Способ ранней диагностики семейной экссудативной ретинопатии у детей Российский патент 2023 года по МПК G01N33/53 A61F9/00 

Предлагаемое изобретение относится к офтальмологии и предназначено для ранней диагностики семейной экссудативной витреоретинопатии у детей (СЭВР).

Семейная экссудативная витреоретинопатия - наследственное прогрессирующее заболевание, возникающие вследствие нарушения васкулогенеза сетчатки и характеризующееся полиморфизмом клинических проявлений от наличия стационарных аваскулярных зон (AЗ) до быстро прогрессирующей отслойки сетчатки. Более тяжелое течение заболевания наблюдается при манифестации в детском возрасте [Kashani А.Н., Brown K.Т., Chang Е., Drenser K.А., Capone A., Trese M.T. Diversity of retinal vascular anomalies in patients with familial exudative vitreoretinopathy. Ophthalmology. 2014;121:2220-2227].

Диагностика СЭВР нередко вызывает значительные трудности. В настоящее время диагноз СЭВР ставится на основании клинических проявлений, данных флуоресцентной ангиографии, течения заболевания, семейного анамнеза и результатов молекулярно-генетического исследования [Wood Е.Н., Drenser K.A., Capone A. Diagnosis and management of familial exudative vitreoretinopathy: a lifelong, progressive, and often asymmetric disease. JAMA Ophthalmol. 2019;137(9):1059-1060. doi:10.1001/jamaophthalmol.2019.1484; Kashani A.H., Brown K.T., Chang E., Drenser K.A., Capone A., Trese M.T. Diversity of retinal vascular anomalies in patients with familial exudative vitreoretinopathy. Ophthalmology. 2014;121(11):2220-7. doi: 10.1016/j.ophtha.2014.05.029]. Однако «абсолютно специфичные» клинические признаки СЭВР отсутствуют, отягощенный семейный анамнез удается проследить только в 20% случаев, а современное генетическое обследование позволяет выявить патогенные или условно патогенные мутации менее, чем у половины пациентов с клиническим диагнозом СЭВР [Катаргина Л.А., Денисова Е.В., Гераськина Е.А. Клинические проявления семейной экссудативной витреоретинопатии при манифестации на первом году жизни. Российский офтальмологический журнал. 2021; 14 (3): 8-13. https://doi.org/10.21516/2072-0076-2021-14-3-8-13; Li J.-K., Li Y., Zhang X., Chen C.-L., Rao Y.-Q., Fei P., Zhang Q., Zhao P., Li J. Spectrum of variants in 389 Chinese probands with familial exudative vitreoretinopathy. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2018 Nov 1;59(13):5368-5381. doi: 10.1167/iovs.17-23541].

В результате правильный диагноз сразу ставится лишь 14-28% пациентов, в трети случаев - в терминальной стадии, а срок от манифестации заболевания до постановки диагноза достигает 15 лет [Ranchod Т.М., Но L.Y., Drenser K.А., Capone A.Jr., Trese M.T. Clinical presentation of familial exudative vitreoretinopathy. (2011) Ophthalmology, 118 (10):2070-75; Wang Z., Chen C., Sun L., Zhang A., Liu C., Huang L., Dinget X. (2019). Symmetry of folds in FEVR: a genotype-phenotype correlation study. Experimental Eye Research, doi: https://doi.Org/10.1016/j.exer.2019.107720; Катаргина Л.А., Денисова E.B., Гераськина Е.А. Клинические проявления семейной экссудативной витреоретинопатии при манифестации на первом году жизни. Российский офтальмологический журнал. 2021; 14 (3): 8-13. https://doi.org/10.21516/2072-0076-2021-14-3-8-13].

Актуальность раннего выявления СЭВР обусловлена высокой эффективностью лечения на начальных стадиях. В 1 стадии заболевание характеризуется наличием на периферии сетчатки аваскулярных зон (AЗ) с аномальными (щеткообразно ветвящимися, дугообразными, патологически извитыми) сосудами, во 2, кроме того, телеэктазий, микроаневризм и экстраретинальной пролиферацией на границе с AЗ (2А стадия), а также отложением твердого экссудата (2Б) [Kashani А.Н., Learned D., Nudleman E., Drenser K.A., Capone A., Trese M.T. High prevalence of peripheral retinal vascular anomalies in family members of patients with familial exudative vitreoretinopathy. Ophthalmology. 2014;121(1):262-8]. В ряде случаев встречается одностороннее поражение, что еще больше затрудняет диагностику [Tian Т., Chen С., Zhang X., Zhang Q., Zhao P. Clinical and genetic features of familial exudative vitreoretinopathy with only-unilateral abnormalities in a Chinese cohort. JAMA Ophthalmol. 2019;137(9):1054-1058. doi: 10.1001/jamaophthalmol.2019.1493].

