Способ прогнозирования прогрессирующего течения ранних форм неалкогольной жировой болезни печени Российский патент 2022 года по МПК G01N33/53 

Назначение изобретения.

Способ относится к медицине, а именно к области гепатологии, и предназначен для скринингового выявления больных ранними формами неалкогольной жировой болезни печени (НАЖБП), имеющих признаки прогрессирующего течения заболевания с вероятностью трансформации в активный гепатит и цирроз печени.

Способ планируется использовать среди взрослого населения - пациентов амбулаторного и стационарного звена, пациентов диспансеров, амбулаторий, клиентов частных клиник и лабораторий.

Уровень мировой техники.

Из уровня мировой техники известен способ дифференциальной диагностики стеатогепатита алкогольной и неалкогольной этиологии [1]. Данный способ заключается в том, что у больного с установленным диагнозом «стеатогепатит» определяют концентрацию уропорфирина (УП) и копропорфирина (КП) в моче, а также содержание КП и протопорфирина (ПП) в кале. В зависимости от совокупности их значений диагностируют алкогольный стеатогепатит (АСГ) или неалкогольный стеатогепатит (НАСГ). Использование способа позволяет дифференцировать стеатогепатит алкогольной и неалкогольной этиологии. Недостатком данного способа является то, что в результате только устанавливается этиология стеатогепатита, однако нельзя сделать никаких выводов о прогнозе и рекомендаций по ведению больных.

Известен способ диагностики неалкогольного стеатогепатита, позволяющий выявлять метаболические изменения в организме, включающий исследование слюны больного, отличающийся тем, что к капле слюны больного добавляют каплю кристаллообразующего вещества - 3% спиртового раствора хлорида меди, выдерживают полученный препарат в течение 24 часов в горизонтальном положении при температуре 20-25°С, влажности 50-70%, вдали от прямых солнечных лучей и нагревательных приборов и исследуют под микроскопом, при этом наличие и выраженность неалкогольного стеатогепатита определяют присутствием и количеством в микроскопическом препарате аморфных темно-желтых масс с наложением на кристаллы в виде «метелок» или «пучков», а отсутствие неалкогольного стеатогепатита определяют наличием в микроскопическом препарате кристаллов в виде «метелок» или «пучков» без наложения аморфных темно-желтых масс [2]. Недостатком данного метода является то, что для его проведения необходимы специфические реактивы и микроскоп, проведение исследования с участием специально обученного персонала, а результат исследования может быть получен не ранее, чем через сутки.

Из уровня мировой техники известен способ дифференциальной диагностики стеатоза печени и стеатогепатита путем биохимического исследования, отличающийся тем, что определяют фосфолипазу А2, оксид азота и эндотоксин и при значении фосфолипазы А2 199,7-252,5 нг/мл, оксида азота 93-94,6 нкмоль/л и эндотоксина 2,2-2,6 ЕЭ/мл диагностируют стеатоз печени, а при значении фосфолипазы А2 412,5-576,5 нг/мл, оксида азота 137,5-168,5 нкмоль/л и эндотоксина 3,32-4,18 ЕЭ/мл диагностируют стеатогепатит [3]. Недостатком данного способа является необходимость исследования трех специфических лабораторных параметров, не использующихся в рутинном здравоохранении.

Известен способ ультразвуковой диагностики неалкогольной жировой болезни печени, заключающийся в том, что при ультразвуковом сканировании печени получают фиксированное изображение - поперечный скан печени, включающий изображение печеночных вен таким образом, чтобы на одном срезе визуализировались продольно ориентированные печеночные вены, их устья и нижняя полая вена на уровне впадения в нее печеночных вен, используют постпроцессорную обработку изображения, на эхограмме выделяют зоны интереса (ROI) в области паренхимы печени (ROIпеч) и в области просвета нижней полой вены без захвата стенки сосуда (ROIнпв), получают гистограммы распределения уровней яркости количественной оценки эхогенности, определяют медиану распределения на полученных гистограммах уровней яркостей, вычисляют печеночно-венозный индекс (ПВИ) как отношение медианы интенсивности эхосигнала печени к медиане интенсивности эхосигнала в просвете нижней полой вены и при значениях ПВИ 3,64, а также при исключении у пациента путем сбора анамнеза факторов, свидетельствующих о наличии гепатитов различной этиологии, употребления алкоголя (в количествах более 30 г/сут. для мужчин и более 20 г/сут. для женщин) диагностируют наличие НАЖБП [4]. Недостатком данного способна является необходимость проведения специфического инструментального исследования с дополнительным программным обеспечением с участием специально обученного узкого специалиста.

Из уровня мировой техники известен способ неинвазивной диагностики неалкогольной жировой болезни печени у детей с ожирением [5]. Данный способ заключается в том, что детям с ожирением проводят УЗИ органов гепатобилиарной системы и полигепатографию. Анализируют данные изменений эхогенности печени, обеднения сосудистого рисунка, нарушений гемодинамики, оценивают индекс массы тела и продолжительность заболевания, после чего диагностируют наличие/отсутствие заболевания по оригинальной расчетной формуле. Определяют коэффициент заболеваемости D0. При величине D0>0 диагностируют наличие неалкогольной жировой болезни печени. Способ обеспечивает точную и раннюю диагностику НАЖБП у детей с ожирением за счет одновременной оценки изменений эхогенности печени, обеднения сосудистого рисунка, нарушений гемодинамики, индекса массы тела и продолжительности заболевания. Недостатками данного способа являются разработанность только для пациентов детского возраста, необходимость проведения комбинированного специфического инструментального исследования с использованием аппарата УЗИ, участием специально обученного узкого специалиста. Он свидетельствует только о наличии структурных изменений в печени без дифференциации воспаления и фиброза.

Известен способ определения митохондриальной дисфункции у больных неалкогольной жировой болезнью печени [6]. Данный способ заключается в клинико-лабораторном исследовании, при котором выделяют ДНК из лейкоцитов венозной крови больного НАЖБП с последующим проведением полимеразной цепной реакции с применением при этом стандартных пар праймеров с последующим определением длины концевых участков хромосом лейкоцитов периферической крови, и при полученных значениях данного показателя выше референсных определяют митохондриальную дисфункцию у больных НАЖБП, в частности к гепатологии и клинической лабораторной диагностике. Недостатками данного способа являются необходимость проведения высокотехнологического лабораторного исследования с использованием дорогостоящего оборудования и участия специально обученного персонала, которыми не располагает первичное звено здравоохранения.

Из уровня мировой техники известен способ определения атеросклеротического поражения сосудистой стенки у пациентов с абдоминальным ожирением и неалкогольной жировой болезнью печени [7]. При использовании данного способа проводят диагностику патологических изменений в печени - определение значения 10 маркеров Стеатоскрин. При этом среднюю толщину интима-медиа сонной артерии у пациента определяют по формуле У=0,64+0,34 Стеатоскрин, и если У≥0,86 мм, то у пациента определяют ранние признаки атеросклероза. Также предложен способ диагностики с использованием пиковой систолической скорости кровотока во внутренней сонной артерии у пациента. Группа изобретений позволяет диагностировать патологию печени и развитие атеросклеротического поражения сосудистой стенки без использования инвазивных методик. Недостатками данного способа являются необходимость выполнения инструментального исследования с использованием специального оборудования и узко специализированный обученный медицинский персонал.

