Способ оценки действия биологически активных препаратов in vivo на метаболизм у птицы Российский патент 2024 года по МПК A23K10/00 

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности, к птицеводству, и может быть использовано при определении эффективности действия биологически активных препаратов на метаболизм у сельскохозяйственной птицы.

В настоящее время для определения эффективности действия биологически активных препаратов на организм сельскохозяйственной птицы используются способы физиологических опытов по изучению переваримости питательных веществ, а также доступности аминокислот и минеральных веществ организмом птицы, научно-хозяйственные опыты по изучению влияния добавок на прирост живой массы и продуктивность птицы.

В процессе оценки препаратов проводят определение следующих показателей:

- сохранность птицы и расход корма;

- абсолютный, среднесуточный и относительный прирост живой массы;

- мясные и откормочные качества цыплят-бройлеров;

- переваримость и использование питательных веществ рациона;

- морфологические и биохимические показатели крови;

- экономическую эффективность использования в кормлении цыплят-бройлеров биологически активных веществ, как в отдельности, так и в различных сочетаниях.

При проведении балансового опыта, азотистые вещества кала и мочи в помете разделяют по методу М.И. Дьякова (1959).

Зоотехнический анализ кормов и помета проводился по методике ВИЖа (Агеев В.К., Егоров И.А., Околелова Т.М., Паньков П.Н. Кормление птицы: справочник. М.: «Агропромиздат», 1987. - 192 с.). При этом определялись следующие показатели:

- первоначальная и гигроскопическая влажность (путем выпаривания в сушильном шкафу при температуре сначала 60-65°С, а затем 105°С);

- сырая зола (методом сухого озоления при температуре 450°С, в муфельной печи);

- сырой жир - методом перегонки с эфиром в аппарате Сокслета (по методу В.Рушковского);

- сырая клетчатка (по методу Геннеберга и Штомана);

- общий азот (по методу Кьельдаля);

- БЭВ - расчетным путем;

- кальций - комплексометрически;

- фосфор - фотоколориметрически.

В конце опыта проведен контрольный убой подопытного поголовья, согласно ГОСТ 18292-85.

Наиболее близким к заявленному изобретению по совокупности существенных признаков являются критерии, представленные в статье Мирошникова С.А., Мирошниковой Е.П., Лебедева С.В. (2006), (Мирошников С.А., Мирошникова Е.П., Лебедев С.В. К совершенствованию методики исследования воздействия биологически активных веществ на организм животных. ВЕСТНИК ОГУ №1, 2006, Т. 2. Естественные и технические науки: 36-40), которые должны быть направлены на учет интенсивности обменных процессов в организме животного. Авторы указывают на то, что оценка действия одних и тех же биологически активных веществ, в одних и тех же дозах, на моделях одного и того же вида животных, но в различных физиологических состояниях, способно привести к противоположным эффектам и, следовательно, может быть по-разному истолковано.

Основным недостатком известных физиологических опытов по изучению переваримости питательных веществ является то, что оценка использования организмом птицы питательных и минеральных веществ рациона не до конца объективна. Это связано с тем, что кал и моча у птицы объединяются в клоаке, вследствие этого выделенные вещества из кишечника перемешиваются с мочой (продуктами межуточного обмена), что приводит к невозможности четкого определения переваримости в кишечнике. Точное знание доступности питательных и минеральных веществ, а также аминокислот позволит уточнить нормы потребления питательных веществ и энергии птицей. А получение и исследование отдельно мочи дает возможность изучить межуточный обмен и влияние различных биологически активных веществ на метаболизм птицы.

Из анализа известных технических решений выявлено, что проблемой в данной области является необходимость создания новых эффективных способов оценки действия биологически активных веществ на метаболизм у птицы.

Результатом предлагаемого технического решения является повышение объективности оценки использования организмом птицы питательных и минеральных веществ рациона под влиянием биологически активной добавки.

Для решения указанной проблемы и достижения заявленного результата в способе оценки действия биологически активных веществ на метаболизм у сложнооперированной птицы наряду с илеальной доступностью питательных и минеральных веществ в илеальном содержимом определяют количество и химический состав мочи, затем коррелируют результаты исследований с показателями крови. Предлагаемые исследования невозможно сделать при традиционном выполнении физиологического эксперимента на интактной птице.

