СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ КОРОВ ОТ ФАСЦИОЛЕЗА Российский патент 2024 года по МПК A61K31/00 

Изобретение относится к области ветеринарной медицины и предназначено для лечения фасциолеза крупного рогатого скота (КРС) с использованием препарата Ниацид-плюс в дозе 1 мл на 50 кг массы тела животного (подкожно) и меланинсодержащего препарата Мелавит[1] в дозе 30,0 мг (в пересчете на меланин) на 50 кг массы тела перорально с концентрированным кормом двукратно с интервалом 3 суток. Предлагаемый способ существенно повышает эффективность противофасциолезных мероприятий в связи с тем, что меланины, применяемые совместно с антигельминтикомниацид-плюс, обладают гепатопротекторным и иммуностимулирующим действием [2].

Как известно, фасциолез широко распространен в России и других странах мира. Экономический ущерб от болезни огромный и складывается из снижения прироста массы тела и удоев молока. У инвазированных животных снижается общая резистентность, повышается восприимчивость к патогенным организмам, снижается эффективность вакцинации.

В связи с изложенным, решение проблемы фасциолеза является объектом внимания исследователей РФ. Однако, как отмечается в ряде публикаций последнего времени, эпизоотическая ситуация по фасциолезу КРС в условиях Центрального Черноземного района Российской Федерации остается недостаточно изученной. В хозяйствах Московской, Рязанской, Калужской, Курской и Костромской областей установлены высокие показатели зараженности крупного рогатого скота трематодами. Экстенсивность инвазии при фасциолезе и парамфистоматозах составляет 3,5 – 41,0 % и 5-7,5 – 47,0 % соответственно и зависит от возраста животных [3,4].У крупного рогатого скота при фасциолёзе возбудитель (F.hepatica) часто поражает печень, селезёнку, плевральную полость, подкожную клетчатку и др., что приводит к вторичным иммунодефицитным состояниям.

С учетом изложенного и известной токсичности существующих антигельминтных препаратов в последнее время ведутся поиски новых подходов к лечению фасциолеза. Суть этих подходов заключается в использовании имеющихся антигельминтных препаратов одновременно с препаратами, которые способствуют повышению иммунитета и восстановлению клеток печени. Необходимость стимуляции резистентности организма инвазированных животных становится особенно востребованной в последнее время в связи с появлением форм паразитов, устойчивых к рекомендуемым дозам лекарственных средств. Вынужденное применение повышенных доз лекарств для достижения терапевтического эффекта становится дополнительной токсической нагрузкой на организм животного и поэтому ясно, что иммунокоррекция способствует оптимизации процесса дегельминтизации.

Известен способ лечения КРС от фасциолеза путем однократного индивидуального перорального введения с помощью шприца-дозатора препарата Альбендазол-суспензия 10% в дозе 5 мл на 50 кг массы тела животного и иммуномодулятора липотон-5000 внутримышечно трехкратно с интервалом 48 часов в дозе 0,02 мл/кг массы тела [5]. Однако этот способ лечения фасциолеза КРС обладает следующими недостатками: способ перорального введения с помощью шприца-дозатора относительно большого количества альбендазола коровам – процесс трудоемкий и неточный; стоимость и трудоемкость лечения относительно высокие в связи с необходимостью трехкратного внутримышечного введения средства липотон.

Другой известный способ терапии фасциолеза КРС (бычков) основан на использовании политрема и иммуномодулятора риботана по следующей схеме: антигельминтикполитрем назначают в дозе 0,2 г/кг массы тела животного перорально с концентрированным кормом однократно, риботан вводят подкожно в область средней трети шеи в течение 5 дней подряд в дозе 5,0 мл на голову[6].Способ обладает рядом недостатков: пятикратное введение иммуномодулятора способствует повышению стоимости работ, фиксация и инъекции сопровождаются стрессом животных.

