СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ ЛЕПТОСПИРОЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА Российский патент 2022 года по МПК A61K36/28 A61K33/38 A61K39/39 A61K36/38 A61K36/53 A61P31/00 

Изобретение относится к ветеринарной медицине, частности ветеринарной фармакологии.

Известна профилактика бактериальных инфекций на основе иммуностимулирующих растительных веществ, содержащихся например в эхинацеи (Bauer R., Wagner Н. Echinacea species as potential immunostimulator drugs. In: Wagner H., Farnsworth N. R. (eds.), economic and Medicinal Plant Research. Vol. 5 New York: Akademic Press, 1991, pp. 253-351).

Известен способ профилактики лептоспироза у животных (патент РФ №2261703, кл. A61K 33/38, 2005 г.), включающий введение парентерально лекарственных препаратов: отдельно 0,3% раствор формалина в дозе 5 мл с интервалом в 12 часов в течение 4 дней или в сочетании с иммуностимулятором АСД-2 в дозе 0,5 мл с интервалом в 12 часов в течение 3 дней.

Наиболее близким способом к заявленному изобретению по совокупности признаков является способ повышения иммунобиологической реактивности и воспроизводительной функции у животных (патент РФ №2609869, кл. A61K 36/00, 2016 г.), в котором используют иммуностимулирующий препарат в виде смеси водно-спиртовой настойки из 2-х частей травы эхинацеи пурпурной приготовленной на основе 70% этилового спирта при соотношении 1:5 и водного раствора серебра, добавленного в количестве не более 200 мл, что составляет не более 0,8 мг ионов серебра на 100 мл, с последующим выдерживанием в течение 14-15 дней при температуре 36-37°С, разбавлением полученной смеси до 30% дистиллированной водой и выпаиванием животному в дозе 0,10-0,12 мл на 1 кг массы животного, разбавленную со 130-150 мл кипяченой воды.

Недостатком известного способа является недостаточная эффективность профилактики иммунитета крупного рогатого скота.

Техническим результатом является повышение эффективности профилактики лептоспироза крупного рогатого скота.

Технический результат достигается тем, что в способе профилактики лептоспироза крупного рогатого скота, включающем использование иммуностимулирующего препарата в виде смеси водно-спиртовой настойки из 2-х частей травы эхинацеи пурпурной приготовленной на основе 70% этилового спирта при соотношении 1:5 и водного раствора серебра, добавленного в количестве 200 мл, что составляет 0,8 мг ионов серебра на 100 мл, с последующим выдерживанием в течение 14-15 дней при температуре 36-37°С, разбавлением полученной смеси до 30% дистиллированной водой и выпаиванием животному в дозе 0,10-0,12 мл на 1 кг массы животного, разбавленную со 130-150 мл кипяченой воды, согласно изобретению в неблагополучных по лептоспирозу хозяйствах, предварительно, перед вакцинацией проводят подготовительную терапию, при которой одновременно в течение 10 дней животному выпаивают водный раствор серебра, содержащий 0,8 мг ионов серебра на 100 мл воды в количестве 19-20 см³, на одно животное; внутримышечно однократно вводят комбинированный витаминный комплекс «Элеовит» в дозе 5-6 см³ на одно животное и выпаивают в течение 14 дней водно-спиртовую настойку, в которую дополнительно добавляют 1 часть зверобоя продырявленного - листьев и цветков по 0,5 частей, 0,5 частей листьев крапивы двудомной и 0,5 частей мелисы - листьев и верхушечных побегов по 0,25 частей, затем вводят подкожно однократно в дозе 0,5 см³ на 1 кг массы животного гипериммунную сыворотку против лептоспироза, далее через 20-22 дня животных вакцинируют препаратом Бови-шилд Голд FP5 внутримышечно в область шеи в дозе 2 см³ двукратно с интервалом 21 день и через 12 месяцев однократно в объеме 2 см³ проводят ревакцинацию с применением выше указанной подготовительной терапии.

