Композиция, содержащая высококонцентрированный ингибитор альфа-1-протеиназы, и способ ее приготовления Российский патент 2024 года по МПК C07K14/81 A61K9/08 A61K9/19 A61K9/51 A61K38/55 A61K38/57 A61K45/00 A61K47/12 A61K47/30 A61P1/16 A61P11/00 

ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Область изобретения

Настоящее изобретение относится к области фармацевтических продуктов. Некоторые воплощения в данном описании относятся к композициям, содержащим высококонцентрированный ингибитор альфа-1-протеиназы (A1PI), которые можно использовать при многих терапевтических показаниях, и способам получения данных композиций.

Описание уровня техники

Ингибитор альфа-1-протеиназы (A1PI), также известный как альфа-1-антитрипсин (ААТ) или α₁-антитрипсин, представляет собой ингибитор протеиназ, действующий на различные клеточные протеазы. A1PI играет важную роль в гомеостазе тканей посредством ингибирования действия эластазы нейтрофилов и посредством других механизмов.

Врожденные дефекты A1PI делают возможным неконтролируемую активность эластазы нейтрофилов и последующую деградацию эластина, важнейшего белка, придающего эластичность тканям, в частности тканям легких. Отсутствие эластина может приводить к осложнениям со стороны дыхательного аппарата, таким как эмфизема легких, и циррозу печени.

Длительное внутривенное (в.в.) введение A1PI для лечения дефицита ААТ является обременительным, требует профессиональной помощи (назначается на дому у пациента или в клиниках, больницах и т.д.) и может вызывать прямые аллергические реакции. Для преодоления указанных проблем авторами изобретения был разработан новый способ концентрирования и новая композиция для нового продукта, который содержит высококонцентрированный A1PI. Концентрированная композиция, подробно описанная в данном изобретении, обеспечивает возможность для более широкого спектра парентерального введения, которое может включать внутривенное, подкожное, аэрозольное и интрадермальное введение. Этот продукт может удовлетворить давно существующую неудовлетворенную потребность в облегчении способа введения доз пациентами на дому без помощи медицинского работника, что снижает затраты и подходит для длительного лечения.

Авторы настоящего изобретения не осведомлены о каком-либо известном способе предшествующего уровня техники для получения A1PI с концентрацией выше 100 мг/мл. Попытки увеличить концентрацию A1PI с использованием традиционной фильтрации в тангенциальном потоке (TFF) приводят к образованию неприемлемо высокого уровня агрегатов даже при использовании небольшого количества солей в составе буферного раствора. Авторы настоящего изобретения неожиданно обнаружили, что с использованием модифицированного способа ультрафильтрации в тангенциальном потоке, при котором применяется тот же самый тип мембраны и то же самое отсечение по молекулярной массе (MWCO), что и на стадии традиционной ультрафильтрации/диафильтрации (UFDF), но процесс осуществляется при пониженных скоростях потока, более высоком трансмембранном давлении (ТМР) и с использованием мембраны большей площади для увеличения длины пути потока, можно сконцентрировать A1PI по меньшей мере до 10% (масс./об., 100 мг/мл) в однопроходной фильтрации в тангенциальном потоке (SPTFF) после проведения диафильтрации против воды для удаления используемых в процессе солей. Авторы настоящего изобретения неожиданно обнаружили, что с использованием дополнительной стадии SPTFF против воды для инъекций (WFI) можно получить концентрацию раствора A1PI по меньшей мере 100 мг/мл, и на основе указанного раствора затем могут быть приготовлены композиции, содержащие незаряженные эксципиенты для достижения изотонических условий. Это позволило создать композицию на основе концентрированного A1PI с незаряженными эксципиентами для подведения осмоляльности при одновременном решении имеющихся ранее проблем, связанных с проявлением низкой стабильности в присутствии заряженных эксципиентов.

КРАТКОЕ ИЗЛОЖЕНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Согласно одному из воплощений настоящего изобретения предложена композиция, содержащая ингибитор альфа-1-протеиназы (A1PI) в водном растворе, где концентрация A1PI составляет более 100 мг/мл или равна 100 мг/мл, предпочтительно составляет более 150 мг/мл или равна 150 мг/мл, более предпочтительно составляет более 200 мг/мл или равна 200 мг/мл.