Известен также способ борьбы с фасциолезом коров, в ходе которого совместно с противопаразитарным препаратом фаскоцид применяют иммуномодуляторронколейкин по следующей схеме: фаскоцид в дозе 1 г на 10 кг массы тела животного перорально с концентрированным кормом однократно, ронколейкин в дозе 5000 ME на один килограмм массы тела подкожно в области средней трети шеи двукратно с интервалом 72 часа [7].Недостатком этого известного способа борьбы с фасциолезем является то, что антигельминтный препарат фаскоцид, выпускается в виде гранул (фасовка по 0,5 и 1 кг) и в виде таблеток (упаковка по 25-100 таблеток). Поэтому в современных условиях промышленного скотоводства точное дозирование препарата большому поголовью затруднено, при неравномерном перемешивании препарата с кормом высока вероятность того, что животные будут получать разные дозы. Существенным недостатком известного способа является также высокая стоимость ронколейкина.

Наиболее близким техническим решением является способ лечения крупного рогатого скота от фасциолеза путем применения комплексного противопаразитарного препарата Ниацид-плюс, разработанного в ФГБОУ ВО - МВА имени К.И. Скрябина[8,9].В соответствии с Инструкцией по применению препарат вводят животным с соблюдением известных правил асептики в области шеи или предплечья внутримышечно или подкожно в дозе 1 мл на 50 кг массы тела. Существенным недостатком этого способа лечения КРС от фасциолеза является то, что ниацид-плюс, как и все известные антигельминтики, оказывает заметное токсическое и угнетающее иммунную систему инвазированных животных действие.

Технический результат изобретения - повышение эффективности лечения коров от фасциолеза за счет снижения токсического действия антигельминтика и интенсификации прихода в норму обменных процессов инвазированных животных.

Для достижения поставленной цели предлагается способ лечения фасциолеза коров, путем совместного с Ниацид-плюс применения меланинов гречихи - Мелавит по следующей схеме: инъекция Ниацид-плюс подкожно однократно в дозе 1 мл на 50 кг массы тела животного; меланины перорально с питьевой водой или концентрированным кормом двукратно с интервалом 3 суток в дозе 30 мг меланина на 50 кг массы тела.

Ниацид-плюс - комплексный противопаразитарный препарат, содержащий натуральные авермектины В1аи В1b(абамектин) и клозантел [8]. Механизм действия препарата на фасциол связан с содержанием в его составе действующего вещества (ДВ) из группы салициланилидов (клозантела) и заключается в нарушении энергетического обмена путем ингибирования процессов фосфорилирования и переноса электронов у трематод, снижении активности фумаратредуктазы и сукцинатдегидрогиназы, что приводит к гибели паразитов.

Меланиныполучают по ТУ №9169-001-35231285-13, под названием – «Экстракт лузги гречихи «Мелавит» от 27.06.2013 г., содержит меланины растения гречихи, обладающие широким спектром биологической активности и участвующие в обменных процессах живых организмов, оказывая гепатопротекторное, иммуномодулирующее и антиоксидантное действие [1,2].

Однако следует отметить, что применение меланинов (Мелавита) совместно с препаратом ниацид-плюс при лечении фасциолеза не известно. Кроме того, дегельминтизация препаратом ниацид-плюс в соответствии Инструкцией по применению не предусматривает совместное применение каких-либо других препаратов, в т.ч. меланинов.

Результат изобретения достигается тем, что в предлагаемом способе антигельминтный препарат ниацид-плюс вводится животным в точной дозировке индивидуально с учетом массы тела, впервые вместе с ниацид- плюс применяют Мелавит, содержащий меланины гречихи, обладающие гепатопротекторным и иммуномодулирующим действием.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Оценку терапевтической эффективности известного и предлагаемого способов лечения коров от фасциолеза проводили на животных хозяйства АОЗТ Ивановское, Ступинского района Московской области. Из 30 голов больных фасциолезом коров было сформировано 3 группы: первая группа из 6 голов контрольнаябез лечения;вторая группа из 12 голов получала ниацид-плюс подкожнооднократно в дозе 1,0 мл/50 кг массы тела; третья группа из12 голов получала ниацид-плюс однократно в дозе 1,0 мл/50 кг массы тела и препарат меланинов - Мелавит с концентрированным кормом двукратно с интервалом 3 суток в дозе 30 мг меланина на 50 кг массы тела животного. Экстенсинвазированность (ЭИ) и интенсинвазированность (ИИ) определяли путем исследования фекалий коров флотационным методом Фюллеборна и флотационно-седиментационным методом Н.В. Демидова.Для оценки противопаразитарной эффективности препаратов использовали показатели экстенсэффективности и интенсэффективности. Экстенсэффективность (ЭЭ) - процент животных (от числа дегельминтизированных), полностью освободившихся от гельминтов после проведения дегельминтизации. Интенсэффективность (ИЭ) - процент вышедших после дачи препарата гельминтов по отношению к общему количеству их до дегельминтизации.