Новизна заявленного предложения обусловлена тем, что крупному рогатому скоту для специфической профилактики лептоспироза предварительно, перед вакцинацией проводят подготовительную терапию для предотвращения возникновения инфекций различного рода и поствакцинальных осложнений, используя схему применения следующих препаратов: водный раствор серебра, водно-спиртовую настойку на травах, комбинированный витаминный комплекс «Элеовит» и гипериммунную сыворотку против лептоспироза.

Признаки, отличающие заявляемое техническое решение от прототипа, направлены на достижение технического результата и не выявлены при изучении патентной и научно-технической литературы в данной и смежной областей науки и техники и, следовательно, соответствуют критерию «изобретательский уровень».

Способ специфической профилактики лептоспироза крупного рогатого скота осуществляют следующим образом.

В неблагополучных по лептоспирозу хозяйствах; предварительно, перед вакцинацией проводят подготовительную терапию, при которой одновременно в течение 10 дней животному выпаивают водный раствор серебра, содержащий 0,8 мг ионов серебра на 100 мл воды в количестве 19-20 см³, на одно животное, в качестве водного раствора серебра используют «Аргерит-40», производителем которого является ООО «Предприятие «Кубаньагроток», разработаны ТУ 9154-001-10073810-2002, «Концентрат гидратированного серебра химически чистый». «Аргерит-40» имеет широкий спектр действия, по внешнему виду представляет собой жидкость без цвета и запаха с кисловатым вкусом, обладает высокой микробицидной активностью вещества при концентрации ионов серебра от 0,001 мг/л, что значительно ниже допустимой санитарной нормы (0,01 г/л), против культур Candida albicans, Staphylococcus aureus 209-P, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, Listeria monocytogenes. Устойчивые микробицидные свойства ионов серебра усиливаются его кислой реакцией.

Внутримышечно однократно вводят комбинированный витаминный комплекс «Элеовит» в дозе 5-6 см³ на одно животное, который применяется для профилактики и лечения гипо- и авитаминозов, ксерофтальмии, рахита, остеомаляции, тетании, энцефаломаляции, токсической дистрофии печени, дерматитов, плохо заживающих ран и язв, катаральных воспалений, слизистых оболочек у млекопитающих животных, а также для повышения их плодовитости и жизнеспособности молодняка. Входящие в состав Элеовита поливитамины оказывают синергидное действие. Витамин А регулирует функцию и регенерацию эпителиальных тканей, тем самым повышая защитную функцию организма животных. Витамин Д участвует в обмене кальция и фосфора, обладает противорахитическим действием. Витамин Е, являясь сильным антиоксидантом, регулирует окислительно-восстановительные процессы, усиливает действие витаминов А и Д. Витамины группы В играют важную роль в нормализации обмена веществ, регуляции нервных процессов (https://areal-bio.com/catalog/eleovit_100_ml/).

Животным одновременно выпаивают в течение 14 дней водно-спиртовую травяную настойку, для которой сбор, приготовленный из 2-х частей эхинацеи пурпурной, 1-й части зверобоя продырявленного - листьев и цветков по 0,5 частей, 0,5 частей листьев крапивы двудомной и 0,5 частей мелисы - листьев и верхушечных побегов по 0,25 частей смешивают с 70 об.% этиловым ректифицированным спиртом в соотношении 1:5, т.е. брали 1 часть сбора (100 г), добавляли 5 частей 70 об.% этилового спирта (500 мл.) и добавляли 200 мл водного раствора серебра, что составляет 0,8 мг ионов серебра «Аргерит-40» на 100 мл воды. Затем помещали в посуду из темного стекла, плотно закрывали и ставили в термостат при температуре 36-37°С на 14 дней, периодически перемешивали, процеживали через бумажный фильтр, предварительно хорошо отжав сырье. Полученную настойку доводили до 30% концентрации дистиллированной водой, после чего перемешивали, настаивали в течение суток для лучшей диффузии и выпаивали животному в дозе 0,10-0,12 мл на 1 кг его массы, разбавленную со 130-150 мл кипяченой воды. Водно-спиртовая травяная настойка имеет рабочее название фитопрепарат «Каргмэз».