Изобретение дает возможность определить механизм действия биологически активной добавки на метаболизм у птицы при изучении илеальной доступности ее питательных веществ, кальция, фосфора, микроэлементов и аминокислот, а также количество и химический состав мочи. Наиболее объективно оценить в условиях in vivo использование организмом птицы питательных и минеральных веществ рациона. Способ имеет ряд преимуществ:

1) определяется истинная илеальная доступность питательных веществ рациона, отличная от фекальной доступности более чем на 5% (Журавлев М.В. и др., 2022).

2) исследование количества и химического состава мочи позволяет определить уровень выделения из организма конечных продуктов белка (мочевой кислоты) и минеральных веществ;

Существенными признаками, характеризующими изобретение, являются данные, которые характеризуют механизм действия кормовой добавки на метаболизм птицы через критерии (количество и химический состав мочи, корреляция с морфо-биохимическими показателями крови, активность трипсина в биологических средах), которые определяются впервые и отвечают на вопросы экспериментатора.

Пример выполнения способа.

Определение влияние фитазы «Акстра Фай Голд» в разных дозах на идеальную доступность кальция и фосфора на фоне пшенично-кукурузного рациона без добавления фосфатов.

Результаты исследований показали, что баланс кальция и фосфора в организме кур-несушек зависит от содержания фосфора в рационе (табл. 1).

Из данной таблицы видно, что потребление кальция курами значительно (на 12,7%) снижается во второй опытной группе по сравнению с 1 контрольной. При этом увеличивается выделение кальция с идеальным содержимым на 7,0%, задерживаясь с мочой на 50,0%. В итоге усвоение кальция на безфосфатном рационе уменьшается на 37,9%. Уменьшается яйцекладка по сравнению с 1 контрольной группой в 4 раза. В результате этого баланс кальция в организме несушки остается положительным. Добавка в рацион фитазы в дозе 900 ед способствует более рациональному использованию кальция, снижая выделение его с идеальным содержимым на 59,0% по сравнению с 1 контрольной группой, но увеличивает выделение через почки с мочой в 1,5 раза. Организм несушки при добавлении фитазы усваивает кальций на уровне 1 контрольной группы, но яйценоскость остается ниже контрольных показателей. Благодаря этому в 3 опытной группе отмечается самый высокий баланс кальция (на 40,4% выше контрольной группы). Наиболее оптимальным уровнем добавки фитазы следует считать 1200 ед, поскольку в этом случае яйцекладка увеличивается на 37,5%) по сравнению с 1 контрольной группой, достигая 55,0% яйценоскости. Потребление кальция в 4 опытной группе не превышает показатели 2 опытной группы, но отстает от 1 контрольной на 17,3% от 1 контрольной группы. Организм несушки более рационально расходует кальций, выделяя с идеальным содержимым и мочой на 45,6% меньше по сравнению с 1 контрольной группой. Таким образом, применение фитазы на безфосфатном рационе оказывает положительное влияние на использование кальция организмом кур-несушек, снижается на 45,6-57,6%) выделение кальция с идеальным содержимым и мочой за сутки по сравнению с птицей, содержащейся на комбикорме с добавкой фосфатов. Яйценоскость несушек с илеальной фистулой уступает курам без хирургического вмешательства, но при добавлении фитазы в дозе 1200 ед превышает контрольный уровень на 37,5%.

Результаты фосфорного обмена в опыте представлены в таблице 2.

Данные эксперимента показали, что потребление фосфора птицей, содержащейся на безфосфатном рационе, уступает 1 контрольной группе на 41,0% одинаково во всех опытных группах. При этом наблюдается значительное снижение выделение фосфора с идеальным содержимым (на 46,4%), 42,9% и 50,0% при р<0.05, соответственно, в опытных группах). Значительно (в 2 раза) уменьшается выделение фосфора с яйцом, что связано со снижением яйцекладки у кур на безфосфатной диете. Использование добавки фитазы в количестве 900 ед оказывает положительное влияние на фосфорный обмен в организме птицы, что проявляется в наиболее эффективном использовании фосфора с кормом на 11,2%о по сравнению с контрольной группой, увеличении выхода фосфора с яйцом, которое достигает 83,3% от контрольной группы. Наиболее оптимальной дозой фитазы следует считать 1200 ед, поскольку в этом случае отмечается лучшее усвоение фосфора организмом птицы (на уровне 1 контрольной группы), при котором повышается эффективность использования фосфора птицей на 9,7%. Наиболее информативными показателями фосфорного обмена у несушки является выход фосфора с мочой и содержание его в яйце, которые увеличиваются в 4 опытной группе по сравнению со 2 опытной группой. Для наиболее детального рассмотрения механизма действия фитазы на межуточный обмен кур был сделан анализ мочи у птицы (табл. 3).

