Способ получения лечебной сыворотки для терапии микотоксикозов животных Российский патент 2023 года по МПК A61K35/00 

Изобретение относится к области ветеринарии, и может быть использовано для лечения микотоксикозов животных.

Микотоксикозы - группа неинфекционных заболеваний человека и животных, вызванная интоксикацией микотоксинами (токсинами микромицетов). Микотоксины представляют собой вторичные метаболиты микроскопических грибов, обладающие политоксическим действием, включая канцерогенность, тератогенность, иммунную токсичность, нейротоксичность, гепатотоксичность, нефротоксичность, репродуктивную токсичность и расстройство желудочно-кишечного тракта.

Среди микотоксинов Т-2 токсин является ведущим микотоксином в патогенезе микотоксикозов животных. Анализ данных распространения этого токсина в Республике Татарстан, опубл. в «Международном вестнике ветеринарии» №1, 2021. (авт. И.Н. Штыров и др.), показывает, что данный токсин является одним из наиболее распространенных контаминантов кормов для животных и пищевых продуктов.

Микотоксины могут быть одним из пусковых факторов множественной химической чувствительности, и основным предполагаемым механизмом которой является нарушения в иммунной системе. При остром и подостром микотоксикозе происходит чрезмерная активация перекисного окисления липидов, гиперпродукция медиаторов воспаления (цитокины, адреналин, норадреналин и др.) с высвобождением свободных радикалов и медиаторов в органах и тканях, приводящие к шоковому состоянию и скоротечной гибели животных.

Мероприятия по борьбе с микотоксикозами у животных, направлены, прежде всего, на профилактику Т-2 микотоксикозов у животных, которая включает, в первую очередь, предотвращение продуцирования микотоксина микромицетами, исключение из рациона животных загрязненных комбикормов и их компонентов. В случае, когда загрязнение кормов уже произошло, предусматривается технологически сложная процедура их обезвреживания, и применение различных кормовых добавок, направленных, главным образом, для профилактики отравления животных микотоксинами. Непосредственно в сельскохозяйственном производстве, несмотря на комплекс превентивных мер, предотвратить потребление животными контаминированных рационов пока не удается, что вызывает необходимость, не столько профилактики, а сколько лечения микотоксикозов.

Известны различные способы получения кормовых добавок, направленные на профилактику микотоксикозов у животных и птиц. Наиболее эффективным способом обезвреживания микотоксинов является нейтрализация с помощью сорбентов, причем ее эффективность существенно различается в силу разнообразия химических структур и свойств микотоксинов, а также самих сорбентов. К существенным параметрам, определяющими эффективность связывания микотоксинов можно отнести специфическую комплементарность поверхности сорбента к определенному классу микотоксинов, площадь поверхности сорбента, доступная для связывания с микотоксинами, и строение макро-, мезо- и микропористой структуры частиц сорбента.

Известно множество препаратов и способов лечения, а также профилактики микотоксикозов животных, среди которых наиболее популярны сорбционные материалы, такие как:

- цеолиты (см. Патенты RU 2262863, МПК A23K 1/16, A23K 1/175, Опубл.: 27.10.2005 Бюл. №30; RU 2357739, МПК A61K 35/02, Опубл.: 10.06.2009 Бюл. №16; и др.);

- бентониты (см. патенты RU 2300204, МПК A23K 1/175, Опубл. 10.06.2007 Бюл. №16; RU 2663994, МПК A23K 20/28, Опубл.: 14.08.2018 Бюл. №23; и др.);

- шунгиты (см. Патенты RU 2569632, МПК A23K 1/175, Опубл.: 27.11.2015 Бюл. №33; RU 2430731, МПК A61K 35/02, А61Р 1/00, Опубл.: 10.10.2011 Бюл. №28; и др.);

- вермикулиты (Патенты RU 2444367, МПК A61K 35/02, A61K 31/00 Опубл.: 10.03.2012 Бюл. №7; RU 2552872, МПК A23K 1/16, Опубл.: 10.06.2015 Бюл. №16; и др.)

