 464

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 464

agttttgtga tccatctatt 20

<210> 465

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 465

tgaagttttg tgatccatct 20

<210> 466

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 466

cgtttcattg aagttttgtg 20

<210> 467

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 467

ccatatttgt agttctccca 20

<210> 468

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 468

aaaccatatt tgtagttctc 20

<210> 469

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 469

aattctccat caagcctccc 20

<210> 470

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 470

atcttctcta ggcccaacca 20

<210> 471

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 471

gagtatatct tctctaggcc 20

<210> 472

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 472

ctatggagta tatcttctct 20

<210> 473

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 473

gcttcactat ggagtatatc 20

<210> 474

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 474

agattgcttc actatggagt 20

<210> 475

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 475

ccagtcttcc aactcaattc 20

<210> 476

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 476

gtctttccag tcttccaact 20

<210> 477

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 477

gtttgttgtc tttccagtct 20

<210> 478

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 478

aatgtttgtt gtctttccag 20

<210> 479

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 479

cgtgatttcc caagtaaaaa 20

<210> 480

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 480

gttttccggg attgcattgg 20

<210> 481

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 481

tctttgtttt ccgggattgc 20

<210> 482

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 482

ccaaatcttt gttttccggg 20

<210> 483

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 483

acaccaaatc tttgttttcc 20

<210> 484

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 484

agaaaacacc aaatctttgt 20

<210> 485

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 485

caagtagaaa acaccaaatc 20

<210> 486

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 486

gatcccaagt agaaaacacc 20

<210> 487

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 487

tttgctttgt gatcccaagt 20

<210> 488

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 488

tccttttgct ttgtgatccc 20

<210> 489

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 489

gaagtgtcct tttgctttgt 20

<210> 490

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 490

tgccaccacc agcctcctga 20

<210> 491

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 491

ctcatcatgc caccaccagc 20

<210> 492

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 492

ccatttaggt tgttttctcc 20

<210> 493

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 493

atatttacca tttaggttgt 20

<210> 494

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 494

cttggtttgt tatatttacc 20

<210> 495

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 495

atagagtata accttccatt 20

<210> 496

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 496

ttttatagag tataaccttc 20

<210> 497

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 497

tggttgattt tatagagtat 20

<210> 498

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 498

attttggttg attttataga 20

<210> 499

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 499

tcaacatttt ggttgatttt 20

<210> 500

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 500

ggatggatca acattttggt 20

<210> 501

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 501

gttggatgga tcaacatttt 20

<210> 502

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 502

tctgttggat ggatcaacat 20

<210> 503

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 503

ctgaatctgt tggatggatc 20

<210> 504

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 504

agctttctga atctgttgga 20

<210> 505

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 505

cattcaaagc tttctgaatc 20

<210> 506

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 506

gttcattcaa agctttctga 20

<210> 507

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 507

tcagttcatt caaagctttc 20

<210> 508

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 508

gcctcagttc attcaaagct 20

<210> 509

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 509

atttgcctca gttcattcaa 20

<210> 510

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 510

ttaaatttgc ctcagttcat 20

<210> 511

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 511

gccttttaaa tttgcctcag 20

<210> 512

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 512

aggatttaat accagattat 20

<210> 513

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 513

cttaaggatt taataccaga 20

<210> 514

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 514

tctcttaagg atttaatacc 20

<210> 515

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 515

gacagtgact ttaagataaa 20

<210> 516

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 516

tgtgattgta tgtttaatct 20

<210> 517

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 517

aggttatgtg attgtatgtt 20

<210> 518

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 518

ctttaaggtt atgtgattgt 20

<210> 519

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 519

ggtattcttt aaggttatgt 20

<210> 520

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 520

attgattccc acatcacaaa 20

<210> 521

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 521

ctaaaattga ttcccacatc 20

<210> 522

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 522

ccatctaaaa ttgattccca 20

<210> 523

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 523

ttgtgatatt agctcatatg 20

<210> 524

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 524

actagttttt taaactggga 20

<210> 525

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 525

gtcaagttta gagttttaac 20

<210> 526

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 526

tatttagtca agtttagagt 20

<210> 527

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 527

gatttttaca catactctgt 20

<210> 528

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 528

ctgcttcatt aggtttcata 20

<210> 529

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 529

cagcaggaat gccatcatgt 20

<210> 530

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 530

tgatggcata catgccactt 20

<210> 531

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 531

tgctgggtct gatggcatac 20

<210> 532

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 532

gagttgctgg gtctgatggc 20

<210> 533

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 533

aaaacttgag agttgctggg 20

<210> 534

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 534

gacatgaaaa acttgagagt 20

<210> 535

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 535

acatcacagt agacatgaaa 20

<210> 536

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 536

agttttgtga tccatctatt 20

<210> 537

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 537

tgaagttttg tgatccatct 20

<210> 538

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 538

cgtttcattg aagttttgtg 20

<210> 539

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 539

ccatatttgt agttctccca 20

<210> 540

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 540

aaaccatatt tgtagttctc 20

<210> 541

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 541

aattctccat caagcctccc 20

<210> 542

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 542

atcttctcta ggcccaacca 20

<210> 543

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 543

gagtatatct tctctaggcc 20

<210> 544

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 544

ctatggagta tatcttctct 20

<210> 545

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 545

gcttcactat ggagtatatc 20

<210> 546

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 546

agattgcttc actatggagt 20

<210> 547

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 547

ccagtcttcc aactcaattc 20

<210> 548

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 548

gtctttccag tcttccaact 20

<210> 549

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 549

gtttgttgtc tttccagtct 20

<210> 550

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 550

aatgtttgtt gtctttccag 20

<210> 551

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 551

cgtgatttcc caagtaaaaa 20

<210> 552

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 552

gttttccggg attgcattgg 20

<210> 553

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 553

tctttgtttt ccgggattgc 20

<210> 554

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 554

ccaaatcttt gttttccggg 20

<210> 555

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 555

acaccaaatc tttgttttcc 20

<210> 556

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 556

agaaaacacc aaatctttgt 20

<210> 557

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 557

caagtagaaa acaccaaatc 20

<210> 558

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 558

gatcccaagt agaaaacacc 20

<210> 559

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 559

tttgctttgt gatcccaagt 20

<210> 560

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 560

tccttttgct ttgtgatccc 20

<210> 561

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 561

gaagtgtcct tttgctttgt 20

<210> 562

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 562

tgccaccacc agcctcctga 20

<210> 563

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 563

ctcatcatgc caccaccagc 20

<210> 564

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 564

ccatttaggt tgttttctcc 20

<210> 565

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 565

atatttacca tttaggttgt 20

<210> 566

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 566

cttggtttgt tatatttacc 20

<210> 567

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 567

atagagtata accttccatt 20

<210> 568

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 568

ttttatagag tataaccttc 20

<210> 569

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 569

tggttgattt tatagagtat 20

<210> 570

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 570

attttggttg attttataga 20

<210> 571

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 571

tcaacatttt ggttgatttt 20

<210> 572

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 572

ggatggatca acattttggt 20

<210> 573

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 573

gttggatgga tcaacatttt 20

<210> 574

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 574

tctgttggat ggatcaacat 20

<210> 575

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 575

ctgaatctgt tggatggatc 20

<210> 576

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 576

agctttctga atctgttgga 20

<210> 577

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 577

cattcaaagc tttctgaatc 20

<210> 578

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 578

gttcattcaa agctttctga 20

<210> 579

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 579

tcagttcatt caaagctttc 20

<210> 580

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 580

gcctcagttc attcaaagct 20

<210> 581

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 581

atttgcctca gttcattcaa 20

<210> 582

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 582

ttaaatttgc ctcagttcat 20

<210> 583

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 583

gccttttaaa tttgcctcag 20

<210> 584

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 584

aggatttaat accagattat 20

<210> 585

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 585

cttaaggatt taataccaga 20

<210> 586

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 586

tctcttaagg atttaatacc 20

<210> 587

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 587

gacagtgact ttaagataaa 20

<210> 588

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 588

tgtgattgta tgtttaatct 20

<210> 589

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 589

aggttatgtg attgtatgtt 20

<210> 590

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 590

ctttaaggtt atgtgattgt 20

<210> 591

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 591

ggtattcttt aaggttatgt 20

<210> 592

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 592

attgattccc acatcacaaa 20

<210> 593

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 593

ctaaaattga ttcccacatc 20

<210> 594

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 594

ccatctaaaa ttgattccca 20

<210> 595

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 595

ttgtgatatt agctcatatg 20

<210> 596

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 596

actagttttt taaactggga 20

<210> 597

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 597

gtcaagttta gagttttaac 20

<210> 598

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 598

tatttagtca agtttagagt 20

<210> 599

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 599

gatttttaca catactctgt 20

<210> 600

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 600

ctgcttcatt aggtttcata 20

<210> 601

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 601

cagtgttatt cagattgtac 20

<210> 602

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 602

agtgtcttac catcatgttt 20

<210> 603

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 603

caccagcctc ctaaaggaga 20

<210> 604

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 604

gaggaggtga agtcagtgag 20

<210> 605

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 605

tagagtagag gaggtgaagt 20

<210> 606

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 606

tgtttgatgt gtttgaatac 20

<210> 607

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 607

gaaacaacaa gggcaaaggc 20

<210> 608

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 608

tgtttgataa cgaccctaag 20

<210> 609

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 609

tttttggtta agtgaccttg 20

<210> 610

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 610

gtagaagttt tcagggatgg 20

<210> 611

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 611

aggaagtaga agttttcagg 20

<210> 612

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 612

aggtgagtgt gcaggagaaa 20

<210> 613

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 613

ttaaataaag gtgagtgtgc 20

<210> 614

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 614

agtgcaggaa tagaagagat 20

<210> 615

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 615

cattttagtg caggaataga 20

<210> 616

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 616

ctatattctg gagtatatac 20

<210> 617

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 617

cagtattcta tattctggag 20

<210> 618

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 618

gtgccataca gtattctata 20

<210> 619

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 619

ctgtgtgaat atgacattac 20

<210> 620

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 620

tgaggcacac tatttctagt 20

<210> 621

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 621

gacctttaat tatgaggcac 20

<210> 622

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 622

gaatgttgac ctttaattat 20

<210> 623

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 623

ttgttgaatg ttgaccttta 20

<210> 624

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 624

tctactaagt aactatgtga 20

<210> 625

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 625

ctcttttcta ctaagtaact 20

<210> 626

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 626

aaggatctat tgtaaagttt 20

<210> 627

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 627

ctaggacctt atttaaaagg 20

<210> 628

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 628

atttcctagg accttattta 20

<210> 629

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 629

ttgacagtaa gaaaagcaga 20

<210> 630

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 630

ttctcattga cagtaagaaa 20

<210> 631

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 631

agtttttctc attgacagta 20

<210> 632

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 632

attgaatgat agtttttctc 20

<210> 633

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 633

ttgggtttgc aatttattga 20

<210> 634

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 634

agtgtgttgg gtttgcaatt 20

<210> 635

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 635

tatttaagtg tgttgggttt 20

<210> 636

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 636

atatattcag tagtttatcg 20

<210> 637

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 637

agatgttggc aggttggcaa 20

<210> 638

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 638

tctgtagatg ttggcaggtt 20

<210> 639

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 639

ttgataattt ttgacctgta 20

<210> 640

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 640

ggctttcttg ataatttgat 20

<210> 641

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 641

gtcttactga tcttcagacc 20

<210> 642

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 642

tttaggtctt actgatcttc 20

<210> 643

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 643

tcagttttag gtcttactga 20

<210> 644

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 644

tgatattctg ttcagatttt 20

<210> 645

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 645

tagagactgc tttgcttaga 20

<210> 646

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 646

aggccaaaag tagagactgc 20

<210> 647

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 647

ggcaaaaaag cagacattgg 20

<210> 648

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 648

aatcagggac attatttaat 20

<210> 649

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 649

tatttaatca gggacattat 20

<210> 650

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 650

ctcaaaatat ttaatcaggg 20

<210> 651

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 651

tacctgttct caaaatattt 20

<210> 652

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 652

gtacagatta cctgttctca 20

<210> 653

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 653

ggtgtttgat atttagataa 20

<210> 654

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 654

ttgtctttca gttcataatg 20

<210> 655

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 655

acagtttgtc tttcagttca 20

<210> 656

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 656

tctgagctga taaaagaata 20

<210> 657

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 657

cccaccaaag tgtcttacca 20

<210> 658

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 658

cttcaagaag gaaacccacc 20

<210> 659

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 659

aatagcttca agaaggaaac 20

<210> 660

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 660

acaagtccta agaataggga 20

<210> 661

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 661

gtctagaaca agtcctaaga 20

<210> 662

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 662

tctaataatc aagtccatat 20

<210> 663

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 663

accttctata ttatctaata 20

<210> 664

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 664

gcatgtatct cttaaacagg 20

<210> 665

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 665

gtccagtgac ctttaactcc 20

<210> 666

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 666

tcttaccaaa ctattttctt 20

<210> 667

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 667

gtaatgttta tgttaaagca 20

<210> 668

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 668

ttgtggcaaa tgtagcattt 20

<210> 669

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 669

gagatttcac ttgacatttt 20

<210> 670

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 670

ggagcttgag atttcacttg 20

<210> 671

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 671

catcagattt agtaatagga 20

<210> 672

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 672

gttattacat cagatttagt 20

<210> 673

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 673

cagcaggaat gcctagaatc 20

<210> 674

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 674

ctccttagac aggttttacc 20

<210> 675

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 675

gtctattctc cttagacagg 20

<210> 676

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 676

atgaatgatt gaatgtagtc 20

<210> 677

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 677

atatgaaggc tgagactgct 20

<210> 678

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 678

ataaattata tgaaggctga 20

<210> 679

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 679

atatttaaga acagacatgt 20

<210> 680

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 680

atttgtaaca gttactactt 20

<210> 681

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 681

cacagcttat ttgtaacagt 20

<210> 682

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 682

gtgactaatg ctaggagtgg 20

<210> 683

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 683

gaatagagtg actaatgcta 20

<210> 684

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 684

atgagagaat agagtgacta 20

<210> 685

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 685

tatactgtat gtctgagttt 20

<210> 686

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 686

aactaattca ttataagcca 20

<210> 687

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 687

tttggatttt aaacatctgt 20

<210> 688

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 688

tgtatgtgct ttttggattt 20

<210> 689

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 689

catggatttt tgtatgtgct 20

<210> 690

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 690

tcattcatgg atttttgtat 20

<210> 691

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 691

acttagacat cattcatgga 20

<210> 692

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 692

gtgagtactt agacatcatt 20

<210> 693

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 693

tttataagtg agtacttaga 20

<210> 694

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 694

gtcttctact ttataagtga 20

<210> 695

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 695

atgaatgtct tctactttat 20

<210> 696

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 696

caaatagtac tgagcattta 20

<210> 697

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 697

ttagaagatt tggagctaca 20

<210> 698

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 698

tcactattag aagatttgga 20

<210> 699

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 699

gggttacact cactattaga 20

<210> 700

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 700

acttacctgt cagcctttta 20

<210> 701

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 701

cttaccagaa ttaagtgagt 20

<210> 702

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 702

aatacaagta caaatgggtt 20

<210> 703

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 703

ctggtaaata caagtacaaa 20

<210> 704

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 704

ggattgctgg taaatacaag 20

<210> 705

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 705

tcattttaag gattgctggt 20

<210> 706

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 706

agttagtagg aagcttcatt 20

<210> 707

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 707

gctattgagt tagtaggaag 20

<210> 708

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 708

agcatggttc ttaataactt 20

<210> 709

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 709

ctttgtagaa aaagacagga 20

<210> 710

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 710

acctggcctt tggtatttgc 20

<210> 711

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 711

agtctttata tggataaact 20

<210> 712

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 712

cgtcattggt agaggaatat 20

<210> 713

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 713

gattatcctt tctataatgc 20

<210> 714

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 714

gtcttgaatc ccttgatcat 20

<210> 715

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 715

ggtgcaacta attgagttgt 20

<210> 716

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 716

gtgtttttta ttggtgcaac 20

<210> 717

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 717

attctcctga aaagaaaagt 20

<210> 718

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 718

atgccaccac cagcctccta 20

<210> 719

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 719

atatccttta acaaatgggt 20

<210> 720

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 720

gcactatatc ctttaacaaa 20

<210> 721

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 721

acttgggcac tatatccttt 20

<210> 722

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 722

gaaacatgtc ctatgagagt 20

<210> 723

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 723

ttgagcactt taagcaaagt 20

<210> 724

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 724

ggaatttgag cactttaagc 20

<210> 725

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 725

tagattagac aactgtgagt 20

<210> 726

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 726

aaaatgaagg tcaagtttga 20

<210> 727

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 727

gtgaaagcaa aatgaaggtc 20

<210> 728

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 728

gtattgtgaa agcaaaatga 20

<210> 729

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 729

tggagagtat agtattgtga 20

<210> 730

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 730

aggaatagaa gagataaata 20

<210> 731

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 731

tggagtatat acaaataatg 20

<210> 732

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 732

tgtttacatt gtagattaat 20

<210> 733

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 733

cagaatatat aatatcttgc 20

<210> 734

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 734

tgcaatttat tgaatgatag 20

<210> 735

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 735

cataatacat aatttgaacc 20

<210> 736

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 736

ataattttca gttttaggtc 20

<210> 737

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 737

tttcagtaat gtttatgtta 20

<210> 738

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 738

aatgcctaga atcaataaaa 20

<210> 739

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 739

gtaaatattt gtagattagc 20

<210> 740

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 740

acaaatgtgt aattgtttga 20

<210> 741

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 741

tactaacaaa tgtgtaattg 20

<210> 742

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 742

tgataagtat atttaagaac 20

<210> 743

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 743

ttaacttcca attaattgat 20

<210> 744

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 744

tctgttattt tatcttgctt 20

<210> 745

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 745

atcacaatcc tttttattaa 20

<210> 746

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 746

agagacttga gtaataataa 20

<210> 747

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 747

aacaaaatga aacatgtcct 20

<210> 748

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 748

cagcaggaat gccatcatgt 20

<210> 749

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 749

tgatggcata catgccactt 20

<210> 750

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 750

tgctgggtct gatggcatac 20

<210> 751

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 751

gagttgctgg gtctgatggc 20

<210> 752

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 752

aaaacttgag agttgctggg 20

<210> 753

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 753

gacatgaaaa acttgagagt 20

<210> 754

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 754

acatcacagt agacatgaaa 20

<210> 755

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 755

agttttgtga tccatctatt 20

<210> 756

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 756

tgaagttttg tgatccatct 20

<210> 757

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 757

cgtttcattg aagttttgtg 20

<210> 758

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 758

ccatatttgt agttctccca 20

<210> 759

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 759

aaaccatatt tgtagttctc 20

<210> 760

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 760

aattctccat caagcctccc 20

<210> 761

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 761

atcttctcta ggcccaacca 20

<210> 762

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 762

gagtatatct tctctaggcc 20

<210> 763

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 763

ctatggagta tatcttctct 20

<210> 764

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 764

gcttcactat ggagtatatc 20

<210> 765

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 765

agattgcttc actatggagt 20

<210> 766

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 766

ccagtcttcc aactcaattc 20

<210> 767

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 767

gtctttccag tcttccaact 20

<210> 768

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 768

gtttgttgtc tttccagtct 20

<210> 769

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 769

aatgtttgtt gtctttccag 20

<210> 770

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 770

cgtgatttcc caagtaaaaa 20

<210> 771

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 771

gttttccggg attgcattgg 20

<210> 772

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 772

tctttgtttt ccgggattgc 20

<210> 773

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 773

ccaaatcttt gttttccggg 20

<210> 774

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 774

acaccaaatc tttgttttcc 20

<210> 775

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 775

agaaaacacc aaatctttgt 20

<210> 776

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 776

caagtagaaa acaccaaatc 20

<210> 777

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 777

gatcccaagt agaaaacacc 20

<210> 778

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 778

tttgctttgt gatcccaagt 20

<210> 779

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 779

tccttttgct ttgtgatccc 20

<210> 780

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 780

gaagtgtcct tttgctttgt 20

<210> 781

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 781

tgccaccacc agcctcctga 20

<210> 782

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 782

ctcatcatgc caccaccagc 20

<210> 783

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 783

ccatttaggt tgttttctcc 20

<210> 784

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 784

atatttacca tttaggttgt 20

<210> 785

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 785

cttggtttgt tatatttacc 20

<210> 786

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 786

atagagtata accttccatt 20

<210> 787

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 787

ttttatagag tataaccttc 20

<210> 788

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 788

tggttgattt tatagagtat 20

<210> 789

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 789

attttggttg attttataga 20

<210> 790

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 790

tcaacatttt ggttgatttt 20

<210> 791

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 791

ggatggatca acattttggt 20

<210> 792

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 792

gttggatgga tcaacatttt 20

<210> 793

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 793

tctgttggat ggatcaacat 20

<210> 794

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 794

ctgaatctgt tggatggatc 20

<210> 795

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 795

agctttctga atctgttgga 20

<210> 796

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 796

cattcaaagc tttctgaatc 20

<210> 797

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 797

gttcattcaa agctttctga 20

<210> 798

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 798

tcagttcatt caaagctttc 20

<210> 799

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 799

gcctcagttc attcaaagct 20

<210> 800

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 800

atttgcctca gttcattcaa 20

<210> 801

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 801

ttaaatttgc ctcagttcat 20

<210> 802

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 802

gccttttaaa tttgcctcag 20

<210> 803

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 803

aggatttaat accagattat 20

<210> 804

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 804

cttaaggatt taataccaga 20

<210> 805

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 805

tctcttaagg atttaatacc 20

<210> 806

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 806

gacagtgact ttaagataaa 20

<210> 807

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 807

tgtgattgta tgtttaatct 20

<210> 808

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 808

aggttatgtg attgtatgtt 20

<210> 809

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 809

ctttaaggtt atgtgattgt 20

<210> 810

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 810

ggtattcttt aaggttatgt 20

<210> 811

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 811

attgattccc acatcacaaa 20

<210> 812

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 812

ctaaaattga ttcccacatc 20

<210> 813

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 813

ccatctaaaa ttgattccca 20

<210> 814

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 814

ttgtgatatt agctcatatg 20

<210> 815

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 815

actagttttt taaactggga 20

<210> 816

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 816

gtcaagttta gagttttaac 20

<210> 817

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 817

tatttagtca agtttagagt 20

<210> 818

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 818

gatttttaca catactctgt 20

<210> 819

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 819

ctgcttcatt aggtttcata 20

<210> 820

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 820

caccagcctc ctaaaggaga 20

<210> 821

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 821

gacttcttaa ctctatatat 20

<210> 822

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 822

ctagacttct taactctata 20

<210> 823

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 823

gacctagact tcttaactct 20

<210> 824

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 824

ggaagcagac ctagacttct 20

<210> 825

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 825

tctggaagca gacctagact 20

<210> 826

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 826

tcttctggaa gcagacctag 20

<210> 827

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 827

ctaatcttta gggatttagg 20

<210> 828

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 828

tgtatctaat ctttagggat 20

<210> 829

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 829

taacttgggc actatatcct 20

<210> 830

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 830

attgacaaag gtaggtcacc 20

<210> 831

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 831

atatgacatg tatattggat 20

<210> 832

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 832

ttttgtactt ttctggaaca 20

<210> 833

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 833

tagtctgtgg tcctgaaaat 20

<210> 834

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 834

agcttagtct gtggtcctga 20

<210> 835

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 835

gacagcttag tctgtggtcc 20

<210> 836

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 836

gtattctggc cctaaaaaaa 20

<210> 837

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 837

attttggtat tctggcccta 20

<210> 838

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 838

gaaattgtcc aatttttggg 20

<210> 839

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 839

tttgcatttg aaattgtcca 20

<210> 840

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 840

ggaagcaact catatattaa 20

<210> 841

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 841

tatcagaaaa agatacctga 20

<210> 842

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 842

ataatagcta ataatgtggg 20

<210> 843

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 843

tgcagataat agctaataat 20

<210> 844

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 844

tgtcattgca gataatagct 20

<210> 845

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 845

taaaagttgt cattgcagat 20

<210> 846

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 846

cggattttta aaagttgtca 20

<210> 847

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 847

gggattcgga tttttaaaag 20

<210> 848

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 848

tttgggattc ggatttttaa 20

<210> 849

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 849

acgcttattt gggattcgga 20

<210> 850

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 850

tttaagagat ttacaagtca 20

<210> 851

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 851

gactacctgt ttttaaaagc 20

<210> 852

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 852

tatggtgact acctgttttt 20

<210> 853

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 853

actttgctgt attataaact 20

<210> 854

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 854

attgtattta actttgctgt 20

<210> 855

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 855

gagcaactaa cttaataggt 20

<210> 856

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 856

gaaatgagca actaacttaa 20

<210> 857

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 857

aatcaaagaa atgagcaact 20

<210> 858

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 858

accttcttcc acattgagtt 20

<210> 859

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 859

cacgaatgta accttcttcc 20

<210> 860

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 860

ttaacttgca cgaatgtaac 20

<210> 861

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 861

tatatatacc aatatttgcc 20

<210> 862

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 862

tcttaactct atatatacca 20

<210> 863

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 863

ctttaagtga agttacttct 20

<210> 864

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 864

tctacttact ttaagtgaag 20

<210> 865

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 865

gaaccctctt tattttctac 20

<210> 866

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 866

acataaacat gaaccctctt 20

<210> 867

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 867

ccacattgaa aacataaaca 20

<210> 868

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 868

gcatgcctta gaaatatttt 20

<210> 869

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 869

caatgcaaca aagtatttca 20

<210> 870

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 870

ctggagatta tttttcttgg 20

<210> 871

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 871

ttcatatata acattaggga 20

<210> 872

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 872

tcagtgtttt catatataac 20

<210> 873

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 873

gacatagtgt tctagattgt 20

<210> 874

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 874

caatagtgta atgacatagt 20

<210> 875

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 875

ttacttacct tcagtaattt 20

<210> 876

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 876

atcttttcca tttactgtat 20

<210> 877

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 877

agaaaaagcc cagcatattt 20

<210> 878

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 878

gtatgcttct ttcaaatagc 20

<210> 879

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 879

ccttcccctt gtatgcttct 20

<210> 880

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 880

cctgtaacac tatcataatc 20

<210> 881

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 881

tgacttacct gattttctat 20

<210> 882

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 882

gatgggacat accattaaaa 20

<210> 883

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 883

gtgaaagatg ggacatacca 20

<210> 884

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 884

cctgtgtgaa agatgggaca 20

<210> 885

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 885

cattggctgc tatgaattaa 20

<210> 886

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 886

gatgacattg gctgctatga 20

<210> 887

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 887

gagaaacatg atctaatttg 20

<210> 888

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 888

atggaaagct attgtgtggt 20

<210> 889

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 889

gtctaaagag ccaatatgag 20

<210> 890

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 890

aatcttggtc taaagagcca 20

<210> 891

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 891

ggagcttgag atttcacttg 20

<210> 892

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 892

catcagattt agtaatagga 20

<210> 893

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 893

gttattacat cagatttagt 20

<210> 894

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 894

cagcaggaat gcctagaatc 20

<210> 895

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 895

ctccttagac aggttttacc 20

<210> 896

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 896

gtctattctc cttagacagg 20

<210> 897

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 897

atgaatgatt gaatgtagtc 20

<210> 898

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 898

atatgaaggc tgagactgct 20

<210> 899

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 899

ataaattata tgaaggctga 20

<210> 900

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 900

atatttaaga acagacatgt 20

<210> 901

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 901

atttgtaaca gttactactt 20

<210> 902

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 902

cacagcttat ttgtaacagt 20

<210> 903

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 903

gtgactaatg ctaggagtgg 20

<210> 904

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 904

gaatagagtg actaatgcta 20

<210> 905

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 905

atgagagaat agagtgacta 20

<210> 906

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 906

tatactgtat gtctgagttt 20

<210> 907

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 907

aactaattca ttataagcca 20

<210> 908

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 908

tttggatttt aaacatctgt 20

<210> 909

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 909

tgtatgtgct ttttggattt 20

<210> 910

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 910

catggatttt tgtatgtgct 20

<210> 911

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 911

tcattcatgg atttttgtat 20

<210> 912

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 912

acttagacat cattcatgga 20

<210> 913

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 913

gtgagtactt agacatcatt 20

<210> 914

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 914

tttataagtg agtacttaga 20

<210> 915

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 915

gtcttctact ttataagtga 20

<210> 916

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 916

atgaatgtct tctactttat 20

<210> 917

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 917

caaatagtac tgagcattta 20

<210> 918

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 918

ttagaagatt tggagctaca 20

<210> 919

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 919

tcactattag aagatttgga 20

<210> 920

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 920

gggttacact cactattaga 20

<210> 921

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 921

acttacctgt cagcctttta 20

<210> 922

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 922

cttaccagaa ttaagtgagt 20

<210> 923

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 923

aatacaagta caaatgggtt 20

<210> 924

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 924

ctggtaaata caagtacaaa 20

<210> 925

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 925

ggattgctgg taaatacaag 20

<210> 926

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 926

tcattttaag gattgctggt 20

<210> 927

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 927

agttagtagg aagcttcatt 20

<210> 928

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 928

gctattgagt tagtaggaag 20

<210> 929

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 929

agcatggttc ttaataactt 20

<210> 930

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 930

ctttgtagaa aaagacagga 20

<210> 931

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 931

acctggcctt tggtatttgc 20

<210> 932

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 932

agtctttata tggataaact 20

<210> 933

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 933

cgtcattggt agaggaatat 20

<210> 934

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 934

gattatcctt tctataatgc 20

<210> 935

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 935

gtcttgaatc ccttgatcat 20

<210> 936

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 936

ggtgcaacta attgagttgt 20

<210> 937

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 937

gtgtttttta ttggtgcaac 20

<210> 938

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 938

attctcctga aaagaaaagt 20

<210> 939

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 939

atgccaccac cagcctccta 20

<210> 940

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 940

atatccttta acaaatgggt 20

<210> 941

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 941

gcactatatc ctttaacaaa 20

<210> 942

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 942

acttgggcac tatatccttt 20

<210> 943

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 943

gaaacatgtc ctatgagagt 20

<210> 944

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 944

ttgagcactt taagcaaagt 20

<210> 945

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 945

ggaatttgag cactttaagc 20

<210> 946

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 946

tagattagac aactgtgagt 20

<210> 947

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 947

aaaatgaagg tcaagtttga 20

<210> 948

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 948

gtgaaagcaa aatgaaggtc 20

<210> 949

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 949

gtattgtgaa agcaaaatga 20

<210> 950

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 950

tggagagtat agtattgtga 20

<210> 951

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 951

gagatttaca agtcaaaaat 20

<210> 952

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 952

atttaacttt gctgtattat 20

<210> 953

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 953

atcaatgcta aatgaaatca 20

<210> 954

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 954

tattttctgg agattatttt 20

<210> 955

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 955

aaaatgaata ttggcaattc 20

<210> 956

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 956

aatgcctaga atcaataaaa 20

<210> 957

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 957

gtaaatattt gtagattagc 20

<210> 958

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 958

acaaatgtgt aattgtttga 20

<210> 959

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 959

tactaacaaa tgtgtaattg 20

<210> 960

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 960

tgataagtat atttaagaac 20

<210> 961

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 961

ttaacttcca attaattgat 20

<210> 962

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 962

tctgttattt tatcttgctt 20

<210> 963

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 963

atcacaatcc tttttattaa 20

<210> 964

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 964

agagacttga gtaataataa 20

<210> 965

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 965

aacaaaatga aacatgtcct 20

<210> 966

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 966

gattttcaat ttcaagcaac 20

<210> 967

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 967

agcttaattg tgaacatttt 20

<210> 968

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 968

gaaggagctt aattgtgaac 20

<210> 969

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 969

caataaaaag aaggagctta 20

<210> 970

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 970

gaacaataaa aagaaggagc 20

<210> 971

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 971

ctggaggaaa taactagagg 20

<210> 972

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 972

attctggagg aaataactag 20

<210> 973

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 973

tcaaatgatg aattgtcttg 20

<210> 974

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 974

ttgattttgg ctctggagat 20

<210> 975

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 975

gcaaatcttg attttggctc 20

<210> 976

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 976

atagcaaatc ttgattttgg 20

<210> 977

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 977

cgtctaacat agcaaatctt 20

<210> 978

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 978

tggctaaaat ttttacatcg 20

<210> 979

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 979

ccattggcta aaatttttac 20

<210> 980

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 980

aggaggccat tggctaaaat 20

<210> 981

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 981

tgaaggaggc cattggctaa 20

<210> 982

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 982

gtcccaactg aaggaggcca 20

<210> 983

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 983

ccatgtccca actgaaggag 20

<210> 984

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 984

agaccatgtc ccaactgaag 20

<210> 985

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 985

tttaagacca tgtcccaact 20

<210> 986

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 986

gtctttaaga ccatgtccca 20

<210> 987

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 987

ggacaaagtc tttaagacca 20

<210> 988

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 988

tcttatggac aaagtcttta 20

<210> 989

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 989

tatgtcatta atttggccct 20

<210> 990

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 990

gatcaaatat gttgagtttt 20

<210> 991

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 991

gactgatcaa atatgttgag 20

<210> 992

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 992

tcttctttga tttcactggt 20

<210> 993

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 993

cttctcagtt ccttttcttc 20

<210> 994

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 994

gttcttctca gttccttttc 20

<210> 995

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 995

tgtagttctt ctcagttcct 20

<210> 996

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 996

tatatgtagt tcttctcagt 20

<210> 997

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 997

gtttatatgt agttcttctc 20

<210> 998

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 998

tgtagtttat atgtagttct 20

<210> 999

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 999

gacttgtagt ttatatgtag 20

<210> 1000

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1000

tcatttttga cttgtagttt 20

<210> 1001

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1001

cctcttcatt tttgacttgt 20

<210> 1002

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1002

tctttacctc ttcatttttg 20

<210> 1003

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1003

catattcttt acctcttcat 20

<210> 1004

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1004

gtgacatatt ctttacctct 20

<210> 1005

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1005

gagttcaagt gacatattct 20

<210> 1006

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1006

tgagttgagt tcaagtgaca 20

<210> 1007

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1007

agttttgagt tgagttcaag 20

<210> 1008

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1008

tcaagttttg agttgagttc 20

<210> 1009

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1009

ggaggctttc aagttttgag 20

<210> 1010

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1010

tttcttctag gaggctttca 20

<210> 1011

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1011

attttttctt ctaggaggct 20

<210> 1012

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1012

gtagaatttt ttcttctagg 20

<210> 1013

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1013

gctcttctaa atatttcact 20

<210> 1014

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1014

agttagttag ttgctcttct 20

<210> 1015

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1015

caggttgatt ttgaattaag 20

<210> 1016

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1016

tttcaggttg attttgaatt 20

<210> 1017

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1017

ggagtttcag gttgattttg 20

<210> 1018

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1018

gttctggagt ttcaggttga 20

<210> 1019

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1019

ttaagtgaag ttacttctgg 20

<210> 1020

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1020

tgctattatc ttgtttttct 20

<210> 1021

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1021

ggtctttgat gctattatct 20

<210> 1022

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1022

gaaggtcttt gatgctatta 20

<210> 1023

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1023

ctggagaagg tctttgatgc 20

<210> 1024

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1024

ctgagctgat tttctatttc 20

<210> 1025

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1025

atttctgtgg gttcttgaat 20

<210> 1026

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1026

gagaaatttc tgtgggttct 20

<210> 1027

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1027

gatagagaaa tttctgtggg 20

<210> 1028

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1028

cttggaagat agagaaattt 20

<210> 1029