Известен способ диагностики поражений печени при атерогенной дислипидемии путем биохимического исследования крови, отличающийся тем, что дополнительно проводят морфологическое исследование биоптатов печени и определяют наличие анизокариоза гепатоцитов, и при содержании гепатоцитов с вакуолями 33% и более, наличии некроза гепатоцитов, внутридольковых инфильтратов и фиброза судят о активности хронического гепатита [8]. Недостатком данного способна является необходимость проведения инвазивного исследования, а именно биопсии ткани печени, которое выполняется строго в условиях круглосуточного стационара, требует участия высоко квалифицированных врачебных кадров, имеет целый ряд потенциально опасных осложнений, экономически затратный и невозможно выполнять данное исследование многократно для оценки динамики патологического процесса, кроме того зависит от места забора биопсионного материала, которое может не отражать патологического процесса в печени в целом.

Из уровня мировой техники известен способ прогнозирования исхода гепатита в цирроз [9]. При данном способе проводят контраст-усиленное ультразвуковое исследование. Выделяют 4 критерия путем анализа количественных и качественного параметров контраст-усиленного ультразвукового исследования: 1) увеличение времени начала порто-венозной фазы на 20% и более от нормы; 2) увеличение транзита контрастного препарата на 15% и более от нормальных показателей; 3) наличие неоднородности выведения контрастного препарата в IV-V-VI-VII сегментах печени в отстроченной фазе на 4-6 минуте с формированием очаговой картины; 4) наличие деформации сегментарных и внутрисегментарных сосудов в виде извитой структуры в артериальной фазе. При наличии 2-х и более критериев прогнозируют неблагоприятный исход. При наличии только 1 критерия определяют как недостоверный результат, при котором требуется дальнейшее наблюдение. При отсутствии данных критериев прогнозируют благоприятный исход. Недостатками данного способа являются необходимость проведения инструментального исследования с использованием специализированной техники и участие специально обученного специалиста.

Из уровня мировой техники известен способ оценки тяжести течения патологического процесса при хронических диффузных поражениях печени [10]. При использовании данного способа определяют в плазме крови уровни печеночно-специфических ферментов (ПСФ): урокиназы (УК), гистидазы (ГИС), фруктоза-1-фосфатальдолазы (Ф-1-Ф), сериндегидротазы (L-СД), треониндегидратазы (L-ТД). Продуктов перекисного окисления липидов: диеновых конъюгатов (ДК), малонового диальдегида (МДА). Определяют состояние параметров неспецифического иммунитета: иммунорегуляторного индекса (ИРИ) как соотношения Т-хелперов и Т-супрессоров, циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК). Дополнительно оценивают состояние регионального кровотока с использованием реогепатографии (РГГ), системой микрогемоциркуляции при помощи конъюнктивальной биомикроскопии (КБ) с определением внутрисосудистого индекса (КИ). В случае увеличения уровня УК, ГИС до 0,5 мкмоль/мл/ч, Ф-1-Ф, L-СД, L-ТД, продуктов ПОЛ, ЦИК до 1,5 раз, повышения ИРИ до 2 при норме 1,0-1,5, изменения показателей регионального кровотока, повышения внутрисосудистого КИ до 2 баллов при норме не более 1 балла диагностируют легкую степень течения процесса. При увеличении уровня УК, ГИС до 0,75 мкмоль/мл/ч, Ф-1-Ф, L-СД, L-ТД, продуктов ПОЛ, ЦИК в 1,5-2 раза, повышении ИРИ до 2,5, изменении показателей регионарного кровотока, повышении внутрисосудистого КИ до 3-4 баллов диагностируют среднюю степень течения процесса. При увеличении уровня УК, ГИС свыше 0,75 мкмоль/мл/ч, Ф-1-Ф, L-СД, L-ТД, продуктов ПОЛ, ЦИК в 2 и более раз, повышении ИРИ более 2,5, изменении показателей регионального кровотока, повышении внутрисосудистого КИ до 5 баллов и более баллов диагностируют тяжелую степень течения процесса. Данный способ наиболее близок по определяемым параметрам к предложенному способу, и был взят в качестве прототипа. Указанный способ оценки тяжести течения патологического процесса при хронических диффузных заболеваниях печени является патогенетически оправданным. В отличии от существующих аналогов он позволяет оценить тяжесть "поломки" на органном уровне путем определения печеночно-специфических ферментов, интенсивности перекисного окисления липидов и соотнести полученные результаты с нарушениями, возникшими в кровеносной, иммунной системах при развитии хронических диффузных заболеваний печени. Однако при использовании данного способа необходимо определение большого количества специфических лабораторных маркеров (7 показателей), которые не определяются в учреждениях практического здравоохранения, а также проведение дополнительных инструментальных исследований - реогепатографии и конъюнктивальной биомикроскопии, что также требует дополнительного специального оборудования и обученного медицинского персонала.

Раскрытие изобретения.

Технический результат предлагаемого способа заключается в упрощении оценки прогноза при ранних формах НАЖБП, снижении экономических затрат на оценку прогноза течения НАЖБП, повышении качества диагностики, уменьшении количества персонала, привлеченного для обследования. Кроме того, данный способ позволяет обосновать применение более активной тактики, в том числе, медикаментозной, у больных с ранними формами НАЖБП с выявленным высоким риском прогрессирования даже в отсутствие синдрома цитолиза. Также данный способ является унифицированным, то есть может быть использован любым учреждением медицинского профиля с наличием возможности проведения иммуноферментного анализа и не требует привлечения врачей-узких специалистов, проведения инструментальных методов исследования. Предлагаемый метод не является инвазивным и может проводиться многократно для оценки изменения риска в динамике у одного и того же пациента.

Технический результат достигается благодаря тому, что у пациента берут образец венозной крови, в котором определяют уровни ФНО-α, интерлейкина-6, цитокератина-18, щелочной фосфатазы, гаммаглутамилтранспептидазы, глюкозы и инсулина натощак, отличающийся тем, что у больных оценивают наличие следующих синдромов: системного воспаления, апоптоза гепатоцитов, внутрипеченочного холестаза, и инсулинорезистентности; при этом системное воспаление диагностируют по повышению следующих параметров выше верхней границы нормы: ФНО-α более 5 пг/мл и интерлейкина-6 более 3,5 пг/мл; апоптоз гепатоцитов выявляют при повышении уровня цитокератина-18 более 100 Ед/л; внутрипеченочный холестаз определяют по повышению следующих параметров выше верхней границы нормы: щелочной фосфатазы более 270 Ед/л и/или гаммаглутамилтранспептидазы более 32 Ед/л у женщин и 50 Ед/л у мужчин; инсулинорезистентность - при повышении значения индекса HOMA-IR более 2,6, когда данный индекс рассчитывается с использованием уровня натощакового инсулина и глюкозы по следующей формуле: [глюкоза натощак (ммоль/л) х инсулин натощак (мкЕд/мл) / 22,5]; и при наличии любых двух и более из оцениваемых синдромов прогнозируют риск прогрессирования ранних форм неалкогольной жировой болезни печени, при наличии лишь одного из исследуемых синдромов либо при отсутствии каждого из них определяется отсутствие риска прогрессирования неалкогольной жировой болезни печени.

