СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГЛИКОЗИДА КУРКУЛИГОЗИДА А Российский патент 2024 года по МПК C07H1/00 C07H15/203 

Изобретение относится к органической химии, а именно к способу получения производных сахаров, который может быть использован в медицине, фармакологии.

Известен способ получения гликозида куркулигозида А путем экстракции из растений, который заключается в кипячении 40 кг сухого порошка корней растения куркулиго орхидеевидного в 75%-ом водном растворе этанола в течение 2-х часов с обратным холодильником. Процедура повторяется три раза. Полученный спиртовой экстракт концентрируют при пониженном давлении. Полученный концентрат экстрагируют несколькими растворителями - петролейным эфиром, этилацетатом, н-бутанолом. Фракцию с этилацетатом концентрируют и очищают с помощью колоночной хроматографии с получением 2,3 г гликозида куркулигозида A [Wu, X.-Y., Li, J.-Z., Guo, J.-Z., & Hou, B.-Y. Ameliorative effects of curculigoside from curculigo orchioides gaertn on learning and memory in aged rats // Molecules. - 2012. - 17(9). - P. 10108-10118].

Однако известный способ характеризуется низким выходом конечного продукта и большим расходом растительного сырья, которое на данный момент является малодоступным [Poonia, А.K., Mishra, S., Chaudhary, V., & Kashyap, S. Tissue culture and over exploitation of anti-cancer herb Curculigo orchioides Garten // Journal of Innovation in Applied Research. - 2021. - X. - P. 1-12].

Известен способ получения гликозида куркулигозида А [Дорошенко И.А. Полный синтез биологически значимых гликозидов Куркулиго орхидеевидного / И.А. Дорошенко, Е.В. Степанова. - Текст: электронный // Фундаментальная гликобиология. Материалы VI Всероссийской конференции. - Мурманск. - 11-15 сентября 2023. - с. 61. - URL: https://glycobiology2023.mstu.edu.ru/files/conf-materials.pdf], выбранный в качестве прототипа, который включает использование в качестве исходного сырья 5-гидроксисалицилового альдегида в присутствии уксусного ангидрида и 4-диметиламинопиридина в толуоле (Фиг. 1). Реакцию проводят при комнатной температуре в течение 1,5 часов с получением 7,1 г 5-ацетилоксисалицилового альдегида, из которого далее при помощи ацетобромглюкозы и оксида серебра (I) в присутствии хинолина при комнатной температуре в течение 2 часов получают 5-(ацетилокси)-2-[(2,3,4,6-тетра-O-ацетил-β-S-глюкопиранозил)окси]бензальдегид. Его растворяют в этилацетате и добавляют метанол и борогидрид натрия, затем в течение 1,5 часов перемешивают при комнатной температуре и получают 5-(ацетилокси)-2-(гидроксиметил)фенил(2,3,4,6-тетра-O-ацетил)-β-D-глюко-пиранозид, к которому далее добавляют трифенилфосфин, тетрабромметан и этилацетат. Реакцию проводят в течение 0,5 часа в среде аргона. Затем в реакционную массу добавляют карбонат калия, 2,6-диметоксибензойную кислоту и N,N-диметилформамид и в среде аргона в течение 16 часов получают пентаацетат гликозида куркулигозида А, который растворяют в дихлорметане, метаноле и добавляют соляную кислоту с концентрацией 35%. Реакцию проводят при комнатной температуре в течение 21 часа и получают гликозид куркулигозид А. Однако известный способ характеризуется низким выходом конечного продукта, который по результатам синтеза составляет всего 14,5%.

Техническим результатом предлагаемого изобретения является разработка способа получения гликозида куркулигозида А, который характеризуется увеличением общего выхода гликозида куркулигозида А с 14,5% до 21% в сравнении с прототипом.

