СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ РЕСПИРАТОРНЫХ БОЛЕЗНЕЙ ТЕЛЯТ Российский патент 2023 года по МПК A61K35/12 A61K35/16 A61P31/12 A61M5/00 

Изобретение относится к ветеринарии, в частности к способам профилактики респираторных болезней телят путем повышения иммунобиологической реактивности при специфической профилактике респираторно-вирусных инфекций молодняк крупного рогатого скота.

Известен способ повышения иммунобиологической реактивности телят при специфической профилактике вирусных респираторных заболеваний, для этого используют иммуностимулирующий препарат и водный раствор серебра, содержащий не более 0,8 мг ионов серебра на 100-120 мл кипяченой воды на 30-40 кг массы животного, который в течение 10 дней выпаивают животному в количестве 19-20 мл, затем вводят внутримышечно трехкратно с интервалом в 24 часа в дозе 0,9-1,0 мл на одно животное, иммуностимулирующий препарат «Иммунофан», далее осуществляют внутримышечное введение девятивалентной сыворотки против инфекционного ринотрахеита и парагриппа-3, сальмонеллеза, пастереллеза и кишечной палочки у крупного рогатого скота: в первый день в дозе 49-50 мл на одно животное, повторно в той же дозе через 10 дней и вводят витаминно-аминокислотный комплекс «Битам» внутримышечно в дозе 2,9-3 мл на 10 кг массы животного два раза в сутки в течение пяти дней, затем через 14 дней, после повторного введения девятивалентной сыворотки и витаминно-аминокислотного комплекса «Битам», двукратно с интервалом в 21 день телятам подкожно вводят вакцину «Кэтлмастер Голд FP5 L5» в дозе 4,9-5 мл на одно животное. (Патент №2712237. МПК А61K 33/38, А61K 39/12, А61K 31/00. Опубл. 27.01.2020, Бюл. №3).

Недостатком данного способа является узкий спектр действия сывороточных антител против вирусных инфекций (2 нозологии), очень длительный процесс выпаивания раствора серебра (10 дней), иммуностимуляции (3 дня), в столь длительном процессе подготовки животных к введению девятивалентной сыворотки при неблагополучной эпизоотической обстановке в хозяйстве может произойти вспышка острых респираторно-вирусных инфекций крупного рогатого скота (ОРВИ КРС).

Известно лекарственное средство для профилактики и лечения болезней вирусной этиологии у крупного рогатого скота и способ профилактики и лечения этих болезней, которое включает в себя поливалентную сыворотку против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи и аденоинфекций крупного рогатого скота и иммуностимулятор виватон при следующем соотношении компонентов, мас.%, поливалентная сыворотка против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи и аденоинфекций крупного рогатого скота - 80-85, виватон - остальное. Лекарственное средство вводят телятам подкожно: с профилактической целью - двукратно с интервалом 10-14 дней в дозе 0,5 мл/кг живой массы, при этом первое введение лекарственного средства телятам осуществляют в течение 24 часов после рождения или поступления в хозяйство, а с лечебной целью лекарственное средство вводят в дозе 1 мл/кг живой массы двукратно с интервалом 48 часов, а взрослым животным лекарственное средство вводят подкожно по 20,0 мл двукратно с интервалом 7-14 дней. Средство и способ формируют напряженный иммунитет против болезней вирусной этиологии, не вызывают аллергических реакций и побочных эффектов. Виватон активирует ряд показателей, характеризующих естественную неспецифическую резистентность организма животных. (Патент №2404807. МПК А61K 39/395, А61K 31/12, А61K 36/00. Опубликовано 27.11.2010. Бюл. №33).

При положительных результатах применения поливалентной сыворотки в сочетании с виватоном-С, к недостаткам данного способа следует отнести, достаточно высокую дозу введения на 1 кг живой массы, при этом не используется весь потенциал сыворотки, так как титр вируснейтрализующих антител на 20,0% снижается за счет разбавления иммуномодулятором. Присутствие в составе виватона-С цитокиновых белков, которые привлекают моноциты, макрофаги и Т-клетки к месту инфекции, способствуют дальнейшему развитию воспаления, а это, как известно, может привести к так называемому цитокиновому шторму, когда уровень цитокинов в крови резко возрастает, что приводит к атаке иммунитета на клетки и ткани собственного организма. Следствием этого может стать разрушение тканей и органов, и привести к гибели организма.

