Способ получения радиофармацевтического препарата для диагностики и терапии костных поражений скелета при онкологических заболеваниях на основе комплекса золедроновой кислоты с изотопом рения-188 Российский патент 2023 года по МПК A61K51/04 A61K103/10 

Изобретение относится к области химии и медицины, в частности к радиофармацевтическим средствам на основе бисфосфонатов и способу их получения, и может быть использовано для диагностики и лечения в онкологии, а именно, в терапии костных метастазов от опухолей, склонных к метастазированию в кости, миеломной болезни, как средство устранения гиперкальциемии, а также в терапии ревматоидного артрита.

Радионуклидная терапия (РНТ) - метод лучевой терапии с использованием открытых источников ионизирующего излучения, вводимых непосредственно в организм пациента. Радиоактивные источники вводятся в организм в виде радиофармацевтических препаратов (РФП). Остеотропные РФП обладают свойством связываться с костным матриксом, концентрируясь преимущественно в очагах с патологически усиленным минеральным обменом (метастазы, зоны переломов, участки деструкции). Терапевтическое воздействие происходит за счет облучения β или α частицами находящихся в таких очагах опухолевых клеток и клеток, задействованных в порочном круге патологического поражения кости. В случаях, когда в спектре излучения радионуклида присутствует γ излучение, есть возможность визуализации очагов накопления терапевтических РФП с помощью гамма-камеры методом ОФЭКТ/КТ.

Комплексы радионуклидов с ди- и полифосфонатами обладают важным свойством избирательного накопления в скелете, особенно в зонах патологического костеобразования. Преимуществом применение сцинтиграфии скелета методом ОФЕКТ/КТ по сравнению с рентгенографической диагностикой является раннее выявление единичных и множественных очагов повышенного накопления радиоактивного изотопа при злокачественных новообразованиях в скелете и костных метастазах.

Известны фосфатные комплексы ^99мТс, в частности полифосфат, трифосфат и пирофосфат [G.Subramanian, JGAgfee // Радиология - 1971. - Vol.99, - p. 192], также дифосфонаты ^99мТс, обладающие сходными известными свойствами [Шмитт Г.Х., Холмс Р.А., Иситман А.Т. // Радиология - 1974. - Т.112, - с.733].

В настоящее время в мировой радиологической практик для диагностики костных метастазов широко используются 99мТс-метилендифосфонат (^99мТс-МДФ) и ^99мТс-гидроксиэтилиден-дифосфонат (^99мТс-HEDP, в русскоязычной литературе - ОЭДФ) [WCEckelman, WAVolkert. // Int.J.Appl.Radiat.lsotopes-1982. - Т.33, - с. 945].

Пертехнетат, ^99мТс натрия получают из генератора ⁹⁹Мо/^99мТс. Тс(VII) - наиболее устойчивое химическое состояние, однако пертехненат-ионы не связываются с хелатирующими агентами. Для получения устойчивых соединений восстановленного технеция требуется применение различных восстановителей, таких как ионы олова (II), боргидрид натрия, концентрированная соляная кислота, дитионит натрия, гидразин [Nuclear Medicine. Диагностика и терапия // JC Harbert, WCEckelman, RDNeumann Eds. - Thieme Medical Publishers, Inc., Нью-Йорк, 1990, с.218]. Наиболее часто в качестве восстановителя используется двухлористое олово, которое входит в состав практически всех препаратов ^99мТс. Двухлористое олово в качестве восстановителя встречается в большинстве РФП, используемых для диагностики с ^99мТс, оно стабилизирует комплекса восстановленного технеция с лигандами.

Все комплексы технеции с дифосфонатами остеотропны, и поэтому общепринятой является формулировка «^99mТс-фосфатный комплекс». Для РНТ вместо ^99mТс в составе фосфатных комплексов использовали рений-186 [S H Han, J M De Klerk, B A Zonnenberg. J Nucl Med. 2001 Mar;45(1):84-90], а в последние годы изотоп рения-188: рений-188-гидроксиэтилидендифосфонат (¹⁸⁸Re-HEDP) [Knut Liepe, Joerg Kotzerke // Nucl Med Commun. 2007 Aug; 28(8): 623-30]; ¹⁸⁸Re-метилендифосфонат (¹⁸⁸Re-MDP) [Angélica Barbezan, João A Osso Jr // 2011 International Nuclear Atlantic Conference - INAC 2011, Belo Horizonte, MG, Brazil, October 24-28, 2011].

