КОМПОЗИЦИЯ НА ОСНОВЕ ЛЕКАРСТВЕННЫХ МАТЕРИАЛОВ ТРАДИЦИОННОЙ КИТАЙСКОЙ МЕДИЦИНЫ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ МЕТАБОЛИЧЕСКОГО СИНДРОМА, СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЕ, И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЙ ПРЕПАРАТ НА ЕЕ ОСНОВЕ И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ Российский патент 2022 года по МПК A61K36/75 A61K36/06 A61K36/428 A61K36/54 A61K36/718 A61K36/8888 A61P3/00 A61P3/06 A61P3/10 

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

Настоящее изобретение относится к области медицинской технологии, в частности, к композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины, способу ее получения, применению, и к фармацевтическим препаратам на ее основе и их применению.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Метаболический синдром представляет собой клинический синдром, который имеет серьезное влияние на здоровье человека. Основные симптомы метаболического синдрома включают нарушенную толерантность к глюкозе, артериальную гипертензию, гиперлипидемию и центральное ожирение. Общей патологической основой метаболического синдрома является инсулинорезистентность, а его клинические признаки включают совокупность различных метаболических заболеваний. В настоящее время от одной четвертой до одной третьей взрослого населения в мире страдают метаболическим синдромом. По мере того как население стареет и избыточный вес/ожирение распространяется с каждым годом увеличивается заболеваемость/частота заболевания метаболическим синдромом. В течение последних 20 лет процент заболеваемости метаболическим синдромом у взрослого населения США увеличился с 21% до 39%. В Китае у возрастной группы старше 20 лет по результатам диагностики по стандартам WHO и NCEP-ATPIII заболеваемость метаболическим синдромом составила соответственно 14%-18% и 12%-21%. У пациентов с метаболическим синдромом частота обнаружения заболевания сердечно-сосудистой системы и вероятность инсульта и смерти в 2-3 раза выше, чем у пациентов без метаболического синдрома. Риск развития сахарного диабета 2 типа у пациентов с метаболическим синдромом в 5 раз выше, чем у пациентов без метаболического синдрома. Среди пациентов с метаболическим синдромом около 45% составляют пациенты с аномальным метаболизмом глюкозы, более 80% составляют пациенты с аномальными уровнями липидов в крови и примерно 90% составляют пациенты с повышенным кровяным давлением. На сегодняшний день контроль метаболического синдрома в западной медицине главным образом предусматривает комбинированное применение ряда лекарственных средств, которые отличаются высокой стоимостью, неудобством в употреблении и сравнительно серьезными побочными эффектами. В традиционной китайской медицине такое эффективное лекарственное средство также отсутствует. Из-за сложности проявлений метаболического синдрома в мире до сегодняшнего дня не представлено лекарственное средство, специально предназначенное для лечения метаболического синдрома, поэтому клинические исследования в целях разработки новых лекарственных средств для лечения метаболического синдрома имеют большое значение. Настоящее изобретение восполняет имеющийся в этой области пробел в мире.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ

Одной из целей настоящего изобретения является обеспечение композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины, где композиция на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины содержит Coptidis Rhizoma, Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma, Trichosanthis Fructus, Cinnamomi Cortex и красный дрожжевой рис.

В композиции Aurantii Fructus Immaturus предпочтительно представляет собой обжаренный в отрубях Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma предпочтительно представляет собой Pinelliae Rhizoma Praeparatumcum Zingibere Et Alumine, и Trichosanthis Fructus предпочтительно представляет собой Trichosanthis Fructus в цельном виде. Предпочтительно композиция содержит 5-80 вес. % Coptidis Rhizoma, 5-70 вес. % Aurantii Fructus Immaturus, 0-60 вес. % Pinelliae Rhizoma, 0-40 вес. % Trichosanthis Fructus, 2-12 вес. % Cinnamomi Cortex и 10-60 вес. % красного дрожжевого риса. Более предпочтительно композиция содержит 10-30 вес. % Coptidis Rhizoma, 10-30 вес. % Aurantii Fructus Immaturus, 10-30 вес. % Pinelliae Rhizoma, 5-30 вес. % Trichosanthis Fructus, 2-10 вес. % Cinnamomi Cortex и 12-36 вес. % красного дрожжевого риса. Наиболее предпочтительно предпочтительные доли компонентов в композиции являются следующими: 19,6 вес. % Coptidis Rhizoma, 19,6 вес. % Aurantii Fructus Immaturus, 19,6 вес. % Pinelliae Rhizoma, 26,1 вес. % Trichosanthis Fructus, 2,1 вес. % Cinnamomi Cortex и 13,0 вес. % красного дрожжевого риса.

Второй целью настоящего изобретения является обеспечение композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины, где композиция содержит Coptidis Rhizoma, Aurantii Fructus Immaturus, красный дрожжевой рис и необязательно один или более компонентов, выбранных из группы, состоящей из Pinelliae Rhizoma, Trichosanthis Fructus и Cinnamomi Cortex. Указанные один или более компонентов включают 1, 2, 3 компонента.

Композиция содержит 5-80 вес. % Coptidis Rhizoma; 5-70 вес. % Aurantii Fructus Immaturus; 0-60 вес. % Pinelliae Rhizoma; 0-40 вес. % Trichosanthis Fructus; 0-12 вес. % Cinnamomi Cortex и 10-60 вес. % красного дрожжевого риса.

Композиция содержит 5-80 вес. % Coptidis Rhizoma; 5-70 вес. % Aurantii Fructus Immaturus; 0-60 вес. % Pinelliae Rhizoma; 5-40 вес. % Trichosanthis Fructus; 2-12 вес. % Cinnamomi Cortex и 10-60 вес. % красного дрожжевого риса.

Композиция содержит 5-80 вес. % Coptidis Rhizoma; 5-70 вес. % Aurantii Fructus Immaturus; 10-60 вес. % Pinelliae Rhizoma; 0-40 вес. % Trichosanthis Fructus; 2-12 вес. % Cinnamomi Cortex и 10-60 вес. % красного дрожжевого риса.

Композиция содержит 5-80 вес. % Coptidis Rhizoma; 5-70 вес. % Aurantii Fructus Immaturus; 10-60 вес. % Pinelliae Rhizoma; 5-40 вес. % Trichosanthis Fructus; 0-12 вес. % Cinnamomi Cortex и 10-60 вес. % красного дрожжевого риса.

Композиция содержит 5-80 вес. % Coptidis Rhizoma; 5-70 вес. % Aurantii Fructus Immaturus; 0-60 вес. % Pinelliae Rhizoma; 0-40 вес. % Trichosanthis Fructus; 2-12 вес. % Cinnamomi Cortex и 10-60 вес. % красного дрожжевого риса.

Композиция содержит 5-80 вес. % Coptidis Rhizoma; 5-70 вес. % Aurantii Fructus Immaturus; 0-60 вес. % Pinelliae Rhizoma; 5-40 вес. % Trichosanthis Fructus; 0-12 вес. % Cinnamomi Cortex и 10-60 вес. % красного дрожжевого риса.

Композиция содержит 5-80 вес. % Coptidis Rhizoma; 5-70 вес. % Aurantii Fructus Immaturus; 10-60 вес. % Pinelliae Rhizoma; 0-40 вес. % Trichosanthis Fructus; 0-12 вес. % Cinnamomi Cortex и 10-60 вес. % красного дрожжевого риса.

Aurantii Fructus Immaturus предпочтительно представляет собой обжаренный в отрубях Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma предпочтительно представляет собой Pinelliae Rhizoma Praeparatumcum Zingibere Et Alumine, и Trichosanthis Fructus предпочтительно представляет собой Trichosanthis Fructus в цельном виде.

Другой целью настоящего изобретения является обеспечение композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины, полученной посредством смешивания экстрактов шести лекарственных материалов традиционной китайской медицины, состоящих из Coptidis Rhizoma, Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma, Trichosanthis Fructus, Cinnamomi Cortex и красного дрожжевого риса. Относительное содержание экстрактов является следующим: 2-30% составляет экстракт суммы алкалоидов из Coptidis Rhizoma (сокращенное название экстракт Coptidis Rhizoma), и 70-98% составляет смешанный экстракт пяти лекарственных материалов традиционной китайской медицины, состоящий из Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma, красного дрожжевого риса (от общего количества в составе, 10-100% красного дрожжевого риса экстрагируется, 0-90% измельчаются в тонкодисперсный порошок для применения в качестве разрыхлителя или наполнителя, далее по аналогии), Trichosanthis Fructus и Cinnamomi Cortex. Предпочтительно экстракт Coptidis Rhizoma составляет 3-25%, и смешанный экстракт пяти лекарственных материалов традиционной китайской медицины, состоящий из Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma, красного дрожжевого риса, Trichosanthis Fructus и Cinnamomi Cortex, составляет 75-97%. Наиболее предпочтительно экстракт Coptidis Rhizoma составляет 5-15%, и смешанный экстракт пяти лекарственных материалов традиционной китайской медицины, состоящий из Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma, красного дрожжевого риса, Trichosanthis Fructus и Cinnamomi Cortex, составляет 85-95%.

Порошок красного дрожжевого риса (0-90% от общего количества в составе) и экстракт Coptidis Rhizoma смешивают до однородного состояния со смешанным экстрактом пяти лекарственных материалов традиционной китайской медицины, состоящим из Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma, красного дрожжевого риса, Trichosanthis Fructus и Cinnamomi Cortex, или соответствующими экстрактами пяти лекарственных материалов традиционной китайской медицины с получением композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины.

Композиция на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины содержит следующие активные ингредиенты (мг/г): 6-122 мг/г суммы алкалоидов (суммарное количество четырех видов алкалоидов: гидрохлорида берберина, гидрохлорида ятрорризина, гидрохлорида коптизина и гидрохлорида пальматина, далее по аналогии), в том числе 4-89 мг/г берберина; 30-315 мг/г суммы флавоноидов (суммарное количество трех флавоноидных гликозидов, включающих неогесперидин, гесперидин и нарингин, далее по аналогии), в том числе 20-186 мг/г неогесперидина, и 0,5-9 мг/г ловастатина.

Композиция на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины содержит следующие активные ингредиенты (мг/г): 12-122 мг/г суммы алкалоидов, в том числе 9-89 мг/г берберина; 130-315 мг/г суммы флавоноидов, в том числе 80-186 мг/г неогесперидина, и 1-9 мг/г ловастатина.

Композиция на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины предпочтительно содержит следующие активные ингредиенты (мг/г): 20-85 мг/г суммы алкалоидов, в том числе 15-62 мг/г берберина; 140-250 мг/г суммы флавоноидов, в том числе 90-170 мг/г неогесперидина, и 1-5 мг/г ловастатина.

Композиция на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины более предпочтительно содержит следующие активные ингредиенты (мг/г): 30-75 мг/г суммы алкалоидов, в том числе 20-50 мг/г берберина; 110-250 мг/г суммы флавоноидов, в том числе 60-120 мг/г неогесперидина, и 1-5 мг/г ловастатина.

Композиция на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины предпочтительно содержит следующие активные ингредиенты (мг/г): 20-85 мг/г суммы алкалоидов, в том числе 15-62 мг/г берберина; 100-250 мг/г суммы флавоноидов, в том числе 30-170 мг/г неогесперидина, и 1-5 мг/г ловастатина.

Композиция на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины более предпочтительно содержит следующие активные ингредиенты (мг/г): 30-75 мг/г суммы алкалоидов, в том числе 20-50 мг/г берберина; 110-250 мг/г суммы флавоноидов, в том числе 40-120 мг/г неогесперидина, и 1-5 мг/г ловастатина.

Еще одной целью настоящего изобретения является обеспечение способа получения экстракта лекарственных средств традиционной китайской медицины. Coptidis Rhizoma экстрагируют с применением водного раствора кислоты и фильтруют, концентрируют, подвергают щелочному осаждению, высаливают, фильтруют, высушивают и измельчают с получением экстракта суммы алкалоидов. Четыре лекарственных материала, включающие красный дрожжевой рис (10-100% от необходимого по рецепту количества), Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma и Cinnamomi Cortex, экстрагируют с применением 50-90% этанола и фильтруют. Trichosanthis Fructus экстрагируют с применением 75-95% этанола, раствор экстракта Trichosanthis Fructus объединяют с раствором экстракта четырех лекарственных материалов традиционной китайской медицины, удаляют этанол, концентрируют при пониженном давлении, высушивают и измельчают с получением смешанного экстракта пяти лекарственных материалов традиционной китайской медицины, состоящего из Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma, красного дрожжевого риса, Cinnamomi Cortex и Trichosanthis Fructus; либо пять лекарственных материалов традиционной китайской медицины, включающих красный дрожжевой рис, Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma, Cinnamomi Cortex и Trichosanthis Fructus, смешивают и экстрагируют с применением 50-90% этанола, фильтруют, удаляют этанол при пониженном давлении, концентрируют, высушивают и измельчают с получением смешанного экстракта пяти лекарственных материалов традиционной китайской медицины, состоящего из красного дрожжевого риса, Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma, Cinnamomi Cortex и Trichosanthis Fructus; либо красный дрожжевой рис, Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma, Cinnamomi Cortex и Trichosanthis Fructus по отдельности экстрагируют с применением 50-90% этанола, фильтруют с получением по отдельности растворов этанольных экстрактов отдельных лекарственных материалов традиционной китайской медицины; полученные по отдельности растворы этанольных экстрактов пяти лекарственных материалов традиционной китайской медицины по отдельности фильтруют, удаляют этанол при пониженном давлении и концентрируют, высушивают и измельчают с получением соответствующих экстрактов пяти лекарственных материалов традиционной китайской медицины, состоящих из красного дрожжевого риса, Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma, Cinnamomi Cortex и Trichosanthis Fructus. Соответствующие экстракты пяти лекарственных материалов традиционной китайской медицины смешивают с получением смешанного экстракта пяти лекарственных материалов традиционной китайской медицины. Экстракт Coptidis Rhizoma и смешанный экстракт пяти лекарственных материалов традиционной китайской медицины смешивают с получением композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины.

В композиции Coptidis Rhizoma экстрагируют 0,1-1% водным раствором серной кислоты, фильтруют, фильтрат концентрируют, добавляют гидроксид кальция для щелочного осаждения, удаляют осадок, регулируют значение рH фильтрата с помощью хлористоводородной кислоты до кислотного значения рH, затем добавляют хлорид натрия для осаждения осадка и осадок отделяют, промывают, фильтруют, высушивают и измельчают с получением экстракта Coptidis Rhizoma.

В композиции четыре лекарственных материала, включающие красный дрожжевой рис (10-100% от необходимого по рецепту количества), Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma и Cinnamomi Cortex, экстрагируют с применением 50-90% этанола и фильтруют; и Trichosanthis Fructus экстрагируют с применением 75-95% этанола, раствор экстракта Trichosanthis Fructus объединяют с раствором экстрактов четырех лекарственных материалов традиционной китайской медицины, удаляют этанол, концентрируют при пониженном давлении, высушивают и измельчают с получением смешанного экстракта пяти лекарственных материалов традиционной китайской медицины, состоящего из Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma, красного дрожжевого риса, Cinnamomi Cortex и Trichosanthis Fructus.