Технический результат достигается за счет проведения реакции получения 5-ацетилоксисалицилового альдегида (2, Фиг. 2) с более высоким выходом за счет уменьшения времени проведения реакции с 1,5 ч до 1 ч в сравнении с прототипом. Также, увеличение общего выхода синтеза происходит за счет увеличения выхода реакции получения непосредственно гликозида куркулигозида А в результате уменьшения времени проведения реакции с 21 часа до 19 часов. Общий выход реакции получения гликозида куркулигозида А увеличивается с 14,5% до 21%. Также замена метанола в реакции восстановления альдегидной группы с получением 5-(ацетилокси)-2-(гидроксиметил)фенил-(2,3,4,6-тетра-O-ацетил)-β-D-глюко-пиранозида (Фиг. 1), на воду (Фиг. 2) упрощает проведение реакции, так как борогидрид натрия лучше вступает в реакцию с водой, чем с метанолом. Также, при добавлении воды, реакционная масса разделяется на две фазы - воду и органический слой растворителя, который содержит в себе конечный продукт.

На Фиг. 1 представлена схема реакций получения гликозида куркулигозида А по прототипу.

На Фиг. 2 представлена схема реакций получения гликозида куркулигозида А по изобретению.

На Фиг. 3 представлен ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) спектр 5-ацетилокси-2-гидроксибензойного альдегида.

На Фиг. 4 представлен ¹³С ЯМР (101 Мгц, CDCl₃) спектр 5-ацетилокси-2-гидроксибензойного альдегида.

На Фиг. 5 представлен ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) спектр 5-(ацетилокси)-2-[(2,3,4,6-тетра-O-ацетил-β-D-глюко-пиранозил)окси]бензальдегида.

На Фиг. 6 представлен ¹³С ЯМР (101 Мгц, CDCl₃) спектр 5-(ацетилокси)-2-[(2,3,4,6-тетра-O-ацетил-β-D-глюко-пиранозил)окси]бензальдегида.

На Фиг. 7 представлен ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) спектр 5-(ацетилокси)-2-(гидроксиметил)фенил-(2,3,4,6-тетра-O-ацетил)-β-D-глюкопиранозида.

На Фиг. 8 представлен ¹³С ЯМР (101 Мгц, CDCl₃) спектр 5-(ацетилокси)-2-(гидроксиметил)фенил-(2,3,4,6-тетра-O-ацетил)-β-D-глюкопиранозида.

На Фиг. 9 ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) спектр пентаацетата гликозида куркулигозида А.

На Фиг. 10 представлен ¹³С ЯМР (101 Мгц, CDCl₃) спектр пентаацетата гликозида куркулигозида А.

На Фиг. 11 представлен COSY ЯМР спектр пентаацетата гликозида куркулигозида А.

На Фиг. 12 представлен HSQC ЯМР пентаацетата гликозида куркулигозида А.

На Фиг. 13 представлен НМВС ЯМР пентаацетата гликозида куркулигозида А.

На Фиг. 14 представлен ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) спектр гликозида куркулигозида А.

На Фиг. 15 представлен ¹³С ЯМР (101 МГц, CDCl₃) спектр гликозида куркулигозида А.

На Фиг. 16 представлен COSY ЯМР спектр гликозида куркулигозида А.

На Фиг. 17 представлен HSQC ЯМР гликозида куркулигозида А.

На Фиг. 18 представлен НМВС ЯМР гликозида куркулигозида А.

На Фиг. 19 представлен график жизнеспособности нормальных клеток фибробластов линии 3T3L1 после 24 часов инкубации с различными концентрациями гликозида куркулигозида А.

Анализ получаемых веществ осуществляли методом ядерно-магнитного резонанса (ЯМР) на ядрах ¹Н (400,13 МГц) и ¹³С (101 МГц), а также методами гомоядерной корреляционной ЯМР спектроскопии (COSY), гетероядерной одноквантовой корреляционной спектроскопии (HSQC) и гетероядерной многосвязной корреляционной спектроскопии (НМВС) на приборе Bruker AV-400. Сравнение полученных результатов проводили с данными в статье [Belyanin, М.L. First total chemical synthesis of natural acyl derivatives of some phenolglycosides of the family Salicaceae / M.L. Belyanin, E.V. Stepanova, V.D. Ogorodnikov // Carbohydrate research. - 2012. - 363. - P. 66-72].