Рений-188 считается одним из наиболее перспективных изотопов для радионуклидной терапии. Период полураспада рения-188 составляет 16,9 час, при этом энергия β-излучения, равная 2,12 МэВ, достаточна, чтобы проникнуть в зону костного опухолевого очага на глубину 5-10 мм. Это позволяет достигать ожидаемого терапевтического эффекта от действия РФП с минимумом лучевого поражения здоровой ткани. Гамма-излучение рения-188 (Eγ=155 кэВ) дает возможность сцинтиграфического наблюдения за распределением активного изотопа в опухолевых образованиях и в организме. Кроме того, являясь элементом VII группы Периодической системы, рений способен к образованию ряда комплексов в различных окислительных состояниях. Получение изотопа рения-188 из генератора непосредственно в клинике позволяет снизить проблемы с логистикой радиоактивных РФП высокой активности и готовить РФП непосредственно в клинических условиях для каждого больного с индивидуальными характеристиками.

Поэтому выбор радионуклида рений-188 в качестве основы радиофармпрепарата для терапии костных поражений скелета при онкологических заболеваниях исключительно целесообразен.

Рений-188 получают с использованием генераторной системы <188>W/<188>Re. Рений-188 образуется при распаде материнского радионуклида вольфрама-188 и его элюируют 0,9% раствором хлорида натрия, при этом рений-188 переходит в раствор в форме перрената натрия (NaReO₄). Рений-188 также получают с использованием экстракционного генератора путём экстракции рения-188, образующегося в результате распада вольфрама-188, с последующим упариванием раствора и растворением осадка в 0,9% растворе хлорида натрия.

Известен коллоид, <188>Re-Sn, и способ его синтеза, предложенные исследователями Сеульского университета [J.M. Jeong et al. / Applied Radiation and Isotopes 52 (2000) 851-855]. Для получения <188>Re-Sn коллоида сначала во флакон в атмосфере азота помещали 0,5 мл 0,1М HCl, содержащей 0,5-30 мг SnCl₂⋅2H₂O, растворенного при барботировании азота. При укупоривании такого раствора во флакон в атмосфере азота его стабильность сохраняется в течение 3 месяцев. Затем во флакон добавляли 0,5 мл <188>Re-перрената (приблизительно 30 МБк) в виде элюата из генератора <188>W/<188>Re и выдерживали при комнатной температуре в течение 2 ч. Затем pH реакционной смеси доводили до нейтрального значения с помощью 0,2М фосфатного буфера с pH=8. В этих условиях эффективность мечения составляла более 95%. Существенными преимуществами этого способа по сравнению с другими является получение радиофармацевтической композиции при комнатной температуре и более высокий выход меченого коллоида. Однако получаемый по указанной технологии показан только для РНТ синовитов и не предназначен для РНТ костных поражений у онкологических больных.

Рений также, как и технеций, образует комплексы с распространёнными лигандами. Были проведены исследования с участием метиленфосфоновых кислот, а именно этилендиамин-N,N,N',N'-тетракис (метиленфосфорная кислота, EDTMP; (этилендиамин-N,N'-бис-(метиленфосфорная кислота, EDBMP); (нитрилотрис-(метиленфосфорная кислота, NTMP). Было выявлено, что в присутствии двухлористого олова все лиганды образуют белковые комплексы при рН <3 [Хашимото К. Второй японско-российский семинар по технецию. Сидзуока, Япония, 1999, Тезисы, - с. 40].

Кроме дифосфонатов, в последние годы в медицинской практике используют бисфосфонаты (БФ) [Боневоленская Л.И. Бисфосфонаты и остеопороз. // Руководство по остеопорозу / под.ред. Л.И. Беневоленской - М., Бинош, Лаборатория знаний. - 2003, - гл.9, - с. 196-216.]. Исследования острой, подострой и хронической токсичности БФ, показали, что они в целом относятся к группе малотоксичных соединений, обладающих относительно низкими уровнями острой и хронической токсичности. Не было выявлено у БФ тератогенных, мутагенных, а также канцерогенных свойств.

