Способ оценки степени тяжести нарушений функций печени у крупного рогатого скота Российский патент 2023 года по МПК G01N33/64 G01N33/50 G01N33/49 A61D99/00 

Изобретение относится к ветеринарии и может быть применено в диагностике нарушений функционального состояния печени у крупного рогатого скота.

Вопросы этиологии, патогенеза, диагностики, лечения и профилактики болезней печени у животных закономерно являются приоритетным направлением ветеринарной науки. Это обусловлено тем, что гепатопатии имеют мультифакторную природу, широко распространены в хозяйствах и наносят значительный экономический ущерб, складывающийся из снижения продуктивности скота, рождения слабого, зачастую нежизнеспособного молодняка и ранней выбраковки животных.

Известен способ оценки функционального состояния печени, где производят оценку лабораторных данных, характеризующих состояние органа: интенсивность процессов липопероксидации (ДК, МДА), функциональную активность (БИЛ, АлАТ, Рж, ЦП) и состояние гистоструктур органа (МИТ, ГЕП, СТ); определяют фазу патологического процесса. Для того показатели сравниваются с их табличными значениями, полученными на основе математического анализа зависимостей, отображающих отдельные параметры реального состояния органа (патент РФ №2629202, кл. G01N 33/48, 2017 г.).

Известен способ оценки степени тяжести нарушений функций печени у детей путем определения биохимических показателей крови, таких как: глюкоза, лактат, альбумин, церулоплазмин, фибриноген, протромбин по Квику, трансферрин, аланинаминотрансферазы, аспартатаминотрансферазы, коэффициент де Ритиса, аммиак, мочевина, билирубин общий, холестерин. Оценивают степень тяжести функциональных нарушений печени по 5-ти бальной системе, в которой каждому значению показателя присваивают соответствующий балл. Затем суммируют эти баллы. При сумме баллов 56-54 делают заключение об отсутствии нарушений функций печени, при сумме 53-43 - о незначительном нарушении, при сумме 42-29 - об умеренном нарушении, при сумме 28-6 - о тяжелом нарушении, а при сумме 2-0 - об абсолютном нарушении (патент РФ №2473904, кл. G01N 33/39, 2013 г.).

Известен способ патолого-морфологической диагностики токсической гепатодистрофии эмбрионального происхождения у крупного рогатого скота и свиней, заключающийся в том, что вскрывают трупы животных, извлекают органокомплекс, исследуют печень. Токсическую гепатодистрофию эмбрионального происхождения диагностируют путем выявления на висцеральной поверхности печени рубцов разроста фиброзной ткани в местах разрушения ее паренхимы в период развития плодов (патент РФ №2354332, кл. A61D 99/00, 2009 г.).

Недостатком приведенных способов является отсутствие возможности их применения для прижизненной оценки степени тяжести нарушений функций печени у крупного рогатого скота. Кроме того, отсутствует качественная оценка степени эндотоксикоза и уровня липопероксидации, как реакции организма на развитие патологии печени или эффективность лечения.

Также известен способ ранней диагностики гепатозов у лакирующих коров, описанный в статье «Практические аспекты ранней диагностики гепатозов у лакирующих коров», авторы: Калюжный И.И., Степанов И.С., Солякина А.А. (журнал «Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана». - 2016. - Т. 226. - №2. - С. 72-76 - аналог). В указанном способе для выявления степени распространения гепатозов проводится диспансерное исследование дойного стада и скрининг биохимических маркеров этой патологии среди поголовья. Биохимические исследования включают анализ параметров крови животных, идентифицирующих нарушения обмена веществ у лакирующих коров: каротин, общий белок, щелочную фосфатазу, холестерин, энзимы - АсАТ (аспартамино-трансфераза) и АлАТ (аланинами-нотрансфераза), глюкозу, билирубин. В случаях необходимости подтверждения достоверности диагноза применяется усложненный клинико-биохимический тест-комплекс, объединяющий анализ белковых фракций, резервной щелочности, глюкозы, общих липидов, холестерина, общего билирубина, витамина А и кальция.

Однако данный способ устанавливает факт патологического состояния печени животных только тогда, когда уже определяется значительное повышение этих показателей в крови, поэтому в ветеринарии постоянно ведется поиск доступных для определения ранних признаков развития гепатопатологии у животных.

Наиболее близким к заявляемому техническому решению является способ оценки функционального состояния печени крупного рогатого скота, включающий клинический осмотр животного и биохимическое исследование крови, в сыворотке крови определяют концентрации молекул средней массы (МСМ) при длине волны облучения пробы 254 нм и кетоновых тел. В случае концентрации МСМ выше 0,185 ед. оп. пл. в сочетании с концентрацией кетоновых тел выше или равной 1,033 ммоль/л выявляют патологию функционального состояния печени у крупного рогатого скота (патент РФ №2773414, кл. G01N 33/64, 2022 г. - прототип).