В некоторых предпочтительных воплощениях композиция, содержащая A1PI, дополнительно содержит один или более незаряженных эксципиентов. Термин «незаряженные эксципиенты» означает, что у указанных эксципиентов вблизи нейтрального значения рН отсутствует какой-либо суммарный заряд, равный единице или более.

В некоторых предпочтительных воплощениях один или более незаряженных эксципиентов находятся в концентрации, необходимой для достижения изотоничности, т.е. осмоляльности, в диапазоне от 220 до 410 мОсм/кг Н₂O, предпочтительно примерно 300 мОсм/кг Н₂O.

В некоторых предпочтительных воплощениях один или более незаряженных эксципиентов выбраны из перечня, состоящего из аминокислот, сахаров и полиолов, включая сорбит, серии, трегалозу, аланин, сахарозу и маннит и их комбинации. Более предпочтительно, один или более незаряженных эксципиентов представляют собой аланин, сорбит или трегалозу и их комбинации.

В некоторых предпочтительных воплощениях указанный(ые) незаряженный(ые) эксципиент(ы) присутствует(ют) в композиции в концентрации приблизительно 120 мМ для достижения приемлемой осмоляльности.

В некоторых воплощениях фармацевтическую композицию можно вводить пациенту, нуждающемуся в этом.

Согласно другому воплощению настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая вышеупомянутую композицию и фармацевтически приемлемый носитель.

В некоторых воплощениях фармацевтическую композицию готовят для внутривенного, подкожного, аэрозольного или интрадермального введения, предпочтительно для подкожного введения.

В некоторых воплощениях фармацевтическая композиция инкапсулирована в наночастицы, или она содержит полимер с замедленным высвобождением.

Согласно другому воплощению настоящего изобретения предложен способ приготовления вышеупомянутой композиции, включающий получение раствора A1PI путем концентрирования исходного раствора A1PI посредством SPTFF.

Согласно некоторым воплощениям предложен способ получения раствора A1PI с использованием SPTFF, где конечная концентрация A1PI составляет по меньшей мере 100 мг/мл, предпочтительно по меньшей мере 150 мг/мл, более предпочтительно по меньшей мере 200 мг/мл.

В некоторых воплощениях способ получения раствора A1PI с использованием SPTFF осуществляют против воды для инъекций (WFI).

В некоторых воплощениях способ получения концентрированного раствора A1PI включает в себя после проведения SPTFF стадию приготовления композиции вместе с одним или несколькими незаряженными эксципиентами, выбранными из перечня, состоящего из сорбита, серина, трегалозы, аланина, сахарозы и маннита и их комбинаций. Более предпочтительно, один или более незаряженных эксципиентов представляют собой аланин, сорбит или трегалозу и их комбинации.

Значение рН регулируют до значения, близкого к нейтральному (в диапазоне примерно от 6,6 до 7,4), без применения буферов, но путем корректировки посредством добавления эксципиента(ов) композиции, и оно остается стабильным в течение всего срока хранения.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

На Фиг. 1 показано воплощение способа, при котором к способу предшествующего уровня техники добавлена стадия SPTFF и стадия приготовления композиции.

На Фиг. 2 показана зависимость значения В₂₂ для различных типов эксципиентов по результатам экспериментов с применением хроматографии с взаимодействием между компонентами (SIC).

На Фиг. 3 показано процентное содержание агрегатов с течением времени (в сутках) для 20%-ных композиций на основе A1PI при 40°С.

На Фиг. 4 показано процентное содержание агрегатов, измеренное с использованием эксклюзионной высокоэффективной жидкостной хроматографии (SE-HPLC) в жидких композициях на основе A1PI, хранящейся во флаконах при 5°С.

На Фиг. 5 показана зависимость дзета-потенциала от рН для разных композиций на основе A1PI при 0,12 М.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ

В настоящее время растворы A1PI для лечения врожденного дефицита белка у человека (дефицита альфа-1 антитрипсина, AATD) имеются в продаже (Prolastin-C, Grifols; Glassia, Shire; Zemaira, CSL; Aralast, Baxter). Одно ограничение, общее для всех этих продуктов, заключается в том, что они содержат A1PI в относительно низких концентрациях (примерно от 20 до 50 мг/мл). По этой причине единственным подходящим способом для их введения в качестве терапевтического средства является еженедельная внутривенная инъекция.