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1029

gtgctcttgg cttggaagat 20

<210> 1030

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1030

cttggtgctc ttggcttgga 20

<210> 1031

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1031

gggagtagtt cttggtgctc 20

<210> 1032

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1032

ctgaagaaag ggagtagttc 20

<210> 1033

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1033

atcatgtttt acatttctta 20

<210> 1034

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1034

gccatcatgt tttacatttc 20

<210> 1035

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1035

gaatgccatc atgttttaca 20

<210> 1036

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1036

caggaatgcc atcatgtttt 20

<210> 1037

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1037

aaagtcaatg tgacttagta 20

<210> 1038

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1038

aaggtatagt gatacctcat 20

<210> 1039

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1039

actgttttct tctggaagca 20

<210> 1040

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1040

aaataaggta tagtgatacc 20

<210> 1041

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1041

acaaataagg tatagtgata 20

<210> 1042

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1042

taacaaataa ggtatagtga 20

<210> 1043

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1043

tttaacaaat aaggtatagt 20

<210> 1044

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1044

atatatttta acaaataagg 20

<210> 1045

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1045

cagtatatat tttaacaaat 20

<210> 1046

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1046

tacagtatat attttaacaa 20

<210> 1047

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1047

tatacagtat atattttaac 20

<210> 1048

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1048

atagtattaa gtgttaaaat 20

<210> 1049

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1049

tcatagtatt aagtgttaaa 20

<210> 1050

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1050

gttttcatag tattaagtgt 20

<210> 1051

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1051

attatttgtt ttcatagtat 20

<210> 1052

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1052

ctttacaatt atttgttttc 20

<210> 1053

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1053

attcctttac aattatttgt 20

<210> 1054

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1054

agattccttt acaattattt 20

<210> 1055

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1055

caagattcct ttacaattat 20

<210> 1056

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1056

gacaagattc ctttacaatt 20

<210> 1057

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1057

ctgacaagat tcctttacaa 20

<210> 1058

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1058

aatctgacaa gattccttta 20

<210> 1059

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1059

gtaatctgac aagattcctt 20

<210> 1060

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1060

ctgtaatctg acaagattcc 20

<210> 1061

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1061

tactgtaatc tgacaagatt 20

<210> 1062

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1062

cttactgtaa tctgacaaga 20

<210> 1063

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1063

ttcttactgt aatctgacaa 20

<210> 1064

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1064

cattcttact gtaatctgac 20

<210> 1065

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1065

ttcattctta ctgtaatctg 20

<210> 1066

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1066

tgttcattct tactgtaatc 20

<210> 1067

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1067

tatgttcatt cttactgtaa 20

<210> 1068

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1068

aatatgttca ttcttactgt 20

<210> 1069

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1069

acaaatatgt tcattcttac 20

<210> 1070

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1070

cgatgccaca aatatgttca 20

<210> 1071

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1071

ctcgatgcca caaatatgtt 20

<210> 1072

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1072

aactcgatgc cacaaatatg 20

<210> 1073

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1073

ttaactcgat gccacaaata 20

<210> 1074

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1074

ctttaactcg atgccacaaa 20

<210> 1075

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1075

aactttaact cgatgccaca 20

<210> 1076

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1076

aatataaact ttaactcgat 20

<210> 1077

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1077

gaaatataaa ctttaactcg 20

<210> 1078

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1078

gggaaatata aactttaact 20

<210> 1079

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1079

gaatcacagc atatttaggg 20

<210> 1080

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1080

tagaatcaca gcatatttag 20

<210> 1081

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1081

gtattagaat cacagcatat 20

<210> 1082

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1082

atgtattaga atcacagcat 20

<210> 1083

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1083

gaatgtatta gaatcacagc 20

<210> 1084

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1084

acgaatgtat tagaatcaca 20

<210> 1085

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1085

acacgaatgt attagaatca 20

<210> 1086

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1086

ctacacgaat gtattagaat 20

<210> 1087

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1087

acctacacga atgtattaga 20

<210> 1088

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1088

aaacctacac gaatgtatta 20

<210> 1089

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1089

gaaaacctac acgaatgtat 20

<210> 1090

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1090

ttgaaaacct acacgaatgt 20

<210> 1091

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1091

acttgaaaac ctacacgaat 20

<210> 1092

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1092

ctacttgaaa acctacacga 20

<210> 1093

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1093

tatttctact tgaaaaccta 20

<210> 1094

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1094

tttatttcta cttgaaaacc 20

<210> 1095

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1095

ggtttatttc tacttgaaaa 20

<210> 1096

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1096

gaggtttatt tctacttgaa 20

<210> 1097

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1097

ttacgaggtt tatttctact 20

<210> 1098

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1098

tgttacgagg tttatttcta 20

<210> 1099

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1099

cttgttacga ggtttatttc 20

<210> 1100

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1100

aacttgttac gaggtttatt 20

<210> 1101

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1101

gtaacttgtt acgaggttta 20

<210> 1102

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1102

cagtaacttg ttacgaggtt 20

<210> 1103

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1103

ttcagtaact tgttacgagg 20

<210> 1104

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1104

cgttcagtaa cttgttacga 20

<210> 1105

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1105

cttgtcaggc tgtttaaacg 20

<210> 1106

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1106

tgcttgtcag gctgtttaaa 20

<210> 1107

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1107

tatacatgct tgtcaggctg 20

<210> 1108

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1108

tatatacatg cttgtcaggc 20

<210> 1109

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1109

catatataca tgcttgtcag 20

<210> 1110

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1110

tggaactgtt ttcttctgga 20

<210> 1111

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1111

cgtggaactg ttttcttctg 20

<210> 1112

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1112

tcttgatttt caatttcaag 20

<210> 1113

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1113

ttttatcttg attttcaatt 20

<210> 1114

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1114

catttttatc ttgattttca 20

<210> 1115

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1115

attgtgaaca tttttatctt 20

<210> 1116

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1116

taattgtgaa catttttatc 20

<210> 1117

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1117

aagaaggagc ttaattgtga 20

<210> 1118

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1118

aaaagaagga gcttaattgt 20

<210> 1119

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1119

taaaaagaag gagcttaatt 20

<210> 1120

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1120

taactagagg aacaataaaa 20

<210> 1121

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1121

aataactaga ggaacaataa 20

<210> 1122

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1122

gaaataacta gaggaacaat 20

<210> 1123

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1123

aggaaataac tagaggaaca 20

<210> 1124

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1124

ggaggaaata actagaggaa 20

<210> 1125

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1125

caattctgga ggaaataact 20

<210> 1126

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1126

atcaattctg gaggaaataa 20

<210> 1127

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1127

cttgatcaat tctggaggaa 20

<210> 1128

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1128

gtcttgatca attctggagg 20

<210> 1129

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1129

ttgtcttgat caattctgga 20

<210> 1130

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1130

aattgtcttg atcaattctg 20

<210> 1131

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1131

tgaattgtct tgatcaattc 20

<210> 1132

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1132

gatgaattgt cttgatcaat 20

<210> 1133

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1133

atgatgaatt gtcttgatca 20

<210> 1134

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1134

aaatgatgaa ttgtcttgat 20

<210> 1135

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1135

aatcaaatga tgaattgtct 20

<210> 1136

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1136

agaatcaaat gatgaattgt 20

<210> 1137

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1137

tagagaatca aatgatgaat 20

<210> 1138

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1138

ctggagatag agaatcaaat 20

<210> 1139

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1139

ctctggagat agagaatcaa 20

<210> 1140

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1140

ttggctctgg agatagagaa 20

<210> 1141

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1141

attttggctc tggagataga 20

<210> 1142

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1142

aatcttgatt ttggctctgg 20

<210> 1143

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1143

acatagcaaa tcttgatttt 20

<210> 1144

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1144

taacatagca aatcttgatt 20

<210> 1145

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1145

tctaacatag caaatcttga 20

<210> 1146

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1146

attggctaaa atttttacat 20

<210> 1147

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1147

ggccattggc taaaattttt 20

<210> 1148

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1148

gaggccattg gctaaaattt 20

<210> 1149

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1149

actgaaggag gccattggct 20

<210> 1150

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1150

caactgaagg aggccattgg 20

<210> 1151

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1151

cccaactgaa ggaggccatt 20

<210> 1152

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1152

atgtcccaac tgaaggaggc 20

<210> 1153

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1153

taagaccatg tcccaactga 20

<210> 1154

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1154

aagtctttaa gaccatgtcc 20

<210> 1155

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1155

caaagtcttt aagaccatgt 20

<210> 1156

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1156

tatggacaaa gtctttaaga 20

<210> 1157

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1157

cgtcttatgg acaaagtctt 20

<210> 1158

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1158

aatatgtcat taatttggcc 20

<210> 1159

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1159

gaaatatgtc attaatttgg 20

<210> 1160

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1160

tttgaaatat gtcattaatt 20

<210> 1161

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1161

agtttttgaa atatgtcatt 20

<210> 1162

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1162

tgagtttttg aaatatgtca 20

<210> 1163

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1163

caaatatgtt gagtttttga 20

<210> 1164

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1164

ctgatcaaat atgttgagtt 20

<210> 1165

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1165

aagactgatc aaatatgttg 20

<210> 1166

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1166

taaaaagact gatcaaatat 20

<210> 1167

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1167

cataaaaaga ctgatcaaat 20

<210> 1168

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1168

atcataaaaa gactgatcaa 20

<210> 1169

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1169

tagatcataa aaagactgat 20

<210> 1170

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1170

gatagatcat aaaaagactg 20

<210> 1171

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1171

gcgatagatc ataaaaagac 20

<210> 1172

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1172

cagcgataga tcataaaaag 20

<210> 1173

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1173

tgcagcgata gatcataaaa 20

<210> 1174

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1174

tttgcagcga tagatcataa 20

<210> 1175

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1175

ggtttgcagc gatagatcat 20

<210> 1176

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1176

ctggtttgca gcgatagatc 20

<210> 1177

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1177

cactggtttg cagcgataga 20

<210> 1178

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1178

atttcactgg tttgcagcga 20

<210> 1179

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1179

ttgatttcac tggtttgcag 20

<210> 1180

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1180

cttcttcttt gatttcactg 20

<210> 1181

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1181

gttccttttc ttcttctttg 20

<210> 1182

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1182

ttgtatgttc acctctgtta 20

<210> 1183

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1183

cttgtatgtt cacctctgtt 20

<210> 1184

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1184

gccacttgta tgttcacctc 20

<210> 1185

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1185

tgccacttgt atgttcacct 20

<210> 1186

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1186

atgccacttg tatgttcacc 20

<210> 1187

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1187

catgccactt gtatgttcac 20

<210> 1188

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1188

acatgccact tgtatgttca 20

<210> 1189

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1189

tacatgccac ttgtatgttc 20

<210> 1190

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1190

gcatacatgc cacttgtatg 20

<210> 1191

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1191

ggcatacatg ccacttgtat 20

<210> 1192

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1192

tggcatacat gccacttgta 20

<210> 1193

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1193

atggcataca tgccacttgt 20

<210> 1194

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1194

tctgatggca tacatgccac 20

<210> 1195

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1195

gtctgatggc atacatgcca 20

<210> 1196

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1196

gggtctgatg gcatacatgc 20

<210> 1197

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1197

tgggtctgat ggcatacatg 20

<210> 1198

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1198

ctgggtctga tggcatacat 20

<210> 1199

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1199

gagagttgct gggtctgatg 20

<210> 1200

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1200

tgagagttgc tgggtctgat 20

<210> 1201

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1201

ttgagagttg ctgggtctga 20

<210> 1202

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1202

cttgagagtt gctgggtctg 20

<210> 1203

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1203

acttgagagt tgctgggtct 20

<210> 1204

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1204

aacttgagag ttgctgggtc 20

<210> 1205

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1205

gaaaaacttg agagttgctg 20

<210> 1206

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1206

tgaaaaactt gagagttgct 20

<210> 1207

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1207

atgaaaaact tgagagttgc 20

<210> 1208

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1208

catgaaaaac ttgagagttg 20

<210> 1209

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1209

gtagacatga aaaacttgag 20

<210> 1210

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1210

cagtagacat gaaaaacttg 20

<210> 1211

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1211

taacatcaca gtagacatga 20

<210> 1212

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1212

ataacatcac agtagacatg 20

<210> 1213

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1213

tataacatca cagtagacat 20

<210> 1214

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1214

atataacatc acagtagaca 20

<210> 1215

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1215

gatataacat cacagtagac 20

<210> 1216

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1216

tgatataaca tcacagtaga 20

<210> 1217

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1217

ctgatataac atcacagtag 20

<210> 1218

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1218

cctgatataa catcacagta 20

<210> 1219

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1219

acctgatata acatcacagt 20

<210> 1220

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1220

tacctgatat aacatcacag 20

<210> 1221

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1221

ctacctgata taacatcaca 20

<210> 1222

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1222

actacctgat ataacatcac 20

<210> 1223

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1223

gactacctga tataacatca 20

<210> 1224

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1224

ggactacctg atataacatc 20

<210> 1225

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1225

tggactacct gatataacat 20

<210> 1226

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1226

atggactacc tgatataaca 20

<210> 1227

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1227

catggactac ctgatataac 20

<210> 1228

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1228

ccatggacta cctgatataa 20

<210> 1229

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1229

tccatggact acctgatata 20

<210> 1230

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1230

gtccatggac tacctgatat 20

<210> 1231

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1231

tgtccatgga ctacctgata 20

<210> 1232

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1232

atgtccatgg actacctgat 20

<210> 1233

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1233

aatgtccatg gactacctga 20

<210> 1234

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1234

taatgtccat ggactacctg 20

<210> 1235

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1235

ttaatgtcca tggactacct 20

<210> 1236

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1236

attaatgtcc atggactacc 20

<210> 1237

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1237

aattaatgtc catggactac 20

<210> 1238

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1238

gttgaattaa tgtccatgga 20

<210> 1239

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1239

tgttgaatta atgtccatgg 20

<210> 1240

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1240

atgttgaatt aatgtccatg 20

<210> 1241

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1241

gatgttgaat taatgtccat 20

<210> 1242

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1242

cgatgttgaa ttaatgtcca 20

<210> 1243

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1243

tcgatgttga attaatgtcc 20

<210> 1244

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1244

ttcgatgttg aattaatgtc 20

<210> 1245

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1245

attcgatgtt gaattaatgt 20

<210> 1246

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1246

tattcgatgt tgaattaatg 20

<210> 1247

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1247

ctattcgatg ttgaattaat 20

<210> 1248

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1248

atctattcga tgttgaatta 20

<210> 1249

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1249

catctattcg atgttgaatt 20

<210> 1250

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1250

ccatctattc gatgttgaat 20

<210> 1251

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1251

tccatctatt cgatgttgaa 20

<210> 1252

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1252

atccatctat tcgatgttga 20

<210> 1253

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1253

gatccatcta ttcgatgttg 20

<210> 1254

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1254

tgatccatct attcgatgtt 20

<210> 1255

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1255

gtgatccatc tattcgatgt 20

<210> 1256

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1256

tgtgatccat ctattcgatg 20

<210> 1257

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1257

ttgtgatcca tctattcgat 20

<210> 1258

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1258

tttaggttgt tttctccaca 20

<210> 1259

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1259

atttaggttg ttttctccac 20

<210> 1260

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1260

taccatttag gttgttttct 20

<210> 1261

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1261

gttatattta ccatttaggt 20

<210> 1262

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1262

tgttatattt accatttagg 20

<210> 1263

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1263

ttgttatatt taccatttag 20

<210> 1264

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1264

tttgttatat ttaccattta 20

<210> 1265

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1265

tggtttgtta tatttaccat 20

<210> 1266

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1266

ctcttggttt gttatattta 20

<210> 1267

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1267

gctcttggtt tgttatattt 20

<210> 1268

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1268

tgctcttggt ttgttatatt 20

<210> 1269

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1269

ttttgctctt ggtttgttat 20

<210> 1270

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1270

attttgctct tggtttgtta 20

<210> 1271

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1271

gattttgctc ttggtttgtt 20

<210> 1272

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1272

agattttgct cttggtttgt 20

<210> 1273

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1273

tagattttgc tcttggtttg 20

<210> 1274

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1274

ctctctggct tagattttgc 20

<210> 1275

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1275

cctctctggc ttagattttg 20

<210> 1276

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1276

tcctctctgg cttagatttt 20

<210> 1277

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1277

cttctcctct ctggcttaga 20

<210> 1278

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1278

tcttctcctc tctggcttag 20

<210> 1279

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1279

ctcttctcct ctctggctta 20

<210> 1280

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1280

taatcctctt ctcctctctg 20

<210> 1281

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1281

ataatcctct tctcctctct 20

<210> 1282

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1282

gataatcctc ttctcctctc 20

<210> 1283

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1283

agataatcct cttctcctct 20

<210> 1284

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1284

aagataatcc tcttctcctc 20

<210> 1285

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1285

caagataatc ctcttctcct 20

<210> 1286

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1286

ccaagataat cctcttctcc 20

<210> 1287

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1287

tccaagataa tcctcttctc 20

<210> 1288

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1288

ttccaagata atcctcttct 20

<210> 1289

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1289

cttccaagat aatcctcttc 20

<210> 1290

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1290

acttccaaga taatcctctt 20

<210> 1291

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1291

gacttccaag ataatcctct 20

<210> 1292

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1292

agacttccaa gataatcctc 20

<210> 1293

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1293

gagacttcca agataatcct 20

<210> 1294

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1294

tgagacttcc aagataatcc 20

<210> 1295

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1295

ttgagacttc caagataatc 20

<210> 1296

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1296

tttgagactt ccaagataat 20

<210> 1297

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1297

ttttgagact tccaagataa 20

<210> 1298

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1298

attttgagac ttccaagata 20

<210> 1299

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1299

ccattttgag acttccaaga 20

<210> 1300

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1300

cttccatttt gagacttcca 20

<210> 1301

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1301

taaccttcca ttttgagact 20

<210> 1302

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1302

ataaccttcc attttgagac 20

<210> 1303

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1303

tataaccttc cattttgaga 20

<210> 1304

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1304

gtataacctt ccattttgag 20

<210> 1305

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1305

gagtataacc ttccattttg 20

<210> 1306

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1306

agagtataac cttccatttt 20

<210> 1307

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1307

ttatagagta taaccttcca 20

<210> 1308

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1308

gattttatag agtataacct 20

<210> 1309

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1309

tgattttata gagtataacc 20

<210> 1310

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1310

ttgattttat agagtataac 20

<210> 1311

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1311

gttgatttta tagagtataa 20

<210> 1312

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1312

tttggttgat tttatagagt 20

<210> 1313

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1313

ggatcaacat tttggttgat 20

<210> 1314

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1314

tggatcaaca ttttggttga 20

<210> 1315

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1315

atggatcaac attttggttg 20

<210> 1316

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1316

aatctgttgg atggatcaac 20

<210> 1317

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1317

gaatctgttg gatggatcaa 20

<210> 1318

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1318

ttctgaatct gttggatgga 20

<210> 1319

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1319

tttctgaatc tgttggatgg 20

<210> 1320

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1320

ctttctgaat ctgttggatg 20

<210> 1321

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1321

aaagctttct gaatctgttg 20

<210> 1322

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1322

ttgcctcagt tcattcaaag 20

<210> 1323

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1323

aaatttgcct cagttcattc 20

<210> 1324

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1324

cttttaaatt tgcctcagtt 20

<210> 1325

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1325

tattgccttt taaatttgcc 20

<210> 1326

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1326

ttattgcctt ttaaatttgc 20

<210> 1327

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1327

ttaaattatt gccttttaaa 20

<210> 1328

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1328

tttaaattat tgccttttaa 20

<210> 1329

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1329

gtttaaatta ttgcctttta 20

<210> 1330

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1330

tgtttaaatt attgcctttt 20

<210> 1331

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1331

atgtttaaat tattgccttt 20

<210> 1332

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1332

tttaataagt tcacctattg 20

<210> 1333

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1333

atttaataag ttcacctatt 20

<210> 1334

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1334

tatttaataa gttcacctat 20

<210> 1335

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1335

ttatttaata agttcaccta 20

<210> 1336

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1336

gttatttaat aagttcacct 20

<210> 1337

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1337

agttatttaa taagttcacc 20

<210> 1338

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1338

aaaagttatt taataagttc 20

<210> 1339

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1339

tatttagaaa agttatttaa 20

<210> 1340

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1340

taaaagtctc taaatttttt 20

<210> 1341

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1341

ataaaagtct ctaaattttt 20

<210> 1342

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1342

aataaaagtc tctaaatttt 20

<210> 1343

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1343

ttagctcata tgatgccttt 20

<210> 1344

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1344

attagctcat atgatgcctt 20

<210> 1345

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1345

atattagctc atatgatgcc 20

<210> 1346

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1346

gatattagct catatgatgc 20

<210> 1347

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1347

tgatattagc tcatatgatg 20

<210> 1348

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1348

gtgatattag ctcatatgat 20

<210> 1349

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1349

gaaagttgtg atattagctc 20

<210> 1350

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1350

ggaaagttgt gatattagct 20

<210> 1351

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1351

gggaaagttg tgatattagc 20

<210> 1352

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1352

tgggaaagtt gtgatattag 20

<210> 1353

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1353

ctgggaaagt tgtgatatta 20

<210> 1354

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1354

actgggaaag ttgtgatatt 20

<210> 1355

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1355

aactgggaaa gttgtgatat 20

<210> 1356

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1356

aaactgggaa agttgtgata 20

<210> 1357

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1357

taaactggga aagttgtgat 20

<210> 1358

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1358

ttaaactggg aaagttgtga 20

<210> 1359

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1359

tttaaactgg gaaagttgtg 20

<210> 1360

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1360

ttttaaactg ggaaagttgt 20

<210> 1361

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1361

gttttttaaa ctgggaaagt 20

<210> 1362

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1362

agttttttaa actgggaaag 20

<210> 1363

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1363

tagtttttta aactgggaaa 20

<210> 1364

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1364

gtactagttt tttaaactgg 20

<210> 1365

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1365

agagtactag ttttttaaac 20

<210> 1366

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1366

caagagtact agttttttaa 20

<210> 1367

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1367

tttaacaaga gtactagttt 20

<210> 1368

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1368

ttttaacaag agtactagtt 20

<210> 1369

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1369

gttttaacaa gagtactagt 20

<210> 1370

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1370

agttttaaca agagtactag 20

<210> 1371

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1371

gagttttaac aagagtacta 20

<210> 1372

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1372

agagttttaa caagagtact 20

<210> 1373

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1373

tttagagttt taacaagagt 20

<210> 1374

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1374

gtttagagtt ttaacaagag 20

<210> 1375

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1375

aagtttagag ttttaacaag 20

<210> 1376

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1376

caagtttaga gttttaacaa 20

<210> 1377

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1377

tagtcaagtt tagagtttta 20

<210> 1378

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1378

ttagtcaagt ttagagtttt 20

<210> 1379

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1379

tttagtcaag tttagagttt 20

<210> 1380

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1380

tgtatttagt caagtttaga 20

<210> 1381

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1381

ctgtatttag tcaagtttag 20

<210> 1382

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1382

tctgtattta gtcaagttta 20

<210> 1383

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1383

gtcctctgta tttagtcaag 20

<210> 1384

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1384

agtcctctgt atttagtcaa 20

<210> 1385

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1385

cagtcctctg tatttagtca 20

<210> 1386

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1386

ccagtcctct gtatttagtc 20

<210> 1387

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1387

accagtcctc tgtatttagt 20

<210> 1388

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1388

taccagtcct ctgtatttag 20

<210> 1389

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1389

ttaccagtcc tctgtattta 20

<210> 1390

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1390

attaccagtc ctctgtattt 20

<210> 1391

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1391

aattaccagt cctctgtatt 20

<210> 1392

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1392

caattaccag tcctctgtat 20

<210> 1393

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1393

acaattacca gtcctctgta 20

<210> 1394

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1394

tacaattacc agtcctctgt 20

<210> 1395

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1395

gtacaattac cagtcctctg 20

<210> 1396

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1396

tgtacaatta ccagtcctct 20

<210> 1397

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1397

ctgtacaatt accagtcctc 20

<210> 1398

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1398

actgtacaat taccagtcct 20

<210> 1399

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1399

aactgtacaa ttaccagtcc 20

<210> 1400

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1400

gaactgtaca attaccagtc 20

<210> 1401

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1401

agaactgtac aattaccagt 20

<210> 1402

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1402

taagaactgt acaattacca 20

<210> 1403

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1403

ttaagaactg tacaattacc 20

<210> 1404

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1404

tttaagaact gtacaattac 20

<210> 1405

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1405

acttgaaatt ataataggaa 20

<210> 1406

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1406

aaaaaactaa cttgaaatta 20

<210> 1407

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1407

gaaacaaaaa actaacttga 20

<210> 1408

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1408

gtgttttcat atataacatt 20

<210> 1409

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1409

aattttcagt gttttcatat 20

<210> 1410

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1410

aaaatgcaaa ttttcagtgt 20

<210> 1411

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1411

gtaattttca tataaaatgc 20

<210> 1412

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1412

gatttgtaat tttcatataa 20

<210> 1413

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1413

taaccgattt gtaattttca 20

<210> 1414

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1414

taatttaacc gatttgtaat 20

<210> 1415

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1415

ttgtataatt taaccgattt 20

<210> 1416

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1416

ctagattgta taatttaacc 20

<210> 1417

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1417

gtgttctaga ttgtataatt 20

<210> 1418

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1418

aatgacatag tgttctagat 20

<210> 1419

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1419

agtgtaatga catagtgttc 20

<210> 1420

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1420

ttacaatagt gtaatgacat 20

<210> 1421

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1421

ttcagtaatt tacaatagtg 20

<210> 1422

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1422

ttaccttcag taatttacaa 20

<210> 1423

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1423

ttaacttttt acttaccttc 20

<210> 1424

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1424

gaatagtttt aaattttttt 20

<210> 1425

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1425

acactggaga atagttttaa 20

<210> 1426

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1426

tttaaacact ggagaatagt 20

<210> 1427

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1427

tctgttttaa acactggaga 20

<210> 1428

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1428

gtattattta atctgtttta 20

<210> 1429

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1429

ttactgtatt atttaatctg 20

<210> 1430

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1430

taaatctttt ccatttactg 20

<210> 1431

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1431

atgaataaat cttttccatt 20

<210> 1432

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1432

gcatattttc atatgaataa 20

<210> 1433

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1433

gcccagcata ttttcatatg 20

<210> 1434

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1434

aaaagaaaaa gcccagcata 20

<210> 1435

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1435

ctgaacttca attaaaagaa 20

<210> 1436

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1436

gattttctga acttcaatta 20

<210> 1437

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1437

tctaaaattt gattttctga 20

<210> 1438

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1438

actatctcta aaatttgatt 20

<210> 1439

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1439

ttaaattgta ctatctctaa 20

<210> 1440

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1440

acattttatt taaattgtac 20

<210> 1441

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1441

gtccttaaca ttttatttaa 20

<210> 1442

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1442

catatttttg tccttaacat 20

<210> 1443

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1443

tagcacatat ttttgtcctt 20

<210> 1444

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1444

tcaaatagca catatttttg 20

<210> 1445

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1445

cttctttcaa atagcacata 20

<210> 1446

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1446

cttgtatgct tctttcaaat 20

<210> 1447

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1447

attccttccc cttgtatgct 20

<210> 1448

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1448

ttggcaattc cttccccttg 20

<210> 1449

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1449

gaatattggc aattccttcc 20

<210> 1450

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1450

tgaaaaatga atattggcaa 20

<210> 1451

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1451

taatggattt gaaaaatgaa 20

<210> 1452

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1452

actaataatg gatttgaaaa 20

<210> 1453

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1453

cataatctaa atttttaaac 20

<210> 1454

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1454

cactatcata atctaaattt 20

<210> 1455

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1455

aatttcctgt aacactatca 20

<210> 1456

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1456

ctattaattt cctgtaacac 20

<210> 1457

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1457

cttttctatt aatttcctgt 20

<210> 1458

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1458

ctctttcttt tctattaatt 20

<210> 1459

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1459

agttgctttc ctctttcttt 20

<210> 1460

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1460

ttataagttg ctttcctctt 20

<210> 1461

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1461

gttggttata agttgctttc 20

<210> 1462

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1462

agtaggttgg ttataagttg 20

<210> 1463

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1463

tagagagtag gttggttata 20

<210> 1464

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1464

ggatatagag agtaggttgg 20

<210> 1465

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1465

agtctggata tagagagtag 20

<210> 1466

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1466

tacaaaagtc tggatataga 20

<210> 1467

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1467

gtttttctac aaaagtctgg 20

<210> 1468

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1468

ttacctgatt ttctatttct 20

<210> 1469

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1469

atactgactt acctgatttt 20

<210> 1470

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1470

ttaaaatact gacttacctg 20

<210> 1471

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1471

taccattaaa atactgactt 20

<210> 1472

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1472

ggacatacca ttaaaatact 20

<210> 1473

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1473

aaagatggga cataccatta 20

<210> 1474

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1474

agacctgtgt gaaagatggg 20

<210> 1475

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1475

tttacagacc tgtgtgaaag 20

<210> 1476

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1476

gtgtttttac agacctgtgt 20

<210> 1477

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1477

attcagtgtt tttacagacc 20

<210> 1478

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1478

ttaggattca gtgtttttac 20

<210> 1479

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1479

ataattttag gattcagtgt 20

<210> 1480

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1480

gcttgtaaat aattttagga 20

<210> 1481

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1481

gttaaagctt gtaaataatt 20

<210> 1482

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1482

tgttttatat ctcttgaaaa 20

<210> 1483

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1483

ttggtaataa tatttgtttt 20

<210> 1484

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1484

ggaaattggt aataatattt 20

<210> 1485

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1485

ttagtggaaa ttggtaataa 20

<210> 1486

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1486

tttgtttagt ggaaattggt 20

<210> 1487

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1487

ttatgtttgt ttagtggaaa 20

<210> 1488

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1488

taacattatg tttgtttagt 20

<210> 1489

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1489

actactaaca ttatgtttgt 20

<210> 1490

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1490

gcagcactac taacattatg 20

<210> 1491

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1491

ttttagcagc actactaaca 20

<210> 1492

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1492

aaacctttta gcagcactac 20

<210> 1493

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1493

gataaaaaac cttttagcag 20

<210> 1494

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1494

tagttgataa aaaacctttt 20

<210> 1495

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1495

caaaagtagt tgataaaaaa 20

<210> 1496

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1496

atggaaacca aaagtagttg 20

<210> 1497

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1497

aaagtatgga aaccaaaagt 20

<210> 1498

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1498

gaaggaaagt atggaaacca 20

<210> 1499

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1499

cataagaagg aaagtatgga 20

<210> 1500

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1500

taacatcata agaaggaaag 20

<210> 1501

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1501

gaataataac atcataagaa 20

<210> 1502

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1502

gaatttagaa taataacatc 20

<210> 1503

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1503

tataattgaa aagaatttag 20

<210> 1504

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1504

tagtaaaaga tataattgaa 20

<210> 1505

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1505

aatcatagta aaagatataa 20

<210> 1506

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1506

caggttcatt taatcatagt 20

<210> 1507

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1507

ctatagtaac attttgcttt 20

<210> 1508

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1508

gtatattact atagtaacat 20

<210> 1509

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1509

acaatgtata ttactatagt 20

<210> 1510

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1510

tagacacaat gtatattact 20

<210> 1511

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1511

tatttttaga cacaatgtat 20

<210> 1512

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1512

acacattttt atttttagac 20

<210> 1513

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1513

ttggtttctt cacacatttt 20

<210> 1514

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1514

ttcattgttt tggtttcttc 20

<210> 1515

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1515

cagaaattca ttgttttggt 20

<210> 1516

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1516

cttcttccaa ctcagaaatt 20

<210> 1517

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1517

tgatctaact cttcttccaa 20

<210> 1518

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1518

ttaaatgatc taactcttct 20

<210> 1519

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1519

tgagaaagtt aaatgatcta 20

<210> 1520

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1520

tacttaaatt tttagagttt 20

<210> 1521

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1521

aaagttactt aaatttttag 20

<210> 1522

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1522

atcttaaagt tacttaaatt 20

<210> 1523

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1523

atgtgatctt aaagttactt 20

<210> 1524

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1524

taactatgtg atcttaaagt 20

<210> 1525

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1525

ttactctttt ctactaagta 20

<210> 1526

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1526

gggtattact cttttctact 20

<210> 1527

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1527

taaagtttgc ttgctgggta 20

<210> 1528

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1528

tattgtaaag tttgcttgct 20

<210> 1529

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1529

taaaaggatc tattgtaaag 20

<210> 1530

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1530

ttatttaaaa ggatctattg 20

<210> 1531

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1531

ggaccttatt taaaaggatc 20

<210> 1532

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1532

gatatttcct aggaccttat 20

<210> 1533

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1533

tgaatgatat ttcctaggac 20

<210> 1534

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1534

gatgctggca tgaatgatat 20

<210> 1535

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1535

ttttttgatg ctggcatgaa 20

<210> 1536

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1536

gttagttttt tgatgctggc 20

<210> 1537

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1537

ttagtgttag ttttttgatg 20

<210> 1538

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1538

gcattattag tgttagtttt 20

<210> 1539

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1539

atcttgcatt attagtgtta 20

<210> 1540

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1540

ataatatctt gcattattag 20

<210> 1541

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1541

cagtaagaaa agcagaatat 20

<210> 1542

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1542

tcattgacag taagaaaagc 20

<210> 1543

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1543

gatagttttt ctcattgaca 20

<210> 1544

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1544

gtttgcaatt tattgaatga 20

<210> 1545

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1545

gtgttgggtt tgcaatttat 20

<210> 1546

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1546

ttaagtgtgt tgggtttgca 20

<210> 1547

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1547

ttttatttaa gtgtgttggg 20

<210> 1548

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1548

tttagcagta acattttatt 20

<210> 1549

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1549

gttagtttag cagtaacatt 20

<210> 1550

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1550

tctatatatt cagtagttta 20

<210> 1551

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1551

ttactttcta tatattcagt 20

<210> 1552

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1552

gtttgcttac tttctatata 20

<210> 1553

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1553

agtttgtttg cttactttct 20

<210> 1554

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1554

tggcaagttt gtttgcttac 20

<210> 1555

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1555

ttactgttac tgtatttccc 20

<210> 1556

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1556

atgtagttac tgttactgta 20

<210> 1557

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1557

atgcaattta atgggtacag 20

<210> 1558

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1558

tagatatgca atttaatggg 20

<210> 1559

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1559

aggagataga tatgcaattt 20

<210> 1560

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1560

cctaaaggag atagatatgc 20

<210> 1561

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1561

agcctcctaa aggagataga 20

<210> 1562

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1562

caccaccagc ctcctaaagg 20

<210> 1563

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1563

atctaagaaa attaataaac 20

<210> 1564

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1564

atgatcacat ctaagaaaat 20

<210> 1565

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1565

aactgcaata ccatgatcac 20

<210> 1566

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1566

taaaactgca ataccatgat 20

<210> 1567

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1567

ctttaaaact gcaataccat 20

<210> 1568

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1568

tctcctttaa aactgcaata 20

<210> 1569

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1569

tgttctcctt taaaactgca 20

<210> 1570

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1570

gattgttctc ctttaaaact 20

<210> 1571

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1571

aggagattgt tctcctttaa 20

<210> 1572

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1572

aacaggagat tgttctcctt 20

<210> 1573

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1573

ttaaacagga gattgttctc 20

<210> 1574

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1574

ctcttaaaca ggagattgtt 20

<210> 1575

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1575

ctttaactcc gtaaatattt 20

<210> 1576

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1576

agtgaccttt aactccgtaa 20

<210> 1577

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1577

ggagtccagt gacctttaac 20

<210> 1578

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1578

accagtctgg agtccagtga 20

<210> 1579

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1579

tcatcttacc aaactatttt 20

<210> 1580

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1580

gaatcatctt accaaactat 20

<210> 1581

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1581

taagaatcat cttaccaaac 20

<210> 1582

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1582

aagaatgtaa gaatcatctt 20

<210> 1583

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1583

gttatttaag aatgtaagaa 20

<210> 1584

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1584

cgtgttattt aagaatgtaa 20

<210> 1585

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1585

taaagcattt ttcttagatg 20

<210> 1586

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1586

tgttaaagca tttttcttag 20

<210> 1587

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1587

tttatgttaa agcatttttc 20

<210> 1588

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1588

atgtttatgt taaagcattt 20