- смеси сорбентов алюмосиликатов (цеолиты или бентониты) и слоистых сорбентов (вермикулит или монтмориллонит) (Патенты RU 2420565, МПК C12N 1/00, A23K 1/165, A01N 63/00, Опубл.: 10.06.2011 Бюл. №16; RU 2502319, МПК A23K 1/00, A23K 1/16, Опубл.: 27.12.2013 Бюл. №36; и др.)

Такие минеральные сорбенты, как алюмосиликаты (цеолиты и бентониты) как и большинство минеральных сорбентов, так и препаратов на их основе, эффективны только в больших дозировках: от 2 до 5 кг/т корма. При чем, эффективность минеральных адсорбентов против фумонизинов и зеараленона может варьировать от высокой до незначительной (S.J. Bursian, R.J. Aulerich, J.K. Cameron, N.K. Ames, В.A. Steficek. Efficacy of hydrated sodium calcium aluminosilicate in reducing the toxicity of dietary zearalenone to mink. J. Appl. Toxicol., 1992, 12, pp. 85-90). По отношению к токсину Т-2 эффективность минеральных сорбентов лишь условна (L.F. Kubena, R.B. Harvey, W.E Huff, D.E. Corrier, T.D. Phillips, G.E. Rottinghaus. Efficacy of a hydrated sodium calcium aluminosilicate to reduce the toxicity of aflatoxin and T-2 toxin. Poult. Sci., 1990, 69, pp. 1078-1086).

Также широко известны для лечения и профилактики микотоксикозов животных и птиц сорбционные материалы, такие как:

- пищевые волокна, такие как свекловичный жом (см. Патент RU 2734030, МПК A23K 10/30, Опубл.: 12.10.2020 Бюл. №29; RU 2499410, МПК A23K 1/12, Опубл.: 27.11.2013 Бюл. №33 и др.)

- олиго- и полисахариды (см. Патенты RU 2502319, МПК A23K 1/00, A23K 1/16, Опубл.: 27.12.2013 Бюл. №36; RU 2366268; МПК A23K 1/00, Опубл.: 10.09.2009 Бюл. №25 и др.);

- глюкоманнаны (см. Патенты RU 2731420, МПК A23K 50/75, Опубл.: 02.09.2020 Бюл. №25; RU 2691591, МПК A23K 10/30 Опубл: 14.06.2019 Бюл. №17; UA 23122 U, 10.05.2007.

и др.; Dawson K.J., Belkhir K.A Bayesian approach to the identification of panmictic populations and the assignment of individuals //Genetics Research. - 2001. - T. 78. - №. 1. - C. 59-77.; Ахмадышин, P.A. и др. Роль клеточной стенки в адсорбции Т-2 токсина дрожжами Saccharomyces cerevisiae // Ветеринарный врач. - 2008. -№. 1. - С.11-12).

К общим недостаткам известных средств можно отнести: отсутствие селективной сорбции к витаминам и питательным веществам; данные по сорбции in vitro, не отражают закономерностей in vivo; при чем лечебный эффект адсорбентов микотоксинов в рекомендуемых дозах, при клинически выраженном микотоксикозе, когда микотоксин уже проник через кишечный барьер в кровяное русло, весьма незначителен.

Для лечения микотоксикозов животных нашли широкое применение пробиотики на основе различных штаммов бактерий, таких как Bacillus subtilis-93 для профилактики микотоксикозов (см. Патент RU 2491942, МПК A61K 35/00, Опубл.: 10.09.2013 Бюл. №25; RU 2534345, МПК A61K 35/74, C12N 1/20, Опубл.: 27.11.2014 Бюл. №33; препарат Сахабактисубтил, содержащий штаммы бактерий Bacillus subtilis-ТНП-3 и Bacillus subtilis-THn-5 (см. Патент RU 2297842, МПК A61K 35/66, Опубл.: 27.04.2007 Бюл. №12; RU 2292132, МПК A01F 25/00, A23K 1/00, Опубл.: 27.01.2007 Бюл. №3; RU 2218924, МПК A61D 1/00, Опубл.: 20.12.2003 г, Бюл. №35; и др.)

