СПОСОБЫ БОРЬБЫ С ИНВАЗИЕЙ ГРИБКОВОГО ПАТОГЕНА РАСТЕНИЙ Российский патент 2024 года по МПК A01N25/00 A01N63/00 

[0001] Настоящее изобретение касается способов борьбы с фитопатогенными грибами с применением средств биологической борьбы. Более конкретно, изобретение касается способов борьбы с фитопатогенными грибами, имеющими длительный инкубационный период. В частности, способы в соответствии с изобретением являются особенно подходящими для борьбы с причинным агентом мучнистой росы винограда - грибком Erysiphe necator.

Уровень техники

[0002] Были разработаны и запущены в серийное производство несколько синтетических химических растворов для борьбы с грибковыми заболеваниями. Однако среди потребителей сохраняется растущая потребность в пищевых продуктах, которые бы подвергались меньшей обработке синтетическими химическими продуктами во время их производства. Для удовлетворения этой потребности разрабатываются средства биологической борьбы.

[0003] Большинство средств биологической борьбы, имеющих фунгицидную активность, как правило, рекомендуются растениеводам для нанесения на культурные растения до фактического развития грибкового заболевания, т.е., до того, как видимые симптомы станут заметны растениеводу.

[0004] Однако многие фитопатогенные грибы имеют длительный инкубационный период, т.е., видимые симптомы болезни проявляются через несколько недель после фактического поражения растений грибком. В отношении этих грибов нанесение до визуализации симптомов может фактически не соответствовать оптимальному времени нанесения, поскольку, несмотря на невидимость симптомов, растение уже может быть поражено болезнью.

[0005] Мучнистая роса винограда, вызываемая Erysiphe necator (также известна как Uncinula necator), является одной из наиболее распространенных болезней винограда (Vitis vinifera L.) во всем мире. Erysiphe necator относится к аскомицетам и представляет собой облигатный биотрофный грибок, т.е., его рост и воспроизводство полностью зависят от его живого хозяина виноградника (плодов и листьев). Erysiphe necator является фитопатогенным грибком с длительным инкубационным периодом, который может длиться несколько недель.

[0006] Биологический штамм Bacillus pumilus QST2808 (также указываемый как NRRL No. В-30087) описывается в документе WO 00/58442 как активный против определенных болезней растений. Более конкретно, штамм Bacillus pumilus QST2808 продемонстрировал способность к сдерживанию развития мучнистой росы винограда Erysiphe necator при испытании в экспериментальных контролируемых условиях, при которых патоген и средства лечения применяют параллельно. Эти данные показывают, что биологический штамм Bacillus pumilus QST2808 способен сдерживать развитие мучнистой росы Erysiphe necator, но не сообщается никакой информации о том, может ли быть эта способность более или менее эффективной в зависимости от стадии инвазии на растениях винограда. Таким образом, на основе изложенного в документе WO 00/58442 можно предположить, что способность штамма Bacillus pumilus QST2808 к сдерживанию развития Erysiphe necator является неизменной независимо от уровня инвазии, и что обработка может быть одинаково эффективна на любой стадии инвазии.

[0007] Авторами настоящего изобретения было определено, что средства биологической борьбы эффективнее сдерживают развитие грибов с длительным инкубационным периодом, если такое средство биологической борьбы применить в начале инкубационного периода. То есть, они пришли к выводу, что биологический штамм Bacillus pumilus QST2808 гораздо лучше борется с мучнистой росой винограда Erysiphe necator в полевых условиях, если его применить на ранней стадии инкубационного периода грибов. Тот же самый эффект также был отмечен и для некоторых других средств биологической борьбы. Уже указывалось, что эти средства биологической борьбы лучше работают до инвазии, т.е., до того, как первые симптомы болезни становятся видимыми на растениях винограда. Однако применение продукта до обнаружения признаков инвазии является проблематичным для растениеводов, поскольку в их распоряжении не имеется других средств, кроме наблюдения первых симптомов болезни на растениях на своих или на соседних полях. Когда растениеводам приходится сталкиваться с инвазиями грибов, имеющих длительный инкубационный период, применение средства биологической борьбы перед визуализацией симптомов фактически может быть слишком запоздалым для достижения оптимальной эффективности такого продукта, если грибы уже находятся в стадии инвазии, то есть, в поздней стадии инкубационного периода, когда эти грибы уже прочно закрепились на культуре. Кроме того, такая обработка требует от растениеводов больших расходов, и они склоняются к ее применению лишь тогда, когда убеждены в ее необходимости. Действительно, обработка при отсутствии каких-либо видимых признаков связана либо с риском напрасной обработки, поскольку инвазия на поле может отсутствовать, либо с риском чрезмерно ранней обработки поля, после которой средство смывается дождем еще до наступления инвазии.

[0008] Эти риски еще более возрастают, когда речь идет о болезни, вызванной грибком, имеющим длительный инкубационный период, таким, как, например, грибок Erysiphe necator на винограде. Грибок Erysiphe necator, так же, как большинство грибков, имеющих длительный инкубационный период, действительно обладает такой особенностью, что его симптомы на винограде обычно становятся заметными для человеческого глаза только через несколько недель после фактической инвазии на растениях. Таким образом, виноградарям трудно судить, действительно ли их растения поражены, пока они не смогут наблюдать видимые симптомы на растениях, но когда такие симптомы становятся видимыми, инвазия в пораженных растениях бывает сильно запущенной. Известно, что такие средства биологической борьбы, как биологический штамм Bacillus pumilus QST2808, все же обладают определенной эффективностью при применении в такое время, когда первые симптомы становятся видимыми на некоторых растениях винограда в поле. Обычно растениеводы собирают информацию с соседних полей вместе с данными о погоде, для оценки риска их инфицирования. Когда на соседних полях действительно наблюдаются видимые симптомы, а погодные условия благоприятствуют развитию грибков, считается, что и их поля подвержены риску инвазии, а их культуры находятся в состоянии прединвазии. Однако для таких грибков, как Erysiphe necator, такая стадия обычно соответствует ситуации фактической инвазии грибка на культуре, и он уже пребывает в позднем инкубационном периоде, близком к созданию угрозы для растений, и, таким образом, вскоре начинают проявляться видимые симптомы.

[0009] Для того, чтобы растениеводы могли лучше определить, подвергнуты ли их виноградники инвазии грибов, имеющих длительный инкубационный период, еще до появления видимых симптомов болезни и, таким образом, применить лечение как можно раньше, были разработаны определенные средства точного обнаружения, такие, как кПЦР, способные обнаруживать очень низкое количество грибков на растениях. Такое средство описывается, например, в документе WO 2017/009251 для грибка Erysiphe necator.

[0010] Однако, несмотря на то, что известно, что биологический штамм Bacillus pumilus QST2808 более эффективен до инвазии Erysiphe necator, то есть, до того, как начинают наблюдаться первые видимые симптомы на поле, а не тогда, когда инвазия становится явно видимой на большинстве растений на поле, не существует свидетельств того, что обработка таким продуктом, наносимым значительно раньше в процессе инвазии, будет такой же эффективной.

[0011] Применяя средства точного обнаружения, авторы изобретения определили, что такие средства биологической борьбы, как штамм Bacillus pumilus QST2808, еще более эффективны при применении на самой ранней стадии процесса инвазии Erysiphe necator, и, таким образом, способ применения таких средств точного обнаружения для определения места обработки на ранней стадии инвазии позволяет оптимизировать эффективность таких продуктов, как штамм Bacillus pumilus QST2808. Это может рассматриваться как возможность применения подобно обработке средствами биологической борьбы с другими грибковыми болезнями, вызываемыми грибками, имеющими длительный инкубационный период.

Описание изобретения

[0012] Настоящее изобретение обеспечивает способ борьбы с грибковыми патогенами растений, имеющими длительный инкубационный период, с применение средства биологической борьбы, характеризующийся тем, что эффективное количество средства биологической борьбы наносят на растение, когда инфицирование грибковым патогеном растений пребывает в начале инкубационного периода.

[0013] Подобным образом, если рассматривать поле культуры, насчитывающее несколько сотен или тысячи растений, изобретение обеспечивает способ борьбы с грибковыми патогенами растений, имеющими длительный инкубационный период, с применением средства биологической борьбы, характеризующийся тем, что эффективное количество средства биологической борьбы наносят на поле культуры, когда инфицирование грибковым патогеном растений в среднем на поле культуры пребывает в начале инкубационного периода.

[0014] При инфекционных болезнях "инкубационный период" означает период времени, длящийся с момента, когда хозяин инфицируется патогеном, и до момента, когда начинают наблюдаться первые симптомы. Таким образом, в случаях грибковых патогенов растений инкубационный период соответствует периоду времени между моментом, когда растение-хозяин (для данного взаимодействия хозяина и патогена) вступает в контакт с патогеном, и моментом, когда первые симптомы болезни становятся заметными на определенных частях растения. Считается, что для патогенов растений этот инкубационный период обычно соответствует периоду времени, в течение которого патоген размножается на поверхности определенных частей растений (например, листьев, корней, плодов …), проникает в такие части растений, используя специальные органы заражения (гаустории), растет среди клеток растения и питается на них до тех пор, пока биологические разрушения, вызванные такой инвазией, не создают определенные симптомы, характерные для болезни, настолько, что они становятся видимыми для человеческого глаза, и их можно наблюдать на зараженных частях растений. Таким образом, следует понимать, что наблюдаемые симптомы не являются частью периода, указываемого как инкубационный период, и что момент, когда они начинают наблюдаться, фактически соответствует концу инкубационного периода. Момент, когда растение-хозяин вступает в контакт с патогеном, обычно называется стадией инфицирования и может состоять из вхождения отдельной патогенной инфицирующей структуры в физический контакт с частью растения. Для грибковых патогенов такой отдельной патогенной инфицирующей структурой обычно является отвечающая за воспроизводство и размножение структура патогена, такая, как спора. Симптомы могут приобретать различные формы в зависимости от взаимодействия хозяина и рассматриваемого патогена, от симптомов, влияющих на рост растений (недостаточное или чрезмерное развитие определенных органов, изменение нормального внешнего вида, например, пятнистость листьев, окаймление жилок, деформация листьев, покрытие мицелием или спорами …), до некроза некоторых частей растения (разложение или гниль некоторых частей растения). Примеры симптомов некоторых видов взаимодействия растении и патогенов представлены в публикации Sambamurty (2006), Textbook of plant pathology, IK International Pvt Ltd, 416 p.

[0015] Грибковый патоген растений, имеющий длительный инкубационный период, представляет собой грибок, патогенный для определенных растений, который имеет инкубационный период, длящийся несколько дней, предпочтительно несколько недель. Более предпочтительно грибковый патоген растений, имеющий длительный инкубационный период, представляет собой грибок, имеющий инкубационный период как минимум одну неделю, как минимум две недели, как минимум три недели, наиболее предпочтительно как минимум месяц. Инкубационный период в значительной мере зависит от патогена растений и растения-хозяина, которое он инфицирует, однако на него также могут влиять факторы внешней среды, такие, как температура, дневное освещение или влажность. Соответственно, инкубационный период следует понимать как средний инкубационный период данного патогена растений на данном растении. Средним длительным инкубационным периодом является инкубационный период от приблизительно 2 недель до приблизительно 16 недель, точнее от приблизительно 2 недель до приблизительно 12 недель, от приблизительно 2 недель до приблизительно 8 недель, от приблизительно 2 недель до приблизительно 4 недель, от приблизительно 3 недель до приблизительно 4 недель.