<210> 1589

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1589

gcattttttc agtaatgttt 20

<210> 1590

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1590

tgtagcattt tttcagtaat 20

<210> 1591

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1591

caaatgtagc attttttcag 20

<210> 1592

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1592

aagttgtggc aaatgtagca 20

<210> 1593

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1593

atgaagttgt ggcaaatgta 20

<210> 1594

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1594

tttatgaagt tgtggcaaat 20

<210> 1595

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1595

tgacatttta tgaagttgtg 20

<210> 1596

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1596

cttgagattt cacttgacat 20

<210> 1597

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1597

tttggagctt gagatttcac 20

<210> 1598

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1598

atctttggag cttgagattt 20

<210> 1599

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1599

aatatctttg gagcttgaga 20

<210> 1600

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1600

aataatatct ttggagcttg 20

<210> 1601

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1601

aggaataata tctttggagc 20

<210> 1602

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1602

aataggaata atatctttgg 20

<210> 1603

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1603

agtaatagga ataatatctt 20

<210> 1604

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1604

ttacatcaga tttagtaata 20

<210> 1605

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1605

aaatgttatt acatcagatt 20

<210> 1606

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1606

ataaaatgtt attacatcag 20

<210> 1607

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1607

cctagaatca ataaaatgtt 20

<210> 1608

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1608

aggaatgcct agaatcaata 20

<210> 1609

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1609

attcagcagg aatgcctaga 20

<210> 1610

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1610

tacattcagc aggaatgcct 20

<210> 1611

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1611

ttacctgata taacatcaca 20

<210> 1612

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1612

gttttacctg atataacatc 20

<210> 1613

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1613

caggttttac ctgatataac 20

<210> 1614

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1614

ttagacaggt tttacctgat 20

<210> 1615

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1615

attctcctta gacaggtttt 20

<210> 1616

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1616

actgtctatt ctccttagac 20

<210> 1617

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1617

actactgtct attctcctta 20

<210> 1618

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1618

actaactact gtctattctc 20

<210> 1619

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1619

tgaactaact actgtctatt 20

<210> 1620

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1620

agttgaacta actactgtct 20

<210> 1621

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1621

attaattgat atgtaaaacg 20

<210> 1622

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1622

ccaattaatt gatatgtaaa 20

<210> 1623

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1623

tccttttaac ttccaattaa 20

<210> 1624

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1624

gtttcctggt ccttttaact 20

<210> 1625

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1625

tctgagtttc ctggtccttt 20

<210> 1626

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1626

atgtctgagt ttcctggtcc 20

<210> 1627

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1627

tgtatgtctg agtttcctgg 20

<210> 1628

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1628

atgtatactg tatgtctgag 20

<210> 1629

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1629

aaaatgtata ctgtatgtct 20

<210> 1630

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1630

ttttaaaatg tatactgtat 20

<210> 1631

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1631

catacattct atatattata 20

<210> 1632

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1632

attataagcc atacattcta 20

<210> 1633

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1633

ttcattataa gccatacatt 20

<210> 1634

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1634

taattcatta taagccatac 20

<210> 1635

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1635

tgagttaact aattcattat 20

<210> 1636

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1636

tttgcattga gttaactaat 20

<210> 1637

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1637

taatttgcat tgagttaact 20

<210> 1638

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1638

gaataatttg cattgagtta 20

<210> 1639

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1639

atagaataat ttgcattgag 20

<210> 1640

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1640

aaaatagaat aatttgcatt 20

<210> 1641

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1641

ttgtaatcaa aatagaataa 20

<210> 1642

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1642

tatttgtaat caaaatagaa 20

<210> 1643

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1643

tactatttgt aatcaaaata 20

<210> 1644

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1644

ttttactatt tgtaatcaaa 20

<210> 1645

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1645

gcttatttta ctatttgtaa 20

<210> 1646

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1646

cttgcttatt ttactatttg 20

<210> 1647

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1647

ttatcttgct tattttacta 20

<210> 1648

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1648

gttattttat cttgcttatt 20

<210> 1649

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1649

aaacatctgt tattttatct 20

<210> 1650

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1650

ggattttaaa catctgttat 20

<210> 1651

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1651

ctttttggat tttaaacatc 20

<210> 1652

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1652

gtgctttttg gattttaaac 20

<210> 1653

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1653

ttttgtatgt gctttttgga 20

<210> 1654

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1654

taagtgagta cttagacatc 20

<210> 1655

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1655

tactttataa gtgagtactt 20

<210> 1656

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1656

ttctacttta taagtgagta 20

<210> 1657

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1657

aatgtcttct actttataag 20

<210> 1658

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1658

aataatgaat gtcttctact 20

<210> 1659

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1659

tataataatg aatgtcttct 20

<210> 1660

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1660

tgatataata atgaatgtct 20

<210> 1661

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1661

aaaatttgat ataataatga 20

<210> 1662

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1662

catttaaaaa tttgatataa 20

<210> 1663

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1663

gtactgagca tttaaaaatt 20

<210> 1664

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1664

aatggtcaaa tagtactgag 20

<210> 1665

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1665

ttaaatggtc aaatagtact 20

<210> 1666

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1666

agtttgaata caaaattttt 20

<210> 1667

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1667

actggtagtt tgaatacaaa 20

<210> 1668

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1668

ttcactggta gtttgaatac 20

<210> 1669

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1669

gctttcactg gtagtttgaa 20

<210> 1670

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1670

agggctttca ctggtagttt 20

<210> 1671

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1671

ggtagggctt tcactggtag 20

<210> 1672

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1672

ctaggtaggg ctttcactgg 20

<210> 1673

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1673

cttctaggta gggctttcac 20

<210> 1674

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1674

taccttctag gtagggcttt 20

<210> 1675

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1675

gtataccttc taggtagggc 20

<210> 1676

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1676

tgagtatacc ttctaggtag 20

<210> 1677

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1677

cactgagtat accttctagg 20

<210> 1678

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1678

tatcactgag tataccttct 20

<210> 1679

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1679

acttatcact gagtatacct 20

<210> 1680

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1680

acaaaactta tcactgagta 20

<210> 1681

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1681

gctacaaaac ttatcactga 20

<210> 1682

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1682

ggagctacaa aacttatcac 20

<210> 1683

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1683

gatttggagc tacaaaactt 20

<210> 1684

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1684

gaagatttgg agctacaaaa 20

<210> 1685

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1685

ctattagaag atttggagct 20

<210> 1686

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1686

cactcactat tagaagattt 20

<210> 1687

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1687

tgtcagcctt ttattttggg 20

<210> 1688

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1688

acctgtcagc cttttatttt 20

<210> 1689

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1689

tcgacttacc tgtcagcctt 20

<210> 1690

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1690

ttctcgactt acctgtcagc 20

<210> 1691

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1691

gtattctcga cttacctgtc 20

<210> 1692

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1692

taacatccat atacagtcaa 20

<210> 1693

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1693

tattaacatc catatacagt 20

<210> 1694

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1694

atttattaac atccatatac 20

<210> 1695

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1695

gctatttatt aacatccata 20

<210> 1696

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1696

ctgtcagcta tttattaaca 20

<210> 1697

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1697

ttactgtcag ctatttatta 20

<210> 1698

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1698

actttactgt cagctattta 20

<210> 1699

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1699

taaactttac tgtcagctat 20

<210> 1700

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1700

ggataaactt tactgtcagc 20

<210> 1701

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1701

tatggataaa ctttactgtc 20

<210> 1702

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1702

ttatatggat aaactttact 20

<210> 1703

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1703

ttgcaagtct ttatatggat 20

<210> 1704

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1704

tatttgcaag tctttatatg 20

<210> 1705

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1705

gaatatttgc aagtctttat 20

<210> 1706

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1706

gtagaggaat atttgcaagt 20

<210> 1707

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1707

gttacattat tatagatatt 20

<210> 1708

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1708

tgtgttacat tattatagat 20

<210> 1709

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1709

gaaatgtgtt acattattat 20

<210> 1710

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1710

ttcaccagtg aaatgtgtta 20

<210> 1711

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1711

tgtttcacca gtgaaatgtg 20

<210> 1712

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1712

acatgtttca ccagtgaaat 20

<210> 1713

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1713

aagacatgtt tcaccagtga 20

<210> 1714

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1714

gacaagacat gtttcaccag 20

<210> 1715

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1715

tatgacaaga catgtttcac 20

<210> 1716

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1716

gcatatgaca agacatgttt 20

<210> 1717

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1717

taatgcatat gacaagacat 20

<210> 1718

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1718

ctataatgca tatgacaaga 20

<210> 1719

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1719

tttctataat gcatatgaca 20

<210> 1720

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1720

tcctttctat aatgcatatg 20

<210> 1721

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1721

tctgattatc ctttctataa 20

<210> 1722

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1722

aagtctgatt atcctttcta 20

<210> 1723

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1723

aactgaaagt ctgattatcc 20

<210> 1724

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1724

tataactgaa agtctgatta 20

<210> 1725

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1725

gttaaaaata ttaatataac 20

<210> 1726

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1726

tgtgcacaaa aatgttaaaa 20

<210> 1727

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1727

ctatgtgcac aaaaatgtta 20

<210> 1728

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1728

tagctatgtg cacaaaaatg 20

<210> 1729

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1729

agatagctat gtgcacaaaa 20

<210> 1730

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1730

tgaagatagc tatgtgcaca 20

<210> 1731

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1731

tattgaagat agctatgtgc 20

<210> 1732

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1732

ttttattgaa gatagctatg 20

<210> 1733

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1733

caattttatt gaagatagct 20

<210> 1734

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1734

aaacaatttt attgaagata 20

<210> 1735

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1735

gtgtatctta aaataatacc 20

<210> 1736

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1736

ttagtgtatc ttaaaataat 20

<210> 1737

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1737

tgatcatttt agtgtatctt 20

<210> 1738

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1738

cccttgatca ttttagtgta 20

<210> 1739

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1739

aatcccttga tcattttagt 20

<210> 1740

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1740

ttgaatccct tgatcatttt 20

<210> 1741

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1741

ttagtcttga atcccttgat 20

<210> 1742

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1742

ttgtttagtc ttgaatccct 20

<210> 1743

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1743

gagttgttta gtcttgaatc 20

<210> 1744

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1744

attgagttgt ttagtcttga 20

<210> 1745

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1745

ctaattgagt tgtttagtct 20

<210> 1746

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1746

caactaattg agttgtttag 20

<210> 1747

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1747

attggtgcaa ctaattgagt 20

<210> 1748

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1748

tttattggtg caactaattg 20

<210> 1749

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1749

ttttttattg gtgcaactaa 20

<210> 1750

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1750

taagtgtttt ttattggtgc 20

<210> 1751

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1751

actgacagtt tttttaagtg 20

<210> 1752

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1752

gacactgaca gtttttttaa 20

<210> 1753

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1753

ttggacactg acagtttttt 20

<210> 1754

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1754

aggttggaca ctgacagttt 20

<210> 1755

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1755

tacaggttgg acactgacag 20

<210> 1756

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1756

tatattggat aatttgaaat 20

<210> 1757

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1757

atgtatattg gataatttga 20

<210> 1758

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1758

gacatgtata ttggataatt 20

<210> 1759

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1759

atgacatgta tattggataa 20

<210> 1760

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1760

tatatatgac atgtatattg 20

<210> 1761

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1761

atgtgacata taaaaatata 20

<210> 1762

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1762

atatgtgaca tataaaaata 20

<210> 1763

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1763

tttatatatg tgacatataa 20

<210> 1764

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1764

cttttatata tgtgacatat 20

<210> 1765

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1765

atcttttata tatgtgacat 20

<210> 1766

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1766

catatctttt atatatgtga 20

<210> 1767

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1767

tcatacatat cttttatata 20

<210> 1768

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1768

tagatcatac atatctttta 20

<210> 1769

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1769

catagatcat acatatcttt 20

<210> 1770

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1770

cacatagatc atacatatct 20

<210> 1771

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1771

aggattcaca tagatcatac 20

<210> 1772

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1772

ttaggattca catagatcat 20

<210> 1773

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1773

acttaggatt cacatagatc 20

<210> 1774

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1774

ttacttagga ttcacataga 20

<210> 1775

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1775

tatttactta ggattcacat 20

<210> 1776

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1776

aatatttact taggattcac 20

<210> 1777

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1777

tgtacttttc tggaacaaaa 20

<210> 1778

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1778

gattattttt acctttatta 20

<210> 1779

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1779

tagattattt ttacctttat 20

<210> 1780

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1780

attatagatt atttttacct 20

<210> 1781

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1781

gaaaattata gattattttt 20

<210> 1782

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1782

ggtcctgaaa attatagatt 20

<210> 1783

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1783

gtggtcctga aaattataga 20

<210> 1784

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1784

ctgtggtcct gaaaattata 20

<210> 1785

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1785

gtctgtggtc ctgaaaatta 20

<210> 1786

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1786

tcgacagctt agtctgtggt 20

<210> 1787

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1787

tttcgacagc ttagtctgtg 20

<210> 1788

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1788

aatttcgaca gcttagtctg 20

<210> 1789

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1789

ttaatttcga cagcttagtc 20

<210> 1790

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1790

cgttaatttc gacagcttag 20

<210> 1791

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1791

tggccctaaa aaaatcagcg 20

<210> 1792

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1792

tctggcccta aaaaaatcag 20

<210> 1793

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1793

tggtattctg gccctaaaaa 20

<210> 1794

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1794

tttggtattc tggccctaaa 20

<210> 1795

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1795

ccattttggt attctggccc 20

<210> 1796

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1796

gaggagccat tttggtattc 20

<210> 1797

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1797

gagaggagcc attttggtat 20

<210> 1798

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1798

aagagaggag ccattttggt 20

<210> 1799

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1799

tgaaattgtc caattttggg 20

<210> 1800

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1800

tttgaaattg tccaattttg 20

<210> 1801

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1801

catttgaaat tgtccaattt 20

<210> 1802

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1802

tgcatttgaa attgtccaat 20

<210> 1803

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1803

attttgcatt tgaaattgtc 20

<210> 1804

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1804

ataatgaatt attttgcatt 20

<210> 1805

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1805

taaataatga attattttgc 20

<210> 1806

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1806

ctcatatatt aaataatgaa 20

<210> 1807

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1807

aactcatata ttaaataatg 20

<210> 1808

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1808

tagaggaagc aactcatata 20

<210> 1809

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1809

aatagaggaa gcaactcata 20

<210> 1810

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1810

caaatagagg aagcaactca 20

<210> 1811

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1811

accaaataga ggaagcaact 20

<210> 1812

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1812

aaaccaaata gaggaagcaa 20

<210> 1813

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1813

ggaaaccaaa tagaggaagc 20

<210> 1814

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1814

taaggaaacc aaatagagga 20

<210> 1815

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1815

tttaaggaaa ccaaatagag 20

<210> 1816

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1816

tgttttcttc tggaagcaga 20

<210> 1817

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1817

cttactttaa gtgaagttac 20

<210> 1818

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1818

ttttctactt actttaagtg 20

<210> 1819

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1819

acatgaaccc tctttatttt 20

<210> 1820

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1820

gaaaacataa acatgaaccc 20

<210> 1821

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1821

agatccacat tgaaaacata 20

<210> 1822

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1822

ttaaaagatc cacattgaaa 20

<210> 1823

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1823

gccttagaaa tatttttttt 20

<210> 1824

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1824

caaatggcat gccttagaaa 20

<210> 1825

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1825

tatttcaaat ggcatgcctt 20

<210> 1826

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1826

caaagtattt caaatggcat 20

<210> 1827

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1827

tgcaacaaag tatttcaaat 20

<210> 1828

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1828

tcaacaatgc aacaaagtat 20

<210> 1829

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1829

gaaaaaaaag tatttcaaca 20

<210> 1830

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1830

gattattttt cttggaaaaa 20

<210> 1831

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1831

gaaattttat tttctggaga 20

<210> 1832

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1832

aaattataat aggaaatttt 20

<210> 1833

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1833

ctgaatataa tgaatgaaat 20

<210> 1834

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1834

tacctgaata taatgaatga 20

<210> 1835

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1835

gactacctga atataatgaa 20

<210> 1836

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1836

atggactacc tgaatataat 20

<210> 1837

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1837

tccatggact acctgaatat 20

<210> 1838

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1838

accatcaagc ctcccaaaac 20

<210> 1839

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1839

ccttaccatc aagcctccca 20

<210> 1840

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1840

agtcccctta ccatcaagcc 20

<210> 1841

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1841

tgtagtcccc ttaccatcaa 20

<210> 1842

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1842

gaatgtagtc cccttaccat 20

<210> 1843

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1843

attgaatgta gtccccttac 20

<210> 1844

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1844

atgattgaat gtagtcccct 20

<210> 1845

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1845

gattagcaag tgaatgaatg 20

<210> 1846

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1846

gtagattagc aagtgaatga 20

<210> 1847

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1847

tttgtagatt agcaagtgaa 20

<210> 1848

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1848

atatttgtag attagcaagt 20

<210> 1849

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1849

ccataagagg ttctcagtaa 20

<210> 1850

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1850

ggtccataag aggttctcag 20

<210> 1851

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1851

cctggtccat aagaggttct 20

<210> 1852

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1852

taatacctgg tccataagag 20

<210> 1853

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1853

tcctaatacc tggtccataa 20

<210> 1854

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1854

ttttcctaat acctggtcca 20

<210> 1855

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1855

tacttttcct aatacctggt 20

<210> 1856

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1856

cgttactact tttcctaata 20

<210> 1857

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1857

aaggctgaga ctgcttctcg 20

<210> 1858

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1858

gataataaat tatatgaagg 20

<210> 1859

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1859

gtttgataat aaattatatg 20

<210> 1860

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1860

gtgtaattgt ttgataataa 20

<210> 1861

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1861

aatgtgtaat tgtttgataa 20

<210> 1862

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1862

gtaatttact aacaaatgtg 20

<210> 1863

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1863

agtgtaattt actaacaaat 20

<210> 1864

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1864

ataagtgtaa tttactaaca 20

<210> 1865

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1865

gtaataagtg taatttacta 20

<210> 1866

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1866

gttgtaataa gtgtaattta 20

<210> 1867

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1867

acagttgtaa taagtgtaat 20

<210> 1868

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1868

ataacagttg taataagtgt 20

<210> 1869

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1869

ttcaaataat aacagttgta 20

<210> 1870

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1870

ataattcaaa taataacagt 20

<210> 1871

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1871

aattgtgata aatataattc 20

<210> 1872

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1872

atgtaattgt gataaatata 20

<210> 1873

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1873

gacatgtaat tgtgataaat 20

<210> 1874

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1874

acagacatgt aattgtgata 20

<210> 1875

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1875

agaacagaca tgtaattgtg 20

<210> 1876

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1876

ttaagaacag acatgtaatt 20

<210> 1877

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1877

aagtatattt aagaacagac 20

<210> 1878

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1878

ttaaattgtg ataagtatat 20

<210> 1879

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1879

gaattaaatt gtgataagta 20

<210> 1880

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1880

gtggaattaa attgtgataa 20

<210> 1881

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1881

gccgtggaat taaattgtga 20

<210> 1882

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1882

taagccgtgg aattaaattg 20

<210> 1883

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1883

ttgtaagccg tggaattaaa 20

<210> 1884

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1884

tcattgtaag ccgtggaatt 20

<210> 1885

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1885

tgatcattgt aagccgtgga 20

<210> 1886

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1886

tatagttatg atcattgtaa 20

<210> 1887

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1887

aattatagtt atgatcattg 20

<210> 1888

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1888

ctttaataat tatagttatg 20

<210> 1889

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1889

tgtctttaat aattatagtt 20

<210> 1890

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1890

aattgtcttt aataattata 20

<210> 1891

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1891

tcaaaattgt ctttaataat 20

<210> 1892

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1892

atttaatcaa aattgtcttt 20

<210> 1893

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1893

taacatttaa tcaaaattgt 20

<210> 1894

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1894

acataacatt taatcaaaat 20

<210> 1895

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1895

atgacataac atttaatcaa 20

<210> 1896

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1896

tacttatgac ataacattta 20

<210> 1897

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1897

ttactactta tgacataaca 20

<210> 1898

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1898

aacagttact acttatgaca 20

<210> 1899

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1899

tgtaacagtt actacttatg 20

<210> 1900

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1900

cttatttgta acagttacta 20

<210> 1901

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1901

tttcacagct tatttgtaac 20

<210> 1902

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1902

tcttttcaca gcttatttgt 20

<210> 1903

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1903

ggttcttttc acagcttatt 20

<210> 1904

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1904

ctaggagtgg ttcttttcac 20

<210> 1905

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1905

atgctaggag tggttctttt 20

<210> 1906

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1906

ctaatgctag gagtggttct 20

<210> 1907

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1907

agagtgacta atgctaggag 20

<210> 1908

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1908

agagaataga gtgactaatg 20

<210> 1909

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1909

ttaatgagag aatagagtga 20

<210> 1910

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1910

ctgttggttt aattgtttat 20

<210> 1911

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1911

tgctgttggt ttaattgttt 20

<210> 1912

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1912

tatgctgttg gtttaattgt 20

<210> 1913

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1913

actatgctgt tggtttaatt 20

<210> 1914

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1914

tgactatgct gttggtttaa 20

<210> 1915

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1915

atttgactat gctgttggtt 20

<210> 1916

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1916

ttatttgact atgctgttgg 20

<210> 1917

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1917

ttttatttga ctatgctgtt 20

<210> 1918

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1918

tcttttattt gactatgctg 20

<210> 1919

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1919

tttcttttat ttgactatgc 20

<210> 1920

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1920

cttctgagct gattttctat 20

<210> 1921

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1921

tccttctgag ctgattttct 20

<210> 1922

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1922

agtccttctg agctgatttt 20

<210> 1923

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1923

ctagtccttc tgagctgatt 20

<210> 1924

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1924

tactagtcct tctgagctga 20

<210> 1925

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1925

aatactagtc cttctgagct 20

<210> 1926

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1926

tgaatactag tccttctgag 20

<210> 1927

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1927

cttgaatact agtccttctg 20

<210> 1928

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1928

ttcttgaata ctagtccttc 20

<210> 1929

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1929

tgggttcttg aatactagtc 20

<210> 1930

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1930

tgtgggttct tgaatactag 20

<210> 1931

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1931

tctgtgggtt cttgaatact 20

<210> 1932

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1932

tagagaaatt tctgtgggtt 20

<210> 1933

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1933

aagatagaga aatttctgtg 20

<210> 1934

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1934

ggaagataga gaaatttctg 20

<210> 1935

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1935

cttggcttgg aagatagaga 20

<210> 1936

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1936

ctcttggctt ggaagataga 20

<210> 1937

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1937

aagggagtag ttcttggtgc 20

<210> 1938

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1938

aaagggagta gttcttggtg 20

<210> 1939

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1939

gaaagggagt agttcttggt 20

<210> 1940

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1940

agaaagggag tagttcttgg 20

<210> 1941

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1941

aagaaaggga gtagttcttg 20

<210> 1942

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1942

gaagaaaggg agtagttctt 20

<210> 1943

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1943

tcaactgaag aaagggagta 20

<210> 1944

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1944

attcaactga agaaagggag 20

<210> 1945

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1945

cattcaactg aagaaaggga 20

<210> 1946

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1946

tcattcaact gaagaaaggg 20

<210> 1947

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1947

tttcattcaa ctgaagaaag 20

<210> 1948

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1948

atttcattca actgaagaaa 20

<210> 1949

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1949

tatttcattc aactgaagaa 20

<210> 1950

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1950

ttatttcatt caactgaaga 20

<210> 1951

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1951

cttatttcat tcaactgaag 20

<210> 1952

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1952

tcttatttca ttcaactgaa 20

<210> 1953

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1953

ttcttatttc attcaactga 20

<210> 1954

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1954

atttcttatt tcattcaact 20

<210> 1955

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1955

tacatttctt atttcattca 20

<210> 1956

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1956

ttcagcagga atgccatcat 20

<210> 1957

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1957

attcagcagg aatgccatca 20

<210> 1958

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1958

cattcagcag gaatgccatc 20

<210> 1959

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1959

acattcagca ggaatgccat 20

<210> 1960

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1960

tacattcagc aggaatgcca 20

<210> 1961

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1961

gtacattcag caggaatgcc 20

<210> 1962

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1962

tggtacattc agcaggaatg 20

<210> 1963

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1963

gtggtacatt cagcaggaat 20

<210> 1964

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1964

ggtggtacat tcagcaggaa 20

<210> 1965

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1965

tggtggtaca ttcagcagga 20

<210> 1966

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1966

atggtggtac attcagcagg 20

<210> 1967

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1967

aatggtggta cattcagcag 20

<210> 1968

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1968

aaatggtggt acattcagca 20

<210> 1969

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1969

taaatggtgg tacattcagc 20

<210> 1970

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1970

tataaatggt ggtacattca 20

<210> 1971

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1971

ttataaatgg tggtacattc 20

<210> 1972

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1972

gttataaatg gtggtacatt 20

<210> 1973

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1973

tgttataaat ggtggtacat 20

<210> 1974

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1974

ctgttataaa tggtggtaca 20

<210> 1975

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1975

tctgttataa atggtggtac 20

<210> 1976

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1976

cacctctgtt ataaatggtg 20

<210> 1977

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1977

tcacctctgt tataaatggt 20

<210> 1978

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1978

ttcacctctg ttataaatgg 20

<210> 1979

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1979

gttcacctct gttataaatg 20

<210> 1980

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1980

atgttcacct ctgttataaa 20

<210> 1981

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1981

tatgttcacc tctgttataa 20

<210> 1982

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1982

gtatgttcac ctctgttata 20

<210> 1983

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1983

tgtatgttca cctctgttat 20

<210> 1984

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1984

taatcgcaac tagatgtagc 20

<210> 1985

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1985

gtaatcgcaa ctagatgtag 20

<210> 1986

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1986

agtaatcgca actagatgta 20

<210> 1987

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1987

cagtaatcgc aactagatgt 20

<210> 1988

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1988

ccagtaatcg caactagatg 20

<210> 1989

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1989

gccagtaatc gcaactagat 20

<210> 1990

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1990

tgccagtaat cgcaactaga 20

<210> 1991

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1991

ttgccagtaa tcgcaactag 20

<210> 1992

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1992

attgccagta atcgcaacta 20

<210> 1993

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1993

cattgccagt aatcgcaact 20

<210> 1994

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1994

acattgccag taatcgcaac 20

<210> 1995

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1995

gacattgcca gtaatcgcaa 20

<210> 1996

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1996

gggacattgc cagtaatcgc 20

<210> 1997

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1997

ttgttttccg ggattgcatt 20

<210> 1998

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1998

tttgttttcc gggattgcat 20

<210> 1999

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 1999

aatctttgtt ttccgggatt 20

<210> 2000

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2000

aaatctttgt tttccgggat 20

<210> 2001

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2001

aaacaccaaa tctttgtttt 20

<210> 2002

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2002

aaaacaccaa atctttgttt 20

<210> 2003

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2003

gtagaaaaca ccaaatcttt 20

<210> 2004

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2004

agtagaaaac accaaatctt 20

<210> 2005

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2005

cccaagtaga aaacaccaaa 20

<210> 2006

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2006

tcccaagtag aaaacaccaa 20

<210> 2007

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2007

gtgatcccaa gtagaaaaca 20

<210> 2008

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2008

tgtgatccca agtagaaaac 20

<210> 2009

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2009

ttgtgatccc aagtagaaaa 20

<210> 2010

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2010

tttgtgatcc caagtagaaa 20

<210> 2011

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2011

cttttgcttt gtgatcccaa 20

<210> 2012

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2012

tgtccttttg ctttgtgatc 20

<210> 2013

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2013

gtgtcctttt gctttgtgat 20

<210> 2014

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2014

agtgtccttt tgctttgtga 20

<210> 2015

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2015

ttgaagtgtc cttttgcttt 20

<210> 2016

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2016

gttgaagtgt ccttttgctt 20

<210> 2017

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2017

agttgaagtg tccttttgct 20

<210> 2018

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2018

cagttgaagt gtccttttgc 20

<210> 2019

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2019

acagttgaag tgtccttttg 20

<210> 2020

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2020

gacagttgaa gtgtcctttt 20

<210> 2021

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2021

ggacagttga agtgtccttt 20

<210> 2022

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2022

tggacagttg aagtgtcctt 20

<210> 2023

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2023

ctggacagtt gaagtgtcct 20

<210> 2024

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2024

tctggacagt tgaagtgtcc 20

<210> 2025

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2025

ctctggacag ttgaagtgtc 20

<210> 2026

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2026

cctctggaca gttgaagtgt 20

<210> 2027

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2027

ccctctggac agttgaagtg 20

<210> 2028

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2028

accctctgga cagttgaagt 20

<210> 2029

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2029

aaccctctgg acagttgaag 20

<210> 2030

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2030

taaccctctg gacagttgaa 20

<210> 2031

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2031

ataaccctct ggacagttga 20

<210> 2032

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2032

aataaccctc tggacagttg 20

<210> 2033

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2033

gaataaccct ctggacagtt 20

<210> 2034

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2034

tgaataaccc tctggacagt 20

<210> 2035

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2035

ctgaataacc ctctggacag 20

<210> 2036

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2036

cctgaataac cctctggaca 20

<210> 2037

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2037

tcctgaataa ccctctggac 20

<210> 2038

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2038

ctcctgaata accctctgga 20

<210> 2039

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2039

cctcctgaat aaccctctgg 20

<210> 2040

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2040

gcctcctgaa taaccctctg 20

<210> 2041

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2041

agcctcctga ataaccctct 20

<210> 2042

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2042

cagcctcctg aataaccctc 20

<210> 2043

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2043

ccagcctcct gaataaccct 20

<210> 2044

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2044

accagcctcc tgaataaccc 20

<210> 2045

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2045

caccagcctc ctgaataacc 20

<210> 2046

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2046

ccaccagcct cctgaataac 20

<210> 2047

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2047

accaccagcc tcctgaataa 20

<210> 2048

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2048

caccaccagc ctcctgaata 20

<210> 2049

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2049

ccaccaccag cctcctgaat 20

<210> 2050

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2050

catgccacca ccagcctcct 20

<210> 2051

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2051

atcatgccac caccagcctc 20

<210> 2052

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2052

catcatgcca ccaccagcct 20

<210> 2053

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2053

acactcatca tgccaccacc 20

<210> 2054

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2054

ttctccacac tcatcatgcc 20

<210> 2055

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2055

ttttctccac actcatcatg 20

<210> 2056

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2056

gttttctcca cactcatcat 20

<210> 2057

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2057

atttaagaac tgtacaatta 20

<210> 2058

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2058

catttaagaa ctgtacaatt 20

<210> 2059

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2059

acatttaaga actgtacaat 20

<210> 2060

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2060

aacatttaag aactgtacaa 20

<210> 2061

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2061

caacatttaa gaactgtaca 20

<210> 2062

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2062

acaacattta agaactgtac 20

<210> 2063

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2063

tacaacattt aagaactgta 20

<210> 2064

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2064

ctacaacatt taagaactgt 20

<210> 2065

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2065

actacaacat ttaagaactg 20

<210> 2066

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2066

tactacaaca tttaagaact 20

<210> 2067

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2067

atactacaac atttaagaac 20

<210> 2068

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2068

aatactacaa catttaagaa 20

<210> 2069

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2069

taatactaca acatttaaga 20

<210> 2070

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2070

ttaatactac aacatttaag 20

<210> 2071

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2071

gaaattaata ctacaacatt 20

<210> 2072

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2072

ttttgaaatt aatactacaa 20

<210> 2073

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2073

gttttgaaat taatactaca 20

<210> 2074

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2074

agttttgaaa ttaatactac 20

<210> 2075

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2075

tagttttgaa attaatacta 20

<210> 2076

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2076

ttagttttga aattaatact 20

<210> 2077

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2077

cgatttttag ttttgaaatt 20

<210> 2078

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2078

acgattttta gttttgaaat 20

<210> 2079

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2079

gacgattttt agttttgaaa 20

<210> 2080

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2080

tgacgatttt tagttttgaa 20

<210> 2081

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2081

ctgacgattt ttagttttga 20

<210> 2082

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2082

tgctgacgat ttttagtttt 20

<210> 2083

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2083

gtgctgacga tttttagttt 20

<210> 2084

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2084

tgtgctgacg atttttagtt 20

<210> 2085

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2085

ctgtgctgac gatttttagt 20

<210> 2086

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2086

tctgtgctga cgatttttag 20

<210> 2087

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2087

ctctgtgctg acgattttta 20

<210> 2088

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2088

actctgtgct gacgattttt 20

<210> 2089

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2089

tactctgtgc tgacgatttt 20

<210> 2090

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2090

atactctgtg ctgacgattt 20

<210> 2091

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2091

catactctgt gctgacgatt 20

<210> 2092

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2092

acatactctg tgctgacgat 20

<210> 2093

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2093

tttttacaca tactctgtgc 20

<210> 2094

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2094

cagattttta cacatactct 20

<210> 2095

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2095

acagattttt acacatactc 20

<210> 2096

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2096

tacagatttt tacacatact 20

<210> 2097

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2097

ttacagattt ttacacatac 20

<210> 2098

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2098

tattacagat ttttacacat 20

<210> 2099

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2099

tgtattacag atttttacac 20

<210> 2100

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2100

cagtttaaaa atttgtatta 20

<210> 2101

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2101

catcagttta aaaatttgta 20

<210> 2102

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2102

aagcatcagt ttaaaaattt 20

<210> 2103

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2103

gaagcatcag tttaaaaatt 20

<210> 2104

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2104

tagcaaaatg aagcatcagt 20

<210> 2105

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2105

gtagcaaaat gaagcatcag 20

<210> 2106

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2106

tgtagcaaaa tgaagcatca 20

<210> 2107

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2107

ttgtagcaaa atgaagcatc 20

<210> 2108

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2108

tttgtagcaa aatgaagcat 20

<210> 2109

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2109

aacatttact ccaaattatt 20

<210> 2110

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2110

caaacattta ctccaaatta 20

<210> 2111

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2111

atcaaacatt tactccaaat 20

<210> 2112

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2112

catatcaaac atttactcca 20

<210> 2113

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2113

tcatatcaaa catttactcc 20

<210> 2114

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2114

atcatatcaa acatttactc 20

<210> 2115

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2115

taaataaatc atatcaaaca 20

<210> 2116

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2116

tcataaataa atcatatcaa 20

<210> 2117

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2117

ttcataaata aatcatatca 20

<210> 2118

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2118

tttcataaat aaatcatatc 20

<210> 2119

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2119

gtttcataaa taaatcatat 20

<210> 2120

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2120

ggtttcataa ataaatcata 20

<210> 2121

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2121

aggtttcata aataaatcat 20

<210> 2122

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2122

taggtttcat aaataaatca 20

<210> 2123

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2123

attaggtttc ataaataaat 20

<210> 2124

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2124

cattaggttt cataaataaa 20

<210> 2125

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2125

tcattaggtt tcataaataa 20

<210> 2126

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2126

ttcattaggt ttcataaata 20

<210> 2127

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2127

cttcattagg tttcataaat 20

<210> 2128

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2128

gcttcattag gtttcataaa 20

<210> 2129

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2129

ttctgcttca ttaggtttca 20

<210> 2130

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2130

taattctgct tcattaggtt 20

<210> 2131

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2131

tatgtagttc ttctcagttc 20

<210> 2132

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2132

tagtttatat gtagttcttc 20

<210> 2133

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2133

cttgtagttt atatgtagtt 20

<210> 2134

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2134

ttgacttgta gtttatatgt 20

<210> 2135

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2135

ttttgacttg tagtttatat 20

<210> 2136

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2136

atttttgact tgtagtttat 20

<210> 2137

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2137

tcttcatttt tgacttgtag 20

<210> 2138

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2138

tacctcttca tttttgactt 20

<210> 2139

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2139

attctttacc tcttcatttt 20

<210> 2140

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2140

caagtgacat attctttacc 20

<210> 2141

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2141

ttcaagtgac atattcttta 20

<210> 2142

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2142

ttgagttcaa gtgacatatt 20

<210> 2143

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2143

agttgagttc aagtgacata 20

<210> 2144

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2144

tttgagttga gttcaagtga 20

<210> 2145

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2145

tttcaagttt tgagttgagt 20

<210> 2146

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2146

gctttcaagt tttgagttga 20

<210> 2147

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2147

aggctttcaa gttttgagtt 20

<210> 2148

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2148

