Применение клатратного комплекса 20-гидроксиэкдизона с арабиногалактаном для нормализации обмена веществ, повышения неспецифической резистентности, роста и развития животных Российский патент 2022 года по МПК A61K31/56 A61K47/36 A61K47/40 A61P3/00 A61P17/18 

Применение клатратного комплекса 20-гидроксиэкдизона с арабиногалактаном для нормализации обмена веществ, повышения резистентности, антиоксидантного статуса организма, роста и развития животных

Изобретение относится к области ветеринарии и может быть использовано в фармакологии, медицине и в животноводстве для перорального введения и включения в рационы животных и птицы с целью нормализации обмена веществ, повышения их неспецифической резистентности, роста и развития.

Одним из инновационных подходов к созданию нового поколения специализированных продуктов может стать использование в их составе в качестве «микроингредиентов» фитопрепаратов, повышающих резистентность организма и обеспечивающих нормальное функционирование всех его органов и систем. Особый интерес в этом плане представляют растительные источники фитоэкдистероидов - полигидроксилированных стеринов, не оказывающих гормонального действия на млекопитающих и обладающих низкой токсичностью. Для фитоэкдистероидов характерна плейотропность (множественность) проявляемого биологического действия. Одним из наиболее широко изучаемых фитоэкдистероидов является 20-гидроксиэкдизон. 20-гидроксиэкдизон содержится в некоторых видах растений, а также в пищевом шпинате. Множественность физиологических эффектов в сочетании с низкой токсичностью 20-гидроксиэкдизона позволяет использовать его (преимущественно как индивидуальное соединение) в составе биологически активных добавок (БАД) к пище и кормам. За последние годы отмечается большой прогресс в изучении фитоэкдистероидов, интенсивно исследуются их коррегирующее участие в процессах белкового, углеводного и липидного обмена.

Однако до сих пор малоизученными остаются вопросы, связанные с исследованиями, направленными на увеличение растворимости, улучшение биодоступности, уменьшение применяемых доз, включении в рационы животных и птицы и пролонгации действия 20-гидроксиэкдистерона. Современные тенденции разработки новых препаратов основываются на создание наноструктурных композиций с улучшенными характеристиками. Создание наноструктурных композиций предполагает синтез клатратных комплексов β-циклодекстрина, арабиногалактана и гуммиарабика с 20-гидроксиэкдистероном. В связи с этим актуальным является создание растворимой, биодоступной наноразмерной формы 20-гидроксиэкдизона и изучение ее коррегирующего действия на процессы белкового, углеводного и липидного обмена, физиологическое состояние животных, резистентность их организма, рост и развитие.

Одним из перспективных в разработке подобных средств направлением является механохимия. Создание новых лекарственных форм методом механохимической активации базируется на создании комплекса путем соединения носителей, например, арабиногалактана с 20-гидроксиэкдистероном.

Известен клатратный комплекс арабиногалактана или гуммиарабика с 20-гидроксиэкдизоном, способ его получения (варианты), фармацевтическая композиция и лекарственное средство, обладающее противодиабетическим действием /Патент на изобретение РФ 2572334, опубл. 10.01.2016г./.

Техническая проблема, на решение которой направлено настоящее изобретение, заключается в расширении арсенала средств, которые одновременно обладают следующими характеристиками:

- проявляют коррегирующее нормализующее действие в отношении метаболизма, физиологического состояния животных;

- улучшают резистентность, антиоксидантный статус организма животных;

- повышает скорость роста и развития животных;

- сохраняет стабильность при хранении и, следовательно, обладает улучшенными физико-химическими свойствами.

Поставленная техническая проблема достигается применением клатратного комплекса, состоящего из 20-гидроксиэкдизона с арабиногалактаном, при следующем их содержании:

20-гидроксиэкдизона 10 масс.% и арабиногалактан остальное, в качестве средства, нормализующее обмен веществ, повышающее неспецифическую резистентность, антиоксидантный статус организма, рост и развитие животных.