Однако данный способ не позволяет оценить степень тяжести нарушений функций печени у крупного рогатого скота, а устанавливает только факт наличия патологии функционального состояния печени у крупного рогатого скота.

Задачей изобретения является разработка достоверного способа оценки степени тяжести нарушений функций печени у крупного рогатого скота.

Техническим результатом является получение достоверной оценки степени тяжести нарушений функций печени.

Технический результат достигается тем, что в способе оценки степени тяжести нарушений функций печени у крупного рогатого скота, включающий клинический осмотр животного, биохимическое исследование крови с определением в сыворотке крови концентрации молекул средней массы (МСМ) при длине волны облучения пробы 254 нм, согласно изобретению дополнительно в крови определяют уровень малонового диальдегида (МДА) и на основании полученных значений МСМ и МДА делают заключение о степени тяжести нарушений функций печени у крупного рогатого скота: при концентрации в крови МСМ от 0,185 ед. оп. пл. до 0,250 ед. оп. пл. и МДА от 1,5 мкмоль/л до 2,0 мкмоль/л - незначительное нарушение; при концентрации в крови МСМ от 0,250 ед. оп. пл. до 0,500 ед. оп. пл. и МДА от 2,0 мкмоль/л до 2,5 мкмоль/л - умеренное нарушение; при концентрации в крови МСМ выше 0,500 ед. оп. пл. и МДА выше 2,5 мкмоль/л - тяжелое нарушение.

Новизна заявляемого способа обусловлена тем, что за счет совокупности биохимических маркеров, обеспечивается возможность получения достоверной оценки степени тяжести нарушений функций печени у крупного рогатого скота, что позволяет подобрать адекватное лечение и повысить сохранность поголовья.

Признаки, отличающие заявляемое техническое решение от прототипа, направлены на достижение технического результата и не выявлены при изучении патентной и научно-технической литературы в данной и смежной областей науки и техники и, следовательно, соответствуют критерию «изобретательский уровень».

Предложенный способ соответствует критерию «промышленная применимость» поскольку может быть использован в ветеринарии для диагностики нарушений функционального состояния печени у крупного рогатого скота.

Способ оценки степени тяжести нарушений функций печени у крупного рогатого скота осуществляют следующим образом.

При оценке степени тяжести патологических процессов в печени крупного рогатого скота, помимо клинического осмотра животного, включающего термометрию, оценку состояния кожного покрова и слизистых, пальпацию и аускультацию печеночной зоны, а также биохимического исследования крови с определением концентрации известных гепатоиндикаторных маркеров (АлАТ, АсАТ, ЩФ, общий билирубин, холестерин и общий белок) осуществляют дополнительное определение уровня эндогенной интоксикации (по концентрации МСМ в сыворотке крови при длине волны 254 нм) и степени оксидативного стресса (по концентрации в крови МДА, являющимся продуктом свободно-радикального окисления липидов) в организме животного. На основании полученных значений МСМ и МДА делают заключение о степени тяжести нарушений функций печени у крупного рогатого скота: при концентрации МСМ выше 0,185 ед. оп. пл. и МДА выше 1,5 мкмоль/л крови - незначительное нарушение; при концентрации МСМ выше 0,250 ед. оп. пл. и МДА выше 2,0 мкмоль/л крови - умеренное нарушение; при концентрации МСМ выше 0,500 ед. оп. пл. и МДА выше 2,5 мкмоль/л крови - тяжелое нарушение.

Пример конкретного осуществления способа оценки степени тяжести нарушений функций печени у КРС

Для доказательства эффективности заявляемого способа были проведены научно-производственные исследования в животноводческих хозяйствах Краснодарского края.

Степень тяжести нарушений функций печени у крупного рогатого скота была оценена предлагаемым способом у 300 больных животных. Из которых было сформировано три группы-аналогов по 100 животных в каждой: 1 - контрольная, в которой был использован общепринятый способ лабораторной оценки функционального состояния печени животных путем измерения в сыворотке крови АлАТ, АсАТ, ЩФ, общего билирубина, холестерина и общего белка; 2 - опытная, в ней проводилась диагностика по прототипу; 3 - опытная, где диагностику осуществляли в соответствии с заявляемым способом. Патологию печени подтверждали ультразвуковым исследовании гепато-билиарной системы животного. Результаты исследований, обосновывающие эффективность заявляемого способа представлены в таблице.

Наиболее наглядными являются следующие примеры.

Пример 1. Корова №5837, при клиническом осмотре установлено - снижение жвачки и руминации, угнетение, температура в норме, состояние кожного покрова и слизистых не изменены, болезненность и увеличение печеночной зоны отсутствует. При биохимическом исследовании крови зарегистрировано, что практически все определяемые показатели находились в пределах референстных значений, только содержание общего белка было незначительно снижено: АлАТ - 33 Ед/л; АсАТ - 98 Ед/л; ЩФ - 138 Ед/л; общий билирубин - 4,8 мкмоль/л; холестерин - 5,9 ммоль/л; общий белок - 71 г/л. По клиническим признакам и известным биохимическим показателям крови нарушение функций печени у коровы не диагностировано. При лабораторных исследованиях крови концентрация МСМ в сыворотке составила 0,207 ед. оп. пл., а МДА - 1,69 мкмоль/л крови. При ультразвуковом исследовании гепатобилиарной системы животного выявлено, что эхоструктура тканей печени повышена, структура паренхимы мелкоочаговая. Заключение: у коровы установлено незначительное нарушение функционального состояния печени.