Эффективность данных пробиотических препаратов основана на способности микроорганизмов, входящих в их состав, к витаминобразующей, кислотообразующей, антагонистической и иммуностимулирующей активности, при всех этих преимуществах, пробиотики практически малоэффективны при выраженной интоксикации организма микотоксинами.

Известны способы лечения при отравлении микотоксинами, включающие применение ряда антиоксидантов, например, витаминов Е и С (раскрыто в патентах RU 2614996, МПК A61K 31/00, А61Р 39/00, Опубл.: 03.04.2017 Бюл. №10; RU 2496329, МПК A23K 1/16, Опубл.: 27.10.2013 Бюл. №30; и др.), или селена (см. Патент RU 2502319, МПК A23K 1/00, Опубл.: 27.12.2013 Бюл. №36; RU 2614996, МПК A61K 31/00, Опубл.: 03.04.2017 Бюл. №10; RU 2207122, МПК A61K 31/00, Опубл.: 27.06.2003 Бюл. №18; и др.). Недостатками известных способов является то, что детоксикационное действие антиоксидантов основано на устранении последствий инициации свободнорадикального окисления липидов - одного из возможных патогенетических механизмов действия трихотеценовых микотоксинов, не невелируя другие последствия действия микотоксинов - нарушение синтеза белка, апоптоз клеток; слабо способствуют предотвращению воспаления в желудочно-кишечном тракте. Кроме того, в организме может возникнуть дефицит данных витаминов, которые расходуются для нейтрализации действия микотоксинов, что негативно влияет на рост и развитие животных и требует внесения значительно более высоких доз антиоксидантов.

Известны комплексные препараты, в которых могут присутствовать органические и минеральные компоненты, культуры пробиотиков и пребиотиков, ингибиторы, ферменты, биологически активные вещества (витамины, минеральные вещества, иммуностимуляторы): «Фунгистат» (см. Патент RU 2420565, МПК C12N 1/00, A23K 1/165, Опубл.: 10.06.2011 Бюл. №16), смесь природных цеолитов и ферментных препаратов (см. Патенты RU 2278158, МПК C12N 1/20, Опубл.: 20.06.2006 Бюл. №17; 2425587, МПК A23K 1/00, Опубл.: 10.08.2011 Бюл. №22) кормовая добавка, содержащая пчелиный подмор, бентонит, травяную муку, биомассу и культуральную жидкость чайного гриба М. Gisevii Lindau, бифидумбактерин, антидиарин (см. Патент RU 2579219, МПК A23K 10/10, Опубл.: 10.04.2016 Бюл. №10). Недостатком этих комбинированных препаратов является то, что одновременное присутствие разных по физико-химическим свойствам составляющих, может привести к взаимному компенсированию (поглощению) полезных свойств.

Одним из эффективнейших подходов для лечения животных в ветеринарии является использование «специфических» гипериммунных лечебных сывороток. Этот принцип, в основе которого лежит взаимодействие «антиген-антитело» используется для лечения инфекционных заболеваний. В связи с тем, что микотоксины имеют неинфекционную природу и являются низкомолекулярными соединениями, не обладающими способностью к антителообразованию, разработка средств подобного специфического лечения затруднена и требует оригинальных научных подходов. Поэтому использование аспектов иммунных взаимодействий в цепи «микотоксин-организм», а на ее основе получение лечебно-профилактических средств, является новым направлением в терапии микотоксикозов животных.

Известен способ получения антитоксической гипериммунной сыворотки для лечения Т-2 токсикоза у животных и способ лечения Т-2 токсикоза на основе антитоксической гипериммунной сыворотки, содержавшей поликлональные антитела к Т-2 токсину. Применение сыворотки трехкратно внутримышечно с интервалом 10 дней в дозе 0,3 мл на 1 кг живой массы обеспечивает нейтрализацию действия Т-2 токсина, нормализацию показателей гомеостаза, улучшение общего состояния, снижение падежа и повышение массы тела (см. патент RU 2730532, МПК A61K 35/15, Опубл.: 24.08.2020 Бюл. №24).

Средство, полученное по известному способу, наиболее близкое по технической сущности и выбрано за прототип.