В композиции пять лекарственных материалов традиционной китайской медицины, включающих красный дрожжевой рис, Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma, Trichosanthis Fructus и Cinnamomi Cortex, смешивают и экстрагируют с применением 50-90% этанола, фильтруют, удаляют этанол при пониженном давлении, концентрируют, высушивают и измельчают с получением смешанного экстракта пяти лекарственных материалов традиционной китайской медицины, состоящего из Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma, красного дрожжевого риса, Cinnamomi Cortex и Trichosanthis Fructus. Альтернативно красный дрожжевой рис, Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma, Cinnamomi Cortex и Trichosanthis Fructus по отдельности экстрагируют с применением 50-90% этанола, фильтруют с получением по отдельности растворов этанольных экстрактов отдельных лекарственных материалов традиционной китайской медицины; полученные по отдельности растворы этанольных экстрактов пяти лекарственных материалов традиционной китайской медицины по отдельности фильтруют, удаляют этанол при пониженном давлении и концентрируют, высушивают, измельчают и смешивают с получением отдельных экстрактов пяти лекарственных материалов традиционной китайской медицины, состоящих из красного дрожжевого риса, Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma, Cinnamomi Cortex и Trichosanthis Fructus. При экстракции этанолом пяти лекарственных материалов традиционной китайской медицины, включающих Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma, Cinnamomi Cortex, красный дрожжевой рис и Trichosanthis Fructus, для получения смешанного экстракта или отдельных экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины этанол предпочтительно представляет собой 60-85% этанол.

Смешанный экстракт пяти лекарственных материалов традиционной китайской медицины, или соответствующие экстракты пяти лекарственных материалов традиционной китайской медицины, или экстракт Trichosanthis Fructus и экстракты четырех лекарственных материалов традиционной китайской медицины, состоящие из Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma, красного дрожжевого риса, Cinnamomi Cortex, смешивают с экстрактом Coptidis Rhizoma и с 0-90% тонкодисперсного порошка красного дрожжевого риса, применяемого в качестве разрыхлителя или наполнителя для таблеток, с получением композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины.

Другой целью настоящего изобретения является обеспечение композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины, предусматривающую дозу введения.

Суточная доза введения композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению, является следующей: 1,5-9 г Coptidis Rhizoma, 1,5-9 г Aurantii Fructus Immaturus, 0-12 г Pinelliae Rhizoma, 0-12 г Trichosanthis Fructus, 0-5 г Cinnamomi Cortex и 1,5-30 г красного дрожжевого риса. Предпочтительно доза предусматривает 3-6 г Coptidis Rhizoma, 3-6 г Aurantii Fructus Immaturus, 3-6 г Pinelliae Rhizoma, 0-6 г Trichosanthis Fructus, 0,5-2,5 г Cinnamomi Cortex и 1,5-6 г красного дрожжевого риса. Наиболее предпочтительно доза предусматривает 4,5 г Coptidis Rhizoma, 4,5 г Aurantii Fructus Immaturus, 4,5 г Pinelliae Rhizoma, 6 г Trichosanthis Fructus, 0,5 г Cinnamomi Cortex и 3 г красного дрожжевого риса.

Другой целью настоящего изобретения является обеспечение композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины, предусматривающую дозу введения.

Доза введения композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению составляет 1-15 г в сутки; предпочтительная доза введения составляет 2-10 г в сутки, и более предпочтительно доза введения составляет 3-6 г в сутки.

Композиция на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины содержит следующие активные ингредиенты (мг/г): 6-122 мг/г суммы алкалоидов, в том числе 4-89 мг/г берберина; 30-315 мг/г суммы флавоноидов, в том числе 20-186 мг/г неогесперидина, и 0,5-9 мг/г ловастатина.

В некоторых примерах композиция на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины содержит следующие активные ингредиенты (мг/г): 12-122 мг/г суммы алкалоидов, в том числе 9-89 мг/г берберина; 130-315 мг/г суммы флавоноидов, в том числе 80-186 мг/г неогесперидина, и 1-9 мг/г ловастатина.

В некоторых примерах композиция на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины предпочтительно содержит следующие активные ингредиенты (мг/г): 20-85 мг/г суммы алкалоидов, в том числе 15-62 мг/г берберина; 100-250 мг/г суммы флавоноидов, в том числе 30-170 мг/г неогесперидина, и 1-5 мг/г ловастатина. В некоторых примерах композиция на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины более предпочтительно содержит следующие активные ингредиенты (мг/г): 30-75 мг/г суммы алкалоидов, в том числе 20-50 мг/г берберина; 110-250 мг/г суммы флавоноидов, в том числе 40-120 мг/г неогесперидина, и 1-5 мг/г ловастатина.

В некоторых примерах композиция на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины предпочтительно содержит следующие активные ингредиенты (мг/г): 20-85 мг/г суммы алкалоидов, в том числе 15-62 мг/г берберина; 140-250 мг/г суммы флавоноидов, в том числе 90-170 мг/г неогесперидина, и 1-5 мг/г ловастатина. В некоторых примерах композиция на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины более предпочтительно содержит следующие активные ингредиенты (мг/г): 30-75 мг/г суммы алкалоидов, в том числе 20-50 мг/г берберина; 110-250 мг/г суммы флавоноидов, в том числе 60-120 мг/г неогесперидина, и 1-5 мг/г ловастатина.

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Обзор современных исследований

Coptidis Rhizoma. Основными компонентами Coptidis Rhizoma являются гидрохлорид берберина, гидрохлорид коптизина и гидрохлорид пальматина и т.п. Coptidis Rhizoma способствует снижению уровня глюкозы в крови и снижению уровня липидов в сыворотке, обладает антиоксидантным, антибактериальным и противовирусным действием.

Aurantii Fructus Immaturus. Основными компонентами Aurantii Fructus Immaturus являются флавоноиды и алкалоиды. Основными активными ингредиентами Aurantii Fructus Immaturus являются нарингин, гесперидин, неогесперидин и синефрин. Aurantii Fructus Immaturus способствует улучшению функции желудочно-кишечного тракта, оказывает антитромботическое действие и усиливает сокращение миокарда.

Trichosanthis Fructus. Основными активными ингредиентами Trichosanthis Fructus являются флавоноиды и сапонины. Trichosanthis Fructus оказывает отхаркивающее и антибактериальное действие, предупреждает развитие ишемической болезни сердца, имеет омолаживающий эффект.

Pinelliae Rhizoma. Основными активными ингредиентами Pinelliae Rhizoma являются 6-гингерол и алкалоиды и т.п. Pinelliae Rhizoma способствует снижению артериального давления и имеет противокашлевое действие.

Cinnamomi Cortex. Основными компонентами Cinnamomi Cortex являются коричная кислота и коричный альдегид. Cinnamomi Cortex имеет успокаивающий эффект, снижает кровяное давление.

Красный дрожжевой рис: Основным активным ингредиентом красного дрожжевого риса является ловастатин. Красный дрожжевой рис снижает уровень липидов в крови, оказывает неспецифическое усиливающее действие на иммунитет, может увеличивать фагоцитарную активность фагоцитов, усиливать выработку антител и улучшать функцию Т-клеток.

Объяснение традиционной рецептуры

Метаболический синдром вызван употреблением жирной и калорийной пищи, мокротой, превращающейся в жар, которые борются друг с другом и конденсируются в средней части тела. Содержащийся в составе Coptidis Rhizoma имеет горький вкус и охлаждающий эффект, имеет тропность к меридианам сердца, желудка и толстой кишки. Он имеет функцию устранения жара и удаления огня, избавления от застоя и устранения вздутия живота, устранения синдрома лихорадки желудка и утоления жажды. В книге «Yao Lei Fa Xiang» Coptidis Rhizoma описывается как «средство для удаления огня сердца, удаления влаги и жара в селезенке и желудке, лечения раздражительности и тошноты, избавления от застоя тепла в средней части тела, и рвоты. Он является важным лекарством для лечения уплотненности в подложечной области». Уплотненность в подложечной области означает симптом «вздутия в подложечной области, чувство боли при надавливании», описанные в древнем рецепте «Xiaoxianxiong Decoction» врача Zhong Jing, при этом они по своим проявлениям схожи с симптомом вздутия живота при метаболическом синдроме. Таким образом, данный компонент используется в качестве «главного» лекарственного препарата.

Pinelliae Rhizoma Praeparatumcum Zingibere Et Alumine имеет теплый характер и согревающий эффект и тропность к меридианам селезенки, желудка и легких. Он устраняет мокроту, рассеивает мокроту в брюшной полости и устраняет застой в желудке, регулирует Ци и устраняет рвоту. Pinelliae Rhizoma описывается в книге «Ming Yi Bie Lu» как «средство от мокроты и жара в груди и подреберье, кашля, уплотненности и твердости в подложечной части с ощущением боли, а также рвоты». При применении Pinelliae Rhizoma совместно с Coptidis Rhizoma один является острым, а другой горьким, лекарство с острым вкусом обладает разгоняющим действием и горькое лекарство оказывает слабительное действие, они оба входят в среднюю часть тела, удаляют жар и устраняют мокроту, рассеивают уплотнения и устраняют тургор. Trichosanthis Fructus имеет горький вкус и охлаждающий эффект, тропность к меридианам легких и желудка. Он имеет функции удаления жара и рассеивания мокроты, устранения ревматической боли и устранения тургора, улучшения циркуляции Ци и увлажнения кишечника. Пациенты с метаболическим синдромом имеют твердый и вздутый живот, и Trichosanthis Fructus может удалить вздутие. Pinelliae Rhizoma хорошо совместим с Trichosanthis Fructus, оба средства могут устранять сухость, устранять жар и удалять мокроту. Trichosanthis Fructus также имеет хорошую совместимость с Coptidis Rhizoma, оба средства хорошо влияют на среднюю часть тела, горечь устраняет сухость, способствует лечебному эффекту и удаляет застойную мокроту в средней части тела. Комбинация данных трех лекарственных препаратов известна из рецепта «Xiaoxianxiong Decoction». Обжаренный в отрубях Aurantii Fructus Immaturus имеет горький вкус и охлаждающий эффект, тропность к меридианам легких и желудка. Он способствует улучшению циркуляции Ци в животе и устраняет мокроту в организме. Aurantii Fructus Immaturus описывается в книге «Ming Yi Bie Lu» как «средство для устранения мокроты в груди и подреберье, удаления застоя жидкости, рассеивания застоя Ци и удаления вздутия, уменьшения вздутия и боли в подложечной области, опускания восходящего Ци». В книге «Yao Pin Hua Yi» указано, что Aurantii Fructus Immaturus способствует пищеварению и устраняет ощущение наполненности желудка, устраняет запор, способствует кроветворению, устранению вздутия и скоплению мокроты, удалению задержки жидкости, устранению непереваренной пищи и облегчению запора. Пациенты с метаболическим синдромом имеют твердый и вздутый живот, применение Aurantii Fructus Immaturus представляется целесообразным. Таким образом, все из Pinelliae Rhizoma Praeparatumcum Zingibere Et Alumine, Trichosanthis Fructus, Aurantii Fructus Immaturus являются лекарствами, «усиливающими действие главного лекарства». Горечь Coptidis Rhizoma имеет очищающий организм эффект, острота Pinelliae Rhizoma имеет рассеивающий эффект, горечь Trichosanthis Fructus увлажняет толстый кишечник, а горечь Aurantii Fructus Immaturus содействует циркуляции Ци. Китайский целитель Чжан Юаньсу говорил: «Для лечения вздутия в подложечной области и расстройства желудка следует использовать сочетание Aurantii Fructus Immaturus и Coptidis Rhizoma».

Красный дрожжевой рис не является токсичным и имеет сладкий и теплый характер. Он имеет тропность к меридианам печени, селезенки, желудка и кишечника. Он способствует пищеварению и нормализует функцию желудка и хорошо способствует удалению жира, активизирует кровообращение и рассеивает застой крови. В книге «Ben Cao Yan Yi Bu Yi» сказано, что красный дрожжевой рис «стимулирует кровообращение и способствует пищеварению, укрепляет селезенку и согревает желудок». В книге «Ben Cao Qiu Yuan» указано, что красный дрожжевой рис «получают из короткозернистого риса с добавлением винной закваски для придания красного цвета. Он имеет эффект стимулирования кровообращения посредством улучшения циркуляции Ци, а также улучшает функцию желудка и способствуют пищеварению. С его помощью можно лечить любого, кто страдает от избыточной эмоциональности из-за Ци, вызывающей сгущение крови». Таким образом, красный дрожжевой рис используют в качестве «вспомогательного» лекарственного средства.

Острый вкус и согревающий эффект Cinnamomi Cortex способствуют устранению застоя Ци в средней части тела. Cinnamomi Cortex описывается в книге «Yu Qiu Yao Jie» следующим образом: «Cinnamomi Cortex согревает желудок, усиливает циркуляцию Ци, тонизирует и согревает Ци в крови. Он имеет душистый аромат и сладкий вкус, это способствует его воздействию на меридиан селезенки; острота, имеющая рассеивающее действие, и сладкий вкус способствуют устранению депрессии и застоя Ци в печени и селезенке». При использовании Cinnamomi Cortex вместе с Coptidis Rhizoma лекарство с острым вкусом обладает разгоняющим действием, а горькое лекарство оказывает слабительное действие, они удаляют жар и защищают селезенку, их сочетание предотвращает чрезмерный охлаждающий эффект Coptidis Rhizoma, подавляющий функцию селезенки и желудка, а также помогает рассеивать застой и способствует выработке жидкости в организме. Таким образом, Cinnamomi Cortex используется в качестве «лекарства-проводника».

Все данные средства являются совместимыми, при совместном использовании в целом составе они оказывают эффект удаления жара, рассеивания мокроты и стимулируют циркуляцию Ци для способствования устранению вздутия в животе. Их применяют для лечения симптомов, вызванных застоем мокроты и жара, таких как ожирение, увеличенный живот, стеснение в груди, обильная мокрота, отсутствие аппетита и чувство наполненности в желудке и животе, сухость во рту, жажда, полидипсия и непроходящее чувство легкого голода, раздражительность, приливы жара к лицу и жирная кожи лица, ночной храп, жидкий стул или запоры, ярко-желтая моча, красный язык с желтым налетом и нестабильный пульс. В западной медицине с их помощью также можно лечить пациентов с гиперлипидемией, сахарным диабетом, артериальной гипертензией, ожирением и метаболическим синдромом (абдоминальным ожирением с отклонениями уровней сахара в крови, гликозилированного гемоглобина, кровяного давления, уровня липидов в крови и мочевой кислоты). Тестирование эффективности проводили с применением в качестве экспериментальных животных моделей мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа, у которых имелись симптомы инсулинорезистентности и ожирения, и мышей C57BL/6J, получавших рацион с высоким содержанием жира. Соответственно вводили 500, 1000 и 1500 мг композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению (что соответствует приему 3000, 6000 и 9000 мг композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению взрослым человеком) с целью исследовать влияние композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению на показатели, связанные с метаболическим синдромом, такие как инсулинорезистентность, метаболизм углеводов и липидов, кровяное давление. Результаты продемонстрировали, что композиция на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению имеет следующие эффекты: (1) снижение уровня глюкозы в крови; (2) снижение уровня инсулина в крови; (3) улучшение толерантности к глюкозе по результату перорального теста; (4) снижение уровня гликированного гемоглобина (HbA1c); (5) повышение индекса чувствительности к инсулину и улучшение состояния при инсулинорезистентности и (6) снижение уровня триглицеридов в крови, формирование тенденции снижения уровня общего холестерина и снижения кровяного давления. Таким образом, авторы настоящего изобретения определили, что предпочтительная суточная доза введения композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению составляет 2-10 г.