Длительное внутривенное введение A1PI для лечения AATD является обременительным, требует профессиональной помощи и может вызывать прямые аллергические реакции. Таким образом, существует давняя неудовлетворенная потребность в облегчении способа введения доз пациентами на дому без помощи медицинского работника, что снижает затраты и подходит для длительного лечения. Для того чтобы обеспечить более широкий спектр способов парентерального введения, концентрация A1PI в продуктах должна быть увеличена. Однако невозможно получить стабильный концентрированный жидкий A1PI на основе имеющихся в настоящее время способов очистки A1PI при использовании имеющихся композиций.

Неожиданно авторы изобретения обнаружили, что включение дополнительной стадии SPTFF в конце процесса очистки позволило получить высококонцентрированный A1PI с концентрацией по меньшей мере 100 мг/мл, предпочтительно по меньшей мере 150 мг/мл и наиболее предпочтительно 200 мг/мл. Новизна этой стадии способа заключается в том, что ее необходимо было проводить в отсутствие буферов и солей, в присутствии WFI и с последующим приготовлением композиции путем добавления одного или более незаряженных эксципиентов, выбранных из перечня, состоящего из сорбита, серина, трегалозы, аланина, сахарозы и маннита и их комбинаций, более предпочтительно аланина, сорбита или трегалозы и их комбинаций. Важно, что полученные композиции подходят для введения человеку, поскольку они соответствуют значениям осмоляльности, стабильности И ВЯЗКОСТИ, требуемым регулирующими органами.

Композиции на основе A1PI

В некоторых воплощениях согласно настоящему изобретению предложена композиция, содержащая А1PI. В некоторых воплощениях композиция содержит А1PI в водном растворе. В некоторых воплощениях концентрация A1PI в композиции составляет по меньшей мере 100 мг/мл. В некоторых воплощениях концентрация A1PI в композиции составляет 150 мг/мл. В некоторых воплощениях концентрация A1PI в композиции составляет не менее 200 мг/мл. В некоторых воплощениях концентрация A1PI в композиции составляет примерно 100, 140, 180, 220, 260, 300, 340, 380, 420, 460 или 500 мг/мл или находится в диапазоне, определенном любыми двумя из вышеупомянутых значений.

Фармацевтические композиции на основе A1PI

В некоторых воплощениях предложена фармацевтическая композиция. В некоторых воплощениях фармацевтическая композиция содержит раствор A1PI. В некоторых воплощениях концентрация A1PI в растворе составляет по меньшей мере 100 мг/мл.

В некоторых воплощениях концентрация A1PI в растворе составляет от примерно 100 мг/мл до примерно 500 мг/мл. В некоторых воплощениях концентрация A1PI в растворе составляет примерно 100, 150, 200, 300, 400 или 500 мг/мл или находится в диапазоне, определенном любыми двумя из вышеупомянутых значений.

В некоторых воплощениях осмоляльность раствора составляет от примерно 220 мОсм/кг до примерно 410 мОсм/кг. В некоторых воплощениях осмоляльность раствора составляет примерно 220, 240, 270, 300, 330, 360, 390 или 410 мОсм/кг или находится в диапазоне, определенном любыми двумя из вышеупомянутых значений.

В некоторых предпочтительных воплощениях фармацевтическая композиция дополнительно содержит один или более незаряженных эксципиентов, выбранных из группы, состоящей из аминокислот, Сахаров и полиолов, включая сорбит, серии, трегалозу, аланин, сахарозу и маннит и их комбинации, более предпочтительно аланин, сорбит или трегалозу и их комбинации.

Значение рН регулируют до значения, близкого к нейтральному (в диапазоне примерно от 6,6 до 7,4), без применения буферов, но путем корректировки посредством добавления эксципиента(ов) композиции, и оно остается стабильным в течение всего срока хранения.

В некоторых предпочтительных воплощениях фармацевтическая композиция содержит один или более незаряженных эксципиентов в конечной концентрации примерно 120 мМ для достижения приемлемой осмоляльности.

