ПРОАДМ ДЛЯ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ РИСКА СОСТОЯНИЯ, ТРЕБУЮЩЕГО ГОСПИТАЛИЗАЦИИ, У ПАЦИЕНТОВ С СИМПТОМАМИ ИНФЕКЦИОННОГО ЗАБОЛЕВАНИЯ Российский патент 2024 года по МПК G01N33/68 G01N33/78 

Изобретение относится к способу руководства по лечению, стратификации и/или контроля пациента с симптомами инфекционного заболевания, включающему прогнозирование прогрессирования заболевания, при этом способ включает: предоставление образца от указанного пациента и определение уровня проАДМ (proADM) или его фрагмента(ов) в указанном образце, при этом низкий уровень риска, соответствующий низкому уровню проАДМ или его фрагмента(ов) в указанном образце, указывает на то, что пациент не подвержен риску прогрессирования заболевания до состояния, требующего госпитализации, при этом указанный уровень проАДМ или его фрагмента(ов), соответствующий низкому уровню риска, предпочтительно равен или составляет ниже 1,2 нмоль/л ±20%, и/или при этом указанный высокий уровень риска, соответствующий высокому уровню проАДМ или его фрагмента(ов) в указанном образце, указывает на то, что пациент подвержен риску прогрессирования заболевания до состояния, требующего госпитализации, при этом указанный уровень проАДМ или его фрагмента(ов), соответствующий высокому уровеню риска, предпочтительно составляет более 1,2 нмоль/л ±20%. Данное изобретение также относится к тест-системе для реализации способа.

Уровень техники

Многие пациенты обращаются к своему терапевту (GP) с инфекционным заболеванием и отправляются домой с пероральными антибиотиками или без них. Однако у меньшинства этих пациентов их состояние может быстро ухудшиться, если скрытая инфекция является более значительной. Это явление регулярно освещается в популярных средствах массовой информации, например, пациент посещает терапевта с легкими симптомами, отправляется домой, и впоследствии у него развивается потенциально смертельное инфекционное заболевание. После ухудшения симптомов эти пациенты затем поступают в отделение скорой помощи (ОСП), и их становится труднее лечить из-за прогрессирования инфекции.

Соответственно, многие терапевты проявляют осторожность и отправляют слишком много пациентов в больницу только на основании клинических признаков и симптомов. Это создает ненужную нагрузку на больницу, поскольку подавляющее большинство этих пациентов фактически не нуждаются в госпитализации. Одним из ключевых факторов уменьшения количества госпитализаций в ОСП является фактическое прекращение обращения пациентов в ОСП, в том числе и тех, кого направил их терапевт, если инфекционное заболевание не является тяжелым.

Соответственно, существует потребность в соответствующем лечении пациентов с симптомами инфекционного заболевания, особенно тех, которые обращаются к терапевту с относительно легкими симптомами. Таким образом, очевидна необходимость в руководстве по лечению, стратификации и/или контроле пациентов с такими симптомами, в частности, в отношении сроков лечения, а также в точной оценке того, когда и до какого уровня интенсивности следует начинать лечение, например, необходима ли госпитализация. Кроме того, существует потребность в средствах для уменьшения количества ненужных госпитализаций на основании начальных, но не представляющих угрозы, симптомов.

Использование проАДМ представляет собой такие средства, в частности среднерегиональный проадреномедуллин (СР-проАДМ, MR-proADM).

Описанные в данном документе данные демонстрируют, что проАДМ позволяет делать эффективные прогностические утверждения относительно необходимости госпитализации, тем самым обеспечивая эффективные средства для руководства по лечению пациента с симптомами инфекционного заболевания.

Сущность изобретения

В свете трудностей, изложенных в предшествующем уровне техники, техническая задача, лежащая в основе данного изобретения, заключается в обеспечении средств для руководства по лечению пациента с симптомами инфекционного заболевания. В частности, одна техническая задача, лежащая в основе данного изобретения, заключается в обеспечении средств для определения на основе простого анализа, который должен быть проведен поставщиками первичной медицинской помощи, такими как терапевт, необходимости госпитализации для пациентов с симптомами инфекционного заболевания.

Данное изобретение, таким образом, относится к способам, наборам и другим средствам диагностики, прогнозирования, предположения, оценки риска и/или стратификации риска, или руководству по лечению, стратификации и/или контролю пациента с симптомами инфекционного заболевания на основе адреномедуллина (АДМ), в частности проАДМ или СР-проАДМ, определенных в образце, взятом у пациента.

Таким образом, одним из объектов данного изобретения является использование биомаркера или комбинации биомаркеров для дифференцирования пациентов, которые с большей вероятностью или имеют высокий риск необходимости в госпитализации (т.е. высокий риск необходимости интенсивного лечения, проводимого в больнице), от пациентов, у которых имеется низкий риск необходимости в таком лечении.

Решение технической задачи данного изобретения предложено в независимых пунктах формулы изобретения. Предпочтительные варианты реализации данного изобретения предложены в зависимых пунктах формулы изобретения.

Следовательно, изобретение относится к способу руководства по лечению, стратификации и/или контроля пациента с симптомами инфекционного заболевания, включающему прогнозирование прогрессирования заболевания, при этом способ включает:

предоставление образца от указанного пациента, и

определение уровня проАДМ или его фрагмента(ов) в указанном образце,

при этом низкий уровень риска, соответствующий низкому уровню проАДМ или его фрагмента(ов) в указанном образце, указывает на то, что пациент не подвержен риску прогрессирования заболевания до состояния, требующего госпитализации, при этом указанный уровень проАДМ или его фрагмента(ов), соответствующий низкому уровеню риска, равен или составляет ниже 1,2 нмоль/л ±20%, и/или

при этом высокий уровень риска, соответствующий высокому уровню проАДМ или его фрагмента(ов) в указанном образце, указывает на то, что пациент подвержен риску прогрессирования заболевания до состояния, требующего госпитализации, при этом указанный уровень проАДМ или его фрагмента(ов), соответствующий высокому уровеню риска, предпочтительно составляет более 1,2 нмоль/л ±20%.

Это представляет собой удивительное открытие, что предельное значение проАДМ или значение проАДМ выше 1,2 нмоль/л ±20% (предпочтительно с использованием иммуноанализа для определения СР-проАДМ) позволяет надежно указать на то, что у пациента может наблюдаться ухудшение состояния здоровья, поэтому необходима госпитализация. Описанные ниже исследования, основанные на оценках уровня проАДМ поставщиками первичной медицинской помощи и сравнении с частотой госпитализации, ранее не были описаны в данной области техники. Таким образом, описанные в данном документе прогностические утверждения, по-видимому, представляют собой неожиданное и полезное открытие в области прогнозирования инфекционных заболеваний и ведения пациентов в учреждениях первичной медицинской помощи и/или в больничных условиях.

Термин «указывает на то, что пациент находится или не находится в группе риска прогрессирования заболевания до состояния, требующего госпитализации» в некоторых вариантах реализации данного изобретения относится к прогнозированию ухудшения состояния пациента. В некоторых вариантах реализации данного изобретения данный термин относится к прогнозированию того, необходимы ли определенные виды лечения, которые доступны только или в основном в больнице. В некоторых вариантах реализации данного изобретения данный термин относится к прогнозированию исхода заболевания. Хотя известно, что уровень проАДМ предсказывает исход заболевания при некоторых медицинских состояниях, в данном изобретении представлены конкретные предельные значения, применимые в сценариях первичной медицинской помощи, в конкретных группах пациентов, которые не были получены из предшествующего уровня техники или предложены ранее в контексте прогнозирования возможной госпитализации.

В некоторых вариантах реализации данного изобретения лечение, обычно проводимое в больнице, относится к лечению с исключением местного и/или перорального введения антибиотиков. Примеры лечения, обычно применяемого в больнице, относятся к внутривенному введению антибиотиков или другой инфузионной терапии, такой как поддержание водного баланса, жидкостная реанимация, регидратация и/или замещающая инфузионная терапия, например с применением коллоидов и/или кристаллоидов, или переливание крови. Другие способы лечения, в основном доступные в больницах, включают, помимо прочего, заместительную почечную терапию (ЗПТ), искусственную и механическую вентиляцию легких, хирургические операции или процедуры очистки, такие как очистка очага инфекции.

В некоторых вариантах реализации данного изобретения термин «госпитализация» предпочтительно относится к стационарному лечению. Это отличается от направления в больницу, осмотра и последующей выписки (отправки домой). Стационарное лечение предпочтительно относится к постоянному контролю и/или оценке состояния здоровья пациента в больнице, будь то отделение скорой помощи, приемный покой, отделение интенсивной терапии или другое помещение больницы или клиники. В некоторых вариантах реализации данного изобретения, прием больного в стационар предпочтительно относится к приему пациента в стационар на ночь для наблюдения.

В вариантах реализации данного изобретения способ по изобретению включает этап госпитализации пациента в случае определения высокого уровня риска, соответствующего высокому уровню проАДМ. В вариантах реализации данного изобретения госпитализация пациента относится к приему пациента в больницу, клинику или аналогичное медицинское учреждение для постоянного контроля и/или оценки заболевания или состояния здоровья и/или мониторинга изменений состояния здоровья пациента и/или способа медицинского лечения, предпочтительно в течение нескольких часов, например, более 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 15, 18 или 24 часов или дольше.

Способ по данному изобретению представляет значительное и неожиданное улучшение по сравнению с известными способами данного уровня техники. Хотя определение уровня проАДМ в качестве биомаркера у пациентов с сепсисом было описано, ранее не было раскрыто использование проАДМ в качестве маркера в способе руководства по лечению, стратификации и/или контроля пациента, который предположительно страдает от инфекционного заболевания, для принятия решения о необходимости госпитализации такого пациента. В частности, способ по изобретению определяет высокий уровень риска, соответствующий высокому уровню проАДМ или его фрагмента(ов), который является решающим для определения того, следует ли пациента госпитализировать или нет, и который ранее не был описан в контексте этого процесса принятия решения. Данное изобретение особенно полезно для пациентов, у которых проявляются легкие симптомы инфекционного заболевания и/или у которых могут не проявляться симптомы сепсиса или инфекции кровяного русла. Способ по изобретению также особенно полезен для пациентов, которые не страдают гематологическими нарушениями или другими нарушениями, которые могут влиять на иммунную систему и/или иммунную защиту пациентов от инфекций, при этом у этих пациентов могут, например, проявляться только легкие симптомы инфекционного заболевания.

В одном варианте реализации данного изобретения уровень проАДМ или его фрагмента(ов) определяют в образце, полученном первичным медицинским персоналом, который консультирует пациентов после появления у них симптомов инфекционного заболевания.

В вариантах реализации данного изобретения термин «первичный медицинский персонал, который консультирует пациентов после появления у них симптомов инфекционного заболевания» относится, но не ограничивается ими, к терапевтам (GP), надомным медицинским работникам или лицам, обеспечивающим уход, медсестрам в жилых домах для пенсионеров, водителям машин скорой помощи или работникам, парамедикам, врачам, посещающих дома, медсестерам в поликлиниках и т.п.Под первичным медицинским персоналом предпочтительно подразумевается медицинский персонал, будь то врач или другой медицинский работник, который впервые встречает пациента, у которого развились симптомы инфекционного заболевания, но у которого предпочтительно не было диагностировано серьезное заболевание.

Совершенно удивительно, что на основе одного измерения уровня проАДМ можно сделать точный и надежный вывод о том, разовьется ли у пациента заболевание такой степени тяжести, что потребуется госпитализация. Эта прогностическая способность проАДМ, насколько известно изобретателям, является новой и неожиданной.

В одном варианте реализации данного изобретения пациент обращается в отделении первичной медицинской помощи, и высокий уровень риска, соответствующий высокому уровню проАДМ или его фрагмента(ов), указывает на необходимость госпитализации пациента, при этом низкий уровень риска, соответствующий низкому уровню проАДМ или его фрагмента(ов), указывает на то, что госпитализация больного не требуется.

В предпочтительных вариантах реализации данного изобретения способ определяется прогнозом возможной госпитализации в группе пациентов, для которых ранее было трудно, если не невозможно, с помощью обычных клинических и/или молекулярных диагностических средств определить, существует ли серьезный риск серьезного ухудшения состояния здоровья, требующего госпитализации. Эту группу пациентов можно рассматривать как пациентов с легкими симптомами инфекционного заболевания или пациентов без симптомов серьезного инфекционного заболевания, например, без симптомов сепсиса.

В одном варианте реализации данного изобретения во время предоставления образца у пациента проявляются легкие симптомы инфекционного заболевания, соответствующие баллу по шкале qSOFA равному 0 или 1.

В одном варианте реализации данного изобретения во время предоставления образца у пациента не проявляются клинические симптомы инфекции кровяного русла, сепсиса, тяжелого сепсиса и/или септического шока у пациента.

Совершенно удивительно, что пациенты, у которых проявляются только легкие симптомы инфекционного заболевания, например пациенты, соответствующие баллу по шкале qSOFA 0 или 1, и пациенты, у которых проявляются симптомы инфекционного заболевания, которые, однако, не указывают на наличие инфекции кровяного русла или сепсис, могут быть отнесены к категории требующих госпитализации на основании определения у них высокого уровня риска, соответствующего высокому уровню проАДМ или его фрагмента(ов), согласно данному изобретению. Это предоставляет большое преимущество способа по изобретению, поскольку специализированный врач не ожидал бы, что пациентам с легкими симптомами инфекционного заболевания и/или симптомами, которые не указывают на инфекцию кровяного русла или сепсис, потребуется госпитализация, например, для наблюдения прогрессирования симптомов инфекционного заболевания и проведения лечения. Такие пациенты обычно могут быть обследованы медицинским персоналом и впоследствии освобождены от постоянного медицинского наблюдения, например, с указанием инструкций по лечению заболевания, которые могут выполняться без профессионального медицинского наблюдения. Кроме того, способ данного изобретения может объективными средствами идентифицировать пациентов, у которых нет тяжелых симптомов инфекционного заболевания, но которые все же нуждаются в госпитализации.

С другой стороны, из соображений осторожности существует тенденция медицинского персонала, в частности персонала, не специализирующегося в области инфекционных заболеваний, отправлять пациентов с симптомами инфекционного заболевания и даже с легкими симптомами, не указывающими на сепсис и инфекцию кровяного русла в больницу или отделение скорой помощи, хотя это может и не потребоваться. Способ по данному изобретению имеет большое преимущество, поскольку он может предоставить объективные критерии даже для неопытного медицинского персонала, который может не специализироваться на инфекционных заболеваниях, для принятия решения о том, следует ли госпитализировать пациента или нет.Таким образом, количество ненужных госпитализаций, вызванных чрезмерно осторожным принятием решений медицинским персоналом, наблюдающим за пациентом, можно будет снизить с помощью способа по данному изобретению. С другой стороны, может увеличиться количество пациентов с легкими симптомами, которые не принимаются в больницу, хотя им требуется постоянное медицинское наблюдение.

Предпочтительное предельное значение 1,2 нмоль/л ±20% является совершенно непредвиденным и неожиданным и не сообщалось в уровне техники для описанной в данном документе группы пациентов и для процесса принятия решения о необходимости госпитализации пациента. Этот порог особенно полезен при принятии решения о госпитализации пациентов с легкими симптомами и пациентов, у которых нет подозрений на сепсис, поскольку во многих случаях эти пациенты могут быть ошибочно освобождены от постоянного медицинского наблюдения из-за отсутствия подходящих диагностических и прогностических тестов, которые обосновывают процесс принятия решений.

В одном варианте реализации изобретения уровень проАДМ или его фрагмента(ов) в указанном образце в диапазоне от 0,7 нм/л ±20% до 1,2 нмоль/л ±20% указывает на наличие заболевания и на то, что пациент не подвержен риску прогрессирования заболевания до состояния, требующего госпитализации.

Диапазон значений уровня проАДМ от 0,7 нм/л ±20% до 1,2 нмоль/л ±20% является особенно полезным, поскольку у здоровых пациентов уровень проАДМ часто составляет от 0,0 до 0,7 нмоль/л. В некоторых вариантах реализации данного изобретения пациенты с уровнем выше 1,5 нмоль/л также нуждаются в серьезном лечении. Следовательно, раньше существовала «серая зона» неопределенности для медицинских работников, когда измерялись значения АДМ от 0,7 нм/л ±20% до 1,2 нмоль/л ±20%. Однако данное изобретение теперь позволяет сделать надежный прогноз для таких пациентов. В некоторых вариантах реализации данного изобретения этих пациентов освобождают от госпитализации, поскольку они не имеют значительного риска развития серьезного состояния, требующего госпитализации.

