1,3-Диоксо-N,N'-дифенилизоиндолин-2-карбоксимидамид, способ его получения и анальгезирующее средство Российский патент 2023 года по МПК C07D209/48 A61K31/4035 A61P29/00 

Изобретение относится к области органической и медицинской химии, а именно к 1,3-диоксо-N,N'-дифенилизоиндолин-2-карбоксимидамиду формулы I. Изобретение также относится к способу получения соединения формулы I и средству на его основе.

В научно-технической литературе описан метод получения 2-(фенил(фенилимино)метил)изоиндолин-1,3-диона (IV), который осуществляют взаимодействием N-фенилбензолкарбоксимидамида (II) с ангидридом фталевой кислоты (III) при кипячении в о-ксилоле в течение 4 часов [Патент РФ 2 768 824 С1, Труханова Ю.А., Колесник Д.А., Яковлев И.П. и др./2-(фенил(фенилимино)метил)изоиндолин-1,3-дион и способ его получения]:

Описан метод получения N-фталоилгуанидинов (VIII), осуществляемый взаимодействием замещенных изонитрилов (VI) с N-хлорфталимидом (VII) и п-анизидином (VII) в среде ацетонитрила с добавлением в качестве катализатора триэтиламина. Реакция протекает в течение 2-х часов при температуре окружающей среды [Demjén A, Angyal А, Wölfling J, Puskás LG, Kanizsai I / One-pot synthesis of diverse N,N'-disubstituted guanidines from N-chlorophthalimide, isocyanides and amines via N-phthaloyl-guanidines // Org Biomol Chem. 2018, Vol.16, No. 12, P.2143-2149. DOI: 10.1039/C7OB03109B]:

Из патентной и научно-технической литературы не выявлены ни структура нового, заявляемого авторами соединения, ни способ синтеза, ни его биологическая активность.

Задачей предполагаемой группы изобретений является создание нового, неописанного в литературе соединения - 1,3-диоксо-N,N'-дифенилизоиндолин-2-карбоксимидамида формулы I, что позволит расширить ассортимент потенциальных анальгезирующих средств.

Техническим результатом, на решение которых направлена группа изобретений, является разработка простого способа получения нового соединения I, которое потенциально может быть использовано в медицине в качестве анальгезирующего средства.

Согласно разработанному способу получения соединения формулы I, взаимодействие дифенилгуанидина (IX) с фталевым ангидридом (III) осуществляется по схеме:

Смесь дифенилгуанидина (IX) и ангидрида фталевой кислоты (III) кипятят в толуоле в течение 2-х часов, затем отгоняют растворитель на роторно-пленочном испарителе, остаток, являющийся целевым продуктом, перекристаллизовывают из ацетона.

Способ получения 1,3-диоксо-N,N'-дифенилизоиндолин-2-карбоксимидамида (I) изучен и проведен в лабораторных условиях на стандартном товарном сырье.

Пример 1. Получение 1,3-диоксо-N,N'-дифенилизоиндолин-2-карбоксимидамида (I).

В плоскодонную колбу объемом 250 мл помещают 0,5 г (2,4 ммоль) дифенилгуанидина (IX), 50 мл толуола и добавляют 0,42 г (2,8 ммоль) ангидрида фталевой кислоты (III). Реакционную смесь кипятят в течение 2-х часов, затем растворитель упаривают досуха на роторно-пленочном испарителе. Полученный осадок перекристаллизовывают из ацетона.

Продукт почти белого цвета, выход составляет 0,56 г, 69,0% от теоретического из расчета на дифенилгуанидин (IX).

Температура плавления 164-166°С. Хроматографическая однородность целевого продукта подтверждалась хроматографированием раствора его в этаноле с использованием в качестве элюента смесь этилацетат-гексан (3:4). R_f=0,56. Состав синтезированного соединения подтвержден элементным анализом. Брутто-формула: C₂₁H₁₅N₃O₂. Вычислено %: С - 73.89; Н - 4.43; N -12.31. Найдено %: С-73.81; Н-4.47; N- 12.29.

Строение синтезированного вещества было доказано физико-химическими методами идентификации органических соединений: спектроскопией ЯМР ¹Н, ¹³С и масс-спектрометрией.

В спектре ЯМР ¹Н соединения I в ДМСО-d₆ (400,13) МГц присутствуют сигналы протонов бензольных колец дифенилгуанидина δ 7.75 (d, J=8.0 Гц, 2Н), 7.37 (t, J=7.8 Гц, 2Н), 7.16 (t, J=7.7 Гц, 2Н), 7.08 (t, J=7.4 Гц, 1Н), 6.90 (t, J=7.4 Гц, 1Н), 6.76 (d, J=7.4 Гц, 2Н), протон группы -NH- 9.79 (s, 1Н), а также сигналы протонов фталевого ангидрида 7.90 (m, 4Н) (табл. 1, фиг. 1).

Спектр ЯМР ¹³С соединения I характеризуется сигналами ядер углерода бензольных колец (140.01, 135.86, 135.64, 131.07, 129.40, 129.16, 124.49, 123.51, 123.33, 121.24, 118.88, 118.81 м.д.), амидных атомов углерода фталимидного цикла (165.77 м.д.) и атома углерода имино группы (148.01 м.д.) (табл. 2, фиг. 2).

