СПОСОБ ПРИМЕНЕНИЯ НИКОТИНОВОЙ И ЯНТАРНОЙ КИСЛОТ И ЕЕ СОЛЕЙ КАК СТИМУЛЯТОРОВ ОБОНЯНИЯ У СОБАК Российский патент 2021 года по МПК A61K31/185 A61D99/00 

Изобретение относится к области ветеринарной фармакологии, а именно, применению химических соединений - янтарной и никотиновой кислоты, а также солей железа янтарной и никотиновой кислоты, влияющих на мозговое кровообращение, уменьшающих свободно-радикальные процессы и усиливающих обоняние у животных.

Никотиновая кислота, витамин РР, ниацин - антиоксидантом и антигипоксантом, содержится в зерновых, печени, является основным метаболитом для ферментов никотинамиддинуклеотид (НАД) и никотинамиддинуклеотид фосфат (НАДФ).

Используется как биологически активная добавка в комплексном лечении сердечно-сосудистых заболеваний (Е.П. Трухачева, М.П. Ежов Значение никотиновой кислоты в современной кардиологии / Е.П. Трухачева, М.П. Ежов // Рациональная фармакотерапия в кардиологии. - 2011. - №7 (3). - С. 365-370. [1]).

Янтарная кислота - антигипоксант, являющийся частью основного метаболического поставщика - цикла Кребса, который присутствует во всех живых клетках.

Янтарная кислота эффективно способствует устранению острых гипоксических состояний: инфаркта, инсульта (Никитина Е.В., Романова Н.К. Янтарная кислота и ее соли как индивидуальные антиоксиданты и генопротекторы. Вестник Казанского технологического университета, №. 10, 2010, С. 375-381. [2]).

Сукцинат железа (II) дигидрат в соответствии с острой токсичностью использовали в соответсвии с рекомендациями (Гасанов А.С.Фармако-токсикологические характеристика антианемического средства сукцината железа. Дисс.… доктора биол.наук. Казань, 2006. 272 с. [3]

Прототипами этих антиоксид антов являются жирорастворимые витамины - токоферол (витамин Е) и ретинол (витамин А), обладающие способностью связывать радикалы в цитозоле клеток, плазме крови, крови и лимфе. Жирорастворимые биоантиоксиданты, в основном, защищают от перекисного окисления мембраны клеток.

Ближайшими по технической сущности и принятые за прототипы стимуляторов обоняния у собак являются алкалоид кофеин и фенамин, обладающие стимулирующим (адренергическим) влиянием на ЦНС, увеличивающие частоту и силу сердечных сокращений, тонус мыщц [А.С. Мозжухин, 1946].

Известно, что после приема веществ, возбуждающих нервную систему (кофеин, эфедрин) повышается чувствительность органа обоняния человека к запаху этилового спирта и уксусной кислоты (Крушинский, Л.В. Искусственное усиление обоняния у служебных собак / Л.В. Крушинский // Журнал высшей нервной деятельности. - 1959. - Т. 9. - Вып.2. - С. 3-7. [4]).

Задачей изобретения является способ применения солей никотиновой и янтарной кислоты, как стимуляторов обоняния и соединений, обладающих более низкой токсичностью, чем лекарственные препараты - кофеин и фенамин.

Изучение влияния фенамина на условные рефлексы у собак и некоторых других животных показало, что этот препарат в оптимальных дозах оказывает благотворное влияние на высшую нервную деятельность, большие же его дозы могут вызвать нарушения высшей нервной деятельности [4]. А.И. Бронштейн (1950) выясняя влияние стрихнина, кофеина, фенамина и пирамидона на величину порога восприятия запаха таких веществ, как кумарин, камфора и другие, установил, что кофеин повышает чувствительность человека к запаху на 15-20% и фенамин - на 35-55%.

Фенамин оказывается наиболее действенным средством для повышения чувствительности обонятельного анализатора человека по сравнению с другими изученными веществами (кофеин, стрихнин и др.) (Бронштейн, 1951, Серейский, 1943) [4].