В литературе отсутствует информация по применению клатратного комплекса, состоящего из 20-гидроксиэкдизона с арабиногалактаном, с его содержанием 10 масс.% и арабиногалактан остальное, как средства для нормализации метаболизма, повышения резистентности, антиоксидантного статуса организма, роста и развития животных.

Новым в предлагаемом изобретении является то, в качестве средства для нормализации обмена веществ, повышения резистентности, антиоксидантного статуса организма, роста и развития может применяться клатратный комплекс, состоящий из 20-гидроксиэкдизона с арабиногалактаном с суммарным его содержанием 10 масс.% и арабиногалактан - остальное. Для специалиста эти свойства явным образом не вытекают из уровня техники.

Для решения технической проблемы в настоящем изобретении предлагается клатратный комплекс 20-гидроксиэкдизона с арабиногалактаном, обеспечивающее нормализацию обмена веществ, повышение резистентности, антиоксидантного статуса организма, роста и развития.

Статистическая обработка результатов исследований была проведена с применением параметрических и непараметрических методов. Различия между группами считались статистически значимыми при p<0,10-0,05.

Предлагаемый Комплекс - 20-гидроксиэкдизон с арабиногалактаном.

Сущность изобретения поясняется примерами конкретного выполнения, в которых:

клатратный комплекс, состоящий из 20-гидроксиэкдизона с арабиногалактаном с суммарным его содержанием 10 масс. % и арабиногалактана - остальное, полученный стандартным способом / Патент РФ №2572334, 2015; Федорова А.В., Еримбетов К.Т., Бондаренко Е.В., Гончарова А.Я., Фрог Е.С. / Разработка наноразмерной формы 20-гидроксиэкдизона// ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ И КЛИНИЧЕСКАЯ ФАРМАКОЛОГИЯ. 2018 Том 81 Приложение с. 254].

ПРИМЕР 1. Клатратный комплекс 20-гидроксиэкдизона с арабиногалактаном, коррегирующее обмен веществ оценивался в экспериментах на крысах линии Wistar при стрептозотоциновой модели сахарного диабета.

При разработке методики исследования учитывались рекомендации, изложенные в Руководстве по проведению доклинических исследований лекарственных средств и общепринятого подхода к формированию стрептозотоциновой модели сахарного диабета на крысах линии Wistar [Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая (под общей редакцией А.Н. Миронова). М.: Гриф и К, 2012.- 944 с.].

Эксперимент был проведен на 32 крысах-самцах линии Wistar массой 160-180г. Крысы содержались в соответствии с требованиями к содержанию лабораторных животных (Приказ МЗ РФ №708н) на стандартных сертифицированных кормах в контролируемых условиях при температуре 18-20 ˚C, влажности воздуха 30-70 % и естественном освещении. Все экспериментальные работы с лабораторными животными выполнены в соответствии с общепринятыми нормами обращения с животными, на основе стандартных операционных процедур, которые соответствуют правилам Европейской Конвенции по защите позвоночных животных, используемых для научных целей.

До индукции стрептозотоциновой модели сахарного диабета у всех крыс определяли массу тела и исходный уровень глюкозы в крови. Определение уровня глюкозы в венозной крови (из хвостовой вены) проводили глюкометром Accu-Chek Performa Nano (Германия). Материал исследования - венозная кровь.

Модель сахарного диабета у животных вызывали комбинированным введением стрептозотоцина и никотинамида взрослым крысам. Никотинамид вводили крысам (230 мг/кг, внутрибрюшинно) за 15 мин до стрептозотоцина (65 мг/кг, внутривенно). При этом развивалась умеренная и устойчивая неголодная гипергликемия без существенного изменения уровня инсулина в плазме крови. Никотинамид проявлял защитный эффект, снижая цитотоксическое действие стрептозотоцина, что приводило к умеренному повреждению панкреатических β-клеток. В дальнейшем в эксперимент отбирались животные с уровнем глюкозы в крови превышающем 10 ммоль/л, то есть крысы с развившимся сахарным диабетом, из их числа были сформированы 3 группы.