Масс-спектрометрия MS-ESI: m/z [М+Н]⁺ вычислено для C₂₁H₁₅N₃O₂: 342,36; найдено: 342,24.

При исследовании острой токсичности и биологической активности соединения I, все эксперименты на животных были проведены в соответствии с Решением Совета Евразийской экономической комиссии от 3 ноября 2016 г. №81 «Об утверждении Правил надлежащей лабораторной практики Евразийского экономического союза в сфере обращения лекарственных средств» и Национальным стандартом Российской Федерации ГОСТ Р-53434-2009 «Принципы надлежащей лабораторной практики».

Все опытные и контрольные животные были взяты из одного привоза и прошли карантин в течение 14 суток. Лабораторных животных содержали в стандартных условиях центра экспериментальной фармакологии. Все проводимые манипуляции с лабораторными животными были рассмотрены и одобрены на заседании биоэтической комиссии ФГБОУ ВО СПХФУ Минздрава России.

Пример 2. Острая токсичность 1,3-диоксо-N,N'-дифенилизоиндолин-2-карбоксимидамида (I).

Определение острой токсичности соединения I проводили на белых аутбредных мышах самцах массой 20±2 г. Соединение I вводили однократно, внутрибрюшинно в интервале доз от 700 до 1500 мг/кг в виде суспензий в смеси диметилсульфоксид (ДМСО): вода для инъекций (1:5) с использованием в качестве стабилизатора образующейся суспензии гидроксиэтилированного сорбитана - твин-80. Выживаемость животных определяли, наблюдая за ними через 24 и 48 ч от момента инъекции. Наблюдение за животными осуществляли в течение 72 ч. Регистрировали развитие основных симптомов и время гибели животных. Экспериментальная среднелетальная доза (LD₅₀) рассчитана с использованием инсталлированного программного обеспечения «STATISTICA 7.0», которое использует для расчета LD₅₀ метод наименьших квадратов. Токсичность соединения I составила 1400±10 мг/кг. Согласно классификации Сидорова К.К., соединение I относится к классу 5 «практически нетоксично».

Пример 3. Изучение анальгезирующей активности 1,3-диоксо-N,N'-дифенилизоиндолин-2-карбоксимидамида (I).

Для моделирования уксуснокислых «корчей» использовали белых аутбредных мышей-самцов массой 20±2 г., из которых были сформированы 3 группы по 5 особей в каждой. Судороги у животных вызывали при помощи внутрибрюшинного введения 0.5% раствора уксусной кислоты. Соединение I вводили внутрибрюшинно первой группе в дозе 100 мг/кг за 40 минут до начала эксперимента в виде суспензии в смеси диметилсульфоксид (ДМСО): вода для инъекций (1:5) с использованием в качестве стабилизатора образующейся суспензии гидроксиэтилированного сорбитана - твин-80. Второй группе за 40 минут до начала эксперимента внутрибрюшинно вводили препарат сравнения - метамизол натрия, в виде раствора для инъекций в дозе 168.57 мг/кг. Особям контрольной группы внутрибрюшинно вводили только раствор 0.5% уксусной кислоты. Регистрировали время начала судорог и их количество в течение 20 минут. Анальгезирующую активность исследуемого соединения оценивали по достоверному уменьшению числа корчей в получавшей препарат группе относительно контрольной группы. Показателем эффективности являлся коэффициент угнетения болевой реакции (УБР), который рассчитывался по формуле:

Исследование показало, что соединение I обладает выраженной анальгезирующей активностью, действуя при боли, вызванной химическими раздражителями-альгогенами (модель перитовисцеральной боли). Исследуемое соединение находится на одном уровне с препаратом сравнения. Результаты анальгезирующей активности представлены в табл.3. оценки

Изобретение относится к области органической и медицинской химии, а именно к 1,3-диоксо-N,N'-дифенилизоиндолин-2-карбоксимидамиду формулы I. Изобретение также относится к способу получения соединения формулы I и анальгезирующему средству на его основе. Способ получения 1,3-диоксо-N,N'-дифенилизоиндолин-2-карбоксимидамида формулы I осуществляют путем кипячения смеси дифенилгуанидина и ангидрида фталевой кислоты при мольном соотношении 1:1,2, соответственно, в толуоле в течение 2-х часов, растворитель отгоняют, остаток целевого продукта перекристаллизовывают из ацетона. Технический результат - соединение 1,3-диоксо-N,N'-дифенилизоиндолин-2-карбоксимидамида, обладающее анальгезирующей активностью. 3 н.п. ф-лы, 2 ил., 3 табл., 3 пр.

1. 1,3-Диоксо-N,N'-дифенилизоиндолин-2-карбоксимидамид формулы I

2. Способ получения 1,3-диоксо-N,N'-дифенилизоиндолин-2-карбоксимидамида формулы I по п. 1, заключающийся в том, что смесь дифенилгуанидина и ангидрида фталевой кислоты при мольном соотношении 1:1,2 соответственно кипятят в толуоле в течение 2-х часов, растворитель отгоняют, остаток целевого продукта перекристаллизовывают из ацетона.

3. Анальгезирующее средство, отличающееся тем, что включает 1,3-диоксо-N,N'-дифенилизоиндолин-2-карбоксимидамид формулы I по п. 1 в качестве активного вещества.