Способ прогнозирования результатов дентальной имплантации у лиц молодого возраста с сахарным диабетом Российский патент 2023 года по МПК A61C8/00 G01N33/68 

Изобретение относится к области медицины, а именно к стоматологии и клинической лабораторной диагностике, и может быть использовано для прогнозирования результатов дентальной имплантации у лиц молодого возраста с сахарным диабетом.

Несмотря на высокие результаты, достигнутые в области дентальной имплантации за последние десятилетия, существует ряд нерешенных вопросов, связанных с отторжением имплантатов. При этом постоянно обсуждаемым остается перечень относительных показаний и противопоказаний к проведению имплантации у конкретного пациента. В связи с этим прогнозирование результатов дентальной имплантации остается актуальной проблемой.

Известны лабораторные методы исследований («Способ прогнозирования эффективности стоматологической имплантации никелида титана», Патент №2237242 РФ; «Способ прогнозирования дентальной имплантации», Патент №2651763 РФ), позволяющие прогнозировать эффективность операции дентальной имплантации и которые получили определенное распространение в отечественной стоматологической практике. В то же время, такие информативные биохимические методики, как определение биоактивных молекул, связанных с воспалением, остеогенезом и остеорезорбцией, до недавнего времени не использовались широко в клинике из-за сложности проведения исследования [Соловых Е.А., 2013, Malamud D., 2011, Ebersole J.L., 2015; Syndergaard В. et al., 2014].

Сахарный диабет (СД) - это хронический метаболический синдром, характеризующийся гипергликемией, гликозурией и связанными с ними нарушениями обмена веществ. Развитие инсулинорезистентности сопровождается нарушением связывания свободных ионов Са с протеинкиназой, что затрудняет транспорт глюкозы внутрь клетки. Развившаяся при СД2 гипергликемия способствует активации остеокластов и резорбции костной ткани. Выявлена обратная корреляционная связь между длительностью течения СД 2 типа, уровнем глюкозы и минеральной плотностью костной ткани осевого и периферического скелета. Главной задачей стоматологического лечения пациентов с сахарным диабетом, как правило, является восстановление целостности зубных рядов. До недавнего времени зубное протезирование при концевых дефектах и полном отсутствии зубов у таких больных осуществлялось съемными конструкциями.

Сахарный диабет 1 и 2 типа относятся к относительным противопоказаниям к использованию дентальных имплантатов. Однако многолетний опыт и успехи в дентальной имплантологии позволили расширить показания к этому виду ортопедической помощи при частичной и полной утрате зубов. Большую роль здесь играют как появление новых лекарственных средств для лечения сахарного диабета, позволяющих больным многие годы находиться в стадии компенсации, так и несомненные успехи в области разработки новых препаратов, влияющих на ремоделирование. В то же время патологические процессы, характерные для СД1 и СД2, требуют индивидуальной оценки для успешности дентальной имплантации. Систематический обзор показал, что пациенты с плохо контролируемым диабетом страдают от нарушения остеоинтеграции, имеют повышенный риск периимплантита и более частые случаи отторжения имплантата (Naujokat, Н., Kunzendorf, В. & Wiltfang, J. Dental implants and diabetes mellitus-a systematic review. Int J Implant Dent 2, 5 (2016). https://doi.org/10.1186/s40729-016-0038-2).

Задачей предлагаемого изобретения является разработка способа прогнозирования результатов дентальной имплантации у лиц молодого возраста с сахарным диабетом.

Задача решается за счет того, что оценивают уровень экспрессии сигнальных молекул буккального эпителия пациентов, и у лиц с сахарным диабетом 1 типа в возрасте 20-35 лет при показателях окклюдина ниже 12,84%, Е-кадгерина 10,32%, β-тубулина ниже 6,73%, в возрасте 36-45 при показателях окклюдина ниже 8,57%, Е-кадгерина ниже 6,54%, β-тубулина ниже 3,59%, а у лиц с сахарным диабетом 2 типа в возрасте 20-35 лет при показателях окклюдина ниже 6,51%, Е-кадгерина ниже 7,11%, β-тубулина ниже 2,54%, в возрасте 36-45 лет при показателях окклюдина ниже 3,25%, Е-кадгерина ниже 2,36%, β-тубулина ниже 1,75% прогнозируют неблагоприятный результат дентальной имплантации.

Технический результат способа: повышение точности прогнозирования дентальной имплантации, снижение процента неудачных операций и рисков развития осложнений у пациентов, низкая травматичность.