Животные были разделены на 4 группы по 8 особей каждой. Крысам каждой группы ежедневно в течение 15 суток вводили соответствующие препараты по схеме:

1 группа – Контроль (суспензия 1 % крахмального геля);

2 группа – Метформин в дозе 200 мг/кг;

3 группа – Предлагаемый комплекс в дозе 1,0 мг/кг.

4 группа – Предлагаемый комплекс в дозе 10,0 мг/кг.

Введение препаратов проводили через 3 суток после введения стрептозотоцина и никотинамида. Препаратом сравнения являлся Метформин. Предлагаемый комплекс и препарат сравнения, вводили внутрижелудочно в виде суспензии в 1% крахмальном геле в объеме 2 мл. Измерение уровня глюкозы проводили глюкометром Accu-Chek Performa Nano (Германия) в венозной крови, полученной из хвостовой вены крыс на 7 и 15 сутки эксперимента.

Массометрию проводили в начале и в конце эксперимента, оценивали изменения массы тела.

На 15 сутки животных выводили из эксперимента, проводили вскрытие, забор крови, выделяли сыворотку и замораживали ее для дальнейших исследований на содержание общего холестерина, холестерина - липопротеинов высокой плотности (ХС ЛПВП), холестерина - липопротеинов низкой плотности (ХС ЛПНП), холестерина - липопротеинов очень низкой плотности (ХС ЛПОНП), триглицеридов, мочевины, креатинина, определение активности щелочной фосфатазы (КФ 3.1.3.1), креатинфосфокиназы (КФ 2.7.3.2), лактатдегидрогеназы (КФ 1.1.1.27), аланинаминотрансферазы (КФ 2.6.1.2), аспартатаминотрансферазы (КФ 2.6.1.1). Биохимические показатели сыворотки крови определяли с помощью наборов, производимых компанией «Юнимед» на автоматическом биохимическом анализаторе АРД-300. На основании полученных данных по липидному профилю сыворотки крови рассчитали коэффициент атерогенности (КА) по следующей формуле:

КА= (ХС ЛПНП + ХС ЛПОНП) / ХС ЛПВП (1)

В результате исследования установлено, что по изменению массы тела крыс, сравниваемые группы статистически значимо не отличались. Введение предлагаемого комплекса в дозах 1,0 и 10,0 мг/кг по сравнению с контролем и препаратом сравнения Метформином не влияло на изменение массы тела крыс с моделью сахарного диабета (табл. 1).

Таблица 1 - Изменение массы тела крыс с моделью сахарного диабета при 15 суточном введении клатратного комплекса 20-гидроксиэкдизона с арабиногалактаном и препарата сравнения метформина

№ Группы Количество животных Масса тела исходная,
М±m Масса тела конечная, М±m Относительное изменение массы
тела, %, М±m 1 Контроль 8 152,50±3,56 171,13±8,85 12,08±4,78% 2 Метформин 8 154,50±3,69 169,50±7,33 10,25±5,61% 3 Предлагаемый Комплекс, 1,0 мг/кг 8 151,75±2,86 174,25±3,87 15,27±4,05% 4 Предлагаемый Комплекс, 10,0 мг/кг 8 154,50±4,31 182,38±9,79 18,05±5,56%

Результаты проведенных исследований свидетельствуют о том, что внутрижелудочное введение предлагаемого комплекса в дозах 1 и 10 мг/кг способствует нормализации уровня глюкозы в крови крыс Wistar к 15 суткам эксперимента. Введение препарата сравнения Метформина, не оказывает статистически значимого эффекта: уровень глюкозы статистически значимо не отличается от показателей крыс группы контроля (табл. 2).