Золедроновая кислота (ЗК) является бисфосфонатом последнего поколения - единственный бисфосфонат, содержащий 2 атома азота и отличающейся наибольшей аффинностью к участкам костного поражения, в том числе метастатической природы и обладает способностью ингибировать костную резорбцию. Показано, что ЗК ингибирует активность и индуцирует апоптоз остеокластов. ЗК блокирует остеокластическую резорбцию минерализованной костной и хрящевой тканей, активированную костными опухолями и метастазами. В связи с этими свойствами ЗК, в отличие от дифосфонатов, остеотропна к участкам, как с остеокластическими, так и с остеобластическими метастазами [Снеговой А.В., Кононенко И.Б. «Современные возможности остеомодифицирующей терапии при метастазах в кости». РМЖ. №6 от 27.11.2019 стр. 16-22].

В настоящее время для РНТ с рением-188 используют дифосфонаты, такие как метилендифосфонат (MDP), оксиэтилидендифосфонат (HEDP), в отечественной практике -ОЭДФ [Jak M.S.P., Han S.H. Zonnenberg B.A, et al. // J. Nucl. Med. - 1996. - Vol.37 - p.1511], 188Re-HEDP [Faintuch B.L., Faintuch S., Muramoto E. // Radiochim. Asta - 2003. - Vol.91,- p.607]. В частности, известен патент RU2567728C1 [Радиофармацевтический препарат с рением-188 для терапии костных поражений скелета и способ его получения. 2006], включающий способ получения лиофилизированного реагента, содержащий дифосфонат 1 поколения (ОЭДФ), восстановитель, антиоксидант и соль неактивного рения с последующим получением РФП в клинических условиях путём получения комплекса с солью радиактивного рения-188.

Однако указанные комплексы дифосфонатов с рением-188 обладают недостаточно высокой специфичностью и чувствительностью при диагностике и эффективностью при терапии костных поражений. Кроме того, их использование ограничено преимущественным применением при остеобластических метастазах.

Известен препарат Золерен, ¹⁸⁸Re в виде комплекса ЗК с рением-188, получаемый по патенту RU 2407746 C1 [Радиофармацевтическое средство для диагностики и лечения (терапии) костных поражений скелета и способ его получения, 27.10.2010]. Особенностью радионуклидной терапии (РНТ) получаемого комплекса ЗК-¹⁸⁸Re является высокий уровень его накопления в костных метастазах разной природы, обеспечивающий максимальную интенсивность локального лучевого воздействия энергии бета-излучения ¹⁸⁸Re и, как следствие, высокую эффективность РНТ костных метастазов [«Радионуклидная терапия препаратами ¹⁸⁸Re в онкологии». К. Лиепе, Г. Лимурис, В.В. Крылов, Т.Ю. Кочетова. Онкологический журнал. 2018. Том 1. № 4. С. 34-42]. Наличие гамма-излучения с энергией 155 keV дает возможность визуализировать накопление и распределение РФП при помощи гамма-камеры методом ОФЭКТ/КТ. Накопление РФП в организме конкретного пациента делает возможным оценить целесообразность РНТ путём диагностики с использованием малых доз комплекса ЗК-¹⁸⁸Re перед проведением РНТ, что позволяет персонализировать подход к лучевой терапии. Короткий период полураспада рения-188 (16,9 час.) и устойчивость комплекса ЗК - ¹⁸⁸Re определяет безопасность его применения, обеспечивает быстрое снижение радиоактивности в теле пациента, позволяет минимизировать облучение тканей организма и окружающих лиц. Золедроновая кислота обладает доказанным терапевтическим действием и является золотым стандартом лечения больных с множественными метастазами в кости.

Поэтому в комплексе ЗК с рением-188 при РНТ достигается двойной радиометаболический эффект.

Методика проведения процедуры лечения препаратом Золерен, ¹⁸⁸Re: расчёт вводимой активности производится индивидуально, рекомендуемая дозировка 45 МБк/кг массы тела пациента. Процедура проводится в специально оборудованном процедурном кабинете или в палате с использованием радиационно-защитных средств. Золерен, 188Re вводится через внутривенный катетер с помощью инфузионной помпы в течение 15 минут.

Показаниями РФП являются: терапия болевого синдрома у пациентов с костными метастазами злокачественных опухолей и ревматоидного артрита. При планировании РНТ препаратом Золерен, ¹⁸⁸Re необходимо учитывать, что в его состав входит терапевтическая доза золедроновой кислоты (4 мг), следовательно, интервал между введением «холодной» золедроновой кислоты и Золерен, ¹⁸⁸Re должен быть не менее 28 дней. Продолжение терапии РФП Золерен, ¹⁸⁸Re показано не ранее, чем через 60 дней после введения в связи с необходимостью восстановления показателей крови после лучевого воздействия.