Тестирование стабильности лекарственного средства показало, таблетки с композицией на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению легко поглощают влагу и более чувствительны к высокой влажности, чем к высокой температуре и свету; воздействие высокой температуры приводит к значительному снижению содержания коричного альдегида; а воздействие света приводит к значительному снижению содержания ловастатина. В условиях применения конечной упаковки для таблеток используется внутренняя упаковка в виде алюминиево-пластиковых блистеров, которые упаковываются в упаковку из алюминиевой фольги. Проводили ускоренный тест при температуре 40°C±2°C и относительной влажности 75±5% в течение 6 месяцев. Степень изменения веса вследствие поглощения влаги таблетками с композицией на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению находилась в диапазоне 0,5%, что демонстрирует хороший эффект гидроизоляции и защиты от влаги данной упаковки. Количества гидрохлорида берберина, суммы алкалоидов из Coptidis Rhizoma, суммы флавоноидов и нарингина из Aurantii Fructus Immaturus в таблетке с композицией на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению изменяются очень незначительно; немного изменяется количество ловастатина, при этом степень изменения содержания находится в пределах 12,23%, и изменение главным образом происходит вследствие взаимопревращения изомеров и не оказывает влияния на эффективность.

Посредством исследований стабильности таблеток с композицией на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению подтвердили, что в качестве внутренней упаковки следует использовать алюминиево-пластиковую блистерную упаковку; условия хранения должны предусматривать герметичное хранение в сухом месте. При вышеуказанных условия хранения конечный продукт является стабильным, защита от влаги является эффективной, и срок годности временно установлен как два года.

Одной из целей настоящего изобретения является обеспечение композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины, которая имеет точный перечень активных ингредиентов, механизм действия, отличается четко определенной фармакологической активностью и клинической эффективностью, контролируемым качеством и безопасностью введения.

Техническое решение, используемое в настоящем изобретении, является следующим: композиция на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины, содержащая Coptidis Rhizoma, Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma, Trichosanthis Fructus, Cinnamomi Cortex и красный дрожжевой рис.

В композиции Aurantii Fructus Immaturus предпочтительно представляет собой обжаренный в отрубях Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma предпочтительно представляет собой Pinelliae Rhizoma Praeparatumcum Zingibere Et Alumine, и Trichosanthis Fructus предпочтительно представляет собой Trichosanthis Fructus в цельном виде.

Предпочтительно композиция содержит 5-80 вес. % Coptidis Rhizoma, 5-70 вес. % Aurantii Fructus Immaturus, 0-60 вес. % Pinelliae Rhizoma, 0-40 вес. % Trichosanthis Fructus, 2-12 вес. % Cinnamomi Cortex и 10-60 вес. % красного дрожжевого риса. Более предпочтительно композиция содержит 10-30 вес. % Coptidis Rhizoma, 10-30 вес. % Aurantii Fructus Immaturus, 10-30 вес. % Pinelliae Rhizoma, 5-30 вес. % Trichosanthis Fructus, 2-10 вес. % Cinnamomi Cortex и 12-36 вес. % красного дрожжевого риса. Наиболее предпочтительно предпочтительные доли компонентов в композиции являются следующими: 19,6 вес. % Coptidis Rhizoma, 19,6 вес. % Aurantii Fructus Immaturus, 19,6 вес. % Pinelliae Rhizoma, 26,1 вес. % Trichosanthis Fructus, 2,1 вес. % Cinnamomi Cortex и 13,0 вес. % красного дрожжевого риса.

Другое техническое решение, обеспечиваемое с помощью настоящего изобретения, является следующим: композиция, содержащая Coptidis Rhizoma, Aurantii Fructus Immaturus, красный дрожжевой рис и один или более компонентов, выбранных из группы, состоящей из Pinelliae Rhizoma, Trichosanthis Fructus и Cinnamomi Cortex.

Композиция содержит 5-80 вес. % Coptidis Rhizoma; 5-70 вес. % Aurantii Fructus Immaturus; 0-60 вес. % Pinelliae Rhizoma; 0-40 вес. % Trichosanthis Fructus; 0-12 вес. % Cinnamomi Cortex и 10-60 вес. % красного дрожжевого риса.

Доза введения композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины составляет 10-50 г в сутки; предпочтительно доза введения составляет 14-38 г в сутки; наиболее предпочтительно доза введения составляет 18-25 г в сутки.

В другом аспекте композиция на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению получена посредством смешивания экстрактов шести лекарственных материалов традиционной китайской медицины: Coptidis Rhizoma, Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma, Trichosanthis Fructus, Cinnamomi Cortex и красного дрожжевого риса. Относительное содержание экстрактов является следующим: экстракт Coptidis Rhizoma составляет 2-30%, и смешанный экстракт пяти лекарственных материалов традиционной китайской медицины, состоящий из Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma, красного дрожжевого риса (в том числе 10-100% которого экстрагируется, 0-90% измельчается в тонкодисперсный порошок для применения в качестве разрыхлителя или наполнителя, далее по аналогии), Trichosanthis Fructus и Cinnamomi Cortex, составляет 70-98%. Предпочтительно экстракт Coptidis Rhizoma составляет 3-25%, и смешанный экстракт пяти лекарственных материалов традиционной китайской медицины, состоящий из Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma, красного дрожжевого риса, Trichosanthis Fructus и Cinnamomi Cortex, составляет 75-97%. Более предпочтительно экстракт Coptidis Rhizoma составляет 5-15%, и смешанный экстракт пяти лекарственных материалов традиционной китайской медицины, состоящий из Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma, красного дрожжевого риса, Trichosanthis Fructus и Cinnamomi Cortex, составляет 85-95%.

Композиция на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины содержит следующие активные ингредиенты (мг/г): 6-122 мг/г суммы алкалоидов, в том числе 4-89 мг/г берберина; 30-315 мг/г суммы флавоноидов, в том числе 20-186 мг/г неогесперидина, и 0,5-9 мг/г ловастатина. Предпочтительно композиция на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины содержит следующие активные ингредиенты (мг/г): 20-85 мг/г суммы алкалоидов, в том числе 15-62 мг/г берберина; 100-250 мг/г суммы флавоноидов, в том числе 30-170 мг/г неогесперидина, и 1-5 мг/г ловастатина. Более предпочтительно композиция на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины содержит следующие активные ингредиенты (мг/г): 30-75 мг/г суммы алкалоидов, в том числе 20-50 мг/г берберина; 110-250 мг/г суммы флавоноидов, в том числе 40-120 мг/г неогесперидина, и 1-5 мг/г ловастатина.

Композиция на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины содержит следующие активные ингредиенты (мг/г): 12-122 мг/г суммы алкалоидов, в том числе 9-89 мг/г берберина; 130-315 мг/г суммы флавоноидов, в том числе 80-186 мг/г неогесперидина, и 1-9 мг/г ловастатина. Предпочтительно композиция на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины содержит следующие активные ингредиенты (мг/г): 20-85 мг/г суммы алкалоидов, в том числе 15-62 мг/г берберина; 140-250 мг/г суммы флавоноидов, в том числе 90-170 мг/г неогесперидина, и 1-5 мг/г ловастатина. Более предпочтительно композиция на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины содержит следующие активные ингредиенты (мг/г): 30-75 мг/г суммы алкалоидов, в том числе 20-50 мг/г берберина; 110-250 мг/г суммы флавоноидов, в том числе 60-120 мг/г неогесперидина, и 1-5 мг/г ловастатина.

Доза введения композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины составляет 1-15 г в сутки; предпочтительно доза введения составляет 2-10 г в сутки; наиболее предпочтительно доза введения составляет 3-6 г в сутки.

Композицию на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины и композицию на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины можно получить в виде фармацевтических препаратов, таких как инъекционные растворы, таблетки, капсулы, гранулы и растворы для перорального введения.

Композиция на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины и композиция на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины оказывают эффект удаления жара и рассеивания мокроты, стимулируют циркуляцию Ци и способствуют устранению вздутия. Композиции применяются для лечения симптомов, вызванных застоем мокроты и жара, таких как ожирение, увеличенный живот, стеснение в груди, обильная мокрота, отсутствие аппетита и чувство наполненности в желудке и животе, сухость во рту, жажда, полидипсия и непроходящее чувство легкого голода, раздражительность, приливы жара к лицу и жирная кожа лица, ночной храп, жидкий стул или запоры, ярко-желтая моча, красный язык с желтым налетом и нестабильный пульс. В западной медицине с помощью композиции также можно лечить симптомы, включающие гиперлипидемию, сахарный диабет, артериальную гипертензию, ожирение, и метаболический синдром (абдоминальное ожирение с отклонениями уровней сахара в крови, гликозилированного гемоглобина, кровяного давления, уровня липидов в крови и мочевой кислоты).

Композицию на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины и/или композицию на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины можно применять для получения лекарственных препаратов для лечения одного или более из следующих симптомов: метаболического синдрома, ожирения, гипергликемии, повышенного кровяного давления или гиперлипидемии.

В некоторых примерах лекарственные препараты применяют для лечения одного или более из следующих заболеваний: нарушения уровня глюкозы в крови и нарушения метаболизма липидов, ожирения, гипергликемии, артериальной гипертензии и гиперлипидемии на ранней стадии метаболического синдрома. В некоторых примерах лекарственные препараты применяют для обеспечения одного или более из следующих эффектов: снижения уровня глюкозы в крови, снижения уровня инсулина в крови, улучшения толерантности к глюкозе по результату перорального теста, снижения уровня гликированного гемоглобина (HbA1c), повышения индекса чувствительности к инсулину, улучшения состояния при инсулинорезистентности, снижения уровня триглицеридов в крови, снижения уровня общего холестерина и снижения кровяного давления.

Несколько видов эффектов включают 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 эффектов.

Композиция на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению имеет нижеуказанные полезные технические эффекты.

(1) Значительное улучшение при лечении метаболического синдрома.

Результаты проведенного сравнительного теста фармакодинамики экстрактов, полученных согласно примерам 1-7, указывают, что экстракты по настоящему изобретению имеют статистически отличные эффекты в отношении снижения уровня сахара в крови, уровня триглицеридов и общего холестерина в сыворотке крови. Системные исследования фармакодинамики подтвердили, что композиция на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению имеет следующие эффекты: снижение веса тела, снижение уровня сахара в крови, снижение уровня инсулина в крови, улучшение толерантности к глюкозе по результату перорального теста, снижение уровня гликированного гемоглобина (HbA1c), повышение индекса чувствительности к инсулину, улучшение состояния при инсулинорезистентности, снижение уровня триглицеридов в крови, снижение уровня общего холестерина, снижение кровяного давления.

(2) Стабильные свойства и контролируемое качество композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению.

Посредством исследований стабильности таблеток с композицией на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению подтвердили, что в качестве внутренней упаковки следует использовать алюминиево-пластиковую блистерную упаковку; условия хранения должны предусматривать герметичное хранение в сухом месте. При вышеуказанных условия хранения конечный продукт является стабильным, защита от влаги является эффективной, и срок годности временно установлен как два года.

(3) Безопасное применение композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению.

При тестировании на острую токсичность на мышах, которым перорально вводили композицию на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению, было показано, что значение LD₅₀ составляет более 20000 мг/кг, что в 200 раз превышает предполагаемую клиническую дозу. При тестировании на острую токсичность на собаках породы бигль было показано, что смертельная доза составляет более 7500 мг/кг, что в 75 раз превышает предполагаемую клиническую дозу.

При тестировании на токсичность при длительном применении на крысах дозы композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению в 8, 28 и 98 раз превышали предполагаемую клиническую дозу, и результаты продемонстрировали, что предполагаемая клиническая доза композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению является безопасной.

Пригодность композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению для промышленного производства. Результаты опытного производства 9 партий показали осуществимость технологии производства.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ВАРИАНТОВ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ

Следующие варианты осуществления применяются для иллюстрации изобретения, но не для ограничения объема настоящего изобретения. Если конкретная методика или условия не описаны в вариантах осуществления, их осуществляют в соответствии с методикой или условиями, описанными в соответствующей литературе в данной области, или в соответствии с инструкцией по применению продукта. Все реагенты и приборы, для которых не указан производитель, являются обычными продуктами, которые можно приобрести через официальные каналы.

Пример 1

Состав 1: 1,5 г (7,9 вес. %) Coptidis Rhizoma, 6 г (31,6 вес. %) Aurantii Fructus Immaturus, 3 г (15,8 вес. %) Pinelliae Rhizoma, 0 г (0 вес. %) Trichosanthis Fructus, 2,5 г (13,1 вес. %) Cinnamomi Cortex и 6 г (31,6 вес. %) красного дрожжевого риса, при этом общая суточная доза введения составляет 19 г. Количество полученных экстрактов составляет 5,58 г, при этом выход составляет 29,4%.

Способ получения: Coptidis Rhizoma измельчали до крупнодисперсного порошка или нарезали лекарственные сырье в виде кусков на части подходящего размера и помещали в экстрактор; добавляли 0,5% серной кислоты в 10-кратном количестве, выполняли три цикла экстрагирования выпариванием, длительность каждого цикла составляет 2 часа; после чего осуществляли фильтрацию, растворы экстрактов объединяли, для концентрирования понижали давление; концентрированный раствор помещали в осадительную емкость и перемешивали, медленно добавляли известковое молоко с регулированием значения pH до 9, отстаивали, фильтровали для удаления осадка сульфата кальция; значение pH фильтрата регулировали с помощью концентрированной хлористоводородной кислоты до значения 1-2, добавляли хлорид натрия до 10% объема, высаливали, раствор отстаивали в течение 24 часов, фильтровали с отсасыванием; осадок промывали водой до достижения значения рН 5 и высушивали при пониженном давлении при 60°C с получением экстракта суммы алкалоидов.

Следующие лекарственные материалы: обжаренный в отрубях Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma Praeparatumcum Zingibere Et Alumine, красный дрожжевой рис и Cinnamomi Cortex, измельчали до крупнодисперсного порошка или нарезали лекарственные сырье в виде кусков на части подходящего размера, лекарственные материалы получали согласно необходимому по рецепту количеству, смешивали и помещали в экстрактор с обратным потоком, в котором используется этанол, и выполняли два цикла экстрагирования с помощью 70% этанола в 10-кратном количестве и с помощью 70% этанола в 8-кратном количестве соответственно, продолжительность каждого цикла составляет 1 час; фильтровали, удаляли этанол при пониженном давлении, концентрировали и высушивали с получением смешанного экстракта четырех лекарственных материалов традиционной китайской медицины.

Смешанный экстракт четырех лекарственных материалов традиционной китайской медицины, состоящий из Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma, Cinnamomi Cortex и красный дрожжевой рис, смешивают с экстрактом Coptidis Rhizoma до однородного состояния с получением конечной композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению.

Результат определения содержания (мг/г): содержание суммы алкалоидов составляет 12,53 мг/г (в том числе 9,27 мг/г берберина), содержание суммы флавоноидов составляет 292,48 мг/г (в том числе 171,11 мг/г неогесперидина), и содержание ловастатина составляет 4,31 мг/г.

Пример 2

Состав 2: 4,5 г (45 вес. %) Coptidis Rhizoma, 3 г (30 вес. %) Aurantii Fructus Immaturus, 0 г (0 вес. %) Pinelliae Rhizoma, 0,5 г (5 вес. %) Trichosanthis Fructus, 0,5 г (5 вес. %) Cinnamomi Cortex и 1,5 г (15 вес. %) красного дрожжевого риса; при этом общая суточная доза введения составляет 10 г. Количество полученных экстрактов составляет 2,74 г, при этом выход составляет 27,4%.

Способ получения: экстракт суммы алкалоидов из Coptidis Rhizoma получали с помощью способа из примера 1.