Согласно одному или более воплощений фармацевтическую композицию, предложенную в данном изобретении, можно вводить пациенту, нуждающемуся в этом. В некоторых воплощениях фармацевтическую композицию вводят внутривенно, интрадермально, подкожно, внутримышечно, перорально или посредством комбинации этих способов.

В некоторых воплощениях другие неограничивающие пути введения охватывают, например, парентеральное, внутрисуставное, внутрибронхиальное, интраабдоминальное, внутрикапсулярное, внутрихрящевое, внутриполостное, внутрибрюшинное, внутримозжечковое, интрацеребровентрикулярное введение, введение в толстую кишку, интрацервикальное, внутрижелудочное, внутрипеченочное, интрамиокардиалыюе, внутрикостное, внутритазовое, внутриперикардиальное, интраперитониальное, внутриплевральное введение, введение в предстательную железу, внутрилегочное, интраректальное, внутрипочечное, интраретинальное, интраспинальное, интрасиновиальное, интраторакальное, внутриматочное, внутрипузырное введение, введение в область поражения, введение в виде болюс-инъекции, вагинальное, ректальное, трансбуккальное, сублингвальное, интраназальное или трансдермальное введение.

В некоторых воплощениях фармацевтические композиции, предложенные в данном изобретении, содержат активные ингредиенты, неактивные ингредиенты, эксципиенты и/или фармацевтически приемлемые носители. Широкий круг фармацевтически приемлемых носителей доступен и хорошо известен в данной области техники. Состав фармацевтических композиций частично определяется конкретно вводимой композицией, а также конкретным способом и/или путем, используемым для введения композиции.

Фармацевтические композиции могут содержать водные и неводные изотонические стерильные растворы для инъекций, которые могут включать в себя антиоксиданты, буферы, бактериостатические средства и растворенные вещества, делающие композицию изотоничной крови предполагаемого реципиента, и водные и неводные стерильные суспензии, которые могут включать в себя суспендирующие агенты, солюбилизаторы, загустители, стабилизаторы и консерванты.

В некоторых воплощениях одно или более воплощений фармацевтической композиции, предложенной в данном изобретении, используют для лечения одного или более осложнений со стороны дыхательного аппарата, таких как эмфизема легких, хроническая обструктивная болезнь легких и так далее. В некоторых воплощениях одно или более воплощений фармацевтической композиции, предложенной в данном изобретении, используют для лечения связанных с печенью осложнений, таких как цирроз печени. В некоторых воплощениях одно или более воплощений фармацевтической композиции, предложенной в данном изобретении, используют для лечения любого заболевания или состояния, связанного с дефицитом A1PI, или заболевания или состояния, при котором полезным является повышение уровня A1PI.

Способы получения концентрированного раствора A1PI

Согласно некоторым воплощениям предложен способ получения раствора A1PI. В некоторых воплощениях способ включает концентрирование раствора A1PI в воде или с использованием незаряженных эксципиентов посредством традиционной ультрафильтрации в тангенциальном потоке (TFF) с применением плоской кассеты. В некоторых воплощениях конечная концентрация A1PI в концентрированном растворе составляет вплоть до 100 мг/мл включительно.

В некоторых воплощениях способ включает концентрирование раствора A1PI в воде или с использованием незаряженных эксципиентов посредством SPTFF, где конечная концентрация A1PI в концентрированном растворе составляет от примерно 150 мг/мл до примерно 500 мг/мл. В некоторых воплощениях конечная концентрация A1PI в концентрированном растворе составляет примерно 150, 180, 200, 220, 260, 300, 340, 380, 420, 460 или 500 мг/мл или находится в диапазоне, определенном любыми двумя из вышеупомянутых значений.

В некоторых предпочтительных воплощениях раствор A1PI в WFI получают с использованием SPTFF.

В некоторых воплощениях способ получения концентрированного раствора A1PI включает, после проведения стадии SPTFF, приготовление композиции с одним или более незаряженными эксципиентами, выбранными из группы, состоящей из аминокислот, Сахаров и полиолов, включая сорбит, серии, трегалозу, аланин, сахарозу и маннит и их комбинации, более предпочтительно аланин, сорбит или трегалозу и их комбинации.