Способ получения РФП Золерен, ¹⁸⁸Re изложен в патенте RU 2407746 С1, и является наиболее близким предлагаемому способу по настоящему изобретению, заключающийся в том, что сначала лиофилизуют реагент, получаемый путём смешения водного раствора золедроновой кислоты и галогенида олова, возможно антиоксиданта, соли соответствующего неактивного изотопа в соляной кислоте, в токе инертного газа, далее в полученный лиофилизат добавляют раствор натрия пертехнетата (^99mТс) или раствор натрия перрената (¹⁸⁸Re) с получением комплекса при смешивании полученного лиофилизата и растворов радионуклидов.

При этом синтез РФП с рением-188 заключается в том, что во флакон с лиофилизатом, содержащий золедроновую кислоту - 4,0 мг, олова дихлорид - 1,5 мг, гентизиновую кислоту - 2,3 мг и перренат натрия - 0,045 мг, вводят 1,5 мл элюата перрената натрия (¹⁸⁸Re) в 0,9% растворе хлорида натрия, нагревают 30 минут, смешивают, на выходе фильтруют с помощью фильтра 0,22 мкм и доводят раствором 0,9% хлорида натрия до объёма 16,5 мл, получают раствор РФП для внутривенного введения, сохраняющий радиохимическую чистоту - не менее 90% при хранении не более 30 минут.

Недостатком полученного РФП золедроновой кислоты с изотопом рения-188 (¹⁸⁸Re) по указанному изобретению является низкая стабильность и поэтому малый срок хранения - 30 минут, наличие осадка, требующего конечной фильтрации, приводящей к неконтролируемой потери активности вследствие остающейся на фильтре части РФП.

Технической задачей заявленного изобретения является создание новых условий приготовления РФП на основе золедроновой кислоты и радионуклида - ¹⁸⁸Re, обеспечивающих повышение стабильности при хранении в течении более длительного периода, отсутствие осадка, исключение конечной фильтрации и потери активности.

Техническим результатом заявленного изобретения является получение РФП на основе комплекса золедроновой кислоты с радионуклидом ¹⁸⁸Re c повышенной стабильностью при хранении в течении 120 мин без потери радиотерапевтической активности и сохранении РХЧ не менее 90% и, как следствие, упрощение и удешевление приготовления в клинике и расширение возможности применения в медицинской практике РФП на основе комплекса золедроновой кислоты с изотопами ¹⁸⁸Re.

Поставленная техническая задача и получаемый технический результат достигаются заявленным в качестве изобретения способом.

Способ получения радиофармацевтического препарата для диагностики и терапии костных поражений скелета при онкологических заболеваниях, на основе комплекса золедроновой кислоты с радионуклидом рения-188, заключающимся в том, что сначала получают реагент путём смешения во флаконе в токе инертного газа водного раствора золедроновой кислоты и раствора галогенид олова, гентизиновой кислоты, нерадиоактивного перрената натрия в соляной кислоте и затем лиофилизуют, далее в асептических условиях во флакон с лиофилизатом вводят 1,8 - 2,2 мл элюата натрия перрената [188Re] в 0,9% растворе хлорида натрия, нагревают 45 - 60 минут при температуре 98°С, перемешивают, получают концентрат, охлаждают не менее 15 минут, далее не более чем через 90 минут или сразу вводят в инфузионную систему, содержащую, не более 15 мл 0,9% раствора хлорида натрия, полученный раствор сразу вводят внутривенно капельно пациенту.

Таким образом, заявленный способ получения радиофармацевтического препарата, содержащий радиотерапевтический комплекс золедроновой кислоты и ¹⁸⁸Re отличается тем, что в асептических условиях в полученный лиофилизат, содержащий золедроновую кислоту и вспомогательные вещества, вводят 1,8 - 2,2 мл элюата ¹⁸⁸Re (вместо 1,5 мл в аналоге), нагревают 45 - 60 минут (вместо 30 минут), охлаждают не менее 15 минут (вместо - до комнатной температуры), далее полученный концентрат вводят непосредственно в инфузионную систему, содержащую не более 15 мл 0,9% раствора хлорида натрия (вместо - в промежуточный флакон, содержащий 16,5 мл 0,9% раствора хлорида натрия, без конечной фильтрации (вместо фильтрации через фильтр 0,22 мкм).