Ближайшим аналогом данного изобретения является способ диагностики СЭВР, основанный на комплексе клинических симптомов, включающих: 1) отсутствие развития сосудов на периферии сетчатки в одном или обоих глазах; 2) рождение в срок или недоношенным с течением заболевания не соответствующим ретинопатии недоношенных; 3) возникновение в любом возрасте витреоретинальной тракции, субретинальной экссудации или неоваскуляризация сетчатки [Ranchod Т.М., Но L.Y., Drenser K.А., Capone A.Jr., Trese M.T. Clinical presentation of familial exudative vitreoretinopathy. (2011) Ophthalmology, 118 (10):2070-75].

Однако аваскулярные зоны встречаются также при миопии средней или высокой степени, при болезни Коатса, при болезни недержания пигмента, у недоношенных детей, а также у здоровых детей, что требует проведения дифференциального диагноза [Blair М.Р., Shapiro M.J., Hartnett М.Е. Fluorescein angiography to estimate normal peripheral retinal nonperfusion in children. J AAPOS. 2012; 16: 234-237; Jeng-Miller K., Yonekawa Y., Mukai S. (2022). Sizmaz S., Yonekawa Y., Trese M. T. (2015). Familial exudative vitreoretinopathy. Turkish journal of ophthalmology, 45(4), 164-168. https://doi.org/10.4274/tjo.67699].

В настоящее время при изучении биохимических механизмов патогенеза сосудистой патологии глаза большое внимание уделяется эндотелину-1 (ЭТ-1). Данный биопептид способствует ангиогенезу, усиливая экспрессию эндотелиального фактора роста, а также влияя на пролиферацию эндотелиальных клеток, миграцию, инвазию, формирование сосудистой трубки. Установлено, что экспрессия гена ЭТ-1 человека возрастает при гипоксии в связи с накоплением фактора HIF-1α, который, в свою очередь, усиливает синтез факторов ангиогенезаVЕGР и ЭТ-1. ЭТ-1 локально продуцируется в глазу при пролиферативной витреоретинопатии у взрослых, при этом установлено повышение ЭТ-1 как в стекловидном теле, так и плазме крови [Roldan-Pallares М., Rollin R., Martinez-Montero J.С., Fernandez-Cruz А., Bravo-Llata С., Fernandez-Durango R. Immunoreactive endothelin-1 in the vitreous humor and epiretinal membranes of patients with proliferative diabetic etinopathy. Retina. 2007;27(2):222-35 pmid: 17290206; Roldán-Pallarés M., Rollín R., Bernal R., Ripodas A., J.A., Fernández-Cruz A., Fernández-Durango R. Proliferative vitreoretinopathy: immunoreactive endothelin-1. Ann Ophthalmol 2004; 36:24-28; Adamiec-Mroczek J., Oficjalska-Młyńczak J., Misiuk-Hojlo M. Roles of endothelin-1 and selected proinflammatory cytokines in the pathogenesis of proliferative diabetic retinopathy: analysis of vitreous samples. Cytokine. 2010; 49(3):269-74. doi: 10.1016/j.cyto.2009.11.004]. Разработан способ прогнозирования риска интраоперационных осложнений у пациентов с пролиферативной диабетической ретинопатией, основанный на определении концентрации ЭТ-1 в сыворотке крови. При концентрации ЭТ-1 3 фмоль/мл и более прогнозируют высокий риск интраоперационных геморрагических осложнений [Патент RU 2696880, 07.08.2019].

В основе предлагаемого нами способа лежит идея использования опеределения концентрации ЭТ-1 в слезной жидкости (СЖ) больного глаза у детей с подозрением на СЭВР (наличие аваскулярных зон на периферии сетчатки без/с сосудистыми мальформациями, эпиретинальным фиброзом, отложением субретинального экссудата).

Задачей предлагаемого изобретения является разработка ранней диагностики СЭВР у детей с помощью лабораторного метода.

Техническим результатом предлагаемого изобретения является адекватное своевременное лечение со снижением частоты развития тяжелых стадий и осложнений.

Технический результат достигается за счет определения концентрации эндотелина-1 в СЖ больного глаза.

Патогенетическим обоснованием предлагаемого способа послужили данные, полученные при обследовании 21 ребенка (33 глаза) в возрасте от 1 месяца до 17 лет (в среднем 6,5±1,3 года) с семейной экссудативной витреоретинопатией и 10 здоровых детей в возрасте от 8 месяцев до 14 лет (в среднем 5,3±0,8 года).

Всем детям проводили биохимическое обследование - определение концентрации ЭТ-1 в СЖ. Определение уровня ЭТ-1 в образцах проводили на полуавтоматическом анализаторе для иммуноферментного анализа. Концентрацию ЭТ-1 выражали в пг/мл.

Ретроспективный сравнительный анализ полученных данных и клинических результатов показал, что у детей с СЭВР определялась значительно более высокая концентрация ЭТ-1 в СЖ в сравнении с данными здоровых детей.