Таблица 2 - Изменение уровня глюкозы в крови крыс с моделью сахарного диабета при 15 суточном введении клатратного комплекса 20-гидроксиэкдизона с арабиногалактаном и препарата сравнения метформина

№ Группы Количество животных Содержание глюкозы, ммоль/л исходно на 3сутки на 7 сутки на 15 сутки 1 Контроль 8 5,45±0,11 12,48±2,45 13,69±2,88 14,36±3,73 2 Метформин 8 5,60±0,20 12,56±2,65 12,36±2,99 10,14±2,37 3 Предлагаемый Комплекс, 1,0 мг/кг 8 5,73±0,19 11,90±2,25 10,69±2,19 7,90±0,78^*# 4 Предлагаемый Комплекс, 10,0 мг/кг 8 5,85±0,13 12,75±3,04 10,73±2,71 7,62±0,88^*#

Примечание: здесь и далее в табл.: ^*Р<0,05 по U-тесту при сравнении c контролем;

^**Р<0,10 по U-тесту при сравнении c контролем;

^***Р<0,05 по U-тесту при сравнении c метформином;

^#Р<0,10 по U-тесту при сравнении c метформином.

Полученные данные по изучению активности ферментов в сыворотке крови крыс с моделью сахарного диабета показали, что предлагаемый комплекс в дозах 1,0 и 10,0 мг/кг способствует стабилизации и нормализации основных ферментных систем организма (табл. 3). В частности, стабилизирующий эффект предлагаемого комплекса наиболее значителен по лактатдегидрогеназной и фосфатазной системам организма крыс на фоне введения им стрептозотоцина (табл. 3).

Контроль Метформин Дозы предлагаемого комплекса, мг/кг 1,0 10,0 Креатинфосфокиназа (КФК), Ед/л 3818,6 ± 1237,7 7380,3 ± 1259,7 6853 ± 1458,5^* 6442 ± 529,6^** Аланинаминотрансфераза (АЛТ), Ед/л 98,8 ± 14,2 102,0 ± 12,8 75,4 ± 8,2^**# 84,8 ± 6,5 Аспартатаминотрансфераза (АСТ), Ед/л 199,8 ± 18,3 235,5 ± 11,9 228,2 ± 18,8 201,8 ± 9,0 Лактатдегидрогеназа, (ЛДГ) Ед/л 2386,2 ± 80,8 2379,7 ± 101,8 2189,9 ± 181,8 1808 ± 142,2^*# Щелочная фосфотаза (ЩФ), Ед/л 397,6 ± 26,3 571,2 ± 121,1 548,5 ± 53,9^*# 546,8 ± 32,2^*#

Таблица 3 – Активность ферментов сыворотки крови крыс с моделью сахарного диабета при 15 суточном введении клатратного комплекса 20-гидроксиэкдизона с арабиногалактаном и препарата сравнения метформина

При оценке уровня мочевины в сыворотке крови крыс было выявлено значительное повышение ее содержания при стрептозотоцин-индуцированном сахарном диабете (до 9,1 моль/л у отдельных животных) по сравнению с нормой, указанной в литературе (5,18 моль/л ± 0,38 моль/л) [Кавешникова С. В., Иванов В. М.Биохимические особенности крови крыс линии Wistar в постнатальном онтогенезе при интоксикации их оксидами азота//Вестник Ставропольского государственного университета 2011,-74. -с 100-105]. При введении предлагаемого комплекса в дозах 1,0 и 10,0 мг/кг у крыс происходит снижение содержания мочевины в сыворотке крови до уровня нормы (табл. 3). Что касается уровня креатинина в сыворотке крови, то его концентрация была статистически незначимо при введении предлагаемого комплекса по сравнению с контролем и метформином (табл. 4).

Таблица 4 - Уровень мочевины и креатинина в сыворотке крови крыс с моделью сахарного диабета при 15 суточном введении клатратного комплекса 20-гидроксиэкдизона с арабиногалактаном и препарата сравнения метформина

Контроль Метформин Дозы предлагаемого комплекса, мг/кг 1,0 10,0 Креатинин, мкмоль/л 39,90 ± 1,24 40,45 ± 0,97 37,10 ± 2,04 37,20 ± 0,75 Мочевина, ммоль/л 8,05 ± 0,56 6,00 ± 0,54 6,08 ± 0,50^* 5,88 ± 0,31^*

Результаты сравнительной оценки влияния предлагаемого комплекса на липидный профиль крови крыс при индукции сахарного диабета в стрептозотоциновой модели свидетельствуют о значительных его изменениях, по сравнению с контролем и метформином (табл. 5).