Таким образом, согласно заявленному изобретению во флакон с лиофилизатом (золедроновая кислота и вспомогательные веществами) вводят преимущественно 2,0 мл элюата перрената натрия (¹⁸⁸Re) в изотоническом растворе (0,9% раствор хлорида натрия), нагревают 45-60 минут, перемешивают, на выходе получают 2 мл концентрата со сроком хранения до 120 минут (предпочтительно 90 минут). Далее концентрат из флакона вводят в инфузионную систему, содержащую не более 15 мл 0,9% раствора хлорида натрия и вводят пациенту медленно капельно со скоростью, обеспечивающей время введения 15 минут.

Ниже приводятся конкретные примеры получения радиофармацевтического препарата, указанного в тексте состава полученного на основании заявленного способа иллюстрирующие изобретение, но не ограничивающие его.

Получен Генератор «ГРЕН-1».

Активность элюата по паспорту 18,5 ГБк.

Активность элюата на дату паспортизации: 30,8 ГБк на 24.01.2022

Элюирование генератора 07.02.2022 г

Активность элюата 24,37 ГБк/5 мл.

РХЧ 99,9 %

рН 5,15

[Пример 1].

Получение концентрата в 2 флаконах с лиофилизатом.

Активность элюата - 2,04 ГБк/мл

Приготовление концентрата: Во флакон с лиофилизатом ввели 1,8 мл элюата из генератора с активностью 2,04 ГБк/мл. Нагревание на бане 45 мин при температуре 98°С. Затем 15 мин остывания и удержания концентрата. Затем отбирали пробы на момент приготовления (после остывания флакона в течение 15 мин), через 60, 90 и 120 мин.

Хроматографические системы: ТСХ 5553 - ацетон; для определения ГВР - Ватман 3ММ - 0,9 % NaCl.

Из каждого флакона брали по 3 пробы. В таблице представлены средние значения из 6 параллельных.

Таблица 1 РХП Время хранения концентрата На момент приготовления 60 мин 90 мин 120 мин ГВР, % 2,47 2,96 2,31 4,08 Перренат, % 2,0 2,04 2,10 2,15 РХП, % 4,47 5,0 4,41 6,23 рН 2,0

[Пример 2].

Получение концентрата в 2 флаконах с лиофилизатом.

Активность элюата - 2,08 ГБк/мл.

Приготовление концентрата: Во флакон с лиофилизатом ввели 2,2 мл элюата из генератора с активностью 2,08 ГБк/мл. Нагревание на бане 60 мин при температуре 98°С. Затем 15 мин флакон остывал. И затем отбирали пробы на момент приготовления (после остывания флакона в течение 15 мин), через 60, 90 и 120 мин.

Хроматографические системы: ТСХ 5553 - ацетон; для определения ГВР - Ватман 3ММ - 0,9 % NaCl.

Из каждого флакона брали по 3 пробы. В таблице представлены средние значения из 6 параллельных.

Таблица 2 РХП Время хранения концентрата На момент приготовления 60 мин 90 мин 120 мин ГВР, % 1,78 1,82 2,06 2,74 Перренат, % 3,26 2,73 3,62 4,59 РХП, % 5,04 4,55 5,68 7,33 рН 2,0

[Пример 3].

Получение концентрата в 2 флаконах с лиофилизатом.

Активность элюата - 2,06 ГБк/мл

Приготовление концентрата: Во флакон с лиофилизатом ввели 2 мл элюата из генератора с активностью 2,06 ГБк/мл. Нагревание на бане 40 мин при температуре 98°С. Затем 15 мин флакон остывал. И затем отбирали пробы на момент приготовления (после остывания флакона в течение 15 мин), через 60, 90 и 120 мин.

Хроматографические системы: ТСХ 5553 - ацетон; для определения ГВР - Ватман 3ММ - 0,9 % NaCl.

Из каждого флакона брали по 3 пробы. В таблице представлены средние значения из 6 параллельных.

Таблица 3 РХП Время хранения концентрата На момент приготовления 60 мин 90 мин 120 мин ГВР, % 4,41 2,84 5,02 3,89 Перренат, % 2,03 1,85 1,85 3,33 РХП, % 6,44 4,69 6,87 7,22 рН 2,04

[Пример 4].