Изобретение поясняется примером, в котором в колбу объемом 250 мл поместили 100 мл толуола, в котором растворили 10 г 5-гидроксисалицилового альдегида (Фиг. 2). В полученный раствор с помощью шприца прикапывали раствор 86,68 мг N,N-диметиламинопиридина (ДМПА) в 6,7 мл уксусного ангидрида (Ас₂О) со скоростью 1 капля в 2 секунды. После окончания прикапывания, полученную смесь перемешивали с помощью магнитной мешалки при комнатной температуре (к.т.) (приблизительно 20°С) в течение 1 часа. Далее растворитель упарили из реакционной массы на роторном испарителе досуха, с получением 13 г порошка светло-зеленого цвета, который проанализировали методами ¹Н ЯМР (Фиг. 3) ((CDCl₃, 400 МГц) δ 2.31 (3Н, s, СН₃СО), 7.00 (1Н, d, J=9.0 Гц, Н-6), 7.25 (2Н, dd, J=9.0, 2.7 Гц, Н-5), 7.33 (1Н, d, J=2.7 Гц, Н-3), 9.85 (1Н, s СОН), 10.91 (1Н, s, ОН)) и методом ¹³С ЯМР (Фиг. 4) ((CDCl₃, 101 МГц) δ 21.0 (СН₃СО), 118.7 (С-6), 120.1 (С-2), 125.3 (С-3), 130.7 (С-5), 142.9 (С-4), 159.2 (С-1), 169.6 (СН₃СО), 195.7 (СОН)) и определили 5-ацетилоксисалициловый альдегид (2, Фиг. 2).

Далее в колбу объемом 100 мл поместили 3,3 г ранее полученного 5-ацетилокси-2-гидроксибензойного альдегида, 4,24 г оксида серебра (I) (Ag₂O) и 7,53 г ацетобромглюкозы. Далее в колбу прилили 25 мл хинолина. Полученный раствор перемешивали стеклянной палочкой при комнатной температуре в течение 2 часов. Далее реакционную массу разбавили 70 мл хлористого метилена. Полученную суспензию отфильтровали от оксида серебра через фильтр Шотта с размером пор 16. Оксид серебра, оставшийся на фильтре, промыли 100 мл хлористого метилена с получением первого фильтрата. Полученный первый фильтрат промыли 3 раза по 120 мл 10 мас.% раствора гидроксида натрия с получением второго фильтрата. Полученный второй фильтрат промыли 3 раза по 50 мл 5 мас.% раствором серной кислоты с получением третьего фильтрата. В третий фильтрат добавили сульфат магния для осушения от остатков воды. Далее сульфат магния отфильтровали с помощью ватного фильтра и полученный четвертый фильтрат упарили с помощью роторного испарителя досуха. Полученный продукт очистили с помощью колоночной хроматографии. В качестве элюента использовали смесь петролейный эфир-этилацетат в соотношении от 2:1 до 4:1 соответственно. Полученный очищенный продукт проанализировали с помощью ¹Н ЯМР (Фиг. 5) ((CDCl₃, 400 МГц) δ 2.04, 2.05, 2.06, 2.07 (all s, 12Н, СН₃СО), 2.30 (3Н, s, CH₃COPh), 3.88 (1Н, ddd, J=9.7, 5.2, 1.8 Гц, Н-5 Glu), 4.16 (1Н, dd, J=12.4, 1.8 Гц, Н-6а Glu), 4.28 (1Н, dd, J=12.4, 5.2 Гц, H-6b Glu), 5.14 (1Н, d, J=7.3 Гц, H-1 Glu), 5.19 (1H, dd~t, J=9.6 Гц, H-4 Glu), 5.28 - 5.39 (2H, m, H-2 Glu, H-3 Glu), 7.13 (1H, d, J=9.0 Гц, H-6), 7.28 (2H, dd, J=9.0, 2.9 Гц, H-5), 7.54 (1H, d, J=2.9 Гц, H-3), 10.28 (1H, s, СОН)) и ¹³C ЯМР (Фиг. 6) ((CDCl₃, 101 МГц) δ 20.56, 20.64, 20.9 (5×CH₃CO), 61.6 (C-6 Glu), 68.0 (C-4 Glu), 70.8 (C-2 Glu), 72.2 (C-3 Glu), 72.3 (C-5 Glu), 99.4 (C-1 Glu), 117.4 (C-6), 120.9 (C-3), 127.0 (C-2), 128.9 (C-5), 146.3 (C-4, 156.2 (C-1), 169.2, 169.33, 169.39, 170.2, 170.5 (5×CH₃CO), 188.1 (CHO)) и определили получение 5-(ацетилокси)-2-[(2,3,4,6-тетра-O-ацетил-β-D-глюко-пиранозил)окси]бензальдегид (3, Фиг. 2).