[0016] Неограничивающими примерами грибковых патогенов растений, имеющих длительный инкубационный период, могут быть: мучнистая роса винограда (Erysiphe necator), серая гниль (Botrytis cinerea), септориозная пятнистость листьев (Mycosphaerella graminicola), септориоз проростков (Phaeosphaeria nodorum).

[0017] В соответствии со способом согласно изобретению, средство биологической борьбы наносят на растение или поле, занятое культурой, когда инфицирование грибковым патогеном растений пребывает в начале инкубационного периода. Следует понимать, что для данного грибкового патогена инфицирование рассматривают в начале инкубационного периода во время периода, который длится со времени, когда некоторые инфицирующие структуры грибкового патогена (например, его споры) вступают в контакт с растением-хозяином, до времени, когда грибок начинает расти на поверхности растения. Поскольку эти явления невидимы для человеческого глаза, требуются определенные средства обнаружения для определения времени, когда инфицирование грибковым патогеном растений пребывает в начале инкубационного периода. Описание подходящих средств обнаружения содержится в публикации P. Narayanasamy, 2011, Microbial Plant Pathogens-Detection and Disease Diagnosis: Fungal Pathogens, Vol.1, ed. Springer Science + Business Media: 5 - 199.

[0018] Предпочтительным способом обнаружения является кПЦР, как описывается, например в Международных патентных заявках РСТ WO 95/29260 или WO 2017/009251.

[0019] Независимо от применяемого способа обнаружения определение того, что инфицирование грибковым патогеном растений пребывает в начале инкубационного периода, может зависеть от многих факторов и, таким образом, может осуществляться различными способами.

[0020] Предпочтительно определение уровня инфицирования растения грибковым патогеном осуществляют на уровне поля, занятого культурой. В такой ситуации уровень инфицирования определяют статистически путем рандомизированного отбора образцов и оценки определенного количества растений по всему полю. Количество отобранных образцов зависит от общего количества растений на поле. Статистические способы позволяют определять размер выборки, которая является репрезентативной для всего поля. Рандомизированный отбор образцов осуществляют путем сбора растительного материала из как минимум 10 растений, как минимум 20 растений, как минимум 50 растений или как минимум 100 растений. Сбор частей растений зависит от культуры, выращиваемой на поле, а также от патогена, подлежащего оценке. Некоторые грибковые патогены действительно поражают лишь некоторые части растений. В случае измерения возможного раннего инфицирования мучнистой росой винограда Erysiphe necator на винограднике в качестве материала предпочтительно собирают листья, и их предпочтительно собирают до цветения растений. Согласно этому способу отбора образцов, инфекция считается находящейся в начале инкубационного периода, если после измерения грибкового патогена с применением способа обнаружения обнаруживается, что инфицировано менее 50% образцов, предпочтительно менее 40%, 30%, 20%, 10%, более предпочтительно - менее 5%, еще более предпочтительно -менее 1%.

[0021] В некоторых ситуациях может быть необходимым определение уровня инфицирования отдельных растений. Для такого определения предпочитают средства обнаружения, позволяющие количественно измерять уровень инфицирования грибковым патогеном. В таких случаях отбор образцов осуществляют на разных частях растений, также в зависимости от свойств растения и грибкового патогена, подлежащего исследованию. Когда осуществляют количественные измерения, уровень инфицирования, который считается соответствующим началу инкубационного периода, в очень большой степени зависит от применяемого способа обнаружения. Однако, может считаться, что мера, соответствующая уровню инфицирования в начале инкубационного периода, является низким уровнем обнаружения. Соответственно, специалистам в данной области, с учетом растения и исследуемого грибкового патогена и применяемых способов обнаружения, известно, какая мера должна рассматриваться как уровень инфекции, пребывающей в начале инкубационного периода.

[0022] Соответственно, изобретение также обеспечивает способ борьбы с инвазией грибкового патогена растений, имеющего длительный инкубационный период, с применением средства биологической борьбы, который включает этапы:

(а) определения стадии инфицирования растения грибковым патогеном растений до проявления видимых симптомов с применением средства обнаружения грибкового патогена растений;

(б) нанесение эффективного количества средства биологической борьбы на растение, когда определение на этапе (а) обнаруживает, что инфицирование грибковым патогеном растений пребывает в начале инкубационного периода.

[0023] Помимо применения способов обнаружения, дополнительная которая, по сведениям, связана с инфицированием грибковым патогеном, также может учитываться для определения того, что уровень инфицирования пребывает в начале инкубационного периода, или для определения идеального момента для оценки уровня инфицирования с применением одного из способов обнаружения. Действительно, известно, что на инфицирование грибковыми патогенами влияют определенные факторы внешней среды, такие, как, например, определение влажности, температура воздуха или дневное освещение. Кроме того, информация о состоянии инфицирования данным грибковым патогеном на соседних полях может быть релевантной для определения риска инфицирования на данном поле. Вся эта дополнительная информация может использоваться для определения риска инфицирования на данном поле и, таким образом, подсказывать оптимальное время для оценки уровня инфицирования с применением одного из способов обнаружения на этом поле. Соответственно, считается, что в случае, когда набор дополнительных данных для данного грибкового патогена способствует определению риска неизбежной инфекции на данном поле, целесообразной была бы оценка фактического уровня инфицирования поля с применением одного из способов обнаружения. Вся дополнительная информация, касающаяся данного грибкового патогена и культуры, может быть измерена соответствующими средствами, доступными для специалистов в данной области, которые также могут истолковывать такую дополнительную информацию для определения риска инфицирования данного поля. Эта дополнительная информация также может быть собрана из различных источников и введена в цифровой инструмент, включающий одну или несколько компьютерных программ, предназначенных для расчета риска инфицирования данного поля, на основе этой дополнительной информации.

[0024] Соответственно, изобретение также обеспечивает способ борьбы с инвазией грибкового патогена растений, имеющего длительный инкубационный период, на поле, занятом культурой, с применением средства биологической борьбы, который включает этапы:

(а) определения, является ли поле, занятое культурой, подверженным риску инфицирования грибковым патогеном растений, путем измерения определенных параметров, связанных с развитием грибкового патогена растений, причем полученная в результате этих измерений информация используется впоследствии для вычисления вероятности такого развития на поле, занятом культурой;

(б) если в результате определения та этапе (а) обнаруживается, что поле, занятое культурой, подвержено риску, - определения стадии инфицирования поля грибковым патогеном растений до проявления видимых симптомов с применением средства обнаружения грибкового патогена растений;

(в) нанесение эффективного количества средства биологической борьбы на поле, если определение на этапе (а) обнаруживает, что инфицирование грибковым патогеном растений пребывает в начале инкубационного периода.

[0025] В соответствии с конкретным вариантом осуществления, изобретение обеспечивает способ борьбы с грибковым патогеном мучнистой росой винограда с применением средства биологической борьбы, характеризующийся тем, что эффективное количество средства биологической борьбы наносят на растения винограда, когда инфицирование грибковым патогеном растений пребывает в начале инкубационного периода. Мучнистая роса винограда представляет собой грибок Erysiphe necator (также известный как Uncinula necator). Этот грибок поражает различные разновидности винограда или сорта вида Vitis vinifera L.

[0026] В контексте данного описания термин "борьба" или "бороться" по сути означает снижение способности к росту или развитию данного грибкового патогена на данном растении, предпочтительно культурном растении, что снижает развитие симптомов, вызываемых этой болезнью на пораженном растении. В соответствии с конкретным вариантом осуществления, грибковым патогеном является грибок Erysiphe necator, а культурным растением является любая разновидность или сорт вида Vitis vinifera L.

[0027] В сельском хозяйстве "средство биологической борьбы" обычно определяется как агент, предназначенный для борьбы с паразитами, болезнями или сорняками, влияющими на рост растений, более конкретно - культурных растений, и состоящий либо из живого организм или продукта или композиции, полученной их живого организма, или их смеси. В соответствии с настоящим изобретением, средства биологической борьбы представляют собой микроорганизмы, более конкретно - бактерии и/или продукты или композиции, получаемые из них и/или их смесей. Продукт или композиция, получаемые из микроорганизма, могут быть продуктом, извлекаемым из клеток такого микроорганизма. Более предпочтительно продукт или композиция, получаемые из микроорганизма, являются продуктом или композицией, которые синтезируются таким микроорганизмом и секретируются в среду, в которой такой микроорганизм ферментируется для жизни и роста, например, культуральный бульон. Последние типы продуктов также указываются как продукты ферментации.

[0028] Примерами средств биологической борьбы, которые могут применяться в способах в соответствии с изобретением, являются:

Бактерии, например, (B1.1) Bacillus subtilis, в частности, штамм QST713/AQ713 (предлагается как SERENADE OPTI или SERENADE AS О от Bayer CropScience LP, США, имеющий номер доступа NRRL В21661 и описываемый в Патенте США №6,060,051); (В1.2) Bacillus pumilus, в частности, штамм QST2808 (предлагается как SONATA® от Bayer CropScience LP, США, имеющий номер доступа NRRL В-30087 и описываемый в Патенте США №6,245,551); (В1.3) Bacillus pumilus, в частности, штамм GB34 (предлагается как Yield Shield® от Bayer AG, Германия); (B1.4) Bacillus pumilus, в частности, штамм BU F-33 (имеющий номер доступа NRRL 50185); (В1.5) Bacillus amyloliquefaciens, в частности, штамм D747 (предлагается как Double Nickel™ от Certis, США, имеющий номер доступа FERM ВР-8234 и раскрываемый в Патенте США №7,094,592); (В1.6) Bacillus subtilis Y1336 (предлагается как BIOBAC^® WP от Bion-Tech, Тайвань, зарегистрированный в качестве биологического фунгицида в Тайване под регистрационными номерами 4764, 5454, 5096 и 5277); (В 1.7) Bacillus amyloliquefaciens, штамм MBI 600 (предлагается как SUBTILEX от BASF SE); (В1.8) Bacillus subtilis, штамм GB03 (предлагается как Kodiak® от Bayer AG, Германия); (В 1.9) Bacillus subtilis var. Amyloliquefaciens, штамм FZB24 (доступен от Novozymes Biologicals Inc., Salem, Virginia или Syngenta Crop Protection, LLC, Greensboro, North Carolina в качестве фунгицида TAEGRO или TAEGRO^® ECO (EPA Registration No. 70127-5); (B1.10) Bacillus mycoides, изолят J (предлагается как BmJ TGAI или WG от Certis USA); (B1.11) Bacillus licheniformis, в частности, штамм SB3086 (предлагается как EcoGuard ТМ Biofungicide и Green Releaf от Novozymes); (B1.12) Paenibacillus sp., штамм имеющий номер доступа NRRL В-50972 или номер доступа NRRL В-67129 и описываемый в Международной патентной публикации №WO 2016/154297.