В одном варианте реализации данного изобретения высокий уровень риска, соответствующий высокому уровню проАДМ или его фрагментов, указывает на то, что пациент подвержен риску прогрессирования заболевания до опасного для жизни состояния в течение 48 часов, 24 часов, предпочтительно 12 часов, и при этом низкий уровень риска, соответствующий низкому уровню проАДМ указывает на то, что пациент не подвергается риску прогрессирования заболевания до опасного для жизни состояния в течение 48 часов, 24 часов, предпочтительно 12 часов.

В одном варианте реализации данного изобретения уровень проАДМ или его фрагмента(ов) в указанном образце указывает на риск развития инфекции кровяного русла, сепсиса, тяжелого сепсиса и/или септического шока у пациента, который требует госпитализации.

В одном варианте реализации данного изобретения высокий уровень риска, соответствующий высокому уровню проАДМ или его фрагмента(ов), указывает на то, что у пациента есть риск развития инфекции кровяного русла, сепсиса, тяжелого сепсиса и/или септического шока, и такому пациенту требуется госпитализация в течение 48 часов, 24 часов, предпочтительно 12 часов, и при этом низкий уровень риска, соответствующий низкому уровню проАДМ, указывает на то, что у пациента нет риска развития инфекции кровяного русла, сепсиса, тяжелого сепсиса и/или септического шока в течение 48 часов, 24 часов, предпочтительно 12 часов.

В одном варианте реализации данного изобретения уровень проАДМ или его фрагмента(ов) в указанном образце указывает на то, что пациенту требуется частое наблюдение и/или интенсивная терапия. В одном варианте реализации данного изобретения пациенту с высоким уровнем риска потребуется медицинское лечение в условиях больницы. Примеры этих способов лечения включают, но не ограничиваются ими, инфузионную терапию, внутривенные антибиотики, в некоторых вариантах реализации данного изобретения - по существу любое лечение помимо пероральных антибиотиков, которые можно принимать самостоятельно дома.

В одном варианте реализации данного изобретения способ дополнительно включает:

определение, по меньшей мере, одного клинического показателя, предпочтительно балла по шкале NEWS, у пациента с подозрением на инфекционное заболевание,

при этом, по меньшей мере, один клинический показатель и уровень проАДМ или его фрагмента(ов) указывают на наличие инфекционного заболевания и на то, находится ли пациент в группе риска прогрессирования заболевания до состояния, которое требует госпитализации.

В одном варианте реализации данного изобретения инфекционное заболевание представляет собой респираторное инфекционное заболевание, инфекционное заболевание мочевыводящих путей, инфекционное заболевание кожи или инфекционное заболевание органов брюшной полости.

В одном варианте реализации данного изобретения определение уровня проАДМ или его фрагмента(ов) включает определение уровня СР-проАДМ в образце. Как продемонстрировано в приведенных ниже примерах, СР-проАДМ, предпочтительно определяемый с использованием известной продукции для иммуноанализа компании B.R.A.H.M.S (Хеннигсдорф, Германия), позволяет проводить надежное и эффективное прогнозирование в соответствии с описанными в данном документе способами. Также можно использовать альтернативные молекулы АДМ, включая его предшественников или фрагменты.

В одном варианте реализации данного изобретения образец выбран из группы, состоящей из образца крови, такого как образец цельной крови, образца сыворотки или образца плазмы, и/или образца мочи.

В одном варианте реализации данного изобретения образец получают от пациентов в течение 24 часов, 6 часов, 2 часов, 1 часа, более предпочтительно в течение 30 минут или 15 минут после определения симптомов.

В одном варианте реализации данного изобретения способ дополнительно включает:

определение уровня, по меньшей мере, одного дополнительного биомаркера или его фрагмента(ов) в образце, полученном от указанного пациента, при этом, по меньшей мере, один дополнительный биомаркер предпочтительно представляет собой ПКТ (PCT) или его фрагмент(ы), и

при этом уровень, по меньшей мере, одного дополнительного биомаркера указывает на необходимость начала лечения противоинфекционным агентом, предпочтительно антибиотиком или антимитотическим агентом.

В одном варианте реализации данного изобретения, по меньшей мере, один дополнительный биомаркер представляет собой ПКТ или его фрагмент(ы), и уровень ПКТ или его фрагмента(ов) составляет выше 0,25 нг/мл, предпочтительно выше 0,5 нг/мл, что указывает на необходимость начала лечения с применением противоинфекционного агента, предпочтительно антибиотика или антимитотического агента.

Как более подробно описано ниже, комбинированное измерение дополнительных биомаркеров, в частности ПКТ, позволяет улучшить прогнозирование и/или дополнительные показания в отношении степени, тяжести или типа инфекции, которая присутствует у субъекта. В некоторых вариантах реализации данного изобретения комбинированное измерение ПКТ и проАДМ может привести к решению относительно необходимости госпитализации в дополнение к назначению дозы антибиотика и способа его введения пациенту. Комбинация этих биомаркеров, таким образом, обеспечивает полезный - в конкретной группе пациентов и группе практикующих специалистов по данному изобретению - и неожиданный эффект.

Дополнительный аспект изобретения относится к набору для реализации описанного в данном документе способа.

В одном варианте реализации данного изобретения набор содержит:

детектирующие реагенты для определения уровня проАДМ или его фрагмента(ов) в образце, полученном от пациента, и

референтные данные о риске для пациента относительно того, произойдет ли у него прогрессирование заболевания до состояния, требующего госпитализации, в частности референтные данные о пороговом или предельном значении риска, при этом упомянутые референтные данные предпочтительно хранятся на машиночитаемом носителе и/или используется в форме исполняемого компьютерного кода, сконфигурированного для сравнения выявленных уровней проАДМ или его фрагмента(ов) с пороговым или предельным значением риска,

и, необязательно, детектирующие реагенты для определения уровня, по меньшей мере, одного дополнительного биомаркера или его фрагмента(ов), предпочтительно ПКТ, в образце, полученном от пациента, и референтные данные, такие как пределы нормы для указанного, по меньшей мере, одного дополнительного биомаркера, предпочтительно ПКТ, для порогового или предельного значения риска, при этом упомянутые референтные данные предпочтительно хранятся на машиночитаемом носителе и/или используются в форме исполняемого компьютерного кода, сконфигурированного для сравнения выявленных уровней, по меньшей мере, одного дополнительного биомаркера или его фрагмента(ов) с пороговым или предельным значением.

В вариантах реализации набора по данному изобретению референтные данные включают порог предельного значения 1,2 нмоль/л ±20%, при этом низкий уровень риска, соответствующий уровню проАДМ или его фрагмента(ов) равному или являющемуся ниже 1,2 нмоль/л ±20% в образце, полученном от пациента, указывает на то, что пациент не подвержен риску прогрессирования заболевания до состояния, требующего госпитализации, и/или при этом высокий уровень риска, соответствующий уровню проАДМ или его фрагмента(ов) выше 1,2 нмоль/л ±20% в образце, полученном от пациента, указывает на то, что пациент находится в группе риска прогрессирования заболевания до состояния, требующего госпитализации. В вариантах реализации данного набора упомянутые референтные данные, включая предельное значение 1,2 нмоль/л ±20%, предложены в форме исполняемого компьютерного кода, сконфигурированном для сравнения выявленных уровней проАДМ или его фрагмента(ов) с пороговым или предельным значением риска, также могут быть дополнительно предложены рекомендации по лечению, включая варианты госпитализации пациента или освобождения пациента от (постоянного) медицинского наблюдения, в зависимости от выявленного уровня проАДМ.

В предпочтительных вариантах реализации данного изобретения набор по данному изобретению представляет собой набор для проведения способа in vitro руководства по лечению, стратификации и/или контроля пациента, у которого наблюдаются легкие симптомы инфекционного заболевания, соответствующие баллу qSOFA 0 или 1, и/или пациента с симптомами инфекционного заболевания, у которого наблюдаются не клинические симптомы инфекции кровяного русла, сепсиса, тяжелого сепсиса и/или септического шока.

Кроме того, референтные данные набора могут включать референтный диапазон уровней проАДМ или его фрагмента(ов) от 0,7 нм/л ±20% до 1,2 нмоль/л ±20%. Этот диапазон уровней проАДМ представляет серьезную проблему для практикующих врачей и/или медицинского персонала, поскольку он может указывать на наличие инфекционного заболевания у пациента, но до данного изобретения было неясно потребуется ли госпитализация пациентам с уровнем проАДМ, попадающим в этот диапазон. Однако, используя набор и способ по данному изобретению, можно принять решение о необходимости госпитализации таких пациентов на основе объективных критериев, таких как референтные данные набора. Референтные данные набора могут быть предложены в исполняемом компьютерном коде, сконфигурированном для сравнения выявленных уровней проАДМ или его фрагмента(ов) с указанным референтным диапазоном, при этом исполняемый компьютерный код может предложить рекомендацию по лечению, включая варианты госпитализации пациента, если выявленный уровень АДМ выше референтного диапазона, или освобождения пациента от (постоянного) медицинского наблюдения, если обнаруженный уровень находится в границах или ниже референтного диапазона.

В некоторых вариантах реализации данного изобретения можно рассматривать признаки набора как включающие те признаки, которые используются при характеристике способа по изобретению, и наоборот.

Изобретение также относится к способу руководства по лечению, стратификации и/или контроля пациента с симптомами инфекционного заболевания, включающему прогнозирование прогрессирования заболевания, при этом способ включает:

предоставление образца от указанного пациента,

определение уровня проАДМ или его фрагмента(ов) в указанном образце, и

сравнение уровня проАДМ или его фрагмента(ов) в указанном образце с предельным значением,

при этом указанное предельное значение составляет 1,2 нмоль/л ±20%,

при этом уровень проАДМ или его фрагмента(ов) (низкий уровень риска) в указанном образце ниже указанного предельного значения указывает на то, что у пациента нет риска прогрессирования заболевания до состояния, требующего госпитализации, и при этом высокий уровень риска, соответствующий высокому уровню проАДМ или его фрагмента(ов), в указанном образце выше указанного предельного значения указывает на то, что пациент подвергается риску прогрессирования заболевания до состояния, требующего госпитализации.

Таким образом, способ относится к способу лечения инфекционного заболевания у пациента, включающего выбор пациента для лечения с использованием способа руководства по лечению, стратификации и/или контроля пациента с симптомами инфекционного заболевания, включая прогнозирование прогрессирования заболевания, при этом способ включает:

предоставление образца от указанного пациента,

определение уровня проАДМ или его фрагмента(ов) в указанном образце, и

сравнение уровня проАДМ или его фрагмента(ов) в указанном образце с предельным значением,

при этом указанное предельное значение составляет 1,2 нмоль/л ±20%,

при этом уровень проАДМ или его фрагмента(ов) (низкий уровень риска) в указанном образце ниже указанного предельного значения указывает на то, что у пациента нет риска прогрессирования заболевания до состояния, требующего госпитализации, и при этом высокий уровень риска, соответствующий высокому уровню проАДМ или его фрагмента(ов), в указанном образце выше указанного предельного значения указывает на то, что пациент подвергается риску прогрессирования заболевания до состояния, требующего госпитализации.

Способ лечения предпочтительно включает введение подходящих терапевтических мер указанному пациенту с использованием предпочтительно одного или более конкретных видов лечения, описанных в данном документе.

В одном варианте реализации данного изобретения, изобретение относится к способу лечения пациента с симптомами инфекционного заболевания, при этом способ включает следующие этапы:

определение того, имеет ли пациент высокий или низкий уровень риска, соответствующий высокому или низкому уровню проАДМ, с помощью:

получения или получения ранее взятого биологического образца от пациента;

выполнения анализа или ранее выполненного анализа, который определяет уровень проАДМ или его фрагмента(ов) в указанном образце;

при этом низкий уровень риска, соответствующий низкому уровню проАДМ или его фрагмента(ов) в указанном образце равен или составляет ниже 1,2 нмоль/л ±20%, и/или

при этом высокий уровень риска, соответствующий высокому уровню проАДМ или его фрагмента(ов) в указанном образце составляет более 1,2 нмоль/л ±20%,

при этом, когда определяется высокий уровень риска, соответствующий высокому уровню проАДМ или его фрагмента(ов) в указанном образце, пациент подвергается лечению, при этом указанное лечение предпочтительно включает госпитализацию, или медицинское лечение доступно преимущественно или только в больнице.

Таким образом, в данном изобретении предложен новый, быстрый и надежный тест для предоставляющих первичную помощь медицинских работников, таких как врачи, медсестры и т.д., для быстрой оценки риска развития у пациента с симптомами инфекционного заболевания состояния, требующего госпитализации, такого как сепсис.

Предельные значения, описанные в данном документе, предпочтительно относятся к измерениям уровня белка проАДМ или его фрагментов в образце крови, предпочтительно в образце цельной крови, или плазме, или образце сыворотки, полученных от пациента, с помощью анализа Thermo Scientific BRAHMS KRYPTOR. Соответственно, значения, описанные в данном документе, могут в некоторой степени варьироваться в зависимости от используемого способа определения/измерения, и конкретные значения, описанные в данном документе, предназначены также для считывания соответствующих значений, определенных другими способами.

В вариантах реализации данного изобретения предельное значение проАДМ или его фрагмента(ов), которое может определять либо низкий, либо высокий уровень тяжести заболевания, может представлять собой любое значение около 1,2 нмоль/л ±20%. В других вариантах реализации данного изобретения предельное значение проАДМ или его фрагмента(ов), которое может определять либо низкий, либо высокий уровень тяжести заболевания, может представлять собой любое значение около 1,2 нмоль/л ± предпочтительно 15%, 12% или 10%, или 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 или 1%.

Любое значение в пределах этого диапазона (т.е. в пределах интервала вариации значения 1,2 нмоль/л) может считаться подходящим пороговым значением между высоким и низким уровнями проАДМ, которые соответствуют высокой и низкой тяжести заболевания.

Кроме того, значения ниже такого предельного значения могут указывать на отсутствие значительного риска развития состояния, требующего госпитализации, а значения, равные или превышающие такое предельное значение, могут указывать на развитие состояния, требующего госпитализации.

Подходящие предельные уровни, которые можно использовать в контексте данного изобретения, включают, но не ограничиваются им, любое значение от 0,96 до 1,44 нмоль/л. Другие значения включают 0,95, 1,0, 1,05, 1,1, 1,15, 1,2, 1,25, 1,3, 1,35, 1,4 и 1,45 нмоль/л, или значение между этими значениями, или диапазон с использованием этих значения в качестве пределов диапазона.

В вариантах реализации данного изобретения также заявлены отклонения от этих возможных пределовых значений, такие как отклонения ±30%, 29%, 28%, 27%, 26%, 25%, 24%, 23%, 22%, 21%, 20%, 19%, 18%, 17%, 16%, 15%, 14%, 13%, 12%, 11%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2% или 1%.

В вариантах реализации данного изобретения, описанных в данном документе, уровни тяжести определяются предпочтительно одним или более пределовыми значениями, которые предоставляют границу между низким и высоким уровнями тяжести. Следовательно, любые варианты реализации данного изобретения, которые представляют предельные значения, могут использовать формат одного предельного значения в качестве границы между двумя уровнями тяжести, или одного предельного уровня для каждого уровня тяжести.

В некоторых вариантах реализации способа по изобретению состояние, требующее госпитализации, представляет собой осложнение, связанное с инфекцией, такое как инфекция, нозокомиальная инфекция, сепсис и/или септический шок. В некоторых вариантах реализации способа по изобретению состояние включает инфекцию, нозокомиальную инфекцию, сепсис и/или септический шок, предпочтительно в результате респираторного инфекционного заболевания, инфекционного заболевания мочевыводящих путей, инфекционного заболевания кожи или инфекционного заболевания органов брюшной полости.

Особым преимуществом является то, что предельное значение проАДМ или его фрагмента(ов), которое может использоваться в контексте способа по данному изобретению, может использоваться для исключения необходимости госпитализации. Соответственно, способ позволяет более точно оценить прогноз/риск для пациента, в зависимости от ситуации взятия образца и дополнительной информации, доступной на тот момент, например, оценить повышенный риск развития тяжелого состояния.

В зависимости от результата использования способа по данному изобретению варианты реализации способа могут включать последующие терапевтические решения и/или терапевтические действия. Такие терапевтические решения могут включать начало, изменение или модификацию лечения. Предпочтительно, если способ по данному изобретению указывает на развитие состояния, требующего лечения в больнице, могут быть инициированы подходящие терапевтические меры, такие как начало или изменение определенной лекарственной терапии, хирургическое вмешательство или инфузионная терапия.

