6-АРИЛ-4-МОРФОЛИН-1-ИЛПИРИДОНЫ, ПРИГОДНЫЕ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ РАКА ИЛИ ДИАБЕТА Российский патент 2021 года по МПК C07D413/04 C07D413/14 A61K31/5377 A61P35/00 A61P3/00 

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

В настоящем изобретении предложены новые соединения 6-арил или 6-гетероарил-4-морфолин-4-ил-пиридин-2-онов формулы (I), фармацевтические композиции, содержащие такие соединения, и способы применения таких соединений для лечения заболеваний, включая рак и диабет.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Ферменты, принадлежащие к семейству фосфатидилинозитидных 3-киназ (PI3K), являются регуляторами нескольких важных клеточных событий. Семейство состоит из трех классов: I, II и III, и в то время как группа I класса была интересной лекарственной мишенью в течение многих лет, классы II и III развивались в меньшей степени. PI3K Класса III, сортировщик вакуольных белков 34 (Vps34, PIK3C3) образует гетеродимер с его регуляторной субъединицей р150 (Vps15), и этот димер участвует в нескольких комплексах, регулирующих везикулярные перемещения, такие как аутофагия, эндоцитоз, экзоцитоз и микропиноцитоз (Amaravadi et al. Clinic Cancer Res., 2011, 17: 654-666; Carpentier et al., 2013, Traffic). Фермент отвечает за фосфорилирование фосфатидилинозитола (PI) до фосфатидилинозитол-(3)-фосфата (PI3P). Связывание лиганда с доменами РХ и FYVE приводит к рекрутингу и делокализации этих эффекторных белков, которые приводят к образованию, удлинению и движению везикул (Backer et al., J Biochem., 2008, 410: 1-17).

Аутофагия - это катаболический процесс, в котором клеточные компоненты подвергаются деградации путем их включения в везикулы с двойной мембраной, аутофагосомы, которые сливаются с лизосомами, содержащими протеазу. Этот процесс является средством для клетки обрабатывать поврежденные органеллы и белки с неправильным фолдингом, и тем самым поддерживать функционирование клеток. Указанный путь также является способом рециркуляции клеточного содержимого в новые строительные блоки (Boya et al, Nat Cell Biol 2013, 15; 713-720). Аутофагия является клеточным ответом на стрессовые условия, такие как лишение питательных веществ, ацидоз и гипоксия, а также и на лечение лекарственными средствами. Таким образом, ингибирование аутофагии является средством для усиления лекарственного действия средств от рака и регенерации лекарственно-устойчивых опухолей (Nagelkerke et al., Semin Cancer Biol 2014, 31; 99-105). Большинство распространенных опухолей демонстрируют высокую регуляцию аутофагического потока (Leone et al., Trends in Endocrin Metab, 2013, 24, 209-217). Установленным маркером для изучения аутофагического потока является обнаружение аутофагической области в виде липидированного белка LC3 на аутофагосоме. Ингибирование Vps34 приводит к ингибированию аутофагии, измеряемому перераспределением LC3 в области (Dowdle et al., Nat Cell Biol 2014, 16; 1069-79).

Как недавно было описано, абляция регуляторной субъединицы р150 приводит к повышенной чувствительности к инсулину in vivo из-за недостаточной интернализации инсулиновых рецепторов (Nemazanyy, Nature Commun., 2015, 6: 8283). Киназная смертельная гетерозиготная модель животных подтверждает этот результат с повышенной толерантностью к глюкозе и повышенной чувствительностью к инсулину (WO 2120176501).

Нескольким состояниям заболеваний может быть полезно ингибирование Vps34, включая рак, воспалительные заболевания, нейродегенеративные расстройства, сердечно-сосудистые заболевания, диабет и вирусные инфекции (Rubinsztein et al., Nat Rev 2012, 11, 709-730). Виды рака, которые выиграют от ингибирования Vps34, включают, без ограничения, тройной отрицательный рак молочной железы, рак поджелудочной железы, лейкемию, меланому и рак легких. Таким образом, существует потребность в новых и мощных ингибиторах Vps34.

Ранее раскрывались документы, описывающие ингибиторы Vps34 для применения при заболеваниях, включая WO 2015150555; WO 2015150557; WO 2015108861; WO 2015108881; WO 2012085815; WO 2012085244; WO 2013190510; Farkas, J. Biol. Chem., 2011 286(45) 38904-12.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Объектом настоящего изобретения является получение новых и ильных ингибиторов Vps34. Другим объектом настоящего изобретения является получение новых и сильных ингибиторов Vps34, которые могут применяться для лечения рака и других заболеваний, таких как диабет.

В соответствии с одним аспектом изобретения, предложено соединение формулы (I)

где

R¹ представляет собой арил или гетероарил, указанный арил и указанный гетероарил являются моно- или бициклическими и возможно замещены одним или более R⁵, R⁶, R⁷ и R⁸;

R², R³ и R⁴ независимо выбраны из водорода, С₁-С₃галоалкила и С₁-С₃алкила;

R⁵, R⁶, R⁷ и R⁸ независимо выбраны из галогена, С₁-С₆алкила, С₁-С₆алкокси, C₁-С₆галоалкила, амино, -NHSO₂R⁹, гидрокси, фенила и моноциклического гетероарила;

R⁹ представляет собой C₁-С₃галоалкил или C₁-С₃алкил;

и его фармацевтически приемлемые соли, таутомеры и стереоизомеры.

В одном воплощении этого аспекта, R⁴ представляет собой C₁-С₃алкил.

В одном воплощении этого аспекта, R² выбран из водорода и метила.

В одном воплощении этого аспекта, R³ представляет собой водород.

В одном воплощении этого аспекта, R⁴ представляет собой метил.

В одном воплощении этого аспекта, R² представляет собой водород.

В одном воплощении этого аспекта, R¹ выбран из фенила, фурила, тиенила, пиридила, пиримидинила, нафтила, хинолинила, индазолила, индолила, 4-азаиндолила, бензоксазолила, бензимидазолила, бензотиофенила, каждый возможно замещен одним или более R⁵, R⁶, R⁷ и R⁸.

В одном воплощении этого аспекта, R⁵, R⁶, R⁷ и R⁸ независимо выбраны из хлора, фтора C₁-С₃алкила, С₁-С₃фторалкила, фенила, амино, -NHSO₂CH₃, гидрокси, имидазолила и пиразолила.

В одном воплощении этого аспекта, R¹ выбран из фенила, фурила, тиенила, пиридила, пиримидинил, нафтила, хинолинила, индазолила, индолила, 4-азаиндолила, бензоксазолила, бензимидазолила, бензотиофенила, каждый возможно замещен одним или более R⁵, R⁶, R⁷ и R⁸; и

R⁵, R⁶, R⁷ и R⁸ независимо выбраны из галогена, С₁-С₃алкила, С₁-С₃галоалкила, фенила, амино, -NHSO₂CH₃, гидрокси, имидазолила и пиразолила.

В одном воплощении этого аспекта, R¹ выбран из фенила, фурила, тиенила, пиридила, пиримидинил и хинолинила.

В одном воплощении этого аспекта, R⁵ и R⁶ независимо выбраны из хлора, фтора, трифторметила, метила, фенила, -NHSO₂CH₃ и пиразолила.

В одном воплощении этого аспекта, R¹ выбран из фенила, фурила, тиенила, пиридила, пиримидинил и хинолинила.

В одном воплощении этого аспекта, R¹ выбран из фенила, фурила, тиенила, пиридила, пиримидинила и хинолинила, каждый возможно замещен R⁵ и/или R⁶; и R⁵ и R⁶ независимо выбраны из хлора, фтора, трифторметила, метила, фенила, -NHSO₂CH₃ и пиразолила.

В одном воплощении этого аспекта, R¹ выбран из

где R⁵ и R⁶ независимо выбраны из галогена, C₁-С₃алкила, C₁-С₃галоалкила, фенила, пиразолила, и -NHSO₂CH₃.

В одном воплощении этого аспекта, R¹ представляет собой моноциклический арил или гетероарил.

В одном воплощении этого аспекта, R¹ выбран из фенила и пиридила.

В одном воплощении этого аспекта, R⁵ и R⁶ независимо выбраны из хлора, фтора и трифторметила, например, хлора и трифторметила.

В одном воплощении этого аспекта, R¹ выбран из фенила и пиридила, каждый возможно замещен R⁵ и/или R⁶; и R⁵ и R⁶ независимо выбраны из хлора, фтора и трифторметила.

В одном воплощении этого аспекта, R¹ выбран из

В одном воплощении этого аспекта, R¹ выбран из

R⁴ представляет собой C₁-С₃алкил; и R⁵ и R⁶ независимо выбраны из хлора, фтора и трифторметила.

В одном воплощении этого аспекта, R¹ выбран из

В одном воплощении этого аспекта, R¹ выбран из

R² представляет собой водород; и

R⁵ выбран из хлора и трифторметила.

В одном воплощении этого аспекта, R¹ выбран из

R² представляет собой водород;

R⁴ представляет собой C₁-С₃алкил; и

R⁵ и R⁶ независимо выбраны из хлора, фтора и трифторметила.

В одном воплощении этого аспекта, R¹ выбран из

R² представляет собой водород или метил;

R³ представляет собой водород;

R⁴ представляет собой метил;

R⁵ и R⁶ выбраны из хлора, фтора трифторметила, метила, фенила, пиразолила и -NHSO₂CH₃; и

его фармацевтически приемлемые соли и стереоизомеры.

В одном воплощении этого аспекта, указанное соединение выбрано из:

6-(2-хлорфенил)-4-морфолино-1Н-пиридин-2-он;

6-(2-хлорфенил)-1-метил-4-морфолино-пиридин-2-он;

6-(2-хлорфенил)-4-(3-метилморфолин-4-ил)-1Н-пиридин-2-он;

6-(2-хлорфенил)-1-метил-4-(3-метилморфолин-4-ил)пиридин-2-он;

4-(3-метилморфолин-4-ил)-6-(4-метил-3-пиридил)-1Н-пиридин-2-он;

4-(3-метилморфолин-4-ил)-6-пиримидин-5-ил-1Н-пиридин-2-он;

4-(3-метилморфолин-4-ил)-6-(2-фенилфенил)-1Н-пиридин-2-он;

6-(2-хлор-5-фтор-фенил)-4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-1Н-пиридин-2-он;

4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-6-(о-толил)-1Н-пиридин-2-он;

4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-6-[2-(трифторметил)-3-пиридил]-1Н-пиридин-2-он;

6-(2-хлорфенил)-4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-1Н-пиридин-2-он;

4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-6-[2-(трифторметил)фенил]-1Н-пиридин-2-он;

6-(3-фурил)-4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-1Н-пиридин-2-он;

4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-6-(4-метил-3-тиенил)-1Н-пиридин-2-он;

N-[2-[4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-6-оксо-1Н-пиридин-2-ил]фенил]метансульфонамид;

4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-6-(6-метил-5-хинолил)-1Н-пиридин-2-он;

4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-6-[4-(1Н-пиразол-5-ил)фенил]-1Н-пиридин-2-он; и его фармацевтически приемлемые соли, таутомеры и стереоизомеры.