Как видно из данных табл.1, предлагаемый способ лечения коров от фасциолеза методом совместного применения противопаразитарного препарата ниацид-плюс и меланинов растения гречихи, обладает существенными преимуществами перед известным аналогом.

Так, ЭИ коров в первой группе (контроль) в начале опыта составляет 100%, а ИИ составляет 94,7 ±8,7 яиц F. Hepatica в 1 г фекалий. Изучаемые показатели в течение опыта практически не изменились и к 28 дню с начала лечения составили 98,5 ±9,3 экз. яиц в 1 г фекалий при ЭИ 100%. Животные второй группы, которые получали только препарат ниацид-плюс, характеризовались следующими исходными показателями: ИИ составляла 89,4 ±8,3 экз. в 1 г фекалий, ЭИ - 100%.

Таблица 1. – Сравнительная эффективность методов лечения фасциолеза коров

Препарат, группа животных Количество больных животных, голов Количество яиц фасциол в 1 г фекалий (ИИ, экз.) ИЭ, % ЭЭ, % До
лечения После До
лечения После На 14 день лечения Контроль 6 6 94,7 ±8,7 - - - Ниацид - плюс 12 4 89,4 ±8,3 41,3 ±3,8* 53,80 66,67 Ниацид-плюс и Мелавит 12 3 78,6 ±7,5 28,9 ±3,4* 63,23 75,00 На 21 день лечения Контроль 6 6 101,4 ±9,7 - - - Ниацид - плюс 12 2 89,4 ±8,3 24,5 ±2,1* 72,59 86,67 Ниацид-плюс и Мелавит 12 2 78,6 ±7,5 11,3±1,4* 85,62 86,67 На 28 день лечения Контроль 6 6 98,5 ±9,3 - - - Ниацид - плюс 12 1 89,4 ±8,3 5,1 ±0,4 94,29 93,33 Ниацид-плюс и Мелавит 12 0 78,6 ±7,5 0 100,00 100,00

*(P≤0,05).

На 14 день опыта в группе животных, леченых ниацидом-плюс, ИИ и ИЭ составляют 41,3 ±3,8 экз. и 53,80% соответственно, те же показатели в группе животных, леченых препаратом ниацид-плюс в сочетании с Мелавитом, составляют 28,9 ±3,4 экз. и 63,23%.

На 21сутки с начала опыта у животных второй опытной группы, получавших антигельминтикниацид-плюс, наблюдаются следующие показатели: ИИ 24,5 ±2,1 экз./г, ИЭ 72,59%. В этот же период у животных третьей группы, получавших ниацид-плюс и меланин, ИИ составляет 11,3±1,4 экз./г фекалий, а ИЭ 85,62%. Как видно, на 21 сутки опыта инвазированность животных, леченых предлагаемым способом, в 2,17 раза ниже по сравнению с известным способом, а ИЭ выше на 13,03%.

На 28 сутки после применения препаратов предлагаемый способ полностью освобождает животных от фасциол, т.е. ЭЭ составляет 100%, в то же время ЭЭ известного способа составляет 93,33%.

Таким образом, разработанный способ лечения коров обеспечивает более высокую терапевтическую эффективность, основанную на удачно выбранном сочетании антигельминтика и биологически активного компонента.

Пример 2.Оценка гематологических, биохимических и иммунобиологических показателей коров при лечении их от фасциолеза.