Любая терапия, лечение или терапевтическое действие, описанные в данном документе, могут использоваться в контексте способа по данному изобретению в качестве последующего терапевтического решения или терапевтического действия, в частности, если терапевтическая мера специально назначается в больнице, то терапевтическая мера включает, но не ограничивается этим, внутривенную инфузионную терапию, диализ, лечение электролитных нарушений (в частности обмена калия, кальция и фосфора). Более того, постоянное интенсивное наблюдение и уход за пациентом могут быть назначены потенциально в течение продолжительных периодов времени, например, нескольких дней, недель или даже месяцев. Это может включать нахождение или перевод пациента в отделении интенсивной терапии (ОИТ) и/или продление пребывания пациента в ОИТ.

С другой стороны, если результат использования способа по данному изобретению указывает на отсутствие риска развития состояния, требующего госпитализации, то никаких специальных лечебных мер в отношении такого осложнения может не потребоваться, или может быть назначено менее серьезное, самостоятельное лечение.

В одном варианте реализации данное изобретение дополнительно включает информирование пациента о результатах способа диагностики, описанного в данном документе. В вариантах реализации данного изобретения возраст пациента составляет, по меньшей мере, 18 лет.

В вариантах реализации данного изобретения образец выбран из группы, состоящей из образца крови, образца сыворотки, образца плазмы и/или образца мочи. Определение проАДям или его фрагмента(ов) в крови, сыворотке или плазме особенно целесообразно, поскольку было показано, что оно является особенно точным. Кроме того, эти образцы очень точно отражают фактическое состояние пациента в данный момент времени.

В вариантах реализации данного изобретения определение уровня проАДМ или его фрагмента(ов) включает определение уровня СР-проАДМ в образце. Использование определения СР-проАДМ является предпочтительным для любого предложенного варианта реализации данного изобретения, описанного в данном документе, и, соответственно, может рассматриваться в контексте каждого варианта реализации данного изобретения. В предпочтительных вариантах реализации данного изобретения «фрагмент АДМ» можно рассматривать как СР-проАДМ.

Согласно некоторым вариантам реализации данного изобретения способ по изобретению дополнительно включает

определение уровня, по меньшей мере, одного дополнительного биомаркера или его фрагмента(ов) в образце, полученном от указанного пациента, при этом, по меньшей мере, один дополнительный биомаркер предпочтительно представляет собой ПКТ или его фрагмент(ы) и/или лактат, и/или

определение, по меньшей мере, одного клинического показателя, при этом, по меньшей мере, один клинический показатель предпочтительно представляет собой балл по шкале SOFA,

при этом уровень, по меньшей мере, одного дополнительного биомаркера и/или балл, по меньшей мере, одного клинического показателя, и уровень проАДМ или его фрагмента(ов) указывают на то, требуется ли госпитализация, или есть ли у пациента риск развития состояния, требующего лечение в больнице.

Последующие дополнительные маркеры, которые могут быть определены в контексте данного изобретения, включают лактат и СРБ (CRP). Клинические параметры, которые могут быть определены в контексте данного изобретения, включают оценку SI (оценку системного воспаления), оценку по шкале SOFA, qSOFA, SIRS, SAPS II, APACHE II, предпочтительно SOFA.

Оказалось, что определение проАДМ или его фрагмента(ов) и предпочтительно шкала SOFA, в контексте способа по данному изобретению обеспечивают дополнительную точность в отношении прогнозирования последующего состояния, при котором потребуется госпитализация.

В дополнительных вариантах реализации данного изобретения, по меньшей мере, один дополнительный биомаркер представляет собой, по меньшей мере, один маркер наличия лактата, синдрома рабдомиолиза, такой как креатинкиназа (КК, CK), лактатдегидрогеназа (ЛДГ, LDH), креатинин, миоглобин, альдолаза, тропонин, карбоангидраза типа 3, связывающий жирные кислоты белок (FABP), трансаминазы или калий.

Детектирующие реагенты для определения уровня проАДМ или его фрагмента(ов) и, необязательно, для определения уровня ПКТ, лактата и/или С-реактивного белка или его фрагмента(ов), предпочтительно выбираются из тех, которые необходимы для реализации способа, например, антитела, нацеленные на АДМ, подходящие метки, такие как флуоресцентные метки, предпочтительно две отдельные флуоресцентные метки, подходящие для применения в тесте на анализаторе KRYPTOR, пробирки для взятия образцов.

Варианты реализации изобретения и особенности, описанные в контексте способа по данному изобретению, также применимы к набору по данному изобретению и наоборот.

В одном варианте реализации способа, описанного в данном документе, уровень проАДМ или его фрагмента (ов)и, необязательно, дополнительно других биомаркеров, таких как, например, ПКТ или его фрагмента(ов), определяется с использованием способа, выбранного из группы, состоящей из масс-спектрометрии (МС), люминесцентного иммуноанализа (ЛИА), радиоиммуноанализа (РИА), хемилюминесцентного и флуоресцентного иммуноанализов, иммуноферментного анализ (ИФА, EIA), твердофазного иммуноферментного анализа (твердофазного ИФА, ELISA), анализа с использованием чипов с люминесцентными гранулами, анализа с использованием чипов с магнитными гранулами, анализа с использованием белкового микрочипа, экспресс-тестов таких форматов, как, например, иммунохроматографические полоски, анализа c использованием криптатов редкоземельного элемента и автоматизированных систем/анализаторов.

Способ согласно данному изобретению может, кроме того, быть реализован как гомогенный способ, при котором сэндвичевые комплексы, образованные антителом/антителами и маркером, например детектируемым проАДМ или его фрагментом, остаются суспендированными в жидкой фазе. В этом случае предпочтительно, чтобы в случае использования двух антител, оба антитела были мечены частями системы детектирования, что приводит к генерации сигнала или запуску сигнала, если оба антитела объединены в один сэндвич.

Такие способы должны быть реализованы, в частности, как способы детектирования усиления или гашения флуоресценции. В частности предпочтительный аспект относится к применению детектирующих реагентов, которые должны использоваться попарно, таких как, например, описанные в US 4 882 733 A, EP-B1 0 180 492 или EP-B1 0 539 477 и в уровне техники, цитируемом в данном документе. Таким образом, становятся возможными измерения, при которых выявляются только продукты реакции, включающие оба метящих компонента в одном иммунном комплексе непосредственно в реакционной смеси.

Например, такие технологии предлагаются под торговыми марками TRACE® (Time Resolved Amplified Cryptate Emission, усиленное излучение криптата с временным разрешением) или KRYPTOR®, реализующие идеи вышеупомянутых заявок. Следовательно, в конкретных предпочтительных аспектах используется диагностическое устройство для реализации предложенного в данном документе способа. Например, определяют уровень белка проАДМ или его фрагмента и/или уровень любого другого дополнительного маркера по способу, предложенного в данном документе. В конкретных предпочтительных аспектах диагностическое устройство представляет собой анализатор KRYPTOR®.

В одном варианте реализации способа, описанного в данном документе, способ представляет собой иммуноанализ, и при этом анализ проводят в гомогенной фазе или в гетерогенной фазе.

В дополнительных вариантах реализации способа, описанного в данном документе, способ дополнительно включает молекулярный анализ образца, полученного от указанного пациента, для выявления инфекции. Образец, используемый при молекулярном анализе для выявления инфекции, предпочтительно представляет собой образец крови. В предпочтительном варианте реализации молекулярный анализ представляет собой способ, направленный на выявление одной или более биомолекул, происходящих от патогена. Указанная одна или более биомолекул могут представлять собой нуклеиновую кислоту, белок, сахар, карбогидразы, липид и/или их комбинацию, такую как гликозилированный белок, но предпочтительно представляет собой нуклеиновую кислоту. Указанная биомолекула предпочтительно специфична для одного или более патогенов. В соответствии с предпочтительными вариантами реализации данного изобретения такие биомолекулы детектируются с помощью одного или более способов для анализа биомолекул, выбранных из группы, включающей способы амплификации нуклеиновых кислот, такие как ПЦР, ПЦР в режиме реального времени, ОТ-ПЦР, ОТ-ПЦР в режиме реального времени или изотермическая амплификация, масс-спектрометрия, способы определение ферментативной активности и способы обнаружения на основе иммуноанализа. Дополнительные способы молекулярного анализа известны специалистам в данной области техники и включают способ по данному изобретению.

В одном варианте реализации способа, описанного в данном документе, первое антитело и второе антитело присутствуют в диспергированном виде в жидкой реакционной смеси, и при этом первый метящий компонент, который является частью системы мечения на основе гашения или усиления флуоресценции или хемилюминесценции, связан с первым антителом, и второй метящий компонент данной системы мечения связан со вторым антителом, так что после связывания обоих антител с данным детектируемым проАДМ или его фрагментами генерируется измеримый сигнал, позволяющий детектировать полученные в результате сэндвичные комплексы в растворе для измерения.

В одном варианте реализации способа, описанного в данном документе, система мечения содержит криптат или хелат редкоземельного элемента в сочетании с флуоресцентным или хемилюминесцентным красителем, в частности цианинового типа.

В одном варианте реализации способа, описанного в данном документе, способ дополнительно включает сравнение обнаруженного уровня проАДМ или его фрагмента(ов) с референтным уровнем, пороговым значением и/или средним значением в группе пациентов, соответствующим уровню проАДМ или его фрагментов у пациентов, которым было диагностировано критическое состояние, и у пациентов, которые проходят лечение, при этом указанное сравнение выполняется процессором компьютера с использованием исполняемого компьютерного кода.

Способы по данному изобретению могут быть частично компьютеризированы. Например, стадия сравнения выявленного уровня маркера, например, уровня проАДМ или его фрагментов, с референтным уровнем может быть проведена в компьютерной системе. В компьютерной системе выявленный уровень маркера(ов) можно сочетать с уровнями другого маркера и/или параметрами субъекта для вычисления оценки, используемой для диагностирования, прогнозирования, оценки риска и/или стратификации риска. Например, выявленные значения могут быть введены (либо вручную медицинским работником, либо автоматически с устройства (устройств), в которых уровень (уровни) соответствующего(их) маркера(ов) был(и) определены) в компьютерную систему. Компьютерная система может находиться непосредственно в пункте оказания медицинской помощи (например, ОИТ или ОСП) или в отдаленном месте с подключением через компьютерную сеть (например, через Интернет или специализированные медицинские облачные системы, которые необязательно комбинируются с другими ИТ-системами или платформами, такими как больничные информационные системы (HIS)). Как правило, компьютерная система будет хранить значения (например, уровень маркера или параметры, такие как возраст, артериальное давление, масса тела, пол и т.д. или системы оценки клинических показателей, например по шкале SOFA, qSOFA, BMI и т.д.) на машиночитаемом носителе и рассчитывать оценку на основании предварительно определенных и/или предварительно сохраненных референтных уровней или референтных значений. Полученная оценка будет отображаться и/или распечатываться для пользователя (обычно им является медицинский работник, такой как врач). В качестве альтернативы или дополнительно, связанный прогноз, диагноз, оценка, руководство по лечению, руководсво по ведению больного или стратификация будут отображаться и/или распечатываться для пользователя (обычно им является медицинский работник, такой как врач).

В одном варианте реализации данного изобретения может использоваться система программного обеспечения, в которой очевиден алгоритм машинного обучения, предпочтительно для выявления госпитализированных пациентов с риском сепсиса, тяжелого сепсиса и септического шока с использованием данных из электронных медицинских карт (ЭМК, EHR). Подход машинного обучения может быть получен с помощью классификатора случайного леса с использованием данных ЭМК (таких как лабораторные исследования, экспрессия биомаркеров, жизненно важные показатели и анкетныеданные) пациентов. Машинное обучение представляет собой тип искусственного интеллекта, который дает компьютерам возможность изучать сложные шаблоны в данных без явного программирования, в отличие от более простых систем, основанных на правилах. В более ранних исследованиях использовались данные электронных медицинских карт для запуска предупреждений при выявлении клинического ухудшения в целом. В одном варианте реализации данного изобретения обработка уровней проАДМ может быть включена в соответствующее программное обеспечение для сравнения с существующими наборами данных, например, уровни проАДМ могут также обрабатываться в программном обеспечении машинного обучения, чтобы помочь в диагностике или прогнозировании возникновения нежелательного явления.

Комбинированное использование выявления проАДМ или его фрагментов в сочетании с другим биомаркером, таким как ПКТ или CРБ, может быть реализовано либо в одном мультиплексном анализе, либо в двух отдельных анализах, проводимых с использованием образца, полученного от пациента. Образец может относиться к одному и тому же образцу или к разным образцам. Анализ, применяемый для выявления и определения проАДМ и, например, ПКТ, также может быть одинаковым или различным, например, для определения одного из вышеуказанных маркеров может использоваться иммуноанализ. Более подробные описания подходящих анализов предложены ниже.

Предельные значения и другие референтные уровни проАДМ или его фрагментов у пациентов, у которым было диагностировано критического состояния и которые находятся на лечении, могут быть определены ранее описанными способами. Например, квалифицированному специалисту известны способы использования коэффициента вариации при оценке изменчивости количественных анализов с целью установления референтных значений и/или пороговых значений (George F. Reed et al., Clin Diagn Lab Immunol.2002; 9(6):1235-1239).

Кроме того, можно определить функциональную чувствительность анализа, чтобы указать статистически значимые значения для использования в качестве референтных уровней или предельных значений в соответствии с разработанными способами. Лаборатории могут независимо определять функциональную чувствительность анализа с помощью клинически значимого протокола. «Функциональную чувствительность» можно рассматривать как концентрацию, которая приводит к коэффициенту вариации (CV), равному 20% (или некоторому другому заранее определенному % CV), и, таким образом, является мерой точности анализа при низких уровнях анализируемого вещества. Таким образом, CV представляет собой стандартизацию стандартного отклонения (SD), которая позволяет сравнивать оценки вариабельности независимо от величины концентрации анализируемого вещества, по меньшей мере, на протяжении большей части рабочего диапазона анализа.

Кроме того, способы, основанные на ROC-анализе, могут использоваться для определения статистически значимых различий между двумя клиническими группами пациентов. «Кривые ошибок» (ROC-кривые, Receiver Operating Characteristic) измеряют эффективность сортировки подобранных вероятностей модели для сортировки уровней ответа. ROC-кривые также могут помочь в установке критериев для диагностического теста. Чем выше кривая от диагонали, тем она лучше подходит.Если логистическая подгонка имеет более двух уровней ответа, она предоставляет обобщенную ROC-кривую. На таком графике представлена кривая для каждого уровня ответа, которая является ROC-кривой этого уровня, в сравнении со всеми другими уровнями. Доступно программное обеспечение, позволяющее проводить такой анализ для определения подходящих референтных уровней и предельных значений, например JMP 12, JMP 13, Statistical Discovery, от SAS.

Аналогичным образом можно определить предельные значения для ПКТ. Для определения подходящего предельного значения доступна литература, например, Philipp Schuetz et al. (BMC Medicine. 2011; 9:107), в которой описывают, что при предельном значении 0,1 нг/мл ПКТ демонстрировал очень высокую чувствительность в анализе для исключения наличия инфекции. Теренс Чан и др. (Expert Rev.Mol.Diagn.2011; 11 (5), 487.496) описали, что такие индикаторы, как отношение правдоподобия для отрицательного и положительного результата исследования, которые рассчитываются на основе чувствительности и специфичности, также полезны для оценки силы диагностического теста. Значения обычно отображаются в виде графиков для нескольких предельных значений (ПЗ) в виде «кривой ошибок». Площадь под кривой используется для определения наилучшего диагностически значимого ПЗ. В этой литературе описываются вариации ПЗ (пределовые значения, которые зависят от анализа и схемы исследования) и подходящие способы для определения предельных значений.

Средние уровни проАДМ или его фрагментов в группе пациентов также могут использоваться в качестве референтных значений, например, средние значения проАДМ в группе пациентов, при этом пациенты, которым диагностировано критического состояния, могут сравниваться с контрольной группой, при этом контрольная группа предпочтительно включает более 10, 20, 30, 40, 50 или более субъектов.