Известен способ профилактики респираторных болезней телят, включающий применение клинически здоровым телятам 20-30-дневного возраста ксимедона гидрохлорида, применяемого в смеси с 3,5% спиртовой настойкой почек сосны обыкновенной (Gemmue Pini), травы и соцветий эхинацеи пурпурной (Ehinacea purpurea L.), корневищ и корней девясила высокого (Inula Neleium L.), взятых в соотношении 2:1:1, из расчета 2,0 г ксимедона гидрохлорида на 100,0 мл 3,5% спиртовой настойки в дозе 1,5-2,0 мл/кг живой массы первый раз за 18-24 часа до и двукратно после иммунизации, которую проводят трехкратно подкожной инъекцией гипериммунной сыворотки, в дозе 1,0 мл/кг живой массы с интервалом в 10-12 дней. (Патент RU №2620548. МПК А61K 36/15, А61K 36/185, А61K 39/42, А61K 31/12. Опубл. 26.05.2017, Бюл. №15).

Недостатком известного способа является то, что он многоэтапный, трудозатратный по своему техническому исполнению. Профилактическое введение сыворотки телятам начинается довольно в поздние сроки (20-30дневном возрасте), когда животные уже могут заразиться или даже переболеть, так как некоторые вирусы респираторных инфекций преодолевают плацентарный барьер и телята заражаются еще внутриутробно, профилактическая обработка в создавшейся ситуации будет мало эффективна и нецелесообразна.

Кроме этого, использование иммуномодуляторов на основе растительного сырья содержащих сотни биологических ингредиентов, влияние которых на организм как по отдельности, так и в сочетаниях зачастую неизвестно, сложный механизм действия фитопрепаратов труден для детального изучения. К тому же, состав растений не стабилен, на него может сильно влиять меняющийся состав почв, внешние источники, погода, загрязнения и т.д. Фармакологи отмечают, что взаимодействие фитопрепаратов с лекарственными средствами может приводить к клинически значимым изменениям фармакологического ответа - снижению эффективности и безопасности фармакотерапии, а также к развитию нежелательных реакций [1].

Известен препарат и способ профилактики диареи у телят. Препарат включает раствор гипохлорита натрия в концентрации 300-350 мг/л и гипериммунную поливалентную сыворотку крови с титром детерминированных антител 1:300-1:1200, при следующем соотношении компонентов, мас.%: раствор гипохлорита натрия 30-40, гипериммунная поливалентная сыворотка - остальное, далее гипериммунная поливалентная сыворотка на основе гипохлорита. С профилактической целью новорожденным телятам в первый день жизни вводят однократно, подкожно или внутримышечно из расчета 3 мл на 10 кг живой массы или перорально за 20-30 мин до первой выпойки молозива в дозе не менее 50 мл на голову.

Раствор гипохлорита натрия, используемый в вышеприведенном источнике информации, обладает щелочной реакцией, бактерицидным, антивирусным, противогрибковым, дезодорирующим, детоксифицирующим действием, способствует нейтрализации токсических веществ путем непрямого окисления токсинов в тканях (см. Наставление по применению активного раствора гипохлорита натрия, протокол №2 от 23 апреля 1999, утвержденного ветфармсоветом Департамента ветеринарии Минсельхозпрода РФ). (Патент РФ №2196591, МПК А61K 33/14, А61K 36/16, опубл. 2003.06.25).

При всех положительных моментах после применения поливалентной сыворотки с полным охватом спектра микрофлоры циркулирующей на территории фермы (хозяйства), к недостаткам следует отнести слабую иммуномодулирующую активность на иммунокомпетентные клетки и системы, а также то, что она не оказывает стимулирующего действия на обмен веществ в организме животных.