Далее полученный ранее 5-(ацетилокси)-2-[(2,3,4,6-тетра-O-ацетил-β-D-глюко-пиранозил)окси]бензальдегид в количестве 6,0 г поместили в колбу объемом 250 мл, растворили в 50 мл этилацетата и прилили 60 мл дистиллированной воды, в результате чего из-за разности плотностей растворителей, образовалось две фазы - водная и органическая. В эту же колбу присыпали 1,33 г борогидрида натрия (NaBH₄) и плотно закрыли септой. Полученную реакционную массу перемешивали с помощью магнитной мешалки при комнатной температуре в течение 6 часов. Далее органическую и водную фазы разделили с помощью делительной воронки в две колбы Эрленмэйера объемом 250 мл. Водную фазу промыли этилацетатом 3 раза по 40 мл, и полученные порции этилацетата после промывки водной фазы объединили с основной органической фазой с получением второй органической фазы. К полученной второй органической фазе добавили сульфат магния для осушки от остатков воды. Сульфат магния отфильтровали с помощью ватного фильтра, и полученный фильтрат упарили на роторном испарителе досуха с получением 5-(ацетилокси)-2-(гидроксиметил)фенил-(2,3,4,6-тетра-O-ацетил)-β-D-глюкопиранозида (4, Фиг. 2), что было доказано с помощью полученного ¹Н ЯМР спектра (Фиг. 7) ((400 МГц, CDCl₃) δ 2.040, 2.045, 2.06, 2.09 (all s, 12Н, 4×СН₃СО), 2.28 (s, 3Н, CH₃COPh), 2.44 (1Н, dd, J=7.9, 5.6 Гц, OH), 3.82 (1H, ddd, J=10.2, 5.5, 2.3 Гц, H-5 Glu), 4.15 (1H, dd, J=12.4, 2.3 Гц, H-6a Glu), 4.26 (1H, dd, J=12.4, 5.5 Гц, H-6b Glu), 4.49 (1H, dd, J=13.3, 7.9 Гц, H-7a), 4.66 (1H, dd, J=13.3, 5.6 Гц, H-7b), 5.01 - 5.09 (1H, m, H-l Glu), 5.10-5.19 (1H, m, H-4 Glu), 5.26 - 5.35 (2H, m, H-2 Glu, H-3 Glu), 6.97 (1H, dd, J=8.8, 2.6 Hz, H-5), 7.01 (1H, d, J=8.8 Гц, H-6), 7.09 (1H, d, J=2.6 Гц, H-3)) и ¹³C ЯМР спектра (Фиг. 8) ((CDCl₃, 101 МГц) δ 20.56, 20.59, 20.63, 20.67, 21.0 (5×CH₃CO), 60.5 (C-7), 61.7 (C-6 Glu), 68.1 (C-4 Glu), 71.0 (C-3 Glu), 72.1 (C-2 Glu), 72.3 (C-5 Glu), 99.8 (C-1 Glu), 116.6 (C-6), 121.6 (C-5), 122.2 (C-3), 132.9 (C-2), 146.3 (C-4), 152.0 (C-1), 169.4, 169.6, 169.7, 170.1, 170.6 (5×СН₃СО)).