Следующие лекарственные материалы: обжаренный в отрубях Aurantii Fructus Immaturus, красный дрожжевой рис, Trichosanthis Fructus и Cinnamomi Cortex, получали согласно необходимому по рецепту количеству, смешивали и помещали в экстрактор с обратным потоком, в котором используется этанол, и выполняли два цикла экстрагирования с помощью 70% этанола в 10-кратном количестве и с помощью 70% этанола в 8-кратном количестве соответственно, продолжительность каждого цикла составляет 1 час; фильтровали, удаляли этанол при пониженном давлении, концентрировали и высушивали с получением смешанного экстракта четырех лекарственных материалов традиционной китайской медицины.

Смешанный экстракт четырех лекарственных материалов традиционной китайской медицины, состоящий из Aurantii Fructus Immaturus, Trichosanthis Fructus, Cinnamomi Cortex и красный дрожжевой рис, смешивают с экстрактом Coptidis Rhizoma до однородного состояния с получением композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению.

Результат определения содержания (мг/г): содержание суммы алкалоидов составляет 85,34 мг/г (в том числе 62,24 мг/г берберина), содержание суммы флавоноидов составляет 290,35 мг/г (в том числе 170,37 мг/г неогесперидина), и содержание ловастатина составляет 2,03 мг/г.

Пример 3

Состав 3: 4,5 г (21,4 вес. %) Coptidis Rhizoma, 4,5 г (21,4 вес. %) Aurantii Fructus Immaturus, 0 г (0 вес. %) Pinelliae Rhizoma, 0 г (0 вес. %) Trichosanthis Fructus, 0 г (0 вес. %) Cinnamomi Cortex и 12 г (57,2 вес. %) красного дрожжевого риса, при этом общая суточная доза введения составляет 21 г. Количество полученных экстрактов составляет 5,21 г, при этом выход составляет 24,8%.

Способ получения: экстракт суммы алкалоидов из Coptidis Rhizoma получали с помощью способа из примера 1.

Смешанный экстракт двух лекарственных материалов традиционной китайской медицины, состоящий из обжаренного в отрубях Aurantii Fructus Immaturus и красного дрожжевого риса, получали с помощью способа из примера 1.

Смешанный экстракт двух лекарственных материалов традиционной китайской медицины, состоящий из Aurantii Fructus Immaturus и красного дрожжевого риса, смешивали с экстрактом Coptidis Rhizoma до однородного состояния с получением композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению.

Результат определения содержания (мг/г): содержание суммы алкалоидов составляет 43,51 мг/г (в том числе 31,83 мг/г берберина), содержание суммы флавоноидов составляет 234,38 мг/г (в том числе 136,56 мг/г неогесперидина), и содержание ловастатина составляет 9,31 мг/г.

Пример 4

Состав 4: 4,5 г (32,1 вес. %) Coptidis Rhizoma, 4,5 г (32,1 вес. %) Aurantii Fructus Immaturus, 0 г (0 вес. %) Pinelliae Rhizoma, 0 г (0 вес. %) Trichosanthis Fructus, 0,5 г (3,6 вес. %) Cinnamomi Cortex и 4,5 г (32,1 вес.%) красного дрожжевого риса, при этом общая суточная доза введения составляет 14 г. Количество полученных экстрактов составляет 3,74 г, при этом выход составляет 26,7%.

Способ получения: экстракт суммы алкалоидов из Coptidis Rhizoma получали с помощью способа из примера 1.

Смешанный экстракт трех лекарственных материалов традиционной китайской медицины, состоящий из обжаренного в отрубях Aurantii Fructus Immaturus, красного дрожжевого риса и Cinnamomi Cortex, получали с помощью способа из примера 1.

Смешанный экстракт трех лекарственных материалов традиционной китайской медицины, состоящий из обжаренного в отрубях Aurantii Fructus Immaturus, красного дрожжевого риса и Cinnamomi Cortex, смешивали с экстрактом Coptidis Rhizoma до однородного состояния с получением композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению.

Результат определения содержания (мг/г): содержание суммы алкалоидов составляет 63,42 мг/г (в том числе 46,25 мг/г берберина), содержание суммы флавоноидов составляет 315,19 мг/г (в том числе 185,75 мг/г неогесперидина), и содержание ловастатина составляет 4,63 мг/г.

Пример 5

Состав 5: 6 г (33,8 вес. %) Coptidis Rhizoma, 1,5 г (8,5 вес. %) Aurantii Fructus Immaturus, 6 г (33,8 вес. %) Pinelliae Rhizoma, 0 г (0 вес. %) Trichosanthis Fructus, 1,25 г (7 вес. %) Cinnamomi Cortex и 3 г (16,9 вес. %) красного дрожжевого риса, при этом общая суточная доза введения составляет 17,75 г. Количество полученных экстрактов составляет 2,64 г, при этом выход составляет 14,9%.

Способ получения: экстракт суммы алкалоидов из Coptidis Rhizoma получали с помощью способа из примера 1.

Смешанный экстракт четырех лекарственных материалов традиционной китайской медицины, состоящий из обжаренного в отрубях Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma, красного дрожжевого риса и Cinnamomi Cortex, получали с помощью способа из примера 1.

Смешанный экстракт четырех лекарственных материалов традиционной китайской медицины, состоящий из обжаренного в отрубях Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma, красного дрожжевого риса и Cinnamomi Cortex, смешивали с экстрактом Coptidis Rhizoma до однородного состояния с получением композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению.

Результат определения содержания (мг/г): содержание суммы алкалоидов составляет 122,06 мг/г (в том числе 89,03 мг/г берберина), содержание суммы флавоноидов составляет 161,34 мг/г (в том числе 92,86 мг/г неогесперидина), и содержание ловастатина составляет 4,87 мг/г.

Пример 6

Состав 6: 4,5 г (19,57 вес. %) Coptidis Rhizoma, 4,5 г (19,56 вес. %) Aurantii Fructus Immaturus, 4,5 г (19,57 вес. %) Pinelliae Rhizoma, 6 г (26,09 вес. %) Trichosanthis Fructus, 0,5 г (2,17 вес. %) Cinnamomi Cortex и 3 г (13,04 вес. %) красного дрожжевого риса, при этом общая суточная доза введения составляет 23 г. Количество полученных экстрактов составляет 4,4 г, при этом выход составляет 19,1%.

Способ получения: экстракт суммы алкалоидов из Coptidis Rhizoma получали с помощью способа из примера 1.

90% от общего количества в составе красного дрожжевого риса, обжаренный в отрубях Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma и Cinnamomi Cortex измельчали до крупнодисперсного порошка или нарезали лекарственные сырье в виде кусков на части подходящего размера, получали согласно необходимому по рецепту количеству, смешивали и помещали в экстрактор с обратным потоком, в котором используется этанол, и выполняли два цикла экстрагирования с помощью 70% этанола в 10-кратном количество и с помощью 70% этанола в 8-кратном разведении, продолжительность каждого цикла составляет 1 час, раствор отстаивали и затем фильтровали; в отношении лекарственного материала Trichosanthis Fructus или его спрессованных кусков проводят два цикла экстрагирования с помощью 85% этанола в 7-кратном количестве и с помощью 85% этанола в 5-кратном количестве, продолжительность каждого цикла составляет 1 час, раствор отстаивали и затем фильтровали, раствор объединяли с раствором этанольных экстрактов четырех лекарственных материалов традиционной китайской медицины, удаляли этанол, концентрировали при пониженном давлении, высушивали, измельчали с получением смешанного экстракта пяти лекарственных материалов традиционной китайской медицины.

Экстракт Coptidis Rhizoma, смешанный экстракт пяти лекарственных материалов традиционной китайской медицины и 10% от необходимого по рецепту количества тонкодисперсного порошка красного дрожжевого риса, применяемого в качестве разрыхлителя или наполнителя для таблеток, смешивают до однородного состояния с получением композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению.

Результат определения содержания (мг/г): содержание суммы алкалоидов составляет 47,05 мг/г (в том числе 31,58 мг/г берберина), содержание суммы флавоноидов составляет 203,6 мг/г (в том числе 108,3 мг/г неогесперидина), и содержание ловастатина составляет 2,59 мг/г.

Пример 7

Состав 7: 4,5 г (19,57 вес. %) Coptidis Rhizoma, 4,5 г (19,56 вес. %) Aurantii Fructus Immaturus, 4,5 г (19,57 вес. %) Pinelliae Rhizoma, 6 г (26,09 вес. %) Trichosanthis Fructus, 0,5 г (2,17 вес. %) Cinnamomi Cortex и 3 г (13,04 вес. %) красного дрожжевого риса, при этом общая суточная доза введения составляет 23 г. Количество полученных экстрактов составляет 5,62 г, при этом выход составляет 24,4%.

Способ получения: экстракт суммы алкалоидов из Coptidis Rhizoma получали с помощью способа из примера 1.

Обжаренный в отрубях Aurantii Fructus Immaturus измельчали до крупнодисперсного порошка или нарезали лекарственные сырье в виде кусков на части подходящего размера, получали согласно необходимому по рецепту количеству и помещали в экстрактор с обратным потоком, в котором используется этанол, и выполняли два цикла экстрагирования с помощью 70% этанола в 8-кратном количестве, продолжительность каждого цикла составляет 1 час; фильтровали, удаляли этанол при пониженном давлении, и концентрировали, и высушивали с получением экстракта обжаренного в отрубях Aurantii Fructus Immaturus.

Pinelliae Rhizoma Praeparatumcum Zingibere Et Alumine измельчали до крупнодисперсного порошка или нарезали лекарственные сырье в виде кусков на части подходящего размера, получали согласно необходимому по рецепту количеству и помещали в экстрактор с обратным потоком, в котором используется этанол, и выполняли два цикла экстрагирования с помощью 70% этанола в 8-кратном количестве, продолжительность каждого цикла составляет 1 час; фильтровали, удаляли этанол при пониженном давлении, и концентрировали, и высушивали с получением экстракта Pinelliae Rhizoma Praeparatumcum Zingibere Et Alumine.

Лекарственные сырье в виде кусков Trichosanthis Fructus в цельном виде получали согласно необходимому по рецепту количеству и помещали в экстрактор с обратным потоком, в котором используется этанол, и выполняли два цикла экстрагирования с помощью 70% этанола в 8-кратном количестве, продолжительность каждого цикла составляет 1 час; фильтровали, удаляли этанол при пониженном давлении, и концентрировали, и высушивали с получением экстракта Trichosanthis Fructus в цельном виде.

Красный дрожжевой рис получали согласно необходимому по рецепту количеству и помещали в экстрактор с обратным потоком, в котором используется этанол, и выполняли два цикла экстрагирования с помощью 70% этанола в 8-кратном количестве, продолжительность каждого цикла составляет 1 час; фильтровали, удаляли этанол при пониженном давлении, и концентрировали, и высушивали с получением экстракта красного дрожжевого риса.

Cinnamomi Cortex получали согласно необходимому по рецепту количеству и помещали в экстрактор с обратным потоком, в котором используется этанол, и выполняли два цикла экстрагирования с помощью 70% этанолом в 8-кратном количестве, продолжительность каждого цикла составляет 1 час; фильтровали, удаляли этанол при пониженном давлении, и концентрировали, и высушивали с получением экстракта Cinnamomi Cortex.

Aurantii Fructus Immaturus, Cinnamomi Cortex, Pinelliae Rhizoma, Trichosanthis Fructus и красный дрожжевой рис смешивают вместе до однородного состояния с получением смешанного экстракта пяти лекарственных материалов традиционной китайской медицины. Смешанный экстракт пяти лекарственных материалов традиционной китайской медицины смешивают с экстрактом Coptidis Rhizoma до однородного состояния с получением композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению.

Результат определения содержания (мг/г): содержание суммы алкалоидов составляет 38,69 мг/г (в том числе 28,10 мг/г берберина), содержание суммы флавоноидов составляет 204,49 мг/г (в том числе 123,2 мг/г неогесперидина), и содержание ловастатина составляет 2,27 мг/г.

Сравнительный пример 1

Состав: 0 г (0 вес. %) Coptidis Rhizoma, 4,5 г (24,32 вес. %) Aurantii Fructus Immaturus, 4,5 г (24,32 вес. %) Pinelliae Rhizoma, 6 г (32,43 вес. %) Trichosanthis Fructus, 0,5 г (2,70 вес. %) Cinnamomi Cortex и 3 г (16,21 вес. %) красного дрожжевого риса, при этом общая суточная доза введения составляет 18,5 г. Количество полученных экстрактов составляет 5,9 г, при этом выход составляет 31,9%.

Способ получения: получение осуществляли согласно способу экстракции соответствующих ингредиентов из примера 6.

Результат определения содержания (мг/г): содержание суммы алкалоидов составляет 0 мг/г (в том числе 0 мг/г берберина), содержание суммы флавоноидов составляет 34,16 мг/г (в том числе 20,11 мг/г неогесперидина), и содержание ловастатина составляет 0,41 мг/г.

Сравнительный пример 2

Состав: 4,5 г (24,32 вес. %) Coptidis Rhizoma, 0 г (0 вес. %) Aurantii Fructus Immaturus, 4,5 г (24,32 вес. %) Pinelliae Rhizoma, 6 г (32,43 вес. %) Trichosanthis Fructus, 0,5 г (2,70 вес. %) Cinnamomi Cortex и 3 г (16,21 вес. %) красного дрожжевого риса, при этом общая суточная доза введения составляет 18,5 г. Количество полученных экстрактов составляет 4,06 г, при этом выход составляет 21,9%.

Способ получения: получение осуществляли согласно способу экстракции соответствующих ингредиентов из примера 6.

Результат определения содержания (мг/г): содержание суммы алкалоидов составляет 9,53 мг/г (в том числе 6,98 мг/г берберина), содержание суммы флавоноидов составляет 0 мг/г (в том числе 0 мг/г неогесперидина), и содержание ловастатина составляет 0,55 мг/г.

Сравнительный пример 3

Состав: 4,5 г (22,5 вес. %) Coptidis Rhizoma, 4,5 г (22,5 вес. %) Aurantii Fructus Immaturus, 4,5 г (22,5 вес. %) Pinelliae Rhizoma, 6 г (30 вес. %) Trichosanthis Fructus, 0,5 г (2,5 вес. %) Cinnamomi Cortex и 0 г (0 вес. %) красного дрожжевого риса, при этом общая суточная доза введения составляет 20 г. Количество полученных экстрактов составляет 5,71 г, при этом выход составляет 28,55%.

Способ получения: получение осуществляли согласно способу экстракции соответствующих ингредиентов из примера 6.

Результат определения содержания (мг/г): содержание суммы алкалоидов составляет 6,88 мг/г (в том числе 4,96 мг/г берберина), содержание суммы флавоноидов составляет 36,01 мг/г (в том числе 21,67 мг/г неогесперидина), и содержание ловастатина составляет 0 мг/г.

Сравнительный пример 4

Состав: 4,5 г (50 вес. %) Coptidis Rhizoma, 4,5 г (50 вес. %) Aurantii Fructus Immaturus, 0 г (0 вес. %) Pinelliae Rhizoma, 0 г (0 вес. %) Trichosanthis Fructus, 0 г (0 вес. %) Cinnamomi Cortex, 0 г (0 вес. %) красного дрожжевого риса, при этом общая суточная доза введения составляет 9 г. Количество полученных экстрактов составляет 2,66 г, при этом выход составляет 9,56%.

Способ получения: получение осуществляли согласно способу экстракции соответствующих ингредиентов из примера 6.