Известен способ производства биогенных лекарственных препаратов включающий использование сырья из отходов боенской продукции, выдержку сырья в холодильнике в течение 5-7 дней при температуре +2, +4°С, измельчение сырья при последующем его смешивании с экстрагентом, фильтрацию, фасовку и стерилизацию в автоклаве в течение часа при температуре 120°С, при этом в качестве экстрагента используют активный раствор гипохлорита натрия в концентрации 300-600 мг/л в соотношении сырье: гипохлорит 1:2-1:3, а экстракцию проводят при температуре +2, +4°С в течение 18-24 часов. Биогенный препарат апробирован в схеме лечения телят с диарейным синдромом с первого дня терапии подкожно в область средней трети шеи в дозе 2-4 мл телятам в возрасте от 2 до 45 дней. (Патент №2682641, МПК А61K 35/12. Заявка 2018122212 от 15.06.2018. Опубл. 20.03.2019, Бюл. №8).

Биогенный препарат, полученный данным способом, как и прочие биогенные препараты не может быть использован в качестве основного средства из-за малой эффективности при специфической профилактики вирусных респираторных инфекций, а только в качестве иммуномодулирующего средства, так как биогенные (тканевые) препараты не оказывают прямого воздействия на патогены, а лишь нормализуют иммунобиологические процессы в организме животных.

При профилактике респираторно-вирусных болезней телят применяют средства, как специфической терапии (вакцины, гипериммунные сыворотки, иммуноглобулины), так и препараты, повышающие неспецифическую (естественную) резистентность (витамины, иммуномодуляторы, биологически активные добавки), что способствует более быстрому формированию и лучшему проявлению его защитных механизмов.

Иммуномодуляторы широко используются в ветеринарии для улучшения пищеварения, нормализации обмена веществ, повышения резистентности организма животных к неблагоприятным факторам воздействия внешней среды [2]. Поэтому актуальным для профилактики телят при болезнях, вызванных ассоциацией различных микроорганизмов, является разработка и применение, экологически безвредных иммуностимулирующих средств. В этом отношении большой научный и практический интерес представляет дешевый ранее запатентованный биогенный препарат, изготовленный из боенских отходов сельскохозяйственных животных: содержащий в своем составе природные физиологически активные соединения, органические кислоты, комплекс карбоновых кислот - осуществляющих окисление, соединения типа альбумин и пептонов, гормоноподобные вещества, полипептиды, аминокислоты и др. Сочетанное применение биогенного препарата с гипериммунной сывороткой позволяет в короткие сроки купировать инфекционный процесс, а также повысить неспецифическую резистентность клеточных и гуморальных факторов иммунной защиты организма животного.

Задачей, на которое направлено заявленное изобретение, является расширение арсенала средств (способов) с высокой эффективностью профилактики вирусных респираторных инфекций молодняка крупного рогатого скота при использовании доступного для животноводческих хозяйств и дешевого сырья (боенских отходов).

Поставленная задача решается тем, что способ профилактики респираторных болезней телят крупного рогатого скота включающий использование гипериммунной сыворотки в сочетании с иммуномодулирующим препаратом, при этом в качестве гипериммунной сыворотки используют препарат, содержащий 60-70% гипериммунной вирусно-бактериальной поливалентной сыворотки против диареи с титром антител 1:300-1:600 и 30-40% гипохлорита натрия в концентрации 300-350 мг/л, а в качестве иммуномодулирующего препарата используют биогенный лекарственный препарат, изготовленный из отходов боенской продукции, при этом оба препарата вводят одновременно, однократно препарат, содержащий гипериммунную сыворотку внутримышечно, а биогенный препарат подкожно, причем с профилактической целью биогенный препарат инъецируют в дозе 0,5-0,75 мл на 10 кг живой массы теленка, а препарат, содержащий гипериммунную вирусно-бактериальную поливалентную сыворотку в дозе 3,0 мл на 10,0 кг живой массы животного. Гипериммунную вирусно-бактериальную поливалентную сыворотку получают из крови животных-доноров, в неблагополучных по вирусно-респираторным болезням, в каждом конкретном хозяйстве.