Далее полученный 5-(ацетилокси)-2-(гидроксиметил)фенил-(2,3,4,6-тетра-O-ацетил)-β-D-глюкопиранозид в количестве 5,1 г и 5,28 г тетрабромметана (CBr₄) поместили в колбу объемом 100 мл и создали в ней инертную среду с помощью аргона, который подавали из баллона, под давлением 0,1 МПа, и закрыли колбу септой. В указанную колбу через септу с помощью шприца добавили 25 мл предварительно осушенного от воды этилацетата с получением реакционной массы, которую затем остудили на ледяной бане. В отдельном химическом стакане растворили 4,44 г трифенилфосфина (Ph₃P) в 10 мл этилацетата и, с помощью шприца, прикапали к реакционной массе при перемешивании. Затем колбу сняли с ледяной бани, и ее содержимое перемешивали при комнатной температуре в течение 0,5 часа. Далее растворитель упарили с помощью роторного испарителя досуха, колбу заполнили аргоном. Затем в колбу добавили предварительно осушенные в отдельных колбах при пониженном давлении 1,64 г карбоната калия и 2,1 г 2,6-диметоксибензойной кислоты. Все вещества растворили в 24 мл N,N-диметилформамида (ДМФА). Реакционную массу перемешивали с помощью магнитной мешалки в течение 16 часов при комнатной температуре, после чего N,N-диметилформамид с помощью роторного испарителя упарили из колбы досуха. Далее в колбу прилили 10 мл толуола и упарили на роторном испарителе досуха. Полученный продукт очистили с помощью колоночной хроматографии. В качестве элюента использовали смесь гексан-этилацетат в соотношении от 3:1 до 1:2 соответственно с получением пентаацетата гликозида куркулигозида А (5, Фиг. 2), что было доказано с помощью проведенных исследований:

¹Н ЯМР (Фиг. 9) ((CDCl₃, 400 МГц) δ 2.04, 2.05, 2.09, 2.10 (all, s, 12Н, 4×СН₃СО), 2.27 (3Н, s, CH₃COPh), 3.80 (6Н, s, 2×ОСН₃), 3.84 (2Н, ddd, J=9.59, 5.3, 2.4 Гц, H-5 Glu), 4.18 (1Н, dd, J=12.3,2.4 Гц, Н-6а Glu), 4.29 (1Н, dd, J=12.3, 5.3 Гц, H-6b Glu), 5.02 (1Н, d, J=7.5 Гц, H-l Glu), 5.17 (1H, dd~t, J=9.5 Гц, H-4 Glu), 5.25 - 5.36 (3H, m, H-2 Glu, H-3 Glu, H-7a), 5.40 (1H, d, J=14.1 Гц, H-7b), 6.56 (2H, d, J=8.4 Гц, H-11, H-13), 6.98 (1H, dd, J=8.9, 3.0 Гц, H-5), 7.09 (1H, d, J=8.9 Гц, H-6), 7.28 (2H, d, J=3.0 Гц, H-3), 7.30 (1H, d, J=8.4 Гц, H-12)),

¹³C ЯМР (Фиг. 10) ((CDCl₃, 101 МГц) δ 20.52, 20.60, 20.62, 20.70, 21.0 (5×CH₃CO), 55.8 (2×OCH₃), 60.8 (C-7), 61.9 (C-6 Glu), 68.2 (C-4 Glu), 70.9 (C-2 Glu), 72.0 (C-3 Glu), 72.6 (C-5 Glu), 100.0 (C-1 Glu), 103.8 (2×CH, C-11, C-13), 112.7 (C-9), 116.9 (C-6), 121.5 (C-3, C-6), 128.4 (C-2), 131.2 (C-l2), 146.4 (C-4), 151.5 (C-1), 157.4 (2C, C-10, C-14), 166.0 (C-8), 169.4, 169.52, 169.54, 170.2, 170.6 (5×CH₃CO).),

COSY ЯМР (Фиг. 11), HSQC ЯМР (Фиг. 12), НМВС ЯМР (Фиг. 13).

Далее в колбе объемом 100 мл в 5 мл дихлорметана растворили 4,0 г пентаацетата гликозида куркулигозида А, добавили 15 мл метанола и 5 мл 36 мас.% соляной кислоты и перемешивали с помощью магнитной мешалки в течение 19 часов. Далее в реакционную массу присыпали катионообменную смолу, которая нейтрализовала кислую среду до рН равного 7, который устанавливали с помощью индикаторной бумаги. Далее реакционную массу отфильтровали с помощью фильтра Шотта. Катионообменную смолу, оставшуюся на фильтре Шотта, промыли метанолом 3 раза по 20 мл. Полученный фильтрат концентрировали с помощью роторного испарителя досуха. Полученный продукт растворили в 120 мл метанола при нагревании до 50°С и затем оставили отстаиваться при температуре ниже 0°С до выпадения белых кристаллов гликозида куркулигозида А, что было доказано с помощью полученных ¹Н, ¹³С, COSY, HSQC, НМВС спектров ядерно-магнитного резонанса. Выпавшие кристаллы отфильтровали с помощью фильтра Шотта с получением 1,7 г гликозида куркулигозида А. Маточный раствор упарили на роторном испарителе досуха и очистили с помощью колоночной хроматографии. В качестве элюента использовали смесь дихлорметан-метанол в соотношении от 5:1 до 12:1 соответственно, с получением дополнительно 0,64 г гликозида куркулигозида А (Фиг. 2), что было доказано с помощью проведенных исследований:

¹Н ЯМР (Фиг. 14) ((MeOD-d₄, 400 МГц) δ 3.33 - 3.54 (4Н, m, Н-2 Glu, Н-3 Glu, Н-4 Glu, H-5 Glu), 3.70 (1Н, dd, J=12.0, 4.8 Гц, Н-6а Glu), 3.82 (6Н, s, 2×ОСН₃), 3.88 (1Н, d, J=12.0 Гц, H-6b Glu), 4.76 (1Н, d, J=7.2 Гц, H-1 Glu), 5.43 (2H, ABq, J=13.4 Гц H-7), 6.68 (2H, d, J=8.3 Гц, H-l 1, H-13), 6.69 (1H, dd, J=8.8, 2.9 Гц, H-5), 6.92 (1H, d, J=2.9 Гц, H-3), 7.08 (1H, d, J=8.8 Гц, H-6), 7.35 (1H, t, J=8.4 Гц, H-12)),

¹³C ЯМР (Фиг. 15) ((MeOD-d₄, 101 МГц) δ 56.5 (2×OCH₃), 62.6 (C-6 Glu), 63.2 (C-7), 71.4, 75.0, 78.0, 78.1 (C-2 Glu, C-3 Glu, C-4 Glu and C-5 Glu), 104.3 (C-1 Glu), 105.1 (2×CH, C-11, C-13), 114.2 C-9), 116.1 (C-3 or C-5), 116.3 (C-3 or C-5), 118.8 (C-6), 128.8 (C-2), 132.6 (C-12), 149.6 (C-1), 153.9 (C-4), 158.7 (2×С, C-10, C-14), 168.6 (C-8)),

COSY ЯМР (Фиг. 16), HSQC ЯМР (Фиг. 17), НМВС ЯМР (Фиг. 18).

Полный выход синтеза гликозида куркулигозида А после проведения всех реакций составляет 21%.

Полученный гликозид куркулигозид А проверяли на цитотоксичность и биологическую активность.

В качестве тестовой клеточной линии для оценки цитотоксичности и биологической активности гликозида куркулигозида А использовали нормальные фибробласты (линия 3T3L1). Клетки предварительно выращивали в среде DMEM/F12 (Gibco, USA) с добавкой GlutaMAX (cell supplement #35050061, Gibco, USA), 10% сыворотки ((FBS), One Shot™ format, Brazil, Thermo Fisher Scientific, Бразилия) и антибиотика (penicillin/streptomycin mixture, Paneco, Russia). Фибробласты выводили в фазу стабильного роста и после 2 пассажей использовали в тестировании. За 24 часа перед тестом гликозида куркулигозида А помещали по 5000 клеток в лунки 96-планшета и инкубировали 24 часа в инкубаторе при 37°С в среде 5% углекислого газа. Далее гликозид куркулигозид А вносили в лунки с клетками и методом серийных разведений получали диапазон финальных концентраций 1000±4 мкг/мл. Далее клетки инкубировали в течение 24 часов при 37°С в среде 5% углекислого газа. Для учета результатов проводили определение уровня жизнеспособных клеток по оценке уровня редуктазной активности в МТТ тесте, который заключается в определении митохондриальной активности клеток.

Результаты определения уровня жизнеспособности фибробластов показали, что гликозид куркулигозид А не проявил цитотоксических и цитостатических свойств в изученном диапазоне концентраций (Фиг. 19). Статистически значимых отклонений от параметров роста и жизнеспособности клеток после воздействия от показателей контрольной группы не установлено. Гликозид куркулигозид А безопасен для клеток, не вызывает морфологических изменений, при этом не оказывает значимого стимулирующего действия на рост клеток.