taggaggctt tcaagttttg 20

<210> 2149

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2149

ttctaggagg ctttcaagtt 20

<210> 2150

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2150

tcttctagga ggctttcaag 20

<210> 2151

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2151

gaattttttc ttctaggagg 20

<210> 2152

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2152

aagtagaatt ttttcttcta 20

<210> 2153

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2153

tgaagtagaa ttttttcttc 20

<210> 2154

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2154

gttgaagtag aattttttct 20

<210> 2155

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2155

tttgttgaag tagaattttt 20

<210> 2156

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2156

tttttgttga agtagaattt 20

<210> 2157

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2157

ttgctcttct aaatatttca 20

<210> 2158

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2158

agttgctctt ctaaatattt 20

<210> 2159

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2159

ttagttgctc ttctaaatat 20

<210> 2160

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2160

tagttagttg ctcttctaaa 20

<210> 2161

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2161

taagttagtt agttgctctt 20

<210> 2162

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2162

attaagttag ttagttgctc 20

<210> 2163

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2163

gaattaagtt agttagttgc 20

<210> 2164

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2164

ttgaattaag ttagttagtt 20

<210> 2165

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2165

ttttgaatta agttagttag 20

<210> 2166

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2166

tgattttgaa ttaagttagt 20

<210> 2167

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2167

ggttgatttt gaattaagtt 20

<210> 2168

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2168

agtttcaggt tgattttgaa 20

<210> 2169

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2169

ctggagtttc aggttgattt 20

<210> 2170

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2170

ggtgttctgg agtttcaggt 20

<210> 2171

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2171

tgggtgttct ggagtttcag 20

<210> 2172

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2172

tctgggtgtt ctggagtttc 20

<210> 2173

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2173

cttctgggtg ttctggagtt 20

<210> 2174

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2174

tacttctggg tgttctggag 20

<210> 2175

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2175

gttacttctg ggtgttctgg 20

<210> 2176

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2176

aagttacttc tgggtgttct 20

<210> 2177

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2177

gtgaagttac ttctgggtgt 20

<210> 2178

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2178

ttttaagtga agttacttct 20

<210> 2179

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2179

agttttaagt gaagttactt 20

<210> 2180

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2180

aaagttttaa gtgaagttac 20

<210> 2181

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2181

acaaaagttt taagtgaagt 20

<210> 2182

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2182

ctacaaaagt tttaagtgaa 20

<210> 2183

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2183

ttctacaaaa gttttaagtg 20

<210> 2184

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2184

tgtttttcta caaaagtttt 20

<210> 2185

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2185

cttgtttttc tacaaaagtt 20

<210> 2186

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2186

tattatcttg tttttctaca 20

<210> 2187

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2187

gatgctatta tcttgttttt 20

<210> 2188

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2188

tttgatgcta ttatcttgtt 20

<210> 2189

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2189

tctttgatgc tattatcttg 20

<210> 2190

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2190

gagaaggtct ttgatgctat 20

<210> 2191

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2191

gtctggagaa ggtctttgat 20

<210> 2192

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2192

cggtctggag aaggtctttg 20

<210> 2193

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2193

cacggtctgg agaaggtctt 20

<210> 2194

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2194

tccacggtct ggagaaggtc 20

<210> 2195

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2195

cttccacggt ctggagaagg 20

<210> 2196

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2196

gtcttccacg gtctggagaa 20

<210> 2197

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2197

tggtcttcca cggtctggag 20

<210> 2198

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2198

attggtcttc cacggtctgg 20

<210> 2199

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2199

atattggtct tccacggtct 20

<210> 2200

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2200

ttatattggt cttccacggt 20

<210> 2201

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2201

gtttatattg gtcttccacg 20

<210> 2202

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2202

ttgtttatat tggtcttcca 20

<210> 2203

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2203

aattgtttat attggtcttc 20

<210> 2204

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2204

ttaattgttt atattggtct 20

<210> 2205

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2205

gtttaattgt ttatattggt 20

<210> 2206

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2206

tggtttaatt gtttatattg 20

<210> 2207

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2207

gttggtttaa ttgtttatat 20

<210> 2208

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2208

tttgtgatcc atctattcga 20

<210> 2209

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2209

ttttgtgatc catctattcg 20

<210> 2210

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2210

attgaagttt tgtgatccat 20

<210> 2211

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2211

cattgaagtt ttgtgatcca 20

<210> 2212

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2212

tcattgaagt tttgtgatcc 20

<210> 2213

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2213

ttcattgaag ttttgtgatc 20

<210> 2214

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2214

tttcattgaa gttttgtgat 20

<210> 2215

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2215

atatttgtag ttctcccacg 20

<210> 2216

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2216

ccaaaaccat atttgtagtt 20

<210> 2217

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2217

cccaaaacca tatttgtagt 20

<210> 2218

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2218

tcccaaaacc atatttgtag 20

<210> 2219

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2219

ctcccaaaac catatttgta 20

<210> 2220

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2220

agcctcccaa aaccatattt 20

<210> 2221

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2221

caagcctccc aaaaccatat 20

<210> 2222

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2222

tcaagcctcc caaaaccata 20

<210> 2223

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2223

atcaagcctc ccaaaaccat 20

<210> 2224

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2224

catcaagcct cccaaaacca 20

<210> 2225

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2225

ccatcaagcc tcccaaaacc 20

<210> 2226

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2226

tccatcaagc ctcccaaaac 20

<210> 2227

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2227

ctccatcaag cctcccaaaa 20

<210> 2228

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2228

aaaattctcc atcaagcctc 20

<210> 2229

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2229

ccaaaattct ccatcaagcc 20

<210> 2230

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2230

accaaaattc tccatcaagc 20

<210> 2231

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2231

ccaaccaaaa ttctccatca 20

<210> 2232

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2232

cccaaccaaa attctccatc 20

<210> 2233

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2233

gcccaaccaa aattctccat 20

<210> 2234

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2234

ggcccaacca aaattctcca 20

<210> 2235

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2235

aggcccaacc aaaattctcc 20

<210> 2236

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2236

taggcccaac caaaattctc 20

<210> 2237

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2237

ctaggcccaa ccaaaattct 20

<210> 2238

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2238

tctaggccca accaaaattc 20

<210> 2239

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2239

ctctaggccc aaccaaaatt 20

<210> 2240

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2240

tctctaggcc caaccaaaat 20

<210> 2241

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2241

ttctctaggc ccaaccaaaa 20

<210> 2242

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2242

cttctctagg cccaaccaaa 20

<210> 2243

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2243

atatcttctc taggcccaac 20

<210> 2244

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2244

tatatcttct ctaggcccaa 20

<210> 2245

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2245

gtatatcttc tctaggccca 20

<210> 2246

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2246

atggagtata tcttctctag 20

<210> 2247

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2247

cactatggag tatatcttct 20

<210> 2248

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2248

tcactatgga gtatatcttc 20

<210> 2249

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2249

ttcactatgg agtatatctt 20

<210> 2250

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2250

ttgcttcact atggagtata 20

<210> 2251

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2251

attgcttcac tatggagtat 20

<210> 2252

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2252

ttagattgct tcactatgga 20

<210> 2253

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2253

attagattgc ttcactatgg 20

<210> 2254

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2254

aattagattg cttcactatg 20

<210> 2255

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2255

taattagatt gcttcactat 20

<210> 2256

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2256

ataattagat tgcttcacta 20

<210> 2257

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2257

cataattaga ttgcttcact 20

<210> 2258

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2258

acataattag attgcttcac 20

<210> 2259

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2259

aacataatta gattgcttca 20

<210> 2260

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2260

aaacataatt agattgcttc 20

<210> 2261

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2261

aaaacataat tagattgctt 20

<210> 2262

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2262

taaaacataa ttagattgct 20

<210> 2263

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2263

gtaaaacata attagattgc 20

<210> 2264

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2264

cgtaaaacat aattagattg 20

<210> 2265

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2265

ttccagtctt ccaactcaat 20

<210> 2266

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2266

ctttccagtc ttccaactca 20

<210> 2267

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2267

ttgttgtctt tccagtcttc 20

<210> 2268

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2268

ataatgtttg ttgtctttcc 20

<210> 2269

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2269

tataatgttt gttgtctttc 20

<210> 2270

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2270

atataatgtt tgttgtcttt 20

<210> 2271

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2271

tcaatataat gtttgttgtc 20

<210> 2272

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2272

atattcaata taatgtttgt 20

<210> 2273

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2273

aatattcaat ataatgtttg 20

<210> 2274

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2274

gaatattcaa tataatgttt 20

<210> 2275

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2275

agaatattca atataatgtt 20

<210> 2276

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2276

aagaatattc aatataatgt 20

<210> 2277

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2277

caagtaaaaa gaatattcaa 20

<210> 2278

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2278

ccaagtaaaa agaatattca 20

<210> 2279

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2279

cccaagtaaa aagaatattc 20

<210> 2280

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2280

tttcccaagt aaaaagaata 20

<210> 2281

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2281

atttcccaag taaaaagaat 20

<210> 2282

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2282

gatttcccaa gtaaaaagaa 20

<210> 2283

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2283

tgatttccca agtaaaaaga 20

<210> 2284

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2284

aatcgcaact agatgtagcg 20

<210> 2285

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2285

attctttaag gttatgtgat 20

<210> 2286

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2286

tattctttaa ggttatgtga 20

<210> 2287

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2287

acggtattct ttaaggttat 20

<210> 2288

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2288

aacggtattc tttaaggtta 20

<210> 2289

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2289

aaacggtatt ctttaaggtt 20

<210> 2290

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2290

taaacggtat tctttaaggt 20

<210> 2291

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2291

gtaaacggta ttctttaagg 20

<210> 2292

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2292

tgtaaacggt attctttaag 20

<210> 2293

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2293

atgtaaacgg tattctttaa 20

<210> 2294

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2294

aatgtaaacg gtattcttta 20

<210> 2295

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2295

aaatgtaaac ggtattcttt 20

<210> 2296

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2296

gaaatgtaaa cggtattctt 20

<210> 2297

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2297

agaaatgtaa acggtattct 20

<210> 2298

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2298

gagaaatgta aacggtattc 20

<210> 2299

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2299

tgagaaatgt aaacggtatt 20

<210> 2300

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2300

ttgagaaatg taaacggtat 20

<210> 2301

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2301

attgagaaat gtaaacggta 20

<210> 2302

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2302

gattgagaaa tgtaaacggt 20

<210> 2303

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2303

tgattgagaa atgtaaacgg 20

<210> 2304

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2304

ttgattgaga aatgtaaacg 20

<210> 2305

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2305

tttgattgag aaatgtaaac 20

<210> 2306

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2306

ttttgattga gaaatgtaaa 20

<210> 2307

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2307

attttgattg agaaatgtaa 20

<210> 2308

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2308

aattttgatt gagaaatgta 20

<210> 2309

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2309

gaattttgat tgagaaatgt 20

<210> 2310

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2310

agaattttga ttgagaaatg 20

<210> 2311

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2311

aagaattttg attgagaaat 20

<210> 2312

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2312

ataagaattt tgattgagaa 20

<210> 2313

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2313

tataagaatt ttgattgaga 20

<210> 2314

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2314

ttataagaat tttgattgag 20

<210> 2315

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2315

attataagaa ttttgattga 20

<210> 2316

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2316

tattataaga attttgattg 20

<210> 2317

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2317

gtattataag aattttgatt 20

<210> 2318

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2318

agtattataa gaattttgat 20

<210> 2319

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2319

tagtattata agaattttga 20

<210> 2320

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2320

aaaacaaata gtattataag 20

<210> 2321

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2321

taaaacaaat agtattataa 20

<210> 2322

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2322

attcccacat cacaaaattt 20

<210> 2323

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2323

gattcccaca tcacaaaatt 20

<210> 2324

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2324

tgattcccac atcacaaaat 20

<210> 2325

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2325

aaattgattc ccacatcaca 20

<210> 2326

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2326

aaaattgatt cccacatcac 20

<210> 2327

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2327

atctaaaatt gattcccaca 20

<210> 2328

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2328

gaccatctaa aattgattcc 20

<210> 2329

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2329

tgaccatcta aaattgattc 20

<210> 2330

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2330

gtgaccatct aaaattgatt 20

<210> 2331

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2331

tgtgaccatc taaaattgat 20

<210> 2332

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2332

ttgtgaccat ctaaaattga 20

<210> 2333

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2333

attgtgacca tctaaaattg 20

<210> 2334

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2334

gattgtgacc atctaaaatt 20

<210> 2335

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2335

agattgtgac catctaaaat 20

<210> 2336

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2336

tagattgtga ccatctaaaa 20

<210> 2337

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2337

ctagattgtg accatctaaa 20

<210> 2338

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2338

tctagattgt gaccatctaa 20

<210> 2339

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2339

atctagattg tgaccatcta 20

<210> 2340

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2340

aatctagatt gtgaccatct 20

<210> 2341

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2341

taatctagat tgtgaccatc 20

<210> 2342

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2342

ataatctaga ttgtgaccat 20

<210> 2343

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2343

tataatctag attgtgacca 20

<210> 2344

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2344

ttataatcta gattgtgacc 20

<210> 2345

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2345

tgattataat ctagattgtg 20

<210> 2346

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2346

ttgattataa tctagattgt 20

<210> 2347

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2347

attgattata atctagattg 20

<210> 2348

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2348

tattgattat aatctagatt 20

<210> 2349

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2349

ctattgatta taatctagat 20

<210> 2350

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2350

cctattgatt ataatctaga 20

<210> 2351

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2351

acctattgat tataatctag 20

<210> 2352

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2352

cacctattga ttataatcta 20

<210> 2353

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2353

tcacctattg attataatct 20

<210> 2354

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2354

ttcacctatt gattataatc 20

<210> 2355

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2355

gttcacctat tgattataat 20

<210> 2356

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2356

agttcaccta ttgattataa 20

<210> 2357

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2357

aagttcacct attgattata 20

<210> 2358

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2358

ataagttcac ctattgatta 20

<210> 2359

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2359

aataagttca cctattgatt 20

<210> 2360

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2360

taataagttc acctattgat 20

<210> 2361

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2361

ttaataagtt cacctattga 20

<210> 2362

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2362

tgagtattct cgacttacct 20

<210> 2363

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2363

aagtgagtat tctcgactta 20

<210> 2364

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2364

attaagtgag tattctcgac 20

<210> 2365

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2365

ccagaattaa gtgagtattc 20

<210> 2366

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2366

tgggttgctt tcttaccaga 20

<210> 2367

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2367

aaatgggttg ctttcttacc 20

<210> 2368

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2368

tacaaatggg ttgctttctt 20

<210> 2369

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2369

aagtacaaat gggttgcttt 20

<210> 2370

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2370

gtaaatacaa gtacaaatgg 20

<210> 2371

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2371

ttgctggtaa atacaagtac 20

<210> 2372

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2372

taaggattgc tggtaaatac 20

<210> 2373

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2373

ttttaaggat tgctggtaaa 20

<210> 2374

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2374

gaagcttcat tttaaggatt 20

<210> 2375

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2375

taggaagctt cattttaagg 20

<210> 2376

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2376

tagtaggaag cttcatttta 20

<210> 2377

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2377

ttgagttagt aggaagcttc 20

<210> 2378

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2378

attgctattg agttagtagg 20

<210> 2379

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2379

cttattgcta ttgagttagt 20

<210> 2380

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2380

attgtcttat tgctattgag 20

<210> 2381

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2381

actattgtct tattgctatt 20

<210> 2382

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2382

ttcactattg tcttattgct 20

<210> 2383

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2383

acattcacta ttgtcttatt 20

<210> 2384

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2384

taaacattca ctattgtctt 20

<210> 2385

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2385

cattaaacat tcactattgt 20

<210> 2386

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2386

gttttcatta aacattcact 20

<210> 2387

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2387

aaatactgtt ttcattaaac 20

<210> 2388

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2388

aaagtattta taaaatactg 20

<210> 2389

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2389

cctttttatt aaagtattta 20

<210> 2390

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2390

caatcctttt tattaaagta 20

<210> 2391

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2391

cttcatcaca atccttttta 20

<210> 2392

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2392

gttcttcatc acaatccttt 20

<210> 2393

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2393

attgttcttc atcacaatcc 20

<210> 2394

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2394

tagattgttc ttcatcacaa 20

<210> 2395

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2395

aaatagattg ttcttcatca 20

<210> 2396

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2396

aacaaatata aatagattgt 20

<210> 2397

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2397

caaataacaa atataaatag 20

<210> 2398

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2398

tggaattaaa aacaaataac 20

<210> 2399

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2399

ttattggaat taaaaacaaa 20

<210> 2400

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2400

tttttattgg aattaaaaac 20

<210> 2401

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2401

taataacttt tttctgtaat 20

<210> 2402

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2402

gttcttaata acttttttct 20

<210> 2403

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2403

aaaagcatgg ttcttaataa 20

<210> 2404

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2404

aaatttaaaa gcatggttct 20

<210> 2405

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2405

aggaataaat ttaaaaaatc 20

<210> 2406

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2406

agacaggaat aaatttaaaa 20

<210> 2407

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2407

aaaagacagg aataaattta 20

<210> 2408

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2408

ctttctttgt agaaaaagac 20

<210> 2409

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2409

atgctttctt tgtagaaaaa 20

<210> 2410

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2410

tttgcttaat gtatgctttc 20

<210> 2411

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2411

gtatttgctt aatgtatgct 20

<210> 2412

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2412

ttggtatttg cttaatgtat 20

<210> 2413

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2413

cctttggtat ttgcttaatg 20

<210> 2414

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2414

tggcctttgg tatttgctta 20

<210> 2415

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2415

taaacctggc ctttggtatt 20

<210> 2416

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2416

atgtaaacct ggcctttggt 20

<210> 2417

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2417

caaatgtaaa cctggccttt 20

<210> 2418

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2418

cttcaaatgt aaacctggcc 20

<210> 2419

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2419

tttcttcaaa tgtaaacctg 20

<210> 2420

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2420

tgtcactttc ttcaaatgta 20

<210> 2421

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2421

taatgtcact ttcttcaaat 20

<210> 2422

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2422

aataataatg tcactttctt 20

<210> 2423

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2423

gagtaataat aatgtcactt 20

<210> 2424

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2424

gacttgagta ataataatgt 20

<210> 2425

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2425

cctagagact tgagtaataa 20

<210> 2426

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2426

attcctagag acttgagtaa 20

<210> 2427

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2427

aagtattcct agagacttga 20

<210> 2428

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2428

tgtgttaagt attcctagag 20

<210> 2429

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2429

agagatgtgt taagtattcc 20

<210> 2430

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2430

gtcaagagat gtgttaagta 20

<210> 2431

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2431

acagtcaaga gatgtgttaa 20

<210> 2432

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2432

tatacagtca agagatgtgt 20

<210> 2433

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2433

ccatatacag tcaagagatg 20

<210> 2434

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2434

gtaagttgaa ctaactactg 20

<210> 2435

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2435

tgagtaagtt gaactaacta 20

<210> 2436

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2436

taatgagtaa gttgaactaa 20

<210> 2437

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2437

aggttaatct tcctaatacg 20

<210> 2438

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2438

ataaccaggt taatcttcct 20

<210> 2439

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2439

atgataacca ggttaatctt 20

<210> 2440

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2440

aacaatgata accaggttaa 20

<210> 2441

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2441

taaaacaatg ataaccaggt 20

<210> 2442

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2442

gtataaaaca atgataacca 20

<210> 2443

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2443

cgaatactca tatatatttc 20

<210> 2444

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2444

atacgaatac tcatatatat 20

<210> 2445

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2445

tttatacgaa tactcatata 20

<210> 2446

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2446

atatttatac gaatactcat 20

<210> 2447

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2447

gtattatatt tatacgaata 20

<210> 2448

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2448

aaaagtatta tatttatacg 20

<210> 2449

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2449

ggtaaaagta ttatatttat 20

<210> 2450

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2450

acaaggtaaa agtattatat 20

<210> 2451

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2451

taaacaaggt aaaagtatta 20

<210> 2452

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2452

acataaacaa ggtaaaagta 20

<210> 2453

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2453

ttgagtaaat acataaacaa 20

<210> 2454

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2454

gagaatattg agtaaataca 20

<210> 2455

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2455

aaggagaata ttgagtaaat 20

<210> 2456

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2456

gaaaaggaga atattgagta 20

<210> 2457

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2457

gaggaaaagg agaatattga 20

<210> 2458

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2458

ttagaggaaa aggagaatat 20

<210> 2459

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2459

attattttag aggaaaagga 20

<210> 2460

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2460

cagattattt tagaggaaaa 20

<210> 2461

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2461

cttcagatta ttttagagga 20

<210> 2462

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2462

tagtcacttc agattatttt 20

<210> 2463

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2463

taatagtcac ttcagattat 20

<210> 2464

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2464

tgataatagt cacttcagat 20

<210> 2465

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2465

tattgataat agtcacttca 20

<210> 2466

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2466

acttattgat aatagtcact 20

<210> 2467

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2467

taaacttatt gataatagtc 20

<210> 2468

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2468

tagtaaactt attgataata 20

<210> 2469

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2469

gcatagtaaa cttattgata 20

<210> 2470

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2470

ttggcatagt aaacttattg 20

<210> 2471

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2471

attttggcat agtaaactta 20

<210> 2472

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2472

tgaattttgg catagtaaac 20

<210> 2473

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2473

ttaatgaatt ttggcatagt 20

<210> 2474

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2474

caattaatga attttggcat 20

<210> 2475

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2475

aaaggcaatt aatgaatttt 20

<210> 2476

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2476

gtgaaaggca attaatgaat 20

<210> 2477

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2477

ttaagtgaaa ggcaattaat 20

<210> 2478

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2478

aagttaagtg aaaggcaatt 20

<210> 2479

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2479

ccaaaagtta agtgaaaggc 20

<210> 2480

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2480

gtcccaaaag ttaagtgaaa 20

<210> 2481

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2481

atggtcccaa aagttaagtg 20

<210> 2482

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2482

attatggtcc caaaagttaa 20

<210> 2483

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2483

tttattatgg tcccaaaagt 20

<210> 2484

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2484

ttattattta ttatggtccc 20

<210> 2485

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2485

atggcaatac attttattat 20

<210> 2486

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2486

gttatggcaa tacattttat 20

<210> 2487

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2487

taatgttatg gcaatacatt 20

<210> 2488

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2488

tattaatgtt atggcaatac 20

<210> 2489

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2489

gtttattaat gttatggcaa 20

<210> 2490

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2490

gtagtttatt aatgttatgg 20

<210> 2491

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2491

aaggtagttt attaatgtta 20

<210> 2492

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2492

tgtaaggtag tttattaatg 20

<210> 2493

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2493

ttttgtaagg tagtttatta 20

<210> 2494

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2494

tggttttgta aggtagttta 20

<210> 2495

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2495

tggtggtttt gtaaggtagt 20

<210> 2496

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2496

aattggtggt tttgtaaggt 20

<210> 2497

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2497

tttaattggt ggttttgtaa 20

<210> 2498

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2498

ttgattttaa ttggtggttt 20

<210> 2499

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2499

tgtttgattt taattggtgg 20

<210> 2500

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2500

atgtaaataa cacttttttg 20

<210> 2501

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2501

cagatgtaaa taacactttt 20

<210> 2502

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2502

tgacagatgt aaataacact 20

<210> 2503

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2503

atgttgacag atgtaaataa 20

<210> 2504

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2504

tttatgttga cagatgtaaa 20

<210> 2505

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2505

agatttatgt tgacagatgt 20

<210> 2506

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2506

agtagattta tgttgacaga 20

<210> 2507

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2507

tttagtagat ttatgttgac 20

<210> 2508

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2508

atttttagta gatttatgtt 20

<210> 2509

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2509

catgtatttt tagtagattt 20

<210> 2510

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2510

gaaatcatgt atttttagta 20

<210> 2511

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2511

attgtatttg atggatatct 20

<210> 2512

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2512

gatacattgt atttgatgga 20

<210> 2513

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2513

taggttgata cattgtattt 20

<210> 2514

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2514

cagtttaggt tgatacattg 20

<210> 2515

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2515

gcatccagtt taggttgata 20

<210> 2516

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2516

ccccagcatc cagtttaggt 20

<210> 2517

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2517

aagaacccca gcatccagtt 20

<210> 2518

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2518

gtgtaaaaag aaccccagca 20

<210> 2519

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2519

atagggtgta aaaagaaccc 20

<210> 2520

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2520

cttttatagg gtgtaaaaag 20

<210> 2521

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2521

tatgtctttt atagggtgta 20

<210> 2522

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2522

ttaggtatgt cttttatagg 20

<210> 2523

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2523

ttgtcttagg tatgtctttt 20

<210> 2524

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2524

ctctgattgt cttaggtatg 20

<210> 2525

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2525

tatttctctg attgtcttag 20

<210> 2526

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2526

tcaagtccat atttgtattt 20

<210> 2527

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2527

aataatcaag tccatatttg 20

<210> 2528

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2528

ttatctaata atcaagtcca 20

<210> 2529

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2529

ctatattatc taataatcaa 20

<210> 2530

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2530

taaaccttct atattatcta 20

<210> 2531

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2531

aattaataaa ccttctatat 20

<210> 2532

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2532

taagtacagg ttggacactg 20

<210> 2533

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2533

gttattaagt acaggttgga 20

<210> 2534

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2534

tgtgagttat taagtacagg 20

<210> 2535

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2535

aaatctgtga gttattaagt 20

<210> 2536

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2536

gttttaaaaa tctgtgagtt 20

<210> 2537

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2537

caaaattctc ctgaaaagaa 20

<210> 2538

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2538

cccaaccaaa attctcctga 20

<210> 2539

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2539

acctgaataa ccctctggac 20

<210> 2540

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2540

aagatacctg aataaccctc 20

<210> 2541

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2541

agaaaaagat acctgaataa 20

<210> 2542

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2542

tggtatcaga aaaagatacc 20

<210> 2543

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2543

agtattggta tcagaaaaag 20

<210> 2544

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2544

aataaagtat tggtatcaga 20

<210> 2545

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2545

atgaaaataa agtattggta 20

<210> 2546

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2546

agatactttg aagatatgaa 20

<210> 2547

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2547

tgggaagata ctttgaagat 20

<210> 2548

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2548

ctaataatgt gggaagatac 20

<210> 2549

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2549

cattgcagat aatagctaat 20

<210> 2550

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2550

aagttgtcat tgcagataat 20

<210> 2551

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2551

ttttaaaagt tgtcattgca 20

<210> 2552

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2552

attcggattt ttaaaagttg 20

<210> 2553

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2553

ttatttggga ttcggatttt 20

<210> 2554

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2554

ttatagttaa gaggttttcg 20

<210> 2555

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2555

tttcattata gttaagaggt 20

<210> 2556

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2556

gaacactttc attatagtta 20

<210> 2557

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2557

gaactagaat gaacactttc 20

<210> 2558

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2558

tgattgaact agaatgaaca 20

<210> 2559

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2559

atacctgatt gaactagaat 20

<210> 2560

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2560

gtaaaatacc tgattgaact 20

<210> 2561

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2561

tagaggtaaa atacctgatt 20

<210> 2562

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2562

aagattagag gtaaaatacc 20

<210> 2563

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2563

tgaggaagat tagaggtaaa 20

<210> 2564

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2564

gaaaatctga ggaagattag 20

<210> 2565

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2565

aaatagaaaa tctgaggaag 20

<210> 2566

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2566

atctatacac taccaaaaaa 20

<210> 2567

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2567

aaataatcta tacactacca 20

<210> 2568

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2568

aaataatctg tataaataat 20

<210> 2569

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2569

cccaatttta aataatctgt 20

<210> 2570

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2570

taagtcccaa ttttaaataa 20

<210> 2571

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2571

tctgtataag tcccaatttt 20

<210> 2572

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2572

aataatctgt ataagtccca 20

<210> 2573

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2573

agttttaaat aatctgtata 20

<210> 2574

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2574

atcccagttt taaataatct 20

<210> 2575

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2575

catgtatccc agttttaaat 20

<210> 2576

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2576

tagatgcatg tatcccagtt 20

<210> 2577

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2577

tgttttagat gcatgtatcc 20

<210> 2578

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2578

tacagtgttt tagatgcatg 20

<210> 2579

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2579

aatattacag tgttttagat 20

<210> 2580

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2580

cttataaata ttacagtgtt 20

<210> 2581

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2581

cttcctttct tataaatatt 20

<210> 2582

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2582

tttatcttcc tttcttataa 20

<210> 2583

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2583

ttccccgtaa gtttatcttc 20

<210> 2584

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2584

tgtatttccc cgtaagttta 20

<210> 2585

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2585

gttactgtat ttccccgtaa 20

<210> 2586

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2586

tgttttcttc tggaagcaga 20

<210> 2587

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2587

cagacctaga cttcttaact 20

<210> 2588

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2588

agcagaccta gacttcttaa 20

<210> 2589

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2589

ttttcttctg gaagcagacc 20

<210> 2590

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2590

aaacatatat acatgcttgt 20

<210> 2591

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2591

ttaaacatat atacatgctt 20

<210> 2592

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2592

gtttattgaa ttttaaacat 20

<210> 2593

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2593

ttgtttattg aattttaaac 20

<210> 2594

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2594

ctttgtttat tgaattttaa 20

<210> 2595

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2595

gtctttgttt attgaatttt 20

<210> 2596

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2596

gggtctttgt ttattgaatt 20

<210> 2597

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2597

ctgggtcttt gtttattgaa 20

<210> 2598

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2598

gactgggtct ttgtttattg 20

<210> 2599

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2599

tttctataat ttagggactg 20

<210> 2600

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2600

aatttctata atttagggac 20

<210> 2601

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2601

taaatttcta taatttaggg 20

<210> 2602

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2602

caagaataat ttaaatttct 20

<210> 2603

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2603

gataaacatg caagaataat 20

<210> 2604

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2604

tcgataaaca tgcaagaata 20

<210> 2605

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2605

tgtcgataaa catgcaagaa 20

<210> 2606

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2606

gatgtcgata aacatgcaag 20

<210> 2607

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2607

gtgatgtcga taaacatgca 20

<210> 2608

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2608

ttgtgatgtc gataaacatg 20

<210> 2609

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2609

tgttgtgatg tcgataaaca 20

<210> 2610

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2610

tctgttgtga tgtcgataaa 20

<210> 2611

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2611

gatctgttgt gatgtcgata 20

<210> 2612

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2612

gggatctgtt gtgatgtcga 20

<210> 2613

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2613

tagggatctg ttgtgatgtc 20

<210> 2614

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2614

tttagggatc tgttgtgatg 20

<210> 2615

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2615

gatttaggga tctgttgtga 20

<210> 2616

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2616

atctaatctt tagggattta 20

<210> 2617

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2617

tttgtatcta atctttaggg 20

<210> 2618

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2618

aatttgtatc taatctttag 20

<210> 2619

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2619

gtggtaaaaa atttgtatct 20

<210> 2620

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2620

ctgtggtaaa aaatttgtat 20

<210> 2621

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2621

tactgtggta aaaaatttgt 20

<210> 2622

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2622

gatactgtgg taaaaaattt 20

<210> 2623

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2623

agtgatactg tggtaaaaaa 20

<210> 2624

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2624

caagtgatac tgtggtaaaa 20

<210> 2625

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2625

gacaagtgat actgtggtaa 20

<210> 2626

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2626

ctgacaagtg atactgtggt 20

<210> 2627

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2627

ttctgacaag tgatactgtg 20

<210> 2628

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2628

aattctgaca agtgatactg 20

<210> 2629

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2629

ataaattctg acaagtgata 20

<210> 2630

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2630

ctggcagttt taaaaaatca 20

<210> 2631

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2631

ttcttactgg cagttttaaa 20

<210> 2632

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2632

atttcttact ggcagtttta 20

<210> 2633

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2633

aaatttctta ctggcagttt 20

<210> 2634

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2634

tttaaaattt cttactggca 20

<210> 2635

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2635

ttaatttaaa atttcttact 20

<210> 2636

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2636

caaatgggtt taatttaaaa 20

<210> 2637

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2637

aacaaatggg tttaatttaa 20

<210> 2638

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2638

ttaacaaatg ggtttaattt 20

<210> 2639

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2639

ctttaacaaa tgggtttaat 20

<210> 2640

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2640

tcctttaaca aatgggttta 20

<210> 2641

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2641

ctatatcctt taacaaatgg 20

<210> 2642

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2642

gggcactata tcctttaaca 20

<210> 2643

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2643

ttgggcacta tatcctttaa 20

<210> 2644

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2644

tataacttgg gcactatatc 20

<210> 2645

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2645

catataactt gggcactata 20

<210> 2646

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2646

tcaccatata acttgggcac 20

<210> 2647

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2647

taggtcacca tataacttgg 20

<210> 2648

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2648

ggtaggtcac catataactt 20

<210> 2649

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2649

aaggtaggtc accatataac 20

<210> 2650

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2650

caaaggtagg tcaccatata 20

<210> 2651

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2651

gtattgacaa aggtaggtca 20

<210> 2652

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2652

aagtattgac aaaggtaggt 20

<210> 2653

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2653

ctaagtattg acaaaggtag 20

<210> 2654

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2654

tgctaagtat tgacaaaggt 20

<210> 2655

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2655

aatgctaagt attgacaaag 20

<210> 2656

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2656

cataatgcta agtattgaca 20

<210> 2657

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2657

tacataatgc taagtattga 20

<210> 2658

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2658

aatacataat gctaagtatt 20

<210> 2659

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2659

gaaatacata atgctaagta 20

<210> 2660

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2660

tttgaaatac ataatgctaa 20

<210> 2661

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2661

ggataatttg aaatacataa 20

<210> 2662

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2662

ttggataatt tgaaatacat 20

<210> 2663

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2663

tattggataa tttgaaatac 20

<210> 2664

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2664

atccagttaa agcttgtaaa 20

<210> 2665

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2665

tcatgatcca gttaaagctt 20

<210> 2666

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2666

tttactcatg atccagttaa 20

<210> 2667

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2667

gataatttta ctcatgatcc 20

<210> 2668

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2668

gatgtgataa ttttactcat 20

<210> 2669

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2669

atgctgatgt gataatttta 20

<210> 2670

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2670

cagttatgct gatgtgataa 20

<210> 2671

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2671

tttaacagtt atgctgatgt 20

<210> 2672

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2672

gcaattttaa cagttatgct 20

<210> 2673

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2673

agagcctgca attttaacag 20

<210> 2674

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2674

gcttcagagc ctgcaatttt 20

<210> 2675

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2675

tattagcttc agagcctgca 20

<210> 2676

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2676

tagtttatta gcttcagagc 20

<210> 2677

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2677

gcaggtagtt tattagcttc 20

<210> 2678

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2678

taaatgcagg tagtttatta 20

<210> 2679

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2679

atggtttaaa tgcaggtagt 20

<210> 2680

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2680

gagccatggt ttaaatgcag 20

<210> 2681

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2681

ttttagagcc atggtttaaa 20

<210> 2682

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2682

caaagtttta gagccatggt 20

<210> 2683

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2683

tcacacaaag ttttagagcc 20

<210> 2684

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2684

caaggtcaca caaagtttta 20

<210> 2685

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2685

gggtgaagta atttattcaa 20

<210> 2686

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2686

gtgaggaaac tgagagataa 20

<210> 2687

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2687

tgtagtatat gtgaggaaac 20

<210> 2688

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2688

atctttgtag tatatgtgag 20

<210> 2689

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2689

ttattatctt tgtagtatat 20

<210> 2690

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2690

ttctgttatt atctttgtag 20

<210> 2691

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2691

ataagttctg ttattatctt 20

<210> 2692

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2692

atcctataag ttctgttatt 20

<210> 2693

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2693

caataatcct ataagttctg 20

<210> 2694

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2694

taagatgaca ttggctgcta 20

<210> 2695

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2695

tttagtaaga tgacattggc 20

<210> 2696

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2696

ttgaatttta gtaagatgac 20

<210> 2697

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2697

ctaatttgaa ttttagtaag 20

<210> 2698

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2698

catgatctaa tttgaatttt 20

<210> 2699

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2699

caaagagaaa catgatctaa 20

<210> 2700

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2700

gttttgagca aagagaaaca 20

<210> 2701

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2701

gtgtggtttt gagcaaagag 20

<210> 2702

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2702

agctattgtg tggttttgag 20

<210> 2703

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2703

tgaaatggaa agctattgtg 20

<210> 2704

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2704

tatgagtgaa atggaaagct 20

<210> 2705

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2705

aaagagccaa tatgagtgaa 20

<210> 2706

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2706

ttggtctaaa gagccaatat 20

<210> 2707

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2707

ggtaatcttg gtctaaagag 20

<210> 2708