Получение концентрата в 2 флаконах с лиофилизатом.

Активность элюата - 2,01 ГБк/мл

Приготовление концентрата: Во флакон с лиофилизатом ввели 2 мл элюата из генератора с активностью 2,01 ГБк/мл. Нагревание на бане 45 мин при температуре 98°С. Затем 20 мин флакон остывал. И затем отбирали пробы на момент приготовления (после остывания флакона в течение 15 мин), через 60, 90 и 120 мин.

Хроматографические системы: ТСХ 5553 - ацетон; для определения ГВР - Ватман 3ММ - 0,9 % NaCl.

Из каждого флакона брали по 3 пробы. В таблице представлены средние значения из 6 параллельных.

Таблица 4 РХП Время хранения концентрата На момент приготовления 60 мин 90 мин 120 мин ГВР, % 2,85 3,28 3,97 2,63 Перренат, % 2,25 1,95 2,0 3,45 РХП, % 4,10 5,23 5,97 6,08 рН Фл. 1 - 2,04; фл. 2 - 2,00

[Пример 5].

Получение концентрата в 2 флаконах с лиофилизатом.

Активность элюата - 2,03 ГБк/мл

Приготовление концентрата: Во флакон с лиофилизатом ввели 2 мл элюата из генератора с активностью 2,03 ГБк/мл. Нагревание на бане 30 мин при температуре 98°С. Затем 10 мин флакон остывал. И затем отобрали пробы на момент приготовления (после остывания флакона в течение 10 мин). Затем один флакон смешивали с 15 мл 0,9 % NaCl через 60 мин после приготовления концентрата и пробы отбирали через 15 и 30 мин после смешивания. Второй флакон смешивали с 15 мл 0,9 % NaCl через 120 мин после приготовления концентрата и пробы отбирали через 15 и 30 мин после смешивания.

Хроматографические системы: ТСХ 5553 - ацетон; для определения ГВР - Ватман 3ММ - 0,9 % NaCl.

Из каждого флакона брали по 3 пробы. В таблице представлены средние значения из 6 параллельных.

Таблица 5 РХП На момент приготовления Флакон 1: приготовление инфузионной формы через 60 мин после приготовления и 10 мин охлаждения концентрата Флакон 2: приготовление инфузионной формы через 120 мин после приготовления концентрата Время контакта с 15 мл 0,9 % NaCl Время контакта с 15 мл 0,9 % NaCl 15 мин 30 мин 15 мин 30 мин ГВР, % 3,22 2,77 4,51 3,75 4,14 Перренат, % 6,86 7,22 6,52 9,24 10,74 РХП, % 9,08 9,99 11,03 12,99 14,88 рН 2,06 2,72 2,72

[Пример 6].

Получение концентрата в 2 флаконах с лиофилизатом.

Активность элюата - 2,01 ГБк/мл

Приготовление концентрата: Во флакон с лиофилизатом ввели 2 мл элюата из генератора с активностью 2,01 ГБк/мл. Нагревание на бане 60 мин при температуре 98°С. Затем 15 мин флакон остывал. Затем отбирали пробы на момент приготовления (после остывания флакона в течение 15 мин), через 60, 90 и 120 мин.

Хроматографические системы: ТСХ 5553 - ацетон; для определения ГВР - Ватман 3ММ - 0,9 % NaCl.

Из каждого флакона брали по 3 пробы. В таблице представлены средние значения из 6 параллельных.

Таблица 6 РХП Время хранения концентрата На момент приготовления 60 мин 90 мин 120 мин ГВР, % 2,57 4,06 2,64 2,58 Перренат, % 2,09 2,11 2,10 2,61 РХП, % 4,66 6,17 4,74 5,19 рН 2,00

[Пример 7].

Получение концентрата в 2-х флаконах с лиофилизатом.

Активность элюата - 2,09 ГБк/мл

Приготовление концентрата: во флакон с лиофилизатом ввели 2 мл элюата из генератора с активностью 2,09 ГБк/мл. Нагревание на бане 40 мин при температуре 98°С. Затем 15 мин остывания и удержания концентрата. Затем отбирали пробы через 60, 90 и 120 мин.

Хроматографические системы: для определения показателей РФП - ТСХ 5553 - ацетон; для определения ГВР - Ватман 3ММ - 0,9 % NaCl.