В соответствии с одним аспектом изобретения, предложено соединение формулы (I)

где

R¹ представляет собой арил или гетероарил, указанный арил и указанный гетероарил являются моно- или бициклическими и возможно замещены одним или более R⁵, R⁶, R⁷ и R⁸;

R², R³ и R⁴ независимо выбраны из водорода, C₁-С₃галоалкила и C₁-С₃алкила;

R⁵, R⁶, R⁷ и R⁸ независимо выбраны из галогена, С₁-С₆алкила, С₁-С₆алкокси, С₁-С₆галоалкила, амино, гидрокси, фенила и моноциклического гетероарила; и его фармацевтически приемлемые соли, таутомеры и стереоизомеры.

В одном воплощении этого аспекта, R⁴ представляет собой С₁-С₃алкил.

В одном воплощении этого аспекта, R² выбран из водорода и метила.

В одном воплощении этого аспекта, R³ представляет собой водород.

В одном воплощении этого аспекта, R⁴ представляет собой метил.

В одном воплощении этого аспекта, R² представляет собой водород.

В одном воплощении этого аспекта, R¹ выбран из фенила, фурила, тиенила, пиридила, и пиримидинила, нафтила, хинолинила, индазолила, индолила, 4-азаиндолила, бензоксазолила, бензимидазолила, бензотиофенила, каждый возможно замещен одним или более R⁵, R⁶, R⁷ и R⁸; a R⁵, R⁶, R⁷ и R⁸ независимо выбраны из хлора, фтора метил, трифторметила, фенила, амино, гидрокси, имидазолила и пиразолила.

В одном воплощении этого аспекта, R¹ представляет собой моноциклический арил или гетероарил.

В одном воплощении этого аспекта, где R¹ выбран из фенила, фурила, тиенила, пиридила, и пиримидинила, каждый возможно замещен одним или более R⁵ и R⁶; a R⁵ и R⁶ независимо выбраны из хлора, фтора С₁-С₃фторалкила, С₁-С₃алкила и фенила.

В одном воплощении этого аспекта, R¹ представляет собой фенил или 3-пиридил, каждый замещен R⁵ и/или R⁶.

В одном воплощении этого аспекта, R¹ выбран из

где R⁵ и R⁶ независимо выбраны из галогена, C₁-С₃алкила, С₁-С₃галоалкила и фенила.

В одном воплощении этого аспекта, R⁵ и R⁶ независимо выбраны из хлора, фтора, трифторметила и метила.

В одном воплощении этого аспекта, R¹ выбран из

R² представляет собой водород или метил;

R³ представляет собой водород;

R⁴ представляет собой водород или метил;

R⁵ и R⁶ выбраны из хлора, фтора трифторметила, метила и фенила; и его фармацевтически приемлемые соли и стереоизомеры.

В одном воплощении этого аспекта, предложено соединение формулы (I), указанное соединение выбрано из:

6-(2-хлорфенил)-4-морфолино-1Н-пиридин-2-он;

6-(2-хлорфенил)-1-метил-4-морфолино-пиридин-2-он;

6-(2-хлорфенил)-4-(3-метилморфолин-4-ил)-1Н-пиридин-2-он;

6-(2-хлорфенил)-1-метил-4-(3-метилморфолин-4-ил)пиридин-2-он;

4-(3-метилморфолин-4-ил)-6-(4-метил-3-пиридил)-1Н-пиридин-2-он;

4-(3-метилморфолин-4-ил)-6-пиримидин-5-ил-1Н-пиридин-2-он;

4-(3-метилморфолин-4-ил)-6-(2-фенилфенил)-1Н-пиридин-2-он;

6-(2-хлор-5-фтор-фенил)-4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-1Н-пиридин-2-он;

4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-6-(о-толил)-1Н-пиридин-2-он;

4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-6-[2-(трифторметил)-3-пиридил]-1Н-пиридин-2-он;

6-(2-хлорфенил)-4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-1Н-пиридин-2-он;

4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-6-[2-(трифторметил)фенил]-1Н-пиридин-2-он;

6-(3-фурил)-4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-1Н-пиридин-2-он;

4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-6-(4-метил-3-тиенил)-1Н-пиридин-2-он; и

его фармацевтически приемлемые соли.

В одном аспекте настоящего изобретения предложено соединение в соответствии с настоящим изобретением для применения при лечении или профилактике заболевания.

В одном аспекте настоящего изобретения предложено соединение в соответствии с настоящим изобретением для применения при лечении рака. Как правило, указанный рак выбран из рака молочной железы, например, трижды негативный рак молочной железы, рака поджелудочной железы, лейкемии, меланомы и рака легкого.

В одном аспекте настоящего изобретения предложено соединение в соответствии с настоящим изобретением для применения при лечении диабета. Как правило, указанный диабет представляет собой диабет II типа.

В одном аспекте настоящего изобретения предложено соединение в соответствии с настоящим изобретением для применения при лечении заболевания, выбранного из воспалительных заболеваний, нейродегенеративных заболеваний, сердечно-сосудистых заболеваний и вирусных инфекций.

В одном аспекте настоящего изобретения предложено применение соединения в соответствии с настоящим изобретением для получения лекарственного средства для лечения рака. Обычно указанный рак выбран из рака молочной железы, например, трижды негативный рак молочной железы, рака поджелудочной железы, лейкемии, меланомы и рака легкого.

В одном аспекте настоящего изобретения предложено применение соединения в соответствии с настоящим изобретением для получения лекарственного средства для лечения диабета. Как правило, диабет представляет собой диабет II типа.

В одном аспекте настоящего изобретения предложено применение соединения в соответствии с настоящим изобретением для получения лекарственного средства для лечения заболевания, выбранного из воспалительных заболеваний, нейродегенеративных заболеваний, сердечно-сосудистых заболеваний и вирусных инфекций.

В одном аспекте настоящего изобретения предложен способ лечения рака, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения в соответствии с настоящим изобретением, нуждающемуся в этом пациенту. Как правило, указанный рак выбран из рака молочной железы, например, трижды негативный рак молочной железы, рака поджелудочной железы, лейкемии, меланомы и рака легкого.

В одном аспекте настоящего изобретения предложено соединение в соответствии с настоящим изобретением для применения при лечении рака, где указанное лечение рака также включает лучевую терапию.

В одном аспекте настоящего изобретения предложено способ лечения рака, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения в соответствии с настоящим изобретением, нуждающемуся в этом пациенту в сочетании с лучевой терапией.

Соединения настоящего изобретения могут также применяться при лечении рака в сочетании с лучевой терапией и/или хирургическим вмешательством. Как правило, применение цитотоксических и/или цитостатических агентов в комбинации с соединением или композицией по изобретению будут способствовать:

(1) дают лучшую эффективность в снижении роста опухоли или даже элиминации опухоли по сравнению с введением только одного из агентов,

(2) предусматривают введение меньших количеств вводимых химиотерапевтических агентов,

(3) предусматривают химиотерапевтическое лечение, которое хорошо переносится у пациента с меньшим количеством вредных фармакологических осложнений, чем наблюдается при однокомпонентной химиотерапии и некоторых других комбинированных терапиях,

(4) предусматривают лечение более широкого спектра различных типов рака у млекопитающих, особенно людей,

(5) обеспечивают более высокий уровень ответа среди пациентов,

(6) обеспечивают более длительное время выживания среди пациентов по сравнению со стандартными химиотерапевтическими процедурами,

(7) обеспечивают более длительное время прогрессирования опухоли и/или

(8) дают результаты эффективности и переносимости, по крайней мере, такие же, как и у агентов, используемых отдельно, по сравнению с известными случаями, когда другие комбинации противораковых агентов вызывают антагонистические эффекты.

В одном аспекте изобретения предложен способ лечения диабета, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения в соответствии с настоящим изобретением, нуждающемуся в этом пациенту. Как правило, диабет представляет собой диабет II типа.

В одном аспекте изобретения предложен способ лечения заболевания, выбранного из воспалительных заболеваний, нейродегенеративных заболеваний, средечно-сосудистых заболеваний и вирусных инфекций, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения в соответствии с настоящим изобретением, нуждающемуся в этом пациенту.

В одном аспекте изобретения предложен способ лечения заболевания, выбранного из воспалительных заболеваний, нейродегенеративных заболеваний и вирусных инфекций, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения в соответствии с настоящим изобретением, нуждающемуся в этом пациенту.

В одном аспекте изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение в соответствии с настоящим изобретением, и фармацевтически приемлемый разбавитель, носитель и/или эксципиент.

В одном аспекте изобретения предложена фармацевтическая композиция, включающая терапевтически эффективное количество соединения по настоящему изобретению и другого противоракового агента, выбранного из алкилирующих агентов, антиметаболитов, противораковых производных камптотецина, противораковых агентов, полученных из растений, антибиотиков, ферментов, координационных комплексов платины, ингибиторов тирозинкиназы, гормонов, антагонистов гормонов, моноклональных антител, интерферонов и модификаторов биологического ответа.

Как здесь используется, термин "С₁-С₆алкил" означает как линейные, так и с разветвленной цепью насыщенные углеводородные группы с 1-6 атомами углерода. Примеры С₁-С₆алкильных групп включают метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изо-бутил, втор-бутил, трет-бутил, н-пентил, 4-метил-бутил, н-гексил, 2-этил-бутильные группы. Среди неразветвленных С₁-С₆-алкильных групп типичными являются метил, этил, н-пропил, н-бутил, н-пентил и н-гексильные группы. Среди разветвленных алкильных групп можно назвать изопропил, изо-бутил, втор-бутил, трет-бутил, 4-метилбутил и 2-этил-бутильные группы.

Как здесь используется, термин "С₁-С₃алкил" означает как линейные, так и с разветвленной цепью насыщенные углеводородные группы с 1-3 атомами углерода. Примеры С₁-С₃алкильных групп включают метил, этил, н-пропил и изопропильные группы.

Как здесь используется, термин "С₁-С₆алкокси" означает группу О-алкил, где "С₁-С₆алкил" используется как описано выше. Примеры С₁-С₆алкокси групп включают, без ограничения, метокси, этокси, изопропокси, н-пропокси, н-бутокси, н-гексокси, 3-метил-бутокси группы.

Как здесь используется, термин "С₁-С₆галоалкил" означает как линейные, так и с разветвленной цепью насыщенные углеводородные группы, с 1-6 атомами углерода и с 1 до количества всех водородов заместителями галогена различных или одинаковых. Примеры С₁-С₆галоалкильных групп включают метил, замещенный 1-3 атомами галогена, этил, замещенный 1-5 атомами галогена, н-пропил или изопропил, замещенные 1-7 атомами галогена, н-бутил или изобутил, замещенные 1-9 атомами галогена, и втор-бутильную или трет-бутильную группы, замещенные 1-9 атомами галогена.

Как здесь используется, термин «С₁-С₃галоалкил» означает как линейные, так и с разветвленной цепью насыщенные углеводородные группы с 1-3 атомами углерода и с 1 до всех водородов, замещенных различными или одинаковыми галогенами. Примеры С1-С3галоалкильных групп включают метил, замещенный 1-3 атомами галогена, этил замещенный 1-5 атомами галогена и н-пропил или изопропил, замещенные 1-7 атомами галогена.