Значение рН регулируют до значения, близкого к нейтральному (в диапазоне примерно от 6,6 до 7,4), без применения буферов, но путем корректировки посредством добавления эксципиента(ов) композиции, и оно остается стабильным в течение всего срока хранения.

В некоторых предпочтительных воплощениях концентрация незаряженного эксципиента в композиции составляет примерно 0,12 М или является достаточной для подведения осмоляльности до изотонических условий.

Дополнительные воплощения

Таким образом, в некоторых воплощениях для такой композиции на основе концентрированного А1PI используются альтернативные способы введения. Например, наноинкапсулирование (т.е. инкапсулирование в наночастицы) с полимером с замедленным высвобождением для интрадермального введения. Такие полимеры с замедленным высвобождением для наноинкапсулирования хорошо известны специалистам в данной области техники. Например, в Tran Thi Dat Nguyen (2015), «Synthesis of timed-release polymer nanoparticles» из Австралийского института Биоинженерии и Нанотехнологии, Университета Квинсленда, доступной в библиотеке eSpace Университета Квинсленда с DOI 10.14264/uql.2015.605, описано применение наночастиц, самоорганизующихся из случайных термочувствительных сополимеров, таких как сополимеры PNIPAM (поли(N-изопропилакриламид)) и PDMAEA (2-диметиламиноэтилакрилат). Полное содержание этой статьи включено тем самым в настоящее описание посредством ссылки. Для достижения безопасного введения высоко концентрированного A1PI также применимы другие способы.

Примеры

Пример сравнения 1. Последовательность операций способа получения высококонцентрированного A1PI в соответствии с предшествующим уровнем техники

В способах приготовления препаратов Alpha-1 MP (US 6462180 B1), Liquid Alpha (US 9616126 B1) и Alpha-1 HC (US 20110237781 Al) готовят раствор A1PI с концентрацией до 50 мг/мл включительно, используя для концентрирования типичную стадию UF в режиме рециркуляции (TFF), после чего осуществляют стадию диафильтрации (DF), используя воду, с целью удаления солей в составе буферного раствора с получением нерасфасованного продукта для конечной композиции и подведения концентрации по белку до 50 мг/мл. Композиция состоит из 20 мМ буфера на основе фосфата натрия для поддержания рН и либо соли (Alpha-1 MP и Alpha-1 НС; 100 мМ или 150 мМ NaCl, соответственно), либо аминокислоты (Liquid Alpha; 200-300 мМ аланин) для подведения осмоляльности до изотонических условий, составляющих 220-410 мОсм/кг. Аналогичным образом готовят другие композиции на основе A1PI (Таблица 1).

Как разъяснено выше, способ по настоящему изобретению включает в себя две дополнительные стадии по сравнению с приведенным выше способом: концентрирование посредством SPTFF и приготовление композиции, как показано на Фиг. 1.

Пример 2. Оценка величины В₂₂ как индикатора агрегации в растворах A1PI с незаряженными эксципиентами, полученных способом по настоящему изобретению

Способ по настоящему изобретению включает концентрирование посредством SPTFF с использованием WFI и приготовление композиции с незаряженными эксципиентами. Несколько незаряженных эксципиентов в концентрации 0,12 М при рН 7,0, а также контроли с низким значением рН или высокой концентрацией соли использовали для приготовления 20%-ных растворов A1PI, наносили на колонки для хроматографии с взаимодействием между компонентами (SIC), приготовленные посредством конъюгирования A1PI со смолой Toyopearl AF-formyl-650M (Tosoh Biosciences), и регистрировали время удерживания. Время удерживания белка преобразовывали во второй вириальный коэффициент осмотического давления (В₂₂), который является мерой белок-белковых взаимодействий. На Фиг. 2 представлен график зависимости В₂₂ от типа эксципиента. Более высокие значения В₂₂ соответствуют более сильному белок-белковому отталкиванию (предпочтительному для того чтобы минимизировать агрегацию) (Payne et al., "Second Virial Coefficient Detennination of a Therapeutic Peptide by Self-Interaction Chromatography", Biopolymers (Peptide Science), Vol.84, 527-533 (2006)). Самые низкие значения B₂₂ предсказуемо наблюдали для отрицательного контроля с низким значением рН (0,12 М KСl, рН 6,0) и контроля состава композиции (20 мМ фосфат натрия, 75 мМ NaCl, рН 7,0) в условиях, которые, как известно, являются наименее благоприятными (наиболее сильное белок-белковое взаимодействие) для A1PI. Сорбит, серии, трегалоза, аланин и маннит - все имели более высокие значения В₂₂ , указывая на более сильное отталкивание молекул белка, при этом маннит имел наивысшее значение В₂₂ . Растворы в WFI, в которых имеется отталкивание за счет собственного заряда при рН 7,0, имели промежуточные значения В₂₂ . Незаряженные эксципиенты использовали в концентрации 0,12 М и при рН 7,0.