Описание реализации изобретения.

Предлагаемый способ включает следующие операции: забор образца венозной крови, проведение иммуноферментного анализа с использованием соответствующих наборов для определения уровней ФНО-α, интерлейкина-6, цитокератина-18, инсулина, определения уровней глюкозы, щелочной фосфатазы, гаммаглутамилтранспептидазы стандартными лабораторными методами, расчета индекса HOMA-IR, подсчета количества параметров (из всех определяемых), имеющихся у данного конкретного больного, формирование на основе полученных параметров заключения о наличии высокого или маловероятного риска прогрессирования ранних форм НАЖБП. Данный метод позволяет обследовать большие группы людей разных возрастных групп (от 18 до 70 лет), поэтому необходим метод, который позволил бы в короткие сроки и без дополнительных затрат трудовых и экономических ресурсов определить круг тех пациентов, которые имеют риск прогрессирования НАЖБП в манифестный гепатит и цирроз печени. Предложен способ прогнозирования прогрессирующего течения НАЖБП с помощью оценки лабораторных параметров, который имеет следующие преимущества:

• Результат может быть получен в течение нескольких часов.

• Метод может быть использован на большом количестве пациентов.

• Оценивает сразу все основные звенья патогенеза НАЖБП (апоптоз печеночных клеток, воспаление, холестаз, инсулинорезистентность).

• Метод не требует дополнительной предшествующей подготовки.

• Отсутствие противопоказаний для проведения метода.

• Метод может быть использован как для пациентов со стеатозом печени, так и у больных стеатогепатитом слабой активности, то есть не зависимо от наличия синдрома цитолиза.

• Не требуется проведения каких-либо инструментальных исследований.

• Заключение по результату метода может сделать врач первичного звена, поэтому не требуется задействования врачей-узких специалистов.

В качестве пациентов, к которым применим данный метод, подходят взрослые лица с ранними формами НАЖБП - стеатозом печени и стеатогепатитом, - пациенты то есть с ожирением, которое устанавливается при наличии ИМТ≥30 кг/м², дислипидемией проатерогенного характера (при отсутствии лекарственной коррекции липидного профиля), диффузным усилением эхогенности печени по данным УЗИ органов брюшной полости, в отсутствие других причин поражения печени. Предлагаемый способ включает оценку биомаркеров основных патофизиологических процессов при НАЖБП: воспаления, гепатоцитарного апоптоза, холестаза и инсулинорезистентности, что позволяет всесторонне оценить имеющийся риск прогрессирования НАЖБП.

Характеристика исследуемых лабораторных маркеров прогрессирования ранних форм НАЖБП.

ФНО-α и ИЛ-6. При ожирении избыточное накопление липидов в жировой ткани и печени сопровождается неоангиогенезом и повреждением гипертрофированных клеток - адипоцитов и гепатоцитов. В результате к ним мигрируют активированные макрофаги, которые выделяют цитокины и первично активируют иммунные реакции замедленного типа - развивается системное воспаление, которое является одним из механизмов прогрессирования НАЖБП [11, 12, 13, 14, 15]. Экспрессия ФНО-α и ИЛ-6 достоверно увеличивается в жировой ткани и в печени у больных стеатогепатитом по сравнению со здоровыми лицами [16, 17, 18, 19]. Уровень данных цитокинов коррелирует со степенью фиброза, дислипидемии, маркерами цитолиза и холестаза [20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28]. При СГ уровень ИЛ-6 тесно связан с показателями абдоминального ожирения и ИР, а также со степенью воспаления и фиброза [29, 30], уровнем ACT, высокочувствительного СРБ [31, 32]. ФНО-α приводит к инсулинорезистентности [33, 17, 34]. ФНО-α увеличивает резистентность клеток к действию инсулина внутриклеточно, активируя стрессовые протеазы [23]. Это подтверждают данные о позитивной корреляции ФНО-α с индексом НОМА [35; 36]. ФНО-α является лигандом к рецепторам клеточной гибели, инициирующим апоптоз по внешнему пути [37, 38, 39]. ФНО-α способен активировать и внутренний путь апоптоза гепатоцитов посредством смещения равновесия в пользу проапоптотических белков [40, 41].

Цитокератин-18. Данный маркер является основным белком промежуточных филаментов клеток (в том числе гепатоцитов), и появляется в крови, когда клетки находятся на финальной стадии апоптоза, при разрушении цитоскелета клетки [42, 43]. Подтверждена прямая связь между сывороточным уровнем ЦК-18 и гистологическим признаком апоптоза - тельцами Маллори [44]. Поглощение апоптотических телец звездчатыми клетками печени и миофибробластами увеличивает выработку коллагена 1-го типа, трансформирующего фактора роста-β1; содержащиеся в апоптотических тельцах нуклеотиды дополнительно стимулируют выработку коллагена через специальные рецепторы звездчатых клеток, приводя к фиброзу, связь с которым ЦК-18 подтверждена и клиническими данными [42, 45, 46, 47, 41, 48]. Также выявлена связь апоптоза с цитолизом, неоангиогенезом, ФНО-α, ИР, дислипидемией, внутрипеченочным холестазом [29, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57].

Щелочная фосфатаза и гаммаглутамилтранспептидаза.

Повышение уровня ГГТП происходит в качестве защитного механизма в ответ на развитии ИР вследствие антиоксидантной активности данного фермента [58, 59]. А также данные ферменты являются маркерами внутрипеченочного холестаза, то есть патологического накопления желчных кислот в печени и их токсического действия на гепатоциты [60]. По данным литературы, при НАЖБП отмечается увеличение пула гидрофобных токсичных желчных кислот [11, 61, 62, 63]. При увеличении концентрации жирных кислот в гепатоцитах нарушается работа ауторегуляции фарнезоидного Х-рецептора, и не происходит активации защитных механизмов по подавлению ресинтеза гидрофобных желчных кислот, что опосредует гепатоцитарный механизм билиотоксичности при холестазе [64]. Кроме того, в отсутствие активации фарнезоидного Х-рецептора ухудшается инсулиночувствительность в связи со снижением выработки глюкагоноподобного пептида 1-го типа энтероэндокринными клетками [65, 66]. У пациентов НАЖБП была выявлена тесная корреляционная связь желчных кислот, ЩФ и ГГТП с уровнем инсулина, глюкозы и HOMA-IR [67, 69, 69, 70], уровнем фиброза [39, 64, 67, 70, 71] и апоптоза печеночных клеток [29, 72, 73].