Как здесь используется, термин «С1-С3фторалкил» означает как линейные, так и с разветвленной цепью насыщенные углеводородные группы, с 1-3 атомами углерода и с 1 атомом до всех атомов водорода, замещенными атомом фтора. Примеры С1-С3фторалкильных групп включают метил, замещенный 1-3 атомами фтора, этил замещенный 1-5 атомами фтора и н-пропил или изопропил, замещенный 1-7 атомами фтора.

Как здесь используется, термин "галоген" означает фтор, хлор, бром или йод.

Как здесь используется, термин «арил» означает моноциклическую или бициклическую ароматическую карбоциклическую группу. Примеры арильных групп включают фенил и нафтил. Нафтильная группа может быть присоединена через положение 1 или 2. В бициклическом ариле одно из колец может быть частично насыщенным. Примеры таких групп включают инданил и тетрагидронафтил. Как здесь используется, термин «моноциклический арил» означает моноциклическую ароматическую карбоциклическую группу. Примеры моноциклических арильных групп включают фенил.

Как здесь используется, термин «гетероарил» означает моноциклическую или бициклическую ароматическую группу из атомов углерода, где от одного до трех атомов углерода заменены одним или несколькими гетероатомами, независимо выбранными из азота, кислорода или серы. В бициклическом гетероариле одно из колец может быть частично насыщенным. Примеры таких групп включают индолинил, и 1,3-бензодиоксолил.

Как здесь используется, термин «моноциклический гетероарил» означает моноциклическую ароматическую группу из атомов углерода, где от одного до трех атомов углерода заменены одним или несколькими гетероатомами, независимо выбранными из азота, кислорода или серы.

Примеры моноциклических гетероарильных групп включают, без ограничения, фурил, тиенил, пирролил, оксазолил, тиазолил, имидазолил, оксадиазолил, тиадиазолил, пиридил, триазолил, триазинил, пиридазил, изотиазолил, изоксазолил, пиразинил, пиразолил и пиримидинил.

Примеры бициклических гетероарильных групп включают, без ограничения, хиноксалинил, хиназолинил, пиридопиразинил, бензоксазолил, бензотиофенил, бензимидазолил, нафтиридинил, хинолинил, бензофурил, индолил, индазолил, бензотиазолил, пиридопиримидинил и изохинолинил.

В зависимости от заместителей, присутствующих в соединениях формулы (I), соединения могут образовывать соли, которые находятся в пределах объема настоящего изобретения. Соли соединений формулы (I), которые пригодны для применения в медицине, представляют собой соли, в которых противоион является фармацевтически приемлемым.

Подходящие соли согласно настоящему изобретению включают соли, образованные с органическими или неорганическими кислотами или основаниями. В частности, подходящие соли, образованные с кислотами согласно изобретению, включают соли, образованные с минеральными кислотами, сильными органическими карбоновыми кислотами, например алканкарбоновыми кислотами с 1-4 атомами углерода, которые являются незамещенными или замещенными, например, галогеном, например насыщенными или ненасыщенными дикарбоновыми кислотами, например гидроксикарбоновыми кислотами, например аминокислотами или органическими сульфокислотами, например (С1-С4) алкил- или арилсульфоновые кислоты, которые являются незамещенными или замещенными, например, галогеном. К фармацевтически приемлемым кислотно-аддитивным солям относятся соли, образованные из соляной, бромистоводородной, серной, азотной, лимонной, винной, уксусной, фосфорной, молочной, пировиноградной, уксусной, трифторцетатной, янтарной, перхлорной, фумаровой, малеиновой, гликолевой, молочной, салициловой, оксалоуксусной, метансульфоновой, этансульфоновой, п-толуолсульфоновой, муравьиной, бензойной, малоновой, нафталин-2-сульфоновой, бензолсульфоновой, эзэтиновой, аскорбиновой, яблочной, фталевой, аспарагиновой и глутаминовой кислотой, лизином и аргинином.

Фармацевтически приемлемые основные соли включают соли аммония, соли щелочных металлов, например соли калия и натрия, соли щелочноземельных металлов, например соли кальция и магния, и соли с органическими основаниями, например дигексиламином, N-метил-D-глюкамином, морфолином, тиоморфолином, пиперидином, пирролидином, моно-, ди- или три-низшим алкиламином, например этил, трет-бутил, диэтил, диизопропил, триэтил, трибутил или диметилпропиламин, или моно-, ди- или тригидрокси низшим алкиламином, например моно-, ди- или триэтаноламином. Кроме того, могут образовываться соответствующие внутренние соли.

Соединения по настоящему изобретению могут быть использованы в профилактике и/или лечении как таковые или в форме фармацевтической композиции. Несмотря на то, что активный ингредиент можно вводить отдельно, он также может присутствовать в фармацевтической композиции. Соответственно, в изобретении предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I) и фармацевтически приемлемый разбавитель, эксципиент и/или носитель. Фармацевтические композиции по изобретению могут принимать форму фармацевтической композиции, как описано далее.

Примеры композиций для перорального введения включают суспензии, которые могут содержать, например, микрокристаллическую целлюлозу для придания объема, альгиновую кислоту или альгинат натрия в качестве суспендирующего агента, метилцеллюлозу в качестве усилителя вязкости и подсластители или ароматизаторы, такие как известные в данной области; и таблетки немедленного высвобождения, которые могут содержать, например, микрокристаллическую целлюлозу, дикальцийфосфат, крахмал, стеарат магния, сульфат кальция, сорбит, глюкозу и/или лактозу и/или другие эксципиенты, связующие, наполнители, разрыхлители, разбавители и смазывающие вещества, такие как известные в уровне техники. Подходящие связующие включают крахмал, желатин, природные сахара, такие как глюкоза или бета-лактоза, кукурузные подсластители, природные и синтетические смолы, такие как аравийская камедь, трагакант или альгинат натрия, карбоксиметилцеллюлозу, полиэтиленгликоль, воски и т.д. Дезинтеграторы включают, без ограничения, крахмал, метилцеллюлозу, агар, бентонит, ксантановую камедь и т.д. Соединения формулы (I) также могут быть введены через ротовую полость посредством сублингвального и/или буккального введения. Типичные формы, которые можно применять, представляют собой формованные таблетки, прессованные таблетки или лиофилизированные таблетки. Типичные композиции включают композиции, содержащие соединение(я) настоящего изобретения с быстро растворимыми разбавителями, такими как маннит, лактоза, сахароза и/или циклодекстрины. Также в такие композиции могут быть включены высокомолекулярные эксципиенты, такие как целлюлозы (авицел) или полиэтиленгликоли (ПЭГ). Такие композиции могут также включать эксципиент для облегчения адгезии слизистой оболочки, такой как гидроксипропилцеллюлоза (НРС), гидроксипропилметилцеллюлоза (НРМС), карбоксиметилцеллюлоза натрия (SCMC), сополимер малеинового ангидрида (например, Gantrez) и агенты для контроля высвобождения такие как полиакриловый сополимер (например, Carbopol 934). Любриканты, скользящие вещества, ароматизаторы, красители и стабилизаторы также могут быть добавлены для облегчения изготовления и применения. Любриканты, применяемые в этих лекарственных формах, включают олеат натрия, стеарат натрия, стеарат магния, бензоат натрия, ацетат натрия, хлорид натрия и т.д. Для перорального введения в жидкой форме пероральные лекарственные компоненты могут быть объединены с любыми пероральными, нетоксичными, фармацевтически приемлемыми инертными носителями, такими как этанол, глицерин, вода и т.д.

Композиции настоящего изобретения, подходящие для перорального введения, могут быть представлены в виде отдельных единиц, таких как капсулы, сашеты, пилюли или таблетки, каждый из которых содержит заданное количество активного ингредиента; в виде порошка или гранул; в виде раствора или суспензии в водной жидкости или неводной жидкости, например в виде эликсиров, настоек, суспензий или сиропов; или в виде жидкой эмульсии масло-в-воде или жидкой эмульсии вода-в-масле. Активный ингредиент также может быть представлен в виде болюса, электуария или пасты.

Таблетка может быть изготовлена путем прессования или формования, возможно с одним или более вспомогательными ингредиентами. Прессованные таблетки могут быть получены путем прессования в подходящем устройстве активного ингредиента в свободно текучей форме, такой как порошок или гранулы, возможно смешанные со связующим, любрикантом, инертным разбавителем, смазывающим, поверхностно-активным или диспергирующим агентом. Формованные таблетки могут быть изготовлены путем формования в подходящем устройстве смеси порошкообразного соединения, смоченного инертным жидким разбавителем. Таблетки могут быть необязательно покрыты или забиты и могут быть составлены так, чтобы получить медленное или контролируемое высвобождение активного ингредиента. Настоящие соединения могут, например, вводиться в форме, подходящей для немедленного высвобождения или длительного высвобождения. Немедленное высвобождение или пролонгированное высвобождение могут быть достигнуты за счет использования подходящих фармацевтических композиций, содержащих настоящие соединения, или, в частности, в случае длительного высвобождения, с использованием таких устройств, как подкожные имплантаты или осмотические насосы. Настоящие соединения также можно вводить липосомально.

Типичными единичными дозированными формами композиций являются те, которые содержат эффективную дозу, как указано выше, или ее соответствующую фракцию активного ингредиента.

Следует понимать, что в дополнение к ингредиентам, в частности, упомянутым выше, композиции настоящего изобретения могут включать другие агенты, обычные в данной области, имеющие отношение к виду рассматриваемой композиции, например, те, которые подходят для перорального введения, могут включать ароматизаторы.

Композиции могут быть представлены в единичной дозированной форме и могут быть получены любым из способов, хорошо известных в фармацевтике. Способы могут включать стадию приведения активного ингредиента в ассоциацию с носителем, который состоит из одного или нескольких вспомогательных ингредиентов. Композиции могут быть получены путем равномерного и тщательного приведения в ассоциацию активного ингредиента с жидкими носителями или тонкоизмельченными твердыми носителями или обоими, а затем, при необходимости, формованием продукта в желаемую композицию.

Соединения настоящего изобретения могут также вводиться в виде липосомальных систем доставки, например небольших однослойных везикул, больших однослойных везикул и многослойных везикул. Липосомы могут быть образованы из множества фосфолипидов, 1,2-дипальмитоилфосфатидилхолина, фосфатидилэтаноламина (цефалина), фосфатидилсерина, фосфатидилинозитола, дифосфатидилглицерина (кардиолипина) или фосфатидилхолина (лецитина).

Композиции для парентерального введения включают водные и неводные стерильные растворы для инъекций, которые могут содержать антиоксиданты, буферы, бактериостатики и растворенные вещества, которые делают композицию изотоничной с кровью предполагаемого реципиента; а также водные и неводные стерильные суспензии, которые могут включать суспендирующие агенты и загустители. Композиции могут быть представлены в однодозовых или многодозовых контейнерах, например, в герметичных ампулах и флаконах, и могут храниться в лиофилизированном состоянии, требующем только добавления стерильного жидкого носителя, например, солевого раствора или воды для инъекции, непосредственно перед использованием. Приготовленные для немедленного приема инъекционные растворы и суспензии могут быть получены из стерильных порошков, гранул и таблеток, описанных ранее. Типичные композиции для парентерального введения включают инъекционные растворы или суспензии, которые могут содержать, например, подходящие нетоксичные, парентерально приемлемые разбавители или растворители, например полиэтиленгликоль, этанол, 1,3-бутандиол, воду, раствор Рингера, изотонический раствор хлорида натрия, или другие подходящие диспергирующие или смачивающие и суспендирующие агенты, включая синтетические моно- или диглицериды, а также жирные кислоты, включая олеиновую кислоту или кремафор.

