Данное изобретение относится к способу управления лечением антибиотиками, стратификации и/или контроля у пациента, страдающего от инфекционного заболевания и получающего лечение одним или большим количеством антибиотических агентов. В частности, указанный способ включает в себя взятие первого образца у указанного пациента, взятие второго образца у указанного пациента после взятия первого образца и начало лечения антибиотиками, определение уровней прокальцитонина (ПКТ) или его фрагмента(ов) в первом и втором образце, и определение уровня проадреномедуллина (проАДМ) или его фрагмента(ов) по меньшей мере во втором образце, причем уровни ПКТ или его фрагмента(ов) в указанных первом и втором образцах, и уровень проАДМ или фрагмента(ов) во втором образце указывают на необходимость изменения лечения одним или большим количеством антибиотических агентов. В предпочтительном варианте осуществления изобретения, способ включает в себя дополнительное определение уровня проАДМ или его фрагмента(ов) в первом и втором образцах. В предпочтительном варианте осуществления изобретения, изменения в уровнях проАДМ и ПКТ между первым и вторым образцами указывают на необходимость изменения или продления лечения антибиотиками. Кроме того, данное изобретение также относится к набору для осуществления способа согласно данному изобретению.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Несмотря на значительные улучшения диагностических и профилактических мер, частота сепсиса продолжает быстро увеличиваться у госпитализированных пациентов (1), при этом уровень смертности колеблется от 10% до 54%, в зависимости от степени тяжести заболевания, используемого определения дисфункции органов, и заболеваемости по конкретной стране (2, 3). Поэтому ранняя и точная оценка как инфекционной нагрузки, так и тяжести заболевания с точки зрения общего патофизиологического ответа хозяина, имеет решающее значение на ранних стадиях сепсиса, чтобы принимать быстрые и верные решения относительно диагностического тестирования и стратегий лечения, также как и на более позднем этапе, чтобы верноосуществлять ведение пациентов, мониторинг лечения, решения о выписке при наличии клинического выздоровления.
Поэтому удивительно, что в настоящее время не существует золотого стандарта для диагностики сепсиса (4). Использование прокальцитонина (ПКТ) частично покрыло эту неудовлетворенную потребность в отношении оценки инфекционной нагрузки данными наблюдений и вмешательств в области назначения антибиотиков (5-7). Впрочем, точный показатель тяжести заболевания пока не был выявлен.
Таким образом, были предложены многочисленные биомаркеры и клинические показатели, включая использование показателей тяжести случаев, таких как динамическая оценка органной недостаточности (SOFA), оценка критических состояний и хронических заболеваний (APACHE) II, и упрощенная оценка критических состояний (SAPS) II, однако они редко рассчитываются на ежедневной основе в обычном порядке из-за относительно высокой сложности и требований к временным ресурсам, связанным с каждым показателем. Использование новых биомаркеров может удовлетворить эту неудовлетворенную клиническую потребность, однако немногие, если вобще таковые имеются, успешно применяют это в общей клинической практике (8).
Из этих биомаркеров серединный фрагмент про-адреномедуллина (СФ-проАДМ) - пептид, производимый множеством тканей для стабилизации микроциркуляции и защиты от проницаемости эндотелия и последующей недостаточности органов (9-16) - продемонстрировал значительную перспективу, особенно в областях изучения сепсиса (17), инфекции нижних дыхательных путей (18-21), трансплантации легких (22) и торакальной хирургии (23). Действительно, широко признано, что эндотелий и микроциркуляция играют значительную роль в патофизиологическом ответе хозяина на сепсис (24, 25), при этом регуляция и распределение кровотока в каждом органе имеют большое значение (25), и, следовательно, могут обеспечить альтернативный индикатор относительно тяжести общего ответа хозяина по сравнению с оценками дисфункции отдельных органов.
Поэтому в данном изобретении используется ряд биомаркеров (ПКТ, лактат, С-реактивный белок, СФ-проАДМ) и клинических оценок (SOFA, APACHE II и SAPS II), чтобы (i) провести точную оценку тяжести заболевания в пределах малого промежутка времени после постановки диагноза, например, в течение 24 часов после постановки диагноза и в течение первых десяти дней терапии в ОИТ (отделении интенсивной терапии), (ii) выявить пациентов низкого риска, которые пригодны к ранней выписке из ОИТ в отделение интенсивного ухода, и (iii) выявить пациентов, которые, несмотря на снижение инфекционных нагрузок, все еще имеют высокий или повышенный риск смертности или других нежелательных явлений, и которым могут потребоваться срочные дополнительные диагностические и терапевтические вмешательства.
Соответственно, СФ-проАДМ может использоваться в качестве инструмента для выявления пациентов с высокой степенью тяжести заболевания, которым могут потребоваться альтернативные диагностические и терапевтические вмешательства, такие как изменение в лечение антибиотиками, и пациентов с низкой степенью тяжести заболевания, которые могут потенциально быть пригодными к раннему переводу из ОИТ в сочетании с отсутствием ОИТ-специфической терапии и/или продолжением лечения теми же антибиотическими агентами.
В области лечения пациентов, страдающих от инфекционного заболевания, таких как пациентов с сепсисом, существует потребность в дополнительных средствах для мониторинга терапии после начала лечения, а также в средствах для управления лечением антибиотиками, стратификации и/или контроля.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
В свете трудностей в предшествующем уровне техники, техническая проблема, лежащая в основе данного изобретения, заключается в предоставлении средств для мониторинга терапии у пациента, страдающего инфекционным заболеванием, или у пациента с сепсисом, который получает лечение антибиотиками, а также средств для управления лечением антибиотиками, стратификации и/или контроля, в частности, в течение короткого периода времени после начала лечения.
Поэтому данное изобретение направлено на обеспечение способа, набора и дополнительных средств для мониторинга терапии пациентов, страдающих от инфекционного заболевания, включая средства для управления лечением антибиотиками, стратификации и/или контроля, а также средств для прогнозирования, оценки риска и/или стратификации риска последующего нежелательного явления со здоровьем у такого пациента на основе уровней проадреномедуллина (проАДМ), определенных в образце, полученном у пациента. Таким образом, одним объектом изобретения является использование биомаркера или комбинации биомаркеров для проведения различий между тяжелобольными пациентами и/или пациентами, страдающими от инфекционного заболевания или сепсиса, которые прошли или проходят лечение, в частности лечение антибиотиками, которые имеют высокий уровень риска нежелательного явления, и тяжелобольными пациентами и/или пациентами, страдающими от инфекционного заболевания или сепсиса, которые имеют низкий риск нежелательного явления.
Решение технической проблемы согласно данному изобретению представлено в независимых пунктах формулы изобретения. Предпочтительные варианты осуществления изобретения представлены в зависимых пунктах формулы изобретения. Данное изобретение относится к способу управления лечением антибиотиками, стратификации и/или контроля у пациента, страдающего от инфекционного заболевания и получающего лечение одним или большим количеством антибиотических агентов, включающему в себя
- взятие первого образца у указанного пациента,
- взятие второго образца у указанного пациента в момент времени после взятия первого образца и после начала лечения антибиотиками, определение уровней прокальцитонина (ПКТ) или его фрагментов в первом и втором образце, и
- определение уровня проАДМ или его фрагмента(ов) по меньшей мере во втором образце,
- причем уровни ПКТ или его фрагмента(ов) в указанных первом и втором образцах и уровень проАДМ или его фрагмента(ов) во втором образце указывают на то, требуется ли изменение в лечении одним или большим количеством антибиотиков.
В предпочтительном варианте осуществления способа управления лечением антибиотиками, стратификации и/или контроля у пациента, страдающего от инфекционного заболевания и получающего лечение одним или большим количеством антибиотических агентов, описанных в данном документе, первый образец берут до, в момент или после определения симптомов инфекционного заболевания у указанного пациента.
Пациентам способа согласно данному изобретению уже был поставлен диагноз «инфекционное заболевание», и они уже получают лечение антибиотиками. Поэтому способ согласно данному изобретению может быть использован для мониторинга успеха начатого лечения антибиотиками с помощью соответствующего одного или большего количества антибиотических агентов. Измеренные уровни ПКТ или его фрагментов, и проАДМ или его фрагментов указывают на то, требуется ли изменение в продолжающемся лечении антибиотиками. Другими словами, уровни маркеров ПКТ или его фрагментов и проАДМ или его фрагментов могут быть использованы в качестве индикаторов вероятности успеха соответствующего лечения антибиотиками, и так можно решить, следует ли продолжать лечение, поскольку, вероятно, оно работает/улучшает состояние здоровья пациента, или его нужно менять. В контексте данного изобретения, изменение в лечении пациента антибиотиками может включать в себя изменение дозы, пути введения или схемы введения, или других параметров лечения антибиотиками, в то время как измененное лечение может по-прежнему включать в себя один и тот же или большее количество антибиотических агентов, которые были использованы изначально. Кроме того, изменение в лечении антибиотиками может также относиться к изменению одного или большего количества антибиотических агентов, применяемых для лечения пациента. Следовательно, изменение может относиться к добавлению дополнительного антибиотика или к замене одного или большего количества антибиотических агентов одним или большим количеством других агентов.
В некоторых вариантах осуществления, управление лечением антибиотиками, стратификация и/или контроль предпочтительно включают в себя прогноз успеха или эффективности проводимого лечения антибиотиками, в том числе в отношении вероятности будущего нежелательного явления.
Врачи или медицинский персонал, которые лечат пациентов, страдающих от инфекционных заболеваний и которые получают лечение антибиотиками, могут использовать способ согласно данному изобретению, предпочтительно в условиях больницы, например, по месту оказания медицинской помощи, или в отделении интенсивной терапии (ОИТ). Этот способ очень полезен для мониторинга эффекта терапии, которая была начата у пациента с инфекционным заболеванием, и может использоваться для оценки того, является ли пациент, подвергаемый лечению, пациентом высокого риска, который должен находиться под интенсивным медицинским наблюдением, при этом лечение антибиотиками может быть изменено, или того, что пациент является пациентом с низким риском со стабильным или даже улучшающимся состоянием здоровья, которое может не требовать изменения лечения антибиотиками, возможно, потому, что начатое лечение успешно улучшает состояние пациента. Первоначальное лечение антибиотиками пациентов, страдающих от инфекционных заболеваний, может оказывать прямое влияние на вероятность возникновения нежелательных явлений со здоровьем у пациента. Таким образом, оценка риска/прогноз будущего нежелательного явления обеспечивает обратную связь в отношении эффективности начатой терапии.
Вероятность возникновения последующего нежелательного явления можно оценить при сравнении уровня ПКТ или его фрагментов и/или уровня проАДМ или его фрагментов в первом и/или втором образце с контрольным уровнем (например, пороговой величиной или пороговым значением и/или средним значением по группе), при этом контрольный уровень может соответствовать проАДМ или его фрагментам, и/или ПКТ или его фрагментам у здоровых пациентов или у пациентов, у которых диагностировано инфекционное заболевание.
Соответственно, способ согласно данному изобретению может помочь в прогнозировании результата лечения антибиотиками и/или вероятности последующего появления проблем со здоровьем у пациента. Это означает, что способ согласно данному изобретению способен разделять пациентов с высоким риском, которые с большей вероятностью будут страдать от осложнений, или чье состояние станет более тяжелым в будущем, несмотря на продолжающуюся антибактериальную терапию, и пациентов с низким риском, состояние здоровья которых является стабильным или даже улучшается, так что не ожидается, что они будут страдать от побочных эффектов, таких как смерть пациента или ухудшение клинических симптомов или физических показателей пациента, которые могут потребовать определенных терапевтических мер. Особое преимущество способа согласно данному изобретению состоит в том, что пациент с инфекционным заболеванием, который был определен как пациент с низким риском с помощью способа согласно данному изобретению, который не требует изменений в антибактериальной терапии или, по меньшей мере, никаких изменений в одном или большем количестве антибиотиков, мог бы быть быстрее выписаны из ОИТ. Кроме того, для пациентов низкого риска интенсивность и/или частота наблюдения за состоянием здоровья пациента может быть уменьшена. Соответственно, больница или другое медицинское учреждение, отвечающее за пациента, может более эффективно решать, какие пациенты нуждаются в интенсивной медицинской помощи и наблюдении. Следовательно, соответствующая больница или учреждение может, например, более эффективно выделять места в отделениях интенсивной терапии для пациентов высокого риска. Это приведет к улучшению медицинского обслуживания пациентов высокого риска, поскольку медицинский персонал может сосредоточить внимание на таких пациентах, в то время как пациенты с низким риском могут быть выписаны из отделения интенсивной терапии. Это также привело бы к значительным выгодам в виде избежания затрат на ненужные меры, которые в противном случае применялись бы к пациентам низкого риска.
В предпочтительных вариантах осуществления изобретения, указанные уровни ПКТ или его фрагмента(ов) в указанных первом и втором образцах, и уровень проАДМ или его фрагмента(ов) во втором образце указывают на последующее нежелательное явление со здоровьем в указанного пациента в течение 28 дней после постановки диагноза и начала лечения. В дополнительных предпочтительных вариантах осуществления изобретения, указанные уровни ПКТ или его фрагмента(ов) в указанных первом и втором образцах, и уровень проАДМ или его фрагмента(ов) во втором образце указывают на последующее нежелательное явление со здоровьем в указанного пациента в течение 90 дней после постановки диагноза и начала лечения. Предпочтительный вариант осуществления изобретения относится к способу управления лечением антибиотиками, стратификации и/или контроля у пациента, страдающего от инфекционного заболевания и получающего лечение одним или большим количеством антибиотических агентов, причем способ включает в себя
- взятие первого образца у указанного пациента при определении симптомов инфекционного заболевания у указанного пациента,
- взятие второго образца у указанного пациента после первоначального определения указанных симптомов и начала антибактериального лечения,
- определение уровней прокальцитонина (ПКТ) или его фрагментов в первом и втором образце, и
- определение уровня проАДМ или его фрагмента(ов) по меньшей мере во втором образце,
- причем уровни ПКТ или его фрагмента(ов) в указанных первом и втором образцах и уровень проАДМ или его фрагмента(ов) во втором образце указывают на то, требуется ли изменение в лечении одним или большим количеством антибиотических агентов.
Получение при определении симптома инфекционного заболевания относится к получению вскоре после определения симптомов инфекционного заболевания и может также упоминаться как момент времени для определения симптомов инфекционного заболевания.
Момент времени, когда пациенты были диагностированы как находящиеся в критическом состоянии, или когда определены симптомы инфекционного заболевания и начаты первые меры лечения, определяется как «момент времени 0» или первый образец, который может быть контрольным для момента времени получения последующего второго образца. Если диагноз пациента или определение симптомов инфекционного заболевания и начало лечения не происходят одновременно, момент времени 0 является моментом времени, когда имеет место более позднее из двух событий - постановка диагноза/определения симптомов и начало лечения. Как правило, постановка диагноза тяжелобольным пациентам и/или определение симптомов инфекционного заболевания немедленно следуют за или сопутствуют началу терапии. Первый образец обычно берут в это время или до этого.
Было совершенно неожиданно, что уровень проАДМ или его фрагментов в более позднем образце из пациента может предоставить критическую информацию об успехе проводимого лечения антибиотиками и/или вероятности возникновения последующего нежелательного явления со здоровьем у указанных пациентов. Не было никаких предпосылок к тому, что одно измерение проАДМ или его фрагментов после диагностики/определения симптомов и начала лечения пациента, страдающего от инфекционного заболевания, могло бы предоставить такую важную информацию относительно вероятности успеха текущего лечения и прогноза состояние здоровья пациента.
Особенно эффективно объединять определение проАДМ или его фрагментов (во втором образце) с определением ПКТ или его фрагментов в более раннем образце (первом образце), который взяли у указанного пациента и который может использоваться для постановки диагноза указанному пациенту, страдающему от инфекционного заболевания, в момент времени 0, и определением уровня ПКТ или его фрагментов во втором образце, взятом в определенный момент времени после постановки диагноза/определения симптомов и начала лечения, что также предпочтительно является тем же моментом времени, когда определяют проАДМ или его фрагменты.
Это позволяет определить разницу между уровнем ПКТ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с уровнем ПКТ или его фрагмента(ов) в первом образце. Как видно из данных ниже, определение разницы между уровнем ПКТ или его фрагментов во втором образце по сравнению с первым образцом дает дополнительную информацию помимо информации, полученной из уровней проАДМ или его фрагментов во втором образце. Исходя из этой объединенной информации можно с большей вероятностью предсказать, будет ли проводимое лечение антибиотиками успешным в отношении стабилизации или улучшения состояния здоровья пациента.
Это является неожиданным открытием, поскольку биомаркеры сепсиса обычно не синергичны и не дополняют друг друга, а представляют собой просто альтернативные диагностические маркеры.
Комбинированное определение проАДМ или его фрагментов с определением ПКТ или его фрагментов, будь то в одном и том же образце или в образцах, полученных в разные моменты времени, обеспечивает синергетический эффект в отношении точности и надежности определения риска последующего нежелательного явления. Эти синергетические эффекты существуют для комбинированной оценки проАДМ или его фрагментов с другими маркерами или клиническими оценками, такими как лактат, СРБ, SOFA, SAPS II, APACHE II, или другими клиническими оценками. В предпочтительном варианте осуществления данного изобретения, второй образец берут у указанного пациента в течение 30 минут после определения симптомов инфекционного заболевания и начала лечения антибиотиками или, по меньшей мере, через 30 минут, 1 час, 2 часа, 6 часов, 12 часов, 24 часа, 4 дня, 7 дней или 10 дней после постановки диагноза и начала лечения антибиотиками. В других вариантах осуществления, второй образец берут у указанного пациента через 12-36 часов и/или 3-5 дней после определения симптомов инфекционного заболевания и начала лечения антибиотиками.
В предпочтительных вариантах осуществления способа согласно данному изобретению, указанный образец берут у указанного пациента около через 30 минут, 1 час, 2 часа, 3 часа, 4 часа, 5 часов, 6 часов, 7 часов, 8 часов, 9 часов, 10 часов, 11 часов, 12 часов, 14 часов, 16 часов, 18 часов, 20 часов, 22 часа, 24 часа, 30 часов, 36 часов, 42 часа, 48 часов, 60 часов, 72 часа, 84 часа, 4 дня, 5 дней, 6 дней, 7 дней, 8 дней, 9 дней или 10 дней после постановки диагноза и начала лечения антибиотиками. В других вариантах осуществления, второй образец берут в моменты времени после постановки указанного диагноза и начала лечения антибиотиками от 30 минут до 12 часов, 12-36 часов, 3-5 дней, 7-14 дней, 8-12 дней или 9-11 дней.
Диапазоны между любыми вышеуказанными значениями могут использоваться для определения момента взятия образца.
Согласно предпочтительному варианту осуществления данного изобретения, способ включает в себя дополнительное определение уровня проАДМ или его фрагмента(ов) в первом образце.
Тот факт, что уровень проАДМ или его фрагментов в период времени, такой малый как около 30 минут после определения симптомов инфекционного заболевания и начала лечения, может предоставить такую информацию, был совершенно неожиданным.
Определяя уровень проАДМ или его фрагментов в первом и во втором образце, можно определить разницу в уровне проАДМ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с уровнем проАДМ или его фрагмента(ов) в первом образце. Это позволяет определить изменение уровня проАДМ в течение курса лечения антибиотиками.
Было неожиданно то, что определение изменения уровней проАДМ или его фрагментов с момента установления диагноза/определения симптомов инфекционного заболевания и начала лечения до более позднего момента времени может предоставить дополнительную информацию в отношении успеха лечение антибиотиками и/или возникновение в будущем нежелательного явления со здоровьем у пациента. Большим преимуществом этого варианта осуществления данного изобретения является то, что тот же образец, который используется для определения уровня ПКТ или его фрагментов в момент времени 0, также можно использовать для определения исходного уровня проАДМ или его фрагментов, которые могут сравнивать с уровнем проАДМ или его фрагментов в более поздний момент времени после диагностики и начала лечения. Определяя изменение уровня проАДМ или его фрагментов в ходе лечения пациента, можно дополнительно повысить точность прогнозирования успеха лечения антибиотиками и/или возникновения нежелательного явления со здоровьем у пациента.
В предпочтительном варианте осуществления данного изобретения, повышенный уровень проАДМ или его фрагмента (фрагментов) во втором образце по сравнению с первым образцом указывает на необходимость изменения одного или большего количества антибиотиков.
Согласно данному изобретению, термин «указывает» в контексте «указывает на то, что требуется изменение одного или большего количества антибиотиков», предназначен для измерения вероятности успеха продолжающегося лечения антибиотиками с помощью соответствующего одного или большего количества антибиотиков. Предпочтительно, «указание» на требуемое изменение одного или большего количества антибиотиков предназначено для обозначения повышенной вероятности того, что продолжающаяся лечение антибиотиками с использованием одного или большего количества антибиотиков не будет успешной для улучшения или стабилизации состояния здоровья пациент. Следовательно, изменение антибиотических агентов должно рассматриваться для предотвращения возникновения побочных эффектов у пациента.
В контексте данного изобретения, указание на необходимость изменения одного или большего количества антибиотических агентов, используемых в лечение антибиотиками пациента, страдающего от инфекционного заболевания, связано с повышенной вероятностью возникновения в будущем нежелательного явления со здоровьем у пациента. Указание на требуемое изменение в одном или большем количестве необходимых антибиотических агентов предназначено для оценки эффективности лечения антибиотиками и, как правило, не должно толковаться как ограничивающее, в плане однозначного указания на абсолютный успех или неудачу лечения антибиотиками.
Принимая во внимание вышесказанное, определение уровней тяжести по уровням проАДМ и ПКТ тем не менее очень надежно в отношении определения того, требуется ли изменение антибиотика при использовании пороговых значений, раскрытых в данном документе, так что оценка риска, основанная на оценке последующего нежелательного явления, надежно определяет подходящее действие медицинского работника.
Неожиданно то, что исходя из изменения уровня проАДМ или его фрагментов можно уверенно прогнозировать вероятность успеха продолжающегося лечения антибиотиками и/или возникновение нежелательного явления со здоровьем у пациента. Повышение уровня или уровня тяжести проАДМ или его фрагментов с момента определения симптомов инфекционного заболевания и начала лечения указывает на то, что может потребоваться изменение одного или большего количества антибиотических агентов, возможно потому, что вероятно, что возникнет нежелательное явление. Соответственно, исходя из изменения проАДМ или его фрагментов в течение курса лечения врач может решить, следует ли изменить или модифицировать лечение пациента или придерживаться первоначального лечения.
В контексте данного изобретения, предпочтительно, чтобы пациент был диагностирован как страдающий от сепсиса и/или септического шока. В свете данных, представленных в данном документе, прогностическая сила проАДМ в образцах этих групп пациентов является особенно точной в отношение прогнозирования вероятности нежелательного явления у этих пациентов и указании на то, требуется ли изменение в продолжающемся лечении антибиотиками.
Кроме того, способ согласно данному изобретению предпочтительно включает в себя определение уровня СФ-проАДМ. Использование определения СФ-проАДМ является предпочтительным для любого предложенного варианта осуществления, описанного в данном документе, и может рассматриваться, соответственно, в контексте каждого варианта осуществления. В предпочтительных вариантах осуществления, «фрагмент АДМ» можно рассматривать как СФ-проАДМ.
В предпочтительном варианте осуществления способа, описанного в данном документе,
- повышенный уровень ПКТ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с первым образцом, и
- уровень средней или высокой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) во втором образце указывают на необходимость изменения одного или большего количества антибиотических агентов,
- при этом уровень средней тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) составляет выше 4 нмоль/л, предпочтительно выше 3 нмоль/л, более предпочтительно выше 2,7 нмоль/л, и ниже 6,5 нмоль/л, предпочтительно ниже 6,95 нмоль/л, более предпочтительно ниже 10,9 нмоль/л, и
- уровень высокой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) составляет выше 6,5 нмоль/л, предпочтительно выше 6,95 нмоль/л, более предпочтительно выше 10,9 нмоль/л.
В предпочтительном варианте осуществления способа, описанного в данном документе,
- более низкий уровень ПКТ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с первым образцом, и
- уровень высокой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) во втором образце, или повысившийся уровень тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с первым образцом, например повышение с уровня низкой тяжести до уровня средней тяжести или уровня высокой тяжести, или с уровня средней тяжести до уровня высокой тяжести,
- указывают на необходимость изменения одного или большего количества антибиотических агентов,
- при этом уровень низкой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) составляет ниже 4 нмоль/л, предпочтительно ниже 3 нмоль/л, более предпочтительно ниже 2,7 нмоль/л,
- уровень средней тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) составляет выше 4 нмоль/л, предпочтительно выше 3 нмоль/л, более предпочтительно выше 2,7 нмоль/л, и ниже 6,5 нмоль/л, предпочтительно ниже 6,95 нмоль/л, более предпочтительно ниже 10,9 нмоль/л, и
- уровень высокой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) составляет выше 6,5 нмоль/л, предпочтительно выше 6,95 нмоль/л, более предпочтительно выше 10,9 нмоль/л.
Было совершенно неожиданно то, что снижение уровня ПКТ со дня определения симптомов и начала лечения до более позднего момента времени после начала лечения может указывать на необходимость изменения антибиотических агентов, используемых в лечение антибиотиками пациента. В частности, этот повышенный риск является очевидным, когда определяют уровень высокой тяжести проАДМ или его фрагментов. Считается, что ПКТ является маркером инфекционных заболеваний, таких как сепсис. Соответственно, считается, что снижение значений ПКТ в ходе лечения указывает на улучшение состояния здоровья пациента. Однако, как раскрыто в данном документе, стало очевидным, что, несмотря на снижение значения ПКТ, пациент подвергается риску возникновения в будущем нежелательного явления, если уровень проАДМ или его фрагментов в более поздний момент времени является уровнем высокой тяжести, или уровень тяжести проАДМ или его фрагментов увеличивается в течение курса лечения антибиотиками. Соответственно, лечащий врач может скорректировать лечение такого пациента, которого бы не идентифицировали как пациента высокого риска, без определения проАДМ или его фрагментов.