Указания об усилении обоняния у собак под влиянием фенамина, кофеина и брома имеются в работе Д.А. Флесса (1952) и Н.М. Мызникова (1958) Л.В. Крушинский (1946) и Д.А. Флесс (1952) провели ряд исследований, в результате которых были уточнены дозировки применения фенамина в отдельности, а также совместно с бромом и кофеином. Оптимальная разовая доза фенамина оказалась для разных собак в пределах 0,01-0,02 г. Возраст в пределах 1-7 лет и пол не имели определяющего значения для величин оптимальной дозы фенамина, но тип высшей нервной деятельности при этом играл определенную роль. Так, у собак с признаками слабости нервной системы (периодические отказы при следовой работе, боязнь выстрелов) средняя доза фенамина - 0,015 г оказалась чрезмерной. Введение фенамина собакам, плохо или недостаточно выдрессированным по розыскной службе, не приводило к существенному улучшению их следовой работы и, следовательно, не могло компенсировать недостаточность их дрессировки и тренировки.

На нескольких собаках выяснилось влияние фенамина на качество выполнения выборки. Фенамин давался собакам за 40-50 мин до испытания.

Фенамин заметно улучшал качество выполнения собакой важного приема розыскной службы - выборки.

В результате воздействия данных веществ повышалась продолжительность поиска, улучшалась следовая работа и качества выборки у служебных собак (Крушинский, Л.В. Служебная собака / Л.В. Крушинский, Е.К. Меркурьев, И.Е. Израилевич [и др.] - М.: Государственное издательство сельскохозяйственной литературы, 1952. - 412 с. [5]).

Фенамин обладает малой широтой терапевтического действия и, в случае передозировки, которая может возникнуть в случае даже незначительного повышения дозы (на 10% выше терапевтической) животные могут погибнуть от возникающих сердечных нарушений - тахикардии и экстрасистолии. Это серьезно ограничивает возможности применения таких стимуляторов обоняния.

Как известно, янтарная кислота является веществом, относящееся 5 класс токсичности, снижает риск возникновения нейрозаболеваний. Янтарная кислота и ее соли - сукцинаты в составе ряда фармпрепаратов (реамберин) используется в комплексном восстановительной терапии заболеваний неврологического генеза [6]. Это вещество способствует регенерации и восстановлению нервных клеток.

Токсичность кофеина (LD₅₀) - 192 мг/кг (перорально, мыши). (Электронный ресурс: http://chemister.ru/Database/properties. php?dbid=l&id=728 (дата обращения: 14.10.2019, [7]).

Токсичность фенамина (LD₅o) составляет 353 мг/ кг (перорально, мыши) (перорально, мыши) (Электронный ресурс: www.xumuk.ru/spravochnik/199.html (дата обращения: 14.12.2019), [8].

Токсичность янтарной кислоты (LD₅₀) - 3400 мг/кг (перорально, мыши) (Басанкин А.В. Фармако-токсикологическое обоснование применения янтарной кислоты в животноводстве и ветеринарии. Автореф. канд. вет. наук. 2007. КГАВМ, Казань, 23 с.) [9].

Источником янтарной кислоты использованы таблетки (Россия, производство «Квадрат-С»), содержащие 0,1 г для приема внутрь [10].

Янтарная кислота использовалась за 15 минут до опыта в количестве 50 мг/30 кг живого веса собаки перорально, что эквивалентно соответствует дозе для человека в соответствии с массой тела равной 75 кг.

Никотиновая кислота в таблетках (Россия, производства ОАО «Фармстандарт-УфаВИТА»), содержащих 0,05 г действующего вещества [10].

Влияние на обоняние изучали на 60 собаках пород немецкая и бельгийская овчарка (малинуа) методом пар - аналогов по 30 собак каждой породы в течение 2-х лет [11].

В эксперименте участвовали здоровые собаки и только после осмотра ветеринарным специалистом. Группы собак - контрольная и опытная -обладали равными навыками и умениями, различались возрастом и полом.

С целью определения влияния янтарной кислоты на обоняние собак был определен обонятельный порог по методике, описанной Л.В. Крушинским [5].

Янтарная кислота скармливалась собакам с лакомством после осмотра их ветеринарным специалистом за 15 минут до пуска на обнюхивание банок. На закрепленной доске находились пять чистых одинаковых банок, которые представляли собой пластиковые трубы одинакового диаметра, внутрь одной из банок помещали кусочек вареной свинины размером 2 см³. Банки сверху накрывались фильтровальной бумагой, которая закреплялась резинкой (фиг 1). Для проведения эксперимента была выбрана фильтровальная бумага «Белая лента», соответствующая ГОСТ 12026-76. Фильтрующая способность бумаги была не более 45 с, массовая доля золы - не более 0,2%. (фиг. 2).

После подготовки помещения в кабинет запускались кинолог с собакой. Сначала собака отпускалась с поводка для ознакомления с помещением.