Примеры композиций для назального, аэрозольного или ингаляционного введения включают растворы в физиологическом растворе, которые могут содержать, например, бензиловый спирт или другие подходящие консерванты, промоторы абсорбции для повышения биодоступности и/или другие солюбилизирующие или диспергирующие агенты, такие как известные в данной области.

Композиции для ректального введения могут быть представлены в виде суппозитория с обычными носителями, такими как масло какао, синтетические глицеридные эфиры или полиэтиленгликоль. Такие носители как правило твердые при обычных температурах, но сжижаются и/или растворяются в ректальной полости для высвобождения лекарственного средства.

Композиции для местного введения в рот, например, буккально или сублингвально, включают леденцы, содержащие активный ингредиент в ароматизированной основе, такой как сахароза и акация или трагакант, и пастилки, содержащие активный ингредиент в основе, такой как желатин и глицерин или сахароза и аравийская камедь. Примеры композиций для местного введения включают местный носитель, такой как Plastibase (минеральное масло, загущенное полиэтиленом).

Соединения формулы (I) можно вводить в качестве единственного фармацевтического агента или в комбинации с одним или более дополнительных терапевтических агентов, где комбинация не вызывает неприемлемых побочных эффектов. Эта фармацевтическая композиция включает введение единственной фармацевтической дозированной композиции, которая содержит соединение формулы (I) и один или несколько дополнительных терапевтических агентов, а также введение соединения формулы (I) и каждого дополнительного терапевтического агента в его отдельной фармацевтической дозированной композиции, Например, соединение формулы (I) и терапевтический агент могут вводиться пациенту вместе в одной пероральной дозированной композиции, такой как капсула или таблетка, или каждый агент можно вводить в композициях с отдельной дозировкой.

Когда используются отдельные лекарственные композиции, соединение формулы (I) и один или несколько дополнительных терапевтических агентов можно вводить, по существу, в одно и то же время (например, одновременно) или раздельно ступенчато (например, последовательно).

Разумеется, количество активного ингредиента, которое требуется для достижения терапевтического эффекта, зависит от конкретного соединения, пути введения, субъекта, подлежащего лечению, включая тип, вид, возраст, вес, пол и состояние здоровья субъекта и почечной и печеночной функции субъекта, а также конкретного заболевания или заболевания, которое лечится, а также его тяжести. Обычно квалифицированный врач, ветеринар или клиницист может легко определить и назначить эффективное количество лекарственного средства, необходимое для предотвращения, противодействия или остановки прогрессирования заболевания.

Пероральные дозы настоящего изобретения, при применении для указанных показаний будут варьировать между примерно 0,01 мг на кг массы тела в день (мг/кг/день) до примерно 100 мг/кг/день, предпочтительно от 0,01 мг на кг массы тела на день (мг/кг/день) до 10 мг/кг/день и наиболее предпочтительно от 0,1 до 5,0 мг/кг/день для взрослых людей. Для перорального введения композиции могут быть представлены в виде таблеток или других форм представления, представленных в дискретных единицах, содержащих 0,01, 0,05, 0,1, 0,5, 1,0, 2,5, 5,0, 10,0, 15,0, 25,0, 50,0, 100 и 500 мг активного ингредиента для симптоматической корректировки дозы для пациента, подлежащего лечению. Лекарственное средство обычно содержит от примерно 0,01 мг до примерно 500 мг активного ингредиента, предпочтительно от примерно 1 мг до примерно 100 мг активного ингредиента. Внутривенно наиболее предпочтительные дозы будут варьироваться от примерно 0,1 до примерно 10 мг/кг/мин во время постоянной инфузии. Соединения по изобретению могут вводиться в виде одной суточной дозы, или общая суточная доза может вводиться в раздельных дозах два, три или четыре раза в день. Кроме того, соединения по настоящему изобретению можно вводить в интраназальной форме посредством местного применения подходящих интраназальных средств доставки или с помощью трансдермальных путей с использованием таких форм трансдермальных пластырей, которые хорошо известны специалистам в данной области. Для введения в виде трансдермальной системы доставки введение дозировки будет, конечно, непрерывным, а не прерывистым во всех режимах дозирования.

ПРИМЕРЫ

Далее следуют примеры, не ограничивающие настоящее изобретение.

В следующе таблице перечислены аббревиатуры, применяемые в данном разделе.

Получение соединений

Схемы 1 и 2, описанные далее, иллюстрируют общие пути синтеза соединений формулы (I) по настоящему изобретению, но не должны рассматриваться как ограничивающие. Соединения в настоящем изобретении могут быть получены в виде свободного основания или его фармацевтически приемлемой соли. В последующем описании таких способов понятно, что подходящие защитные группы, при необходимости, будут добавляться и впоследствии удаляться из различных реагентов и промежуточных соединений способом, который будет легко понят специалистом в области органического синтеза. Обычные методики использования таких защитных групп, а также примеры подходящих защитных групп описаны, например, в Protective Groups in Organic Synthesis by T.W. Greene, P.G.M Wutz, 4^th Edition, Wiley-lnterscience, New York, 2006. Необходимо понимать, что для нагревания реакционных смесей альтернативно может применяться микроволновое излучение.

R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸ и R⁹ представляют собой, если не указано иного, такие, как определено в формуле (I).

(i) Образование соответствующего соединения формулы (III)

Соединение формулы (III) может быть получено (Схема 1) с использованием в качестве исходного вещества, например, соединения формулы (II), где LG представляет собой уходящую группу, такую как галоген (например, хлор, бром или йод), или алкил-, арил- или галоалкил-сульфонат (например, трифлат), и взаимодействием указанного соединения (II) с соединением формулы T-R1, где R1 является таким, как определено выше, а Т представляет собой бороновую кислоту, бороновый эфир или трифторборат калия или MIDA боронат или станнан, в присутствии катализатора на основе переходного металла, как описано в, например Metal-Catalyzed Cross-Coupling Reactions, 2^nd, Completely Revised and Enlarged Edition by A. de Meijere and F. Diederich, Wiley VCH, 2004. Соединение формулы T-R1 может быть получено из соответствующего LG-R1, где LG представляет собой уходящую группу, например, галоген (например, хлор, бром, или йод) известными способами, как описано в, например, Advanced Organic Chemistry, Part A and В под авторством F.A. Carey и R.J. Sundberg, 5th edition, Springer Science, 2007

Взаимодействие может быть проведено посредством связывания соединения формулы (II), с подходящим арил или гетероарилбороновой кислотой или бороновым эфиром или станнаном формулы T-R¹. Взаимодействие может быть проведено с применением подходящего катализатора на основе металла, например, палладиевого катализатора, например, ди-трет-бутил фосфиноферроцен палладий (II) дихлорид, тетракис(трифенилфосфин)палладий (0), палладия дифенилфосфиноферроцен дихлорид, ацетат палладия (II) или бис(дибензилиденацетон)палладий (0). Возможно применяется подходящий лиганд, например, трифенилфосфин, три-трет-бутилфосфин или 2-(дициклогексилфосфино)бифенил в реакции связывания. В дополнение, подходящее основание, например, фторид цезия, алкиламин, например, триэтиламин, или щелочного или щелочноземельного металла карбонат или гидроксид или фосфат, например, карбонат калия, карбонат натрия, карбонат цезия или гидроксид натрия, или фосфат калия могут применяться в реакции. Указанная реакция может быть проведена при температуре в диапазоне между +20°С и +160°С, в подходящем растворителе, например толуоле, тетрагидрофуране, 2-метил-тетрагидрофуране, 1,4-диоксане, диметоксиэтане, ацетонитриле, воде, этаноле, N,N-диметилацетамиде или N,N-диметилформамиде или их смеси. Если энантиомерно чистое или обогащенное соединение (II) используется в этой реакции, получают энантиомерно чистое или энантиомерно обогащенное соединение (III).

(ii) образование соответствующего соединения формулы (I)

Соединение формулы (I) может быть получено (Схема 2) с использованием в качестве исходного вещества, например, соединения формулы (III), где R¹⁰ может быть F, ОСН₃, ОС(СН₃)₃, или OSiR'R''R''' (где R', R'' и R''' независимо представляют собой арил (например, фенил) или алкил (например, метил или трет-бутил)). Если R¹⁰ представляет собой F, конверсия в соединение (I) может быть проведена, например, кислотным гидролизом с использованием водной HCl. Если R¹⁰ представляет собой ОСН₃, конверсия в соединение (I) может быть проведена посредством взаимодействия с, например, TMSI в подходящем растворителе, таком как хлороформ, или взаимодействием с HBr в подходящем растворителе, таком как уксусная кислота, или взаимодействием с BBr₃ в подходящем растворителе, таком как дихлорметан. Если R¹⁰ представляет собой ОС(СН₃)₃, конверсия в соединение (I) может быть проведена взаимодействием с, например, трифторуксусной кислотой в подходящем растворителе, таком как дихлорметан. Если R¹⁰ представляет собой OSiR'R''R''', конверсия в соединение (I) может быть проведена с помощью, например, HCl в подходящем растворителе, таком как метанол, или с использованием тетрабутиламмония фторида в тетрагидрофуране. Если энантиомерно чистое или обогащенное соединение (III) используется в этой реакции, получают энантиомерно чистое или энантиомерно обогащенное соединение (I).

Соединения формулы (II), (III) и T-R1 являются коммерчески доступными соединениями, или известны в литературе, или их получают стандартными методиками, известными в уровне техники. Соединение формулы (I), (II) или (III) могут быть разделены на их энантиомеры с помощью обычных методик, известных в уровне техники, посредством, например, хроматографии на хиральной неподвижной фазе.

Общие способы

Все используемые растворители были аналитической степени чистоты, и коммерчески доступные безводные растворители обычно использовались для реакций. Исходные материалы были доступны из коммерческих источников или приготовлены в соответствии с литературными методиками. Комнатная температура относится к +20-25°С. Композиции смесей растворителей приведены как объемные проценты или объемные соотношения.

Микроволновый нагрев проводили в микроволновой печи Biotage Initiator, обеспечивающей непрерывное облучение при 2,45 ГГц. Понятно, что микроволны могут использоваться для нагревания реакционных смесей.

Прямофазовую хроматографию вручную проводили на силикагеле Merck 60 (0,040-0,063 мм) или автоматически с использованием системы ISCO Combiflash® Companion™ с использованием флеш колонок с нормальной фазой SiliaSep™ с использованием указанной системы растворителей.

ЯМР-спектры регистрировали на ЯМР-спектрометре на 400 МГц (или выше), снабженном зондом соответствующей конфигурации. Спектры регистрировались при комнатной температуре, если не указано иное. ЯМР-спектры были получены в CDCl₃, ДМСО-d₆ или CD₃OD. Химические сдвиги приведены в ppm вниз и вверх от TMS (0.00 ppm). Использовались следующие эталонные сигналы: сигнал остаточного растворителя ДМСО-ds 6 2,5 или сигнал остаточного растворителя CHCl₃ δ 7,26. Резонансные мультиплетности обозначаются s, d, t, q, m и br для синглетов, дублетов, триплетов, квартетов, мультиплетов и широкий соответственно.