В одном варианте реализации данного изобретения предельный уровень для ПКТ может представлять собой значение в диапазоне от 0,01 до 100,00 нг/мл в образце сыворотки, например, при использовании системы анализа Luminex MAC Pix E-Bioscience или анализа BRAHMS PCT-Kryptor. В предпочтительном варианте реализации данного изобретения предельный уровень ПКТ может находиться в диапазоне от 0,01 до 100, от 0,05 до 50, от 0,1 до 20 или от 0,1 до 2 нг/мл, а наиболее предпочтительно от>0,05 до 0,5 нг/мл. Любое значение в этих диапазонах может рассматриваться как подходящее предельное значение. Например, можно использовать 0,01; 0,05; 0,1; 0,2; 0,3; 0,4; 0,5; 0,6; 0,7; 0,8; 0,9; 1,0; 1,1; 1,2; 1,3; 1,4; 1,5; 1,6; 1,7; 1,8; 1,9; 2,0; 3; 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95 или 100 нг/мл. В некоторых вариантах реализации данного изобретения уровень ПКТ для здоровых субъектов составляют приблизительно 0,05 нг/мл.

Подробное описание сущности изобретения

Данное изобретение основано на данных, описанных в данном документе, которые демонстрируют, что оценка уровня проАДМ позволяет делать эффективные прогностические утверждения относительно того, требуется ли госпитализация, тем самым обеспечивая эффективные средства для руководства по лечению пациента с симптомами инфекционного заболевания.

Данное изобретение имеет следующие преимущества по сравнению с традиционными способами: способы и наборы по данному изобретению являются быстрыми, объективными, простыми в применении и точными. Способы и наборы по данному изобретению относятся к маркерам и клиническим показателям, которые легко измерить обычными способами, поскольку уровни проАДМ, ПКТ, лактата, c-реактивного белка, оценки по шкале SOFA, qSOFA, APACHE II, SAPS II могут быть определены в получаемых по стандартной технологии образцах крови или других биологических жидкостях или образцах, полученных от субъекта.

В контексте данного документа «пациент» или «субъект» может представлять собой позвоночное. В контексте данного изобретения термин «субъект» включает как людей, так и животных, в частности, млекопитающих, и другие организмы.

В ключе данного изобретения пациент с симптомами инфекционного заболевания представляет собой субъект, у которого наблюдается одно или более из перечисленного, но не ограничивается этим - лихорадка, диарея, усталость, боль в мышцах, кашель, в случае если субъекта укусило животное, то - затрудненное дыхание, сильная головная боль с лихорадкой, сыпь или отек, необъяснимая или продолжительная лихорадка или проблемы со зрением. Другими симптомами могут быть жар и озноб, очень низкая температура тела, меньшее, чем обычно мочеиспускание, учащенный пульс, учащенное дыхание, тошнота и рвота. В предпочтительных вариантах реализации изобретения симптомами инфекционного заболевания являются лихорадка, диарея, утомляемость, боли в мышцах, учащенный пульс, учащенное дыхание, тошнота, рвота и/или кашель.

Используемый в контексте данного документа термин «инфекционное заболевание» включает все заболевания или расстройства, которые связаны с бактериальными и/или вирусными, и/или грибковыми инфекциями.

Используемый в контексте данного изобретения термин «диагностирование» относится к распознаванию и (раннему) обнаружению клинического состояния. Термин «диагностирование» также может охватывать оценку тяжести заболевания.

«Прогнозирование» относится к предположению исхода состояния субъекта или определенного риска состояния субъекта. Этот термин также может включать оценку вероятности выздоровления или вероятности нежелательного исхода для данного субъекта.

Способы по данному изобретению также могут быть использованы для мониторинга, мониторинга терапии, руководства по лечению и/или контроля терапии. «Мониторинг» относится к отслеживанию пациента и потенциально возникающих осложнений, например для анализа прогресса процесса выздоровления или влияния конкретного вида лечения или терапии на состояние здоровья пациента.

Термин «мониторинг терапии» или «контроль терапии» в контексте данного изобретения относится к мониторингу и/или корректировке терапевтического лечения указанного пациента, например, путем получения обратной связи об эффективности терапии. Используемый в контексте данного документа термин «руководство по лечению» относится к применению определенных способов лечения, терапевтических действий или медицинских вмешательств, основанных на значении/уровне одного или более биомаркеров и/или клинических параметров и/или клинических оценок. Этот термин включает корректировку или прекращение лечения.

В данном изобретении термины «оценка риска» и «стратификация риска» относятся к распределению субъектов в различные группы риска в соответствии с их дальнейшим прогнозом состояния здоровья. Оценка риска также относится к стратификации для применения профилактических и/или терапевтических мер. Термин «стратификация терапии», в частности, относится к распределению или классификации пациентов в различные группы, такие как группы риска или терапевтические группы, которые получают определенные дифференцированные терапевтические меры в зависимости от их классификации. Термин «стратификация терапии» также относится к распределению или классификации пациентов с инфекциями или имеющими симптомы инфекционного заболевания в группу, которая не нуждается в определенных терапевтических мерах.

Понятно, что в контексте данного изобретения «определение уровня проАДМ или его фрагмента(ов)» или тому подобное относится к любым средствам определения проАДМ или его фрагмента. Фрагмент может иметь любую длину, например, по меньшей мере, около 5, 10, 20, 30, 40, 50 или 100 аминокислот, при условии, что фрагмент позволяет однозначно определить уровень проАДМ или его фрагмента. В конкретных предпочтительных аспектах данного изобретения «определение уровня проАДМ» относится к определению уровня среднерегионального проадреномедуллина (СР-проАДМ). СР-проАДМ представляет собой фрагмент и/или область проАДМ.

Пептид адреномедуллин (АДМ) был открыт как гипотензивный пептид, содержащий 52 аминокислоты, который был выделен из феохромоцитомы человека (Kitamura et al., 1993). Адреномедуллин (АДМ) кодируется как пептид-предшественник, содержащий 185 аминокислот ("препроадреномедуллин" или «пре-проАДМ"). Иллюстративная аминокислотная последовательность АДМ приведена в последовательности SEQ ID NO: 1.

SEQ ID NO:1: аминокислотная последовательность пре-про-АДМ:

1 MKLVSVALMY LGSLAFLGAD TARLDVASEF RKKWNKWALS RGKRELRMSS

51 SYPTGLADVK AGPAQTLIRP QDMKGASRSP EDSSPDAARI RVKRYRQSMN

101 NFQGLRSFGC RFGTCTVQKL AHQIYQFTDK DKDNVAPRSK ISPQGYGRRR

151 RRSLPEAGPG RTLVSSKPQA HGAPAPPSGS APHFL

АДМ содержит положения 95-146 аминокислотной последовательности пре-проАДМ и представляет собой продукт его сплайсинга. «Проадреномедуллин» («проАДМ») относится к пре-проАДМ, не содержащему сигнальную последовательность (аминокислоты с 1 по 21), то есть состоит из аминокислотных остатков пре-проАДМ с 22 по 185. «Среднерегиональный проадреномедуллин» («СР-проАДМ») относится к аминокислотам пре-проАДМ с 42 по 95. Иллюстративная аминокислотная последовательность СР-проАДМ приведена в последовательности SEQ ID NO: 2.

SEQ ID NO:2: аминокислотная последовательность СР-проАДМ (AО пре-про-АДМ с 45 по 92):

ELRMSSSYPT GLADVKAGPA QTLIRPQDMK GASRSPEDSS PDAARIRV

В данном документе также предусмотрено, что пептид пре-проАДМ или СР-проАДМ и его фрагмент могут применяться для описанных в данном документе способов. Например, пептид или его фрагмент могут содержать аминокислоты 22-41 пре-проАДМ (пептид РАМР) или аминокислоты 95-146 пре-проАДМ (зрелый адреномедуллин, включая биологически активную форму, также известную как био-АДМ). С-концевой фрагмент проАДМ (аминокислоты пре-проАДМ от 153 до 185) называется адренотензином. Фрагменты пептидов проАДМ или фрагменты СР-проАДМ могут содержать, например, по меньшей мере, около 5, 10, 20, 30 или более аминокислот.Соответственно, фрагмент проАДМ может, например, быть выбран из группы, состоящей из СР-проАДМ, PAMP, адренотензина и зрелого адреномедуллина, предпочтительно в данном документе фрагмент представляет собой СР-проАДМ.

Определение этих различных форм АДМ или проАДМ и их фрагментов также включает измерение и/или обнаружение конкретных субрегионов этих молекул, например, с использованием антител или других аффинных реагентов, нацеленных против определенной части молекул, или путем определения наличия и/или количества молекул путем измерения части белка с помощью масс-спектрометрии. В данном изобретении можно использовать любой один или более «пептидов или фрагментов АДМ», описанных в данном документе.

Соответственно, способы и наборы по данному изобретению могут также включать определение, по меньшей мере, одного дополнительного биомаркера, маркера, клинической оценки и/или параметра в дополнение к данному проАДМ.

Используемый в контексте данного документа параметр представляет собой характеристику, признак или измеримый показатель, который может помочь в определении конкретной системы. Параметр является важным элементом для связанных со здоровьем и физиологией оценок, таких как риск заболевания/расстройства/клинического состояния, предпочтительно, органной дисфункции (дисфункций). Кроме того, параметр определяется как характеристика, которая объективно измеряется и оценивается как показатель нормальных биологических процессов, патогенных процессов или фармакологических реакций на терапевтическое вмешательство. Иллюстративный параметр может быть выбран из группы, состоящей из Шкалы оценки острых функциональных и хронических изменений в состоянии здоровья II (APACHE II), упрощенной шкалы оценки острых физиологических расстройств (шкала SAPSII), Шкалы динамической оценки выраженности органной недостаточности (шкала SOFA), Шкалы упрощенной динамической оценки выраженности органной недостаточности (qSOFA), индекс массы тела, веса, возраст, пола, IGS II, потребления жидкости, количества лейкоцитов, натрия, калия, температуры тела, артериального давления, количества дофамина, билирубина, частоты дыхания, парциального давления кислорода, Шкалы Всемирной федерации нейрохирургических обществ (WFNS) и Шкалы комы Глазго (GCS).

Используемые в контексте данного документа такие термины, как «маркер», «имитатор», «прогностический маркер», «показатель» или «биомаркер», или «биологический маркер», используются взаимозаменяемо и относятся к поддающимся измерению и количественной оценке биологическим маркерам (например, концентрации определенного белка или фермента или их фрагмента, концентрации определенного гормона или его фрагмента, или присутствию биологических веществ или их фрагмента), которые служат показателями для оценок состояния здоровья и физиологии, таких как риск заболевания/расстройства/клинического состояния, предпочтительно нежелательного явления. Маркер или биомаркер определяется как характеристика, которая может быть объективно измерена и оценена как показатель нормальных биологических процессов, патогенных процессов или фармакологических реакций на терапевтическое вмешательство. Биомаркеры могут быть измерены в образце (например, анализ крови, плазмы, мочи или ткани).

По меньшей мере, один дополнительный маркер и/или параметр указанного субъекта может быть выбран из группы, состоящей из уровня лактата в указанном образце, уровня прокальцитонина (ПКТ) в указанном образце, оценки указанного субъекта по шкале динамической оценки выраженности органной недостаточности (балл SOFA), необязательно оценки по упрощенной шкале SOFA, оценки указанного субъекта по упрощенной шкале оценки острых физиологических расстройств (SAPSII), оценки указанного субъекта по шкале оценки острых функциональных и хронических изменений в состоянии здоровья II (APACHE II) и уровня растворимой fms-подобной тирозинкиназы 1 (sFlt-1), Гистона H2A, Гистона H2B, Гистона H3, Гистона H4, кальцитонина, Эндотелин-1 (ET-1), Аргинина-Вазопрессина (АВП, AVP), Предсердного Натрийуретического Пептида (ПНП, ANP), Липокалина, Ассоциированного с Желатиназой Нейтрофилов (NGAL), Тропонина, Мозгового Натрийуретического Пептида (МНП, BNP), C-Реактивного Белка (СРБ, CRP), Белка Панкреатических Камней (PSP), Триггерного рецептора, Экспрессируемого на Миелоидных клетках 1 (TREM1), Интерлейкина-6 (IL-6), Интерлейкина-1, Интерлейкина-24 (IL-24), Интерлейкина-22 (IL-22), Интерлейкина 20 (IL-20), других интерлейкинов, Пресепсина (sCD14-ST), Липополисахарид-Связывающего Белка (ЛСБ, LBP), Альфа-1-Антитрипсина, Матриксной Металлопротеиназы 2 (MMP2), Матриксной Металлопротеиназы 8 (MMP8), Матриксной Металлопротеиназы 9 (MMP9), Матриксной Металлопротеиназы 7 (MMP7), Плацентарного фактора роста (PIGF), Хромогранина A, белка S100A, белка S100B и фактора некроза опухоли-α (TNFα), Неоптерина, Альфа-1-Антитрипсина, Проаргинин-вазопрессина (АВП, проАВП (AVP, proAVP) или Копептина), прокальцитонина, предсердного натрийуретического пептида (ANP, про-ANP), Эндотелина-1, CCL1/TCA3, CCL11, CCL12/MCP-5, CCL13/MCP-4, CCL14, CCL15, CCL16, CCL17/TARC, CCL18, CCL19, CCL2/MCP-1, CCL20, CCL21, CCL22/MDC, CCL23, CCL24, CCL25, CCL26, CCL27, CCL28, CCL3, CCL3L3, CCL4, CCL4L1/LAG-1, CCL5, CCL6, CCL7, CCL8, CCL9, CX3CL1, CXCL1, CXCL10, CXCL11, CXCL12, CXCL13, CXCL14, CXCL15, CXCL16, CXCL17, CXCL2/MIP-2, CXCL3, CXCL4, CXCL5, CXCL6, CXCL7/Ppbp, CXCL9, IL8/CXCL8, XCL1, XCL2, FAM19A1, FAM19A2, FAM19A3, FAM19A4, FAM19A5, CLCF1, CNTF, IL11, IL31, IL6, Leptin, LIF, OSM, IFNA1, IFNA10, IFNA13, IFNA14, IFNA2, IFNA4, IFNA7, IFNB1, IFNE, IFNG, IFNZ, IFNA8, IFNA5/IFNaG, IFNω/IFNW1, BAFF, 4-1BBL, TNFSF8, CD40LG, CD70, CD95L/CD178, EDA-A1, TNFSF14, LTA/TNFB, LTB, TNFa, TNFSF10, TNFSF11, TNFSF12, TNFSF13, TNFSF15, TNFSF4, IL18, IL18BP, IL1A, IL1B, IL1F10, IL1F3/IL1RA, IL1F5, IL1F6, IL1F7, IL1F8, IL1RL2, IL1F9, IL33 или их фрагмента. Дополнительные маркеры включают мембранные микрочастицы, количество тромбоцитов, средний объем тромбоцитов (MPV), sCD14-ST, активность протромбиназы, антитромбин и активность антитромбина, катионный белок 18 (CAP18), протеазы, расщепляющие фактор фон Виллебранда (vWF), липопротеины в сочетании с СРБ, фибриноген, фибрин, B2GP1, GPIIb-llla, неденатурированный D-димер фибрина, тромбоцитарный фактор 4, гистоны и анализ ПВ (PT-анализ).

Используемый в контексте данного документа термин «прокальцитонин» или «ПКТ» относится к пептиду, охватывающему аминокислотные остатки 1-116, 2-116, 3-116, или их фрагменты, пептида прокальцитонина. ПКТ представляет собой пептидный предшественник гормона кальцитонина. Таким образом, длина фрагментов прокальцитонина составляет, по меньшей мере, 12 аминокислот, предпочтительно более 50 аминокислот, более предпочтительно более 110 аминокислот.ПКТ может содержать посттрансляционные модификации, такие как гликозилирование, липидирование или дериватизация. Прокальцитонин является предшественником кальцитонина и катакальцина. Таким образом, в нормальных условиях уровни ПКТ в кровотоке являются очень низкими (<около 0,05 нг/мл).

Уровень ПКТ в образце, полученного от субъекта, может быть определен с помощью иммуноанализов, как описано в данном документе. В контексте данного документа также может быть определен уровень рибонуклеиновой кислоты или дезоксирибонуклеиновых кислот, кодирующих «прокальцитонин» или «ПКТ». Способы определения ПКТ известны специалисту, например, с использованием продукции, полученной от Thermo Fisher Scientific/B R A H M S GmbH.

Лактат или молочная кислота представляет собой органическое соединение с формулой CH₃CH(OH)COOH, которое встречается в биологических жидкостях, включая кровь. Анализы крови на лактат проводятся для определения состояния кислотно-щелочного гомеостаза в организме. Молочная кислота представляет собой продукт клеточного метаболизма, который может накапливаться, когда клеткам не хватает кислорода (гипоксия) и они должны обращаться к менее эффективным средствам производства энергии, или когда состояние вызывает избыточное производство или нарушение выведения лактата. Лактоацидоз может быть вызван недостаточным количеством кислорода в клетках и тканях (гипоксии), например, если у кого-то есть состояние, которое может привести к снижению количества кислорода, доставляемого клеткам и тканям, например, шок, септический шок или хроническая сердечная недостаточность, лактатный тест может быть использован для выявления и оценки степени гипоксии и лактоацидоза.