Известное средство обладает следующими недостатками: трудоемкость получения, высокая стоимость конъюгата Т-2 токсина с полилизином, необходимого для иммунизации животных при получении гипериммунной сыворотки со специфическими антителами, причем его этиотропный и специфический характер лечебного действия не учитывает случаи быстрой метаболизации токсина в организме и слабо нейтрализует действие активных метаболитов Т-2 токсина.

Вышеописанный способ не учитывает чрезмерную, не контролируемую активацию Т-2 токсином медиаторов воспаления, в том числе имеющих функцию клеточных мессенджеров и направляющие иммунный ответ организма. Высокие уровни медиаторов воспаления провоцируют повышенный воспалительный ответ в организме, который наносит вред и нарушает целый ряд функций организма. Микотоксины, в подострых, клинически значимых дозах, приводят к изменению в регуляции гормональной активности в оси гипоталамус-гипофиз-надпочечники. Вышеописанный симптомокомплекс выражается в угнетении животных, судороги, тремор, нарушение координации движений имеющее нейротоксичную, нейрогуморальную природу, нарушение свертываемости крови, выраженное воспаление желудочно-кишечного тракта, гиперемию и одышку, снижение функции легких вплоть до отека легких, гиповолемический шок, нарушение функции почек и печени, гибель животных.

Технической задачей изобретения является создание лечебной сыворотки для терапии микотоксикоза у животных, основанной на новом лечебном принципе с более простым способом ее получения.

Технический результат заключается в создании заявляемой сыворотки для терапии микотоксикоза, обеспечивающей более высокие показатели гомеостаза, улучшающей общее состояние, приводящей к снижению падежа и способствующей повышение массы тела животных.

Использование иммунологического принципа защиты позволяет предлагаемой сыворотке воздействовать на причину возникновения микотоксикоза, а не только снимать симптоматику. Защитный эффект происходит на сигнальном уровне и сохраняется даже по истечении времени после поступления токсина, т.е. сыворотки помогает организму справится и с последствиями потребления токсина.

Для терапии микотоксикоза у животных предложена лечебная сыворотка, эффект которой достигается новым лечебным принципом, ранее до этого не использовавшийся при терапии микотоксикозов. В отличие от прототипа, где лечебный эффект основан на принципе нейтрализации токсина в результате взаимодействия «антитело - токсин» без учета того, что в случае быстрой метаболизации токсина в организме происходит каскад выработки токсичных метаболитов с усугублением интоксикации, от которых не защищает сыворотка, полученная по прототипу. Сыворотка, полученная по прототипу, эффективна при ее своевременном введении, а предлагаемая лечебная сыворотка нейтрализует действие микотоксина на стадии метаболизации и активации гиперпродукции провосалительных пептидов, т.е. защитный эффект происходит на сигнальном уровне и сохраняется даже по истечении времени после поступления токсина, т.е. сыворотка помогает организму справится и с последствиями потребления токсина. Причем, получение лечебной сыворотки осуществляется по более простому способу, исключающему применение дорогостоящих процедур (химический синтез конъюгата Т-2 токсина с полилизином, диализ -дополнительная очистка иммуноглобулинов) и реактивов (для синтеза конъюгата Т-2 токсина с полилизином и диализа сыворотки) и применение ее для лечения микотоксикоза животных.

Технический результат достигается за счет способа получения лечебной сыворотки для терапии микотоксикоза животных, который осуществляется по технологии, предусматривающей два этапа, а способ лечения микотоксикоза животных предусматривает двукратное введение заявляемой лечебной сыворотки внутримышечно с интервалом в 7 суток в дозе 0,3 мл на кг живой массы.

Сопоставительный анализ заявляемого технического решения с известными технологиями получения лечебной сыворотки позволяет сделать вывод, о его соответствии критерию «новизна», так как в результате проведенного патентно-информационного поиска, предлагаемая совокупность существенных признаков изобретения не обнаружена.

Сопоставление заявленного технического решения с известными из области техники позволили выявить признаки, не являющиеся очевидными для специалиста в связи с достигаемым всей совокупностью существенных признаков техническим результатом. Это позволяет сделать вывод о соответствии заявляемого технического решения критерию «изобретательский уровень».