Жидкостная хроматография высокого давления (ВЭЖХ) проводилась на колонке с обращенной фазой. Линейный градиент наносили с использованием, например, подвижной фазы А (водный 0,1% NH₃ или водная 0,1% уксусная кислота или водная 0,1% муравьиная кислота) и В (ацетонитрил или метанол). Анализ масс-спектрометрии (МС) проводили в режиме определения положительных ионов с использованием ионизации электрораспылением (ES+).

Препаративную хроматографию проводили на Gilson-PREP GX271 или GX281 с Trilution Ic в качестве программного обеспечения на колонке с обращенной фазой. Линейный градиент наносили с использованием подвижной фазы А (водный 0,1% NH₃ или водная 0,1% уксусная кислота или водная 0,1% муравьиная кислота) и В (ацетонитрил или метанол).

Препаративную хиральную хроматографию для разделения энантиомеров проводили на Thar SFC с использованием сверхкритической жидкостной хроматографии на хиральной стационарной фазе. Линейный градиент наносили с использованием подвижной фазы А (двуокись углерода) и В (ацетонитрил или метанол или этанол или 2-пропанол или любые их смеси). Могут быть использованы добавки (такие как диэтиламин или изопропиламин или аммиак или муравьиная кислота или ТФУ).

Соединения называли с помощью Accelrys Draw 4.1 SP1.

Промежуточный Пример 1

6-(2-хлорфенил)-4-гидрокси-1Н-пиридин-2-он

Этил 3-оксобутаноат (6.33 мл, 50 ммоль) добавили по каплям к суспензии NaH (60%, 1.92 г, 50 ммоль) в 2-МеТГФ (60 мл) при -78°С в атмосфере азота. Через 5 мин охлаждающую баню удалили и смесь перемешивали при КТ в течение 20 Мин. Раствор снова охладили до - 78°С и 1.6 М n-BuLi (31.25 мл) добавили медленно в течение 20 мин. Получившийся раствор перемешивали при -78°С в течение 30 мин. Затем 2-хлорбензонитрил (6.88 г, 50 ммоль) добавили в виде осадка за одну порцию и реакционную смесь перемешивали на тающей охлаждающей бане в течение ночи. Смесь охладили до 0°С и медленно добавили МеОН (15 мл). Охлаждающую баню удалили и смесь перемешивали при КТ в течение 30 мин и затем снова охладили до 0°С. Смесь нейтрализовали медленным добавлением концентрированной HCl и получившийся преципитат отфильтровали, промыли с помощью EtOH, пентана и высушили с получением продукта в виде осадка (11.08 г, 87%). MS ES+ m/z 222 [М+Н]⁺.

Промежуточный Пример 2

2,4-дихлор-6-(2-хлорфенил)пиридин

6-(2-хлорфенил)-4-гидрокси-1Н-пиридин-2-он (5 г, 22.56 ммоль) растворили в POCl₃ (40 мл) и медленно добавили N,N-диметиланилин (5.5 мл, 43.4 ммоль). Получившуюся смесь кипятили с обратным холодильником в течение ночи. После охлаждения до КТ смесь влили на лед (600 мл) и перемешивали при КТ в течение 30 мин. Преципитат отфильтровали и промыли водой. Осадок растворили в EtOAc (100 мл), высушили над Na₂SO₄, отфильтровали и сконцентрировали с получением продукта в виде осадка (7 г, 83%). MS ES+ m/z 258 [М+Н]⁺.

Промежуточный Пример 3

4-хлор-6-(2-хлорфенил)-1Н-пиридин-2-он

2,4-дихлор-6-(2-хлорфенил)пиридин (5.7 г, 22,05 ммоль) и KOtBu (6.19 г, 55.12 ммоль) растворили в толуоле (75 мл) и получившуюся смесь перемешивали при 100°С в течение 2 ч. После охлаждения до КТ, воду (40 мл) добавили и органический слой отделили. Водный слой сделали слегка закисленным с использованием конц. HCl и экстрагировали EtOAc (2×40 мл). Объединенные органические фазы промыли солевым раствором (50 мл), высушили над Na₂SO₄, отфильтровали и сконцентрировали. Получившийся остаток растворили в ДХМ (30 мл) и добавили ТФУ (5 мл, 67.3 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 1 h, сконцентрировали и получившийся остаток растворили в МеОН (25 мл). 30% NH₄OH (20 мл) и воду (20 мл) добавили и смесь перемешивали при КТ в течение ночи. Образовавшийся преципитат отфильтровали, промыли водой, EtOH, Пентаном и высушили с получением продукта в виде осадка (4.13 г, 78%). MS ES+ m/z 240 [М+Н]⁺.

Пример 1

6-(2-хлорфенил)-4-морфолино-1Н-пиридин-2-он

4-хлор-6-(2-хлорфенил)-1Н-пиридин-2-он (80 мг, 0.33 ммоль) растворили в морфолине (1 мл, 11.56 ммоль) и получившуюся смесь перемешивали при 120°С в течение 2 ч. После охлаждения до КТ воду (5 мл) и EtOAc (5 мл) добавили. Органический слой разделили и водный слой экстрагировали EtOAc (2×5 мл). Объединенные органические фазы высушили над Na₂SO₄, отфильтровали и сконцентрировали. Получившийся остаток растворили в 2-пропаноле (2 мл) и Гептан (8 мл) добавили. Смесь перемешивали при КТ в течение ночи и преципитат отфильтровали и отбросили. Фильтрат сконцентрировали и растворили в ДХМ (2 мл) и добавили Гептан (8 мл). После перемешивания при КТ в течение 10 мин получившийся преципитат отфильтровали и высушили с получением продукта в виде осадка (48 мг, 49%). ¹Н NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 11.06 (br s, 1 H), 7.61-7.52 (m, 1H), 7.52-7.32 (m, 3H), 6.06 (s, 1H), 5.47 (s, 1H), 3.65 (s, 4H), 3.24 (s, 4H). MS ES+ m/z 291 [M+H]⁺.

Пример 2

6-(2-хлорфенил)-1-метил-4-морфолино-пиридин-2-он

6-(2-хлорфенил)-4-морфолино-1Н-пиридин-2-он (100 мг, 0.34 ммоль) and K₂CO₃ (71.3 мг, 0.52 ммоль) растворили в MeCN (2 мл) при КТ и йодометан (0.03 мл, 0.52 ммоль) добавили. Получившуюся смесь перемешивали при КТ в течение ночи. Дополнительное количество йодометана (0.1 мл) добавили и смесь перемешивали при 70°С в течение ночи. После охлаждения до КТ смесь отфильтровали и очистили с помощью препаративной ВЭЖХ с получением продукта в виде осадка (46 мг, 44%). ¹Н NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 7.65-7.61 (m, 1Н), 7.57-7.52 (m, 1Н), 7.51-7.47 (m, 2Н), 6.05 (d, 1Н), 5.61 (d, 1Н), 3.64 (t, 4Н), 3.27-3.18 (m, 4Н), 2.98 (s, 3Н). MS ES+ m/z 305 [М+Н]⁺.

Пример 3

6-(2-хлорфенил)-4-(3-метилморфолин-4-ил)-1Н-пиридин-2-он

4-хлор-6-(2-хлорфенил)-1Н-пиридин-2-он (65 мг, 0.27 ммоль) и 3-метилморфолин (0.15 мл, 1.32 ммоль) смешали и нагревали в микроволновой печи при 160°С в течение 30 мин. Снова нагревали при 180°С в течение 1 ч. Опять нагревали при 200°С в течение 1 ч. После охлаждения до КТ смесь растворили в МеОН, отфильтровали и очистили с помощью препаративной ВЭЖХ с получением продукта в виде осадка (44 мг, 53%). ¹Н NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 7.55 (d, 1Н), 7.51-7.38 (m, 3Н), 6.02 (s, 1Н), 5.40 (s, 1Н), 3.98-3.83 (m, 2Н), 3.69-3.54 (m, 2Н), 3.46 (t, 1Н), 3.41-3.35 (m, 1Н), 3.10-2.95 (m, 1Н), 1.11 (d, 3Н). MS ES+ m/z 305 [M+H]⁺.

Пример 4

6-(2-хлорфенил)-1-метил-4-(3-метилморфолин-4-ил)пиридин-2-он

6-(2-хлорфенил)-4-(3-метилморфолин-4-ил)-1Н-пиридин-2-он (75 мг, 0.25 ммоль) и K₂CO₃ (50 мг, 0.36 ммоль) растворили в MeCN (1 мл). Йодометан (0.02 мл, 0.32 ммоль) добавили и смесь перемешивали при КТ в течение 30 мин. DMAc (0.5 мл) добавили и смесь перемешивали при КТ в течение ночи. МеОН (1 мл) и йодометан (0.05 мл, 0.8 ммоль) добавили и перемешивание продолжили при КТ в течение ночи. Смесь отфильтровали и очистили с помощью препаративной ВЭЖХ с получением продукта в виде осадка (46 мг, 59%). ¹Н NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 7.63 (d, 1Н), 7.57-7.48 (m, 3Н), 6.01 (t, 1Н), 5.58-5.53 (m, 1Н), 4.00-3.84 (m, 2Н), 3.70-3.56 (m, 2Н), 3.50-3.34 (m, 2Н), 3.04-2.97 (m, 4Н), 1.10 (t, 3Н). MS ES+ m/z 319 [M+H]⁺.

Промежуточный Пример 4

4-(2,6-дихлор-4-пиридил)-3-метил-морфолин

2,6-дихлор-4-йод-пиридин (1.5 г, 5.48 ммоль), 3-метилморфолин (0.61 мл, 6.02 ммоль), PPh₃ (143.65 мг, 0.55 ммоль), Pd(OAc)₂ (61.48 мг, 0.27 ммоль) и свежесмолотый K₃PO₄ (3.49 г, 16.43 ммоль) растворили в ДМФ (30 мл) и получившуюся смесь перемешивали при 100°С в течение 1 ч. После охлаждения до КТ смесь влили в воду (50 мл) и экстрагировали EtOAc (3×15 мл). Объединенные органические фазы промыли солевым раствором, высушили над Na₂SO₄, отфильтровали, сконцентрировали и очистили на колонке с силикагелем с элюцией 0-60% EtOAc в гептане с получением продукта в виде осадка (800 мг, 59%). MS ES+ m/z 247 [М+Н]⁺.

Промежуточный Пример 5

4-(2-трет-бутокси-6-хлор-4-пиридил)-3-метил-морфолин

4-(2,6-дихлор-4-пиридил)-3-метил-морфолин (2.2 г, 8.9 ммоль), KOtBu (2.5 g, 22.26 ммоль) и молекулярные сита растворили в безводном толуоле (40 мл) и перемешивали при 90°С в течение 2 ч. После охлаждения до КТ смесь разбавили EtOAc (30 мл), солевым раствором (40 мл) и водой (20 мл). Органический слой разделили и водный слой экстрагировали EtOAc (2×25 мл). Объединенные органические фазы промыли солевым раствором, высушили над Na₂SO₄, отфильтровали, сконцентрировали и очистили на колонке с силикагелем с элюцией 0-40% EtOAc в гептане с получением указанного продукта в виде масла (2.2 г, 87%). MS ES+ m/z 285 [М+Н]⁺.