Было совершенно неожиданно то, что уровень проАДМ или его фрагментов может коррелировать с требованием изменения одного или большего количества антибиотических агентов, используемых в лечении антибиотиками. Уровни проАДМ в образцах от пациентов с инфекционными заболеваниями согласно данному изобретению предпочтительно могут быть обозначены 3-мя различными уровнями тяжести по уровням проАДМ. Высокие уровни проАДМ указывают на уровень высокой тяжести, средние уровни указывают на уровень средней тяжести, а низкие уровни указывают на уровни низкой тяжести. Соответствующие концентрации, которые определяют пороговые значения для соответствующих уровней тяжести, зависят от множества параметров, таких как момент взятия образца после постановки диагноза и начала лечения пациента способом согласно данному изобретению, и способа, используемого для определения уровня проАДМ или его фрагментов в указанном образце.
Пороговые значения, раскрытые в данном документе, предпочтительно относятся к измерениям уровня белка проАДМ или его фрагментов в образце плазмы, взятом у пациента, посредством анализа Thermo Scientific BRAHMS KRYPTOR. Соответственно, значения, раскрытые в данном документе, могут варьировать в некоторой степени в зависимости от используемого способа обнаружения/измерения, и конкретные значения, раскрытые в данном документе, предназначены также для охвата соответствующих значений, определенных другими способами.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, уровень низкой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) находиться ниже порогового значения в диапазоне 1,5 нмоль/л и 4 нмоль/л. Любое значение в этих диапазонах может рассматриваться как подходящее пороговое значение для уровней низкой тяжести проАДМ или его фрагментов. Например, 1,5, 1,55, 1,6, 1,65, 1,7, 1,75, 1,8, 1,85, 1,9, 1,95, 2,0, 2,05, 2,1, 2,15, 2,2, 2,25, 2,3, 2,35, 2,4, 2,45, 2,5, 2,55, 2,6, 2,65, 2,7, 2,75, 2,8, 2,85, 2,9, 2,95, 3,0, 3,05, 3,1, 3,15, 3,2, 3,25, 3,3, 3,35, 3,4, 3,45, 3,5, 3,55, 3,6, 3,65, 3,7, 3,75, 3,8, 3,85, 3,9 3,95, 4,0 нмоль/л. В вариантах осуществления изобретения, уровень высокой тяжести проАДМ или фрагмента(ов) превышает пороговое значение в диапазоне от 6,5 нмоль/л до 12 нмоль/л. Любое значение в этих диапазонах может рассматриваться как подходящее пороговое значение для уровней высокой тяжести проАДМ или его фрагментов. Например, 6,5, 6,55, 6,6, 6,65, 6,7, 6,75, 6,8, 6,85, 6,9, 6,95, 7,0, 7,05, 7,1, 7,15, 7,2, 7,25, 7,3, 7,35, 7,4, 7,45, 7,5, 7,55, 7,6, 7,65, 7,7, 7,75, 7,8, 7,85, 7,9, 7,95, 8,0, 8,05, 8,1, 8,15, 8,2, 8,25, 8,3, 8,35, 8,4, 8,45, 8,5, 8,55, 8,6, 8,65, 8,7, 8,75, 8,8, 8,85, 8,9, 8,95, 9,0, 9,05, 9,1, 9,15, 9,2, 9,25, 9,3, 9,35, 9,4, 9,45, 9,5, 9,55, 9,6, 9,65, 9,7, 9,75, 9,8, 9,85, 9,9, 9,95, 10,0, 10,05, 10,1, 10,15, 10,2, 10,25, 10,3, 10,35, 10,4, 10,45, 10,5, 10,55, 10,6, 10,65, 10,7, 10,75, 10,8, 10,85, 10,9, 10,95, 11,0, 11,05, 11,1, 11,15, 11,2, 11,25, 11,3, 11,35, 11,4 11,45, 11,5, 11,55, 11,6, 11,65, 11,7, 11,75, 11,8, 11,85, 11,9, 11,95, 12,0 нмоль/л.
Все пороговые значения, раскрытые в данном документе, относящиеся к уровню маркера или биомаркера, такого как проАДМ или ПКТ, следует понимать как «составляющие или превышающие» определенную пороговую величину или «составляющие или ниже» определенной пороговой величины. Например, вариант осуществления, относящийся к уровню проАДМ или его фрагмента(ов) ниже 4 нмоль/л, предпочтительно ниже 3 нмоль/л, более предпочтительно ниже 2,7 нмоль/л, следует понимать как относящийся к уровню проАДМ или его фрагмента(ов) составляющему или ниже 4 нмоль/л, предпочтительно составляющему или ниже 3 нмоль/л, более предпочтительно составляющему или ниже 2,7 нмоль/л. И наоборот, вариант осуществления, относящийся к уровню проАДМ или его фрагмента(ов) выше 6,5 нмоль/л, предпочтительно выше 6,95 нмоль/л, более предпочтительно выше 10,9 нмоль/л, следует понимать как относящийся к уровню проАДМ или его фрагмента(ов) составляющему или выше 6,5 нмоль/л, предпочтительно составляющему или выше 6,95 нмоль/л, более предпочтительно составляющему или выше 10,9 нмоль/л. В вариантах осуществления, описанных в данном документе, уровни тяжести определяются предпочтительно по пороговыми значениями, которые представляют границы между уровнем низкой, средней или высокой тяжести. Любые варианты осуществления, которые предоставляют пороговые значения, следовательно, могут использовать формат единственного порогового значения в качестве границы между двумя уровнями тяжести, или единственного порогового уровня для каждого уровня тяжести.
В некоторых вариантах осуществления, пороговое значение уровня проАДМ между уровнем низкой и средней тяжести составляет:
2,7 нмоль/л ± 20% или 2,7 нмоль/л ± 15%, или ± 12%, ± 10%, ± 8%, или ± 5%,
и между уровнями средней и высокой тяжести:
10,9 нмоль/л ± 20% или 10,9 нмоль/л ± 15% или ± 12%, ± 10%, ± 8% или ± 5%.
Эти пороговые значения предпочтительно подходят для оценки уровня тяжести проАДМ в исходной точке, другими словами, в начале постановки диагноза и/или терапии и/или госпитализации.
В некоторых вариантах осуществления, пороговое значение проАДМ между уровнем низкой и средней тяжести составляет:
2,80 нмоль/л ± 20%, или 2,80 нмоль/л ± 15%, или ± 12%, ± 10%, ± 8%, или ± 5%,
и между уровнями средней и высокой тяжести:
9,5 нмоль/л ± 20%, или 9,5 нмоль/л ± 15%, или ± 12%, ± 10%, ± 8%, или ± 5%.
Эти пороговые значения предпочтительно подходят для оценки уровня тяжести проАДМ через 1 день, другими словами примерно через 24 часа от исходной точки, другими словами, примерно через 1 день после постановки диагноза и/или начала терапии и/или госпитализации. Например, в вариантах осуществления, где проАДМ измеряют через один день после начала терапии, могут использоваться пороговые значения для дня 1. Как видно из вышеизложенного, пороговое значение между средним и высоким уровнем несколько ниже, чем в исходной точке, то есть с течением времени даже несколько более низкие (но все еще относительно высокие) уровни связаны с высоким риском и классифицируются как уровень высокой тяжести. В некоторых вариантах осуществления, пороговое значение проАДМ между уровнями низкой и средней тяжести составляет:
2,80 нмоль/л ± 20%, или 2,80 нмоль/л ± 15%, или ± 12%, ± 10%, ± 8%, или ± 5%,
и между уровнями средней и высокой тяжести:
7,7 нмоль/л ± 20%, или 7,7 нмоль/л ± 15%, или ± 12%, ± 10%, ± 8%, или ± 5%,
Эти пороговые значения предпочтительно подходят для оценки уровня тяжести проАДМ через 4 дня, другими словами примерно спустя 4 дня от исходной точки, другими словами, примерно через 4 дня после постановки диагноза и/или начала терапии и/или госпитализации. Например, в вариантах осуществления, где проАДМ измеряют через 4 дня после начала терапии, могут использоваться пороговые значения для дня 4. Как видно из вышеизложенного, пороговое значение между средним и высоким уровнем несколько ниже, чем в исходной точке или в день 1, то есть с течением времени даже несколько более низкие (но все еще относительно высокие) уровни связаны с высоким риском и классифицируются как уровень высокой тяжести. В некоторых вариантах осуществления, пороговые уровни, которые должны использоваться в вариантах осуществления, описанных выше, могут корректироваться в соответствии с подходящим уровнем в зависимости от дня, когда выполняют измерение. Каждое из пороговых значений подвержено некоторой вариативности из-за общего отклонения, ожидаемого специалистом в данной области техники. Соответствующие пороговые уровни определяют исходя из обширных данных, как представлено ниже, но не предназначены для всех возможных вариантов осуществления в качестве окончательных или точных значений. При использовании сходного порогового значения, аналогичного приведенному, то есть в пределах ± 20%, ± 15%, ± 12%, ± 10%, ± 8% или ± 5%, как может определить специалист в данной области техники, можно ожидать аналогичных результатов.
Любой вариант осуществления, в котором указано ± 20% от заданного порогового значения, также может рассматриваться как раскрывающий ± 15%, ± 12%, ± 10%, ± 8% или ± 5%.
Любой вариант осуществления, в котором указывается конкретное пороговое значение для исходной точки, дня 1 или дня 4, также может рассматриваться как раскрытие соответствующих пороговых значений для других дней, например, вариант осуществления, описывающий исходное пороговое значение, может рассматриваться как относящийся к тому же варианту осуществления, в котором приводится пороговое значение для дня 1 или дня 4.
Согласно предпочтительному варианту осуществления способа согласно данному изобретению
- больше чем на 50% более низкий уровень ПКТ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с первым образцом, и
- уровень средней тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с уровнем низкой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) в первом образце, указывают на необходимость изменения одного или большего количества антибиотических агентов.
Было совершенно неожиданно то, что степень относительного изменения уровня ПКТ в первом образце ко второму образцу может составить дополнительную прогностическую ценность в отношении эффективности и вероятности успеха продолжающегося лечения антибиотиками. Как видно из данных ниже, снижение уровня ПКТ больше чем на 50% от момента времени 0 до момента взятия второго образца вместе с увеличением уровня тяжести проАДМ или его фрагментов с уровня низкой до высокой тяжести может быть связано с неудачным продолжающимся лечением антибиотиками. Соответственно, лечащий врач или медицинский персонал должны рассмотреть вопрос об изменении одного или большего количества используемых в данный момент антибиотических агентов. Это особенно неожиданно, поскольку даже сильное/резкое снижение уровней ПКТ больше чем на 50% может быть связано с неудачным лечением.
В предпочтительных вариантах осуществления способа согласно данному изобретению,
- меньше чем на 50% более низкий уровень ПКТ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с первым образцом, и
- уровень высокой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с уровнем средней тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) в первом образце, указывают на необходимость изменения одного или большего количества антибиотических агентов.
Удивительно, что снижение уровня ПКТ или его фрагментов меньше чем на 50% указывает на неудачное лечение антибиотиками, если оно связано с повышением уровня тяжести проАДМ или его фрагментов с уровня низкой или средней тяжести до уровня высокой тяжести.
Кроме того, в контексте способа данного вмешательства предпочтительно, чтобы повышенный уровень ПКТ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с первым образцом, и уровень средней или высокой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) во втором образце, указывали на необходимость изменения одного или большего количества антибиотических агентов.
Неожиданно, если уровни ПКТ увеличиваются в течение курса лечения антибиотиками, изменение используемых антибиотических агентов может быть назначено только в том случае, если уровень тяжести проАДМ или его фрагментов во втором образце является средним или высоким. В случае уровня низкой тяжести проАДМ, лицо, отвечающее за лечение антибиотиками, должно учитывать возможность того, что один или большее количество антибиотических агентов являются эффективными в стабилизации или улучшении состояния пациента, несмотря на повышение уровня ПКТ. Вместо этого следует рассмотреть возможность изменения дозы, пути введения или другой модификации лечения антибиотиками без изменения комбинации одного или большего количества используемых антибиотических агентов. Предпочтительно, первый и второй образцы способа согласно данному изобретению выбирают из группы, состоящей из образца крови, образца сыворотки, образца плазмы и/или образца мочи.
В одном варианте осуществления, изобретение дополнительно включает в себя информирование пациента о результатах способа диагностики, описанного в данном документе.
Дополнительные предпочтительные варианты осуществления способа согласно данному изобретению дополнительно включают в себя
- определение уровня по меньшей мере одного дополнительного биомаркера или его фрагмента(ов) в первом и втором образце, причем по меньшей мере один дополнительный биомаркер предпочтительно представляет собой лактат и/или С-реактивный белок,
- при этом уровни по меньшей мере одного дополнительного биомаркера в указанных первом и втором образцах и уровень проАДМ или его фрагмента(ов) во втором образце указывают на то, требуется ли изменение в продолжающемся лечении антибиотиками.
Предпочтительные варианты осуществления способа управления лечением антибиотиками, стратификации терапии и/или контроля у пациента, страдающего от инфекционного заболевания и получающего лечение антибиотиками, описанное в данном документе, дополнительно включают в себя
- определение, по меньшей мере, одной клинической оценки в момент взятия первого образца и в момент взятия второго образца, при этом, по меньшей мере, одна клиническая оценка предпочтительно представляет собой SOFA, APACHE II и/или SAPS II,
- при этом по меньшей мере одна клиническая оценка в моменты взятия указанных первого и второго образцов, и уровень проАДМ или его фрагмента(ов) во втором образце, указывают на то, требуется ли изменение в продолжающемся лечении антибиотиками.
В дополнительных вариантах осуществления способа, описанного в данном документе, способ дополнительно включает в себя молекулярный анализ образца из указанного пациента для выявления инфекции. Образец, используемый для молекулярного анализа для выявления инфекции, предпочтительно представляет собой образец крови. В предпочтительном варианте осуществления, молекулярный анализ представляет собой способ, направленный на обнаружение одной или большего количества биомолекул, производимых патогеном. Указанная одна или большее количество биомолекул могут представлять собой нуклеиновую кислоту, белок, сахар, углеводы, липид и/или их комбинацию, такую как гликозилированный белок, предпочтительно нуклеиновую кислоту. Указанная биомолекула предпочтительно является специфичной для одного или большего количества патогенов. Согласно предпочтительным вариантам осуществления, такие биомолекулы детектируют одним или большим количеством способов анализа биомолекул, выбранных из группы, включающей в себя способы амплификации нуклеиновых кислот, такие как ПНР, кПЦР, ОТ-ПЦР, кОТ-ПЦР, или изотермическая амплификация, масс-спектрометрию, обнаружение ферментативной активности и способы детекции на основе иммуноанализа. Дополнительные способы молекулярного анализа известны специалисту в данной области техники и включают в себя способ согласно данному изобретению.
Данное изобретение дополнительно относится к способу управления лечением антибиотиками, стратификации терапии и/или контроля у пациента, страдающего от инфекционного заболевания и получающего лечение антибиотиками, включающему в себя
- взятие первого образца у указанного пациента при определении симптомов инфекционного заболевания (момент времени 0) и взятие второго образца у указанного пациента после первоначального определения указанных симптомов и начала лечения,
- определение уровня по меньшей мере одного биомаркера или его фрагмента(ов) в первом и втором образце и/или определение по меньшей мере одной клинической оценки в момент взятия первого образца и в момент взятия второго образца, причем по меньшей мере один биомаркер представляет собой прокальцитонин (ПКТ), лактат и/или С-реактивный белок, и по меньшей мере одна клиническая оценка представляет собой SOFA, APACHE II и/или SAPS II,
- определение уровня проАДМ или его фрагмента(ов) по меньшей мере во втором образце,
- при этом изменение уровня по меньшей мере одного биомаркера и/или по меньшей мере одной клинической оценки между указанным первым и вторым образцом, и уровня проАДМ или его фрагмента(ов) во втором образце, указывают на то, требуется ли изменение в данный момент продолжающемся лечении антибиотиками.
Данное изобретение также относится к набору для осуществления способа управления лечением антибиотиками, стратификации и/или контроля терапии у пациента, страдающего от инфекционного заболевания, и получающего лечение антибиотиками, причем набор содержит
- реагенты для определения уровня проАДМ или его фрагмента(ов) и, необязательно, дополнительно для определения уровня ПКТ или его фрагмента(ов) в образце из субъекта, и
- данные по контролю, такие как контрольный уровень, соответствующий уровням тяжести по уровням проАДМ и, возможно, уровням ПКТ, причем указанные данные по контролю предпочтительно хранятся на машиночитаемом носителе и/или используются в форме исполняемого компьютером кода, сконфигурированного для сравнения определенных уровней проАДМ или его фрагмента(ов) и, необязательно, дополнительно определенных уровней ПКТ или его фрагмента(ов), с указанными данными по контролю.
Реагенты для определения уровня проАДМ или его фрагмента(ов) и, необязательно, для определения уровня ПКТ или его фрагмента(ов) предпочтительно выбирают из тех, которые необходимы для осуществления способа, например, антитела, нацеленные на проАДМ, подходящие метки, такие как флуоресцентные метки, предпочтительно две отдельные флуоресцентные метки, подходящие для применения в анализе KRYPTOR, пробирки для сбора образцов.
В одном варианте осуществления способа, описанного в данном документе, уровень проАДМ или его фрагмента(ов) и, необязательно, ПКТ или его фрагмента(ов) определяют с использованием способа, выбранного из группы, состоящей из: масс-спектрометрии (МС), люминесцентного иммуноанализа (ЛИА), радиоиммуноанализа (РИА), хемилюминесцентного и флуоресцентного иммуноанализов, ферментативного иммуноанализа (ФИА), иммуноферментных анализов (ИФА), анализов на основе массивов люминесцентных гранул, анализов на основе массивов магнитных гранул, анализов с белковыми микрочипами, анализов в быстрой форме, таких как, например, анализ иммунохроматографической полоской, анализ с редкоземельными криптатами, и автоматизированных систем/анализаторов.
Способ согласно данному изобретению, кроме того, может быть воплощен как гомогенный способ, в котором сэндвич-комплексы, образованные антителом/антителами и маркером, например, проАДМ или его фрагментом, который должен быть обнаружен, остаются суспендированными в жидкой фазе. В этом случае предпочтительно, чтобы при использовании двух антител оба антитела были помечены частями системы обнаружения, что приводит к созданию сигнала или инициации сигнала, если оба антитела интегрированы в один сэндвич.
Такие способы должны быть воплощены, в частности, в качестве способов усиления флуоресценции или обнаружения тушения флуоресценции. В частности, предпочтительный аспект относится к использованию детектирующих реагентов, которые должны использоваться попарно, таких как, например, те, которые описаны в US 4882733 A, ЕР-В 10180492 или ЕР-В 10539477, и приведены в предшествующем уровне техники. Таким образом, становятся возможными измерения, при которых обнаруживаются только продукты реакции, содержащие оба метящих компонента в одном иммунном комплексе непосредственно в реакционной смеси.
Например, такие технологии предлагаются под торговыми марками TRACE® (Time Resolved Amplified Cryptate Emission) или KRYPTOR®, реализуя принципы вышеупомянутых приложений. Поэтому в конкретных предпочтительных аспектах диагностическое устройство используется для осуществления предложенного в данном документе способа. Например, определяют уровень белка проАДМ или его фрагмента и/или уровень любого другого маркера предлагаемого в данном документе способа. В частности, в предпочтительных аспектах, диагностическое устройство представляет собой KRYPTOR®.
В одном варианте осуществления способа, описанного в данном документе, способ представляет собой иммуноанализ, и при этом анализ проводится в гомогенной фазе или в гетерогенной фазе.
В одном варианте осуществления способа, описанного в данном документе, первое антитело и второе антитело присутствуют как диспергированные в жидкой реакционной смеси, и при этом первый метящий компонент, который является частью системы мечения на основе флуоресцентного или хемилюминесцентного тушения или усиления, связан с первым антитело, а второй компонент мечения указанной системы мечения связан со вторым антителом, так что после связывания обеих антител с указанным проАДМ или его фрагментами, подлежащим(и) обнаружению, создается измеримый сигнал, который позволяет обнаруживать полученные сэндвич-комплексы в анализируемом растворе.
В одном варианте осуществления способа, описанного в данном документе, система мечения содержит редкоземельный криптат или хелат в комбинации с флуоресцентным или хемилюминесцентным красителем, в частности цианинового типа.
В одном варианте осуществления способа, описанного в данном документе, способ дополнительно включает в себя сравнение определенного уровня проАДМ или его фрагмента(ов) с контрольным уровнем, пороговым значением и/или средним значением для группы, соответствующей проАДМ или его фрагментов, у пациентов, которым был поставлен диагноз - тяжелобольные/страдающие от инфекционного заболевания и находящиеся на терапевтическом лечении, при этом указанное сравнение выполняется в процессоре компьютера с использованием исполняемого компьютером кода.
Способы согласно данному изобретению могут быть частично реализованы на компьютере. Например, этап сравнения обнаруженного уровня маркера, например, проАДМ или его фрагментов с контрольным уровнем может быть выполнен в компьютерной системе. В компьютерной системе определенный уровень маркера(ов) может быть скомбинирован с другими уровнями маркера и/или параметрами субъекта для вычисления оценки, которая является показательной для диагноза, прогноза, оценки риска и/или стратификации риска. Например, определенные значения могут быть введены (либо вручную медицинским работником, либо автоматически с устройства(ств), в котором был/были определены соответствующие уровни маркера) в компьютерную систему. Компьютерная система может находиться непосредственно в месте оказания медицинской помощи (например, ОИТ или ED) или в удаленном месте, подключенном через компьютерную сеть (например, через Интернет, или через специализированные медицинские облачные системы, которые могут быть дополнительно объединены с другими ИТ-системами или платформами, такими как больничные информационные системы (HIS)). Как правило, компьютерная система хранит значения (например, уровень маркера или параметры, такие как возраст, артериальное давление, вес, пол и т.д., или системы клинической оценки, такие как SOFA, qSOFA, BMI и т.д.) на машиночитаемом носителе и рассчитывает оценку на основе предварительно определенных и/или предварительно сохраненных контрольных уровней или контрольных значений. Полученная результирующая оценка будет отображаться и/или распечатываться для пользователя (обычно медицинским работником, таким как врач). В альтернативном варианте, или в дополнение, соответствующий прогноз, диагноз, оценка, руководство по лечению, руководство по ведению пациентов или стратификация будут отображаться и/или распечатываться для пользователя (как правило, медицинским работником, таким как врач).
В одном варианте осуществления изобретения, может использоваться программная система, в которой имеется алгоритм машинного обучения, предпочтительно для идентификации госпитализированных пациентов с риском сепсиса, тяжелого сепсиса и септического шока с использованием данных из электронных медицинских карт (ЭМК). Модель машинного обучения может быть обучена на классификаторе «случайный лес» с использованием данных ЭМК (таких как лабораторные показатели, экспрессия биомаркеров, показатели жизненно важных функций и демография) пациентов. Интеллекта, который дает компьютерам возможность изучать сложные шаблоны данных без прямого программирования, в отличие от более простых систем на основе правил. В более ранних исследованиях использовались данные электронных медицинских карт для запуска предупреждающих сигналов для выявления общего клинического ухудшения. В одном варианте осуществления изобретения, анализ уровней проАДМ может быть включен в соответствующее программное обеспечение для сравнения с существующими наборами данных, например, уровни проАДМ также могут обрабатываться в программе с алгоритмами машинного обучения, чтобы помочь в диагностике или прогнозировании возникновения нежелательного явления.
Комбинированное использование проАДМ или его фрагментов в сочетании с другим биомаркером, таким как ПКТ или СРБ, может быть реализовано либо в одном мультиплексном анализе, либо в двух отдельных анализах, проводимых на образце из пациента. Образец может относиться к одному и тому же образцу или к разным образцам. Анализ, используемый для обнаружения и определения проАДМ и, например, ПКТ, также может быть тем же или отличающимся, например, иммуноанализ может быть использован для определения одного из вышеуказанных маркеров. Более подробные описания подходящих анализов приведены ниже.
Пороговые значения и другие контрольные уровни проАДМ или его фрагментов у пациентов, которым поставлен диагноз - критически больные, и которые находятся на лечении, могут быть определены ранее описанными способами. Например, специалистам известны способы использования коэффициента вариации для оценки вариабельности количественных анализов, чтобы установить контрольные значения и/или пороговые значения (George F. Reed et al., Clin Diagn Lab Immunol. 2002; 9(6): 1235-1239).
Кроме того, может быть определена функциональная чувствительность анализа, чтобы обозначить статистически значимые значения для использования в качестве контрольных уровней или пороговых значений в соответствии с установленными методами. Лаборатории способны самостоятельно устанавливать функциональную чувствительность анализа с помощью клинически уместного протокола. «Функциональная чувствительность» может рассматриваться как концентрация, которая приводит к коэффициенту вариации (CV), составляющему 20% (или некоторому другому заранее определенному % CV), и, таким образом, является мерой точности анализа при низких уровнях аналита. Следовательно, CV представляет собой стандартизацию среднеквадратичного отклонения (SD), которая позволяет сравнивать оценки изменчивости независимо от величины концентрации аналита, по меньшей мере, по большей части рабочего диапазона анализа.
Кроме того, способы, основанные на анализе ROC, могут быть использованы для определения статистически значимых различий между двумя клиническими группами пациентов. Кривые-ROC (ROC - Receiver Operating Characteristic) измеряют эффективность сортировки подобранных вероятностей модели для сортировки уровней ответа. Кривые-ROC также могут помочь в установлении критических точек в диагностических тестах. Чем выше кривая от диагонали, тем лучше подбор. Если логистическое соответствие имеет большем чем два уровня ответа, оно создает обобщенную кривую ROC. На таком графике есть кривая для каждого уровня ответа, которая является кривой ROC этого уровня в сравнении со всеми остальными уровнями. Доступно программное обеспечение, позволяющее проводить такой анализ для установления подходящих контрольных уровней и пороговых значений, например, JMP 12, JMP 13, Statistical Discovery, от SAS.