На основании сравнительного анализа был установлен критериальный показатель концентрации ЭТ-1 в СЖ больного глаза 8,0 пг/мл, превышение которого указывает на наличие диагноза СЭВР.

Способ осуществляют следующим образом.

В слезной жидкости больного глаза определяют концентрацию эндотелина-1 и при его величине свыше 8,0 пг/мл диагностируют семейную экссудативную витреоретинопатию.

Забор СЖ производят из обоих глаз, с помощью полосок стерильной фильтровальной бумаги шириной 5 мм, которые закладывают за нижнее веко на 5 мин. Условием взятия образца является отсутствие инсталляции лекарственных веществ минимум за 12 часов до манипуляции. Компоненты слезы элюируют физиологическим раствором, элюат центрифугируют 10 мин при 3000 об/мин, надосадочную часть используют для исследования. Определение уровня ЭТ-1 в образцах проводится на полуавтоматическом анализаторе для иммуноферментного анализа с использованием специальных наборов реактивов (например, ELISA Kitfor Endothelin-1). Постановка реакции осуществляется традиционным способом, согласно инструкции компании-производителя тест-системы.

Способ иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Пациент Г., 8 мес. Ребенок доношенный, соматически здоровый. Направлен в НМИЦ ГБ в связи с выявлением изменений глазного дна слева. При обследовании в наркозе слева выявлена широкая аваскулярная зона в наружной половине глазного дна, отложение субретинального экссудата, единичные микроаневризмы и преретинальное кровоизлияние вдоль АЗ. Справа обнаружена узкая АЗ с агенезией капилляров в верхненаружном квадранте. Поставлен диагноз OU - подозрение на семейную экссудативную витреоретинопатию. Концентрация ЭТ-1 в СЖ составила OD - 13,82 пг/мл; OS - 16,91 пг/мл. Поставлен диагноз: OU - семейная экссудативная витреоретинопатия, OD 1, OS 2Б стадия, проведена рассасывающая терапия, лазеркоагуляция аваскулярной зоны и микроаневризм сетчатки слева. При динамическом наблюдении в течение года отмечено запустевание микроаневризм, резорбция кровоизлияния, стабилизация субретинального экссудата.

Данный пример подтверждает положение о том, что у пациентов с СЭВР повышена концентрация ЭТ-1 в СЖ, включая первую и вторую стадию заболевания, что способствовало установлению правильного диагноза и проведению лечения со стабилизацией состояния.

Пример 2. Пациентка Е., 1,5 года. Ребенок доношенный, соматически здоровый. При обследовании в обоих глазах выявлены широкие АЗ с эпиретинальным фиброзом на границе в нижне-наружном отделе. Диагноз OU - подозрение на семейную экссудативную витреоретинопатию. Концентрация ЭТ-1 в СЖ OD - 13,15 пг/мл; OS - 13,73 пг/мл. Диагноз OU - семейная экссудативная витреоретинопатия, 2А стадия. Пациентке проведена лазеркоагуляция АЗ обоих глаз. При наблюдении в течение 1,5 лет прогрессирования заболевания не отмечалось.

Данный пример также подтверждает положение повышении концентрации ЭТ-1 в СЖ у пациентов с СЭВР на ранних стадиях, что способствует установлению правильного диагноза и своевременному лечению.

Пример 3. Пациент С., 4 года. Диагноз OU - гиперметропия слабой степени. Во время обследования выявлены узкие аваскулярные зоны сетчатки в верхне-наружном отделе обоих глаз. Поставлен диагноз: гиперметропия слабой степени, подозрение на семейную экссудативную витреоретинопатию (1 стадия). Концентрация ЭТ-1 в СЖ OD - 0,39 пг/мл; OS - 0,37 пг/мл. Диагноз СЭВР был снят. При динамическом обследовании через 1 год состояние глазного дна не изменилось.

Данный пример демонстрирует низкую концентрацию ЭТ-1 у здорового ребенка даже при наличии аваскулярных зон сетчатки.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет диагностировать ранние стадии СЭВР у детей с аваскулярными зонами сетчатки на основании определения концентрации ЭТ-1 в СЖ и будет способствовать адекватному наблюдению, своевременному лечению и, тем самым снижению частоты развития тяжелых стадий, осложнений и сохранению зрительных функций.

Изобретение относится к офтальмологии и предназначено для ранней диагностики семейной экссудативной витреоретинопатии. В слезной жидкости больного глаза определяют концентрацию эндотелина-1. При его величине свыше 8,0 пг/мл диагностируют семейную экссудативную витреоретинопатию. Изобретение обеспечивает адекватное своевременное лечение со снижением частоты развития тяжелых стадий и осложнений. 3 пр.

Способ ранней диагностики семейной экссудативной витреоретинопатии, отличающийся тем, что в слезной жидкости больного глаза определяют концентрацию эндотелина-1 и при его величине свыше 8,0 пг/мл диагностируют семейную экссудативную витреоретинопатию.