Пример 5

4-(3-метилморфолин-4-ил)-6-(4-метил-3-пиридил)-1Н-пиридин-2-он

4-(2-трет-бутокси-6-хлор-4-пиридил)-3-метил-морфолин (0.14 г, 0.51 ммоль), (4-метил-3-пиридил)бороновую кислоту (0.08 г, 0.61 ммоль), PdCl₂ (амфос) (3.58 мг, 5.06 мкмоль) и K₂CO₃ (209.65 мг, 1.52 ммоль) растворили в 2-МеТГФ (3 мл) и воде (1 мл). Получившуюся смесь нагревали в микроволновой печи при 140°С в течение 40 мин. Дополнительное количество PdCl₂ (амфос) (3.58 мг, 5.06 мкмоль) и (4-метил-3-пиридил)бороновой кислоты (0.03 г) добавили и смесь снова нагревали при 140°С в течение 60 мин. После охлаждения до КТ добавили солевой раствор (5 мл) и EtOAc (5 мл). Органический слой разделили и водный слой экстрагировали EtOAc (2×10 мл). Объединенные органические фазы промыли солевым раствором, высушили над MgSO₄, отфильтровали и сконцентрировали. Получившийся остаток растворили в ДХМ (5 мл), добавили ТФУ (345.93 мг, 3.03 ммоль) и смесь перемешивали при КТ в течение ночи. Смесь сконцентрировали и очистили с помощью препаративной ВЭЖХ с получением продукта в виде осадка (40 мг, 28%). ¹Н NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.48 (d, 1Н), 8.43 (s, 1Н), 7.33 (d, 1Н), 6.04 (s, 1Н), 5.40 (s, 1Н), 3.97 (br d, 1H), 3.88 (dd, 1H), 3.69-3.57 (m, 2H), 3.51-3.35 (m, 2H), 3.04 (td, 1H), 2.30 (s, 3H), 1.12 (d, 3H). MS ES+ m/z 286 [M+H]⁺.

Пример 6

4-(3-метилморфолин-4-ил)-6-пиримидин-5-ил-1Н-пиридин-2-он

4-(2-трет-бутокси-6-хлор-4-пиридил)-3-метил-морфолин (0.14 г, 0.51 ммоль), пиримидин-5-илбороновую кислоту (0.08 г, 0.61 ммоль), PdCl₂(амфос) (3.58 мг, 5.06 мкмоль) и K₂CO₃ (209.65 мг, 1.52 ммоль) растворили в 2-МеТГФ (3 мл) и воде (1 мл). Получившуюся смесь нагревали в микроволновой печи при 140°С в течение 40 мин. Дополнительное количество PdCl₂(амфос) (3.58 мг, 5.06 мкмоль) и пиримидин-5-илбороновой кислоты (0.03 г) добавили и смесь нагревали при 140°С в течение 60 мин. После охлаждения до КТ солевой раствор (5 мл), воду (4 мл) и EtOAc (5 мл) добавили. Органический слой разделили и водный слой экстрагировали EtOAc (2×10 мл). Объединенные органические фазы промыли солевым раствором, высушили над MgSO₄, отфильтровали и сконцентрировали. Получившийся остаток растворили в ДХМ (5 мл) и ТФУ (345.93 мг, 3.03 ммоль) добавили. Смесь перемешивали при КТ в течение ночи. Смесь сконцентрировали и очистили с помощью препаративной ВЭЖХ с получением продукта в виде осадка (60 мг, 42%). ¹Н NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 11.05 (br s, 1Н), 9.22 (s, 1Н), 9.17 (s, 2Н), 6.63 (s, 1Н), 5.56 (s, 1Н), 4.08 (br d, 1H), 3.91 (br d, 1H), 3.73-3.67 (m, 1H), 3.66-3.60 (m, 1H), 3.53-3.44 (m, 2H), 3.12-3.02 (m, 1H), 1.12 (d, 3H). MS ES+ m/z 273 [M+H]⁺.

Пример 7

4-(3-метилморфолин-4-ил)-6-(2-фенилфенил)-1Н-пиридин-2-он

4-(2-трет-бутокси-6-хлор-4-пиридил)-3-метил-морфолин (0.09 г, 0.32 ммоль), (2-фенилфенил)бороновую кислоту (0.08 г, 0.38 ммоль), K₂CO₃ (131.03 мг, 0.95 ммоль) и PdCl₂(амфос) (2.24 мг, 3.16 мкмоль) растворили в 2-МеТГФ (3 мл) и воде (1 мл). Получившуюся смесь нагревали в микроволновой печи при 140°С в течение 60 мин. После охлаждения до КТ органический слой отфильтровали и сконцентрировали. Получившийся остаток растворили в ДХМ (5 мл), добавили ТФУ (0.28 г, 2.48 ммоль) и смесь перемешивали при КТ в течение ночи. Смесь сконцентрировали и очистили с помощью препаративной ВЭЖХ с получением продукта в виде осадка (12 мг, 14%). ¹Н NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 10.80 (br s, 1H), 7.55-7.50 (m, 1H), 7.47 (d, 2H), 7.42 (d, 1H), 7.38-7.32 (m, 2H), 7.32-7.24 (m, 3H), 5.65 (d, 1H), 5.24 (d, 1H), 3.82 (br dd, 1H), 3.66 (br d, 1H), 3.57 (d, 1H), 3.50 (dd, 1H), 3.38 (td, 1H), 3.14 (br d, 1H), 2.86 (td, 1H), 0.82 (d, 3H). MS ES+ m/z 347 [M+H]⁺.

Промежуточный Пример 6

(3R)-4-(2,6-дихлор-4-пиридил)-3-метил-морфолин

Соединение, указанное в заголовке, получили как описано в Промежуточном Примере 4, заменив 3-метилморфолин на (R)-3-метилморфолин, с получением продукта в виде осадка (900 мг, 66%). MS ES+ m/z 247 [М+Н]⁺.

Промежуточный Пример 7

(3R)-4-(2-трет-бутокси-6-хлор-4-пиридил)-3-метил-морфолин

Соединение, указанное в заголовке, получили как описано в Промежуточном Примере 5, с использованием в качестве исходного вещества (3R)-4-(2,6-дихлор-4-пиридил)-3-метил-морфолин (700 мг), с получением указанного продукта в виде масла (510 мг, 63%). ¹Н NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 6.29 (s, 1Н), 5.92-5.81 (m, 1Н), 4.04-3.92 (m, 1Н), 3.85-3.69 (m, 3Н), 3.65-3.52 (m, 1Н), 3.29-3.10 (m, 2Н), 1.59-1.53 (m, 9Н), 1.21 (d, 3Н). MS ES+ m/z 285 [M+H]⁺.

Промежуточный Пример 8

(3R)-4-[2-трет-бутокси-6-(2-хлор-5-фтор-фенил)-4-пиридил]-3-метил-морфолин

К раствору (3R)-4-(2-трет-бутокси-6-хлор-4-пиридил)-3-метил-морфолина (1.0 г, 3.52 ммоль) в 1,4-диоксане (10 мл) при КТ, (2-хлор-5-фтор-фенил)бороновую кислоту (735 мг, 4.2 ммоль) и водн. 0.5 М раствор K₃PO₄ (5 мл) добавили и получившуюся смесь дегазировали азотом в течение 15 мин. Хлор(2-дициклогексилфосфино-2',4',6'-триизопропил-1,1'-бифенил)[2-(2'-амино-1,1'-бифенил)]палладий(II) (110 мг, 0.35 ммоль) добавили и реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при 100°С в течение 1 ч. После охлаждения до КТ смесь отфильтровали через целит® и фильтрат разбавили водой и экстрагировали EtOAc. Органический слой промыли солевым раствором, высушили над Na₂SO₄, отфильтровали, сконцентрировали и очистили с помощью препаративной ВЭЖХ с получением указанного продукта (150 мг, 11%). MS ES+ m/z 379 [М+Н]⁺.

Пример 8

6-(2-хлор-5-фтор-фенил)-4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-1Н-пиридин-2-он

ТФУ (0.3 мл, 3.9 ммоль) добавили в раствор (3R)-4-[2-трет-бутокси-6-(2-хлор-5-фтор-фенил)-4-пиридил]-3-метил-морфолина (150 мг, 0.39 ммоль) в ДХМ (10 мл) при 0°С и смесь перемешивали при КТ в течение ночи. рН довели до приблизительно 7 с использованием насыщ. водн. NaHCO₃ и смесь экстрагировали с помощью ДХМ. Органический слой промыли солевым раствором, высушили над Na₂SO₄, отфильтровали, сконцентрировали и очистили на силикагеле с элюцией 0-5% МеОН в ДХМ с получением продукта в виде осадка (60 мг, 47%). ¹Н NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.45 (dd, 1Н), 7.20-7.17 (m, 1Н), 7.13-7.08 (m, 1Н), 6.00 (d, 1Н), 5.64 (d, 1Н), 4.00 (dd, 1Н), 3.85-3.72 (m, 3Н), 3.61 (dt, 1Н), 3.33-3.20 (m, 2Н), 1.27 (d, 3Н). MS ES+ m/z 323 [М+Н]⁺.

Пример 9

4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-6-(о-толил)-1Н-пиридин-2-он

Смесь (3R)-4-(2-трет-бутокси-6-хлор-4-пиридил)-3-метил-морфолина (0.5 г, 1.76 ммоль), о-толилбороновой кислоты (713 мг, 5.3 ммоль), K₂CO₃ (729 мг, 5.3 ммоль) и PdCl₂ (амфос) (31 мг, 0.17 ммоль) в 2-МеТГФ:H₂O (3:1, 4 мл) дегазировали азотом в течение 15 мин. Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при 160°С в течение 4 ч. После охлаждения до КТ смесь отфильтровали через целит® и фильтрат разбавили водой и экстрагировали EtOAc. Органический слой промыли солевым раствором, высушили над Na₂SO₄, отфильтровали, сконцентрировали и очистили с помощью препаративной ВЭЖХ (с использованием 0.1% НСООН в MeCN) с получением неочищенного продукта (70 мг). Неочищенный продукт дополнительно очистили с помощью препаративной ТСХ с получением продукта в виде осадка (35 мг, 7%). ¹Н NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.35 (br d, 1Н), 7.28 (br s, 3H), 5.86 (s, 1H), 5.63 (br s, 1H), 4.00 (br dd, 1H), 3.81 (br s, 1H), 3.77-3.75 (m, 1H), 3.76 (s, 1H), 3.65-3.59 (m, 1H), 3.28 (br d, 2H), 2.36 (s, 3H), 1.27 (br d, 3H). MS ES+ m/z 285 [M+H]⁺.