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2708

gtgagatgac gaagggttgg 20

<210> 2709

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2709

agtcagtgag atgacgaagg 20

<210> 2710

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2710

ggtgaagtca gtgagatgac 20

<210> 2711

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2711

gtagaggagg tgaagtcagt 20

<210> 2712

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2712

aactagagta gaggaggtga 20

<210> 2713

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2713

agaataacta gagtagagga 20

<210> 2714

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2714

cggtcagaat aactagagta 20

<210> 2715

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2715

taaagcggtc agaataacta 20

<210> 2716

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2716

actggtaaag cggtcagaat 20

<210> 2717

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2717

tgaatactgg taaagcggtc 20

<210> 2718

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2718

tgtgtttgaa tactggtaaa 20

<210> 2719

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2719

agtatgtttg atgtgtttga 20

<210> 2720

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2720

gtggcagtat gtttgatgtg 20

<210> 2721

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2721

ttgaggtggc agtatgtttg 20

<210> 2722

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2722

aggctttgag gtggcagtat 20

<210> 2723

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2723

ggcaaaggct ttgaggtggc 20

<210> 2724

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2724

aacaagggca aaggctttga 20

<210> 2725

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2725

tagaggaaac aacaagggca 20

<210> 2726

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2726

ccagttagag gaaacaacaa 20

<210> 2727

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2727

gataccaggg cagaagagcg 20

<210> 2728

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2728

aaatcagaga gtgggccacg 20

<210> 2729

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2729

cctaagggaa atcagagagt 20

<210> 2730

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2730

acgaccctaa gggaaatcag 20

<210> 2731

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2731

tgataacgac cctaagggaa 20

<210> 2732

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2732

ttttgtttga taacgaccct 20

<210> 2733

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2733

gtcttcattg ggaatttttt 20

<210> 2734

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2734

tgtaagtctt cattgggaat 20

<210> 2735

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2735

gaccttgtaa gtcttcattg 20

<210> 2736

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2736

taagtgacct tgtaagtctt 20

<210> 2737

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2737

ttggttaagt gaccttgtaa 20

<210> 2738

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2738

tgatttttgg ttaagtgacc 20

<210> 2739

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2739

ggttgtgatt tttggttaag 20

<210> 2740

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2740

caggcggttg tgatttttgg 20

<210> 2741

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2741

gggaccaggc ggttgtgatt 20

<210> 2742

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2742

ctaaggaagt agaagttttc 20

<210> 2743

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2743

agtagctaag gaagtagaag 20

<210> 2744

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2744

caggagaaaa gtagctaagg 20

<210> 2745

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2745

gtgtgcagga gaaaagtagc 20

<210> 2746

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2746

taaaggtgag tgtgcaggag 20

<210> 2747

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2747

atgttaaata aaggtgagtg 20

<210> 2748

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2748

atgttatgtt aaataaaggt 20

<210> 2749

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2749

aatttatgtt atgttaaata 20

<210> 2750

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2750

taactaaaat ttatgttatg 20

<210> 2751

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2751

gataaataac taaaatttat 20

<210> 2752

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2752

tttagtgcag gaatagaaga 20

<210> 2753

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2753

aatccctgta ttcacagagc 20

<210> 2754

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2754

gaaaaaatcc ctgtattcac 20

<210> 2755

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2755

taatggaaaa aatccctgta 20

<210> 2756

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2756

aaatatgaag ataatggaaa 20

<210> 2757

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2757

ataatggaaa atatgaagat 20

<210> 2758

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2758

tatacaaata atggaaaata 20

<210> 2759

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2759

ttctggagta tatacaaata 20

<210> 2760

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2760

attctatatt ctggagtata 20

<210> 2761

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2761

ccatacagta ttctatattc 20

<210> 2762

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2762

ctgtgtgcca tacagtattc 20

<210> 2763

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2763

gcctactgtg tgccatacag 20

<210> 2764

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2764

agaaatgcct actgtgtgcc 20

<210> 2765

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2765

tcaacagaaa tgcctactgt 20

<210> 2766

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2766

attaattcaa cagaaatgcc 20

<210> 2767

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2767

gacattacat ttattaattc 20

<210> 2768

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2768

gtgaatatga cattacattt 20

<210> 2769

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2769

cttctgtgtg aatatgacat 20

<210> 2770

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2770

acacgcttct gtgtgaatat 20

<210> 2771

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2771

atagcacacg cttctgtgtg 20

<210> 2772

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2772

taatcatagc acacgcttct 20

<210> 2773

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2773

aataataatc atagcacacg 20

<210> 2774

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2774

ccaagtaata ataatcatag 20

<210> 2775

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2775

ctagtaatcc aagtaataat 20

<210> 2776

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2776

tatttctagt aatccaagta 20

<210> 2777

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2777

cacactattt ctagtaatcc 20

<210> 2778

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2778

ttatgaggca cactatttct 20

<210> 2779

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2779

tttaattatg aggcacacta 20

<210> 2780

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2780

gttgaccttt aattatgagg 20

<210> 2781

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2781

ttacattgtt gaatgttgac 20

<210> 2782

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2782

attaattaca ttgttgaatg 20

<210> 2783

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2783

tgtagattaa ttacattgtt 20

<210> 2784

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2784

tacattgtag attaattaca 20

<210> 2785

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2785

agatgtttac attgtagatt 20

<210> 2786

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2786

ttcaccagat gtttacattg 20

<210> 2787

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2787

gtcacttcac cagatgttta 20

<210> 2788

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2788

cctctgtcac ttcaccagat 20

<210> 2789

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2789

gcttccctct gtcacttcac 20

<210> 2790

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2790

caagtgcttc cctctgtcac 20

<210> 2791

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2791

gcttttttct aaacaagtgc 20

<210> 2792

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2792

acatagcttt tttctaaaca 20

<210> 2793

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2793

ttctgacata gcttttttct 20

<210> 2794

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2794

atggattctg acatagcttt 20

<210> 2795

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2795

aatacatgga ttctgacata 20

<210> 2796

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2796

attagaatac atggattctg 20

<210> 2797

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2797

ttgtactgca tattagaata 20

<210> 2798

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2798

aactattgta ctgcatatta 20

<210> 2799

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2799

ttttaaacta ttgtactgca 20

<210> 2800

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2800

tgagagtatt attaatattt 20

<210> 2801

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2801

gctgtttgag agtattatta 20

<210> 2802

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2802

gaatagctgt ttgagagtat 20

<210> 2803

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2803

cctcttgaat agctgtttga 20

<210> 2804

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2804

tgaatcctct tgaatagctg 20

<210> 2805

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2805

ttttttgaat cctcttgaat 20

<210> 2806

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2806

ttatgttttt tgaatcctct 20

<210> 2807

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2807

gtttatatta tgttttttga 20

<210> 2808

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2808

tctgagttta tattatgttt 20

<210> 2809

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2809

cagtttctct gagtttatat 20

<210> 2810

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2810

gtttaccagt ttctctgagt 20

<210> 2811

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2811

attttgttta ccagtttctc 20

<210> 2812

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2812

aaatgatttt gtttaccagt 20

<210> 2813

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2813

ctcttgaaaa tgattttgtt 20

<210> 2814

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2814

tatatctctt gaaaatgatt 20

<210> 2815

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2815

caggttggca agtttgtttg 20

<210> 2816

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2816

gttggcaggt tggcaagttt 20

<210> 2817

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2817

atatctgtag atgttggcag 20

<210> 2818

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2818

taaacatatc tgtagatgtt 20

<210> 2819

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2819

acctgtaaac atatctgtag 20

<210> 2820

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2820

ttttgacctg taaacatatc 20

<210> 2821

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2821

ataatttttg acctgtaaac 20

<210> 2822

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2822

taatttgata atttttgacc 20

<210> 2823

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2823

ttcttgataa tttgataatt 20

<210> 2824

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2824

accaggcttt cttgataatt 20

<210> 2825

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2825

tttgaaccag gctttcttga 20

<210> 2826

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2826

agacataata cataatttga 20

<210> 2827

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2827

ctgtgataaa gacataatac 20

<210> 2828

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2828

cagacctgtg ataaagacat 20

<210> 2829

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2829

atcttcagac ctgtgataaa 20

<210> 2830

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2830

tactgatctt cagacctgtg 20

<210> 2831

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2831

ttaataattt tcagttttag 20

<210> 2832

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2832

taagtttaat aattttcagt 20

<210> 2833

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2833

ttcagatttt aagtttaata 20

<210> 2834

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2834

tatatttgat attctgttca 20

<210> 2835

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2835

atattgtaat gtattctttt 20

<210> 2836

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2836

ttagaatatt gtaatgtatt 20

<210> 2837

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2837

tttgcttaga atattgtaat 20

<210> 2838

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2838

actgctttgc ttagaatatt 20

<210> 2839

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2839

aagtagagac tgctttgctt 20

<210> 2840

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2840

gcaaggccaa aagtagagac 20

<210> 2841

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2841

acagagcaag gccaaaagta 20

<210> 2842

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2842

ggaaaacaga gcaaggccaa 20

<210> 2843

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2843

tggtcggaaa acagagcaag 20

<210> 2844

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2844

gacattggtc ggaaaacaga 20

<210> 2845

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2845

aagcagacat tggtcggaaa 20

<210> 2846

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2846

caaggcaaaa aagcagacat 20

<210> 2847

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2847

ataaagcaag gcaaaaaagc 20

<210> 2848

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2848

cattatttaa taagataaaa 20

<210> 2849

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2849

aaatatttaa tcagggacat 20

<210> 2850

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2850

tgttctcaaa atatttaatc 20

<210> 2851

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2851

gattacctgt tctcaaaata 20

<210> 2852

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2852

gattgtacag attacctgtt 20

<210> 2853

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2853

attcagattg tacagattac 20

<210> 2854

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2854

aaacagtgtt attcagattg 20

<210> 2855

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2855

tagataaaca gtgttattca 20

<210> 2856

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2856

atatttagat aaacagtgtt 20

<210> 2857

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2857

gtttgatatt tagataaaca 20

<210> 2858

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2858

aacggtgttt gatatttaga 20

<210> 2859

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2859

gttataacgg tgtttgatat 20

<210> 2860

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2860

ataatgttat aacggtgttt 20

<210> 2861

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2861

agttcataat gttataacgg 20

<210> 2862

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2862

ctttcagttc ataatgttat 20

<210> 2863

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2863

agtacagttt gtctttcagt 20

<210> 2864

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2864

tcagaagtac agtttgtctt 20

<210> 2865

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2865

ggatgtcaga agtacagttt 20

<210> 2866

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2866

gagtaaggat gtcagaagta 20

<210> 2867

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2867

gaaatctgag taaggatgtc 20

<210> 2868

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2868

tactgaatat acaattaggg 20

<210> 2869

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2869

aatgatactg aatatacaat 20

<210> 2870

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2870

gaatataaat ctgtttttta 20

<210> 2871

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2871

taaaagaata taaatctgtt 20

<210> 2872

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2872

gctgataaaa gaatataaat 20

<210> 2873

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2873

ccttctgagc tgataaaaga 20

<210> 2874

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2874

ctagtccttc tgagctgata 20

<210> 2875

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2875

ttaccatcat gttttacatt 20

<210> 2876

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2876

caaagtgtct taccatcatg 20

<210> 2877

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2877

aaacccacca aagtgtctta 20

<210> 2878

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2878

agaaggaaac ccaccaaagt 20

<210> 2879

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2879

aataatagct tcaagaagga 20

<210> 2880

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2880

aatttgataa taatagcttc 20

<210> 2881

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2881

tagggaattt gataataata 20

<210> 2882

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2882

aagaataggg aatttgataa 20

<210> 2883

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2883

gtcctaagaa tagggaattt 20

<210> 2884

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2884

tagaacaagt cctaagaata 20

<210> 2885

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2885

ttagtctaga acaagtccta 20

<210> 2886

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2886

atcttttagt ctagaacaag 20

<210> 2887

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2887

taactatctt ttagtctaga 20

<210> 2888

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2888

atctcttaac tatcttttag 20

<210> 2889

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2889

tggatatctc ttaactatct 20

<210> 2890

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2890

tttgatggat atctcttaac 20

<210> 2891

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2891

ttaattctgc ttcattaggt 20

<210> 2892

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2892

tttaattctg cttcattagg 20

<210> 2893

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2893

cagtatttaa ttctgcttca 20

<210> 2894

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2894

acagtattta attctgcttc 20

<210> 2895

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2895

tacagtattt aattctgctt 20

<210> 2896

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2896

atacagtatt taattctgct 20

<210> 2897

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2897

aatacagtat ttaattctgc 20

<210> 2898

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2898

taatacagta tttaattctg 20

<210> 2899

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2899

tttaatacag tatttaattc 20

<210> 2900

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2900

ttttaataca gtatttaatt 20

<210> 2901

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2901

ttattttaat acagtattta 20

<210> 2902

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2902

aacttatttt aatacagtat 20

<210> 2903

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2903

gaacttattt taatacagta 20

<210> 2904

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2904

cgaacttatt ttaatacagt 20

<210> 2905

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2905

gcgaacttat tttaatacag 20

<210> 2906

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2906

agcgaactta ttttaataca 20

<210> 2907

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2907

cagcgaactt attttaatac 20

<210> 2908

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2908

acagcgaact tattttaata 20

<210> 2909

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2909

gacagcgaac ttattttaat 20

<210> 2910

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2910

agacagcgaa cttattttaa 20

<210> 2911

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2911

aaagacagcg aacttatttt 20

<210> 2912

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2912

taaagacagc gaacttattt 20

<210> 2913

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2913

gtttaaagac agcgaactta 20

<210> 2914

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2914

tgtttaaaga cagcgaactt 20

<210> 2915

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2915

ttgtttaaag acagcgaact 20

<210> 2916

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2916

tttgtttaaa gacagcgaac 20

<210> 2917

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2917

atttgtttaa agacagcgaa 20

<210> 2918

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2918

catttgttta aagacagcga 20

<210> 2919

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2919

tccatttgtt taaagacagc 20

<210> 2920

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2920

ctccatttgt ttaaagacag 20

<210> 2921

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2921

atctccattt gtttaaagac 20

<210> 2922

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2922

catctccatt tgtttaaaga 20

<210> 2923

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2923

tcatctccat ttgtttaaag 20

<210> 2924

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2924

gtcatctcca tttgtttaaa 20

<210> 2925

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2925

tagtcatctc catttgttta 20

<210> 2926

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2926

gtagtcatct ccatttgttt 20

<210> 2927

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2927

agtagtcatc tccatttgtt 20

<210> 2928

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2928

tagtagtcat ctccatttgt 20

<210> 2929

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2929

ttagtagtca tctccatttg 20

<210> 2930

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2930

cttagtagtc atctccattt 20

<210> 2931

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2931

gtgacttagt agtcatctcc 20

<210> 2932

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2932

tgtgacttag tagtcatctc 20

<210> 2933

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2933

atgtgactta gtagtcatct 20

<210> 2934

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2934

aatgtgactt agtagtcatc 20

<210> 2935

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2935

caatgtgact tagtagtcat 20

<210> 2936

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2936

tcaatgtgac ttagtagtca 20

<210> 2937

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2937

agtcaatgtg acttagtagt 20

<210> 2938

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2938

ttaaagtcaa tgtgacttag 20

<210> 2939

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2939

gttaaagtca atgtgactta 20

<210> 2940

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2940

tgttaaagtc aatgtgactt 20

<210> 2941

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2941

atgttaaagt caatgtgact 20

<210> 2942

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2942

catgttaaag tcaatgtgac 20

<210> 2943

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2943

ctcatgttaa agtcaatgtg 20

<210> 2944

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2944

cctcatgtta aagtcaatgt 20

<210> 2945

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2945

acctcatgtt aaagtcaatg 20

<210> 2946

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2946

tacctcatgt taaagtcaat 20

<210> 2947

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2947

atacctcatg ttaaagtcaa 20

<210> 2948

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2948

gatacctcat gttaaagtca 20

<210> 2949

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2949

tgatacctca tgttaaagtc 20

<210> 2950

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2950

gtgatacctc atgttaaagt 20

<210> 2951

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2951

agtgatacct catgttaaag 20

<210> 2952

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2952

tagtgatacc tcatgttaaa 20

<210> 2953

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2953

atagtgatac ctcatgttaa 20

<210> 2954

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2954

tatagtgata cctcatgtta 20

<210> 2955

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2955

gtatagtgat acctcatgtt 20

<210> 2956

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2956

ggtatagtga tacctcatgt 20

<210> 2957

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2957

ataaggtata gtgatacctc 20

<210> 2958

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2958

aataaggtat agtgatacct 20

<210> 2959

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2959

taatgtttaa attattgcct 20

<210> 2960

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2960

ggttaatgtt taaattattg 20

<210> 2961

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2961

aggttaatgt ttaaattatt 20

<210> 2962

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2962

gaggttaatg tttaaattat 20

<210> 2963

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2963

tgaggttaat gtttaaatta 20

<210> 2964

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2964

aatgaggtta atgtttaaat 20

<210> 2965

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2965

gaatgaggtt aatgtttaaa 20

<210> 2966

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2966

ggaatgaggt taatgtttaa 20

<210> 2967

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2967

tggaatgagg ttaatgttta 20

<210> 2968

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2968

ttggaatgag gttaatgttt 20

<210> 2969

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2969

cttggaatga ggttaatgtt 20

<210> 2970

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2970

taacttggaa tgaggttaat 20

<210> 2971

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2971

ttaacttgga atgaggttaa 20

<210> 2972

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2972

attaacttgg aatgaggtta 20

<210> 2973

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2973

cattaacttg gaatgaggtt 20

<210> 2974

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2974

acattaactt ggaatgaggt 20

<210> 2975

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2975

accacattaa cttggaatga 20

<210> 2976

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2976

gaccacatta acttggaatg 20

<210> 2977

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2977

agaccacatt aacttggaat 20

<210> 2978

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2978

tagaccacat taacttggaa 20

<210> 2979

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2979

ttagaccaca ttaacttgga 20

<210> 2980

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2980

attagaccac attaacttgg 20

<210> 2981

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2981

tattagacca cattaacttg 20

<210> 2982

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2982

ttattagacc acattaactt 20

<210> 2983

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2983

attattagac cacattaact 20

<210> 2984

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2984

gattattaga ccacattaac 20

<210> 2985

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2985

aataccagat tattagacca 20

<210> 2986

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2986

taataccaga ttattagacc 20

<210> 2987

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2987

tttaatacca gattattaga 20

<210> 2988

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2988

atttaatacc agattattag 20

<210> 2989

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2989

gatttaatac cagattatta 20

<210> 2990

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2990

taaggattta ataccagatt 20

<210> 2991

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2991

tttctcttaa ggatttaata 20

<210> 2992

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2992

ctttctctta aggatttaat 20

<210> 2993

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2993

agctttctct taaggattta 20

<210> 2994

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2994

aagctttctc ttaaggattt 20

<210> 2995

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2995

tcaagctttc tcttaaggat 20

<210> 2996

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2996

ttctcaagct ttctcttaag 20

<210> 2997

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2997

tttctcaagc tttctcttaa 20

<210> 2998

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2998

tctatttctc aagctttctc 20

<210> 2999

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 2999

atctatttct caagctttct 20

<210> 3000

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3000

aatctatttc tcaagctttc 20

<210> 3001

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3001

aaatctattt ctcaagcttt 20

<210> 3002

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3002

aaaatctatt tctcaagctt 20

<210> 3003

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3003

gataaaaaaa atctatttct 20

<210> 3004

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3004

tagacagtga ctttaagata 20

<210> 3005

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3005

atagacagtg actttaagat 20

<210> 3006

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3006

aatagacagt gactttaaga 20

<210> 3007

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3007

aaatagacag tgactttaag 20

<210> 3008

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3008

taaatagaca gtgactttaa 20

<210> 3009

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3009

ttaaatagac agtgacttta 20

<210> 3010

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3010

cttaaataga cagtgacttt 20

<210> 3011

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3011

tcttaaatag acagtgactt 20

<210> 3012

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3012

atcttaaata gacagtgact 20

<210> 3013

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3013

aatcttaaat agacagtgac 20

<210> 3014

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3014

taatcttaaa tagacagtga 20

<210> 3015

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3015

ttaatcttaa atagacagtg 20

<210> 3016

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3016

tttaatctta aatagacagt 20

<210> 3017

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3017

gtttaatctt aaatagacag 20

<210> 3018

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3018

tgtttaatct taaatagaca 20

<210> 3019

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3019

atgtttaatc ttaaatagac 20

<210> 3020

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3020

ttgtatgttt aatcttaaat 20

<210> 3021

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3021

attgtatgtt taatcttaaa 20

<210> 3022

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3022

gattgtatgt ttaatcttaa 20

<210> 3023

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3023

tgattgtatg tttaatctta 20

<210> 3024

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3024

tatgtgattg tatgtttaat 20

<210> 3025

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3025

gttatgtgat tgtatgttta 20

<210> 3026

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3026

taaggttatg tgattgtatg 20

<210> 3027

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3027

ttaaggttat gtgattgtat 20

<210> 3028

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3028

ttctttaagg ttatgtgatt 20

<210> 3029

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3029

tctggaagca gaccta 16

<210> 3030

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3030

cttctggaag cagacc 16

<210> 3031

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3031

aaataaggta tagtga 16

<210> 3032

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3032

tagtattaag tgttaa 16

<210> 3033

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3033

tcatagtatt aagtgt 16

<210> 3034

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3034

agattccttt acaatt 16

<210> 3035

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3035

acaagattcc tttaca 16

<210> 3036

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3036

ctgacaagat tccttt 16

<210> 3037

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3037

tgtaatctga caagat 16

<210> 3038

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3038

tactgtaatc tgacaa 16

<210> 3039

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3039

tcttactgta atctga 16

<210> 3040

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3040

cattcttact gtaatc 16

<210> 3041

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3041

gttcattctt actgta 16

<210> 3042

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3042

atatgttcat tcttac 16

<210> 3043

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3043

gccacaaata tgttca 16

<210> 3044

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3044

gatgccacaa atatgt 16

<210> 3045

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3045

ctttaactcg atgcca 16

<210> 3046

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3046

aaactttaac tcgatg 16

<210> 3047

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3047

tataaacttt aactcg 16

<210> 3048

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3048

cacagcatat ttaggg 16

<210> 3049

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3049

tagaatcaca gcatat 16

<210> 3050

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3050

tattagaatc acagca 16

<210> 3051

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3051

aatgtattag aatcac 16

<210> 3052

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3052

acgaatgtat tagaat 16

<210> 3053

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3053

tacacgaatg tattag 16

<210> 3054

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3054

acctacacga atgtat 16

<210> 3055

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3055

aaaacctaca cgaatg 16

<210> 3056

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3056

ttgaaaacct acacga 16

<210> 3057

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3057

tacttgaaaa cctaca 16

<210> 3058

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3058

gtttatttct acttga 16

<210> 3059

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3059

gaggtttatt tctact 16

<210> 3060

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3060

tacgaggttt atttct 16

<210> 3061

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3061

tgttacgagg tttatt 16

<210> 3062

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3062

acttgttacg aggttt 16

<210> 3063

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3063

cagtaacttg ttacga 16

<210> 3064

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3064

gttcagtaac ttgtta 16

<210> 3065

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3065

tcaggctgtt taaacg 16

<210> 3066

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3066

ttgtcaggct gtttaa 16

<210> 3067

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3067

tatacatgct tgtcag 16

<210> 3068

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3068

gtctttgttt attgaa 16

<210> 3069

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3069

tgggtctttg tttatt 16

<210> 3070

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3070

gactgggtct ttgttt 16

<210> 3071

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3071

ataatttagg gactgg 16

<210> 3072

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3072

tctataattt agggac 16

<210> 3073

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3073

cgataaacat gcaaga 16

<210> 3074

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3074

tgtcgataaa catgca 16

<210> 3075

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3075

tgatgtcgat aaacat 16

<210> 3076

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3076

ttgtgatgtc gataaa 16

<210> 3077

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3077

ctgttgtgat gtcgat 16

<210> 3078

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3078

gatctgttgt gatgtc 16

<210> 3079

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3079

agggatctgt tgtgat 16

<210> 3080

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3080

tttagggatc tgttgt 16

<210> 3081

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3081

ggatttaggg atctgt 16

<210> 3082

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3082

gatttaggga tttagg 16

<210> 3083

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3083

tctttaggga tttagg 16

<210> 3084

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3084

taatctttag ggattt 16

<210> 3085

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3085

atctaatctt taggga 16

<210> 3086

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3086

tgtatctaat ctttag 16

<210> 3087

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3087

aaatttgtat ctaatc 16

<210> 3088

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3088

gtaaaaaatt tgtatc 16

<210> 3089

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3089

gtggtaaaaa atttgt 16

<210> 3090

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3090

gatactgtgg taaaaa 16

<210> 3091

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3091

agtgatactg tggtaa 16

<210> 3092

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3092

acaagtgata ctgtgg 16

<210> 3093

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3093

ctgacaagtg atactg 16

<210> 3094

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3094

attctgacaa gtgata 16

<210> 3095

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3095

taaattctga caagtg 16

<210> 3096

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3096

tactggcagt tttaaa 16

<210> 3097

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3097

tcttactggc agtttt 16

<210> 3098

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3098

atttcttact ggcagt 16

<210> 3099

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3099

aaaatttctt actggc 16

<210> 3100

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3100

aacaaatggg tttaat 16

<210> 3101

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3101

gaatatttgc aagtct 16

<210> 3102

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3102

tcattggtag aggaat 16

<210> 3103

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3103

atattttaaa gtctcg 16

<210> 3104

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3104

gttacattat tataga 16

<210> 3105

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3105

gtgaaatgtg ttacat 16

<210> 3106

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3106

tcaccagtga aatgtg 16

<210> 3107

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3107

catgtttcac cagtga 16

<210> 3108

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3108

acaagacatg tttcac 16

<210> 3109

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3109

catatgacaa gacatg 16

<210> 3110

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3110

ctataatgca tatgac 16

<210> 3111

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3111

tcctttctat aatgca 16

<210> 3112

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3112

tgattatcct ttctat 16

<210> 3113

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3113

taactgaaag tctgat 16

<210> 3114

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3114

gtgcacaaaa atgtta 16

<210> 3115

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3115

agctatgtgc acaaaa 16

<210> 3116

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3116

gaagatagct atgtgc 16

<210> 3117

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3117

tttattgaag atagct 16

<210> 3118

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3118

tcattttagt gtatct 16

<210> 3119

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3119

ccttgatcat tttagt 16

<210> 3120

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3120

tgaatccctt gatcat 16

<210> 3121

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3121

gttgtttagt cttgaa 16

<210> 3122

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3122

aattgagttg tttagt 16

<210> 3123

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3123

gcaactaatt gagttg 16

<210> 3124

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3124

attggtgcaa ctaatt 16

<210> 3125

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3125

gttttttatt ggtgca 16

<210> 3126

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3126

ggacactgac agtttt 16

<210> 3127

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3127

caggttggac actgac 16

<210> 3128

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3128

taagtacagg ttggac 16

<210> 3129

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3129

agttattaag tacagg 16

<210> 3130

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3130

tctgtgagtt attaag 16

<210> 3131

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3131

accaaaattc tcctga 16

<210> 3132

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3132

acctgaataa ccctct 16

<210> 3133

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3133

ggtatcagaa aaagat 16

<210> 3134

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3134

agtattggta tcagaa 16

<210> 3135

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3135

ggaagatact ttgaag 16

<210> 3136

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3136

aatgtgggaa gatact 16

<210> 3137

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3137

cagataatag ctaata 16

<210> 3138

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3138

tcattgcaga taatag 16

<210> 3139

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3139

gattcggatt tttaaa 16

<210> 3140

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3140

atttgggatt cggatt 16

<210> 3141

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3141

acgcttattt gggatt 16

<210> 3142

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3142

tctagagaga aaacgc 16

<210> 3143

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3143

agttaagagg ttttcg 16

<210> 3144

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3144

cattatagtt aagagg 16

<210> 3145

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3145

cactttcatt atagtt 16

<210> 3146

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3146

tagaatgaac actttc 16

<210> 3147

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3147

ttgaactaga atgaac 16

<210> 3148

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3148

acctgattga actaga 16

<210> 3149

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3149

taaaatacct gattga 16

<210> 3150

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3150

tagaggtaaa atacct 16

<210> 3151

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3151

gaagattaga ggtaaa 16

<210> 3152

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3152

tctgaggaag attaga 16

<210> 3153

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3153

tatacactac caaaaa 16

<210> 3154

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3154

ataatctata cactac 16

<210> 3155

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3155

taagtcccaa ttttaa 16

<210> 3156

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3156

ccagttttaa ataatc 16

<210> 3157

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3157

tgtatcccag ttttaa 16

<210> 3158

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3158

gttttagatg catgta 16

<210> 3159

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3159

tacagtgttt tagatg 16

<210> 3160

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3160

ttccccgtaa gtttat 16

<210> 3161

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3161

ctgtatttcc ccgtaa 16

<210> 3162

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3162

tagttactgt tactgt 16

<210> 3163

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3163

cgtatgtagt tactgt 16

<210> 3164

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3164

aatgggtaca gactcg 16

<210> 3165

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3165

gcaatttaat gggtac 16

<210> 3166

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3166

gatagatatg caattt 16

<210> 3167

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3167

aaaggagata gatatg 16

<210> 3168

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3168

cctcctaaag gagata 16

<210> 3169

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3169

caccagcctc ctaaag 16

<210> 3170

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3170

tttgtgatcc caagta 16

<210> 3171

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3171

gctttgtgat cccaag 16

<210> 3172

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3172

ttgctttgtg atccca 16

<210> 3173

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3173

ttttgctttg tgatcc 16

<210> 3174

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3174

ccttttgctt tgtgat 16

<210> 3175

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3175

gtccttttgc tttgtg 16

<210> 3176

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3176

gtgtcctttt gctttg 16

<210> 3177

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3177

gaaatgtaaa cggtat 16

<210> 3178

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3178

ttgagaaatg taaacg 16

<210> 3179

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3179

tgattgagaa atgtaa 16

<210> 3180

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3180

tttgattgag aaatgt 16

<210> 3181

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3181

aagaattttg attgag 16

<210> 3182

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3182

ataagaattt tgattg 16

<210> 3183

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3183

caaatagtat tataag 16

<210> 3184

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3184

cccacatcac aaaatt 16

<210> 3185

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3185

gattcccaca tcacaa 16

<210> 3186

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3186

ttgattccca catcac 16

<210> 3187

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3187

aattgattcc cacatc 16

<210> 3188

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3188

aaaattgatt cccaca 16

<210> 3189

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3189

ctaaaattga ttccca 16

<210> 3190

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3190

catctaaaat tgattc 16

<210> 3191

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3191

accatctaaa attgat 16

<210> 3192

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3192

tgaccatcta aaattg 16

<210> 3193

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3193

tgtgaccatc taaaat 16

<210> 3194

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3194

attgtgacca tctaaa 16

<210> 3195

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3195

agattgtgac catcta 16

<210> 3196

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3196

ctagattgtg accatc 16

<210> 3197

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3197

atctagattg tgacca 16

<210> 3198

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3198

taatctagat tgtgac 16

<210> 3199

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3199

tataatctag attgtg 16

<210> 3200

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3200

attataatct agattg 16

<210> 3201

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3201

tgattataat ctagat 16

<210> 3202

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3202

attgattata atctag 16

<210> 3203

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3203

ctattgatta taatct 16

<210> 3204

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3204

acctattgat tataat 16

<210> 3205

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3205

tcacctattg attata 16

<210> 3206

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3206

gttcacctat tgatta 16

<210> 3207

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3207

aagttcacct attgat 16

<210> 3208

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3208

ataagttcac ctattg 16

<210> 3209

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3209

taataagttc acctat 16

<210> 3210

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3210

tttaataagt tcacct 16

<210> 3211

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3211

tatttaataa gttcac 16

<210> 3212

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3212

gttatttaat aagttc 16

<210> 3213

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3213

catatgatgc ctttta 16

<210> 3214

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3214

tattagctca tatgat 16

<210> 3215

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3215

gatattagct catatg 16

<210> 3216

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3216

gtgatattag ctcata 16

<210> 3217

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3217

agttgtgata ttagct 16

<210> 3218

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3218

aaagttgtga tattag 16

<210> 3219

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3219

ggaaagttgt gatatt 16

<210> 3220

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3220

tgggaaagtt gtgata 16

<210> 3221

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3221

aaactgggaa agttgt 16

<210> 3222

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3222

ttaaactggg aaagtt 16

<210> 3223

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3223

gttttttaaa ctggga 16

<210> 3224

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3224

tagtttttta aactgg 16

<210> 3225

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3225

gagtactagt ttttta 16

<210> 3226

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3226

aagagtacta gttttt 16

<210> 3227

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3227

acaagagtac tagttt 16

<210> 3228

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3228

taacaagagt actagt 16

<210> 3229

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3229

tttaacaaga gtacta 16

<210> 3230

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3230

gttttaacaa gagtac 16

<210> 3231

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3231

gagttttaac aagagt 16

<210> 3232

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3232

tagagtttta acaaga 16

<210> 3233

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3233

gtttagagtt ttaaca 16

<210> 3234

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3234

caagtttaga gtttta 16

<210> 3235

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3235

gtcaagttta gagttt 16

<210> 3236

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3236

tagtcaagtt tagagt 16

<210> 3237

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3237

tttagtcaag tttaga 16

<210> 3238

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3238

tatttagtca agttta 16

<210> 3239

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3239

tgtatttagt caagtt 16

<210> 3240

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3240

tctgtattta gtcaag 16

<210> 3241

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3241

cctctgtatt tagtca 16

<210> 3242

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3242

gtcctctgta tttagt 16

<210> 3243

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3243

cagtcctctg tattta 16

<210> 3244

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3244

accagtcctc tgtatt 16

<210> 3245

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3245

ttaccagtcc tctgta 16

<210> 3246

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3246

aattaccagt cctctg 16

<210> 3247

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3247

acaattacca gtcctc 16

<210> 3248

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3248

tctgacaaga ttcctt 16

<210> 3249

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3249

atctgacaag attcct 16

<210> 3250

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3250

taatctgaca agattc 16

<210> 3251

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3251

gtaatctgac aagatt 16

<210> 3252

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3252

cttgtcaggc tgttta 16

<210> 3253

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3253

gcttgtcagg ctgttt 16

<210> 3254

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3254

atgcttgtca ggctgt 16

<210> 3255

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3255

tacatgcttg tcaggc 16

<210> 3256

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3256

atacatgctt gtcagg 16

<210> 3257

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3257

aaaggtaggt caccat 16

<210> 3258

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3258

caaaggtagg tcacca 16

<210> 3259

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3259

gacaaaggta ggtcac 16

<210> 3260

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3260

tgacaaaggt aggtca 16

<210> 3261

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3261

tctgacatag cttttt 16

<210> 3262

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3262

attctgacat agcttt 16

<210> 3263

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3263

gattctgaca tagctt 16

<210> 3264

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3264

ggattctgac atagct 16

<210> 3265

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3265

atggattctg acatag 16

<210> 3266

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3266

catggattct gacata 16

<210> 3267

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3267

acatggattc tgacat 16

<210> 3268

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3268

tacatggatt ctgaca 16

<210> 3269

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3269

atacatggat tctgac 16

<210> 3270

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3270

tttagcagca ctacta 16

<210> 3271

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3271

ttttagcagc actact 16

<210> 3272

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3272

cttttagcag cactac 16

<210> 3273

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3273

aaaacctttt agcagc 16

<210> 3274

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3274

gataaaaaac ctttta 16

<210> 3275

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3275

tgataaaaaa cctttt 16

<210> 3276

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3276

agatgttggc aggttg 16

<210> 3277

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3277

tagatgttgg caggtt 16

<210> 3278

