Способ лапароскопического моделирования некротического энтероколита Российский патент 2023 года по МПК A61B17/94 A61K31/327 A61P43/00 G09B23/28 

Изобретение относится к области медицины, а именно к лапароскопическому моделированию некротического энтероколита (НЭК) у лабораторных животных.

Наиболее близким к предлагаемому способу является способ моделирования локального некроза стенки кишки в эксперименте, который описал И.И. Бабич и Закурка М.В. [Патент N 2594978 Российская Федерация, МПК G09B 23/28 (2006.01). N 2015121438/14, 04.06.2015: опубликовано 20.08.2016 Бюл. № 23 / Бабич И.И., Закурка М.В. — 12 с. : ил. — Текст : непосредственный]. Способ заключается в том, что под наркозом кроликам выполняли лапаротомию, затем в операционную рану выводили петлю подвздошной кишки, после чего в серозно-мышечный слой вводили 70%-ный раствор этилового спирта до получения сине-багрового участка диаметром от 0.5 см до 0.8 см. В результате, при гистологическом исследовании тонкой кишки (через сутки) обнаружено, что покровный эпителий отсутствует на всем протяжении, в поверхностных отделах слизистой оболочки очаговые некрозы и диффузная инфильтрация сегментоядерными лейкоцитами, распространяющаяся до мышечной оболочки.

Основными недостатками указанного выше способа является более травматичный доступ (лапаротомия), который усугубляет течение послеоперационного периода ввиду обширного повреждения тканей передней брюшной стенки, а также брюшины, что может привести к формированию спаечного процесса, что не желательно в данном случае. Также возможно развитие гнойных осложнений со стороны послеоперационной раны, учитывая некротические изменения со стороны кишечной стенки. Помимо этого, при выполнении лапаротомии требуется большое количество расходных материалов (перевязочных средств, антисептических средств), инструментов, а также увеличивается время операции, которое затрачивается на послойное ушивание лапаротомной раны.

Техническим результатом изобретения является разработка легко воспроизводимого лапароскопического способа моделирования НЭК, характеризующегося минимальной инвазивностью доступа и низкими показателями летальности животных, стабильностью воспроизведения патологического процесса в кишечной стенке.

Технический результат достигается тем, что после наложения карбоксиперитонеума, установки лапароскопа и одного эндоскопического инструмента-манипулятора, выполняют ревизию органов брюшной полости. Следующим этапом фиксируют зажимом петлю тонкой кишки. Затем шприцем с инъекционной иглой после прокола передней брюшной стенки и введения иглы в брюшную полость производят пункцию стенки кишки и субсерозно вводят 1 мл 33%-ной перекиси водорода. Визуально оценивают распространение введенного вещества в дистальном и проксимальном направлении по петле кишки. После оценки изменений в брюшной полости выполняют десуфляцию, удаляют лапароскоп, инструмент, троакары, раны в местах стояния троакаров ушивают узловыми швами. Через 12 часов выполняют лапаротомию и ревизию брюшной полости, пораженный участок резецируют для гистологического исследования.

Изобретение поясняется фигурами.

На фиг. 1 изображен момент лапароскопической операции – субсерозная пункция кишечной стенки;

На фиг. 2 изображены изменения стенки кишки (приобрела белесый цвет) сразу после введения 1 мл 33%-ной перекиси водорода

На фиг. 3 изображена интраоперационная картина через 5 минут после введения 1 мл 33%-ной перекиси водорода (участок кишечной трубки длиной 10 см не перестальтирует, стенка белесого цвета)

На фиг. 4 изображены макроскопические изменения стенки кишки через 12 часов после введения 1 мл 33%-ной перекиси водорода

На фиг. 5 изображен микропрепарат тонкой кишки, в которую вводили 1 мл 33%-ной перекиси водорода, окрашен гематоксилином и эозином

СПОСОБ ОСУЩЕСТВЛЯЕТСЯ СЛЕДУЮЩИМ ОБРАЗОМ

Моделирование некротического энтероколита у лабораторных животных (кролик, массой 2-2,5 кг) осуществляют с соблюдением мер асептики и антисептики при выполнении хирургических манипуляций. Перед началом оперативного вмешательства животное фиксируют на операционном столе в положение на спине, под общей анестезией выполнят обработку операционного поля, в мезогастрии по средней линии производят разрез длиной до 5 мм, обнажают апоневроз, затем – наложение карбоксиперитонеума иглой по типу Veresh. Устанавливают 5 мм троакар, в который вводят лапароскоп, производят ревизию органов брюшной полости. Справа или слева в мезогастрии устанавливают 3 мм троакар, вводят мягкий зажим или диссектор. Захватывают им петлю тонкой кишки, затем шприцем с инъекционной иглой после прокола передней брюшной стенки и введения иглы в брюшную полость субсерозно в петлю кишки вводят 1 мл 33%-ной перекиси водорода. После остановки распространения введенного вещества по стенке кишки в дистальном и проксимальном направлении, оценивают изменения в брюшной полости, выполняют десуфляцию, удаляют лапароскоп, инструмент, троакары, раны в местах стояния троакаров ушивают узловыми швами, обрабатывают растворами антисептиков.