Изобретение относится к органической химии. Предложен способ получения гликозида куркулигозида А, заключающийся в том, что в колбу помещают толуол, добавляют 5-гидроксисалициловый альдегид и растворяют в толуоле, затем добавляют 4-диметиламинопиридин в уксусном ангидриде, после чего полученную реакционную массу перемешивают при комнатной температуре с получением 5-ацетилоксисалицилового альдегида, который затем помещают в колбу вместе с оксидом серебра (I) и ацетобромглюкозой, растворяют в хинолине и перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов с получением 5-(ацетилокси)-2-[(2,3,4,6-тетра-O-ацетил-β-D-глюкопиранозил)окси]бензальдегида, который растворяют в этилацетате, добавляют борогидрид натрия и перемешивают при комнатной температуре с получением 5-(ацетилокси)-2-(гидроксиметил)фенил-(2,3,4,6-тетра-O-ацетил)-β-D-глюкопиранозида, который далее вместе с тетрабромметаном растворяют в этилацетате в среде аргона, а затем добавляют трифенилфосфин, перемешивают при комнатной температуре в течение 0,5 часа, после чего добавляют карбонат калия и 2,6-диметоксибензойную кислоту и растворяют в N,N-диметилформамиде с последующим перемешиванием в течение 16 часов при комнатной температуре с получением пентаацетата гликозида куркулигозида А, который растворяют в дихлорметане, добавляют метанол и 36 мас.% соляную кислоту и перемешивают при комнатной температуре с получением гликозида куркулигозида А, где перемешивание на стадии получения 5-ацетилоксисалицилового альдегида осуществляют в течение 1 часа, на стадии получения 5-(ацетилокси)-2-(гидроксиметил)фенил-(2,3,4,6-тетра-O-ацетил)-β-D-глюкопиранозида добавляют дистиллированную воду, и перемешивание осуществляют в течение 6 часов, и перемешивание на стадии получения гликозида куркулигозида А осуществляют в течение 19 часов. Техническим результатом является разработка способа получения гликозида куркулигозида А, который характеризуется увеличением общего выхода гликозида куркулигозида А с 14,5% до 21% в сравнении с прототипом. 19 ил., 1 пр.

Способ получения гликозида куркулигозида А, заключающийся в том, что в колбу помещают толуол, добавляют 5-гидроксисалициловый альдегид и растворяют в толуоле, затем добавляют 4-диметиламинопиридин в уксусном ангидриде, после чего полученную реакционную массу перемешивают при комнатной температуре с получением 5-ацетилоксисалицилового альдегида, который затем помещают в колбу вместе с оксидом серебра (I) и ацетобромглюкозой, растворяют в хинолине и перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов с получением 5-(ацетилокси)-2-[(2,3,4,6-тетра-O-ацетил-β-D-глюкопиранозил)окси]бензальдегида, который растворяют в этилацетате, добавляют борогидрид натрия и перемешивают при комнатной температуре с получением 5-(ацетилокси)-2-(гидроксиметил)фенил-(2,3,4,6-тетра-O-ацетил)-β-D-глюкопиранозида, который далее вместе с тетрабромметаном растворяют в этилацетате в среде аргона, а затем добавляют трифенилфосфин, перемешивают при комнатной температуре в течение 0,5 часа, после чего добавляют карбонат калия и 2,6-диметоксибензойную кислоту и растворяют в N,N-диметилформамиде с последующим перемешиванием в течение 16 часов при комнатной температуре с получением пентаацетата гликозида куркулигозида А, который растворяют в дихлорметане, добавляют метанол и 36 мас.% соляную кислоту и перемешивают при комнатной температуре с получением гликозида куркулигозида А, отличающийся тем, что перемешивание на стадии получения 5-ацетилоксисалицилового альдегида осуществляют в течение 1 часа, на стадии получения 5-(ацетилокси)-2-(гидроксиметил)фенил-(2,3,4,6-тетра-O-ацетил)-β-D-глюкопиранозида добавляют дистиллированную воду, и перемешивание осуществляют в течение 6 часов, и перемешивание на стадии получения гликозида куркулигозида А осуществляют в течение 19 часов.