При развитии сахарного диабета у крыс отмечалось статистически значимое повышение значения уровня триглицеридов до 2,67 ммоль/л у отдельных крыс (медиана (верхний-нижний квартиль) – 1,78 (1,13-2,67)). Введение предлагаемого комплекса в дозах 1,0 и 10,0 мг/кг, нормализовало уровень триглицеридов в сыворотке крови – значения статистически значимо различались от группы контроля (табл. 5).

Уровень общего холестерина в сыворотке крови крыс при развитии экспериментального сахарного диабета повышался. Под действием предлагаемого комплекса в дозах 1,0 и 10,0 мг/кг происходила нормализация показателей, при этом статистически значимый эффект отмечался по сравнению с контролем (табл. 5).

В результате измерения уровня холестерина, связанного с ЛПВП, ЛПНП и ЛПОНП было выявлено снижение фракции ХС ЛПОНП на фоне незначительных изменений величин ХС ЛПВП и уменьшении расчетного значения коэффициента атерогенности в сыворотке крыс, получавших предлагаемый комплекс в дозах 1,0 и 10,0 мг/кг по сравнению с контролем (табл. 5).

Таблица 5 – Показатели липидного обмена в сыворотке крови крыс с моделью сахарного диабета при 15 суточном введении клатратного комплекса 20-гидроксиэкдизона с арабиногалактаном и препарата сравнения метформина

Контроль Метформин Дозы предлагаемого комплекса, мг/кг 1,0 10,0 Триглицириды, ммоль/л 1,78 ± 0,25 1,28 ± 0,13 0,92 ± 0,13^*# 1,37 ± 0,13^** Общий холестерин, ммоль/л 1,80 ± 0,06 1,51 ± 0,15 1,50 ± 0,08^* 1,60 ± 0,03^* Холестерин-ЛПВП ммоль/л 1,00 ± 0,02 0,84 ± 0,08 0,89 ± 0,04 0,95 ± 0,04 Холестерин-ЛПОНП ммоль/л 0,71 ± 0,11 0,57 ± 0,06 0,50 ± 0,07^* 0,53 ± 0,04^* Холестерин-ЛПНП ммоль/л 0,09 ± 0,1 0,10 ± 0,03 0,11 ± 0,02 0,12 ± 0,04 Коэффициент атерогенности 0,80 ± 0,04 0,79 ± 0,04 0,68± 0,06^*# 0,68 ± 0,06^*#

Таким образом, на основании полученных результатов оценки липидного профиля, можно заключить, что введение стрептозотоцина крысам на фоне стандартной диеты приводит наряду с нарушениями углеводного обмена к повышению уровней триглицеридов, общего холестерина, ХС ЛПОНП и понижению содержания ХС ЛПВП в сыворотке крови. Данную картину можно охарактеризовать как основу дальнейшего развития нарушений метаболизма. Введение предлагаемого комплекса в дозах 1,0 и 10,0 мг/кг связано со статистически значимым эффектом, характеризующимся снижением уровней триглицеридов, общего холестерина и ХС ЛПОНП в сыворотке крови, на фоне уменьшения расчетного значения коэффициента атерогенности. Применение предлагаемого комплекса приводит к нормализации показателей липидного обмена.

В результате проведенных исследований экспериментально было установлено, что на фоне индуцированного при помощи стрептозотоцина сахарного диабета клатратный комплекс 20-гидроксиэкдизона с арабиногалактаном нормализует обмен веществ у крыс.

ПРИМЕР 2. Клатратный комплекс 20-гидроксиэкдизона с арабиногалактаном, обеспечивающий повышение резистентности, антиоксидантного статуса организма, рост и развитие изучалось в экспериментах на кроликах породы Советская Шиншилла.