С-реактивный белок (CРБ) представляет собой пентамерный белок, который можно найти в биологических жидкостях, таких как плазма крови. Уровень СРБ может повышаться в ответ на воспаление. Измерение и составление графика значений CRP может оказаться полезным для определения прогрессирования заболевания или эффективности лечения.

Используемый в контексте данного документа термин «шкала динамической оценки выраженности органной недостаточности" или «шкала SOFA" представляет собой оценку, используемую для отслеживания статуса пациента во время пребывания в отделении интенсивной терапии (ОИТ). Шкала SOFA представляет собой систему подсчета баллов, определяющую степень функционирования органов или уровень органной недостаточности пациента. Шкала основана на шести различных оценках, по одной для дыхательной, сердечно-сосудистой, печеночной, коагуляционной, почечной и неврологической систем. Как средние, так и высшие баллы SOFA являются предикторами исхода. Увеличение оценки SOFA в течение первых 24-48 часов в ОИТ прогнозирует уровень смертности от 50% до 95%. Оценки менее 9 прогнозируют летальный исход на уровне 33%, тогда как оценки выше 14 могут быть близки к 95% или выше.

Используемый в контексте данного документа термин «ускоренная шкала SOFA» (qSOFA) представляет собой систему оценки, которая указывает на нарушение функции органа или риске летального исхода у пациента. Шкала оценки основана на трех критериях: 1) изменение психического статуса, 2) снижение систолического артериального давления до уровня менее 100 мм рт.ст., 3) частота дыхательных движений более 22 вдохов в минуту. Пациенты с двумя или более из этих состояний подвергаются большему риску нарушения функции органа или смерти. «Положительная» оценка по шкале qSOFA (≥2) предполагает высокий риск неблагоприятного исхода у пациентов с подозрением на инфекцию. Этих пациентов следует более тщательно обследовать на предмет наличия дисфункции органов.

Используемый в контексте данного документа термин «APACHE II» или «Шкала Оценки Острых Физиологических Состояний и Хронического Состояния Здоровья II» представляет собой систему оценки тяжести заболевания (Knaus et al., 1985). Данная оценка может быть применена в течение 24 часов после поступления пациента в отделение интенсивной терапии (ОИТ) и может быть определена на основании 12 различных физиологических параметров: AaDO2 или PaO2 (в зависимости от FiO2), температуры тела (ректальной), среднего артериального давления, pH артериальной крови, частоты сердечных сокращений, частоты дыхания, количества натрия (в сыворотке), калия (в сыворотке), креатинина, гематокрита, количества лейкоцитов и Шкалы Комы Глазго.

В контексте данного документа «SAPS II» или «Упрощенная Шкала Оценки Острых Физиологических Состояний II» относится к системе классификации тяжести заболевания или расстройства (см. Le Gall JR et al., A new Simplified Acute Physiology Score (SAPS II) based on a European/North American multicenter study. JAMA. 1993;270(24):2957-63.). Шкала SAPS II состоит из 12 обычных физиологических переменных и 3 связанных с болезнью переменных. Балльная оценка рассчитывается на основе этих 12 обычных физиологических измерений, информации о предыдущем состоянии здоровья и некоторой информации, полученной при поступлении в ОИТ. Оценка SAPS II может быть определена в любое время, предпочтительно, на 2-й день. «Худшее» измерение определяется как мера, которая соответствует наибольшему количеству баллов. Оценка по шкале SAPS II составляет от 0 до 163 баллов. Система классификации включает следующие параметры: Возраст, Частота Сердечных Сокращений, Систолическое Артериальное Давление, Температура, Оценка По Шкале Комы Глазго, Искусственная Вентиляция Легких или CPAP (Вентиляция Постоянным Положительным Давлением), PaO2, FiO2, Диурез, Концентрация Азота Мочевины в Крови, Натрий, Калий, Бикарбонат, Билирубин, Лейкоциты, Хронические заболевания и Тип госпитализации. Существует сигмоидальная взаимосвязь между летальным исходом и общей оценкой по шкале SAPS II. Летальный исход субъекта составляет 10% при оценке по шкале SAPSII, составляющей 29 баллов, 25% при оценке по шкале SAPSII, составляющей 40 баллов, 50% при оценке по шкале SAPSII, составляющей 52 балла, 75% при оценке по шкале SAPSII, составляющей 64 балла, и 90% при оценке SAPSII, составляющей 77 баллов (Le Gall loc. cit.).

Используемый в контексте данного документа термин «образец» означает биологический образец, полученный или взятый от пациента или субъекта. В контексте данного документа «образец» может, например, относиться к образцу биологической жидкости или ткани, полученному с целью исследования, диагностирования, прогнозирования или оценки представляющего интерес субъекта, такого как пациент.Предпочтительно в данном документе образец представляет собой образец биологической жидкости, такой как кровь, сыворотка, плазма, спинномозговая жидкость, моча, слюна, мокрота, плевральные выпоты, клетки, клеточный экстракт, образец ткани, биопсия ткани, образец кала и тому подобное. В частности, образец представляет собой кровь, плазму крови, сыворотку крови.

«Плазма» в контексте данного изобретения представляет собой практически бесклеточный супернатант крови, содержащий антикоагулянт, полученный после центрифугирования. Примеры антикоагулянтов включают соединения, связывающие ионы кальция, такие как ЭДТА или цитрат, и ингибиторы тромбина, такие как гепаринаты или гирудин. Бесклеточная плазма может быть получена путем центрифугирования антикоагулированной крови (например, цитратной, ЭДТА- или гепаринизированной крови), например, в течение по меньшей мере 15 минут при 2000-3000 g.

«Сыворотка» в контексте данного изобретения представляет собой жидкую фракцию цельной крови, которую собирают после того, как крови дают свернуться. При центрифугировании коагулированной крови (свернутой крови) сыворотку можно получить в качестве супернатанта.

В контексте данного документа «моча» представляет собой жидкий продукт организма, выделяемый почками в процессе, называемом уринацией (или мочеиспусканием), и выводимый через мочеиспускательный канал.

В вариантах реализации данного изобретения состоянием, требующим госпитализации, может быть сепсис, тяжелый сепсис и/или септический шок. «Сепсис» в контексте данного изобретения относится к системному ответу на инфекцию. В качестве альтернативы, сепсис может рассматриваться как комбинация ССВО (SIRS) с подтвержденным инфекционным процессом или инфекцией. Сепсис может быть охарактеризован как клинический синдром, определенный наличием как инфекции, так и системного воспалительного ответа (Levy MM et al. 2001 SCCM/ESICM/ACCP/ATS/SIS International Sepsis Definitions Conference. Crit Care Med. 2003 Apr;31(4): 1250-6). Используемый в контексте данного документа термин «сепсис» включает, но не ограничивается перечисленным, сепсис, тяжелый сепсис и септический шок.

Используемый в контексте данного документа термин «сепсис» включает, но не ограничивается перечисленным, сепсис, тяжелый сепсис и септический шок. Тяжелый сепсис в данном документе означает сепсис, связанный с нарушением функции органа, патологией, связанной с гипоперфузией, или гипотензией, вызванной сепсисом. Патологии, связанные с гипоперфузией, включают лактоацидоз, олигурию и острое изменение психического статуса. Гипотензия, вызванная сепсисом, определяется наличием систолического артериального давления менее приблизительно 90 мм рт.ст.или его снижением приблизительно на 40 мм рт.ст.или более относительно исходного уровня в отсутствие других причин гипотензии (например, кардиогенного шока). Септический шок определен как тяжелый сепсис с вызванной сепсисом гипотензией, сохраняющейся несмотря на надлежащую инфузионную терапию, наряду с наличием патологий, связанных с гипоперфузией, или нарушения функции органа (Bone et al., CHEST 101(6): 1644-55, 1992).

Термин «сепсис» можно также определить как опасную для жизни дисфункцию органа, вызванную нарушенной регуляцией реакции «хозяина на инфекцию». Для клинического практического применения дисфункция органов предпочтительно может быть представлена увеличением показателя оценки по шкале динамической оценки выраженности органной недостаточности (SOFA) на 2 балла или более, что связано с внутрибольничной летальностью более 10%. Септический шок можно определить как разновидность сепсиса, при котором особенно серьезные нарушения кровообращения, клеточного обмена и метаболизма связаны с более высоким риском летального исхода, чем только при сепсисе. Пациенты с септическим шоком могут быть клинически идентифицированы по потребности в сосудосуживающих препаратах для поддержания среднего артериального давления 65 мм рт.ст.или выше и уровня лактата в сыворотке выше 2 ммоль/л (>18 мг/дл) при отсутствии гиповолемии.

Термин «сепсис» в контексте данного документа относится ко всем возможным стадиям развития сепсиса. Термин «сепсис» также включает тяжелый сепсис или септический шок, основанный на определении СЕПСИС-2 (Bone et al., 2009). Термин «сепсис» также включает субъектов, попадающих под определение СЕПСИС-3 (Singer et al., 2016). Термин «сепсис» в контексте данного документа относится ко всем возможным стадиям развития сепсиса.

Используемый в контексте данного документа термин «инфекция» в объеме изобретения означает патологический процесс, вызванный проникновением в нормальную стерильную ткань или жидкость патогенных или потенциально патогенных агентов, патогенов, организмов и/или микроорганизмов, и предпочтительно относится к инфекции(ям) бактериями, вирусами, грибами и/или паразитами. Соответственно, инфекция может представлять собой бактериальную инфекцию, вирусную инфекцию и/или грибковую инфекцию. Инфекция может представлять собой местную или системную инфекцию. В контексте данного изобретения вирусная инфекция может рассматриваться как инфекция, вызванная микроорганизмом.

Кроме того, осложнение, связанное с инфекцией, может представлять собой «нозокомиальную» инфекцию. Нозокомиальные инфекции также называются внутрибольничными инфекциями (ВБИ, HAI) - инфекциями, которые передаются в больнице или другом медицинском учреждении. Чтобы подчеркнуть как больничные, так и внебольничные условия, данную инфекцию иногда называют инфекцией, связанной с оказанием медицинской помощи (ВБИ или ИСМП (HCAI)). Такая инфекция может быть передана в больнице, доме престарелых, реабилитационном учреждении, поликлинике или других клинических условиях. Нозокомиальная инфекция может передаваться восприимчивому пациенту в клинических условиях различными способами. Распространять инфекцию может медицинский персонал, в дополнении с зараженным оборудованием, постельным бельем или воздушно-капельным путем заражения. Инфекция может поступать из внешней среды, другого инфицированного пациента, персонала, который может быть инфицирован, или, в некоторых случаях, источник инфекции не может быть определен. В некоторых случаях микроорганизм происходит из собственной микробиоты кожи пациента и становится условно-патогенным после хирургического вмешательства или других процедур, нарушающих защитный барьер кожи. Хотя пациент мог заразиться инфекцией через собственную кожу, инфекция по-прежнему считается нозокомиальной, поскольку она развивается в медицинских учреждениях.

Кроме того, субъект, страдающий от инфекции, может страдать от более чем одного источника инфекции одновременно. Например, субъект, страдающий инфекцией, может страдать от бактериальной инфекции и вирусной инфекции; от вирусной инфекции и грибковой инфекции; от бактериальной и грибковой инфекции, а также от бактериальной инфекции, грибковой инфекции и вирусной инфекции, или страдать от смешанной инфекции, включающей одну или более инфекций, перечисленных в данном документе, включая потенциально суперинфекцию, например, одну или более бактериальных инфекций в дополнение к одной или более вирусных инфекций и/или одной или более грибковых инфекций.

Используемый в контексте данного документа термин «инфекционное заболевание» включает все заболевания или расстройства, которые связаны с бактериальными и/или вирусными, и/или грибковыми инфекциями. Предпочтительно инфекционное заболевание является бактериальным.

В контексте данного изобретения термин «медицинское лечение» или «лечение» включает различные виды лечения и терапевтические стратегии, которые включают, но не ограничиваются ими, противовоспалительные стратегии, введение АДМ-антагонистов, таких как терапевтические антитела, миРНК или ДНК, экстракорпоральную очистку крови или удаление вредных веществ с помощью афереза, диализа, адсорберов для предотвращения цитокинового шторма, удаление медиаторов воспаления, плазмаферез, введение витаминов, таких как витамин С, хирургию, неотложную хирургическую помощь, вентиляцию легких, такую как механическая вентиляция легких и немеханическая вентиляция легких, чтобы обеспечить организм достаточным количеством кислорода, например, процедуры очистки очага инфекции, переливание препаратов крови, инфузию коллоидов, реплантация органов, например, реплантация почек или печени, лечение антибиотиками, инвазивную механическую вентиляцию легких, неинвазивную механическую вентиляция легких, использование сосудосуживающих препаратов, инфузионную терапию, аферез и меры по защите органов.

Квалифицированный специалист способен определить, какой из описанных в данном документе способов лечения требуется применить в условиях больницы.

Квалифицированный специалист также способен определить, какие медицинские состояния и какие степени тяжести таких медицинских состояний требуют только (или в первую очередь) лечения, доступного в условиях больницы, например, в ОСК или ОИТ.

Дополнительные способы лечения по данному изобретению включают введение клеток или клеточных продуктов, таких как стволовые клетки, кровь или плазма, и стабилизацию кровообращения пациентов и защиту эндотелиального гликокаликса, например, с помощью оптимальных стратегий инфузионной терапии, например, для достижения нормоволемии и предотвращения или лечения гиперволемии или гиповолемии. Кроме того, сосудосуживающие препараты или, например, катехоламин, а также ингибирование альбумина или гепараназы с помощью нефракционированного гепарина или N-десульфатированного ре-N-ацетилированного гепарина являются полезными средствами лечения для поддержания кровообращения и эндотелиального слоя.

Кроме того, медицинские способы лечения по данному изобретению включают, но не ограничиваются ими, стабилизацию свертывания крови, антифибринолитическое лечение, ингибиторы iNOS, противовоспалительные средства, такие как гидрокортизон, седативные и болеутоляющие средства, а также инсулин.

Искусственная и механическая вентиляция легких представляют собой эффективные способы улучшения надлежащего газообмена и вентиляции, призванные спасти жизнь во время тяжелой гипоксемии. Искусственная вентиляция легких связана с поддержанием или стимулированием дыхания субъекта. Искусственная вентиляция легких может быть выбрана из группы, состоящей из механической вентиляции, ручной вентиляции, экстракорпоральной мембранной оксигенации (ЭКМО) и неинвазивной вентиляции (НИВ). Механическая вентиляция относится к способу механической помощи или замены самостоятельного дыхания. Это может быть аппарат, называемый аппарат искусственной вентиляции легких. Механическая вентиляция может представлять собой Высокочастотную Колебательную Вентиляцию или Частичной Жидкостной Вентиляцией.

«Заместительная почечная терапия» (ЗПТ) относится к терапии, которая используется для замены нормальной функции почек по фильтрации крови. Заместительная почечная терапия может относиться к диализу (например, гемодиализу или перитонеальному диализу), гемофильтрации и гемодиафильтрации. Такие способы представляют собой различные способы отведения крови в машину, ее очистки и последующего возврата в организм. Заместительная почечная терапия может также относиться к трансплантации почки, которая является окончательной формой замещения, когда старая почка заменяется донорской. Гемодиализ, гемофильтрация и гемодиафильтрация могут быть непрерывными или периодическими и могут проводиться артериовенозным путем (при котором кровь выходит из артерии и возвращается через вену) или венозным путем (при котором кровь выходит из вены и возвращается через вену). Это приводит к различным типам ЗПТ. Например, заместительная почечная терапия может быть выбрана из группы, состоящей из, но не ограничивающаяся этим, непрерывной заместительной почечной терапией (НЗПТ, CRRT), непрерывного гемодиализа (НГ, CHD), непрерывного артерио-венозного гемодиализа (НАВГ, CAVHD), непрерывного вено-венозного гемодиализа (НВВГ, CVVHD), непрерывной гемофильтрации (НГФ, CHF), непрерывной артерио-венозной гемофильтрации (НАГФ, CAVH или CAVHF), непрерывной вено-венозной гемофильтрации (НВВГФ, CWH или CVVHF), непрерывной гемодиафильтрации (НГДФ, CHDF), непрерывной артерио-венозной гемодиафильтрации (НАВГДФ, CAVHDF), непрерывной вено-венозной гемодиафильтрации (НВВГДФ, CVVHDF), периодической заместительной почечной терапии (ПЗПТ, IRRT), периодического гемодиализа (ПГД, IHD), периодического вено-венозного гемодиализа (ПВВГД, IVVHD), периодической гемофильтрации (ПГФ, IHF), периодической вено-венозной гемофильтрации (ПВВГФ, IVVH или IVVHF), периодической гемодиафильтрации (ПГДФ, IHDF) и периодической вено-венозной гемодиафильтрации (ПВВГДФ, IVVHDF).