Пороговые значения могут быть аналогичным образом определены для ПКТ. Квалифицированному специалисту доступна литература для определения соответствующего порогового значения, например Philipp Schuetz et al. (BMC Medicine. 2011; 9:107) описывают, что при пороговом значение 0,1 нг/мл, ПКТ обладает очень высокой чувствительностью в отношение исключения инфекции. Теренс Чан и соавт.(Expert Rev. Mol. Diagn.2011; 11(5), 487-496) описали, что такие показатели, как положительные и отрицательные коэффициенты вероятности, которые рассчитываются на основе чувствительности и специфичности, также полезны для оценки мощности диагностического теста. Значения обычно отображаются для множества пороговых значений (CV) в виде кривой ROC. Значение площади под кривой используется для определения наилучшего диагностически значимого CV. В этой литературе описаны вариации CV (пороговые значения, которые зависят от анализа и дизайна исследования) и подходящие способы для определения пороговых значений.
Средние значения по группе для проАДМ или его фрагментов также могут использоваться в качестве контрольных значений, например, средние значения по группе для проАДМ, при этом пациенты, которым поставлен диагноз «тяжелобольной», могут сравниваться с контрольной группой, при этом контрольная группа предпочтительно содержит больше чем 10, 20, 30, 40, 50 или больше субъектов. В одном варианте осуществления изобретения, пороговый уровень для ПКТ может быть значением в диапазоне от 0,01 до 100,00 нг/мл в образце сыворотки при использовании, например, анализа Luminex MAC Pix E-Bioscience или анализа BRAHMS PCT-Kryptor. В предпочтительном варианте осуществления, пороговый уровень ПКТ может находиться в диапазоне от 0,01 до 100, от 0,05 до 50, от 0,1 до 20 или от 0,1 до 2 нг/мл и наиболее предпочтительно от >0,05 до 0,5 нг/мл. Любое значение в этих диапазонах может рассматриваться как соответствующее пороговое значение. Например, могут быть использованы 0,01, 0,05, 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1,0, 1,1, 1,2, 1,3, 1,4, 1,5, 1,6, 1,7, 1,8, 1,9, 2,0, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95 или 100 нг/мл. В некоторых вариантах осуществления, уровни ПКТ для здоровых субъектов составляют примерно 0,05 нг/мл. Данное изобретение дополнительно относится к способам лечения по медицинским показаниям, описанным в данном документе, при этом группу пациентов, подлежащих лечению, идентифицируют, стратифицируют, наблюдают, прогнозируют, диагностируют или оценивают иным образом, с использованием способов, описанных в данном документе. Подходящие методики лечения для способов описаны в данном документе. Следовательно, данное изобретение особенно полезно для выявления пациентов с повышенным риском развития нежелательного явления, и начала профилактического лечения или лечения, снижающего риск, или начала лечения для устранения наличия любой указанной медицинской патологии, предпочтительно тех, которые обозначены как тяжелое заболевание.
Варианты осуществления изобретения, относящиеся к определению уровня проАДМ или его фрагмента(ов) в одном или большем количестве образцов тяжелобольных пациентов, таких как пациенты с сепсисом
Дополнительно, изобретение относится к способу мониторинга терапии, включающему в себя прогноз, оценку риска и/или стратификацию риска последующего нежелательного явления со здоровьем у пациента, включающему в себя
- получение образца указанного пациента, причем пациент был диагностирован как тяжелобольной, и было начато терапевтическое лечение, при этом образец был взят у пациента после постановки диагноза и начала лечения,
- определение уровня проАДМ или его фрагмента(ов) в указанном образце,
- при этом указанный уровень проАДМ или его фрагмента(ов) коррелирует с вероятностью последующего нежелательного явления со здоровьем у указанного пациента.
Пациенты способа согласно данному изобретению уже были диагностированы как тяжелобольные и уже начали получать лечение. Таким образом, способ согласно данному изобретению может быть использован для мониторинга успеха начатого лечения или терапии исходя из определения вероятности последующего нежелательного явления. Терапевтический мониторинг предпочтительно включает в себя прогнозирование нежелательного явления и/или стратификацию риска или оценку риска для пациента в отношении будущего нежелательного явления, причем эту оценку риска и определение указанного риска следует рассматривать как средство мониторинга начатой терапии.
В вариантах осуществления изобретения, термин «тяжелобольной» может использоваться взаимозаменяемо с «пациент, страдающий от инфекционного заболевания».
Использование проАДМ или его фрагментов в качестве одиночного параметра в вариантах осуществления данного изобретения выгодно по сравнению с использованием других одиночных параметров, таких как биомаркеры или клинические показатели, поскольку проАДМ более точен в прогнозировании побочного эффекта по сравнению с другими маркерами, такими как ПКТ, CRP, лактат, или клиническими оценками, такими как SOFA, SAPS II или APACHE II. В некоторых вариантах осуществления, данное изобретение включает в себя определение дополнительных параметров, таких как маркеры, биомаркеры, клинические оценки или тому подобное. В другом предпочтительном варианте осуществления данного изобретения, пациенту был поставлен диагноз с использованием по меньшей мере одного из биомаркеров - прокальцитонина (ПКТ), лактата и С-реактивного белка, и/или по меньшей мере одной из клинических оценок SOFA, APACHE II и SAPS II.
В одном варианте осуществления изобретения, тяжелобольной пациент является пациентом, у которого диагностировано инфекционное заболевание, пациентом, у которого диагностировано инфекционное заболевание и одна или большее количество существующих функциональных недостаточностей органов, пациентом с диагнозом сепсис, тяжелый сепсис или септический шок, и/или посттравматическим или послеоперационным пациентом. В свете данных, представленных в данном документе, прогностическая сила проАДМ в образцах этих групп пациентов является особенно точной в отношении прогнозирования вероятности нежелательного явления у этих пациентов.
В предпочтительных вариантах осуществления данного изобретения, нежелательным явлением со здоровьем у указанного пациента является смерть, предпочтительно смерть в течение 28-90 дней после постановки диагноза и лечения, новая инфекция, недостаточность органов и/или ухудшение клинических симптомов, требующих процедуры очистки очага, переливания компонентов крови, инфузии коллоидов, неотложной хирургии, инвазивной механической вентиляции легких, и/или замены почек или печени.
В предпочтительных вариантах осуществления изобретения, указанный уровень проАДМ или его фрагмента(ов) коррелирует с вероятностью последующего нежелательного явления со здоровьем у указанного пациента в течение 28 дней после постановки диагноза и начала лечения. В дополнительных предпочтительных вариантах осуществления изобретения, указанный уровень проАДМ или его фрагмента(ов) коррелирует с вероятностью последующего нежелательного явления со здоровьем у указанного пациента в течение 90 дней после постановки диагноза и начала лечения.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, лечение, получаемое пациентом, включает в себя одно или большее количество из: лечение антибиотиками, инвазивную механическую вентиляцию легких, неинвазивную механическую вентиляцию легких, заместительную почечную терапию, использование сосудосуживающих препаратов, инфузионную терапию, аферез (apheresis) и/или защиту органов.
В предпочтительных вариантах осуществления изобретения, образец выбирают из группы, состоящей из образца крови, образца сыворотки, образца плазмы и/или образца мочи.
Предпочтительно, способ осуществляют в некоторых вариантах осуществления путем определения уровня проАДМ или его фрагмента(ов), причем указанное определение проАДМ включает в себя определение уровня СФ-проАДМ в образце. Использование определения СФ-проАДМ является предпочтительным для любого предложенного варианта осуществления, описанного в данном документе, и может рассматриваться, соответственно, в контексте каждого варианта осуществления. В предпочтительных вариантах осуществления, «фрагмент АДМ» можно рассматривать как СФ-проАДМ. В дополнительном варианте осуществления изобретения, уровень проАДМ или его фрагмента(ов) коррелирует с вероятностью возникновения последующих проблем со здоровьем у указанного пациента. В предпочтительном варианте осуществления, уровень проАДМ или его фрагмента(ов) положительно коррелирует с вероятностью возникновения последующего нежелательного явления со здоровьем у указанного пациента. Другими словами, чем выше определяемый уровень проАДМ, тем выше вероятность возникновения последующего нежелательного явления.
Согласно предпочтительному варианту осуществления данного изобретения,
- уровень низкой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) указывает на отсутствие последующего нежелательного явления или указывает на низкий риск последующего нежелательного явления, причем уровень низкой тяжести составляет ниже 4 нмоль/л, предпочтительно ниже 3 нмоль/л, более предпочтительно ниже 2,7 нмоль/л, или
- уровень высокой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) указывает на последующее нежелательное явление или указывает на высокий риск последующего нежелательного явления, причем уровень высокой тяжести составляет выше 6,5 нмоль/л, предпочтительно выше 6,95 нмоль/л, более предпочтительно выше 10,9 нмоль/л, или
Согласно предпочтительному варианту осуществления данного изобретения,
- уровень проАДМ или его фрагмента(ов) ниже 4 нмоль/л, предпочтительно ниже 3 нмоль/л, более предпочтительно ниже 2,7 нмоль/л, указывает на отсутствие последующего нежелательного явления или указывает на низкий риск последующего нежелательного явления, или
- уровень проАДМ или его фрагмента(ов) выше 6,5 нмоль/л, предпочтительно выше 6,95 нмоль/л, более предпочтительно выше 10,9 нмоль/л, указывает на последующее нежелательное явление или указывает на высокий риск последующего нежелательного явления.
Согласно предпочтительному варианту осуществления данного изобретения,
- уровень низкой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) указывает на отсутствие последующего нежелательного явления, причем уровень низкой тяжести составляет ниже 2,7 нмоль/л, или
- уровень высокой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) указывает на последующее нежелательное явление, причем уровень высокой тяжести составляет выше 10,9 нмоль/л.
Этот вариант осуществления данного изобретения особенно полезен, когда уровни проАДМ или его фрагментов определяют в образце, который был взят в день постановки диагноза и начала лечения пациента, в частности, примерно через 30 минут после постановки диагноза и начала лечения. Это видно из анализа, приведенного в Примере 3.
Согласно предпочтительному варианту осуществления данного изобретения,
- уровень низкой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) указывает на отсутствие последующего нежелательного явления, причем уровень низкой тяжести составляет ниже 2,7 нмоль/л, или
- уровень высокой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) указывает на последующее нежелательное явление, причем уровень высокой тяжести составляет выше 10,9 нмоль/л,
- при этом уровни проАДМ или его фрагментов определяют в образце, который был взят в день постановки диагноза и начала лечения.
Согласно предпочтительному варианту осуществления данного изобретения,
- уровень низкой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) указывает на отсутствие последующего нежелательного явления, причем уровень низкой тяжести составляет ниже 2,8 нмоль/л, или
- уровень высокой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) указывает на последующее нежелательное явление, причем уровень высокой тяжести составляет выше 9,5 нмоль/л.
Этот вариант осуществления данного изобретения особенно полезен, когда уровни проАДМ или его фрагментов определяют в образце, который был взят 1 день спустя постановки диагноза и начала лечения пациента, как видно из Таблицы 12.
Согласно предпочтительному варианту осуществления данного изобретения,
- уровень низкой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) указывает на отсутствие последующего нежелательного явления, причем уровень низкой тяжести составляет ниже 2,8 нмоль/л, или
- уровень высокой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) указывает на последующее нежелательное явление, причем уровень высокой тяжести составляет выше 9,5 нмоль/л,
- при этом уровни проАДМ или его фрагментов определяют в образце, который был взят 1 день спустя постановки диагноза и начала лечения.
Согласно предпочтительному варианту осуществления данного изобретения,
- уровень низкой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) указывает на отсутствие последующего нежелательного явления, причем уровень низкой тяжести составляет ниже 2,25 нмоль/л.
Это пороговое значение для уровень низкой тяжести является особенно полезным, поскольку в некоторых вариантах осуществления оно было определено как оптимальное пороговое значение между уровнями низкой и средней тяжести по уровням проАДМ или его фрагментов, когда образец берут у пациента на 4-й, 7-й или 10-й день после указанных постановки диагноза и начала лечения. Это видно из анализа, представленного в Таблице 12.
Согласно предпочтительному варианту осуществления данного изобретения,
- уровень низкой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) указывает на отсутствие последующего нежелательного явления, причем уровень низкой тяжести составляет ниже 2,25 нмоль/л,
- при этом уровни проАДМ или его фрагментов определяют в образце, который был взят 4 или 7 дней спустя постановки диагноза и начала лечения.
Согласно предпочтительному варианту осуществления данного изобретения,
- уровень высокой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) указывает на последующее нежелательное явление, причем уровень высокой тяжести составляет выше 7,7 нмоль/л.
Это пороговое значение для уровня высокой тяжести является особенно полезным, поскольку в некоторых вариантах осуществления оно было определено как оптимальное пороговое значение между уровнем средней и высокой тяжести проАДМ или его фрагментов, когда образец берут у пациента 4 дня спустя указанных постановки диагноза и начала лечения. Это видно из анализа, представленного в Таблице 12.
Согласно предпочтительному варианту осуществления данного изобретения,
- уровень высокой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) указывает на последующее нежелательное явление, причем уровень высокой тяжести составляет выше 7,7 нмоль/л,
- при этом уровни проАДМ или его фрагментов определяют в образце, который был взят 4 дня спустя постановки диагноза и начала лечения.
Согласно предпочтительному варианту осуществления данного изобретения,
- уровень высокой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) указывает на последующее нежелательное явление, причем уровень высокой тяжести составляет выше 6,95 нмоль/л.
Это пороговое значение для уровня высокой тяжести является особенно полезным, поскольку в некоторых вариантах осуществления оно было определено как оптимальное пороговое значение между уровнем средней и высокой тяжести проАДМ или его фрагментов, когда образец берут у пациента 7 дней спустя указанных постановки диагноза и начала лечения. Это видно из анализа, представленного в Таблице 12.
Согласно предпочтительному варианту осуществления данного изобретения,
- уровень высокой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) указывает на последующее нежелательное явление, причем уровень высокой тяжести составляет выше 6,95 нмоль/л,
- при этом уровни проАДМ или его фрагментов определяют в образце, который был взят 7 дней спустя постановки диагноза и начала лечения.
Согласно предпочтительному варианту осуществления данного изобретения,
- уровень высокой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) указывает на последующее нежелательное явление, причем уровень высокой тяжести составляет выше 7,45 нмоль/л.
Это пороговое значение для уровня высокой тяжести является особенно полезным, поскольку оно было определено как оптимальное пороговое значение между уровнем средней и высокой тяжести проАДМ или его фрагментов, когда образец берут у пациента 10 дней спустя указанных постановки диагноза и начала лечения. Это видно из анализа, представленного в Таблице 12.
Согласно предпочтительному варианту осуществления данного изобретения,
- уровень высокой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) указывает на последующее нежелательное явление, причем уровень высокой тяжести составляет выше 7,45 нмоль/л,
- при этом уровни проАДМ или его фрагментов определяют в образце, который был взят 10 дней спустя постановки диагноза и начала лечения.
Предпочтительно пациенты согласно данному изобретению являются пациентами отделения интенсивной терапии (ОИТ), причем:
- уровень низкой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) предполагает выписку указанного пациента из ОИТ, или
- уровень высокой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) предполагает изменение режима лечения пациента в ОИТ.
Особое преимущество данного изобретения состоит в том, что исходя из классификации определенных уровней проАДМ или его фрагментов можно оценить вероятность возникновения будущего нежелательного явления со здоровьем у пациента из ОИТ. На основании этой оценки возможной является корректировка следующих вариантов лечения и решений.
Например, если уровень проАДМ или его фрагментов попадает в категорию уровня низкой тяжести проАДМ, лечащий врач может с большей уверенностью принять решение о выписке указанного пациента из ОИТ, поскольку маловероятно, что у пациента возникнет нежелательное явление со здоровьем, предпочтительно, в течение следующих 28 дней, более предпочтительно в течение следующих 90 дней. Соответственно, возможно, нет необходимости держать этого пациента в ОИТ. Возможно также сделать вывод о том, что текущее лечение успешно улучшает состояние здоровья пациента, что оценивается путем измерения риска нежелательного явления.
Напротив, если определение уровня проАДМ или его фрагментов у указанного пациента с ОИТ указывает на уровень высокой тяжести проАДМ или его фрагментов, лечащий врач должен оставить пациента в ОИТ. Кроме того, следует рассмотреть возможность корректировки лечения пациента, поскольку существует вероятность того, что текущее лечение не улучшает состояние здоровья пациента, поэтому пациент с большей вероятностью будет страдать от нежелательного явления в будущем.
Модификация лечения в контексте данного изобретения будет включать в себя, без ограничения, корректировку дозы или режима введения текущего лекарства. Изменение текущего лечения на другое лечение, добавление дополнительного варианта лечения к текущему лечению или прекращение текущего лечения. Различные способы лечения, которые могут быть применены к пациентам в контексте данного изобретения, были раскрыты в подробном описании данной заявки на патент.
В соответствии с особенно предпочтительным вариантом осуществления данного изобретения, уровень низкой тяжести составляет ниже 2,25 нмоль/л, указанный образец берут у пациента с ОИТ спустя 1 день, или больше, указанных постановки диагноза и начала лечения, и уровень низкой тяжести проАДМ или фрагмента(ов) предполагает выписку указанного пациента из ОИТ.
Дополнительно, данное изобретение относится к способу мониторинга терапии, включающему в себя прогноз, оценку риска и/или стратификацию риска последующего нежелательного явления со здоровьем у пациента, включающему в себя
- взятие образца указанного пациента, причем пациент является пациентом ОИТ, и было начато терапевтическое лечение, при этом образец отбирают у пациента после поступления в ОИТ и начала лечения,
- определение уровня адреномедулина (АДМ) или его фрагмента(ов) в указанном образце,
- при этом указанный уровень проАДМ или его фрагмента(ов) коррелирует с вероятностью последующиего нежелательного явления со здоровьем у указанного пациента.
В контексте способа данного изобретения, относящегося к пациентам ОИТ (вместо пациентов, которые были диагностированы как тяжелобольные), отсылка к моменту времени взятия образца, используемого для определения проАДМ или его фрагментов, является моментом времени, когда пациенты поступают в ОИТ, и начинаются первые меры лечения (момент времени 0). Этот момент времени соответствует моменту времени постановки диагноза и начала лечения в способе согласно данному изобретению, по отношению к пациентам, которым был поставлен диагноз «тяжелобольные».
Все предпочтительные варианты осуществления способа согласно данному изобретению, относящиеся к пациентам, которые были диагностированы как тяжелобольные, также раскрыты в контексте способа согласно данному изобретению, относящегося к пациентам ОИТ.
Варианты осуществления изобретения, относящиеся к дополнительному определению уровня ПКТ и/или других биомаркеров (или клинических оценок) в первом и втором образце (или в момент взятия первого и второго образца) у тяжелобольных пациентов
Предпочтительный вариант осуществления данного изобретения включает в себя дополнительное определение уровня ПКТ или его фрагмента(ов) в образце, взятом у пациента. В предпочтительном варианте осуществления, образец для определения уровня ПКТ или его фрагмента(ов) берут до, в или после момента постановки диагноза и начала лечения.
Особенно выгодно объединять определение проАДМ или его фрагментов с определением ПКТ или его фрагментов в образце, причем образец, используемый для определения проАДМ, может быть тем же или другим образцом, используемым для обнаружения ПКТ.
Комбинированное определение проАДМ или его фрагментов с определением ПКТ или его фрагментов, будь то в одном и том же образце или в образцах, полученных в разные моменты времени, обеспечивает синергетический эффект в отношении точности и надежности определения риска последующего нежелательного явления. Эти синергетические эффекты существуют для комбинированной оценки проАДМ или его фрагментов с другими маркерами или клиническими оценками, такими как лактат, СРБ, SOFA, SAPS II, APACHE II, или другими клиническими оценками.
Согласно дополнительному предпочтительному варианту осуществления данного изобретения, способ, описанный в данном документе, дополнительно включает в себя
- определение уровня ПКТ или его фрагмента(ов) в первом образце, отобранном у пациента, причем указанный первый образец берут до, во время или после момента постановки диагноза и начала лечения,
- определение уровня ПКТ или его фрагмента(ов) во втором образце, взятом у указанного пациента, причем второй образец был взят после первого образца, предпочтительно в течение 30 минут после взятия первого образца или через 30 минут, 1 час, 2 часа, 6 часов, 12 часов, 24 часа, 4 дня, 7 или 10 дней после взятия первого образца, и
- определение разницы между уровнем ПКТ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с уровнем ПКТ или его фрагмента(ов) в первом образце.
Особенно целесообразно объединить определение проАДМ или его фрагментов в образце, отобранном у пациента, с определением ПКТ или его фрагментов, в первом образце, и определением уровня ПКТ или его фрагментов во втором образце, отобранном после первого образца, причем образец, используемый для определения проАДМ или его фрагментов, может отличаться от первого образца или второго образца, используемого для определения ПКТ или его фрагментов.
В предпочтительном варианте осуществления способа, описанного в данном документе, способ дополнительно включает в себя
- определение уровня ПКТ или его фрагмента(ов) в первом образце, взятом у пациента, причем указанный первый образец берут во время или до момента постановки диагноза и начала лечения (момент времени 0),
- определение уровня ПКТ или его фрагмента(ов) во втором образце, взятом у указанного пациента после постановки диагноза и начала лечения, предпочтительно в течение 30 минут после указанных постановки диагноза и начала лечения, или через 30 минут, 1 час, 2 часа, 6 часов, 12 часов, 24 часа, 4 дня, 7 или 10 дней после указанных постановки диагноза и начала лечения, и
- определение разницы между уровнем ПКТ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с уровнем ПКТ или его фрагмента(ов) в первом образце.
Особенно целесообразно объединять определение проАДМ или его фрагментов (во втором образце) с определением ПКТ или его фрагментов в более раннем образце (первом образце), который взяли у указанного пациента и который может быть использован для постановки диагноза «тяжелобольной» указанному пациенту, в момент времени 0, и определение уровня ПКТ или его фрагментов во втором образце, взятом в определенный момент времени после постановки диагноза и начала лечения, что также предпочтительно является тем же моментом времени, когда определяют проАДМ или его фрагменты. Как видно из данных ниже, определение разницы между уровнем ПКТ или его фрагментов во втором образце по сравнению с первым образцом дает дополнительную информацию помимо информации, полученной из уровней проАДМ или его фрагментов во втором образце. На основании этой объединенной информации можно с большей вероятностью предсказать, возникнет ли нежелательное явление со здоровьем у указанного пациента, по сравнению с прогнозированием вероятности нежелательного явления исключительно на основе информации об уровне проАДМ или его фрагментах в втором образце. Это является неожиданным открытием, поскольку биомаркеры сепсиса обычно не синергичны и не дополняют друг друга, а представляют собой просто альтернативные диагностические маркеры.
В предпочтительном варианте осуществления способа, описанного в данном документе, способ дополнительно включает в себя
- определение уровня лактата в первом образце, взятом у пациента, причем указанный первый образец берут во время или до момента постановки диагноза и начала лечения (момент времени 0),
- определение уровня лактата во втором образце, взятом у указанного пациента после указанных постановки диагноза и начала лечения, предпочтительно в течение 30 минут или по меньшей мере через 30 минут, 1 час, 2 часа, 6 часов, 12 часов, 24 часа, 4 дня, 7 или 10 дней после указанных постановки диагноза и начала лечения, и
- определение разницы между уровнем лактата во втором образце по сравнению с уровнем лактата в первом образце.
Предпочтительный вариант осуществления данного изобретения включает в себя дополнительное определение уровня СРБ или его фрагмента(ов) в образце, взятом у пациента. В предпочтительном варианте осуществления, образец для определения уровня СРБ или его фрагмента(ов) берут до, в или после момента постановки диагноза и начала лечения.
Особенно целесообразно объединять определение проАДМ или его фрагментов с определением СРБ или его фрагмента(ов) в образце, причем образец, используемый для определения проАДМ, может быть тем же или другим образцом, используемым для обнаружения СРБ или его фрагмента(ов).
Согласно дополнительному предпочтительному варианту осуществления данного изобретения, способ, описанный в данном документе, дополнительно включает в себя
- определение уровня СРБ или его фрагмента(ов) в первом образце, взятом у пациента, причем указанный первый образец берут до, во время или после момента постановки диагноза и начала лечения,
- определение уровня СРБ или его фрагмента(ов) во втором образце, взятом у указанного пациента, причем второй образец был взят после первого образца, предпочтительно в течение 30 минут после взятия первого образца или через 30 минут, 1 час, 2 часа, 6 часов, 12 часов, 24 часа, 4 дня, 7 или 10 дней после взятия первого образца, и
- определение разницы между уровнем СРБ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с уровнем лактата в первом образце.
В предпочтительном варианте осуществления способа, описанного в данном документе, способ дополнительно включает в себя
- определение уровня СРБ или его фрагмента(ов) в первом образце, взятом у пациента, причем указанный первый образец берут во время или до момента постановки диагноза и начала лечения (момент времени 0),
- определение уровня СРБ или его фрагмента(ов) во втором образце, взятом у указанного пациента после указанных постановки диагноза и начала лечения, предпочтительно в течение 30 минут или по меньшей мере через 30 минут, 1 час, 2 часа, 6 часов, 12 часов, 24 часа, 4 дня, 7 или 10 дней после указанных постановки диагноза и начала лечения, и
- определение разницы между уровнем СРБ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с уровнем СРБ или его фрагмента(ов) в первом образце.
Предпочтительный вариант осуществления данного изобретения включает в себя дополнительное определение SOFA. В предпочтительном варианте осуществления, SOFA определяют до, в или после момента постановки диагноза и начала лечения. Особенно целесообразно объединять определение проАДМ или его фрагментов с определением SOFA, причем момент взятия образца, используемый для определения проАДМ, может быть тем же или отличатся от момента времени определения SOFA.
Согласно дополнительному предпочтительному варианту осуществления данного изобретения, способ, описанный в данном документе, дополнительно включает в себя
- определение первой SOFA до, во время или после момента постановки диагноза и начала лечения,
- определение второй SOFA в течение 30 минут после определения первой SOFA или через 30 минут, 1 час, 2 часа, 6 часов, 12 часов, 24 часа, 4 дня, 7 или 10 дней после определения первой SOFA, и
- вычисление разницы между двумя определенными SOFA.