Буккальный эпителий можно рассматривать как пограничную зону между внешней и внутренней средами организма. Таким образом, изменения функциональной активности клеток буккального эпителия (процессы клеточного обновления и дифференцировки, экспрессия различных сигнальных молекул) во многом отражают состояние локального и системного гомеостаза организма или его нарушения при патологических состояниях. Клетки буккального эпителия способны экспрессировать сигнальные молекулы, регулирующие межклеточные нейроиммуноэндокринные взаимодействия, определяющие успех лечения стоматологических заболеваний.

Создание малоинвазивного способа прогнозирования результатов дентальной имплантации, т.е. оценки и прогнозирования приживления имплантов, по уровню экспрессии сигнальных молекул в буккальном эпителии БЭ, может позволить избежать развития осложнений и соответственно значительно снизить процент неудачных операций.

Способ поясняется Фиг. 1, на которой показан уровень экспрессии сигнальных молекул в буккальном эпителии.

Способ осуществляется следующим образом.

Проводится сбор буккального эпителия. Пациенту цитологической щеткой, с легким нажимом, совершая обратно-поступательные движения, потирают щеку с внутренней стороны, при этом плавно ее поворачивая около 8-10 оборотов. Открывают капсулу эппендорфа, окунают цитологическую щеточку полностью в раствор, крутят в эппендорфе 7-8 оборотов. Эппендорф нумеруют.

Ход определения. Иммуноокрашивание препаратов БЭ осуществляют по стандартному протоколу, с использованием первичных антител к МТ (1:75, Abeam, США), SIRT1 (1:100, Abeam, США), SIRT3 (1:50, Abeam, США), SIRT6 (1:100, Abeam, США). В качестве вторичных антител используют антитела, конъюгированные с флуорофоромами: Alexa Fluor 488 (1:1000, Abeam, США. Срезы инкубируют 30 мин при комнатной температуре в темноте. Ядра клеток докрашивают Hoechst 33258 (Sigma, США). Визуализацию результатов иммунофлуоресцентого окрашивания осуществляют с помощью конфокального микроскопа Zeiss LSM 980. Для оценки результатов иммунофлуоресцентного окрашивания было проведено морфометрическое исследование с помощью системы компьютерного анализа микроскопических изображений Image J. В каждом случае анализировали 5 полей зрения. Площадь экспрессии (%) рассчитывали, как отношение площади, занимаемой иммунопозитивными клетками, к общей площади поля зрения. Статистическую обработку результатов проводили в программе SPSS Statistics 17.0. Характер распределения показателей определяли по критерию Шапиро-Уилка (Shapiro-Wilk test). Оценку различий между выборками проводили с использованием параметрического t-критерия Стьюдента (при нормальном распределении данных), непараметрического U-критерия Манна-Уитни (в случае отсутствия нормального распределения данных). Критический уровень достоверности нулевой статистической гипотезы (об отсутствии значимых различий) принимался равным 0,01.

По дизайну проведенное исследование - закрытое когортное проспективное STROBE, класс доказательности III. В исследование было включено 293 пациента (175 женщин и 118 мужчин). Все участники исследования соответствовали критериям включения, дали информированное добровольное согласие на участие в исследовании. Проводилась оценка уровня экспрессии сигнальных молекул межклеточных контактов окклюдин, Е-кадгерин, β-тубулин в БЭ пациентов контрольной и исследуемых групп. Выборка была разделена на 6 подгрупп:

- 2 контрольные группы (условно здоровые): молодого возраста (20-35 лет) и среднего возраста (36-45 лет) - группы 1А и 2А соответственно;

- 2 группы пациентов с сахарным диабетом 1-го типа молодого возраста (20-35 лет) и среднего возраста (36-45 лет) - группы 1Б и 2Б соответственно.

- 2 группы пациентов с сахарным диабетом 2-го типа молодого возраста (20-35 лет) и среднего возраста (36-45 лет) - группы 1В и 2В соответственно.

Уровень экспрессии сигнальных молекул межклеточных контактов коррелирует с патофизиологическими процессами, протекающими при сахарном диабете, в первую очередь воспалением и остеодезинтеграцией, таким образом позволяя прогнозировать успешность дентальной имплантации при отсутствии других выраженных рисков.

Уровень экспрессии сигнальной молекулы окклюдина у пациентов 20-35 лет в 1,9 раза ниже у пациентов с СД1 и в 3,9 раза ниже у пациентов с СД2 при сравнении с контрольной группой этого возраста.