Биологически активные вещества, входящие в состав этой настойки нормализуют факторы неспецифической резистентности, активность иммунокомпетентных клеток, стимулируют обменные процессы, за счет свойств, входящих в состав сбора трав:

- эхинацея пурпурная (Echinacea purpurea) в своем составе содержит вещество эхинацин, оксикоричные кислоты (1,0-1,15%), которые стимулируют организм на выработку своего собственного интерферона - важного белка, блокирующего деление РНК- и ДНК-содержащих вирусов. Стимулирует активность Т- и В-клеток являющихся важным посредником в иммунной системе организма. Стимулирует кору надпочечников, повышая обменные процессы, при этом не вызывает его истощения. Также обладает антибактериальным, антифунгицидным и антивирусным свойствами;

- зверобой продырявленный - Hypericum perforatum L., семейство зверобойных - Hyperiecaceae, в своем составе содержит дубильные (12-13%) вещества, флавоноиды: гиперозид (0,6-0,7%), рутин, кверцитрин, изокверцитрин; эфирное масло (0,1-1,2%), азулен, антоцианы (5-6%), каротин (50-55 мг %), гиперицин, РР, холин, аскорбиновая кислота (135-140 мг %), спирты, следы алкалоидов. Зверобой продырявленный обладает иммуномодулирующим, общеукрепляющим, повышающим функцию половых желез, противовоспалительным, противомикробным, сосудорасширяющим, спазмолитическим, гипертензивным, кардиотоничесим, мочегонным, кровоостанавливающим, бронхолитическим, аналгизирующим, вяжущим, репаративным, тонизирующим, желчегонным действием;

- крапива двудомная - Urtica dioica семейство крапивных - Urticaceae, листья содержит в своем составе дубильные (2%) и белковые вещества, муравьиную кислоту, гликозид уртицин, витамин К, аскорбиновую кислоту (0,6%), пантотеновую кислоту, каротиноиды (50 мг %), ситостерин, гистамин, виолаксантин, соли железа и воск. Крапива двудомная обладает противовоспалительным, антигипоксантным, кардиотоничесим, мочегонным, кровоостанавливающим, анальгезирующим, репаративным, потогонным, ветрогонным, повышающим аппетит, тонизирующим, желчегонным и десенсибилизирующим действием;

- мелисса лекарственная - Melissa officinalis Z, семейство яснотковые - Lamiaceae, листья и верхушечные побеги мелисы во время цветения содержит в своем составе эфирные масла (0,33%) - цитраль, цитронеллаль, гераниол, линалоол, кофейная кислоты и ее эфиры: розмариновая, хлорогеновая кислоты; флавоноиды - цинарозид, лютеолин; каротин (7 мг/%), аскорбиновую кислоту (150 мг/%). Мелиса обладает противовоспалительным, противомикробным, спазмолитическим, гипотензивным, антигипоксантным, седативным, бронхолитическим, анальгезирующим, репаративным, потогонным, ветрогонным, повышающим аппетит.

Затем вводят подкожно, однократно в дозе 0,5 см³ на 1 кг массы животного гипериммунную сыворотку против лептоспироза, перед ее применением флаконы с сывороткой тщательно взбалтывали и подогревали на водяной бане до температуры 37-38°С, соблюдая правила асептики и антисептики. Механизм действия сыворотки основан на связывании и нейтрализации патогенных антигенов специфическими антителами биопрепарата. Сыворотка содержит специфические антитела к лептоспирам шести серогрупп: Помона, Тарассови, Гебдомонадис, Гриппотифоза, Иктерогеморрагия и Каникола.

Далее через 20-22 дня, после введения гипериммунной сыворотки животных вакцинируют препаратом Бови-шилд Голд FP5 внутримышечно в область шеи в дозе 2 см³ двукратно с интервалом 21 день и через 12 месяцев однократно в объеме 2 см³ проводят ревакцинацию с применением выше указанной подготовительной терапии.