После этого кинолог, стоя в 1,5-2 м от банок, подзывал собаку к себе и жестом правой руки направлял собаку для самостоятельного обнюхивания банок. Пуск осуществлялся всегда с одной стороны.

Как только собака обозначала нужную банку, кинолог поощрял собаку и, прицепив поводок, уводил ее из помещения на выгул. В это время банки тщательно промывались другим человеком в перчатках, протирались, добавлялось количество фильтровальной бумаги, банки с «начинкой» менялись местами, после чего кинолог заводил собаку для очередного пуска.

Повторный пуск собаки продолжался до тех пор, пока собака не переставала улавливать запаховые частицы и не находила лакомство. Если собака тратила на нахождение искомого предмета более 1 минуты, она снималась с выборки.

Кинолог выводил собаку из помещения, в этот момент менялись местами банки, и собака запускалась снова.

Данная процедура повторялась три контрольных раза с интервалом в 7 дней: в 1-й, в 7-й и 14 дней. В опытной группе собаки получали янтарную кислоту в количестве 50 мг на 30 кг живого веса собаки. По завершению опыта кинолог выгуливал собаку и ставил ее в место содержания. Во второй и третий день давали вещества собакам за 15 минут до прохождения по банкам. Оценку влияния янтарной кислоты проводили по качественному показателю - результативность собак в выборке вещи и количественному показателю - время, затраченное на время поиска. Время поиска, которое собаки затратили на прохождение приведены в виде среднего арифметического и среднеквадратичного отклонения (σ).

Результаты применения янтарной кислоты приведены в таблице 1.

Обонятельный порог в группе контроля изменился на 32,65%, а в группе опыта на 51,92%. Под влиянием янтарной кислоты в опытной группе изменилось время, которое затратили собаки на нахождение мяса на 10,16%, а в группе контроля 8,9%.

Для определения влияния никотиновой кислоты в дозе 0,05 г на собаку весом 35-40 кг давали за 15 минут до выполнения выборки вещи. В таблице 2 приведены результаты применения никотиновой кислоты на обонятельную активность немецких овчарок и бельгийских овчарок (малинуа) в виде среднего значения и среднеквадратичного отклонения (σ).

В контрольной группе произошло незначительные изменения. Прием заявленных веществ является более безопасным в связи с большей широтой терапевтического действия, чем прием химических соединений - прототипов (фенамина, кофеина).ное увеличение результативности выполнения выборки вещи. В то же время опытная группа показала прирост результативности на 18,8%.

Было обнаружено, что время выполнения выборки вещи на фоне применения у собак никотиновой кислоты сократилось на 21,6%, а время в группе контроля уменьшилось на 7,8%, что свидетельствует об эффективном использовании никотиновой кислоты как стимулятора обонятельной активности.

С целью определения влияния на обоняние сукцината железа было сделано выполнение собаками выборки человека. Этот эксперимент состоял в том, что 7-10 человек находятся в строю, а при обнюхивании этих людей собака находит у них предметы, либо собакой устанавливается человек, который спрятал предмет, который ищет собака.

Результаты влияния сукцината железа на выборку человека приведены в таблице 3 в виде среднего арифметического и среднеквадратичного отклонения.

Собаки, которые получали сукцинат железа, были заинтересованы в обнюхивании, меньше подвергались утомлению и по результативности прирост за 14 дней в серии из 3-х экспериментов составил 38,8%, а в группе контроля результативность за 14 дней возросла значительно меньше - на 13,1%. Время поиска составила в группе контроля за 14 дней снизилось на 12,3%, а в группе опыта на 29,2%. Группа собак, которая получала сукцинат железа работала с большей эффективностью.

Применение сукцината железа в качестве стимулятора обоняния происходило по аналогичной схеме и в дозе 0,02 г на собаку весом 35-40 кг (породы немецкая и бельгийская овчарки).

Зачастую интенсивные физические нагрузки, некоторые заболевания животных с длительным латентным периодом способствуют формированию у собак обонятельной усталости [12], соли железа используются для профилактики железо дефицитной анемии у собак [13].

Все эти факторы являются существенными затруднениями, которые приводят к невыполнению или неудовлетворительному выполнению собакой служебных задач по поиску предметов или человека.

Прием заявленных веществ является более безопасным в связи с большей широтой терапевтического действия, чем прием химических соединений - прототипов (фенамина, кофеина).