В предпочтительном варианте осуществления способа, описанного в данном документе, способ дополнительно включает в себя
- определение SOFA в или до момента постановки диагноза и начала лечения (момент времени 0),
- определение SOFA после указанных постановки диагноза и начала лечения, предпочтительно в течение 30 минут или по меньшей мере через 30 минут, 1 час, 2 часа, 6 часов, 12 часов, 24 часа, 4 дня, 7 или 10 дней после указанных постановки диагноза и начала лечения, и
- вычисление разницы между SOFA, определенной после указанных постановки диагноза и начала лечения, и SOFA, определенной в момент времени 0.
Предпочтительный вариант осуществления данного изобретения включает в себя дополнительное определение SAPS II. В предпочтительном варианте осуществления, SAPS II определяют до, в или после момента постановки диагноза и начала лечения.
Особенно целесообразно объединять определение проАДМ или его фрагментов с определением SAPS II, причем момент взятия образца, используемый для определения проАДМ, может быть тем же или отличатся от момента времени определения SAPS II.
Согласно дополнительному предпочтительному варианту осуществления данного изобретения, способ, описанный в данном документе, дополнительно включает в себя
- определение первой SAPS II до, во время или после момента постановки диагноза и начала лечения,
- определение второй SAPS II в течение 30 минут после определения первой SOFA или через 30 минут, 1 час, 2 часа, 6 часов, 12 часов, 24 часа, 4 дня, 7 или 10 дней после определения первой SAPS II, и вычисление разницы между двумя определенными SAPS II.
В предпочтительном варианте осуществления способа, описанного в данном документе, способ дополнительно включает в себя
- определение SAPS II в или до момента постановки диагноза и начала лечения (момент времени 0),
- определение SAPS II после указанных постановки диагноза и начала лечения, предпочтительно в течение 30 минут или по меньшей мере через 30 минут, 1 час, 2 часа, 6 часов, 12 часов, 24 часа, 4 дня, 7 или 10 дней после указанных постановки диагноза и начала лечения, и
- вычисление разницы между SAPS II, определенной после указанных постановки диагноза и начала лечения, и SAPS II, определенной в момент времени 0.
Предпочтительный вариант осуществления данного изобретения включает в себя дополнительное определение APACHE II. В предпочтительном варианте осуществления, APACHE II определяют до, в или после момента постановки диагноза и начала лечения.
Особенно целесообразно объединять определение проАДМ или его фрагментов с определением APACHE II, причем момент взятия образца, используемый для определения проАДМ, может быть тем же или отличатся от момента времени определения APACHE II.
Согласно дополнительному предпочтительному варианту осуществления данного изобретения, способ, описанный в данном документе, дополнительно включает в себя
- определение первой APACHE II до, во время или после момента постановки диагноза и начала лечения,
- определение второй APACHE II в течение 30 минут после определения первой APACHE II или через 30 минут, 1 час, 2 часа, 6 часов, 12 часов, 24 часа, 4 дня, 7 или 10 дней после определения первой APACHE II, и
- вычисление разницы между двумя определенными APACHE II.
В предпочтительном варианте осуществления способа, описанного в данном документе, способ дополнительно включает в себя
- определение APACHE II в или до момента постановки диагноза и начала лечения (момент времени 0),
- определение APACHE II после указанных постановки диагноза и начала лечения, предпочтительно в течение 30 минут или по меньшей мере через 30 минут, 1 час, 2 часа, 6 часов, 12 часов, 24 часа, 4 дня, 7 или 10 дней после указанных постановки диагноза и начала лечения, и
- вычисление разницы между APACHE II, определенной после указанных постановки диагноза и начала лечения, и APACHE II, определенной в момент времени 0.
В предпочтительном варианте осуществления данного изобретения,
- более низкий уровень ПКТ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с первым образцом, и уровень низкой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов), причем уровень низкой тяжести составляет ниже 4 нмоль/л, предпочтительно ниже 3 нмоль/л, более предпочтительно ниже 2,7 нмоль/л, указывает на отсутствие последующего нежелательного явления, или
- более низкий уровень ПКТ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с первым образцом, и уровень высокой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов), причем уровень высокой тяжести составляет выше 6,5 нмоль/л, предпочтительно выше 6,95 нмоль/л, более предпочтительно выше 10,9 нмоль/л, указывает на отсутствие последующего нежелательного явления.
В контексте данного изобретения, определение более низкого уровня маркера во втором образце по сравнению с первым образцом может указывать на снижение уровней соответствующего маркера у пациента в течение курса начатого лечения. И наоборот, повышенные уровни во втором образце по сравнению с первым образцом могут указывать на повышающиеся уровни маркера в течение курса лечения.
Считается, что ПКТ является маркером тяжелого заболевания у пациента, в частности, пациента с сепсисом. Соответственно, считается, что снижение значения ПКТ в ходе лечения указывает на улучшение состояния здоровья пациента. Однако, как раскрыто в данном документе, стало очевидным, что уменьшение значения ПКТ может указывать на возникновение будущего нежелательного явления, если уровень проАДМ или его фрагментов в более поздний момент времени представляет собой уровень высокой тяжести. Соответственно, лечащий врач может скорректировать лечение такого пациента, которого бы не идентифицировали как пациента высокого риска без определения проАДМ или его фрагментов в втором образце.
С другой стороны, врач может быть уверен, что вряд ли возникнет нежелательное явление, когда уровень ПКТ снижается в течение курса лечения, в то время как уровень проАДМ или его фрагментов во втором образце представляет собой уровень низкой тяжести проАДМ или его фрагментов. Соответственно, такие пациенты могут быть идентифицированы как пациенты низкого риска. Совершенно неожиданным оказалось то, что комбинация определения изменения уровней ПКТ в ходе лечения тяжелобольного пациента с определением уровней проАДМ в более поздний момент времени приводит к улучшению мониторинга лечения, прогноза и оценки риска возникновения в будущем нежелательного явления со здоровьем у пациента.
Согласно другому предпочтительному варианту осуществления способа, описанного в данном документе,
- повышенный уровень ПКТ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с первым образцом, и уровень низкой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов), причем уровень низкой тяжести составляет ниже 4 нмоль/л, предпочтительно ниже 3 нмоль/л, более предпочтительно ниже 2,7 нмоль/л, указывает на отсутствие последующего нежелательного явления, или
- повышенный уровень ПКТ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с первым образцом, и уровень высокой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов), причем уровень высокой тяжести составляет выше 6,5 нмоль/л, предпочтительно выше 6,95 нмоль/л, более предпочтительно выше 10,9 нмоль/л, указывает на появление последующего нежелательного явления.
В одном варианте осуществления, изобретение дополнительно включает в себя информирование пациента о результатах способа диагностики, описанного в данном документе.
Варианты осуществления данного изобретения, относящиеся к определению уровня проАДМ или его фрагмента(ов) в первом и втором образце у тяжелобольных пациентов
Предпочтительный вариант осуществления способа согласно данному изобретению включает в себя дополнительно
- определение уровня проАДМ или его фрагмента(ов) в первом образце, взятом у пациента, причем указанный первый образец отбирают до, во время или после момента постановки диагноза и начала лечения, и
- определение уровня проАДМ или его фрагмента(ов) во втором образце, взятом у указанного пациента, причем второй образец был взят после первого образца и после момента постановки диагноза и начала лечения, предпочтительно в течение 30 минут после взятия первого образца или через 30 минут, 1 час, 2 часа, 6 часов, 12 часов, 24 часа, 4 дня, 7 или 10 дней после взятия первого образца, и
- определение разницы между уровнем проАДМ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с уровнем проАДМ или его фрагмента(ов) в первом образце является очевидным.
Первый и второй образцы, используемые для определения уровня проАДМ или его фрагмента(ов), могут отличаться от первого и второго образцов, используемых для определения уровня ПКТ или их фрагмента(ов).
Предпочтительный вариант осуществления способа согласно данному изобретению включает в себя дополнительно
- определение уровня проАДМ или его фрагмента(ов) в первом образце, взятом у пациента, причем указанный первый образец берут во время или до момента постановки диагноза и начала лечения (момент времени 0), и
- определение уровня проАДМ или его фрагмента(ов) во втором образце, взятом после постановки диагноза и начала лечения, предпочтительно в течение 30 минут, или через 30 минут, 1 час, 2 часа, 6 часов, 12 часов, 24 часа, 4 дня, 7 или 10 дней после указанных постановки диагноза и начала лечения, и
- определение разницы между уровнем проАДМ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с уровнем проАДМ или его фрагмента(ов) в первом образце является очевидным.
Предпочтительный вариант осуществления способа согласно данному изобретению включает в себя дополнительно
- определение уровня проАДМ или его фрагмента(ов) в первом образце, взятом у пациента, причем указанный первый образец используют для постановки диагноза «тяжелобольной» указанному пациенту (момент времени 0), и
- определение уровня проАДМ или его фрагмента(ов) во втором образце, взятом у указанного пациента после постановки диагноза и начала лечения, предпочтительно в течение 30 минут, или через 30 минут, 1 час, 2 часа, 6 часов, 12 часов, 24 часа, 4 дня, 7 или 10 дней после указанных постановки диагноза и начала лечения, и
- определение разницы между уровнем проАДМ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с уровнем проАДМ или его фрагмента(ов) в первом образце.
Дополнительный предпочтительный вариант осуществления способа согласно данному изобретению включает в себя дополнительно
- определение уровня проАДМ или его фрагмента(ов) и необязательно ПКТ или его фрагмента(ов) в первом образце, взятом у пациента, причем указанный первый образец берут во время или до момента постановки диагноза и начала лечения (момент времени 0), и
- определение уровня проАДМ или его фрагмента(ов) и необязательно ПКТ или его фрагмента(ов) во втором образце, взятом у указанного пациента после указанных постановки диагноза и начала лечения, предпочтительно в течение 30 минут, или через 30 минут, 1 час, 2 часа, 6 часов, 12 часов, 24 часа, 4 дня, 7 или 10 дней после указанных постановки диагноза и начала лечения, и
- определение разницы между уровнем проАДМ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с уровнем проАДМ или его фрагмента(ов) в первом образце.
Дополнительный предпочтительный вариант осуществления способа согласно данному изобретению включает в себя дополнительно
- определение уровня проАДМ или его фрагмента(ов) и необязательно ПКТ или его фрагмента(ов) в первом образце, взятом у пациента, причем указанный первый образец используют для постановки диагноза «тяжелобольной» указанному пациенту (момент времени 0), и определение уровня проАДМ или его фрагмента(ов) и необязательно ПКТ или его фрагмента(ов) во втором образце, взятом у указанного пациента после указанных постановки диагноза и начала лечения, предпочтительно в течение 30 минут, или через 30 минут, 1 час, 2 часа, 6 часов, 12 часов, 24 часа, 4 дня, 7 или 10 дней после указанных постановки диагноза и начала лечения, и
- определение разницы между уровнем проАДМ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с уровнем проАДМ или его фрагмента(ов) в первом образце. В одном варианте осуществления способа, описанного в данном документе, повышенный уровень проАДМ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с первым образцом указывает на последующее нежелательное явление.
В предпочтительном варианте осуществления способа согласно данному изобретению
- повышенный уровень проАДМ или его фрагмента(ов) и повышенный уровень ПКТ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с первым образцом указывает на последующее нежелательное явление, и/или
- повышенный уровень проАДМ или его фрагмента(ов) и более низкий уровень ПКТ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с первым образцом указывает на последующее нежелательное явление.
В предпочтительных вариантах осуществления данного изобретения повысившийся уровень проАДМ или его фрагментов во втором образце по сравнению с первым образцом относится к повышенному уровню тяжести по уровню проАДМ или его фрагментов. И наоборот, в предпочтительных вариантах осуществления данного изобретения более низкий уровень проАДМ или его фрагментов во втором образце по сравнению с первым образцом относится к более низкому уровню тяжести по уровню проАДМ или его фрагментов во втором образце по сравнению с первым образцом.
Дополнительные варианты осуществления данного изобретения у тяжелобольных пациентов
Согласно предпочтительному варианту осуществления данного изобретения пациенты являются пациентами отделения интенсивной терапии (ОИТ), и
- более низкий уровень ПКТ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с первым образцом и уровень низкой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов), причем уровень низкой тяжести составляет ниже 4 нмоль/л, предпочтительно ниже 3 нмоль/л, более предпочтительно ниже 2,7 нмоль/л, предполагает выписку указанного пациента из ОИТ;
- более низкий уровень ПКТ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с первым образцом и уровень высокой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов), причем уровень высокой тяжести составляет выше 6,5 нмоль/л, предпочтительно выше 6,95 нмоль/л, более предпочтительно выше 10,9 нмоль/л, предполагает изменение режима лечения пациента в ОИТ;
- повышенный уровень ПКТ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с первым образцом, и уровень низкой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов), причем уровень низкой тяжести составляет ниже 4 нмоль/л, предпочтительно ниже 3 нмоль/л, более предпочтительно ниже 2,7 нмоль/л, предполагает выписку указанного пациента из ОИТ; или
- повышенный уровень ПКТ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с первым образцом и уровень высокой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов), причем уровень высокой тяжести составляет выше 6,5 нмоль/л, предпочтительно выше 6,95 нмоль/л, более предпочтительно выше 10,9 нмоль/л, предполагает изменение режима лечения пациента в ОИТ.
В дополнительном варианте осуществления, данное изобретение относится к набору для осуществления способа согласно данному изобретению, причем набор содержит
- реагенты для определения уровня проАДМ или его фрагмента(ов) и, необязательно, дополнительно для определения уровня ПКТ, лактата и/или C-реактивного белка или его фрагмента(ов), в образце из субъекта, и
- данные по контролю, такие как контрольный уровень, соответствующий уровню высокой и/или низкой тяжести проАДМ, причем уровень низкой тяжести составляет ниже 4 нмоль/л, предпочтительно ниже 3 нмоль/л, более предпочтительно ниже 2,7 нмоль/л, и уровень высокой тяжести составляет выше 6,5 нмоль/л, предпочтительно выше 6,95 нмоль/л, более предпочтительно выше 10,9 нмоль/л и, необязательно, уровней ПКТ, лактата и/или C-реактивного белка, причем указанные данные по контролю предпочтительно хранятся на машиночитаемом носителе и/или используются в форме исполняемого компьютером кода, сконфигурированного для сравнения определенных уровней проАДМ или его фрагмента(ов) и, необязательно, дополнительно определенных уровней ПКТ, лактата и/или C-реактивного белка или его фрагмента(ов), с указанными данными по контролю.
В дополнительном варианте осуществления, данное изобретение относится к набору для осуществления способа согласно данному изобретению, причем набор содержит
- реагенты для определения уровня проАДМ или его фрагмента(ов) и, необязательно, дополнительно для определения уровня ПКТ или его фрагмента(ов) в образце из субъекта, и
- данные по контролю, такие как контрольный уровень, соответствующий уровню высокой и/или низкой тяжести проАДМ, причем уровень низкой тяжести составляет ниже 4 нмоль/л, предпочтительно ниже 3 нмоль/л, более предпочтительно ниже 2,7 нмоль/л, и уровень высокой тяжести составляет выше 6,5 нмоль/л, предпочтительно выше 6,95 нмоль/л, более предпочтительно выше 10,9 нмоль/л и, необязательно, уровней ПКТ, причем указанные данные по контролю предпочтительно хранятся на машиночитаемом носителе и/или используются в форме исполняемого компьютером кода, сконфигурированного для сравнения определенных уровней проАДМ или его фрагмента(ов) и, необязательно, дополнительно определенных уровней ПКТ, или его фрагмента(ов), с указанными данными по контролю.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Данное изобретение относится к способу управления лечением антибиотиками, стратификации и/или контроля у пациента, страдающего от инфекционного заболевания и получающего лечение одним или большим количеством антибиотических агентов. Как видно из данных, представленных в данном документе, вероятность появления или отсутствия нежелательного явления со здоровьем у пациента определяется уровнем проАДМ или его фрагмента(ов), который предоставляет информацию о возможном изменении лечения антибиотиками. Данное изобретение имеет следующие преимущества по сравнению с традиционными способами: способы и наборы согласно изобретению являются быстрыми, объективными, простыми в использовании и точными для мониторинга терапии тяжелобольных пациентов. Способы и наборы согласно изобретению относятся к маркерам и клиническим оценкам, которые легко измерить обычными способами в больницах, поскольку уровни проАДМ, ПКТ, лактата, С-реактивного белка, SOFA, APACHE II, SAPS II можно определять в обычном режиме в полученных образцах крови или дополнительных биологических жидкостях или образцах, полученных из субъекта.
Как применяется в данном документе, «пациент» или «субъект» может представлять собой позвоночное.
В контексте данного изобретения термин «субъект» включает в себя как людей, так и животных, в частности млекопитающих, и другие организмы. В контексте данного изобретения «нежелательное явление со здоровьем у пациента» относится к явлениям, которые указывают на осложнения или ухудшение состояния здоровья пациента. Такие нежелательные явления включают в себя, без ограничения, смерть пациента, смерть пациента в течение 28-90 дней после постановки диагноза и лечения, возникновение инфекции или новой инфекции, недостаточность органов и ухудшение общих клинических показателей или симптомов пациента, например гипотония или гипертония, тахикардия или брадикардия. Кроме того, примеры нежелательных явлений включают в себя ситуации, когда ухудшение клинических симптомов указывает на необходимость принятия терапевтических мер, таких как процедура очистки очага, переливание продуктов крови, инфузия коллоидов, инвазивная механическая вентиляция легких, неинвазивная механическая вентиляция легких, неотложная хирургия, заместительная терапия органов, такая как замена почек или печени, и использование сосудосуживающих препаратов.
Пациент, описанный в данном документе, которому был поставлен диагноз «тяжелобольной», может быть диагностирован как пациент отделения интенсивной терапии (ОПТ), пациент, которому требуется постоянное и/или интенсивное наблюдение за состоянием его здоровья, пациент с диагнозом сепсис, тяжелый сепсис или септический шок, пациент, у которого диагностировано инфекционное заболевание и одна или большее количество существующих недостаточностей органов, пациент до или после операции, пациент с посттравматическим синдромом, пациент с травмой, такой как пациент из аварии, пациент с ожогом, пациент с одним или большим количество открытых очагов поражения. Описанный в данном документе субъект может находиться в отделении неотложной помощи или отделении интенсивной терапии, или в других местах оказания медицинской помощи, например в транспортной машине неотложной помощи, такой как скорая помощь, или у врача общей практики, который контактирует с пациентом с указанными симптомами. Пациенты с подозрением на ССВР (синдром системной воспалительной реакции, SIRS) не обязательно считаются тяжелобольными.
Термин «пациент ОПТ» относится, без ограничения, к пациенту, который был помещен в отделение интенсивной терапии. Отделение интенсивной терапии также может называться отделением интенсивной терапии или отделением интенсивного лечения (ОПТ) или отделением реанимации (ОР), которое является специальным отделением больницы или учреждения здравоохранения, которое предоставляет медицинскую помощь в виде интенсивной терапии. Пациенты ОПТ обычно страдают от тяжелых и опасных для жизни заболеваний и травм, которые требуют постоянного, тщательного контроля и поддержки со стороны специального оборудования и лекарств для обеспечения нормальных функций организма. Распространенные патологии, которые лечат в отделениях интенсивной терапии, включают в себя, без ограничения, синдром дыхательной недостаточности - острый или взрослых (ARDS), травму, недостаточность органов и сепсис.
Используемый в данном документе термин «постановка диагноза» в контексте данного изобретения относится к распознаванию и (раннему) обнаружению клинической патологии у субъекта, связанной с инфекционным заболеванием. Также оценка степени тяжести инфекционного заболевания может охватываться термином «диагноз».
«Прогноз» относится к прогнозированию результата или конкретного риска для субъекта, исходя из инфекционного заболевания. Это может также включать в себя оценку вероятности выздоровления или вероятности неблагоприятного исхода для указанного субъекта.
Способы согласно данному изобретению также могут быть использованы для наблюдения. «Наблюдение» относится к отслеживанию уже диагностированного инфекционного заболевания, нарушения, осложнения или риска, например, для анализа прогрессирования заболевания или влияние конкретного лечения или терапии на прогрессирование заболевания у тяжелобольного пациента или на инфекционное заболевание у пациента.
Термин «мониторинг терапии» или «контроль терапии» в контексте данного изобретения относится к мониторингу и/или корректировке терапевтического лечения указанного субъекта, например, путем получения обратной связи относительно эффективности терапии.
В данном изобретении, термины «оценка риска» и «стратификация риска» относятся к распределению субъектов по группам различного риска в соответствии с их дальнейшим прогнозом. Оценка риска также относится к стратификации для применения профилактических и/или терапевтических мер. Примерами стратификации риска являются низкий, промежуточный и высокий уровни риска, раскрытые в данном документе.
Как применяется в данном документе, термин «управление лечением» относится к применению определенных вариантов лечения или медицинских вмешательств, исходя из значения одного или большего количества биомаркеров и/или клинического параметра, и/или клинических оценок.
Понятно, что в контексте данного изобретения «определение уровня проАДМ или его фрагмента(ов)» или т.п. относится к любому средству определения проАДМ или его фрагмента. Фрагмент может иметь любую длину, например по меньшей мере около 5, 10, 20, 30, 40, 50 или 100 аминокислот, при условии, что фрагмент позволяет однозначно определить уровень проАДМ или его фрагмента. В частности, в предпочтительных аспектах изобретения «определение уровня проАДМ» относится к определению уровня серединного фрагмента проадреномедуллина (СФ-проАДМ). СФ-проАДМ представляет собой фрагмент и/или область проАДМ.
Пептид адреномедуллин (АДМ) был обнаружен как гипотензивный пептид, содержащий 52 аминокислоты, который был выделен из человеческой феохромоцитомы (Kitamura et al., 1993). Адреномедуллин (АДМ) кодируется как пептид-предшественник, содержащий 185 аминокислот («препроадреномедуллин» или «пре-проАДМ»). Иллюстративная аминокислотная последовательность АДМ приведена в SEQ ID NO: 1.
SEQ ID NO: 1: аминокислотная последовательность пре-про-АДМ:
1 MKLVSVALMY LGSLAFLGAD TARLDVASEF RKKWNKWALS RGKRELRMSS
51 SYPTGLADVK AGPAQTLIRP QDMKGASRSP EDSSPDAARIRVKRYRQSMN
101 NFQGLRSFGC RFGTCTVQKL AHQIYQFTDK DKDNVAPRSK ISPQGYGRRR
151 RRSLPEAGPG RTLVSSKPQA HGAPAPPSGS APHFL
АДМ содержит позиции 95-146 аминокислотной последовательности пре-проАДМ и представляет собой его сплайс-продукт. «Проадреномедуллин» («проАДМ») относится к пре-проАДМ без сигнальной последовательности (аминокислоты с 1 по 21), то есть к аминокислотным остаткам с 22 по 185 пре-проАДМ. «Серединный фрагмент проадреномедуллина» («СФ-проАДМ») относится к аминокислотам с 42 по 95 пре-проАДМ. Иллюстративная аминокислотная последовательность СФ-проАДМ приведена в SEQ ID NO: 2.
SEQ ID NO: 2: аминокислотная последовательность СФ-про-АДМ (AS 45-92 пре-про-АДМ):
ELRMSSSYPT GLADVKAGPA QTLIRPQDMK GASRSPEDSS PDAARIRV
В данном документе также предусмотрено, что пептид и его фрагмент пре-проАДМ или СФ-проАДМ могут быть использованы для описанных в данном документе способов. Например, пептид или его фрагмент может содержать аминокислоты 22-41 пре-проАДМ (пептид РАМР) или аминокислоты 95-146 пре-проАДМ (зрелый адреномедуллин, включая биологически активную форму, также известную как био-АДМ). С-концевой фрагмент проАДМ (аминокислоты от 153 до 185 пре-проАДМ) называется адренотензином. Фрагменты пептидов проАДМ или фрагменты СФ-проАДМ могут содержать, например, по меньшей мере, около 5, 10, 20, 30 или большее количество аминокислот. Соответственно, фрагмент проАДМ может, например, быть выбран из группы, состоящей из СФ-проАДМ, РАМР, адренотензина и зрелого адреномедуллина, предпочтительно в данном документе фрагмент представляет собой СФ-проАДМ.
Определение этих различных форм АДМ или проАДМ и их фрагментов также включает в себя измерение количества и/или обнаружение специфических субобластей этих молекул, например, с помощью антител или других аффинных реагентов, нацеленных на определенные части молекул, или путем определения присутствия и/или количества молекул, путем измерения количества части белка с помощью масс-спектрометрии.
Любой один или большее количество «пептидов или фрагментов АДМ», описанных в данном документе, могут быть использованы в данном изобретении. Соответственно, способы и наборы согласно данному изобретению могут также включать в себя определение, по меньшей мере, одного дополнительного биомаркера, маркера, клинической оценки и/или параметра в дополнение к проАДМ.
Как применяется в данном документе, параметр является характеристикой, признаком или измеримым фактором, который может помочь в раскрытие конкретной системы. Параметр является важным элементом для оценок, связанных со здоровьем и физиологией, таких как риск заболевания/нарушения/клинической патологии, предпочтительно дисфункции(ий) органа. Кроме того, параметр определяется как характеристика, которую объективно измеряют и оценивают в качестве показателя нормальных биологических процессов, патогенных процессов или фармакологических реакций на терапевтическое вмешательство. Иллюстративный параметр может быть выбран из группы, состоящей из: оценки критических состояний и хронических заболеваний II (APACHE II), упрощенной оценки критических состояний (оценка SAPSII), быстрой динамической оценки органной недостаточности (qSOFA), динамической оценки органной недостаточности (показатель SOFA), индекса массы тела, веса, возраста, пола, IGS II, потребления жидкости, количества лейкоцитов, натрия, калия, температуры, кровяного давления, дофамина, билирубина, частоты дыхания, парциального давления кислорода, шкалы Всемирной федерации нейрохирургических сообществ (WFNS) и шкалы комы Глазго (GCS).