Вакцина «Бови-шилд Голд FP5» способствует формированию иммунного ответа у крупного рогатого скота к возбудителям: лептоспироза серогрупп: Canicola, Grippotyphosa, Hardjo, Icterohaemorrhagiae, Pomona, инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи типа 1, вирусной диареи типа 2, парагриппа-3, респираторно-синтициальной инфекции, через три недели после двукратной вакцинации, продолжительностью не менее 12 месяцев.

В одной прививной дозе вакцины содержится инактивированные лептоспиры серогрупп: Canicola, Grippotyphosa, Hardjo, Icterohaemorrhagiae, Pomona. Кроме того, содержатся аттенуированные штаммы возбудителей:инфекционного ринотрахеита (штамм С-13) - ≥10^4.4 ТЦД₅₀, вирусной диареи типа 1 (штамм NADL) - ≥10^3.9 ТЦД₅₀, вирусной диареи типа 2 (штамм 53637) - ≥10^4.4 ТЦД₅₀, парагриппа-3 (штамм Reisinger) - ≥10^4.6 ТЦД₅₀, респираторно-синтициальной инфекции (штамм BRSV/375) - ≥10^4.1 ТЦД₅₀.

Применение комплексной системы профилактики, включающая подготовительную терапию обеспечивает защиту организма от возникновения бактериальных инфекций, в частности лептоспироза и вирусных респираторных заболеваний.

Пример конкретного осуществления заявляемого способа

Для доказательства эффективности предложенной специфической профилактики лептоспироза был проведен научно-хозяйственный опыт были сформированы две группы животных по 15 голов в каждой: первая - контрольная (интактные), вторая - опытная группа.

Кровь брали из хвостовой вены в серологические и гематологические моноветы с соблюдением правил асептики и антисептики. Для этого опытной группе животным ежедневно вовнутрь вводили в течение 10 дней Аргерит-40 (содержащий 0,8 мг ионов серебра на 100 мл воды) в количестве 19-20 см³ на одно животное, одновременно однократно внутримышечно вводили «Элеовит» (комбинированный витаминный комплекс) в дозе 5-6 см³ на одно животное, применяли водно-спиртовую травяную настойку, которая имеет рабочее название фитопрепарат «Каргмэз», в течение 14 дней в дозе 0,15 см³ 1 кг животного, разбавленного со 130-145 см³ кипяченой воды, и гипериммунную сыворотку против лептоспироза вводили подкожно однократно в дозе 0,5 см³ на 1 кг массы животного.

Через 20-22 дня, после подготовительной терапии животных вакцинировали препаратом «Бови-шилд Голд FP5» внутримышечно в область шеи в дозе 2 см³ (1 доза) двукратно с интервалом 21 день. Ревакцинацию проводят через 12 месяцев однократно в объеме 2 см² с применением выше указанной подготовительной терапии.

Применение подготовительной терапии, включающее использование препаратов: Аргерит-40, Элеовита и фитопрепарата «Каргмэз» обеспечило формирование неспецифической резистентности организма животных и подготовке к иммунизации, применение гипериммунной сыворотки и вакцины Бови-шилд Голд FP5 способствовало формированию специфического иммунитета с сохранением высоких антител. При постановке реакции микроагглютинации (РМА) установлен титр антител 1:1600-1:3200, 1:800-1:400 в течение длительного времени. Однако затем титр антител снижается до 1:100 и 1:50. Бови-шилд Голд FP5 обеспечивает защиту животных в течение 12 месяцев от возникновения заболевания лептоспироза серогрупп: Canicola, Grippotyphosa, Hardjo, Icterohaemorrhagiae, Pomona, а также возбудителей вирусных респираторных инфекций, таких как инфекционного ринотрахеита вирусной диареи типа 1 и 2 парагриппа-3 респираторно-синтициальной инфекции. По истечению 12 месяцев необходимо провести ревакцинацию животных с применением выше указанной подготовительной терапии.

Результаты исследования процесса профилактики крупному рогатому скоту приведены в таблице 1.