Пример 10

4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-6-[2-(трифторметил)-3-пиридил]-1Н-пиридин-2-он

Смесь (3R)-4-(2-трет-бутокси-6-хлор-4-пиридил)-3-метил-морфолина (0.25 г, 0.88 ммоль), [2-(трифторметил)-3-пиридил]бороновой кислоты (501 мг, 2.6 ммоль), K₂CO₃ (364 мг, 2.6 ммоль) и PdCl₂(амфос) (16 мг, 0.08 ммоль) в 2-МеТГФ:H₂O (3:1, 3 мл) дегазировали азотом в течение 15 мин. Реакционную смесь нагревали в микроволновой печи при 160°С в течение 4 ч. После охлаждения до КТ смесь отфильтровали через целит® и фильтрат разбавили водой и экстрагировали EtOAc. Органический слой промыли солевым раствором, высушили над Na₂SO₄, отфильтровали, сконцентрировали и очистили с помощью препаративной ВЭЖХ. ТФУ (0.06 мл, 0.76 ммоль добавили в раствор неочищенный продукт в ДХМ (1 мл) и получившуюся смесь перемешивали при КТ в течение ночи. рН довели до приблизительно 7 с использованием насыщ. водн. NaHCO₃ и смесь экстрагировали с помощью ДХМ. Органический слой промыли солевым раствором, высушили над Na₂SO₄, отфильтровали, сконцентрировали и очистили на силикагеле с элюцией 0-5% МеОН в ДХМ с получением продукта в виде осадка (5 мг, 2%). ¹Н NMR (400MHz, CDCl₃) δ 10.83 (br s, 1Н), 8.82 (br d, 1Н), 7.92 (br d, 1Н), 7.63 (dd, 1Н), 5.94 (d, 1Н), 5.62 (s, 1Н), 3.99 (br d, 1H), 3.81-3.74 (m, 3Н), 3.60 (dt, 1H), 3.30-3.18 (m, 2H), 1.25 (br d, 3Н). MS ES+ m/z 340 [M+H]⁺.

Пример 11

6-(2-хлорфенил)-4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-1Н-пиридин-2-он

Смесь (2-хлорфенил)бороновой кислоты (769 мг, 4.9 ммоль), хлор(2-дициклогексилфосфино-2',4',6'-триизопропил-1,1'-бифенил)[2-(2'-амино-1,1'-бифенил)]палладия (II) (110 мг, 0.35 ммоль), водн. 0.5 М раствора K₃PO₄ (5 мл) в ТГФ (10 мл) дегазировали аргоном в течение 15 мин. (3R)-4-(2-трет-бутокси-6-хлор-4-пиридил)-3-метил-морфолин (1.0 г, 3.52 ммоль) добавили и получившуюся смесь нагревали в микроволновой печи при 100°С в течение 1 ч. После охлаждения до КТ смесь отфильтровали через целит® и фильтрат разбавили водой и экстрагировали EtOAc. Органический слой промыли солевым раствором, высушили над Na₂SO₄, отфильтровали, сконцентрировали и очистили с помощью препаративной ВЭЖХ (с использованием 0.1% НСООН в MeCN) с получением неочищенного продукта (85 мг). Неочищенный продукт дополнительно очистили с помощью препаративной ТСХ с получением продукта в виде осадка (45 мг, 4%). ¹Н NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.50 (br d, 1H), 7.43-7.34 (m, 3Н), 6.01 (s, 1H), 5.66 (br s, 1H), 4.02-3.98 (m, 1H), 3.86-3.75 (m, 3H), 3.61 (dt, 1H), 3.35-3.23 (m, 2H), 1.28 (d, 3H). MS ES+ m/z 305 [M+H]⁺.

Пример 12

4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-6-[2-(трифторметил)фенил]-1Н-пиридин-2-он

Соединение, указанное в заголовке, получили как описано в примере 9, заменив о-толилбороновую кислоту на [2-(трифторметил)фенил]бороновую кислоту, с получением продукта в виде осадка (50 мг, 8%). ¹Н NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.79 (d, 1Н), 7.68-7.57 (m, 2Н), 7.50 (br d, 1Н), 5.92 (d, 1Н), 5.63 (d, 1Н), 3.99 (br dd, 1Н), 3.81-3.74 (m, 3Н), 3.60 (td, 1Н), 3.30-3.18 (m, 2Н), 1.25 (d, 3Н). MS ES+ m/z 339 [М+Н]⁺.

Пример 13

6-(3-фурил)-4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-1Н-пиридин-2-он

Соединение, указанное в заголовке, получили как описано в примере 9, заменив о-толилбороновую кислоту на 3-фурилбороновую кислоту, с получением продукта в виде осадка (40 мг, 14%). ¹Н NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.37 (s, 1Н), 7.49 (s, 1Н), 6.76 (s, 1Н), 6.08 (d, 1Н), 5.65 (d, 1Н), 4.02 (dd, 1Н), 3.89 (br d, 1Н), 3.82-3.74 (m, 2Н), 3.63 (td, 1Н), 3.37-3.22 (m, 2Н), 1.27 (d, 3Н). MS ES+ m/z 261 [М+Н]⁺.

Пример 14

4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-6-(4-метил-3-тиенил)-1Н-пиридин-2-он

Соединение, указанное в заголовке, получили как описано в примере 9, заменив о-толилбороновую кислоту на (4-метил-3-тиенил)бороновую кислоту, с получением продукта в виде осадка (50 мг, 10%). ¹Н NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.70 (br s, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.07 (br s, 1H), 5.93 (s, 1 H), 5.63 (br s, 1H), 4.00 (br dd, 1H), 3.85-3.75 (m, 3H), 3.61 (td, 1H), 3.34-3.20 (m, 2H), 2.33 (s, 3H), 1.27 (d, 3H). MS ES+ m/z 291 [M+H]⁺.

Промежуточный Пример 9

N-[2-[6-трет-бутокси-4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-2-пиридил]фенил]метансульфонамид

Раствор (3R)-4-(2-трет-бутокси-6-хлор-4-пиридил)-3-метил-морфолина (300 мг, 1.05 ммоль), [2-(метансульфонамидо)фенил]бороновой кислоты (300 мг, 1.26 ммоль) и Na₂CO₃ (350 мг, 3.16 ммоль) в 1,4-диоксане и воде (1:1, 10 мл) дегазировали азотом в течение 10 мин. PdCl₂(dppf), ДХМ аддукт (80 мг, 0.11 ммоль) добавили и смесь нагревали в микроволновой печи при 130°С в течение 1.5 ч. Воду (10 мл) добавили и смесь экстрагировали EtOAc (3×15 мл). Объединенные органические фазы промыли солевым раствором, высушили над Na₂SO₄, отфильтровали, сконцентрировали и очистили на колонке с силикагелем с элюцией 20-30% EtOAc в гептане с получением указанного продукта (200 мг, 43%). ЖХМС ES+ m/z 420 [М+Н]⁺.

Пример 15

N-[2-[4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-6-оксо-1Н-пиридин-2-ил]фенил]метансульфонамид

ТФУ (1 мл, 13.07 ммоль) добавили к раствору N-[2-[6-трет-бутокси-4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-2-пиридил]фенил]метансульфонамида (300 мг, 0.71 ммоль) в ДХМ (30 мл) и получившуюся смесь перемешивали при КТ в течение ночи. Смесь охладили до 0°С и рН довели до 8 с использованием насыщ. водн. NaHCO₃. Органический слой разделили и водный слой экстрагировали с помощью ДХМ (2×15 мл). Объединенные органические фазы промыли солевым раствором, высушили над Na₂SO₄, отфильтровали, сконцентрировали и очистили на колонке с силикагелем с элюцией 10% МеОН в ДХМ с получением продукта в виде осадка (140 мг, 53%). ¹Н NMR (400 MHz, DMSO-d₆); δ 10.95-10.40 (bs, 1Н), 7.87 (d, 1Н), 7.69-7.62 (m, 2Н), 7.50-7.37 (bs, 2Н), 6.00-5.98 (bs, 1Н), 5.42-5.39 (bs, 1Н), 3.90-3.84 (dd, 2Н), 3.65-3.56 (m, 2Н), 3.50-3.45 (m, 1Н), 3.17-3.05 (m, 1Н), 2.5 (d, 3Н), 1.19-1.10 (m, 3H). ЖХМС ES+ m/z 364 [М+Н]⁺.

Промежуточный Пример 10

(3R)-4-[2-трет-бутокси-6-(6-метил-5-хинолил)-4-пиридил]-3-метил-морфолин

Соединение, указанное в заголовке, получили как описано в примере 15, заменив [2-(метансульфонамидо)фенил]бороновую кислоту на (6-метил-5-хинолил)бороновую кислоту, с получением указанного продукта (180 мг, 43%). ЖХМС ES+ m/z 392 [М+Н]⁺.

Пример 16

4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-6-(6-метил-5-хинолил)-1Н-пиридин-2-он

Соединение, указанное в заголовке, получили как описано в примере 16, с использованием в качестве исходного вещества (3R)-4-[2-трет-бутокси-6-(6-метил-5-хинолил)-4-пиридил]-3-метил-морфолина (180 мг, 0.46 ммоль), с получением продукта в виде осадка (85 мг, 59%). ¹Н NMR (400 MHz, DMSO-d₆); δ 10.94 (s, 1Н), 8.87 (d, 1Н), 8.01 (d, 1Н), 7.91 (d, 1Н), 7.71 (m, 1Н), 6.03 (bs, 1Н) 5.45 (bs, 1Н), 3.94 (m, 1Н), 3.88-3.86 (d, 2Н), 3.64-3.45 (m, 2Н), 3.40 (m,1Н) 3.01-3.17 (t, 1Н), 2.37 (s, 3Н), 1.20 (d, 3Н). ЖХМС ES+ m/z 336 [М+Н]⁺.

Промежуточный Пример 11

5-[4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил]-1Н-пиразол

Раствор 5-(4-бромфенил)-1Н-пиразола (250 мг, 0.88 ммоль), Бис(пинаколато)дибора (268 мг, 1.05 ммоль) и КОАс (260 мг, 2.63 ммоль) в 1,4-диоксане (10 мл) дегазировали азотом в течение 10 мин. PdCl₂(dppf), ДХМ аддукт (65 мг, 0.09 ммоль) добавили и смесь нагревали в микроволновой печи при 120°С в течение 2 ч. Воду (10 мл) добавили и смесь экстрагировали EtOAc (3×10 мл). Объединенные органические фазы промыли солевым раствором, высушили над Na₂SO₄, отфильтровали, сконцентрировали и очистили на колонке с силикагелем с элюцией 25-30% EtOAc в гептане с получением указанного продукта (150 мг, 50%). ЖХМС ES+ m/z 271 [М+Н]⁺.

Промежуточный Пример 12

(3R)-4-[2-трет-бутокси-6-[4-(1Н-пиразол-5-ил)фенил]-4-пиридил]-3-метил-морфолин

Соединение, указанное в заголовке, получили как описано в примере 15, заменив [2-(метансульфонамидо)фенил]бороновую кислоту на 5-[4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил]-1Н-пиразол, с получением указанного продукта (120 мг, 17%). ЖХМС ES+ m/z 393 [М+Н]⁺.

Пример 17

4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-6-[4-(1Н-пиразол-5-ил)фенил]-1Н-пиридин-2-он

Соединение, указанное в заголовке, получили как описано в примере 16, с использованием в качестве исходного вещества (3R)-4-[2-трет-бутокси-6-[4-(1Н-пиразол-5-ил)фенил]-4-пиридил]-3-метил-морфолина (200 мг, 0.51 ммоль), с получением продукта в виде осадка (125 мг, 70%). ¹Н NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 12.95 (bs, 1Н), 10.91 (bs, 1Н), 7.88-7.77 (dd, 5Н), 6.80 (d, 1Н), 6.37 (s, 1Н), 5.42 (s, 1Н), 4.06 (d, 1Н), 3.90 (d, 1Н), 3.71-3.62 (m, 2Н), 3.52-3.45 (m, 2Н), 3.10-3.05 (m, 1Н), 1.13-1.12 (m, 3H). ЖХМС ES+ m/z 337 [М+Н]⁺.

