Способ получения аллогенного и ксеногенного минерального костного компонента из дентальных тканей человека и животных Российский патент 2024 года по МПК A61K35/32 A61L27/00 

Изобретение относится к медицине и биотехнологии, а именно к разработке лекарственных препаратов для коррекции нарушения костного метаболизма, изготовлению биоматериалов для восстановления дефектов челюстно-лицевой области и раскрывает способ получения минерального компонента из зубов человека и животных.

Известен способ получения минерально-органического компонента из зубов человека и животных, в котором целевой продукт получают после стачивания эмали с последующей деминерализацией образцов в соляной кислоте и осаждением минерального компонента при нейтральных значениях рН [1]. Недостатком данного метода является низкий выход минеральной составляющей при удалении эмали с поверхности образца.

Целью изобретения является разработка способа получения аллогенного и ксеногенного минерального костного компонента из дентальных тканей человека и животных.

Цель достигается тем, что зубы человека и животных подвергаются предварительной механической очистке от мягких тканей, пищевых остатков и налета. Дентальный материал заливали 3% раствором перекиси водорода в соотношении материала и раствора 1:10 и оставляли в течение суток при температуре +2°С -+8°С. Затем сливали раствор. Далее зубы заливали спирт-эфирной смесью (1 часть спирта и 3 части эфира) в соотношении материала и смеси 1:5. Оставляли на сутки при комнатной температуре, затем сливали раствор и промывали каждый зуб дистиллированной водой в течение 1 часа при комнатной температуре на магнитной мешалке. После этого материал высушивали на фильтровальной бумаге. В результате получали обработанные зубы, готовые для проведения исследования. Материал взвешивали. Концентрации деминерализующего раствора соляной кислоты (1,8 н. и 2,4 н.), объемно-массового соотношение биоматериала и кислоты (1:5 и 1:10) со сменой один раз в трое суток были выбраны с целью определения оптимального выхода минеральной фазы и определения длительности деминерализации для максимального выхода минерального компонента из дентальных тканей. Материал деминерализуют в растворе соляной кислоты концентрацией 1,8 н или 2,4 н. в зависимости от размера зуба. Полученный после деминерализации биоматериала раствор фильтруют через бумажный фильтр («красная полоса»), нейтрализуют, доводя его рН до 8; образующийся после нейтрализации осадок отделяют центрифугированием, промывают дистиллированной водой, после чего снова центрифугируют и промывают дистиллированной водой в течение 10 минут; после двухкратного промывания водой полученный материал высушивают при 120°С в течение 8 часов, после чего минеральный

компонент подвергается измельчению до порошкообразного состояния в аптечной ступке и может быть стерилизован различными способами.

Расчет процентного выхода биоматериала из образцов проводился по формуле:

М (МКК) - масса минерального костного компонента;

М (исх.сырья) - масса исходного образца.

Расчет проходил с учетом полученного образца МКК к массе исходных материалов, взятых для получения биоматериала.

Предлагаемый способ предполагает использование в качестве материалов зубов человека, удаленных по ортодонтическим показаниям, и животных после вывода из экспериментального исследования или предоставленными из животноводческих хозяйств после предварительного санитарного исследования.

Способ иллюстрируется следующими примерами. Процентный выход МКК из зубов человека с удаленной эмалью составляет 29,3- 46,5% (таблица 1), в то время как из зубов с не удаленной эмалью значения достигали 85,9% (таблица2).

Процентный выход МКК из зубов коровы с удаленной эмалью составляет 15,8-48,2% (таблица 3), в то время как из зубов с не удаленной эмалью значения достигали 64,0% (таблица 4). Аналогичные результаты получены на дентальных тканях козы Capra hircus.

Таким образом, выход минерального компонента из аллогенных и ксеногенных дентальных тканей с эмалью существенно выше, чем из дентальных тканей, лишенных эмали.

Способ может быть использован в стоматологии, челюстно-лицевой хирургии и для коррекции минерального гомеостаза, расширить область применения аллогенных и ксеногенных биоматериалов в регенеративной медицине.

ИСТОЧНИКИ ИНФОРМАЦИИ

1. Патент РФ на изобретение №2752035 от 22.07.2021 / Способ одновременного получения деминерализованного дентина и минерально-органического компонента из зубов // Волова Л.Т., Тимченко Е.В., Зыбин М.А., Фролов О.О., Тимченко П.Е., Власов М.Ю.

Изобретение относится к области разработки лекарственных препаратов для коррекции нарушения костного метаболизма и изготовления биоматериалов для восстановления дефектов челюстно-лицевой области, и касается способа получения минерального костного компонента из зубов человека и животных. Предлагаемый способ включает обработку зубов раствором перекиси водорода, деминерализацию полученного материала в растворе соляной кислоты, фильтрацию полученного раствора через целлюлозный фильтр, нейтрализацию, отделение образующегося после нейтрализации осадка центрифугированием и промывание дистиллированной водой, при этом зубы механически очищают от мягких тканей, пищевых остатков и налета, не подвергая очистке от эмали, заливают последовательно 3% раствором перекиси водорода в соотношении зубного материала и раствора 1:10 на сутки при температуре +2-+8°С и спирт-эфирной смесью, содержащей 1 часть спирта и 3 части эфира, в соотношении материала и смеси 1:5 на сутки при комнатной температуре, после чего промывают каждый зуб дистиллированной водой и высушивают на фильтровальной бумаге, деминерализацию проводят в растворе 1,8 или 2,4 Н соляной кислоты при объемно-массовом соотношении биоматериала и кислоты 1:5 или 1:10 со сменой деминерализующего раствора один раз в трое суток, при нейтрализации доводят рН раствора до 8; отделенный центрифугированием осадок дважды промывают дистиллированной водой, высушивают при 120°С в течение 8 ч, измельчают до порошкообразного состояния в аптечной ступке и стерилизуют. Способ обеспечивает увеличение выхода минерального костного компонента по сравнению с прототипом. 4 табл.

Способ получения минерального костного компонента из зубов человека и животных, включающий обработку зубов раствором перекиси водорода, деминерализацию полученного материала в растворе соляной кислоты, фильтрацию полученного раствора через целлюлозный фильтр, нейтрализацию, отделение образующегося после нейтрализации осадка центрифугированием и промывание дистиллированной водой, отличающийся тем, что зубы механически очищают от мягких тканей, пищевых остатков и налета, не подвергая очистке от эмали, заливают последовательно 3% раствором перекиси водорода в соотношении зубного материала и раствора 1:10 на сутки при температуре +2-+8°С и спирт-эфирной смесью, содержащей 1 часть спирта и 3 части эфира, в соотношении материала и смеси 1:5 на сутки при комнатной температуре, после чего промывают каждый зуб дистиллированной водой и высушивают на фильтровальной бумаге, деминерализацию проводят в растворе 1,8 или 2,4 Н соляной кислоты при объемно-массовом соотношении биоматериала и кислоты 1:5 или 1:10 со сменой деминерализующего раствора один раз в трое суток, при нейтрализации доводят рН раствора до 8; отделенный центрифугированием осадок дважды промывают дистиллированной водой, высушивают при 120°С в течение 8 ч, измельчают до порошкообразного состояния в аптечной ступке и стерилизуют.