Приведенные выше данные по эффективности терапии, несомненно, связаны с определенными физиолого-биохимическими изменениями, которые происходят в организме коров в процессе их лечения от фасциолеза. С целью экспериментального обоснования наличия эффекта восстановления и нормализации метаболизма в целом и защитных функций организма инвазированных коров при лечении заявленным способом изучены основные индикаторные показатели крови подопытных животных.

Для исследований образцы крови брали на 21-й и 28-й день после дегельминтизации. Общепринятыми методами определяли количество эритроцитов, гемоглобина, лейкоцитов, содержание белка, активность аланинаминотрансферазы (АЛТ), аспартатаминотрансферазы (АСТ) и щелочной фосфатазы (ЩФ) - на биохимическом анализаторе StatFax 1904. Состояние антиоксидантной системы контролировали по содержанию в крови малоновогодиальдегида (МДА) в реакции с тиабарбитуровой кислотой с помощью спектрофотометра PD – 303UV, белковые фракции – методом электрофоретического фракционирования.

Результаты гематологических исследований представлены в таблице 2, и они показывают, что дегельминтизация способствует увеличению количества эритроцитов, лейкоцитов и гемоглобина в крови подопытных животных. На 21 и 28 сутки с начала лечения концентрация эритроцитов в крови коров контрольной группы увеличилась на 7,02% и 8,77%, те же показатели в крови опытной группы увеличились на 19,28% и 22,81% (P ≤ 0,05). Изменение содержания гемоглобина в крови подопытных коров имеет ту же картину. Это позволяет говорить о положительном влиянии препарата меланинов на кроветворную систему больных фасциолезом коров.

Таблица 2. – Изменение гематологических показателей коров в процессе

лечения их от фасциолеза

показатели До лечения Контроль, группа 1 Опыт, группа 3 Через 21 сутки Через 28 суток Через 21 сутки Через 28 суток Эритроциты, 10^12/л 5,7 ± 0,07 6,1 ± 0,09 6,2 ± 0,08 6,8 ± 0,09* 7,0 ± 0,10* Гемоглобин, г/л 98,3 ± 1,9* 101,4 ± 2,0 100,6 ± 2,1 110,25 ± 1,7* 114,13 ± 1,9* Лейкоциты, 10⁹/л 6,2 ± 0,14 7,3 ± 0,13 7,9 ± 0,16 7,6 ± 0,18* 8,3 ± 0,17* Лимфоциты, % 54,8 ± 4,64 57,6 ± 1,61 61,2 ± 1,47 53,4 ± 1,79 60,7 ± 1,28* Нейтрофилы: % Нейтрофилы палочкоядерные, % 8,7 ± 0,33 7,4 ± 0,30 6,9 ± 0,26 6,4 ± 0,29* 6,1 ± 0,23* Нейтрофилы сегментоядерные, % 19,6 ± 1,25 19,4 ± 1,16 20,9 ± 1,28 22,1 ± 1,72 21,4 ± 1,06 Эозинофилы, % 15,4 ± 1,29 12,7± 0,99 14,6 ± 0,97 10,8 ±1,05* 9,3 ± 0,45*

* (P ≤ 0,05)

Данные табл.2 показывают также возрастание количества лейкоцитов в крови подопытных животных и изменение показателей лейкоцитарной формулы. Особого внимания заслуживает содержание эозинофилов – лейкоцитов, обладающих широким спектром цитотоксических и иммунорегуляторных факторов, обеспечивающих участие клеток в патогенезе паразитарных заболеваний. Содержание эозинофилов в крови инвазированных коров на 21 и 28 сутки после применения препаратов снижается относительно контроля на 14,96% и 36,3% соответственно. Тенденция снижения содержания эозинофилов в процессе освобождения животных от фасциол, несомненно, свидетельствует о восстановлении функций печени за счет совместного действия антигельминтиканиацид-плюс и меланинов. Гепатопротекторные свойства меланинов растения гречихи экспериментально подтверждены в ранее проведенных исследованиях [2]. Результаты, полученные при изучении основных индикаторных биохимических и иммунологических показателей крови коров, (табл.3) показывают существенное влияние процедуры лечения на метаболические процессы организма подопытных животных.