Биогенный лекарственный препарат из отходов боенской продукции готовят путем выдержки сырья в холодильнике в течение 5-7 дней, измельчении сырья при последующем смешивании с активным раствором гипохлорита натрия в соотношении сырье: гипохлорит натрия 1:2-1:3 и экстракции при температуре +2, +4°С в течение в 18-24 часов, фасовки, стерилизации в автоклаве 1 час при температуре 120°С.

В производственных опытах были задействованы для сравнения сыворотка поливалентная фабричная (Покровского завода биопрепаратов) и гипериммунная вирусно-бактериальная поливалентная сыворотка, полученная от животных-доноров хозяйства в котором проводилась профилактика телят и выявление более эффективной их (сывороток) сочетаемости с биогенным препаратом.

Научно-производственные опыты по изучению профилактической эффективности по применению заявленного способа представлены в таблице 1.

Забор крови для исследований у новорожденных телят проводили дважды до введения препаратов и на 14 сутки после инъекции препаратов (табл. 2, 3). Клинические наблюдения за опытными животными вели в течение месяца.

Полученные данные свидетельствуют о том, что у 10,0% новорожденных телят регистрировали снижение общего количества лейкоцитов на 2,2% ниже физиологической нормы, соответственно гемоглобина у 40,0% на 2,0-7,0%, общего количества белка у 40,0% на 2,0-10,2%.

После инъекций сывороточных препаратов в отдельности и сочетании с биогенным препаратом отмечали достоверное увеличение общего количества лейкоцитов на 12,9% в O-2, О-3, O-4 (Р≤0,01). Физиологический лейкоцитоз в пределах референтных значений указывает на увеличение клеток иммунной системы, отвечающих за защиту организма, способных сформировать так называемую «линию обороны» от вирусов, бактерий, токсинов, инородных тел, отработанных шлаков. Общее количество гемоглобина во 0-2 группе к исходным и показателям O-1 группы увеличилось на 4,4-6,1%, что указывает на улучшение эритропоэза. Помимо таких важных функций, как транспортировка кислорода и железа по всему организму, гемоглобин поддерживает кислотно-щелочной баланс и выводит углекислый газ из тканей и органов. Белки крови выполняют многие функции: поддерживают постоянство осмотического давления, рН крови, уровень катионов в ней, играют важную роль в формировании иммунитета, являются структурными компонентами мембран клеток и прочее [3]. Повышение общего количества белка регистрировали в O-1 группе телят на 7,6%, O-2 на 14,2%, О-3 на 9,0% (Р≤0,01), O-4 на 12,0% (Р≤0,05). Снижение альбуминовой фракции белка отмечали в O-1 группе телят на 5,6% (Р≤0,05), O-2 на 1,2% (Р≤0,01), O-4 на 2,2% (Р≤0,05). Альбумины в сыворотке являются основными белками крови, функцией которых является поддержание онкотического давления крови, транспорт различных химических веществ и участие в метаболических процессах. Достоверное снижение альбуминов, в границах физиологической нормы к исходным значениям, указывает на интенсивность белкового обмена, роста и развития молодняка крупного рогатого скота.

Фракция гамма-глобулинов состоит из иммуноглобулинов, функционально представляющих собой антитела, обеспечивающие гуморальную иммунную защиту организма от инфекций и чужеродных веществ, достоверное увеличение данной фракции отмечали в O-2 группе на 10,0% и O-4 на 8,5% (Р≤0,01).

Определение бактерицидной активности сыворотки крови (БАСК) является показателем активности фагоцитоза, а именно нейтрофилов и моноцитов и указывает на антимикробные свойства крови и общее состояние иммунной системы. БАСК достоверно увеличилась у телят в O-1 на 4,3% (Р≤0,01), соответственно во O-2 на 6,6% (Р≤0,05), в О-3 на 3,8%, O-4 на 5,0% (Р≤0,01) по отношению к исходным показателям. Лизоцимная активность сыворотки крови (ЛАСК) также была достоверно выше во всех опытных группах спустя 14 дней после введения препаратов в O-1 группе телят на 6,7%, во O-2 на 12,6%, в О-3 на 6,2%, O-4 на 11,0% (Р≤0,05), также достоверная разница отмечена между O-1 и O-2, О-3 и О-4 группами (Р≤0,05) и O-2 и O-4 (Р≤0,01). Таким образом, применение поливалентных сывороток и биогенного препарата с цель профилактики ОРВИ КРС способствуют укреплению уровня естественной резистентности в период адаптации организма новорожденных телят к новым условиям и формированию иммунной защиты. У животных, получавших дополнительно к поливалентной сыворотке биогенный препарат, показатели неспецифической защиты были выше, чем у телят без применения иммуномодулятора (БАСК на 1,2-2,3%, ЛАСК на 4,8-5,9%).