Инсулинорезистентность и индекс HOMA-IR. При ожирении висцеральная жировая ткань инфильтрирована макрофагами, которые секретируют ФНО-α [74]. Именно этот цитокин и избыток СЖК приводят к нарушению работы инсулинового рецептора и, развитию ИР [75, 76, 77]. Метаболиты СЖК, диацилглицеролы (ДАГ) также негативно влияют на инсулиновый сигнальный путь, нарушая работу инсулинового рецептора 2-го типа, в результате чего усиливается глюконеогенез, снижается синтез гликогена в печени, в ответ на гипергликемию увеличивается выработка инсулина поджелудочной железой, а гиперинсулинемия стимулирует липогенез [78, 79, 80, 81, 82]. Индекс НОМА отражает наличие системной ИР. Выявлена тесная связь индекса ИР при НАЖБП с фиброзом, степенью ожирения, ИЛ-6, ФНО-α, цитолизом, холестазом и дислипидемией [46, 77, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90].

Апробация разработанного способа на пациентах НАЖБП и здоровых добровольцах.

Описанный способ был апробирован на 244 пациентах терапевтического отделения и поликлиники ЧУЗ КБ РЖД-Медицина на ст. Петрозаводск ОАО РЖД.

Оценивались индекс массы тела (ИМТ), окружность талии (ОТ), клинический анализ крови, стандартные печеночные функциональные тесты - АЛАТ, АСАТ, билирубин, щелочная фосфатаза (ЩФ), холестерин, липопротеины высокой плотности (ЛПВП) и низкой плотности (ЛПНП), триглицериды (ТГ), глюкоза, альбумин с использованием автоматического анализатора «Random Access F-15» («BioSystems», Испания). Всем пациентам выполнялась абдоминальная ультрасонография (аппарат Vivid Pro-7, «General Electric», USA). Для оценки системного воспаления определялся фактор некроза опухолей-альфа (ФНО-α) иммуноферментным методом с помощью коммерческих тест-систем «Human TNFα Platinum ELISA» («eBioscience», Австрия). Фрагменты ЦК-18 (ФЦК-18) оценивались иммуноферментным методом с использованием тест-системы «TPS ELISA» («Biotech», Швеция). Слепая чрескожная и лапароскопическая прицельная биопсия печени выполнена 19 (7,8%) больным. Оценка гистологических параметров проводилась согласно Nonalcoholic fatty liver disease activity score (NAS) [91]. Рассчитывался индекс фиброза NAFLD fibrosis score (NFS): (возраст, ИМТ, наличие нарушений углеводного обмена, АЛТ, ACT, уровень альбумина и тромбоцитов): < -1,455: предиктор отсутствия значительного фиброза (F0-F2 fibrosis), ≤ -1,455 to ≤ 0,675: промежуточный индекс, > 0,675: предиктор наличия значительного фиброза (F3-F4 fibrosis).

В таблице 1 отражены основные показатели антропометрических данных, лабораторных показателей, отражающих состояние печени, липидного и углеводного обменов, и индекса фиброза печени в зависимости от нормального или повышенного уровня цитокератина-18 (ЦК-18) у больных ранними формами НАЖБП.

Как видно из таблицы 1, у больных ранними формами НАЖБП в сочетании с повышенным уровнем ЦК-18 достоверно выше были уровни лейкоцитов, СОЭ, АЛТ, ACT, ЩФ, ГГТП, ТГ, ФНО-α, индекса НОМА и индекса фиброза и ниже уровень тромбоцитов. Также уровень ЦК-18 продемонстрировал у этих больных достоверные коррелятивные связи с СОЭ - r = 0,54 (р=0,015), АЛТ - r = 0,26 (р=0,007), ACT - r = 0,32 (р=0,006), ФНО-α - r = 0,62 (р=0,016), HOMA-IR - r = 0,30 (р=0,004), NAFLD FS - r = 0,60 (р=0,0001) и отрицательно коррелировал с уровнем тромбоцитов - r = -0,33 (р=0,001). Эти данные доказывают прямое влияние апоптоза гепатоцитов на процессы воспаления, печеночно-клеточного повреждения, инсулинорезистентности и фиброза у больных ранними формами НАЖБП, что актуализирует необходимость определения у них уровня ЦК-18.

В таблице 2 отражены основные показатели антропометрических данных, лабораторных показателей, отражающих состояние печени, липидного и углеводного обменов, и индекса фиброза печени в зависимости от нормального или повышенного уровня фактора некроза опухолей-альфа (ФНО-α) у больных ранними формами НАЖБП.

Из таблицы 2 видно, что у больных ранними формами НАЖБП в сочетании с повышенным уровнем ФНО-α достоверно выше были уровни ОТ, лейкоцитов, СРБ, АЛТ, ГГТП, холестерина, ТГ, ЦК-18, индексов НОМА и фиброза. Ниже был уровень альбумина и ЛПВП. Также уровень ФНО-α продемонстрировал у этих больных достоверные коррелятивные связи с ОТ - r = 0,33 (р=0,04), ТГ - r = 0,68 (р=0,031), ЦК-18 - r = 0,66 (р=0,008), HOMA-IR - r = 0,67 (р=0,004), NAFLD FS - r = 0,84 (р=0,035). Эти данные доказывают прямое влияние данного маркера на процессы воспаления, печеночно-клеточного повреждения, холестаза, дислипидемии, инсулинорезистентности и фиброза у больных ранними формами НАЖБП, что актуализирует необходимость определения у них уровня ФНО-α.

В таблице 3 отражены основные показатели антропометрических данных, лабораторных показателей, отражающих состояние печени, липидного и углеводного обменов, и индекса фиброза печени в зависимости от нормального или повышенного уровня интерлейкина-6 (ИЛ-6) у больных ранними формами НАЖБП.

Как видно из таблицы 3, у больных ранними формами НАЖБП в сочетании с повышенным уровнем ИЛ-6 достоверно выше были уровни ОТ, лейкоцитов, лимфоцитов, СОЭ, СРБ, ЩФ, ГГТП, холестерина, ТГ, глюкозы, ФНО-α, и индекса фиброза. Ниже был уровень ЛПВП. Также уровень ИЛ-6 продемонстрировал у этих больных достоверные коррелятивные связи с лейкоцитами - r = 0,49 (р=0,04), лимфоцитами - r = 0,62 (р=0,013), СОЭ - r = 0,51 (р=0,04), ТГ - r = 0,73 (р=0,016), ЩФ - r = 0,63 (р=0,04), ЛПВП - r = -0,52 (р=0,04), NAFLD FS - r = 0,70 (р=0,02). Эти данные доказывают прямое влияние данного маркера на процессы воспаления, холестаза, дислипидемии, инсулинорезистентности и фиброза у больных ранними формами НАЖБП, что актуализирует необходимость определения у них уровня ИЛ-6.

В таблице 4 отражены основные показатели антропометрических данных, лабораторных показателей, отражающих состояние печени, липидного и углеводного обменов, и индекса фиброза печени в зависимости от наличия или отсутствия синдрома внутрипеченочного холестаза (ВПХ) у больных ранними формами НАЖБП.