Таблица 3. – Биохимические и иммунологические показатели крови коров при лечении фасциолеза предлагаемым способом

показатели До лечения Контроль, группа 1 Опыт, группа 3 Через 21 сутки Через 28 суток Через 21 сутки Через 28 суток Белок общий, г/л 64,7 ± 1,68 68,5 ± 2,09 67,9 ± 2,14 75,6 ± 2,15* 79,3 ± 2,68* Альбумины, % 30,2 ± 2,06 31,4 ± 1,13 30,5 ± 1,70 36,2 ± 1,32* 37,1 ± 1,60* Глобулины, % 34,4 ± 0,92 37,1 ± 1,82 37,4 ± 1,89 39,6 ± 2,43 42,2± 2,71 АСТ, ЕД/л 83,0 ± 3,24 76,2 ± 4,15 74,8 ± 4,09 63,5 ± 3,17* 58,7 ± 3,04* АЛТ, ЕД/л 69,5 ± 3,11 62,3 ± 2,19 54,7 ± 2,34 46,5 ± 2,83* 41,8 ± 2,50* ЩФ, ЕД/л 64,8 ± 3,08 58,8 ± 2,23 67,5 ± 3,12 60,4 ± 2,85* 51,7 ± 2,48* БАСК, % 57,8 ± 4,68 59,6 ± 5,31 57,4 ± 4,96 68,2 ± 5,01* 74,3 ± 5,33* ЛАСК, мкг/мл 2,9 ± 0,12 3,1 ± 0,12 2,8 ± 0,18 4,4 ± 0,17* 5,6 ± 0,20* МДА, мкМ/л 3,92±0,28 4,40±0,35 3,97±0,24 3,1 ± 0,16 2,82±0,15*

*Достоверное отличие от контроля при P≤0,05

Содержание общего белка в сыворотке крови всех подопытных животных до начала опыта находилось на уровне близком к нижнему пределу физиологической нормы. Этот показатель достоверно не менялся в течение опыта имел величину в пределах 64,7±2,09-67,9±2,14 г/л.

В сыворотке крови животных третьей опытной группы, обработанных препаратами ниацид-плюс и Мелавит, содержание общего белка на 21 и 28 сутки опыта выше контроля на 10,36% и 16,79% соответственно. Анализ данных, касающихся белковых фракций показывает относительно низкое содержание альбуминов в крови животных контрольной группы и возрастание уровня альбуминов и глобулинов в крови опытной группы. Таким образом, у зараженных фасциолезом коров наблюдается нарушение белкового обмена и это свидетельствует о нарушении белоксинтезирующей функции печени. Дегельминтизация новым способом с применением ниацида-плюс и Мелавита способствует снижению патогенного действия фасциол и нормализации метаболизма в целом.

Важнейшим показателем, характеризующим функциональное состояние печени, считается активность аспартатаминотрансферазы (АсАТ) и аланинаминотрансферазы (АлАТ). Из данных табл. 3 видно, что активность ферментов АсАТ и АлАТ в печени животных контрольной группы значительно выше, чем в опытной группе, т.е. лечение коров предлагаемым способом способствует нормализации активности аминотрансфераз и снижению разрушения гепатоцитов. Терапевтическое действие препарата Ниацид-плюс, сопровождающееся тенденцией к нормализации основных биохимических процессов, проявляется также в повышении показателей неспецифической защиты организма коров, инвазированныхфасциолезом (таблица 3). Такие гуморальные факторы естественной резистентности, как бактерицидная активность сыворотки крови (БАСК) и лизоцимная активность сыворотки крови (ЛАСК), после проведения лечения достоверно повышаются. Эти же показатели у контрольных животных остаются без существенных изменений на низком уровне. Позитивное действие комплексного противопаразитарного препарата ниацид-плюс и Мелавит проявляется также в том, что у инвазированныхфасциолезом коров после обработки препаратами достоверно снижается на 21и 28 сутки опыта содержание малоновогодиальдегида в крови на 29,54% и 28,97% соответственно. Согласно общепризнанной в последнее время концепции о роли антиоксидантно-прооксидантных систем в живых клетках это свидетельствует о повышении активности биохимических процессов, связанных с неспецифической резистентностью организма.