Процентное соотношение различных видов лейкоцитов, представленных в таблице 3, достоверных различий, как с исходными показателями, так и между опытными группами, после применения сыворотки в отдельности и в сочетании с биогенным препаратом не регистрировали, что указывает на безопасность и физиологичность сочетанного использования биогенного препарата, который является естественным компонентом организма животного.

Среднесуточный привес телят в первый месяц выращивания достоверно увеличился (Р≤0,01) во O-2 и O-4 опытных группах, где дополнительно одновременно с поливалентной сывороткой против ОРВИ вводили биогенный препарат, по отношению к O-1 группе животных. Максимальный абсолютный прирос живой массы телят был получен во O-2 опытной группе, что на 6,0% выше, чем в O-1, соответственно на 8,2% чем О-3 и на 5,0% в сравнении с O-4. Показатель относительного прироста, позволяет оценить интенсивность и энергию роста растущего молодняка крупного рогатого скота, во O-2 группе был выше на 2,3% по отношению к O-1, соответственно на 4,1 к О-3 и 3,3% к O-4. Необходимо отметить положительное влияние, биогенного препарата в сочетании с поливалентной сывороткой, на динамику среднесуточного и относительного прироста животных, соответственно на 3,3% и 0,8% в O-4 группы в сравнении с О-3.

Минимальная заболеваемость телят ОРВИ отмечена в O-2 группе (5,0%), где в качестве профилактического средства использовали биогенный препарат с гипериммунной сывороткой, полученной из крови доноров данного хозяйства, содержащей весь спектр антител соответствующий вирусно-бактериальному фону хозяйства, по 10,0% животных заболели в O-1, O-4, максимальное количество 40,0% заболевших отмечали в О-3 группе, где в качестве профилактического средства использовали поливалентную фабричную сыворотку с ограниченным набором антител против вирусных инфекций КРС.

Полученные данные свидетельствуют о том, что у опытных телят при специфической профилактики ОРВИ с использованием поливалентных сывороток в сочетании с биогенным препаратом формируется действенный (стойкий) иммунитет, а у телят, где использовали только поливалентные специфические сыворотки регистрировали прорыв иммунитета, связанный, по-видимому, с иммунодепрессивным состоянием телят в ранний постнатальный период.

Пример 1. В стационарно неблагополучном пункте по ОРВИ КРС, новорожденным телятам с живой массой 37-40 кг в первый день жизни с профилактической целью внутримышечно вводили в дозе 3,0 мл на 10 кг массы тела (11,1-12,0 мл) гипериммунную сыворотку, полученную в неблагополучном хозяйстве по вирусно-респираторным болезням крупного рогатого скота в сочетании с биогенным препаратом в дозе 0,5 мл на 10 кг живой массы (1,9-2,0 мл) подкожно, однократно.

Таким образом, проведенные исследования указывают на высокую эффективность заявляемого способа профилактики респираторно-вирусных инфекций телят при использовании биогенного препарата в сочетании с гипериммунной сывороткой, содержащей в своем составе антитела к вакцинным штаммам, а также патогенной и условно патогенной микрофлоре циркулирующей в популяции биотопа окружающей среды, обособленной (ограниченной) территорией хозяйства, и может успешно использоваться с профилактической целью респираторно-вирусных инфекций новорожденных телят, для создания пассивного антимикробного иммунитета, а введение биогенного препарата, обладающего иммуномодулирующей активностью, способного воздействовать на метаболизм клеток и ткани организма, например, стимулировать синтез иммуноглобулинов, лизоцима сыворотки крови который обладает антимикробной активностью, оказывают иммуномодулирующие, противовоспалительное, антитоксическое действие, стимулируют процессы регенерации, гемопоэз и др.