Эксперимент проведен на 18 кроликах породы Советская Шиншилла в период от 6- до 18 - недельного возраста. Было сформировано 3 группы по 6 кроликов. Животным 1-й группы (контроль) вводили суспензию арабиногалактана в крахмальном геле; 2-й группы - клатратный комплекс 20-гидроксиэкдизона с арабиногалактаном в дозе 1,0 мг/кг; 3-й группы - клатратный комплекс 20-гидроксиэкдизона с арабиногалактаном в дозе 5,0 мг/кг. Животные содержались в индивидуальных клетках в условиях искусственного освещения (12 часов светлого и темного времени) с принудительной 16-кратной в час вентиляцией, при температуре 18-20 °С и относительной влажности 50-65%

Взвешивание кроликов осуществляли до утреннего приема пищи каждые 2 недели в течение 85 суток. В ходе эксперимента вели учет потребления корма и исследовали их химический состав. В течение проведения эксперимента кровь была взята 2 раза: через 45 и 75 суток после его начала. Взятие крови проводили из краевой вены уха кролика в объеме 2,0-2,5 мл. Кровь для определения показателей неспецифической резистентности организма кроликов отбиралась в полипропиленовые пробирки без антикоагулянтов с целью получения сыворотки. Сыворотка крови отделялась центрифугированием при 4000 об/мин. в течение 15 мин. Образцы сыворотки крови замораживались и хранились до анализа при температуре -20°С.

Неспецифическую резистентность организма подопытных кроликов оценивали на основе определения бактерицидной активности сыворотки крови (БАСК) и лизоцимной активности сыворотки крови (ЛАСК). БАСК определяли по методике Мюнселя и Треффенса в модификации О.В. Смирновой и Т.Н. Кузьминой и ЛАСК по Дорофейчуку [Карпуть, И.М. Рекомендации по диагностике и профилактике иммунодефицитов и аутоиммунных заболеваний у животных /И.М. Карпуть [и др.]. Витебск,1992, с. 79]. Антиоксидантный статус организма кроликов оценивали на основе определения концентрации малонового диальдегида (МДА) и активности ферментативного звена антиоксидантной системы в крови. Определение концентрации МДА в плазме крови проводили с использованием KMnO₄ и FeSO₄ по методу, описанному в ниже приведенной статье [Osipov A.N., Ryabchenko N.I.., Ivannik B.P., Dzikovskaya L.A.., Ryabchenko V.I.., Kolomijtseva G.Ya. A prior administration of heavy metals reduces thymus lymphocyte DNA lesions and lipid peroxidation in gamma-irradiated mice.// J.Phys.IV France – 2003 – Vol. 107 – P.987-992]. Анализ состояния ферментативного звена антиоксидантной системы оценивали на основе определения активности супероксиддисмутазы (СОД) и каталазы в в лизате эритроцитов. Определение активности СОД в эритроцитах производили энзиматическим методом на биохимическом анализаторе RX Monza (Великобритания) с использованием коммерческих наборов Randox SD 125 (Великобритания). Метод основан на ингибировании ферментом реакции взаимодействия супероксид анион-радикалов и 2-(4-иодофенил)-3- (4-нитрофенол)-5-фенилтетразолиумхлорид с образованием окрашенного в красный цвет соединения – формазана. Активность каталазы в лизате эритроцитов определяли спектрофотометрически общепринятым методом [Королюк М.А., Иванова Л.И., Майорова И.Г., Токарев В.Е. Метод определения активности каталазы. Лабораторное дело. 1988; 1: 16–19.] при длине волны 420 нм, принцип которого основан на способности перекиси водорода образовывать с молибдатом аммония стойкий окрашенный комплекс. Активность каталазы эритроцитов выражали в количестве утилизированной перекиси водорода в мкмоль за 1 мин из расчета на один эритроцит, пкат/эритроцит. С этой целью гемолизат эритроцитов разводили таким образом, чтобы в реакционную смесь попадало 10×10⁶ клеток.