Пример 2. Корова №12167, при клиническом осмотре установлено - снижение жвачки и руминации, угнетение, температура в норме, кожный покров тусклый, взъерошенный, слизистые слегка желтушные, болезненность печеночной зоны отсутствует, гепатомегалия. При биохимическом исследовании крови зарегистрировано, что содержание общего белка снижено (68 г/л), АлАТ - повышено (39 Ед/л), холестерина - повышено (6,7 ммоль/л), остальные показатели в норме (АсАТ - 101 Ед/л, ЩФ - 142 Ед/л; общий билирубин - 4,6 мкмоль/л). При лабораторных исследованиях крови концентрация МСМ в сыворотке составила 0,268 ед. оп. пл., а МДА - 2,13 мкмоль/л крови. При ультразвуковом исследовании гепатобилиарной системы животного выявлено увеличение размеров печени, края закруглены, контур нечеткий, структура паренхимы мелкоочаговая. Заключение: у коровы установлено умеренное нарушение функционального состояния печени.

Пример 3. Бык кличка «Барон», при клиническом осмотре установлено - снижение жвачки и руминации, угнетение, температура повышена, кожный покров тусклый, взъерошенный, ломкий, слизистые желтушные, гепатомегалия, болезненность печеночной зоны. При биохимическом исследовании крови зарегистрировано, что содержание общего белка снижено (63 г/л), АлАТ - повышено (41 Ед/л), АсАТ - повышено (128 Ед/л), холестерина - повышено (7,3 ммоль/л), ЩФ - повышено (211 Ед/л), общий билирубина - повышено (10,2 мкмоль/л). При лабораторных исследованиях крови концентрация МСМ в сыворотке составила 0,928 ед. оп. пл., а МДА - 3,14 мкмоль/л крови. При ультразвуковом исследовании гепатобилиарной системы животного выявлено увеличение размеров печени, края закруглены, контур нечеткий, структура паренхимы мелкоочаговая, гиперэхогенность стенки желчного пузыря, гиперэхогенная взвесь в желчном пузыре. Заключение: у быка установлено тяжелое нарушение функционального состояния печени.

Таким образом, использование заявляемого способа позволяет достичь заданный технический результат: повысить точность диагностики состояния печени крупного рогатого скота, что даст возможность назначить адекватное лечение и предотвратить гибель животного.

Изобретение относится к медицине, а именно к ветеринарии, и может быть использовано для оценки степени тяжести нарушений функций печени у крупного рогатого скота. Проводят клинический осмотр животного, биохимическое исследование крови с определением в сыворотке крови концентрации молекул средней массы (МСМ) при длине волны облучения пробы 254 нм. Дополнительно в крови определяют уровень малонового диальдегида (МДА). На основании полученных значений МСМ и МДА делают заключение о степени тяжести нарушений функций печени у крупного рогатого скота. При концентрации в крови МСМ от 0,185 до 0,250 ед. оп. пл. и МДА от 1,5 до 2,0 мкмоль/л - незначительное нарушение. При концентрации в крови МСМ от 0,250 до 0,500 ед. оп. пл. и МДА от 2,0 до 2,5 мкмоль/л - умеренное нарушение. При концентрации в крови МСМ выше 0,500 ед. оп. пл. и МДА выше 2,5 мкмоль/л - тяжелое нарушение. Способ обеспечивает возможность получения достоверной оценки степени тяжести нарушений функций печени у крупного рогатого скота за счет определения в крови концентрации молекул средней массы и малонового диальдегида. 1 табл., 3 пр.

Способ оценки степени тяжести нарушений функций печени у крупного рогатого скота, включающий клинический осмотр животного, биохимическое исследование крови с определением в сыворотке крови концентрации молекул средней массы (МСМ) при длине волны облучения пробы 254 нм, отличающийся тем, что дополнительно в крови определяют уровень малонового диальдегида (МДА) и на основании полученных значений МСМ и МДА делают заключение о степени тяжести нарушений функций печени у крупного рогатого скота: при концентрации в крови МСМ от 0,185 до 0,250 ед. оп. пл. и МДА от 1,5 до 2,0 мкмоль/л - незначительное нарушение; при концентрации в крови МСМ от 0,250 до 0,500 ед. оп. пл. и МДА от 2,0 до 2,5 мкмоль/л - умеренное нарушение; при концентрации в крови МСМ выше 0,500 ед. оп. пл. и МДА выше 2,5 мкмоль/л - тяжелое нарушение.