Медицинское лечение также включает в себя способы предотвращения переохлаждения, которые включают использование подогретых растворов при внутривенном введении и теплых одеял с конвекционной системой обогрева.

Медицинское лечение также включает лечение ран, включая контроль кровотечения, способы контроля кровотечения с использованием жгутов или без них, очистку ран, применение местного анестетика, способы закрытия ран, при которых могут использоваться клейкие полоски для кожи, медицинский тканевой клей, швы, скобы и повязки для заживления ран.

Термин «инфузионная терапия», используемый в данном изобретении, относится к введению жидкости нуждающемуся в этом субъекту. Также могут использоваться термины «регидратация» или «жидкостная реанимация». Инфузионная терапия включает, но не ограничивается этим, регидратацию с помощью пероральной регидратационной терапии (питье), внутривенного вливания, ректального введения или инъекции жидкости в подкожную ткань. Предпочтительными являются способы внутривенного введения. «Коллоиды» представляют собой дисперсии крупных органических молекул (например, Гелофузин, Волювен). Коллоиды обычно представляют собой суспензии молекул в растворе-носителе, которые относительно неспособны пересекать здоровую полупроницаемую мембрану капилляра из-за своей молекулярной массы. В одном варианте реализации данного изобретения способ указывает на то, что инфузионная терапия включает введение коллоида, выбранного из раствора желатина, альбумина и/или крахмала, или крови, или жидкости, полученной из крови. «Кристаллоиды» представляют собой растворы небольших молекул в воде (например, хлорид натрия, глюкоза,

Раствор Хартмана или раствор Рингера). Кристаллоиды обычно представляют собой растворы ионов, которые являются свободно проницаемыми, но содержат концентрации натрия и хлорида, которые определяют тоничность жидкости.

«Поддержание водного баланса» относится к мониторингу и контролю водного баланса в огранизме субъекта и введению жидкостей для стабилизации кровообращения или жизнеспособности органов, например, путем перорального, энтерального или внутривенного введения жидкости. Поддержание водного баланса включает стабилизацию водно-солевого баланса или предотвращение или коррекцию гипер- или гиповолемии, а также предоставление кроветворных препаратов.

Процедуры очистки представляют собой гигиенические способы предотвращения инфекций, особенно внутрибольничных инфекций, включающие дезинфекцию всех органических и неорганических поверхностей, которые могут контактировать с пациентом, таких как, например, кожа, предметы в палате пациента, медицинские устройства, диагностические устройства или воздух в комнате. Процедуры очистки включают использование защитной одежды и средств защиты, таких как капы, халаты, перчатки или гигиенический замок, а также такие действия, как ограничение посещения пациента. Кроме того, процедуры очистки включают очищение самого пациента и одежды пациента.

В предпочтительном варианте реализации данного изобретения термин «медицинское лечение» или «лечение» включает лечение антибиотиками, например внутривенным антибиотиком, пероральными антибиотиками или антибиотиками для местного применения.

Медицинское лечение по данному изобретению может представлять собой лечение антибиотиками, при котором можно вводить один или более «антибиотиков» или «антибиотических агентов», если инфекция была диагностирована или прогнозируется с помощью способа по данному изобретению. Антибиотики или антибиотические агенты согласно данному изобретению также потенциально включают противогрибковые или противовирусные соединения, используемые для лечения диагностированной инфекции или сепсиса. Антибиотики, обычно применяемые при лечении любой данной инфекции, разделены на классы в зависимости от патогенов, на которые они нацелены:

Спектр действия против грамположительных бактерий: Пенициллины (Ампициллин, амоксициллин), пенициллиназоустойчивые препараты (Диклоксациллин, Оксациллин), Цефалоспорины (1-го и 2-го поколения), Макролиды (Эритромицин, Кларитромицин, Азитромицин), Хинолоны (гатифлоксацин, моксифлоксацин, левофлоксацин), Ванкомицин, Сульфонамид/Триметоприм, Клиндамицин, Тетрациклины, Хлорамфеникол, Линезолид, Синерцид.

Спектр действия против грамотрицательных микроогранизмов: Пенициллины широкого спектра действия (Тикарциллин, Клавуланат, пиперациллин, тазобактам), Цефалоспорины (2-го, 3-го и 4-го поколения), Аминогликозиды, Макролиды, Азитромицин, Хинолоны (Ципрофлоксацин), Монобактамы (Азтреонам), Сульфонамид/триметоприм, Карбапенемы (Имипенем), Хлорамфеникол.

Спектр действия против синегнойной палочки (Pseudomonas): Ципрофлоксацин, Аминогликозиды, Некоторые цефалоспорины 3-го поколения, цефалоспорины 4-го поколения, Пенициллины широкого спектра действия, Карбапенемы.

Противогрибковые препараты: Аллиамины, Амфотерицин В, Флуконазол и другие Азолы, итраконазол, вориконазол, позаконазол, равуконазол, эхинокандины, Флуцитозин, сордарины, ингибиторы синтеза хитина, ингибиторы топоизомеразы, липопептиды, прадимицины, Липосомальный нистатин, Вориконазол, Эхиноканидины, Имидазол, Триазол, Тиазол, Полиен.

Противовирусные препараты: Абакавир, Ацикловир (Зовиракс), активируемый двухцепочечной РНК олигомеризатор каспазы, Адефовир, Амантадин, Ампренавир (Агенераза), Амплиген, Арбидол, Атазанавир, Атрипла, Балавир, Цидофовир, Комбивир, Долутегравир, Дарунавир, Делавирдин, Диданозин, Докозанол, Эдоксудин, Эфавиренз, Эмтрицитабин, Энфувиртид, Энтекавир, Эколивер, Фамцикловир, Комбинация фиксированных доз (антиретровирусных препаратов), Фомивирсен, Фосампренавир, Фоскарнет, Фосфонет, Ингибитор слияния, Ибацитабин, Имуновир, Идоксуридин, Имиквимод, Индинавир, Инозин, Ингибитор интегразы, Интерферон III типа, Интерферон II типа, Интерферон I типа, Интерферон, Ламивудин, Лопинавир, Ловирид, Маравирок, Мороксидин, Метизазон, Морфолинос, Нелфинавир, Невирапин, Нексавир, Нитазоксанид, Нуклеозидные аналоги, Новир, Осельтамивир (Тамифлю), Пегинтерферон альфа-2а, Пенцикловир, Перамивир, Плеконарил, Подофиллотоксин, Ингибитор протеазы (фармакология), Ралтегравир, Ингибитор обратной транскриптазы, рибавирин, Рибозимы, Рифампицин, Римантадин, Ритонавир, РНКаза H, ингибиторы протеазы, Пирамидин, Саквинавир, Софосбувир, Ставудин, Синергетический усилитель (антиретровирусный), Телапревир, Тенофовир, Тенофовир дизопроксил, Типранавир, Трифлуридин, Тризивир, Тромантадин, Трувада, Валацикловир (Валтрекс), Валганцикловир, Викривирок, Видарабин, Вирамидин, Зальцитабин, Занамивир (Реленза), Зидовудин.

Кроме того, антибиотические агенты включают бактериофаги для лечения бактериальных инфекций, синтетические антимикробные пептиды или антагонисты железа/хелатор железа. Кроме того, терапевтические антитела или антагонисты против патогенных структур, такие как анти-VAP-антитела, вакцинация против резистентных клонов, введение иммунных клеток, таких как примированные in vitro или модулированные Т-эффекторные клетки, являются антибиотическими средствами, которые предоставляют варианты лечения для пациентов в критическом состоянии, например, у пациентов с сепсисом. Дополнительные антибиотические агенты/способы лечения или стратегии лечения против инфекции или для предотвращения новых инфекций включают использование антисептиков, препаратов обеззараживания, противовирулентных агентов, таких как липосомы, санитарию, уход за раной, хирургию.

Также возможно комбинировать несколько вышеупомянутых антибиотиков или стратегий лечения.

В соответствии с данным изобретением проАДМ, необязательно, ПКТ и/или другие маркеры или клинические показатели используются в качестве маркеров для диагностирования, прогнозирования, предположения, оценки риска и/или стратификации риска у пациента при развитии заболевания, требующего лечения в больнице, при наличии симптомов инфекционного заболевания.

Квалифицированный специалист способен получить или разработать средства для идентификации, измерения, определения и/или количественного определения любой из вышеуказанных молекул АДМ или их фрагментов или вариантов, а также других маркеров по данному изобретения в соответствии со стандартной молекулярно-биологической практикой.

Уровень проАДМ или его фрагментов, а также уровни других маркеров по данному изобретению можно определить с помощью любого анализа, который достоверно определяет концентрацию маркера. В частности, могут быть использованы масс-спектрометрия (МС) и/или иммуноанализы, как представлено в прилагаемых примерах. В контексте данного документа иммуноанализ представляет собой биохимический тест, в котором измеряют наличие или концентрацию макромолекулы/полипептида в растворе с помощью антитела или связывающего фрагмента антитела или иммуноглобулина.

Способы определения АДМ или других маркеров, таких как ПКТ, используемые в контексте данного изобретения, представлены в данном изобретении. Например, может быть использован способ, выбранный из группы, состоящей из масс-спектрометрии (МС), люминесцентного иммуноанализа (ЛИА), радиоиммуноанализа (РИА), хемилюминесцентного и флуоресцентного иммуноанализов, иммуноферментного анализ (ИФА, EIA), твердофазного иммуноферментного анализа (твердофазного ИФА, ELISA), анализа с использованием чипов с люминесцентными гранулами, анализа с использованием чипов с магнитными гранулами, анализа с использованием белкового микрочипа, экспресс-тестов таких форматов, как, например, иммунохроматографические полоски, анализа c использованием криптатов редкоземельного элемента и автоматизированных систем/анализаторов.

Определение АДМ и, возможно, других маркеров на основе распознавания их антителами является предпочтительным вариантом реализации данного изобретения. Используемый в контексте данного документа термин «антитело» относится к молекулам иммуноглобулина и иммунологически активным частям молекул иммуноглобулина (Ig), то есть молекулам, содержащим антигенсвязывающий участок, специфически связывающий антиген (вступающий с ним в иммунную реакцию). Согласно изобретению антитела могут представлять собой как моноклональные, так и поликлональные антитела. В частности, используются антитела, которые специфически связываются, по меньшей мере, с проАДМ или его фрагментами.

Антитело считается специфичным, если его аффинность по отношению к представляющей интерес молекуле, например, АДМ или ее фрагменту, по меньшей мере, в 50 раз выше, предпочтительно в 100 раз выше, наиболее предпочтительно, по меньшей мере, в 1000 раз выше, чем по отношению к другим молекулам, содержащимся в образце, содержащем представляющую интерес молекулу. В данной области техники хорошо известно, как разрабатывать и отбирать антитела с заданной специфичностью. В контексте данного изобретения предпочтительными являются моноклональные антитела. Антитело или его связывающий фрагмент специфически связывается с описанными в данном документе маркерами или их фрагментами. В частности, антитело или его связывающий фрагмент связывается с описанными в данном документе пептидами АДМ. Таким образом, описанные в данном документе пептиды также могут представлять собой эпитопы, с которыми специфически связываются антитела. Дополнительно, в способах и наборах по изобретению применяют антитело или его связывающий фрагмент, специфически связывающиеся с АДМ или проАДМ, в частности, с СР-проАДМ.

Дополнительно, в способах и наборах согласно изобретению применяют антитело или его связывающий фрагмент, специфически связывающиеся с проАДМ или его фрагментами и необязательно с другими маркерами, представленными в данном изобретении, таким как СР-проАДМ. Иллюстративные иммуноанализы могут представлять собой люминесцентный иммуноанализ (ЛИА), радиоиммуноанализ (РИА), хемилюминесцентный и флуоресцентный иммуноанализ, иммуноферментный анализ (ИФА, EIA), твердофазного иммуноферментного анализа (твердофазного ИФА, ELISA), анализа с использованием чипов с люминесцентными гранулами, анализа с использованием чипов с магнитными гранулами, анализа с использованием белкового микрочипа, экспресс-тестов разного формата, анализа c использованием криптатов редкоземельного элемента. Дополнительно, могут быть использованы анализы, подходящие для проведения тестов в местах оказания медицинской помощи, и ускоренные способы исследований, такие как, например, иммунохроматографические тест-полоски. Также предполагаются для использования автоматизированные иммуноанализы, такие как анализ с использованием анализатора KRYPTOR.

В качестве альтернативы вместо антител в объем данного изобретения могут входить другие молекулы захвата, которые специфично и/или селективно распознают последовательности АДМ. В данном документе термин «молекулы захвата» или «молекулярные каркасы» включает молекулы, которые могут быть использованы для связывания целевых или представляющих интерес молекул, то есть аналитов (например, АДМ, проАДМ, СР-проАДМ), из образца. Таким образом, молекулы захвата должны иметь подходящую форму, как пространственную, так и с точки зрения характеристик поверхности, таких как поверхностный заряд, гидрофобность, гидрофильность, наличие или отсутствие доноров и/или акцепторов Льюиса, чтобы специфически связывать целевые или представляющие интерес молекулы. Таким образом, связывание может, например, быть опосредовано взаимодействиями на основе ионных, ван-дер-ваальсовых, пи-пи, сигма-пи, гидрофобных или водородных связей, или комбинацией двух или более вышеупомянутых взаимодействий, или ковалентными взаимодействиями между молекулами захвата или молекулярными каркасами и целевыми или представляющими интерес молекулами. В контексте данного изобретения молекулы захвата или молекулярные каркасы могут, например, быть выбраны из группы, состоящей из молекулы нуклеиновой кислоты, молекулы углевода, молекулы ПНК, белка, пептида и гликопротеина. Молекулы захвата или молекулярные каркасы включают, например, аптамеры, DARpin (Сконструированные Белки с Анкириновым Повтором). Включая аффимеры и т.п.

В отдельных аспектах данного изобретения способ представляет собой иммуноанализ, включающий следующие стадии:

контактирование образца с

первым антителом или его антигенсвязывающим фрагментом или производным, специфичным к первому эпитопу указанного проАДМ, и

вторым антителом или его антигенсвязывающим фрагментом или производным, специфичным ко второму эпитопу указанному проАДМ; и

обнаружение связывания двух антител или антигенсвязывающих фрагментов или их производных с указанным проАДМ.

Предпочтительно одно из антител может быть мечено, а другое антитело может быть связано с твердой фазой или может быть селективно связано с твердой фазой. В особенно предпочтительном аспекте анализа одно из антител мечено, в то время как другое либо связано с твердой фазой, либо может быть селективно связано с твердой фазой. Первое антитело и второе антитело присутствуют в диспергированном виде в жидкой реакционной смеси, и при этом первый метящий компонент, который является частью системы мечения на основе гашения или усиления флуоресценции или хемилюминесценции, связан с первым антителом, и второй метящий компонент данной системы мечения связан со вторым антителом, так что после связывания обоих антител с данным детектируемым проАДМ или его фрагментами генерируется измеримый сигнал, позволяющий детектировать полученные в результате сэндвичные комплексы в растворе для измерения. Система мечения может содержать криптат или хелат редкоземельного металла в сочетании с флуоресцентным или хемилюминесцентным красителем, в частности цианинового типа.

В предпочтительном варианте реализации данного изобретения способ проводят в виде гетерогенного сэндвич-иммуноанализа, в котором одно из антител иммобилизовано на произвольно выбранной твердой фазе, например, на стенках пробирок с покрытием (например, полистирольных пробирок; пробирок с покрытием; CT) или планшетах для микротитрования, например, состоящих из полистирола, или на частицах, таких как, например, магнитные частицы, при этом другое антитело имеет группу, напоминающую детектируемую метку или позволяющую избирательно прикрепляться к метке, и которая служит для детектирования образованных сэндвич-структур. Также возможна временная отсрочка иммобилизации или ее последующее проведение с использованием подходящих твердых фаз.