Результат определения содержания (мг/г): содержание суммы алкалоидов составляет 15,11 мг/г (в том числе 10,65 мг/г берберина), содержание суммы флавоноидов составляет 76,71 мг/г (в том числе 46,62 мг/г неогесперидина), и содержание ловастатина составляет 0 мг/г.

Сравнительный пример 5

Состав: 4,5 г (29,03 вес. %) Coptidis Rhizoma, 0 г (0 вес. %) Aurantii Fructus Immaturus, 4,5 г (29,03 вес. %) Pinelliae Rhizoma, 6 г (38,71 вес. %) Trichosanthis Fructus, 0,5 г (3,22 вес. %) Cinnamomi Cortex и 0 г (0 вес. %) красного дрожжевого риса, при этом общая суточная доза введения составляет 15,5 г. Количество полученных экстрактов составляет 3,46 г, при этом выход составляет 22,32%.

Способ получения: получение осуществляли согласно способу экстракции соответствующих ингредиентов из примера 6.

Результат определения содержания (мг/г): содержание суммы алкалоидов составляет 11,88 мг/г (в том числе 8,12 мг/г берберина), содержание суммы флавоноидов составляет 0 мг/г (в том числе 0 мг/г неогесперидина), и содержание ловастатина составляет 0 мг/г.

Составы лекарственных средств и результаты определения содержания активных ингредиентов в примерах 1-7 и сравнительных примерах 1-5 кратко представлены далее.

Таблица I. Составы лекарственных средств

Таблица II. Результаты определения содержания (мг/г)

Пример 8

Состав 8: Смесь экстрактов получали согласно примеру 6.

Таблица III

Способ получения: порошок экстракта отвешивают в дозе согласно составу и добавляют в сухой гранулятор для гранулирования с получением гранул и просеиванием, добавляют стеарат магния и диоксид кремния, смесь смешивают до однородного состояния и с помощью специального пуансона спрессовывают в таблетки. Каждая таблетка весит 1,1 г, и получают 1000 таблеток. Соответствующие требованиям таблетки покрывают влагостойкую пленочную оболочку красновато-коричневого цвета, и при этом увеличение веса составляет 2-2,5%. Таблетки упаковывали с получением конечного продукта. Способ применения: по 2-5 таблеток 2-3 раза в сутки.

Таблица IV. Результаты тестирования трех партий опытных продуктов

Пример 9

Состав 9: Смесь экстрактов получали согласно примеру 5.

Таблица V

Способ получения аналогичен способу из примера 8, при этом каждая таблетка весит 0,8 г.

Способ применения: по 1-2 таблетки 3 раза в сутки.

Таблица VI. Результаты тестирования трех партий опытных продуктов

Пример 10

Состав 10: Смесь экстрактов получали согласно примеру 2.

Таблица VII

Способ получения: добавляют 50 г карбоната кальция к 450 г смеси экстрактов шести лекарственных материалов традиционной китайской медицины, применяя 95% этанол в качестве связующего вещества получают мягкий материал и мягкий материал высушивают в сушильном шкафу при температуре 40°C и формируют в желатиновые капсулы с получением всего 1000 капсул.

Способ применения: по 2-3 капсулы 3 раза в сутки.

Таблица VIII. Результаты тестирования трех партий опытных продуктов

Пример 11

Состав 11: Смесь экстрактов получали согласно примеру 7.

Таблица IX

Способ получения: смесь экстрактов получали согласно необходимому по рецепту количеству, а затем смешивали; порошок экстракта взвешивали в количестве согласно составу, добавляли маннит и аспартам, смесь перемешивают до однородного состояния и помещают в сухой гранулятор для гранулирования с получением гранул и просеиванием и гранулы упаковывают. Каждый пакетик содержит 4,1 г гранул, и каждый пакетик содержит 2 г экстракта.

Способ применения: по 1-2 пакетика 2-3 раза в сутки.

Таблица X. Результаты тестирования трех партий опытных продуктов

I. Исследование стабильности композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению

Источник образцов: композиция на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению представляет собой экстракт, полученный согласно примеру 8.

Исследования стабильности показали, что таблетки с композицией на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению легко поглощают влагу и более чувствительны к высокой влажности, чем к высокой температуре и свету, а воздействие света имеет значительное влияние на содержание ловастатина. В условиях применения конечной упаковки для таблеток используется внутренняя упаковка в виде алюминиево-пластиковых блистеров, которые упаковываются в упаковку из алюминиевой фольги. Проводили ускоренный тест при температуре 40°C±2°C и относительной влажности 75±5% в течение 6 месяцев. Степень изменения веса вследствие поглощения влаги таблетками с композицией на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению находилась в диапазоне 0,5%, что демонстрирует хороший эффект гидроизоляции и защиты от влаги данной упаковки. Количества гидрохлорида берберина, суммы алкалоидов из Coptidis Rhizoma, суммы флавоноидов и нарингина из Aurantii Fructus Immaturus в таблетке с композицией на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению изменяются очень незначительно; немного изменяется количество ловастатина, при этом степень изменения содержания находится в пределах 12,23%, и изменение главным образом происходит вследствие взаимопревращения изомеров и не оказывает влияния на эффективность.

Посредством исследований стабильности таблеток с композицией на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению подтвердили, что в качестве внутренней упаковки следует использовать алюминиево-пластиковую блистерную упаковку, которая должна быть помещена в пакет из алюминиево-пластикового композитного материала; условия хранения должны предусматривать герметичное хранение в сухом месте; срок годности препарата временно установлен как два года.

Таблица XI

Примечание: _ означает, что необходимость в исследовании отсутствует.

II. Исследование по отбору состава композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению

1. Лабораторные животные: крыс Wistar приобретали у Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd. Номер лицензии: SCXK (Пекин) 2016-0011.

2. Способ тестирования

2.1 Способ получения животных моделей с нарушением обмена глюкозы и липидов

2.1.1 Рацион с высоким содержанием жира и наполнение желудка жировой эмульсией с помощью желудочного зонда до формирования нарушения метаболизма липидов и инсулинорезистентности

160 самцов крыс Wistar (весом 150-180 г) приобретали у Beijing Vital River Laboratory Animal Center. После адаптивного кормления в течение недели крыс случайным образом разделяли на нормальную группу и группу с высоким употреблением жиров. 20 крыс из нормальной группы кормили обычным рационом. 140 крыс из группы с высоким употреблением жиров кормили рационом с высоким содержанием жира и наполняли их желудок жировой эмульсией (1 мл/100 г веса/сутки) с помощью желудочного зонда каждый день на протяжении 4 недель.

После кормления в течение 4 недель у крыс из нормальной группы и крыс из группы с высоким употреблением жиров из области глазниц отбирали образцы крови для измерения уровня липидов в крови. По сравнению с нормальной группой вес, содержание триглицеридов и холестерина в сыворотке крови у крыс из группы с высоким употреблением жиров значительно повышены, что указывает на нарушение метаболизма липидов.

После испытания с помощью эугликемического клэмп-метода было обнаружено, что скорость инфузии глюкозы (GIR) в группе с высоким употреблением жиров была значительно ниже, чем в нормальной группе, что свидетельствует о том, что у крыс в группе с высоким употреблением жиров значительно снизилась чувствительность к инсулину, и у животных появились явные симптомы инсулинорезистентности.

2.1.2 Внутрибрюшинная инъекция небольших доз STZ для формирования нарушения обмена глюкозы

Получение 1% раствора стрептозоцина (STZ): добавляют 0,1 моль/л буферный раствор цитрата натрия (pH 4,2) к точно взвешенному 1,00 г стрептозоцина до достижения смешанным раствором объема 100 мл и смешанный раствор хорошо перемешивают с получением 1% раствора стрептозоцина (STZ). Раствор получают непосредственно перед применением.

Животные из группы с высоким употреблением жиров не получали пищи в течение 24 часов, при этом обеспечивался доступ к воде. 30 мг/кг/раз свежеполученного 1% раствора стрептозоцина в буфере с цитратом натрия вводили посредством внутрибрюшинной инъекции. Крысам из нормальной группы вводили посредством внутрибрюшинной инъекции равный объем 0,1 моль/л буферного раствора цитрата натрия.

2.2 Способ определения уровня липидов в крови

После 4 недель непрерывного кормления рационом с высоким содержанием жира из каждой клетки каждой группы случайным способом отбирались 2 крысы. 0,2 мл крови отбирали из области глазниц крыс; собирали в пробирки ЕР, после свертывания незамедлительно помещали в центрифугу. Сыворотку крови собирали и хранили при температуре -20°С. Сыворотку крови анализировали с применением набора реагентов APPLYGEN.

2.3 Эугликемический клэмп-метод

После 4 недель непрерывного кормления рационом с высоким содержанием жира из каждой клетки нормальной группы (всего 4 клетки) случайным образом отбирали одну крысу, при этом из 4-ой клетки отбирали две крысы; из 4-ой, 9-ой, 14-ой, 19-ой и 24-й клеток группы с высоким употреблением жиров (всего 28 клеток) случайным образом отбирали одну крысу для проведения исследования клэмп-методом.

2.4 Способ получения по рецепту состава лекарственного средства

Способы получения согласно примерам: композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины из примеров 1-7 по отдельности получали согласно способам, описанным в примерах 1-7. Способ получения сравнительных примеров: композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины из сравнительных примеров 1-5 получают по отдельности согласно способу, описанному в примере 6.

2.5 Способ введения

Модельная группа и нормальная группа: крыс наполняли желудок 0,5 мл/100 г веса/сутки физиологическим раствором с помощью желудочного зонда.

Доза композиций на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины из примеров 1-7 и сравнительных примеров 1-5 для испытания на крысах составляла: 0,7 г/кг веса/сутки. Согласно методу расчета эквивалентной дозы доза для крысы приблизительно эквивалентно следующей дозе для человека, составляющей 0,11 г/кг веса тела/день, что эквивалентно примерно 20-30 г лекарственного средства в сутки на одного человека (из расчета на вес, составляющий 60 кг). Дозу для групп с другими составами рассчитывали таким же образом.

Способ получения тестируемого образца для наполнения желудка с помощью желудочного зонда: 10,00 г взвешенной натрий-карбоксиметилцеллюлозы добавляли в 1000 мл чистой воды и обеспечивали набухание с получением 1% водного раствора CMC-Na. Взвешенные экстракты с разным составом диспергируют в 1% водном растворе CMC-Na и смешанный раствор перемешивали и смешивали до однородного состояния. Лекарственное средство получают один раз в неделю и хранят в холодильнике при температуре 4°C. Введение посредством наполнения желудка с помощью желудочного зонда осуществляли согласно следующему разделению на группы.

Таблица 1

На основе разделения по группам ежедневно с 8:30 до 10:30 осуществляли введение посредством наполнения желудка с помощью желудочного зонда, при этом доза составляла 0,5 мл/100 г веса/сутки. После 4 недель непрерывного введения подлежащие тестированию крысы не получали пищи ночью в течение 12 часов и с помощью глюкометра измеряли их уровень глюкозы в крови натощак (или измеряли с применением тест-полосок на уровень глюкозы в крови). Затем животных умерщвляли посредством пускания крови из бедренной артерии, отбирали образцы крови, отделяли сыворотку и измеряли соответственно пять показателей на уровень липидов в крови. В ходе испытания записывали изменение веса каждой крысы.

2.6 Способ статистического анализа данных

Все данные заносились в таблицу Excel для расчета среднего значения и стандартного отклонения. Данные для каждой группы представлены в виде среднее значение ± SD. Для расчета погрешностей данных для каждой группы использовали программное обеспечение SPSS 11.5. Сначала выполняли дисперсионный тест на однородность, а затем проводился дисперсионный анализ для каждой группы.

3. Результаты фармакодинамических тестов для примеров

3.1 Результаты измерения уровня липидов в крови после 4 недель кормления рационом с высоким содержанием жира

После кормления в течение 4 недель у крыс из нормальной группы и крыс из группы с высоким употреблением жиров (рационом с высоким содержанием жира + жировая эмульсия) 2 крыс случайным образом выбирали из каждой клетки и из области глазниц отбирали образцы крови для измерения уровня липидов в крови. Результаты показаны в таблице 2.

Таблица 2. Результаты тестирования на уровень липидов в крови (среднее значение ± SD)

(По сравнению с нормальной группой ^*** p<0,001, ^** p<0,01, ^* p<0,05)

Как показано в таблице 2, после 4 недель кормления рационом с высоким содержанием жиров и наполнения желудка жировой эмульсией с помощью желудочного зонда уровень липидов в крови в группе с высоким употреблением жиров значительно повышен, при этом он значительно отличается от уровня в нормальной группе. Это свидетельствует о том, что модель нарушения метаболизма липидов была успешно разработана.

3.2 Результаты тестирования с помощью эугликемического клэмп-метода

В таблице 3 показаны результаты тестирования с помощью эугликемического гиперинсулинемического клэмп-метода.

Таблица 3. Результаты тестирования каждой группы с помощью эугликемического гиперинсулинемического клэмп-метода (среднее значение ± SD)

Как показано в таблице 3, после 4 недель кормления рационом с высоким содержанием жиров и наполнения желудка жировой эмульсией с помощью желудочного зонда у крыс в группе с высоким употреблением жиров значительно снижается скорость инфузии глюкозы и чувствительность к инсулину, и у животных явно проявляется инсулинорезистентность.

3.3 Результаты для разделения на группы

Через 3 дня после введения STZ из хвостовой вены отбирали образцы крови для измерения уровня глюкозы в крови натощак (после 12 часов голодания). Крыс с уровнем глюкозы в крови выше 26,6 ммоль/л и ниже 13,3 ммоль/л исключали, и выбирали и разделяли на группы крыс с уровнем глюкозы в крови в диапазоне 13,3-26,6 ммоль/л. Разделенных на группы животных в соответствии со значением уровня глюкозы в крови разделяли на 4 уровня: 13,3-16,6 ммоль/л, 16,7-19,9 ммоль/л, 20,0-23,3 ммоль/л и 23,4-26,6 ммоль/л. Животных в каждом уровне случайным образом разделяли на 8 групп в соответствии со своим весом. Результат для разделения на группы показаны в таблице 4. 8 групп состояли из от группы с составом 1 до группы с составом 7, а также модельной группы.

Таблица 4. Уровни глюкозы в крови натощак и вес крыс в каждой группе (среднее значение ± SD)

Как показано в таблице 4, значения веса животных были распределены равномерно в модельной группе и различных группах, и значительная разница в весе и уровне глюкозы в крови между группами отсутствует, что указывает на то, что распределение на группы было выполнено равномерно.

Контрольная группа состояла из 12 обычных крыс, не задействованных в создании модели, весом в диапазоне 358,75±12,08 г и с уровнем глюкозы в крови натощак в диапазоне 4,94±0,34. Для контрольной группы наблюдаются значительные различия по сравнению с группами после создания модели.

3.4 Общее состояние каждой группы

Крысы из нормальной контрольной группы находятся в хорошем состоянии, демонстрируют быструю реакцию, нормальную двигательную способность и имеют блестящую шерсть; крысы из модельной группы после инфузии STZ находятся в подавленном состоянии, демонстрируют замедленную реакцию и замедленность движений. После 4 недель обработки в каждой группе обработки в различной степени отмечается улучшение общего состояния.

3.5 Данные об изменении уровня глюкозы в крови в группах после обработки

Разделение на группы осуществляли согласно таблице 4. После 4 недель непрерывного введения подлежащие тестированию крысы не получали пищи ночью в течение 12 часов, и измеряли их уровень глюкозы в крови натощак (измерение с применением глюкометра и тест-полосок на уровень глюкозы в крови). Результаты показаны в таблице 5.