В некоторых вариантах осуществления средством биологической борьбы является штамм Bacillus subtilis или Bacillus amyloliquefaciens, который вырабатывает фенгицин или плипастатин-подобное соединение, итурин-подобное соединение и/или сурфактин-подобное соединение. Среди источников существующего уровня техники следует отметить следующую обзорную статью: Ongena, M., et al., "Bacillus Lipopeptides: Versatile Weapons for Plant Disease Biocontrol," Trends in Microbiology, Vol 16, No. 3, March 2008, pp. 115-125. К штаммам Bacillus, способным вырабатывать липопептиды, относятся Bacillus subtilis QST713 (предлагается как SERENADE OPTI или SERENADE ASO от Bayer CropScience LP, США, имеющий номер доступа NRRL В21661 и описываемый в Патенте США №6,060,051), штамм Bacillus amyloliquefaciens D747 (предлагается как Double Nickel™ от Certis, США, имеющий номер доступа FERM ВР-8234 и раскрываемый в Патенте США №7,094,592); Bacillus subtilis MBI600 (предлагается как SUBTILEX^® от Becker Underwood, США ЕРА Reg. No. 71840-8); Bacillus subtilis Y1336 (предлагается как BIOBAC^® WP от Bion-Tech, Тайвань, зарегистрированный в качестве биологического фунгицида в Тайване под регистрационными номерами 4764, 5454, 5096 и 5277); Bacillus amyloliquefaciens, в частности, штамм FZB42 (предлагается как RHIZOVITAL® от ABiTEP, Германия); и Bacillus subtilis var. amyloliquefaciens FZB24 (доступен от Novozymes Biologicals Inc., Salem, Virginia или Syngenta Crop Protection, LLC, Greensboro, North Carolina, в качестве фунгицида TAEGRO^® или TAEGRO^® ECO (EPA Registration No. 70127-5); и

Грибы, например: (B2.1) Coniothyrium mini tans, в частности, штамм CON/M/91-8 (Accession No. DSM-9660; например, Contans ® от Bayer); (B2.2) Metschnikowia fructicola, в частности, штамм NRRL Y-30752 (например, Shemer®); (B2.3) Microsphaeropsis ochracea (например, Microx® от Prophyta); (B2.5) Trichoderma spp., включая Trichoderma atroviride, штамм SCI, описываемый в Международной заявке №PCT/IT2008/000196); (В2.6) Trichoderma harzianum rifai, штамм KRL-AG2 (также известный как штамм Т-22, /АТСС 208479, например, PLANTSHIELD T-22G, Rootshield®, и TurfShield от BioWorks, США); (В2.14) Gliocladium roseum, штамм 321U от W.F. Stoneman Company LLC; (В2.35) Talaromyces flavus, штамм V117b; (B2.36) Trichoderma asperellum, штамм ICC 012 от Isagro; (B2.37) Trichoderma asperellum, штамм SKT-1 (например, ECO-HOPE® от Kumiai Chemical Industry); (B2.38) Trichoderma atroviride, штамм CNCM 1-1237 (например, Esquive® WP от Agrauxine, Франция); (B2.39) Trichoderma atroviride, штамм № V08/002387; (B2.40) Trichoderma atroviride, штамм NMI № V08/002388; (B2.41) Trichoderma atroviride, штамм NMI № V08/002389; (B2.42) Trichoderma atroviride, штамм NMI № V08/002390; (B2.43) Trichoderma atroviride, штамм LC52 (например, Tenet от Agrimm Technologies Limited); (B2.44) Trichoderma atroviride, штамм ATCC 20476 (IMI 206040); (B2.45) Trichoderma atroviride, штамм T11 (IMI352941/ CECT20498); (B2.46) Trichoderma harmatum; (B2.47) Trichoderma harzianum; (B2.48) Trichoderma harzianum rifai T39 (например, Trichodex® от Makhteshim, США); (B2.49) Trichoderma harzianum, в частности, штамм KD (например, Trichoplus от Biological Control Products, SA (приобретенный Becker Underwood)); (B2.50) Trichoderma harzianum, штамм ITEM 908 (например, Trianum-P от Koppert); (B2.51) Trichoderma harzianum, штамм TH35 (например, Root-Pro от Mycontrol); (B2.52) Trichoderma virens (также известный как Gliocladium virens), в частности, штамм GL-21 (например, SoilGard 12G от Certis, США); (В2.53) Trichoderma viride, штамм TV1 (например, Trianum-P от Koppert); (В2.54) Ampelomyces quisqualis, в частности, штамм AQ 10 (например, AQ 10® от IntrachemBio Italia); (B2.56) Aureobasidium pullulans, в частности, бластоспоры штамма DSM14940; (В2.57) Aureobasidium pullulans, в частности, бластоспоры штамма DSM 14941; (В2.58) Aureobasidium pullulans, в частности, смеси бластоспор штаммов DSM14940 и DSM 14941 (например, Botector® от bio-ferm, Швейцария); (В2.64) Cladosporium cladosporioides, штамм Н39 (от Stichting Dienst Landbouwkundig Onderzoek); (B2.69) Gliocladium catenulatum (Синоним: Clonostachys rosea f. catenulate) штамм J1446 (например, Prestop® от AgBio Inc., а также, например, Primastop® от Kemira Agro Oy); (B2.70) Lecanicillium lecanii (ранее известный как Verticillium lecanii) conidia штамма KV01 (например, Vertalec® от Koppert/Arysta); (B2.71) Penicillium vermiculatum; (B2.72) Pichia anomala, штамм WRL-076 (NRRL Y-30842); (B2.75) Trichoderma atroviride, штамм SKT-1 (FERM P-16510); (B2.76) Trichoderma atroviride, штамм SKT-2 (FERM P-16511); (B2.77) Trichoderma atroviride, штамм SKT-3 (FERM P-17021); (B2.78) Trichoderma gamsii (раннее Т. viride), штамм ICC080 (IMI CC 392151 CABI, например, BioDerma от AGROBIOSOL DE MEXICO, S.A. DE C.V.); (B2.79) Trichoderma harzianum, штамм DB 103 (например, T-Gro 7456 от Dagutat Biolab); (B2.80) Trichoderma polysporum, штамм IMI 206039 (например, Binab TF WP от BINAB Bio-Innovation AB, Швеция); (B2.81) Trichoderma stromaticum (например, Tricovab от Ceplac, Бразилия); (B2.83) Ulocladium oudemansii, в частности, штамм HRU3 (например, Botry-Zen® от Botry-Zen Ltd, Новая Зеландия); (В2.84) Verticillium albo-atrum (ранее V. dahliae), штамм WCS850 (CBS 276.92; например, Dutch Trig от Tree Care Innovations); (B2.86) Verticillium chlamydosporium; (B2.87) смеси Trichoderma asperellum, штамм ICC 012, и Trichoderma gamsii, штамм ICC 080 (продукт, известный как, например, BIO-ТАМ™ от Bayer CropScience LP, США).

[0029] В соответствии с предпочтительным вариантом осуществления средство биологической борьбы включает бактериальный штамм Bacillus pumilus QST2808, его мутанты, их продукты ферментации или их смесь. Бактериальный штамм Bacillus pumilus QST2808 описывается в Международной патентной заявке РСТ, опубликованной как документ WO 00/58442. В документе WO 00/58442 штамм указывается как NRRL No. В-30087, что является синонимом Bacillus pumilus QST2808. Bacillus pumilus QST2808 был депонирован в NRRL 14 января 1999 г. согласно положениям Будапештского договора о международном признании депонирования микроорганизмов для целей патентной процедуры под номером доступа В-30087. Такое средство биологической борьбы выпускается серийно под торговым названием Sonata®.

[0030] В соответствии с другим вариантом осуществления средство биологической борьбы представляет собой композицию, включающую соединения, получаемые из живого организма. Примером такой композиции может быть композиция, включающая хитоолигосахариды, также известные как COS, которые могут быть получены из стенок грибковых клеток или экзоскелетов ракообразных. Еще одним примером является композиция, включающая производные от пектинов олигогалактурониды, также известные как OGA, которые могут быть получены из стенок клеток различных растений. Известно, что COS и OGA являются элиситорами механизмов природной защиты растений. Предпочтительной композицией является композиция, включающая хитоолигосахариды и олигогалактурониды, такие, как описываемый в Европейской патентной заявке ЕР 2115066. Такое средство биологической борьбы серийно выпускается под торговым названием Bastid®.

[0031] В соответствии с другим вариантом осуществления средство биологической борьбы включает экстракт (стенок клеток) дрожжей Saccharomyces cerevisiae, более конкретно - штамма Saccharomyces cerevisiae LAS117, его мутантов, их продуктов ферментации или их смеси. Такое средство биологической борьбы описывается в Международной патентной заявке РСТ, опубликованной как документ WO 2007/074303. Такое средство биологической борьбы серийно выпускается под торговым названием Romeo®.

[0032] В соответствии с другим вариантом осуществления средство биологической борьбы включает грибковый штамм Ampelomyces quisqualis AQ10, его мутанты, их продукты ферментации или их смесь. Грибковый штамм Ampelomyces quisqualis AQ10 описывается в Европейской патентной заявке ЕР 0353662. Такое средство биологической борьбы серийно выпускается под торговым названием AQ 10®.

[0033] В соответствии с другим вариантом осуществления средство биологической борьбы включает бактериальный штамм Bacillus amyloliquefaciens, подв. plantarum, штамм D747, его мутанты, их продукты ферментации или их смесь. Такое средство биологической борьбы серийно выпускается под торговым названием Amylo-X®.

[0034] В соответствии с другим вариантом осуществления средство биологической борьбы включает экстракт чайного дерева (Melaleuca alternifolia). Такое средство биологической борьбы описывается в Международной патентной заявке РСТ, опубликованной как документ WO 2011/140309. Такое средство биологической борьбы серийно выпускается под торговым названием Timorex Gold®.

[0035] В соответствии с другим вариантом осуществления средство биологической борьбы включает экстракт морских водорослей Ascophyllum nodosum. Такое средство биологической борьбы серийно выпускается под торговым названием Alginure®.

[0036] В соответствии с другим вариантом осуществления средство биологической борьбы включает композицию, включающую экстракт масла вида цитрусовых. Такое средство биологической борьбы описывается в Европейской патентной заявке ЕР 2200429. Такое средство биологической борьбы серийно выпускается под торговым названием Prev-Am®.

[0037] В соответствии с другим вариантом осуществления средство биологической борьбы включает экстракт растения Reynoutria sachalinensis. Такое средство биологической борьбы описывается в Международной патентной заявке РСТ, опубликованной как документ WO 2011/014596. Такое средство биологической борьбы серийно выпускается под торговым названием Regalia®.

[0038] По отношению к средству биологической борьбы термин "мутант" означает генетический вариант, производный от данного живого организма, вырабатывающего средство биологической борьбы. В одном варианте осуществления мутант обладает одной или несколькими или всеми отличительными характеристиками (его функциями биологической борьбы) данного живого организма средства биологической борьбы. В конкретном случае мутант или продукт его ферментации обладает характеристиками биологической борьбы, которые как минимум не уступают характеристикам соответствующего родительского живого организма. Такие мутанты могут быть генетическими вариантами, имеющими геномную последовательность, имеющую более, чем приблизительно 85%, более, чем приблизительно 90%, более, чем приблизительно 95%, более, чем приблизительно 98% или более, чем приблизительно 99% идентичности последовательности с данным живым организмом. Мутанты получают путем обработки клеток данного живого организма химикатами или облучения или путем отбора спонтанных мутантов из популяции таких клеток (таких, как фагоустойчивые или антибиотикоустойчивые мутанты) или другими способами, общеизвестными среди специалистов в данной области.