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3278

gtagatgttg gcaggt 16

<210> 3279

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3279

tgtagatgtt ggcagg 16

<210> 3280

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3280

ctgtagatgt tggcag 16

<210> 3281

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3281

tatctgtaga tgttgg 16

<210> 3282

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3282

atatctgtag atgttg 16

<210> 3283

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3283

catatctgta gatgtt 16

<210> 3284

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3284

tttgaaccag gctttc 16

<210> 3285

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3285

aatttgaacc aggctt 16

<210> 3286

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3286

cataatttga accagg 16

<210> 3287

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3287

acataatttg aaccag 16

<210> 3288

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3288

tacataattt gaacca 16

<210> 3289

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3289

atacataatt tgaacc 16

<210> 3290

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3290

acattggtcg gaaaac 16

<210> 3291

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3291

gacattggtc ggaaaa 16

<210> 3292

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3292

agacattggt cggaaa 16

<210> 3293

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3293

cagacattgg tcggaa 16

<210> 3294

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3294

gcagacattg gtcgga 16

<210> 3295

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3295

aagcagacat tggtcg 16

<210> 3296

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3296

tgtacagatt acctgt 16

<210> 3297

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3297

ttgtacagat tacctg 16

<210> 3298

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3298

attgtacaga ttacct 16

<210> 3299

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3299

gattgtacag attacc 16

<210> 3300

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3300

agattgtaca gattac 16

<210> 3301

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3301

tcagattgta cagatt 16

<210> 3302

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3302

ttcagattgt acagat 16

<210> 3303

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3303

attcagattg tacaga 16

<210> 3304

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3304

tattcagatt gtacag 16

<210> 3305

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3305

ttattcagat tgtaca 16

<210> 3306

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3306

taggtatgtc ttttat 16

<210> 3307

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3307

tgtcttaggt atgtct 16

<210> 3308

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3308

attgtcttag gtatgt 16

<210> 3309

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3309

gattgtctta ggtatg 16

<210> 3310

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3310

ttcttagatg gcgtgt 16

<210> 3311

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3311

atttttctta gatggc 16

<210> 3312

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3312

catttttctt agatgg 16

<210> 3313

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3313

gcatttttct tagatg 16

<210> 3314

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3314

ataagtccca atttta 16

<210> 3315

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3315

tataagtccc aatttt 16

<210> 3316

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3316

gtataagtcc caattt 16

<210> 3317

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3317

tgtataagtc ccaatt 16

<210> 3318

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3318

ctgtataagt cccaat 16

<210> 3319

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3319

taatctgtat aagtcc 16

<210> 3320

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3320

ataatctgta taagtc 16

<210> 3321

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3321

aataatctgt ataagt 16

<210> 3322

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3322

tgcatgtatc ccagtt 16

<210> 3323

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3323

tagatgcatg tatccc 16

<210> 3324

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3324

ttagatgcat gtatcc 16

<210> 3325

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3325

tttagatgca tgtatc 16

<210> 3326

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3326

gtggaactgt tttctt 16

<210> 3327

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3327

acgtggaact gttttc 16

<210> 3328

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3328

ttgatcaatt ctggag 16

<210> 3329

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3329

tcttgatcaa ttctgg 16

<210> 3330

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3330

ggctctggag atagag 16

<210> 3331

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3331

ttggctctgg agatag 16

<210> 3332

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3332

gattttggct ctggag 16

<210> 3333

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3333

tcttgatttt ggctct 16

<210> 3334

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3334

aatcttgatt ttggct 16

<210> 3335

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3335

caaatcttga ttttgg 16

<210> 3336

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3336

gcagcgatag atcata 16

<210> 3337

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3337

ttgcagcgat agatca 16

<210> 3338

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3338

tggtttgcag cgatag 16

<210> 3339

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3339

tttgatttca ctggtt 16

<210> 3340

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3340

tctttgattt cactgg 16

<210> 3341

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3341

agttcttctc agttcc 16

<210> 3342

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3342

ttagttagtt gctctt 16

<210> 3343

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3343

agttagttag ttgctc 16

<210> 3344

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3344

gtgctcttgg cttgga 16

<210> 3345

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3345

tggtgctctt ggcttg 16

<210> 3346

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3346

tatgttcacc tctgtt 16

<210> 3347

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3347

tgtatgttca cctctg 16

<210> 3348

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3348

acactcatca tgccac 16

<210> 3349

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3349

ccacactcat catgcc 16

<210> 3350

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3350

ttagattttg ctcttg 16

<210> 3351

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3351

atagagtata accttc 16

<210> 3352

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3352

aatctgttgg atggat 16

<210> 3353

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3353

tgaatctgtt ggatgg 16

<210> 3354

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3354

ttcattcaaa gctttc 16

<210> 3355

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3355

agttcattca aagctt 16

<210> 3356

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3356

tcagttcatt caaagc 16

<210> 3357

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3357

gattattaga ccacat 16

<210> 3358

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3358

aatagacagt gacttt 16

<210> 3359

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3359

agaaatgtaa acggta 16

<210> 3360

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3360

tcatatgatg cctttt 16

<210> 3361

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3361

attagctcat atgatg 16

<210> 3362

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3362

tgtgatatta gctcat 16

<210> 3363

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3363

gttgtgatat tagctc 16

<210> 3364

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3364

tactctgtgc tgacga 16

<210> 3365

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3365

catactctgt gctgac 16

<210> 3366

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3366

gtttaaagac agcgaa 16

<210> 3367

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3367

ttgtttaaag acagcg 16

<210> 3368

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3368

gtagtcatct ccattt 16

<210> 3369

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3369

tagtagtcat ctccat 16

<210> 3370

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3370

tcttaactct atatat 16

<210> 3371

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3371

cttcttaact ctatat 16

<210> 3372

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3372

gacttcttaa ctctat 16

<210> 3373

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3373

tagacttctt aactct 16

<210> 3374

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3374

cctagacttc ttaact 16

<210> 3375

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3375

gacctagact tcttaa 16

<210> 3376

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3376

cagacctaga cttctt 16

<210> 3377

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3377

agcagaccta gacttc 16

<210> 3378

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3378

gaagcagacc tagact 16

<210> 3379

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3379

tggaagcaga cctaga 16

<210> 3380

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3380

ctttaacaaa tgggtt 16

<210> 3381

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3381

atcctttaac aaatgg 16

<210> 3382

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3382

ctatatcctt taacaa 16

<210> 3383

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3383

gcactatatc ctttaa 16

<210> 3384

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3384

tgggcactat atcctt 16

<210> 3385

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3385

acttgggcac tatatc 16

<210> 3386

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3386

ataacttggg cactat 16

<210> 3387

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3387

catataactt gggcac 16

<210> 3388

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3388

caccatataa cttggg 16

<210> 3389

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3389

ggtcaccata taactt 16

<210> 3390

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3390

gtaggtcacc atataa 16

<210> 3391

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3391

aaggtaggtc accata 16

<210> 3392

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3392

ttgacaaagg taggtc 16

<210> 3393

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3393

gtattgacaa aggtag 16

<210> 3394

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3394

taagtattga caaagg 16

<210> 3395

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3395

tgctaagtat tgacaa 16

<210> 3396

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3396

taatgctaag tattga 16

<210> 3397

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3397

tacataatgc taagta 16

<210> 3398

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3398

ggataatttg aaatac 16

<210> 3399

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3399

tattggataa tttgaa 16

<210> 3400

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3400

gtatattgga taattt 16

<210> 3401

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3401

catgtatatt ggataa 16

<210> 3402

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3402

cttttatata tgtgac 16

<210> 3403

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3403

gatcatacat atcttt 16

<210> 3404

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3404

atagatcata catatc 16

<210> 3405

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3405

cacatagatc atacat 16

<210> 3406

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3406

attcacatag atcata 16

<210> 3407

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3407

aggattcaca tagatc 16

<210> 3408

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3408

cttaggattc acatag 16

<210> 3409

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3409

ttacttagga ttcaca 16

<210> 3410

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3410

tatttactta ggattc 16

<210> 3411

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3411

cctgaaaatt atagat 16

<210> 3412

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3412

ggtcctgaaa attata 16

<210> 3413

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3413

tgtggtcctg aaaatt 16

<210> 3414

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3414

gtctgtggtc ctgaaa 16

<210> 3415

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3415

ttagtctgtg gtcctg 16

<210> 3416

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3416

agcttagtct gtggtc 16

<210> 3417

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3417

gacagcttag tctgtg 16

<210> 3418

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3418

ttcgacagct tagtct 16

<210> 3419

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3419

aatttcgaca gcttag 16

<210> 3420

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3420

gttaatttcg acagct 16

<210> 3421

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3421

cctaaaaaaa tcagcg 16

<210> 3422

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3422

ggccctaaaa aaatca 16

<210> 3423

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3423

ttctggccct aaaaaa 16

<210> 3424

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3424

gtattctggc cctaaa 16

<210> 3425

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3425

ttggtattct ggccct 16

<210> 3426

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3426

attttggtat tctggc 16

<210> 3427

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3427

gccattttgg tattct 16

<210> 3428

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3428

ggagccattt tggtat 16

<210> 3429

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3429

agaggagcca ttttgg 16

<210> 3430

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3430

aagagaggag ccattt 16

<210> 3431

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3431

attgtccaat tttggg 16

<210> 3432

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3432

gaaattgtcc aatttt 16

<210> 3433

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3433

tttgaaattg tccaat 16

<210> 3434

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3434

gcatttgaaa ttgtcc 16

<210> 3435

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3435

gcaactcata tattaa 16

<210> 3436

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3436

gaagcaactc atatat 16

<210> 3437

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3437

gaggaagcaa ctcata 16

<210> 3438

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3438

atagaggaag caactc 16

<210> 3439

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3439

caaatagagg aagcaa 16

<210> 3440

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3440

aaccaaatag aggaag 16

<210> 3441

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3441

ggaaaccaaa tagagg 16

<210> 3442

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3442

ctttaagtga agttac 16

<210> 3443

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3443

tacttacttt aagtga 16

<210> 3444

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3444

gaaccctctt tatttt 16

<210> 3445

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3445

aaacatgaac cctctt 16

<210> 3446

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3446

gatccacatt gaaaac 16

<210> 3447

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3447

catgccttag aaatat 16

<210> 3448

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3448

aaatggcatg ccttag 16

<210> 3449

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3449

gtatttcaaa tggcat 16

<210> 3450

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3450

gcaacaaagt atttca 16

<210> 3451

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3451

gtatttcaac aatgca 16

<210> 3452

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3452

ataacattag ggaaac 16

<210> 3453

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3453

tcatatataa cattag 16

<210> 3454

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3454

gtggttttga gcaaag 16

<210> 3455

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3455

ctattgtgtg gttttg 16

<210> 3456

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3456

ggaaagctat tgtgtg 16

<210> 3457

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3457

tatgagtgaa atggaa 16

<210> 3458

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3458

agccaatatg agtgaa 16

<210> 3459

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3459

ctaaagagcc aatatg 16

<210> 3460

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3460

ggtaatcttg gtctaa 16

<210> 3461

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3461

gatgacgaag ggttgg 16

<210> 3462

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3462

cagtgagatg acgaag 16

<210> 3463

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3463

tgaagtcagt gagatg 16

<210> 3464

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3464

aggaggtgaa gtcagt 16

<210> 3465

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3465

gagtagagga ggtgaa 16

<210> 3466

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3466

taactagagt agagga 16

<210> 3467

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3467

tcagaataac tagagt 16

<210> 3468

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3468

aagcggtcag aataac 16

<210> 3469

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3469

ctggtaaagc ggtcag 16

<210> 3470

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3470

tgaatactgg taaagc 16

<210> 3471

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3471

tgtgtttgaa tactgg 16

<210> 3472

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3472

gtttgatgtg tttgaa 16

<210> 3473

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3473

cagtatgttt gatgtg 16

<210> 3474

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3474

aggtggcagt atgttt 16

<210> 3475

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3475

gctttgaggt ggcagt 16

<210> 3476

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3476

gggcaaaggc tttgag 16

<210> 3477

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3477

caacaagggc aaaggc 16

<210> 3478

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3478

gaggaaacaa caaggg 16

<210> 3479

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3479

ccagttagag gaaaca 16

<210> 3480

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3480

ccagggcaga agagcg 16

<210> 3481

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3481

tagataccag ggcaga 16

<210> 3482

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3482

cagagagtgg gccacg 16

<210> 3483

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3483

ggaaatcaga gagtgg 16

<210> 3484

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3484

cctaagggaa atcaga 16

<210> 3485

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3485

aacgacccta agggaa 16

<210> 3486

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3486

tttgataacg acccta 16

<210> 3487

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3487

tttttgtttg ataacg 16

<210> 3488

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3488

cattgggaat tttttg 16

<210> 3489

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3489

agtcttcatt gggaat 16

<210> 3490

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3490

cttgtaagtc ttcatt 16

<210> 3491

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3491

agtgaccttg taagtc 16

<210> 3492

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3492

tggttaagtg accttg 16

<210> 3493

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3493

gatttttggt taagtg 16

<210> 3494

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3494

ggttgtgatt tttggt 16

<210> 3495

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3495

ccaggcggtt gtgatt 16

<210> 3496

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3496

atgggaccag gcggtt 16

<210> 3497

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3497

aagttttcag ggatgg 16

<210> 3498

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3498

aagtagaagt tttcag 16

<210> 3499

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3499

ctaaggaagt agaagt 16

<210> 3500

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3500

aagtagctaa ggaagt 16

<210> 3501

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3501

ggagaaaagt agctaa 16

<210> 3502

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3502

tgtgcaggag aaaagt 16

<210> 3503

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3503

ggtgagtgtg caggag 16

<210> 3504

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3504

aataaaggtg agtgtg 16

<210> 3505

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3505

tgcaggaata gaagag 16

<210> 3506

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3506

ttttagtgca ggaata 16

<210> 3507

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3507

tattcacaga gcttac 16

<210> 3508

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3508

tccctgtatt cacaga 16

<210> 3509

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3509

gaaaaaatcc ctgtat 16

<210> 3510

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3510

tatgaagata atggaa 16

<210> 3511

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3511

ggagtatata caaata 16

<210> 3512

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3512

tattctggag tatata 16

<210> 3513

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3513

attctatatt ctggag 16

<210> 3514

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3514

catacagtat tctata 16

<210> 3515

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3515

gtgtgccata cagtat 16

<210> 3516

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3516

agaaatgcct actgtg 16

<210> 3517

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3517

attcaacaga aatgcc 16

<210> 3518

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3518

gaatatgaca ttacat 16

<210> 3519

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3519

ctgtgtgaat atgaca 16

<210> 3520

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3520

acgcttctgt gtgaat 16

<210> 3521

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3521

tagcacacgc ttctgt 16

<210> 3522

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3522

taatcatagc acacgc 16

<210> 3523

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3523

ccaagtaata ataatc 16

<210> 3524

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3524

agtaatccaa gtaata 16

<210> 3525

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3525

atttctagta atccaa 16

<210> 3526

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3526

cacactattt ctagta 16

<210> 3527

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3527

atgaggcaca ctattt 16

<210> 3528

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3528

ttaattatga ggcaca 16

<210> 3529

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3529

tgacctttaa ttatga 16

<210> 3530

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3530

gcaatttatt gaatga 16

<210> 3531

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3531

gggtttgcaa tttatt 16

<210> 3532

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3532

tgtgttgggt ttgcaa 16

<210> 3533

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3533

tttaagtgtg ttgggt 16

<210> 3534

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3534

gtttagcagt aacatt 16

<210> 3535

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3535

attcagtagt ttatcg 16

<210> 3536

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3536

ctatatattc agtagt 16

<210> 3537

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3537

gcttactttc tatata 16

<210> 3538

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3538

agtttgtttg cttact 16

<210> 3539

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3539

ttggcaagtt tgtttg 16

<210> 3540

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3540

ggcaggttgg caagtt 16

<210> 3541

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3541

gatgttggca ggttgg 16

<210> 3542

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3542

aacatatctg tagatg 16

<210> 3543

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3543

cctgtaaaca tatctg 16

<210> 3544

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3544

ttttgacctg taaaca 16

<210> 3545

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3545

gataattttt gacctg 16

<210> 3546

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3546

tcttgataat ttgata 16

<210> 3547

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3547

aggctttctt gataat 16

<210> 3548

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3548

tgaaccaggc tttctt 16

<210> 3549

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3549

gataaagaca taatac 16

<210> 3550

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3550

acctgtgata aagaca 16

<210> 3551

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3551

cttcagacct gtgata 16

<210> 3552

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3552

actgatcttc agacct 16

<210> 3553

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3553

ggtcttactg atcttc 16

<210> 3554

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3554

gttttaggtc ttactg 16

<210> 3555

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3555

gttcagattt taagtt 16

<210> 3556

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3556

atattctgtt cagatt 16

<210> 3557

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3557

atattgtaat gtattc 16

<210> 3558

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3558

cttagaatat tgtaat 16

<210> 3559

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3559

gctttgctta gaatat 16

<210> 3560

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3560

gagactgctt tgctta 16

<210> 3561

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3561

aaagtagaga ctgctt 16

<210> 3562

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3562

aggccaaaag tagaga 16

<210> 3563

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3563

tcggaaaaca gagcaa 16

<210> 3564

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3564

cattggtcgg aaaaca 16

<210> 3565

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3565

agcaaggcaa aaaagc 16

<210> 3566

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3566

gacattattt aataag 16

<210> 3567

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3567

atcagggaca ttattt 16

<210> 3568

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3568

tatttaatca gggaca 16

<210> 3569

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3569

attacctgtt ctcaaa 16

<210> 3570

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3570

gtacagatta cctgtt 16

<210> 3571

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3571

gttattcaga ttgtac 16

<210> 3572

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3572

aacagtgtta ttcaga 16

<210> 3573

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3573

tagataaaca gtgtta 16

<210> 3574

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3574

tgatatttag ataaac 16

<210> 3575

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3575

ggtgtttgat atttag 16

<210> 3576

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3576

tataacggtg tttgat 16

<210> 3577

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3577

taatgttata acggtg 16

<210> 3578

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3578

agttcataat gttata 16

<210> 3579

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3579

gtctttcagt tcataa 16

<210> 3580

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3580

acagtttgtc tttcag 16

<210> 3581

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3581

agaagtacag tttgtc 16

<210> 3582

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3582

gatgtcagaa gtacag 16

<210> 3583

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3583

agtaaggatg tcagaa 16

<210> 3584

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3584

aatctgagta aggatg 16

<210> 3585

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3585

gaatatacaa ttaggg 16

<210> 3586

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3586

tgatactgaa tataca 16

<210> 3587

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3587

ctgagctgat aaaaga 16

<210> 3588

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3588

accatcatgt tttaca 16

<210> 3589

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3589

tgtcttacca tcatgt 16

<210> 3590

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3590

ccaaagtgtc ttacca 16

<210> 3591

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3591

aacccaccaa agtgtc 16

<210> 3592

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3592

gaaggaaacc caccaa 16

<210> 3593

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3593

cttcaagaag gaaacc 16

<210> 3594

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3594

taatagcttc aagaag 16

<210> 3595

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3595

gggaatttga taataa 16

<210> 3596

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3596

agaataggga atttga 16

<210> 3597

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3597

gtcctaagaa taggga 16

<210> 3598

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3598

gaacaagtcc taagaa 16

<210> 3599

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3599

agtctagaac aagtcc 16

<210> 3600

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3600

tcttttagtc tagaac 16

<210> 3601

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3601

taactatctt ttagtc 16

<210> 3602

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3602

atctcttaac tatctt 16

<210> 3603

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3603

aactgttttc ttctgg 16

<210> 3604

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3604

tcaatttcaa gcaacg 16

<210> 3605

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3605

cttaattgtg aacatt 16

<210> 3606

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3606

agcttaattg tgaaca 16

<210> 3607

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3607

ggagcttaat tgtgaa 16

<210> 3608

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3608

aaggagctta attgtg 16

<210> 3609

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3609

agaaggagct taattg 16

<210> 3610

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3610

aaagaaggag cttaat 16

<210> 3611

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3611

ctagaggaac aataaa 16

<210> 3612

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3612

taactagagg aacaat 16

<210> 3613

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3613

aataactaga ggaaca 16

<210> 3614

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3614

ggaaataact agagga 16

<210> 3615

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3615

gaggaaataa ctagag 16

<210> 3616

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3616

tggaggaaat aactag 16

<210> 3617

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3617

tctggaggaa ataact 16

<210> 3618

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3618

caattctgga ggaaat 16

<210> 3619

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3619

atcaattctg gaggaa 16

<210> 3620

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3620

tgatcaattc tggagg 16

<210> 3621

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3621

ttgtcttgat caattc 16

<210> 3622

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3622

aattgtcttg atcaat 16

<210> 3623

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3623

tgaattgtct tgatca 16

<210> 3624

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3624

gatgaattgt cttgat 16

<210> 3625

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3625

atgatgaatt gtcttg 16

<210> 3626

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3626

caaatgatga attgtc 16

<210> 3627

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3627

atcaaatgat gaattg 16

<210> 3628

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3628

gatagagaat caaatg 16

<210> 3629

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3629

tggagataga gaatca 16

<210> 3630

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3630

tctggagata gagaat 16

<210> 3631

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3631

tttggctctg gagata 16

<210> 3632

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3632

attttggctc tggaga 16

<210> 3633

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3633

atcttgattt tggctc 16

<210> 3634

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3634

gcaaatcttg attttg 16

<210> 3635

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3635

tagcaaatct tgattt 16

<210> 3636

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3636

catagcaaat cttgat 16

<210> 3637

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3637

aacatagcaa atcttg 16

<210> 3638

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3638

ctaacatagc aaatct 16

<210> 3639

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3639

gtctaacata gcaaat 16

<210> 3640

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3640

taaaattttt acatcg 16

<210> 3641

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3641

ggctaaaatt tttaca 16

<210> 3642

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3642

ccattggcta aaattt 16

<210> 3643

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3643

ggccattggc taaaat 16

<210> 3644

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3644

gaggccattg gctaaa 16

<210> 3645

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3645

aggaggccat tggcta 16

<210> 3646

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3646

gaaggaggcc attggc 16

<210> 3647

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3647

ctgaaggagg ccattg 16

<210> 3648

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3648

aactgaagga ggccat 16

<210> 3649

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3649

ccaactgaag gaggcc 16

<210> 3650

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3650

tcccaactga aggagg 16

<210> 3651

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3651

tgtcccaact gaagga 16

<210> 3652

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3652

catgtcccaa ctgaag 16

<210> 3653

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3653

accatgtccc aactga 16

<210> 3654

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3654

agaccatgtc ccaact 16

<210> 3655

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3655

taagaccatg tcccaa 16

<210> 3656

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3656

tttaagacca tgtccc 16

<210> 3657

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3657

tctttaagac catgtc 16

<210> 3658

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3658

agtctttaag accatg 16

<210> 3659

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3659

aaagtcttta agacca 16

<210> 3660

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3660

acaaagtctt taagac 16

<210> 3661

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3661

ggacaaagtc tttaag 16

<210> 3662

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3662

atggacaaag tcttta 16

<210> 3663

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3663

ttatggacaa agtctt 16

<210> 3664

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3664

tcttatggac aaagtc 16

<210> 3665

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3665

cgtcttatgg acaaag 16

<210> 3666

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3666

ttaatttggc ccttcg 16

<210> 3667

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3667

cattaatttg gccctt 16

<210> 3668

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3668

gtcattaatt tggccc 16

<210> 3669

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3669

atgtcattaa tttggc 16

<210> 3670

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3670

tatgttgagt ttttga 16

<210> 3671

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3671

tcaaatatgt tgagtt 16

<210> 3672

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3672

gatcaaatat gttgag 16

<210> 3673

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3673

gtacaattac cagtcc 16

<210> 3674

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3674

ctgtacaatt accagt 16

<210> 3675

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3675

aactgtacaa ttacca 16

<210> 3676

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3676

agaactgtac aattac 16

<210> 3677

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3677

taagaactgt acaatt 16

<210> 3678

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3678

catttaagaa ctgtac 16

<210> 3679

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3679

tactacaaca tttaag 16

<210> 3680

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3680

ttaatactac aacatt 16

<210> 3681

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3681

ttgaaattaa tactac 16

<210> 3682

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3682

gttttgaaat taatac 16

<210> 3683

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3683

cgatttttag ttttga 16

<210> 3684

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3684

gacgattttt agtttt 16

<210> 3685

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3685

ctgacgattt ttagtt 16

<210> 3686

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3686

tgctgacgat ttttag 16

<210> 3687

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3687

tgtgctgacg attttt 16

<210> 3688

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3688

tctgtgctga cgattt 16

<210> 3689

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3689

tacacatact ctgtgc 16

<210> 3690

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3690

tttacacata ctctgt 16

<210> 3691

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3691

gatttttaca catact 16

<210> 3692

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3692

gaagcatcag tttaaa 16

<210> 3693

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3693

atgaagcatc agttta 16

<210> 3694

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3694

ttgtagcaaa atgaag 16

<210> 3695

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3695

catttactcc aaatta 16

<210> 3696

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3696

cattaggttt cataaa 16

<210> 3697

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3697

ttcattaggt ttcata 16

<210> 3698

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3698

gcttcattag gtttca 16

<210> 3699

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3699

ctgcttcatt aggttt 16

<210> 3700

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3700

ttctgcttca ttaggt 16

<210> 3701

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3701

aattctgctt cattag 16

<210> 3702

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3702

cagtatttaa ttctgc 16

<210> 3703

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3703

gaacttattt taatac 16

<210> 3704

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3704

gcgaacttat tttaat 16

<210> 3705

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3705

cagcgaactt atttta 16

<210> 3706

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3706

gacagcgaac ttattt 16

<210> 3707

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3707

aagacagcga acttat 16

<210> 3708

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3708

tttaaagaca gcgaac 16

<210> 3709

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3709

gtcatctcca tttgtt 16

<210> 3710

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3710

tagtcatctc catttg 16

<210> 3711

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3711

acttagtagt catctc 16

<210> 3712

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3712

tgacttagta gtcatc 16

<210> 3713

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3713

tgtgacttag tagtca 16

<210> 3714

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3714

aatgtgactt agtagt 16

<210> 3715

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3715

tcaatgtgac ttagta 16

<210> 3716

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3716

agtcaatgtg acttag 16

<210> 3717

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3717

aaagtcaatg tgactt 16

<210> 3718

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3718

ttaaagtcaa tgtgac 16

<210> 3719

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3719

tgttaaagtc aatgtg 16

<210> 3720

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3720

catgttaaag tcaatg 16

<210> 3721

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3721

ctcatgttaa agtcaa 16

<210> 3722

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3722

acctcatgtt aaagtc 16

<210> 3723

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3723

atacctcatg ttaaag 16

<210> 3724

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3724

tgatacctca tgttaa 16

<210> 3725

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3725

agtgatacct catgtt 16

<210> 3726

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3726

atagtgatac ctcatg 16

<210> 3727

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3727

gtatagtgat acctca 16

<210> 3728

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3728

aggtatagtg atacct 16

<210> 3729

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3729

taaggtatag tgatac 16

<210> 3730

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3730

aataaggtat agtgat 16

<210> 3731

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3731

gtaaacttat tgataa 16

<210> 3732

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3732

ggcatagtaa acttat 16

<210> 3733

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3733

aattttggca tagtaa 16

<210> 3734

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3734

ggcaattaat gaattt 16

<210> 3735

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3735

gtgaaaggca attaat 16

<210> 3736

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3736

agttaagtga aaggca 16

<210> 3737

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3737

cccaaaagtt aagtga 16

<210> 3738

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3738

tatggtccca aaagtt 16

<210> 3739

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3739

atttattatg gtccca 16

<210> 3740

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3740

gttatggcaa tacatt 16

<210> 3741

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3741

attaatgtta tggcaa 16

<210> 3742

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3742

gtagtttatt aatgtt 16

<210> 3743

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3743

tgtaaggtag tttatt 16

<210> 3744

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3744

tggttttgta aggtag 16

<210> 3745

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3745

aattggtggt tttgta 16

<210> 3746

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3746

gattttaatt ggtggt 16

<210> 3747

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3747

gatgtaaata acactt 16

<210> 3748

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3748

ttgacagatg taaata 16

<210> 3749

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3749

tttatgttga cagatg 16

<210> 3750

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3750

agtagattta tgttga 16

<210> 3751

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3751

cctgaatata atgaat 16

<210> 3752

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3752

ggactacctg aatata 16

<210> 3753

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3753

accatcaagc ctccca 16

<210> 3754

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3754

ccccttacca tcaagc 16

<210> 3755

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3755

tgtagtcccc ttacca 16

<210> 3756

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3756

attgaatgta gtcccc 16

<210> 3757

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3757

gattagcaag tgaatg 16

<210> 3758

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3758

tttgtagatt agcaag 16

<210> 3759

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3759

aagaggttct cagtaa 16

<210> 3760

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3760

gtccataaga ggttct 16

<210> 3761

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3761

tacctggtcc ataaga 16

<210> 3762

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3762

tcctaatacc tggtcc 16

<210> 3763

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3763

tacttttcct aatacc 16

<210> 3764

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3764

cgttactact tttcct 16

<210> 3765

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3765

ctgagactgc ttctcg 16

<210> 3766

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3766

tgaaggctga gactgc 16

<210> 3767

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3767

taaattatat gaaggc 16

<210> 3768

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3768

gtaattgttt gataat 16

<210> 3769

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3769

tactaacaaa tgtgta 16

<210> 3770

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3770

gtaatttact aacaaa 16

<210> 3771

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3771

ataagtgtaa tttact 16

<210> 3772

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3772

gttgtaataa gtgtaa 16

<210> 3773

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3773

gtgataaata taattc 16

<210> 3774

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3774

catgtaattg tgataa 16

<210> 3775

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3775

gtatatttaa gaacag 16

<210> 3776

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3776

ttgtgataag tatatt 16

<210> 3777

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3777

tggaattaaa ttgtga 16

<210> 3778

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3778

aagccgtgga attaaa 16

<210> 3779

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3779

cattgtaagc cgtgga 16

<210> 3780

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3780

tatgatcatt gtaagc 16

<210> 3781

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3781

tatagttatg atcatt 16

<210> 3782

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3782

gacataacat ttaatc 16

<210> 3783

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3783

acttatgaca taacat 16

<210> 3784

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3784

gttactactt atgaca 16

<210> 3785

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3785

gtaacagtta ctactt 16

<210> 3786

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3786

gcttatttgt aacagt 16

<210> 3787

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3787

ttcacagctt atttgt 16

<210> 3788

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3788

gttcttttca cagctt 16

<210> 3789

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3789

ggagtggttc ttttca 16

<210> 3790

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3790

atgctaggag tggttc 16

<210> 3791

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3791

tgactaatgc taggag 16

<210> 3792

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3792

atagagtgac taatgc 16

<210> 3793

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3793

gagagaatag agtgac 16

<210> 3794

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3794

attgatatgt aaaacg 16

<210> 3795

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3795

caattaattg atatgt 16

<210> 3796

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3796

ccttttaact tccaat 16

<210> 3797

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3797

cctggtcctt ttaact 16

<210> 3798

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3798

gagtttcctg gtcctt 16

<210> 3799

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3799

atgtctgagt ttcctg 16

<210> 3800

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3800

tactgtatgt ctgagt 16

<210> 3801

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3801

ccatacattc tatata 16

<210> 3802

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3802

tataagccat acattc 16

<210> 3803

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3803

attcattata agccat 16

<210> 3804

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3804

cattgagtta actaat 16

<210> 3805

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3805

aatttgcatt gagtta 16

<210> 3806

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3806

tgaagttact tctggg 16

<210> 3807

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3807

agtgaagtta cttctg 16

<210> 3808

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3808

taagtgaagt tacttc 16

<210> 3809

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3809

gttttaagtg aagtta 16

<210> 3810

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3810

aagttttaag tgaagt 16

<210> 3811

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3811

gtttttctac aaaagt 16

<210> 3812

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3812

atgctattat cttgtt 16

<210> 3813

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3813

tgatgctatt atcttg 16

<210> 3814

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3814

tttgatgcta ttatct 16

<210> 3815

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3815

gtctttgatg ctatta 16

<210> 3816

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3816

aggtctttga tgctat 16

<210> 3817

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3817

gaaggtcttt gatgct 16

<210> 3818

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3818

gagaaggtct ttgatg 16

<210> 3819

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3819

tggagaaggt ctttga 16

<210> 3820

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3820

tctggagaag gtcttt 16

<210> 3821

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3821

ggtctggaga aggtct 16

<210> 3822

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3822

acggtctgga gaaggt 16

<210> 3823

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3823

ccacggtctg gagaag 16

<210> 3824

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3824

ttccacggtc tggaga 16

<210> 3825

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3825

tcttccacgg tctgga 16

<210> 3826

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3826

ggtcttccac ggtctg 16

<210> 3827

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3827

ttggtcttcc acggtc 16

<210> 3828

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3828

tattggtctt ccacgg 16

<210> 3829

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3829

tatattggtc ttccac 16

<210> 3830

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3830

tttatattgg tcttcc 16

<210> 3831

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3831

tgtttatatt ggtctt 16

<210> 3832

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3832

attgtttata ttggtc 16

<210> 3833

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3833

taattgttta tattgg 16

<210> 3834

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3834

ggtttaattg tttata 16

<210> 3835

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3835

gttggtttaa ttgttt 16

<210> 3836

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3836

ctgttggttt aattgt 16

<210> 3837

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3837

tgctgttggt ttaatt 16

<210> 3838

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3838

tatgctgttg gtttaa 16

<210> 3839

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3839

actatgctgt tggttt 16

<210> 3840

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3840

tgactatgct gttggt 16

<210> 3841

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3841

tttgactatg ctgttg 16

<210> 3842

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3842

tatttgacta tgctgt 16

<210> 3843

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3843

tttatttgac tatgct 16

<210> 3844

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3844

cttttatttg actatg 16

<210> 3845

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3845

gagctgattt tctatt 16

<210> 3846

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3846

ctgagctgat tttcta 16

<210> 3847

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3847

ttctgagctg attttc 16

<210> 3848

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3848

ccttctgagc tgattt 16

<210> 3849

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3849

gtccttctga gctgat 16

<210> 3850

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3850

tagtccttct gagctg 16

<210> 3851

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3851

actagtcctt ctgagc 16

<210> 3852

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3852

atactagtcc ttctga 16

<210> 3853

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3853

gaatactagt ccttct 16

<210> 3854

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3854

ttgaatacta gtcctt 16

<210> 3855

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3855

tcttgaatac tagtcc 16

<210> 3856

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3856

gttcttgaat actagt 16

<210> 3857

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3857

gggttcttga atacta 16

<210> 3858

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3858

gtgggttctt gaatac 16

<210> 3859

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3859

ctgtgggttc ttgaat 16

<210> 3860

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3860

ttctgtgggt tcttga 16

<210> 3861

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3861

aaatttctgt gggttc 16

<210> 3862