Способ согласно данному изобретению может, кроме того, быть реализован как гомогенный способ, при котором сэндвичевые комплексы, образованные антителом/антителами и маркером, АДМ или его фрагментом, остаются суспендированными в жидкой фазе. В этом случае предпочтительно, чтобы в случае использования двух антител оба антитела были мечены частями системы детектирования, что приводит к генерации сигнала или запуску сигнала, если оба антитела объединены в один сэндвич. Такие способы должны быть реализованы, в частности, как способы детектирования усиления или гашения флуоресценции. Особенно предпочтительный аспект относится к применению реагентов для детектирования, применяемых попарно, таких как, например, описанные в патентах US4882733, EP0180492 или EP0539477 и в уровне техники, цитируемом в данном документе. Таким образом становятся возможными измерения, при которых детектируются только продукты реакции, содержащие оба метящих компонента в одном иммунном комплексе непосредственно в реакционной смеси. Например, такие технологии предлагаются под товарными знаками TRACE® (Time Resolved Amplified Cryptate Emission) или KRYPTOR®, в которых реализуются идеи цитируемых выше патентных заявок. Следовательно, в конкретных предпочтительных аспектах используется диагностическое устройство для реализации предложенного в данном документе способа. Например, определяют уровень проАДМ или его фрагмента, и/или уровень любого другого маркера из предложенного в данном документе способа. В частных предпочтительных аспектах устройство для диагностики представляет собой KRYPTOR^®.

Уровень маркера по данному изобретению, например проАдМ или его фрагментов, ПКТ или его фрагментов, или других маркеров, также может быть определен с помощью способов на основе масс-спектрометрии (МС). Такой способ может включать детектирование наличия, количества или концентрации одного или более модифицированных или немодифицированных фрагментированных пептидов, например, АДМ и/или ПКТ, в указанном биологическом образце или продукте расщепления белка (например, трипсинового расщепления) из указанного образца, и, необязательно, разделение образца хроматографическими способами и подвергание подготовленного и необязательно разделенного образца МС-анализу. Например, в МС-анализе могут применяться масс-спектрометрия с мониторингом выбранных реакций (МВР, SRM), мониторингом множественных реакций (ММР, MRM) или мониторингом параллельных реакций (МПР, PRM), в частности для определения количеств проАДМ или его фрагментов.

В данном документе термин «масс-спектрометрия» или «МС» относится к аналитическому способу, позволяющему идентифицировать соединения по их массе. Чтобы улучшить возможности масс-спектрометрии по разрешению и определению массы, образцы перед проведением МС-анализа могут быть подвергнуты обработке. Соответственно, изобретение относится к МС способам детектирования, которые можно сочетать с технологиями иммунообогащения, способами, связанными с пробоподготовкой и/или хроматографическими способами, предпочтительно с жидкостной хроматографией (ЖХ), более предпочтительно с высокоэффективной жидкостной хроматографией (ВЭЖХ) или ультра высокоэффективной жидкостной хроматографией (УВЭЖХ). Способы пробоподготовки включают способы лизиса, фракционирования, расщепления образца до пептидов, обеднения, обогащения, диализа, обессоливания, алкилирования и/или восстановления пептидов. Однако эти стадии являются необязательными. Селективное детектирование ионов аналита может быть проведено с помощью тандемной масс-спектрометрии (МС/МС). Тандемная масс-спектрометрия характеризуется стадией отбора по массе (используемый в контексте данного документа термин «стадия отбора по массе» обозначает выделение ионов, имеющих определенное отношение масса/заряд (m/z) или узкий диапазон отношения масса/заряд) с последующей фрагментацией отобранных ионов и анализом массы (фрагментированных) ионов полученного продукта.

Специалисту в данной области техники известно, как количественно определить уровень маркера в образце с помощью масс-спектрометрических способов. Например, может быть использовано определение относительного количества «оМВР (rSRM)» или определение абсолютного количества, как описано выше.

Более того, уровни (включая референсные уровни) могут быть определены с помощью масс-спектрометрических способов, таких как способы, определяющие относительное количество или определяющие абсолютное количество представляющего интерес белка или его фрагмента.

Определение относительного количества «оМВР» может быть осуществлено путем:

1. Определения повышенного или пониженного наличия целевого белка путем сравнения площади характеристического пика МВР (мониторинга выбранных реакций) данного целевого фрагментированного пептида, детектированного в образце, с площадью этого же характеристического пика МВР целевого фрагментированного пептида, по меньшей мере, во втором, третьем, четвертом или более биологических образцах.

2. Определения повышенного или пониженного наличия целевого белка путем сравнения площади характеристического пика МВР данного целевого пептида, детектированного в образце, с площадями характеристических пиков МВР, полученных от фрагментированных пептидов других белков, в других образцах, полученных из других и отдельных биологических источников, при этом сравнение площади характеристического пика МВР двух образцов в отношении фрагментированного пептида нормировано, например, по количеству белка, анализируемого в каждом образце.

3. Определения повышенного или пониженного наличия целевого белка путем сравнения площади характеристического пика МВР для данного целевого пептида с площадями характеристических пиков МВР других фрагментированных пептидов, полученных из разных белков в одном и том же биологическом образце, чтобы нормировать изменяющиеся уровни гистоновых белков к уровням других белков, которые не меняют свои уровни экспрессии в различных клеточных условиях.

4. Эти анализы могут применяться как к немодифицированным фрагментированным пептидам, так и к модифицированным фрагментированным пептидам целевых белков, при этом модификации включают, но не ограничиваются перечисленным, фосфорилирование и/или гликозилирование, ацетилирование, метилирование (моно-, ди-, три-), цитруллинирование, убиквитинилирование, и при этом относительные уровни модифицированных пептидов определяют таким же образом, как и определение относительных количеств немодифицированных пептидов.

Определение абсолютного количества данного пептида может быть осуществлено путем:

1. Сравнения площади характеристического пика МВР/ММР для данного фрагментированного пептида из целевых белков в отдельном биологическом образце с площадью характеристического пика МВР/ММР внутреннего стандарта фрагментированного пептида, добавленного в лизат белка из биологического образца. Внутренним стандартом может быть меченая синтетическая версия фрагментированного пептида из исследуемого целевого белка, или меченый рекомбинантный белок. Этот стандарт добавляют в образец в известных количествах до (обязательно для рекомбинантного белка) или после расщепления, и площадь характеристического пика МВР/ММР может быть определена как для внутреннего стандарта фрагментированного пептида, так и для нативного фрагментированного пептида в биологическом образце по отдельности с последующим сравнением площадей обоих пиков. Данный способ может применяться к немодифицированным фрагментированным пептидам и модифицированным фрагментированным пептидам, при этом модификации включают, но не ограничиваются перечисленным, фосфорилирование и/или гликозилирование, ацетилирование, метилирование (например, моно-, ди- или триметилирование), цитруллинирование, убиквитинилирование, и при этом абсолютные уровни модифицированных пептидов могут быть определены таким же образом, как и абсолютные уровни немодифицированных пептидов.

2. Пептиды также могут быть количественно определены с использованием внешних калибровочных кривых. В подходе с использованием нормальной кривой используется постоянное количество тяжелого пептида в качестве внутреннего стандарта и изменяющееся количество легкого синтетического пептида, добавленного в образец. Для построения стандартных кривых с учетом влияния матрицы необходимо использовать репрезентативную матрицу, аналогичную матрице исследуемых образцов. Кроме того, способ обратной кривой (способ внутреннего стандарта) позволяет обойти проблему эндогенного аналита в матрице, при этом постоянное количество легкого пептида добавляется к эндогенному аналиту для получения внутреннего стандарта, а различные количества тяжелого пептида добавляются для получения набора стандартных концентраций. В исследуемые образцы для сравнения с нормальными или обратными кривыми добавляют количество стандартного пептида, равное количеству внутреннего стандарта, добавляемого в матрицу, использованную для создания калибровочной кривой.

Изобретение также относится к наборам, применению наборов и способам, в которых применяются такие наборы. Изобретение относится к наборам для реализации способов, представленных выше и ниже в данном документе. Предложенные в данном документе определения, например, предложенные в отношении способов, также применимы к наборам по изобретению. В частности, изобретение относится к наборам для мониторинга терапии, включающим прогнозирование, оценку риска или стратификацию риска последующего нежелательного явления для здоровья пациента, при этом указанный набор включает

детектирующие реагенты для определения уровня проАДМ или его фрагмента(ов) и, необязательно, дополнительно реагенты для определения уровня ПКТ, лактата и/или С-реактивного белка или его фрагмента(ов) в образце, полученного от субъекта, и

детектирующие реагенты для определения указанного уровня АДМ в указанном образце указанного субъекта и референтные данные, такие как референтный уровень, соответствующий высокому и/или низкому уровню тяжести заболевания, т.е. высокому и/или низкому уровню АДМ, при этом низкий уровень серьезности представляет собой уровень АДМ ниже 4 нмоль/л, предпочтительно ниже 3 нмоль/л, более предпочтительно ниже 2,7 нмоль/л, а высокий уровень серьезности представляет собой уровень АДМ выше 6,5 нмоль/л, предпочтительно выше 6,95 нмоль/л, более предпочтительно выше 10,9 нмоль/л и, необязательно, реагенты для определения уровней ПКТ, лактата и/или C-реактивного белка, при этом указанные референтные данные предпочтительно хранятся на машиночитаемом носителе и/или используются в форме исполняемого компьютерного кода, сконфигурированного для сравнения выявленных уровней проАДМ или его фрагмента(ов), и, необязательно, дополнительно определенных уровней ПКТ, лактата и/или C-реактивного белка или его фрагмента(ов), с указанными референтными данными.

Используемые в контексте данного документа «референтные данные» включают референтный уровень (уровни) АДМ и, необязательно, ПКТ, лактата, С-реактивного белка и/или других подходящих маркеров, описанных в данном документе, таких как, например, маркеры рабдомиолиза. Уровни АДМ и, необязательно, других маркеров, таких как ПКТ, лактат и/или C-реактивный белок в образце, полученном от субъекта, можно сравнить с референтными уровнями, содержащимися в референтных данных набора. Референтные уровни описаны в данном документе выше и приведены также в прилагаемых примерах. Референтные данные также могут включать референтный образец, с которым сравнивается уровень АДМ и, необязательно, ПКТ, лактата и/или С-реактивного белка. Референтные данные также могут включать руководство по использованию наборов по изобретению.

Набор может дополнительно содержать предметы, полезные для получения образца, такого как образец крови, например, набор может содержать емкость, при этом указанная емкость содержит устройство для прикрепления указанной емкости к канюле или шприцу представляет собой шприц, подходящий для отбора крови, который имеет внутреннее давление ниже атмосферного, так что подходит для забора предварительно определенного объема образца в указанную емкость, и/или дополнительно содержит детергенты, хаотропные соли, ингибиторы рибонуклеазы, хелатирующие агенты, такие как гуанидинтиоцианат, гуанидин гидрохлорид, додецилсульфат натрия, полиоксиэтилен сорбитан монолаурат, белки-ингибиторы РНКазы и их смеси и/или систему фильтрации, содержащую нитроцеллюлозу, кремнеземную матрицу, ферромагнитные сферы, чашу для сбора жидкости, трегалозу, фруктозу, лактозу, маннозу, полиэтиленгликоль, глицерин, ЭДТА, ТРИС, лимонен, ксилол, бензоил, фенол, минеральное масло, анилин, пирол, цитрат и их смеси.

Используемый в контексте данного документа термин «детектирующий реагент» или тому подобное представляет собой реагенты, подходящие для определения описанного(ых) в данном документе маркера(ов), например, АДМ, ПКТ, лактата и/или С-реактивного белка. Примерами таких детектирующих реагентов являются, например, лиганды, например антитела или их фрагменты, специфично связывающиеся с пептидом или эпитопами описанного(ых) в данном документе маркера(ов). Такие лиганды могут применяться в иммуноанализах, как описано выше. Дополнительные реагенты, применяемые в иммуноанализах для определения уровня маркера(ов), также могут быть включены в набор и рассматриваются в данной заявке как детектирующие реагенты. Детектирующие реагенты также могут относиться к реагентам, используемым для детектирования маркеров или их фрагментов способами, основанными на МС.Таким образом, такой детектирующий реагент также может представлять собой реагенты, например, ферменты, химические вещества, буферы и т.д., применяемые для подготовки образца к проведению МС-анализа. Масс-спектрометр также можно рассматривать в качестве детектирующего реагента. Детектирующие реагенты согласно изобретению также могут представлять собой калибровочный(ые) раствор(ы), например, который(ые) может (могут) быть использован(ы) для определения и сравнения уровня маркера(ов).

Чувствительность и специфичность диагностического и/или прогностического теста зависит не только от аналитического «качества» теста, но и от определения того, что представляет собой отклоняющийся от нормы результат.На практике «кривые ошибок» (ROC-кривые) обычно рассчитывают путем построения графика зависимости значения переменной от ее относительной частоты у "нормальных" (то есть, очевидно, здоровых людях, не имеющих инфекцию) и в "больных" группах, например, у субъектов, имеющих одну или более инфекций. Для любого конкретного маркера (например, ADM) распределение уровней маркеров для субъектов с заболеванием/состоянием или без него, вероятно, будет перекрываться. В таких условиях тест не всегда позволяет отличить нормальное состояние от заболевания со 100% точностью, и область перекрытия может показывать, где тест не позволяет отличить нормальное состояние от заболевания. Выбирается пороговое значение, ниже которого тест считается аномальным, и выше которого тест считается нормальным, или ниже или выше которого тест указывает на особое состояние, например, инфекцию. Площадь под ROC-кривой является мерой вероятности того, что наблюдаемое измерение позволит правильно идентифицировать состояние. ROC-кривые могут использоваться, даже если результаты теста не обязательно дают точное число. При условии, что можно ранжировать результаты, можно построить ROC-кривую. Например, результаты теста на образцах "больных" могут быть ранжированы в соответствии со степенью (например, 1=низкая, 2=нормальная и 3=высокая). Это ранжирование может быть связано с результатами в «нормальной» группе и может быть создана ROC-кривая. Эти способы хорошо известны в данной области техники; см., например, Hanley et al. 1982. Radiology 143: 29-36. Предпочтительно пороговое значение выбирают так, чтобы обеспечить площадь под ROC-кривой более около 0,5, более предпочтительно более около 0,7, еще более предпочтительно более около 0,8, еще более предпочтительно более около 0,85 и наиболее предпочтительно более около 0,9. Термин «около » в данном контексте относится к+/- 5% от данного измерения.

Горизонтальная ось ROC-кривой представляет собой (1-специфичность), которая возрастает со степенью ложноположительных результатов. Вертикальная ось кривой представляет собой чувствительность, которая возрастает со степенью истинных положительных результатов. Таким образом, для конкретного выбранного порога может быть определено значение (1-специфичность) и может быть получена соответствующая чувствительность. Площадь под ROC-кривой является мерой вероятности того, что измеренный уровень маркера позволит правильно распознать заболевание или состояние. Таким образом, площадь под ROC-кривой может быть использована для определения эффективности теста.

Соответственно, изобретение включает введение антибиотика, подходящего для лечения, на основе информации, полученной описанным в данном документе способом.

Используемые в контексте данного документа термины «содержащий» и «включающий» или их грамматические варианты следует понимать как обозначающие данные признаки, целые числа, стадии или компоненты, но не исключающие добавления одного или более дополнительных признаков, целых чисел, стадий, компонентов или их групп.Этот термин включает термины «состоящий из» и «состоящий по существу из».

Таким образом, термины «содержащий»/«включающий»/«имеющий» означают, что может присутствовать любой дополнительный компонент (или, аналогично, признаки, целые числа, стадии и тому подобное). Термин «состоящий из» означает, что не присутствует никаких дополнительных компонентов (или, аналогично, признаков, целых чисел, стадий и тому подобного).

Термин «состоящий по существу из» или его грамматические варианты при использовании в данном документе следует понимать как обозначающий упомянутые признаки, целые числа, стадии или компоненты, но не исключающий добавления одного или более дополнительных признаков, целых чисел, стадий, компонентов или их групп, но только в том случае, если дополнительные признаки, целые числа, стадии, компоненты или их группы существенно не изменяют основные и новые характеристики заявленной композиции, устройства или способа.

Таким образом, термин «состоящий по существу из» означает, что могут присутствовать такие конкретные дополнительные компоненты (или, аналогично, признаки, целые числа, стадии и тому подобное), а именно, такие, которые не оказывают существенного влияния на основные характеристики композиции, устройства или способа. Другими словами, термин «состоящий по существу из» (который может использоваться в данном документе взаимозаменяемо с термином «содержащий по существу»), допускает наличие других компонентов в композиции, устройстве или способе помимо обязательных компонентов (или, аналогично, признаков, целых чисел, стадий и тому подобного), при условии, что наличие других компонентов не оказывает существенного влияния на существенные характеристики устройства или способа.