Как применяется в данном документе, термины, такие как «маркер», «суррогатный маркер», «прогностический маркер», «фактор» или «биомаркер» или «биологический маркер», используются взаимозаменяемо и относятся к поддающимся измерению и количественной оценке биологическим маркерам (например, к концентрации конкретного белка или фермента, или его фрагмента, специфической концентрации гормона или его фрагмент, или присутствию биологических веществ или их фрагментов), которые служат показателями для оценок, связанных со здоровьем и физиологией, таких как риск заболевания/нарушения/клинической патологии, предпочтительно нежелательного явления. Маркер или биомаркер определяется как признак, который может быть объективно измерен и оценен в качестве индикатора нормальных биологических процессов, патогенных процессов или фармакологических реакций на терапевтическое вмешательство. Биомаркеры могут быть измерены в образце (в виде анализа крови, плазмы, мочи или ткани).
По меньшей мере, один дополнительный маркер и/или параметр указанного субъекта может быть выбран из группы, состоящей из: уровня лактата в указанном образце, уровня прокальцитонина (ПКТ) в указанном образце, динамической оценки органной недостаточности (оценка SOFA) указанного субъекта, упрощенной оценки критических состояний (SAPSII) указанного субъекта, оценки критических состояний и хронических заболеваний II (APACHE II) указанного субъекта, и уровня растворимой fms-подобной тирозинкиназы-1 (sFlt-1), гистона Н2А, гистона Н2В, гистона Н3, гистона Н4, кальцитонина, эндотелина-1 (ЕТ-1), аргинин-вазопрессина (A VP), предсердного натрийуретического пептида (ANP), липокалина, ассоциированного с желатиназой нейтрофилов (NGAL), тропонина, мозгового натрийуретического пептида (BNP), С-реактивного белка (СРБ), литостатина (PSP), экспрессируемого на миелоидных клетках 1 триггерного рецептора (TREM1), интерлейкина-6 (ИЛ-6), интерлейкина-1, интерлейкина-24 (ИЛ-24), интерлейкина-22 (IL-22), интерлейкина (ИЛ-20), других ИЛ, прецепсина (sCD14-ST), связывающего липополисахарид белка (LBP), альфа-1-антитрипсина, матриксной металлопротеиназы 2 (ММР2) металлопротеиназы 2 (ММР8), матриксной металлопротеиназы 9 (ММР9), матриксной металлопротеиназы 7 (ММР7), плацентарного фактора роста (PIGF), хромогранина А, белка S100A, белка S100B и фактора некроза опухоли а (ФНОа), неоптерина, альфа-1-антитрипсина, про-аргинин-вазопрессина (AVP, proAVP или копептин), прокальцитонина, предсердного натрийуретического пептида (ANP, pro-ANP), эндотелина-1, CCL1/TCA3, CCL11, CCL12/MCP-5, CCL13/MCP-4, CCL14, CCL15, CCL16, CCL17/TARC, CCL18, CCL19, CCL2/MCP-1, CCL20, CCL21, CCL22/MDC, CCL23, CCL24, CCL25, CCL26, CCL27, CCL28, CCL3, CCL3L3, CCL4, CCL4L1/LAG-1, CCL5, CCL6, CCL7, CCL8, CCL9, CX3CL1, CXCL1, CXCL10, CXCL11, CXCL12, CXCL13, CXCL14, CXCL15, CXCL16, CXCL17, CXCL2/MTP-2, CXCL3, CXCL4, CXCL5, CXCL6, CXCL7/Ppbp, CXCL9, IL8/CXCL8, XCL1, XCL2, FAM19A1, FAM19A2, FAM19A3, FAM19A4, FAM19A5, CLCF1, CNTF, ИЛ11, ИЛ31, ИЛ6, лептина, LIF, OSM, IFNA1, IFNA10, IFNA13, IFNA14, IFNA2, IFNA4, IFNA7, IFNB1, IFNE, IFNG, IFNZ, IFNA8, IFNA5/IFNaG, IFNω/IFNW1, BAFF, 4-1BBL, TNFSF8, CD40LG, CD70, CD95L/CD178, EDA-A1, TNFSF14, LTA/TNFB, LTB, TNFa, TNFSF10, TNFSF11, TNFSF12, TNFSF13, TNFSF15, TNFSF4, ИЛ18, ИЛ18-ВР, ИЛ1-А, ИЛ1-В, ИЛ1-F10, ИЛ1-F3/ИЛ1-RA, ИЛ1-F5, ИЛ1-F6, ИЛ1-Б7, ИЛ1-F8, ИЛ1-RL2, ИЛ1-F9, ИЛ33, или их фрагментов.
Как применяется в данном документе, термин «прокальцитонин» или «ПКТ» относится к пептиду, охватывающему аминокислотные остатки 1-116, 2-116, 3-116, или их фрагменты, прокальцитонинового пептида. ПКТ является пептидным предшественником гормона кальцитонина. Таким образом, длина фрагментов прокальцитонина составляет, по меньшей мере, 12 аминокислот, предпочтительно, больше чем 50 аминокислот, более предпочтительно, больше чем 110 аминокислот. ПКТ может содержать посттрансляционные модификации, такие как гликозилирование, липосидирование или дериватизация. Прокальцитонин является предшественником кальцитонина и катакальцина. Таким образом, в нормальных условиях уровни ПКТ в кровотоке очень низкие (< около 0,05 нг/мл).
Уровень ПКТ в образце субъекта может быть определен с помощью иммуноанализа, как описано в данном документе. Как применяется в данном документе, также может быть определен уровень рибонуклеиновой кислоты или дезоксирибонуклеиновой кислоты, кодирующей «прокальцитонин» или «ПКТ». Способы определения ПКТ известны специалисту, например, с использованием продуктов, полученных от Thermo Fisher Scientific/BRAHMS GmbH.
Лактат, или молочная кислота, представляет собой органическое соединение с формулой СН3СН(ОН)СООН, которое встречается в жидкостях организма, включая кровь. Анализы крови на лактат проводятся для определения состояния кислотно-основного гомеостаза в организме. Молочная кислота является продуктом клеточного метаболизма, который может накапливаться, когда клеткам не хватает кислорода (гипоксия) и они должны переходить на менее эффективный способ производства энергии, или когда состояние вызывает избыточное производство или нарушенный клиренс лактата. Лактоацидоз может быть вызван недостаточным количеством кислорода в клетках и тканях (гипоксия), например, если кто-то имеет патологию, которая может приводить к уменьшению количества кислорода, доставляемого в клетки и ткани, например, шок, септический шок или застойную сердечную недостаточность, лактат может быть использован для выявления и оценки тяжести гипоксии и лактоацидоза.
С-реактивный белок (СРБ) - это пентамерный белок, который может быть найден в жидкостях организма, таких как плазма крови. Уровни СРБ могут повышаться в ответ на воспаление. Измерение значений СРБ и построение графика может оказаться полезным для определения прогрессирования заболевания или эффективности лечения. Как применяется в данном документе, термин «динамическая оценка органной недостаточности» или «оценка SOFA» представляет собой один показатель, используемый для отслеживания состояния пациента во время пребывания в отделении интенсивной терапии (ОИТ). Оценка SOFA - это бальная система, определяющая степень функционирования органа человека или частоту отказа. Оценка основана на шести различных оценках, по одной для дыхательной, сердечно-сосудистой, печеночной, коагуляционной, почечной и неврологической систем. Как средние, так и самые высокие оценки SOFA являются предикторами исхода. Увеличение оценки SOFA в течение первых 24-48 часов в ОИТ прогнозирует уровень смертности по меньшей мере от 50% вплоть до 95%. Оценки менее чем 9 дают прогнозируемую смертность на уровне 33%, а в случае выше 14 могут быть близки к или выше 95%.
Как применяется в данном документе, быстрая оценка SOFA (qSOFA) представляет собой бальную систему, которая указывает на дисфункцию органа пациента или риск смертности. Оценка основана на трех критериях: 1) изменение психического статуса, 2) снижение систолического артериального давления до меньше чем 100 мм рт.ст., 3) частота дыхания больше чем 22 вдохов в минуту. Пациенты с двумя или большим количеством из этих патологий подвергаются большему риску дисфункции органа или смерти.
Как применяется в данном документе, «APACHE II» или «оценка критических состояний и хронических заболеваний II» представляет собой бальную систему классификации тяжести заболевания (Knaus et al., 1985). Она может применяться в течение 24 часов после поступления пациента в отделение интенсивной терапии (ОИТ) и может быть определена на основе 12 различных физиологических параметров: AaDO2 или PaO2 (в зависимости от FiO2), температура (ректально), среднее артериальное давление, артериальное рН, частота сердечных сокращений, частота дыхания, натрий (сыворотка), калий (сыворотка), креатинин, гематокрит, количество лейкоцитов и шкала комы Глазго.
Как применяется в данном документе, «SAPS II» или «упрощенная оценка критических состояний II» относится к системе классификации тяжести заболевания или нарушения (смотрите, Le Gall JR et al., A new Simplified Acute Physiology Score (SAPS II) based on a European/North American multicenter study. JAMA. 1993; 270(24):2957-63). Оценка SAPS II состоит из 12 физиологических параметров и 3 связанных с болезнью параметров. Балльная оценка рассчитывается на основе 12 обычных физиологических измерений, информации о предыдущем состоянии здоровья и некоторой информации, полученной при поступлении в ОИТ. Оценка SAPS II может быть определена в любое время, предпочтительно в день 2. «Наихудшее» измерение определяется как величина, которая соответствует наибольшему количеству балов. Оценка SAPS II имеет диапазон от 0 до 163 баллов. Система классификации включает в себя следующие параметры: возраст, частота сердечных сокращений, систолическое артериальное давление, температура, шкала комы Глазго, механическая вентиляция легких или CPAP, PaO2, FiO2, диурез, азот мочевины крови, натрий, калий, бикарбонат, билирубин, лейкоциты, хронические заболевания и тип поступления. Существует сигмоидальная взаимосвязь между смертностью и общей оценкой SAPS II. Смертность субъекта составляет 10% при оценке SAPSII 29 баллов, смертность составляет 25% при оценке SAPSII 40 баллов, смертность составляет 50% при оценке SAPSII 52 балла, смертность составляет 75% при оценке SAPSII 64 балла, смертность составляет 90% при оценке SAPSII 77 баллов (Le Gall loc. cit).
Как применяется в данном документе, термин «образец» представляет собой биологический образец, который получают или берут у пациента или субъекта. Как применяется в данном документе, термин «образец» может, например, относиться к образцу жидкости или ткани организма, полученному с целью постановки диагноза, прогноза или оценки субъекта интереса, такого как пациент. Предпочтительно в данном документе образец представляет собой образец жидкости организма, такой как кровь, сыворотка, плазма, спинномозговая жидкость, моча, слюна, мокрота, плевральные выпоты, клетки, клеточный экстракт, образец ткани, биопсию ткани, образец стула и тому подобное. В частности, образец представляет собой кровь, плазму крови, сыворотку крови или мочу.
Варианты осуществления данного изобретения относятся к взятию первого образца и взятию второго образца. В контексте способа согласно данному изобретению, термины «первый образец» и «второй образец» относятся к относительному определению порядка взятия образцов, используемых в способе согласно данному изобретению. Когда термины «первый образец» и «второй образец» используются в определении данного способа, эти образцы не должны рассматриваться как абсолютные определения количества взятых образцов. Следовательно, дополнительные образцы могут быть взяты у пациента до, во время или после взятия первого и/или второго образца, или между первым или вторым образцами, причем эти дополнительные образцы могут или могут не использоваться в способе данного изобретения. Таким образом, первый образец может рассматриваться как любой ранее полученный образец. Второй образец может рассматриваться как любой дополнительный или последующий образец.
«Плазма» в контексте данного изобретения представляет собой практически бесклеточный супернатант крови, содержащий антикоагулянт, полученный после центрифугирования. Иллюстративные антикоагулянты включают в себя соединения, связывающие ионы кальция, например ЭДТК, или ингибиторы цитрата и тромбина, такие как гепаринаты или гирудин. Бесклеточная плазма может быть получена центрифугированием антикоагулированной крови (например, цитратной, ЭДТК или гепаринизированной крови), например, в течение по меньшей мере 15 минут при 2000-3000 g.
«Сыворотка» в контексте данного изобретения представляет собой жидкую фракцию цельной крови, которую собирают после того, как крови дают свернуться. Когда коагулированную кровь (свернутую кровь) центрифугируют, в качестве супернатанта может быть получена сыворотка.
Как применяется в данном документе, термин «моча» представляет собой жидкий продукт организма, выделяемый почками в процессе, называемом мочеотделением (или мочевыделением), и выводиться через мочеиспускательный канал.
В предпочтительных вариантах осуществления данного изобретения, пациенту поставлен диагноз «сепсис». В частности, пациенту может быть поставлен диагноз «тяжелый сепсис» и/или «септический шок».
«Сепсис» в контексте изобретения относится к системному ответу на инфекцию. В альтернативном варианте, сепсис может рассматриваться как комбинация SIRS с подтвержденным инфекционным процессом или инфекцией. Сепсис можно охарактеризовать как клинический синдром, определяемый наличием как инфекции, так и системной воспалительной реакции (Levy MM et al. 2001 SCCM/ESICM/ACCP/ATS/SIS International Sepsis Definitions Conference. Crit Care Med. 2003 Apr; 31(4): 1250-6). Используемый в данном документе термин «сепсис» включает в себя, но не ограничивается лишь этими: сепсис, тяжелый сепсис, септический шок.
Используемый в данном документе термин «сепсис» включает в себя, но не ограничивается лишь этими: сепсис, тяжелый сепсис, септический шок. Тяжелый сепсис относится к сепсису, связанному с дисфункцией органа, аномалией гипоперфузии, или гипотензией, вызванной сепсисом. Гипоперфузионные нарушения включают в себя лактоацидоз, олигурию и острое изменение психического состояния. Гипотензия, вызванная сепсисом, определяется наличием систолического артериального давления, меньшего чем около 90 мм рт.ст., или его снижением на около 40 мм рт.ст. или больше относительно исходного уровня в отсутствие других причин гипотонии (например, кардиогенного шока). Септический шок определяется как тяжелый сепсис с вызванной сепсисом гипотензией, сохраняющейся, несмотря на адекватную инфузионную поддержку, наряду с наличием аномалий гипоперфузии или дисфункции органов (Bone et al., CHEST 101(6): 1644-55, 1992).
Термин сепсис может альтернативно быть определен как опасная для жизни дисфункция органа, вызванная нерегулируемым ответом хозяина на инфекцию. Для клинического практического применения дисфункция органа предпочтительно может быть представлена увеличением динамической оценки органной недостаточности (SOFA) на 2 балла или больше, что ассоциируют с внутрибольничной смертностью, большей чем 10%. Септический шок может быть определен как разновидность сепсиса, при котором особенно глубокие кровеносные, клеточные и метаболические нарушения связаны с более высоким риском смертности, чем один только сепсис. Пациенты с септическим шоком могут быть клинически идентифицированы по необходимости в сосудосуживающем препарате для поддержания среднего артериального давления 65 мм рт.ст. или выше, и уровне лактата в сыворотке больше чем 2 ммоль/л (>18 мг/дл) в отсутствие гиповолемии.
Используемый в данном документе термин «сепсис» относится ко всем возможным стадиям развития сепсиса.
Термин «сепсис» также включает в себя тяжелый сепсис или септический шок, исходя из определения SEPSIS-2 (Bone et al., 2009). Термин «сепсис» также включает в себя субъектов, подпадающих под определение SEPSIS-3 (Singer et al., 2016). Используемый в данном документе термин «сепсис» относится ко всем возможным стадиям развития сепсиса.
Как применяется в данном документе, термин «инфекция» в рамках изобретения означает патологический процесс, вызванный проникновением в нормальную стерильную ткань или жидкость патогенных или потенциально патогенных агентов/патогенов, организмов и/или микроорганизмов, и предпочтительно относится к инфекции(ям) бактериями, вирусами, грибками и/или паразитами. Соответственно, инфекция может представлять собой бактериальную инфекцию, вирусную инфекцию и/или грибковую инфекцию. Инфекция может быть локальной или системной инфекцией. Для целей изобретения вирусная инфекция может рассматриваться как инфекция микроорганизмом.
Кроме того, субъект, страдающий от инфекции, может страдать от больше чем одного источника(ов) инфекции одновременно. Например, субъект, страдающий от инфекции, может страдать от бактериальной инфекции и вирусной инфекции; от вирусной инфекции и грибковой инфекции; от бактериальной и грибковой инфекции, и от бактериальной инфекции, грибковой инфекции и вирусной инфекции, или страдать от смешанной инфекции, включающей в себя одну или большее количество инфекций, перечисленных в данном документе, включая потенциально суперинфекцию, например одну или большее количество бактериальных инфекций в дополнение к одной или большему количеству вирусных инфекций и/или одной или большему количеству грибковых инфекций.
Как применяется в данном документе, термин «инфекционное заболевание» включает в себя все заболевания или нарушения, которые связаны с бактериальными, и/или вирусными, и/или грибковыми инфекциями.
В одном варианте осуществления, инфекция, подлежащая выявлению или проверке, может быть выбрана из видов Bordetella, таких как Bordetella pertussis, Borrelia, таких как Borrelia burgdorferi, Brucella, таких как Brucella abortus, Brucella canis, Brucella melitensis или Brucella suis, Campylobacter, таких как Campylobacter jejuni, Chlamydia и Chlamydophila, таких как Chlamydia pneumonia, Chlamydia trachomatis, Chlamydophila psittaci, Clostridium, таких как Clostridium botulinum, Clostridium difficile, Clostridium perfringens, Clostridium tetani, Corynebacterium, таких как Corynebacterium diphtheria, Enterococcus, таких как Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium, Escherichia, таких как Escherichia coli, Francisella, таких как Francisella tularensis, Haemophilus, таких как Haemophilus influenza, Helicobacter, таких как Helicobacter pylori, Legionella, таких как Legionella pneumophila, Leptospira, таких как Leptospira interrogans, Listeria, таких как Listeria monocytogenes, Mycobacterium, таких как Mycobacterium leprae, Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium ulcerans, Mycoplasma, таких как Mycoplasma pneumonia, Neisseria, таких как Neisseria gonorrhoeae, Neisseria meningitides, Pseudomonas, таких как Pseudomonas aeruginosa, Rickettsia, таких как Rickettsia rickettsia, Salmonella, таких как Salmonella typhi, Salmonella typhimurium, Shigella, таких как Shigella sonnei, Staphylococcus, таких как Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus saprophyticus, Streptococcus, таких как Streptococcus agalactiae, Streptococcus pneumonia, Streptococcus pyogenes, Treponema, таких как Treponema pallidum, Vibrio, таких как Vibrio cholera, Yersinia, таких как Yersinia pestis, Yersinia enterocolitica или Yersinia pseudotuberculosis.
Патогенные грибы - это грибы, которые вызывают заболевания у людей или других организмов. Виды Candida являются важными человеческими патогенами, которые наиболее известны как вызывающие оппортунистические инфекции у хозяев с ослабленным иммунитетом (например, пациенты с трансплантатом, больные СПИДом, пациенты с раком). Инфекции трудно поддаются лечению и могут быть очень серьезными: 30-40% системных инфекций приводят к смерти. Аспергиллез является еще одним потенциальным грибковым патогеном. Aspergillus могут вызывать заболевание тремя основными путями: через производство микотоксинов; через индукцию аллергенных реакций; и через локальные или системные инфекции. Для последних двух категорий иммунный статус хозяина является ключевым. Наиболее распространенными патогенными видами являются Aspergillus fumigatus и Aspergillus flavus. Aspergillus flavus вырабатывает афлатоксин, который является одновременно токсином и канцерогеном, и может потенциально загрязнять пищевые продукты. Aspergillus fumigatus и Aspergillus clavatus могут быть причиной болезни. Cryptococcus neoformans может вызывать заболевания у людей. Cryptococcus neoformans является основным патогеном для человека и животных. Известно, что Cryptococcus laurentii и Cryptococcus albidus иногда вызывают заболевание от средней до тяжелой степени у пациентов с нарушенным иммунитетом. Cryptococcus gattii является эндемиком тропических частей континента Африки и Австралии, и может быть причиной болезни. Histoplasma capsulatum может вызвать гистоплазмоз у людей, собак и кошек. Pneumocystis jirovecii (или Pneumocystis carinii) может вызвать форму пневмонии у людей с ослабленной иммунной системой, таких как недоношенные дети, пожилые люди и больные СПИДом. Stachybotrys chartarum или «черная плесень» может вызвать повреждение дыхательных путей и сильные головные боли.
В одном варианте осуществления, инфекция, подлежащая обнаружению или анализу, может быть выбрана из: Acinetobacter baumannii, Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter Iwoffii, Listeria monocytogenes, Aeromonas caviae, Morganella morganii, Aeromonas hydrophila, Neisseria gonorrhoeae, Aspergillus flavus, Neisseria meningitidis, Aspergillus nidulans, Pasteurella multocida, Aspergillus niger, Pasteurella pneumotropica, Aspergillus terreus, Propionibacterium acnes, Bacillus anthracis, Proteus mirabillis, Bacillus cereus, Providencia rettgeri, Bacillus subtilis, Pseudomonas aeruginosa, Bacteroides fragilis, Salmonella choleraesuis, Brucella melitensis, Serratia liquefaciens, Burkholderia cepacia, Serratia marcescens, Candida albicans, Staphylococcus aureus, Candida dubliniensis, Staphylococcus epidermidis, Candida glabrata, Staphylococcus haemolyticus, Candida krusei, Staphylococcus hominis, Candida parapsilosis, Staphylococcus sac charolyticus, Candida tropicalis, Staphylococcus warn-eri,Capnocytophaga canimorsus, Stenotrophomonas maltophilia, Citrobacter braakii, Streptococcus agalactiae, Citrobacter freundii, Streptococcus anginosus, Clostridium perfringens, Streptococcus bovis, Corynebacterium jeikeium, Streptococcus constellatus, Enterobacter aerogenes, Streptococcus dysgalactiae, Enterobacter cloacae, Streptococcus mutans, Enterobacter sakazakii, Streptococcus pneumoniae, Enterococcus faecalis, Streptococcus pyogenes, Enterococcus faecium, Streptococcus salivarius, Escherichia coli, Streptococcus sanguinis, Shigella sp., Streptococcus suis, Gemella haemolysans, Vibrio vulnificus, Gemella morbillorum, Yersinia enterocolitica, Haemophilus influenzae, Yersinia pestis, Kingella kingae, Yersinia pseudotuberculosis и; Klebsiella oxytoca.
Согласно данному изобретению тяжелобольные пациенты, такие как пациенты с сепсисом, могут нуждаться в очень строгом контроле в отношении жизненно важных функций и/или мониторинга защиты органов, и могут проходить терапевтическое лечение.
В контексте данного изобретения, термин «терапевтическое лечение» или «лечение» включает в себя различные способы лечения и терапевтические стратегии, которые включают в себя, без ограничения, противовоспалительные стратегии, введение АДМ-антагонистов, таких как терапевтические антитела, миРНК или ДНК, экстракорпоральное очищение крови или удаление вредных веществ с помощью афереза, диализа, адсорберов для предотвращения цитокинового шторма, удаление медиаторов воспаления, плазмаферез, введение витаминов, таких как витамин С, вентиляцию, такую как механическая вентиляция и немеханическая вентиляция, для обеспечения организма достаточным количеством кислорода, например, процедуры очистки очага, переливание продуктов крови, инфузию коллоидов, замену почек или печени, лечение антибиотиками, инвазивную механическую вентиляцию легких, неинвазивную механическую вентиляцию легких, заместительную почечную терапию, использование сосудосуживающих препаратов, инфузионную терапию, аферез и меры для защиты органов.
Дополнительное лечение согласно данному изобретению включает в себя введение клеток или клеточных продуктов, таких как стволовые клетки, кровь или плазма, и стабилизацию кровообращения пациентов и защиту эндотелиального гликокаликса, например, с помощью оптимальных стратегий инфузионной терапии, например, для достижения нормоволемии, и предотвращения или лечения гиперволемии или гиповолемии. Кроме того, сосудосуживающие препараты или, например, катехоламин, а также ингибирование альбумина или гепараназы с помощью нефракционированного гепарина или N-десульфатированного pe-N-ацетилированного гепарина являются полезными средствами для поддержания кровообращения и эндотелиального слоя.
Кроме того, терапевтическое лечение согласно данному изобретению включает в себя, без ограничения, стабилизацию свертывания крови, ингибиторы iNOS, противовоспалительные агенты, такие как гидрокортизон, седативные и анальгетические средства, а также инсулин.
«Заместительная почечная терапия» (ЗПТ) относится к терапии, которая применяется для замены нормальной функции фильтрации крови в почках. Заместительная почечная терапия может относиться к диализу (например, гемодиализу или перитонеальному диализу), гемофильтрации и гемодиафильтрации. Такие методы представляют собой различные способы перенаправления крови в машину, ее очистки и последующего возврата в организм. Заместительная почечная терапия может также относиться к трансплантации почки, которая является конечной формой замены, когда старая почка заменяется донорской почкой. Гемодиализ, гемофильтрация и гемодиафильтрация могут быть непрерывными или периодическими, и могут использовать артериовенозный путь (при котором кровь выходит из артерии и возвращается через вену) или венозный путь (при котором кровь выходит из вены и возвращается через вену). Это дает различные типы ЗПТ. Например, заместительная почечная терапия может быть выбрана из группы, но не ограничена лишь этими: непрерывной заместительной почечной терапии (CRRT), непрерывного гемодиализа (CHD), непрерывного артериовенозного гемодиализа (CAVHD), непрерывного веновенозного гемодиализа (CVVHD), непрерывной гемофильтрации (CHF), непрерывной артериовенозной гемофильтрации (CAVH или CAVHF), непрерывной веновенозной гемофильтрации (CWH или CVVHF), непрерывной гемодиафильтрации (CHDF), непрерывной артериовенозной гемодиафильтрации (CAVHDF), непрерывной веновенозной гемодиафильтрации (CVVHDF), периодической заместительной почечной терапии (IRRT), периодического гемодиализа (IHD), периодического веновенозного гемодиализа (IVVHD), периодической гемофильтрация (IHF), периодической веновенозной гемофильтрация (IVVH или IVVHF) периодической гемодиафильтрации (IHDF) и периодической веновенозной гемодиафильтрации (IVVHD).