Рост животных имеет два аспекта. Первый связан с увеличением массы тела за единицу времени. Второй включает изменение формы и состава тела, обусловленные дифференциальным ростом его составных частей. Понимание того, как растут животные, может привести к разработке методов управления процессами роста, изысканию путей увеличения эффективности или же получения продукции более высокого качества.

В результате проведенных исследований установлено, что введение клатратного комплекса 20-гидроксиэкдизона с арабиногалактаном в дозах 1,0 и 5,0 мг/кг массы тела по сравнению с контролем в течение 69 суток позволило статистически значимо на 32-38 % повысить абсолютные и среднесуточные приросты массы тела кроликов (табл. 6). Наилучшие результаты были получены при введении кроликам предлагаемого комплекса в дозе 1,0 мг/кг массы тела. В конце опыта масса тела у кроликов, получавших предлагаемый комплекс в дозах 1,0 и 5,0 мг/кг, соответственно, составляла 3062 и 3086 г или была выше на 15,4 и 16,3 %, чем у животных контрольной группы. При этом введение предлагаемого комплекса в дозах 1,0 и 5,0 мг/кг обеспечило повышение эффективности использования корма кроликами, а именно статистически значимо снизило затраты кормов на 1 кг прироста массы тела по сравнению с животными контрольной группы. Аналогичные изменения отмечались и по затратам сырого протеина и обменной энергии на единицу продукции (табл. 7).

Иммунный статус организма может быть определён с помощью различных показателей, характеризующих уровень защитных свойств животного. В качестве критериев оценки формирования неспецифической резистентности у подопытных кроликов при введении предлагаемого комплекса были рассмотрены БАСК и ЛАСК.

Результаты исследований неспецифической резистентности показали, что введение клатратного комплекса 20-гидроксиэкдизона с арабиногалактаном кроликам в дозах 1,0 и 5,0 мг/кг массы тела по сравнению с контролем в течение 69 суток статистически значимо повышает уровни БАСК и ЛАСК (табл. 8). Следует при этом отметить, что сопоставимые результаты были получены при введении клатратного комплекса кроликам как в дозе 1,0 мг/кг, так и 5,0 мг/кг массы тела.

Полученные данные по антиоксидантному статусу организма кроликов свидетельствуют о том, что введение клатратного комплекса 20-гидроксиэкдизона с арабиногалактаном в дозах 1,0 и 5,0 мг/кг массы тела по сравнению с контролем в течение 69 суток статистически значимо повышает активности неферментативного и ферментативного звена антиоксидантной системы. В частности, активности ферментов каталазы и СОД в лизате эритроцитов у кроликов получавших клатратный комплекс в двух исследуемых дозах статистически значимо были выше по сравнению с контролем (табл. 9).

Таким образом, введение кроликам клатратного комплекса 20-гидроксиэкдизона с арабиногалактаном обеспечивает нормализацию обмена веществ, повышение неспецифической резистентности и антиоксидантного статуса организма, роста и развития животных.

Таблица 6 – Рост и развитие кроликов при 69-суточном введении клатратного комплекса 20-гидроксиэкдизона с арабиногалактаном в дозах 1,0 и 5,0 мг/кг массы тела (М±m, n=6)

Показатели Группы контроль 1-я опытная 2-я опытная Предварительный период (до введения - в течение 14 суток) Масса тела в начале, г 1128±103,9 1191 ± 89,5 1191 ± 85,2 Масса тела в конце, г 1454 ± 111,0 1404 ± 50,5 1502 ± 60,0 Абсолютный прирост массы тела, г 285± 60,4 260 ±24,3 312 ± 35,0 Среднесуточный прирост массы тела, г 20,4 ± 4,31 18,6 ± 1,73 22,3± 2,50 Основной период (через 69 суток после введения препарата) Масса тела в начале, г 1454 ± 111,0 1404 ± 50,5 1502 ± 60,0 Масса тела в конце, г 2653 ± 143,3 3062 ± 21,6^* 3086 ± 62,4^* Абсолютный прирост массы тела, г 1199± 117,0 1658 ±71,4** 1583 ± 74,2* Среднесуточный прирост массы тела, г 17,4 ± 1,69 24,0 ± 1,03** 23,0± 1,07* Относительный прирост, % 58,80 ± 5,21 74± 3,70^# 69,13± 3,51 CW (удельная скорость роста, 1/сутки 0,02 ± 0,005 0,025± 0,003^* 0,023± 0,003 К (константа роста) 1,40 ± 0,33 1,81± 0,23^# 1,61± 0,18