Пример 3. Оценка агрегации A1PI в присутствии незаряженных эксципиентов

В термокинетических исследованиях композиций с содержанием A1PI 20% при 40°С измеряли ускоренную агрегацию с использованием SE-HPLC с течением времени. 20%-ные растворы A1PI с различным составом эксципиентов (маннит, аланин, серии, сорбит и трегалоза) в концентрации 0,12 М при рН 7,0, наряду с контрольной композицией (16 мМ фосфат натрия, 60 мМ NaCl, рН 7,0), инкубировали при 40°С в течение 7 суток и анализировали с использованием SE-HPLC (Фиг. 3). Эти данные подразделяли на три категории, при этом контрольная композиция имела, как и ожидалось, наивысшую скорость агрегации, тогда как композиции с маннитом, аланином, серином и сорбитом имели промежуточную скорость агрегации, а композиция с трегалозой имела значительно более низкую скорость агрегации по сравнению с остальными. В итоге, эти результаты показывают, что в присутствии незаряженных эксципиентов наблюдается меньшая агрегация в сравнении с контролем.

Пример 4. Оценка стабильности A1PI в присутствии незаряженных эксципиентов

С другой стороны, агрегацию с течением времени измеряли с использованием SE-HPLC и при разных концентрациях A1PI в присутствии заряженных и незаряженных эксципиентов. На Фиг. 4 показана выраженная в процентах агрегация для растворов A1PI во флаконах, которые хранили при 5°С. A1PI в концентрации приблизительно 50 мг/мл (ромбы), A1PI в концентрации приблизительно 200 мг/мл (кружки) с солью для регулирования осмоляльности и раствор A1PI в концентрации приблизительно 200 мг/мл, приготовленный только с 0,12 М трегалозой (треугольники), демонстрируют разные скорости агрегации. Подобно тому как у Bauer (US 7879800) показано в Таблице 12, 20%-ный раствор A1PI, приготовленный в 20 мМ фосфате натрия, 75 мМ хлориде натрия, рН 7,0, имел очень высокую скорость агрегации по сравнению с A1PI в концентрации 5% с аналогичными эксципиентами. Однако, 20%-ный раствор A1PI, приготовленный только с 120 мМ трегалозой, рН 7,0, демонстрировал гораздо меньшую агрегацию в аналогичных условиях хранения.

Пример 5. Подкожное (п.к.) или внутривенное (в.в.) введение A1PI пациенту массой 70 кг/100 кг один раз в сутки или один раз в неделю

Следует понимать, что при подкожном введении объем ограничен, причем при введении в одном участке часто ограничен значением примерно 25 мл. Поэтому для осуществления введения предписанных количеств необходима более высокая концентрация A1PI. Применяемая в настоящее время дозировка до 60 мг/кг может быть достигнута с коэффициентом всасывания 1,2 (ЕР 2214699 В1) при введении один раз в неделю 15%-ного раствора A1PI в 2-х участках, либо 20%-ного раствора A1PI в одном участке, для среднестатистического пациента (Таблица 2).