Термин «способ» относится к приемам, средствам, техники и процедурам для выполнения данной задачи, включая, но не ограничиваясь перечисленным, те приемы, средства, техники и процедуры, которые или являются известными, или легко могут быть получены из известных приемов, средств, техник и процедур практикующими специалистами в области химии, биологии и биофизики.

Примеры

Данное изобретение дополнительно описано со ссылкой на следующие неограничивающие примеры.

Предпосылки исследования:

80% случаев сепсиса начинаются во внебольничных условиях, до госпитализации. Успех лечения сепсиса зависит от времени лечения. Ранняя диагностика сепсиса во внебольничных условиях, например, в лечебных центрах первой помощи, например, медицинским персоналом, который впервые встречается с пациентами с симптомами инфекционного заболевания, то есть терапевтами, должна быть приоритетом для снижения заболеваемости и смертности от этого заболевания.

Основная Цель Исследования, Описанная В Примерах:

Найти лучшие биомаркеры для выявления пациентов с подозрением на (предпочтительно респираторные) инфекции во внебольничных условиях (например, при обращении к терапевту), которым требуется перевод в больницу, то есть в отделение скорой помощи (ОСП) в больнице, и дифференцировать их от тех, кто не нуждается в лечении в больнице.

Прогностическая способность биомаркеров будет сравниваться с оценкой по шкале qSOFA и NEW.

Схема проведения исследования:

Это проспективное обсервационное исследование с набором пациентов с респираторной инфекцией во внебольничных условиях. Набор пациентов происходит в Центр Общественного Здоровья. Терапевты набирают пациентов либо в Общественном Центре здоровья, либо на дому у пациентов.

Объем выборки: обследовано 220 пациентов с подозрением на респираторную инфекцию.

Критерии включения в исследование: взрослые пациенты с признаками респираторной инфекции (кашель, боль в глотке, усиление выделения слизи, одышка...), которые набрали, по меньшей мере, 1 балла по шкале NEWS:

Частота дыхания: 11 вд/мин - 21 вд/мин.

Сатурация кислородом: 95.

Температура тела: 36,0-38,1°C

Систолическое артериальное давление: 110 мм рт.ст.- 220 мм рт.ст.

Частота сердечных сокращений: 50-91

Критерии принятия решения о переводе пациента в больницу:

Лечащий врач принимает решение на основании своих клинических критериев. Исследование не мешает выполнению типовой инструкции (СОП) терапевтами, посещающими пациентов с респираторной инфекцией во внебольничных условиях.

Различия в степени тяжести состояния между пациентами, переведенными и не переведенными в больницу, анализируются в конце исследования с использованием данных, собранных в нормализованных таблицах данных.

Критерии исключения из исследования: отсутствие информированного согласия, пациенты моложе 18 лет.

Клиническая информация:

Наиболее важные клинические данные собираются с использованием стандартизированной таблицы данных. Собранные данные позволяют быстро рассчитать оценку по шкале SOFA и NEW.

Сбор образцов: цельную кровь собирают во время включения пациента в исследование, используя 2 пробирки Paxgene (для отбора крови, каждая по 2,5 мл) и 1 пробирку с ЭДТА (5 мл). Пробирки Paxgene хранятся при -20°C не более 3 месяцев и переносятся в морозильную камеру на -80°C. Кровь из пробирок с ЭДТА немедленно подвергается обработке для количественного определения прокальцитонина и проадреномедуллина с использованием портативного диагностического устройства (ПДУ, POC). Параллельно получают мазок из носоглотки, который хранят при -20°C не более 3 месяцев и переносят в морозильную камеру на -80°C.

Профилированные биомаркеры:

Кровь в пробирках Paxgene используется для профилирования экспрессии генов с использованием микроматриц, секвенирования нового поколения или способов количественной ПЦР с использованием в ПЦР в реальном времени, цифровой капельной ПЦР или аналогичных способов. Кровь в пробирках с ЭДТА используется для количественного определения прокальцитонина и проадреномедуллина с использованием устройства ПДУ, предоставленного компанией Thermo Fischer Scientific (BRAHMS, Хеннигсдорф, Германия), в первые 12 часов после включения пациента в исследование.

Мазки из носоглотки будут использоваться для диагностики вирусной инфекции с использованием способов молекулярной биологии.

Статистический анализ: площадь под ROC-кривой и многомерный регрессионный анализ выполняются для проверки способности биомаркеров различать пациентов, которых перевели на лечение в больницу, и пациентов, которые не были переведены в больницу. Для пациентов, нуждающихся в Госпитализации, тот же подход используется для прогнозирования необходимости госпитализации в палату или ОИТ, или наступления летального исхода. Модели многомерной линейной регрессии построены для прогнозирования продолжительности госпитализации.

Результаты:

Пациенты с респираторными инфекциями (по оценке терапевта) были распределены в учреждение первичной медицинской помощи. Эти пациенты включали пациентов с вирусными и бактериальными инфекциями (или их комбинацией).

Уровень СР-проАДМ с предельными значением 1,2 нмоль/л был независимым параметром, связанным с госпитализацией в больницу после направления терапевтом (фактическая госпитализация является определяющим фактором, в отличие от того, что пациента просто направили в больницу, и затем снова отправят в больницу).

Повышенный уровень ПКТ мог определить, была ли у пациента бактериальная или вирусная инфекция, но был относительно слабо информативным по сравнению с оценкой уровня проАДМ при определении необходимости направления пациента в больницу или нет.

Решение:

Измерение СР-проАДМ в кабинете терапевта или в других пунктах первичной медицинской помощи может выявить пациентов, которым может потребоваться госпитализация. Это может сократить время ожидания у терапевта и в ОСП (где пациентам все равно придется ждать, чтобы их осмотрели, несмотря на направление).

Пациенты с концентрацией СР-проАДМ<1,2 нмоль/л не будут направляться в больницу и будут получать антибиотики для приема дома в зависимости от их концентрации ПКТ, что уменьшит количество пациентов, посещающих ОСП.

Таким образом, комбинация обоих биомаркеров может гарантировать, что терапевт не направит «не нужнающихся» пациентов в ОСП, одновременно предоставив антибиотики тем, кто может проходить лечение дома. Конечный результат - уменьшение количества госпитализаций в ОСП, что представляет собой долгожданное решение для контроля лечения пациентов, когда тяжесть заболевания кажется неопределенной. Насколько известно изобретателю, нет никаких предыдущих исследований СР-проАДМ в учреждениях первичной медицинской помощи, предлагающих данные результаты (и, конечно, ни одного исследования инфекций).

Данные:

Всего: кол-во пациентов=66

Не требующих госпитализации в отделение больницы: кол-во=49

Поступило в отделение больницы: кол-во=17

Многофакторный регрессионный анализ для оценки риска госпитализации в отделение больницы:

ОШ Доверительный Интервал с доверительной вероятностью 95% P Антибиотики в домашних условиях 1,936 0,154 24,394 0,609 02 в домашних условиях 5,153 0,276 96,219 0,272 Антигипертензивные препараты 0,066 0,002 2,138 0,125 Пероральные стероиды 3,011 0,116 78,009 0,507 Ингаляционные стероиды 1,078 0,059 19,583 0,959 Высокое Артериальное Давление 27,877 0,797 974,607 0,066 Температура 0,476 0,167 1,361 0,166 Частота Дыхания 1,089 0,926 1,28 0,304 Сатурация 02 0,791 0,601 1,04 0,093 ПроАДМ>1,2 8,112 1,095 60,09 0,04

Список последовательностей

<110>BRAHMS GmbH

<120>ПРО-АДМ ДЛЯ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ РИСКА СОСТОЯНИЯ, ТРЕБУЮЩЕГО ГОСПИТАЛИЗАЦИИ, У ПАЦИЕНТОВ С СИМПТОМАМИ ИНФЕКЦИОННОГО ЗАБОЛЕВАНИЯ

<130>2188/18WO

<150>EP18200907.6

<151>2018-10-17

<150>EP18188098.0

<151>2018-08-08

<160>2

<170>BiSSAP 1.3.6

<210>1

<211>185

<212>БЕЛОК

<213>Homo sapiens

<220>

<223>аминокислотная последовательность пре-про-АДМ

<400>1

Met Lys Leu Val Ser Val Ala Leu Met Tyr Leu Gly Ser Leu Ala Phe

1 5 10 15

Leu Gly Ala Asp Thr Ala Arg Leu Asp Val Ala Ser Glu Phe Arg Lys

20 25 30

Lys Trp Asn Lys Trp Ala Leu Ser Arg Gly Lys Arg Glu Leu Arg Met

35 40 45

Ser Ser Ser Tyr Pro Thr Gly Leu Ala Asp Val Lys Ala Gly Pro Ala

50 55 60

Gln Thr Leu Ile Arg Pro Gln Asp Met Lys Gly Ala Ser Arg Ser Pro

65 70 75 80

Glu Asp Ser Ser Pro Asp Ala Ala Arg Ile Arg Val Lys Arg Tyr Arg

85 90 95

Gln Ser Met Asn Asn Phe Gln Gly Leu Arg Ser Phe Gly Cys Arg Phe

100 105 110

Gly Thr Cys Thr Val Gln Lys Leu Ala His Gln Ile Tyr Gln Phe Thr

115 120 125

Asp Lys Asp Lys Asp Asn Val Ala Pro Arg Ser Lys Ile Ser Pro Gln

130 135 140

Gly Tyr Gly Arg Arg Arg Arg Arg Ser Leu Pro Glu Ala Gly Pro Gly

145 150 155 160

Arg Thr Leu Val Ser Ser Lys Pro Gln Ala His Gly Ala Pro Ala Pro

165 170 175

Pro Ser Gly Ser Ala Pro His Phe Leu

180 185

<210>2

<211>48

<212>БЕЛОК

<213>Homo sapiens

<220>

<223>аминокислотная последовательность СР-про-АДМ (АО пре-про-АДС с 45 по 92)

<400>2

Glu Leu Arg Met Ser Ser Ser Tyr Pro Thr Gly Leu Ala Asp Val Lys

1 5 10 15

Ala Gly Pro Ala Gln Thr Leu Ile Arg Pro Gln Asp Met Lys Gly Ala

20 25 30

Ser Arg Ser Pro Glu Asp Ser Ser Pro Asp Ala Ala Arg Ile Arg Val

35 40 45

Группа изобретений относится к медицине, а именно к терапии и инфектологии, включает способ и набор, которые могут быть использованы для прогнозирования прогрессирования инфекционного заболевания до состояния, требующего госпитализации у пациента с симптомами инфекционного заболевания. Способ включает: предоставление образца от указанного пациента, определение уровня среднерегионального проадреномедуллина (СР-проАДМ) в указанном образце, сравнение уровня СР-проАДМ в указанном образце с пороговым значением. Указанное пороговое значение представляет собой 1,2 нмоль/л. Уровень СР-проАДМ в указанном образце ниже указанного порогового значения указывает на то, что пациент не подвержен риску прогрессирования инфекционного заболевания до состояния, требующего госпитализации. Уровень СР-проАДМ в указанном образце выше указанного порогового значения указывает на то, что пациент подвержен риску прогрессирования инфекционного заболевания до состояния, требующего госпитализации. Набор для реализации способа содержит: a) детектирующие реагенты для определения уровня СР-проАДМ в образце, полученном от пациента, и b) референтные данные о риске для пациента относительно того, произойдет ли у него прогрессирование инфекционного заболевания до состояния, требующего госпитализации. Группа изобретений обеспечивает возможность прогнозирования прогрессирования инфекционного заболевания до состояния, требующего госпитализации у пациента с симптомами инфекционного заболевания, за счет определение уровня СР-проАДМ в образце, полученном от пациента, и тест-системы для реализации способа. 2 н. и 11 з.п. ф-лы, 1 табл., 1 пр.

1. Способ прогнозирования прогрессирования инфекционного заболевания до состояния, требующего госпитализации у пациента с симптомами инфекционного заболевания, при этом способ включает:

предоставление образца от указанного пациента, и

определение уровня среднерегионального проадреномедуллина (СР-проАДМ) в указанном образце, и

сравнение уровня СР-проАДМ в указанном образце с пороговым значением,

при этом указанное пороговое значение представляет собой 1,2 нмоль/л,

при этом уровень СР-проАДМ в указанном образце ниже указанного порогового значения указывает на то, что пациент не подвержен риску прогрессирования инфекционного заболевания до состояния, требующего госпитализации, и

при этом уровень СР-проАДМ в указанном образце выше указанного порогового значения указывает на то, что пациент подвержен риску прогрессирования инфекционного заболевания до состояния, требующего госпитализации.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что уровень СР-проАДМ определяют в образце, полученном первичным медицинским персоналом, который консультирует пациента после появления у него симптомов инфекционного заболевания.

3. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что во время предоставления образца у пациента проявляются легкие симптомы инфекционного заболевания, соответствующие баллу по шкале qSOFA равному 0 или 1.

4. Способ по любому из пп. 1-3, отличающийся тем, что во время предоставления образца у пациента не проявляются клинические симптомы инфекции кровеносного русла, сепсиса, тяжелого сепсиса и/или септического шока у пациента.

5. Способ по любому из пп. 1-4, отличающийся тем, что уровень СР-проАДМ в указанном образце выше указанного порогового значения указывает на то, что пациент подвержен риску прогрессирования инфекционного заболевания до опасного для жизни состояния в течение 48 часов, и при этом уровень СР-проАДМ в указанном образце ниже указанного порогового значения указывает на то, что пациент не подвергается риску прогрессирования инфекционного заболевания до опасного для жизни состояния в течение 48 часов.

6. Способ по любому из пп. 1-5, отличающийся тем, что уровень СР-проАДМ в указанном образце указывает на риск развития инфекции кровеносного русла, сепсиса, тяжелого сепсиса и/или септического шока у пациента, который требует госпитализации.

7. Способ по п. 1, отличающийся тем, что уровень СР-проАДМ в указанном образце выше указанного порогового значения указывает на то, что у пациента есть риск развития инфекции кровеносного русла, сепсиса, тяжелого сепсиса и/или септического шока, и такому пациенту требуется госпитализация в течение 48 часов, и при этом уровень СР-проАДМ в указанном образце ниже указанного порогового значения указывает на то, что у пациента нет риска развития инфекции кровеносного русла, сепсиса, тяжелого сепсиса и/или септического шока в течение 48 часов.

8. Способ по любому из пп. 1-7, отличающийся тем, что уровень СР-проАДМ выше 1,5 нмоль/л указывает, что пациенту требуется интенсивная терапия.

9. Способ по любому из пп. 1-8, дополнительно включающий

определение, по меньшей мере, одного клинического показателя, указывающего на наличие инфекционного заболевания у пациента с подозрением на инфекционное заболевание,

при этом, по меньшей мере, один клинический показатель и уровень СР-проАДМ указывают на наличие инфекционного заболевания и на то, находится ли пациент в группе риска прогрессирования инфекционного заболевания до состояния, которое требует госпитализации.

10. Способ по любому из пп. 1-9, отличающийся тем, что инфекционное заболевание представляет собой респираторное инфекционное заболевание, инфекционное заболевание мочевыводящих путей, инфекционное заболевание кожи или инфекционное заболевание органов брюшной полости.

11. Способ по любому из пп. 1-10, отличающийся тем, что образец представляет собой образец крови.

12. Способ по любому из пп. 1-11, отличающийся тем, что образец получают от пациентов в течение 24 часов после выявления симптомов.

13. Набор для реализации способа по любому из пп. 1-12, содержащий:

a) детектирующие реагенты для определения уровня СР-проАДМ в образце, полученном от пациента, и

b) референтные данные о риске для пациента относительно того, произойдет ли у него прогрессирование инфекционного заболевания до состояния, требующего госпитализации, включающие пороговое значение, при этом указанное пороговое значение представляет собой 1,2 нмоль/л, при этом уровень СР-проАДМ в указанном образце ниже указанного порогового уровня указывает на то, что пациент не подвержен риску прогрессирования инфекционного заболевания до состояния, требующего госпитализации, и при этом уровень СР-проАДМ в указанном образце выше указанного порогового уровня указывает на то, что пациент находится в группе риска прогрессирования инфекционного заболевания до состояния, требующего госпитализации, при этом упомянутые референтные данные предпочтительно хранятся на машиночитаемом носителе и/или используются в форме исполняемого компьютерного кода, сконфигурированного для сравнения выявленных уровней СР-проАДМ с пороговым значением.