[0039] Продукты или композиции согласно настоящему изобретению получают путем культивирования соответствующего живого организма, вырабатывающего средство биологической борьбы, в соответствии со способами, общеизвестными среди специалистов в данной области, включая, например, способы, касающиеся средства биологической борьбы штамма Bacillus pumilus QST2808, использование сред и другие способы, описываемые в Международной патентной заявке РСТ, опубликованной как документ WO 00/58442.

[0040] Если средство биологической борьбы получают из/от микроорганизма, более конкретно бактерии, традиционные крупномасштабные процессы микробного культивирования включают глубинную ферментацию, твердофазную ферментацию или культивирование на поверхности жидкости. К концу ферментации, с исчерпанием питательных веществ, клетки начинают переходить из стадии роста в стадию споруляции, и, таким образом, конечный продукт ферментации в значительной мере представляет собой споры, метаболиты и остаточную сбраживаемую среду. Споруляция является частью естественного жизненного цикла большинства микроорганизмов, в частности, бактерий, и, как правило, запускается клеткой в ответ на ограничение питательных веществ. Ферментацию конфигурируют для получения высокого уровня колониеобразующих единиц ("КОЕ") бактерий и для стимулирования споруляции. Бактериальные клетки, споры и метаболиты в культуральных средах, получаемых в результате ферментации, используют непосредственно или в концентрированном виде с применением традиционных промышленных способов, таких, как центрифугирование, тангенциальная поточная фильтрация, глубинная фильтрация и выпаривание. Ферментационный бульон и бульонный концентрат указываются авторами как "продукты ферментации". Композиции в соответствии с настоящим изобретение включают продукты ферментации. В некоторых вариантах осуществления концентрированный ферментационный бульон промывают, например, с применением процесса диафильтрации, для удаления остатков ферментационного бульона и метаболитов.

[0041] Ферментационный бульон или бульонный концентрат высушивают с добавлением или без добавления носителей с применением традиционных процессов или способов высушивания, включая, помимо прочих, сушку распылением, лиофилизацию, сушка в лотках, сушка в псевдоожиженном слое, сушка в барабанной сушилке или выпаривание.

[0042] Полученные в результате сухие продукты подвергают дальнейшей обработке, такой, как измельчение или грануляция, например, для достижения конкретного размера частиц (например, среднего размера частиц от приблизительно 1 до приблизительно 5000, от приблизительно 1 до приблизительно 2500, от приблизительно 1 до приблизительно 500, от приблизительно 1 до приблизительно 250, от приблизительно 1 до приблизительно 100, от приблизительно 1 до приблизительно 50, от приблизительно 1 до приблизительно 25, от приблизительно 1 до приблизительно 10 мкм, или любого другого размера частиц или его диапазона, желательного и известного специалистам в данной области) или физического формата. После высушивания также добавляют носители, описываемые ниже.

[0043] Бесклеточные препараты ферментационного бульона новых вариантов и штаммов Bacillus согласно настоящему изобретению могут быть получены любыми способами, известными специалистам в данной области, такими, как экстракция, центрифугирование и/или фильтрация ферментационного бульона. Специалистам в данной области станет понятно, что так называемые бесклеточные препараты могут быть не совсем лишенными клеток, а в значительной мере бесклеточными или по сути бесклеточными, в зависимости от применяемой технологии (например, скорости центрифугирования) удаления клеток. Получаемый в результате бесклеточный препарат высушивают и/или рецептируют с компонентами, которые способствуют его нанесению на растения или на среду роста растений. Способы концентрирования и технологии высушивания, описываемые выше для ферментационного бульона, также применимы к бесклеточным препаратам.

[0044] В случае штамма Bacillus pumilus QST2808 метаболиты получают в соответствии со способами, изложенными в Международной патентной заявке РСТ, опубликованной как документ WO 00/58442. Термин "метаболиты" в контексте данного описания может означать наполовину чистые и чистые или по сути чистые метаболиты или метаболиты, которые не были отделены от соответствующего живого организма.

[0045] Способы концентрирования и технологии высушивания, описанные выше для рецептирования ферментационного бульона, также применимы к метаболитам.

[0046] Композиции согласно настоящему изобретению могут включать инертные компоненты композиций, добавляемые к композициям, включающим клетки, бесклеточные препараты или метаболиты, для улучшения эффективности, устойчивости и применимости, и/или для способствования обработке, упаковке и конкретному применению. К таким инертным компонентам композиций и ингредиентам относятся носители, стабилизаторы, питательные вещества или модифицирующие физические свойства агенты, которые могут добавляться по отдельности или в комбинации. В некоторых вариантах осуществления носители могут включать жидкие материалы, такие, как вода, масло и другие органические или неорганические растворители и твердые материалы, такие, как минералы, полимеры или полимерные комплексы, получаемые биологически или путем химического синтеза. В некоторых вариантах осуществления носитель представляет собой связующее или адгезив, способствующий прилипанию композиции к части растения, такой, как семена или корень. См., например, Taylor, A.G., et al., "Concepts and Technologies of Selected Seed Treatments", Annu. Rev. Phytopathol. 28: 321-339 (1990). Стабилизаторы могут включать антислеживающие агенты, антиоксиданты, сиккативы, защитные средства или консерванты. Питательные вещества могут включать источники углерода, азота и фосфора, такие, как сахара, полисахариды, масло, белки, аминокислоты, жирные кислоты и фосфаты. Модификаторы физических свойств могут включать объемообразующие агенты, смачивающие агенты, загустители, модификаторы уровня рН, модификаторы реологии, диспергаторы, адъюванты, поверхностно-активные вещества, антифризы или красители. В некоторых вариантах осуществления композицию, включающую клетки, бесклеточный препарат или метаболиты, производимые путем ферментации, применяют непосредственно с водой или без воды в качестве разбавителя и без какой бы то ни было другой рецептурной подготовки. В некоторых вариантах осуществления инертные компоненты композиций добавляют после концентрирования ферментационного бульона и во время и/или после высушивания.

[0047] Композиции согласно настоящему изобретению могут включать носители, которые являются инертными ингредиентами рецептуры, добавляемыми к продуктам ферментации или бесклеточным препаратам для улучшения восстановления, эффективности или физических свойств и/или для облегчения фасовки и применения. Такие носители могут добавляться по отдельности или в комбинации.

[0048] Композиции согласно настоящему изобретению смешивают с другими химическими или нехимическими добавками, адъювантами и/или средствами обработки, причем к средствам обработки относятся, помимо прочих, химические и нехимические фунгициды, инсектициды, майтициды, нематициды, удобрения, питательные вещества, минералы, ауксины, стимуляторы роста и т.п.

[0049] Фунгицид, с которыми могут быть смешаны средства биологической борьбы согласно настоящему изобретению, являются химическими или биологическими фунгицидами.

[0050] В некоторых вариантах осуществления химический или биологический фунгицид представляет собой рецептированный продукт серийного производства, смешиваемый в резервуаре с композициями согласно настоящему изобретению. В других вариантах осуществления химический или биологический фунгицид смешивают со средством биологической борьбы перед рецептированием, таким образом, чтобы композиции образовывали рецептированный продукт.

[0051] "Эффективное количество" означает количество, достаточное для обеспечения благоприятных или желаемых результатов. Эффективное количество может применяться однократно или несколько раз. С точки зрения лечения и защиты "эффективное количество" означает количество, достаточное для борьбы с болезнью, более конкретно для ослабления, стабилизации, реверсирования, замедления или задержки прогрессирования болезни.

[0052] Нанесение композиций, включающих средство биологической борьбы, может осуществляться путем распыления на листья, обработки отвечающей за размножение части растения (например, семян или клубней) и/или обработки почвы.

[0053] В соответствии с конкретным вариантом осуществления, описываемые авторами композиции наносят на растения винограда или части растений, предпочтительно надземные части растений, такие, как почки, цветки, листья, гроздья, ствол (или ветки) или стебли (лозу). Композиции согласно настоящему изобретению предпочтительно распыляют на все растение винограда, таким образом, чтобы обеспечивался контакт со всеми надземными частями растений.

[0054] Композиции, включающие средство биологической борьбы, наносят на культурные растения на поле в рамках программы обработки. Как правило, поле с культурными растениями подвергают не однократной обработке продуктами для защиты урожая, а обрабатывают несколько раз одним и тем же или различными продуктами для защиты урожая, которые планируются для нанесения на поле, занятое культурой, последовательно, по мере развития культуры, для оптимальной защиты культуры. Такое планирование оптимальной обработки называется программой обработки. Более конкретно, программа обработки может включать применение различных продуктов для защиты урожая, которые могут быть химическими продуктами или средствами биологической борьбы, или и теми, и другими. С целью снижения применения химических продуктов программа обработки предпочтительно включает как химические продукты, так и средства биологической борьбы. При включении средств биологической борьбы в программы обработки они должны занимать оптимальное место в таких программах обработки, т.е., на стадии развития культуры или стадии развития данного вредителя, для борьбы с которым предусмотрена обработка (например, стадии инфицирования грибковым патогеном растений), что обеспечивает оптимальную эффективность борьбы.

[0055] В соответствии с частным вариантом осуществления средство биологической борьбы применяют согласно способам в соответствии с изобретением в рамках программы обработки, которая может включать дополнительные средства обработки с химическими продуктами для защиты урожая и/или другими средствами биологической борьбы. При включении средства биологической борьбы в программу обработки, направленную на борьбу с определенными грибковыми патогенами растений, это предпочтительно осуществляют в начале инкубационного периода таких грибковых патогенов растений.

[0056] В ситуациях, когда борьба с определенным грибковым патогеном растений оказалась безуспешной, и он, таким образом, способен развиваться на поле, занятом культурой, программа обработки может предусматривать средства обработки продуктами для защиты урожая, которые, по сведениям, способны бороться с полностью закрепившимися грибковыми патогенами растений. При применении таких средств обработки культура обычно излечивается от данного грибкового патогена растений. Однако все же может сохраняться риск второй или дальнейшей инвазии грибкового патогена растений. Соответственно, если обнаруживается наличие второго или дальнейшего инфицирования грибковым патогеном растений, который пребывает в начале инкубационного периода, в это время также может быть применено средство биологической борьбы в соответствии со способами согласно настоящему изобретению.

[0057] Продукты для защиты урожая, которые могут быть включены в программы обработки, могут быть химическими продуктами или средствами биологической борьбы, или и теми, и другими.