Таким образом, новый способ терапии коров при фасциолезе с применением Ниацид-плюс и меланинсодержащего средства Мелавит повышает лечебную эффективность противопаразитарных мероприятий за счет восстановления и нормализации нарушенной белоксинтезирующей функции печени, стимуляции факторов неспецифической резистентности.

Источники информации

1. ТУ №9169-001-35231285-13 Экстракт лузги гречихи «Мелавит» от 27.06.2013 г.

2. Мирзаева, К.М. Протекторные свойства растительных меланинов (Мелавит) /К.М. Мирзаева, Т.И. Мельницкая, М.Н. Мирзаев, Е.В. Бессарабова, Е.И. Молокова // В сборнике: Биотехнология: состояние и перспективы развития. Материалы У111 Московского Международного Конгресса. ЗАО «Эко-биохим-технологии» РХТУ им. Д.И. Менделеева. – 2015. – С. 149-151.

3. Шемякова, С. А. Трематодозы крупного рогатого скота (эпизоотология, диагностика и меры борьбы) в Центральном регионе Европейской части Российской Федерации: диссертация ... доктора Ветеринарных наук: 03.02.11 / С. А. Шемякова //[Место защиты: ФГБОУ ВО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К.И. Скрябина»]. – 2018. – 373 с;

4. Шемякова, С.А. Сезонная динамика парамфистоматозов крупного рогатого скота в Московской и Рязанской обл. / С.А. Шемякова//Ветеринария. – 2011. – № 5. – С. 38-39.

5. Шелякин, И.Д. Изменение показателей крови коров при экспериментальном лечении фасциолеза / И.Д. Шелякин, Л.В. Ческидова // Вестник Воронежского государственного аграрного университета. – 2016. – № 1 (48). – С. 45-50.

6. Биттиров А.М. Интегрированная методика терапии фасциолеза крупного рогатого скота / А.М. Биттиров, С.Ш. Кабардиев, М.Г. Газимагомедов и др//Патент РФ, № 2 584 212, 2016. 05. 20.

7. Беспалова Н.С. Способ лечения фасциолеза коров/ Н.С. Беспалова, Г.А. Востроилова, А.М. Лопатина // Патент РФ, № 2 385 713, 2010.04.10.

8. Мирзаева К.М. Технология получения препарата Ниацид-плюс и его влияние на иммунный статус животных: диссертация ... кандидата биологических: 03.00.23 / К. М.Мирзаева// [Место защиты: ФГБОУ ВО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА им.К.И. Скрябина»]. – 2009. – 142 с.

9. Мирзаева К.М. Эффективность препарата Ниацид-плюс при лечении крупного рогатого скота от гельминтозов / К.М. Мирзаева, Е.Н. Милаев, Н.Г. Гусейнов, Т.И. Мельницкая, А.Х. Манджиев//Ветеринарная медицина. – 2009. – № 1-2. – С.60-64.

Изобретение относится к области ветеринарной паразитологии и заключается в том, что крупному рогатому скоту подкожно вводят препарат Ниацид-плюс однократно в дозе 1 мл на 50 кг массы тела и задают меланинсодержащий препарат Мелавит перорально с питьевой водой или концентрированным кормом двукратно с интервалом 72 часа в дозе 30 мг меланина на 50 кг массы тела. Изобретение обеспечивает высокую эффективность мероприятий против фасциолеза. 3 табл., 2 пр.

Способ лечения коров от фасциолеза, включающий использование препарата ниацид-плюс, отличающийся тем, что дополнительно используют меланины растения гречихи в качестве иммунокорректора по следующей схеме: ниацид-плюс однократно в дозе 1 мл на 50 кг массы тела подкожно, меланины в дозе 30 мг на 50 кг массы тела с концентрированным кормом или питьевой водой двукратно с интервалом 72 часа.