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3862

agaaatttct gtgggt 16

<210> 3863

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3863

tagagaaatt tctgtg 16

<210> 3864

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3864

gatagagaaa tttctg 16

<210> 3865

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3865

gcttggaaga tagaga 16

<210> 3866

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3866

tggcttggaa gataga 16

<210> 3867

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3867

cttggcttgg aagata 16

<210> 3868

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3868

ctcttggctt ggaaga 16

<210> 3869

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3869

tgctcttggc ttggaa 16

<210> 3870

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3870

ttggtgctct tggctt 16

<210> 3871

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3871

tcttggtgct cttggc 16

<210> 3872

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3872

gttcttggtg ctcttg 16

<210> 3873

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3873

tagttcttgg tgctct 16

<210> 3874

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3874

agtagttctt ggtgct 16

<210> 3875

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3875

ggagtagttc ttggtg 16

<210> 3876

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3876

agggagtagt tcttgg 16

<210> 3877

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3877

aaagggagta gttctt 16

<210> 3878

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3878

agaaagggag tagttc 16

<210> 3879

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3879

gaagaaaggg agtagt 16

<210> 3880

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3880

ctgaagaaag ggagta 16

<210> 3881

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3881

tcaactgaag aaaggg 16

<210> 3882

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3882

tcattgaagt tttgtg 16

<210> 3883

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3883

cgtttcattg aagttt 16

<210> 3884

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3884

ttgtagttct cccacg 16

<210> 3885

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3885

atttgtagtt ctccca 16

<210> 3886

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3886

atatttgtag ttctcc 16

<210> 3887

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3887

ccatatttgt agttct 16

<210> 3888

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3888

aaccatattt gtagtt 16

<210> 3889

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3889

ccaaaaccat atttgt 16

<210> 3890

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3890

ctcccaaaac catatt 16

<210> 3891

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3891

gcctcccaaa accata 16

<210> 3892

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3892

aagcctccca aaacca 16

<210> 3893

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3893

tcaagcctcc caaaac 16

<210> 3894

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3894

tccatcaagc ctccca 16

<210> 3895

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3895

tctccatcaa gcctcc 16

<210> 3896

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3896

attctccatc aagcct 16

<210> 3897

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3897

aaattctcca tcaagc 16

<210> 3898

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3898

accaaaattc tccatc 16

<210> 3899

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3899

caaccaaaat tctcca 16

<210> 3900

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3900

cccaaccaaa attctc 16

<210> 3901

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3901

ggcccaacca aaattc 16

<210> 3902

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3902

taggcccaac caaaat 16

<210> 3903

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3903

tctaggccca accaaa 16

<210> 3904

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3904

tctctaggcc caacca 16

<210> 3905

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3905

cttctctagg cccaac 16

<210> 3906

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3906

atatcttctc taggcc 16

<210> 3907

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3907

gtatatcttc tctagg 16

<210> 3908

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3908

gagtatatct tctcta 16

<210> 3909

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3909

tggagtatat cttctc 16

<210> 3910

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3910

tatggagtat atcttc 16

<210> 3911

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3911

actatggagt atatct 16

<210> 3912

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3912

tcactatgga gtatat 16

<210> 3913

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3913

cttcactatg gagtat 16

<210> 3914

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3914

tgcttcacta tggagt 16

<210> 3915

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3915

attgcttcac tatgga 16

<210> 3916

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3916

agattgcttc actatg 16

<210> 3917

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3917

ttagattgct tcacta 16

<210> 3918

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3918

aattagattg cttcac 16

<210> 3919

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3919

ataattagat tgcttc 16

<210> 3920

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3920

acataattag attgct 16

<210> 3921

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3921

cgtaaaacat aattag 16

<210> 3922

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3922

cttccaactc aattcg 16

<210> 3923

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3923

gtcttccaac tcaatt 16

<210> 3924

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3924

cagtcttcca actcaa 16

<210> 3925

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3925

tccagtcttc caactc 16

<210> 3926

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3926

tttccagtct tccaac 16

<210> 3927

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3927

gtctttccag tcttcc 16

<210> 3928

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3928

ttgttgtctt tccagt 16

<210> 3929

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3929

ataatgtttg ttgtct 16

<210> 3930

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3930

cgtatagttg gtttcg 16

<210> 3931

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3931

gcaactagat gtagcg 16

<210> 3932

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3932

tcgcaactag atgtag 16

<210> 3933

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3933

aatcgcaact agatgt 16

<210> 3934

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3934

gtaatcgcaa ctagat 16

<210> 3935

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3935

cagtaatcgc aactag 16

<210> 3936

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3936

gccagtaatc gcaact 16

<210> 3937

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3937

ttgccagtaa tcgcaa 16

<210> 3938

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3938

cattgccagt aatcgc 16

<210> 3939

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3939

gacattgcca gtaatc 16

<210> 3940

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3940

gggacattgc cagtaa 16

<210> 3941

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3941

tccgggattg cattgg 16

<210> 3942

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3942

tttccgggat tgcatt 16

<210> 3943

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3943

gttttccggg attgca 16

<210> 3944

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3944

ttgttttccg ggattg 16

<210> 3945

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3945

ctttgttttc cgggat 16

<210> 3946

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3946

atctttgttt tccggg 16

<210> 3947

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3947

aaatctttgt tttccg 16

<210> 3948

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3948

acaccaaatc tttgtt 16

<210> 3949

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3949

aaacaccaaa tctttg 16

<210> 3950

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3950

caagtagaaa acacca 16

<210> 3951

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3951

cccaagtaga aaacac 16

<210> 3952

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3952

atcccaagta gaaaac 16

<210> 3953

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3953

tgatcccaag tagaaa 16

<210> 3954

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3954

tgtgatccca agtaga 16

<210> 3955

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3955

ctgatcaaat atgttg 16

<210> 3956

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3956

gactgatcaa atatgt 16

<210> 3957

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3957

aagactgatc aaatat 16

<210> 3958

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3958

cataaaaaga ctgatc 16

<210> 3959

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3959

gatcataaaa agactg 16

<210> 3960

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3960

tagatcataa aaagac 16

<210> 3961

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3961

gatagatcat aaaaag 16

<210> 3962

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3962

gcgatagatc ataaaa 16

<210> 3963

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3963

cagcgataga tcataa 16

<210> 3964

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3964

tttgcagcga tagatc 16

<210> 3965

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3965

ggtttgcagc gataga 16

<210> 3966

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3966

cactggtttg cagcga 16

<210> 3967

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3967

ttcactggtt tgcagc 16

<210> 3968

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3968

atttcactgg tttgca 16

<210> 3969

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3969

tgatttcact ggtttg 16

<210> 3970

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3970

tagttcttct cagttc 16

<210> 3971

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3971

tgtagttctt ctcagt 16

<210> 3972

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3972

tatgtagttc ttctca 16

<210> 3973

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3973

tatatgtagt tcttct 16

<210> 3974

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3974

gtttatatgt agttct 16

<210> 3975

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3975

gtagtttata tgtagt 16

<210> 3976

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3976

cttgtagttt atatgt 16

<210> 3977

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3977

gacttgtagt ttatat 16

<210> 3978

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3978

ttgacttgta gtttat 16

<210> 3979

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3979

tttttgactt gtagtt 16

<210> 3980

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3980

catttttgac ttgtag 16

<210> 3981

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3981

cctcttcatt tttgac 16

<210> 3982

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3982

gacatattct ttacct 16

<210> 3983

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3983

gtgacatatt ctttac 16

<210> 3984

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3984

ttcaagtgac atattc 16

<210> 3985

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3985

agttcaagtg acatat 16

<210> 3986

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3986

tgagttcaag tgacat 16

<210> 3987

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3987

gttgagttca agtgac 16

<210> 3988

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3988

gagttgagtt caagtg 16

<210> 3989

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3989

ttgagttgag ttcaag 16

<210> 3990

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3990

ttttgagttg agttca 16

<210> 3991

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3991

agttttgagt tgagtt 16

<210> 3992

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3992

caagttttga gttgag 16

<210> 3993

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3993

ttcaagtttt gagttg 16

<210> 3994

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3994

ctttcaagtt ttgagt 16

<210> 3995

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3995

ggctttcaag ttttga 16

<210> 3996

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3996

gaggctttca agtttt 16

<210> 3997

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3997

aggaggcttt caagtt 16

<210> 3998

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3998

ctaggaggct ttcaag 16

<210> 3999

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 3999

ttctaggagg ctttca 16

<210> 4000

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4000

tcttctagga ggcttt 16

<210> 4001

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4001

tttcttctag gaggct 16

<210> 4002

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4002

gttgaagtag aatttt 16

<210> 4003

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4003

gttgctcttc taaata 16

<210> 4004

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4004

tagttgctct tctaaa 16

<210> 4005

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4005

gttagttgct cttcta 16

<210> 4006

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4006

tagttagttg ctcttc 16

<210> 4007

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4007

aagttagtta gttgct 16

<210> 4008

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4008

ttaagttagt tagttg 16

<210> 4009

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4009

aattaagtta gttagt 16

<210> 4010

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4010

tgaattaagt tagtta 16

<210> 4011

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4011

tttgaattaa gttagt 16

<210> 4012

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4012

ggttgatttt gaatta 16

<210> 4013

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4013

caggttgatt ttgaat 16

<210> 4014

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4014

ttcaggttga ttttga 16

<210> 4015

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4015

gtttcaggtt gatttt 16

<210> 4016

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4016

gagtttcagg ttgatt 16

<210> 4017

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4017

tggagtttca ggttga 16

<210> 4018

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4018

ttctggagtt tcaggt 16

<210> 4019

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4019

tgttctggag tttcag 16

<210> 4020

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4020

ggtgttctgg agtttc 16

<210> 4021

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4021

tgggtgttct ggagtt 16

<210> 4022

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4022

tctgggtgtt ctggag 16

<210> 4023

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4023

cttctgggtg ttctgg 16

<210> 4024

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4024

tacttctggg tgttct 16

<210> 4025

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4025

gttacttctg ggtgtt 16

<210> 4026

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4026

aagttacttc tgggtg 16

<210> 4027

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4027

ccatcatgtt ttacat 16

<210> 4028

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4028

tgccatcatg ttttac 16

<210> 4029

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4029

gaatgccatc atgttt 16

<210> 4030

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4030

aggaatgcca tcatgt 16

<210> 4031

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4031

gcaggaatgc catcat 16

<210> 4032

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4032

cagcaggaat gccatc 16

<210> 4033

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4033

ttcagcagga atgcca 16

<210> 4034

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4034

cattcagcag gaatgc 16

<210> 4035

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4035

tacattcagc aggaat 16

<210> 4036

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4036

ggtacattca gcagga 16

<210> 4037

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4037

gtggtacatt cagcag 16

<210> 4038

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4038

tggtggtaca ttcagc 16

<210> 4039

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4039

tataaatggt ggtaca 16

<210> 4040

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4040

gttataaatg gtggta 16

<210> 4041

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4041

ctgttataaa tggtgg 16

<210> 4042

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4042

ctctgttata aatggt 16

<210> 4043

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4043

acctctgtta taaatg 16

<210> 4044

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4044

tcacctctgt tataaa 16

<210> 4045

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4045

gttcacctct gttata 16

<210> 4046

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4046

atgttcacct ctgtta 16

<210> 4047

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4047

ttgtatgttc acctct 16

<210> 4048

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4048

acttgtatgt tcacct 16

<210> 4049

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4049

ccacttgtat gttcac 16

<210> 4050

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4050

tgccacttgt atgttc 16

<210> 4051

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4051

catgccactt gtatgt 16

<210> 4052

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4052

tacatgccac ttgtat 16

<210> 4053

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4053

catacatgcc acttgt 16

<210> 4054

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4054

ggcatacatg ccactt 16

<210> 4055

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4055

atggcataca tgccac 16

<210> 4056

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4056

tgatggcata catgcc 16

<210> 4057

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4057

tctgatggca tacatg 16

<210> 4058

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4058

ggtctgatgg cataca 16

<210> 4059

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4059

tgggtctgat ggcata 16

<210> 4060

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4060

gttgctgggt ctgatg 16

<210> 4061

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4061

gagagttgct gggtct 16

<210> 4062

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4062

ttgagagttg ctgggt 16

<210> 4063

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4063

acttgagagt tgctgg 16

<210> 4064

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4064

aaaaacttga gagttg 16

<210> 4065

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4065

tgaaaaactt gagagt 16

<210> 4066

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4066

catgaaaaac ttgaga 16

<210> 4067

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4067

gacatgaaaa acttga 16

<210> 4068

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4068

tcacagtaga catgaa 16

<210> 4069

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4069

catcacagta gacatg 16

<210> 4070

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4070

aacatcacag tagaca 16

<210> 4071

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4071

ataacatcac agtaga 16

<210> 4072

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4072

atataacatc acagta 16

<210> 4073

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4073

tgatataaca tcacag 16

<210> 4074

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4074

cctgatataa catcac 16

<210> 4075

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4075

tacctgatat aacatc 16

<210> 4076

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4076

actacctgat ataaca 16

<210> 4077

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4077

ggactacctg atataa 16

<210> 4078

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4078

atggactacc tgatat 16

<210> 4079

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4079

ccatggacta cctgat 16

<210> 4080

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4080

atgtccatgg actacc 16

<210> 4081

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4081

taatgtccat ggacta 16

<210> 4082

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4082

attaatgtcc atggac 16

<210> 4083

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4083

gaattaatgt ccatgg 16

<210> 4084

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4084

ttgaattaat gtccat 16

<210> 4085

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4085

tgttgaatta atgtcc 16

<210> 4086

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4086

gatgttgaat taatgt 16

<210> 4087

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4087

tcgatgttga attaat 16

<210> 4088

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4088

attcgatgtt gaatta 16

<210> 4089

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4089

ctattcgatg ttgaat 16

<210> 4090

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4090

atctattcga tgttga 16

<210> 4091

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4091

atccatctat tcgatg 16

<210> 4092

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4092

tgatccatct attcga 16

<210> 4093

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4093

tgtgatccat ctattc 16

<210> 4094

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4094

tttgtgatcc atctat 16

<210> 4095

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4095

gttttgtgat ccatct 16

<210> 4096

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4096

aagttttgtg atccat 16

<210> 4097

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4097

tgaagttttg tgatcc 16

<210> 4098

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4098

attgaagttt tgtgat 16

<210> 4099

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4099

caacattttg gttgat 16

<210> 4100

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4100

gatcaacatt ttggtt 16

<210> 4101

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4101

gatggatcaa catttt 16

<210> 4102

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4102

gttggatgga tcaaca 16

<210> 4103

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4103

ctgttggatg gatcaa 16

<210> 4104

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4104

atctgttgga tggatc 16

<210> 4105

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4105

ctgaatctgt tggatg 16

<210> 4106

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4106

caaagctttc tgaatc 16

<210> 4107

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4107

ctcagttcat tcaaag 16

<210> 4108

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4108

gcctcagttc attcaa 16

<210> 4109

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4109

ttgcctcagt tcattc 16

<210> 4110

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4110

atttgcctca gttcat 16

<210> 4111

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4111

aaatttgcct cagttc 16

<210> 4112

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4112

tttaaatttg cctcag 16

<210> 4113

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4113

cttttaaatt tgcctc 16

<210> 4114

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4114

gccttttaaa tttgcc 16

<210> 4115

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4115

gtttaaatta ttgcct 16

<210> 4116

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4116

atgaggttaa tgttta 16

<210> 4117

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4117

gaatgaggtt aatgtt 16

<210> 4118

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4118

tggaatgagg ttaatg 16

<210> 4119

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4119

cttggaatga ggttaa 16

<210> 4120

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4120

aacttggaat gaggtt 16

<210> 4121

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4121

cattaacttg gaatga 16

<210> 4122

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4122

cacattaact tggaat 16

<210> 4123

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4123

accacattaa cttgga 16

<210> 4124

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4124

ttagaccaca ttaact 16

<210> 4125

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4125

tattagacca cattaa 16

<210> 4126

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4126

attattagac cacatt 16

<210> 4127

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4127

taccagatta ttagac 16

<210> 4128

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4128

aataccagat tattag 16

<210> 4129

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4129

ttaataccag attatt 16

<210> 4130

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4130

atttaatacc agatta 16

<210> 4131

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4131

ggatttaata ccagat 16

<210> 4132

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4132

aaggatttaa taccag 16

<210> 4133

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4133

ttaaggattt aatacc 16

<210> 4134

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4134

ctcttaagga tttaat 16

<210> 4135

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4135

ttctcttaag gattta 16

<210> 4136

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4136

gctttctctt aaggat 16

<210> 4137

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4137

aagctttctc ttaagg 16

<210> 4138

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4138

tcaagctttc tcttaa 16

<210> 4139

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4139

agtgacttta agataa 16

<210> 4140

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4140

acagtgactt taagat 16

<210> 4141

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4141

agacagtgac tttaag 16

<210> 4142

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4142

aaatagacag tgactt 16

<210> 4143

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4143

ttaaatagac agtgac 16

<210> 4144

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4144

tcttaaatag acagtg 16

<210> 4145

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4145

aatcttaaat agacag 16

<210> 4146

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4146

ttaatcttaa atagac 16

<210> 4147

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4147

gtttaatctt aaatag 16

<210> 4148

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4148

gtatgtttaa tcttaa 16

<210> 4149

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4149

attgtatgtt taatct 16

<210> 4150

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4150

gtgattgtat gtttaa 16

<210> 4151

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4151

tatgtgattg tatgtt 16

<210> 4152

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4152

gttatgtgat tgtatg 16

<210> 4153

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4153

aggttatgtg attgta 16

<210> 4154

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4154

taaggttatg tgattg 16

<210> 4155

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4155

tttaaggtta tgtgat 16

<210> 4156

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4156

tctttaaggt tatgtg 16

<210> 4157

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4157

attctttaag gttatg 16

<210> 4158

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4158

gtattcttta aggtta 16

<210> 4159

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4159

cggtattctt taaggt 16

<210> 4160

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4160

aacggtattc tttaag 16

<210> 4161

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4161

taaacggtat tcttta 16

<210> 4162

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4162

tgtaaacggt attctt 16

<210> 4163

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4163

aatgtaaacg gtattc 16

<210> 4164

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4164

tctggaagca gaccta 16

<210> 4165

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4165

cttctggaag cagacc 16

<210> 4166

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4166

aaataaggta tagtga 16

<210> 4167

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4167

tagtattaag tgttaa 16

<210> 4168

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4168

tcatagtatt aagtgt 16

<210> 4169

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4169

agattccttt acaatt 16

<210> 4170

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4170

acaagattcc tttaca 16

<210> 4171

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4171

ctgacaagat tccttt 16

<210> 4172

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4172

tgtaatctga caagat 16

<210> 4173

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4173

tactgtaatc tgacaa 16

<210> 4174

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4174

tcttactgta atctga 16

<210> 4175

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4175

cattcttact gtaatc 16

<210> 4176

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4176

gttcattctt actgta 16

<210> 4177

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4177

atatgttcat tcttac 16

<210> 4178

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4178

gccacaaata tgttca 16

<210> 4179

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4179

gatgccacaa atatgt 16

<210> 4180

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4180

ctttaactcg atgcca 16

<210> 4181

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4181

aaactttaac tcgatg 16

<210> 4182

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4182

tataaacttt aactcg 16

<210> 4183

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4183

cacagcatat ttaggg 16

<210> 4184

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4184

tagaatcaca gcatat 16

<210> 4185

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4185

tattagaatc acagca 16

<210> 4186

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4186

aatgtattag aatcac 16

<210> 4187

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4187

acgaatgtat tagaat 16

<210> 4188

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4188

tacacgaatg tattag 16

<210> 4189

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4189

acctacacga atgtat 16

<210> 4190

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4190

aaaacctaca cgaatg 16

<210> 4191

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4191

ttgaaaacct acacga 16

<210> 4192

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4192

tacttgaaaa cctaca 16

<210> 4193

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4193

gtttatttct acttga 16

<210> 4194

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4194

gaggtttatt tctact 16

<210> 4195

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4195

tacgaggttt atttct 16

<210> 4196

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4196

tgttacgagg tttatt 16

<210> 4197

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4197

acttgttacg aggttt 16

<210> 4198

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4198

cagtaacttg ttacga 16

<210> 4199

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4199

gttcagtaac ttgtta 16

<210> 4200

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4200

tcaggctgtt taaacg 16

<210> 4201

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4201

ttgtcaggct gtttaa 16

<210> 4202

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4202

tatacatgct tgtcag 16

<210> 4203

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4203

gtctttgttt attgaa 16

<210> 4204

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4204

tgggtctttg tttatt 16

<210> 4205

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4205

gactgggtct ttgttt 16

<210> 4206

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4206

ataatttagg gactgg 16

<210> 4207

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4207

tctataattt agggac 16

<210> 4208

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4208

cgataaacat gcaaga 16

<210> 4209

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4209

tgtcgataaa catgca 16

<210> 4210

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4210

tgatgtcgat aaacat 16

<210> 4211

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4211

ttgtgatgtc gataaa 16

<210> 4212

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4212

ctgttgtgat gtcgat 16

<210> 4213

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4213

gatctgttgt gatgtc 16

<210> 4214

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4214

agggatctgt tgtgat 16

<210> 4215

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4215

tttagggatc tgttgt 16

<210> 4216

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4216

ggatttaggg atctgt 16

<210> 4217

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4217

gatttaggga tttagg 16

<210> 4218

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4218

tctttaggga tttagg 16

<210> 4219

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4219

taatctttag ggattt 16

<210> 4220

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4220

atctaatctt taggga 16

<210> 4221

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4221

tgtatctaat ctttag 16

<210> 4222

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4222

aaatttgtat ctaatc 16

<210> 4223

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4223

gtaaaaaatt tgtatc 16

<210> 4224

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4224

gtggtaaaaa atttgt 16

<210> 4225

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4225

gatactgtgg taaaaa 16

<210> 4226

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4226

agtgatactg tggtaa 16

<210> 4227

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4227

acaagtgata ctgtgg 16

<210> 4228

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4228

ctgacaagtg atactg 16

<210> 4229

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4229

attctgacaa gtgata 16

<210> 4230

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4230

taaattctga caagtg 16

<210> 4231

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4231

tactggcagt tttaaa 16

<210> 4232

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4232

tcttactggc agtttt 16

<210> 4233

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4233

atttcttact ggcagt 16

<210> 4234

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4234

aaaatttctt actggc 16

<210> 4235

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4235

aacaaatggg tttaat 16

<210> 4236

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4236

gaatatttgc aagtct 16

<210> 4237

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4237

tcattggtag aggaat 16

<210> 4238

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4238

atattttaaa gtctcg 16

<210> 4239

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4239

gttacattat tataga 16

<210> 4240

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4240

gtgaaatgtg ttacat 16

<210> 4241

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4241

tcaccagtga aatgtg 16

<210> 4242

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4242

catgtttcac cagtga 16

<210> 4243

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4243

acaagacatg tttcac 16

<210> 4244

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4244

catatgacaa gacatg 16

<210> 4245

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4245

ctataatgca tatgac 16

<210> 4246

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4246

tcctttctat aatgca 16

<210> 4247

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4247

tgattatcct ttctat 16

<210> 4248

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4248

taactgaaag tctgat 16

<210> 4249

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4249

gtgcacaaaa atgtta 16

<210> 4250

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4250

agctatgtgc acaaaa 16

<210> 4251

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4251

gaagatagct atgtgc 16

<210> 4252

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4252

tttattgaag atagct 16

<210> 4253

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4253

tcattttagt gtatct 16

<210> 4254

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4254

ccttgatcat tttagt 16

<210> 4255

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4255

tgaatccctt gatcat 16

<210> 4256

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4256

gttgtttagt cttgaa 16

<210> 4257

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4257

aattgagttg tttagt 16

<210> 4258

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4258

gcaactaatt gagttg 16

<210> 4259

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4259

attggtgcaa ctaatt 16

<210> 4260

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4260

gttttttatt ggtgca 16

<210> 4261

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4261

ggacactgac agtttt 16

<210> 4262

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4262

caggttggac actgac 16

<210> 4263

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4263

taagtacagg ttggac 16

<210> 4264

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4264

agttattaag tacagg 16

<210> 4265

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4265

tctgtgagtt attaag 16

<210> 4266

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4266

accaaaattc tcctga 16

<210> 4267

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4267

acctgaataa ccctct 16

<210> 4268

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4268

ggtatcagaa aaagat 16

<210> 4269

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4269

agtattggta tcagaa 16

<210> 4270

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4270

ggaagatact ttgaag 16

<210> 4271

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4271

aatgtgggaa gatact 16

<210> 4272

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4272

cagataatag ctaata 16

<210> 4273

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4273

tcattgcaga taatag 16

<210> 4274

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4274

gattcggatt tttaaa 16

<210> 4275

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4275

atttgggatt cggatt 16

<210> 4276

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4276

acgcttattt gggatt 16

<210> 4277

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4277

tctagagaga aaacgc 16

<210> 4278

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4278

agttaagagg ttttcg 16

<210> 4279

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4279

cattatagtt aagagg 16

<210> 4280

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4280

cactttcatt atagtt 16

<210> 4281

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4281

tagaatgaac actttc 16

<210> 4282

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4282

ttgaactaga atgaac 16

<210> 4283

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4283

acctgattga actaga 16

<210> 4284

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4284

taaaatacct gattga 16

<210> 4285

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4285

tagaggtaaa atacct 16

<210> 4286

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4286

gaagattaga ggtaaa 16

<210> 4287

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4287

tctgaggaag attaga 16

<210> 4288

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4288

tatacactac caaaaa 16

<210> 4289

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4289

ataatctata cactac 16

<210> 4290

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4290

taagtcccaa ttttaa 16

<210> 4291

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4291

ccagttttaa ataatc 16

<210> 4292

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4292

tgtatcccag ttttaa 16

<210> 4293

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4293

gttttagatg catgta 16

<210> 4294

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4294

tacagtgttt tagatg 16

<210> 4295

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4295

ttccccgtaa gtttat 16

<210> 4296

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4296

ctgtatttcc ccgtaa 16

<210> 4297

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4297

tagttactgt tactgt 16

<210> 4298

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4298

cgtatgtagt tactgt 16

<210> 4299

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4299

aatgggtaca gactcg 16

<210> 4300

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4300

gcaatttaat gggtac 16

<210> 4301

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4301

gatagatatg caattt 16

<210> 4302

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4302

aaaggagata gatatg 16

<210> 4303

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4303

cctcctaaag gagata 16

<210> 4304

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4304

caccagcctc ctaaag 16

<210> 4305

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4305

tttgtgatcc caagta 16

<210> 4306

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4306

gctttgtgat cccaag 16

<210> 4307

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4307

ttgctttgtg atccca 16

<210> 4308

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4308

ttttgctttg tgatcc 16

<210> 4309

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4309

ccttttgctt tgtgat 16

<210> 4310

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4310

gtccttttgc tttgtg 16

<210> 4311

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4311

gtgtcctttt gctttg 16

<210> 4312

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4312

gaagtgtcct tttgct 16

<210> 4313

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4313

ttgaagtgtc cttttg 16

<210> 4314

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4314

agttgaagtg tccttt 16

<210> 4315

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4315

acagttgaag tgtcct 16

<210> 4316

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4316

ggacagttga agtgtc 16

<210> 4317

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4317

ctggacagtt gaagtg 16

<210> 4318

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4318

ctctggacag ttgaag 16

<210> 4319

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4319

ccctctggac agttga 16

<210> 4320

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4320

aaccctctgg acagtt 16

<210> 4321

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4321

ataaccctct ggacag 16

<210> 4322

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4322

gaataaccct ctggac 16

<210> 4323

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4323

ctgaataacc ctctgg 16

<210> 4324

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4324

tcctgaataa ccctct 16

<210> 4325

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4325

cctcctgaat aaccct 16

<210> 4326

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4326

accaccagcc tcctga 16

<210> 4327

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4327

atgccaccac cagcct 16

<210> 4328

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4328

tcatgccacc accagc 16

<210> 4329

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4329

catcatgcca ccacca 16

<210> 4330

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4330

cactcatcat gccacc 16

<210> 4331

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4331

tccacactca tcatgc 16

<210> 4332

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4332

tctccacact catcat 16

<210> 4333

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4333

tttctccaca ctcatc 16

<210> 4334

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4334

gttttctcca cactca 16

<210> 4335

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4335

gttgttttct ccacac 16

<210> 4336

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4336

aggttgtttt ctccac 16

<210> 4337

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4337

ttaggttgtt ttctcc 16

<210> 4338

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4338

taccatttag gttgtt 16

<210> 4339

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4339

tttaccattt aggttg 16

<210> 4340

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4340

tatttaccat ttaggt 16

<210> 4341

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4341

ttgttatatt taccat 16

<210> 4342

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4342

gtttgttata tttacc 16

<210> 4343

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4343

cttggtttgt tatatt 16

<210> 4344

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4344

ctcttggttt gttata 16

<210> 4345

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4345

tgctcttggt ttgtta 16

<210> 4346

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4346

tttgctcttg gtttgt 16

<210> 4347

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4347

gattttgctc ttggtt 16

<210> 4348

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4348

cttagatttt gctctt 16

<210> 4349

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4349

ggcttagatt ttgctc 16

<210> 4350

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4350

ctggcttaga ttttgc 16

<210> 4351

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4351

ctctggctta gatttt 16

<210> 4352

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4352

ctctctggct tagatt 16

<210> 4353

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4353

tcctctctgg cttaga 16

<210> 4354

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4354

tctcctctct ggctta 16

<210> 4355

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4355

taatcctctt ctcctc 16

<210> 4356

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4356

gataatcctc ttctcc 16

<210> 4357

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4357

aagataatcc tcttct 16

<210> 4358

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4358

ccaagataat cctctt 16

<210> 4359

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4359

ttccaagata atcctc 16

<210> 4360

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4360

acttccaaga taatcc 16

<210> 4361

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4361

agacttccaa gataat 16

<210> 4362

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4362

tgagacttcc aagata 16

<210> 4363

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4363

tttgagactt ccaaga 16

<210> 4364

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4364

attttgagac ttccaa 16

<210> 4365

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4365

ttccattttg agactt 16

<210> 4366

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4366

ccttccattt tgagac 16

<210> 4367

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4367

aaccttccat tttgag 16

<210> 4368

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4368

ataaccttcc attttg 16

<210> 4369

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4369

gtataacctt ccattt 16

<210> 4370

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4370

gagtataacc ttccat 16

<210> 4371

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4371

tatagagtat aacctt 16

<210> 4372

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4372

tttatagagt ataacc 16

<210> 4373

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4373

gattttatag agtata 16

<210> 4374

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4374

ttgattttat agagta 16

<210> 4375

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4375

ggttgatttt atagag 16

<210> 4376

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4376

ttggttgatt ttatag 16

<210> 4377

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4377

taatgtttaa attattgcct 20

<210> 4378

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4378

ggttaatgtt taaattattg 20

<210> 4379

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4379

aggttaatgt ttaaattatt 20

<210> 4380

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4380

gaggttaatg tttaaattat 20

<210> 4381

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4381

tgaggttaat gtttaaatta 20

<210> 4382

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4382

aatgaggtta atgtttaaat 20

<210> 4383

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4383

gaatgaggtt aatgtttaaa 20

<210> 4384

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4384

ggaatgaggt taatgtttaa 20

<210> 4385

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4385

tggaatgagg ttaatgttta 20

<210> 4386

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4386

ttggaatgag gttaatgttt 20

<210> 4387

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4387

cttggaatga ggttaatgtt 20

<210> 4388

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4388

taacttggaa tgaggttaat 20

<210> 4389

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4389

ttaacttgga atgaggttaa 20

<210> 4390

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4390

attaacttgg aatgaggtta 20

<210> 4391

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4391

cattaacttg gaatgaggtt 20

<210> 4392

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4392

acattaactt ggaatgaggt 20

<210> 4393

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4393

accacattaa cttggaatga 20

<210> 4394

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4394

gaccacatta acttggaatg 20

<210> 4395

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4395

agaccacatt aacttggaat 20

<210> 4396

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4396

tagaccacat taacttggaa 20

<210> 4397

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4397

ttagaccaca ttaacttgga 20

<210> 4398

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4398

attagaccac attaacttgg 20

<210> 4399

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4399

tattagacca cattaacttg 20

<210> 4400

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4400

ttattagacc acattaactt 20

<210> 4401

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4401

attattagac cacattaact 20

<210> 4402

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4402

gattattaga ccacattaac 20

<210> 4403

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4403

aataccagat tattagacca 20

<210> 4404

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4404

taataccaga ttattagacc 20

<210> 4405

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4405

tttaatacca gattattaga 20

<210> 4406

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4406

atttaatacc agattattag 20

<210> 4407

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4407

gatttaatac cagattatta 20

<210> 4408

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4408

taaggattta ataccagatt 20

<210> 4409

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4409

tttctcttaa ggatttaata 20

<210> 4410

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4410

ctttctctta aggatttaat 20

<210> 4411

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4411

agctttctct taaggattta 20

<210> 4412

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4412

aagctttctc ttaaggattt 20

<210> 4413

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4413

tcaagctttc tcttaaggat 20

<210> 4414

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4414

ttctcaagct ttctcttaag 20

<210> 4415

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4415

tttctcaagc tttctcttaa 20

<210> 4416

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4416

tctatttctc aagctttctc 20

<210> 4417

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4417

atctatttct caagctttct 20

<210> 4418

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4418

aatctatttc tcaagctttc 20

<210> 4419

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4419

aaatctattt ctcaagcttt 20

<210> 4420

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4420

aaaatctatt tctcaagctt 20

<210> 4421

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4421

gataaaaaaa atctatttct 20

<210> 4422

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4422

tagacagtga ctttaagata 20

<210> 4423

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4423

atagacagtg actttaagat 20

<210> 4424

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4424

aatagacagt gactttaaga 20

<210> 4425

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4425

aaatagacag tgactttaag 20

<210> 4426

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4426

taaatagaca gtgactttaa 20

<210> 4427

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4427

ttaaatagac agtgacttta 20

<210> 4428

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4428

cttaaataga cagtgacttt 20

<210> 4429

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4429

tcttaaatag acagtgactt 20

<210> 4430

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4430

atcttaaata gacagtgact 20

<210> 4431

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4431

aatcttaaat agacagtgac 20

<210> 4432

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4432

taatcttaaa tagacagtga 20

<210> 4433

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4433

ttaatcttaa atagacagtg 20

<210> 4434

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4434

tttaatctta aatagacagt 20

<210> 4435

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4435

gtttaatctt aaatagacag 20

<210> 4436

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4436

tgtttaatct taaatagaca 20

<210> 4437

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4437

atgtttaatc ttaaatagac 20

<210> 4438

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4438

ttgtatgttt aatcttaaat 20

<210> 4439

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4439

attgtatgtt taatcttaaa 20

<210> 4440

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4440

gattgtatgt ttaatcttaa 20

<210> 4441

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4441

tgattgtatg tttaatctta 20

<210> 4442

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4442

tatgtgattg tatgtttaat 20