Из таблицы 4 видно, что у больных ранними формами НАЖБП в сочетании с синдромом внутрипеченочного холестаза достоверно выше были уровни лейкоцитов, СРБ, АЛТ, ЩФ, ГГТП, ТГ, ИЛ-6, ЦК-18, и индексов ИР и фиброза. Ниже был уровень ЛПВП. ЩФ продемонстрировала у этих больных достоверные коррелятивные связи с ЛПВП - r = -0,57 (р=0,002), ACT - r = 0,21 (р=0,04), ТГ - r = 0,58 (р=0,003), НОМА - r = 0,61 (р=0,04), NAFLD FS - r = 0,48 (р=0,04); ГГТП достоверно коррелировала с уровнем АЛТ - r = 0,49 (р=0,044) и с уровнем лейкоцитов - r = 0,50 (р=0,04). Эти данные доказывают прямое влияние внутрипеченочного холестаза на процессы воспаления, печеночно-клеточного повреждения, дислипидемии, апоптоза, ИР и фиброза у больных ранними формами НАЖБП, что актуализирует необходимость определения у них уровней ЩФ и ГГТП.

В таблице 5 отражены основные показатели антропометрических данных, лабораторных показателей, отражающих состояние печени, липидного и углеводного обменов, и индекса фиброза печени в зависимости от наличия или отсутствия синдрома инсулинорезистентности (ИР) у больных ранними формами НАЖБП.

Как видно из таблицы 5, у больных ранними формами НАЖБП в сочетании с синдромом инсулинорезистентности достоверно выше были уровни ОТ, ИМТ, АЛТ, ACT, ЩФ, ГГТП, холестерина, ТГ, глюкозы, ФНО-α, ИЛ-6, ЦК-18, и индекса фиброза. Ниже был уровень тромбоцитов. Индекс НОМА продемонстрировал у этих больных достоверные коррелятивные связи с ACT - r = 0,26 (р=0,032), ТГ - r = 0,49 (р=0,021), ЦК-18 - r = 0,51 (р=0,016), NAFLD FS - r = 0,66 (р=0,038). Эти данные доказывают прямую связь инсулинорезистентности с процессами воспаления, печеночно-клеточного повреждения, дислипидемии, апоптоза, внутрипеченочного холестаза и фиброза у больных ранними формами НАЖБП, что актуализирует необходимость определения у них уровней глюкозы и натощакового инсулина с расчетом индекса ИР.

Таким образом, предлагаемое техническое решение позволяет упростить и снизить экономические затраты на оценку прогноза течения НАЖБП, повысить качество диагностики, уменьшить количество персонала, привлеченного для обследования, обосновать применение более активной тактики у больных с ранними формами НАЖБП с выявленным высоким риском прогрессирования. Технический результат достигается за счет одновременной оценки всех основных звеньев патогенеза прогрессирования неалкогольной жировой болезни печени одним широко распространенным лабораторным методом (ИФА) без привлечения врачей-узких специалистов, дополнительных методов обследования. Предлагаемый метод может использоваться в любом медицинском учреждении, где имеются условия для проведения ИФА, заключение может быть дано любым врачом терапевтического профиля, метод не является инвазивным и может проводиться многократно для оценки изменения риска в динамике у одного и того же пациента, что делает его простым, унифицированным и общедоступным.

Библиография

1. Патент RU №2337365. «Способ дифференциальной диагностики алкогольного и неалкогольного стеатогепатита», опубликован 27.10.2008.

2. Патент RU №2578029. «Способ диагностики неалкогольного стеатогепатита», опубликован 20.03.2016.

3. Патент RU №2545990. «Способ дифференциальной диагностики стеатоза печени и стеатогепатита», опубликован 10.04.2015.

4. Заявка на изобретение RU №2017146929. «Способ ультразвуковой диагностики неалкогольной жировой болезни печени», опубликована 28.06.2019.

5. Патент RU №2712580. «Способ неинвазивной диагностики неалкогольной жировой болезни печени у детей с ожирением», опубликован 29.01.2020.

6. Патент RU №2691108. «Способ определения митохондриальной дисфункции у больных неалкогольной жировой болезнью печени», опубликован 11.06.2019.

7. Патент RU №2637412. «Способ определения атеросклеротического поражения сосудистой стенки у пациентов с абдоминальным ожирением и неалкогольной жировой болезнью печени», опубликован 04.12.2017.

8. Патент RU №2403567. «Способ диагностики поражений печени при атерогенной дислипидемии», опубликован 10.11.2010.

9. Патент RU №2702145. «Способ прогнозирования исхода гепатита в цирроз», опубликован 04.10.2019.

10. Патент RU №2244305. «Способ оценки тяжести течения патологического процесса при хронических диффузных поражениях печени», опубликован 10.01.2005.

11. Вовк, Е.И. Неалкогольная жировая болезнь печени как проатерогенное заболевание: диагностика и лечение в общей практике / Е. И. Вовк // РМЖ. Медицинское обозрение. - 2017. - Т. 1, №2. - С. 68-79.

12. Liu, Н. Nonalcoholic fatty liver disease and cardiovascular disease / H. Liu, H.-Y. Lu // World J Gastroenterol. - 2014. - Vol. 20, №26. - P. 8407-8415.

13. Perindopril and barnidipine alone or combined with simvastatin on hepatic steatosis and inflammatory parameters in hypertensive patients / G. Derosa, A. Mugellini, R.M. Pesce [et al.] // European journal of pharmacology. -2015. - Vol. 766. - P. 31-36.

14. Resolution of inflammation in obesity-induced liver disease / B. Rius, C. [et al.] // Frontiers in Immunology. - 2012. - Vol. 3. - P. 257.

15. Silva, A.K.S. Role of peroxisome proliferator-activated receptors in non-alcoholic fatty liver disease inflammation / A.K.S. Silva, C.A. Peixoto // Cellular and Molecular Life Sciences. - 2018. - Vol. 75, №16. - P. 1-11.

16. Body mass index and the visceral adipose tissue expression of IL-6 and TNF-alpha are associated with the morphological severity of nonalcoholic fatty liver disease in individuals with class III obesity / A.S.B. Jorge, J.M.O. Andrade, A.F. Paraiso [et al.] // Obesity research & clinical practice. - 2018. - Vol. 12, №1. - P. 1-8.

17. Combination of Aspartate Aminotranferase and Tumor Necrosis Fac-tor-a as Non Invasive Diagnostic Tools for Non Alcoholic Steatohepatitis (NASH) / H.D. Purnomo, F.E. Mundhofir, K. Kasno [et al] // Acta Medica Indonesiana. - 2015. - Vol. 47, №1. - P. 16-23.

18. Peripheral and Hepatic Vein Cytokine Levels in Correlation with Non-Alcoholic Fatty Liver Disease (NAFLD)-Related Metabolic, Histological, and Hae-modynamic Features / L. Voghia, T. Magrone, A. Verrijken [et al.] // PLOS ONE. - Vol. 10, №11. - P. e0143380.

19. Prediction of nonalcoholic fatty liver disease via a novel panel of serum adipokines / R. Jamali, A. Arj, M. Razavizade, M. Hossein // Medicine. - 2016. - Vol. 95, №5. - P. 1-8.

20. Дуданова О.П., Шиповская А.А., Курбатова И.В. Маркеры печеночно-клеточного повреждения и воспаления при ранней форме неалкогольной жировой болезни печени // Гастроэнтерология Санкт-Петербурга. - 2017. - №. 3. - С. 16-20.