Примечание: здесь и далее в табл.: ^*Р<0,05 по U-тесту при сравнении c контролем

^**Р<0,01 по U-тесту при сравнении c контролем

^#Р<0,02 по U-тесту при сравнении c контролем

^&Р<0,02 по U-тесту при сравнении c контролем

^@Р<0,004 по U-тесту при сравнении c контролем

^$Р<0,03 по U-тесту при сравнении c контролем

^%Р<0,04 по U-тесту при сравнении c контролем

Таблица 7 - Эффективность использования корма кроликами при 69-суточном введении клатратного комплекса 20-гидроксиэкдизона с арабиногалактаном в дозах 1,0 и 5,0 мг/кг массы тела (М±m, n=6)

Показатели Группы контроль 1-я опытная 2-я опытная Основной период (через 69 суток после введения препарата) Потреблено корма на 1 голову, кг 10,45 ± 1,05 8,46 ± 1,52 9,37 ± 0,83 Расход корма на единицу прироста, кг 7,26 ± 0,97 4,89 ± 0,72^# 5,85 ± 0,88^& Расход обменной энергии на единицу прироста, МДж 66,54 ± 9,93 43,32 ± 6,92^# 51,82 ± 8,84^& Расход протеина на единицу прироста, кг 1,11 ± 0,15 0,72 ± 0,11^# 0,88 ± 0,12^&

Таблица 8 – Показатели неспецифической резистентности организма кроликов при 69-суточном введении клатратного комплекса 20-гидроксиэкдизона с арабиногалактаном в дозах 1,0 и 5,0 мг/кг массы тела (М±m, n=6)

Показатели Группы контроль 1-я опытная 2-я опытная БАСК, % 52,38±3,01 61,90±3,01^* 64,28±3,19^& ЛАСК, % 47,12±0,47 53,22±1,52^# 54,90±0,99^#

Таблица 9 – Показатели антиоксидантного статуса организма кроликов при 69-суточном введении клатратного комплекса 20-гидроксиэкдизона с арабиногалактаном в дозах 1,0 и 5,0 мг/кг массы тела (М±m, n=6)

Показатели Группы контроль 1-я опытная 2-я опытная Через 45 суток Каталаза, пкат/эритроцит 52,38±3,01 61,90±3,01^* 64,28±3,19^& СОД, Ед/г Hb 40,4±5,51 59,4±5,76^* 63,75±4,25^$ Через 75 суток СОД, Ед/г Hb 49,4±1,78 76,0±7,35^** 71,±8,59^$ Каталаза, пкат/эритроцит 48,4±1,75 56,0±1,76^# 56,20±2,80^* МДА, мкмоль/л 13,96±1,39 9,17±0,47^@ 10,24±0,60^$

Изобретение относится к области фармакологии и ветеринарии и направлено на коррегирующее действие роста и развития животных. Описано применение клатратного комплекса, содержащего 20-гидроксиэкдизон и арабиногалактан, для повышения неспецифической резистентности, антиоксидантного статуса организма, роста и развития животных. Технический результат: эффективное повышение неспецифической резистентности, антиоксидантного статуса организма, роста и развития животных одновременно. 9 табл., 2 пр.

Применение клатратного комплекса, содержащего 20-гидроксиэкдизон и арабиногалактан, для повышения неспецифической резистентности, антиоксидантного статуса организма, роста и развития животных.