Искусственная и механическая вентиляция являются эффективными подходами для улучшения правильного газообмена и вентиляции, и направлены на спасение жизни при тяжелой гипоксемии. Искусственная вентиляция относится к способствованию или стимуляции дыхания субъекта. Искусственная вентиляция может быть выбрана из группы, состоящей из: механической вентиляции легких, ручной вентиляции, экстракорпоральной мембранной оксигенации (ЕСМО) и неинвазивной вентиляции (NIV). Механическая вентиляция относится к способу механического способствования дыханию или замене собственного дыхания. Это может включать в себя аппарат, который называется респиратором. Механическая вентиляция может быть высокочастотной колебательной вентиляцией или частичной жидкостной вентиляцией. «Инфузионная терапия» относится к мониторингу и контролю баланса жидкостей субъекта и введению жидкостей для стабилизации кровообращения или жизнеспособности органов, например, путем перорального, энтерального или внутривенного введения жидкости. Это включает в себя стабилизацию баланса жидкостей и электролитов, или предотвращение или коррекцию гипер- или гиповолемии, а также подачу продуктов крови.
Неотложные хирургические операции/экстренная хирургия необходимы, если у пациента возникло неотложное состояние, и может потребоваться немедленное хирургическое вмешательство для сохранения жизни или состояния здоровья. Субъект, нуждающийся в экстренной хирургии, может быть выбран из группы, состоящей из субъектов, страдающих от сильной травмы, активной неконтролируемой инфекции, трансплантации органов, орган-профилактической или орган-стабилизирующей хирургии или рака.
Процедуры очистки - это гигиенические способы предотвращения заражения субъектов, в частности внутрибольничных инфекций, включающие в себя дезинфекцию всех органических и неорганических поверхностей, которые могут контактировать с пациентом, таких как, например, кожа, предметы в комнате пациента, медицинские приборы, диагностические устройства или комнатный воздух. Процедуры очистки включают в себя использование защитной одежды и предметов, таких как маски, халаты, перчатки или гигиенический шлюз, и таких действий, как ограниченное посещение пациента. Кроме того, процедуры очистки включают в себя очистку самого пациента и одежды пациента.
В случае тяжелых заболеваний, таких как сепсис или тяжелые инфекции, очень важно иметь ранний диагноз, а также прогноз и оценку риска для исхода пациента, чтобы найти оптимальную терапию и тактику ведения. Терапевтические подходы должны быть очень индивидуальными и изменяться от случая к случаю. Терапевтический мониторинг необходим для лечения по передовым подходам и зависит от сроков лечения, использования комбинированной терапии и оптимизации дозирования препарата. Неправильное или пропущенное лечение или тактика введения пациента увеличит уровень смертности ежечасно.
Терапевтическое лечение согласно данному изобретению может представлять собой лечение антибиотиками, при котором могут назначаться один или большее количество «антибиотиков» или «антибиотических агентов», если была диагностирована инфекция или были выявлены симптомы инфекционного заболевания.
Антибиотики или антибиотические агенты согласно данному изобретению также включают в себя потенциально противогрибковые или противовирусные соединения, используемые для лечения диагностированной инфекции или сепсиса. Антибиотические агенты, обычно применяемые в лечении любой данной инфекции, разделены по классам патогенов:
Грамположительного спектра действия: пенициллины, (ампициллин, амоксициллин), пеницилиназа устойчивые, (диклоксациллин, оксациллин), цефалоспорины (1-го и 2-го поколения), макролиды (эритромицин, кларитромицин, азитромицин), хинолоны (гатифлоксацин, моксифлоксацин, левофлоксацин), ванкомицин, сульфаниламид/триметоприм, клиндамицин, тетрациклины, хлорамфеникол, линезолид, синерцид.
Грамотрицательного спектра действия: пенициллины широкого спектра (тикарциллин, клавуланат, пиперациллин, тазобактам), цефалоспорины (2-го, 3-го и 4-го поколения), аминогликозиды, макролиды, азитромицин, хинолоны (ципрофлоксацин), монобактамы (азетреонам), сульфаниламид/триметоприм, карбапенемы (имипенем), хлорамфеникол. Псевдомонадного спектра действия: ципрофлоксацин, аминогликозиды, некоторые цефалоспорины 3-го поколения, цефалоспорины 4-го поколения, пенициллины широкого спектра действия, карбапенемы.
Противогрибковые лекарства: аллиамины, амфотерицин В, флуконазол и другие азолы, итраконазол, вориконазол, позаконазол, равуконазол, эхинокандины, флуцитозин, сордарины, ингибиторы хитин-синтетазы, ингибиторы топоизомеразы, липопептиды, прадимицины, липосомальный нистатин, вориконазол, эхинокандины, имидазол, триазол, тиазол, полиен.
Противовирусные лекарства: абакавир, ацикловир, активированный олигомеризатор каспазы, адефовир амантадин, ампренавир (агенераза), амплиген, арбидол, атазанавир, атрипла, балавир, цидофовир, комбивир, долутегравир, дарунавир, делавирдин, динадозан, двухцепочечная РНК, доконазол, эдоксудин, эфавиренц, эмтрицитабин, энфувиртид, энтекавир, эколивер, фамцикловир, комбинированный препарат с установленной дозой (антиретровирусный), фомивирсен, фосампренавир, фоскарнет, фосфонет, ингибитор слияния, ганцикловир, ибацитабин, имуновир, идоксуридин, имиквимод, индинавир, инозин, ингибитор интегразы, интерферон типа III, интерферон типа II, интерферон типа I, интерферон, ламивудин, лопинавир, ловирид, маравирок, мороксидин, метизазон, морфолинос, нелфинавир, невирапин, нексавир, нитазоксанид, аналоги нуклеозидов, новир, осельтамивир (тамифлю), пегинтерферон альфа-2а, пенцикловир, перамивир, плеконарил, подофиллотоксин, ингибитор протеазы (фармакологический), ралтегравир, ингибитор обратной транскриптазы, рибавирин, рибозим, рифампицин, римантадин, ритонавир, РНКаза Н, ингибиторы протеаз, пирамидин, саквинавир, софосбувир, ставудин, синергетический энхансер (антиретровирусный), телапревир, тенофовир, тенофовир дисопроксил, типранавир, трифлуридин, тризивир, тромантадин, трувада, валацикловир (вальтрекс), вал ганцикловир, викривирок, видарабин, вирамидин, зальцитабин, занамивир (реленза), зидовудин.
Кроме того, могут быть использованы антибиотические агенты содержащие бактериофаги для лечения бактериальных инфекций, синтетические антимикробные пептиды или антагонисты железа/хелаторы железа. Кроме того, терапевтические антитела или антагонист к патогенным структурам, например анти-VAP-антитела, вакцинация против резистентных клонов, введение иммунных клеток, таких как in vitro примированные или модулированные Т-эффекторные клетки, являются антибиотическими агентами, которые представляют варианты лечения для тяжелобольных пациентов, таких как пациенты с сепсисом. Другие антибиотические агенты/средства для лечения, или терапевтические стратегии против инфекции или для предотвращения новых инфекций, включают в себя использование антисептиков, дезинфицирующих продуктов, анти-вирулентных агентов, таких как липосомы, санитарию, уход за ранами, хирургическое вмешательство.
Также возможно комбинировать несколько из вышеупомянутых антибиотических агентов или стратегий лечения.
Согласно данному изобретению, проАДМ и, необязательно, ПКТ и/или другие маркеры или клинические оценки используются в качестве маркеров для мониторинга терапии, включая прогноз, оценку риска и стратификацию риска последующего нежелательного явления со здоровьем у пациента, которому был поставлен диагноз «тяжелобольной». Специалист в данной области способен получить или разработать средства для идентификации, измерения, определения и/или количественного подсчета любой из указанных выше молекул проАДМ или их фрагментов или вариантов, а также других маркеров согласно данному изобретению в соответствии с стандартной молекулярно-биологической практикой.
Уровень проАДМ или его фрагментов, а также уровни других маркеров, согласно данному изобретению, могут быть определены любым анализом, который надежно определяет концентрацию маркера. В частности, могут быть использованы масс-спектрометрия (МС) и/или иммуноанализы, как показано в прилагаемых примерах. В данном документе, иммуноанализ представляет собой биохимический тест, который измеряет наличие или концентрацию макромолекулы/полипептида в растворе с использованием антитела, или связывающего фрагмента антитела, или иммуноглобулина.
Способы определения проАДМ или других маркеров, таких как ПКТ, используемые в контексте данного изобретения, предназначены для данного изобретения. В качестве примера, может быть использован способ, выбранный из группы, состоящей из: масс-спектрометрии (МС), люминесцентного иммуноанализа (ЛИА), радиоиммуноанализа (РИА), хемилюминесцентного и флуоресцентного иммуноанализов, ферментативного иммуноанализа (ФИА), иммуноферментных анализов (ИФА), анализов на основе массивов люминесцентных гранул, анализов на основе массивов магнитных гранул, анализов с белковыми микрочипами, анализов в быстрой форме, таких как, например, анализ иммунохроматографической полоской, анализ с редкоземельными криптатами, и автоматизированных систем/анализаторов.
Определение проАДМ и, возможно, других маркеров на основе распознавания антителами является предпочтительным вариантом осуществления изобретения. Как применяется в данном документе, термин «антитело» относится к молекулам иммуноглобулина и иммунологически активным частям молекул иммуноглобулина (Ig), то есть молекулам, которые содержат антиген-связывающий сайт, который специфически связывает (иммунно реагирует с) антиген. Согласно изобретению, антитела могут быть как моноклональными, так и поликлональными антителами. В частности, используются антитела, которые специфически связываются, по меньшей мере, с проАДМ или его фрагментами.
Антитело считается специфичным, если его аффинность к молекуле интереса, например, АДМ или его фрагменту, по меньшей мере в 50 раз выше, предпочтительно в 100 раз выше, наиболее предпочтительно по меньшей мере в 1000 раз выше, чем по отношению к другим молекулам, содержащимся в образце, содержащем молекулу интереса. В данной области техники хорошо известно, как разрабатывать и отбирать антитела с заданной специфичностью. В контексте изобретения, моноклональные антитела являются предпочтительными. Антитело или связывающий фрагмент антитела специфически связывается с определенными в данном документе маркерами или их фрагментами. В частности, антитело или связывающий фрагмент антитела связывается с определенными в данном документе пептидами АДМ. Таким образом, определенные в данном документе пептиды также могут быть эпитопами, с которыми специфически связываются антитела. Также, антитело или связывающий фрагмент антитела используют в способах и наборах согласно данному изобретению, которые специфически связываются с АДМ или проАДМ, в частности с СФ-проАДМ.
Также, антитело или связывающий фрагмент антитела используют в способах и наборах согласно данному изобретению, которые специфически связываются с проАДМ или его фрагментами, и необязательно, с другими маркерами согласно данному изобретению, например ПКТ. Иллюстративные иммуноанализы могут представлять собой люминесцентный иммуноанализ (ЛИА), радиоиммуноанализ (РИА), хемилюминесцентный и флуоресцентный иммуноанализы, ферментативный иммуноанализ (ФИА), иммуноферментный анализ (ИФА), анализ на основе массивов люминесцентных гранул, анализ на основе массивов магнитных гранул, анализ с белковыми микрочипами, анализы в быстрой форме, анализ с редкоземельными криптатами. Также, могут использоваться анализы, подходящие для тестирования в местах оказания медицинской помощи, и анализы в быстрой форме, такие как, например, анализы иммунохроматографической полоской. Предусмотрены также автоматические иммуноанализы, такие как анализ KRYPTOR.
В альтернативном варианте, в объем данного изобретения вместо антител могут быть включены другие молекулы захвата или молекулярные каркасы, которые специфически и/или избирательно распознают проАДМ. В данном документе, термин «молекулы захвата» или «молекулярные каркасы» включает в себя молекулы, которые можно использовать для связывания молекул-мишеней или молекул интереса, то есть аналитов (например, проАДМ, проАДМ, СФ-проАДМ и ПКТ) в образце. Таким образом, молекулы захвата должны иметь подходящую форму, как пространственную, так и с точки зрения характеристик поверхности, таких как поверхностный заряд, гидрофобность, гидрофильность, наличие или отсутствие доноров и/или акцепторов Льюиса, чтобы специфически связывать молекулы-мишени или молекулы интереса. Таким образом, связывание может, например, быть опосредовано взаимодействиями ионных, ван-дер-ваальсовых, пи-пи, сигма-пи, гидрофобных или водородных связей, или комбинацией двух или большего количества вышеупомянутых взаимодействий или ковалентных взаимодействий между молекулами захвата, или молекулярным каркасом, и молекулами-мишенями, или молекулами интереса. В контексте данного изобретения, молекулы захвата или молекулярные каркасы, например, могут быть выбраны из группы, состоящей из молекулы нуклеиновой кислоты, молекулы углевода, молекулы PNA, белка, пептида и гликопротеина. Молекулы захвата или молекулярные каркасы включают в себя, например, аптамеры, DARpin (сконструированные белки с анкириновым повтором - Designed Ankyrin Repeat Proteins). Включены аффимеры и тому подобное.
В некоторых аспектах изобретения, способ представляет собой иммуноанализ, включающий в себя стадии:
а) приведения в контакт образца с
i. первым антителом или его антиген-связывающим фрагментом или его производным, специфичным к первому эпитопу указанного проАДМ, и
ii. вторым антителом или его антиген-связывающим фрагментом или его производным, специфичным к второму эпитопу указанного проАДМ; и
б) обнаружения связывания двух антител или антиген-связывающих фрагментов или их производных с указанным проАДМ.
Предпочтительно одно из антител может быть мечено, а другое антитело может быть связано с твердой фазой или может быть селективно связано с твердой фазой. В особенно предпочтительном аспекте анализа одно из антител является меченным, а другое либо связано с твердой фазой, либо может быть селективно связано с твердой фазой. Первое антитело и второе антитело могут присутствовать как диспергированные в жидкой реакционной смеси, и при этом первый метящий компонент, который является частью системы мечения на основе флуоресцентного или хемилюминесцентного тушения или усиления, связан с первым антитело, а второй компонент мечения указанной системы мечения связан со вторым антителом, так что после связывания обеих антител с указанным проАДМ или его фрагментами, подлежащим(и) обнаружению, создается измеримый сигнал, который позволяет обнаруживать полученные сэндвич-комплексы в анализируемом растворе. Система мечения может содержать редкоземельный криптат или хелат в комбинации с флуоресцентным или хемилюминесцентным красителем, в частности цианинового типа.
В предпочтительном варианте осуществления, способ воплощают в виде гетерогенного сэндвич-иммуноанализа, в котором одно из антител иммобилизовано на произвольно выбранной твердой фазе, например на стенках пробирок с покрытием (например, полистирольных пробирок; пробирок с покрытием; СТ - coated tubes) или плашек для микротитрования, например, состоящих из полистирола, или на частицах, таких как, например, магнитные частицы, причем другое антитело имеет группу, сходную с обнаруживаемой меткой, или делающую возможной избирательное прикрепление к метке, и которая служит для обнаружения сформированных сэндвич-структур. Также возможна задержанная на время или последующая иммобилизация с использованием подходящих твердых фаз.
Способ согласно данному изобретению, кроме того, может быть воплощен как гомогенный способ, в котором сэндвич-комплексы, образованные антителом/антителами и маркером, проАДМ или его фрагментом, который должен быть обнаружен, остаются суспендированными в жидкой фазе. В этом случае предпочтительно, чтобы при использовании двух антител оба антитела были помечены частями системы обнаружения, что приводит к созданию сигнала или инициации сигнала, если оба антитела интегрированы в один сэндвич. Такие способы должны быть воплощены, в частности, в качестве способов усиления флуоресценции или обнаружения тушения флуоресценции. В частности, предпочтительный аспект относится к использованию детектирующих реагентов, которые должны использоваться попарно, таких как, например, те, которые описаны в US 4882733, ЕР 0180492 или ЕР 0539477, и приведены в предшествующем уровне техники. Таким образом, становятся возможными измерения, при которых обнаруживаются только продукты реакции, содержащие оба метящих компонента в одном иммунном комплексе непосредственно в реакционной смеси. Например, такие технологии предлагаются под торговыми марками TRACE® (Time Resolved Amplified Cryptate Emission) или KRYPTOR®, реализуя принципы вышеупомянутых приложений. Поэтому в конкретных предпочтительных аспектах диагностическое устройство используется для осуществления предложенного в данном документе способа. Например, определяют уровень проАДМ или его фрагмента, и/или уровень любого дополнительного маркера предложенного в данном документе способа, такого как ПКТ. В частности, в предпочтительных аспектах, диагностическое устройство представляет собой KRYPTOR®.
Уровень маркера согласно данному изобретению, например, проАДМ или его фрагментов, ПКТ или его фрагментов, или других маркеров, также может быть определен способами на основе масс-спектрометрии (МС). Такой способ может включать в себя определение присутствия, количества или концентрации одного или большего количества модифицированных или немодифицированных фрагментов пептидов, например проАДМ или ПКТ, в указанном биологическом образце или продукте белкового расщепления (например, триптического расщепления) указанного образца и, необязательно, отделение образца с помощью хроматографических способов, и проведение анализа МС с приготовленным и необязательно отделенным образцом. Например, в анализе МС могут использовать масс-спектрометрию с контролем селективных реакций (SRM), контролем множества реакций (MRM) или контролем параллельных реакций (PRM), в частности, для определения количества проАДМ или его фрагментов.
В данном документе, термин «масс-спектрометрия» или «МС» относится к аналитическому методу, позволяющему идентифицировать соединения по их массе. Чтобы улучшить возможности масс-спектрометрии в плане разделения масс и определения массы, образцы могут быть обработаны перед анализом МС. Соответственно, изобретение относится к способам обнаружения МС, которые можно комбинировать с технологиями иммунообогащения, способами, связанными с приготовлением образцов и/или способами хроматографии, предпочтительно с жидкостной хроматографией (ЖХ), более предпочтительно с высокоэффективной жидкостной хроматографией (ВЭЖХ) или ультра высокоэффективной жидкостной хроматографии (UHPLC). Способы приготовления образцов включают в себя способы лизиса, фракционирования, расщепления образца до пептидов, отделения, обогащения, диализа, обессоливания, алкилирования и/или восстановления пептидов. Однако эти этапы не являются обязательными. Селективное обнаружение ионов аналита может проводиться с помощью тандемной масс-спектрометрии (МС/МС). Тандемная масс-спектрометрия характеризуется стадией выбора массы (как применяется в данном документе, термин «выбор массы» обозначает отделение ионов, имеющих заданное m/z или узкий диапазон значений m/z) с последующей фрагментацией выбранных ионов и масс-анализом ионов результирующего продукта (фрагмента).
Специалисту известно, как количественно определить уровень маркера в образце с помощью масс-спектрометрических способов. Например, может быть использовано определение относительного количества «rSRM» или абсолютного количества, как описано выше.
Кроме того, уровни (включая контрольные уровни) могут быть определены с помощью способов на основе масс-спектрометрии, таких как способы, определяющие относительное количество или определяющие абсолютное количество белка или его фрагмента, представляющего интерес.
Определение относительного количества «rSRM» может быть выполнено путем:
1. Определения увеличенного или уменьшенного количества белка-мишени путем сравнения площади характерного пика SRM (контроль селективной реакции) от данного фрагмента пептида-мишени, обнаруженного в образце, с площадью такого же характерного пика SRM фрагмента пептида-мишени по меньшей мере во втором, третьем, четвертом или большем количестве биологических образцов.
2. Определения увеличенного или уменьшенного количества белка-мишени путем сравнения площади характерного пика SRM от данного пептида-мишени, обнаруженного в образце, с площадями характерных пиков SRM, полученных для фрагментов пептидов из других белков, в других образцах, полученных из отличающихся или разных биологических источников, где сравнение площадей характерных пиков SRM между двумя образцами для пептидного фрагмента нормализуют для например количества белка, анализируемого в каждом образце.
3. Определения увеличенного или уменьшенного количества белка-мишени путем сравнения площади характерного пика SRM от данного пептида-мишени с площадями характерных пиков SRM от других фрагментов пептидов полученных из разных белков из того же биологического образца, для того чтобы нормализовать изменяющиеся уровни гистоновых белков с уровням других белков, которые не изменяют своих уровней экспрессии при различных клеточных условиях.
4. Эти анализы могут быть применены как к немодифицированным фрагментам пептидов, так и к модифицированным фрагментам пептидов белков-мишеней, где модификации включают в себя, но не ограничиваются лишь этими: фосфорилирование и/или гликозилирование, ацетилирование, метилирование (моно, ди, три), цитруллинирование, убиквитинилирование, и где относительные уровни модифицированных пептидов определяют таким же образом, как определяют относительные количества немодифицированных пептидов.
Определение абсолютного количества данного пептида может быть достигнуто путем:
1. Сравнения площади характерного пика SRM/MRM для данного фрагмента пептида из белков-мишеней в отдельном биологическом образце с площадью характерного пика SRM/MRM внутреннего стандарта фрагмента пептида, введенного в белковый лизат из биологического образца. Внутренним стандартом может быть меченая синтетическая версия фрагмента пептида из исследуемого белка-мишени, или меченый рекомбинантный белок. Этот стандарт добавляют в образец в известных количествах до (обязательно для рекомбинантного белка) или после расщепления, и площадь характерного пика SRM/MRM может быть раздельно определена как для стандарта внутреннего фрагмента пептида, так и для нативного фрагмента пептида в биологическом образце, с последующим сравнением обеих площадей пиков. Это может быть применено как к немодифицированным фрагментам пептидов, так и к модифицированным фрагментам пептидов, где модификации включают в себя, но не ограничиваются лишь этими: фосфорилирование и/или гликозилирование, ацетилирование, метилирование (моно, ди, три), цитруллинирование, убиквитинилирование, и где абсолютные уровни модифицированных пептидов могут быть определены таким же образом, как определяют абсолютные уровни немодифицированных пептидов.
2. Также может быть определено количество пептидов с использованием внешних калибровочных кривых. Подход с кривой нормального распределения использует постоянное количество тяжелого пептида в качестве внутреннего стандарта и различное количество легкого синтетического пептида, добавленного в образец. Репрезентативную матрицу, аналогичную матрице тестовых образцов, необходимо использовать для построения стандартных кривых для учета эффекта матрицы. Кроме того, способ обратной кривой позволяет обойти проблему эндогенного аналита в матрице, где постоянное количество легкого пептида вводят поверх эндогенного аналита для создания внутреннего стандарта, а различные количества тяжелого пептида вводят для создания набора стандартов концентрации. В тестируемые образцы для сравнения с кривыми нормального распределения или обратными кривыми добавляют то же количество стандартного пептида, что и внутреннего стандарта, добавленного в матрицу, используемую для создания калибровочной кривой.
Данное изобретение дополнительно относится к наборам, использованию наборов, и способам, в которых используются такие наборы. Данное изобретение относится к наборам для осуществления описанных выше и ниже в данном документе предложенных способов. Приведенные в данном документе определения, например, предложенные в отношении способов, также применяют к наборам согласно данному изобретению. В частности, изобретение относится к наборам для мониторинга терапии, включающего в себя прогноз, оценку риска или стратификацию риска последующего нежелательного явления со здоровьем у пациента, при этом указанный набор содержит
- реагенты обнаружения для определения уровня проАДМ или его фрагмента(ов) и, необязательно, дополнительно для определения уровня ПКТ, лактата и/или С-реактивного белка или их фрагмента(ов) в образце из субъекта, и реагенты обнаружения для определения указанного уровня проАДМ в указанном образце указанного субъекта, и
- данные по контролю, такие как контрольный уровень, соответствующий уровню высокой и/или низкой тяжести проАДМ, причем уровень низкой тяжести составляет ниже 4 нмоль/л, предпочтительно ниже 3 нмоль/л, более предпочтительно ниже 2,7 нмоль/л, и уровень высокой тяжести составляет выше 6,5 нмоль/л, предпочтительно выше 6,95 нмоль/л, более предпочтительно выше 10,9 нмоль/л и, необязательно, уровней ПКТ, лактата и/или С-реактивного белка, причем указанные данные по контролю предпочтительно хранятся на машиночитаемом носителе и/или используются в форме исполняемого компьютером кода, сконфигурированного для сравнения определенных уровней проАДМ или его фрагмента(ов) и, необязательно, дополнительно определенных уровней ПКТ, лактата и/или С-реактивного белка или его фрагмента(ов), с указанными данными по контролю.
Как применяется в данном документе, «данные по контролю» включают в себя контрольный уровень(ни) проАДМ и, необязательно, ПКТ, лактата и/или С-реактивного белка. Уровни проАДМ и, необязательно, ПКТ, лактата и/или С-реактивного белка в образце субъекта можно сравнить с контрольными уровнями, содержащимися в данных набора по контролю. Контрольные уровни описаны в данном документе выше и иллюстрируются также в прилагаемых примерах. Данные по контролю также могут включать в себя контрольный образец, с которым сравнивается уровень проАДМ и, необязательно, ПКТ, лактата и/или С-реактивного белка. Данные по контролю также могут включать в себя руководство по использованию наборов согласно данному изобретению.
Набор может дополнительно содержать предметы, полезные для получения образца, например образца крови, например, набор может содержать контейнер, причем указанный контейнер содержит устройство для прикрепления указанного контейнера к канюле или шприцу, является шприц-совместимым для отбора крови, имеет внутреннее давление ниже атмосферного, такое, которое подходит для извлечения предварительно определенного объема образца в указанный контейнер, и/или дополнительно содержит детергенты, хаотропные соли, ингибиторы рибонуклеазы, хелатообразующие агенты, такие как гуанидин изотиоцианат, гуанидин гидрохлорид, додецилсульфат натрия, полиоксиэтиленсорбитанмонолаурат, ингибирующие РНКазу белки, и их смеси, и/или систему фильтров, содержащую нитроцеллюлозу, кремнеземную матрицу, ферромагнитные сферы, чашечку для возврата перелитого, трегалозу, фруктозу, лактозу, маннозу, полиэтиленгликоль, глицерин, ЭДТК, Трис, лимонен, ксилол, бензоил, фенол, минеральное масло, анилин, пирол, цитрат и их смеси.