21. Дуданова О.П. и др. Ранняя диагностика печеночно-клеточного повреждения и воспаления при неалкогольном стеатогепатите слабой активности //Гастроэнтерология. Хирургия. Интенсивная терапия. Consilium Medicum. - 2018. - №. 2. - С. 15-20.

22. Стилиди, Е.И. Роль фактора некроза опухоли альфа и интерлейкина-6 в патогенезе неалкогольного стеатогепатита / Е.И. Стилиди // Крымский терапевтический журнал. - 2012. - Т. 1. - С. 91-98.

23. Das, S.K. Role of cytokines in the pathogenesis of non-alcoholic fatty liver disease / S.K. Das, V. Balakrishnan // Ind J Clin Biochem. - 2011. - Vol. 26, №2. - P. 202-209.

24. Efficacy of Tumor Necrosis Factor and Interleukin-10 Analysis in the Follow-up of Nonalcoholic Fatty Liver Disease Progression / W.E. Zahran, K. A. S. El-Dien, P. G. Kamel, A.S. El-Sawaby // Indian Journal of Clinical Biochemis-try. - 2013. - Vol. 28, №2. - P. 141-146.

25. Efficacy of Tumor Necrosis Factor and Interleukin-10 Analysis in the Follow-up of Nonalcoholic Fatty Liver Disease Progression / W.E. Zahran, K.A.S. El-Dien, P.G. Kamel, A.S. El-Sawaby // Indian Journal of Clinical Biochemistry. -2013. - Vol. 28, №2. - P. 141-146.

26. Mechanisms of NAFLD development and therapeutic strategies / S. L. Friedman, B. A. Neuschwander-Tetri, M. Rinella, A.J. Sanyal // NATuRe MeDiCiNe. - 2018. - Vol. 24. - P. 908-922.

27. Serum cytokine and soluble cytokine receptor levels in patients with nonalcoholic steatohepatitis / S. Abiru, K. Migita, Y. Maeda [et al.] // Liver International. - 2006. - Vol. 26, №1. - P. 39-45.

28. TNF-α interferes with lipid homeostasis and activates acute and proatherogenic processes / K. Fon Tacer, D. Kuzman, M. Seliskar [et al.] // Physiological genomics. - 2007. - Vol. 31, №2. - P. 216-227.

29. Inhibition of NF-κВ by deoxycholic acid induces miR-21/PDCD4-dependent hepatocellular apoptosis / P.M. Rodrigues, M.A. Afonso, A.L. Simao [et al.] // Scientific reports. - 2015. - Vol. 5. - P. 17528.

30. Silva, M. T. Secondary necrosis: the natural outcome of the complete apoptotic program / M. T. Silva // FEBS letters. - 2010. - Vol. 584, №22. - P. 4491-4499.

31. Increased hepatic and circulating interleukin-6 levels in human nonalcoholic steatohepatitis / A. Wieckowcka, B.G. Papouchado, Z.Z. Li [et al.] // The American journal of gastroenterology. - 2008. - Vol. 103, №6. - P. 1372-1379.

32. Vaspin, resistin, retinol binding protein-4, interleukin-1 a and interleukin-6 in patients with non-alcoholic fatty liver disease / S.A. Polyzos, J. Kountouras, V. Polymerou [et al.] // Annals of hepatology. - 2016. - Vol. 15, №5. - P. 705-714.

33. Adipokines and proinflammatory cytokines, the key mediators in the pathogenesis of nonalcoholic fatty liver disease / S. Stojsavljevic, M. Gomercic Palcic, L. Virovic Jukic [et al.] // World J Gastroenterol. - 2014. - Vol. 20, №48. - P. 18070-18091.

34. Tilg, H. Evolution of inflammation in nonalcoholic fatty liver disease: the multiple parallel hits hypothesis / H. Tilg and A. R. Moschen // Hepatology. -2010. - Vol. 52, №5. - P. 1836-1846.

35. Шиповская А.А., Дуданова О.П., Курбатова И.В. Клиническое значение инсулинорезистентности у недиабетических пациентов с ранними формами неалкогольной жировой болезни печени // Терапевтический архив. - 2018. - Т. 90. - №. 8. - С. 63-68.

36. Increased production of IL-1α and TNF-α in lipopolysaccharide-stimulated blood from obese patients with non-alcoholic fatty liver disease / J. Poniachik, A. Csendes, J. C. Diaz [et al.] // Cytokine. - 2006. - Vol. 33, №5. - P. 252-257.

37. Akazawa, Y. To die or not to die: death signaling in nonalcoholic fatty liver disease / Y. Akazawa, K. Nakao // J. Gastroenterol. - 2018. - Vol. 53. - P. 893-906.

38. Apoptosis and necrosis in the liver / M.E. Guicciardi, H. Mlhi, J.L. Mott [et al.] // Comprehensive Physiology. - 2013. - Vol. 3, №2. - P. 1-62.

39. Marra, F. Lipotoxicity and the gut-liver axis in NASH pathogenesis / F. Marra, G. Svegliati-Baroni // Journal of hepatology. - 2018. - Vol. 68, №2. - P. 280-295.

40. Hepatic tumor necrosis factor signaling and nuclear factor-кВ: effects on liver homeostasis and beyond / A. Wullaert, G. van Loo, K. Heyninck, R. Beyaert // Endocrine reviews. 2007. - Vol. 28, №4. - P. 365-386.

41. Tumor necrosis factor-a-mediated hepatocyte apoptosis stimulates fibrosis in the steatotic liver in mice / Y. Osawa, E. Kojika, Y. Hayashi [et al.] // Hepatology communications. - 2018. - Vol. 2, №4. - P. 407-420.

42. Apoptosis and non-alcoholic fatty liver diseases / T. Kanda, S. Matsuoka, M. Yamazaki [et al.] // World journal of gastroenterology. - 2018. - Vol. 24, №25.-P. 2661-2672.

43. In vivo assessment of liver cell apoptosis as a novel biomarker of disease severity in nonalcoholic fatty liver disease / A. Wieckowska, N.N. Zein, L.M. Yerian [et al.] // Hepatology. - 2006. - Vol. 44, №1. - P. 27-33.

44. Serum fragmented cytokeratin 18 levels reflect the histological activity score of nonalcoholic fatty liver disease more accurately than serum alanine aminotransferase levels / M. Tsutsui, N. Tanaka, M. Kawakubo [et al.] // J Clin Gastroenterol. - 2010. - Vol. 44, №6. - P. 440-447.

45. Apoptosis: the nexus of liver injury and fibrosis / A. Canbay, S. Friedman, G. J. Gores // Hepatology. - 2004. - Vol. 39, №2. - P. 273-278.

46. Crosstalk between angiogenesis, cytokeratin-18, and insulin resistance in the progression of non-alcoholic steatohepatitis / M. Kitade, H. Yoshiji, R Noguchi [et al.] // World J Gastroenterol. - 2009. - Vol. 15, №41. - P. 5193-5199.