Таблица 5. Значения уровня глюкозы в крови натощак в каждой группе после введения

(По сравнению с модельной группой ^*** p<0,001, ^** p<0,01, ^* p<0,05)

Примечание: в разделении по группам согласно таблице 5 группы с составом 1-7 соответствующим образом представляют собой примеры 1-7 по настоящему изобретению, далее по аналогии.

Как показано в таблице 5, уровень глюкозы в крови натощак в группах с составами 3, 4, 6 и 7 значительно ниже по сравнению с уровнем в модельной группе, при этом наиболее сильный эффект наблюдали в группе с составом 6.

3.6 Данные об изменении уровня липидов в каждой группе

После измерения уровня глюкозы в крови животных в каждой группе умерщвляли посредством пускания крови из бедренной артерии, отбирали образцы крови, отделяли сыворотку и вышеописанным способом соответственно измеряли пять показателей на уровень липидов в крови. Результаты показаны в таблице 6 и таблице 7.

Таблица 6. Значения уровня липидов в крови в каждой группе после обработки (среднее значение ± SD)

(По сравнению с модельной группой ^*** p<0,001, ^** p<0,01, ^* p<0,05)

Таблица 7. Значения уровня липидов в крови в каждой группе после обработки (среднее значение ± SD)

(По сравнению с модельной группой ^*** p<0,001, ^** p<0,01, ^* p<0,05)

Как показано в таблице 6 и таблице 7, 5 показателей на уровень липидов в крови в каждой из групп с составом значительно отличаются от показателей в модельной группе. Уровень триглицеридов в каждой из групп с составами 5, 6 и 7 значительно отличается от уровня в модельной группе. Уровень свободного холестерина в каждой из групп с составами 1, 3, 4, 6 и 7 отличается от уровня в модельной группе. Уровень общего холестерина в каждой из групп с составами 1, 3, 4, 5, 6 и 7 отличается от уровня в модельной группе. Анализ составов и количеств в каждой группе с составом показал, что повышение количества красного дрожжевого риса эффективно способствует снижению уровня холестерина, но не оказывает очевидного влияния на снижение уровня триглицеридов; в каждой группе с составом отмечается наличие определенного влияния на снижение уровня триглицеридов; предположительно, это связано с количеством и совместимостью Coptidis Rhizoma; в каждой группе с составом отмечается наличие определенного влияния на повышение уровня липопротеинов высокой плотности; и в каждой группе с составом отмечается наличие определенного влияния на снижение уровня липопротеинов низкой плотности, в том числе в группах с составами 3 и 6 отмечено эффективное снижение уровня липопротеинов низкой плотности.

Результаты комплексного анализа 5 показателей на уровень липидов в крови показали, что наиболее эффективное действие по регулированию уровня липидов в крови отмечается в группе с составом 6.

4. Результаты фармакодинамических тестов в отношении сравнительных примеров

4.1 Способ измерения, применяемый в отношении сравнительных примеров

Измерение уровня липидов в крови после 4 недель кормления рационом с высоким содержанием жира, тестирование с помощью эугликемического клэмп-метода, анализ для разделения на группы и анализ общего состояния для каждой группы проводили с помощью способов, указанных в разделах 2.5, 2.6 и 3.1-3.4.

4.2 Данные об изменении уровня глюкозы в крови в каждой группе со сравнительным примером после обработки

После 4 недель непрерывного введения с помощью способа, аналогичному способу, который представлен в разделе 3.5, подлежащие тестированию крысы не получали пищи ночью в течение 12 часов и измеряли их уровень глюкозы в крови натощак (измерение с применением глюкометра и тест-полосок на уровень глюкозы в крови). Результаты показаны в таблице 8.

Таблица 8. Значения уровня глюкозы в крови натощак в каждой группе

(По сравнению с модельной группой ^*** p<0,001, ^** p<0,01, ^* p<0,05)

Как показано в таблице 8, по сравнению с модельной группой уровень глюкозы в крови натощак значительно ниже для примера 6 (группа с составом 6), и в сравнительных примерах 2 и 3, при этом наиболее значительным оказалось снижение в примере 6 (p<0,001), и наиболее посредственный эффект снижения уровня глюкозы продемонстрировал сравнительный пример 1, при этом уровень наиболее приближен к значению для модельной группы.

4.3. Данные об изменении уровня липидов в крови в группах со сравнительным примером после обработки

После измерения уровня глюкозы в крови с помощью способа, аналогичного способу, который представлен в разделе 3.6, животных в каждой группе умерщвляли посредством пускания крови из бедренной артерии, отбирали образцы крови, отделяли сыворотку и вышеописанным способом измеряли 5 показателей на уровень липидов в крови. Результаты показаны в следующей таблице.

Таблица 9. Значения уровня липидов в крови в каждой группе после обработки (мкмоль/л)

(По сравнению с модельной группой ^*** p<0,001, ^** p<0,01, ^* p<0,05)

Как показано в таблице 9, по сравнению с модельной группой уровни триглицеридов, свободного холестерина, общего холестерина и липопротеинов низкой плотности для примера 6 значительно снижены, и значительно повышен уровень липопротеинов высокой плотности, и такой эффект значительно превосходит эффекты сравнительных примеров 1-5. Для сравнительного примера 3 эффективно снижен только уровень триглицеридов, и для сравнительных примеров 4-5 уровень триглицеридов, свободного холестерина, общего холестерина и липопротеинов низкой плотности отсутствовало значительное снижение, и уровень липопротеинов высокой плотности был значительно снижен, демонстрируя наиболее посредственный эффект.

Комплексный анализ данных из таблицы 8 и таблицы 9 показывает, что эффект снижения уровня глюкозы для сравнительных примеров 1 и 4-5 сравнительно посредственный, эффект снижения уровня липидов для сравнительных примеров 3-5 сравнительно посредственный, и эффект снижения уровня липидов и глюкозы в крови для сравнительного примера 2 хуже, чем эффект для примера 6 по настоящему изобретению. Как доказано с помощью примера 6 по настоящему изобретению, композиция на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению имеет отличные эффекты в отношении как снижения уровня глюкозы, так и снижения уровня липидов в крови.

III. Исследование фармакодинамики композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению

Источник образцов: композиция на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению: экстракт, полученный согласно примеру 6.

Лабораторные животные: мыши KKAy предоставлены Научно-исследовательским институтом медицинских лабораторных животных Академии медицинских наук КНР, мыши C57BL/6J предоставлены Beijing Huafukang Biotechnology Co., LTD., крысы SD предоставлены Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd.

(1) Нормальные мыши C57BL/6J

Самок/самцов нормальных мышей C57BL/6J, вес 18-20 г, использовали соответственно в качестве нормальных контрольных животных для мышей KKAy (самок) со спонтанным сахарным диабетом 2 типа и мышей C57BL/6J (самцов), которых кормили рационом с высоким содержанием жира.

(2) Мыши KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа

Самок мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа кормили специальным рационом, предназначенным для мышей KKAy, в каждой клетке находилось 5 мышей. После того, как вес мыши превышал 40 г, делались прогнозы по ряду показателей, включая уровень глюкозы в крови, уровень липидов в крови и инсулинорезистентность. В зависимости от уровня глюкозы в крови натощак, процента снижения уровня глюкозы в крови через 40 мин. после теста на толерантность к инсулину, уровня триглицеридов в крови (TG), уровня общего холестерина (TC) и веса мышей разделяли на 5 групп по 12 мышей в каждой группе.

(3) Мыши C57BL/6J, которых кормили рационом с высоким содержанием жира

Самцов мышей C57BL/6J кормили специальным рационом с высоким содержанием жира, в каждой клетке находилось 5 животных. После того, как вес мыши превышал 45 г, делались прогнозы по ряду показателей, включая уровень глюкозы в крови, уровень липидов в крови и инсулинорезистентность. В зависимости от уровня глюкозы в крови натощак, процента снижения уровня глюкозы в крови через 40 мин. после теста на толерантность к инсулину, уровня TG в крови, уровня TC в крови и веса мышей разделяли на 5 групп по 12 мышей в каждой группе.

Тест 1. Влияние композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению на толерантность к инсулину у мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа

Мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа разделяли на 5 групп на основе следующих четырех показателей: процента снижения уровня глюкозы в крови через 40 мин. после теста на толерантность к инсулину, уровню глюкозы в крови натощак, уровня TG в крови и уровня TC в крови. Группы соответственно представляли собой модельную контрольную группу (Con, наполнение желудка водой эквивалентного объема с помощью желудочного зонда), группу положительного контроля (Met, наполнение желудка 150 мг/кг веса метформина с помощью желудочного зонда) и три группы введения дозы композиции на основе экстракта лекарственных средств традиционной китайской медицины по настоящему изобретению. Животных в трех группах введения дозы подвергали наполнению желудка 500, 1000 и 1500 мг/кг композиции на основе экстракта лекарственных средств традиционной китайской медицины с помощью желудочного зонда; и содержание активных ингредиентов для каждой группы введения дозы показано в таблице 10.

Таблица 10. Содержание активных ингредиентов в различных группах введения дозы композиции на основе экстракта лекарственных средств традиционной китайской медицины (г/кг)

Самок мышей C57BL/6J применяли в качестве контрольной группы с нормальными животными (Nor, наполнение желудка водой эквивалентного объема с помощью желудочного зонда, n=10). Наполнение желудка с помощью желудочного зонда осуществляли один раз в сутки непрерывно на протяжении 58 дней, на 14-й день введения мышей подвергали тестированию на толерантность к инсулину. В день тестирования животные не получали пищи в течение 4 часов (с обеспечением доступа к воде), из кончика хвоста осуществлялся забор крови (0 минут), а затем осуществляли подкожную инъекцию обычного инсулина (0,4 Ед./кг) и повторный забор крови осуществляли через 40 и 90 минут после инъекции. Уровень глюкозы в крови определяли с помощью способа на основе применения глюкозооксидазы (далее по аналогии) и рассчитывали площадь под кривой уровня глюкозы в крови (AUC).

Результаты продемонстрировали (в таблице 11 и таблице 12), что уровень глюкозы в крови в модельной контрольной группе (Con) практически не снизился через 40 минут после подкожной инъекции инсулина (0,4 Ед./кг), что свидетельствует о наличии четких признаков инсулинорезистентности у мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа. В отличие от группы Con уровень глюкозы в крови у мышей в трех групп введения дозы с применением 500, 1000 и 1500 мг/кг композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению снижался через 0 минут и через 40 минут после подкожной инъекции инсулина; и площадь под кривой уровня глюкозы в крови также соответственно снижалась на 7,8%, 26,1% и 41,8% соответственно, при этом наблюдалась определенная дозозависимость. Это указывает на то, что композиция на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины способна в определенной степени улучшать состояние при инсулинорезистентности у мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа.

Таблица 11. Влияние композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению на толерантность к инсулину у мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа

(По сравнению с модельной группой, n=12, ^* p<0,05, ^** p<0,01, ^*** p<0,001)

Таблица 12. Влияние композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению на площадь под кривой уровня сахара в крови при толерантности к инсулину (AUC) у мышей KKAy

(По сравнению с модельной группой, n=12, ^* p<0,05, ^** p<0,01, ^*** p<0,001)

Тест 2. Влияние композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению на толерантность к глюкозе по результату перорального теста у мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа.

Мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа разделяли на 5 групп на основе следующих пяти показателей: процента снижения уровня глюкозы в крови через 40 мин. после теста на толерантность к инсулину, уровня глюкозы в крови натощак, уровня TG в крови, уровня TC в крови и веса. Группы соответственно представляли собой модельную контрольную группу (Con, наполнение желудка водой эквивалентного объема с помощью желудочного зонда), группу положительного контроля (Met, наполнение желудка 150 мг/кг веса метформина с помощью желудочного зонда) и три группы введения дозы композиции на основе экстракта лекарственных средств традиционной китайской медицины по настоящему изобретению. Животных в трех группах введения дозы подвергали наполнению желудка 500, 1000 и 1500 мг/кг композиции на основе экстракта лекарственных средств традиционной китайской медицины с помощью желудочного зонда. Самок мышей C57BL/6J применяли в качестве контрольной группы с нормальными животными (Nor, наполнение желудка водой эквивалентного объема с помощью желудочного зонда, n=10). Наполнение желудка с помощью желудочного зонда осуществляли один раз в сутки непрерывно на протяжении 58 дней, на 28-й день введения животных в каждой группе подвергали пероральному тестированию на толерантность к глюкозе. В день тестирования животные в каждой группе не получали пищи в течение 4 часов (с обеспечением доступа к воде), забор крови осуществляли из кончика хвоста (0 минут), затем выполняли наполнение желудка раствором глюкозы (2,0 г/кг) с помощью желудочного зонда и забор крови осуществляли через 30, 60 и 120 минут после углеводной нагрузки. Уровень глюкозы в крови измеряли и рассчитывали площадь под кривой уровня глюкозы в крови (AUC).

Результаты продемонстрировали (в таблице 13 и таблице 14), что по сравнению с нормальной контрольной группой (Nor) в модельной контрольной группе (Con) отмечали существенное повышение уровня глюкозы в крови после заполнения желудка раствором глюкозы с помощью желудочного зонда, что свидетельствует об очевидном нарушении толерантности к глюкозе у мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа. В отличие от группы Con у мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа в трех группах введения дозы, составляющей 500, 1000 и 1500 мг/кг композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению, при тестировании после применения пероральной углеводной нагрузки наблюдалось снижение в определенной степени уровня глюкозы в крови, и площадь под кривой уровня глюкозы в крови уменьшилась соответственно на 12%, 12,5% и 17,2%, при этом эффект снижения уровня глюкозы в крови у группы введения дозы, составляющей 1500 мг/г, имеет статистически значимое различие. Это указывает на то, что композиция на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины может в определенной степени улучшать нарушение толерантности к глюкозе у мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа.

Таблица 13. Влияние композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению на толерантность к глюкозе по результату перорального теста у мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа

(По сравнению с модельной группой, n=10-12, ^* p<0,05, ^** p<0,01, ^*** p<0,001)

Таблица 14. Влияние композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению на площадь под кривой уровня глюкозы в крови при толерантности к глюкозе (AUC) у мышей KKAy

(По сравнению с модельной группой, n=10-12, ^* p<0,05, ^** p<0,01)

Тест 3. Влияние композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению на уровень глюкозы в крови натощак, уровень инсулина в крови и индекс чувствительности к инсулину у мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа

Мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа разделяли на 5 групп на основе следующих пяти показателей: процента снижения уровня глюкозы в крови через 40 мин. после теста на толерантность к инсулину, уровня глюкозы в крови натощак, уровня TG в крови, уровня TC в крови и веса. Группы соответственно представляли собой модельную контрольную группу (Con, наполнение желудка водой эквивалентного объема с помощью желудочного зонда), группу положительного контроля (Met, наполнение желудка 150 мг/кг веса метформина с помощью желудочного зонда) и три группы введения дозы композиции на основе экстракта лекарственных средств традиционной китайской медицины по настоящему изобретению. Животных в трех группах введения дозы подвергали наполнению желудка 500, 1000 и 1500 мг/кг композиции на основе экстракта лекарственных средств традиционной китайской медицины с помощью желудочного зонда. Самок мышей C57BL/6J применяли в качестве контрольной группы с нормальными животными (Nor, наполнение желудка водой эквивалентного объема с помощью желудочного зонда, n=10). Наполнение желудка с помощью желудочного зонда осуществляли один раз в сутки непрерывно на протяжении 58 дней; на 28-й день введения одновременно с тестированием на толерантность к глюкозе у животных в каждой группе измеряли уровень глюкозы в крови натощак и уровень инсулина в крови (методом ELISA), и рассчитывали индекс чувствительности к инсулину (ISI), при этом ISI=1/(FBG_мг/дл X FBI_нг/мл).