Как применяется в данном документе, термин «реагент обнаружения» или тому подобное представляет собой реагенты, которые подходят для определения присутствия описанного в данном документе маркера(ов), например, проАДМ, ПКТ, лактата и/или С-реактивного белка. Такими иллюстративными реагентами обнаружения являются, например, лиганды, например, антитела или их фрагменты, которые специфически связываются с пептидом или эпитопами описанного в данном документе маркера(ов). Такие лиганды могут быть использованы в иммуноанализах, как описано выше. Дополнительные реагенты, которые используются в иммуноанализах для определения уровня маркера(ов), также могут быть включены в набор и в данном документе рассматриваются как реагенты обнаружения. Реагенты для обнаружения также могут относиться к реагентам, которые используются для обнаружения маркеров или их фрагментов способами на основе МС. Таким образом, таким реагентом обнаружения также могут быть реагенты, например ферменты, химические вещества, буферы и т.д., которые используются для подготовки образца к анализу МС. Масс-спектрометр также можно рассматривать как реагент обнаружения. Реагенты обнаружения согласно изобретению также могут представлять собой калибровочный раствор(ы), например который может быть использован для определения и сравнения уровня маркера(ов).
Чувствительность и специфичность диагностического и/или прогностического теста зависит не только от аналитического «качества» теста, но и от определения того, что представляет собой аномальный результат. На практике, графики зависимости чувствительности от частоты ложно положительных заключений (кривые ROC), как правило, рассчитываются путем построения графика зависимости значения переменной от ее относительной частоты в «нормальной» (т.е. явно здоровые люди, не имеющие инфекции), и «больной» (например, субъекты, имеющие инфекцию) группах. Для любого конкретного маркера (например, АДМ) распределение уровней маркера для субъектов с и без заболевания/патологии, вероятно, будет перекрываться. В таких условиях тест не позволяет окончательно отличить норму от заболевания с точностью 100%, и область перекрытия может указывать, где тест не может отличить норму от заболевания. Выбирают порог, ниже которого тест считается аномальным, и выше которого тест считается нормальным, или ниже или выше которого тест указывает на конкретную патологию, например, инфекционное заболевание. Площадь под кривой ROC является мерой вероятности того, что предполагаемое измерение позволит правильно идентифицировать патологию. Кривые ROC могут использоваться, даже если результаты испытаний не обязательно дают точное число. Пока можно ранжировать результаты, можно создать кривую ROC. Например, результаты теста на образцах с «болезнью» могут быть ранжированы согласно степени (например, 1 = низкая, 2 = нормальная и 3 = высокая). Это ранжирование может быть связано с результатами в «нормальной» группе и полученной кривой ROC. Эти способы хорошо известны в данной области техники; смотрите, например, Hanley et al., 1982. Radiology 143: 29-36. Предпочтительно, пороговое значение выбирают так, чтобы обеспечить площадь кривой ROC больше чем около 0,5, более предпочтительно больше чем около 0,7, еще более предпочтительно больше чем около 0,8, еще более предпочтительно больше чем около 0,85, и наиболее предпочтительно больше чем около 0,9. Термин «около» в данном контексте относится к +/-5% от данного замера.
Горизонтальная ось кривой ROC представляет (1-специфичность), которая увеличивается с частотой ложно-положительных заключений. Вертикальная ось кривой представляет чувствительность, которая увеличивается с частотой истинно-положительных заключений. Таким образом, для конкретного выбранного порогового значения может быть определено значение (1-специфичность) и может быть получена соответствующая чувствительность. Площадь под кривой ROC является мерой вероятности того, что измеренный уровень маркера позволит правильно идентифицировать заболевание или патологию. Таким образом, площадь под кривой ROC может использоваться для определения эффективности теста.
Соответственно, изобретение включает в себя введение антибиотика, подходящего для лечения, на основе информации, полученной способом, описанным в данном документе.
Как применяется в данном документе, термины «содержащий» и «включающий в себя», или их грамматические варианты, следует понимать как указывающие на заявленные признаки, целые числа, этапы или компоненты, но не исключающие добавления одного или большего количества дополнительных признаков, целых чисел, этапов, компонентов, или их групп. Этот термин охватывает термины «состоящий из» и «состоящий по существу из».
Таким образом, термины «содержащий»/«включающий в себя»/«имеющий» означают, что может присутствовать любой дополнительный компонент (или, аналогично, признаки, целые числа, этапы и тому подобное). Термин «состоящий из» означает то, что нет никакого дополнительного компонента (или, аналогично, признаков, целых чисел, этапов и т.п.).
Термин «состоящий по существу из» или его грамматические варианты при использовании в данном документе следует понимать как указывающий на заявленные признаки, целые числа, этапы или компоненты, но не исключающий добавления одного или большего количества дополнительных признаков, целых чисел, этапов, компонентов или их групп, но только в том случае, если дополнительные признаки, целые числа, этапы, компоненты или их группы существенно не изменяют основные и новые характеристики заявленной композиции, устройства или способа.
Таким образом, термин «состоящий по существу из» означает, что могут присутствовать такие конкретные дополнительные компоненты (или, аналогично, признаки, целые числа, этапы и тому подобное), а именно те, которые не оказывают существенного влияния на основные характеристики композиции, устройства или способа. Другими словами, термин «по существу состоящий из» (который может использоваться в данном документе взаимозаменяемо с термином «содержащий по существу»), допускает присутствие других компонентов в композиции, устройстве или способе, в дополнение к обязательным компонентам (или, аналогично, признакам, целым числам, этапам и т.п.), при условии, что на существенные характеристики устройства или способа присутствие других компонентов не оказывает существенного влияния.
Термин «способ» относится к способам, средствам, методам и процедурам для выполнения данной задачи, включая, но не ограничиваясь лишь этим: способы, средства, методики и процедуры, либо уже известные, либо легко разрабатываемые из известных способов, средств, методов и процедур, специалистами химической, биологической и биофизической области техники.
Данное изобретение дополнительно описано путем отсылки к следующим неограничивающим примерам.
ПРИМЕРЫ
Способы примеров:
Схема исследования и пациенты:
Это исследование представляет собой вторичный анализ плацебо-контролируемого испытания противомикробной терапии с селенитом натрия и корректировкой по прокальцитонину при тяжелом сепсисе (SISPCT), которая проводилась в 33 многопрофильных отделениях интенсивной терапии (ОИТ) по всей Германии с ноября 2009 года по февраль 2013 года (26). Критерии допуска включали в себя взрослых пациентов >18 лет с новым тяжелым сепсисом или септическим шоком (<24 часа), согласно определению SEPSIS-1 Комитета консенсусной конференции ACCP/SCCM, и дополнительно классифицировались в соответствии с определениями 2016 года (сепсис-3 и септический шок-3) (4). Детали схемы исследования, сбора данных и ведения были описаны ранее (26). Комитет по этике Университетской больницы Йены и всех других центров одобрил исследование, и при необходимости было получено письменное информированное согласие. Измерения биомаркеров:
Пациенты были включены в исследование в течение 24 часов после постановки диагноза тяжелого сепсиса или септического шока, и сразу после этого измеряли ПКТ, СРБ и лактат. ПКТ измеряли на приборах с диапазоном измерения 0,02-5000 нг/мл и чувствительностью функционального анализа и нижним пределом обнаружения, по меньшей мере, 0,06 нг/мл и 0,02 нг/мл, соответственно. Собирали дополнительные образцы крови из всех пациентов и хранили их в центральной исследовательской лаборатории в Йене при -80°С. Концентрации СФ-проАДМ в плазме измеряли ретроспективно (Kryptor®, Thermo Fisher Scientific, Германия) с пределом обнаружения 0,05 нмоль/л. При зачисление в исследование проводилась клиническая оценка степени тяжести, включая динамическую оценку органной недостаточности (SOFA), оценку критических состояний и хронических заболеваний (APACHE) II, и упрощенную оценку критических состояний (SAPS) II.
Статистический анализ:
Различия в демографических и клинических характеристиках в отношении 28-дневной смертности были оценены с использованием критерия у2 для категорийных переменных, и критерия Стьюдента или U-критерия Манна-Уитни для непрерывных переменных в зависимости от нормальности распределения. Нормально и ненормально распределенные значения были выражены как среднее (среднеквадратическое отклонение) и медиана [первый квартиль-третий квартиль], соответственно. Связь между смертностью и каждым биомаркером и клинической оценкой во все моменты времени была оценена с использованием площади под кривыми ROC (AUROC) и регрессионного анализа Кокса, с мультивариантным анализом с поправкой на возраст и наличие сопутствующих заболеваний и септического шока. Пациенты были дополнительно разделены на три подгруппы тяжести (низкая, средняя и высокая) на основе расчета двух пороговых значений AUROC по всей группе для каждого биомаркера и клинической оценки в каждый момент времени, с заданной чувствительностью и специфичностью, близкими к 90%. Дополнительно идентифицировали подгруппу клинически стабильных пациентов по отсутствию каких-либо ОИТ-связанных процедур или осложнений (включая процедуры очистки очага, неотложную хирургию, появление новых инфекций, переливание продуктов крови, инфузию коллоидов, инвазивную механическую вентиляцию легких, замену почек/печени или терапию сосудосуживающими препаратами, и ухудшение общих клинических показателей и симптомов пациента), и дополнительно группу идентифицировали по соответствующим низким концентрациям СФ-проАДМ, которые не показали какого-либо увеличения со времени предыдущего измерения. Смертность и среднюю продолжительность пребывания рассчитывали в обеих группах и сравнивали с группой пациентов, которые были выписаны в каждый определенный момент времени.
Как результат, были построены две модели, стратифицирующие пациентов с изменениями ПКТ, составляющими 20% (от исходной точки до 1-го дня на основе среднего снижения ПКТ, наблюдаемого в течение этого периода времени) и 50% (от исходной точки до четвертого дня на основе ранее построенной модели (26)). Подгруппы пациентов были впоследствии определены исходя из уровней тяжести по уровню СФ-проАДМ и рассчитанных соответствующих показателей смертности. Риск смертности в каждой подгруппе был рассчитан с помощью регрессионного анализа Кокса и проиллюстрирован кривыми Каплана-Мейера. Прогнозируемый риск развития новых инфекций и потребность в процедурах очистки очага и экстренной хирургии в течение 4-7 дней были впоследствии исследованы в модели с исходной точки до 4 дня. Все данные были проанализированы с использованием программного обеспечения R для статистики (версия 3.1.2).
Пример 1: Характеристики пациента
Характеристики пациентов после включения в исследование приведены в Таблице 1.
Всего было проанализировано 1089 пациентов с тяжелым сепсисом (13,0%) или септическим шоком (87,0%), причем 445 (41,3%) и 633 (58,7%) пациентов также соответствовали критериям сепсиса - 3 и септического шока - 3, соответственно. Допущенные пациенты имели средний возраст 65,7 (13,7) лет и среднюю оценку SOFA 10,0 (3,3) балла. 28-дневный уровень смертности от всех причин (N=1076) составил 26,9% (сепсис - 3: 20,0%; септический шок-3: 32,1%), с больничной смертностью 33,4% (сепсис - 3: 24,4%; септический шок - 3: 40,4%). Инфекции, возникающие из одного очага, были обнаружены у 836 пациентов (77,7%), с наиболее распространенными пневмологическими (N=324; 30,1%), внутрибрюшными (N=252; 23,4%), урогенитальными (N=57; 5,3%) и в костной/мягких тканях (N=50; 4,6%) первоисточником. Соответствующие показатели смертности составили 26,5%, 24,6%, 22,8% и 28,0% соответственно. Инфекция с множеством очагов происхождения была обнаружена у 240 (22,3%) пациентов. Наиболее распространенные причины смертности включали в себя вызванную сепсисом полиорганную недостаточность (N=132; 45,7%), рефрактерный септический шок (N=54; 18,7%), смерть от ранее существовавшего заболевания (N=35; 12,1%), и острую дыхательную недостаточность (N=17; 5,9%). Другие причины, такие как кардиогенный и геморрагический шок, тромбоэмболия легочной артерии, отек головного мозга, инфаркт миокарда и аритмия сердца, составили объединенный уровень смертности 8,6%. Ограничение терапии было применено к 3,4% пациентов.
Пример 2: Связь основных биомаркеров и клинических оценок с смертностью
Однофакторный и мультифакторный регрессионный анализ Кокса показал, что СФ-проАДМ имел наиболее сильную связь с 28-дневной смертностью среди всей группы пациентов, а также в подгруппах с сепсисом-3 и септическим шоком-3 (Таблица 2). Соответствующий анализ AUROC выявил значимые различия во всех сравнениях биомаркеров и клинических оценок с СФ-проАДМ, за исключением APACHE II (группа пациентов с сепсисом-3).
Аналогичные результаты были также обнаружены для прогнозирования смертности для 7 дней, 90 дней, ОИТ и в стационаре (Таблица 3), наряду с добавлением СФ-проАДМ ко всем возможным комбинациям биомаркеров и клинических оценок (N=63), значительно увеличивающим прогностическую силу (Таблица 4).
Пример 3: Выявление пациентов высокого риска
Вся группа пациентов была дополнительно стратифицирована на основании существующих уровней тяжести SOFA, и эффективности биомаркеров и клинических оценок, при прогнозировании 28-дневной смертности, оцененной в каждой подгруппе. СФ-проАДМ показал наивысшую точность из всех параметров в подгруппах SOFA низкой (SOFA≤7) и средней (8≤SOFA≤13) степени тяжести (Таблица 5; Таблица 6). Впоследствии были рассчитаны два соответствующих пороговых значения СФ-проАДМ для идентификации подгрупп низкой (≤2,7 нмоль/л) и высокой (>10,9 нмоль/л) степени тяжести в исходной точке. По сравнению с SOFA, может быть выполнена более точная реклассификация для обоих пороговых значений - низкой (СФ-проАДМ по сравнению с SOFA: N=265 по сравнению с 232; 9,8% по сравнению с 13,8% смертности), и высокой (СФ-проАДМ по сравнению с SOFA: N=161 по сравнению с 155; 55,9% по сравнению с 41,3%) степени тяжести (Таблица 7). Подгруппа из 94 пациентов (9,3%) с высокими концентрациями СФ-проАДМ и соответствующими низким или средним SOFA имела 28 и 90-дневную смертность 57,4% и 68,9% соответственно, по сравнению с 19,8% и 30,8% в оставшейся группе пациентов с низким и средним значениями SOFA. Аналогичные закономерности могут быть обнаружены для SAPS II, APACHE II и лактата соответственно (Таблицы 8-10).
Пример 4: Идентификация пациентов низкого риска в течение пребывания в ОПТ
Исследуемая группа включает в себя подгруппу клинически стабильных пациентов, которые не сталкивались с процедурами или осложнениями, связанными с ОИТ, такими как процедуры очистки очага, неотложная хирургия, появление новых инфекций, переливание продуктов крови, инфузия коллоидов, инвазивная механическая вентиляция легких, замена почек/печени, ухудшение общих клинических показателей и симптомов пациента. Эта группа клинически стабильных пациентов была отнесена к категории пациентов низкого риска.
СФ-проАДМ показал наиболее сильную связь с 28-дневной смертностью среди всех последующих моментов времени (Таблица 11) и мог обеспечить стабильное пороговое значение ≤2,25 нмоль/л при идентификации группы пациентов низкого риска, приводя к отнесению большего числа пациентов в группу низкого уровня смертности по сравнению с другими биомаркерами и клиническими оценками (Таблица 12). Соответственно, на 4-й день можно было выявить 290 пациентов с уровнем низкой тяжести по уровню СФ-проАДМ, из которых 79 (27,2%) были клинически стабильны и не имели увеличения концентраций СФ-проАДМ по сравнению с последним измерением (Таблица 13). Постоянно низкая концентрация СФ-проАДМ могла быть обнаружена у 51 (64,6%) пациента, в то время как понижение с уровня средней до низкой тяжести могло наблюдаться у 28 (35,4%) пациентов. Средняя продолжительность пребывания в ОПТ составила 8 [7-10] дней, а коэффициент смертности на 28-й и 90-й дни составил 0,0% и 1,4% соответственно. Для сравнения, только 43 пациента были выписаны из ОПТ на 4-й день, с 28- и 90-дневным уровнем смертности 2,3% и 10,0%. Анализ концентраций СФ-проАДМ в этой группе пациентов указал диапазон значений, с 20 (52,6%), 16 (42,1%) и 2 (5,3%) пациентами, которые имели уровень низкой, средней и высокой тяжести, соответственно. Аналогичные результаты были получены для пациентов, остававшихся в ОПТ на 7-й и 10-й дни. СФ-проАДМ со стабильным пороговым значением ≤2,25 нмоль/л может идентифицировать большее число пациентов низкого риска с более низкими уровнями смертности по сравнению с другими биомаркерами и клиническими оценками. Исходя из этого, большее количество пациентов может быть выписано из ОИТ по сравнению с системами классификации без использования АДМ. Выписывая больше пациентов, больница может более эффективно заполнять койки в ОИТ и получать выгоду от избежания затрат.
Пример 5: Дополнительное влияние СФ-проАДМ на терапию, корректируемую по прокальцитонину
Регрессионный время-зависимый анализ Кокса показал, что самое раннее значительное дополнительное увеличение прогностической информации по отношению к исходным значениям СФ-проАДМ можно было наблюдать в 1-й день с последующими единичными или кумулятивными измерениями, приводящими к значительно более сильным ассоциациям с 28-дневной смертностью (Таблица 14). Таким образом, были построены две модели алгоритмов, корректируемые по ПКТ, с целью изучения изменений ПКТ от исходной точки до либо дня 1, либо дня 4, с соответствующим анализом подгрупп на основе классификации тяжести по уровню СФ-проАДМ.
У пациентов с уменьшением концентрации ПКТ ≥20% от исходной точки до дня 1 (Таблица 15 и Таблица 16) или ≥50% от исходной точки до дня 4 (Таблица 17 и Таблица 18) было обнаружено, что 28-дневные уровни смертности составили 18,3% (N=458) и 17,1% (N=557), соответственно. Этот показатель снизился до 5,6% (N=125) и 1,8% (N=111), когда у пациентов наблюдали постоянно низкий уровень СФ-проАДМ, хотя увеличился до 66,7% (N=27) и 52,8% (N=39) у пациентов с постоянно высокими значениями СФ-проАДМ (ОР (отношение рисков) [95% ДИ]: 19,1 [8,0-45,9] и 43,1 [10,1-184,0]).
Кроме того, у пациентов с уменьшающимися значениями ПКТ ≥50% (от исходной точки до дня 4), но постоянно высокими или средними концентрациями СФ-проАДМ, был значительно более высокий риск развития последующих внутрибольничных инфекций (ОР [95% ДИ]: высокие концентрации: 3,9 [1,5-10,5]; средние концентрации: 2,4 [1,1-5,1] по сравнению с пациентами с постоянно низкими концентрациями; средние концентрации: 2,9 [1,2-6,8]) по сравнению с снижением со средних до низких концентраций), или необходимости неотложной хирургии (ОР [95% ДИ]: средние концентрации: 2,0 [1,1-3,7] по сравнению с снижением со средних до низких концентраций). И наоборот, пациентам с увеличивающимися со средних до высоких концентрациями чаще требовалась очистка очага инфекции по сравнению с пациентами с постоянными средними (ОР [95% ДИ]: 3,2 [1,3-7,6]) или снижающимися (ОР [95%>] CI]: со средних до низких: 8,7 [3,1-24,8]); с высоких до средних: 4,6 [1,4 -14,5]) значениями. Когда уровни ПКТ не снижались на ≥50%, наблюдали значительно возросший риск необходимости экстренной операции, если концентрации СФ-проАДМ были либо на постоянно высоком (ОР [95% ДИ]: 5,7 [1,5-21,9]), либо среднем уровне (ОР [95% ДИ]: 4,2 [1,3-13,2]), в отличие от постоянно низкого.
Пример 6: Связь основных биомаркеров и клинических оценок с смертностью
СФ-проАДМ продемонстрировал наиболее сильную связь у пациентов с пневмологическими и внутрибрюшными инфекциями, а также у пациентов с грамположительными инфекциями, независимо от происхождения инфекции (Таблицы 19-20). Когда пациентов сгруппировали по данным неотложной помощи с оперативным вмешательством, неотложной помощи с неоперативным вмешательством и плановой хирургии, приводящей к поступлению в ОИТ, СФ-проАДМ обеспечил наиболее сильную и наиболее сбалансированную связь с 28-дневной смертностью во всех группах (Таблица 21).
Пример 7: Корреляция биомаркеров и клинических оценок с SOFA в исходной точке и в день 1
СФ-проАДМ имел наибольшую корреляцию из всех биомаркеров с оценкой SOFA в исходной точке, которая была значительно увеличена, когда исходные значения были сопоставлены с оценками SOFA в день 1. Наибольшая корреляция может быть обнаружена между СФ-проАДМ и SOFA на 10-й день, при этом повсюду обнаружены различия между отдельными субоценками SOFA (таблицы 22-24).
Пример 8: Выявление пациентов высокого риска
Аналогичные результаты могут быть получены в подгруппе из 124 пациентов (12,0%) с высокими концентрациями СФ-проАДМ, и либо низкими, либо средними значениями SAPS II (подгруппа высокой СФ-проАДМ [54,8% и 65,6% смертности]; остальная группа SAPS II [19,7 % и 30,0% смертности]), а также у 109 (10,6%) пациентов с либо низкими, либо средним значениями APACHE II (подгруппа высокой СФ-проАДМ: [56,9% и 66,7% смертности]; остальная группа APACHE II: [19,5% и 30,3% смертности]).
Пример 9: Улучшенная терапия с корректировкой по прокальцитонину (ПКТ) с комбинированием ПКТ и АДМ
Были построены две модели алгоритмов, корректируемые по ПКТ, с целью изучения изменений ПКТ от исходной точки до либо дня 1, либо дня 4, с соответствующим анализом подгрупп на основе классификации тяжести по уровню СФ-проАДМ (Таблицы 25-30).
В предыдущих примерах показано добавление АДМ у пациентов с уменьшением ПКТ <20% или <50%, а также у пациентов, у которых ПКТ снизился на ≥20% или ≥50%. Тем не менее, дополнительный анализ показывает, что АДМ может быть добавлен независимо от % уменьшения или даже увеличения ПКТ. Снижение значений ПКТ может учитывать пациентов, у которых, по-видимому, работает лечение антибиотиками, поэтому врач считает, что они находятся на правильном пути к выживанию (то есть устранение основной причины сепсиса - бактерий - должно привести к улучшению состояния пациента).
Например, у некоторых пациентов уровни ПКТ снижаются с исходной точки (день поступления) до дня 1 с 19% смертностью на 28-й день. При дополнительном измерении АДМ, по пациентах с низким АДМ можно сделать вывод о гораздо более высокой вероятности выживания или гораздо более низкой вероятности умереть (Таблица 25; сравните 19% уровень смертности только для снижающегося ПКТ с 5% уровнем смертности для ПКТ + низкий АДМ). Имея уменьшенный риск смерти, пациенты могут быть выписаны из ОИТ с большей уверенностью, или требуется меньше диагностических тестов (т.е. вы знаете, что они находятся на правильном пути к выздоровлению).
С другой стороны, должны быть рассмотрены новые меры для тех, кто имеет высокое значение АДМ. Они подвержены гораздо более высокому риску в отношении смертности (сравните 19% уровень смертности только для снижающегося ПКТ с 58,8% уровнем смертности для ПКТ + низкий АДМ). Врач считает, что состояние пациента улучшается из-за уменьшения значения ПКТ, но на самом деле концентрация АДМ остается неизменной. Поэтому можно сделать вывод, что лечение не работает, и его необходимо адаптировать как можно скорее).
Аналогичным образом, АДМ может помочь стратифицировать пациентов с повышенными значениями ПКТ (Таблица 25).
Развитие новых инфекций
Изменения ПКТ и СФ-проАДМ были проанализированы в двух моделях, либо от исходной точки до дня 1, либо от исходной точки до дня 4. Пациенты были сгруппированы по общим изменениям ПКТ и уровням тяжести по уровням СФ-проАДМ.
Количество новых инфекций в течение дней 1, 2, 3 и 4 (Таблица 26) и дней 4, 5, 6 и 7 (Таблица 27) впоследствии рассчитывали для каждого пациента, который присутствовал в день 1 или день 4 соответственно. В некоторых случаях, пациентов выписывали в течение периода наблюдения. Предполагается, что после выписки не было новых инфекций. Пациентов с множественными инфекциями в течение дней наблюдения засчитывали как с одной новой инфекцией.
В качестве клинического заключения, пациентов с высокими концентрациями СФ-проАДМ должны потенциально лечить антибиотиком широкого спектра действия при поступлении в ОИТ, в комбинации с другими, чтобы остановить развитие новых инфекций. С этими пациентами следует проявлять особую осторожность из-за их высокой восприимчивости к новым инфекциям.
Необходимость очистки очага
Изменения ПКТ и СФ-проАДМ были проанализированы в двух моделях, либо от исходной точки до дня 1, либо от исходной точки до дня 4. Пациенты были сгруппированы по общим изменениям ПКТ и уровням тяжести по уровням СФ-проАДМ.
Количество случаев очистки очагов в течение дней 1, 2, 3 и 4 (Таблица 28) и дней 4, 5, 6 и 7 (Таблица 29) впоследствии рассчитывали для каждого пациента, который присутствовал в день 1 или день 4 соответственно. В некоторых случаях, пациентов выписывали в течение периода наблюдения.
Необходимость неотложной хирургии
Изменения ПКТ и СФ-проАДМ были проанализированы в двух моделях, либо от исходной точки до дня 1, либо от исходной точки до дня 4. Пациенты были сгруппированы по общим изменениям ПКТ и уровням тяжести по уровням СФ-проАДМ.