[0058] Химические продукты, которые могут применяться для борьбы с патогенами растений, являются химическими фунгицидами. Примерами таких химических фунгицидов могут быть:

1) Ингибиторы биосинтеза эргостерина, например, (1.001) ципроконазол, (1.002) дифеноконазол, (1.003) эпоксиконазол, (1.004) фенгексамид, (1.005) фенпропидин, (1.006) фенпропиморф, (1.007) фенппиразамин, (1.008) флуквинконазол, (1.009) флутриафол, (1.010) имазалил, (1.011) имазалил сульфат, (1.012) ипконазол, (1.013) метконазол, (1.014) миклобутанил, (1.015) паклобутразол, (1.016) прохлораз, (1.017) пропиконазол, (1.018) протиоконазол, (1.019) пиризоксазол, (1.020) спироксамин, (1.021) тебуконазол, (1.022) тетраконазол, (1.023) триадименол, (1.024) тридеморф, (1.025) тритиконазол, (1.026) (1R,2S,5S)-5-(4-хлоробензил)-2-(хлорометил)-2-метил-1-(1Н-1,2,4-триазол-1-илметил)циклопентанол, (1.027) (1S,2R,5R)-5-(4-хлоробензил)-2-(хлорометил)-2-метил-1-(1Н-1,2,4-триазол-1-илметил)циклопентанол, (1.028) (2R)-2-(1-хлороциклопропил)-4-[(1R)-2,2-дихлороциклопропил]-1-(1H-l,2,4-триазол-1-ил)бутан-2-ол, (1.029) (2R)-2-(1-хлороциклопропил)-4-[(1S)-2,2-дихлороциклопропил]-1-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)бутан-2-ол, (1.030) (2R)-2-[4-(4-хлорофенокси)-2-(трифторометил)фенил]-1-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пропан-2-ол, (1.031) (2S)-2-(1-хлороциклопропил)-4-[(1H)-2,2-дихлороциклопропил]-1-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)бутан-2-ол, (1.032) (2S)-2-(1-хлороциклопропил)-4-[(1S)-2,2-дихлороциклопропил]-1-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)бутан-2-ол, (1.033) (2S)-2-[4-(4-хлорофенокси)-2-(трифторометил)фенил]-1-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пропан-2-ол, (1.034) (R)-[3-(4-хлоро-2-фторофенил)-5-(2,4-дифторофенил)-1,2-оксазол-4-ил](пиридин-3-ил)метанол, (1.035) (S)-[3-(4-хлоро-2-фторофенил)-5-(2,4-дифторофенил)-1,2-оксазол-4-ил](пиридин-3-ил)метанол, (1.036) [3-(4-хлоро-2-фторофенил)-5-(2,4-дифторофенил)-1,2-оксазол-4-ил](пиридин-3-ил)метанол, (1.037) 1-({(2R,4S)-2-[2-хлоро-4-(4-хлорофенокси)фенил]-4-метил-1,3-диоксолан-2-ил}метил)-1Н-1,2,4-триазол, (1.038) l-({(2S,4S)-2-[2-хлоро-4-(4-хлорофенокси)фенил]-4-метил-1,3-диоксолан-2-ил}метил)-1Н-1,2,4-триазол, (1.039) 1-{[3-(2-хлорофенил)-2-(2,4-дифторофенил)оксиран-2-ил]метил}-1Н-1,2,4-триазол-5-ил тиоцианат, (1.040) 1-{[рел(2R,3R)-3-(2-хлорофенил)-2-(2,4-дифторофенил)оксиран-2-ил]метил}-1Н-1,2,4-триазол-5-ил тиоцианат, (1.041) 1-{[рел(2R,3S)-3-(2-хлорофенил)-2-(2,4-дифторофенил)оксиран-2-ил]метил}-1Н-1,2,4-триазол-5-ил тиоцианат, (1.042) 2-[(2R,4R,5R)-1-(2,4-дихлорофенил)-5-гидрокси-2,6,6-триметилгептан-4-ил]-2,4-дигидро-3Н-1,2,4-триазол-3-тион, (1.043) 2-[(2R,4R,5S)-1-(2,4-дихлорофенил)-5-гидрокси-2,6,6-триметилгептан-4-ил]-2,4-дигидро-3Н-1,2,4-триазол-3-тион, (1.044) 2-[(2R,4S,5R)-l-(2,4-дихлорофенил)-5-гидрокси-2,6,6-триметилгептан-4-ил]-2,4-дигидро-3Н-1,2,4-триазол-3-тион, (1.045) 2-[(2R,4S,5S)-1-(2,4-дихлорофенил)-5-гидрокси-2,6,6-триметилгептан-4-ил]-2,4-дигидро-3Н-1,2,4-триазол-3-тион, (1.046) 2-[(2S,4R,5R)-1-(2,4-дихлорофенил)-5-гидрокси-2,6,6-триметилгептан-4-ил]-2,4-дигидро-3Н-1,2,4-триазол-3-тион, (1.047) 2-[(2S,4R,5S)-1-(2,4-дихлорофенил)-5-гидрокси-2,6,6-триметилгептан-4-ил]-2,4-дигидро-3Н-1,2,4-триазол-3-тион, (1.048) 2-[(2S,4S,5R)-1-(2,4-дихлорофенил)-5-гидрокси-2,6,6-триметилгептан-4-ил]-2,4-дигидро-3Н-1,2,4-триазол-3-тион, (1.049) 2-[(2S,4S,5S)-1-(2,4-дихлорофенил)-5-гидрокси-2,6,6-триметилгептан-4-ил]-2,4-дигидро-3Н-1,2,4-триазол-3-тион, (1.050) 2-[1-(2,4-дихлорофенил)-5-гидрокси-2,6,6-триметилгептан-4-ил]-2,4-дигидро-3Н-1,2,4-триазол-3-тион, (1.051) 2-[2-хлоро-4-(2,4-дихлорофенокси)фенил]-1-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пропан-2-ол, (1.052) 2-[2-хлоро-4-(4-хлорофенокси)фенил]-1-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)бутан-2-ол, (1.053) 2-[4-(4-хлорофенокси)-2-(трифторометил)фенил]-1-(1Н-1,2,4-триазол- 1-ил)бутан-2-ол, (1.054) 2-[4-(4-хлорофенокси)-2-(трифторометил)фенил]-1-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пентан-2-ол, (1.055) Мефентрифлуконазол, (1.056) 2-{[3-(2-хлорофенил)-2-(2,4-дифторофенил)оксиран-2-ил]метил}-2,4-дигидро-3Н-1,2,4-триазол-3-тион, (1.057) 2-{[рел(2R,3R)-3-(2-хлорофенил)-2-(2,4-дифторофенил)оксиран-2-ил]метил}-2,4-дигидро-3Н-1,2,4-триазол-3-тион, (1.058) 2-{[рел(2R,3S)-3-(2-хлорофенил)-2-(2,4-дифторофенил)оксиран-2-ил]метил}-2,4-дигидро-3Н-1,2,4-триазол-3-тион, (1.059) 5-(4-хлоробензил)-2-(хлорометил)-2-метил-1-(1Н-1,2,4-триазол-1-илметил)циклопентанол, (1.060) 5-(аллилсульфанил)-1-{[3-(2-хлорофенил)-2-(2,4-дифторофенил)оксиран-2-ил]метил}-1Н-1,2,4-триазол, (1.061) 5-(аллилсульфанил)-1-{[рел(2R,3R)-3-(2-хлорофенил)-2-(2,4-дифторофенил)оксиран-2-ил]метил}-1Н-1,2,4-триазол, (1.062) 5-(аллилсульфанил)-1-{[рел(2R,3S)-3-(2-хлорофенил)-2-(2,4-дифторофенил)оксиран-2-ил]метил}-1Н-1,2,4-триазол, (1.063) N'-(2,5-диметил-4-{[3-(1,1,2,2-тетрафтороэтокси)фенил]сульфанил}фенил)-N-этил-N-метилимидоформамид, (1.064) N'-(2,5-диметил-4-{[3-(2,2,2-трифтороэтокси)фенил]сульфанил}фенил)-N-этил-N-метилимидоформамид, (1.065) N'-(2,5-диметил-4-{[3-(2,2,3,3-тетрафторопропокси)фенил]сульфанил}фенил)-N-этил-N-метилимидоформамид, (1.066) N'-(2,5-диметил-4-{[3-(пентафтороэтокси)фенил]сульфанил}фенил)-N-этил-N-метилимидоформамид, (1.067) N'-(2,5-диметил-4-{3-[(1,1,2,2-тетрафтороэтил)сульфанил]фенокси}фенил)-N-этил-N-метилимидоформамид, (1.068) N'-(2,5-диметил-4-{3-[(2,2,2-трифтороэтил)сульфанил]фенокси}фенил)-N-этил-N-метилимидоформамид, (1.069) N'-(2,5-диметил-4-{3-[(2,2,3,3-тетрафторопропил)сульфанил]фенокси}фенил)-N-этил-N-метилимидоформамид, (1.070) N'-(2,5-диметил-4-{3-[(пентафтороэтил)сульфанил]фенокси}фенил)-N-этил-N-метилимидоформамид, (1.071) N-(2,5-диметил-4-феноксифенил)-N-этил-N-метилимидоформамид, (1.072) N'-(4-{[3-(дифторометокси)фенил]сульфанил}-2,5-диметилфенил)-N-этил-N-метилимидоформамид, (1.073) N'-(4-{3-[(дифторо-метил)сульфанил]фенокси}-2,5-диметилфенил)-N-этил-N-метилимидоформамид, (1.074) N'-[5-бромо-6-(2,3-дигидро-1Н-инден-2-илокси)-2-метилпиридин-3-ил]-N-этил-N-метилимидоформамид, (1.075) N'-{4-[(4,5-дихлоро-1,3-тиазол-2-ил)окси]-2,5-диметилфенил}-N-этил-N-метилимидоформамид, (1.076) N'-{5-бромо-6-[(1R)-1-(3,5-дифторофенил)этокси]-2-метилпиридин-3-ил}-N-этил-N-метилимидоформамид, (1.077) N'-{5-бромо-6-[(1S)-1-(3,5-дифторофенил)этокси]-2-метилпиридин-3-ил}-N-этил-N-метилимидоформамид, (1.078) N'-{5-бромо-6-[(цис-4-изопропилциклогексил)окси]-2-метилпиридин-3-ил}-N-этил-N-метилимидоформамид, (1.079) N'-{5-бромо-6-[(транс-4-изопропилциклогексил)окси]-2-метилпиридин-3-ил}-N-этил-N-метилимидоформамид, (1.080) N'-{5-бромо-6-[1-(3,5-дифторофенил)этокси]-2-метилпиридин-3-ил}-N-этил-N-метилимидоформамид, (1.081) ипфентрифлуконазол.