После проведения подготовительной терапии установлено, что у животных произошло повышение количества эритроцитов в опытной группе (лептоспирозе) на 24%, уровня гемоглобина - на 14% и, напротив, снижение количества лейкоцитов на 33%, относительно контрольных (интактных) животных. Количество базофилов снизилось на 37% эозинофилов - на 73% (в 4 раза), и, напротив, происходило повышение сегментоядерных нейтрофилов на 60% (в 1,6 раза), относительно контрольной группы (таблица 1).

Таким образом, учитывая результаты исследования, можно утверждать о повышении эффективности специфической профилактики лептоспироза у крупного рогатого скота, за счет увеличения иммунобиологической реактивности организма животного.

Изобретение относится к ветеринарной медицине, в частности к ветеринарной фармакологии. Способ профилактики лептоспироза крупного рогатого скота включает проведение подготовительной терапии, при которой одновременно в течение 10 дней животному выпаивают водный раствор серебра, содержащий 0,8 мг ионов серебра на 100 мл воды в количестве 19-20 см³, на одно животное, внутримышечно однократно вводят комбинированный витаминный комплекс «Элеовит» в дозе 5-6 см³ на одно животное и выпаивают в течение 14 дней водно-спиртовую настойку, содержащую 2 части травы эхинацеи пурпурной, 1 часть зверобоя продырявленного - листьев и цветков по 0,5 частей, 0,5 частей листьев крапивы двудомной и 0,5 частей мелисы - листьев и верхушечных побегов по 0,25 частей, полученную на основе 70% этилового спирта при соотношении 1:5 и водного раствора серебра, добавленного в количестве 200 мл, что составляет 0,8 мг ионов серебра на 100 мл. Затем вводят подкожно однократно в дозе 0,5 см³ на 1 кг массы животного гипериммунную сыворотку против лептоспироза. Далее через 20-22 дня животных вакцинируют препаратом Бови-шилд Голд FP5 внутримышечно в область шеи в дозе 2 см³ двукратно с интервалом 21 день. Через 12 месяцев однократно в объеме 2 см³ проводят ревакцинацию с применением выше указанной подготовительной терапии. Изобретение обеспечивает повышение эффективности профилактики лептоспироза крупного рогатого скота. 1 пр., 1 табл.

Способ профилактики лептоспироза крупного рогатого скота, включающий использование иммуностимулирующего препарата в виде смеси водно-спиртовой настойки из 2-х частей травы эхинацеи пурпурной, приготовленной на основе 70% этилового спирта при соотношении 1:5 и водного раствора серебра, добавленного в количестве 200 мл, что составляет 0,8 мг ионов серебра на 100 мл, с последующим выдерживанием в течение 14-15 дней при температуре 36-37°С, разбавлением полученной смеси до 30% дистиллированной водой и выпаиванием животному в дозе 0,10-0,12 мл на 1 кг массы животного, разбавленную со 130-150 мл кипяченой воды, отличающийся тем, что в неблагополучных по лептоспирозу хозяйствах; предварительно, перед вакцинацией проводят подготовительную терапию, при которой одновременно в течение 10 дней животному выпаивают водный раствор серебра, содержащий 0,8 мг ионов серебра на 100 мл воды в количестве 19-20 см³, на одно животное; внутримышечно однократно вводят комбинированный витаминный комплекс «Элеовит» в дозе 5-6 см³ на одно животное и выпаивают в течение 14 дней водно-спиртовую настойку, в которую дополнительно добавляют 1 часть зверобоя продырявленного - листьев и цветков по 0,5 частей, 0,5 частей листьев крапивы двудомной и 0,5 частей мелисы - листьев и верхушечных побегов по 0,25 частей, затем вводят подкожно однократно в дозе 0,5 см³ на 1 кг массы животного гипериммунную сыворотку против лептоспироза, далее через 20-22 дня животных вакцинируют препаратом Бови-шилд Голд FP5 внутримышечно в область шеи в дозе 2 см³ двукратно с интервалом 21 день и через 12 месяцев однократно в объеме 2 см³ проводят ревакцинацию с применением выше указанной подготовительной терапии.