Поставленная задача достигается тем, что за 15 минут до использования в проведении оперативных или режимных мероприятий по поиску предметов, веществ и человека служебной собаке перорально с лакомством дают никотиновую, янтарную кислоты в дозе 0,05 г / 30 кг веса животного или сукцинат железа дигидрат в дозе 0,02 г / 30 кг веса животного.

Список литературы

1. Трухачева, Е.П. Значение никотиновой кислоты в современной кардиологии / Е.П. Трухачева, М.П. Ежов // Рациональная фармакотерапия в кардиологии. - 2011. - №7 (3). - С. 365-370.

2. Никитина Е.В., Романова Н.К. Янтарная кислота и ее соли как индивидуальные антиоксиданты и генопротекторы. Вестник Казанского технологического университета, №. 10, 2010, С. 375-381.

3. Гасанов А.С. Фармако-токсикологические характеристика антианемического средства сукцината железа. Дисс.… доктора биол.наук. КГАВМ, Казань, 2006. 272 с.

4. Крушинский, Л.В. Искусственное усиление обоняния у служебных собак / Л.В. Крушинский // Журнал высшей нервной деятельности. - 1959. - Т. 9. - Вып. 2. - С. 3-7.

5. Крушинский, Л.В. Служебная собака / Л.В. Крушинский, Е.К. Меркурьев, И.Е. Израилевич [и др.] - М.: Государственное издательство сельскохозяйственной литературы, 1952. - 412 с.

6. Румянцева С.А. Комплексная антиоксидантная терапия реамберином в комплексной терапии больных с заболеваниями нервного генеза / С.А. Румянцева // Реамберин: реальность и перспективы, сб. науч. статей, СПб., 2002. С. 74-98.

7. Электронный ресурс: www.xumuk.ru/spravochnik/199.html (дата обращения: 14.12.2019).

8. Басанкин А.В. Фармако-токсикологическое обоснование применения янтарной кислоты в животноводстве и ветеринарии. Автореф.… на соискание канд. вет. наук. 2007. КГАВМ, Казань, 23 с.

9. Электронный ресурс: https://www.rlsnet.ru/mnn_index_id_1023.htm (дата обращения: 14.12.2019).

10. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. М. 2000. 155 с.

11. Коптев В.В. Основы научных исследований и патентоведения: для с.-х. вузов инженер. и агроном. специальностей / Коптев В.В., Богомягких В.А., Трифонова М.Ф. - М.: Колос, 1993. - 144 с.

12. Райт, P. X. Наука о запахах. - М.: Мир, 1966. - 221 с.

13. Кононова Н.Ю., Зухрабов М.Г. Сравнительная эффективность препаратов хелавит и сукцината железа для профилактики железодефицитной анемии у беременных сук. Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана, Т. 207, №. 3, 2011, С. 293-297.

Группа изобретений относится к области ветеринарной фармакологии, а именно применению никотиновой, янтарной кислот и ее соли - сукцината железа дигидрата, влияющих на мозговое кровообращение, уменьшающих свободно-радикальные процессы и усиливающих обоняние у животных. Применение янтарной и никотиновой кислот в качестве стимулятора обоняния у собак заключается в том, что янтарную кислоту или никотиновую кислоту в дозе 0,05 г на каждые 30 кг веса за 15 мин до предполагаемого использования служебной собаки с лакомством дают перорально. Применение сукцината железа дигидрата как стимулятора обоняния у собак заключается в том, что сукцинат железа дигидрат в дозе 0,02 г на 30 кг веса животного дают за 15 мин до предполагаемого использования служебной собаки с лакомством. Техническим результатом является возможность применения никотиновой, янтарной кислот и ее соли - сукцината железа, обладающих более низкой токсичностью, в качестве стимуляторов обоняния у собак. 3 н.п. ф-лы, 2 ил., 3 табл.

1. Применение янтарной кислоты в качестве стимулятора обоняния у собак заключается в том, что янтарную кислоту в дозе 0,05 г на каждые 30 кг веса за 15 мин до предполагаемого использования служебной собаки с лакомством дают перорально.

2. Применение никотиновой кислоты как стимулятора обоняния у собак заключается в том, что за 15 мин до предполагаемого использования служебной собаки с лакомством дают перорально в дозе 0,05 г на каждые 30 кг веса животного.

3. Применение сукцината железа дигидрата как стимулятора обоняния у собак заключается в том, что сукцинат железа дигидрат в дозе 0,02 г на 30 кг веса животного дают за 15 мин до предполагаемого использования служебной собаки с лакомством.