Из каждого флакона отбирали по 3 пробы. В таблице представлены средние значения из 6 параллельных.

Таблица 7 РХП Время хранения концентрата Время контакта с 15 мл 0,9 % NaCl* На момент приготовления 60 мин 90 мин 120 мин 15 мин 30 мин ГВР, % 2,41 2,65 3,11 2,36 3,60 3,97 Перренат, % 1,95 2,59 1,95 2,19 7,93 8,66 РХП, % 4,36 5,24 5,06 4,55 11,53 12,63 рН 2,0 2,81

* Инфузионный раствор готовили через 120 мин после приготовления концентрата.

рН концентрата 2,0; рН инфузионной раствора 2,81.

[Пример 8].

Получение концентрата в 2 флаконах с лиофилизатом.

Активность элюата - 2,02 ГБк/мл

Приготовление концентрата: Во флакон с лиофилизатом ввели 2 мл элюата из генератора с активностью 2,02 ГБк/мл. Нагревание на бане 45 мин при температуре 98°С. Затем 15 мин флакон остывал. И затем отобрали пробы на момент приготовления (после остывания флакона в течение 15 мин). Затем один флакон смешивали с 15 мл 5,0 % раствора декстрозы (глюкозы) сразу после приготовления концентрата, и отбирали пробы через 15 и 30 мин после смешивания. Второй флакон смешивали с 15 мл 5,0 % раствора декстрозы (глюкозы) через 60 мин после приготовления концентрата и пробы отбирали через 15 и 30 мин после смешивания.

Хроматографические системы: ТСХ 5553 - ацетон;

для определения ГВР - Ватман 3ММ - 0,9 % NaCl.

Из каждого флакона брали по 3 пробы. В таблице представлены средние значения из 6 параллельных.

Таблица 8 РХП На момент приготовления Флакон 1: приготовление инфузионной формы сразу после приготовления концентрата Флакон 2: приготовление инфузионной формы через 60 мин после приготовления концентрата Время контакта с 15 мл 5,0 % раствора декстрозы (глюкозы) Время контакта с 15 мл 5,0 % раствора декстрозы (глюкозы) 15 мин 30 мин 15 мин 30 мин ГВР, % 2,71 3,31 3,13 3,04 3,01 Перренат, % 2,37 14,83 15,54 18,51 23,04 РХП, % 5,08 18,14 18,67 21,55 25,05 рН - 2,77 2,77

[Пример 9].

Получение концентрата в 2 флаконах с лиофилизатом.

Активность элюата - 2,05 ГБк/мл

Приготовление концентрата: Во флакон с лиофилизатом ввели 2 мл элюата из генератора с активностью 2,05 ГБк/мл. Нагревание на бане 60 мин при температуре 98°С. Затем 15 мин флакон остывал. И затем отобрали пробы на момент приготовления (после остывания флакона в течение 15 мин). Затем один флакон смешивали с 15 мл 10,0 % раствора маннита сразу после приготовления концентрата и пробы отбирали через 15 и 30 мин после смешивания. Второй флакон смешивали с 15 мл 10,0 % раствора маннита через 60 мин после приготовления концентрата и пробы отбирали через 15 и 30 мин после смешивания.

Хроматографические системы: ТСХ 5553 - ацетон; для определения ГВР - Ватман 3ММ - 0,9 % NaCl.

Из каждого флакона брали по 3 пробы. В таблице представлены средние значения из 6 параллельных.

Таблица 9 РХП На момент приготовления Флакон 1: приготовление инфузионной формы сразу после приготовления концентрата Флакон 2: приготовление инфузионной формы через 60 мин после приготовления концентрата Время контакта с 15 мл 10,0 % раствора маннита Время контакта с 15 мл 10,0 % раствора маннита 15 мин 30 мин 15 мин 30 мин ГВР, % 3,67 2,55 3,46 2,67 2,79 Перренат, % 2,08 7,30 7,52 13,37 15,39 РХП, % 5,75 10,85 10,98 16,04 18,18 рН - 2,64 2,67

[Пример 10].

Получение концентрата в 2 флаконах с лиофилизатом.