Результаты продемонстрировали (в таблице 15), что по сравнению с группой Con в группе введения дозы, составляющей 500 мг/кг, и группе введения дозы, составляющей 1500 мг/кг композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению можно достичь существенного снижения уровня глюкозы в крови натощак, уровня инсулина в крови и индекса чувствительности к инсулину (ISI) у мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа.

Таблица 15. Влияние композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению на уровень глюкозы в крови натощак, уровень инсулина в крови и индекс чувствительности к инсулину у мышей KKAy

(По сравнению с модельной группой, n=10-12, ^* p<0,05, ^** p<0,01, ^*** p<0,001)

Тест 4. Влияние продолжительного введения композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению на уровень глюкозы в крови натощак у мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа

Мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа разделяли на 5 групп на основе следующих пяти показателей: процента снижения уровня глюкозы в крови через 40 мин. после теста на толерантность к инсулину, уровня глюкозы в крови натощак, уровня TG в крови, уровня TC в крови и веса. Группы соответственно представляли собой модельную контрольную группу (Con, наполнение желудка водой эквивалентного объема с помощью желудочного зонда), группу положительного контроля (Met, наполнение желудка 150 мг/кг веса метформина с помощью желудочного зонда) и три группы введения дозы композиции на основе экстракта лекарственных средств традиционной китайской медицины по настоящему изобретению. Животных в трех группах введения дозы подвергали наполнению желудка 500, 1000 и 1500 мг/кг композиции на основе экстракта лекарственных средств традиционной китайской медицины с помощью желудочного зонда. Самок мышей C57BL/6J применяли в качестве контрольной группы с нормальными животными (Nor, наполнение желудка водой эквивалентного объема с помощью желудочного зонда, n=10). Наполнение желудка с помощью желудочного зонда осуществляли один раз в сутки непрерывно на протяжении 58 дней; животные в каждой группе не получали пищи в течение 4 часов (с обеспечением доступа к воде), на 14-й, 21-й, 28-й и 40-й день введения из кончика хвоста осуществляли забор крови с измерением уровня глюкозы в крови натощак.

Результаты продемонстрировали (в таблице 16), что по сравнении с группой Con в трех группах введения дозы, составляющей 500, 1000 и 1500 мг/кг композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению, можно достичь снижения в разной степени уровня глюкозы в крови натощак у мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа, при этом в группе введения дозы, составляющей 1500 мг/кг, процент снижения уровня глюкозы в крови у мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 в разный момент времени составил соответственно 43,9%, 23,6%, 29,8% и 22,4%. Это указывает на то, что продолжительное введение композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению может обеспечивать в явной степени контроль уровня глюкозы в крови у мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа.

Таблица 16. Влияние продолжительного введения композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению на уровень глюкозы в крови натощак у мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа

(По сравнению с модельной группой, n=10-12, ^* p<0,05, ^** p<0,01, ^*** p<0,001)

Тест 5. Влияние композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению на уровень гликированного гемоглобина (HbA1c) у мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа

Мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа разделяли на 5 групп на основе следующих пяти показателей: процента снижения уровня глюкозы в крови через 40 мин. после теста на толерантность к инсулину, уровня глюкозы в крови натощак, уровня TG в крови, уровня TC в крови и веса. Группы соответственно представляли собой модельную контрольную группу (Con, наполнение желудка водой эквивалентного объема с помощью желудочного зонда), группу положительного контроля (Met, наполнение желудка 150 мг/кг веса метформина с помощью желудочного зонда) и три группы введения дозы композиции на основе экстракта лекарственных средств традиционной китайской медицины по настоящему изобретению. Животных в трех группах введения дозы подвергали наполнению желудка 500, 1000 и 1500 мг/кг композиции на основе экстракта лекарственных средств традиционной китайской медицины с помощью желудочного зонда. Самок мышей C57BL/6J применяли в качестве контрольной группы с нормальными животными (Nor, наполнение желудка водой эквивалентного объема с помощью желудочного зонда, n=10). Наполнение желудка с помощью желудочного зонда осуществляли один раз в сутки непрерывно на протяжении 58 дней; на 48-й день введения из кончика хвоста осуществляли забор крови и измеряли уровень гликированного гемоглобина.

Результаты продемонстрировали (в таблице 17), что по сравнению с контрольной группой с нормальными животными в модельной контрольной группе у мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа отмечается существенное повышение уровня HbA1c. Продолжительное введение композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению (500, 1000 и 1500 мг/кг) способно снижать уровень HbA1c у мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа соответственно на 0,77, 0,87 и 1,03, при между группами введения средней и высокой дозы имеются значимые различия. Это указывает на то, что продолжительное введение композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению может обеспечивать в явной степени контроль колебания уровня глюкозы в крови у мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа.

Таблица 17. Влияние композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению на уровень гликированного гемоглобина у мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа (48-й день)

(По сравнению с модельной группой, n=11-12, ^* p<0,05, ^*** p<0,001)

Тест 6. Влияние композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению на уровень триглицеридов (TG) и уровень общего холестерина (ТС) в крови у мышей KKAy

Мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа разделяли на 5 групп на основе следующих пяти показателей: процента снижения уровня глюкозы в крови через 40 мин. после теста на толерантность к инсулину, уровня глюкозы в крови натощак, уровня TG в крови, уровня TC в крови и веса. Группы соответственно представляли собой модельную контрольную группу (Con, наполнение желудка водой эквивалентного объема с помощью желудочного зонда), группу положительного контроля (Met, наполнение желудка 150 мг/кг веса метформина с помощью желудочного зонда) и три группы введения дозы композиции на основе экстракта лекарственных средств традиционной китайской медицины по настоящему изобретению. Животных в трех группах введения дозы подвергали наполнению желудка 500, 1000 и 1500 мг/кг композиции на основе экстракта лекарственных средств традиционной китайской медицины с помощью желудочного зонда. Самок мышей C57BL/6J применяли в качестве контрольной группы с нормальными животными (Nor, наполнение желудка водой эквивалентного объема с помощью желудочного зонда, n=10). Наполнение желудка с помощью осуществляли один раз в сутки непрерывно на протяжении 58 дней; на 14-й введения одновременно с тестированием на толерантность к инсулину у мышей осуществляли забор крови для измерения уровня триглицеридов (TG) и уровня общего холестерина (ТС).

Результаты продемонстрировали (в таблице 18), что по сравнению с контрольной группой (Con) в группе введения дозы, составляющей 1500 мг/кг композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению можно достичь существенного снижения уровня TG в сыворотке крови у мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа, и при этом существенного влияния на уровень TC в сыворотке крови не выявлено.

Таблица 18. Влияние композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению на уровень TG и уровень TC в крови у мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа

(По сравнению с модельной группой, n=10-12, ^* p<0,05, ^*** p<0,001)

Тест 7. Влияние продолжительного введения композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению на инсулинорезистентность у мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 (методика эугликемического гиперинсулинемического клэмпа)

Мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа разделяли на 5 групп на основе следующих пяти показателей: процента снижения уровня глюкозы в крови через 40 мин. после теста на толерантность к инсулину, уровня глюкозы в крови натощак, уровня TG в крови, уровня TC в крови и веса. Группы соответственно представляли собой модельную контрольную группу (Con, наполнение желудка водой эквивалентного объема с помощью желудочного зонда), группу положительного контроля (Met, наполнение желудка 150 мг/кг веса метформина с помощью желудочного зонда) и три группы введения дозы композиции на основе экстракта лекарственных средств традиционной китайской медицины по настоящему изобретению. Животных в трех группах введения дозы подвергали наполнению желудка 500, 1000 и 1500 мг/кг композиции на основе экстракта лекарственных средств традиционной китайской медицины с помощью желудочного зонда. Самок мышей C57BL/6J применяли в качестве контрольной группы с нормальными животными (Nor, наполнение желудка водой эквивалентного объема с помощью желудочного зонда, n=10). Наполнение желудка с помощью желудочного зонда осуществляли один раз в сутки непрерывно на протяжении 58 дней; после 54 дней введения животным в каждой группе, осуществляли отбор случайным образом 5-6 мышей из различных групп для ежедневного осуществления эугликемического гиперинсулинемического клэмп-теста.

Результаты продемонстрировали (в таблице 19), что по сравнению с контрольной группой с нормальными животными (Nor) при достижении концентрации глюкозы в равновесном состоянии в крови (6,0 ммоль/л) в условиях высокого уровня инсулина у мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа в модельной контрольной группы (Con) отмечается существенное снижение скорости инфузии глюкозы (GIR) что свидетельствует о наличии явной инсулинорезистентности у мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа. В отличие от модельной контрольной группы (Con) в трех группах введения дозы, составляющей 500, 1000 и 1500 мг/кг композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению, выявлено, что продолжительное введение может обеспечивать повышение значения GIR у мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа соответственно на 12,3%, 54,3% и 70,4%. Это указывает на то, что продолжительное введение композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению способно улучшить чувствительность к инсулину у мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа.

Таблица 19. Влияние продолжительного введения композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению на скорость инфузии глюкозы у мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа

(По сравнению с модельной группой, n=3-5, ^* p<0,05, ^** p<0,01, ^*** p<0,001)

Тест 8. Влияние композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению на кровяное давление у мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа

Мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа разделяли на 5 групп на основе следующих пяти показателей: процента снижения уровня глюкозы в крови через 40 мин. после теста на толерантность к инсулину, уровня глюкозы в крови натощак, уровня TG в крови, уровня TC в крови и веса. Группы соответственно представляли собой модельную контрольную группу (Con, наполнение желудка водой эквивалентного объема с помощью желудочного зонда), группу положительного контроля (Met, наполнение желудка 150 мг/кг веса метформина с помощью желудочного зонда) и три группы введения дозы композиции на основе экстракта лекарственных средств традиционной китайской медицины по настоящему изобретению. Животных в трех группах введения дозы подвергали наполнению желудка 500, 1000 и 1500 мг/кг композиции на основе экстракта лекарственных средств традиционной китайской медицины с помощью желудочного зонда. Самок мышей C57BL/6J применяли в качестве контрольной группы с нормальными животными (Nor, наполнение желудка водой эквивалентного объема с помощью желудочного зонда, n=10). Наполнение желудка с помощью желудочного зонда осуществляли один раз в сутки непрерывно на протяжении 58 дней, на 53-й день введения животным в каждой группе с помощью интеллектуального неинвазивного тонометра (BP98A, Beijing Ruanlong Biotechnology Co., Ltd.) проводили измерение кровяного давления.

Результаты продемонстрировали (в таблице 20), что продолжительное введение композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению (в дозе 500, 1000 и 1500 мг/кг) в течение 53 дней способно существенно снизить кровяное давление у мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа (примечание: из-за их небольшого веса и малых размеров хвоста возможность измерить кровяное давление с помощью неинвазивного тонометра у мышей из нормальной контрольной группы отсутствовала).

Таблица 20. Влияние композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению на кровяное давление у мышей KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа

(По сравнению с модельной группой, n=11-12, ^* p<0,05, ^** p<0,01)

Тест 9. Влияние композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению на толерантность к инсулину у мышей C57BL/6J, которых кормили рационом с высоким содержанием жира

Для предварительного тестирования на показатели, включающие уровень глюкозы в крови, уровень липидов и инсулинорезистентность, были выбраны мыши C57BL/6J, которых кормили рационом с высоким содержанием жира, и весом более 45 г, и разделяли на 5 групп на основе следующих пяти показателей: процента снижения уровня глюкозы в крови через 40 мин. после теста на толерантность к инсулину, уровня глюкозы в крови натощак, уровня TG в крови, уровня TC и веса, при этом в каждой группе было 12 мышей. Группы соответственно представляли собой модельную контрольную группу (Con), группу положительного контроля с метформином (Met, 150 мг/кг) и три группы введения дозы (500, 1000 и 1500 мг/кг) с применением композиции на основе экстракта лекарственных средств традиционной китайской медицины по настоящему изобретению. Самцов мышей C57BL/6J применяли в качестве контрольной группы с нормальными животными. Животных в группе положительного контроля и каждой группе с тестируемым лекарственным средством ежедневно подвергали наполнению желудка соответствующей дозой тестируемого лекарственного средством с помощью желудочного зонда. Нормальную контрольную группу и модельную контрольную группу подвергали наполнению желудка эквивалентным объемом воды с помощью желудочного зонда один раз в сутки непрерывно в течение 30 дней. На 10-й день после введения животных в каждой группе подвергали тестированию на толерантность к инсулину. В день тестирования животные не получали пищи в течение 4 часов (с обеспечением доступа к воде), из кончика хвоста осуществляли забор крови (0 минут), а затем осуществляли подкожную инъекцию обычного инсулина (0,4 Ед./кг). Забор крови осуществляли через 40 мин. и 90 мин. после инъекции с измерением уровня глюкозы в крови и расчетом AUC.

Результаты продемонстрировали (в таблице 21 и таблице 22), что при сравнении измерения уровня глюкозы в крови через 40 минут после инъекции инсулина и измерения уровня глюкозы в крови в момент 0 минут у мышей C57BL/6J из нормальной контрольной группы выявлено снижение уровня глюкозы в крови через 40 мин. после инъекции инсулина на 40,3%, и у мышей C57BL/6J, которых кормили рационом с высоким содержанием жира, из модельной контрольной группы выявлено снижение уровня глюкозы в крови через 40 мин. после инъекции инсулина на 26,7%; что свидетельствует о наличии инсулинорезистентности у мышей C57BL/6J с ожирением.

В отличие от модельной контрольной группы (Con) в группе введения дозы, составляющей 500 мг/кг, и группе введения дозы, составляющей 1500 мг/кг композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению, отмечено существенное снижение уровня глюкозы в крови и AUC у мышей C57BL/6J, которых кормили рационом с высоким содержанием жира, через 40 мин. и 90 мин. после инъекции инсулина, и в группе введения дозы, составляющей 1000 мг/кг, отмечено существенное снижение уровня глюкозы в крови и AUC у мышей C57BL/6J, которых кормили рационом с высоким содержанием жира, через 90 мин. после инъекции инсулина. Это указывает на то, что композиция на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины способна существенно улучшать состояние при инсулинорезистентности у мышей C57BL/6J, которых кормили рационом с высоким содержанием жира.

