СПОСОБ ОЦЕНКИ СТАБИЛЬНОСТИ ГЕНОМА И ПРОДУКТИВНЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ МОЛОДНЯКА НОРОК ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ В РАЦИОНАХ НЕТРАДИЦИОННОЙ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ СУХОГО ПАЛЬМОВОГО ЖИРА Российский патент 2023 года по МПК A01K67/00 

Изобретение относится к области пушного звероводства, в частности, к периоду выращивания молодняка норок для получения шкурок, а именно, к применению микроядерного теста (определение частоты встречаемости эритроцитов, содержащих микроядра (ЭМЯ), в периферической крови норок) при оценке физиологического состояния животных, геномной стабильности (нестабильности), изменчивости хозяйственно полезных признаков (в зависимости от направления продуктивности) при применении новых нетрадиционных кормовых ингредиентов.

Высокая продуктивность животных может быть достигнута при рациональном кормлении. Кормление оказывает значительное влияние на рост и развитие молодняка пушных зверей и качество получаемой от них шкурковой продукции. При применении новых кормовых ингредиентов в рационах пушных зверей необходимо проводить оценку физиологического состояния клинически здоровых животных, стабильности их генома, обеспечивающие реализацию продуктивных показателей [1].

Известен способ, согласно которому посредством микроядерного теста изучали цитогенетические нарушения в эритроцитах периферической крови индюшат, получавших разное количество витаминов А, D₃ и Е. Установлен рост частот ядерных аномалий с 0,85 до 1,13% (промилле) (р<0,05) с уменьшением количества поливитаминной добавки в рационе, что свидетельствует о снижении уровня стабильности генома индеек при недостатке витаминов A, D₃ и Е в их рационе и приводит к существенным морфофизиологическим аномалиям, замедлению темпов их роста и развития [6].

Известен способ, согласно которому микроядерный тест по признаку частоты встречаемости эритроцитов, содержащих микроядра, в периферической крови рыб может быть использован в качестве маркера для выявления быстрорастущих особей рыб. Установлена корреляция между показателем темпа роста рыб и частотой встречаемости в их крови эритроцитов с микроядрами. Этот тест может использоваться для выявления выдающихся особей, групп и популяций рыб по другим биологическим, морфологическим и хозяйственно полезным признакам, формирования из них племенных групп для селекции и разведения [4].

Известен способ, согласно которому микроядерный тест используется для оценки стабильности генетического аппарата в различные периоды онтогенеза и фазы репродуктивного цикла самок норок, характеристики физиологического состояния организма и прогноза повышенной вероятности снижения их воспроизводительной функции [5].

Недостатком известных способов является то, что они не адаптированы к оценке стабильности генома молодняка норок, выращиваемого для получения шкурок при использовании новых нетрадиционных кормовых ингредиентов, в частности, сухого пальмового жира в рационах зверей, физиологического состояния клинически здоровых животных данного направления продуктивности для реализации их генетического потенциала.

Цель заявляемого изобретения - разработка способа оценки стабильности генома, физиологического состояния, обеспечения реализации продуктивных показателей молодняка норок, выращиваемого для получения шкурок, при использовании новой нетрадиционной кормовой добавки -сухого пальмового жира в рационах зверей.

Поставленная цель достигается тем, что при использовании новых нетрадиционных кормовых ингредиентов, в частности, при введения сухого пальмового жира в рацион молодняка норок, выращиваемого для получения шкурок, посредством микроядерного теста у клинически здоровых животных оценивают стабильность генома, физиологическое состояние, что повышает эффективность оценки влияния кормового ингредиента на продуктивные показатели молодняка норок.

Техническим результатом заявленного изобретения является получение большего прироста живой массы животных при сохранении морфофизиологических признаков, также изобретение направлено на реализацию продуктивности молодняка - увеличение площади и качества шкурок.

Применение заявленного способа обеспечивает контроль за физиологическим состоянием молодняка норок, стабильностью генома при использовании нового нетрадиционного кормового ингредиента - сухого пальмового жира в рационах молодняка норок в период выращивания и поддержанием высокой продуктивности.

Заявленный технический результат достигается за счет того, что способ оценки стабильности генома молодняка норок, выращиваемого для получения шкурок при использовании в рационах нетрадиционной кормовой добавки - сухого пальмового жира, включает использование микроядерного теста - определение частоты встречаемости эритроцитов, содержащих микроядра, в периферической крови молодняка норок, устанавливающий зависимость между этим показателем и фактором кормления, физиологическим состоянием клинически здоровых животных данного направления продуктивности, позволяющий повысить результативность оценки влияния нетрадиционной кормовой добавки сухого пальмового жира на продуктивные показатели молодняка норок. Установлено, что повышение частоты встречаемости эритроцитов, содержащих микроядра, в крови самцов в возрасте 7 месяцев до среднего уровня 14,6±3,18% (промилле) связано с изменением состава рациона за счет введения нетрадиционной кормовой добавки сухого пальмового жира.