Использование заявленного способа позволит расширить арсенал средств (способов) направленных на снижение заболеваемости с высокой эффективностью профилактики вирусных респираторных инфекций молодняка крупного рогатого скота при использовании доступного для животноводческих хозяйств и дешевого сырья (боенских отходов).

Источники информации

1. Морозов С.В., Ткачева Н.И., Ткачев А.В. Проблемы комплексного химического профилирования лекарственных растений // Химия растительного сырья. 2018. №4. С. 5-28. DOI: 10.1425 8/j cprm.2018044003

2. Даричева Н.Н., Ермолаев В.А. Тканевая терапия в ветеринарной медицине. Монография. - Ульяновск, УГСХА. 2011. - 168 с.

3. Ноздрачев А.Д., Баженов Ю.И., Баранникова И.А. и др. Общий курс физиологии человека и животных. Кн. 2. Физиология висцеральных систем. - М.: Высшая шк., 1991. - С.136-146.

Изобретение относиться к ветеринарии, в частности к способу профилактики респираторных болезней телят. Способ включает использование гипериммунной сыворотки в сочетании с иммуномодулирующим препаратом, при этом в качестве гипериммунной сыворотки используют препарат, содержащий 60-70% гипериммунной вирусно-бактериальной поливалентной сыворотки против диареи с титром антител 1:300-1:600 и 30-40% гипохлорита натрия в концентрации 300-350 мг/л, а в качестве иммуномодулирующего препарата используют биогенный лекарственный препарат, изготовленный из отходов боенской продукции. Оба препарата вводят одновременно, однократно, препарат, содержащий гипериммунную сыворотку внутримышечно, а биогенный препарат подкожно. С профилактической целью биогенный препарат инъецируют в дозе 0,5-0,75 мл на 10 кг живой массы теленка, а препарат, содержащий гипериммунную вирусно-бактериальную поливалентную сыворотку, в дозе 3,0 мл на 10 кг живой массы животного. Гипериммунную вирусно-бактериальную поливалентную сыворотку получают из крови животных-доноров, неблагополучных по вирусно-респираторным болезням, в каждом конкретном хозяйстве. Изобретение обеспечивает расширение арсенала средств с высокой эффективностью профилактики вирусных респираторных инфекций молодняка крупного рогатого скота при использовании доступного для животноводческих хозяйств и дешевого сырья - боенских отходов. 1 з.п. ф-лы, 4 табл., 1 пр.

1. Способ профилактики респираторных болезней телят, включающий использование гипериммунной сыворотки в сочетании с иммуномодулирующим препаратом, при этом в качестве гипериммунной сыворотки используют препарат, содержащий 60-70% гипериммунной вирусно-бактериальной поливалентной сыворотки против диареи с титром антител 1:300-1:600 и 30-40% гипохлорита натрия в концентрации 300-350 мг/л, а в качестве иммуномодулирующего препарата используют биогенный лекарственный препарат, изготовленный из отходов боенской продукции, при этом оба препарата вводят одновременно, однократно, препарат, содержащий гипериммунную сыворотку внутримышечно, а биогенный препарат подкожно, причем с профилактической целью биогенный препарат инъецируют в дозе 0,5-0,75 мл на 10 кг живой массы теленка, а препарат, содержащий гипериммунную вирусно-бактериальную поливалентную сыворотку, в дозе 3,0 мл на 10 кг живой массы животного, причем гипериммунную вирусно-бактериальную поливалентную сыворотку получают из крови животных-доноров, неблагополучных по вирусно-респираторным болезням, в каждом конкретном хозяйстве.

2. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что биогенный лекарственный препарат из отходов боенской продукции готовят путем выдержки сырья в холодильнике в течение 5-7 дней, измельчения сырья при последующем смешивании с активным раствором гипохлорита натрия в соотношении сырье: гипохлорит натрия 1:2-1:3 и экстракции при температуре +2, +4°С в течение 18-24 часов, фасовке, стерилизации в автоклаве 1 час при температуре 120°С.