47. The natural history of nonalcoholic fatty liver disease in children: a follow-up study for up to 20-years / A. E. Feldstein, P. Charatcharoenwitthaya, S. Treeprasertsuk [et al.] // Gut. - 2009. - Vol. 58, №11. - P. 1538-1544.

48. Use of non-invasive parameters of non-alcoholic steatohepatitis and liver fibrosis in daily practice-an exploratory case-control study / K. Dvorak, J. Stritesky, J. Petrtyl [et al.] // PloS one. - 2014. - Vol. 9, №10. - P. el 11551.

49. Шиповская А.А., Курбатова И.В., Дуданова О.П. Диагностическая роль фрагментов цитокератина-18 при неалкогольной жировой болезни печени //Клиническая медицина. - 2017. - Т. 95. - №. 10. - С.923-927.

50. Apoptosis and Disease Severity is Associated with Insulin Resistance in Non-alcoholic Fatty Liver Disease / K. Atay, B. Canbakan, E. Koroglu [et al.] // Acta gastro-enterologica Belgica. - 2017. - Vol. 80, №2. - P. 271-277.

51. Endoplasmic reticulum stress is the crossroads of autophagy, inflammation, and apoptosis signaling pathways and participates in liver fibrosis / X. Li, Y. Wang, H. Wang [et al.] // Inflammation Research. - 2015. - Vol. 64, №1. - P. 1-7.

52. Free fatty acids sensitize hepatocytes to bile acid-induced apoptosis / T. Pusl, N. Wild, T. Vennegeerts [et al.] // Biochemical and Biophysical Research Communications. - 2008. - Vol. 371. - P. 441-445.

53. Randomised clinical trial: emricasan versus placebo significantly decreases ALT and caspase 3/7 activation in subjects with non-alcoholic fatty liver disease / M. Shiftman, B. Freilich, R. Vuppalanchi [et al] // Alimentary Pharmacology & Therapeutics. - 2019. - Vol. 49, №1. - P. 64-73.

54. Relationship between changes in serum keratin 18 and changes in liver histology in children and adults with nonalcoholic fatty liver disease / R. Vuppalanchi, A.K. Jain, R. Deppe [et al.] // Clin Gastroenterol Hepatol. -2014. - Vol. 12, №12. - P. 2121-2130.

55. Serum Cytokeratin-18 Is Associated with NOX2-Generated Oxidative Stress in Patients with Nonalcoholic Fatty Liver / M. Del Ben, L. Polimeni, F. Baratta [et al.] // Int J Hepatol. - 2014. - Vol. 2014. - P. 784985.

56. The Impact of Liver Cell Injury on Health-Related Quality of Life in Patients with Chronic Liver Disease / Y. Alt, A. Grimm, L. Schlegel [et al.] // DigDis Sci. - 2016. - Vol. 61, №3. - P. 905-912.

57. Toxic bile salts induce rodent hepatocyte apoptosis via direct activation of Fas / W.A. Faubion, M.E. Guicciardi, H. Miyoshi [et al.] // The Journal of clinical investigation. - 1999. - Vol. 103, №1. - P. 137-145.

58. Fatty liver index vs waist circumference for predicting non-alcoholic fatty liver disease / N. Motamed, M. Sohrabi, H. Ajdarkosh [et al.] // World J Gastroenterol. - 2016. - Vol. 22, №10. - P. 3023-3030.

59. Large-scale analysis of factors influencing nonalcoholic fatty liver disease and its relationship with liver enzymes / W. R. Bi, C. Q. Yang, Q. Shi [et al.] // GenMol Res. - 2014. - Vol. 13, №3. - P. 5880-5891.

60. Заболевания печени и желчевыводящих путей / В.Г. Радченко, А.В. Шабров, Е.Н. Зиновьева, С.И. Ситкин - Санкт-Петербург: СпецЛит, 2011, -526 с. - С. 239.

61. Драпкина, О.М. Континуум неалкогольной жировой болезни печени: от стеатоза печени до сердечно-сосудистого риска / О.М. Драпкина, О.Н. Корнеева // Рациональная фармакотерапия в кардиологии. - 2016. - Т. 12, №4. - С. 424-429.

62. Bile acid levels are increased in the liver of patients with steatohepatitis / M.M. Aranha, H. Cortez-Pinto, A. Costa [et al.] // European journal of gastroenterology & hepatology. - 2008. - Vol. 20, №6. - P. 519-525.

63. Intrahepatic cholestasis in common chronic liver diseases / C. Jungst, T. Berg, J. Cheng [et al.] // Eur J Clin Invest. - 2013. - Vol. 43, №10. - P. 1069-1083.

64. Free Fatty Acids Repress Small Heterodimer Partner (SHP) Activation and Adiponectin Counteracts Bile Acid-Induced Liver Injury in Superobese Patients With Nonalcoholic Steatohepatitis / L.P. Bechmann, P. Kocabayogly, L.-P. Sowa [et al.] // Hepatology. -2013. - Vol. 57. - P. 1394-1406.

65. TGR5-mediated bile acid sensing controls glucose homeostasis / C. Thomas, A. Gioiello, L. Noriega [et al.] // Cell metabolism. - 2009. - Vol. 10, №3. - P. 167-177.

66. Yuan, L. Bile acid receptors and nonalcoholic fatty liver disease / L. Yuan, K. Bambha // World J Hepatol. - 2015. - Vol. 7, №28. - P. 2811-2818.

67. Шиповская А. А., Дуданова О. П. Внутрипеченочный холестаз при неалкогольной жировой болезни печени // Терапевтический архив. - 2018. - Т. 90. - №. 2. - С. 69-74.

68. Ali, А.Н. Recent advances in the development of farnesoid X receptor agonists / A.H. Ali, E.J. Carey, K.D. Lindor // Annals of translational medicine. - 2015. - Vol. 3, №l. - P. 5.

69. Alkaline phosphatase: can it be considered as an indicator of liver fibrosis in non-alcoholic steatohepatitis with type 2 diabetes? / G. Kocabay, A. Telci, Y. Tutuncu [et al.] // Bratislavske lekarske listy. - 2011. - Vol. 112, №11. - P. 626-629.

70. Bile acid alterations are associated with insulin resistance, but not with NASH in obese subjects / V. Legry, S. Francque, J. T. Haas [et al.] // The Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism. - 2017. - Vol. 102, №10. - P. 3783-3794.

71. Bile acid levels are increased in the liver of patients with steatohepatitis / M.M. Aranha, H. Cortez-Pinto, A. Costa [et al.] // European journal of gastroenterology & hepatology. - 2008. - Vol. 20, №6. - P. 519-525.

72. Deoxycholic acid modulates cell death signaling through changes in mitochondrial membrane properties / T. Souza, R.E. Castro, S.N. Pinto [et al.] // Journal of lipid research. - 2015. - Vol. 56, №11. - P. 2158-2171.

73. Progressive stages of mitochondrial destruction caused by cell toxic bile salts / S. Schulz, S. Schmitt, R Wimmer [et al.] // Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Biomembranes. - 2013. - Vol. 1828, №9. - P. 2121-2133.