ПРИМЕР КОНКРЕТНОГО ИСПОЛЬЗОВАНИЯ

Лапароскопическое моделирование некротического энтероколита было произведено 10 кроликам-самцам породы «Советская шиншилла» массой 2-2,5 кг. Для обеспечения анестезиологического пособия использовали ингаляционный масочный наркоз (концентрация изофлурана во вдыхаемой газовой смеси – 3%, поток воздуха – 0,8 л/мин). Манипуляция осуществлялась с соблюдением всех международных и российских норм гуманного обращения с лабораторными животными, животное фиксировали на операционном столе в положении на спине. Оперативное вмешательство выполняли с помощью видеоэндоскопического комплекса. Обрабатывали и отграничивали операционное поле стандартным способом, в мезогастрии производили разрез длиной до 5 мм, а затем – пункцию брюшной полости иглой по типу Veresh. Выполняли наложение карбоксиперитонеума с предварительно установленными параметрами инсуфляции: давление – 7 мм рт. ст., поток – 1 л/мин. В брюшную полость устанавливали оптическую канюлю диаметром 5 мм и вводили лапароскоп, после чего производили ревизию органов брюшной полости. Справа в мезогастрии вводили 3 мм троакар с эндоскопическим диссектором. Захватывали и фиксировали в нем петлю тонкой кишки, затем шприцем (с иглой длиной 40 мм диаметром 0,8 мм) после прокола передней брюшной стенки и введения иглы в брюшную полость субсерозно в кишку производили инъекцию 1 мл 33%-ной перекиси водорода. После остановки распространения введенного вещества по стенке кишки в дистальном и проксимальном направлении (протяженностью до 10 см), оценивали изменения в брюшной полости. В течение 5 минут после описанной манипуляции петля кишки приобретала белесый цвет, сосуды брыжейки «запустевали», перистальтика на данном участке отсутствовала. Затем выполняли десуфляцию, удаляли лапароскоп, инструмент, троакары, раны в местах стояния троакаров ушивали узловыми швами, обрабатывали растворами антисептиков.

Через 12 часов под общим обезболиванием выполняли лапаротомию и ревизию брюшной полости. По вскрытии брюшной полости выявлено наличие мутного выпота, резкая гиперемия брюшины, петли кишечника фиксированы между собой рыхлыми воспалительными спайками – картина перитонита и частичной кишечной непроходимости. Проксимальнее кишки, в которую производили введение раствора 33%-ной перекиси водорода, диаметр петель значительно увеличен (в 2 раза), дистальнее – петли спавшиеся. Сама же патологически-измененная петля тонкой кишки имеет характерные для сегментарного поражения НЭК макроскопические изменения: аперистальтична, стенка истончена, серо-зеленого цвета (пропитана кишечным содержимым), хрупкая, отмечаются точеченые перфоративные отверстия. Выполнена резекция данного участка для гистологического исследования. При морфологическом исследовании в стенке кишки определяется картина острого расстройства кровообращения с наличием язвенно-некротических дефектов. В одном из которых определяется перфоративное отверстие с выраженной воспалительной реакцией. На остальном протяжении исследуемого участка стенки кишки морфологическая картина стерта за счет наличия обширных имбибированных кровью участков и некротических масс. В сохранных участках определяются многочисленные расширенные кровеносные сосуды с эритростазом и выраженная полиморфноклеточная реакция.

Описанный способ позволяет моделировать наиболее типичные морфологические проявления тяжелого течения НЭК с помощью эндовидеохирургических технологий, характеризующийся высокой воспроизводимостью. Моделирование НЭК по средствам лапароскопии максимально приближает экспериментатора к реальной клинической ситуации, когда патологический процесс развивается при отсутствии обширного повреждения серозного покрова брюшной полости, что возникает при лапаротомии. Это позволит использовать полученные результаты для разработки новых методов лечения НЭК и последующего их внедрения в клиническую практику.

Изобретение относится к медицине, а именно к эксперементальной гастроэнтерологии. После наложения карбоксиперитонеума, установки лапароскопа и одного эндоскопического инструмента-манипулятора, фиксируют им петлю тонкой кишки. Шприцем с инъекционной иглой после прокола передней брюшной стенки и введения иглы в брюшную полость производят пункцию стенки кишки и субсерозно вводят 1 мл 33%-ной перекиси водорода. Способ обеспечивает разработку легковоспроизводимого лапароскопического способа моделирования некротического энтероколита, характеризующегося минимальной инвазивностью доступа и низкими показателями летальности животных, стабильностью воспроизведения патологического процесса в кишечной стенке. 5 ил., 1 пр.

Способ лапароскопического моделирования некротического энтероколита, включающий субсерозную инъекцию в стенку кишки кролика, отличающийся тем, что после наложения карбоксиперитонеума, установки лапароскопа и одного инструмента-манипулятора фиксируют петлю кишки, далее шприцем с инъекционной иглой прокалывают переднюю брюшную стенку и вводят её в брюшную полость, а затем в стенку кишки субсерозно вводят 1 мл 33%-ной перекиси водорода.