Количество случаев/запросов неотложной хирургии в течение дней 1, 2, 3 и 4 (Таблица 30) впоследствии рассчитывали для каждого пациента, который присутствовал в день 1. В некоторых случаях, пациентов выписывали в течение периода наблюдения.
Пример 10: Необходимость изменения или модификации лечения антибиотиками
В сочетании с корректируемым по ПКТ алгоритмом лечения антибиотиками, СФ-проАДМ может стратифицировать тех пациентов, которым в будущем потребуется изменение или модификация лечения антибиотиками, от тех, кто в этом не нуждается. Изменения ПКТ и СФ-проАДМ были проанализированы в двух моделях, либо от исходной точки до дня 1, либо от исходной точки до дня 4. Пациенты были сгруппированы по общим изменениям ПКТ и уровням тяжести по уровням СФ-проАДМ.
Был впоследствии рассчитан процент изменений антибиотика на 4-й день, требуемых для каждой группы пациентов (Таблицы 31 и 32).
У пациентов с уменьшающимися значениями ПКТ ≥50%
Пациенты с повышающимися концентрациями СФ-проАДМ, с уровня низкой до средней тяжести, с большей вероятностью нуждались в модификации лечения антибиотиками на 4-й день, чем пациенты с постоянно низкими уровнями (отношение шансов [95% ДИ]: 1,5 [0,6-4,1]).
У пациентов с уменьшающимися значениями ПКТ <50%
Пациенты с либо повышающимися концентрациями СФ-проАДМ, с уровня средней до высокой тяжести, или с постоянно высокими концентрациями, также с большей вероятностью нуждались в изменениях своего лечения антибиотиками на 4-й день, чем пациенты с постоянно низкими концентрациями СФ-проАДМ (отношение шансов [95% CI]: 5,9 [1,9 - 18,1] и 2,9 [0,8 - 10,4], соответственно).
Вывод
Несмотря на увеличение концентраций ПКТ, либо от исходной точки до дня 1, либо от исходной точки до дня 4, пациенты с постоянно низкими концентрациями СФ-проАДМ имели значительно меньше модификаций назначенного им лечения антибиотиками, чем пациенты с постоянно средними или высокими концентрациями.
В качестве клинического заключения, когда врач сталкивается с увеличением концентраций ПКТ, он должен проверить уровни СФ-проАДМ пациента, прежде чем принимать решение об изменении антибиотиков. Для тех, у кого низкие концентрации СФ-проАДМ, нужно рассматривать либо увеличение дозы, либо повышение концентрации того же антибиотика, прежде чем рассматривать его изменение. Для пациентов с более высокими концентрациями СФ-проАДМ нужно рассматривать более ранние изменения антибиотика (то есть в дни с 1 по 3, по сравнению с днем 4).
Обсуждение примеров
Точная и быстрая оценка тяжести заболевания имеет решающее значение для начала наиболее подходящего лечения при первой же возможности. Действительно, задержанное или неэффективное лечение может привести к общему ухудшению клинического состояния пациента, что приведет к тому, что дальнейшее лечение станет менее эффективным и возрастет вероятность худшего общего результата (8, 27). В результате было предложено множество биомаркеров и оценок клинической степени тяжести для удовлетворения этой неудовлетворенной клинической потребности, при этом динамическая оценка органной недостаточности (SOFA) в настоящее время выделяется в качестве наиболее подходящего инструмента, и как результат имеет центральную роль в определении сепсиса-3 2016 года (4). Этот вторичный анализ исследования SISPCT (26) впервые сравнил поэтапные измерения обычных биомаркеров и клинических оценок, таких как лактат, прокальцитонин (ПКТ) и SOFA, с таковыми маркера микроциркуляторной дисфункции, СФ-проАДМ, в большой группе пациентов с тяжелым сепсисом и септическим шоком.
Наши результаты показывают, что раннее использование СФ-проАДМ в течение первых 24 часов после постановки диагноза сепсиса как следствие имеет очень сильную связь с короткосрочной, среднесрочной и долгосрочной смертностью по сравнению со всеми другими биомаркерами или оценками. Предыдущие исследования в значительной степени подтверждают наши выводы (17, 28, 29), однако противоречивые результаты (30) могут быть частично объяснены меньшим размером анализируемой выборки, а также другими факторами, выделенными в данном исследовании, такими как виды микробов, источник инфекции и предыдущий хирургический анамнез, предшествующий развитию сепсиса, все из которых могут влиять на эффективность биомаркера, таким образом увеличивая потенциальную вариабельность результатов в небольших группах исследования. Кроме того, наше исследование также почти полностью подтверждает результаты предыдущего исследования (17), подчеркивая превосходную эффективность СФ-проАДМ у пациентов с низкой и средней степенью тяжести дисфункции органов. Действительно, Andaluz-Ojeda et al. (17) придают большое значение группе пациентов с низким уровнем дисфункции органов, поскольку «эта группа представляет собой либо самое раннее проявление в клиническом течении сепсиса, и/или менее тяжелую форму заболевания». Тем не менее, может быть сохранена приемлимая результативность во всех группах тяжести в отношении прогнозирования смертности, что также имело место в обеих группах пациентов, определенных в соответствии с критериями сепсиса-3 и септического шока-3.
Анализ последовательных измерений, проведенных после начала сепсиса, позволил идентифицировать конкретные группы пациентов исходя из степени тяжести заболевания. Идентификация пациентов низкого и высокого риска представляла значительный интерес в нашем анализе. Во многих ОИТ потребность в койках ОИТ может периодически превышать их доступность, что может привести к нецелесообразному установлению очередности, распределению ресурсов, и последующему снижению вероятности правильного поступления в ОИТ (32-35). Следовательно, точная оценка пациентов низкого риска больничной смертности, которые пригодны к ранней выписке из ОИТ в отделение интенсивного ухода, может иметь существенную пользу. В рамках нашего исследования, СФ-проАДМ, измеренный в каждый контрльный момент времени, мог идентифицировать большее количество пациентов с низкой степенью тяжести с наименьшими показателями ОИТ, госпитализации и 28-дневной смертности. Дополнительный анализ группы пациентов с низкой степенью тяжести и отсутствием дополнительных ОИТ-специфичных терапий показал то, что наблюдали дополнительные 4 дня пребывания в ОИТ для каждого отрезка времени после проведения измерений биомаркера. По сравнению с группой пациентов, которые были фактически выписаны в каждый контрольный момент времени, биомаркерный подход для точной идентификации пациентов с низкой степенью тяжести привел к снижению 28-дневной и 90-дневной смертности. Действительно, пациенты, которые были выписаны, имели различные концентрации СФ-проАДМ уровня низкой, средней и высокой тяжести, что впоследствии нашло отражение в более высоком уровне смертности. Однако неизвестно, требовалось ли еще нескольким пациентам в этой группе дополнительное лечение в ОИТ для не микроциркуляторных и не угрожающих жизни осложнений, или же те кровати в отделение интенсивного ухода были доступны. Тем не менее, такой подход, основанный на биомаркерах, для выписки из ОИТ в дополнение к суждению врача может улучшить правильную стратификацию пациента, с сопутствующими клиническими преимуществами и потенциальной экономией затрат.
И наоборот, выявление пациентов высокого риска, которым может потребоваться раннее и целенаправленное лечение для предотвращения последующего клинического ухудшения, может иметь еще большую клиническую значимость. Уже наблюдали значительную экономию средств и сокращение использования антибиотиков в соответствии с алгоритмом, корректируемым по ПКТ, в исследовании SISPCT и других исследованиях (26, 36, 37), однако все еще можно наблюдать относительно высокие показатели смертности, даже когда значения ПКТ, по-видимому, стабильно снижаются. Наше исследование выявило, что добавление СФ-проАДМ к модели снижения ПКТ в последующие дни в ОИТ позволило идентифицировать группы пациентов низкого, среднего и высокого риска, с повышением и понижением уровней тяжести по уровню СФ-проАДМ от исходной точки до дня 1, обеспечивая чувствительное и раннее указание на успех лечения. Кроме того, прогнозирование потребности в будущей очистке очага или неотложной хирургии, а также восприимчивости к развитию новых инфекций может быть существенным преимуществом в инициировании дополнительных терапевтических и интервенционных стратегий, таким образом, пытаясь предотвратить любые будущие клинические осложнения на ранней стадии.
Сильная сторона нашего исследования включает в себя тщательное изучение нескольких различных подгрупп с низкой и высокой степенью тяжести заболевания из базы данных рандомизированных исследований, с поправкой на потенциальные неизвестные факторы, и в том числе самый большой размер выборки пациентов с сепсисом, охарактеризованных согласно как обеим определениям SEPSIS 1 и 3, так и информации о кинетике СФ-проАДМ.
В заключение следует отметить, что СФ-проАДМ превосходит другие биомаркеры и клинические оценки тяжести заболевания в способности установить риск смерти у пациентов с сепсисом, как при первичной постановке диагноза, так и в ходе лечения в ОИТ. Соответственно, СФ-проАДМ может использоваться в качестве инструмента для выявления пациентов с высокой степенью тяжести заболевания, которым могут потребоваться альтернативные диагностические и терапевтические вмешательства, и пациентов с низкой степенью тяжести заболевания, которые могут потенциально быть пригодными к ранней выписке из ОИТ в сочетании с отсутствием ОИТ-специфичных терапий.
Таблицы
Все мультифакторные значения р<0,0001, кроме ПКТ и СРБ для 7-дневной смертности (0,0015 и 0,0843, соответственно).
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Martin GS, Mannino DM, Eaton S, Moss M. The epidemiology of sepsis in the United States from 1979 through 2000. N Engi J Med. Apr 17 2003;348(16): 1546-1554.
2. Kaukonen KM, Bailey M, Suzuki S, Pilcher D, Bellomo R. Mortality related to severe sepsis and septic shock among critically ill patients in Australia and New Zealand, 2000-2012. JAMA. Apr 02 2014;311(13):1308-1316.
3. Vincent JL, Sakr Y, Sprung CL, et al. Sepsis in European intensive care units: results of the SOAP study. Crit Care Med. Feb 2006;34(2):344-353.
4. Singer M, Deutschman CS, Seymour CW, et al. The Third International Consensus Definitions for Sepsis and Septic Shock (Sepsis-3). JAMA. Feb 23 2016;315(8):801-810.
5. Kopterides P, Siempos, II, Tsangaris I, Tsantes A, Armaganidis A. Procalcitonin-guided algorithms of antibiotic therapy in the intensive care unit: a systematic review and meta-analysis of randomized controlled trials. Crit Care Med. Nov 2010;38(11):2229-2241.
6. de Jong E, van Oers JA, Beishuizen A, et al. Efficacy and safety of procalcitonin guidance in reducing the duration of antibiotic treatment in critically ill patients: a randomised, controlled, open-label trial. Lancet Infect Dis. Jul 2016;16(7):819-827.
7. Harbarth S, Holeckova K, Froidevaux C., et al. Diagnostic value of procalcitonin, interleukin-6, and interleukin-8 in critically ill patients admitted with suspected sepsis. Am J Respir Crit Care Med. Aug 1 2001;164(3):396-402.
8. Andriolo BN, Andriolo RB, Salomao R, Atallah AN. Effectiveness and safety of procalcitonin evaluation for reducing mortality in adults with sepsis, severe sepsis or septic shock. Cochrane Database SystRev. Jan 18 2017;1:CD010959.
9. Temmesfeld-Wollbruck B, Brell B, David I, et al. Adrenomedullin reduces vascular hyperpermeability and improves survival in rat septic shock. Intensive Care Med. Apr 2007;33(4):703-710.
10. Muller-Redetzky HC, Will D, Hellwig K, et al. Mechanical ventilation drives pneumococcal pneumonia into lung injury and sepsis in mice: protection by adrenomedullin. Crit Care. 2014; 18(2):R73.
11. Vallet B. Endothelial cell dysfunction and abnormal tissue perfusion. Crit Care Med. May2002;30(5 Suppl):S229-234.
12. Gonzalez-Rey E, Chorny A, Varela N, Robledo G, Delgado M. Urocortin and adrenomedullin prevent lethal endotoxemia by down-regulating the inflammatory response. Am J Pathol. Jun 2006; 168(6): 1921-1930.
13. Carrizo GJ, Wu R, Cui X, Dwivedi AJ, Simms HH, Wang P. Adrenomedullin and adrenomedullin-binding protein-1 downregulate inflammatory cytokines and attenuate tissue injury after gut ischemia-reperfusion. Surgery. Feb 2007;141(2):245-253.
14. Brell B, Hippenstiel S, David I, et al. Adrenomedullin treatment abolishes ileal mucosal hypoperfusion induced by Staphylococcus aureus alpha-toxin-an intravital microscopic study on an isolated rat ileum. Crit Care Med. Dec 2005;33(12):2810-2016.
15. Brell B, Temmesfeld-Wollbruck B, Altzschner I, et al. Adrenomedullin reduces Staphylococcus aureus alpha-toxin-induced rat ileum microcirculatory damage. Crit Care Med. Apr2005;33(4):819-826.
16. Vigue B, Leblanc PE, Moati F, et al. Mid-regional pro-adrenomedullin (MR-proADM), a marker of positive fluid balance in critically ill patients: results of the ENVOL study. Crit Care. Nov 09 2016;20(1):363.
17. Andaluz-Ojeda D, Cicuendez R, Calvo D, et al. Sustained value of proadrenomedullin as mortality predictor in severe sepsis. J Infect. Jul 2015;71(1): 136-139.
18. Hartmann 0, Schuetz P, Albrich WC, Anker SD, Mueller B, Schmidt T. Time-dependent Cox regression: serial measurement of the cardiovascular biomarker proadrenomedullin improves survival prediction in patients with lower respiratory tract infection. IntJ Cardiol. Nov 29 2012;161(3):166-173.
19. Albrich WC, Dusemund F, Ruegger K, et al. Enhancement of CURB65 score with proadrenomedullin (CURB65-A) for outcome prediction in lower respiratory tract infections: derivation of a clinical algorithm. BMC Infect Dis. 2011;11:112.
20. Albrich WC, Ruegger K, Dusemund F, et al. Optimised patient transfer using an innovative multidisciplinary assessment in Kanton Aargau (OPTIMA I): an observational survey in lower respiratory tract infections. Swiss Med Wkly. 2011;141:wl3237.
21. Albrich WC, Ruegger K, Dusemund F, et al. Biomarker-enhanced triage in respiratory infections: a proof-of-concept feasibility trial. Eur Respir J. Oct 2013;42(4): 1064-1075.
22. Riera J, Senna A, Cubero M, Roman A, Rello J, Study Group Investigators TV. Primary Graft Dysfunction and Mortality Following Lung Transplantation: A Role for Proadrenomedullin Plasma Levels. Am J Transplant. Oct 13 2015.
23. Schoe A, Schippers EF, Struck J, et al. Postoperative pro-adrenomedullin levels predict mortality in thoracic surgery patients: comparison with Acute Physiology and Chronic Health Evaluation IV Score*. Crit Care Med. Feb 2015;43(2):373-381.
24. Tyagi A, Sethi AK, Girotra G, Mohta M. The microcirculation in sepsis. Indian J Anaesth. Jun 2009;53(3):281-293.
25. Hernandez G, Bruhn A, Ince C. Microcirculation in sepsis: new perspectives. Curr Vasc Pharmacol. Mar 01 2013; 11(2): 161-169.
26. Bloos F, Trips E, Nierhaus A, et al. Effect of Sodium Selenite Administration and Procalcitonin-Guided Therapy on Mortality in Patients With Severe Sepsis or Septic Shock: A Randomized Clinical Trial. JAMA Intern Med. Sep 01 2016;176(9):1266-1276.
27. Bloos F, Ruddel H, Thomas-Ruddel D, et al. Effect of a multifaceted educational intervention for anti-infectious measures on sepsis mortality: a cluster randomized trial. Intensive Care Med. May 02 2017.
28. Enguix-Armada A, Escobar-Conesa R, La Torre AG, De La Torre-Prados MV. Usefulness of several biomarkers in the management of septic patients: C-reactive protein, procalcitonin, presepsin and mid-regional pro-adrenomedullin. Clin Chem Lab Med. Jun 17 2015.
29. Christ-Crain M, Morgenthaler NG, Struck J, Harbarth S, Bergmann A, Muller B. Mid-regional pro-adrenomedullin as a prognostic marker in sepsis: an observational study. Crit Care. 2005;9(6):R816-824.
30. Suberviola B, Castellanos-Ortega A, Ruiz Ruiz A, Lopez-Hoyos M, Santibanez M. Hospital mortality prognostication in sepsis using the new biomarkers suPAR and proADM in a single determination on ICU admission. Intensive Care Med. Nov 2013;39(11): 1945-1952.
31. Gillmann HJ, Meinders A, Larmann J, et al. Adrenomedullin Is Associated With Surgical Trauma and Impaired Renal Function in Vascular Surgery Patients. J Intensive Care Med. Jan 01 2017:885066616689554.
32. Garrouste-Orgeas M, Montuclard L, Timsit JF, Misset B, Christias M, Carlet J. Triaging patients to the ICU: a pilot study of factors influencing admission decisions and patient outcomes. Intensive Care Med. May 2003;29(5):774-781.
33. Garrouste-Orgeas M, Montuclard L, Timsit JF, et al. Predictors of intensive care unit refusal in French intensive care units: a multiple-center study. Crit Care Med. Apr 2005;33(4):750-755.
34. Mery E, Kahn JM. Does space make waste? The influence of ICU bed capacity on admission decisions. Crit Care. May 08 2013;17(3):315.
35. Orsini J, Blaak C, Yeh A, et al. Triage of Patients Consulted for ICU Admission During Times of ICU-Bed Shortage. J Clin Med Res. Dec 2014;6(6):463-468.
36. Kip MM, Kusters R, MJ IJ, Steuten LM. A PCT algorithm for discontinuation of antibiotic therapy is a cost-effective way to reduce antibiotic exposure in adult intensive care patients with sepsis. J Med Econ. 2015;18(11):944-953.
37. Wilke MH, Grube RF, Bodmann KF. The use of a standardized PCT-algorithm reduces costs in intensive care in septic patients - a DRG-based simulation model. Eur J Med Res. Dec 02 2011;16(12):543-548.
Данное изобретение относится к способу управления лечением антибиотиками у пациента, страдающего от инфекционного заболевания и получающего лечение одним или большим количеством антибиотических агентов, включающему в себя: взятие первого образца у указанного пациента, взятие второго образца у указанного пациента в определенный момент времени после взятия первого образца и после начала лечения антибиотиками; определение уровней прокальцитонина (ПКТ) или его фрагмента(ов) в первом и втором образце, и определение уровня проАДМ (проадреномедуллин) или его фрагмента(ов) по меньшей мере во втором образце. Причем более низкий уровень ПКТ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с первым образцом, и уровень высокой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) во втором образце, или повысившийся уровень тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с первым образцом, включающий повышение с уровня низкой тяжести до уровня средней или высокой тяжести, или с уровня средней тяжести до уровня высокой тяжести, указывают на необходимость изменения одного или большего количества антибиотических агентов, при этом уровень низкой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) составляет ниже 4 нмоль/л, уровень средней тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) составляет выше 4 нмоль/л и ниже 6,5 нмоль/л, и уровень высокой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) составляет выше 6,5 нмоль/л. Кроме того, данное изобретение также относится к набору для осуществления способа согласно данному изобретению. Изобретение обеспечивает способ и набор управления лечением антибиотиками у пациента, страдающего от инфекционного заболевания и получающего лечение одним или большим количеством антибиотических агентов. 2 н. и 13 з.п. ф-лы, 32 табл.
1. Способ управления лечением антибиотиками у пациента, страдающего от инфекционного заболевания и получающего лечение одним или большим количеством антибиотических агентов, включающий в себя
- взятие первого образца у указанного пациента,
- взятие второго образца у указанного пациента в определенный момент времени после взятия первого образца и после начала лечения антибиотиками,
- определение уровней прокальцитонина (ПКТ) или его фрагмента(ов) в первом и втором образце, и
- определение уровня проАДМ (проадреномедуллин) или его фрагмента(ов) по меньшей мере во втором образце, причем более низкий уровень ПКТ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с первым образцом и уровень высокой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) во втором образце, или повысившийся уровень тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с первым образцом, включающий повышение с уровня низкой тяжести до уровня средней или высокой тяжести, или с уровня средней тяжести до уровня высокой тяжести, указывают на необходимость изменения одного или большего количества антибиотических агентов, при этом
- уровень низкой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) составляет ниже 4 нмоль/л,
- уровень средней тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) составляет выше 4 нмоль/л и
- ниже 6,5 нмоль/л, и уровень высокой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) составляет выше 6,5 нмоль/л.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что первый образец берут при определении симптомов инфекционного заболевания у указанного пациента, и второй образец берут после первоначального определения указанных симптомов и начала лечения антибиотиками.
3. Способ по п. 2, отличающийся тем, что второй образец берут у указанного пациента в течение 30 минут после определения симптомов инфекционного заболевания и начала лечения антибиотиками или по меньшей мере через 30 минут, 1 час, 2 часа, 6 часов и/или 12 часов после определения симптомов инфекционного заболевания и начала лечения антибиотиками.
4. Способ по п. 2, отличающийся тем, что указанный второй образец берут у указанного пациента через 12-36 часов и/или 3-5 дней после определения симптомов инфекционного заболевания и начала лечения антибиотиками.
5. Способ по любому из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что пациенту ставят диагноз сепсис и/или септический шок.
6. Способ по любому из предыдущих пунктов, включающий в себя определение уровня СФ-проАДМ (серединный фрагмент про-адреномедуллина).
7. Способ по любому из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что
- повышенный уровень ПКТ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с первым образцом и
- уровень средней или высокой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) во втором образце указывают на необходимость изменения одного или большего количества антибиотических агентов,
- при этом уровень средний тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) составляет выше 4 нмоль/л, предпочтительно выше 3 нмоль/л, более предпочтительно выше 2,7 нмоль/л и ниже 6,5 нмоль/л, предпочтительно ниже 6,95 нмоль/л, более предпочтительно ниже 10,9 нмоль/л, и
- уровень высокой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) составляет выше 6,5 нмоль/л, предпочтительно выше 6,95 нмоль/л, более предпочтительно выше 10,9 нмоль/л.
8. Способ по любому из предыдущих пунктов, включающий в себя дополнительное определение уровня проАДМ или его фрагмента(ов) в первом образце.
9. Способ по любому из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что повышенный уровень проАДМ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с первым образцом указывает на необходимость изменения одного или большего количества антибиотических агентов.
10.Способ по любому из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что
- больше чем на 50% более низкий уровень ПКТ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с первым образцом и
- уровень средней тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с уровнем низкой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) в первом образце указывают на необходимость изменения одного или большего количества антибиотических агентов.
11. Способ по любому из пп. 1-8, отличающийся тем, что
- меньше чем на 50% более низкий уровень ПКТ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с первым образцом и
- уровень высокой тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) во втором образце по сравнению с уровнем средней тяжести проАДМ или его фрагмента(ов) в первом образце указывают на необходимость изменения одного или большего количества антибиотических агентов.
12. Способ по любому из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что первый и второй
образец выбирают из группы, состоящей из образца крови, образца сыворотки, образца плазмы и/или образца мочи.
13. Способ по любому из предыдущих пунктов, дополнительно включающий в себя
- определение уровня по меньшей мере одного дополнительного биомаркера или его фрагмента(ов) в первом и втором образце, причем по меньшей мере один дополнительный биомаркер предпочтительно представляет собой лактат и/или С-реактивный белок,
- при этом уровни по меньшей мере одного дополнительного биомаркера в указанных первом и втором образцах и уровень проАДМ или его фрагмента(ов) во втором образце указывают на то, требуется ли изменение в продолжающемся лечении антибиотиками.
14. Способ по любому из предыдущих пунктов, дополнительно включающий в себя
- определение по меньшей мере одной клинической оценки в момент взятия первого образца и в момент взятия второго образца, при этом по меньшей мере одна клиническая оценка предпочтительно представляет собой SOFA, APACHE II и/или SAPS II,
- при этом по меньшей мере одна клиническая оценка в моменты взятия указанных первого и второго образцов и уровень проАДМ или его фрагмента(ов) во втором образце указывают на то, требуется ли изменение в продолжающемся лечении антибиотиками.
15. Набор для осуществления способа по любому из пп. 1-14, содержащий:
- реагенты обнаружения для определения уровня проАДМ или его фрагмента(ов) и дополнительно реагенты для определения уровня ПКТ или его фрагмента(ов) в образце субъекта, и
- данные по контролю, включающие контрольный уровень, соответствующий тяжелому и/или легкому уровню тяжести проАДМ, причем низкий уровень тяжести составляет ниже 4 нмоль/л, предпочтительно ниже 3 нмоль/л, более предпочтительно ниже 2.7 нмоль/л и высокому уровню тяжести выше 6.5 нмоль/л предпочтительно выше 6.95 нмоль/л, более предпочтительно выше 10.9 моль/л, и
- данные по контролю, соответствующие уровням ПКТ,
- причем указанные данные по контролю используются в форме исполняемого компьютером кода, сконфигурированного для сравнения определенных уровней проАДМ или его фрагмента(ов) и, дополнительно определенных уровней ПКТ или его фрагмента(ов), с указанными данными по контролю.
| SILVIA ANGELETTI et al | |||
| Diagnostic and prognostic role of procalcitonin (PCT) and MR-pro-Adrenomedullin (MR-proADM) in bacterial infections | |||
| APMIS, 2015 Sep; 123(9), p | |||
| АППАРАТ ДЛЯ ПРЕССОВАНИЯ И РАЗРЕЗАНИЯ ТОРФА НА КИРПИЧИ | 1923 |
|
SU740A1 |
| PMID: 26058482 | |||
| Silvia Angeletti et al | |||
| Procalcitonin and mid-regional pro-adrenomedullin test combination in sepsis diagnosis | |||
| Clin Chem Lab Med | |||
| De Gruyte | |||
| Многоступенчатая активно-реактивная турбина | 1924 |
|
SU2013A1 |