Уровень экспрессии сигнальной молекулы окклюдина у пациентов 36-45 лет в 1,9 раза ниже у пациентов с СД1 и в 5,1 раза ниже у пациентов с СД2 при сравнении с контрольной группой этого возраста.

При оценке межвозрастных различий по уровню экспрессии окклюдина выявлено, что у пациентов с СД1 в возрасте 20-35 этот показатель в 1,4 раза ниже по сравнению с пациентами СД2 36-45 лет.

Установлено, что в возрасте 20-35 лет при СД1, если значения уровня экспрессии окклюдина ниже 12,84%, Е-кадгерина 10,32%, β-тубулина ниже 6,73%, то высокая вероятность того, что дентальный имплант не приживется.

Установлено, что в возрасте 36-45 лет при СД1, если значения уровня экспрессии окклюдина ниже 8,57%, Е-кадгерина 6,54%, β-тубулина ниже 3,59%, то высокая вероятность того, что дентальный имплант не приживется.

Выявлено, что в возрасте 20-35 лет при СД2, если значения уровня экспрессии окклюдина ниже 6,51%, Е-кадгерина 7,11%, β-тубулина ниже 2,54%о, то высокая вероятность, что дентальный имплант не приживется.

В возрасте 36-45 лет при СД2, если значения уровня экспрессии окклюдина ниже 3,25%, Е-кадгерина 2,36%, β-тубулина ниже 1,75%, то высокая вероятность того, что дентальный имплант не приживется.

У условно здоровых пациентов молодого возраста (20-35 лет) уровень экспрессии окклюдина должен быть выше 25,47%, Е-кадгерина 17,51%, β-тубулина выше 12,34%, что позволяет говорить об успехе дентальной имплантации. У пациентов 36-45 лет этой группы показатели должны быть выше 16, 32%, 9,08% и 7,81% соответственно.

Клинический пример 1

Пациентка Л., 36 лет, обратилась к стоматологу-хирургу по поводу отсутствия шестого зуба на нижней челюсти справа. Конфигурация лица не изменена. В полости рта - вторичная адентия 46 зуба. Слизистая оболочка в области отсутствующего зуба плотная, влажная, блестящая, без видимых патологических изменений. По данным КЛКТ наличие достаточного объема костной ткани в области отсутствующего зуба. Диагноз: вторичная адентия 46 зуба.

Протокол операции: под инфильтрационной анестезией «Артикаин 4%»

с вазоконстриктором в концентрации 1:100000 проведен разрез через слизистую оболочку и надкостницу в области 46 зуба, откинут

слизисто-надкостничный лоскут, обнажен беззубый участок альвеолярного отростка. Сформировано костное ложе. В проекцию 46 зуба установлен имплантат. Гемостаз. Установлен формирователь десневой манжеты. Рана ушита нитью «Гликолон».

В буккальном эпителии определяли уровень окклюдина - 15,32%, Е-кадгерина 8,78%, β-тубулина 7,44%, что соответствует референсным значениям и позволяет прогнозировать успех проведенной дентальной имплантации.

В послеоперационном периоде назначен амоксиклав 625 мг по 1 таблетке 2 раза в день, линекс 500 мг 3 раза в день, ополаскиватель с содержанием хлоргексидина 0,05%, НПВС в течение 3-4 дней.

Через 4 месяца проведен осмотр пациента, выполнено контрольное КЛКТ по данным которого определяется хорошая остеоинтеграция. Пациент направлен к стоматологу-ортопеду для дальнейшего протезирования.

Клинический пример 2

Пациент Б., 42 года, обратился к стоматологу-хирургу с жалобой на отсутствие шестого зуба на верхней челюсти слева. Конфигурация лица не изменена. В полости рта - вторичная адентия 26 зуба. Слизистая оболочка в области отсутствующего зуба плотная, влажная, блестящая, без видимых патологических изменений. По данным КЛКТ наличие достаточного объема костной ткани в области отсутствующего зуба. У пациента в анамнезе сахарный диабет 1 типа.

Диагноз: вторичная адентия 46 зуба.

Протокол операции: под инфильтрационной анестезией «Артикаин 4%» с вазоконстриктором в концентрации 1:100000 проведен разрез через слизистую оболочку и надкостницу в области 26 зуба, откинут слизисто-надкостничный лоскут, обнажен беззубый участок альвеолярного отростка. Сформировано костное ложе. В проекцию 26 зуба установлен имплантат.Гемостаз. Установлен формирователь десневой манжеты. Рана ушита нитью «Гликолон».