Заявляемое техническое решение соответствует критерию «промышленная применимость», так как может быть использовано для лечения микотоксикоза животных сывороткой, полученной заявляемым способом, как в личном подсобном хозяйстве, так и в масштабах фермерских хозяйств в экологически неблагоприятных районах по отношению к зараженным кормам микотоксинами.

Способ получения лечебной сыворотки для терапии микотоксикоза животных осуществляется по технологии предусматривающей два этапа.

Первый этап: шести самцам белых крыс массой 150-180 г вводят внутрижелудочно Т-2 токсин, как наиболее опасный и распространенный микотоксин. Токсин является «модельным», эффективность лечебно-профилактических средств при данном токсикозе, гарантирует их эффективность на других микотоксинах. Токсин вводят в виде 5%-ного водно-спиртового раствора в дозе 1/5 ЛД₅₀ в течение 6 сут. Через сутки после последнего введения Т-2 токсина у крыс отбирали кровь тотальным способом, отделяли сыворотку общепринятым методом (Бургасов П.Н. Руководство по вакцинному и сывороточному делу. М // Медицина. - 1978. - С. 103-157). Выбор дозы и сроков основывали на исследованиях (Взаимосвязь цитокинового профиля и оксидантно-антиоксидантного статуса белых крыс при экспериментальном Т-2 токсикозе / А.Г. Шахов (и др.) // Ветеринария Кубани. - 2016. - №1. - С.15-18), показывающих, что в эти сроки происходит максимальное накопление медиаторов воспаления, в том числе провоспалительных пептидов.

Второй этап: полученную на первом этапе сыворотку в дальнейшем вводили 12 самцам белых крыс подкожно в суммарном объеме 1 мл в 4 точки вдоль позвоночного столба и оставшуюся в шприце часть внутримышечно. Инъекции сыворотки проводили трехкратно на 1, 21 и 42 сутки. На 14 сут от последнего введения, у крыс отбирали кровь тотальным способом, отделяли сыворотку общепринятым методом (Бургасов П.Н. Руководство по вакцинному и сывороточному делу. М // Медицина. - 1978. - С. 103-157.) Затем, полученную таким образом лечебную сыворотку, использовали в работе.

Для подтверждения эффективности заявляемой лечебной сыворотки провели опыт на животных.

Пример 1.

Провели оценку полученных сывороток на белых мышах. Для этого сформировали группы белых мышей массой тела 18-22 г, по шесть особей в каждой. Мышам вводили Т-2 токсин в «острой» дозе 3,2 мг/кг массы тела (ЛД₅₀) и через 6 часов исследуемые сыворотки внутримышечно в дозе 0,5 мл/мышь. В качестве контроля были группы мышей с введением аналогичной дозы токсина Т-2, но без введения сывороток (первая группа); с введение гипериммунной сывороткой (в том же объеме) полученной по ранее разработанному способу (патент RU 2730532) (третья группа); с введением интактной сыворотки (в том же объеме), полученной от неиммунизированных животных (четвертая группа). Выживаемость оценивали в течение 3 суток. Данные представлены в таблице 1.

Как следует из данных, представленных в таблице 1, эффективными (по проценту выживаемости) показали себя лечебная (заявляемая) и гипериммунная сыворотки. Интактная сыворотка не обнаружила лечебный эффект. Предлагаемый новый способ лечения, с использованием лечебной сыворотки, полученной по заявляемому способу, был более эффективен (100% выживаемость животных).

Пример 2.

Для постановки эксперимента сформировали 4 группы белых крыс по принципу аналогов, по 8 животных в каждой, в конце эксперимента для исследований брали кровь у 6 животных из группы. Первая группа животных служила биологическим контролем, крысам второй группы задавали Т-2 токсин в виде 5%-ного водно-спиртового раствора в дозе 1/5 ЛД₅₀ в течение 21 сут, третья и четвертая группы получали токсин в аналогичной дозировке и лечение. В начале опыта и повторно на 7 и 14 сутки эксперимента крысам третьей группы вводили антитоксическую сыворотку, четвертой - поликлональную.