Пример 6. Высококонцентрированный A1PI, приготовленный с использованием SPTFF

Способ приготовления композиций, содержащих высококонцентрированный A1PI, который может быть использован при многих терапевтических показаниях, включает применение SPTFF. Стадия SPTFF следует за стадией диафильтрации в WFI (Фиг. 1). С использованием SPTFF можно сконцентрировать A1PI до более высоких концентраций в WFI по сравнению с теми, которые могут быть достигнуты с применением традиционной TFF (выше 100 мг/мл), только за одно пропускание через UF мембранный узел при более низких скоростях насоса, уменьшая воздействия тепла и напряжения, связанных с продолжительными циркуляциями с использованием насоса при TFF. Увеличенная длина пути потока в сочетании со сниженной скоростью потока при более высоком трансмембранном давлении позволяет достичь более высоких концентраций A1PI [более 25% (масс./об.)] с использованием SPTFF в присутствии только WFI. Окончательно, концентрированный раствор A1PI разбавляют с точностью до заданной концентрации [по меньшей мере 10% (масс./об.)] с использованием концентрированного раствора эксципиентов с рН, подведенным до 7,0, для регулирования осмоляльности с использованием аминокислот, Сахаров или полиолов (представленных в Таблице 3 аланином, трегалозой и сорбитом, соответственно). Этот способ позволяет достичь высоких концентраций A1PI, одновременно получая стабильные композиции жидкого лекарственного продукта без использования буферов, солей или поверхностно-активных веществ.

Пример 7. Измерение дзета-потенциала в диапазоне рН

Производили оценку дзета-потенциала для растворов A1PI, содержащих эксципиенты в концентрации 0,12 М, для различных значений рН с использованием Zetasizer. Более высокая величина дзета-потенциала (не менее 40 мВ или не более -40 мВ) соответствует лучшей коллоидной стабильности, поскольку молекулы с достаточным зарядом имеют тенденцию к электростатическому отталкиванию и с меньшей вероятностью образуют агрегаты в растворе. Все протестированные композиции на основе A1PI (Фиг. 5) демонстрировали коллоидную стабильность в диапазоне рН от 6,6 до 7,4, на основании измеренных значений ZP ниже -40 мВ. В случае каждой композиции наблюдали тенденцию стремления дзета-потенциала к 0 при приближении рН к изоэлектрической точке A1PI (между 4,0 и 5,0).

Определения

Как использовано в данном описании, заголовки разделов предназначены только для организационных целей и не должны рассматриваться как каким-либо образом ограничивающие описываемый объект. Все публикации и аналогичные материалы, цитируемые в этой заявке, включая, но не ограничиваясь этим, патенты, патентные заявки, статьи, книги, монографии и web-страницы из Интернета, в явном виде включены посредством ссылки во всей своей полноте для любого назначения. Когда определения терминов во включенных ссылках отличаются от определений, приведенных в настоящем описании, определение, приведенное в настоящем описании, должно иметь преимущественную силу. Следует понимать, что термин «примерно» перед значениями температур, концентраций, времени и т.д., обсуждаемых в настоящем описании, подразумевает наличие небольших и несущественных отклонений, находящихся в пределах объема настоящего описания.

В этой заявке использование единственного числа включает объекты во множественном числе, если конкретно не указано иное. Кроме того, подразумевается, что использование терминов «содержат», «содержит», «содержащий», «имеют в своем составе», «имеет в своем составе», «имеющий в своем составе», «включают», «включает» и «включающий» не является ограничивающим.

Как использовано в этом описании и формуле изобретения, формы единственного числа включают ссылки на множественное число, если содержание явным образом не предписывает иное.

Как использовано в данном описании, термин «примерно» подразумевает, что количество, уровень, величина, число, частота, процентное содержание, габариты, размер, степень, масса или длина варьируют на величину, составляющую до 20, 15, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 или 1% от референсных значений количества, уровня, величины, числа, частоты, процентного содержания, габаритов, размера, степени, массы или длины.

Несмотря на то, что это описание приводится с указанием на конкретные воплощения и примеры, специалистам в данной области техники будет понятно, что настоящее описание не ограничивается конкретно раскрытыми воплощениями и распространяется на другие альтернативные воплощения и/или применения воплощений и их очевидных модификаций и эквивалентов. В дополнение, несмотря на то, что некоторые варианты воплощений приведены и описаны подробно, специалистам в данной области техники с учетом данного описания будут очевидны и другие модификации, находящиеся в пределах объема этого изобретения.