При использовании микроядерного теста приготовление мазков крови осуществляют следующим образом: каплю периферической крови распределяют равномерно по всему предметному стеклу, высушивают при комнатных условиях, окрашивают по Май-Грюнвальду (1 способ), промывают дистиллированной водой, подсушивают, проводят подсчет эритроцитов с микроядрами (ЭМЯ), не менее чем в 3000 клеток, выражают полученные данные в промилле (%), анализ окрашенных цитогенетических препаратов проводят с помощью бинокулярного микроскопа фирмы «Micros» со встроенным цифровым фотоаппаратом при увеличении в 1000 раз. Проведен анализ зависимости частоты встречаемости ЭМЯ в периферической крови молодняка норок при использовании сухого пальмового жира от эндогенных факторов: возраста и физиологического состояния клинически здоровых животных, изучение ряда биологических признаков: темпа роста, морфологического строения волосяного покрова.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами: Пример 1. В опыт в период формирования зимнего волосяного покрова (в октябре-ноябре) было взято 20 самцов коротковолосой черной норки, разделенных на 2 группы, по 10 зверей-аналогов по возрасту и живой массе. Самцам опытной группы ежедневно в корм вводили нетрадиционную кормовую добавку сухого пальмового жира в количестве от 0,50 г, увеличивая в течение недели до 0,75 г на 100 г кормосмеси. Контрольная группа зверей получала хозяйственный рацион без добавки.

Перед началом опыта и перед убоем в декабре у самцов была взята кровь на определение лейкоцитарной формулы и частоты встречаемости ЭМЯ для оценки геномной стабильности (нестабильности) (табл. 1).

Установлено, что изученные показатели крови самцов черной норки находились в пределах физиологической нормы [2, 7]. Возрастные изменения в лейкоцитарной формуле крови самцов коротковолосой норки заключаются в уменьшении с возрастом в крови числа нейтрофилов (р<0,05) и увеличении базофилов (р<0,01).

Частота встречаемости ЭМЯ в клетках периферической крови самцов коротковолосой норки в возрасте 4 мес.перед началом опыта в обеих группах была одинаковой. При этом живая масса самцов также была практически одинаковой (2233,0±54,8 и 2272,0±58,3 г). Перед убоем в декабре, после завершения опыта по включению в рацион сухого пальмового жира, частота встречаемости ЭМЯ у самцов опытной группы была в 2 раза выше, чем у самцов контрольной группы (р<0,1) и в сравнении с показателями этих животных в возрасте 4 месяцев (р<0,01). В октябре-ноябре опытные самцы имели более высокую интенсивность роста и достигли большей живой массы (на 4,7%) к убою: 2846,0±119,2 г против 2718,6±120,3 г в контроле. Повышение частоты встречаемости ЭМЯ связано с изменением состава рациона за счет введения сухого пальмового жира в период формирования зимнего волосяного покрова у норок (октябрь-ноябрь). Среди животных опытной группы геномная нестабильность была выражена более ярко (14,6±3,18% против 7,7±1,84% в контроле). Полученные данные согласуются с повышением частоты встречаемости ЭМЯ у ремонтных самок норок при увеличении уровня поступления энергии с кормом в период выращивания [5]. Выращивание молодняка норок для получения шкурок направлено на увеличение площади и качества шкурок. Ранее было установлено положительное влияние использования в рационе молодняка норок новой нетрадиционной кормовой - добавки сухого пальмового жира в период формирования зимнего волосяного покрова (октябрь-ноябрь) на площадь и качество шкурок [8]. В литературе имеются данные о том, что частота встречаемости клеток с микроядрами зависит от направления продуктивности скота - молочный, мясной, двойного направления продуктивности [3].

Применение микроядерного теста на молодняке норок, выращиваемом для получения шкурок, позволяет оценивать стабильность генома, физиологическое состояние клинически здоровых животных, темп роста молодняка при использовании нового нетрадиционного кормового ингредиента - сухого пальмового жира в рационах зверей.

Пример 2. После завершения формирования зимнего волосяного покрова и убоя подопытных зверей в декабре (Пример 1), первичной обработки полученных шкурок изучали морфологическое строения волосяного покрова (табл. 2). Были взяты пробы волос с кожевой тканью на огузке в области хвоста на шкурках самцов каждой группы, имеющих одинаковую среднюю живую массу в период выращивания. Измерили толщину кожевой ткани на основных топографических участках шкурок: хребет, бок и огузок.

При изучении морфологического строения волосяного покрова на шкурках молодняка норок, получающего в период формирования зимнего волосяного покрова (октябрь-ноябрь) в рационе новую нетрадиционную кормовую добавку сухого пальмового жира, не выявили значимых различий между группами.