Таблица 21. Влияние композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению на толерантность к инсулину у мышей C57BL/6J, которых кормили рационом с высоким содержанием жира

(По сравнению с модельной группой, n=10-12, ^* p<0,05, ^** p<0,01, ^*** p<0,001)

Таблица 22. Влияние композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению на толерантность к инсулину с помощью AUC у мышей C57BL/6J, которых кормили рационом с высоким содержанием жира

(По сравнению с модельной группой, n=10-12, ^* p<0,05, ^** p<0,01)

Тест 10. Влияние композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению на толерантность к глюкозе по результату перорального теста у мышей C57BL/6J, которых кормили рационом с высоким содержанием жира

Для предварительного тестирования на показатели, включающие уровень глюкозы в крови, уровень липидов и инсулинорезистентность, были выбраны мыши C57BL/6J, которых кормили рационом с высоким содержанием жира, и весом более 45 г, и разделяли на 5 групп на основе следующих пяти показателей: процента снижения уровня глюкозы в крови через 40 мин. после теста на толерантность к инсулину, уровня глюкозы в крови натощак, уровня TG в крови, уровня TC и веса, при этом в каждой группе было 12 мышей. Группы соответственно представляли собой модельную контрольную группу (Con), группу положительного контроля с метформином (Met, 150 мг/кг) и три группы введения дозы (500, 1000 и 1500 мг/кг) с применением композиции на основе экстракта лекарственных средств традиционной китайской медицины по настоящему изобретению. Самцов мышей C57BL/6J применяли в качестве контрольной группы с нормальными животными. Животных в группе положительного контроля и каждой группе с тестируемым лекарственным средством ежедневно подвергали наполнению желудка соответствующей дозой тестируемого лекарственного средством с помощью желудочного зонда. Нормальную контрольную группу и модельную контрольную группу подвергали наполнению желудка эквивалентным объемом воды с помощью желудочного зонда один раз в сутки непрерывно в течение 30 дней. На 29-й день после введения животных в каждой группе подвергали тестированию на толерантность к глюкозе. В день тестирования животные не получали пищи в течение 4 часов (с обеспечением доступа к воде), забор крови осуществляли из кончика хвоста (0 минут), а затем осуществляли наполнение желудка раствором глюкозы (2,0 г/кг) с помощью желудочного зонда. Забор крови осуществляли через 30 мин., 60 мин. и 120 мин. после углеводной нагрузки с измерением уровня глюкозы в крови и расчетом AUC.

Результаты продемонстрировали (в таблице 23 и таблице 24), что в группах введения дозы, составляющей 500 мг/кг, и дозы, составляющей 1000 мг/кг композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению, отмечено существенное снижение уровня глюкозы в крови у мышей C57BL/6J, которых кормили рационом с высоким содержанием жира, через 30, 60 и 120 минут после пероральной углеводной нагрузки; в группе введения дозы, составляющей 1500 мг/кг, отмечено существенное снижение уровня глюкозы в крови через 30 минут после пероральной углеводной нагрузки; и в трех группах введения дозы отмечено снижение AUC соответственно на 10,5%, 14,8% и 1,7%. Это указывает на то, что композиция на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению способна улучшать состояние при отклонениях толерантности к глюкозе по результату перорального теста у мышей C57BL/6J, которых кормили рационом с высоким содержанием жира.

Таблица 23. Влияние композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению на толерантность к глюкозе по результату перорального теста у мышей C57BL/6J, которых кормили рационом с высоким содержанием жира

(По сравнению с модельной группой, n=10-12, ^* p<0,05, ^** p<0,01, ^*** p<0,001)

Таблица 24. Влияние композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению на AUC в отношении толерантности к глюкозе по результату перорального теста у мышей C57BL/6J, которых кормили рационом с высоким содержанием жира

(По сравнению с модельной группой, n=10-12, ^** p<0,01, ^*** p<0,001)

Для исследования влияния композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению на признаки метаболического синдрома, такие инсулинорезистентность, метаболизм глюкозы и липидов, кровяное давление и вес, был проведен фармакодинамический тест, в котором в качестве модели с лабораторными животными использовались мыши KKAy со спонтанным сахарным диабетом 2 типа и с инсулинорезистентностью и ожирением и мыши C57BL/6J, которых кормили рационом с высоким содержанием жира.

Результаты фармакодинамического теста показали, что композиция на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению имеет следующие эффекты: (1) снижение уровня глюкозы в крови; (2) снижение уровня инсулина в крови; (3) улучшение толерантности к глюкозе по результату перорального теста; (4) снижение уровня гликированного гемоглобина (HbA1c); (5) повышение индекса чувствительности к инсулину и улучшение состояния при инсулинорезистентности; (6) снижение уровня триглицеридов в крови и формирование тенденции снижения уровня общего холестерина и (7) снижение кровяного давления.

VI. Безопасность композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению

Лабораторные животные: мыши C57BL/6J предоставлены Beijing Huafukang Biotechnology Co., LTD., и собаки породы бигль предоставлены Beijing Maas Biotechnology Co., LTD.

В тесте на острую токсичность на мышах, которым пероральным путем вводили композицию на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению, измерили, что значение LD₅₀ составляет более 20000 мг/кг.

В тесте на острую токсичность на собаках породы бигль, которым пероральным путем вводили композицию на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению, измерили, что смертельная доза составляет более 7500 мг/кг, и основной токсической реакцией является рвота после введения. Доза 20000 мг/кг в 200 раз превышает предполагаемую клиническую дозу, и доза 7500 мг/кг в 75 раз превышает предполагаемую клиническую дозу.

Результаты тестирования на токсичность при длительном применении на крысах, которым пероральным путем вводили композицию на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению, показали, что она может вызывать обратимые повреждения желудка у крыс, такие как гиперкератоз преджелудка и паракератоз и разрушение слизистой оболочки; а также повреждения печени, такие как обратимая гепатоцеллюлярная гипертрофия и трудно поддающаяся лечению гиперплазия желчных протоков. При тестировании на токсичность при длительном применении использовали дозу, которая 8, 28 и 98 раз превышает предполагаемую клиническую дозу; и таким образом установлена взаимосвязь между токсичным действием и длительным применением тестируемого продукта в больших дозах и растворителем, используемым для получения тестируемого продукта. Таким образом, предполагаемая клиническая доза композиции на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины по настоящему изобретению является безопасной.

Вышеизложенное описание является исключительно описанием конкретных вариантов осуществления настоящего изобретения, однако объем защиты настоящего изобретения не ограничивается данным описанием; любые изменения или замещения, которые любой специалист в данной области техники может предложить в пределах технической области, раскрываемой настоящим изобретением, находятся в пределах объема защиты настоящего изобретения. Следовательно, объем защиты настоящего изобретения определяется объемом защиты формулы изобретения.

Применимость

Представленные в соответствии с вариантами осуществления настоящего изобретения композиция на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины и композиция на основе экстрактов лекарственных материалов традиционной китайской медицины применимы в технической области фармацевтики и особенно применимы для лечения метаболического синдрома.

Группа изобретений относится к фармацевтической промышленности, а именно к композиции для лечения метаболического синдрома. Композиция на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины для лечения метаболического синдрома, где композиция на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины содержит Coptidis Rhizoma, Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma, Trichosanthis Fructus, Cinnamomi Cortex и красный дрожжевой рис в виде сырья, при этом композиция содержит 19,57 вес. % Coptidis Rhizoma, 19,56 вес. % Aurantii Fructus Immaturus, 19,57 вес. % Pinelliae Rhizoma, 26,09 вес. % Trichosanthis Fructus, 2,17 вес. % Cinnamomi Cortex и 13,04 вес. % красного дрожжевого риса. Композиция на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины для лечения метаболического синдрома, где композиция содержит Coptidis Rhizoma, Aurantii Fructus Immaturus, красный дрожжевой рис и необязательно один или более компонентов, выбранных из группы, состоящей из Pinelliae Rhizoma, Trichosanthis Fructus и Cinnamomi Cortex в виде сырья, где композиция содержит: 7,9-45 вес. % Coptidis Rhizoma, 8,5-32,1 вес. % Aurantii Fructus Immaturus, 0-33,8 вес. % Pinelliae Rhizoma, 0-26,09 вес. % Trichosanthis Fructus, 0-13,1 вес. % Cinnamomi Cortex и 13,04-57,2 вес. % красного дрожжевого риса. Фармацевтическая композиция для лечения метаболического синдрома, содержащая композицию на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины и фармацевтически приемлемый носитель. Способ получения композиции для лечения метаболического синдрома из вышеописанной композиции, где (а-1) Coptidis Rhizoma экстрагируют с применением водного раствора кислоты и фильтруют, концентрируют, подвергают щелочному осаждению, высаливают, фильтруют, высушивают и измельчают с получением экстракта суммы алкалоидов из Coptidis Rhizoma; (а-2) четыре лекарственных материала, включающие красный дрожжевой рис, составляющий 90% от необходимого по рецепту количества, Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma и Cinnamomi Cortex, экстрагируют с применением 70% этанола и фильтруют; (а-3) Trichosanthis Fructus экстрагируют с применением 85% этанола, раствор экстракта Trichosanthis Fructus объединяют с раствором экстракта четырех лекарственных материалов традиционной китайской медицины, удаляют этанол при пониженном давлении, концентрируют, высушивают и измельчают с получением смешанного экстракта пяти лекарственных материалов традиционной китайской медицины, состоящего из Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma, красного дрожжевого риса, Cinnamomi Cortex и Trichosanthis Fructus; и (a-4) экстракт суммы алкалоидов из Coptidis Rhizoma, смешанный экстракт пяти лекарственных материалов традиционной китайской медицины и тонкодисперсный порошок красного дрожжевого риса, составляющий 10% от необходимого по рецепту количества, смешивают до однородного состояния с получением композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины. Фармацевтический препарат для лечения метаболического синдрома, содержащий композицию на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины, где фармацевтический препарат предусматривает инъекционные растворы, таблетки, капсулы, гранулы и растворы для перорального введения. Применение композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины для лечения болезни, выбранной из: a. метаболического синдрома; b. нарушения уровня глюкозы в крови и метаболизма липидов на ранней стадии метаболического синдрома. Применение композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины для обеспечения одного или более из следующих эффектов: снижения уровня глюкозы в крови, снижения уровня инсулина в крови, улучшения толерантности к глюкозе по результату перорального теста, снижения уровня гликированного гемоглобина (HbAlc), повышения индекса чувствительности к инсулину, улучшения состояния при инсулинорезистентности, снижения уровня триглицеридов в крови, снижения уровня общего холестерина и снижения кровяного давления. Применение фармацевтического препарата для лечения болезни, выбранной из: a. метаболического синдрома; b. нарушения уровня глюкозы в крови и метаболизма липидов на ранней стадии метаболического синдрома. Применение фармацевтического препарата для обеспечения одного или более из следующих эффектов: снижения уровня глюкозы в крови, снижения уровня инсулина в крови, улучшения толерантности к глюкозе по результату перорального теста, снижения уровня гликированного гемоглобина (HbAlc), повышения индекса чувствительности к инсулину, улучшения состояния при инсулинорезистентности, снижения уровня триглицеридов в крови, снижения уровня общего холестерина и снижения кровяного давления. Вышеописанные композиции эффективны для лечения метаболических синдромов, а именно в отношении снижения уровня глюкозы в крови, снижения уровня инсулина в крови, улучшения толерантности к глюкозе по результату перорального теста, снижения уровня гликированного гемоглобина (HbAlc), повышения индекса чувствительности к инсулину, улучшения состояния при инсулинорезистентности, снижения уровня триглицеридов в крови, снижения уровня общего холестерина и снижения кровяного давления. 9 н. и 1 з.п. ф-лы, 24 табл., 12 пр.

1. Композиция на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины для лечения метаболического синдрома, где композиция на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины содержит Coptidis Rhizoma, Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma, Trichosanthis Fructus, Cinnamomi Cortex и красный дрожжевой рис в виде сырья, при этом композиция содержит 19,57 вес. % Coptidis Rhizoma, 19,56 вес. % Aurantii Fructus Immaturus, 19,57 вес. % Pinelliae Rhizoma, 26,09 вес. % Trichosanthis Fructus, 2,17 вес. % Cinnamomi Cortex и 13,04 вес. % красного дрожжевого риса.

2. Композиция на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по п. 1, где Aurantii Fructus Immaturus представляет собой обжаренный в отрубях Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma представляет собой Pinelliae Rhizoma Praeparatumcum Zingibere Et Alumine, и Trichosanthis Fructus представляет собой Trichosanthis Fructus в цельном виде.

3. Композиция на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины для лечения метаболического синдрома, где композиция содержит Coptidis Rhizoma, Aurantii Fructus Immaturus, красный дрожжевой рис и необязательно один или более компонентов, выбранных из группы, состоящей из Pinelliae Rhizoma, Trichosanthis Fructus и Cinnamomi Cortex в виде сырья, где композиция содержит: 7,9-45 вес. % Coptidis Rhizoma, 8,5-32,1 вес. % Aurantii Fructus Immaturus, 0-33,8 вес. % Pinelliae Rhizoma, 0-26,09 вес. % Trichosanthis Fructus, 0-13,1 вес. % Cinnamomi Cortex и 13,04-57,2 вес. % красного дрожжевого риса.

4. Фармацевтическая композиция для лечения метаболического синдрома, содержащая композицию на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по любому из пп. 1-3 и фармацевтически приемлемый носитель.

5. Способ получения композиции для лечения метаболического синдрома из композиции по любому из пп. 1-3, где

(а-1) Coptidis Rhizoma экстрагируют с применением водного раствора кислоты и фильтруют, концентрируют, подвергают щелочному осаждению, высаливают, фильтруют, высушивают и измельчают с получением экстракта суммы алкалоидов из Coptidis Rhizoma;

(а-2) четыре лекарственных материала, включающие красный дрожжевой рис, составляющий 90% от необходимого по рецепту количества, Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma и Cinnamomi Cortex, экстрагируют с применением 70% этанола и фильтруют;

(а-3) Trichosanthis Fructus экстрагируют с применением 85% этанола, раствор экстракта Trichosanthis Fructus объединяют с раствором экстракта четырех лекарственных материалов традиционной китайской медицины, удаляют этанол при пониженном давлении, концентрируют, высушивают и измельчают с получением смешанного экстракта пяти лекарственных материалов традиционной китайской медицины, состоящего из Aurantii Fructus Immaturus, Pinelliae Rhizoma, красного дрожжевого риса, Cinnamomi Cortex и Trichosanthis Fructus; и

(a-4) экстракт суммы алкалоидов из Coptidis Rhizoma, смешанный экстракт пяти лекарственных материалов традиционной китайской медицины и тонкодисперсный порошок красного дрожжевого риса, составляющий 10% от необходимого по рецепту количества, смешивают до однородного состояния с получением композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины.

6. Фармацевтический препарат для лечения метаболического синдрома, содержащий композицию на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по любому из пп. 1-3, где фармацевтический препарат предусматривает инъекционные растворы, таблетки, капсулы, гранулы и растворы для перорального введения.

7. Применение композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по любому из пп. 1-3 для лечения болезни, выбранной из:

a. метаболического синдрома;

b. нарушения уровня глюкозы в крови и метаболизма липидов на ранней стадии метаболического синдрома.

8. Применение композиции на основе лекарственных материалов традиционной китайской медицины по любому из пп. 1-3 для обеспечения одного или более из следующих эффектов: снижения уровня глюкозы в крови, снижения уровня инсулина в крови, улучшения толерантности к глюкозе по результату перорального теста, снижения уровня гликированного гемоглобина (HbAlc), повышения индекса чувствительности к инсулину, улучшения состояния при инсулинорезистентности, снижения уровня триглицеридов в крови, снижения уровня общего холестерина и снижения кровяного давления.

9. Применение фармацевтического препарата по п. 6 для лечения болезни, выбранной из:

a. метаболического синдрома;

b. нарушения уровня глюкозы в крови и метаболизма липидов на ранней стадии метаболического синдрома.

10. Применение фармацевтического препарата по п. 6 для обеспечения одного или более из следующих эффектов: снижения уровня глюкозы в крови, снижения уровня инсулина в крови, улучшения толерантности к глюкозе по результату перорального теста, снижения уровня гликированного гемоглобина (HbAlc), повышения индекса чувствительности к инсулину, улучшения состояния при инсулинорезистентности, снижения уровня триглицеридов в крови, снижения уровня общего холестерина и снижения кровяного давления.