Также подразумевается, что могут быть выполнены различные комбинации или подкомбинации конкретных признаков и аспектов воплощений, и они по-прежнему входят в объем данного изобретения. Следует понимать, что различные признаки и аспекты раскрытых воплощений могут быть объединены друг с другом или могут заменять друг друга с целью образования измененных вариантов или воплощений данного изобретения. Таким образом подразумевается, что объем настоящего изобретения, раскрытого в данном описании, не должен быть ограничен конкретно описанными выше раскрытыми воплощениями.

Однако следует понимать, что такое подробное описание с указанием предпочтительных воплощений данного изобретения приведено только в иллюстративных целях, поскольку различные изменения и модификации в пределах сущности и объема данного изобретения будут очевидны специалистам в данной области техники.

Терминологию, используемую в данном описании, не следует интерпретировать каким-либо ограничительным или рестриктивным образом. Скорее, данная терминология просто используется вместе с подробным описанием воплощений систем, способов и соответствующих компонентов. Кроме того, воплощения могут содержать несколько новых признаков, ни один из которых по отдельности не отвечает за свои желательные характеристики или не считается важным для практического осуществления приведенных в данном описании воплощений.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к композициям, содержащим высококонцентрированный ингибитор альфа-1-протеиназы (A1PI) в концентрации от 100 мг/мл до 200 мг/мл. На основе этих композиций могут быть приготовлены фармацевтические композиции. Фармацевтические композиции могут быть подходящими для подкожного введения. Данные композиции можно использовать при многих терапевтических показаниях. Изобретение также относится к способу получения описанных композиций с использованием однопроходной фильтрации в тангенциальном потоке (SPTFF). 4 н. и 10 з.п. ф-лы, 5 ил., 3 табл., 7 пр.

1. Композиция для ингибирования действия эластазы нейтрофилов, содержащая ингибитор альфа-1-протеиназы (A1PI) в водном растворе, где:

(а) концентрация A1PI составляет от 100 мг/мл до 200 мг/мл; и

(b) композиция (1) дополнительно содержит один или более незаряженных эксципиентов в концентрации, необходимой для достижения осмоляльности от 220 до 410 мОсм/кг H₂O; и (2) не содержит буфер.

2. Композиция по п. 1, где указанные один или более незаряженных эксципиентов находятся в концентрации, необходимой для достижения осмоляльности примерно 300 мОсм/кг H₂O.

3. Композиция по п. 1 или 2, где один или более незаряженных эксципиентов выбраны из группы, состоящей из сорбита, серина, трегалозы, аланина, сахарозы и маннита и их комбинаций.

4. Композиция по п. 3, где один или более незаряженных эксципиентов выбраны из группы, состоящей из сорбита, трегалозы, аланина и их комбинаций.

5. Фармацевтическая композиция для лечения заболеваний, связанных с дефицитом A1PI, содержащая композицию по любому из пп. 1-4 и фармацевтически приемлемый носитель.

6. Фармацевтическая композиция для лечения заболеваний, при которых полезным является повышение уровня A1PI, содержащая композицию по любому из пп. 1-4 и фармацевтически приемлемый носитель.

7. Фармацевтическая композиция по п. 5 или 6, приготовленная для внутривенного, подкожного, аэрозольного или интрадермального введения.

8. Фармацевтическая композиция по п. 7, приготовленная для подкожного введения.

9. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 5-8, инкапсулированная в наночастицы.

10. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 5-9, содержащая полимер с замедленным высвобождением.

11. Способ приготовления композиции по любому из пп. 1-4, включающий стадию получения раствора A1PI путем концентрирования исходного раствора A1PI с использованием однопроходной фильтрации в тангенциальном потоке (SPTFF).

12. Способ приготовления композиции по п. 11, где указанную стадию SPTFF осуществляют против воды для инъекций (WFI).

13. Способ приготовления композиции по любому из пп. 11 и 12, где после стадии SPTFF раствор A1PI изготавливают в виде композиции с одним или более незаряженными эксципиентами, выбранными из перечня, состоящего из сорбита, серина, трегалозы, аланина, сахарозы и маннита и их комбинаций.

14. Способ приготовления композиции по п. 13, где после стадии SPTFF раствор A1PI изготавливают в виде композиции с сорбитом, трегалозой, аланином или их комбинацией.