Волосяной покров на шкурках соответствовал селекционируемому типу норок в зверохозяйстве. Соотношение длины остевых и пуховых волос в группах было практически одинаковым и составило: 1,51-1,54, а разница в длине остевых и пуховых волос составила: 5,3-5,5 мм. Коэффициент мягкости волосяного покрова, рассчитанный по отношению толщины к длине стержня остевых волос [9], также был практически одинаковым и составил в группах 0,03 и 0,04 мкм/мм. На шкурках опытной группы отмечена тенденция увеличения толщины кожевой ткани на боку и хребте на 12,2% и 6,6%, соответственно, в сравнении с контрольной группой, что должно положительно сказаться на механических свойствах шкурок таких, как пластичность, растяжимость и прочность.

Список литературы:

1. Балакирев Н.А. Отбор пушных зверей по эволюционно несвойственным видам кормов и низкопротеиновому кормлению // Вестник ВОГиС, 2007. -Том 11. -№1. -С. 212-220.

2. Берестов В.А. Лабораторные методы оценки состояния пушных зверей. Петрозаводск: Карелия, 1981. -151 с.

3. Глазко Т.Т., Дубицкий С.Е., Косовский Г.Ю. Частоты встречаемости цитогенетических аномалий в клетках крови крупного рогатого скота разных направлений продуктивности при действии низких доз ионизирующего излучения // Сельскохозяйственная биология. - 2007. - Т. 42. - №6. - С. 58-62.

4. Глазко Т.Т., Глазко В.И., Зубалий A.M., Чугреев М.К., Ткачева И.С. Способ определения выраженности геномной стабильности (нестабильности), генетической изменчивости в группах, популяциях рыб и у отдельных их особей. Заявка №2014144153. Зарегистрировано в гос.реестре изобретений 27.05.2016. Бюл. №15. - 6 с.

5. Косовский Г.Ю., Лоенко Н.Н., Куликов В.Н., Люднов И.П. Способ оценки геномной стабильности, генетической изменчивости в популяциях самок норок. Заявка №2021125032. Зарегистрировано в гос.реестре изобретений 23.08.2021. Опубликовано 26.05.2022. Бюл. №15. - 6 с.

6. Крюков В.И., Власова Е.Ю. Влияние гиповитаминоза на частоту микроядер в эритроцитах периферической крови индейки домашней (Meleagris gallopavo) // Биология в сельском хозяйстве. - 2019. - №3 (24). -С. 2-9.

7. Лоенко Н.Н., Куликов В.Н., Люднов И.П. Оценка физиологического состояния организма стандартной черной норки (neovison vison) в различные биологические периоды // Международный вестник ветеринарии. - 2021. -№2. -С. 122-125.

8. Лоенко Н.Н., Куликов В.Н., Люднов И.П., Косовский Г.Ю. Использование пальмового жира в кормлении молодняка норок // Международный вестник ветеринарии. - 2022. - №1 - С. 100-103.

9. Тинаев Н.И., Балакирев Н.А. Основы товароведения и первичная обработка пушно-мехового сырья. - М.: Издательско-полиграфический отдел ФГБОУ ВПО МГАВМиБ, 2012.- 165 с.

Изобретение относится к области биотехнологии и представляет собой способ оценки стабильности генома молодняка норок, выращиваемого для получения шкурок, при использовании в рационах новой нетрадиционной кормовой добавки - сухого пальмового жира, включающий использование микроядерного теста - определение частоты встречаемости эритроцитов, содержащих микроядра в периферической крови молодняка норок, устанавливающий зависимость между этим показателем и фактором кормления, физиологическим состоянием клинически здоровых животных данного направления продуктивности, позволяющий повысить результативность оценки влияния сухого пальмового жира на продуктивные показатели молодняка норок. При пользовании в рационе молодняка норок нетрадиционной кормовой добавки - сухого пальмового жира в период формирования зимнего волосяного покрова (в октябре-ноябре) установлено, что повышение частоты встречаемости эритроцитов, содержащих микроядра, в крови самцов в возрасте 7 месяцев до среднего уровня 14,6±3,18%о (промилле) связано с изменением состава рациона, коррелирует с большим приростом живой массы при сохранении морфофизиологических признаков и направлено на реализацию продуктивности молодняка - увеличение площади и качества шкурок. 2 табл, 2 пр.

Способ оценки стабильности генома молодняка норок, выращиваемого для получения шкурок при использовании в рационах нетрадиционной кормовой добавки - сухого пальмового жира, включающий использование микроядерного теста - определение частоты встречаемости эритроцитов, содержащих микроядра, в периферической крови молодняка норок, при этом увеличение частоты встречаемости эритроцитов, содержащих микроядра, в крови самцов в возрасте 7 месяцев выше уровня 7,7±1,84%о (промилле) указывает на нестабильность генома молодняка норок, выращиваемого для получения шкурок при использовании в рационах нетрадиционной кормовой добавки - сухого пальмового жира.