Данные таблицы показали, что в 1 контрольной группе выделялось 60 мл мочи в сутки. При использовании безфосфатной диеты количество мочи уменьшалось на 38,3% (р<0.05), при добавлении фитазы в дозе 1200 ед количество мочи по сравнению с 1 контрольной группой увеличивалось на 38,3%о (р<0.05).Это указывает на увеличение в крови фосфора, который увеличивает фильтрационную функцию почек для его выведения с мочой (табл. 4). Наименьшее количество трипсина, судя по его активности, выделяется с мочой в 1 контрольной группе. При переходе птицы на безфосфатную диету активность трипсина в моче увеличивается на 62,5%, хотя с учетом среднеквадратичного отклонения различия не являются достоверными. Существенные отличия наблюдаются между 3 опытной по сравнению с 1 контрольной (на 267,5%, р<0.05) и 2 опытной группами (на 126,1%, р<0.05). При анализе трипсина в суточном объеме мочи у кур наибольшая активность фермента наблюдается в 3 опытной группе (в 4.3 раза выше 1 контрольной группы) и в 4 опытной группе, где показатель превышает 1 контрольную группу в 3,1 раза. Содержание кальция в единице объема мочи имеет самый низкий показатель в 1 контрольной группе, затем увеличивается в 6,4 раза во 2 опытной группе (на безфосфатной диете), в 7,1 раза - по сравнению с 3 опытной группой, в 9,4 раза - по сравнению с 4 опытной группой. В суточном объеме мочи тенденция сохраняется: увеличение кальция по сравнению с 1 контрольной группой составляет, соответственно, в 3,9 раза, 8,2 раза, 13,0 раз. Количество общего фосфора в единице объема мочи в 4 опытной группе на 150,0% по сравнению с 1 контрольной группой. В общем объеме мочи наблюдается увеличение в 3,4 раза в 4 опытной группе по сравнению с 1 контрольной группой, что свидетельствует о значительном увеличении фосфора в организме, связанного с действием фитазы в дозе 1200 ед. Подтверждением данного утверждения могут служить результаты биохимических исследований крови у кур-несушек (табл. 4).

Из данной таблицы видно, что использование в рационе кур-несушек корма, не содержащего фосфаты, оказывает существенное влияние на углеводный и белковый обмен, что проявляется в уменьшении глюкозы в крови на 42,6% (р<0.05), увеличение количества общего белка в сыворотке крови на 12,9% (р<0.05) и мочевой кислоты на 134,4% (р<0.05) по сравнению с 1 контрольной группой. Содержание фосфора в сыворотке крови, увеличивается в 4 опытной группе на 27,8% (р<0.05), коррелируя с показателем фосфора в моче кур. Следовательно, при добавлении в рацион кур-несушек фитазы в дозе 1200 ед способствует выходу фитатного фосфора из растений в достаточном количестве, что обеспечивает при безфосфатном рационе физиологическую потребность птицы в фосфоре.

По сравнению с прототипом предложенный способ дает возможность определить механизм действия биологически активной добавки на метаболизм у птицы при изучении илеальной доступности ее питательных веществ, кальция, фосфора, микроэлементов и аминокислот, а также количество и химический состав мочи.

Способ оценки действия биологически активных препаратов in vivo на метаболизм у птицы относится к сельскому хозяйству, в частности к птицеводству. Способ оценки действия биологически активных препаратов in vivo на метаболизм у птицы включает определение переваримости питательных, минеральных веществ в илеальном содержимом у сложнооперированной птицы, отличается тем, что у сложнооперированной птицы наряду с определением переваримости питательных и минеральных веществ в илеальном содержимом дополнительно определяют количество и химический состав мочи, и при увеличении активности трипсина в ней судят об усилении процессов анаболизма в организме птицы, которые согласуются с содержанием фосфора в моче и показателями крови. Изобретение позволяет повысить объективность оценки использования организмом птицы питательных и минеральных веществ рациона под влиянием биологически активной добавки. 4 табл., 1 пр.

Способ оценки действия биологически активных препаратов in vivo на метаболизм у птицы, включающий определение переваримости питательных, минеральных веществ в илеальном содержимом у сложнооперированной птицы, отличающийся тем, что у сложнооперированной птицы наряду с определением переваримости питательных и минеральных веществ в илеальном содержимом дополнительно определяют количество и химический состав мочи, и при увеличении активности трипсина в ней судят об усилении процессов анаболизма в организме птицы, которые согласуются с содержанием фосфора в моче и показателями крови.