Пример 18

Биохимический анализ Vps34

Серийные разведения соединений по настоящему изобретению получили в ДМСО при 100 кратной конечной концентрации в анализе (n₁=n₀/3 в 10 точках). Соединения дополнительно развели в 4 раза по сравнению с концентрацией анализа в буфере для анализа (Life technologies буфер Q, PV5125, разбавленный 5 раз, с присутствием 2 мМ DTT и 2 мМ MnCl₂). 2.5 мкл разбавленного соединения добавили в 384 луночный планшет для анализа с последующим добавлением 2.5 мкл 16.5 нМ фермента Vps34 (Life technologies, PV5126). Фермент и соединения предварительно инкубировали при КТ в течение 15 мин. Затем в лунки, содержащие фермент и соединение, добавили 5 мкл субстратной смеси, содержащей 20 мкМ АТФ (Life technologies, PV3227) и 200 мкМ субстрата PI:PS (Life technologies, PV5122) в буфере для анализа и перемешали с помощью пипетирования несколько раз. Реакционную смесь инкубировали при комнатной температуре в течение 1 ч. Затем добавили 5 мкл смеси для остановки детекции, полученной как описано в инструкции к набору Adapta kinase assay (Life technologies, PV5099), содержащей антитело Adapta Eu-anti-ADP (2.3 нМ), трейсер Alexa Fluor 647 ADP (9 nM) и ЭДТА (30 мМ) в буфере TR-FRET, для остановки реакции. Смешивание провели с помощью пипетирования несколько раз. Затем планшет для анализа инкубировали при комнатной температуре в течение 30 мин и считывали на микропланшетном ридере Artemis. Рассчитали процент ингибирования соединений по сравнению с обработанными ДМСО контрольными образцами. Для получения значений IC50 соотнесли концентрацию соединений по отношению к проценту ингибирования с помощью программного обеспечения Dotmatics.

Соединения примеров эффективно ингибируют Vps34 и результаты анализа показаны в Таблице 1 (Медианное IC₅₀ мкМ Adapta).

Пример 19

Скрининг высоко-содержащей аутофагии

Клетки остеосаркомы человека (HOS), стабильно экспрессирующие Зеленый Флуоресцентный Белок (GFP), меченные LC3 (GFP-LC3) использовались для определения ингибирующего эффекта заявленных соединений на аутофагию. С этой целью аутофагию активировали с использованием mTOR ингибитора KU-0063794 при концентрации 500 нМ в присутствии Бафиломицина А1 (Sigma-Aldrich) при концентрации 5 нМ. Вкратце, клетки поместили на ночь в 96-луночные планшеты с прозрачным дном в среде DMEM-High Modified media (Hi-Clone Cat # SH30285.01). В начале эксперимента среду удалили и заменили на свежую среду, содержащую ингибитор mTOR, Бафиломицин А1 и носитель или тестируемое соединение как указано. Через 6 часов среду удалили, клетки промыли дважды с помощью ледяного фосфатно-солевого буфера (PBS) и зафиксировали 4% параформальдегидом в течение 20 минут при комнатной температуре. Затем клетки промыли дважды с помощью ледяного PBS перед добавлением Hoechst 33342 при 1 мкг/мл в PBS для окраски ядра. После инкубирования в течение ночи при 4°С, клетки промыли один раз с помощью PBS для удаления избытка красителя и 100 мкл PBS добавили в каждую лунку. Изображения получили при 20× увеличении, 6 изображений на лунку, с использованием автоматического микроскопа ImageXpress (Molecular Devices Inc.) и и анализировали с помощью программного обеспечения MetaXpress для идентификации очагов LC3-GFP. Значения области очага на клетку использовались для построения кривой доза-ответ и значения IC50 рассчитывались с использованием нелинейного аппроксимирующего анализа в программном обеспечении GraphPad Prism.

Протестированные соединения примеров эффективно ингибировали аутофагию в клетках HOS. Результаты анализа показаны в Таблице 2 (Медианное IC₅₀ мкМ клеточный анализ).

Изобретение относится к соединению формулы (I) и к его фармацевтически приемлемым солям, таутомерам и стереоизомерам, где R¹ представляет собой фенил или гетероарил, который является моно- или бициклической 5-10-членной ароматической группой, включающей один или два гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода или серы, причем указанные фенил или гетероарил возможно замещены одним или двумя из R⁵, R⁶, R⁷ и R⁸; R², R³ и R⁴ независимо выбраны из водорода и С₁-С₃алкила; R⁵, R⁶, R⁷ и R⁸ независимо выбраны из галогена, C₁-С₆алкила, С₁-С₆галоалкила, -NHSO₂R⁹, фенила и 5-6-членного моноциклического гетероарила, включающего один или два атома азота; R⁹ представляет собой С₁-С₃алкил. Изобретение также относится к фармацевтической композиции для ингибирования Vps34 на основе указанных соединений формулы (I). Технический результат – получено новое соединение и фармацевтическая композиция на его основе, которые могут найти применение в медицине для лечения и профилактики таких заболеваний, опосредованных ингибированием Vps34. 5 н. и 15 з.п. ф-лы, 2 табл., 19 пр.

1. Соединение формулы (I)

,

где

R¹ представляет собой фенил или гетероарил, который является моно- или бициклической 5-10-членной ароматической группой, включающей один или два гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода или серы, причем указанные фенил или гетероарил возможно замещены одним или двумя из R⁵, R⁶, R⁷ и R⁸;

R², R³ и R⁴ независимо выбраны из водорода и С₁-С₃алкила;

R⁵, R⁶, R⁷ и R⁸ независимо выбраны из галогена, C₁-С₆алкила, С₁-С₆галоалкила, -NHSO₂R⁹, фенила и 5-6-членного моноциклического гетероарила, включающего один или два атома азота;

R⁹ представляет собой С₁-С₃алкил;

и его фармацевтически приемлемые соли, таутомеры и стереоизомеры.

2. Соединение по п. 1, где R⁴ представляет собой С₁-С₃алкил.

3. Соединение по п. 1 или 2, где R² выбран из водорода и метила.

4. Соединение по любому из пп. 1-3, где R³ представляет собой водород.

5. Соединение по любому из пп. 1-4, где R⁴ представляет собой метил.

6. Соединение по любому из пп. 1-5, где R² представляет собой водород.

7. Соединение по любому из пп. 1-6, где

R¹ выбран из фенила, фурила, тиенила, пиридила, пиримидинила, хинолинила, индазолила, индолила, 4-азаиндолила, бензоксазолила, бензимидазолила, бензотиофенила, каждый возможно замещен одним или двумя из R⁵, R⁶, R⁷ и R⁸; и

R⁵, R⁶, R⁷ и R⁸ независимо выбраны из галогена, С₁-С₃алкила, С₁-С₃галоалкила, фенила, -NHSO₂CH₃, имидазолила и пиразолила.

8. Соединение по любому из пп. 1-7, где R¹ выбран из фенила, фурила, тиенила, пиридила, пиримидинила и хинолинила, каждый возможно замещен R⁵ и/или R⁶; и R⁵ и R⁶ независимо выбраны из хлора, фтора трифторметила, метила, фенила, -NHSO₂CH₃ и пиразолила.

9. Соединение по любому из пп. 1-7, где R¹ выбран из

где R⁵ и R⁶ независимо выбраны из галогена, С₁-С₃алкила, С₁-С₃галоалкила, фенила, пиразолила и -NHSO₂CH₃.

10. Соединение по любому из пп. 1-9, где R¹ представляет собой фенил или 5- или 6-членный моноциклический гетероарил.

11. Соединение по любому из пп. 1-8 или 10, где R¹ выбран из фенила и пиридила, каждый возможно замещен R⁵ и/или R⁶; и R⁵ и R⁶ независимо выбраны из хлора, фтора и трифторметила.

12. Соединение по любому из пп. 1-4 или 6-11, где R¹ выбран из

R⁴ представляет собой С₁-С₃алкил;

и R⁵ и R⁶ независимо выбраны из хлора, фтора и трифторметила.

13. Соединение по любому из пп. 1-12, где R¹ выбран из

R² представляет собой водород; и

R⁵ выбран из хлора и трифторметила.

14. Соединение по любому из пп. 1-4 или 6-13, где R¹ выбран из

R² представляет собой водород;

R⁴ представляет собой С₁-С₃алкил; и

R⁵ и R⁶ независимо выбраны из хлора, фтора и трифторметила.

15. Соединение по п. 1, где

R¹ выбран из

R² представляет собой водород или метил;

R³ представляет собой водород;

R⁴ представляет собой метил;

R⁵ и R⁶ выбраны из хлора, фтора, трифторметила, метила, фенила, пиразолила и -NHSO₂CH₃; и

его фармацевтически приемлемые соли и стереоизомеры.

16. Соединение по п. 1, указанное соединение выбрано из:

6-(2-хлорфенил)-4-морфолино-1Н-пиридин-2-он;

6-(2-хлорфенил)-1-метил-4-морфолино-пиридин-2-он;

6-(2-хлорфенил)-4-(3-метилморфолин-4-ил)-1Н-пиридин-2-он;

6-(2-хлорфенил)-1-метил-4-(3-метилморфолин-4-ил)пиридин-2-он;

4-(3-метилморфолин-4-ил)-6-(4-метил-3-пиридил)-1Н-пиридин-2-он;

4-(3-метилморфолин-4-ил)-6-пиримидин-5-ил-1Н-пиридин-2-он;

4-(3-метилморфолин-4-ил)-6-(2-фенилфенил)-1Н-пиридин-2-он;

6-(2-xлop-5-фтop-фeнил)-4-[(3R)-3-мeтилмopфoлин-4-ил]-1H-пиpидин-2-oн;

4-[(3R)-3-мeтилмopфoлин-4-ил]-6-(o-тoлил)-1Н-пиридин-2-он;

4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-6-[2-(трифторметил)-3-пиридил]-1Н-пиридин-2-он;

6-(2-хлорфенил)-4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-1Н-пиридин-2-он;

4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-6-[2-(трифторметил)фенил]-1Н-пиридин-2-он;

6-(3-фурил)-4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-1Н-пиридин-2-он;

4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-6-(4-метил-3-тиенил)-1Н-пиридин-2-он;

N-[2-[4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-6-оксо-1Н-пиридин-2-ил]фенил]метансульфонамид;

4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-6-(6-метил-5-хинолил)-1Н-пиридин-2-он;

4-[(3R)-3-метилморфолин-4-ил]-6-[4-(1Н-пиразол-5-ил)фенил]-1Н-пиридин-2-он;

и его фармацевтически приемлемые соли, таутомеры и стереоизомеры.

17. Соединение по любому из пп. 1-16 для применения в ингибировании Vps34.

18. Применение соединения по любому из пп. 1-16 в изготовлении лекарственного средства для ингибирования Vps34.

19. Способ ингибирования Vps34, содержащий введение терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп. 1-16 нуждающемуся в этом пациенту.

20. Фармацевтическая композиция для ингибирования Vps34, содержащая эффективное количество соединения по любому из пп. 1-16, и фармацевтически приемлемый разбавитель, носитель и/или эксципиент.