Активность элюата - 2,05 ГБк/мл

Приготовление концентрата: Во флакон с лиофилизатом ввели 2 мл элюата из генератора с активностью 2,05 ГБк/мл. Нагревание на бане 45 мин при температуре 98°С. Затем 15 мин флакон остывал. И затем отобрали пробы на момент приготовления (после остывания флакона в течение 15 мин). Затем один флакон смешивали с 15 мл 0,9 % NaCl сразу после приготовления концентрата и пробы отбирали сразу и через 15 мин после смешивания. Второй флакон смешивали с 30 мл 0,9 % NaCl сразу после приготовления концентрата и пробы отбирали сразу и через 15 мин после смешивания.

Хроматографические системы: ТСХ 5553 - ацетон; для определения ГВР - Ватман 3ММ - 0,9 % NaCl.

Из каждого флакона брали по 3 пробы. В таблице представлены средние значения из 6 параллельных

Таблица 10 РХП На момент приготовления Флакон 1: приготовление инфузионной формы сразу после приготовления концентрата Флакон 2: приготовление инфузионной формы сразу после приготовления концентрата Время контакта с 15 мл
0,9 % NaCl Время контакта с 30 мл
0,9 % NaCl Сразу после смешивания Через 15 мин после смешивания Сразу после смешивания Через 15 мин после смешивания ГВР, % 2,33 2,84 2,83 3,33 3,41 Перренат, % 2,04 5,48 6,46 8,05 11,23 РХП, % 4,37 8,22 9,29 11,38 14,64 рН - 2,82 2,99

Выводы:

Приведённые сведения согласно экспериментов свидетельствуют о достижении указанного технического результата;

Необходимое и достаточное время для синтеза концентрата при температуре составляет 45 - 60 мин. При этом сумма примесей не превышает 10 % в течение 90 - 120 мин хранения концентрата, то есть повышается стабильность концентрата и радиофармацевтического препарата при более длительном хранении.

Оптимальные условия (из испытанных) для приготовления инфузионной формы: смешивание с 15 мл 0,9 % NaCl, при этом введение инфузионного раствора пациенту - сразу после его приготовления и не должно превышать 15 мин. При таких условиях значение РХП составляет не более 9 - 10 %.

Изобретение относится к области химии и медицины, в частности к способу получения радиофармацевтического препарата для диагностики и терапии костных поражений скелета при онкологических заболеваниях на основе комплекса золедроновой кислоты с радионуклидом рения-188. Сначала получают лиофилизированный реагент в виде лиофилизата путём смешения водного раствора золедроновой кислоты, раствора галогенида олова и гентизиновой кислоты, нерадиоактивного перрената натрия в соляной кислоте. Далее во флакон с лиофилизатом вводят 1,8-2,2 мл элюата натрия перрената (¹⁸⁸Re) в 0,9% растворе хлорида натрия, нагревают 45-60 минут при температуре 98°С, перемешивают и получают концентрат, охлаждают не менее 15 минут. Далее полученный концентрат не более чем через 90 минут вводят в инфузионную систему, содержащую не более 15 мл 0,9% раствора хлорида натрия для получения инфузионной формы препарата. Техническим результатом заявленного изобретения является получение РФП на основе комплекса золедроновой кислоты с радионуклидом ¹⁸⁸Re c повышенной стабильностью при хранении в течение 120 мин без потери радиотерапевтической активности и сохранении РХЧ не менее 90% и, как следствие, упрощение и удешевление приготовления в клинике и расширение возможности применения в медицинской практике РФП на основе комплекса золедроновой кислоты с изотопами ¹⁸⁸Re. 10 табл., 10 пр.

Способ получения радиофармацевтического препарата для диагностики и терапии костных поражений скелета при онкологических заболеваниях на основе комплекса золедроновой кислоты с радионуклидом рения-188, заключающийся в том, что сначала получают реагент путём смешения во флаконе в токе инертного газа водного раствора золедроновой кислоты и раствора галогенида олова, гентизиновой кислоты, нерадиоактивного перрената натрия в соляной кислоте и затем лиофилизуют, далее в асептических условиях во флакон с лиофилизатом вводят 1,8-2,2 мл элюата натрия перрената [¹⁸⁸Re] в 0,9% растворе хлорида натрия, нагревают 45-60 минут при температуре 98°С, перемешивают, получают концентрат, охлаждают не менее 15 минут, далее не более чем через 90 минут или сразу вводят в инфузионную систему, содержащую не более 15 мл 0,9% раствора хлорида натрия, полученный раствор сразу вводят внутривенно капельно пациенту.