В буккальном эпителии определяли уровень окклюдина - 9,03%, Е-кадгерина 6,32%, β-тубулина 3,61%, что соответствует референсным значениям и позволяет прогнозировать успех проведенной дентальной имплантации.

В послеоперационном периоде назначен амоксиклав 625 мг по 1 таблетке 2 раза в день, линекс 500 мг 3 раза в день, ополаскиватель с содержанием хлоргексидина 0,05%, НПВС в течение 3-4 дней.

Через 3,5 месяца проведен осмотр пациента, выполнено контрольное

КЛКТ по данным которого определяется хорошая остеоинтеграция.

Пациент направлен к стоматологу-ортопеду для дальнейшего протезирования.

Клинический пример 3

Пациент А., 26 лет, обратился к стоматологу-хирургу с жалобой на отсутствие шестого зуба на нижней челюсти слева. Конфигурация лица не изменена. В полости рта - вторичная адентия 36 зуба. Слизистая оболочка в области отсутствующего зуба плотная, влажная, блестящая, без видимых патологических изменений. По данным КЛКТ объем костной ткани в области отсутствующего зуба снижен. У пациента в анамнезе сахарный диабет 2 типа.

Диагноз: вторичная адентия 36 зуба. Протокол операции: под инфильтрационной анестезией «Артикаин 4%» с вазоконстриктором в концентрации 1:100000 проведен разрез через слизистую оболочку и надкостницу в области 26 зуба, откинут слизисто-надкостничный лоскут, обнажен беззубый участок альвеолярного отростка. Сформировано костное ложе. В проекцию 26 зуба установлен имплантат. Гемостаз. Установлен формирователь десневой манжеты. Рана ушита нитью «Гликолон».

В буккальном эпителии определяли уровень окклюдина - 4,03%, Е-кадгерина 5,75%, β-тубулина 1,24%, что соответствует референсным значениям и позволяет прогнозировать неблагоприятный исход дентальной имплантации.

В послеоперационном периоде назначен амоксиклав 625 мг по 1 таблетке 2 раза в день, линекс 500 мг 3 раза в день, ополаскиватель с содержанием хлоргексидина 0,05%, НПВС в течение 3-4 дней.

Через 3,5 месяца проведен осмотр пациента, выполнено контрольное КЛКТ, по данным которого определяется низкий уровень остеоинтеграции. Пациент направлен к стоматологу-хирургу для реимплантации дентального имплантата.

Предлагаемый способ позволяет на этапе планирования дентальной имплантации определить ее результаты, установить вероятность развития осложнений, скорректировать лечебно-профилактические мероприятия.

Изобретение относится к области медицины, а именно к стоматологии и клинической лабораторной диагностике, и может быть использовано для прогнозирования результатов дентальной имплантации у лиц молодого возраста с сахарным диабетом. Осуществляют оценку уровня экспрессии сигнальных молекул – окклюдина, Е-кадгерина и β-тубулина. На основании полученных результатов, с учетом возраста пациента и типа сахарного диабета прогнозируют неблагоприятный результат дентальной имплантации. Способ позволяет на этапе планирования дентальной имплантации определить ее результаты, повысить точность прогнозирования результатов дентальной имплантации, снизить процент неудачных операций, установить вероятность развития осложнений и скорректировать лечебно-профилактические мероприятия за счет оценки совокупности наиболее значимы показателей. 1 ил., 3 пр.

Способ прогнозирования результатов дентальной имплантации у лиц молодого возраста с сахарным диабетом, отличающийся тем, что оценивают уровень экспрессии сигнальных молекул буккального эпителия, и у лиц с сахарным диабетом 1 типа в возрасте 20-35 лет при показателях окклюдина ниже 12,84%, Е-кадгерина ниже 10,32%, β-тубулина ниже 6,73%, в возрасте 36-45 при показателях окклюдина ниже 8,57%, Е-кадгерина ниже 6,54%, β-тубулина ниже 3,59%, а у лиц с сахарным диабетом 2 типа в возрасте 20-35 лет при показателях окклюдина ниже 6,51%, Е-кадгерина ниже 7,11%, β-тубулина ниже 2,54%, в возрасте 36-45 лет при показателях окклюдина ниже 3,25%, Е-кадгерина ниже 2,36%, β-тубулина ниже 1,75% прогнозируют неблагоприятный результат дентальной имплантации.