2) Ингибиторы дыхательной цепи в комплексе I или II, например, (2.001) бензовиндифлупир, (2.002) биксафен, (2.003) боскалид, (2.004) карбоксин, (2.005) флуопирам, (2.006) флутоланил, (2.007) флуксапироксад, (2.008) фураметпир, (2.009) изофетамид, (2.010) изопиразам (антиэпимерный энантиомер 1R,4S,9S), (2.011) изопиразам (антиэпимерный энантиомер 1S,4R,9R), (2.012) изопиразам (антиэпимерный рацемат 1RS,4SR,9SR), (2.013) изопиразам (смесь син-эпимерного рацемата 1RS,4SR,9RS и антиэпимерного рацемата 1RS,4SR,9SR), (2.014) изопиразам (син-эпимерный энантиомер 1R,4S,9R), (2.015) изопиразам (син-эпимерный энантиомер 1S,4R,9S), (2.016) изопиразам (син-эпимерный рацемат 1RS,4SR,9RS), (2.017) пенфлуфен, (2.018) пентиопирад, (2.019) пидифлуметофен, (2.020) пиразифлумид, (2.021) седаксан, (2.022) 1,3-диметил-N-(1,1,3-триметил-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1Н-пиразол-4-карбоксамид, (2.023) 1,3-диметил-N-[(3R)-1,1,3-триметил-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил]-1Н-пиразол-4-карбоксамид, (2.024) 1,3-диметил-N-[(3S)-1,1,3-триметил-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил]-1Н-пиразол-4-карбоксамид, (2.025) 1-метил-3-(трифторометил)-N-[2'-(трифторометил)бифенил-2-ил]-1Н-пиразол-4-карбоксамид, (2.026) 2-фторо-6-(трифторометил)-N-(1,1,3-триметил-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)бензамид, (2.027) 3-(дифторометил)-1-метил-N-(1,1,3-триметил-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1Н-пиразол-4-карбоксамид, (2.028) 3-(дифторометил)-1-метил-N-[(3R)-1,1,3-триметил-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил]-1Н-пиразол-4-карбоксамид, (2.029) 3-(дифторометил)-1-метил-N-[(3S)-1,1,3-триметил-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил]-1Н-пиразол-4-карбоксамид, (2.030) флуиндапир, (2.031) 3-(дифторометил)-N-[(311)-7-фторо-1,1,3-триметил-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил]-1-метил-1Н-пиразол-4-карбоксамид, (2.032) 3-(дифторометил)-N-[(3S)-7-фторо-1,1,3-триметил-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил]-1-метил-1Н-пиразол-4-карбоксамид, (2.033) 5,8-дифторо-N-[2-(2-фторо-4-{[4-(трифторометил)пиридин-2-ил]окси}фенил)этил]хиназолин-4-амин, (2.034) N-(2-циклореп1у1-5-фторобензил)-N-циклопропил-3-(дифторометил)-5-фторо-1-метил-1Н-пиразол-4-карбоксамид, (2.035) N-(2-трет-бутил-5-метилбензил)-N-циклопропил-3-(дифторометил)-5-фторо-1-метил-1Н-пиразол-4-карбоксамид, (2.036) N-(2-трет-бутилбензил)-N-циклопропил-3-(дифторометил)-5-фторо-1-метил-1Н-пиразол-4-карбоксамид, (2.037) N-(5-хлоро-2-этилбензил)-N-циклопропил-3-(дифторометил)-5-фторо-1-метил-1Н-пиразол-4-карбоксамид, (2.038) изофлуципрам, (2.039) N-[(1R,4S)-9-(дихлорометилен)-1,2,3,4-тетрагидро-1,4-метанонафталин-5-ил]-3-(дифторометил)-1-метил-1Н-пиразол-4-карбоксамид, (2.040) N-[(1S,4R)-9-(дихлорометилен)-1,2,3,4-тетрагидро-1,4-метанонафталин-5-ил]-3-(дифторометил)-1-метил-1Н-пиразол-4-карбоксамид, (2.041) N-[1-(2,4-дихлорофенил)-1-метоксипропан-2-ил]-3-(дифторометил)-1-метил-1Н-пиразол-4-карбоксамид, (2.042) N-[2-хлоро-6-(трифторометил)бензил]-N-циклопропил-3-(дифторометил)-5-фторо-1-метил-1Н-пиразол-4-карбоксамид, (2.043) N-[3-хлоро-2-фторо-6-(трифторометил)бензил]-N-циклопропил-3-(дифторометил)-5-фторо-1-метил-1Н-пиразол-4-карбоксамид, (2.044) N-[5-хлоро-2-(трифторометил)бензил]-Н-циклопропил-3-(дифторометил)-5-фторо-1-метил-1Н-пиразол-4-карбоксамид, (2.045) N-циклопропил-3-(дифторометил)-5-фторо-1-метил-N-[5-метил-2-(трифторометил)бензил]-1Н-пиразол-4-карбоксамид, (2.046) N-циклопропил-3-(дифторометил)-5-фторо-N-(2-фторо-6-изопропилбензил)-1-метил-1Н-пиразол-4-карбоксамид, (2.047) N-циклопропил-3-(дифторометил)-5-фторо-Н-(2-изопропил-5-метилбензил)-1-метил-1Н-пиразол-4-карбоксамид, (2.048) N-циклопропил-3-(дифторометил)-5-фторо-N-(2-изопропилбензил)-1-метил-1Н-пиразол-4-карботиоамид, (2.049) N-циклопропил-3-(дифторометил)-5-фторо-Н-(2-изопропилбензил)-1-метил-1H-пиразол-4-карбоксамид, (2.050) Н-циклопропил-3-(дифторометил)-5-фторо-N-(5-фторо-2-изопропилбензил)-1-метил-1Н-пиразол-4-карбоксамид, (2.051) N-циклопропил-3-(дифторометил)-N-(2-этил-4,5-диметилбензил)-5-фторо-1-метил-1Н-пиразол-4-карбоксамид, (2.052) N-циклопропил-3-(дифторометил)-N-(2-этил-5-фторобензил)-5-фторо-1-метил-1Н-пиразол-4-карбоксамид, (2.053) N-циклопропил-3-(дифторометил)-N-(2-этил-5-метилбензил)-5-фторо-1-метил-1Н-пиразол-4-карбоксамид, (2.054) N-циклопропил-N-(2-циклопропил-5-фторобензил)-3-(дифторометил)-5-фторо-1-метил-1Н-пиразол-4-карбоксамид, (2.055) N-циклопропил-N-(2-циклопропил-5-метилбензил)-3-(дифторометил)-5-фторо-1-метил-1H-пиразол-4-карбоксамид, (2.056) N-циклопропил-N-(2-циклопропилбензил)-3-(дифторометил)-5-фторо-1-метил-1H-пиразол-4-карбоксамид, (2.057) пирапропоин.

3) Ингибиторы дыхательной цепи в комплексе III, например, (3.001) аметоктрадин, (3.002) амисульбром, (3.003) азоксистробин, (3.004) куметоксистробин, (3.005) кумоксистробин, (3.006) циазофамид, (3.007) димоксистробин, (3.008) эноксастробин, (3.009) фамоксадон, (3.010) фенамидон, (3.011) флуфеноксистробин, (3.012) флуоксастробин, (3.013) крезоксим-метил, (3.014) метоминостробин, (3.015) оризастробин, (3.016) пикоксистробин, (3.017) пираклостробин, (3.018) пираметостробин, (3.019) пираоксистробин, (3.020) трифлоксистробин, (3.021) (2Е)-2-{2-[({[(1Е)-1-(3-{[(Е)-1-фторо-2-фенилвинил]окси}фенил)этилиден]амино}окси)метил] фенил}-2-(метокси-имино)-N-метилацетамид, (3.022) (2E,3Z)-5-{[1-(4-хлорофенил)-1H-пиразол-3-ил]окси}-2-(метоксиимино)-N,3-диметилпент-3-енамид, (3.023) (2R)-2-{2-[(2,5-диметилфенокси)метил]фенил}-2-метокси-N-метилацетамид, (3.024) (2S)-2-{2-[(2,5-диметилфенокси)метил]фенил}-2-метокси-N-метилацетамид, (3.025) (3S,6S,7R,8R)-8-бензил-3-[({3-[(изобутирилокси)метокси]-4-метоксипиридин-2-ил}карбонил)амино]-6-метил-4,9-диоксо- 1,5-диоксонан-7-ил 2-метилпропаноат, (3.026) мандестробин, (3.027) N-(3-этил-3,5,5-триметилциклогексил)-3-формамидо-2-гидроксибензамид, (3.028) (2Е,3Z)-5-{[1-(4-хлоро-2-фторофенил)-1Н-пиразол-3-ил]окси}-2-(метоксиимино)-N,3-диметилпент-3-енамид, (3.029) метил {5-[3-(2,4-диметилфенил)-1Н-пиразол-1-ил]-2-метилбензил}карбамат, (3.030) метилтетрапрол, (3.031) флорилпикоксамид.

4) Ингибиторы митоза и деления клеток, например, (4.001) карбендазим, (4.002) диэтофенкарб, (4.003) этабоксам, (4.004) флуопиколид, (4.005) пенцикурон, (4.006) тиабендазол, (4.007) тиофанат-метил, (4.008) зоксамид, (4.009) 3-хлоро-4-(2,6-дифторофенил)-6-метил-5-фенилпиридазин, (4.010) 3-хлоро-5-(4-хлорофенил)-4-(2,6-дифторофенил)-6-метилпиридазин, (4.011)3-хлоро-5-(6-хлоропиридин-3-ил)-6-метил-4-(2,4,6-трифторофенил)пиридазин, (4.012) 4-(2-бромо-4-фторофенил)-N-(2,6-дифторофенил)-1,3-диметил-1Н-пиразол-5-амин, (4.013) 4-(2-бромо-4-фторофенил)-N-(2-бромо-6-фторофенил)-1,3-диметил-1H-пиразол-5-амин, (4.014) 4-(2-бромо-4-фторофенил)-N-(2-бромофенил)-1,3-диметил-1Н-пиразол-5-амин, (4.015) 4-(2-бромо-4-фторофенил)-N-(2-хлоро-6-фторофенил)-1,3-диметил-1Н-пиразол-5-амин, (4.016) 4-(2-бромо-4-фторофенил)-N-(2-хлорофенил)-1,3-диметил-1Н-пиразол-5-амин, (4.017) 4-(2-бромо-4-фторофенил)-N-(2-фторофенил)-1,3-диметил-1Н-пиразол-5-амин, (4.018) 4-(2-хлоро-4-фторофенил)-N-(2,6-дифторофенил)-1,3-диметил-1H-пиразол-5-амин, (4.019) 4-(2-хлоро-4-фторофенил)-N-(2-хлоро-6-фторофенил)-1,3-диметил-1Н-пиразол-5-амин, (4.020) 4-(2-хлоро-4-фторофенил)-N-(2-хлорофенил)-1,3-диметил-1Н-пиразол-5-амин, (4.021) 4-(2-хлоро-4-фторофенил)-N-(2-фторофенил)-1,3-диметил-1Н-пиразол-5-амин, (4.022) 4-(4-хлорофенил)-5-(2,6-дифторофенил)-3,6-диметилпиридазин, (4.023) N-(2-бромо-6-фторофенил)-4-(2-хлоро-4-фторофенил)-1,3-диметил-1H-пиразол-5-амин, (4.024) N-(2-бромофенил)-4-(2-хлоро-4-фторофенил)-1,3-диметил-1Н-пиразол-5-амин, (4.025) N-(4-хлоро-2,6-дифторофенил)-4-(2-хлоро-4-фторофенил)-1,3-диметил-1Н-пиразол-5-амин.