74. Nonalcoholic Fatty Liver Disease and Insulin Resistance: New Insights and Potential New Treatments / H. Kitade, G. Chen, Y. Ni and T. Ota // Nutrients. - 2017. - Vol. 9. - P. 387.

75. Красильникова, E.И. Синдром инсулинорезистентности и печень / Е.И. Красильникова, А. А. Быстрова // Эффективная фармакотерапия. - 2011. - №6. - С. 24-28.

76. Sabio, G. CJun NH2-terminal kinase 1 (JNK1): roles in metabolic regulation of insulin resistance / G. Sabio, R.J. Davis // Trends in biochemical sciences. - 2010. - Vol. 35, №9. - P. 490-496.

77. Tilg, H. Insulin resistance, inflammation, and non-alcoholic fatty liver disease / H. Tilg, A. R. Moschen // Trends in Endocrinology & Metabolism. -2008. - Vol. 19, №10. - P. 371-379.

78. Birkenfeld. A. L. Nonalcoholic fatty liver disease, hepatic insulin resistance, and type 2 diabetes / A. L. Birkenfeld, G. I. Shulman // Hepatology. - 2014. - Vol. 59, №2. - P. 713-723.

79. Effect of adipose tissue insulin resistance on metabolic parameters and liver histology in obese patients with nonalcoholic fatty liver disease / R. Lomonaco, C. Ortiz-Lopez, B. Orsak [et al.] // Hepatology. - 2012. - Vol. 55, №5. - P. 1389-1397.

80. Jornayvaz, F.R. Diacylglycerol Activation of Protein Kinase Ce and Hepatic Insulin Resistance / F.R. Jornayvaz and G.I. Shulman // Cell metabolism. - 2012. - Vol. 15, №5. - P. 574-584.

81. Mitochondrial dysfunction in non-alcoholic fatty liver disease and insulin resistance: cause or consequence? / C. Garcia-Ruiz, A. Baulies, M. Mari [et al.] // Free radical research. - 2013. - Vol. 47, №11. - P. 854-868.

82. The role of hepatic lipids in hepatic insulin resistance and type 2 diabetes / R. J. Perry, V. T. Samuel, K.F. Petersen, G.I. Shulman // Nature. - 2014. - Vol. 510, №7503. - P. 84-91.

83. Неалкогольная жировая болезнь печени при дислипидемии и инсулинорезистентности: сходство и различия; дифференцированный подход к терапии / Л. Б. Лазебник, Л.А. Звенигородская, Е.Г. Егорова [и др.] // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. - 2009. - №8. - С. 4-11.

84. Diagnostic accuracy of serum alanine aminotransferase as biomarker for nonalcoholic fatty liver disease and insulin resistance in healthy subjects, using 3T MR spectroscopy / J.L. Martin-Rodriguez, J. Gonzalez-Cantero, A. Gonzalez-Cantero [et al.] //Medicine. - 2017. - Vol. 96, №. 17. - P. 1-9.

85. Excessive hepatic mitochondrial TCA cycle and gluconeogenesis in humans with nonalcoholic fatty liver disease / N.E. Sunny, E.J. Parks, J.D. Browning, S.C. Burgess // Cell metabolism. - 2011. - Vol. 14, №6. - P. 804-810.

86. Fabbrini, E. Hepatic steatosis as a marker of metabolic dysfunction / E. Fabbrini, F. Makos // Nutrients. - 2015. - Vol. 7, №6. - P. 4995-5019.

87. Impact of weight loss on inflammatory proteins and their association with the insulin resistance syndrome in morbidly obese patients / H.P. Kopp, C.W. Kopp, A. Festa [et al.] // Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. -2003. - Vol. 23, №6. - P. 1042-1047.

88. Infliximab reverses steatosis and improves insulin signal transduction in liver of rats fed a high-fat diet / R. Barbuio, M. Milanski, M.B. Bertolo [et al.] // Journal of Endocrinology. - 2007. - Vol. 194, №3. - P. 539-550.

89. The role of liver fat and insulin resistance as determinants of plasma aminotransferase elevation in nonalcoholic fatty liver disease / M. Maximos, F. Bril, P. Portillo Sanchez [et al.] // Hepatology. - 2015. - Vol. 61, №1. - P. 153-160. 185.

90. Non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) and its connection with insulin resistance, dyslipidemia, atherosclerosis and coronary heart disease / M. Gaggini, M. Morelli, E. Buzzigoli [et al.] //Nutrients. - 2013. - Vol. 5, №5. - P. 1544-1560.

91. Nalbantoglu, I. Role of liver biopsy in nonalcoholic fatty liver disease / I. Nalbantoglu, E. M. Brunt // World J Gastroenterol. - 2014. - Vol. 20, №27. - P. 9026-9037.

Изобретение относится к медицине, а именно к области гепатологии. Определяют в периферической крови in vitro уровни ФНО-α, интерлейкина-6, цитокератина-18, щелочной фосфатазы, гаммаглутамилтранспептидазы, глюкозы и инсулина натощак. Далее оценивают наличие следующих синдромов: системного воспаления, апоптоза гепатоцитов, внутрипеченочного холестаза и инсулинорезистентности. При наличии любых двух и более из оцениваемых синдромов прогнозируют риск прогрессирования ранних форм неалкогольной жировой болезни печени (НАЖБП), при наличии лишь одного из исследуемых синдромов либо при отсутствии каждого из них определяется отсутствие риска прогрессирования неалкогольной жировой болезни печени. Изобретение позволяет упростить и снизить экономические затраты на оценку прогноза течения НАЖБП, повысить качество диагностики, уменьшить количество персонала, привлеченного для обследования, обосновать применение более активной тактики у больных с ранними формами НАЖБП с выявленным высоким риском прогрессирования. 5 табл.

Способ прогнозирования прогрессирующего течения ранних форм неалкогольной жировой болезни печени, включающий определение в периферической крови in vitro уровней ФНО-α, интерлейкина-6, цитокератина-18, щелочной фосфатазы, гаммаглутамилтранспептидазы, глюкозы и инсулина натощак, отличающийся тем, что у больных оценивают наличие следующих синдромов: системного воспаления, апоптоза гепатоцитов, внутрипеченочного холестаза и инсулинорезистентности; при этом системное воспаление диагностируют по повышению следующих параметров выше верхней границы нормы: ФНО-α более 5 пг/мл и интерлейкина-6 более 3,5 пг/мл; апоптоз гепатоцитов выявляют при повышении уровня цитокератина-18 более 100 Ед/л; внутрипеченочный холестаз определяют по повышению следующих параметров выше верхней границы нормы: щелочной фосфатазы более 270 Ед/л и/или гаммаглутамилтранспептидазы более 32 Ед/л у женщин и 50 Ед/л у мужчин; инсулинорезистентность - при повышении значения индекса HOMA-IR более 2,6, когда данный индекс рассчитывается с использованием уровня натощакового инсулина; и при наличии любых двух и более из оцениваемых синдромов прогнозируют риск прогрессирования ранних форм неалкогольной жировой болезни печени, при наличии лишь одного из исследуемых синдромов либо при отсутствии каждого из них определяется отсутствие риска прогрессирования неалкогольной жировой болезни печени.