<210> 4443

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4443

gttatgtgat tgtatgttta 20

<210> 4444

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4444

taaggttatg tgattgtatg 20

<210> 4445

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4445

ttaaggttat gtgattgtat 20

<210> 4446

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4446

ttctttaagg ttatgtgatt 20

<210> 4447

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4447

gaaatgtaaa cggtat 16

<210> 4448

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4448

ttgagaaatg taaacg 16

<210> 4449

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4449

tgattgagaa atgtaa 16

<210> 4450

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4450

tttgattgag aaatgt 16

<210> 4451

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4451

aagaattttg attgag 16

<210> 4452

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4452

ataagaattt tgattg 16

<210> 4453

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4453

caaatagtat tataag 16

<210> 4454

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4454

cccacatcac aaaatt 16

<210> 4455

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4455

gattcccaca tcacaa 16

<210> 4456

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4456

ttgattccca catcac 16

<210> 4457

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4457

aattgattcc cacatc 16

<210> 4458

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4458

aaaattgatt cccaca 16

<210> 4459

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4459

ctaaaattga ttccca 16

<210> 4460

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4460

catctaaaat tgattc 16

<210> 4461

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4461

accatctaaa attgat 16

<210> 4462

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4462

tgaccatcta aaattg 16

<210> 4463

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4463

tgtgaccatc taaaat 16

<210> 4464

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4464

attgtgacca tctaaa 16

<210> 4465

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4465

agattgtgac catcta 16

<210> 4466

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4466

ctagattgtg accatc 16

<210> 4467

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4467

atctagattg tgacca 16

<210> 4468

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4468

taatctagat tgtgac 16

<210> 4469

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4469

tataatctag attgtg 16

<210> 4470

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4470

attataatct agattg 16

<210> 4471

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4471

tgattataat ctagat 16

<210> 4472

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4472

attgattata atctag 16

<210> 4473

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4473

ctattgatta taatct 16

<210> 4474

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4474

acctattgat tataat 16

<210> 4475

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4475

tcacctattg attata 16

<210> 4476

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4476

gttcacctat tgatta 16

<210> 4477

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4477

aagttcacct attgat 16

<210> 4478

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4478

ataagttcac ctattg 16

<210> 4479

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4479

taataagttc acctat 16

<210> 4480

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4480

tttaataagt tcacct 16

<210> 4481

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4481

tatttaataa gttcac 16

<210> 4482

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4482

gttatttaat aagttc 16

<210> 4483

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4483

catatgatgc ctttta 16

<210> 4484

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4484

tattagctca tatgat 16

<210> 4485

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4485

gatattagct catatg 16

<210> 4486

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4486

gtgatattag ctcata 16

<210> 4487

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4487

agttgtgata ttagct 16

<210> 4488

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4488

aaagttgtga tattag 16

<210> 4489

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4489

ggaaagttgt gatatt 16

<210> 4490

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4490

tgggaaagtt gtgata 16

<210> 4491

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4491

aaactgggaa agttgt 16

<210> 4492

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4492

ttaaactggg aaagtt 16

<210> 4493

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4493

gttttttaaa ctggga 16

<210> 4494

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4494

tagtttttta aactgg 16

<210> 4495

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4495

gagtactagt ttttta 16

<210> 4496

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4496

aagagtacta gttttt 16

<210> 4497

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4497

acaagagtac tagttt 16

<210> 4498

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4498

taacaagagt actagt 16

<210> 4499

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4499

tttaacaaga gtacta 16

<210> 4500

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4500

gttttaacaa gagtac 16

<210> 4501

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4501

gagttttaac aagagt 16

<210> 4502

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4502

tagagtttta acaaga 16

<210> 4503

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4503

gtttagagtt ttaaca 16

<210> 4504

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4504

caagtttaga gtttta 16

<210> 4505

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4505

gtcaagttta gagttt 16

<210> 4506

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4506

tagtcaagtt tagagt 16

<210> 4507

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4507

tttagtcaag tttaga 16

<210> 4508

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4508

tatttagtca agttta 16

<210> 4509

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4509

tgtatttagt caagtt 16

<210> 4510

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4510

tctgtattta gtcaag 16

<210> 4511

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4511

cctctgtatt tagtca 16

<210> 4512

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4512

gtcctctgta tttagt 16

<210> 4513

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4513

cagtcctctg tattta 16

<210> 4514

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4514

accagtcctc tgtatt 16

<210> 4515

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4515

ttaccagtcc tctgta 16

<210> 4516

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4516

aattaccagt cctctg 16

<210> 4517

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4517

acaattacca gtcctc 16

<210> 4518

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4518

gcaaattttc agtgtt 16

<210> 4519

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4519

cgatttgtaa ttttca 16

<210> 4520

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4520

tttaaccgat ttgtaa 16

<210> 4521

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4521

gtataattta accgat 16

<210> 4522

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4522

ctagattgta taattt 16

<210> 4523

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4523

agtgttctag attgta 16

<210> 4524

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4524

tgacatagtg ttctag 16

<210> 4525

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4525

gtgtaatgac atagtg 16

<210> 4526

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4526

acaatagtgt aatgac 16

<210> 4527

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4527

gtaatttaca atagtg 16

<210> 4528

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4528

ccttcagtaa tttaca 16

<210> 4529

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4529

tacttacctt cagtaa 16

<210> 4530

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4530

ctggagaata gtttta 16

<210> 4531

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4531

ttaaacactg gagaat 16

<210> 4532

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4532

gcccagcata ttttca 16

<210> 4533

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4533

gaaaaagccc agcata 16

<210> 4534

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4534

gattttctga acttca 16

<210> 4535

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4535

gtactatctc taaaat 16

<210> 4536

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4536

taaattgtac tatctc 16

<210> 4537

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4537

cacatatttt tgtcct 16

<210> 4538

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4538

ctttcaaata gcacat 16

<210> 4539

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4539

gtatgcttct ttcaaa 16

<210> 4540

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4540

ccccttgtat gcttct 16

<210> 4541

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4541

ttccttcccc ttgtat 16

<210> 4542

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4542

tggcaattcc ttcccc 16

<210> 4543

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4543

gaatattggc aattcc 16

<210> 4544

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4544

ctaataatgg atttga 16

<210> 4545

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4545

ctatcataat ctaaat 16

<210> 4546

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4546

gtaacactat cataat 16

<210> 4547

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4547

aatttcctgt aacact 16

<210> 4548

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4548

aagttgcttt cctctt 16

<210> 4549

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4549

ggttataagt tgcttt 16

<210> 4550

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4550

taggttggtt ataagt 16

<210> 4551

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4551

agagagtagg ttggtt 16

<210> 4552

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4552

ggatatagag agtagg 16

<210> 4553

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4553

aagtctggat atagag 16

<210> 4554

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4554

ctacaaaagt ctggat 16

<210> 4555

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4555

cttacctgat tttcta 16

<210> 4556

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4556

tactgactta cctgat 16

<210> 4557

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4557

ccattaaaat actgac 16

<210> 4558

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4558

ggacatacca ttaaaa 16

<210> 4559

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4559

aagatgggac atacca 16

<210> 4560

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4560

gtgtgaaaga tgggac 16

<210> 4561

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4561

agacctgtgt gaaaga 16

<210> 4562

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4562

ttttacagac ctgtgt 16

<210> 4563

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4563

cagtgttttt acagac 16

<210> 4564

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4564

taggattcag tgtttt 16

<210> 4565

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4565

gttaaagctt gtaaat 16

<210> 4566

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4566

gatccagtta aagctt 16

<210> 4567

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4567

actcatgatc cagtta 16

<210> 4568

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4568

aattttactc atgatc 16

<210> 4569

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4569

tgtgataatt ttactc 16

<210> 4570

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4570

tgctgatgtg ataatt 16

<210> 4571

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4571

gcaattttaa cagtta 16

<210> 4572

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4572

gagcctgcaa ttttaa 16

<210> 4573

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4573

tagcttcaga gcctgc 16

<210> 4574

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4574

gtttattagc ttcaga 16

<210> 4575

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4575

caggtagttt attagc 16

<210> 4576

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4576

taaatgcagg tagttt 16

<210> 4577

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4577

atggtttaaa tgcagg 16

<210> 4578

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4578

tagagccatg gtttaa 16

<210> 4579

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4579

tcacacaaag ttttag 16

<210> 4580

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4580

gtgaagtaat ttattc 16

<210> 4581

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4581

actgagagat aaaggg 16

<210> 4582

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4582

gtatatgtga ggaaac 16

<210> 4583

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4583

tttgtagtat atgtga 16

<210> 4584

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4584

attatctttg tagtat 16

<210> 4585

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4585

ataagttctg ttatta 16

<210> 4586

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4586

aatcctataa gttctg 16

<210> 4587

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4587

ctgctatgaa ttaatt 16

<210> 4588

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4588

cattggctgc tatgaa 16

<210> 4589

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4589

agatgacatt ggctgc 16

<210> 4590

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4590

ttagtaagat gacatt 16

<210> 4591

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4591

gatctaattt gaattt 16

<210> 4592

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4592

ttgagcaaag agaaac 16

<210> 4593

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4593

gaatgttgac ctttaa 16

<210> 4594

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4594

attgttgaat gttgac 16

<210> 4595

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4595

ttaattacat tgttga 16

<210> 4596

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4596

ttgtagatta attaca 16

<210> 4597

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4597

tttacattgt agatta 16

<210> 4598

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4598

cagatgttta cattgt 16

<210> 4599

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4599

cttcaccaga tgttta 16

<210> 4600

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4600

agtgcttccc tctgtc 16

<210> 4601

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4601

taaacaagtg cttccc 16

<210> 4602

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4602

tagctttttt ctaaac 16

<210> 4603

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4603

ctgacatagc tttttt 16

<210> 4604

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4604

aatacatgga ttctga 16

<210> 4605

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4605

tattagaata catgga 16

<210> 4606

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4606

gtactgcata ttagaa 16

<210> 4607

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4607

actattgtac tgcata 16

<210> 4608

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4608

ttttaaacta ttgtac 16

<210> 4609

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4609

gagagtatta ttaata 16

<210> 4610

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4610

ctgtttgaga gtatta 16

<210> 4611

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4611

gaatagctgt ttgaga 16

<210> 4612

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4612

aatcctcttg aatagc 16

<210> 4613

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4613

tttttgaatc ctcttg 16

<210> 4614

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4614

gagtttatat tatgtt 16

<210> 4615

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4615

gtttctctga gtttat 16

<210> 4616

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4616

ttaccagttt ctctga 16

<210> 4617

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4617

gattttgttt accagt 16

<210> 4618

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4618

gttttatatc tcttga 16

<210> 4619

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4619

ttggtaataa tatttg 16

<210> 4620

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4620

tggaaattgg taataa 16

<210> 4621

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4621

gtttagtgga aattgg 16

<210> 4622

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4622

atgtttgttt agtgga 16

<210> 4623

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4623

ctaacattat gtttgt 16

<210> 4624

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4624

gcactactaa cattat 16

<210> 4625

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4625

ttagcagcac tactaa 16

<210> 4626

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4626

ttgataaaaa accttt 16

<210> 4627

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4627

caaaagtagt tgataa 16

<210> 4628

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4628

ggaaaccaaa agtagt 16

<210> 4629

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4629

gaaagtatgg aaacca 16

<210> 4630

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4630

acatcataag aaggaa 16

<210> 4631

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4631

tcatagtaaa agatat 16

<210> 4632

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4632

tcatttaatc atagta 16

<210> 4633

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4633

gcaggttcat ttaatc 16

<210> 4634

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4634

gtaacatttt gctttg 16

<210> 4635

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4635

atattactat agtaac 16

<210> 4636

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4636

caatgtatat tactat 16

<210> 4637

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4637

tagacacaat gtatat 16

<210> 4638

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4638

ggtttcttca cacatt 16

<210> 4639

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4639

ctcagaaatt cattgt 16

<210> 4640

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4640

cttcttccaa ctcaga 16

<210> 4641

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4641

ctaactcttc ttccaa 16

<210> 4642

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4642

aatgatctaa ctcttc 16

<210> 4643

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4643

gaaagttaaa tgatct 16

<210> 4644

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4644

atcttaaagt tactta 16

<210> 4645

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4645

tatgtgatct taaagt 16

<210> 4646

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4646

agtaactatg tgatct 16

<210> 4647

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4647

ctactaagta actatg 16

<210> 4648

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4648

tcttttctac taagta 16

<210> 4649

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4649

tattactctt ttctac 16

<210> 4650

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4650

gctgggtatt actctt 16

<210> 4651

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4651

taaagtttgc ttgctg 16

<210> 4652

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4652

ctattgtaaa gtttgc 16

<210> 4653

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4653

aaggatctat tgtaaa 16

<210> 4654

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4654

cttatttaaa aggatc 16

<210> 4655

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4655

taggacctta tttaaa 16

<210> 4656

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4656

atttcctagg acctta 16

<210> 4657

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4657

catgaatgat atttcc 16

<210> 4658

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4658

tgctggcatg aatgat 16

<210> 4659

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4659

ttttgatgct ggcatg 16

<210> 4660

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4660

ttagtttttt gatgct 16

<210> 4661

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4661

gcattattag tgttag 16

<210> 4662

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4662

tatcttgcat tattag 16

<210> 4663

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4663

atataatatc ttgcat 16

<210> 4664

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4664

cattgacagt aagaaa 16

<210> 4665

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4665

agtttttctc attgac 16

<210> 4666

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4666

atggatatct cttaac 16

<210> 4667

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4667

tatttgatgg atatct 16

<210> 4668

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4668

acattgtatt tgatgg 16

<210> 4669

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4669

gttgatacat tgtatt 16

<210> 4670

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4670

gtttaggttg atacat 16

<210> 4671

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4671

catccagttt aggttg 16

<210> 4672

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4672

ccccagcatc cagttt 16

<210> 4673

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4673

aaagaacccc agcatc 16

<210> 4674

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4674

gtgtaaaaag aacccc 16

<210> 4675

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4675

tatagggtgt aaaaag 16

<210> 4676

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4676

aggtatgtct tttata 16

<210> 4677

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4677

agtccatatt tgtatt 16

<210> 4678

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4678

taatcaagtc catatt 16

<210> 4679

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4679

atctaataat caagtc 16

<210> 4680

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4680

ccttctatat tatcta 16

<210> 4681

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4681

taataaacct tctata 16

<210> 4682

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4682

gatcacatct aagaaa 16

<210> 4683

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4683

taccatgatc acatct 16

<210> 4684

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4684

ctgcaatacc atgatc 16

<210> 4685

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4685

gttctccttt aaaact 16

<210> 4686

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4686

gagattgttc tccttt 16

<210> 4687

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4687

aaacaggaga ttgttc 16

<210> 4688

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4688

tctcttaaac aggaga 16

<210> 4689

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4689

catgtatctc ttaaac 16

<210> 4690

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4690

cgtaaatatt tcagca 16

<210> 4691

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4691

taactccgta aatatt 16

<210> 4692

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4692

gacctttaac tccgta 16

<210> 4693

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4693

tccagtgacc tttaac 16

<210> 4694

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4694

caccagtctg gagtcc 16

<210> 4695

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4695

ttctatcacc agtctg 16

<210> 4696

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4696

atcttaccaa actatt 16

<210> 4697

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4697

agaatcatct taccaa 16

<210> 4698

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4698

gaatgtaaga atcatc 16

<210> 4699

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4699

gtgttattta agaatg 16

<210> 4700

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4700

gtttatgtta aagcat 16

<210> 4701

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4701

agtaatgttt atgtta 16

<210> 4702

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4702

gtagcatttt ttcagt 16

<210> 4703

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4703

gcaaatgtag catttt 16

<210> 4704

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4704

gttgtggcaa atgtag 16

<210> 4705

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4705

tatgaagttg tggcaa 16

<210> 4706

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4706

gatttcactt gacatt 16

<210> 4707

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4707

gcttgagatt tcactt 16

<210> 4708

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4708

tttggagctt gagatt 16

<210> 4709

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4709

aatatctttg gagctt 16

<210> 4710

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4710

aggaataata tctttg 16

<210> 4711

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4711

atttagtaat aggaat 16

<210> 4712

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4712

catcagattt agtaat 16

<210> 4713

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4713

gttattacat cagatt 16

<210> 4714

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4714

gcctagaatc aataaa 16

<210> 4715

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4715

aggaatgcct agaatc 16

<210> 4716

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4716

ttcagcagga atgcct 16

<210> 4717

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4717

ttacctgata taacat 16

<210> 4718

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4718

caggttttac ctgata 16

<210> 4719

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4719

cttagacagg ttttac 16

<210> 4720

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4720

attctcctta gacagg 16

<210> 4721

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4721

ctgtctattc tcctta 16

<210> 4722

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4722

taactactgt ctattc 16

<210> 4723

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4723

ttgaactaac tactgt 16

<210> 4724

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4724

agtaagttga actaac 16

<210> 4725

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4725

gtaatgagta agttga 16

<210> 4726

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4726

taatcttcct aatacg 16

<210> 4727

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4727

accaggttaa tcttcc 16

<210> 4728

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4728

atgataacca ggttaa 16

<210> 4729

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4729

cgaatactca tatata 16

<210> 4730

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4730

tttatacgaa tactca 16

<210> 4731

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4731

attatattta tacgaa 16

<210> 4732

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4732

ggtaaaagta ttatat 16

<210> 4733

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4733

gagaatattg agtaaa 16

<210> 4734

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4734

cagattattt tagagg 16

<210> 4735

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4735

tcacttcaga ttattt 16

<210> 4736

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4736

taatagtcac ttcaga 16

<210> 4737

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4737

tattgataat agtcac 16

<210> 4738

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4738

tactatttgt aatcaa 16

<210> 4739

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4739

cttgcttatt ttacta 16

<210> 4740

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4740

catctgttat tttatc 16

<210> 4741

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4741

atgtgctttt tggatt 16

<210> 4742

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4742

ggatttttgt atgtgc 16

<210> 4743

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4743

catcattcat ggattt 16

<210> 4744

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4744

cttagacatc attcat 16

<210> 4745

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4745

tgagtactta gacatc 16

<210> 4746

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4746

tataagtgag tactta 16

<210> 4747

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4747

ctactttata agtgag 16

<210> 4748

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4748

tgaatgtctt ctactt 16

<210> 4749

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4749

tataataatg aatgtc 16

<210> 4750

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4750

gtactgagca tttaaa 16

<210> 4751

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4751

caaatagtac tgagca 16

<210> 4752

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4752

aatggtcaaa tagtac 16

<210> 4753

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4753

gtagtttgaa tacaaa 16

<210> 4754

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4754

tcactggtag tttgaa 16

<210> 4755

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4755

taggtagggc tttcac 16

<210> 4756

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4756

accttctagg tagggc 16

<210> 4757

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4757

gagtatacct tctagg 16

<210> 4758

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4758

atcactgagt atacct 16

<210> 4759

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4759

aaacttatca ctgagt 16

<210> 4760

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4760

gctacaaaac ttatca 16

<210> 4761

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4761

tttggagcta caaaac 16

<210> 4762

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4762

agaagatttg gagcta 16

<210> 4763

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4763

actattagaa gatttg 16

<210> 4764

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4764

acactcacta ttagaa 16

<210> 4765

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4765

agccttttat tttggg 16

<210> 4766

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4766

cctgtcagcc ttttat 16

<210> 4767

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4767

gacttacctg tcagcc 16

<210> 4768

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4768

attctcgact tacctg 16

<210> 4769

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4769

gtgagtattc tcgact 16

<210> 4770

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4770

aattaagtga gtattc 16

<210> 4771

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4771

taccagaatt aagtga 16

<210> 4772

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4772

gctttcttac cagaat 16

<210> 4773

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4773

tgggttgctt tcttac 16

<210> 4774

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4774

tacaagtaca aatggg 16

<210> 4775

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4775

ggtaaataca agtaca 16

<210> 4776

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4776

attgctggta aataca 16

<210> 4777

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4777

ttaaggattg ctggta 16

<210> 4778

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4778

gcttcatttt aaggat 16

<210> 4779

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4779

gtaggaagct tcattt 16

<210> 4780

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4780

gagttagtag gaagct 16

<210> 4781

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4781

gctattgagt tagtag 16

<210> 4782

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4782

cttattgcta ttgagt 16

<210> 4783

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4783

tattgtctta ttgcta 16

<210> 4784

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4784

attcactatt gtctta 16

<210> 4785

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4785

atcacaatcc ttttta 16

<210> 4786

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4786

ttcttcatca caatcc 16

<210> 4787

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4787

agattgttct tcatca 16

<210> 4788

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4788

tataaataga ttgttc 16

<210> 4789

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4789

ggttcttaat aacttt 16

<210> 4790

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4790

aagcatggtt cttaat 16

<210> 4791

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4791

ctttgtagaa aaagac 16

<210> 4792

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4792

tatgctttct ttgtag 16

<210> 4793

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4793

cttaatgtat gctttc 16

<210> 4794

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4794

gtatttgctt aatgta 16

<210> 4795

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4795

cctttggtat ttgctt 16

<210> 4796

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4796

acctggcctt tggtat 16

<210> 4797

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4797

atgtaaacct ggcctt 16

<210> 4798

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4798

cttcaaatgt aaacct 16

<210> 4799

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4799

gtaataataa tgtcac 16

<210> 4800

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4800

agacttgagt aataat 16

<210> 4801

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4801

tcctagagac ttgagt 16

<210> 4802

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4802

aagtattcct agagac 16

<210> 4803

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4803

tgtgttaagt attcct 16

<210> 4804

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4804

aagagatgtg ttaagt 16

<210> 4805

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4805

ccatatacag tcaaga 16

<210> 4806

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4806

taacatccat atacag 16

<210> 4807

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4807

ctatttatta acatcc 16

<210> 4808

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4808

tgtcagctat ttatta 16

<210> 4809

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4809

ctttactgtc agctat 16

<210> 4810

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4810

gataaacttt actgtc 16

<210> 4811

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4811

ctttatatgg ataaac 16

<210> 4812

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4812

gcaagtcttt atatgg 16

<210> 4813

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4813

ctgggtatta ctcttttcta 20

<210> 4814

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4814

cttgctgggt attactcttt 20

<210> 4815

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4815

tgcttgctgg gtattactct 20

<210> 4816

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4816

catgaatgat atttcctagg 20

<210> 4817

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4817

ggcatgaatg atatttccta 20

<210> 4818

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4818

ctggcatgaa tgatatttcc 20

<210> 4819

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4819

tgctggcatg aatgatattt 20

<210> 4820

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4820

aagtccatat ttgtatttct 20

<210> 4821

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4821

gcaaatgtag cattttttca 20

<210> 4822

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4822

ggcaaatgta gcattttttc 20

<210> 4823

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4823

ctggtccttt taacttccaa 20

<210> 4824

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4824

cctggtcctt ttaacttcca 20

<210> 4825

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4825

ttcctggtcc ttttaacttc 20

<210> 4826

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4826

tgcttaatgt atgctttctt 20

<210> 4827

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4827

ccgtaagttt atcttccttt 20

<210> 4828

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4828

ccccgtaagt ttatcttcct 20

<210> 4829

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4829

cacaaatatg ttcattctta 20

<210> 4830

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4830

aaactttaac tcgatgccac 20

<210> 4831

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4831

ataaacttta actcgatgcc 20

<210> 4832

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4832

atgcttgtca ggctgtttaa 20

<210> 4833

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4833

gtcaccatat aacttgggca 20

<210> 4834

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4834

aggtcaccat ataacttggg 20

<210> 4835

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4835

gctgggtatt actcttt 17

<210> 4836

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4836

gcatgaatga tatttcc 17

<210> 4837

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4837

ggcaaatgta gcatttt 17

<210> 4838

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4838

ctggtccttt taacttc 17

<210> 4839

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4839

gtaagtttat cttcctt 17

<210> 4840

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4840

actttaactc gatgcca 17

<210> 4841

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4841

aactttaact cgatgcc 17

<210> 4842

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4842

aaactttaac tcgatgc 17

<210> 4843

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4843

caccatataa cttgggc 17

<210> 4844

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4844

tcaccatata acttggg 17

<210> 4845

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4845

gtcaccatat aacttgg 17

<210> 4846

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4846

cttgattttg gctctggaga 20

<210> 4847

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4847

tgattttggc tctggag 17

<210> 4848

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4848

actggtttgc agcgata 17

<210> 4849

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4849

tttcactggt ttgcagcgat 20

<210> 4850

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4850

cactggtttg cagcgat 17

<210> 4851

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4851

tcactggttt gcagcga 17

<210> 4852

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4852

ttcttggtgc tcttggc 17

<210> 4853

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4853

gttcttggtg ctcttgg 17

<210> 4854

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4854

ttgtctttcc agtcttccaa 20

<210> 4855

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4855

tgttgtcttt ccagtcttcc 20

<210> 4856

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4856

cattgccagt aatcgca 17

<210> 4857

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4857

acattgccag taatcgc 17

<210> 4858

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4858

gacattgcca gtaatcg 17

<210> 4859

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4859

ctttgtgatc ccaagtagaa 20

<210> 4860

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4860

ttgtgatccc aagtaga 17

<210> 4861

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4861

tgctttgtga tcccaagtag 20

<210> 4862

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4862

tttgtgatcc caagtag 17

<210> 4863

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4863

ctttgtgatc ccaagta 17

<210> 4864

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4864

cacactcatc atgccac 17

<210> 4865

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4865

gttgttttct ccacactcat 20

<210> 4866

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4866

agattttgct cttggtt 17

<210> 4867

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4867

tagattttgc tcttggt 17

<210> 4868

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4868

ttagattttg ctcttgg 17

<210> 4869

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4869

cttagatttt gctcttg 17

<210> 4870

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4870

agattattag accacat 17

<210> 4871

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4871

cagattatta gaccaca 17

<210> 4872

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4872

accagattat tagacca 17

<210> 4873

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4873

acatactctg tgctgac 17

<210> 4874

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4874

ttacacatac tctgtgctga 20

<210> 4875

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4875

cttagtagtc atctcca 17

<210> 4876

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4876

acttagtagt catctcc 17

<210> 4877

<211> 17

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4877

gacttagtag tcatctc 17

<210> 4878

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4878

agcttcttgt ccagctttat 20

<210> 4879

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4879

agcttcttgt ccagctttat a 21

<210> 4880

<211> 14

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4880

tcagtcatga cttc 14

<210> 4881

<211> 15

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4881

tcagtcatga cttca 15

<210> 4882

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4882

gctgattaga gagaggtccc 20

<210> 4883

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4883

tcccatttca ggagacctgg 20

<210> 4884

<211> 15

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4884

atcagtcatg acttc 15

<210> 4885

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4885

cggtgcaagg cttaggaatt 20

<210> 4886

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4886

gcttcagtca tgacttcctt 20

<210> 4887

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4887

gcttcagtca tgacttcctt a 21

<210> 4888

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4888

agcttcagtc atgacttcct t 21

<210> 4889

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4889

tggtaatcca ctttcagagg 20

<210> 4890

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4890

tggtaatcca ctttcagagg a 21

<210> 4891

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4891

tgcttcagtc atgacttcct t 21

<210> 4892

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4892

cactgatttt tgcccaggat 20

<210> 4893

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4893

cactgatttt tgcccaggat a 21

<210> 4894

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4894

aagcttcttg tccagcttta t 21

<210> 4895

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4895

acccaattca gaaggaagga 20

<210> 4896

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4896

acccaattca gaaggaagga a 21

<210> 4897

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4897

aacccaattc agaaggaagg a 21

<210> 4898

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4898

atggtaatcc actttcagag g 21

<210> 4899

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4899

tcttggttac atgaaatccc 20

<210> 4900

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4900

tcttggttac atgaaatccc a 21

<210> 4901

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4901

attcactttc ataatgctgg 20

<210> 4902

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4902

attcactttc ataatgctgg a 21

<210> 4903

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4903

tgctccgttg gtgcttgttc 20

<210> 4904

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4904

atcttggtta catgaaatcc c 21

<210> 4905

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4905

atgcatggtg atgcttctga 20

<210> 4906

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4906

cagctttatt agggacagca 20

<210> 4907

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4907

cagctttatt agggacagca a 21

<210> 4908

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4908

acagctttat tagggacagc a 21

<210> 4909

<211> 16

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4909

ttcagtcatg acttcc 16

<210> 4910

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<220>

<221> misc_feature

<222> (1)..(5)

<223> Основания в указанных положениях представляют собой РНК

<220>

<221> misc_feature

<222> (16)..(20)

<223> Основания в указанных положениях представляют собой РНК

<400> 4910

gcuucagtca tgactuccuu 20

<210> 4911

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4911

tgctccgttg gtgcttgttc a 21

<210> 4912

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4912

ggacattgcc agtaatcgca a 21

<210> 4913

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4913

aggacattgc cagtaatcgc a 21

<210> 4914

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Синтетический олигонуклеотид

<400> 4914

gacatgttct tcacctcctc 20

<---

Группа изобретений относится к соединениям и композициям, которые представляют собой специфический ингибитор ANGPTL3, а также к способу для снижения экспрессии мРНК и белка ANGPTL3 у животного. Предложенные антисмысловые соединения, обладают улучшенной активностью в клетках печени in vivo. Такие способы, соединения и композиции подходят для лечения, предупреждения, отсрочки или облегчения любого одного или более из сердечно-сосудистого заболевания и/или метаболического заболевания или его симптома у индивидуума, нуждающегося в этом. 7 н. и 23 з.п. ф-лы, 239 табл., 133 пр.

1. Соединение для снижения экспрессии ангиопоэтин-подобного (ANGPTL3) белка 3 или его фармацевтически приемлемая соль, содержащее модифицированный олигонуклеотид и группу конъюгата, причем модифицированный олигонуклеотид состоит из 20 связанных нуклеозидов и имеет последовательность азотистых оснований, содержащую 20 смежных азотистых оснований, комплементарную равной по длине части азотистых оснований 1140- 1159 SEQ ID NO: 1, при этом последовательность азотистых оснований модифицированного олигонуклеотида по меньшей мере на 80% комплементарна SEQ ID NO: 1 по результатам измерения по всей длине модифицированного олигонуклеотида, при этом группа конъюгата содержит:

,

и где модифицированный олигонуклеотид содержит:

сегмент гэп, состоящий из десяти связанных дезоксинуклеозидов; сегмент 5'-крыла, состоящий из пяти связанных нуклеозидов;

сегмент 3'-крыла, состоящий из пяти связанных нуклеозидов;

при этом сегмент гэп расположен между сегментом 5'-крыла и сегментом 3'-крыла, причем каждый нуклеозид каждого сегмента крыла содержит 2'-O-метоксиэтильный сахар; при этом по меньшей мере одна межнуклеозидная связь представляет собой тиофосфатную связь и причем каждый остаток цитозина представляет собой 5-метилцитозин.

2. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, отличающееся тем, что последовательность азотистых оснований модифицированного олигонуклеотида по меньшей мере на 85%, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 95% или на 100% комплементарна SEQ ID NO: 1 по результатам измерения по всей длине модифицированного олигонуклеотида.

3. Соединение по п. 1 или его фармацевтически приемлемая соль, отличающееся тем, что модифицированный олигонуклеотид состоит из 20 связанных нуклеозидов с последовательностью азотистых оснований SEQ ID NO: 77.

4. Соединение по любому из пп. 1-3 или его фармацевтически приемлемая соль, отличающееся тем, что модифицированный олигонуклеотид является одноцепочечным.

5. Соединение по любому из пп. 1-3 или его фармацевтически приемлемая соль, отличающееся тем, что модифицированный олигонуклеотид является двухцепочечным.

6. Соединение по любому из пп. 1-5 или его фармацевтически приемлемая соль, отличающееся тем, что модифицированный олигонуклеотид содержит по меньшей мере одну фосфодиэфирную межнуклеозидную связь.

7. Соединение по любому из пп. 1-5 или его фармацевтически приемлемая соль, отличающееся тем, что каждая межнуклеозидная связь модифицированного олигонуклеотида выбрана из фосфодиэфирной межнуклеозидной связи и тиофосфатной межнуклеозидной связи.

8. Соединение по любому из пп. 1-5 или его фармацевтически приемлемая соль, отличающееся тем, что каждая межнуклеозидная связь модифицированного олигонуклеотида представляет собой тиофосфатную межнуклеозидную связь.

9. Соединение по любому из пп. 1-8 или его фармацевтически приемлемая соль, отличающееся тем, что группа конъюгата связана с модифицированным олигонуклеотидом на 5'-конце модифицированного олигонуклеотида.

10. Соединение по любому из пп. 1-8 или его фармацевтически приемлемая соль, отличающееся тем, что группа конъюгата связана с модифицированным олигонуклеотидом на 3'-конце модифицированного олигонуклеотида.

11. Соединение по п. 1, отличающееся тем, что последовательность азотистых оснований модифицированного олигонуклеотида представляет собой G_esG_eoA_eo^mC_eoA_eoT_dsT_dsG_ds^mC_ds^mC_dsA_dsG_dsT_dsA_dsA_dsT_eo^mC_eoG_es^mC_esA_e (SEQ ID NO: 77), где ^mС означает 5-метилцитозин; «е» означает 2'-О-метоксиэтил модифицированный нуклеозид; «d» означает β-D-2'-дезоксирибонуклеозид; «s» означает тиофосфатную межнуклеозидную связь (PS); «о» означает фосфодиэфирную межнуклеозидную связь.

12. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль, характеризующееся следующей формулой:

.

13. Соединение по любому из пп. 1-12, отличающееся тем, что соединение представлено в форме натриевой соли.

14. Соединение по любому из пп. 1-12, отличающееся тем, что соединение представлено в форме калиевой соли.

15. Фармацевтическая композиция для лечения, предупреждения или замедления прогрессирования заболевания, связанного с повышенным ANGPTL3, содержащая терапевтически эффективное количество соединения по п. 1 или его фармацевтически приемлемую соль и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель.

16. Фармацевтическая композиция по п. 15, отличающаяся тем, что соединение представлено в форме натриевой соли.

17. Фармацевтическая композиция по п. 15, отличающаяся тем, что соединение представлено в форме калиевой соли.

18. Фармацевтическая композиция для лечения, предупреждения или замедления прогрессирования заболевания, связанного с повышенным ANGPTL3, содержащая терапевтически эффективное количество соединения по п. 12 или его фармацевтически приемлемую соль и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель.

19. Фармацевтическая композиция по п. 18, отличающаяся тем, что соединение представлено в форме натриевой соли.

20. Фармацевтическая композиция по п. 18, отличающаяся тем, что соединение представлено в форме калиевой соли.

21. Способ для лечения, предупреждения или замедления прогрессирования заболевания, связанного с повышенным ANGPTL3, включающий введение животному терапевтически эффективного количества соединения или композиции по любому из пп. 1-20.

22. Способ по п. 21, отличающийся тем, что животное представляет собой человека.

23. Способ по п. 21, отличающийся тем, что введение соединения обеспечивает предупреждение, лечение, облегчение или замедление прогрессирования сердечно-сосудистого и/или метаболического заболевания.

24. Способ по п. 23, включающий совместное введение соединения или композиции и второго терапевтического агента.

25. Способ по п. 24, отличающийся тем, что указанное соединение или композицию и второй терапевтический агент вводят одновременно.

26. Способ по п. 21, отличающийся тем, что введение является парентеральным.

27. Способ по п. 21, отличающийся тем, что введение является подкожным.

28. Способ лечения человека с сердечно-сосудистым и/или метаболическим заболеванием, связанным с повышенным ANGPTL3, включающий идентификацию человека с сердечнососудистым и/или метаболическим заболеванием и введение человеку терапевтически эффективного количества соединения или композиции по любому из пп. 1-20 для лечения человека от сердечно-сосудистого и/или метаболического заболевания.

29. Фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество соединения по любому из пп. 1-14, для применения в лечении, предупреждении или замедлении прогрессирования заболевания, связанного с повышенным ANGPTL3.

30. Фармацевтическая композиция по п. 29, отличающаяся тем, что заболевание представляет собой сердечно-сосудистое и/или метаболическое заболевание, расстройство или состояние.

название	год	авторы	номер документа
КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ МОДУЛИРОВАНИЯ ЭКСПРЕССИИ HBV И TTR	2014	Пракаш Тхажа П. Сет Пунит П. Свейз Эрик Е.	RU2782034C2
МОДУЛЯЦИЯ ЭКСПРЕССИИ ПРЕКАЛЛИКРЕИНА (ПКК)	2014	Фрэйер Сьюзан М. Буй Хуйнх-Хоа	RU2712559C2
МОДУЛЯЦИЯ ЭКСПРЕССИИ ФАКТОРА 11	2014	Фрейер Сьюзан М. Мония Бретт П. Чжан Хун Чжао Чэньгуан Кросби Джеффри Р. Сивковски Эндрю М.	RU2739594C2
КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ МОДУЛЯЦИИ ЭКСПРЕССИИ C90RF72	2014	Фрэйер Сьюзан М. Риго Фрэнк Сингх Прийям	RU2748426C2
СОЕДИНЕНИЕ ДЛЯ МОДУЛЯЦИИ ЭКСПРЕССИИ ГЕНА C9ORF72 И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ	2013	Беннетт Франк С. Фрайер Сьюзан М. Свэйзи Эрик Е. Риго Франк	RU2730677C2
КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ МОДУЛИРОВАНИЯ ЭКСПРЕССИИ ТАУ-БЕЛКА	2014	Кордашевич Холли Свэйз Эрик Э. Фрайер Сьюзан М. Буи Хунх-Хоа	RU2735551C2
КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ МОДУЛИРОВАНИЯ ЭКСПРЕССИИ TAU	2014	Риго Фрэнк Беннетт С. Фрэнк	RU2745324C2
КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ МОДУЛИРОВАНИЯ ЭКСПРЕССИИ ТАУ-БЕЛКА	2014	Кордашевич, Холли Свэйз, Эрик, Э. Фрайер, Сьюзан, М. Буи, Хунх-Хоа	RU2823361C1
КОНЪЮГАТЫ И ИХ ПОЛУЧЕНИЕ И ПРИМЕНЕНИЕ	2018	Чжан, Хунъянь Ян, Чживэй Цао, Лицян Вань, Лянъи	RU2795400C2
СПОСОБЫ И КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ МОДУЛИРОВАНИЯ ЭКСПРЕССИИ АПОЛИПОПРОТЕИНА (А)	2013	Крук Розанна М. Грэхэм Марк Дж. Фрайер Сюзан М.	RU2748495C2

WO 2012177784 A2, 27.12.2012
WO 2011085271 A2, 14.07.2011
KALLANTHOTTATHIL R
"Conjugation Strategies for In Vivo siRNA Delivery", 8TH ANNUAL MEETING OF THE OLIGONUCLEOITDE THERAPEUTICS SOCIETY, 29 October 2012, pages 1-30, Найденов в Интернет URL: http://www.alnylam.com/web/assets/ALNY-OTS-Conjugate-Oct2012.pdf
Способ приготовления мыла	1923	Петров Г.С. Таланцев З.М.	SU2004A1

КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ МОДУЛИРОВАНИЯ ЭКСПРЕССИИ АНГИОПОЭТИН-ПОДОБНОГО БЕЛКА 3 Российский патент 2020 года по МПК C07H21/02 C07H21/04 A61K31/713 C12N15/113 A61P3/00 A61P9/00

Описание патента на изобретение RU2734658C2

Похожие патенты RU2734658C2

Реферат патента 2020 года КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ МОДУЛИРОВАНИЯ ЭКСПРЕССИИ АНГИОПОЭТИН-ПОДОБНОГО БЕЛКА 3

Формула изобретения RU 2 734 658 C2

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2020 года RU2734658C2

RU 2 734 658 C2