5) Соединения имеющие многонаправленное действие, например, (5.001) бордосская жидкость, (5.002) каптафол, (5.003) каптан, (5.004) хлороталонил, (5.005) гидроксид меди, (5.006) нафтенат меди, (5.007) оксид меди, (5.008) хлороксид меди, (5.009) сульфат меди(2+), (5.010) дитианон, (5.011) додин, (5.012) фолпет, (5.013) манкоцеб, (5.014) манеб, (5.015) метирам, (5.016) метирам цинк, (5.017) оксинат меди, (5.018) пропинеб, (5.019) сера и препараты серы, включая полисульфид кальция, (5.020) тирам, (5.021) цинеб, (5.022) цирам, (5.023) 6-этил-5,7-диоксо-6,7-дигидро-5Н-pyrrolo[3',4':5,6][1,4]дитиино[2,3-с][1,2]тиазол-3-карбонитрил.

6) Соединения, вызывающие иммунную защиту (host defense), например, (6.001) ацибензолар-S-метил, (6.002) изотианил, (6.003) пробеназол, (6.004) тиадинил.

7) Ингибиторы биосинтеза аминокислот и/или белков, например, (7.001) ципродинил, (7.002) касугамицин, (7.003) касугамицин гидрохлорид гидрат, (7.004) окситетрациклин, (7.005) пириметанил, (7.006) 3-(5-фторо-3,3,4,4-тетраметил-3,4-дигидроизохинолин-1-ил)хинолин.

8) Ингибиторы продуцирования АТФ, например, (8.001) сильтиофам.

9) Ингибиторы синтеза клеточных стенок, например, (9.001) бентиаваликарб, (9.002) диметоморф, (9.003) флуморф, (9.004) ипроваликарб, (9.005) мандипропамид, (9.006) пириморф, (9.007) валидамицин, (9.008) (2Е)-3-(4-трет-бутилфенил)-3-(2-хлоропиридин-4-ил)-1-(морфолин-4-ил)проп-2-ен-1-он, (9.009) (2Z)-3-(4-трет-бутилфенил)-3-(2-хлоропиридин-4-ил)-1-(морфолин-4-ил)проп-2-ен-1-он.

10) Ингибиторы синтеза липидов и мембраны, например, (10.001) пропамокарб, (10.002) пропамокарб гидрохлорид, (10.003) толклофос-метил.

11) Ингибиторы биосинтеза меланина, например, (11.001) трициклазол, (11.002) 2,2,2-трифтороэтил {3-метил-1-[(4-метилбензоил)амино]бутан-2-ил}карбамат.

12) Ингибиторы синтеза нуклеиновой кислоты, например, (12.001) беналаксил, (12.002) беналаксил-М (киралаксил), (12.003) металаксил, (12.004) металаксил-М (мефеноксам).

13) Ингибиторы трансдукции сигнала, например, (13.001) флудиоксонил, (13.002) ипродион, (13.003) процимидон, (13.004) проквиназид, (13.005) квиноксифен, (13.006) винклозолин.

14) Соединения, действующие как разобщающие агенты, например, (14.001) флуазинам, (14.002) мептилдинокап.

15) Другие соединения, например, (15.001) абсцизовая кислота, (15.002) бентиазол, (15.003) бетоксазин, (15.004) капсимицин, (15.005) карвон, (15.006) хинометионат, (15.007) куфранеб, (15.008) цифлуфенамид, (15.009) цимоксанил, (15.010) ципросульфамид, (15.011) флутианил, (15.012) фосэтил алюминий, (15.013) фосэтил кальций, (15.014) фосэтил натрий, (15.015) метилизотиоцианат, (15.016) метрафенон, (15.017) милдиомицин, (15.018) натамицин, (15.019) никель диметилдитиокарбамат, (15.020) нитротал-изопропил, (15.021) оксамокарб, (15.022) оксатиапипролин, (15.023) оксифентиин, (15.024) пентахлорофенол и соли, (15.025) фосфорная кислота и ее соли, (15.026) пропамокарб-фосэтилат, (15.027) пириофенон (хлазафенон), (15.028) тебуфлоквин, (15.029) теклофтаоам, (15.030) толнифанид, (15.031) 1-(4-{4-[(5R)-5-(2,6-дифторофенил)-4,5-дигидро-1,2-оксазол-3-ил]-1,3-тиазол-2-ил}пиперидин-1-ил)-2-[5-метил-3-(трифторометил)-1Н-пиразол-1-ил]этанон, (15.032) 1-(4-{4-[(5S)-5-(2,6-дифторофенил)-4,5-дигидро-1,2-оксазол-3-ил]-1,3-тиазол-2-ил}пиперидин-1-ил)-2-[5-метил-3-(трифторометил)-1Н-пиразол-1-ил]этанон, (15.033) 2-(6-бензилпиридин-2-ил)хиназолин, (15.034) дипиметитрон, (15.035) 2-[3,5-бис(дифторометил)-1Н-пиразол-1-ил]-1-[4-(4-{5-[2-(проп-2-ин-1-илокси)фенил]-4,5-дигидро-1,2-оксазол-3-ил}-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин-1-ил]этанон, (15.036) 2-[3,5-бис(дифторометил)-1Н-пиразол-1-ил]-1-[4-(4-{5-[2-хлоро-6-(проп-2-ин-1-илокси)фенил]-4,5-дигидро-1,2-оксазол-3-ил}-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин-1-ил]этанон, (15.037) 2-[3,5-бис(дифторометил)-1Н-пиразол-1-ил]-1-[4-(4-{5-[2-фторо-6-(проп-2-ин-1-илокси)фенил]-4,5-дигидро-1,2-оксазол-3-ил}-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин-1-ил]этанон, (15.038) 2-[6-(3-фторо-4-метоксифенил)-5-метилпиридин-2-ил]хиназолин, (15.039) 2-{(5R)-3-[2-(l-{[3,5-бис(дифторометил)-1Н-пиразол-1-ил]ацетил}пиперидин-4-ил)-1,3-тиазол-4-ил]-4,5-дигидро-1,2-оксазол-5-ил}-3-хлорофенил метансульфонат, (15.040) 2-{(5S)-3-[2-(1-{[3,5-бис(дифторометил)-1Н-пиразол-1-ил]ацетил}пиперидин-4-ил)-1,3-тиазол-4-ил]-4,5-дигидро-1,2-оксазол-5-ил}-3-хлорофенил метансульфонат, (15.041) ипфлуфеноквин, (15.042) 2-{2-фторо-6-[(8-фторо-2-метилхинолин-3-ил)окси]фенил}пропан-2-ол, (15.043) 2-{3-[2-(1-{[3,5-бис(дифторометил)-1Н-пиразол-1-ил]ацетил}пиперидин-4-ил)-1,3-тиазол-4-ил]-4,5-дигидро-1,2-оксазол-5-ил}-3-хлорофенил метансульфонат, (15.044) 2-{3-[2-(1-{[3,5-бис(дифторометил)-1Н-пиразол-1-ил]ацетил}пиперидин-4-ил)-1,3-тиазол-4-ил]-4,5-дигидро-1,2-оксазол-5-ил}фенил метансульфонат, (15.045) 2-фенилфенол и соли, (15.046) 3-(4,4,5-трифторо-3,3-диметил-3,4-дигидроизохинолин-1-ил)хинолин, (15.047) квинофумелин, (15.048) 4-амино-5-фторопиримидин-2-ол (таутомерная форма: 4-амино-5-фторопиримидин-2(1Н)-он), (15.049) 4-оксо-4-[(2-фенилэтил)амино]бутановая кислота, (15.050) 5-амино-1,3,4-тиадиазол-2-тиол, (15.051) 5-хлоро-N'-фенил-N'-(проп-2-ин-1-ил)тиофен-2-сульфоногидразид, (15.052) 5-фторо-2-[(4-фторобензил)окси]пиримидин-4-амин, (15.053) 5-фторо-2-[(4-метилбензил)окси]пиримидин-4-амин, (15.054) 9-фторо-2,2-диметил-5-(хинолин-3-ил)-2,3-дигидро-1,4-бензоксазепин, (15.055) бут-3-ин-1-ил{6-[({[(Z)-(1-метил-1Н-тетразол-5-ил)(фенил)метилен]амино}окси)метил]пиридин-2-ил}карбамат, (15.056) этил (2Z)-3-амино-2-циано-3-фенилакрилат, (15.057) феназин-1-карбоновая кислота, (15.058) пропил 3,4,5-гпгидроксибензоа1е, (15.059) хинолин-8-ол, (15.060) хинолин-8-ол сульфат (2:1), (15.061) трет-бутил{6-[({[(1-метил-1Н-тетразол-5-ил)(фенил)метилен]амино}окси)метил]пиридин-2-ил}карбамат, (15.062) 5-фторо-4-имино-3-метил-1-[(4-метилфенил)сульфонил]-3,4-дигидропиримидин-2(1Н)-он, (15.063) аминопирифен.

[0059] Все указанные партнеры по связыванию классов с (1) по (15), как описывается выше, могут присутствовать в форме свободного соединения и/или, если это позволяют их функциональные группы, его приемлемой с точки зрения сельского хозяйства соли.

[0060] Средства биологической борьбы, которые могут применяться для борьбы с патогенами растений, являются биологическими фунгицидами. Примерами таких биологических фунгицидов могут быть любые из описанных выше.

[0061] Различные аспекты изобретения станут более понятны благодаря представленным ниже экспериментальным примерам.

[0062] Все описываемые ниже способы или операции представлены на примерах и соответствуют выбору, сделанному среди различных способов, предлагаемых для достижения одного и того же результата. Этот выбор никак не влияет на качество результата и, таким образом, специалистами в данной области может быть применен любой приемлемый способ для достижения того же результата. В частности, если в примерах не указывается иное, все применяемые технологии рекомбинантных ДНК выполняют в соответствии со стандартными протоколами, описываемыми в публикациях Sambrook and Russel (2001, Molecular cloning: A laboratory manual, Third edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press, NY), Ausubel et al. (1994, Current Protocols in Molecular Biology, Current protocols, USA, Volumes 1 and 2) и Brown (1998, Molecular Biology LabFax, Second edition, Academic Press, UK). Стандартные материалы и способы для молекулярной биологии растений описаны в публикациях Croy R.D.D. (1993, Plant Molecular Biology LabFax, BIOS Scientific Publications Ltd (UK) и Blackwell Scientific Publications (UK)), стандартные материалы и способы ПЦР (полимеразной цепной реакции) также описываются в публикациях Dieffenbach and Dveksler (1995, PCR Primer: A laboratory manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, NY) и McPherson et al. (2000, PCR - Basics: From background to bench, First edition, Springer Verlag, Германия).

Примеры

Пример 1: Влияние штамма Bacillus pumilus QST2808 на мучнистую росу винограда, Erysiphe necator, в полевых условиях

Полевые испытания проводили на выбранных виноградниках и в условиях естественного поражения мучнистой росой винограда, Erysiphe necator. Естественное появление и развитие мучнистой росы на исследуемых полях отслеживали с применением средства обнаружения при помощи кПЦР, специфичного к Erysiphe necator, как описывается в Международной патентной заявке РСТ WO 2017/009251.

Штамм Bacillus pumilus QST2808 применяли в его коммерческой форме, которая реализуется на рынке Франции под торговым названием Sonata®.