В ходе опыта изучали изменение массы тела и выживаемость животных (таблица 2).

Гематологические исследования, включающие определение количества эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобина, проводили с использованием гематологического анализатора «Mythic 18 vet» (Франция) (таблица 3).

Содержание общего белка, глюкозы, холестерина, активности ферментов АЛТ, ACT, ЩФ, мочевины, креатинина и триглицеридов в сыворотке крови животных проводили с помощью биохимического анализатора «Microlab 300» (Нидерланды) (таблица 4).

О степени интенсивности процесса перекисного окисления липидов (ПОЛ) судили по накоплению вторичных продуктов ПОЛ - малонового диальдегида (МДА) в реакции с 2-тиобарбитуровой кислотой (Методы ветеринарной клинической лабораторной диагностики / И.П. Кондрахин и др. // Справочник М.: Колос, 2004. - 520 с.) (таблица 5).

Активность лизоцима сыворотки крови определяли нефелометрическим методом по В.Г Дорофейчуку (Дорофейчук В.Г. Определение активности лизоцима нефелометрическим методом // Лаб. дело. - 1968. - №1. - С. 28-30), а нейтрофилов - по методике С.А. Кост и М.И. Стенко (Кост С.А., Стенко М.И. Определение фагоцитарной активности лейкоцитов // Клиническая гематология животных. - М.: Колос, 1974. - С. 99-100), Определение бактерицидной активности сыворотки крови (БАСК) проводили по методике Смирновой О.В., Кузьминовой Т.А. (Смирнова О.В., Кузьмина Т.А. Определение бактерицидной активности сыворотки крови методом фотонефелометрии // ЖМЭИ - 1966. - №4. - С. 8-11) (таблица 6).

Полученные экспериментальные данные обрабатывали общепринятым методом вариационной статистики с применением критерия достоверности по Стьюденту с использованием специальных программ.

Проведенные исследования показали, что при микотоксикозе, у крыс 2 группы на 11 день эксперимента наблюдалось угнетение, снижение двигательной активности, пищевой возбудимости, разжижение фекалий, взъерошенность шерстного покрова, анемичность слизистых оболочек. На 20 день была отмечена гибель одного животного, труп которого подвергся патологоанатомическому вскрытию. У животных, получавших антитоксическое лечение, клинические признаки проявились у части животных, и в меньшей степени.

Показатели выживаемости и массы тела подопытных белых крыс при Т-2 токсикозе на фоне лечения представлены в таблице 2.

Результаты исследования динамики живой массы показали, что у крыс второй группы к концу эксперимента регистрировали потерю массы тела на 40,8% (р<0,001) по сравнению с контрольной группой, третьей - 6,0% и четвертой - 17,2%.

Анализ гематологических параметров показал, что у животных 2 группы наблюдались признаки анемии (таблица 3). На 30 день опыта у крыс в группе без лечения отмечалось достоверное снижение уровня эритроцитов по отношению к контрольной группе на 30,2% (р<0,001), гемоглобина - 32,0% (р<0,001), лейкоцитов - 38,1% (р<0,001). В группах лечения, в целом, динамика была положительной, которая была более выражена у животных 3 опытной группы.

Проведение антитоксической иммунотерапии крыс третьей и четвертой групп позитивно сказалось на функциональном состоянии печени (таблица 4), где разница по АЛТ с показателем интактного контроля составила на 21 день - 23,0% и 50,8% (р<0,05), соответственно, по ACT - 24,6% и 46,4% (р<0,001), соответственно, при токсикозе колебание данных показателей составило 100,8 (р<0,001) и 70,4% (р<0,05), соответственно. В активности щелочной фосфатазы прослеживалась аналогичная динамика: у животных в группе без лечения данный показатель к концу наблюдений превышал значение контроля в 2,1 раза (р<0,001), в то время, как у крыс 3 и 4 групп - в 1,2 и 1,5 раза (р<0,01).