Испытания осуществляли в двух разных местах на виноградниках, засаженными двумя различными сортами винограда, оба из которых были одинаково восприимчивы к мучнистой росе:

Место 1: Гульт, юго-восток Франции. Сорт винограда: Русан.

Место 2: Кюксак-д'Од, юг Франции. Сорт винограда: Шардоне.

Для испытаний использовали штамм Bacillus pumilus QST2808 в рамках программы обработки, которая также включала другие фунгицидные продукты.

Сравнительную обработку осуществляли с применением продукта на основе серы вместо штамма. Bacillus pumilus QST2808.

Контрольные образцы мне получали средств обработки.

Программы обработки были следующими:

Применяли дополнительную сравнительную программу обработки (программу "Less QST") с использованием QST2808 в качестве первых трех средств обработки в рамках программы, но без первого или первых трех средств обработки, и с серой в качестве последних трех средств обработки в рамках программы, как описывается в схеме ниже.

В двух местах обработку производили на одинаковых стадиях развития виноградника.

Развитие болезни оценивали двумя различными способами.

Сначала инвазию Erysiphe necator оценивали на молекулярном уровне на листьях во время первой обработки с применением средства кПЦР, описываемого в Международной патентной заявке РСТ WO 2017/009251. В этот момент видимые симптомы болезни не наблюдаются.

Затем развитие симптомов болезни визуально оценивали на полностью развившихся гроздьях через 3-4 недели после последней обработки в рамках программы.

Визуальные наблюдения симптомов на гроздьях винограда выполняли путем отбора приблизительно сотни гроздьев на одном экспериментальном участке с нескольких растений, подсчета количества инфицированных гроздьев и определения процента инфицированной площади грозди.

Результаты визуальных наблюдений симптомов выражают в процентах эффективности программы обработки относительно необработанных контрольных образцов в соответствии со следующей формулой:

((Симптомы у контрольных образцов - симптомы у обработанных образцов) / симптомы у контрольных образцов) × 100

Обнаружение при помощи кПЦР

Результаты измерений при помощи кПЦР показали, что грибок Erysiphe necator в значительной мере присутствовал уже в начале программы обработки на объекте в Гульте (на 9 из 10 исследованных листьев был обнаружен заметный уровень грибка), тогда как на объекте в Кюксак-д'Од он присутствовал в гораздо меньшей степени (без пораженных листьев в начале программы обработки, 3 пораженных листа из 10 после первой обработки, и 1 лист из 20 после второй обработки). Таким образом, при отсутствии наблюдаемых видимых симптомов ситуация с инвазией в начале обработки была различной на двух экспериментальных объектах.

Визуальное наблюдение симптомов на гроздьях винограда Наблюдение симптомов на гроздьях винограда осуществляли через несколько недель после завершения программ обработки на полностью развившихся гроздьях. Эти наблюдения проводили на обоих объектах.

(1) без первых трех средств обработки с QST2808

Результаты этих наблюдений указывают на то, что первые три средства обработки с QST2808 не имели положительного влияния на уровень эффективности, наблюдаемый для трех программ обработки.

(2) только без первого средства обработки с QST2808

(3) без первых трех средств обработки с QST2808

Результаты этих наблюдений указывают на то, что средства ранней обработки с QST2808 имеют эффективное положительное влияние на уровень эффективности, наблюдаемый для программ обработки. При исключении более одного из средств ранней обработки до цветения общая эффективность программы обработки снижается.

В совокупности результаты на гроздьях винограда на двух объектах, в сочетании с полученной при помощи кПЦР информацией в начале программ обработки, указывают на то, что средства ранней обработки с QST2808 не могут иметь положительного влияния на борьбу с развитием Erysiphe necator, если такая ранняя обработка осуществляется тогда, когда патоген уже в значительной мере присутствует на винограднике. С другой стороны, эти результаты указывают на то, что средства ранней обработки с QST2808 действительно имеют положительное влияние на борьбу с развитием Erysiphe necator, если такая ранняя обработка осуществляется, когда патоген едва обнаруживается (т.е., когда инвазия на поле пребывает в начале инкубационного периода).

Пример 2: Влияние средства биологической борьбы, содержащего COS и OGA, на мучнистую росу винограда, Erysiphe necator, в полевых условиях

В точно таких же условиях, в том же месте и в то же время, как и в эксперименте, проводимом в Примере 1, такой же эксперимент был воспроизведен с заменой обработки штаммом Bacillus pumilus QST2808 нами обработкой другим средством биологической борьбы, содержащим смесь хитоолигосахаридов (COS) и олигогалактуронидов (OGA).

Это средство биологической борьбы применяли в его коммерческой форме, реализуемой на рынке Франции под торговым названием Bastid®.

Визуальное наблюдение симптомов на гроздьях винограда

Наблюдение симптомов на гроздьях винограда осуществляли через несколько недель после окончания программ обработки на полностью развившихся гроздьях. Эти наблюдения проводили на обоих объектах.

(1) без первых трех средств обработки с Bastid®

Результаты этих наблюдений указывают на то, что первые три средства обработки с Bastid® не имели положительного влияния на уровень эффективности, наблюдаемый для трех программ обработки.

(2) без первых трех средств обработки с Bastid®

Результаты этих наблюдений указывают на то, что средства ранней обработки с Bastid® имеют эффективное положительное влияние на уровень эффективности, наблюдаемый для программ обработки. При исключении более одного из средств ранней обработки до цветения общая эффективность программы обработки снижается.

В совокупности результаты на гроздьях винограда на двух объектах, в сочетании с полученной при помощи кПЦР информацией в начале программ обработки, указывают на то, что средства ранней обработки с Bastid® не могут иметь положительного влияния на борьбу с развитием Erysiphe necator, если такая ранняя обработка осуществляется тогда, когда патоген уже в значительной мере присутствует на винограднике. С другой стороны, эти результаты указывают на то, что средства ранней обработки с Bastid® действительно имеют положительное влияние на борьбу с развитием Erysiphe necator, если такая ранняя обработка осуществляется, когда патоген едва обнаруживается (т.е., когда инвазия на поле пребывает в начале инкубационного периода).

Изобретения относятся к сельскому хозяйству. Способ борьбы с инвазией грибкового патогена растений, имеющего длительный инкубационный период от 2 до 8 недель, с применением средства биологической борьбы характеризуется тем, что эффективное количество средства биологической борьбы применяют на растениях, когда инфицирование грибковым патогеном растений пребывает в начале инкубационного периода до визуализации симптомов. Способ борьбы с инвазией грибкового патогена растений, имеющего длительный инкубационный период от 2 до 8 недель, с применением средства биологической борьбы, который включает этапы: (а) определения стадии инфицирования растения грибковым патогеном растений до проявления видимых симптомов с применением средства обнаружения грибкового патогена растений, (б) нанесения эффективного количества средства биологической борьбы на растение, когда определение на этапе (а) обнаруживает, что инфицирование грибковым патогеном растений пребывает в начале инкубационного периода до визуализации симптомов. Способ борьбы с инвазией поля, занятого культурой, грибковым патогеном растений, имеющим длительный инкубационный период от 2 до 8 недель, с применением средства биологической борьбы, который включает этапы: (а) определения, является ли поле, занятое культурой, подверженным риску инфицирования грибковым патогеном растений, путем измерения параметров, выбранных из влажности, температуры воздуха и дневного освещения, причем полученная в результате этих измерений информация используется впоследствии для вычисления вероятности такого развития на поле, занятом культурой, (б) если в результате определения на этапе (а) обнаруживается, что поле, занятое культурой, подвержено риску, - определения стадии инфицирования поля грибковым патогеном растений до проявления видимых симптомов с применением средства обнаружения грибкового патогена растений, (в) нанесения эффективного количества средства биологической борьбы на поле, если определение на этапе (а) обнаруживает, что инфицирование грибковым патогеном растений пребывает в начале инкубационного периода до визуализации симптомов. Изобретения позволяют эффективно бороться с грибковым патогеном растений на самой ранней стадии процесса инвазии. 3 н. и 7 з.п. ф-лы, 4 табл., 2 пр.

1. Способ борьбы с инвазией грибкового патогена растений, имеющего длительный инкубационный период от 2 до 8 недель, с применением средства биологической борьбы, характеризующийся тем, что эффективное количество средства биологической борьбы применяют на растениях, когда инфицирование грибковым патогеном растений пребывает в начале инкубационного периода до визуализации симптомов.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что растение является культурным растением.

3. Способ по п. 2, отличающийся тем, что культурное растение находится на поле, занятом культурой.

4. Способ борьбы с инвазией грибкового патогена растений, имеющего длительный инкубационный период от 2 до 8 недель, с применением средства биологической борьбы, который включает этапы:

(а) определения стадии инфицирования растения грибковым патогеном растений до проявления видимых симптомов с применением средства обнаружения грибкового патогена растений;

(б) нанесения эффективного количества средства биологической борьбы на растение, когда определение на этапе (а) обнаруживает, что инфицирование грибковым патогеном растений пребывает в начале инкубационного периода до визуализации симптомов.

5. Способ борьбы с инвазией поля, занятого культурой, грибковым патогеном растений, имеющим длительный инкубационный период от 2 до 8 недель, с применением средства биологической борьбы, который включает этапы:

(а) определения, является ли поле, занятое культурой, подверженным риску инфицирования грибковым патогеном растений, путем измерения параметров, выбранных из влажности, температуры воздуха и дневного освещения, причем полученная в результате этих измерений информацияиспользуется впоследствии для вычисления вероятности такого развития на поле, занятом культурой;

(б) если в результате определения на этапе (а) обнаруживается, что поле, занятое культурой, подвержено риску, - определения стадии инфицирования поля грибковым патогеном растений до проявления видимых симптомов с применением средства обнаружения грибкового патогена растений;

(в) нанесения эффективного количества средства биологической борьбы на поле, если определение на этапе (а) обнаруживает, что инфицирование грибковым патогеном растений пребывает в начале инкубационного периода до визуализации симптомов.

6. Способ по п. 5, отличающийся тем, что определение на этапе (а) осуществляют с применением цифровых средств, включающих одну или несколько компьютерных программ, предназначенных для расчета риска инфицирования данного поля, при котором информация, полученная в результате измерения параметров, используется такими цифровыми средствами для выполнения такого расчета.

7. Способ по любому из пп. 1-6, отличающийся тем, что грибковый патоген растений, имеющий длительный инкубационный период от 2 до 8 недель, представляет собой грибок мучнистой росы винограда Erysiphe necator, а растение представляет собой виноград или поле, занятое культурой, представляющей собой виноградную культуру.

8. Способ по любому из пп. 1-7, отличающийся тем, что средство биологической борьбы включает штамм Bacillus pumilus QST2808.

9. Способ по любому из пп. 1-8, отличающийся тем, что определение того, что инфицирование грибковым патогеном растений пребывает в начале инкубационного периода до визуализации симптомов, осуществляют с применением средства обнаружения при помощи кПЦР, специфичного к данному грибковому патогену растений.

10. Способ по любому из пп. 1-9, отличающийся тем, что средство биологической борьбы применяют в рамках программы обработки.