При оценке показателей желчеобразования при Т-2 токсикозе была зарегистрирована гипербиллирубинемия и гиперхолестеринемия - в сыворотке крови крыс, получавших и не получавших лечение, разница в концентрации общего билирубина составила 20,6%, холестерина - 40,2% (p<0,001).

Исследование процесса перекисного окисления липидов по показателю МДА при экспериментальном Т-2 токсикозе крыс на фоне специфического лечения представлено в таблице 5. У животных второй группы зарегистрировали достоверное усиление процессов ПОЛ в 1,4 раза по сравнению с данными контроля, в то время, как при введении антитоксических сывороток, лишь в 0,9-1,1 раза.

Наблюдали изменения в работе иммунной системы у белых крыс второй группы, которые носили достоверный характер (таблица 6). Во всех исследуемых группах наблюдали снижение, как фагоцитарной активности, так и фагоцитарного индекса. Снижение этих показателей во 2 группе составило 22,0% (р<0,05) и 18,6% (р<0,05), в третьей - 5,4 и 7,0%, в четвертой - 8,6% и 11,5%.

Лизоцимная и бактерицидная активности к концу эксперимента у крыс 2 группы имела статистически значимые отличия от значения группы контроля, и была ниже на 19,6% (р<0,05) и 18,0% (р<0,05). В остальных группах на фоне лечения изменения были незначительны.

При паталогоанатомическом вскрытии у крыс 2 группы было выявлено: гиперплазия и гиперемия почек, истончение и катаральное и катарально-геморрагическое воспаление слизистой оболочки кишечника, токсическая дистрофия печени. На фоне лечения у животных 3 и 4 групп изменения были выражены слабее.

Таким образом, результаты эксперимента подтверждают эффективность терапии микотоксикоза животных на основе заявляемой лечебной сыворотки. Применение которой позволяет преодолеть токсический эффект, вызванный Т-2 токсином, нормализовать показатели гомеостаза, улучшить общее состояние и снизить гибель животных, предотвратить снижение массы тела.

Для терапии Т-2 микотоксикоза животных предложена лечебная сыворотка, эффект которой достигается на новом лечебном принципе, который до этого не использовался при терапии микотоксикозов. Заявляемая лечебная сыворотка нейтрализует действие Т-2 токсина на стадии метаболизации и активации гиперпродукции провоспалительных пептидов, т.е. защитный эффект происходит на сигнальном уровне и сохраняется даже по истечении времени после поступления токсина, при этом сыворотка помогает организму справится и с последствиями потребления токсина.

Преимуществом также является то, что получение лечебной сыворотки происходит по более простому способу, исключающему применение дорогостоящих процедур (химический синтез конъюгата Т-2 токсина с полилизином, дополнительная очистка иммуноглобулинов диализом) и реактивов.

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ, включающий получение лечебной сыворотки для терапии микотоксикоза животных, и предусматривает шестидневный курс внутрижелудочного введения микотоксина в дозе 1/5 ЛД₅₀, затем через сутки после последнего введения микотоксина у животных отбирают кровь, отделяют сыворотку крови, которую вводят новым животным подкожно вдоль позвоночного столба и часть внутримышечно на 1, 21 и 42 сутки, и на 14 сутки от последнего введения отбирают партию лечебной сыворотки, которую используют в работе. Лечебную сыворотку при микотоксикозе животных вводят внутримышечно двукратно с интервалом 7 суток в дозе 0,3 мл на кг живой массы. Способ обеспечивает снижение действия микотоксина, увеличивает сохранность животных, прирост массы тела, улучшает физиологическое состояние животных, нормализует гемато-биохимические показатели, повышает уровень иммунного статуса. 6 табл., 2 пр.

Способ получения лечебной сыворотки для терапии микотоксикоза животных, предусматривающий шестидневный курс внутрижелудочного введения микотоксина в дозе 1/5 ЛД₅₀, затем через сутки после последнего введения микотоксина у животных отбирают кровь, отделяют сыворотку крови, которую вводят новым животным подкожно вдоль позвоночного столба и часть внутримышечно на 1, 21 и 42 сутки, и на 14 сутки от последнего введения отбирают партию лечебной сыворотки, которую используют в работе.